CN100471865C - 三七二醇皂苷的制备方法 - Google Patents

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CN100471865C CNB2005100750390A CN200510075039A CN100471865C CN 100471865 C CN100471865 C CN 100471865C CN B2005100750390 A CNB2005100750390 A CN B2005100750390A CN 200510075039 A CN200510075039 A CN 200510075039A CN 100471865 C CN100471865 C CN 100471865C
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Abstract

本发明公开了一种三七二醇皂苷的制备方法,包括取三七粉碎,加浓度为60%的乙醇浸泡、渗漉,收集渗漉液,渗漉液减压浓缩,浓缩液用蒸镏水稀释,缓慢加到大孔吸附树脂分离柱中,用60%乙醇洗脱,收集60%乙醇洗脱液,将洗脱液经减压浓缩至相对密度为1.10的二醇皂苷粗品溶液,然后再精制得浅棕黄色粉末的三七二醇皂苷等步骤;用本发明的方法提取的三七二醇皂苷包含了三七中的全部的二醇类皂苷,提取率达到82-88%,用本发明的方法制备的三七二醇皂苷是三七中的消肿、镇痛活性成份,并且毒性低、安全、质量稳定成本低。

Description

三七二醇皂苷的制备方法
发明领域
本发明是关于一种药用植物的提取方法,更特别的是关于一种从三七中提取三七二醇皂苷的制备方法。
背景技术
三七历来是一种名贵传统中药具有散瘀止血消肿定痛作用,在传统中药复方中,特别是治疗跌打损伤的复方都离不开它,如云南白药、参七伤药、七厘散等。在近代药味较少的复方中也常用它,如著名的复方丹参片(三七、丹参)滴丸。
单味中药独用力专,是中药方剂“七方”的“奇方”,三七在传统临床使用时也有单用一味药的方法。
三七二醇皂苷是单味中药三七(又名田七,人参三七)的皂苷提取物,是三七消肿定痛的有效部位,主含消肿定痛作的有效成分人参皂苷Rb1和Rd。
三七别名田七、人参三七,为五加科人参属Panaxnotoginseng(Burk)F.H.Chen的根茎,主产于云南、广西。三七为常用中药之一,其生物活性和药理作用的主要成分为皂苷类。药理实验结果表明,三七总皂苷能增加动脉血流量、扩张血管、降低动脉血压及心肌耗氧量,提高肌体功能及对缺氧的耐受力,并有抑止血小板聚集、降低血粘度等作用。
《中国药典》称:三七功效“散瘀止血,消肿定痛”。《本草纲目》称:三七根“甘、微苦,温无毒”,主治“止血、散血、定痛”。
痹病系由素体不足,正气偏虚,腠理不密,卫外不固且感风寒湿热等邪气侵袭而经络阻闭,气血运行不畅,以致肌肉关节疼痛、麻木、重着,屈伸不利而形成痹证。早在《灵枢·五变》就说,“粗理而内不坚者,善病痹”。《济生方·诸痹门》说:“皆因体虚,腠理空疏,受风寒气湿气而成痹也”。
痹证初病属实,久则多呈正虚邪实,虚实夹杂之候。痹证容易出现三种病理变化:一是风寒湿热痹日久不愈,气血津液运行不畅之病变日甚,血脉瘀阻,津液凝聚,以致瘀血痰浊阻痹经络,出现皮肤瘀斑,关节周围结节,关节肿大,屈伸不利等症。二是病久使气血伤耗,呈现不同程度的气血亏虚或肝肾亏虚等证候。三是痹证不愈,由经络而病及脏腑,出现脏腑痹的证候。古今医界多依风寒湿热的偏胜分别施以祛风,散寒,除湿,舒经通络的辨证治疗,辅以益补气血,扶正固本而达气血畅通之目的。
迄今为止,未见有关用三七二醇皂苷治疗痹证的专业报道。
本发明人经多年研究发现,三七总皂苷中的许多成分对人体治疗痹证是无效的,真正有作用的是三七二醇皂苷等,有关三七二醇皂苷的性质、药理作用、制备方法以及对人体的作用均未见报道。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术存在的缺陷,提供一种从三七中提取三七二醇皂苷的方法。
本发明的第二个目的是提供一种能治疗痹证的三七二醇皂苷的制备方法。
本发明的这些以及其它目的将通过在下面的详细描述来进一步体现和说明。
本发明的三七二醇皂苷的制备方法,包括下列步骤:
1、取三七粉碎过一号筛,加浓度为60%的乙醇浸泡、渗漉,收集渗漉液;
2、渗漉液减压浓缩,回收乙醇;
3、浓缩液用蒸镏水稀释,缓慢加到大孔吸附树脂分离柱中,依次用蒸馏水、40%乙醇和60%乙醇洗脱,收集60%乙醇洗脱液;
4、60%乙醇洗脱液经减压浓缩至相对密度为1.10的二醇皂苷粗品溶液;
5、二醇皂苷粗品溶液拌入硅胶,充分混匀,减压干燥,得拌样硅胶;
6、将拌样硅胶装入23倍硅胶的层析柱中,用含醋酸乙酯、乙醇和水的混合溶剂洗脱,用硅胶G板检查,收集含人参皂苷Rb1、Rd等成分的流份;
7、洗脱液滤过,滤液减压浓缩至相对密度1.33流浸膏;
8、流浸膏减压干燥,得干浸膏,将干浸膏粉碎,即得浅黄棕色粉末的三七二醇皂苷。
进一步的,在本发明的三七二醇皂苷制备方法中,其原料与大孔吸附树脂之比为8∶10,大孔吸附树脂的柱径与柱高之比为:30:160,大孔吸附树脂为苯乙烯型共聚体,型号为D-101,大孔吸附树脂分离柱为已处理平衡好的,并经检查有机溶剂残留量符合药用级标准要求:苯小于2ppm,甲苯、二甲苯、二乙烯苯小于20ppm,所述的减压浓缩或减压干燥温度为低于50℃。
在本发明的三七二醇皂苷的制备方法中,还包括大孔吸附树脂再生步骤,即将使用过的大孔吸附树脂分离柱以1%盐酸或硫酸乙醇液浸泡过夜,继用乙醇、稀乙醇洗涤及用蒸馏水冲洗至中性,即可再次使用。
在本发明的三七二醇皂苷的制备方法中,还包括柱层硅胶再生步骤,即将使用过的硅胶,用蒸馏水洗脱至流出液无色,取出硅胶烘烤,烘箱温度升至120±2℃时,停止加热,自然冷却即可使用。
用本发明的方法提取的三七二醇皂苷包含了三七的全部二醇类皂苷,其中人参皂苷Rg1含量不低于56%,Rd不低于15%,二者合计为82-88%。含量高、质量稳定,色泽好,以其为原料制成的中药制剂将完全能满足现代化中药的要求,并且成本低、三七二醇皂苷损失少。与传统的溶剂萃取法相比,工艺流程中不使用毒性和易挥发的有机溶剂,安全可靠,大大简化的生产工艺。
用本发明的方法提取的三七二醇皂苷具有显著的抗炎、消肿、镇痛作用,对佐剂关节炎模型的免疫性炎症也有明显的抗炎作用;能治疗类风湿性关节炎和风湿性关节炎等痹症。
以下结合实施例详述本发明,但实施例仅用于说明并不能限制本发明的范围。
在本发明中,若非特指,所有的份、百分比均为重量单位,所有的设备和原材料等均可从市场购得或是本行业常用的。
具体实施方式
例1:按以下步骤进行制备:
1、取100克三七粉碎过一号筛,加浓度为60%的乙醇浸泡、渗漉,收集渗漉液;
2、渗漉液减压浓缩,温度为50℃,回收乙醇;
3、浓缩液用蒸镏水稀释至500-600毫升,缓慢加到大孔吸附树脂分离柱(柱径与柱高之比为:30:160,内装有100毫升D101树脂)中,依次用500毫升蒸馏水、1000毫升40%乙醇和1000毫升60%乙醇洗脱,流速为0.5倍床体积/小时,收集60%乙醇洗脱液;
4、60%乙醇洗脱液在温度为50℃时经减压浓缩至相对密度为1.10的二醇皂苷粗品溶液;
5、将二醇皂苷粗品溶液拌入硅胶(常规方法和比例)中,充分混匀,减压干燥,得拌样硅胶;
6、将拌样硅胶装入23倍硅胶柱中,用600-800毫升含醋酸乙酯、乙醇和水的混合溶剂(三者比例为:1:1:10)洗脱,用硅胶G板检查,收集含人参皂苷Rb1、Rd等成分的流份;
7、洗脱液过滤,滤液在温度为50℃时减压浓缩得相对密度为1.33的流浸膏;
8、将流浸膏减压干燥,得干浸膏,将干浸膏粉碎,即得浅黄棕色粉末的三七二醇皂苷大约2.15克;
9、大孔吸附树脂再生:将使用过的大孔吸附树脂分离柱以1%盐酸乙醇液浸泡12-24小时,逐渐降低乙醇浓度洗脱,最后用蒸馏水冲洗至中性;
10、柱层硅胶再生步骤:将使用过的硅胶,用蒸馏水洗脱至流出液无色,取出硅胶烘烤,烘箱温度升至120±2℃时,停止加热,自然冷却即可使用。
例2:按以下步骤进行制备:
1、取50克三七粉碎过一号筛,加浓度为60%的乙醇浸泡、渗漉,收集渗漉液;
2、渗漉液减压浓缩,温度为50℃,回收乙醇;
3、浓缩液用蒸镏水稀释至250-300毫升,离心、过滤,水溶液缓慢加到大孔吸附树脂分离柱(柱径与柱高之比为:30:160,内装有40毫升D101树脂)中,依次用200毫升蒸馏水、300毫升40%乙醇和400毫升60%乙醇洗脱,流速为0.6倍床体积/小时,收集60%乙醇洗脱液;
4、60%乙醇洗脱液在温度为50℃时经减压浓缩至相对密度为1.10的二醇皂苷粗品溶液;
5、将二醇皂苷粗品溶液拌入硅胶(常规方法和比例)中,充分混匀,减压干燥,得拌样硅胶;
6、将拌样硅胶装入23倍硅胶柱中,用100-300毫升含醋酸乙酯、乙醇和水的混合溶剂(三者比例为:1:0.8:10)洗脱,用硅胶G板检查,收集含人参皂苷Rb1、Rd等成分的流份;
7、洗脱液过滤,滤液在温度为50℃时减压浓缩得相对密度为1.33的流浸膏;
8、将流浸膏减压干燥,得干浸膏,将干浸膏粉碎,即得浅黄棕色粉末的三七二醇皂苷大约0.98克;
9、大孔吸附树脂再生:将使用过的大孔吸附树脂分离柱以1%盐酸或硫酸乙醇液浸泡,逐渐降低乙醇浓度洗脱,继用蒸馏水冲洗至中性;
10、柱层硅胶再生步骤:将使用过的硅胶,用蒸馏水洗脱至流出液无色,取出硅胶烘烤,烘箱温度升至120±2℃时,停止加热,自然冷却即可使用。
例3:三七二醇皂苷的抗炎和镇压痛作用
受试药物三七二醇皂苷由天津药物研究院植化室提供的淡黄棕色药粉批号940201,含量Rb1=59.15 Rd=15.10%,试验前用蒸馏水配制成所需浓度的溶液,供实验动物灌胃给药。
实验动物用本院动物房生产提供的昆明种小鼠(体重19-23g)除免疫和活血试验和Wistar种大鼠(体重120-150g)均为雄性)饲养在有中央空调的观察室中,饲料为中央药检所生产的全价营养块料,饮自来水,合格证号津动001。
消炎痛系天津中央制药二厂赠送的粉剂,用1.0%的西黄蓍胶浆配制成1.0毫克/毫升浓度的混悬液,供实验动物灌胃给药。
试验方法和结果
一、三七二醇皂苷的抗炎消肿作用
1、对鼠耳水肿的影响本试验使用50只雄性小鼠,随机分成5组,每组10只。每天灌胃给药1次,连续给药5天,对照组给生理盐水,于末次给药后30分钟,向每只小鼠左耳壳滴巴豆油致炎剂0.05毫升,2小时后处死。剪下左右耳,用直径9毫米打孔器打下同部位耳片,称重,以两耳重量之差作为鼠耳水肿程度。取平均数与对照组比较,进统计学测验结果(见表1)发现三七二醇皂苷口服给药,对鼠耳水肿的抑制作用非常显著,并具有一定的量效关系,其量关系方程y=0.097X+5.629(r=0.8834)
表1  三七二醇皂苷对鼠耳水肿的抗炎作用
Figure C200510075039D00111
*p<0.05     **P<0.01     ***P<0.001
2、对大鼠足肿的影响本试验使用50只雄性大鼠,随机分组,每组10只。每天灌胃给药1次连续给药4天,对照组给生理盐水。于末次给药后30分钟,在左后足垫皮下注射1.0%角叉菜胶浆0.05毫升致炎。分别在致炎前和致炎后30、60、120和180分钟,用投影仪(放大6倍)测量大鼠致炎肢(右后肢)踝关节下方0.5厘米处直径,用致炎前后的差值作为肿账度,取平均数与对照组比较,进行统计测验。结果(见表2)发现三七二醇皂苷对大鼠足肿的抑制作用非常显著,在这种实验性炎症模型上,三七二醇皂苷的抗炎作用不低于5毫克/公斤剂量的消炎痛。
表2  三七二醇皂苷对大鼠角叉菜胶足肿的影响
Figure C200510075039D00121
*p<0.05     **p<0.01     ***p<0.001
3、对大鼠佐剂关节炎的影响本试验使用50只雄性大鼠,随机分成5组,每组10只。佐剂的配制系将预先灭活的卡介苗加入预先灭菌的不完全福氏佐剂中,研磨配制成10毫克/毫升浓度的佐剂。模型制备采用在每只大鼠右后足垫部皮内注射0.1毫升佐剂,诱导关节炎的发生。
(1)对原发性病变的影响于致炎前4天开始给药剂量为200毫克/公斤,100毫克/公斤和50毫克/公斤,对照组生理盐水。每天灌胃给药1次,于末次给药后30分钟致炎,观察致炎后18小时和第8天佐剂注射侧足肿程度。用投影仪测量每只大鼠右后肢踝关节下0.5厘米处的直径(放大6倍),以致炎前后的差值作肿胀度,取平均数与对照组比较,进行统计学测验,结果(见表3)表明三七二醇皂苷对大鼠佐剂关节炎原发性病变的抗炎作用非常显著,三个剂量的作用均不小于2.5毫克/公斤剂量的消炎痛。
(2)、对继发性病变的影响于佐剂注射后第8天开始灌胃给药,剂量同上,每天1次,连续给药到第30天,观察三七二醇皂苷对继发性病变的防治作用,自给药之日起,每隔4-5天,用千分尺测量大鼠左后足掌厚度(佐剂注射对侧,用毫米表示),作为继发性病变肿胀度的指标,取平均数与对照组比较,进行统计学测验,结果列于表之中。从表中的结果可见三七二醇皂苷对佐剂注射对侧足肿的防治作用非常显著,提示该药能阻止和减轻大鼠佐剂关节炎继发性病变的发生。
表3  三七二醇皂苷对大鼠佐剂关节炎原发性病变的影响
Figure C200510075039D00131
*p<0.05     **p<0.01     ***p<0.001
(3)、对全身性病变的影响除观察左后足(佐剂注射对侧)的肿胀度,作为多发性关节炎的指标之外,还观察前肢、耳和尾部病变发生率与严重程度等全身性病变,按0-4级评分法记录,取平均数进统计测验,结果(见表5)发现三七二醇皂苷同样能够阻止全身性病变的发生。
表4  三七二醇皂苷对大鼠佐剂关节炎继发性病变的影响
Figure C200510075039D00141
*p<0.05     **p<0.01     ***p<0.001
表5  三七二醇皂苷对大鼠佐剂关节炎全身性病变的影响
*p<0.05     **p<0.01     ***p<0.001
4、对大鼠棉球肉芽肿的影响本试验使用50只雄性大鼠,随机分组,每组10只。预先给药4天,每天1次,剂量为200毫克/公斤、100毫克/公斤和50毫克/公斤,对照组大鼠给生理盐水。第4天灌胃给药后30分钟,用乙醚麻醉大鼠,在腋下接种棉球,然后继续给药7天。于末次给药后24小时处死大鼠,剥离棉球肉芽肿,先称湿重,后在80度烘箱中干燥,再称干重,减去棉球重,即得肉芽肿重。取平均数与对照组比较,进行统计学测验,结果(见表6)发现三七二醇皂苷对大鼠棉球肉芽肿的抑制作用显著,提示该药对慢性炎症也有明显的抗炎作用,其作用强度不小10mg/kg的可的松。
表6  三七二醇皂苷对大鼠棉球肉芽肿的影响
Figure C200510075039D00151
*p<0.05     **p<0.01     ***p<0.001
二、三七二醇皂苷的镇痛作用
1,对小鼠醋酸扭体反应的影响本试验使用50雄性小鼠,随机分组,每组10只。每天灌胃给药1次,连续给药4天,于末次给药后30分钟,腹腔注射0.6%醋酸溶液02毫升/鼠,10分钟后用记数器记录第二个10分钟内每只小鼠的扭体次数。同时做生理盐水和消炎痛对照组,计算每组小鼠的平均扭体数,与对照组比较进行统计测验,结果(见表7)发现在这个模型上三七二醇皂苷的镇痛作用非常显著。
表7  三七二醇皂苷对小鼠醋酸扭体反应的镇痛作用
Figure C200510075039D00161
*p<0.05     **p<0.01      ***p<0.001
2,对小鼠水浴甩尾反应的影响实验动物及其分组和给药情况同上,于第4天给药后30、90、120分钟,分别在55±0。5度水浴中测定小鼠甩尾反应潜伏期,作为痛阈指标,取平均数与对照组比较,进行统计学测验,结果(见表8)可见三七醇皂苷口服给药能非常显著地提高小鼠水浴甩尾的痛阈值,其镇痛作用没有超过5毫克/公斤剂量的消炎痛。
3,对大鼠水浴甩尾反应的影响本试验使用50雄性大鼠,随机分成5组,每组10只。每天灌胃给药1次,连续给药3天,于末次给药后30、90和120分钟,55±0.5度恒温水浴中测定大鼠甩尾反应潜伏期,作为痛阈指标,同时做生理盐水和消炎痛对照组,计算每组大鼠的平均扭数,与对照组比较进行统计测验。结果(见表9)发现在这个模型上三七二醇皂苷也有一定的镇痛作用。
表8  三七二醇皂苷对小鼠水浴甩尾反应的镇痛作用
Figure C200510075039D00171
*p<0.05     **p<0.01     ***p<0.001
表9  三七二醇皂苷对大鼠水浴甩尾反应的镇痛作用
*p<0.05     **p<0.01     ***p<0.001
三、对小鼠迟发性接触性皮炎的影响
本试验使用50只小鼠,随机分成5组,每组10只。雌雄各半。每天灌胃给药1次,连续给药10天,在第3天给药后30分钟,给每只小鼠背部皮下注射7%DNCB丙酮溶液20毫升致敏。于末次给药后30分钟,在每只小鼠左耳壳上涂上相同浓度的DNCB丙酮溶液15毫升攻击16小时后处死小鼠,用9毫米直径的打孔器取下耳片,称重,以左右耳片重量差作肿胀度。结果(见表10)发现三七二醇皂苷能显著地抑制DNCB诱导的小鼠迟发性接触性皮炎,但作用不及10毫克/公斤剂量的可的松。三七二醇皂苷对半抗原所引起的VI型变态反应具有显著的拮抗作用,提示该药对T淋巴细胞功能有一定的影响。
表10  三七二醇皂苷对小鼠迟发性接触性皮炎的影响
Figure C200510075039D00181
*p<0.05     **p<0.01     ***p<0.001
三、对小鼠耳廓微循环的影响
本试验使用40只小鼠,随机分成4组,每组10只。雌雄各半。给药前每组抽2只小鼠,在解剖显微镜下(4×22)观察右耳廓毛细血管交点数,作为小鼠耳廓微循环的正常值,一般3-4个毫克/公斤鼠耳。然后灌胃给药,每天1次,连续给药3天,于末次给药后30分钟,在观察每组的鼠右耳毛细血管交点数。取平均数与对照组比较,进行统计学测验,结果(见表11)发现三七二醇皂苷确有活血化瘀的作用,血液鲜红,其增加小鼠耳廓微循环非常显著,但作用不及5毫克/公斤剂量的复方丹参滴丸,三七的功能为活血止血,消肿定痛。已经上报的试验材料充分证明了三七二醇皂苷的消肿定痛作用,也为将来临床上治疗痹证的肿痛提供了实验依据,本试验按照“中药药理实验方法”第104页,选择小鼠耳廓微循环作为活体微循环观察,结果发现三七二醇皂苷也有显著的活血化瘀作用,从而揭示了三七二醇皂苷具有三七的主要功能。
表11  三七二醇皂苷对小鼠耳廓微循环的影响
Figure C200510075039D00191
*p<0.05     **p<0.01     ***p<0.001
试验结论
本试验使用4种实验性炎症模型和2种镇痛试验模型,进行主要药效学研究,结果证明三七二醇皂苷灌胃给药的抗炎镇痛作用都非常显著,揭示了三七确有消肿定痛的功效。虽然风湿性关节炎和类风湿性关节炎的发病机理尚不十分清楚,但是,我们的试验结果表明三七二醇皂苷能够治疗炎风湿性关节炎等风湿炎疾病。
三七二醇皂苷抗实验性水肿性炎症的作用非常显著,表现为对巴豆油所引起的鼠耳水肿的抑制作用较强,并具有明显的剂量依赖关系。此外,对角叉菜胶所致大鼠足肿或关节肿胀的抑制作用也非常显著,在这两种模型上的抗炎作用均不低于消炎痛。
众所周知,大鼠佐剂性关节炎是一个免疫性炎症模型,其发病机理和病理变化与人的类风湿性关节炎相似。在这个模型的不同发病阶段,三七二醇皂苷均能出现非常显著的抗炎作用,其作用强度也不低于消炎痛。
此外,三七二醇皂苷对慢性炎症也有明显的抗炎作用,其表现为对大鼠棉球肉芽肿的抑制作用与氢化可的松相当。
上述结果证明三七二醇皂苷的抗炎作用强而范围广。
三七二醇皂苷口服给药,对大鼠和小鼠的镇痛作用也非常显著,既能提高温热刺激的痛阈,又能降低化学致痛剂所引起的扭体次数。在这2种镇痛试验模型上,三七二醇皂对啵鼠镇痛作用不亚于消炎痛,但对大鼠甩尾反应的镇痛作用却不如消炎痛,据分析可能是经药次数少的原因。
参照三七的功能主治,围绕消肿定痛进行了主要药效学研究,结果发现了上述药理作用特点,为临床上治疗类风湿性关节炎和风湿性关节炎等痹证的肿痛提供了实验依据。
本试验结果还发现三七二醇皂苷口服给药,对小鼠T淋巴细胞功能有非常明显的影响,对小鼠耳廓微循环具有非常明显的增加微循环的作用,毛细血管内血内血液鲜红。上述结果进一步为该药治疗风湿性关节炎和类风湿性关炎等痹证的肿痛提供了依据。

Claims (8)

1、一种三七二醇皂苷的制备方法,其特征在于包括下列步骤:
A、取三七粉碎过一号筛,加浓度为60%的乙醇浸泡、渗漉,收集渗漉液;
B、渗漉液减压浓缩,回收乙醇;
C、浓缩液用蒸镏水稀释,缓慢加到大孔吸附树脂分离柱中,依次用蒸馏水、40%乙醇和60%乙醇洗脱,收集60%乙醇洗脱液,原料与大孔吸附树脂之比为10:1,大孔吸附树脂的柱径与柱高之比为:30:160;
D、60%乙醇洗脱液经减压浓缩至相对密度为1.10的二醇皂苷粗品溶液;
E、二醇皂苷粗品溶液拌入硅胶,充分混匀,减压干燥,得拌样硅胶;
F、将拌样硅胶装入23倍硅胶柱中,用含醋酸乙酯、乙醇和水的混合溶剂洗脱,用硅胶G板检查,收集含人参皂苷Rb1、Rd等成分的流份;
G、洗脱液滤过,滤液减压浓缩至相对密度1.33流浸膏;
H、流浸膏减压干燥,得干浸膏,将干浸膏粉碎,即得浅黄棕色粉末的三七二醇皂苷。
2、根据权利要求1所述的三七二醇皂苷的制备方法,其特征在于所述的大孔吸附树脂为苯乙烯型共聚体,型号为D-101。
3、根据权利要求1所述的三七二醇皂苷的制备方法,其特征在于所述的大孔吸附树脂分离柱为已处理平衡好的。
4、根据权利要求1所述的三七二醇皂苷的制备方法,其特征在于还包括将使用过的大孔吸附树脂分离柱以1%盐酸乙醇液冲洗,逐渐降低乙醇浓度洗脱,直至用蒸馏水冲洗至中性,即可再次使用。
5、根据权利要求1所述的三七二醇皂苷的制备方法,其特征在于还包括将使用过的硅胶,用蒸馏水洗脱至流出液无色,取出硅胶烘烤,烘箱温度升至120±2℃时,停止加热,自然冷却即可使用。
6、根据权利要求1所述的三七二醇皂苷的制备方法,其特征在于所述的减压浓缩或减压干燥温度为50±5℃。
7、根据权利要求1所述的三七二醇皂苷的制备方法,其特征在于提取的三七二醇皂苷包含了三七中的二醇类皂苷,其中人参皂苷Rg1含量不低于56%,Rd含量不低于12%,二者合计为82-88%。
8、根据权利要求1所述的三七二醇皂苷的制备方法,其特征在于三七二醇皂苷中有机溶剂残留物含量苯小于2ppm,甲苯、二甲苯和二乙烯苯均小于20ppm。
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