CN100386329C

CN100386329C - 取代的3-氨基-噻吩并[2,3-b]吡啶-2-羧酸酰胺化合物及其制备方法和用途

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Publication number: CN100386329C
Application number: CNB038099586A
Authority: CN
Inventors: 查尔斯·L·赛温; 陈志东; 乔纳森·埃梅格; 罗曼·W·弗莱克; 郝鸣鸿; 尤金·希基; 刘为民; 丹尼尔·R·马歇尔; 蒂纳·莫威克; 彼得·尼莫托; 罗纳德·J·索塞克; 孙三兴; 吴真平
Original assignee: Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2002-06-06
Filing date: 2003-06-03
Publication date: 2008-05-07
Anticipated expiration: 2023-06-03
Also published as: NZ537394A; JP4364120B2; AR040250A1; ATE415966T1; DK1513516T3; AU2003237330A1; MXPA04011246A; ME00355B; RS105204A; WO2003103661A1; UY27834A1; JP2005530816A; TW200401640A; EP1513516A1; HRP20041154A2; EA008706B1; PE20040539A1; JP2009102447A; US7405225B2; NO20044599L

Abstract

本发明公开了用作IκB激酶(IKK)复合物的激酶活性抑制剂的式(I)化合物：其中R₁及R₂是如本文的定义。该化合物因此可用于治疗以IKK调节的疾病，包括自体免疫性疾病、炎性疾病及癌症。也公开了含有这些化合物的药物组合物及制备这些化合物的方法。

Description

取代的3-氨基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺化合物及其制备方法和用途

申请数据

本申请要求2002年6月6日提交的美国临时申请号60/386,312以及2003年3月26日提交的美国临时申请号60/457,867的优先权，并且所述的申请这里引入作为参考。

技术领域

本发明涉及用作IκB激酶(IKK)复合物的激酶活性抑制剂的取代的3-氨基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺化合物。该化合物因此可用于治疗IKK调节的疾病，包括自体免疫性疾病、炎性疾病及癌症。本发明也涉及这些化合物的制备方法及包含这些化合物的药物组合物。

发明背景

NF-κB或核因子κB是诱发大量促炎及抗细胞凋亡基因表达的转录因子。这些包括细胞因子(如IL-1、IL-2、TNF-αIL-6)、趋化因子(包括IL-8及RANTES)与其它促炎分子，包括COX-2及细胞粘附分子(如ICAM-1、VCAM-1及E-选择蛋白)。NF-κB家族包括由Rel家庭成员所组成的同-及杂二聚转录因子(参考例如P.A.Baeurle及D.Baltimore的Cell，1996，87，13)。在静息条件下，NF-κB以与IκB的复合物存在于细胞的胞质中。蛋白IκB家族为NF-κB抑制剂，干扰其核定位信号的功能(参考例如U.Siebenlist等Ann.Rev.Cell Biol.，1994，10，405)。在细胞活化之后IκB-NF-κB复合物的破坏，则NF-κB会移位至核及活化基因转录。IκB-NF-κB复合物的破坏以及后续的NF-κB活化作用由IκB的裂解而启动。

在以各种促炎刺激物(包括IL-1、TNF-α及LPS(细菌脂多糖))活化细胞时，IκB的两个特异性丝氨酸残基被磷酸化。在磷酸化时，IκB发生多“泛素化”(polyubiquination)现象，并且随后被26S蛋白酶降解(参考例如V.J.Palombella等Cell，1994，78，773)，使NF-κB自由转位至核。IκB激酶完成IκB的磷酸化作用(参考例如M.Karin及M.Delhase在Seminars inImmunology，2000，12，85的评论)。传统的IKK复合物包括至少三种亚基IKKα(也称为IKK-1)、IKKβ(或IKK-2)及IKKγ(或NEMO)，尽管可能存在包含IKKα及IKKβ的其它相关的复合物。IKKα及IKKβ两者都是催化性亚基，而据信IKKγ是调节亚基。IKKα及IKKβ两者都可使IκB磷酸化。就该文件的目的而言，术语IKK或IKK复合物是指任何衍生自IKKα及/或IKKβ亚基具有激酶活性的复合物。

在活体内，IKK活化是在其催化性亚基磷酸化时发生的。IKKα及IKKβ两者可在丝氨酸残基上磷酸化，在IKKβ的情况下，在活化环(activationloop)的S177及S181上磷酸化，在IKKα的情况中，在活化环的S176及S180上磷酸化。以在177及181上以丙氨酸代替丝氨酸的IKKβ突变体阻止IKKβ磷酸化及后续的以TNFα、IL-1及其它的上活化因子使IKK复合物活化的作用。这些结果支持IKKβ在促性刺激作用后的IκB磷酸化中的关键性角色。

细胞及动物中的NF-κB途径受到抑制的研究支持下述观念：抑制IκB磷酸化是治疗炎性、自体免疫及其它疾病的可行途径。在这些研究中，NF-κB的活化被不可降解型的IκB蛋白质表达阻碍。该抑制剂在源自类风湿性关节炎患者的滑膜细胞中的表达减低TNF-α、IL-6、IL-1β及IL-8的表达，但是抗炎性分子IL-10、IL-1ra及IL-11不受影响。基质金属蛋白酶(MMP1及MMP3)也下调(J.Bonderson等Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A，1999，96，5668)。IκB抑制剂在T细胞中的转基因表达造成小鼠中胶原诱发的关节炎的严重性以及发作明显降低(R.Seetharaman等J.Immunol.1999，163，1577)。这些实验表明在患病关节中NF-κB的抑制可同时可以减低RA的严重性及进展。在初生肠上皮细胞中，NF-κB抑制剂阻断IL-1、IL-8、iNOS及COX-2、在炎性肠道疾病期间上调的调节因子的表达(C.Jubin等J.Immunol.，1998，160，410)。该抑制剂在一些的肿瘤细胞中的表达有助于化疗剂杀死这些细胞的作用(A.A.Beg及D.Baltimore，Science，1996，274，782)。

患有慢性阻塞性肺部疾病(COPD)的病人的肺部生物活检分析发现NF-κB的表达增加，并且与疾病严重性相关(A.Di Stefano等Eur.Resp.J.，2002，1，437)。据报道IKK-β抑制剂对NF-κB活化的抑制可能用于治疗COPD的消炎方法之一(P.U.Barnes的Nature Rev.Drug Disc.，2002，1，437)。同样已提及抑制NF-κB活性作为哮喘的治疗方法(A.Pahl及I.Szelenyi的Infl.Res.，2002，51，273)。

最近的评论描述了炎性调节因子在心血管疾病的发展中的重要角色。报导指出炎性调节因子以及其募集的细胞在引起动脉粥样硬化症的脂肪条纹及斑的发展中扮演关键性角色。此外，报导指出这些调节因子在后续的在斑上形成的纤维帽降解的作用中扮演关键性角色，所述的纤维帽引起破裂及凝块形成作用。如果凝块长到足够大时，可以引起心肌梗塞或中风。因此，可以抑制这些调节因子的产生及抑制后续的募集和这些细胞的活化作用的消炎药物可能有利于这些疾病的治疗(P.Libby的Scientific American，2002，46)。

许多研究显示NF-κB的活化作用也在癌症的致病及发展中也扮演关键性角色(参考例如B.Haefner在Drug Disc.Today，2002，7，653及M.Marin等Nat.Rev.Cancer，2002，2，301的评论)。研究已证明其中NF-κB具有组成性活性的细胞会抵抗细胞凋亡。这有利于通过阻碍在染色体变化或损伤的细胞的死亡而形成癌症。此外，以具有组成型活性的NF-κB的肿瘤细胞会抵抗抗癌症治疗，包括化疗法及辐照。进一步的研究已将活化的NF-κB与多种以淋巴-、骨髓-及上皮-衍生的恶性肿瘤关联起来，所述的肿瘤包括白血病、淋巴瘤和乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌及胰腺癌。因此暗示NF-κB抑制剂(包括IKKα及IKKβ抑制剂)，或单独或与其它的抗癌症治疗法组合可用于治疗癌症。

总而言之，以上所述的研究提供了通过抑制IKK的NF-κB功能的抑制可能是治疗自体免疫及炎性疾病、心血管疾病和癌症有用的治疗方法的支持。

也在IKKβ基因受到针对性破坏的小鼠中进行了研究。IKKβ基因的基因敲出由于肝细胞的细胞凋亡而引起胚胎死亡。但是，来自IKKβ敲出的成纤维细胞在被IL-1或TNFα刺激时不会发生IKK及NF-κB的活化(Q.Li等Science，1999，284，321)，该结果支持IKKβ在炎性刺激物后的NF-κB活化作用中的关键性角色。

通过表达肝特异性可诱发显性的阴性IαBα转基因产生条件性的基因敲出(L.Lavon等Nature Medicine，2000，6，573)。这些小鼠甚至在存活1年之后也没有任何肝功能障碍征候，但是这些小鼠确实具有受损的免疫功能。该研究支持下述观点：IKKβ的抑制可以引起使肝不受损的免疫抑制。

IKKα基因敲出的小鼠会在出生之后立即死亡，并出现各种骨骼缺陷及皮肤异常。这些小鼠的成纤维细胞及胸腺细胞显示出正常的IKK活化作用以及响应于TNFα、IL-1或LPS的IκB降解作用(Y.Hu等Science，1999，284，316；K.Takeda等Scinece，1999，284，313)。最近以基因敲出及基因替换的小鼠的研究显露IKKα在发育及细胞信号转导中具有不同的作用。相对于IKKα基因敲出的小鼠的研究，具有激酶失活型的IKKα基因替换的小鼠具有存活性及繁殖力，显示在IKKα基因敲出的小鼠中出现的产期死亡及异常不是因为激酶缺乏活性。但是，这些小鼠确实在B细胞成熟及次级淋巴器官的发育中存在缺陷(U.Senftleben等Science，2001，293，1495)。该表型似乎是由于在NF-κB2/p100蛋白质加工成p52(该Rel家庭转录因子成员的DNA结合形式)的缺陷。进而引起在B细胞中的NF-κB标的基因亚组的活化缺陷。此外，以这些相同的小鼠的其它研究已证明IKKα激酶活性是怀孕期间使乳腺上皮中的NF-κB活化所必需的(Cao Y.等Cell，2001，107，763)。该通路具体地通过TNF受体家庭成员RANK而激活，该途径需要正规的IKK基底IκB的磷酸化作用，并在细胞周期调节基因周期蛋白D1的诱发作用中达到最大值。

这些研究显示IKKα激酶活性抑制剂可用于治疗与不当的B细胞活化作用相关联的疾病，如红斑性狼疮(O.T.Chan等Immunological Rev.，1999，169，107)及类风湿性关节炎(A.Gause及C.Borek的Biodrugs，2001，15，73)。此外，IKKα抑制剂可用于治疗乳腺癌，因为NF-κB在许多乳房肿瘤中具有组成型活性，并且许多这些肿瘤的增殖依据周期蛋白D1。

已报导一些IKKβ抑制剂。WO 01/58890和WO 03/037886描述了作为IKKβ抑制剂的杂芳族羧酰胺衍生物。WO 01/68648描述了具有IKKβ抑制活性的取代的β-咔啉(carboline)。在WO 01/30774中报导了具有IKKβ抑制活性的取代的吲哚。WO 01/00610描述了具有NF-κB抑制活性的取代的苯并咪唑。已有报导指出阿斯匹灵(Aspirin)及水杨酸能与IKKβ结合并抑制IKKβ(M.Yin等Nature，1998，396，77)。

在US 2001/0020030 A1及A.O.Srewart等J.Med.Chem.，2001，44，998中报导具有细胞粘附抑制活性的取代的噻吩并吡啶。在U.S.6,313,301中报导显示绒促性素释放激素拮抗活性的噻吩并吡啶。在U.S.5,656,638中公开了描述作为端粒酶抑制剂的取代的噻吩并吡啶。

已在化学文献中记载了许多4，6-取代的噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺。实例包括3-氨基-4，6-二甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸二酰胺、3-氨基-4-甲基-6-苯基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酰胺、3-氨基-6-甲基-4-苯基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-6-(4-溴苯基)-4-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-4-(4-溴苯基)-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺丁基酰胺、3-氨基-6-呋喃-2-基-4-苯基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-6-呋喃-2-基-4-吡啶-3-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-4-(4-氯苯基)-6-苯基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-4-(4-氟苯基)-6-呋喃-2-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-4-(4-氯苯基)-6-呋喃-2-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-4-(4-溴苯基)-6-呋喃-2-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-4，6-双(4-氯苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-6-萘-2-基-4-吡啶-3-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-(2-羟乙基)酰胺、3-氨基-6-甲基-4-哌啶-1-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酰胺及3-氨基-4-甲基-6-羟基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酰胺，报导了以这些化合物作为合成三环杂环的中间物并评价了这些化合物的抗过敏活性(G.Wagner等Pharmazie，1990，45，102)。

其它实例包括3-氨基-4，6-二苯基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(A.M.Shestopalov等J.Org.Chem.USSR(英文译本)，1984，20，1382)、3-氨基-6-甲基-4-吡啶-4-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺及3-氨基-6-甲基-4-吡啶-3-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(G.Wagner等Pharmazie，1993，48，514)、3-氨基-4-甲氧基甲基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(E.I.Kaigorodova等Chem.Heterocycl.Compd.(英文译本)，1996，32，1234)、3-氨基-6-苯基-4-噻吩-2-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-4-呋喃-2-基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺、3-氨基-4-(4-氯苯基)-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺及3-氨基-4-呋喃-2-基-6-苯基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(F.A.Attaby的Phosphorus，Sulfur，Silicon Relat.Elem.，1998，139，1)、3-氨基-6-(4-氯苯基)-4-噻吩-2-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(Y.Sharanin等J.Org.Chem.USSR(英文译本)，1996，32，1207)、3-氨基-6-苯基-4-吡啶-3-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(A.Krauze的Eur.J.Med.Chem.Chim.Ther.，1999，34，301)及3-氨基-6-噻吩-2-基-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(M.I.Abdel-Monem等Pharmazie，2001，56，41)。

这些所述的化合物都不具有抑制IKKα或IKKβ的能力。

发明概述

因此，本发明的目的是提供抑制IKK的下式(I)的新化合物：

其中变量R₁及R₂如本文所定义。本发明进一步的目的是提供治疗IKK恶化的疾病及病理症状的方法，如但不限于自体免疫性疾病、炎性疾病及癌症。本发明还进一步的目的是提供制备上述新化合物的新方法。

发明详述

本发明的第一个方面包含治疗炎性或自体免疫性症状的方法，所述方法包括施用式(I)的一些新以及已知的分子：

其中：

R₁是

(a)苯基或选自呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、咪唑基及苯并呋喃基的杂芳基，任选被1至2个R₃基取代，

(b)选自1-哌啶基、1-哌嗪基、1-吡咯烷基及4-吗啉基的杂环基，任选被1至2个选自C_1-6烷基、-CO₂C_1-5烷基、苯基、苄基、-OH及-C(O)杂芳基的基团取代，其中杂芳基选自呋喃基、噻吩基、吡啶基及吡咯基，

(c)R₆(CH₂)_mO-，

(d)R₆OCH₂-

(e)R₆(CH₂)_mNH-

(f)R₆(CH₂)_p(CH＝CH)_m-，

(g)C_1-6烷基，任选部分或全部卤代及任选被1至2个R₉取代，

(h)C_1-8烷氧基，任选部分或全部卤代及任选被1至2个R₉取代，

(i)C_1-8烷基S(O)_n-，任选部分或全部卤代及任选被1至2个R₉取代，

(j)-N(R₄)(R₅)，或

(k)-C(O)NHR′，其中R′是R₆、吡啶基或-CH₃；

R₂是

(a)C_1-6烷基，任选部分或全部卤代及任选被1至2个R₁₀取代，

(b)C_1-6烷氧基，任选部分或全部卤代及任选被1至2个R₁₀取代，

(c)C_1-6烷胺基，任选部分或全部卤代及任选被1至2个R₁₀取代，

(d)C_1-6烷硫基，任选部分或全部卤代及任选被1至2个R₁₀取代，

(e)杂环基(CH₂)_m-，其中该杂环选自哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚基、吡咯烷基、1，4-二氮杂环庚基、氮杂环庚基、2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚基、氧氮杂环庚基及硫代吗啉代，并任选被1或3个R₇取代，

(f)杂环基CH₂O-，其中该杂环基选自1-哌啶基、1-哌嗪基、4-吗啉基及1-吡咯烷基，任选被C_1-6烷基取代，

(g)苯基，任选被1或3个R₃取代，

(h)-N(R₄)(R₅)，

(i)选自呋喃基、噻吩基、咪唑基、吡啶基及吡咯基的杂芳基，或

(j)-H；

R₃选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷基、卤素、-CN、-CO₂H、-CO₂C_1-6烷基、-S(O)_nC_1-6烷基、-NO₂、-OH、-CF₃、-N(R₄)(R₅)、-NHC(O)NHC_1-6烷基、-C(O)N(R₄)(R₅)及任选被卤素、C_1-6烷基、-CN或C_1-6烷氧基取代的苯基；R₄及R₅独立地选自H、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基、-SO₂C_1-6烷基、苯基、吡啶基、苄基、哌啶基、苯乙基及(CH₃)₃COC(O)-；

R₆是任选被1或2个选自卤素、C_1-6烷基、-CN、-CO₂C_1-6烷基、-C(O)NR₄R₅、-SO₂NH₂、-NO₂、-OH、-NH₂、-CF₃及C_1-6烷氧基的基团取代的苯基，或R₆是C_3-6环烷基、-CH₂OH、萘-2-基、萘-1-基或2-噻吩基；

R₇选自-OH、-CN、氧代、-CO₂C_1-6烷基、-CO₂H、-CON(R₄)(R₅)、-N(R₄)(R₅)、-CH₂N(R₄)(R₅)、-CH₂OH、C_1-6烷基、-CO₂苄基、羟基C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷N(R₄)(R₅)、-NHCO₂C_1-6烷基、-NHC(O)N(R₄)(R₅)、-S(O)_nC_1-6烷基、(CH₃)₃COC(O)-、苯基、吡啶基、H₂NCH(R₈)C(O)-、HO(CH₂)_mCH₂CH(NH₂)C(O)-、HOCH(R₆)CH₂NH-、R₆CH₂CH(OH)CH₂NH-、R₆OCH₂CH(OH)CH₂NH-及-C(O)杂环基，其中该杂环基选自哌啶基、哌嗪基、吗啉基及吡咯烷基，或R₇是2-羟乙基胺基、甲基脒基(methylcarbamimidoyl)、羟基亚胺基、肼羰基、胺磺酰基、甲烷磺酰基胺基、甲基磺酰基肼基、2-羟基丙基胺基、2，3-二羟基丙基胺基、2-羟基-1-甲基乙基胺基、氨基甲酰基甲基胺基、N′-苯基肼羰基或甲苯-4-磺酰基胺基；

R₈选自C_1-6烷基、-(CH₂)_1-4NH₂、苯基或苄基；

R₉选自氧代、-OH、-NR₄R₅、-CO₂H及C_1-6烷氧基；

R₁₀选自氧代、-OH、-N(R₄)(R₅)、C_1-6烷氧基、-C(O)C_1-6烷基、-C(O)N(R₄)(R₅)、R₆及选自呋喃基、噻吩基、咪唑基、吡啶基、吲哚基及吡咯基的杂芳基；

m是0或1；

n是0、1或2；及

p是0、1、2或3。

在本发明的第二个方面中，提供了新颖的式(I)化合物：

其中：

R₁是

(c)R₆(CH₂)_mO-，

(d)R₆OCH₂-

(e)R₆(CH₂)_mNH-

(f)R₆(CH₂)_p(CH＝CH)_m-，

(g)C_1-6烷基，任选部分或全部卤代及任选被1至2个R₉取代，

(j)-N(R₄)(R₅)，或

(k)-C(O)NHR′，其中R′是R₆、吡啶基或-CH₃；

R₂是

(e)杂环基(CH₂)_m-，其中该杂环选自哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂环庚基、吡咯烷基、1，4-二氮杂环庚基、氮杂环庚基、2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚基、氧氮杂环庚基及硫代吗啉代，并任选被1至3个R₇取代，

(g)苯基，任选被1至3个R₃取代，

(h)-N(R₄)(R₅)，

(j)-H；

R₃选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷基、卤素、-CN、-CO₂H、-CO₂C_1-6烷基、-S(O)_nC_1-6烷基、-NO₂、-OH、-CF₃、-N(R₄)(R₅)、-NHC(O)NHC_1-6烷基、-C(O)N(R₄)(R₅)及任选被卤素、C_1-6烷基、-CN或C_1-6烷氧基取代的苯基；

R₄及R₅独立地选自H、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基、-SO₂C_1-6烷基、苯基、吡啶基、苄基、哌啶基、苯基乙基及(CH₃)3COC(O)-；

R₇选自-OH、-CN、氧代、-CO₂C_1-6烷基、-CO₂H、-CON(R₄)(R₅)、-N(R₄)(R₅)、-CH₂N(R₄)(R₅)、-CH₂OH、C_1-6烷基、-CO₂苄基、羟基C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基N(R₄)(R₅)、-NHCO₂C_1-6烷基、-NHC(O)N(R₄)(R₅)、-S(O)_nC_1-6烷基、(CH₃)₃COC(O)-、苯基、吡啶基、H₂NCH(R₈)C(O)-、HO(CH₂)_mCH₂CH(NH₂)C(O)-、HOCH(R₆)CH₂NH-、R₆CH₂CH(OH)CH₂NH-、R₆OCH₂CH(OH)CH₂NH-及-C(O)杂环基，其中该杂环基选自哌啶基、哌嗪基、吗啉基及吡咯烷基，或R₇是2-羟乙基胺基、甲基脒基、羟基亚胺基、肼羰基、胺磺酰基、甲烷磺酰基胺基、甲基磺酰基肼基、2-羟丙基胺基、2，3-二羟丙基胺基、2-羟基-1-甲基乙基胺基、氨基甲酰基甲基胺基、N′-苯基肼羰基或甲苯-4-磺酰基胺基；

R₈是选C_1-6烷基、-(CH₂)_1-4NH₂、苯基或苄基；

R₉选自氧代、-OH、-NR₄R₅、-CO₂H及C_1-6烷氧基；

m是0或1；

n是0、1或2；

p是0、1、2或3；

及其可药用盐类、酯类、互变体、单独的异构物及异构物的混合物。

在另一个实施方案中，本发明提供如以上所述的新颖式(I)化合物及其中：

R₁是

(b)R₆(CH₂)_mO-，

(c)R₆OCH₂-

(d)R₆(CH₂)_mNH-

(e)R₆(CH₂)_p(CH＝CH)_m-，

(f)C_1-6烷基，任选部分或全部卤代及任选被1至2个R₉取代，

(g)C_1-8烷氧基，任选部分或全部卤代及任选被1至2个R₉取代，

(h)C_1-8烷硫基，

(i)-N(R₄)(R₅)，或

(j)-C(O)NHR′，其中R′是R₆、吡啶基或-CH₃；

R₂是

(a)C_1-6烷基，任选被R₁₀取代，

(b)C_1-6烷氧基，任选被R₁₀取代，

(c)C_1-6烷胺基，任选被R₁₀取代，

(d)选自1-哌啶基、1-哌嗪基、4-吗啉基、1-氮杂环庚基、1-吡咯烷基、1，4-二氮杂环庚-1-基、1-氮杂环庚基、2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、氧氮杂环庚-4-基及4-硫代吗啉代的杂环基，并任选被1至3个R₇取代，

(e)杂环基CH₂O-，其中该杂环基选自1-哌啶基、1-哌嗪基、4-吗啉基及1-吡咯烷基，任选被C_1-6烷基取代，或

(f)-N(R₄)(R₅)；

R₄及R₅独立地选自H、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基、吡啶基、苄基、哌啶基及苯基乙基；

R₆是任选被1或2个选自Cl、F、C_1-6烷基、-CN、-CO₂C_1-6烷基、-C(O)NR₄R₅、-SO₂NH₂、-NO₂、-OH、-NH₂、-CF₃及C_1-6烷氧基的基团取代的苯基，或R₆是C_3-6环烷基、-CH₂OH、萘-2-基、萘-1-基或2-噻吩基；

R₇选自-OH、-CN、氧代、-CO₂C_1-6烷基、-C(O)N(R₄)(R₅)、-N(R₄)(R₅)、-CH₂N(R₄)(R₅)、-CH₂OH、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基N(R₄)(R₅)、-NHC(O)N(R₄)(R₅)、-S(O)_nC_1-6烷基、H₂NCH(R₈)C(O)-、HO(CH₂)_mCH₂CH(NH₂)C(O)-、HOCH(R₆)CH₂NH-及-C(O)杂环基，其中该杂环基选自哌啶基、哌嗪基、吗啉基及吡咯烷基，或R₇是2-羟乙基胺基、甲基脒基、羟基亚胺基、肼羰基、胺磺酰基、甲烷磺酰基胺基、甲基磺酰基肼基、2-羟丙基胺基、2，3-二羟丙基胺基、2-羟基-1-甲基乙基胺基、氨基甲酰基甲基胺基、N′-苯基肼羰基或甲苯-4-磺酰基胺基；

R₈选自C_1-6烷基、-(CH₂)_1-4NH₂、苯基或苄基；

R₉是-OH；

R₁₀选自-OH、-N(R₄)(R₅)、C_1-6烷氧基及选自呋喃基、噻吩基及吡啶基的杂芳基；

m是0或1；

n是0、1或2；

p是0、1、2或3；

在本发明还有的另一个实施方案中，提供如以上所述的新颖式(I)化合物及其中：

R₁是

(a)苯基或选自呋喃基、噻吩基及吡啶基的杂芳基，任选被1至2个R₃基取代，

(b)R₆(CH₂)_mO-，

(c)R₆OCH₂-

(d)R₆(CH₂)_mNH-

(e)R₆(CH₂)_p(CH＝CH)_m-，

(f)C_1-6烷基，

(g)C_1-6烷基OH，

(h)-CF₃，

(i)C_1-8烷氧基，

(j)-OC_1-6烷基OH，

(k)C_1-8烷硫基，

(l)-N(R₄)(R₅)，或

(m)-C(O)NHR′，其中R′是R₆、吡啶基或-CH₃；

R₂是杂环基，其中该杂环选自1-哌啶基、1-哌嗪基、4-吗啉基、1-氮杂环庚基、1-吡咯烷基、1，4-二氮杂环庚-1-基、1-氮杂环庚基、2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、氧氮杂环庚-4-基及4-硫代吗啉代，任选被1至3个R₇取代，

R₃选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷基、卤素、-CH、-CO₂H、-CO₂C_1-6烷基、-S(O)_nC_1-6烷基、-NO₂、-OH、-CF₃、-N(R₄)(R₅)、-NHC(O)NHC_1-6烷基、-C(O)N(R₄)(R₅)及任选被卤素、C_1-6烷基、-CN或C_1-6烷氧基取代的苯基；

R₇选自-OH、-CN、氧代、-CO₂C_1-6烷基、-CO₂H、-C(O)N(R₄)(R₅)、-N(R₄)(R₅)、-CH₂N(R₄)(R₅)、-CH₂OH、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基N(R₄)(R₅)、-NHC(O)N(R₄)(R₅)、-S(O)_nC_1-6烷基、苯基、吡啶基、H₂NCH(R₈)C(O)-、HO(CH₂)_mCH₂CH(NH₂)C(O)-、HOCH(R₆)CH₂NH-、R₆CH₂CH(OH)CH₂NH-、R₆OCH₂CH(OH)CH₂NH-及-C(O)杂环基，其中该杂环基选自哌啶基、哌嗪基、吗啉基及吡咯烷基，或R₇是2-羟乙基胺基、甲基脒基、羟基亚胺基、肼羰基、胺磺酰基、甲烷磺酰基胺基、甲基磺酰基肼基、2-羟丙基胺基、2，3-二羟丙基胺基、2-羟基-1-甲基乙基胺基、氨基甲酰基甲基胺基、N′-苯基肼羰基或甲苯-4-磺酰基胺基；

R₈选自C_1-6烷基、-(CH₂)_1-4NH₂、苯基或苄基；

m是0或1；

n是0、1或2；

p是0、1、2或3；

R₁是

(a)苯基，任选被1至2个R₃基取代，

(b)R₆CH＝CH-，

(c)C_1-6烷基，

(d)-C_2-3烷基OH，

(e)-CF₃；

(f)C_1-6烷氧基，

(g)-OC_2-3烷基OH，

(h)-C_1-6烷硫基，或

(i)-C(O)NHR′，其中R′是R₆、吡啶基或-CH₃；

R₂是杂环基，其中该杂环选自1-哌啶基、1-哌嗪基、1-氮杂环庚基、1，4-二氮杂环庚-1-基及1-氮杂环庚基，并任选被1至3个R₇取代，

R₃选自-CH₃、-OCH₃、F、Cl、-CO₂CH₃、-SO₂CH₃及-NO₂；

R₄及R₅独立地选自H、-CH₃及苄基；

R₆是任选被1或2个选自Cl、F、C_1-6烷基、-CN、-CO₂C_1-6烷基、C(O)NR₄R₅、-SONH₂、-NO₂、-OH、-NH₂、-CF₃及C_1-6烷氧基的基团取代的苯基，或R₆是C_3-6环烷基、-CH₂OH、萘-2-基、萘-1-基或2-噻吩基；

R₇选自-OH、-CN、氧代、-CO₂C_1-6烷基、-C(O)N(R₄)(R₅)、-N(R₄)(R₅)、-CH₂N(R₄)(R₅)、CH₂OH、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基N(R₄)(R₅)、-NHC(O)N(R₄)(R₅)、-S(O)_nC_1-6烷基、H₂NCH(R₈)C(O)-、HO(CH₂)_mCH₂CH(NH₂)C(O)-、HOCH(R₆)CH₂NH-、R₆CH₂CH(OH)CH₂NH-、R₆OCH₂CH(OH)CH₂NH-及-C(O)杂环基，其中该杂环基选自哌啶基、哌嗪基、吗啉基及吡咯烷基，或R₇是2-羟乙基胺基、甲基脒基、羟基亚胺基、肼羰基、胺磺酰基、甲烷磺酰基胺基、甲基磺酰基肼基、2-羟丙基胺基、2，3-二羟丙基胺基、2-羟基-1-甲基乙基胺基、氨基甲酰基甲基胺基、N′-苯基肼羰基或甲苯-4-磺酰基胺基；

R₈选自C_1-6烷基、-(CH₂)_1-4NH₂、苯基或苄基；

在本发明尚有的实施方案中，提供如以上所述的新颖式(I)化合物及其中：

R₁是

(a)-CH₂CH₂CH₃，

(b)-OCH₂CH₃，

(c)-SCH₃，

(d)-C(O)NHR′，其中R′是3-吡啶基或在4-位置被-OH、-C(O)NH₂或-SO₂NH₂取代的苯基；

R₂是杂环基，其中该杂环选自1-哌啶基及1-哌嗪基，并任选被1至3个R₇取代，

R₄及R₅独立地选自H、-CH₃及苄基；

R₆是任选被1或2个选自Cl、F、-CH₃、-CN、-CO₂CH₃、-C(O)NR₄R₅、-NO₂、-OH、-NH₂、-CF₃及-CH₃的基团取代的苯基，或R₆是萘-2-基、萘-1-基或2-噻吩基；

R₇选自-OH、-CN、氧代、-C(O)NH₂、-NH₂、-CH₂NH₂、-CH₃、-NHC(O)NH₂、H₂NCH(R₈)C(O)、HOCH(R₆)CH₂NH-、R₆CH₂CH(OH)CH₂NH-及R₆OCH₂CH(OH)CH₂NH-，或R₇是2-羟乙基胺基、甲基脒基、甲烷磺酰基胺基、甲基磺酰基肼基、2-羟丙基胺基、2，3-二羟丙基胺基、氨基甲酰基甲基胺基或N′-苯基肼羰基；

R₈是-(CH₂)_1-4NH₂；

条件是在上述每一个新颖化合物的实施方案中，如果R₁是苯基或杂芳基、C_1-6烷基、-CF₃、-C(O)NR₄R₅或杂环基时，则R₂不是C_1-6烷基、苯基、杂芳基、-CF₃或H。在关于以式(I)化合物治疗炎性或自体免疫性症状的方法的本发明的第一个方面中，该条件不适用。

在本发明进一步的实施方案中，提供了以下的化合物：

以及其可药用盐、酯、互变体、单个的异构体以及异构体的混合物。

对于在本申请中公开的所有的化合物，如果化合物的命名与结构相矛盾，应该理解为化合物由结构定义为准。

在另一个本发明的实施方案中，提供了下述化合物：

3-氨基-6-(4-氧代-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-4-氰基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-(4-甲烷磺酰基-苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-甲硫基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-((E)-苯乙烯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-(4-硝基-苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[1，4]二氮杂环庚-1-基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2，4-二氨基-丁酰基)-哌嗪-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-[(E)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙烯基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(2-氨基甲基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-哌嗪-1-基-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-((E)-2-对-甲苯基-乙烯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2，3-二羟基-丙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-((E)-2-间-甲苯基-乙烯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-甲烷磺酰基氨基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

4-[3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-2-氨基甲酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-基]-苯甲酸甲基酯；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-苯基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-哌啶-4-基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-(2，5-二氟-苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(N′-苯基-肼基羰基)-哌嗪-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-((S)-2-羟基-2-苯基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-((R)-2-羟基-2-苯基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(4-硝基-苯基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-乙氧基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-((S)-2-羟基-丙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(3-羟基-苯基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(4-羟基-苯基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-氮杂环庚-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-3-羟基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-(2，4-二氟-苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-(4-氰基-3-氟-苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-异丙氧基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[(1H-吲哚-3-基甲基)-氨基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-(4-氨基-苯基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-(4-氯-苯基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-4-(4-甲烷磺酰基-苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

4-{2-[1-(3-氨基-2-氨基甲酰基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-基)-哌啶-4-基氨基]-1-羟基-乙基}-苯甲酸甲基酯；

3-氨基-4-(4-氰基-3-氟-苯基)-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-4-乙氧基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-4-丙基-6-(4-脲基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-((S)-3，4-二羟基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-4-甲硫基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-4-(3-羟基-丙基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-(4-氨基甲酰基-苯基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-吡啶-3-基酰胺；

3-氨基-6-((S)-3-羟基-4-甲烷磺酰基氨基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-萘-2-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(N′-甲基磺酰基-肼基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-2-萘-1-基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-{2-[1-(3-氨基-2-氨基甲酰基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-基)-哌啶-4-基氨基]-1-羟基-乙基}-苯甲酸甲基酯；

3-氨基-6-(4-氨基-4-甲基-哌啶-1-基)-4-乙氧基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-2-(4-甲基氨基甲酰基-苯基)-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-(4-二甲基氨基甲酰基-苯基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-(4-苄基氨基甲酰基-苯基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-(3-氨基甲酰基-苯基)-2-羟基-乙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-[(4-羟基-苯基)-酰胺]；

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-[(4-氨基甲酰基-苯基)-酰胺]；

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-[(4-胺磺酰基-苯基)-酰胺]；

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-吡啶-4-基酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-3-苯氧基-丙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-羟基-3-苯基-丙基氨基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[2-羟基-3-(4-甲氧基-苯氧基)-丙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-{4-[3-(4-氨基甲酰基-苯氧基)-2-羟基-丙基氨基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-3，3-二甲基-环己基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

本发明包括式(I)化合物的可药用衍生物。“可药用衍生物”表示本发明化合物的任何可药用酸、盐或酯、或在对病人给药后能够(直接或间接)提供本发明化合物的任何其他化合物、其药理活性代谢物或药理活性残留物。

本发明的化合物可药用盐类包括那些衍生自可药用无机酸及有机酸及碱的盐类。适合的酸实例包括氢氯酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、富马酸、马来酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水杨酸、琥珀酸、甲苯-对-磺酸、酒石酸、醋酸、柠檬酸、甲烷磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸及苯磺酸。其他的酸类(如草酸)，尽管其本身不是可药用的酸，可用于制备作为获得本发明的化合物及其可药用酸加成盐的中间物的盐类。衍生自适当的碱的盐类包括碱金属(例如，钠)、碱土金属(例如，镁)、铵及N-(C₁-C₄)烷基)₄ ⁺盐类。

此外，本发明的化合物包括式(I)化合物的前体药物。前体药物包括那些在一经简单的转变时会，以产生本发明的化合物的化合物。简单的化学转变作用包括以酶、代谢及其它方式发生的水解作用、氧化作用及还原作用。尤其是在将本发明的前体药物对病人给药的时候，前体药物可以转变成式(I)化合物，因此提供预期的药理效应。

任何包括一或多个不对称碳原子的本发明化合物可以外消旋体及外消旋混合物、单一对映异构物、非对映异构物混合物及单独的非对映异构物出现。本发明特别包括这些化合物所有的这些异构物形式。每一个立体形式的碳可以具有R或S构型或构型的组合。

本发明的部分化合物可以一种上述互变体形式存在。本发明包括所有的这些互变体。

本发明的化合物只是涵盖那些在本领域普通技术人员公知的“化学稳定”的化合物。例如，可能具有“悬挂价(dangling valency)”或“碳阴离子”的化合物不是以本发明涵盖的化合物。

本文使用以下的缩写：

DMF是二甲基甲酰胺；

DMSO是二甲基亚砜；

EtOAc是醋酸乙酯；

EtOH是乙醇；

HPLC是高性能液相层析法；

MeOH是甲醇；

THF是四氢呋喃；

TLC是薄层层析法。

这里没有明确定义的术语应该具有本领域普通技术人员依据说明书以及上下文中得到的含义。例如，“C_1-6烷氧基”是具有末端氧的C_1-6烷基，如甲氧基、乙氧基、丙氧基、戊氧基及己氧基。所有的烷基、烯基或炔基应该理解为支链或非支链，除非有其它另外的说明。其它更具体的定义如下：

以“烷基”术语表示含有1至10个碳原子的饱和脂肪族基或含有2至12个碳原子的单-或多不饱和脂肪族烃基，除非有其它另外的陈述。单-或多不饱和脂肪族烃基分别包括至少一个双键或叁键。以“烷基”表示支链及非支链烷基两种。“烷基”实例包括含有1至8个碳原子的直链烷基及含有3至10个碳原子的支链烷基。其它实例包括含有1至6个碳原子的直链烷基及含有3至6个碳原子的支链烷基的低级烷基。应了解的是使用“烷基(alk)”或“烷基(alkyl)”字首的任何组合术语表示根据上述“烷基”定义的类似含义。例如，如“烷氧基”及“烷硫基”之类的术语表示经由氧或硫原子连接至第二个基团的烷基。“烷酰基”表示连接至羰基(C＝O)的烷基。应了解的是可将在本文所述的每一个烷基或烷基类似基团任选部分或完全卤代。

以“环烷基”术语表示如以上定义的烷基的环状类似基团。环烷基实例是含有3至8个碳原子的饱和或不饱和的非芳族环烷基，并且其它的实例包括具有3至6个碳原子的环烷基。

“杂环烷基”术语表示稳定的4-8员(优选5或6员)单环或8-11员双环系杂环基，其可以是或饱和或不饱和，并且为非芳香的。每一个杂环是由碳原子及从1至4个选自氮、氧及硫的杂原子所组成的。杂环可以环的任何原子进行连接，产生稳定的结构。“杂环烷基”实例包括如吡咯啉基、吡咯烷基、吡唑啉基、吡唑烷基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、哌嗪基、吲哚啉基、氮杂环丁基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、四氢呋喃基、六氢嘧啶基、六氢哒嗪基、二氢噁唑基、1，2-噻嗪基(thiazinanyl)-1，1-二氧化物、1，2，6-噻二嗪基-1，1-二氧化物、异噻唑烷基-1，1-二氧化物及咪唑烷基-2，4-二酮之类的基团。

“卤素”术语表示溴、氯、氟或碘。

“芳基”术语代表6-12员芳族碳环，其可以是单环或可以是稠合在一起或以共键连结的多环。“芳基”术语包括例如苯基及萘基；其它含有“芳基”的术语将具有与芳基组份相同的定义，这些部分的实例包括：芳烷基、芳氧基或芳硫基。

以“杂芳基”术语表示稳定的5-8员(但优选5或6员)单环或8-11员双环芳族杂环基。每一个杂环由碳原子及从1至4个选自氮、氧及硫的杂原子组成。杂环可以环的任何原子连接，产生稳定的结构。“杂芳基”实施例包括如呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、四唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、中氮茚基、吲哚基、异吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、嘌呤基、喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、二氮杂萘基、喋啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基及吩噁嗪基之类的基团。

“任选的”或“任选地”术语代表后续说明的事件或环境可能会或可能不会发生，并以该说明包括发生该事件或环境的情况或其不会发生的情况。例如，以“任选取代的芳基”代表取代的芳基或未取代的芳基，并且该说明同时包括取代的芳基及没有取代的芳基。

以“取代的”术语代表以选自指定的取代基代替在无论是否指定的基或部分上的任何一或多个氢，条件是不超过原子的正常价键并且取代得到稳定的化合物。如果与取代基相连的键显示穿过连接环中两个原子的键时，则这种取代基可与在环上的任何原子键结。当列出的取代基未显示该取代基与化合物的其余部分键结的原子的时候，则该取代基可经由该取代基中任何的原子键结。例如，当取代基是哌嗪基、哌啶基或四唑基时，除非有其它的说明，则这些哌嗪基、哌啶基或四唑基可经由在这些哌嗪基、哌啶基或四唑基中的任何原子键结。通常当任何取代基或基团在任何成分或化合物中出现多于一次的时候，则其在每一次出现时候的定义与其他每次出现的定义无关。因此，例如，如果将基团被0至2个R取代时，则该基团任选被多达2个R基取代，并且每一个情况的R独立地选自可能的R定义。然而只有当这些取代基及/或变量的组合得到稳定的化合物时，才是允许的。

在本文并在整个说明书中所使用的“氮”和“硫”包括氮和硫的任何氧化形式及任何碱性氮的季铵化形式。

治疗应用法

根据本发明，提供了使用式(I)化合物的新颖方法。本发明的化合物可有效抑制IKKβ及/或IKKα活性。这些化合物特别可用于阻断以IKKβ调节的NF-κB活化作用及B细胞活性或细胞周期调节基因周期蛋白D1的IKKα活性作用而恶化的疾病过程。在阻断NF-κB活化作用时，本发明的化合物可有效阻断基因编码炎性细胞因子(包括IL-1、IL-2、IL-6、IL-8、TNFα)、趋化因子(包括IL-8及RANTES)与其它促炎分子(包括COX-2)及细胞粘附分子(如ICAM-1、VCAM-1及E-选择素)的转录作用。这些调节因子在炎性、自体免疫性及心血管异常及癌症的致病学中扮演关键性角色。预防这些调节因子的产生是治疗这些异常的预期手段。因此，本发明提供了使用本发明的化合物治疗这些症状的方法。这些炎性及自体免疫性症状包括(但不限于此)骨关节炎、再灌注损伤、哮喘、慢性阻塞性肺部疾病(COPD)、多发性硬化症、居杨-巴贺(Guillain-Barre)综合征、克隆氏症、溃疡性结肠炎、牛皮癣、移植物抗宿主疾病、全身性红斑性狼疮、类风湿性关节炎、阿耳茨海默(氏)病、中毒性休克综合征、胰岛素依赖性糖尿病、急性及慢性疼痛、热伤害、成人呼吸性窘迫综合征(ARDS)、继发于创伤的多器官损伤、急性肾小球肾炎、具有急性炎症成分的皮肤炎、急性化脓性脑膜炎或其它中枢神经系统异常、格雷氏(Grave′s)疾病、重症肌无力、硬皮症及异位性皮炎。这些心血管异常包括(但不限于此)动脉粥样硬化症、心肌梗塞及中风。这些癌症包括(但不限于此)淋巴-、骨髓-及上皮-衍生的恶性肿瘤，包括白血病、淋巴瘤和乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌及胰腺癌。也可以使用本发明的化合物治疗与在以上所列或在并现有技术中所讨论的那些无关的NF-κB的IKK活化作用关联的其他异常。例如，以本发明的化合物也可用于以增强化疗剂疗效的方式治疗癌症。因此，本发明也提供治疗炎性及自体免疫性疾病和其它包括癌症的疾病的方法，包含对需要治疗的患者使用治疗有效量的本发明的化合物。

关于治疗用途，可将本发明的化合物以任何常规剂型经任何常规方式给药。给药途径包括(但不限于此)经静脉内、肌肉内、皮下、滑膜内、灌注、舌下、皮肤、口服、局部或吸入。较佳的给药模式是经口服及静脉内。本领域的普通技术人员会明白适用于每一种上述给药路径的含有本发明化合物的组合物。本发明也提供药物组合物，其包括有效治疗剂量的根据本发明的化合物。这些药物组合物将包括如下进一步讨论的可药用载体及佐剂。

可将本发明的化合物单独或与佐剂的结合给药，所述佐剂增强抑制剂的稳定性、加速含佐剂的药物组合物在特定的实施方案中的给药，提供增加的溶解或分散、增加抑制活性、包括其他的活性成分时提供辅助疗法等。有利地，这些组合治疗使用剂量较低的常规治疗剂，因此避免在使用那些试剂作为单一治疗剂时可能的毒性及副效应。可将本发明的化合物与常规治疗剂或其它佐剂以物理方式结合成单一药物组合物。有利地，可将化合物以单一剂型一起给药。在一些实施方案中，含有这些化合物的组合的药物组合物包括至少约15％(重量/重量)的本发明化合物或其组合，但是更优选至少约20％。或者，可将化合物分开(或连续或同时)给药。分开给药可有更大的给药灵活性。

如以上所述，本发明的化合物剂型包括那些本领域的普通技术人员已知的可药用载体及佐剂。这些载体及佐剂包括例如离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白、缓冲物质、水、盐类或电解质以及纤维素类的物质。优选的剂型包括药片、胶囊、薄膜衣片、液体、溶液、悬浮液、乳液、锭剂、糖浆、可重构散剂、颗粒、栓剂及皮肤贴片。制备这些剂型的方法是已知的(参考例如H.C.Ansel及N.G.Popovish的第5版Pharmaceutical Dosage Forms and Drugs Delivery Systems，Lea andFebiger(1990))。剂量水平以及需求是本技术领域中公知的，并且可由那些本领域的普通技术人员根据适合特殊病患的已有方法及技术进行选择。在一些实施方案中，对70公斤病患，剂量值范围为约10-1000毫克/剂量。虽然以每天给药一次可能足够了，但是可以每天提供多达5次的给药。关于口服给药，可能需要多达2000毫克/天的剂量。本领域的普通技术人员将意识到依据具体的因素可能需要较少或较多的给药量。例如，特定的剂量及治疗方案将依据患者的一般健康状态、患者异常或异常倾向的严重性或进程及治疗医师的判断等因素而定。

合成方法

本发明另外提供了制备式(I)化合物的方法。本发明的化合物可由以下所提出的通用方法和实施例及那些本领域普通技术人员公知的方法制备。最适宜的反应条件及方法可依据所使用的特定反应物而改变。本领域的普通技术人员可轻易选择溶剂、温度、压力及其它反应条件，除非有其它另外的说明。在合成实施例部分中提供特定的步骤。可以常规方法监控反应进度，如薄层层析法(TLC)。可以本技术领域已知的方法纯化中间物及产物，包括以柱层析分离法、HPLC或重结晶。

如流程1所示，可以带有取代基R₁及R₂的1，3-二酮(II)开始制备式(I)化合物。将II与氰基硫代乙酰胺(III)在适合的溶剂(如乙醇)中并在适合的碱(如三乙胺)存在下的反应提供取代的2-巯基烟碱腈IV。IV与氯-或溴乙酰胺(V)在适合的溶剂中(如DMF、THF或乙醇)并在适合的碱存在下(如碳酸钠、氢氧化钠或乙醇钠)的反应提供预期的式(I)化合物。可以本技术领域已知的方法进一步修饰取代基R₁及R₂，以产生另外的本发明化合物。

流程I

例如，如流程II所示，以二酮基酯VI开始并使用以上列出的步骤获得酯I(R₁＝CO₂R′，其中R′是烷基，如甲基或乙基)。通过使用本技术领域已知的方法，可以将R₁修饰为其它预期的R₁。例如，水解提供羧酸I(R₁＝CO₂H)，并将羧酸与胺R″NH₂在标准的偶合条件下的反应提供酰胺I(R₁＝C(O)NHR″)。或者利用适合的还原剂(如氢化锂铝)还原酯，以提供醇I(R₁＝CH₂OH)。将醇与酚ArOH在Mitsunobu条件下反应提供芳基醚I(R₁＝CH₂OAr)。这些及其它修饰将在合成实施例部分中描述。

流程II

在以上制备VII的步骤的改进方法中，可以2-氯或2-溴-3-氰基异烟碱酸酯开始(VIII，流程III)。接着可将2-卤基利用本技术领域熟知的方法转化成2-巯基，例如，与硫脲在适合的溶剂中(如乙醇)反应提供酯中间物VII。

流程III

流程IV例证了可以获得在R₁上具有胺的式(I)化合物的步骤。将2-溴-4-羟基烟碱腈(IX)与4-甲氧基苄基氯在适合的碱存在下(如氢化钠)并在适合的溶剂中(如DMF)处理，提供4-甲氧基苄基醚X。接着可将其转化成2-巯基化合物，如上述流程III所述。接着可将所得巯基化合物与卤代乙酰胺反应，如流程I及II所述，以提供I(R₁＝4-甲氧基苄基醚)。或者可将X与巯基乙酰胺在适合的碱存在下(如氢化钠)并在适合的溶剂中(如DMF)反应，直接提供I(R₁＝4-甲氧基苄基醚)。将醚以三氟醋酸处理，以提供盐XI。将XI与N-苯基三氟甲烷磺酰亚胺在适合的碱存在下(如二异丙基乙胺)并在适合的溶剂中(如二噁烷)反应提供三氟甲烷磺酸酯XII。将XII与胺R′R″NH在适合的溶剂中(如二噁烷)反应提供I(R₁＝NR′R″)。对反应性较低的胺(如芳基胺)可任选将反应加热。

流程IV

可以使用以流程V例示的步骤在R₁引入各种芳基或芳烯基并将各种亲核基上胺引入到在R₂上。将Meldrum′s酸(XIII)以二硫化碳、甲基碘及适合的碱(如三乙胺)在适合的溶剂中(如DMF)处理，以提供双甲硫基亚甲基二酮XIV。用2-氰基硫代乙酰胺在适合的碱性条件下(如乙醇钠的乙醇溶液)处理XIV，以提供腈(XVa)。将XVa与2-氯或2-溴乙酰胺在适合的碱存在下(如氢化钠)并在适合的溶剂中(如DMF)的反应提供XVIa。将XVI与N-苯基三氟甲烷磺酰亚胺在适合的碱存在下(如氢化钠)并在适合的溶剂中(如DMF)的反应可以实现三氟甲磺酸酯中间物XVIIa的环化。将XVIIa与预期的芳基硼酸或芳烯基硼酸在适合的钯催化剂(优选三(二苄叉丙酮)二钯(0)-氯仿加成物)、膦配体(优选三-2-呋喃基膦)及铜盐(优选噻吩-2-羧酸铜(I))存在下并在适合的溶剂中(如THF)的反应提供预期的芳基或芳烯基中间物XVIII。将XVIII与预期的亲核基(如所示的胺R′R″NH)在适合的溶剂中(如二噁烷)的反应提供预期的式(I)化合物。在适合的碱存在下可以使用醇(R′OH)或硫醇(R′SH)代替胺，以获得分别在R₂上的醚或硫醚。

流程V

流程VI例示了在R₁基上提供烷基的以上步骤的改进。将烷醇酸酯(如所示的甲基酯)与2-氰基硫代乙酰胺在适合的碱存在下(如吗啉)并在适合的溶剂中(如乙醇)反应，以提供XVb。如上述流程V所述，按照将XVa转化为XVIa的步骤处理XVb，以提供XVIb。将XVIb与适合的磺酸化试剂(如N-苯基三氟甲烷磺酰亚胺)在适合的碱存在下(如二异丙基乙胺)并在适合的溶剂中(如二噁烷)的反应提供磺酰酯XVIIb(在该情况中R′＝CF₃)。将XVIIb与预期的亲核基(如胺)在适合的碱存在下(如三乙胺)及任选同时在约50℃至100℃加热下反应得到以亲核基置换磺酰酯的作用。加入另一种适合的碱(如碳酸钠水溶液)及接着持续加热可以实现原位环化，以提供预期的式(I)化合物。

流程VI

流程VII例示了另一个在R₁上提供芳基或芳烯基并在R₂上提供各种基(如芳基及烷基)的步骤。如流程VII所例示，将带有R₂的酰基氯与偏二氯乙烯在路易士酸的存在下(如AlCl₃)并在适合的溶剂中(如二氯甲烷)反应，接着以适合的碱(如三乙胺)处理，以提供XIX，以XIX与甲硫醇钠反应提供XX。以2-氰基硫代乙酰胺在适合的碱存在下(如异丙醇钠)处理XX，以提供XXI。将XXI与2-溴或2-氯乙酰胺的反应提供XXII，如流程I所述。以芳基硼酸或芳烯基硼酸处理XXII，以提供预期的式(I)化合物，如流程V所述。

流程VII

流程VIII例示了可用于制备式(I)化合物的另外的步骤。将带有R₁的醛与带有R₂的三苯基膦叉(XXIII)在适合的酸存在下(如醋酸)并在适合的溶剂中(如甲苯)反应，以提供α，β-不饱和酮XXIV。以2-氰基硫代乙酰胺在适合的碱存在下(如叔丁醇钠)处理XXIV，以提供IV。将其如流程I所述的方法转化成I。

流程VIII

合成实施例

实施例1：

3-氨基-6-哌嗪-1-基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将吗啉(10.5克，0.120摩尔)在室温下逐滴加入2-己炔酸甲酯(15克，0.119摩尔)在乙醇(40毫升)中的溶液中。接着将溶液在氮气下45℃温热4小时。接着以小份量加入固体NCCH₂C(S)NH₂(12.1克，0.120摩尔)。在45℃下搅拌30分钟之后，将混合物在室温下搅拌过夜。过滤收集黄色沉淀物，得到10.9克的预期的巯基吡啶酮与1摩尔吗啉的复合物。

将在无水DMF(50毫升)中上述巯基吡啶酮(5.25克，18.68毫摩尔)、2-溴代乙酰胺(2.58克，18.68毫摩尔)与K₂CO₃(2.58克，18.68毫摩尔)的混合物在Ar下在70℃加热4小时。接着将混合物冷却至0℃并用6当量HCl(～3毫升)酸化成pH～2。将混合物在0℃下维持2小时，并过滤收集所得白色沉淀物。将产物以冷水洗涤，得到5.5克预期的巯基乙酰胺。

将N-苯基三氟甲烷-磺酰亚胺(5.91克，16.54毫摩尔)以小份量加入上述巯基乙酰胺(4.15克，16.54毫摩尔)与iPr₂NEt(4.6毫升，32.82毫摩尔)在无水二噁烷(40毫升)中的混合物中。将混合物在氮气下搅拌16小时，浓缩并用50-80％乙酸乙酯-己烷(梯度)洗脱的硅胶柱层析分离法纯化，得到4.7克预期的2-(3-氰基-4-正丙基-6-三氟甲烷磺酰基吡啶-2-基巯基)乙酰胺。

将542.4毫克(2.86毫摩尔)1-BOC-哌嗪及379.8微升(2.72毫摩尔)三乙胺加入600毫克(1.57毫摩尔)上述乙酰胺的溶液中。将所得混合物在100℃下搅拌2小时。接着加入2M碳酸钠溶液(4毫升)。在100℃下持续搅拌过夜。接着将反应混合物以乙酸乙酯稀释，以硫酸钠干燥并浓缩。将粗产物经层析分离(在以10％甲醇/二氯甲烷洗脱的硅胶上的制备性TLC，rf＝0.75)，得到408.4毫克(62.2％)预期的N-Boc-哌嗪中间物。

将的6毫升的6M HCl的甲醇溶液加入408.4毫克(0.97毫摩尔)上述N-Boc中间物在9毫升乙酸乙酯中的悬浮液中。将所得混合物在室温下搅拌4小时。接着真空除去溶剂，将残余物悬浮在二氯甲烷中，搅拌10分钟及过滤。将产物以二氯甲烷洗涤两次。将固体真空干燥，得到295毫克标题化合物。

实施例2：

3-氨基-6-二甲基胺基-4-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将2-(3-氰基-4-甲基-6-三氟甲烷磺酰基吡啶-2-基巯基)乙酰胺(30.0毫克，0.08毫摩尔)(如实施例1中制备正丙基类似物的方法，但是使用2-丁炔酸甲酯)与二甲胺(170.0毫升，0.34毫摩尔)在1，4-二噁烷(0.5毫升)中在压力管中混合，并在80℃下加热1小时。加入2.0M碳酸钠水溶液(520微升，1.04毫摩尔)，并将反应在100℃加热6小时，接着冷却至室温过夜。将混合物倒入饱和氯化铵水溶液中并用乙酸乙酯萃取。将有机萃取物以食盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并真空浓缩，得到23.0毫克粗产物。将其经由自动化快速二氧化硅层析分离法(4克硅胶柱，30-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到9.0毫克(0.02毫摩尔，45％产量)标题化合物。

也使用以实施例2所述的步骤及适当的胺制得以下的化合物：

3-氨基-4-甲基-6-吗啉-4-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-6-(2-羟基-乙基胺基)-4-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-甲基-6-哌啶-1-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-4-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

实施例3：

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将400毫克(1.04毫摩尔)吡啶-三氟甲磺酸盐中间物(参考实施例1)溶解在1，4-二噁烷(10毫升)中，并放入配备磁搅拌棒并在Ar气下的无水压力管中。加入4-N-Boc-氨基哌啶(640毫克，3.13毫摩尔)，并将试管密封。将反应搅拌并同时在80℃下加热35分钟。TLC显示三氟甲磺酸盐原料已完全消失。将反应冷却至室温，并加入2.0M碳酸钠水溶液(4.0毫升，8.00毫摩尔)。将反应加热至100℃，在此时搅拌20小时，然后将其冷却至室温。

将反应混合物真空浓缩，并将残余物用丙酮/甲醇(约50∶50)溶解。将所得混合物过滤并将滤液真空浓缩。将物质预吸附在硅藻土上，并先经由自动化快速硅胶层析分离法(10克硅胶柱，30-70％乙酸乙酯/己烷梯度，以乙酸乙酯冲洗)纯化，得到274毫克不太纯的产物。将其经由在以33％-50％乙酸乙酯/己烷阶段梯度洗脱及接着以乙酸乙酯冲洗的硅胶上以标准快速层析分离法(4英寸高的30毫米直径柱)纯化，得到249.3毫克(55％产量)的[1-(3-氨基-2-氨基甲酰基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-基)-哌啶-4-基]-氨基甲酸叔丁酯。

将249.3毫克(0.57毫摩尔)上述化合物悬浮在10.0毫升乙酸乙酯中。加入甲醇(2.0毫升)及二氯甲烷(2.0毫升)使物质完全溶解。将5.0毫升(30.0毫摩尔)的6M氢氯酸甲醇溶液加入其中。将该反应混合物在室温下搅拌4小时，同时自溶液缓慢地沉淀出黄色固体。TLC显示原料已完全消失，故将反应真空浓缩。以少量的甲醇自烧瓶壁洗出残余物，并接着以醋酸乙酯研磨。抽气过滤收集黄色固体，并以醋酸乙酯、二氯甲烷及丙酮连续洗涤。将固体真空干燥，得到191.3毫克的标题化合物(83％产量)。

实施例4：

3-氨基-4-甲基-6-(吡啶-4-基甲氧基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将4-氯甲基吡啶氢氯酸盐(57.0毫克，0.34毫摩尔)与在DMF(1.0毫升)中的50毫克4-甲巯基吡啶酮中间物(以类似于实施例1的方法制备)(0.22毫摩尔)及碳酸钾(95.0毫克，0.68毫摩尔)在以火焰干燥的压力管中并在Ar气下混合。将管密封并在70℃下加热45分钟。TLC显示原料已完全消失并形成新的斑点。将反应冷却至0℃，并加入氢化钠(9.0毫克，0.23毫摩尔)。将反应温热至室温及搅拌30分钟，然后将其在冰浴中冷却并用水性碳酸氢钠(饱和)中止。将所得混合物以乙酸乙酯萃取两次。将有机层合并，以食盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并真空浓缩，得到65.8毫克粗产物，将其经由自动化快速二氧化硅纯化，得到41.8毫克(0.13毫摩尔，59％产量)的标题化合物。

实施例5：

(3-氨基-2-氨基甲酰基-4-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-氧基)-醋酸甲酯的合成

将溴醋酸甲酯(50毫克)加入4-甲巯基吡啶酮中间物(以类似于实施例1的方法制得)(62毫克)与K₂CO₃(70毫克)在DMF(1毫升)中的混合物中。将混合物在Ar下以70℃加热2小时。冷却至0℃之后，将混合物以NaH(60％，10毫克)处理并在室温下搅拌30分钟。接着将混合物倒入冰-NH₄Cl混合物中，以乙酸乙酯萃取，以Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物以制备性TLC纯化，提供5毫克标题化合物(白色固体)。

实施例6：

3-氨基-6-(1-甲基吡咯烷-2-基甲氧基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将吡啶-三氟甲磺酸盐中间物(参考实施例1)(10毫克)与N-甲基-L-脯胺醇(40毫克)在二噁烷中的混合物在Ar下90℃加热3小时。将混合物冷却至室温，加入Na₂CO₃(2M，0.2毫升)。将混合物在Ar下100℃加热10小时，冷却至室温并用水(1毫升)稀释。将混合物以乙酸乙酯萃取，以Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物以制备性硅胶层析分离法纯化，得到6毫克白色固体的标题化合物。

实施例7：

3-氨基-6-咪唑-1-基-4-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将9.2毫克咪唑加入20毫克(0.067毫摩尔)4-甲基吡啶三氟甲磺酸盐中间物原料(参考实施例2)在1.2毫升1，4-二噁烷中的溶液中。将所得混合物在80℃下搅拌2小时。然后加入0.5毫升的2M碳酸钠溶液。在100℃下持续搅拌过夜。接着将反应混合物冷却至室温，以乙酸乙酯稀释，以硫酸钠干燥并浓缩。将粗产物经层析分离(在以10％甲醇/二氯甲烷洗脱的硅胶上的制备性TLC，Rf＝0.56)，得到3.7毫克产物，将其以HPLC(反相-溶剂系统：等度60％水/乙腈)进一步纯化，提供2.7毫克(14.7％)标题化合物。

实施例8：

3-氨基-6-异丁基-4-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将三乙胺(0.4毫升)加入氰基硫代乙酰胺(2.20克，22毫摩尔)及6-甲基-2，4-庚烷二酮(3.12克，22毫摩尔)在无水乙醇(40毫升)中的搅拌溶液中，并将反应在50℃下加热1小时，然后允许其冷却至室温。过滤并用乙醇洗涤沉淀物得到黄色固体的6-异丁基-2-巯基-4-甲基烟碱腈(2.8克，61％)。

将上述腈(1.00克，4.85毫摩尔)、溴乙酰胺(0.67克，4.85毫摩尔)与乙醇钠(0.68克，10毫摩尔)在DMF(20毫升)中的混合物在70℃下加热1小时，然后允许其冷却至室温。将所得混合物以水稀释，过滤并将沉淀物用乙醇洗涤，提供标题化合物(0.5克，39％)。

实施例9：

3-氨基-4-甲基-6-戊基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将三乙胺(0.5毫升)加入2-氰基硫代乙酰胺(1.4克，14毫摩尔)及2，4-壬烷二酮(2.0克，13毫摩尔)在无水乙醇(40毫升)中的搅拌溶液中，并将反应在50℃下加热1小时，接着允许其冷却至室温。过滤并用乙醇洗涤沉淀物得到黄色固体的6-戊基-2-巯基-4-甲基烟碱腈(1.84克，62.1％)。

将上述腈(1.84克，6.7毫摩尔)、2-氯基乙酰胺(0.63克，6.7毫摩尔)与乙醇钠(0.91克，13.4毫摩尔)在甲醇(35毫升)中的混合物在75℃下加热2小时，接着允许其冷却至室温。过滤并用乙醇洗涤沉淀物提供固体的标题化合物(1.31克，71.2％)。

实施例10：

3-氨基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸-2-酰胺4-苯基酰胺的合成

在室温下，将三乙胺(0.5毫升)加入到2-氰基硫代乙酰胺(3.52克，35毫摩尔)及2，4-二氧代戊酸乙酯(5.0克，32毫摩尔)在无水乙醇(75毫升)中的搅拌溶液中，并将反应搅拌过夜。过滤并用乙醇洗涤沉淀物得到黄色固体的3-氰基-2-巯基-6-甲基异烟酸乙酯(4.54克，64.5％)。将该酯(3.54克，16毫摩尔)、溴基乙酰胺(2.15克，16毫摩尔)与乙醇钠(2.18克，32毫摩尔)在甲醇中的混合物回流加热过夜。接着允许其冷却至室温。过滤并用乙醇洗涤沉淀物提供固体的3-氨基-2-氨基甲酰基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-羧酸乙酯(0.94克，21.1％)。

将上述酯(0.94克，3.4毫摩尔)与氢氧化锂(0.11克，4.7毫摩尔)在甲醇/H₂O(100毫升，甲醇∶H₂O＝3∶1)中的混合物在室温下搅拌2小时。将反应以2M HCl中和并真空浓缩，得到橘色固体的3-氨基-2-氨基甲酰基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-羧酸(0.78克，63.2％)。将该酸(0.3克，1.2毫摩尔)、苯胺(0.56克，6.0毫摩尔)与PyBop(0.63克，1.4毫摩尔)在DMF(10毫升)中的混合物在室温下搅拌过夜。接着将反应以水稀释，过滤，并将所得固体以乙醇洗涤，提供固体的标题化合物(0.27克，73.6％)。

实施例11：

3-氨基-6-甲基-4-(吗啉-4-羰基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将3-氨基-2-氨基甲酰基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-羧酸(参考实施例10)(0.5克，2.0毫摩尔)、吗啉(0.87克，10毫摩尔)与PyBop(0.88克，2.0毫摩尔)在DMF(10毫升)中的混合物在室温下搅拌过夜。将其以水稀释并用二氯甲烷(50毫升)萃取。浓缩有机相得到橘色固体的标题化合物(0.45克，70.3％)。

实施例12：

3-氨基-6-甲基-4-苯氧基甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

在室温下将硫脲(339毫克，4.46毫摩尔)加入2-氯-3-氰基-6-甲基烟碱酸乙酯(500毫克，2.23毫摩尔)在乙醇(25毫升)中的溶液中。将混合物加热回流经24小时。将混合物冷却(一经冷却开始结晶)至室温。真空过滤收集固体，得到黄橘色固体的3-氰基-2-巯基-6-甲基异烟酸乙酯(250毫克，50％)。

在室温下将NaH(39毫克，0.95毫摩尔)加入上述酯(210毫克，0.95毫摩尔)在THF(15毫升)中的溶液中。搅拌5分钟之后，加入α-溴乙酰胺(134毫克，0.97毫摩尔)及n-Bu₄NI(10毫克)。将混合物在室温搅拌1小时，接着加入NaH(39毫克，0.95毫摩尔)，并将混合物再搅拌0.5小时。加入饱和水性NH₄Cl中止反应，乙酸乙酯稀释，以食盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，得到橘色固体。将粗残余物自甲醇重结晶，得到3-氨基-2-氨基甲酰基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-羧酸乙酯(160毫克，60％)，熔点205-208℃。

在室温下将LiBH₄(62毫克，2.04毫摩尔)加入3-氨基-2-氨基甲酰基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-羧酸乙酯(205毫克，0.73毫摩尔)在10∶1的THF∶甲醇(15毫升)中的溶液中。搅拌2小时之后，加入1M HCl中止反应。将混合物缓冲至pH≈7，以乙酸乙酯稀释，以H₂O及食盐水连续洗涤，经Na₂SO₄干燥、浓缩并用50％乙酸乙酯/己烷研磨，得到黄色固体的3-氨基-4-羟甲基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(123毫克，71％)，熔点＞210℃。

在0℃下将偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD)(14毫克，0.069毫摩尔)加入3-氨基-4-羟甲基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(15毫克，0.063毫摩尔)、酚(6毫克，0.069毫摩尔)及Ph₃P(18毫克，0.069毫摩尔)在THF(1.5毫升)中的溶液中。将混合物温热至室温及搅拌24小时。将反应混合物浓缩，并以制备性TLC(10％甲醇/CH₂Cl₂)级分，提供橘色固体的标题化合物(12毫克，61％)，熔点194-196℃。

实施例13：

氨基-4-(4-氨基甲酰基苯氧基甲基)-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

在0℃下将DIAD(23毫克，0.116毫摩尔)加入3-氨基-4-羟甲基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(参考实施例12)(25毫克，0.105毫摩尔)、4-羟基苯甲酰胺(15毫克，0.116毫摩尔)及Ph₃P(30毫克，0.116毫摩尔)在THF(2.5毫升)中的溶液中。将混合物温热至室温及搅拌24小时。将反应混合物浓缩并用2∶1的乙酸乙酯∶甲醇研磨，得到橘色固体的标题化合物(7毫克，19％)，熔点＞250℃。

实施例14：

3-氨基-4，6-二甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

在室温下将α-溴乙酰胺(388毫克，2.81毫摩尔)加入2-巯基-4，6-二甲基烟碱腈(420毫克，2.56毫摩尔)在甲醇(25毫升)中的溶液中。接着加入甲醇钠(1.76毫升，在甲醇中的25％NaOMe，7.7毫摩尔)。将反应混合物加热回流。持续回流加热过夜，然后将反应混合物冷却及过滤。将产物干燥过夜，提供450毫克(80％)标题化合物，熔点238-40℃。

实施例15：

3-氨基-4-(1-羟乙基)-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将1.8毫升二异丙基乙胺及1.23克O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲三氟硼酸盐加入0.80克3-氨基-2-氨基甲酰基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-羧酸及0.37克N，O-二甲基羟胺氢氯酸盐在DMF中的溶液中。将溶液在室温下搅拌过夜。将反应倒入NH₄Cl水溶液中，以乙酸乙酯萃取4次，以水及Na₂CO₃水溶液洗涤4次，干燥并真空浓缩成0.74克。将水相以正丁醇再萃取4次，以Na₂CO₃水溶液洗涤，真空浓缩，并与甲苯共沸3次，得到0.71克上述产物。将水相以Na₂CO₃水溶液调解成碱性，以正丁醇再萃取4次，以水洗涤，真空浓缩，并与甲苯共沸3次，得到0.52克的第三批产物。将三次产物合并，并在以5％甲醇-CH₂Cl₂洗脱的硅胶上经快速层析分离，提供0.62克的黄色固体的3-氨基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-(甲氧基甲基酰胺)。

在冰浴中将0.68毫升的3M甲基溴化镁加入100毫克3-氨基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-(甲氧基甲基酰胺)在3毫升无水THF中的溶液中，并将反应在冷却时搅拌1小时并在氩气的室温下搅拌过夜。加入NH₄Cl水溶液，并将产物以萃取4次至乙酸乙酯中，干燥并真空浓缩。在2毫米硅胶制备板上以5％甲醇-CH₂Cl₂的纯化提供12.2毫克的4-乙酰基-3-氨基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺。

将一满茶匙的NaBH₄加入9.9毫克的4-乙酰基-3-氨基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺在1毫升甲醇中的溶液中。0.5小时之后，将反应真空浓缩，以NH₄Cl水溶液中止，以萃取4次至乙酸乙酯中，真空浓缩，溶解在甲醇-CH₂Cl₂中，过滤并在60℃的真空干燥，提供米黄色固体的8.1毫克标题化合物。

实施例16：

3-氨基-4-(羟基-苯基甲基)-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

在-10℃下将LiAlH₄(0.31克)加入0.60克3-氨基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-(甲氧基甲基酰胺)(参考实施例15)在15毫升无水THF中的悬浮液中，并在Ar下搅拌1小时。缓慢加入NH₄Cl水溶液，并将混合物经由硅藻土过滤，以H₂O及乙酸乙酯洗涤。将水相分开，并以乙酸乙酯萃取3次以上，将合并的有机物真空浓缩成树脂，将其经快速层析分离(以30％丙酮-石油醚洗脱)，得到163毫克的深色树脂的3-氨基-4-甲酰基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺。

在-78℃下将0.425毫升的3M苯基溴化镁加入314毫克CeCl₃在3毫升无水THF中的悬浮液中，并将反应在Ar下搅拌1.5小时。接着加入50毫克3-氨基-4-甲酰基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺，并将反应在冷却下搅拌5小时，并接着允许其经0.5小时温热至室温。加入NH₄Cl水溶液，并将反应经由硅藻土过滤，以乙酸乙酯洗涤，分离水相，并以乙酸乙酯萃取3次以上。将合并的有机物干燥并真空浓缩，并将产物在以5％甲醇-CH₂Cl₂展开的制备板上纯化。将产物溶解在具有少量甲醇的乙酸乙酯中并用NaHSO₃水溶液洗涤3次，以除去原料杂质。将有机物干燥，真空浓缩，再溶解在甲醇-CH₂Cl₂中，过滤，浓缩并在60℃的真空干燥，提供8.2毫克的黄色固体的标题化合物。

实施例17：

3-氨基-4-(1-羟基-2-苯基乙基)-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

在-78℃下将0.70毫升的2M苄基氯化镁加入344毫克CeCl₃在3毫升无水THF中的悬浮液中，并将反应在Ar下搅拌1.5小时。接着加入41毫克3-氨基-4-甲酰基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(参考实施例16)，并将反应在冷却时搅拌3.5小时，并接着允许其经0.5小时温热至室温。加入NH₄Cl水溶液，并将反应经由硅藻土过滤，以乙酸乙酯洗涤，将水相分开，并以乙酸乙酯萃取3次以上。将合并的有机物干燥，真空浓缩，并再溶解在具有少量甲醇的乙酸乙酯中并用NaHSO₃水溶液洗涤3次。将其干燥，真空浓缩，并将产物在以5％甲醇-CH₂Cl₂展开的制备板上纯化。将产物再溶解在甲醇-CH₂Cl₂中，过滤，浓缩并60℃真空干燥，提供16.3毫克的橘色固体的标题化合物。

实施例18：

3-氨基-4-(4-甲氧基苄氧基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将在压力容器中的2-氯基-4-甲氧基烟碱腈(M.Mittelbach等Arch.Pharm.(Weinheim Ger.)，1985，GE，318，6，481-486)(6.92克)悬浮70毫升的30％HBr中醋酸溶液中，并在100℃下以搅拌加热2小时。将反应冷却至室温及过滤，以H₂O彻底洗涤并在50℃的真空干燥过夜，提供白色固体的4.85克2-溴基-4-羟基烟碱腈。质子NMR(DMSO)显示产物是69％溴基化合物与31％原料氯基类似物的混合物。

将1.52克的60％NaH的矿物油混合物分批加入5.85克上述混合物在30毫升无水DMF中的溶液中，并将棕色反应在室温及Ar下搅拌15分钟。加入4-甲氧基苄基氯(5.16毫升)，并将反应在60℃加热2.5小时，接着以NH₄Cl的水溶液中止。萃取至乙酸乙酯中，接着以H₂O洗涤，在分液漏斗中得到沉淀的白色固体副产物，将其过滤。将滤液干燥并得到9.4克半固体，将其以CH₂Cl₂研磨及过滤，得到多于730毫克的副产物。将滤液浓缩并在以CH₂Cl₂洗脱的硅胶上经快速层析分离，提供4.80克白色蜡状固体。质子NMR(DMSO)显示产物是2∶1的2-溴-4-(4-甲氧基苄氧基)-烟碱腈与其2-氯类似物的混合物。

将在甲醇(6.80毫升)中的巯基乙酰胺溶液真空浓缩，提供928毫克。加入2.75克的上述2∶1的混合物，并溶解在以N₂冲洗下的14毫升无水DMF中。加入在矿物油中的60％NaH悬浮体(723毫克)，并在60℃及Ar下搅拌过夜。加入NH₄Cl水溶液，并将产物过滤，以H₂O洗涤并在50℃的真空干燥，提供1.97克粗产物，自甲醇重结晶，得到黄色固体的1.25克标题化合物。

以上述的方式从2-溴-4-羟基烟碱腈及适当的烷基卤制备以下的化合物。在烷基醚的情况中，使用烷基溴或碘。在苄基醚的情况中，使用苄基氯或溴：

3-氨基-4-甲氧基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-乙氧基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-丙氧基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-异丙氧基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-苄氧基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(3-甲氧基苄氧基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(环己基甲氧基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

实施例19：

3-氨基-4-苯基胺基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将2.43克3-氨基-4-(4-甲氧基苄氧基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(实施例18)的溶液在20毫升三氟醋酸中带干燥管搅拌6小时。将反应真空浓缩，接着与甲苯共蒸发3次并与CH₂Cl₂共蒸发2次，得到黄色树脂。将其以乙酸乙酯研磨及过滤，得到1.88克黄色固体的3-氨基-4-氧代-4，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺三氟醋酸盐。

将1.0克3-氨基-4-氧代-4，7-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺三氟醋酸盐及2.76克N-苯基三氟甲烷磺酰亚胺与1.35毫升二异丙基乙胺的混合物在10毫升二噁烷中室温并在Ar下搅拌过夜。加入乙酸乙酯，并将混合物以H₂O洗涤，以NH₄Cl水溶液洗涤两次并用Na₂CO₃水溶液洗涤一次。将乙酸乙酯溶液干燥并真空浓缩成3.63克黄色固体。以丙酮-石油醚洗脱的快速层析分离法得到1.05克黄色固体的三氟甲烷磺酸3-氨基-2-氨基甲酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-基酯。

将20毫克三氟甲烷磺酸3-氨基-2-氨基甲酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-基酯及27微升苯胺在1毫升THF中的溶液在55℃及Ar下加热过夜。将反应涂在2毫米硅胶制备板上，将其以5％甲醇-CH₂Cl₂展开两次。将谱带以50％甲醇-CH₂Cl₂洗脱，得到18毫克。将其溶解在5％甲醇-CH₂Cl₂中，过滤，浓缩，并在60℃真空干燥过夜，提供10.5毫克的黄绿色固体的标题化合物。

实施例20：

3-氨基-4-(4-硝基-苯基胺基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将20毫克三氟甲烷磺酸3-氨基-2-氨基甲酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-基酯(参考实施例19)及40.5毫克4-硝基苯胺在1毫升无水二噁烷中的溶液在95℃及Ar下加热过夜。将反应浓缩及涂在2毫米硅胶制备板上，将其以7.5％甲醇-CH₂Cl₂展开两次。将谱带以20％甲醇-CH₂Cl₂洗脱，真空浓缩，再溶解在5％甲醇-CH₂Cl₂中，过滤，浓缩，并在60℃真空经过夜干燥，得到2.2毫克的橘色固体的标题化合物。

实施例21：

3-氨基-4-(4-苄基-哌嗪-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将20毫克三氟甲烷磺酸3-氨基-2-氨基甲酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-基酯与50毫升N-苄基-哌嗪在1毫升无水二噁烷中的混合物以N₂冲洗，并封口并在室温下放置过夜。将反应以乙酸乙酯稀释，以水冲洗四次，干燥并真空浓缩至干。将产物在2毫米硅胶制备板上纯化，以甲醇-CH₂Cl₂混合物展开及洗脱谱带，并接着浓缩至干。将产物再溶解在5-10％甲醇-CH₂Cl₂中，过滤除去硅胶，浓缩，并在60℃真空经过夜干燥，提供7.9毫克的米黄色固体的标题化合物。

使用与以上实施例所述相同的步骤制备以下的化合物。如果二级胺中间物是固体时，则使用50摩尔当量，而不是50微升。在一些情况中，如果认为产物在水中具有相当的溶解度时，则将反应混合物矫形浓缩而不萃取，并将残余物以如上述制备性TLC纯化。对具体的化合物标注其他细微的改变。

3-氨基-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-哌啶-1-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-吗啉-4-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-[甲基-(2-吡啶-2-基乙基)-氨基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-[4-(异丙基氨基甲酰基-甲基)-哌嗪-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(4-苯基哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(4-羟基-4-苯基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(4-苯基-哌嗪-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(4-氧代-1-苯基-1，3，8-三氮杂-螺[4.5]癸-8-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-[1，4′]联哌啶-1′-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(苄基-甲基-胺基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(甲基苯基乙基胺基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(4-苄基哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-[(2-羟基-2-苯基乙基)-甲基胺基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

4-(3-氨基-2-氨基甲酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-基)-哌嗪-1-羧酸苄基酯

4-(3-氨基-2-氨基甲酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯

3-氨基-4-[4-(2-氧代-2，3-二氢-苯并咪唑-1-基)-哌啶-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-[4-(呋喃-2-羰基)-哌嗪-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(4-苯磺酰基-哌嗪-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(乙基-甲基-胺基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(甲基-丙基-胺基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(丁基-甲基-胺基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-吡咯烷-1-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-4-(4-羟基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

在以制备板之后，以75％H₂O-25％乙腈洗脱的C8柱上的HPLC纯化该产物。

3-氨基-4-(3-羟基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

在以制备板之后，以65％H₂O-35％乙腈洗脱的C8柱上以HPLC纯化该产物。

3-氨基-4-哌嗪-1-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

将18毫克4-(3-氨基-2-氨基甲酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-基)-哌嗪-1-羧酸叔丁酯在1毫升CH₂Cl₂+1毫升三氟醋酸中的的溶液在室温下带干燥管搅拌4小时。将反应真空浓缩，以25％甲醇-CH₂Cl₂-2％NH₄OH的制备板展开，并将谱带以50％甲醇-CH₂Cl₂洗脱，得到油状物，将其再溶解在10％甲醇-CH₂Cl₂中，过滤，浓缩并在60℃真空干燥，提供4.6毫克的黄色固体的产物。

实施例22：

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-((E)-苯乙烯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将30毫升无水THF加入可密封的烧瓶中，并将Ar气流以起泡流经溶剂5分钟。加入三(二苄叉丙酮)二钯(0)-氯仿加成物(76.1毫克，73.5微摩尔)、三-2-呋喃基膦(121.9毫克，0.5毫摩尔)、噻吩-2-羧酸铜(I)(541.2毫克，2.7毫摩尔)、反式2-苯基乙烯基硼酸(621.4毫克，4.2毫摩尔)及3-氨基-4-甲硫基-6-三氟甲基磺酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(800.0毫克，2.1毫摩尔)，并将密封的烧瓶在40℃下加热20小时。将溶液以CH₂Cl₂稀释，并将有机相以NaHCO₃饱和溶液萃取。将水相以CH₂Cl₂萃取两次，并将合并的有机相以食盐水洗涤。将溶液经MgSO₄干燥，过滤及蒸发。将残余物在使用梯度(以0-2.5％甲醇/CH₂Cl₂经5分钟)的硅胶上经层析分离。将包括产物的级分合并，蒸发并用制备性TLC(10％丙酮/醚)纯化，产生415毫克(45％)4-(E)-苯乙烯基中间物。

将上述中间物溶解在二噁烷(20毫升)中，加入4-N-Boc-氨基-哌啶(382.毫克，1.9毫摩尔)，并将混合物在100℃搅拌8小时。将溶液冷却至室温及加入NH₄Cl饱和溶液。将水相以醋酸乙酯萃取，并将合并的有机相经MgSO₄干燥。将化合物以制备性TLC(5％甲醇/CH₂Cl₂)进一步纯化，产生220毫克(48％)产物。

将上述胺基甲酸酯溶解在二噁烷(10毫升)中，并加入4当量的HCl二噁烷溶液(5毫升)。将悬浮液搅拌3小时，然后将溶剂蒸发。将残余物以制备性TLC(10％的4当量NH₃甲醇溶液/90％CH₂Cl₂)纯化，产生115毫克(65％)的标题化合物。

实施例23：

3-氨基-4-(4-甲烷磺酰基苯基)-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将氯化铝(4.2克，32毫摩尔)悬浮在二氯甲烷(5毫升)中，并经30分钟逐滴加入乙酰氯(2.44毫升，34毫摩尔)，同时将内温维持在30℃以下。持续搅拌15分钟，然后在30℃下经10分钟加入偏二氯乙烯。在室温下再搅拌90分钟之后，将混合物倒入碎冰中。将混合物搅拌20分钟，并将水相以二氯甲烷萃取两次。将合并的有机相以水洗涤。接着将二氯甲烷溶液冷却至0℃，并加入三乙胺(4.21毫升，30毫摩尔)，同时搅拌溶液。在30分钟之后，加入10％HCl，并将有机相以5％HCl-水及食盐水洗涤。将挥发物蒸发，并将残余物经短路径蒸馏装置蒸馏，产生3.28克(78％)预期的二氯乙烯基酮。

将硫代甲醇钠(1.40克，20毫摩尔)悬浮在醚(20毫升)中，并逐滴加入溶解上述二氯基乙烯酮(10毫摩尔)在醚(10毫升)中的溶液。将所得溶液回流1小时，过滤并用醚洗涤沉淀物。将合并的滤液蒸发，产生1.4克(87％)预期的二甲基硫代乙烯基酮。

在加热下将钠(533毫克，23.2毫摩尔)溶解在异丙醇(50毫升)中。加入2-氰基硫代乙酰胺(2.1克，21毫摩尔)，并将溶液在室温下搅拌5分钟。将上述二甲基硫代乙烯酮(3.4克，21毫摩尔)加入反应混合物中，并将溶液回流，直到原料消失为止(～30小时)。将溶剂蒸发并将残余物溶解在水中。将水溶液过滤，酸化成pH 3，并过滤沉淀物。将沉淀物以醚及接着以己烷洗涤，得到3.9克(95％)预期的硫代吡啶。

将甲醇钠(21.6克，40毫摩尔)溶解在甲醇(60毫升)中，并加入上述硫代吡啶(3.9克，20毫摩尔)。在5分钟之后，加入2-溴乙酰胺(2.76克，20毫摩尔)，并将溶液回流2小时。部分蒸发甲醇，并将残余物以碳酸氢钠水溶液稀释。将水相以10％甲醇/二氯甲烷萃取数次，并将合并的萃取物经硫酸镁干燥。将溶剂蒸发并将残余物在硅胶上以柱层析分离法纯化，得到2.1克(41％)预期的噻吩并[2，3-b]吡啶中间物。

将无水THF(3毫升)加入可密封的试管中，并将Ar气流以起泡流经溶剂5分钟。加入上述噻吩并[2，3-b]吡啶中间物(50毫克，0.2毫摩尔)、4-甲烷磺酰基苯基硼酸(48毫克，0.24毫摩尔)、三(二苄叉丙酮)二钯(0)-氯仿加成物(4毫克，4微摩尔)、三-2呋喃基膦(7.5毫克，32微摩尔)及噻吩-2-羧酸铜(I)(50毫克，0.26毫摩尔)。将试管密封及接着在65℃下加热24小时。将溶液以CH₂Cl₂稀释，并将有机相以碳酸氢钠水溶液萃取。将水相以CH₂Cl₂萃取两次，并将合并的有机相以食盐水洗涤。将溶液经MgSO₄干燥，过滤及蒸发。将残余物以柱层析分离法纯化。将包括产物的所有级分合并，蒸发并用制备性TLC再纯化，得到23毫克(32％)的标题化合物。

实施例24：

3-氨基-6-甲基-4-(1-甲基-1H-吡咯-2-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将1-甲基-2-吡咯醛(500毫克，4.58毫摩尔)溶解在10毫升甲苯中，接着加入1-三苯基磷叉-2-丙酮(1.53克，4.81毫摩尔)及10滴醋酸。将反应混合物在密封的试管中120℃加热16小时。将反应混合物冷却至室温并将溶剂蒸发。将残余物溶解在乙酸乙酯中，并将有机相以NaHCO₃饱和溶液及食盐水洗涤。将有机相经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物在硅胶上以柱层析分离法纯化，产生565毫克(82.7％)乙烯酮。

将2-氰基硫代乙酰胺(70.6毫克，0.71毫摩尔)及叔丁醇钠(71毫克，0.74毫摩尔)在2-丙醇(4毫升)中的溶液加入密封的试管中。将混合物在室温下搅拌5分钟，接着加入上述乙烯酮(100毫克，0.67毫摩尔)。将混合物在80℃下加热16小时。将溶剂浓缩并将残余物溶解在水中。加入稀释的HCl，将pH调整成6。过滤在酸化期间形成的固体并用水洗涤。将固体在高真空下干燥，得到70毫克(45.5％)预期的硫代吡啶中间物。

将上述硫代吡啶中间物(70毫克，0.31毫摩尔)悬浮在2毫升甲醇中，接着加入2-溴乙酰胺(42毫克，0.3毫摩尔)以及1.22毫升的0.5当量甲醇钠在甲醇中的溶液。将混合物在密封的试管中70℃加热2小时。将反应混合物浓缩并将残余物在硅胶上以柱层析分离法纯化，产生36毫克(41％)的标题化合物。

实施例25：

3-氨基-6-(4-{[(2-氨基甲酰基-苯基氨基甲酰基)-甲基]-氨基}-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将溴代乙酰溴(1.33毫升，15.0毫摩尔)加入2-氨基苯酰胺(2.00克，14.4毫摩尔)及三乙胺(2.4毫升，17毫摩尔)在无水二噁烷(20毫升)中的溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌1小时，接着倒入水中。过滤收集所得固体，并自甲醇重结晶，得到棕色固体的二酰胺中间物(2.02克)。

将上述中间物(70毫克，0.21毫摩尔)及3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(65毫克，0.25毫摩尔)与三乙胺(0.05毫升，0.36毫摩尔)一起在1毫升DMF中搅拌2小时。真空除去溶剂。将残余物以水研磨。过滤收集所得固体，并自乙腈重结晶，得到浅色固体的标题化合物(37毫克)。

实施例26：

3-氨基-6-{4-[3-(4-氨基甲酰基苯氧基)-2-羟丙基胺基]-哌啶-1-基}-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将4-羟基苯酰胺(200毫克，1.458毫摩尔)、环氧氯丙烷(135毫克，1.458毫摩尔)及碳酸钾(403毫克，2.916毫摩尔)在7毫升无水DMF中的溶液加入到密封的试管中。将反应混合物在70℃下搅拌18小时。将反应混合物过滤并浓缩。将残余物以快速层析分离法(以在甲醇/CH₂Cl₂中的0-5％的2M NH₃洗脱)纯化。收集并浓缩产物级分，得到80毫克的白色固体的4-环氧乙烷基甲氧基苯酰胺。

将4-环氧乙烷基甲氧基苯甲酰胺(76毫克，0.393毫摩尔)溶解在8毫升无水DMF中，接着加入4-氨基-1-N-boc-哌啶(178毫克，0.889毫摩尔)。将反应混合物在80℃下搅拌48小时。将反应混合物浓缩并将残余物以在甲醇/CH₂Cl₂中的0-5％的2M NH₃洗脱的快速层析分离法纯化。收集并浓缩产物级分，得到62毫克无色油的4-[3-(4-氨基甲酰基苯氧基)-2-羟丙基胺基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯。

将的5毫升的4.0M HCl在1，4-二噁烷中的溶液及上述酯(62毫克，0.158毫摩尔)在2毫升甲醇中的溶液加入到圆底烧瓶中。将该反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物以高真空泵浓缩，得到57毫克的白色玻璃状固体产物的4-[2-羟基-3-(哌啶-4-基胺基)-丙氧基]-苯甲酰胺，氢氯酸盐。

将在5毫升无水DMF中的三氟基甲烷磺酸6-(2-氨基甲酰基乙基)-5-氰基-4-丙基吡啶-2-基酯(54.2毫克，0.141毫摩尔)加入密封的试管中，接着加入上述氢氯酸盐(57毫克，0.156毫摩尔)及N，N-二异丙基乙胺(91.4毫克，0.707毫摩尔)。将反应混合物在70℃下搅拌2小时。将反应浓缩，并将0.5M甲醇钠的甲醇溶液(1.41毫升，0.707毫摩尔)及2毫升甲醇加入到残余物中。将反应混合物在70℃下搅拌4小时。将反应混合物浓缩并将残余物以0-10％的2M NH₃的甲醇/CH₂Cl₂溶液洗脱的快速层析分离法纯化。收集并浓缩产物级分，得到浅黄色结晶固体的42毫克(56.4％)标题化合物。

实施例27：

3-氨基-6-((S)-3-羟基-4-甲烷磺酰基胺基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将7-氧杂-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-羧酸叔丁酯(830毫克，4.2毫摩尔)、甲基磺酰胺(1.2克，12.5毫摩尔)、碳酸钾(829毫克，12.5毫摩尔)与硫酸镁(1.5克，12.5毫摩尔)在甲醇(15毫升)中的混合物在压力管中在Ar及90℃加热过夜。接着将混合物冷却至室温，以CH₂Cl₂(10毫升)稀释，经由硅藻土过滤并浓缩。将粗产物在使用乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶上以柱层析分离法进一步纯化，得到504毫克预期的羟基-哌啶中间物。

将上述中间物(118毫克，0.4毫摩尔)溶解在甲醇(1毫升)中。将4M的HCl(在二噁烷中，0.2毫升)逐滴加入该溶液中。将混合物在室温下搅拌过夜并浓缩。将因此获得的产物溶解在二噁烷中，以300毫升三乙胺碱化，并以实施例26所述的步骤，与144毫克(0.376毫摩尔)的2-(3-氰基-4-正丙基-6-三氟甲烷磺酰基吡啶-2-基巯基)乙酰胺反应，提供73毫克的标题化合物。

实施例28：

3-氨基-6-(4-肼基羰基哌嗪-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将哌嗪-1-羧酸苄基酯(0.385毫升，1.996毫摩尔)及二异丙基乙胺(0.383毫升，4.397毫摩尔)在5毫升CH₂Cl₂中的溶液逐滴加入在0℃下的光气溶液(在甲苯中的20％溶液)中。将所得淡黄色混合物在Ar下搅拌2小时，温热至室温。以真空蒸馏作用除去光气溶液。加入20毫升无水CH₂Cl₂。将反应容器冷却至0℃，并一次性地加入肼羧酸叔丁酯及二异丙基乙胺(0.383毫升，4.397毫摩尔)。将反应温热至室温及搅拌1小时。将反应以10毫升饱和NaHO₃中止，以30毫升乙酸乙酯稀释，接着以2×30毫升NH₄Cl饱和溶液及30毫升食盐水洗涤。将有机相经MgSO₄干燥，过滤并浓缩，提供白色固体的720毫克的4-(N-叔丁氧基羰基肼羰基)-哌嗪-1-羧酸苄基酯。

将上述苄基酯(720毫克，1.913毫摩尔)溶解在10毫升乙酸乙酯中，并放入圆底烧瓶中。加入10％的Pd/C(300毫克)，并将反应置于1大气压的H₂气球下。使反应搅拌过夜，接着经由硅藻土塞过滤并浓缩，得到淡白色固体的465毫克的4-(N-叔丁氧基羰基肼羰基)-哌嗪。

按照上述实施例26所述的方法，从上述中间物制备N′-[4(3-氨基-2-氨基甲酰基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-基)-哌啶-1-羰基]-肼羧酸叔丁酯。将溶解在乙酸乙酯/CH₂Cl₂中并用4当量HCl二噁烷的溶液处理，以除去t-Boc保护基，提供标题化合物。

实施例29：

3-氨基-6-[4-(1-亚胺基乙基)-哌嗪-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将硫代乙酰胺(326.0毫克，4.339毫摩尔)及2-溴甲基萘(959.0毫克，4.337毫摩尔)放入50毫升圆底烧瓶中。加入20毫升CHCl₃，并将混合物回流3小时，在此时形成白色沉淀物。将混合物冷却及收集沉淀物。将沉淀物以20毫升CH₂Cl₂洗涤，并放在真空下干燥，得到白色细粉末的1.01克的硫代乙酰亚胺酸萘-2-甲基酯氢溴酸盐。

将上述氢溴酸盐(850.0毫克，2.869毫摩尔)放入25毫升圆底烧瓶中。将10毫升EtHO加入其中，生成悬浮液。将烧瓶放在冰浴中，并一次性地加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(534.4毫克，2.869毫摩尔)。将反应温热至室温及再搅拌3小时。将非均相溶液以40毫升乙酸乙酯稀释并用2×30毫升H₂O洗涤。将水相浓缩至干，用2×20毫升甲苯共沸，得到白色固体。将固体悬浮在CH₂Cl₂/己烷中并浓缩至干。将物质放在真空过夜，得到白色固体的769毫克4-(1-亚胺基乙基)-哌嗪-1-基羧酸叔丁酯氢溴酸盐。

如实施例28所述的方法，除去上述中间物的t-Boc保护基，并将所得中间物如实施例26所述的方法进一步反应，提供标题化合物。

实施例30：

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-4-(3-羟基-丙基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将正丁基锂溶液(28毫升的1.6M溶液)的己烷溶液加入7.98克(40.2毫摩尔)叔丁基二甲基戊-4-炔氧基甲硅烷(J.A.Marshall及B.S.DeHoff的J.Org.Chem.，1986，51，863)在THF(100毫升)中的溶液(冷却至-78℃)中。将混合物在-78℃下搅拌1小时，接着经由管子转移至包括4.5毫升(58毫摩尔)氯基甲酸甲酯的THF(100毫升)溶液(冷却至-78℃)的烧瓶中。将反应在-78℃搅拌2小时，接着以加入NH₄Cl饱和水溶液消耗过量碱。将混合物以H₂O稀释并用Et₂O洗涤。将合并的有机相经无水Na₂SO₂干燥并在减压浓缩。将粗残余物以使用5％乙酸乙酯在己烷中的溶液作为洗脱剂的快速硅胶层析分离法纯化，并在溶剂浓缩之后提供6.18克(60％)澄清油状的预期的酯。

将2.2毫升(25毫摩尔)吗啉加入6.18克(24.1毫摩尔)上述酯在乙醇(120毫升)中的溶液中。将混合物在60℃下加热3小时。将反应混合物冷却至室温，并一份地加入2.5克(25毫摩尔)固体的2-氰基乙酰胺。接着将反应混合物在60℃加热15分钟，接着冷却至室温并真空浓缩。将残余物悬浮在Et₂O中并用H₂O洗涤。将合并的水相以Et₂O萃取回收。将水相冷冻，提供3.5克(30.8％)黄色粉末的4-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-丙基]-3-氰基-6-酮基-1，6-二氢吡啶-2-硫醇酸吗啉盐。

将一份固体的0.315克(0.280毫摩尔)2-溴基乙酰胺加入0.940克(2.28毫摩尔)上述吗啉盐在THF(15毫升)中的溶液(冷却至0℃)中。将混合物搅拌及经2小时缓慢温热至室温，在此期间自溶液沉淀出盐。将混合物经由硅藻土过滤，以除去固体，并将过滤垫以乙酸乙酯洗涤。将混合物减压浓缩，提供0.385克(44％)的橘色泡沫的2-{4-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-丙基]-3-氰基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-2-基硫基}-乙酰胺。

将2.2克(6.2毫摩尔)的N-苯基三氟甲烷磺酰亚胺及1.2毫升(6.7毫摩尔)N，N-二异丙基乙胺加入2.32克(6.08毫摩尔)上述乙酰胺在THF(25毫升)中的溶液(冷却至0℃)中。将混合物搅拌3小时，在此时缓慢温热至室温。将混合物倒入H₂O中并用乙酸乙酯洗涤。将合并的有相机经无水Na₂SO₄干燥并减压浓缩。将残余物以使用0-50％梯度A(10％甲醇CH₂Cl₂溶液)至B(CH₂Cl₂)的快速硅胶层析分离法纯化，在溶解剂浓缩之后提供0.832克(26％)的橘色油的预期的三氟甲烷磺酰酯。

将0.175克(1.73毫摩尔)的4-羟基-哌啶及0.32毫升(1.79毫摩尔)的N，N-二异丙基乙胺加入0.832克(1.62毫摩尔)上述三氟甲烷磺酰酯乙酰胺在1，4-二噁烷(30毫升)中的溶液中。将混合物80℃加热5小时。将反应冷却至室温，并加入Na₂CO₃水溶液(8.0毫升的2.0M溶液)。将混合物100℃加热3天，接着冷却至室温并用H₂O稀释。将混合物以CH₂Cl₂洗涤，并将合并的有机相经无水Na₂SO₄干燥并减压浓缩。将残余物以使用0-5％梯度A(10％甲醇的CH₂Cl₂溶液)至B(CH₂Cl₂)的快速硅胶层析分离法纯化，浓缩洗脱剂之后提供0.232克(31％)为黄色粉末的3-氨基-4-[3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-丙基]-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺。

将0.50毫升(8.7毫摩尔)冰醋酸加入0.23克(0.49毫摩尔)上述酰胺在1∶1的THF∶H₂O的混合物(1.0毫升)中的溶液中。将混合物50℃加热15小时，接着冷却至室温并减压浓缩，自溶液沉淀出固体。过滤收集物质，并以H₂O及CH₂Cl₂洗涤，接着在真空干燥，提供0.106克(61％)白色固体的标题化合物。

实施例31：

3-氨基-6-(4-氨基-3，3-二甲基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(5)的合成

将0.10克(0.46毫摩尔)1-苄基-3，3-二甲基吡啶-4-酮、0.055毫升(0.50毫摩尔)苄基胺与0.19毫升(0.64毫摩尔)异丙醇钛的混合物在室温下搅拌1小时。将混合物以乙醇(1毫升)稀释，引起黄色溶液转成混浊溶液。将0.031克(0.49毫摩尔)氰基硼氢化钠加入反应中，并将混合物在室温下搅拌20小时。将混合物以H₂O(1毫升)稀释，接着经由硅藻土过滤，除去沉淀物。将过滤垫以甲醇洗涤，并将混合物减压浓缩。将残余物使用0-40％梯度A(10％甲醇在CH₂Cl₂中的溶液)至B(CH₂Cl₂)的快速硅胶层析分离法纯化，在洗脱剂浓缩之后提供0.069克(44％)澄清油的预期的苄基胺。

将0.049克(0.046毫摩尔)钯-碳及0.050毫升(0.60毫摩尔)浓HCl加入放置在厚壁压力容器内0.069克(0.22毫摩尔)上述苄基胺在甲醇(5毫升)中的溶液中。将混合物放置在氢气下(50磅/平方英寸)及摇动24小时。将混合物经由硅藻土塞过滤，并将过滤垫以甲醇洗涤。将有机相减压浓缩，提供0.041克(91％)的白色固体的预期的4-氨基-3，3-二甲基哌啶二盐酸盐。

将0.041克(0.20毫摩尔)上述二盐酸盐及0.11毫升(0.61毫摩尔)N，N-二异丙基乙胺加入0.075克(0.20毫摩尔)的三氟甲烷磺酸6-氨基甲酰基甲硫基-5-氰基-4-丙基吡啶-2-基酯在1，4-二噁烷(5毫升)中的溶液中。将混合物在60℃下加热15小时，接着冷却至室温，并加入Na₂CO₃水溶液(0.5毫升的2.0M溶液)。将混合物100℃加热3天，接着冷却至室温，以H₂O稀释并用CH₂Cl₂洗涤。将合并的有机相经无水Na₂SO₄干燥并减压浓缩。将粗残余物使用0-50％梯度A(10％甲醇在CH₂Cl₂中的溶液)至B(CH₂Cl₂)的快速硅胶层析分离法纯化，在洗脱剂浓缩之后提供0.019克(27％)为黄色固体的标题化合物。

实施例32：

3-氨基-6-哌啶-4-基-4-丙基-3a，7a-二氢-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺二盐酸盐的合成

将1-Boc-哌啶-4-羧酸(4.4克，19.2毫摩尔)在草酰氯(50毫升)中的溶液加热回流3小时及接着浓缩，并在真空下干燥，得到酰基氯，4-氯羰基哌啶-1-羧酸叔丁酯。

在-50℃下，将2-戊酮(4.1毫升，38.4毫摩尔)加入LDA(在THF/庚烷/乙基苯中的1.8M，21.3毫升，38.4毫摩尔)在无水THF(50毫升)中的搅拌溶液中，并在10分钟之后，加入上述酰基氯在无水THF(50毫升)中的溶液中。使反应温热至室温及搅拌过夜。将其以1当量HCl(500毫升)稀释，以二氯甲烷萃取，以饱和碳酸氢钠及食盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将其在硅胶上以层析分离法(乙酸乙酯/二氯甲烷＝1/10)纯化，得到预期的二酮中间物：4-(3-氧代-己酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.1克)。

将二酮(2.1克，7.1毫摩尔)与2-氰基硫代乙酰胺(1.42克，14.2毫摩尔)在乙醇(30毫升)中的搅拌混合物在70℃下加热过夜。将其浓缩，并在硅胶上以层析分离法(甲醇/二氯甲烷＝1/10)得到1.8克的5-氰基-6-巯基-4-丙基-3′，4′，5′，6′-四氢-2′H-[2，4′]联吡啶基-1′-羧酸叔丁酯。

将上述叔丁酯(0.9克，2.49毫摩尔)与溴基乙酰胺(0.38克，2.75毫摩尔)在无水二噁烷(20毫升)中的搅拌混合物在80℃加热2小时。加入碳酸钠(400毫克)在水(7毫升)中的溶液，并将反应加热回流过夜。将其以水(100毫升)稀释，并将沉淀物过滤及干燥，得到0.85克的4-(3-氨基-2-氨基甲酰基-4-丙基-3a，7a-二氢噻吩并[2，3-b]吡啶-6-基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯。

将HCl/二噁烷(4当量，2毫升)加入在无水二氯甲烷(35毫升)中上述叔丁酯(600毫克，1.43毫摩尔)的搅拌溶液中。立即出现沉淀物。将其浓缩并真空干燥，得到为二盐盐的标题化合物(570毫克)。

实施例33：固相还原胺基化作用

以下的通用步骤是说明制备许多3-氨基-6-(4-取代的胺基哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺化合物的方法：

向3-氨基-6-(4-氧代-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺中，加入1.5-3.00当量需要的胺、1.42当量以固体支撑的氰基硼氢化物及8-9当量醋酸的THF溶液。将反应混合物在轨道摇动器上摇动15-72小时。接着将反应过滤，并将以固体支撑的氰基硼氢化盐与甲醇摇动5-15分钟，接着过滤。将5M NH₃的甲醇溶液加入到合并的滤液中，并将所得混合物真空浓缩。纯化作用或经制备性TLC(以5-10％(5M NH₃/甲醇)/乙酸乙酯作为洗脱剂)或经由快速二氧化硅层析分离法(以2.5-10％(5M NH₃/甲醇)/CH₂Cl₂作为洗脱剂)，得到在以下表中所述的化合物：

实施例34：固相还原胺基化作用

以下的通用步骤是说明制备许多使用以上实施例中的方法制备的3-氨基-6-(4-取代的胺基哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺化合物的中间物的方法：

将需要的芳基醛溶解在醚中，并在0℃下使用作为酸性催化剂的蒙脱土K10(0.1-0.2当量)与三甲基甲硅烷基氰(1-2当量)反应。将反应搅拌1-3小时，接着过滤，并将滤液真空浓缩，得到相应的三甲基甲硅烷基醚的化合物。将醚溶解在THF中，在0℃下并加入到硼烷/THF的溶液中。将反应搅拌17-24小时，同时使冰浴终止。将反应再冷却至0℃，并以甲醇中止，接着真空浓缩。将残余物溶解在乙酸乙酯/CH₂Cl₂中，加入HCl/甲醇或HCl/二噁烷。将所得白色固体或以抽气过滤或真空浓缩作用分离，得到对应的羟基胺HCl盐。接着将这些HCl盐根据实施例33所述的方法反应及纯化，提供在以下表中所示的化合物34a-34e：

实施例35：

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-吡啶-3-基酰胺的合成

在40℃下，将4-甲氧基苄醇(11.0克，79.7毫摩尔)以分批加入6.38克的60％NaH在110毫升THF中的悬浮液中，并将反应在Ar下搅拌30分钟。在40℃下滴入10.00克的4-氯基乙酰醋酸甲酯在40毫升THF中的溶液，并将反应在室温下搅拌过夜。加入NH₄Cl水溶液，并将产物萃取至乙酸乙酯中，以NH₄Cl水溶液及食盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并浓缩成18.5克油。将其经快速层析分离(以15％丙酮/石油醚洗脱)，提供2.99克油的第一个洗脱级分，NMR(CDCl₃)证明其包括80％纯度的4-(4-甲氧基苄氧基)-3-氧代-丁酸甲酯。获得12.01克油的第二个洗脱份，NMR证明其包括55％的4-(4-甲氧基苄氧基)-3-氧代-丁酸甲酯，其余大部分是未反应原料。

由以上实施例8及30所述的步骤，将4-(4-甲氧基苄氧基)-3-氧代-丁酸甲酯转化成2-[3-氰基-6-三氟甲烷磺酰氧基-4-(4-甲氧基苄氧基甲基)-吡啶-2-基硫基]-乙酰胺

将上述中间物(9.00克)溶解在171毫升CH₂Cl₂及9毫升水中。加入2，3-二氯基-5，6-二氰基-1，4-苯醌(DDQ)(12.47克)，并将深色悬浮液搅拌6小时，接着再加入4.16克DDQ，并将反应搅拌过夜。将反应倾析，并将残余的胶粘性红色沉淀物以2×CH₂Cl₂研磨及倾析。将沉淀物溶解在乙酸乙酯中，以水(4X)及NaHCO₃水溶液洗涤，干燥并浓缩成棕色固体。将其在CH₂Cl₂中研磨，过滤及干燥，提供4.61克(68％)的黄褐色固体的预期的羟甲基吡啶中间物。

将叔丁基二甲基甲硅烷基氯(8.94克)加入5.00克4-羟甲基哌啶在25毫升DMF中的溶液中，并将放热反应放入冰浴中10分钟，接着加入10.10克咪唑，并将反应在室温及Ar下搅拌过夜。TLC证明是大部分的原料。加入4-二甲基胺基吡啶(0.60克)及7.45克上述叔丁基二甲基甲硅烷基氯，并将反应搅拌过夜。将其倒入Na₂CO₃水溶液中，以乙酸乙酯(3X)萃取，以水(4X)洗涤，干燥并浓缩成15.3克黄色油。将其经快速层析分离(以0-10％甲醇/CH₂Cl₂溶液)，得到许多不同纯度的洗脱份。最好的洗脱份包括2.9克黄色的油，NMR(CDCl₃)测定其包括55摩尔％的4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-哌啶：45摩尔％的叔丁基二甲基甲硅烷基氯。

以实施例30所述的步骤，将粗4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-哌啶与来自上述4-羟甲基吡啶中间物偶合，提供3-氨基-6-[4-(叔丁基-二甲基甲硅烷氧基)-哌啶-1-基]-4-羟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺。

将400毫克上述酰胺、298毫克KCN、1.59克的MnO₂与157毫升醋酸的混合物悬浮在16毫升甲醇中，并将反应封口并搅拌2天。将反应混合物经由硅藻土过滤，浓缩及经快速层析分离(以5％甲醇/CH₂Cl₂洗脱)，提供254毫克(60％)的3-氨基-6-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-哌啶-1-基]-2-氨基甲酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-羧酸甲酯(如NMR(DMDO)所测定)。以25％甲醇/CH₂Cl₂/1％HOAc进一步的洗脱使相应的羧酸降低至151毫克(36％)(用NMR(DMDO)测定)。

在0℃下，将81毫克的1-[二甲基胺基丙基]-3-乙基碳化二酰亚胺氢氯酸盐加入9.5毫克上述羧酸在0.5毫升无水DMF中的溶液中。在15分钟之后，加入99毫克的3-氨基吡啶，并将反应在室温下搅拌过夜。将其以乙酸乙酯稀释，以水(4X)及NH₄Cl水溶液(3X)洗涤，干燥，浓缩并用7.5％甲醇/CH₂Cl₂/0.5％NH₄OH的制备性TLC纯化。将主要的谱带以50％甲醇/CH₂Cl₂洗脱，提供12.8毫克油，NMR(CD₃OD)证明其是3-氨基-6-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-哌啶-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-吡啶-3-基酰胺与未反应的原料的混合物。将混合物溶解在0.5毫升CH₂Cl₂中，并加入50毫升HF-吡啶复合物，并将反应搅拌过夜。从胶粘性沉淀物倾析出澄清的溶液，将其以CH₂Cl₂洗涤及倾析(2X以上)。将沉淀物溶解在10％甲醇/CH₂Cl₂中，以1滴浓NH₄OH中和，涂在制备性TLC平板上并在10％甲醇/CH₂Cl₂/1％NH₄OH中展开两次。将谱带以50％甲醇/CH₂Cl₂洗脱，提供2.0毫克(23％)的标题化合物。

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-甲基酰胺：

自上述3-氨基-6-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-哌啶-1-基]-2-氨基甲酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-4-羧酸甲酯制备该化合物，其是以的10毫克该酯在1毫升CH₂Cl₂中的溶液与0.5毫升的2M甲基胺的THF溶液混合。将反应封口并搅拌2天。将反应浓缩，得到黄色固体的3-氨基-6-[4-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)-哌啶-1-基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2，4-二羧酸2-酰胺4-甲基酰胺。将其溶解在0.5毫升的10％甲醇/CH₂Cl₂中，并加入HF-吡啶复合物，将反应封口及搅拌过夜。以N₂吹入反应中，溶解在乙酸乙酯，以NaHCO₃水溶液及NH₄Cl水溶液洗涤，干燥，浓缩并用10％甲醇/CH₂Cl₂洗脱的制备性TLC纯化。将谱带以25％甲醇/CH₂Cl₂洗脱，得到2.7毫克(35％)为黄色固体的标题化合物。

实施例36：

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-4-乙氧基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺的合成

将三氟甲烷磺酸3-氨基-2-氨基甲酰基-4-甲硫基-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-基酯(500毫克，1.29毫摩尔)溶解在甲醇(10毫升)中，冷至0℃，并加入溶解在水(15毫升)中的过氧单硫酸钾(950毫克，1.55毫摩尔)。将混合物搅拌18小时，然后将其过滤，得到86％产率的预期的三氟甲烷磺酸3-氨基-2-氨基甲酰基-4-甲烷亚磺酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-基酯。

将上述酯(100毫克，0.25毫摩尔)溶解在二噁烷(5毫升)中，加入4-羟基-哌啶(100毫克，1.0毫摩尔)，并将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物以氯化铵饱和溶液稀释，并将水相以二氯甲烷萃取数次。将合并的有机相经MgSO₄干燥及蒸发。最后将产物以柱层析分离法纯化，产生43毫克的3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-4-甲烷亚磺酰基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺(49％)。

将上述产物溶解在乙醇中，并加入235毫升的2.7M乙醇钠的乙醇溶液。将溶液在80℃加热6小时。将混合物倒入NH₄Cl水溶液中，并将水相以二氯甲烷萃取3次。将合并的相经MgSO₄干燥，过滤及蒸发。将产物以柱层析分离法纯化，产生23毫克的标题化合物(54％)。

由以上所述的方式制备以下的化合物：

3-氨基-6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)-4-乙氧基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-4-异丙氧基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(1，1-二氧代-1-硫代吗啉-4-基)-4-乙氧基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

生物特性的评价

由以下测量各个激酶使IκBα基底磷酸化的分析测定本发明化合物对IKKα及IKKβ的抑制作用。在分析时所使用的酶是以N-末端标识型的人IKKβ或IKKα，基底是带有IκBα(氨基酸1-54)的GST融合蛋白。

反应混合物(60微升)包括20mM HEPES pH 7.5、10mM MgCl₂、2mMMnCl₂、100mM NaCl、100μM Na₃VO₄、20mM β-甘油磷酸盐、1mM DTT、2％DMSO、25μM ATP、0.4μM[³³P]ATP(特定活性，3000Ci/毫摩尔)、IκBα基底、IKK酶及试验化合物。反应混合物包括或3.6微克/毫升IKKα及245微克/毫升IκBα，或0.9微克/毫升IKKβ及53微克/毫升IκBα。

将IκBα基底及ATP的溶液加入用试验化合物预培育5分钟的包括IKK酶的聚丙烯板中，开始反应。接着将反应混合物在25℃下培育1小时，放在冰上，并以加入150微升的10％三氟醋酸及5％焦磷酸二钠中止。在混合之后，将中止的反应混合物全部的内容物转移至预湿的PackardUniFilter滤板中，抽气及使用Packard Filtermate Harvester以250微升ddH₂O洗涤6次。接着将滤板以空气干燥，补充40微升Microscint 20闪烁流体，并使用Packard TopCount闪烁计数器定量³³P-标记的反应产物。

测试三倍连续的化合物的活性，并自使用SAS软件(SAS Institute，CaryNC)自剂量-反应曲线得到实现50％的酶活性抑制作用的抑制剂浓度(即IC₅₀)。基于Hill方程的非线性回归分析应用于抑制百分比-浓度数据。在所有的情况中，以HPLC证实化合物浓度。

利用IKKβ抑制测定方法评价了发明详述部分中表格中的所有的化合物，这些化合物的IC₅₀为10μM或更低。下面列出的化合物在本测定方法中的IC₅₀小于1μM：

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-4-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-4-[(E)-2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-咪唑-1-基-4-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-4-甲基-6-哌嗪-1-基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-羟基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基甲酰基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-哌嗪-1-基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-甲磺酰基-哌嗪-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(3-羟基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(3-氨基-丙酰基)-哌嗪-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-4-(4-羟基-4-苯基-哌啶-1-基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(2-氨基-乙酰基)-哌嗪-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基甲酰基-哌嗪-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-((S)-3-氨基-吡咯烷-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-((R)-3-氨基-吡咯烷-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-二甲基氨基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

4-(3-氨基-2-氨基甲酰基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-6-基)-哌嗪-2-羧酸甲基酯；

3-氨基-6-[4-(4-氨基-丁酰基)-哌嗪-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-((R)-2-氨基-丙酰基)-哌嗪-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-((S)-2-氨基-丙酰基)-哌嗪-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

6-(4-乙酰基氨基-哌啶-1-基)-3-氨基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(哌啶-4-基氨基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-羟基-4-甲基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-甲基氨基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-(4-甲磺酰基-苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-[(E)-2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-苯乙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基甲基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-苯基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-[(E)-2-(2-氯-苯基)-乙烯基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-(4-氟-苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-(4-甲氧基-苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(1-哌啶-4-基-甲酰基)-哌嗪-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-(3-硝基-苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(3-氨基-丙基氨基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(3-氨基甲酰基-哌嗪-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-[4-(3-甲基-脲基)-哌啶-1-基]-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

6-(4-乙酰基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-3-氨基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(3-氨基甲酰基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(3-氨基-全氢-氮杂环庚三烯-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(3-氨基甲基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-哌嗪-1-基-4-三氟甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；以及

3-氨基-6-(2-羟基甲基-哌啶-1-基)-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺。

评价了选自发明详述部分的表中的化合物对IKKα抑制活性。在本分析方法中，下列化合物的IC₅₀值为10μM或更低：

3-氨基-4-呋喃-2-基-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-4-异丙氧基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-甲基-4-(4-硝基-苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-甲基-4-((E)-苯乙烯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-4-(4-甲磺酰基-苯基)-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-4-[(E)-2-(4-氟-苯基)-乙烯基]-6-甲基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-哌嗪-1-基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-((E)-苯乙烯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；以及

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-4-(4-硝基-苯基)-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺。

Claims

1.式(I)化合物：

其中：

R¹是

(b)R₆(CH₂)_mO-，

(c)R₆OCH₂-，

(d)R₆(CH₂)_mNH-，

(e)R₆(CH₂)_p(CH＝CH)_m-，

(f)C_1-6烷基，任选部分或全部卤代及任选被1至2个R₉取代，

(h)-N(R₄)(R₅)，

R₂是

(a)C_1-6烷基，任选被1至2个R₁₀取代，

(b)C_1-6烷氧基，任选被1至2个R₁₀取代，

(c)C_1-6烷胺基，被1至2个R₁₀取代，

(d)杂环基，其选自1-哌啶基、1-哌嗪基、4-吗啉基、1-吡咯烷基、1，4-二氮杂环庚-1-基、1-氮杂环庚基、2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、氧杂氮杂环庚-4-基及4-硫代吗啉代，并任选被1至3个R₇取代，

(f)-N(R₄)(R₅)；

R₃选自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷基、卤素、-CN、-CO₂H、-CO₂C_1-6烷基、-S(O)_nC_1-6烷基、-NO₂、-OH、-CF₃、-N(R₄)(R₅)、-NHC(O)NHC_1-6烷基、-C(O)N(R₄)(R₅)及任选被卤素、C_1-6烷基、-CN或C_1-6烷氧基取代的苯基；R₄及R₅独立地选自H、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基、吡啶基、苄基、哌啶基及苯基乙基；

R₇选自-OH、-CN、氧代、-CO₂C_1-6烷基、-CO₂H、-C(O)N(R₄)(R₅)、-N(R₄)(R₅)、-CH₂N(R₄)(R₅)、-CH₂OH、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基N(R₄)(R₅)、-NHC(O)N(R₄)(R₅)、-S(O)_nC_1-6烷基、H₂NCH(R₈)C(O)-、HO(CH₂)_mCH₂CH(NH₂)C(O)-、HOCH(R₆)CH₂NH-及-C(O)杂环基，其中该杂环基选自哌啶基、哌嗪基、吗啉基及吡咯烷基，或R₇是2-羟乙基胺基、甲基脒基、羟基亚胺基、肼羰基、胺磺酰基、甲烷磺酰基胺基、甲基磺酰基肼基、2-羟丙基胺基、2，3-二羟丙基胺基、2-羟基-1-甲基乙基胺基、氨基甲酰基甲基胺基、N′-苯基肼羰基或甲苯-4-磺酰基胺基；

R₈选自C_1-6烷基、-(CH₂)_1-4NH₂、苯基或苄基；

R₉是-OH；

m是0或1；

n是0、1或2；及

p是1、2或3；

或其可药用盐、或互变体、或单独的异构体，

条件是如果R₁是苯基或杂芳基、C_1-6烷基、-CF₃时，则R₂不是C_1-6烷基。

2.根据权利要求1的化合物，其中：

R₁是

(b)R₆(CH₂)_mO-，

(c)R₆OCH₂-

(d)R₆(CH₂)_mNH-

(e)R₆(CH₂)_p(CH＝CH)_m-，

(f)C_1-6烷基，任选部分或全部卤代并任选被一至两个R⁹取代，

(g)C_1-8烷氧基，

(h)-OC_1-6烷基OH，

(i)-N(R₄)(R₅)，

R₂是杂环基，其中该杂环选自1-哌啶基、1-哌嗪基、4-吗啉基、1-氮杂环庚基、1-吡咯烷基、1，4-二氮杂环庚-1-基、2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、氧杂氮杂环庚-4-基及4-硫代吗啉代，任选被1至3个R₇取代，

R₈选自C_1-6烷基、-(CH₂)_1-4NH₂、苯基或苄基；

m是0或1；

n是0、1或2；及

p是1、2或3；

或其可药用盐、互变体、单独的异构体。

3.权利要求2的化合物，其中，如果R₁为C_1-6烷基，其不被取代。

4.根据权利要求1的化合物，其中：

R₁是

(a)苯基，任选被1至2个R₃基取代，

(b)C_1-6烷基，

(c)-C_2-3烷基OH，

(d)-CF₃；

(e)C_1-6烷氧基，

(f)-OC_2-3烷基OH；

R₂是杂环基，其中该杂环选自1-哌啶基、1-哌嗪基、1，4-二氮杂环庚-1-基及1-氮杂环庚基，并任选被1至3个R₇取代，

R₃选自-CH₃、-OCH₃、F、Cl、-CO₂CH₃、-SO₂CH₃及-NO₂；

R₄及R₅独立地选自H、-CH₃及苄基；

R₆是任选被1或2个选自Cl、F、C_1-6烷基、-CN、CO₂C_1-6烷基、C(O)NR₄R₅、-SO₂NH₂、-NO₂、-OH、-NH₂、-CF₃及C_1-6烷氧基的基团取代的苯基，或R₆是C_3-6环烷基、-CH₂OH、萘-2-基、萘-1-基或2-噻吩基；

R₇选自-OH、-CN、氧代、-CO₂C_1-6烷基、-C(O)N(R₄)(R₅)、-N(R₄)(R₅)、-CH₂N(R₄)(R₅)、-CH₂OH、C_1-6烷基、-C(O)C_1-6烷基N(R₄)(R₅)、-NHC(O)N(R₄)(R₅)、-S(O)_nC_1-6烷基、H₂NCH(R₈)C(O)-、

HO(CH₂)_mCH₂CH(NH₂)C(O)-、HOCH(R₆)CH₂NH-及-C(O)杂环基，其中该杂环基选自哌啶基、哌嗪基、吗啉基及吡咯烷基，或R₇是2-羟乙基胺基、甲基脒基、羟基亚胺基、肼羰基、胺磺酰基、甲烷磺酰基胺基、甲基磺酰基肼基、2-羟丙基胺基、2，3-二羟丙基胺基、2-羟基-1-甲基乙基胺基、氨基甲酰基甲基胺基、N′-苯基肼羰基或甲苯-4-磺酰基胺基；

R₈选自C_1-6烷基、-(CH₂)_1-4NH₂、苯基或苄基；

或其可药用盐、互变体、单独的异构体。

5.根据权利要求4的化合物，其中：

R₁是

(a)-CH₂CH₂CH₃，

(b)-OCH₂CH₃，

(c)-CF₃，

R₄及R₅独立地选自H、-CH₃及苄基；

R₆是任选被1或2个选自Cl、F、-CN、-CO₂CH₃、X-C(O)NR₄R₅、-NO₂、-OH、-NH₂、-CF₃及-CH₃的基团取代的苯基，或R₆是萘-2-基、萘-1-基或2-噻吩基；

R₇选自-OH、-CN、氧代、-C(O)NH₂、-NH₂、-CH₂NH₂、-CH₃、-NHC(O)NH₂、H₂NCH(R₈)C(O)-、HOCH(R₆)CH₂NH-，或R₇是2-羟乙基胺基、甲基脒基、甲烷磺酰基胺基、甲基磺酰基肼基、2-羟丙基胺基、2，3-二羟丙基胺基、氨基甲酰基甲基胺基或N′-苯基肼羰基；

R₈是-(CH₂)_1-4NH₂；

或其可药用盐、互变体、单独的异构体。

6.权利要求1的化合物，选自：

3-氨基-6-[1，4]二氮杂环庚-1-基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺

3-氨基-6-(4-氨基-哌啶-1-基)-44(E)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙烯基]-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

3-氨基-6-哌啶-4-基-4-丙基-噻吩并[2，3-b]吡啶-2-羧酸酰胺；

或其可药用盐、互变体、单独的异构体。

7.一种药物组合物，其包含权利要求1～6任一项的化合物。

8.权利要求1～6任一项的化合物在制备用于治疗炎性或自体免疫性疾病或症状的药物中的用途。

9.根据权利要求8的用途，其中炎性或自体免疫性疾病或症状选自骨关节炎、再灌注损伤、哮喘、多发性硬化症、居杨-巴贺综合征、克隆氏病、溃疡性结肠炎、牛皮癣、移植物抗宿主疾病、全身性红斑性狼疮、类风湿性关节炎、阿耳茨海默氏病、中毒性休克综合征、胰岛素依赖性糖尿病、急性及慢性疼痛、热伤害、成人呼吸性窘迫综合征、慢性阻塞性肺部疾病、继发于创伤的多器官损伤、急性肾小球肾炎、具有急性炎症成分的皮肤炎、急性化脓性脑膜炎或其它中枢神经系统异常、格雷氏疾病、重症肌无力、硬皮症及异位性皮炎。

10.根据权利要求8的用途，其中炎性或自体免疫性疾病或症状选自骨关节炎、类风湿性关节炎、克隆氏病、溃疡性结肠炎、哮喘、成人呼吸性窘迫综合征及慢性阻塞性肺部疾病。

11.权利要求1～6任一项的化合物在制备用于治疗动脉粥样硬化症、心肌梗塞或中风的药物中的用途。

12.权利要求1～6任一项的化合物在制备用于治疗选自淋巴-、骨髓-及上皮-衍生的恶性肿瘤的药物中的用途。

13.权利要求1～6任一项的化合物在制备用于治疗选自白血病、淋巴瘤、乳腺癌、胃癌、结肠直肠癌、肺癌及胰腺癌的癌症的药物中的用途。

14.一种制备式(I)化合物的方法：

其中R₁及R₂是如权利要求4的定义，该方法包含：

(a)将式(XVa)化合物与2-氯代或2-溴代乙酰胺在适合的碱存在下并在适合的溶剂中反应，以形成式(XVIb)中间物

(b)将式(XVIb)中间物与适合的磺酸化试剂在适合的碱存在下并在适合的溶剂中反应，以形成式(XVIIb)的磺酸酯，其中R’为CF₃

(c)将式(XVIIb)中间物与适当的亲核试剂在第一种适合的碱存在下反应以引入R₂，接着加入第二种适合的碱及进一步的反应，以形成预期的式(I)化合物

15.根据权利要求14的方法，其特征在于，步骤(c)所述的第一种适合的碱为三乙胺。