CH321004A - Procédé d'obtention du chlorhydrate de chlortétracycline - Google Patents

Description

  
 



  Procédé d'obtention du chlorhydrate de chlortétracycline
 Le présent brevet additionnel concerne, comme le brevet principal No 303460, l'extraction du chlorhydrate de chlortétracycline à partir des moûts de fermentation de Streptomyces Aureofaciens. La chlortétracycline, substance antibiotique connue également sous la marque     Auréomycine  ,    est un dérivé naphthacénique à savoir la chloro-7-diméthylamino  4-octahydro-l,    4, 4a, 5, 5a, 6, 11, 12a-pentahydroxy-3, 6, 10, 12, 12a-méthyl-6-dioxo-l,   1 l-naphtacène-carboxamide-2    ou une forme tau  tomère.    L'invention a pour but de séparer la chlortétracycline des impuretés contenues dans le moût de fermentation.



   Ainsi qu'il est connu, l'une des grosses diffi  cultés    rencontrées dans la production commerciale des antibiotiques, tels que la chlortétracycline, par des procédés de fermentation, réside dans l'extraction de la substance active à partir du milieu de culture (moût de fermentation) dans lequel elle a pris naissance. A cet égard il est connu d'alcaliniser le milieu de culture de façon à former un précipité, ou gâteau (dû à la présence dans le milieu de culture d'ions solubles de métaux alcalino-terreux, par exemple calcium, baryum, strontium ou magnésium utilisés comme constituants du milieu nutritif pour le champignon), de séparer ce précipité de la liqueur surnageante et d'extraire le précipité au moyen d'un solvant.



   Dans le brevet principal, on a décrit, pour effectuer une telle extraction, un nouveau procédé qui présente des avantages sur les modes opératoires antérieurement connus. Ce procédé comporte les stades suivants: acidification à un pH d'environ 1,5 puis filtration du jus acide, traitement du filtrat pour en précipiter la chlortétracycline brute que   l'on    isole par filtration, puis traitement du gâteau alcalin de filtration par de l'isopropanol acidifié pour en extraire la chlortétracycline, salage de l'extrait isopropylique acide et concentration de la solution en présence d'éthoxyéthanol pour provoquer la cristallisation du chlorhydrate de chlortétracycline.

   Le stade préliminaire d'acidification et de clarification est essentiel dans ce procédé et a, sur le procédé qui comporte l'alcalinisation directe du milieu de culture et le traitement du précipité résultant au moyen du solvant choisi, l'avantage d'une plus grande économie dans l'emploi du solvant et d'un plus grand degré de pureté dans l'extrait.



   Le présent brevet additionnel a pour objet un procédé d'extraction sous forme de son chlorhydrate de la chlortétracycline présente dans un milieu de culture liquide résultant de la croissance de Streptomyces Aureofaciens, caractérisé en ce qu'on acidifie le jus de fermentation à un pH d'environ 1,5, on filtre le jus acide, puis on alcalinise le filtrat pour en préci  piter la chlortétracycline brute, laquelle est isolée par filtration, en ce qu'on traite le gâteau alcalin de filtration par du propanol normal acidifié pour en extraire la chlortétracycline, on sale l'extrait propylique acide, puis on retire le chlorhydrate de chlortétracycline de la solution dans le propanol normal, en concentrant cette dernière pour provoquer la cristallisation dudit chlorhydrate, en présence d'éthoxyéthanol.



   Du fait de sa miscibilité à l'eau, le propanol normal mouille bien les solides pendant l'extraction initiale en l'absence de toute quantité substantielle de chlorure minéral; après l'addition du chlorure à l'extrait alcoolique clarifié, néanmoins, l'eau qui se trouve dans l'extrait se sépare sous forme d'une couche aqueuse, qui contient la totalité des impuretés solubles dans l'eau, la chlortétracycline restant dans la couche de solvant. Avec un seul solvant par conséquent, on obtient le double avantage d'une extraction aqueuse et d'une extraction par solvant.



   La nature de l'acide employé dans le stade préliminaire d'acidification n'a vraisemblablement pas d'importance critique, mais, pour des raisons de commodité et d'économie, on emploie de préférence des acides minéraux tels que l'acide sulfurique, l'acide chlorhydrique ou l'acide phosphorique. La quantité et la concentration de l'acide doivent être telles qu'on obtient un pH d'environ 1,5. L'acidification du solvant d'extraction se fait de préférence au même pH.



   Dans le traitement du milieu clarifié au moyen d'un alcali, le pH du milieu est amené de préférence entre 7 et 9. Comme alcalis convenables, on peut citer par exemple la soude caustique, le carbonate de sodium et l'ammoniaque.



   On peut utiliser des températures d'extraction comprises entre 0 et 600.   ll    est préférable d'opérer à température ordinaire, c'est-à-dire à une température de l'ordre de 200. La quantité de solvant d'extraction peut varier dans d'assez larges limites, mais, de préférence, le poids d'alcool choisi est approximativement celui du précipité à extraire.



   On isole la chlorotétracycline sous forme de son chlorhydrate, et on a trouvé que ceci peut être réalisé avec l'élimination simultanée d'une grande quantité d'eau et d'impuretés avant l'isolement final du chlorhydrate, en ajoutant à l'extrait alcoolique un chlorure minéral soluble dans l'eau et relativement insoluble dans l'alcool d'extraction. Un tel chlorure est par exemple le chlorure de sodium ou le chlorure d'ammonium. Par addition du chlorure, l'extrait se sépare en une phase aqueuse et une phase alcoolique, cette dernière étant alors séparée, par exemple par décantation, puis, après concentration à un volume substantiellement plus faible, on laisse cristalliser le chlorhydrate de chlorotétracycline. La cristallisation est effectuée en présence d'éthoxy-2 éthanol.



   L'exemple suivant montre comment l'invention peut être mise en pratique.



   Exemple
 30 litres d'un milieu de culture contenant 960 unités de chlortétracycline par cm3 sont acidifiés à un pH de 1,5 au moyen d'acide sulfurique à 25 %. On ajoute 0,5 kg de   Supercel   Hyflo     et on filtre la solution. Le précipité est lavé à plusieurs reprises avec 15 litres d'eau acidifiée à un pH 2. Le filtrat et les lavages sont réunis et on ajoute une solution à 10 % de soude caustique jusqu'à obtenir un pH compris entre 8 et 9. On ajoute 250 g de   Supercel
Hyflo  , filtre la solution et lave le précipité avec 3 litres d'eau.



   Le gâteau alcalin résultant est mis en suspension dans 1,5 litre de propanol normal et on ajoute à la suspension une quantité d'acide sulfurique à 25 % suffisante pour obtenir un pH de 1,5. Après agitation et filtration de la suspension, le précipité est lavé avec 1 litre de propanol normal à 70 %. A la solution obtenue, on ajoute, en agitant, 0,4 kg de chlorure de sodium.



  On laisse reposer la solution et sépare par décantation les deux couches qui se sont formées. La couche aqueuse est extraite à nouveau avec 0,5 litre de propanol, puis on filtre les deux extraits propanoliques.



   Après addition de 0,3 litre d'éthoxyéthanol, le filtrat est concentré dans le vide à une température d'environ 350, jusqu'à ce que le volume soit devenu environ 0,2 litre. Après cristallisation, la bouillie résultante est filtrée et lavée  avec 20 cm3 d'éthoxyéthanol à 80 % et 20 cm3 d'eau. Le produit brut obtenu est mis en suspension dans 50 cm3 d'eau, puis filtré. L'opération est recommencée et le résidu est finalement lavé au moyen de 20 cm3 d'éthanol. Le produit est séché dans le vide (2 mm de pression) à 400. On obtient ainsi 20 g de chlorhydrate de chlortétracycline titrant 980 y par milligramme.
  

Claims (1)

1. REVENDICATION : Procédé d'obtention du chlorhydrate de chlortétracycline à partir des moûts de fermentation de Streptomyces Aureofaciens, caractérisé en ce que l'on acidifie le jus de fermentation à un pH d'environ 1,5, on filtre le jus acide, puis on alcalinise le filtrat pour en précipiter la chlortétracycline brute, laquelle est isolée par filtration, en ce que l'on traite le gâteau alcalin de filtration par du propanol normal acidifié pour en extraire la chlortétracycline, on sale l'extrait propylique acide, puis on retire le chlorhydrate de chlortétracycline de la solution dans le propanol normal, en concentrant cette dernière pour provoquer la cristallisation dudit chlorhydrate, en présence d'éthoxyéthanol.

   SOUS-REVENDICATION : Procédé selon la revendication, caractérisé en ce qu'après le salage de l'extrait propylique, on sépare la couche aqueuse de celle de la solution dans le propanol normal et concentre cette der nière.