CN100546578C - 一种抗癌药物组合物及其在制备抗癌药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗癌药物组合物及其在制备肠癌药物中的应用、在制备乳腺癌药物中的应用、在制备肺癌药物中的应用。本发明药物组合物包括有以下重量分比的原料：1-羟基-大旋覆花内酯0.1-5份，1-氧-乙酰基大旋覆花内酯0.1-5份，1，6-二氧-二乙酰基大旋覆花内酯0.1-5份。本发明药物组合物具有显著的抗癌活性，且其毒副作用小。同时，以本发明药物组合物为活性成分制备成各种药物制剂，可为临床治疗各种癌症提供新的用药选择。尤其是为肠癌，乳腺癌，肺癌的治疗提供了新的选择。

Description

一种抗癌药物组合物及其在制备抗癌药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种从天然植物中提取物的药物组合物及其在制备抗癌药物中的应用。

背景技术

菊科旋覆花(Inula L.)属约有100多种。本属多种植物常供药用，如土木香(I.henlenium)可作为健胃、利尿、祛痰和驱虫药；欧亚旋覆花(I.britannica)具有消炎、下气、软坚、行水等功效。倍半萜类化学成分是本属植物的特征性成分，它包括有桉烷型、裂环桉烷型、吉马烷型和愈创木烷型倍半萜。近年来，人们从欧亚旋覆花(Inula britannica L)中分离提取出三种裂环桉烷型倍半萜(即：1-羟基-大旋覆花内酯，1-氧-乙酰基大旋覆花内酯，1，6-二氧-二乙酰基大旋覆花内酯)，并对其药理活性进行了广泛的研究。研究发现1-氧-乙酰基大旋覆花内酯具有抑制一氧化氮合酶的活性和抗炎活性(详见参考文献：Je KH，Han AR，Lee HT，et al.The inhibitory principle of lipopolysaccharide-induced nitric oxide production from Inula britannica var.chinensis.Arch PharmRes，2004，27：83-85.)；1-氧-乙酰基大旋覆花内酯，1，6-二氧-二乙酰基大旋覆花内酯具有抑制白血病细胞毒活性和肝癌细胞毒活性(详见参考文献：LiuS，Liu H，Yan W，et al.Studies on 1-O-acetylbritannilactone and its derivative，(2-O-butyloxime-3-phenyl)-propi-only-1-O-acetylbritannilactone ester.Bioorg Med ChemLett，2004，14：1101-1104.)。不过令人感到遗憾的是，单一化合物的药理活性较弱，不能满足临床需要。

发明内容

本发明的目的之一提供一种具有良好协同作用的抗癌药物组合物；本发明的目的之二是提供该药物组合物在制备抗癌药物中的应用。

本发明的目的是这样实现的：

本发明人对1-羟基-大旋覆花内酯，1-氧-乙酰基大旋覆花内酯，1，6-二氧-二乙酰基大旋覆花内酯的抗癌药理活性作了进一步的研究，发现其单独应用时抗癌活性均不够理想，而将这三种化合物按照一定的配比进行组合后，竟产生了意想不到的显著效果。据此，本发明人完成了本发明药物的组方配伍。

本发明所提供的抗癌药物组合物，包括有以下重量份比的原料：

1-羟基-大旋覆花内酯0.1-5份，1-氧-乙酰基大旋覆花内酯0.1-5份，1，6-二氧-二乙酰基大旋覆花内酯0.1-5份。

本发明所提供的抗癌药物组合物，其优选的原料重量份比是：

1-羟基-大旋覆花内酯1-3份，1-氧-乙酰基大旋覆花内酯0.1-2份，1，6-二氧-二乙酰基大旋覆花内酯4-5份。

本发明中的1-羟基-大旋覆花内酯亦称Britannilactone(1)，在以下表述中简称为BL；其化学结构如下：

1-氧-乙酰基大旋覆花内酯亦称1-O-diacetylbritannilactone，在以下表述中简称为ABL；其化学结构如下：

1，6-二氧-二乙酰基大旋覆花内酯亦称1，6-O，O-diacetylbritannilactone，在以下表述中简称为1，6-O₂-ABL；其化学结构如下：

本发明药物组合物各组分的提取制备方法可按照常规技术进行提取，也可参考以下方法：

a、将欧亚旋覆花粉碎，50-95％乙醇提取，提取液减压浓缩至膏状；依次用石油醚，氯仿，乙酸乙酯和正丁醇萃取膏状物，取氯仿萃取物；

b、取a步骤中的氯仿萃取物进行加压硅胶柱层析，用氯仿-乙酸乙酯(10∶1-0∶10)进行梯度洗脱；将洗脱液依次等量分成3部分，浓缩；第1部分用30-95％乙醇重结晶得到1，6-O₂-ABL；第2部分用30-95％乙醇重结晶得到1-O-ABL；第3部分再经硅胶柱层析得到BL。

本发明所提供的抗癌药物组合物，其中各组分的定性定量方法可采用以下方法进行：

定性方法  按照BL、1-O-ABL1、1，6-O₂-ABL的顺序：

1.熔点  依次为：173～175℃、124～126℃、82～84℃。

2.TLC固定相：硅胶G；展开剂：石油醚-乙酸乙酯(1∶1)；显色剂：5％H₂SO₄-香草醛溶液，105℃加热；显示桃红色。Rf值依次为：0.1，0.3，0.6。

3.HPLC条件

Agilent SB-C18 4.6×250mm色谱柱，流动相流速：1ml/min；

流动相：乙腈-水(25∶75；31∶69；100∶0)，波长210nm。

保留时间分别为：4′；13′；20′。

4.显色

三个化合物异羟肟酸铁反应均显阳性。

定量方法采用HPLC方法：

Agilent SB-C18 4.6×250mm色谱柱，流动相流速：1ml/min；

流动相：乙腈-水(25∶75；31∶69；100∶0)，波长210nm。

用外标法分别测定含量。

本发明所提供的抗癌药物组合物，对人大肠癌细胞株HT29，乳腺癌细胞株MCF-7，肺癌细胞株A-549，肝癌细胞株BEL-7404有非常显著的抑制。

据此可以实现本发明所述抗癌药物组合物在制备肠癌药物中的应用；所述抗癌药物组合物在制备乳腺癌药物中的应用；所述的抗癌药物组合物在制备肺癌药物中的应用。

本发明的有益效果通过以下实验得到了验证：

实验方法

实验用药：

实验1组：BL；

实验2组：1-O-ABL；

实验3组：1，6-O₂-ABL；

实验4组：本发明实施例1所制备的药物组合物；

阴性对照组：生理盐水，生产厂家：石家庄四药有限公司生产；生产批号：05062844。

阳性对照组：5-氟尿嘧啶，生产厂家：天津金耀氨基酸制药厂；生产批号：0704171。

实验组药物的配制：取所需重量的药物溶于70％乙醇作为储存液，使用时，用生理盐水稀释1000倍至工作浓度。

给药剂量及给药方法：

实验组：10mg/kg/天，灌胃给药，隔天一次，共5次。

阳性对照组：30mg/kg/天，肌注给药，隔天一次，共5次。

血药浓度检测：于灌胃2h后，用HPLC或毛细管电泳分析系统检测血浆药物浓度。

2、细胞株：人大肠癌细胞株HT29，乳腺癌细胞株MCF-7，肺癌细胞株A-549，肝癌细胞株BEL-7404。

3、种植瘤模型的建立与给药

(1)皮下种植瘤：分别将上述细胞培养至90％融合，收集细胞，取2×10⁶细胞悬液，注射至BALB/c-nu/nu裸鼠右或左肋下皮下组织，于术后15天取材，测量瘤体积。另取同样模型，观察30天，计算药物对模型动物存活率的影响。

(2)脾内种植瘤肝转移膜型：手术暴露腹腔取2×10⁶细胞，注射至BALB/c-nu/nu脾包膜内，于术后15天取脾和肝脏，测量瘤体积和肝转移结节数。

(3)给药方式：种植瘤细胞同时给药。

实验结果：

实验表明，实验组用药均有不同程度的抑制肿瘤生长和转移的作用，可延长实验动物的生存期，但实验4组用药效果明显优于实验1组、实验2组和实验3组。实验4组与阳性对照组，无统计学差异。详见表1、表2、表3。

表1不同药物对种植瘤大小的影响(cm³，n＝20)

表2不同药物对肿瘤肝转移发生率的影响(％，n＝20)

由表1、表2可以看出，实验4组用药其抑制肿瘤生长、转移的效果与阳性对照组基本相当，且明显优于其它实验组。

表3不同药物对实验动物生存率的影响(％，n＝20)

由表3可以看出，实验4组用药可有效延缓患癌动物的生存寿命，其效果明显优于其它组。

从以上试验可以看出，本发明药物组合物其无论是抑制肿瘤生长和转移方面还是在延长患癌动物寿命方面，其效果均优于单一药物组(实验1组、实验2组、实验3组)，且抗癌活性与5-氟尿嘧啶相当。由此充分证明本发明药物组合物具有良好的协同作用。

5-氟尿嘧啶是目前公认的疗效确切的抗癌药物，其在临床上也早已广泛用于治疗消化系癌(胃癌、结肠癌、肝癌、胰腺癌、食管癌等)、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、膀胱癌、肺癌、皮肤癌、头颈部癌等各种癌症。但其毒性大，有时会发生严重的毒副作用甚至死亡。

上述实验表明本发明药物组合物与5-氟尿嘧啶相比较其疗效相当，且在延长患癌动物寿命方面的效果还优于5-氟尿嘧啶。由此充分说明本发明药物组合物具有显著的抗癌活性，且其毒副作用小。以本发明药物组合物为活性成分制备成各种药物制剂，可为临床治疗各种癌症提供新的用药选择。尤其是为肠癌，乳腺癌，肺癌的治疗提供了新的选择。

本发明药物组合物在制剂应用中，可以本发明药物组合物为活性成分按照常规的制剂技术制备成各种临床用药物制剂。

本发明药物组合物可经口服或不经口服给药，给药量因给药途径不同而各有不同。通常情况下，按照人用药剂量为动物剂量的1/6进行折算，体重60公斤的成人，每天服用1克，5天为一疗程/月，连续服用6个疗程。但本发明药物的用法用量，也不完全限于此，临床医师也可以根据病人的具体情况决定药物的用法用量。

本发明药物组合物经口服给药时，首先使用该药物组合物与常规的药用辅料如赋形剂、崩解剂、黏合剂、润滑剂、抗氧化剂、包衣剂、着色剂、芳香剂、表面活性剂等混合，将其制成颗粒剂、胶囊剂、片剂的等形式给药。非经口服给药时可以注射液、输液剂或栓剂等形式给药。

以下实施例是由本发明提供的药物组合物制成制剂。它仅为更详细地说明本发明，但不以任何形式限制本发明。

具体实施方式

制剂实施例1

按照本领域已知的方法制备片剂，每片含有下述成分：

BL              5mg

1-O ABL         25mg

1，6-O₂-ABL；   25mg

乳糖            50mg

硬脂酸镁        5mg

糊精            130mg

制剂实施例2

按照本领域已知的方法制备胶囊剂，每个胶囊中含有下述成分：

BL                100mg

1-O-ABL           10mg

1，6-O₂-ABL；     100mg

乳糖              70mg

玉米淀粉          25mg

硬脂酸镁          1mg

聚乙烯比咯烷酮    130mg

制剂实施例4

按照本领域已知的方法制备注射剂，5ml注射液中含有下述成分：

BL               500mg

1-O-ABL          400mg

1，6-O₂-ABL；    100mg

以下实施例是本发明药物组合物的配比实施例，其按照常规的制剂技术制备成各种制剂，均可达到本发明所述效果，其中实施例5、6所制备的药物综合疗效更好。

Claims (5)

1、一种抗癌药物组合物，其特征在于它由以下重量份比的原料药组成：

1-羟基-大旋覆花内酯0.1-5份，1-氧-乙酰基大旋覆花内酯0.1-5份，1，6-二氧-二乙酰基大旋覆花内酯0.1-5份。

2、根据权利要求1所述的用于抗癌的药物组合物，其特征在于它由以下重量份比的原料药组成：

1-羟基-大旋覆花内酯1-3份，1-氧-乙酰基大旋覆花内酯0.1-2份，1，6-二氧-二乙酰基大旋覆花内酯4-5份。

3、权利要求1或2所述的抗癌药物组合物在制备肠癌药物中的应用。

4、权利要求1或2所述的抗癌药物组合物在制备乳腺癌药物中的应用。

5、权利要求1或2所述的抗癌药物组合物在制备肺癌药物中的应用。