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PATENTANSPRÜCHE
1. Verfahren zur Herstellung von 7-(a-substituierten-Aceta- mido)-3-cephem-4-carbonsäuren der allgemeinen Formel:
EMI1.1
worin bedeuten: R1 Hydroxy(niedrig)alkylthio oder heterocyclisches Thio, das durch Niedrigalkyl oder Alkanoyloxy(niedrig)alkyl substituiert sein kann, R2 Niedrigalkyl, Niedrigalkylthio(niedrig)alkyl, Acyl(niedrig)alkyl, Acylamino(niedrig)alkyl.
Niedrigalkenyl, Ar(niedrig)alkenyl oder Niedrigalkinyl, R3 Was serstoff, Niedrigalkyl oder Aryl und X Schwefel oder Sulfinyl, und deren Estern, Amiden und Säureanhydriden an der Carboxygruppe und ihrer pharmazeutisch verträglichen Salze, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der allgemeinen Formel:
EMI1.2
worin R2, R3 und X die oben angegebenen Bedeutungen haben und Y Azido oder Niedrigalkanoyloxy bedeutet, oder ihre Ester, Amide oder Säureanhydride an der Carboxygruppe ode Salze davon mit einer Thiolverbindung der allgemeinen Formel: Rl-H (V worin Rl die oben angegebenen Bedeutungen hat, oder einem Alkalimetallsalz derselben umsetzt.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass R1 Hydroxy(niedrig)alkylthio, R2 Niedrigalkyl oder Niedri alkenyl, R3 Wasserstoff und X Schwefel bedeuten, sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze davon.
3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass Rl Hydroxyäthylthio und R2 Methyl oder Allyl bedeuten.
4. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass Rl heterocyclisches Thio, das durch Niedrigalkyl oder Alkanoyloxy(niedrig)alkyl substituiert sein kann, R2 Niedrigalkyl, Niedrigalkylthio(niedrig)alkyl, Acyl(niedrig)alkyl, Acylamino(niedrig)alkyl, Niedrigalkenyl, Ar(niedrig)alkenyl oder Niedrigalkinyl, R3 Wasserstoff, Niedrigalkyl oder Aryl und X Schwefel oder Sulfinyl bedeuten, sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze davon.
5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass X Schwefel und R3 Wasserstoff bedeuten.
6. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass Rl eine ungesättigte, 5-gliedrige heteromonocyclische Thiogruppe, die ein Schwefelatom und 1 bis 3 Stickstoffatome, die durch Niedrigalkyl substituiert sind, enthält, R2 Niedrigalkyl, X Schwefel und R3 Niedrigalkyl bedeuten.
7. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass Ri eine ungesättigte, 5-gliedrige heteromonocyclische Thiogruppe, die ein Schwefelatom und 1 bis 3 Stickstoffatome enthält und durch Niedrigalkyl substituiert ist, R2 Niedrigalkyl, X Sulfinyl und R3 Wasserstoff oder Aryl bedeuten.
8. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man eine erhaltene Carbonsäure der Formel I durch Umsetzung mit einer alkalischen, erdalkalischen oder organischen Base in das entsprechende Salz überführt.
Die Erfindung betrifft ein neues Verfahren zur Herstellung von 7-(a-substituierten-Acetamido)-3-cephem-4-carbonsäuren und deren Estern, Amiden und Säureanhydriden an der Carboxygruppe die wertvolle pharmakologische Eigenschaften besitzen.
Die nach den erfindungsgemässen Verfahren erhältlichen 7-(a-substituierten-Acetamido)-3-cephem-4-carbonsäuren können durch die allgemeine Formel dargestellt werden
EMI1.3
worin bedeuten: R1 Hydroxy(niedrig)alkylthio oder heterocyclisches Thio, das durch Niedrigalkyl oder Alkanoyloxy(niedrig)alkyl substituiert sein kann, R2 Niedrigalkyl. Niedrigalkylthio(niedrig)alkyl. Acyl(niedrig)alkyl, Acylamino(niedrig)alkyl, Niedrigalkenyl, Ar(niedrig)alkenyl oder Niedrigalkinyl, R3 Wasserstoff, Niedrigalkyl oder Aryl und X Schwefel oder Sulfinyl.
Das hier in Verbindung mit den Resten Alkan, Alken oder Alkin, wie zum Beispiel Alkyl, Alkenyl oder Alkinyl. verwendete Ausdruck niedrig steht. wenn nichts anderes angegeben ist, für eine Gruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen.
Ein geeignetes Beispiel für Hydroxy(niedrig)alkylthio ist ein solches mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, wie 2-Hydroxyäthylthio, 2-Hydroxypropylthio, 3-Hydroxypropylthio, 2-Hydrox > -buthyl- thio, 3-Hydroxybuthylthio, 2-Hydroxypenthylthio. 3-lly droxy- pentylthio, 2-Hydroxyhexylthio. 3-H'droxvhe < yl thio 5-H ydroxyhexylthio oder dergleichen. und bevorzugt Ist ein solches mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, insbesondere ein solches mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen.
Bei der heterocyclischen Thiogruppe kann es sich um eine ungesättigte, monocyclische, heterocyclische Thiogruppe handeln, die mindestens ein Heteroatom aus der Gruppe Sauerstoff, Schwefel, Stickstoff oder dergleichen enthält. Ein geeignetes Beispiel für eine heterocyclische Thiogruppe ist ein solches mit einer heterocyclischen Gruppe, wie zum Beispiel eine ungesättigte, 5-gliedrige heteromonocyclische Gruppe, die ein Schwefelatom und 1 bis 3 Stickstoffatome enthält, beispielsweise Thiazolyl, Thiadiazolyl (zum Beispiel 1 .2,4-Thiadiazolyl, 1,3,4-Thiadiazolyl oder 1 ,2,5-Thiadiazolyl) und dergleichen, eine ungesättigte 5-gliedrige heteromonocyclische Gruppe, die ein Sauerstoffatom und 1 bis 3 Stickstoffatome enthält, beispielsweise Oxazolyl, Oxadiazolyl (zum Beispiel 1,2,4-Oxadiazolyl, 1,3,4-Oxadiazolyl oder 1,2,5-Oxadiazolyl) und dergleichen, eine ungesättigte,
5-gliedrige heteromonocyclische Gruppe, die 2 bis 4 Stickstoffatome enthält. beispielsweise Triazolyl (zum Beispiel 4H-1,2,4-Triazolyl oder 2H-1 .2,3-Triazolyl), Tetrazolyl (zum Beispiel 1 H-Tetrazolyl oder 2H-Tetrazolyl) und dergleichen, und diese heterocyclischen Gruppen können gegebenenfalls durch Niedrigalkyl (zum Beispiel Methyl, Methyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, t-Butyl, Cyclopentyl, Pentyl, Cyclohexyl oder Hexyl), vorzugsweise ein solches mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, oder Alkanoyloxy(niedrig)alkyl (zum Beispiel Formyloxymethyl, Acetoxymethyl, Acetoxyäthyl.
Acetoxypropyl, Propionyloxymethyl, Butyryloxymethyl, Isobutyryloxymethyl, Isobutyryloxyäthyl, Isobutyryloxypropyl, Hexanoyloxymethyl, Pivaloyloxymethyl, Lauroyloxymethyl, Lauroyloxyäthyl, Lauroyloxypropyl, Palmitoyloxymethyl, Palmitoyloxyäthyl oder Stearoyloxymethyl), vorzugsweise durch niederes Alkanoyloxy(niedrig)alkyl und höheres Alkanoyloxy(niedrig)alkyl mit 2 bis 24 Kohlenstoffatomen und insbesondere mit 5 bis 17 Kohlenstoffatomen substituiert sein.
Ein geeignetes Beispiel für Niedrigalkyl ist ein solches mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, wie Methyl, Äthyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, t-Buty, Pentyl, Hexyl oder dergleichen, und vor
zugsweise ein solches mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen.
Ein geeignetes Beispiel für Niedrigalkylthio(niedrig)-alkyl ist ein solches mit 2 bis 12 Kohlenstoffatomen und dazu gehört auch eine Gruppe, in der das oben erwähnte Niedrigalkyl durch Niedrigalkylthio, wie Methylthio, Äthylthio, Propylthio, Isopropylthio, Butylthio, t-Butylthio, Pentylthio, Hexylthio oder dergleichen, substituiert ist, und vorzugsweise ein solches mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen, insbesondere ein solches mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen.
Ein geeignetes Beispiel für Niedrigalkylthio(niedrig)alkyl kanoyl(niedrig)alkyl mit 2 bis 12 Kohlenstoffatomen, in dem das oben erwähnte Niedrigalkyl durch Niedrigalkanoyl (zum Beispiel Formyl, Acetyl, Propionyl oder Butyryl) substituiert ist, Aroyl(niedrig)alkyl mit 7 bis 14 Kohlenstoffatomen, wie Benzoyl(niedrig)alkyl, in dem das oben erwähnte Niedrigalkyl durch Aroyl (zum Beispiel Benzoyl, Toluoyl oder Xyloyl) substituiert ist, heterocyclisches Carbonyl(niedrig)alkyl mit 6 bis 12 Kohlenstoffatomen, in dem das oben erwähnte Niedrigalkyl durch heterocyclisches Carbonyl (zum Beispiel Nicotinoyl, Furoyl oder Thienoyl) substituiert ist oder dergleichen.
Ein geeignetes Beispiel für Acylamino(niedrig)alkyl ist Niedrigalkanoylamino(niedrig)alkyl mit 2 bis 12 Kohlenstoffatomen, in dem das oben erwähnte Niedrigalkyl durch Niedrigalkanoylamino (zum Beispiel Formamido, Acetamido, Propionamido oder Butyramido) substituiert ist, Aroylamino(niedrig)alkyl mit 7 bis 14 Kohlenstoffatomen, wie Benzamido(niedrig)alkyl, in dem das oben erwähnte Niedrigalkyl durch Aroylamino (zum Beispiel Benzamido oder Toluamido) substituiert ist, heterocyclisches Carbonylamino(niedrig)alkyl mit 6 bis 12 Kohlenstoffatomen, in dem das oben erwähnte Niedrigalkyl durch heterocyclisches Carbonylamino (zum Beispiel Nicotinamido, Furamido oder Thiophencarboxyamido) substituiert ist oder dergleichen.
Ein geeignetes Beispiel für Niedrigalkenyl ist ein solches mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen, wie Vinyl, l-Propenyl. Allyl, lso- propenyl, 2-Butenyl, 3-Pentenyl, 1-Cyclohexenyl, 1,3-Cyclohexadienyl oder dergleichen, und vorzugsweise ein solches mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen, insbesondere ein solches mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen, insbesondere ein solches mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen.
Ein geeignetes Beispiel für Ar(niedrig)alkenyl ist ein solches mit 8 bis 9 Kohlenstoffatomen, wie Styryl, Cinnamyl oder dergleichen.
Ein geeignetes Beispiel für Niedrigalkinyl ist ein solches mit 2 bis 4 Kohlenstoffatomen, wie Äthinyl, I-Propinyl, 2-Propinyl, l-Butinyl, 2-Butinyl, 3-Butinyl oder dergleichen.
Ein geeignetes Beispiel für Aryl ist ein solches mit 6 bis 10 Kohlenstoffatomen, wie Phenyl, Tolyl, Xylyl, Mesityl, Cumenyl, Naphthyl oder dergleichen, und vorzugsweise ein solches mit 6 bis 8 Kohlenstoffatomen.
Genannt werden unter den bereits erwähnten Derivaten an der Carboxygruppe, nämlich Ester, Amide und Säureanhydride, vorzugsweise die Ester (zum Beispiel die Methyl-, Trichloräthyl-, Pivaloyloxymethyl-, 1-Cyclopropyläthyl-, Acetoxymethyl-, Methoxymethyl-, Acetonyl- oder Phenacylester).
Ein geeignetes Beispiel für pharmazeutisch verträgliche Salze ist ein anorganisches Salz, wie zum Beispiel Alkalimetallsalz (zum Beispiel Natrium- oder Kaliumsalz), ein Erdalkalimetallsalz (zum Beispiel das Calcium- oder Magnesiumsalz) oder ein Salz mit einer organischen Base, wie Trimethylamin, Triäthylamin, Dicyclohexylamin oder dergleichen.
Das erfindungsgemässe Verfahren besteht darin, dass man eine Verbindung der allgemeinen Formel:
EMI2.1
worin R2, R3 und X die oben angegebenen Bedeutungen haben und Y Azido oder Niedrigalkanoyloxy bedeutet, oder ihre Ester, Amide oder Säureanhydride an der Carboxygruppe oder Salze davon mit einer Thiolverbindung der allgemeinen Formel:
R1-H (V) worin R, die oben angegebenen Bedeutungen hat, oder einem Alkalimetallsalz derselben umsetzt.
Ein geeignetes Beispiel für Niedrigalkanoyloxy ist ein solches mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, zum Beispiel Formyloxy, Acetoxy, Propionyloxy, Butyryloxy, Pentanoyloxy oder dergleichen, und vorzugsweise ein solches mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, insbesondere ein solches mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen.
Bezüglich geeigneter Beispiele für Hydroxy(niedrig)alkylthio, heterocyclisches Thio oder der Derivate der Verbindungen der Formel (IV) an der Carboxygruppe sei auch auf diejenigen Beispiele verwiesen, die für die Verbindung der Formel (1) angegeben sind. Bei den Salzen der Verbindung der Formel (IV) kann es sich um Alkalimetallsalze (zum Beispiel Natriumoder Kaliumsalze), Erdalkalimetallsalze (zum Beispiel Calciumoder Magnesiumsalze), um Salze mit einer organischen Base, wie Trimethylamin, Dicyclohexylamin oder dergleichen, handeln.
Die Derivate der Verbindung der Formel (IV) an der Carboxygruppe können im Verlaufe der Umsetzung in ihre freie Form überführt werden.
Das erfindungsgemässe Verfahren kann in einem Lösungsmittel, zum Beispiel in Wasser, Aceton, Chloroform. Nitrobenzol, Dimethylformamid, Methanol, Äthanol, Äther, Tetrahydrofuran, Dimethylsulfoxyd oder irgendeinem anderen organischen Lösungsmittel, das keinen nachteiligen Einfluss auf die Umsetzung ausübt, vorzugsweise in einem stark polaren Lösungsmittel, durchgeführt werden. Unter diesen Lösungsmitteln können die hydrophilen Lösungsmittel in Mischung mit Wasser verwendet werden. Die Umsetzung wird vorzugsweise in einem etwa neutralen Medium durchgeführt.
Wenn die Verbindung der Formel (IV) oder die Thiolverbindung der Formel (V) in ihrer freien Form verwendet wird, wird die Umsetzung vorzugsweise in Gegenwart einer Base, wie zum Beispiel eines Alkalimetallhydroxyds, eines Alkalimetallcarbonats, eines Alkalimetallbicarbonats, von Trialkylamin und dergleichen, durchgeführt. Die Reaktionstemperatur unterliegt keiner Beschränkung und die Umsetzung wird in der Regel bei Raumtemperatur oder unter Erwärmen durchgeführt. Das Reaktionsprodukt kann nach üblichen Verfahren aus der Reaktionsmischung isoliert werden.
Da die Ausgangsverbindung der Formel (IV) und die erfindungsgemässe Verbindung der Formel (1) beide vergleichsweise instabile Verbindungen sind und im Verlaufe der Umsetzung leicht zersetzt werden, ist es zweckmässig, die Umsetzung und die Isolierung des Produktes unter milden Bedingungen durchzuführen.
Wenn es sich bei den so hergestellten Verbindungen der Formel (1) um freie Säuren handelt, können sie nach üblichen Verfahren in ihre pharmazeutisch verträglichen Salze überführt werden.
Es waren bereits verschiedene N-substituierte Derivate der 7-Amino-3-cephem-4-carbonsäure bekannt [Belg. Patent Nr.798 927, US-Patent Nr.3 382 238, Britisches Patent Nur.998265, Chem. Abstr. 60(1964), 2963a]. Die dort beschriebenen Verbindungen haben antibakterielle Eigenschaften.
Die Verbindungen der Formel (1) weisen eine hohe antibakterielle Aktivität auf und hemmen das Wachstum einer Reihe von Mikroorganismen einschliesslich der gram-positiven und gram-negativen Bakterien. Bei der therapeutischen Verabreichung werden die Cephalosporinverbindungen in Form von pharmazeutischen Präparaten verwendet, welche diese
Verbindungen in Mischung mit pharmazeutisch verträglichen
Trägern, wie zum Beispiel einem organischen oder anorgani schen Feststoff, oder einem flüssigen Hilfsstoff enthalten und sich für die orale, parenterale oder externe Verabreichung eig nen. Die pharmazeutischen Präparate können in fester Form, zum Beispiel in Form von Kapseln, Tabletten, Dragees, Salben oder Suppositorien, oder in flüssiger Form, zum Beispiel in
Form von Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen, vorlie gen.
Gewünschtenfalls können die oben angegebenen Präpa rate auch Hilfssubstanzen, Stabilisatoren, Netz- oder Emulgier mittel, Puffer und andere üblicherweise verwendete Zusätze enthalten.
Obgleich die Dosierung der Verbindungen variiert und abhängt von dem Alter und dem Gesundheitszustand des
Patienten, hat sich eine mittlere Einfachdosis von etwa 100 mg,
250 mg und 500 mg der Verbindungen als wirksam zur Behand lung von durch bakterielle Infektionen hervorgerufenen
Erkrankungen erwiesen. Im allgemeinen können Mengen zwischen etwa 10 und etwa 1000 mg oder noch höhere Mengen verabreicht werden.
Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele näher erläutert.
Beispiele (A) 3,18 g Methylthioessigsäure wurden in 3,4 g Triäthylamin gelöst und 4,22 g Benzoylchlorid wurden zu der Lösung bei - 10 bis - 15 "C zugegeben und dann wurde die Mischung bei der gleichen Temperatur 20 Minuten lang gerührt. Daneben wurde 5,45 g 7-Aminocephalosporansäure in einer Mischung aus 2,42 g Triäthylamin, 10 ml Aceton und 10 ml Wasser gelöst und die Mischung wurde aus -5 bis -10"C abgekühlt. Zu der Mischung wurde die oben erhaltene Lösung bei -5 bis - 10 C zugetropft, während die Mischung durch Zugabe von Triäthylamin bei pH 7,5 bis 8 gehalten wurde. Die Reaktionsmischung wurde mit Benzol gewaschen. Die wässrige Lösung wurde auf pH 4 eingestellt und der Niederschlag wurde abfiltriert.
Das Filtrat wurde dreimal mit Äther gewaschen, auf pH 1 eingestellt und dann dreimal mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet und das Äthylacetat wurde unter vermindertem
Druck abdestilliert. Der weisse pulverförmige Rückstand wurde mit einer Mischung aus Äthylacetat und Äther gewaschen und man erhielt 3,4 g 7-Methylthioacetamidocephalosporansäure, F. 164 0C (Zers.). 720 mg der so erhaltenen 7-Methylthioacetamidocephalosporansäure und 340 mg Natriumbicarbonat wurden in einem Phosphatpuffer (pH 5,2,30 ml) gelöst.
Zu der Lösung wurden 330 mg 4-Methyl-4H-1 ,2,4-triazol-3-thiol zugegeben und die Mischung wurde 4,5 Stunden lang bei 60 bis 65 "C gerührt. Die Reaktionsmischung wurde abgekühlt, mit 1 00/oiger Chlorwasserstoffsäure auf pH 1 bis 2 eingestellt, mit Äthylacetat gewaschen und dann lyophilisiert. Zu dem Rückstand wurden 70 ml Aceton zugegeben und die unlösliche Substanz wurde abfiltriert. Aus dem Filtrat wurde Aceton abdestilliert und der Rückstand wurde mit einer geringen Menge Aceton und dann mit einer geringen Menge Wasser gewaschen unter Bildung von 260 mg 7-Methylthioacetamido-3-(4-methyl 4H-1 ,2,4-triazol-3-yl)thiomethyl-3- cephem-4-carbonsäure, F. 154 bis 159 0C (Zers.).
IR-Spektrum v Nujol cm-1:1765, (Schulter) 1650 max NMR-Spektrum 6(D2O+NaHCO3) ppm: 2,17 (3H, s), 3,33 (2H, s), 3,38(1 H, d,J-- 17 Hz), 3,70 (3H, s), 3,77(1H, d,J=13 Hz), 3,86(1H,d,J=17 Hz), 4,30(1H, d,J=13 Hz), 5,08 (I H,d,J=4,5 Hz), 5,58(1 H,d,J=4,5 Hz), 8,50(1H,s) (B) 15 g Kalium-3-(1-hydroxyacetyl)dithiocarbazat wurden über einen Zeitraum von 10 Minuten bei 0 bis 5 "C langsam zu einer Mischung aus 20 ml Schwefelsäure und 100 ml Äthylacetat zugegeben und die Mischung wurde 1 Stunde lang bei der gleichen Temperatur gerührt.
Die Reaktionsmischung wurde in 11 Äthylacetat gegossen und die Mischung wurde mit einer wässrigen gesättigten Natriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck abdestilliert und man erhielt 3,7 g 5-Hydroxymethyl-1,3,4-thiadiazol-2-thiol, F. 120 bis 125"C.
Unter Rühren wurden bei 0 bis 5 C über einen Zeitraum von 30 Minuten 7,9 g Isobutyrylchlorid zu einer Lösung von 5,0 g des oben erhaltenen 5-Hydroxymethyl-1 ,3,4-thiadiazol-2-thiols in 50 ml Pyridin zugetropft. Die Lösung wurde 30 Minuten lang bei der gleichen Temperatur und 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Zu der Reaktionsmischung wurden 100 ml Wasser zugegeben und die Mischung wurde auf einem Wasserbad von 50"C unter vermindertem Druck eingeengt. Zu dem öligen Rückstand wurden 100 ml kaltes Wasser zugegeben und unter Rühren wurden bei Raumtemperatur 9,3 g Natriumbicarbonat vorsichtig zu der Mischung zugegeben.
Nach 2,5stündigem Rühren bei Raumtemperatur wurde die Reaktionsmischung mit Äther gewaschen, mit 1 O0loiger Chlorwasserstoffsäure angesäuert und mit Äther extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und das Lösungsmittel wurde abdestilliert, wobei 7,7 g eines öligen Rückstandes erhalten wurden. Der Rückstand wurde an 100 g Silikagel unter Verwendung einer Mischung aus Benzol und Chloroform (7-3) als Entwicklungslösungsmittel chromatographiert und man erhielt 4,0 eines reinen Öls aus 5-lsobutylr ioxymeth i 1.3,4-thiadiazol- 2-thiol [NMR-Spektrum (CCI4,6,1.23 ( H,d.l 7 1 l). 2.54(111. q.
J=7 Hz), 5,1 (2H, s)].
Eine Lösung von 2,50 g des oben erhaltenen 5-lsobtitrylo- xymethyl-l ,3,4-thiadiazol-2-thiols in 5 ml Aceton wurde zu einer Lösung von 3,60 g der in Beispiel (A) erhaltenen 7-Methylthioacetamidocephalosporansäure und 1,68 g Natriumbicarbonat in 76 ml eines pH 6,4-Phosphatpuffers zugegeben und die Mischung wurde 7 Stunden lang bei 65 C gerührt. Die Reaktionsmischung wurde abgekühlt und mit Äthylacetat gewaschen. Die wässrige Schicht wurde mit verdünnter Chlorwasserstoffsäure auf pH 2 eingestellt und mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und eingeengt unter Bildung von 4,0 g eines Öls aus 7-Methyl thioacetamido-3-(5-isobutyloxymethyl-1 ,3,4-thiadiazol-2-yll thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure.
Das Ol wurde unter Verwendung einer Mischung aus Äthylacetat. Chloroform und Essigsäure (20:20:1) als Entwicklungslösungsmittel an Silikagel chromatographiert und das Eluat wurde in Fraktionen zu 50 ml aufgetrennt. Die sechste bis zehnte Fraktion wurde gesammelt und eingeengt. Nach dem Lösen des Rückstandes in 8 ml Methanol wurden unter Kühlen zu der Lösung 16 ml einer Natriuma-äthylhexanoatlösung zugegeben und stehengelassen, um die Kristalle auszufällen. Die Kristalle wurden durch Filtrieren gesammelt, mit kaltem Methanol und Äther gewaschen und getrocknet unter Bildung von 1,81 g Natrium-7-methylthioace tamido-3-(5-isobutyryloxymethyl-1 ,3,4-thiadiazol-2-yl)thiomet- hyl-3-cephem-4-carboxylat, F. 200,5 bis 202 0C (Zers.).
(C) Nach einem ähnlichen Verfahren wie in den Beispielen (A) und (B) wurden unter Verwendung der entsprechenden Ausgangsmaterialien die folgenden Verbindungen hergestellt: (1) 7-Methylthioacetamido-3-( 1 ,3,4-thiadiazol-2-yl)-thiomet- hyl-3-cephem-4-carbonsäure, F. 128 bis 131 C (Zers.), (2) 7-Methylthioacetamido-3-(1 -methyl-1 H-tetrazol-5yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure, F. 81 bis 84 "C.
(3) 7-Methylthioacetamido-3-(5-methyl-1 ,3,4-thiadiazol-2 yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure, F. 167 bis 168 C (Zers.), (4) 7-Methylthioacetamido-3-(3-methyl-1,2,4-thiadiazol-5- yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure, F. 179 bis 180 C (Zers.).
(5) 7-Allylthioacetamido-3-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2- yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure, F. 156 bis 1580C(Zers.), (6) 7-Allylthioacetamido-3-(3-methyl-1 ,2,4-thiadiazol-5- yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure, F. 114 bis 115"C, (7) 7-(2-Propinylthioacetamido3-(3-methyl-1 ,2,4-thiadiazol- 5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure, F. 127 bis 129"C, (8) 7-(2-Allylthio-2-phenylacetamido)-3-(5-methyl-1 ,3,4-thia- diazol-2-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure, F. 89 bis 94"C (Zers.), (9) 7-Isopropylthioacetamido-3-(5-methyl-1 ,3,4-thiadiazol-2- yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure, F.
156 bis 157 "C, (10) 7-t-Butylthioacetamido-3-(5-methyl- 1 ,3,4-thiadiazol-2- y\5thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure, F. 154 bis 155"C(Zers.), (11) 7-(2-Methylthio-2-methylacetamido)-3-(5-methyl-1,3,4- thiadiazol-2-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure, 7-(2-Meth hylthio-2-methylacetamido)-3-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2- yl)thiomethyl-3-cemphem-4-carbonsäure, F. 171 bis 172"C, (12) 7-Methylthioacetamido-3-(5-palmitoyloxy-methyl-1 1,3,4- thiadiazol-2-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure (Pulver) und ihr Natriumsalz, F. 145 bis 1500C (Zers.).
(D) 6,88 g der in Beispiel (A) erhaltenen 7-(2-Methylthioacetamido)cephalosporansäure wurden in 20 ml einer wässrigen
Lösung von 1,68 g Natriumbicarbonat gelöst. Zu der Lösung wurden 120 ml eines pH 6,86-Phosphatpuffers und 4,68 g 2-Mercaptoäthanol unter Rühren zugeben und die Mischung wurde 4 Stunden lang bei 60 C gerührt, während sie bei pH 6,5 bis 6,8 gehalten wurde. Nach dem Abkühlen wurde die Reaktionsmischung auf pH 8 bis 9 eingestellt und mit Äthylacetat gewaschen. Die wässrige Lösung wurde auf pH 2 eingestellt und mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser und dann mit einer wässrigen gesättigten Natriumchloridlösung gewaschen und getrocknet.
Das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck abdestilliert und man erhielt 0,2 g 7-(2 Methylthioacetamido)-3-(2-hydroxyäthyl)thiomethyl-3-cephem- 4-carbonsäure, F. 134 bis 138"C.
IR-Spektrum V Nujol cm-1:3310,1775,1655,1530 max (E) 7,73 g 7-(2-Allylthioacetamido)cephalosporansäure wurden in 20 ml einer wässrigen Lösung von 1,68 g Natriumbicarbonat gelöst. Zu der Lösung wurden 6,2 g 2Mercaptoäthanol, 120 ml eines pH 6,8-Phosphatpuffers und eine wässrige Natriumbicarbonatlösung zugegeben und die Mischung wurde 2 Stunden lang bei 60"C gerührt, während ihr pH bei 6,4 bis 6,5 gehalten wurde. Die Reaktionsmischung wurde mit Natriumbicarbonat auf pH 7,5 eingestellt und mit Äthylacetat gewaschen. Zu der wässrigen Schicht wurde Äthylacetat zugegeben und die Mischung wurde mit Chlorwasserstoffsäure auf pH 4 bis 5 eingestellt. Die Äthylacetatschicht wurde abgetrennt und mit Wasser und dann mit einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung gewaschen.
Das Lösungsmittel wurde abdestilliert und man erhielt 4,2 g eines hygroskopischen Pulvers aus 7-(2 Allylthioacetamido)-3-(2-hydroxyäthyl)thiomethyl-3-cephem-4- carbonsäure.
(F) Zu einer Lösung von 10 g 2-Methylthio-2-phenylessigsäure in 100 ml Methylenchlorid und 5 ml Essigsäure wurden bei 0 C 6,5 mg Natriumwolframat und 6 ml Wasserstoffperoxyd zugegeben. Die erhaltene Mischung wurde bei 3" so lange gerührt, bis die Ausgangsverbindungen verschwunden waren. Zu der Reaktionsmischung wurde Wasser zugegeben und das Methylenchlorid wurde abdestilliert. Der Rückstand wurde stark angesäuert und nach der Zugabe von Natriumchlorid wurde er viermal mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel wurde abdestilliert. Der Rückstand wurde aus Methylenchlorid umkristallisiert und man erhielt 7 g 2-Methansulfinyl-2phenylessigsäure, F. 123 bis 126"C.
Das aus der 2-Methansulfinyl-2-phenylessigsäure in Methylenchlorid bei -78 C in Gegenwart von lsobutylchlorformiat erhaltene gemischte Anhydrid wurde auf einmal zu 7-Aminocephalosporansäure, die in Methylenchlorid, abgekühlt auf -78 C, gelöst war, in Gegenwart von Trimethylsilylacetamid zugegeben.
Die erhaltene 7-(2-Methansulfinyl-2-phenylacetamido)cephanlosporansäure wurde auf ähnliche Weise wie in den Beispielen (A) und (B) mit 5-Methyl-1,3,4-thiadiazol-2-thiol behandelt unter Bildung der 7-(2-Methansulfinyl-2-phenylaceta mido)-3-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)thiomethyl-3-cephem-4- carbonsäure, F.
110 bis 1300C[lR-Spektrum (Nujol) 3300, 1785, 1715, 1680cm-1, NMR-Spektrum (D2O+NaHCO3, 3)2,51 (s, 3H), 272(s, 3H), 3,75,3,42 (AB-q, 2H, 1=17 Hz), 4,00 (d, 1 H, J=14 Hz), 4,50 (d, 1 H, J=13 Hz), 5,10 (d, 1 H, J=4,5 Hz), 5,68 (d, 1H,J=4,5 Hz)] (G) Das aus Methansulfinylessigsäure in Methylenchlorid bei -78 C in Gegenwart von lsobutylchlorformiat hergestellte gemischte Anhydrid von Methansulfinylessigsäure wurde auf einmal zu 7-Aminocephalosporansäure,
gelöst in Methylenchlorid und abgekühlt auf -78 "C, in Gegenwart von Trimethylsilylacetamid zugegeben. Die erhaltene 7-Methansulfinylacetamidocephalosporansäure wurde auf ähnliche Weise wie in den Beispielen (A) und (B) mit 5-Methyl-1,3,4-thiadiazol-2-thiol behandelt unter Bildung der 7-Methan-sulfinylacetamido-3-(5 methyl- 1 ,3,4-thiadiazol-2-yl)-thiomethyl-3-cephem-4- carbonsäure, F. 117 bis 119 C (Zers.).