CN101010082A - 米哚妥林用于治疗胃肠道基质瘤的用途 - Google Patents

米哚妥林用于治疗胃肠道基质瘤的用途 Download PDF

Info

Publication number
CN101010082A
CN101010082A CNA2005800287142A CN200580028714A CN101010082A CN 101010082 A CN101010082 A CN 101010082A CN A2005800287142 A CNA2005800287142 A CN A2005800287142A CN 200580028714 A CN200580028714 A CN 200580028714A CN 101010082 A CN101010082 A CN 101010082A
Authority
CN
China
Prior art keywords
kit
imatinib
midostaurin
treatment
resistance
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CNA2005800287142A
Other languages
English (en)
Inventor
J·库尔斯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Novartis AG
Original Assignee
Novartis AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novartis AG filed Critical Novartis AG
Publication of CN101010082A publication Critical patent/CN101010082A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/553—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having at least one nitrogen and one oxygen as ring hetero atoms, e.g. loxapine, staurosporine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及游离形式或药学上可接受的盐形式的米哚妥林在制备用于治疗胃肠道基质瘤的药物组合物中的用途，还涉及对温血动物、优选人类的治疗方法，该方法包括给予患有所述疾病或病症的动物治疗有效量的米哚妥林。

Description

米哚妥林用于治疗胃肠道基质瘤的用途
本发明涉及游离形式或药学上可接受的盐形式的米哚妥林在制备用于治疗胃肠道基质瘤(例如对化合物I有抗性的胃肠道肿瘤)的药物组合物中的用途，还涉及对温血动物、优选人类的治疗方法，该方法包括给予患有所述疾病或病症的动物治疗有效量的米哚妥林。
附图说明
图B：伊马替尼或者PKC412对表达KIT ΔWK557-558/T6701、PDGFRA D842V或ΔDIM842-844突变的Ba/F3细胞的剂量响应曲线。
胃肠道基质瘤最近被定性为属于间充质瘤家族，它们源自胃肠道，60-70％的GIST源自胃。过去，这些肿瘤以不同的名称被归类为平滑肌瘤、成平滑肌瘤或平滑肌肉瘤。然而，现在已经明确，GIST代表具有明确临床病理特征的一组疾病，该疾病具有独特的分子学发病机制和临床特征。
GIST是相对少见的病症并且据估计其发病率约为20例/百万，GIST是胃肠道中最常见的间充质瘤。直到最近，唯一可行的治疗方法是外科切除术。常规的细胞毒素化疗和放疗的有限的作用导致晚期GIST成为不变的进行性和致命性病症，患者的存活期不同，平均为20个月(例如转移性GIST)到1年或更少(例如手术后复发)。
绝大多数GIST的最可能的致瘤性分子学因素为KIT或血小板衍生的生长因子受体A(缩写为PDGFRA)的活化突变，籍此信号通路被活化，该过程促进细胞增生和/或存活。甲磺酸伊马替尼特别抑制受体酪氨酸激酶PDGFRs、KIT、ABL和ARG并且在患有GIST的患者中引起高响应率。但是，到目前为止，伊马替尼的治疗仍停留在仅对该疾病的有效的系统治疗上。临床和试验观察表明，该响应与肿瘤中KIT/PDGFRA突变的存在和类型有关，这使具有KIT外显子11突变的肿瘤对治疗特别敏感。影响激酶催化域的KIT-D816V和PDGFRA-D842V突变干扰了伊马替尼的结合从而使得药物在初期是无效的。在对药物表现出不同程度的初期响应后，大多数GIST患者在治疗过程中逐渐产生抗性。对伊马替尼治疗的其它恶性肿瘤(如慢性髓性白血病(CML)或慢性嗜酸粒细胞白血病(CEL))的调查表明，对该抑制剂的抗性是由独特的分子学机制导致的。对伊马替尼有抗性的大多数CML患者具有白血病细胞的克隆扩张，所述细胞具有新的突变型BCR-ABL等位基因或者由于BCR-ABL扩增而表达高水平的融合蛋白。在CEL中对伊马替尼抗性的产生与FIPL1-PDGFRA融合蛋白催化域的二级突变有关。对患有伊马替尼抗性疾病发展阶段的GIST患者的初步研究表明，在大多数肿瘤中KIT活化仍然继续起到了功能性的作用，其中KIT激酶域的获得性突变或KIT基因的基因组的扩增在患者亚群中成为诱因。
伊马替尼为选择性抑制特定酪氨酸激酶的小分子，它目前已经成为晚期GIST患者的有价值的治疗手段。伊马替尼作为GIST治疗的单一药物治疗在PCT公开文本WO 02/34727中已有描述，在此并入本文作为参考。然而，在许多患者中出现对伊马替尼的初期抗性也已有报道，例如在一个研究中13.7％的患者出现了抗性。另外，许多患者对采用伊马替尼治疗具有了抗性。更通常的情况是，该抗性部分伴随着某些损害的进一步恶化，但在另外的损害中它可以继续控制疾病。因此，这些患者保持伊马替尼治疗，但迫切需要另外的或可替代的治疗药物。
伊马替尼为4-(4-甲基哌嗪-1-基甲基)-N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基]苯基]-苯甲酰胺，其具有式I的结构：
Figure A20058002871400041
伊马替尼的制备及其用途、特别是作为抗肿瘤药物的用途描述于1993年10月6日公布的欧洲专利申请EP-A-0 564 409的实施例21中，还有在其它许多国家的相应申请和专利中，例如在US专利5,521,184和日本专利2706682中，所有这些均并入本文作为参考。
申请人现在惊奇地发现，米哚妥林(蛋白激酶C抑制剂)具有使其用于治疗胃肠道基质瘤(例如治疗伊马替尼抗性的胃肠道基质瘤)的治疗性质。
蛋白激酶C(此后缩写为PKC)为细胞信号转导通路中重要的酶之一，它在控制细胞增殖和分化中具有关键性作用。PKC属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族。已经鉴定了至少12种PKC同种型，根据其结构和底物的不同通常可以将它们分为三组。与正常的乳房组织比较，在人乳房肿瘤活组织检查中发现PKC的表达有所提高，高PKC表达在人星形细胞瘤中被认为是恶变的生物学标志。PKCθ(PKC的同种型之一)是T细胞存活信号的正向调节剂。有趣的是，PKCθ在GIST中被结构性磷酸化。所以，PKCθ可以被认为是GIST治疗措施的潜在的靶酶。特别的是，PKC抑制剂在伊马替尼抗性的GIST的治疗中是有益的。
因此，本发明涉及治疗GIST的方法，它包括将米哚妥林给予患有GIST的患者，例如具有伊马替尼抗性的GIST患者。
本发明的米哚妥林为式(II)的N-[(9S，10R，11R，13R)-2，3，10，11，12，13-六氢-10-甲氧基-9-甲基-1-氧代-9，13-环氧-1H，9H-二吲哚并[1，2，3-gh：3′，2′，1′-lm]吡咯并[3，4-j][1，7]苯并壬三烯(benzodiazonin)-11-基]-N-甲基苯甲酰胺或其盐：
Figure A20058002871400051
此后称为：“式II化合物或米哚妥林”。
式II化合物或米哚妥林[国际非专有名]也称为PKC412。
米哚妥林是天然存在的生物碱星形孢菌素的衍生物，已经被特别描述于1988年12月21日公布的欧洲专利号0 296 110以及1992年3月3日公布的美国专利号5；093,330和日本专利号No.2 708 047中。在这些文件中所描述的米哚妥林并入本申请作为参考。米哚妥林及其制备方法在许多文献中都有具体的描述，它们是本领域技术人员所熟知的。
在引用专利申请或科学出版物、特别是关于米哚妥林的情况下，所有文献中所述的主题(包括终产物、药物制剂以及权利要求的主题)均并入本申请作为参考。
本文所用术语“伊马替尼抗性”是指在治疗胃肠道基质瘤中伊马替尼治疗效果的缺乏、减少或丧失。
本发明涉及米哚妥林(也称为PKC412)或其药学上可接受的盐在制备用于治疗胃肠道基质瘤(此后缩写为GIST)、例如伊马替尼抗性的GIST的药物中的用途，还涉及治疗患有GIST的包括人类的温血动物的方法，所述方法包括给予需要此类治疗的所述动物有效量的米哚妥林或其药学上可接受的盐。
本发明涉及治疗GIST(例如具有伊马替尼抗性的GIST)的方法，它包括给予患有GIST(例如具有伊马替尼抗性的GIST)的患者米哚妥林。
用于治疗上述疾病和病症的米哚妥林的精确剂量取决于多种因素，包括宿主、待治疗病症的性质和严重程度、给药方式。通常，通过非肠道(例如，腹膜内、静脉内、肌内、皮下、肿瘤内或直肠)或肠内(例如口服)给予米哚妥林可达到满意的效果，优选静脉给药，或优选口服给药，静脉给药的日剂量为0.1-10mg/kg体重，优选1-5mg/kg体重。在人体试验中，225mg/天的总剂量是推测的最大耐受剂量(MTD)。优选的静脉给药的日剂量为0.1-10mg/kg体重，对于大多数较大的灵长类而言，日剂量为200-300mg。典型的静脉给药剂量为3-5mg/kg，每周3-5次。
米哚妥林口服给药的剂量至多约为300mg/天，例如100-300mg/天。米哚妥林可以单剂量给药或者每天分为2-3个剂量、优选2个剂量给药。特别推荐的剂量为200-225mg/天，特别是100mg一次，每天二次(共200mg/天)。剂量的上限受副作用的影响并且可以通过对待治疗患者的试验来确定。
本发明也涉及将治疗有效量的米哚妥林给药于哺乳动物患者的方法，所述方法中每周给药7-4次或在一段时间内有约100％至约50％的天数给药，该段时间为1-6周，随后的1-3周中不给予药物，该循环可以重复一到数个循环。
通常，初期给予小剂量，将剂量逐渐增加直到获得对于治疗的患者而言最佳的剂量。剂量的上限受副作用的影响并且可以通过对待治疗患者的试验来确定。
米哚妥林可以与一种或多种药学上可接受的载体以及任选的一种或多种其它常规药用辅料组合并通过肠道给药，例如以片剂、胶囊剂、囊片剂等形式通过口服给药，或者以无菌注射溶液或混悬液的形式通过非肠道给药(例如腹膜内或静脉内给药)。可以根据常规方法制备肠道给药和非肠道给药的组合物。
本发明的输液优选为无菌的。这可以通过例如除菌过滤膜过滤容易地达到。任何液体形式的组合物的无菌制备、小瓶的无菌灌装和/或在无菌条件下将本发明的药用组合物与适当的稀释剂混合的步骤是技术人员熟知的。
米哚妥林可以配制成含有一定量的有效治疗上述疾病和病症的活性物质的肠道和非肠道药物组合物，此类组合物可以为单位剂型并且此类组合物可以含有药学上可接受的载体。
可用的组合物的实例描述于欧洲专利号0 296 110、0 657 164、  0 296110、0 733 372、0 711 556、0 711 557。
优选的组合物描述于1995年6月14日公布的欧洲专利号0 657 164。所述的药用组合物含有米哚妥林在饱和的聚烷二醇甘油酯中的溶液或分散体，其中二醇甘油酯为一种或多种C8-C18饱和的脂肪酸的甘油酯和聚乙二醇酯的混合物。
本发明涉及米哚妥林或其药学上可接受的盐在制备用于治疗GIST(例如伊马替尼抗性的GIST)的药物中的用途，条件是米哚妥林不与伊马替尼共同、顺序或分别给药。
本发明涉及米哚妥林或其药学上可接受的盐在治疗GIST(例如伊马替尼抗性的GIST)中的用途，其中伊马替尼不用于治疗所述GIST，例如伊马替尼抗性的GIST。
本发明涉及米哚妥林或其药学上可接受的盐的用途，其中米哚妥林用作治疗GIST(例如伊马替尼抗性的GIST)的抗肿瘤药物。
本发明也涉及包装的米哚妥林，所述包装包括使用米哚妥林或其盐以及治疗GIST(例如伊马替尼抗性的GIST)的说明书。
一方面，本发明提供了治疗GIST的方法，包括给予需要的温血动物、特别是人类治疗有效量的米哚妥林以对抗GIST。更特别的是，本发明提供了治疗患有GIST患者的方法，它包括给予患者有效量的米哚妥林或其药学上可接受的盐。更特别的是，本发明提供了治疗患有GIST患者的方法，它包括给予患者有效量的米哚妥林或其药学上可接受的盐，其中作为口服药物制剂，米哚妥林以每天100-300mg的剂量给药，优选以每天150-250mg的剂量给药，最优选每天200mg给药。
实施例I：米哚妥林药物制剂
组合物A：
将单硬脂酸甘油脂(gelucire)44/14(82份)加热至60℃融化。将粉末状的米哚妥林(18份)加到融化物中。将所得混合物匀化，将所得分散体装入不同大小的硬明胶胶囊中，以便一部分胶囊含有米哚妥林的剂量为25mg，另一部分含有75mg。所得胶囊适用于口服给药。
组合物B：
将单硬脂酸甘油脂44/14(86份)加热至60℃融化。将粉末状的米哚妥林(14份)加到融化物中。将所得混合物匀化，将所得分散体装入不同大小的硬明胶胶囊中，一部分胶囊含有米哚妥林的剂量为25mg，另一部分含有75mg。所得胶囊适用于口服给药。
购自Gattefossé的单硬脂酸甘油脂44/14为C8-C18饱和脂肪酸与甘油和分子量约为1500的聚乙二醇的酯的混合物，用于脂肪酸成分的组合物的标准为：按重量比为4-10％辛酸、3-9％癸酸、40-50％月桂酸、14-24％肉豆蔻酸、4-14％棕榈酸和5-15％硬脂酸。
优选的单硬脂酸甘油脂制剂的实例包括：
单硬脂酸甘油脂(44/14)：47g
米哚妥林：3.0g(填充到60mL的螺旋(Twist off)烧瓶中)
组合物C：含有下列微乳的软胶囊的实例：
玉米油甘油酯 85.0mg
聚乙二醇400 128.25mg
聚氧乙烯醚(40)氢化蓖麻油 213.75mg
米哚妥林 25.0mg
 DLα维生素E 0.5mg
无水乙醇 33.9mg
总计 486.4mg
实施例2：
PKC412与常规PKCs、FLT3、PDGFRs、VEGFRs、KIT和CDK1-细胞周期蛋白B复合物的ATP结合位点强烈地相互作用。值得注意的是，PKC412在顽固性CEL患者中表现出具有对抗FIPL1-PDGFRA的伊马替尼抗性T674I突变型的完全的抑制活性，参见，例如Cools J.等人，CancerCell 2003；3：459-469。酪氨酸激酶的催化位点被高度保留，PDGFRA的T674I突变分别与ABL中的T315I突变和KIT中的T670I突变、在进行性BCR-ABL阳性CML和在KIT突变的GIST患者中的抗性突变一致。在26位患有对伊马替尼治疗无效的GIST的患者中对伊马替尼的抗性的机制进行了研究，PKC412的使用在那些由于KIT-T670I或-V654A复发导致的疾病中克服了对伊马替尼的临床抗性，并且对PDGFRA-D842V激酶域突变进行了研究。
材料和方法
患者：在Leuven大学医院肿瘤部对采用伊马替尼治疗的26位患者的进行性肿瘤进行了研究。共有20位男性和6位女性，中值年龄53岁(年龄范围为37-77岁)。26位患者中的22位的初期肿瘤经手术切除。在采用伊马替尼治疗之前，13位患者在疾病的晚期阶段采用了化疗和/或放疗。肿瘤处于进行阶段但临床状况又较好的患者可以将日剂量提高到至多1000mg。剂量增加的决定基于治疗至少4周的患者的数据。一个月、三个月后重新评价损害，此后每6个月评价一次。试验进展应基于临床检验和CT/PET成像，并根据先前公布的标准进行定义，参见例如Van OosteromAT等人，Lancet 2001；358：1421-1423。通过连续肿瘤活组织检查的方法，在选定的同意的患者中评价治疗过程中的病理组织学和分子学变化。
病理学：病理组织学和免疫组织化学分析在包埋于石蜡中的组织中进行。在没有进行任何抗原提取(antigen retrieval)的情况下，采用抗CD117(A4502，稀释度为1/250，DAKO，Denmark)的多克隆抗体和亲和素-生物素-过氧化物酶复合物。
荧光原位杂交(FISH)：在伊马替尼治疗前所获得的肿瘤活组织检查的4μm石蜡包埋的组织切片上(18例)，或者在得自伊马替尼抗性损害的新鲜活组织检查的接触标本上(共26例)进行双色间期FISH分析。根据前面所述，将用于KIT/4q12(RP11-568A2)或PDGFRA/4q12(RP11-24O11)的地高辛或生物素标记的BAC克隆分别与绿色荧光素(SpectrumGreen)-或橙色荧光素(SpectrumOrange)-标记的染色体4着丝粒探针(CEP4，Vysis Inc.，Downers Grove，IL，USA)共同杂交。21在装配有制冷型黑白电荷耦合器件的暗箱(Photometrics，Tuscon，AZ)中并通过Quips SmartCaptureTMFISH Imaging软件(Vysis，Bergisch-Gladbach，Germany)运行的LeicaDMRB(Leica，Wetzlar，Germany)荧光显微镜上收集FISH数据。评价数百个分裂间期细胞核，并计算KIT/PDGFRA与CEP4的比例。比例≥2定义为特异性的KIT/PDGFRA扩增。
序列分析：采用High Pure PCR Template Preparation试剂盒(Roche，Mannheim，Germany)自速冻的组织提取基因组DNA。通过前面所述的聚合酶链反应(PCR)使得KIT的外显子9、11、13、14、15和17以及PDGFRA的外显子12和18扩增，参见，例如Debiec-Rychter M等人，J Pathol2004；202：430-438。将PCR产物纯化(Microcon PCR，Millipore，MA，USA)，并且在Transgenomic WAVE DHPLC系统(DHPLC；Transgenomic，Inc.，UK)上采用变性高效液相色谱筛选突变。具有异常洗脱特征的样品再扩增并测序。
Western-blot法：足够用于制备细胞裂解产物的速冻肿瘤样品得自10个顽固性GIST。采用21所述方法进行细胞裂解、SDS-PAGE和免疫印迹。采用稀释度为1∶500的抗磷酸化-KIT(Y703)(Zymed，San Francisco，CA)抗体将膜(Amersham Pharmacia Biotechnology，UK)免疫印迹过夜。在稀释度为1∶2500时使用HRP-结合的抗-兔IgG并采用增强的化学发光(Pierce)目测。然后将膜解吸并重新印迹，采用抗体识别总KIT蛋白(抗-CD117，A4502，DAKO，Glostrup，Denmark)测定总蛋白水平。
初期抗性GIST细胞响应分析：将甲磺酸伊马替尼和PKC412(结晶化合物)以10mM溶于100％DMSO(Sigma)中，将等份的量保存在-80℃。系列稀释10mM储备液进行试验。对照用溶剂(DMSO)稀释液进行试验。自胶原酶解聚的进行性肿瘤样本获取初期细胞，以60-70％的融合接种于100-mm细胞培养盘中(Corning Inc.，Corning，NY)，在补充有10％胎牛血清、0.1mM非必需氨基酸和1.0mM丙酮酸钠的DMEM中生长3天。将细胞分别暴露在甲磺酸伊马替尼、PKC412或载体中各90分钟，采用10mL冷PBS洗涤，在缓冲液[1％NP40、50mM Tris-HCl(pH8.0)、150mMNaCl，并补充有完全性蛋白酶抑制剂混合片(Boehringer Mannheim GmbH，Mannheim，Germany)和0.2mM原钒酸钠(Sigma，St.Louis，MO)]中裂解。
构建：通过RT-PCR在自进行性肿瘤分离的RNA上获得突变型PDGFRA和KIT cDNA。将cDNA克隆到反转录病毒载体pMSCV-puro(Clontech)中。
细胞培养：293T细胞在补充有10％FCS的DMEM中生长。Ba/F3细胞在补充有10％FCS和白介素-3(1ng/mL)的RPMI-1640中生长。如前所述产生病毒，参见，例如Cools J等人，N Engl J Med 2003；348：1201-1214。
用嘌呤霉素(2μg/mL)对用不同的构建物转导的Ba/F3细胞进行选择。为进行因子非依赖性生长试验，将Ba/F3在PBS中洗涤3次，在不添加白介素-3的情况下开始新的培养。将变为不依赖白介素-3的细胞保存在没有白介素-3的条件下。对于剂量-响应曲线，将Ba/F3细胞置于具有不同浓度抑制剂的24孔板中生长。采用AqueousOne溶液(Promega)，在开始时和24小时后分别测定存活细胞的数量。
结果：评价采用伊马替尼治疗的26位患者的进行性肿瘤。自诊断到证明为恶性疾病的中值时间为48周(范围为0-265周)，而自诊断到伊马替尼治疗的中值时间为91周(范围为6-304周)。15位患者(57.6％)得到部分缓解，10位患者(38.4％)在伊马替尼治疗期间病情稳定，无事件存活的平均时间为48周(范围为16-200周)。
病理组织学：25个初期GIST具有纺锤状细胞并且一个具有混和形态。在每个初期肿瘤和26个中的24例(92％)进行性活组织检查中都证明具有CD117抗原表达。两个伊马替尼抗性的GIST的组织形态自纺锤状转变为上皮状，并且其免疫显形变为CD117阴性(数据未公布)。
突变分析：D-HPLC和直接测序的组合应用显示26个中的25个(96.1％)的基线GIST活组织检查中出现KIT突变，见表1。19个肿瘤具有外显子11近膜突变，6个具有外显子9突变。预先治疗的肿瘤样本在PDGFRA中没有产生突变或在KIT中没有多于一个的突变。在接受检查的外显子中，没有1个肿瘤产生可识别的KIT或PDGFRA序列改变。在伊马替尼治疗前，肿瘤中没有检查到KIT激酶域的点突变，而在进行过程中，中值为77周(范围为16-88)的治疗后，12/26(48％)个患者中检查到6个明显的二级KIT突变。4个患者具有V654A，3个患者具有T670I替代，而其余的患者具有D716N、D816G、D820Y、D820E或N822K突变。具有原始KITG565R突变的1个患者在PDGFRA中获得D842V点突变，而在该患者的初期肿瘤中没有检测到。
FISH分析：FISH分析揭示在26个进行性肿瘤中的2个(7.7％)具有KIT扩增。在患者26的初期未响应肿瘤中，KIT扩增与同时发生的PDGFRA的扩增有关(数据未显示)。在治疗前或疾病的发展中，该患者的肿瘤中未发现KIT或PDGFRA突变。在一个患者中，KIT扩增(至多5倍)与增加的PDGFRA复制数没有关系。该病例具有初期KIT突变，但在发展过程中没有鉴定到二级突变。在6个伊马替尼抗性的样本中，分裂间期FISH分析显示了KIT/PDGFRA/CEP4基因座的缺失。在这些肿瘤中的3个，在基线肿瘤活组织检查中观察到了半合子状态，而在另外3个样本中，它只是在进行性损害中存在。然而，在后者中，每个细胞核的KIT/CEP4信号数中出现了标记的不均匀性(范围自0-4)。特别是，在1个患者的进行性肿瘤活组织检查中23％的细胞出现了KIT/PDGFRA/CEP4双-等位基因的缺失。
在抗性GIST中的KIT活化：采用KIT磷酸化酪氨酸Y703和总KIT的抗体通过Western blotting方法分析评价10个伊马替尼抗性的GIST中的KIT活化。8个样本证实有KIT表达和不同水平的组成性KIT自磷酸化。这些8个肿瘤中的4个具有二级KIT突变，而对于其余4个，伊马替尼抗性的肿瘤细胞中KIT再活化的原因还不知道。两个抗性转移肿瘤都没有KIT表达，它与免疫组织化学检测的CD117-阳性的缺失和在1个病例中观察到的KIT基因座的双-等位基因的缺失相符合。
抗性GIST对伊马替尼和PKC412的离体响应：在具有KITΔ557-558/T670I或KITInsAY502-503/V654A突变异型的培养的伊马替尼抗性细胞中，通过Western blot方法测定伊马替尼和PKC412对KITY703残基的自磷酸化的作用。将结果与具有半合子KIT K642E突变的GIST882细胞比较。对于采用抗KIT抗体的总KIT表达使用标准化观察。在抗性KITΔ557-558/T670I和KITIns503AY/V654A肿瘤中以及它们的体外培养的细胞配对物中将KIT蛋白表达和磷酸化至显著的水平。任一初级细胞系与伊马替尼(至多5μM)的接触不会影响KIT的自磷酸化。相反，0.5μMPKC412使其减少且1μM PKC412完全抑制了突变型KITΔ557-558/T670I细胞的KIT自磷酸化。同样，PKC412的浓度为0.5μM时也减少了突变型KITIns503AY/V654A的KIT自磷酸化，在药物浓度到达10倍高时能够完全抑制其自磷酸化。
伊马替尼和PKC412在体外对KIT和PDGFRA突变型的作用：在Ba/F3鼠细胞中表达突变型KITΔ557-558/T670I和PDGFRAΔDIM842-844以及D842V。Ba/F3细胞的生长依赖于IL3，但经许多活化的激酶(例如FIP1L1-PDGFRA和BCR-ABL)表达后成为IL3非依赖型的。引入Ba/F3细胞中的突变型KIT和PDGFRA蛋白也赋予因子非依赖性生长(confer factor independent growth)，并且是组成性磷酸化的，这证实这些蛋白是活化激酶(数据为给出)。剂量响应曲线和使用伊马替尼的KITΔ557-558/T670I磷酸化状态分析证实了对伊马替尼的抗性，10μM的伊马替尼不能完全抑制磷酸化(细胞IC50～5μM)。PDGFRA D824V突变型也对伊马替尼显示了抗性，尽管程度较低(细胞IC50～1μM)。在该试验中采用PDGFRAΔDIM842-844突变型作为对照。所有3个突变型都被浓度低于1μM的PKC412所抑制，而PDGFRA D842V具有较高的细胞IC50值，约为200nM(图.1)。
初步的研究描述了两类伊马替尼抗性：KIT-依赖型或KIT-非依赖型的机制。15根据申请人的结果，申请人推断KIT的再活化对于抗性的产生是最重要的机制。在10个进行性肿瘤中的8个中发现了KIT的磷酸化(活化)，可以在伊马替尼肿瘤期间通过Western blot方法进行分析。在50％的这些病例中，KIT的再活化是二级抗性突变的结果，而在其它50％中，再活化的原因还不知道。在这些样本中对KIT的完整测序可以在KIT的意料之外的区域中识别新的突变，它使得蛋白质对伊马替尼治疗不敏感。或者，影响细胞内药物传递或清除的因素能够导致不充分的受体抑制，结果影响了疾病的进展。
在研究的26位患者中，获得性二级KIT突变是解释对伊马替尼抗性的最常发生的事件(48％的病例)。在进行性肿瘤中鉴别出了6个明显的二级KIT突变。所有的突变都是单氨基酸取代，并且除了在基线、非治疗的肿瘤中鉴别的活化KIT突变外所有的突变都存在。从申请人了解的情况来看，在单一病例中出现的两种频发的KIT突变(V654A和T670I)和三种其它突变(D716N、D820E和D816G)以前在初期GIST中并没有报道。这就支持了这些突变与对药物的抗性的产生之间的紧密联系。D820Y和N822K突变以前在没有采用伊马替尼治疗的GIST中有报道。活化环突变(例如D816G、D820E/Y、N822K)有可能在KIT中活化突变，从而也直接导致产生对伊马替尼的抗性。在患有系统性肥大细胞病的患者中和在精原细胞瘤的亚类中，KIT D816V突变与对伊马替尼的初期抗性有关。
具有初级KIT G565R突变的1个肿瘤通过二级PDGFRA D842V突变获得对伊马替尼的抗性。在GIST中，D842V突变是最常见的活化PDGFRA突变，也被证明具有伊马替尼抗性。该突变是活化突变，它显示出对伊马替尼的敏感性降低。对由于不同激酶(例如PDGFRA)的突变而产生的对伊马替尼的抗性的观察证实了以前没有报道过的抗性的机制。通常，依赖对小分子抑制剂敏感的活化的激酶的肿瘤的抗性可以通过对该抑制剂不敏感的不同激酶中的活化突变而产生。还需要确定的是，是否该抗性机制在GIST以及其他肿瘤和白血病中更经常起作用，在申请人所研究的病例中(其中不能确定KIT中的二级基因组变化)它是否是产生抗性的原因。
在本研究中的2个病例中，伊马替尼抗性与KIT或KIT/PDGFRA基因的扩增有关。在后者中，随着大面积的进行性肿瘤生长，患者表现出对伊马替尼的初期抗性，因此在伊马替尼开始给药后的5周患者死亡。该患者的疾病的恶性阶段持续了超过1年，并且在给予伊马替尼治疗前该患者采用高剂量化疗和放疗进行了治疗，因此在伊马替尼给药前和另外选择的本药存在的情况下在肿瘤细胞内可能就已经产生了扩增。该发现表明KIT扩增可以导致产生初级抗性，提醒在GIST患者中要小心使用传统的化疗方法，它可能增加与疾病进程有关的克隆多样性的进展，可能会产生影响药物响应的基因的改变。
两个进行性肿瘤完全丧失了KIT表达，说明了抗性的KIT非依赖性机制。分裂间期FISH分析揭示了在这些肿瘤之一中目标KIT/PDGFRA基因的双-等位基因缺失的细胞的选择性生长，进一步典定了不产生受体依赖性的基础。在对伊马替尼抗性产生的时候在两个肿瘤中观察到向KIT/PDGFRA半合子状态的移位，它与二级KIT突变的出现有关。是否是半合子状态/纯合子状态增加了对伊马替尼频发的突变的不敏感还不清楚，需要另外深入研究。
在试图定义处于进行性阶段的肿瘤细胞中常见的KIT V654A和T670I突变对伊马替尼敏感性的尝试中，采用离体法分析测定伊马替尼对具有这些突变的细胞中的配体-非依赖性KIT磷酸化的抑制作用。在上述两种情况中，伊马替尼的浓度高至5μM时KIT自磷酸化也不会受到抑制，该浓度是伊马替尼在体内可能达到的大约最高水平。PKC412(可供选择的KIT和PDGFR抑制剂)在该药物能够发挥治疗作用的浓度下对两种突变均具有抑制作用。在体外采用转化Ba/F3鼠细胞也可以确认KIT T670I突变对伊马替尼和PKC412的不同敏感性。为进一步研究其它伊马替尼抗性突变对PKC412的敏感性，对采用伊马替尼抗性PDGFRA D842V突变转染的Ba/F3细胞进行了试验。PKC412在浓度为1μM时能够有效抑制PDGFRAD842V突变，另外强调了该药物在体外对具有不同伊马替尼抗性突变同种型的抑制的潜力。在GIST患者中伊马替尼抗性的KIT-依赖性和非依赖性机制的存在得到了证实并揭示了新的伊马替尼抗性KIT突变同种型。表明伊马替尼抗性PDGFRA突变的获得是KIT阳性肿瘤中二级抗性产生的原因，表明KIT扩增不仅是对药物二级抗性也是初级抗性产生的可能的原因。KIT T670I和V654A以及PDGFRA D6842V突变对PKC421的敏感性得到证实。结论是不同的激酶域突变对可选择的激酶抑制剂具有不同的敏感性，它对于准确地根据抗性产生的主要机制设计调整二线治疗方案是非常重要的。
表1.KIT和PDGFR肿瘤基因型26 GIST患者
病例 基因型
基线活组织检查  二级突变a
 KIT  KIT或PDGFRA
 1  PM K558N
 2  Del WK557-558
 3  Del WK557-558d
 4  Del WK557-558d
 5  Del KVVE558-561
 6  Del KVVEEI 558-563
 7  Del VYIDPTQL 569-576
 8  Del GNNYVYIDPTQLPYD565-579V
 9  PM V559G  KIT V654A(GTG→GCG)
 10  PM L576Pd  KIT V654A(GTG→GCG)d
 11  Ins 574PT  KIT V654A(GTG→GCG)
 12  Del WK557-558  KIT D716N(GAT→AAT)
 13  Del WK557-558  KIT T670I(ACA→ATA)
 14  Del WK557-558 KIT T670I(ACA→ATA)d
 15  Del KPMYEVQWK 550-558Q KIT T670I(ACA→ATA)
 16  Del VEEINGNNYVYIDPTQL560-576 KIT D820E(GAT→GAA)
 17  Del VYIDPTQL 569-576 KIT D820Y(GAT→TAT)
 18  Del VYIDPTQL 569-576 KIT N822K(AAT→AAA)d
 19  Ins 503AY KIT V654A(GTG→GCG)
 20  Ins 503AY KIT D816G(GAC→GGC)
 21  Ins 503AY
 22  Ins 503AY
 23  Ins 503AY
 24  Ins 503AY
 25  PM G565R  PDGFRA         D842V(GAC→GTC)
 26  WT
缩写：WT-野生型；a-在基线突变同种型的顶部检测到的突变；b-每一细胞核KIT信号的范围；d-通过测序的半合子

Claims (11)

1.治疗患有胃肠道基质瘤患者的方法，该方法包括给予需要的患者有效量的下式的米哚妥林或其药学上可接受的盐：
Figure A2005800287140002C1
2.权利要求1的方法，其中胃肠道基质瘤为伊马替尼抗性的胃肠道基质瘤。
3.权利要求2的方法，其中米哚妥林给药的日剂量为100-300mg。
4.权利要求3的方法，其中日剂量为150-250mg。
5.权利要求4的方法，其中日剂量为200mg。
6.前述权利要求任意一项的方法，其中米哚妥林给药于患者的条件是米哚妥林不与伊马替尼同时、分别或顺序使用。
7.米哚妥林在制备用于治疗胃肠道基质瘤的药物中的用途。
8.权利要求8的用途，其中胃肠道基质瘤对于用伊马替尼的治疗具有抗性。
9.权利要求8的用途，其中米哚妥林给药的日剂量为150-250mg。
10.权利要求9的用途，其中给药的日剂量为200mg。
11.权利要求1的方法或权利要求8的用途，其中米哚妥林经口服给药。
CNA2005800287142A 2004-08-31 2005-08-30 米哚妥林用于治疗胃肠道基质瘤的用途 Pending CN101010082A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US60577104P 2004-08-31 2004-08-31
US60/605,771 2004-08-31

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN101010082A true CN101010082A (zh) 2007-08-01

Family

ID=35134408

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA2005800287142A Pending CN101010082A (zh) 2004-08-31 2005-08-30 米哚妥林用于治疗胃肠道基质瘤的用途

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20090075972A1 (zh)
EP (1) EP1799226A1 (zh)
JP (1) JP4970262B2 (zh)
KR (1) KR20070046906A (zh)
CN (1) CN101010082A (zh)
AU (1) AU2005279344B2 (zh)
BR (1) BRPI0514765A (zh)
CA (1) CA2576926C (zh)
MX (1) MX2007002415A (zh)
RU (1) RU2410098C2 (zh)
WO (1) WO2006024494A1 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111393454A (zh) * 2020-05-07 2020-07-10 奥锐特药业(天津)有限公司 米哚妥林的新晶型及其制备方法
WO2022142914A1 (zh) * 2020-12-31 2022-07-07 浙江海正药业股份有限公司 米哚妥林的新晶型及其制备方法和用途

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1899616A (zh) * 2006-07-20 2007-01-24 中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所 非受体酪氨酸激酶c－Abl特异性抑制剂的新用途
JP5546860B2 (ja) * 2006-08-16 2014-07-09 ノバルティス アーゲー 高結晶性治療化合物の固体分散体を製造するための方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5093330A (en) * 1987-06-15 1992-03-03 Ciba-Geigy Corporation Staurosporine derivatives substituted at methylamino nitrogen
IL86632A0 (en) * 1987-06-15 1988-11-30 Ciba Geigy Ag Derivatives substituted at methyl-amino nitrogen
BRPI0414527A (pt) * 2003-09-19 2006-11-07 Novartis Ag tratamento de tumores estromáticos gastrointestinais com imatinib e midostaurina
SG139747A1 (en) * 2003-11-18 2008-02-29 Novartis Ag Inhibitors of the mutant form of kit

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111393454A (zh) * 2020-05-07 2020-07-10 奥锐特药业(天津)有限公司 米哚妥林的新晶型及其制备方法
WO2022142914A1 (zh) * 2020-12-31 2022-07-07 浙江海正药业股份有限公司 米哚妥林的新晶型及其制备方法和用途

Also Published As

Publication number Publication date
RU2007111754A (ru) 2008-10-10
JP2008511572A (ja) 2008-04-17
MX2007002415A (es) 2007-04-23
BRPI0514765A (pt) 2008-06-24
KR20070046906A (ko) 2007-05-03
CA2576926C (en) 2012-10-02
WO2006024494A1 (en) 2006-03-09
JP4970262B2 (ja) 2012-07-04
AU2005279344A1 (en) 2006-03-09
EP1799226A1 (en) 2007-06-27
CA2576926A1 (en) 2006-03-09
RU2410098C2 (ru) 2011-01-27
AU2005279344B2 (en) 2009-11-12
US20090075972A1 (en) 2009-03-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101222850B (zh) 治疗对药物有抗性的癌症的方法
US9474754B2 (en) Pharmaceutical combinations comprising a B-RAF inhibitor, and EGFR inhibitor and optionally a PI3K-α inhibitor
ES2791539T3 (es) Compuestos para el tratamiento de enfermedades relacionadas con la expresión de DUX4
RU2607596C2 (ru) Комбинированная противораковая терапия
CN106211755A (zh) 使用erk和raf抑制剂的组合的癌症治疗
CN105339008A (zh) 用于治疗癌症的包括tor激酶抑制剂和n-(3-(5-氟-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基氨基)嘧啶-4-基氨基)苯基)丙烯酰胺的组合疗法
CN105377260A (zh) 用二氢吡嗪并-吡嗪类对癌症的治疗
CN105008394A (zh) 治疗结肠直肠癌的方法
JP2024012493A (ja) 消化管間質腫瘍の治療のための併用療法
JP2013501808A (ja) アポトーシスを促進し、かつ転移を阻害する方法
KR20220130085A (ko) 테트라사이클릭 화합물 및 이의 염, 조성물, 및 이의 사용 방법
CN101010082A (zh) 米哚妥林用于治疗胃肠道基质瘤的用途
AU2021339579A1 (en) Pharmaceutical combination and tumor treatment
ES2861516T3 (es) Oligonucleótidos antisentido para IL-34 y métodos de uso de los mismos
EP3880207B1 (en) Combination of a mcl-1 inhibitor and midostaurin, uses and pharmaceutical compositions thereof
EA021951B1 (ru) Противораковая комбинация
US10821114B2 (en) Derivatives of cephalosporin for treating cancer
CN102665716B (zh) 用于治疗唐氏综合征的方法和药物组合物
CN101784277A (zh) 儿科肿瘤的治疗
CN113453671A (zh) 用于治疗癌症的Raf抑制剂和CDK4/6抑制剂的组合疗法
CN114222576A (zh) 治疗癌症的方法
KR102664292B1 (ko) 항산화 반응요소 활성제를 유효성분으로 포함하는 암 전이 억제용 약학적 조성물
KR102664293B1 (ko) 항산화 반응요소 활성제를 유효성분으로 포함하는 암 전이 억제용 약학적 조성물
CN102238952A (zh) 用2-[4-(7-乙基-5H-吡咯并[2，3-b]吡嗪-6-基)-丙-2-醇治疗肾小球性肾炎
KR20230031443A (ko) 벤즈이미다졸 유도체를 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20070801