Procédé de préparation du sel sodique de pénicilline cristallisé. La présente invention se rapporte<B>à</B> un procédé de préparation du sel sodique de péni- eilline cristallisé<B>à</B> partir d'un bouillon de culture contenant la pénicilline<B>à</B> Fétat rela tivement impur.
On retire la pénicilline du bouillon de fer mentation en soumettant ce dernier, après J'avoir acidifié,<B>à</B> un certain nombre d'extrac tions et<B>à</B> d'autres traitements de purification, comme il est bien connu dans la pratique, le dernier stade consistant<B>à</B> sécher<B>à</B> basse tem pérature une solution aqueuse du sel sodique de pénicilline, obtenue par adjonction<B>à</B> l'ex trait organique d'un composé alcalin du so dium en solution aqueuse, pour obtenir le sel sodique de pénicilline sous forme amorphe, coloré et d'une pureté relative, la pureté et la coloration dépendant du degré de purification atteint.
Le sel sodique de pénicilline amorphe ainsi obtenu est non seulement moins pur et plus fortement coloré qu'il n'est désirable, mais il est relativement hydroscopique et ins table, de sorte qu'il est nécessaire de le con- -erver et de le transporter<B>à</B> des températures réduites pour éviter une perte notable d'acti vité.
On sait cependant que le sel sodique de pénicilline pur cristallisé est, beaucoup moins bydroscopique et beaucoup plus stable que le produit amorphe relativement impur et qu'il peut être conservé pendant de longues<B>pé-</B> riodes dans des récipients fermés<B>à</B> la tempé rature ordinaire sans perte appréciable de son aetivité. On a trouvé en outre que ce corps est beaucoup moins douloureux quand il est injecté et qu'il est par conséquent préférable pour les emplois cliniques.
De nombreuses méthodes (le cristallisation des sels de pénicilline ont été décrites. Ces méthodes consistent<B>à</B> dissoudre un sel solide de pénicilline dans un solvant organique, puis <B>à</B> refroidir la solution jusqu'à ce que la cris tallisation se produise. Les procédés de cristal lisation des sels de pénicilline utilisés jusqu'ici se caractérisent par le fait que la dissolution du sel solide de pénicilline dans un solvant se fait approximativement<B>à</B> la température ordi naire et, que la cristallisation<B>à</B> partir de la solution résultante se fait toujours<B>à</B> une tem pérature inférieure<B>à</B> la température de pré paration de la solution, par exemple en lais sant la solution pendant une nuit dans un réfrigérateur.
On a trouvé maintenant que l'emploi de température élevées pour la cristallisation du sel sodique de pénicilline augmente notable ment le rendement en sel cristallisé et, en outre, réduit le temps nécessaire<B>à,</B> la cristalli sation.
Le procédé selon l'invention, pour la pré paration du sel sodique de pénicilline cristal lisé, est caractérisé en ce qu'on extrait,<B>à</B> Faide d'un solvant organique, la pénicilline libre contenue dans un bouillon de culture acidifié, en ce qu'on transforme la pénicilline libre en le sel sodique de pénicilline par adjonction, d'un composé alcalin du sodium, en ce qu'on recueille le sel sodique de pénicilline impur sous forme solide et amorphe, en<B>ce</B> qu'on mé lange ensuite, sous agitation, ce sel amorphe avec au moins un solvant organique,<B>à</B> une température ne dépassant pas<B>70" C,</B> en ce qu'on maintient le mélange<B>à</B> une température comprise entre 40 et<B>701> C,</B> tout en poursui vant l'agitation pendant la cristallisation du sel sodique de pénicilline,
et en ce qu'on sé pare ledit sel cristallisé formé. Le solvant or ganique peut être un alcool aliphatique mono valent ayant de<B>3 à 6</B> atomes de carbone, l'acétone, la méthyl-éthyl-cétone, des mélanges de ces solvants, et des mélanges de ces sol vants avec des esters carboxyliques alipha tiques.
Le rapport des poids de sel solide amorphe et de solvant organique -utilisés peut être compris entre 2:10 et<B>7:10,</B> la tempéra ture de mélange peut être comprise entre 20 et 601, <B>C,</B> le mélange pouvant être amené en suite<B>à</B> une température comprise de préfé- renee entre 40 et<B>600 C.</B> Parmi les solvants organiques qui peuvent être utilisés, on peut citer, outre l'acétone et la méthyl-éthyl-cétone, <B>le</B> propanol normal et l'isopropanol, le butanol. normal, l'alcool amylique,
l'hexanol normal et les mélanges tels que le mélange butanol-acétate d'éthyle, le mélange acétone-acétate d'éthyle et le mélange butanol normal-acétate de butyle.
Il est préférable que le solvant utilisé soit pratiquement anhydre, la présence d'eau pen dant la cristallisation réduisant le rendement en sel sodique de pénicilline cristallisé.
Le sel sodique amorphe de pénicilline peut être recueilli par dessiccation<B>à</B> basse tempé rature ou par pulvérisation de sa solution aqueuse. Quand l'activité de ce sel est infé rieure<B>à 600</B> imitésimg, la cristallisation peut être inhibée par les impuretés présentés, et il est préférable que le sel ait une activité d'au moins<B>800</B> unités/mg.
Le rapport du sel sodique amorphe de pénicilline au solvant organique utilisé est compris de préférence entre 20 et<B>70 g</B> de sel pour<B>100</B> millilitres de solvant. On obtient le rendement maximum en général avec une pro portion de 40<B>g</B> de sel pour<B>100</B> millilitres-de solvant. Quand on utilise une plus forte pro portion de sel sodique amorphe par rapport au solvant, par exemple de 4:<B>10 à 7: 10</B> en poids, il est préférable de diluer le mélange avec un solvant organique approprié frais pour que le rapport soit inférieur<B>à</B> 4<B>à 10,</B> avant de séparer le sel cristallisé de la liqueur- mère, pour éviter des difficultés lors de la filtration.
Quand un rapport supérieur<B>à 7: 10</B> est -utilisé, le mélange tend<B>à</B> devenir trop vis queux pour permettre un brassage efficace, et il est nécessaire de diluer le mélange avec un solvant organique.
Les cristaux de sel sodique de pénicilline peuvent être séparés du solvant organique sans refroidissement, par toute méthode appropriée telle qu'une filtration ordinaire ou au vide, ou une centrifugation, bien que la séparation des cristaux puissent se faire aussi après refroidissement. La masse cristalline sé parée peut être débarrassée de la liqueur-nière par lavage au moyen de petites quantités du solvant organique utilisé primitivement.
On petit effectuer un autre lavage en utilisant. de petites quantités d'un solvant inerte<B>à</B> bas point d'ébullition, par exemple de lacétate d'éthyle ou de l'éther de pétrole, et éliminer l'excès de solvant dit sel sodique de pénieil- line en chauffant doucement dans -une étuve <B>à</B> vide.
Le sel sodique de pénicilline cristallisé obtenu dans les meilleures conditions a une couleur jaune pâle et une activité d'au moins <B>1500</B> unitésimg, le rendement de l'opération étant compris entre 60 et 90% selon la pureté du sel amorphe obtenu<B>à</B> partir du bouillon et la nature des impuretés.
Ainsi, en passant par un sel sodique amorphe de pénicilline d'une activité de<B>800</B> unités<B>'</B> /mg seulement, le rende ment atteint approximativement 601/o, tandis qu#-an sel amorphe ayant une activité clé <B>1150</B> -uinitéslmg donne un rendement d'environ 900/0. Le sel cristallisé obtenu petit être facile ment recristallisé pour donner, avec un haut rendement, un sel sodique de pénicilline cris tallisé blanc,
d'une activité de<B>1600</B> unités1mg. La recristallisation peut se faire le plus avan tageusement en dissolvant le sel sodique cris tallisé dans une solution aqueuse de butanol normal et en ajoutant<B>à</B> la solution du buta- nol normal sec, de préférence par deux fois ou plus et<B>à<I>0"</I> C</B> environ, pour amener le butanol normal<B>à</B> une concentration de<B>95 à 99</B> % approximativement, la cristallisation du sel sodique de pénicilline se produisant alors.
On a constaté quesi l'addition de butanol normal sec se poursuit jusqu'à une concentra tion finale en butanol normal de<B>97</B> % en vo lume, et si l'on veille<B>à</B> ce que la cristallisation commence avec une teneur en eau aussi haute que possible et que les cristaux se séparent en aiguilles, on peut obtenir dans ce stade de cristallisation, et avec Lin rendement de<B>72 à</B> <B>77</B> %, des cristaux blancs de sel sodique de pénicilline d'une pureté de 10011/o pratique ment. Ce procédé donne normalement des aiguilles, niais il peut être nécessaire parfois d'amorcer la cristallisation.
Quand on poursuit l'addition de butanol normal, sec jusqu'à une concentration finale de<B>99</B> % en volume, le rendement en substance cristalline peut être augmenté, mais le produit obtenu est plas eo- loré. Comme la liqueur-mère séparée<B>à</B> ce stade de l'opération peut être utilisée<B>à</B> nouveau dans un stade antérieur du procédé d'isole ment de la pénicilline, il n'y a pas d'avantage <B>A,</B> continuer l'addition de butanol normal sec au-delà d'une concentration de<B>97</B> % en vo- ]unie.
La recristallisation peut se faire aussi en dissolvant les cristaux dans une solution aqueuse d'acétone, puis en ajoutant de Faeé- tone sèche jusqu'à ce que la concentration atteigne<B>99</B> 1/o en volume ou s'approche de cette valeur. La substance recristallisée ainsi obtenue n'a cependant pas la blancheur abso lue de celle obtenue quand on utilise le buta- nol normal.
<B>Il</B> faut noter que les solvants organiques utilisés dans le présent procédé ne sont pas, strictement parlant, des solvants du sel sodi que de pénicilline, mais il est probable que le sel cristallisé est pratiquement insoluble dans lesdits solvants organiques, tandis que le sel amorphe est soluble. C'est ainsi que si l'on brasse le sel sodique amorphe de pénicilline avec un de<B>ces</B> solvants organiques, il semble passer en solution, et le sel cristallisé est pré cipité de cette solution. Dans certains cas, on obtient une solution complète du sel amorphe de laquelle précipite le sel cristallisé, tandis que, dans d'autres cas, il n'y a pas de limite nette entre la dissolution du sel amorphe et la précipitation du sel cristallisé, les deux pro cessus s'effectuant apparemment. en même temps.
Quand le sel amorphe est brassé dans le solvant organique<B>à</B> -une température infé rieure<B>à</B> 400<B>C,</B> on obtient ordinairement une solution complète et, en élevant la tempéra ture<B>à</B> une valeur comprise entre 40 et<B>700 C,</B> la cristallisation se produit. Si, par ailleurs, on brasse le sel amorphe dans le solvant<B>à</B> une température supérieure<B>à</B> 40"<B>C</B> et si on con tinue le brassace <B>à</B> cette température, la disso lution du sel amorphe et la précipitation du sel cristallisé se produisent ensemble.
Il n'est pas possible, cependant, de donner une règle générale pour tous les cas et il est bien connu que le comportement de la matière première <B>à</B> base de pénicilline varie d'une charge<B>à</B> l'autre, selon la nature des impuretés pré sentes.<B>Il</B> f aut noter cependant qu'il n'y a au- eune différence significative dans le rende ment obtenu selon que le sel amorphe a donné une solution complète ou non. Il est essentiel de continuer le brassage pendant les stades de dissolution et de cristallisation.
En général, la vitesse de cristallisation augmente avec la tem pérature, et. on a observé qu'il est avantageux de brasser le mélange du sel sodique de péni cilline et du solvant organique pendant un temps minimum de<B>30</B> minutes.
Les exemples suivants se réfèrent<B>à</B> des mises en oeuvre du procédé selon l'invention. L'activité de la pénicilline est donnée en uni tés internationales, et les pourcentages sont donnés en poids, sauf indication contraire. Les expressions parties en poids et parties en volume utilisées dans les exemples ont entre elles la même relation que les termes kilo gramme et elitre . Rxemple <B>1:</B> On prépare le sel sodique de pénicilline amorphe<B>à</B> partir d'un bouillon de culture contenant la pénicilline, selon la technique habituelle.
On ajoute lentement et en brassant <B>1-0</B> parties en poids de ce sel sodique de péni cilline amorphe séché<B>à</B> basse température et de couleur jaune brunâtre,<B>à 25</B> parties en volume dacétone sèche<B>à</B> 200<B>C,</B> et on continue de brasser<B>à</B> cette température pendant <B>1.</B> heure. Pendant ce temps, la dissolution weffectue et il ne se produit pas de cristalli sation. En élevant lentement la température<B>à</B> <B>500 C,</B> les cristaux commencent<B>à</B> se séparer et la cristallisation est complète après une courte période. Les cristaux sont séparés par filtra tion<B>à</B> chaud, lavés avec de petites quantités d'acétone sèche et séchés.
On obtient., avec un rendement de<B>71</B> %, un sel sodique de péni cilline cristallisé jaune, d'une activité de 1420 unités./mg.
<I>Exemple</I><B>29:</B> On ajoute lentement et en brassant<B>10</B> par ties en poids du sel amorphe obtenu comme dans l'exemple<B>1, à 25</B> parties en volume d'un mélange contenant<B>25</B> 11/o en volume de butanol normal et 75% en volume d'acétate de butyle, <B>à</B> 201, <B>C.</B> Après addition totale du sel solide, on élève la température<B>à 60"</B> C et la cristalli-. sation commence presque immédiatement. Les cristaux'sont séparés par filtration, lavés avec de petites quantités du même mélange de sol vants et séchés.
On obtient, avec un rende ment de<B>69</B> 11/o en poids, un sel sodique de pénicilline cristallisé, jaune pâle, d'une acti vité de<B>1500</B> unitésimg. <I>Exemple</I> 3: On ajoute lentement et en brassant<B>10</B> par ties en poids du sel amorphe de l'exemple<B>1,</B> <B>à 25</B> parties en volume de propanol normal sec,<B>à</B> 201, <B>C.</B> On élève lentement la tempéra ture de la solution<B>à</B> 601, C, et la cristallisation est complète après une courte période de bras sage<B>à</B> cette température.
Les cristaux sont séparés par filtration, lavés avec de petites quantités de propanol normal sec, puis avec de petites quantités d'acétate d'éthyle sec, et séchés dans une 'étuve<B>à</B> vide. On obtient, avec un rendement de 67%, un sel sodique de pénicilline cristallisé, jaune très pâle, d'une activité de 1480 unités/mg. <I>Exemple 4:
</I> On ajoute lentement et en brassant<B>10</B> par ties en poids du sel sodique de pénicilline amorphe, obtenu comme dans l'exemple<B>1</B> et séché<B>à</B> basse température, de couleur jaune foncé et d'une activité de<B>1050</B> unités/mg, <B>à</B> <B>25</B> parties en volume de butanol normal sec,, <B>à 60" C.</B> La cristallisation commence immé- diatementet, après une très courte période de brassage, on sépare les cristaux par filtration <B>à</B> chaud, on les lave avec de petites quantités de butanol normal sec et on les sèche.
On ob tient, avec un rendement de<B>60</B> %, un sel so dique de pénicilline cristallisé jaune pâle et d#une activité de<B>1530</B> 1-initéslni,-. <I>Exemple</I> 5: On ajoute lentement et en brassant<B>10</B> par ties en poids dun sel sodique de pénicilline amorphe obtenu selon la technique usuelle et séché<B>à</B> basse température, jaune foncé, deune activité de<B>1100</B> unitéslmo, et contenant 70% de la pénicilline sous forme de pénicilline C' selon une détermination chromatographique,
<B>à</B> <B>25</B> parties en volume de butanol normal sec, <B>à</B> 20"<B>C.</B> Après addition totale du sel, on élève la température<B>à</B> 501, <B>C</B> tout en continuant le brassage. On sépare les cristaux par filtration sur un entonnoir de Buchner et on les lave avec de petites quantités de butanol normal sec, puis avec de petites quantités d'acétone sèche.
Après séchage a-Li vide, on obtient, avec un rendement de<B>70</B> 1/o, un sel sodique de péni cilline cristallisé jaune pâle, d'une activité clé <B>1.550</B> unités/ing et contenant 801/o de la péni- eilline sous forme de pénicilline Cr, selon une détermination chromatographique. En main tenant cette substance<B>à 1000.C</B> dans un flacon ouvert pendant six jours,
Facivité n'est réduite seulement que de 4%.
On recristallise 2 parties en poids du sel obtenu en le dissolvant dans le volume mini- muni d'une solution aqueuse d#aeétone <B>à</B> 901/o en volume,<B>à</B> 200<B>C,</B> et en ajoutant lentement de l'acétone sèche jusqu'à une concentration en acétone de<B>99</B> % en volume. On sépare les cristaux obtenus par filtration, on les lave avec de petites quantités d'acétone sèche et on les sèche.
On obtient, avec un rendement de 681/o basé sur la matière cristalline jaune pâle originale, un sel sodique de pénicilline cris tallisé pratiquement incolore, ayant une aeti- vité de 1600 unités/mg et contenant 90% de la pénicilline sous forme de pénicilline<B>G</B> selon une détermination chromatographique.
<I>Exemple,<B>6:</B></I> On ajoute lentement et en brassant<B>10</B> par ties en poids d'un sel sodique de pénicilline amorphe jaune foncé, obtenu selon la techni que usuelle, d'une activité de<B>100</B> unitésimg, <B>à</B> <B>17</B> parties en vol-Lime de butanol normal sec,<B>à</B> <B>50,<I>C.</I></B> Après cristallisation complète, on ajoute encore<B>33</B> parties en volume de butanol normal sec,<B>à</B> 201, <B>C,</B> pour réduire la viscosité. On sépare les cristaux par filtration, on les lave avec de pe tites, quantités de butanol normal sec, et on les sèche.
On obtient, avec un rendement de 801/o, un sel sodique de pénicilline cristallisé jaune pâle, ayant une activité de<B>1550</B> unitésimg. <I>Exemple<B>7:</B></I> On ajoute lentement et en brassant<B>10</B> par ties en poids d'un sel sodique de pénicilline amorphe jaune foncé, obtenu selon la tech nique usuelle, séché par pulvérisation et ayant une activité de<B>970</B> unités/mg, <B>à 16</B> parties en volume de butanol normal sec,<B>à 550 C.</B> On continue de brasser pendant<B>1</B> heure<B>à</B> cette température pouir achever la cristallisation, et on ajoute<B>32</B> parties en volume de butanol normal sec,
<B>à</B> 201, <B>C.</B> Les cristaux sont séparés par filtration, lavés avec de petites quantités de butanol normal sec, puis avec de petites quantités d'acétate d'éthyle sec, et finalement séchés au vide. On obtient, avec un rendement de 741/o, un sel sodique de pénicilline cristal lisé jaune pâle, ayant une activité de<B>1600</B> uni- tésimg.
On répète le même procédé dans les mêmes conditions, sauf qu'on utilise successivement un mélange sec de niéthyl-éthyl-cétone, et #I d'acétate de butyle et un mélange sec de bu- tanol normal et d'alcool amylique<B>à</B> la place <B>du</B> butanol normal sec utilisé précédemment. Le produit obtenu a -une couleur très pâle.
<I>Exemple<B>8:</B></I> On ajoute lentement et en brassant<B>10</B> par ties en poids d'un sel sodique de pénicilline amorphe obtenu selon la technique usuelle et séché<B>à</B> basse température, jaune foncé, d'une pureté de 561/o, <B>à 25</B> parties en volume d'al cool amylique normal sec,<B>à</B> 200<B>C.</B> Quand tout le sel a été ajouté et s'est dissous dans le sol vant, on élève la température<B>à 600</B> C, tout en continuant<B>à</B> brasser, jusqu'à ce que la cris tallisation se produise. Le sel cristallisé est séparé par filtration de la solution chaude, lavé avec de petites quantités d'alcool amyli- que normal sec, puis avec de l'acétone sèche.
Le produit est séché au vide et donne, avec un rendement de 74%, un sel sodique de péni- cilline cristallisé faiblement coloré, d'une pureté de 94(1/o. Le sel est recristallisé en dis solvant une partie en poids dans 2 parties en volume d'une solution aqueuse de butanol normal contenant 12 1/o d'eau en volume,
et en ajoutant lentement du butanol normal sec, en brassant, jusqu'à une concentration finale de butanol dans le mélange de 97% en volume. Le sel sodique de pénicilline cristallisé ainsi obtenu est séparé par filtration. <I>Exemple<B>9:</B></I> On brasse dans<B>61</B> litres de butanol nor mal sec 24<B>688 g</B> d'un mélange de sels sodi ques amorphes de pénicilline obtenus selon la technique usuelle, mélange comprenant<B>16 589 g</B> d'un sel ayant une activité de 1420 unitéslmg et<B>8099 g</B> d'un sel ayant une activité de <B>1390</B> unitésimg, soit au total 34914 millions d'unités de pénicilline.
On élève la tempéra ture<B>à 500 C.</B> La cristallisation est complète après brassage pendant une heure et demie<B>à</B> cette température, et les cristaux sont séparés par filtration, lavés avec du butanol normal sec, puis avec une petite quantité d'acétate d'éthyle sec, et finalement séchés. On obtient 21540<B>g</B> d'un sel sodique de pénicilline cris tallisé ayant une activité de<B>1551</B> unitésimg, soit un rendement de<B>96</B> %.
On dissout<B>5520 g</B> du-sel cristallisé dans <B>8</B> litres d'-une solution aqueuse d'acétone con tenant 201/o d'eau en vol-Lime. On ajoute<B>à</B> la solution<B>90</B> litres d'acétone sèche, en brassant continuellement, ce qui amène la concentra tion de la solution en acétone<B>à</B> 98% environ en volume. On laisse reposer le mélange pen dant 12 heures, en brassant par intermittence, puis on sépare les cristaux par filtration, on les lave avec de lacétone et on les sèche.
On obtient<B>375,3 g</B> d'un sel sodique de pénicilline cristallisé blanc, ayant une activité de<B>1650</B> unités/mg, et ainsi le rendement en sel sodique de pénicilline recristallisé pur, basé sur le sel amorphe, est de 76%.
La liqueur-mère du stade de recristallisa- tion contient<B>1555</B> millions d'unités de péni cilline, et les eaux de lavage du sel contien nent 344 millions d'unités. On peut en récu- pérer la pénicilline et ainsi le rendement total du procédé est de<B>95</B> Vo. <I>Exemple</I> 10..
<B>On</B> ajoute lentement et en brassant<B>10</B> par ties en poids d'un sel sodique de pénicilline amorphe jaune foncé obtenu selon la techni- que usuelle, d'une pureté de<B>83</B> %, au solvant organique indiqué dans la colonne<B>1</B> de la table, suivante, les parties en volume du sol vant étant indiquées dans la colonne 2 et la température dans la colonne<B>3.</B> Quand tout le sel a été ajouté, la température est maintenue <B>à</B> la valeur indiquée dans la colonne 4, et le mélange est encore brassé pendant une heure. Le sel sodique de pénicilline cristallisé est sé paré par filtration de la solution chaude et lavé avec de petites quantités du solvant orga nique employé, et ensuite avec de l'acétone sèche. Le produit est finalement séché.
On obtient un sel sodique de pénicilline cristallisé de couleur très pâle, d'une pureté indiquée en '/o du poids dans la colonne<B>5,</B> et avec un rendement indiqué en Q/o dans la colonne<B>6.</B>
EMI0006.0018
Colonne <SEP> Colonne <SEP> Colonne <SEP> Colonne <SEP> Colonne <SEP> Colonne
<tb> <B>1</B> <SEP> 2 <SEP> <B>3</B> <SEP> 4 <SEP> <B>5 <SEP> 6</B>
<tb> Solvant <SEP> Parties <SEP> Temp. <SEP> de <SEP> Temp.
<SEP> de <SEP> Pureté <SEP> Rendement
<tb> organique <SEP> en <SEP> <B>vol.</B> <SEP> dissolu <SEP> cristal.
<tb> en <SEP> <B>0 <SEP> C</B> <SEP> en <SEP> <B>0 <SEP> 0</B>
<tb> <B>1</B> <SEP> Butanol <SEP> normal <SEP> <B>100 <SEP> 50 <SEP> 50 <SEP> 88 <SEP> 90</B>
<tb> 2 <SEP> <B> <SEP> 50 <SEP> 50 <SEP> 50 <SEP> 93 <SEP> 97</B>
<tb> <B>3 <SEP> <SEP> 25 <SEP> 50 <SEP> 50 <SEP> 92 <SEP> 96</B>
<tb> 4 <SEP> <B> <SEP> 16* <SEP> 50 <SEP> 50 <SEP> 93 <SEP> 100</B>
<tb> <B>5 <SEP> <SEP> 12,
5' <SEP> 50 <SEP> 50 <SEP> 9c <SEP> 99</B>
<tb> <B>6 <SEP> <SEP> 10* <SEP> 50 <SEP> 50 <SEP> 88</B> <SEP> 94
<tb> <B>7 <SEP> <SEP> 25 <SEP> 60</B> <SEP> 40 <SEP> <B>90</B> <SEP> 94
<tb> <B>8 <SEP> <SEP> 25 <SEP> 35 <SEP> 50 <SEP> 93 <SEP> 100</B>
<tb> <B>9</B> <SEP> Hexanol <SEP> normal <SEP> <B>25 <SEP> 50 <SEP> 50 <SEP> 87 <SEP> 98</B>
<tb> <B>10 <SEP> <SEP> - <SEP> 25 <SEP> 60 <SEP> -10 <SEP> 85 <SEP> 96</B>
<tb> <B>Il</B> <SEP> Alcool <SEP> amylique
<tb> normal <SEP> <B>25 <SEP> 50 <SEP> 50 <SEP> 88 <SEP> 97</B>
<tb> 12 <SEP> Méthyl-éthyl,
<tb> cétone <SEP> <B>25 <SEP> 50 <SEP> 50 <SEP> 90 <SEP> 100</B>
<tb> Le <SEP> mélange <SEP> du <SEP> sel <SEP> sodique <SEP> de <SEP> pénicilline <SEP> cristallisé <SEP> et <SEP> de <SEP> butanol <SEP> normal <SEP> est <SEP> dilué <SEP> encore
<tb> avec <SEP> <B>25</B> <SEP> parties <SEP> en <SEP> volume <SEP> de <SEP> butanol <SEP> normal <SEP> avant <SEP> filtration
EMI0007.0001
No. <SEP> Colonne <SEP> Colonne <SEP> Colonne <SEP> Colonne <SEP> Colonne <SEP> Colonne
<tb> <B>1</B> <SEP> 2 <SEP> <B>8</B> <SEP> 4 <SEP> <B>5 <SEP> 6</B>
<tb> Solvant <SEP> Parties <SEP> Temp. <SEP> de <SEP> Temp. <SEP> de <SEP> Pureté <SEP> Rendement
<tb> organique <SEP> en <SEP> vol. <SEP> dissol.
<SEP> cristal <SEP> <B>* <SEP> % <SEP> %</B>
<tb> en <SEP> en <SEP> <B>0 <SEP> C</B>
<tb> <B>13</B> <SEP> Butanol <SEP> normal méthyl-méthyl cétone <SEP> <B>* <SEP> * <SEP> 25 <SEP> 50 <SEP> 50 <SEP> 93 <SEP> 99</B>
<tb> 14 <SEP> Butanol <SEP> normal acétate <SEP> d'éthyle <SEP> <B>*' <SEP> 25 <SEP> 50 <SEP> 50 <SEP> 92 <SEP> 98</B>
<tb> <B>15</B> <SEP> Butanol <SEP> normal acétate <SEP> d'amyle<B>** <SEP> 25 <SEP> 50 <SEP> 50 <SEP> 89 <SEP> 99</B>
<tb> Le <SEP> mélange <SEP> comprend <SEP> <B>50%</B> <SEP> de <SEP> chaque <SEP> solvant.