BRPI1012549B1 - moduladores do regulador da condutância transmembrana na fibrose cística, composição farmacêutica e kit - Google Patents

moduladores do regulador da condutância transmembrana na fibrose cística, composição farmacêutica e kit Download PDF

Info

Publication number
BRPI1012549B1
BRPI1012549B1 BRPI1012549A BRPI1012549A BRPI1012549B1 BR PI1012549 B1 BRPI1012549 B1 BR PI1012549B1 BR PI1012549 A BRPI1012549 A BR PI1012549A BR PI1012549 A BRPI1012549 A BR PI1012549A BR PI1012549 B1 BRPI1012549 B1 BR PI1012549B1
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
compound
disease
cftr
fact
petition
Prior art date
Application number
BRPI1012549A
Other languages
English (en)
Inventor
F Van Goor Fredrick
Zlokarnik Gregor
C Botfield Martyn
d j grootenhuis Peter
S Hadida Ruah Sara
Yang Xiaoqing
Original Assignee
Vertex Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Vertex Pharma filed Critical Vertex Pharma
Publication of BRPI1012549A2 publication Critical patent/BRPI1012549A2/pt
Publication of BRPI1012549A8 publication Critical patent/BRPI1012549A8/pt
Publication of BRPI1012549B1 publication Critical patent/BRPI1012549B1/pt
Publication of BRPI1012549B8 publication Critical patent/BRPI1012549B8/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/48—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C07D215/54—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen attached in position 3
    • C07D215/56—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen attached in position 3 with oxygen atoms in position 4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/10—Laxatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/10—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for impotence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/18—Drugs for disorders of the endocrine system of the parathyroid hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/12—Antidiuretics, e.g. drugs for diabetes insipidus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/20—Oxygen atoms
    • C07D215/22—Oxygen atoms attached in position 2 or 4
    • C07D215/233—Oxygen atoms attached in position 2 or 4 only one oxygen atom which is attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/48—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/502—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects
    • G01N33/5041—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects involving analysis of members of signalling pathways
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6872—Intracellular protein regulatory factors and their receptors, e.g. including ion channels
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/38—Pediatrics
    • G01N2800/382—Cystic fibrosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)

Abstract

moduladores do regulador da condutância transmembrana na fibrose cística, composição farmacêutica e kit. a presente invenção refere-se a um composto de fórmula i ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que r é cooh ou ch2oh.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para MODULADORES DO REGULADOR DA CONDUTÂNCIA TRANSMEMBRANA NA FIBROSE CÍSTICA, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E KIT.
REIVINDICAÇÃO DA PRIORIDADE [0001] Este pedido reivindica a prioridade do Pedido Provisório para U.S. N° de Série 61/162.130, depositado em 20 de março de 2009 que é aqui incorporado por referência em sua totalidade.
CAMPO TÉCNICO DA INVENÇÃO [0002] A presente invenção refere-se aos moduladores do regulador da condutância transmembrana na fibrose cística (CFTR), suas composições, e métodos com estes. A presente invenção também se refere aos métodos de tratamento de doenças utilizando os moduladores da CFTR.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO [0003] A fibrose cística (CF) é uma doença genética recessiva que afeta aproximadamente 30.000 crianças e adultos nos Estados Unidos e aproximadamente 30.000 crianças e adultos na Europa. Apesar dos progressos no tratamento da CF, não existe cura.
[0004] A CF é causada por mutações no gene regulador da condutância transmembrana na fibrose cística (CFTR) que codifica um canal iônico de cloreto epitelial responsável por ajudar na regulação do sal e absorção e secreção de água em vários tecidos. Medicamentos de pequenas moléculas, conhecidos como potenciadores que aumentam a probabilidade de abertura do canal do CFTR representam uma estratégia terapêutica potencial para tratar a CF.
[0005] Especificamente, o CFTR é um canal aniônico mediado por cAMP/ATP que se expressa em uma variedade de tipos de células, incluindo as células epiteliais de absorção e secreção, onde regula o fluxo de ânions através da membrana, assim como a atividade de ou
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 6/99
2/84 tros canais iônicos e proteínas. Nas células epiteliais, o funcionamento normal do CFTR é essencial para a manutenção do transporte de eletrólito através do corpo, incluindo o tecido respiratório e digestivo. O CFTR é composto de aproximadamente 1480 aminoácidos que codificam uma proteína preparada de uma repetição em tandem de domínios da transmembrana, cada uma contendo seis hélices da transmembrana e um domínio de ligação de nucleotídeo. Os dois domínios da transmembrana são ligados por um grande domínio (R) regulador polar com múltiplos sítios de fosforilação que regulam a atividade do canal e tráfego celular.
[0006] O gene que codifica o CFTR foi identificado e sequenciado (Ver Gregory, R. J. et al. (1990) Nature 347:382-386; Rich, D. P. et al. (1990) Nature 347:358-362), (Riordan, J. R. et al. (1989) Science 245:1066-1073). Um defeito nesse gene provoca mutações no CFTR resultando em fibrose cística (CF), a doença genética fatal mais comum em seres humanos. A fibrose cística afeta aproximadamente uma em cada 2500 crianças nos Estados Unidos. dentro da população geral dos Estados Unidos, até 10 milhões de pessoas carregam uma única cópia do gene defeituoso, sem aparentes efeitos adversos. Em contraste, os indivíduos com duas cópias do gene associado à CF sofrem dos efeitos debilitantes e fatais da CF, incluindo a doença pulmonar crônica.
[0007] Em pacientes com CF, as mutações no CFTR, endogenamente expressas no epitélio respiratório, leva à secreção de ânions apicais reduzida causando um desequilíbrio no transporte de íons e fluidos. A diminuição resultante no transporte de ânion contribui para o acúmulo acentuado de muco no pulmão e as infecções microbianas acompanhantes que finalmente causam a morte em pacientes com CF. Além das doenças respiratórias, os pacientes com CF tipicamente sofrem de problemas gastrointestinais e insuficiência pancreática que,
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 7/99
3/84 se não tratados, resulta em morte. Além disso, a maioria dos homens com fibrose cística são inférteis e a fertilidade diminui nas mulheres com fibrose cística. Em contraste com os graves efeitos de duas cópias do gene associado com a CF, os indivíduos com uma única cópia do gene associado com a CF apresentam resistência aumentada à cólera e à desidratação resultante da diarreia, o que talvez explique a frequência relativamente alta do gene de CF dentro da população.
[0008] A análise da sequência do gene de CFTR de cromossomos de CF revelou uma variedade de doença que causa mutações (Cutting, G. R. et al. (1990) Nature 346:366-369; Dean, M. et al. (1990) Cell 61:863:870; e Kerem, B-S. et al. (1989) Science 245:1073-1080; Kerem, B-S et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:84478451). Até esta data, mais de 1000 mutações causadoras de doença no gene de CF foram identificadas (http://www.genet.sickkids.on.ca/cftr/app). A mutação mais prevalente é uma anulação de fenilalanina na posição 508 da sequência de aminoácido do CFTR, e é comumente referida como AF508-CFTR. Esta mutação ocorre em aproximadamente 70% dos casos de fibrose cística e está associada com uma doença grave.
[0009] A anulação de resíduos 508 na AF508-CFTR impede a proteína nascente de dobrar corretamente. Isto resulta na incapacidade da proteína mutante para sair do ER, e trafegar para a membrana plasmática. Como um resultado, o número de canais presentes na membrana é muito menor do que o observado nas células que expressam o CFTR tipo silvestre. Além do tráfego prejudicado, a mutação resulta em obstrução do canal defeituoso. Ao mesmo tempo, o número reduzido de canais na membrana e a obstrução defeituosa levam ao transporte reduzido de ânions através do epitélio que leva ao transporte defeituoso de íons e fluidos. (Quinton, P. M. (1990), FASEB J. 4: 2709-2727). Estudos têm mostrado, no entanto, que os números reduPetição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 8/99
4/84 zidos de AF508-CFTR na membrana são funcionais, embora menores do que o CFTR tipo silvestre. (Dalemans et al. (1991), Nature Lond. 354: 526-528; Denning et al., supra; Pasyk and Foskett (1995), J. Cell. Biochem. 270: 12347-50). Além de AF508-CFTR, outras mutações causadoras de doença no CFTR que resultam em tráfego defeituoso, a síntese, e/ou obstrução do canal pode ser supra- ou infra-regulada para alterar a secreção de ânion e modificar a progressão e/ou gravidade da doença.
[00010] Embora o CFTR transporta uma variedade de moléculas além de ânions, fica claro que esse papel (o transporte de ânions) representa um elemento em um importante mecanismo de transporte de íons e água através do epitélio. Os outros elementos incluem o canal de Na+ epitelial, ENaC, co-transveículo Na+/2Cl-/K+, bomba de Na+-K+ATPase e os canais K+ da membrana basolateral, que são responsáveis pela absorção de cloreto na célula.
[00011] Estes elementos trabalham em conjunto para alcançar o transporte direcional sobre o epitélio através de sua expressão seletiva e localização dentro da célula. A absorção de cloreto ocorre pela atividade coordenada de ENaC e CFTR presentes na membrana apical e na bomba Na+-K+-ATPase e canais de íon de Cl expressos na superfície basolateral da célula. O transporte ativo secundário de cloreto a partir do lado luminal leva ao acúmulo de cloreto intracelular, que pode depois passivamente sair da célula através dos canais de Cl-, resultando em um transporte vetorial. A disposição do cotransveículo Na+/2Cl-/K+, bomba Na+-K+-ATPase e dos canais K+ da membrana basolateral na superfície basolateral e CFTR no lado luminal coordenam a secreção de cloreto através do CFTR no lado luminal. Porque a água provavelmente nunca seja ativamente transportada em si, seu fluxo através do epitélio depende dos minúsculos gradientes osmóticos transepiteliais gerados pelo fluxo em massa de sódio e cloreto.
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 9/99
5/84 [00012] Como debatido acima, acredita-se que a anulação de resíduos 508 em AF508-CFTR impeça a proteína nascente de dobrar corretamente, resultando na incapacidade desta proteína mutante de sair do ER, e trafegar até a membrana plasmática. Como um resultado, as quantidades insuficientes da proteína madura estão presentes na membrana plasmática e o transporte de cloreto dentro dos tecidos epiteliais é significativamente reduzido. De fato, este fenômeno celular de processamento defeituoso de ER de transveículoes ABC pela máquina ER foi mostrado para ser a base fundamental não apenas para a doença de CF, mas para uma ampla faixa de outras doenças isoladas e herdadas.
[00013] Conseqüentemente, existe uma necessidade de moduladores da atividade de CFTR, e suas composições, que podem ser usados para modular a atividade do CFTR na membrana da célula de um mamífero.
[00014] Existe uma necessidade de métodos de tratamento de doenças causadas por mutação no CFTR utilizando tais moduladores da atividade de CFTR.
[00015] Há uma necessidade de métodos de modulação da atividade de CFTR em uma membrana celular ex vivo de um mamífero. SUMÁRIO DA INVENÇÃO [00016] Em um aspecto, esta invenção se refere a um composto de Fórmula I:
Figure BRPI1012549B1_D0001
I ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, em que R é
COOH ou CH2OH.
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 10/99
6/84 [00017] Em uma modalidade, o composto possui a estrutura:
Figure BRPI1012549B1_D0002
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00018] Em outra modalidade, o composto possui a estrutura: OH v ,
Figure BRPI1012549B1_D0003
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00019] Em um aspecto, esta invenção se refere a uma composição farmacêutica incluindo um composto de Fórmula I, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R é definido como acima, e um veículo ou adjuvante farmaceuticamente aceitável.
[00020] Em uma modalidade da composição farmacêutica, o composto possui a estrutura:
Figure BRPI1012549B1_D0004
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00021] Em outra modalidade da composição farmacêutica, o composto possui a estrutura:
Figure BRPI1012549B1_D0005
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 11/99
7/84 [00022] As modalidades desse aspecto também podem incluir uma composição farmacêutica contendo um agente adicional selecionado de um agente mucolítico, um broncodilatador, um antibiótico, um agente anti-infeccioso, um agente anti-inflamatório, um modulador de CFTR, ou um agente nutricional.
[00023] Em um aspecto, esta invenção inclui um método de modulação da atividade de CFTR em uma amostra biológica compreendendo a etapa de colocar em contato a dita amostra biológica com um composto de Fórmula I, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que R é definido como acima.
[00024] Em uma modalidade do método de modulação da atividade de CFTR, o composto possui a estrutura:
Figure BRPI1012549B1_D0006
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00025] Em uma outra modalidade do método de modulação da atividade de CFTR, o composto possui a estrutura:
Figure BRPI1012549B1_D0007
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00026] Em outro aspecto, a invenção também fornece um método de tratamento ou diminuição da gravidade de uma doença em um paciente, compreendendo a administração ao dito paciente de uma das composições como aqui definidas, e a dita doença é selecionada de fibrose cística, asma, COPD induzida por fumo, bronquite crônica, rinossinusite, constipação, pancreatite, insuficiência pancreática, inferti
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 12/99
8/84 lidade masculina causada pela ausência congênita bilateral dos vasos deferentes (CBAVD), doença pulmonar leve, pancreatite idiopática, aspergilose broncopulmonar alérgica (ABPA), doença hepática, enfisema hereditário, hemocromatose hereditária, deficiências de coagulação por fibrinólise, tais como deficiência de proteína C, angioedema hereditário Tipo 1, deficiências de processamento de lipídeo, tais como a hipercolesterolemia familiar, quilomicronemia Tipo 1, abetalipoproteinemia, doenças de depósito lisossômico, tais como doença da célula I/pseudo-Hurler, mucopolissacaridoses, Sandhof/Tay-Sachs, CriglerNajjar tipo II, poliendocrinopatia/hiperinsulemia, Diabetes melito, nanismo Laron, deficiência de mileoperoxidase, hipoparatireoidismo primário, melanoma, glicanose CDG tipo 1, hipotireoidismo congênito, osteogênese imperfeita, hipofibrinogenemia hereditária, deficiência de ACT, Diabetes insípido (DI), DI neurofiseal, DI neprogênico, síndrome de Charcot-Marie Tooth, doença de Perlizaeus-Merzbacher, doenças neurodegenerativas tais como doença de Alzheimer, doença de Parkinson, esclerose lateral amiotrófica, plasy supranuclear progressiva, doença de Pick, vários distúrbios neurológicos de poliglutamina tais como a de Huntington, ataxia espinocerebular tipo I, atrofia muscular espinhal e bulbar, dentatorrubal palidoluisiano, e distrofia miotônica, assim como encefalopatias espongiformes, tais como a doença de Creutzfeldt-Jakob hereditária (devido ao defeito de processamento da proteína príon), doença de Fabry, síndrome de Straussler-Scheinker, COPD, doença do olho seco, ou doença de Sjogren, Osteoporose, Osteopenia, cicatrização óssea e crescimento ósseo (incluindo reparação óssea, regeneração óssea, redução da reabsorção óssea e aumento da deposição óssea), Síndrome de Gorham, canalopatias de cloreto tais como miotonia congênita (formas Thomson e Becker), síndrome de Bartter tipo III, doença de Dent, hiperecplexia, epilepsia, hiperecplexia, doença de depósito lisossômico, síndrome de Angelman, e
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 13/99
9/84 discinesia ciliar primária (PCD), um termo para os distúrbios hereditários da estrutura e/ou função dos cílios, incluindo PCD com situs inversus (também conhecido como síndrome de Kartagener), PCD sem situs inversus e aplasia ciliar.
[00027] Em uma outra modalidade do método de tratamento ou diminuição da gravidade de uma doença, a doença é selecionada de CF, COPD, COPD induzida por fumo, pancreatite e rinossinusite.
[00028] Em certas modalidades, a doença é a fibrose cística. [00029] Em uma modalidade do método de tratamento ou diminuição da gravidade de uma doença, o composto possui a estrutura:
Figure BRPI1012549B1_D0008
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00030] Em outra modalidade do método de tratamento ou diminuição da gravidade de uma doença, o composto possui a estrutura:
Figure BRPI1012549B1_D0009
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00031] Em outro aspecto, a presente invenção fornece um kit para uso na medição da atividade de CFTR ou um fragmento deste em uma amostra biológica in vitro ou in vivo compreendendo (i) uma composição que compreende um composto de Fórmula I ou qualquer um das modalidades acima; e (ii) instruções para a) colocar em contato a composição com a amostra biológica e b) mediar a atividade de dito CFTR ou um fragmento deste.
[00032] Em uma modalidade deste aspecto, o kit ainda compreende
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 14/99
10/84 instruções para a) colocar em contato uma composição adicional com a amostra biológica; b) medir a atividade de dito CFTR ou um fragmento deste na presença de dito composto adicional; e c) comparar a atividade do CFTR ou um fragmento deste na presença do composto adicional com a densidade do CFTR ou um fragmento deste na presença de uma composição de Fórmula I.
[00033] Nas modalidades preferidas, o kit é usado para medir a densidade do CFTR ou um seu fragmento.
[00034] Em uma modalidade preferida adicional, o kit é usado para medir a densidade de dito CFTR ou um fragmento deste e a etapa de comparar a atividade de dito CFTR ou um seu fragmento fornece uma medida da densidade do referido CFTR ou um fragmento deste.
[00035] Em uma modalidade do kit para uso na medição da atividade de CFTR, o composto possui a estrutura:
Figure BRPI1012549B1_D0010
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00036] Em uma outra modalidade do kit para uso na medição da atividade de CFTR, o composto possui a estrutura:
Figure BRPI1012549B1_D0011
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00037] Os compostos de Fórmula I fornecem propriedades vantajosas tais como, mas não limitado a elas, polaridade aumentada, solubilidade aquosa favorável, menor volume de distribuição e penetração no tecido inferior.
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 15/99
11/84
DESCRIÇÃO DETALHADA
DEFINIÇÕES [00038] Os compostos desta invenção incluem aqueles descritos de uma forma geral acima, e são ainda ilustrados pelas classes, subclasses, e espécies descritas neste documento. Como aqui usado, as seguintes definições são aplicáveis a não ser que de outra maneira indicada.
[00039] O termo transportador ABC como aqui utilizado significa uma proteína transportadora ABC ou um fragmento desta compreendendo pelo menos um domínio de ligação, em que a dita proteína ou seu fragmento está presente in vivo ou in vitro. O termo domínio de ligação como aqui utilizado significa um domínio sobre o transportador ABC que pode vincular a um modulador. Ver, por exemplo, Hwang, T.
C. et al., J. Gen. Physiol. (1998): 111(3), 477-90.
[00040] O termo CFTR como aqui utilizado significa regulador da condutância transmembrana na fibrose cística ou uma mutação deste capaz de atividade reguladora, incluindo, mas não limitado a estas, ÁF508 CFTR e G551D CFTR (ver, por exemplo, http://www.genet.sickkids.on.ca/cftr/, para mutações de CFTR).
[00041] O termo modular como aqui utilizado significa o aumento ou diminuição de uma quantidade mensurável.
[00042] Para os propósitos da presente invenção, os elementos químicos são identificados de acordo com a Tabela Periódica dos Elementos, CAS version, Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed. Adicionalmente, os princípios gerais de química orgânica são descritos em Organic Chemistry, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, and March's Advanced Organic Chemistry, 5th Ed., Ed.: Smith, M.B. and March, J., John Wiley & Sons, New York: 2001, cujos conteúdos são por meio desta incorporados por referência. [00043] Como descrito neste documento, os compostos da inven
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 16/99
12/84 ção podem ser opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes, tais como são ilustrados de uma forma geral acima, ou como exemplificados por classes, subclasses, e espécies particulares da invenção. Será observado que a frase opcionalmente substituída é usada de modo trocável com a frase substituído ou não substituído. Em geral, o termo substituído, quer precedido pelo termo opcionalmente quer não, refere-se à substituição dos radicais de hidrogênio em uma determinada estrutura com o radical de um substituinte específico. A não ser que de outra maneira indicada, um grupo opcionalmente substituído pode ter um substituinte em cada posição substituível do grupo, e quando mais do que uma posição em qualquer estrutura dada pode ser substituída com mais do que um substituinte selecionado de um grupo específico, o substituinte pode ser o mesmo ou diferente em cada posição. As combinações de substituintes previstas por esta invenção são preferivelmente aquelas que resultam na formação de compostos estáveis ou quimicamente viáveis. O termo estável, como aqui utilizado, refere-se aos compostos que não são substancialmente alterados quando submetidos às condições para permitir a sua produção, detecção e preferivelmente a sua recuperação, purificação e utilização para um ou mais dos propósitos descritos neste documento. Em algumas modalidades, um composto estável ou composto quimicamente viável é aquele que não é substancialmente alterado quando mantido em uma temperatura de 40°C ou menos, na ausência de umidade ou outras condições quimicamente reativas, durante pelo menos uma semana.
[00044] O termo grupo de proteção (PG) como aqui utilizado, representa aqueles grupos destinados a proteger um grupo funcional, tal como, por exemplo, um álcool, amina, carboxila, carbonila, etc., contra as reações indesejáveis durante os procedimentos sintéticos. Os grupos de proteção comumente utilizados são descritos em Greene and
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 17/99
13/84
Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Edition (John Wiley & Sons, New York, 1999), que é aqui incorporado por referência. Exemplos de grupos de proteção de nitrogênio incluem grupos de acila, aroíla ou carbamila tais como formila, acetila, propionila, pivaloíla, tbutilacetila, 2-cloroacetila, 2-bromoacetila, trifluoracetila, tricloroacetila, ftalila, o-nitrofenoxiacetila, α-clorobutirila, benzoíla, 4-clorobenzoíla, 4bromobenzoíla, 4-nitrobenzoíla e auxiliares de quiral tais como os D, L ou D, L-aminoácidos protegidos ou desprotegidos tais como alanina, leucina, fenilalanina e outros mais; grupos de sulfonila tais como benzenossulfonila, p-toluenossulfonila e outros mais; grupos carbamato tais como benziloxicarbonila, p-clorobenziloxicarbonila, pmetoxibenziloxicarbonila, p-nitrobenziloxicarbonila, 2nitrobenziloxicarbonila, p-bromobenziloxicarbonila, 3,4dimetoxibenziloxicarbonila, 3,5-dimetoxibenziloxicarbonila, 2,4-dimetoxibenziloxicarbonila, 4-metoxibenziloxicarbonila, 2-nitro-4,5dimetoxibenziloxicarbonila, 3,4,5-trimetoxibenziloxicarbonila, 1 -(pbifenilil)-1-metiletoxicarbonila, a,a-dimetil-3,5dimetoxibenziloxicarbonila, benzidriloxicarbonila, t-butiloxicarbonila, diisopropilmetoxicarbonila, isopropiloxicarbonila, etoxicarbonila, metoxicarbonila, aliloxicarbonila, 2,2,2-tricloroetoxicarbonila, fenoxicarbonila, 4-nitrofenóxi carbonila, fluorenil-9-metoxicarbonila, ciclopentiloxicarbonila, adamantiloxicarbonila, ciclo-hexiloxicarbonila, feniltiocarbonila, e outros mais, grupos de arilalquila tais como benzila, trifenilmetila, benziloximetila e outros mais e grupos de silila tais como trimetilsilila e assim por diante. Os grupos de N-proteção preferidos são tercbutiloxicarbonila (Boc).
[00045] Exemplos de grupos de proteção úteis para os ácidos são ésteres alquílicos substituídos tais como 9-fluorenilmetila, metoximetila, metiltiometila, tetra-hidropiranila, tetra-hidrofuranila, metoxietoximetila, 2-(trimetilsilil)etoximetila, benziloximetila, pivaloiloximetila, fenilacePetição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 18/99
14/84 toximetila, triisopropropilsisililmetila, cianometila, acetol, fenacila, ésteres fenacílicos substituídos, 2,2,2-tricloroetila, 2-haloetila, ωcloroalquila, 2-(trimetilsilil)etila, 2-metiltioetila, t-butila, 3-metil-3-pentila, diciclopropilmetila, ciclopentila, ciclo-hexila, alila, metalila, cinamila, fenila, ésteres silílicos, benzila e ésteres benzílicos substituídos, ésteres 2,6-dialquilfenílicos tais como pentafluorofenila, 2,6dialquilfenila. Os grupos de proteção preferidos para ácidos são ésteres metílicos ou etílicos.
[00046] Os métodos de adição (um processo geralmente referido como proteção) e remoção (processo geralmente referidos como desproteção) tais como grupos de proteção de amina e ácido são bem conhecidos na técnica e disponíveis, por exemplo, em P.J.Kocienski, Protecting Groups, Thieme, 1994, que é por meio desta incorporado por referência em sua totalidade e em Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Edition (John Wiley & Sons, New York, 1999).
[00047] A não ser que de outra maneira mencionada, todas as formas tautoméricas dos compostos da invenção estão dentro do escopo da invenção. Isto é, os compostos da Fórmula I podem existir como tautômeros:
Figure BRPI1012549B1_D0012
[00048] Adicionalmente, a não ser que de outra maneira mencionada, as estruturas aqui descritas também são significadas para incluir compostos que diferem apenas na presença de um ou mais átomos isotopicamente enriquecidos. Por exemplo, os compostos tendo as presentes estruturas exceto para a substituição de hidrogênio por deutério ou trítio, ou a substituição de um de carbono por um de carbono
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 19/99
15/84 enriquecido com 13C ou 14C estão dentro do escopo desta invenção. Tais compostos são úteis, por exemplo, como ferramentas de análise, sondas em ensaios biológicos ou como agentes terapêuticos. [00049] Exemplos de solventes adequados são, mas não limitado a eles, água, metanol, diclorometano (DCM), acetonitrila, dimetilformamida (DMF), acetato de etila (EtOAc), álcool isopropílico (IPA), acetato de isopropila (IPAC), tetra-hidrofurano (THF), metil etil cetona (MEK), tbutanol e N-metil pirrolidona (NMP).
[00050] Exemplos de agentes de acoplamento adequados são, mas não limitado a estes, cloridreto de 1-(3-(dimetilamino)propil)-3-etilcarbodiimida (EDCI), hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-
1,1,3,3-tetrametilurônio (HBTU), 1-hidroxibenzotriazol (HOBT), hexafluorofosfato de 2-(1H-7-Azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil urônio (HATU), tetrafluorborato de 2-cloro-1,3-dimetil-2-imidazólio, 1-Hbenzotriazólio-1-[bis(dimetilamino)metileno]-5-cloroexafluorofosfato (HCTU), 2-cloro-4,6-dimetóxi-1,3, 5-triazina e anidrido de 2-propano fosfônico (T3P®).
[00051] Exemplos de bases adequadas são, mas não limitado a elas, K2CO3, N-Metilmorfolina (NMM), trietilamina (TEA), diisopropiloetil amina (DIEA), piridina, hidróxido de potássio, hidróxido de sódio, e metóxido de sódio.
COMPOSTOS [00052] Em uma modalidade, a invenção inclui um composto de Fórmula I:
OH ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, em que R é
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 20/99
16/84
COOH ou CH2OH.
[00053] [00054] [00055] estrutura:
Em algumas modalidades, R é CH2OH.
Em algumas modalidades, R é COOH.
Em outra modalidade, a invenção inclui um composto da o
Figure BRPI1012549B1_D0013
N H o
Figure BRPI1012549B1_D0014
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00056] estrutura:
Em outra modalidade, a invenção inclui um composto da o
o
Figure BRPI1012549B1_D0015
N H
N H
OH
Figure BRPI1012549B1_D0016
OH ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
Em uma modalidade, a invenção inclui uma composição [00057] farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula I, e um veículo ou adjuvante farmaceuticamente aceitável.
[00058] farmacêutica compreendendo
Em outra modalidade, a invenção inclui uma composição um composto da estrutura:
o
Figure BRPI1012549B1_D0017
N H o
Figure BRPI1012549B1_D0018
e um veículo ou adjuvante farmaceuticamente aceitável.
[00059] Em outra modalidade, a invenção inclui uma composição farmacêutica compreendendo um composto da estrutura:
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 21/99
17/84
Figure BRPI1012549B1_D0019
e um veículo ou adjuvante farmaceuticamente aceitável.
[00060] Em uma outra modalidade, a composição farmacêutica ainda compreende um agente adicional selecionado de um agente mucolítico, um broncodilatador, um antibiótico, um agente anti-invectivo, um agente anti-inflamatório, um modulador de CFTR, ou um agente nutricional.
III. SÍNTESE GERAL [00061] Os compostos de fórmula I podem ser sintetizados de acordo com o Esquema 1.
Esquema 1
Figure BRPI1012549B1_D0020
Π ΠΙ IV
Figure BRPI1012549B1_D0021
I [00062] No Esquema 1, as anilinas da Fórmula II, em que R e OH opcional e independentemente carregam os grupos de proteção, são reagidas com intermediários de ácido carboxílico da Fórmula III sob condições de acoplamento para formar compostos de Fórmula IV. Os compostos de Fórmula IV que carregam um ou mais grupos de proteção podem depois ser desprotegidos para fornecer derivados de Fórmula I.
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 22/99
18/84 [00063] A reação de acoplamento descrita no Esquema 1 pode ser obtida pela dissolução dos reagentes em um solvente adequado, tratamento da solução resultante com um reagente de acoplamento adequado opcionalmente na presença de uma base adequada.
[00064] Os derivados de quinolina de Fórmula III podem ser sintetizados de acordo com o Esquema 2.
Esquema 2
Figure BRPI1012549B1_D0022
Figure BRPI1012549B1_D0023
Figure BRPI1012549B1_D0024
Éter fenílico
228-232 °C
Figure BRPI1012549B1_D0025
Método 1 hci/h2o Método 2 1.2N NaOH
2. 2N HCI
Figure BRPI1012549B1_D0026
[00065] As anilinas da Fórmula II, em que R é -CH2OH, podem ser sintetizada de acordo com o Esquema 3.
Esquema 3
Figure BRPI1012549B1_D0027
Figure BRPI1012549B1_D0028
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 23/99
19/84 [00066] As anilinas da Fórmula II, em que R é -COOH podem ser sintetizadas de acordo com o Esquema 4.
Esquema 4
Figure BRPI1012549B1_D0029
OH OH OBn
2 3
Figure BRPI1012549B1_D0030
Figure BRPI1012549B1_D0031
USOS E MÉTODOS DE USO
Composições Farmaceuticamente Aceitáveis [00067] Em um aspecto da presente invenção, as composições farmaceuticamente aceitáveis são fornecidas, em que estas composições compreendem qualquer um dos compostos como aqui descritos, e opcionalmente compreendem um veículo, adjuvante ou veículo farmaceuticamente aceitável. Em certas modalidades, estas composições opcionalmente ainda compreendem um ou mais agentes terapêuticos adicionais.
[00068] Também será observado que certos compostos da presente invenção podem existir na forma livre para tratamento, ou onde apropriado, como um derivado farmaceuticamente aceitável ou um pró-medicamento deste. De acordo com a presente invenção, um derivado farmaceuticamente aceitável ou um pró-medicamento inclui, mas não limitado a eles, sais farmaceuticamente aceitáveis, ésteres, sais
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 24/99
20/84 de tais ésteres, ou qualquer outro aduto ou derivado que após a administração a um paciente com sua necessidade é capaz de fornecer, direta ou indiretamente, um composto como de outro modo aqui descrito, ou um metabólito ou resíduo deste.
[00069] Como aqui usado, o termo sal farmaceuticamente aceitável refere-se àqueles sais que são, dentro do escopo do julgamento médico íntegro, adequados para uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais inferiores sem a toxicidade indevida, irritação, reações alérgicas e similares, e são compatíveis com uma relação benefício/risco razoável. Um sal farmaceuticamente aceitável significa qualquer sal não tóxico ou sal de um éster de um composto desta invenção que, após a administração a um destinatário, é capaz de fornecer, direta ou indiretamente, um composto desta invenção ou um metabólito inibidor ativo ou resíduo deste.
[00070] Os sais farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos na técnica. Por exemplo, S. M. Berge, et al., descrevem os sais farmaceuticamente aceitáveis com detalhes em J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19, aqui incorporado por referência. Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos desta invenção incluem aqueles derivados ácidos e bases inorgânicos e orgânicos adequados. Exemplos de sais de adição de ácido não tóxicos farmaceuticamente aceitáveis são sais de um grupo de amino formado com ácidos inorgânicos tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico e ácido perclórico ou com ácidos orgânicos tais como ácido acético, ácido oxálico, ácido maléico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico ou ácido malônico ou mediante o uso de outros métodos utilizados na técnica tais como a troca iônica. Outros sais farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de adipato, alginato, ascorbato, aspartato, benzenossulfonato, benzoato, bissulfato, borato, butirato, canforato, canforsulfonato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodeci
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 25/99
21/84 lsulfato, edissilato (etanodissulfonato), etanossulfonato, formiato, fumarato, glicoeptonato, glicerofosfato, gluconato, hemissulfato, heptanoato, hexanoato, hidroiodeto, 2-hidróxi-etanossulfonato, lactobionato, lactato, laurato, sulfato de laurila, malato, maleato, malonato, metanossulfonato, 2-naftalenossulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalate, propionato, estearato, succinato, sulfato, tartarato, tiocianato, p-toluenossulfonato, undecanoato, valerato, e outros mais. Os sais derivados de bases apropriadas incluem sais de metal alcalino, metal alcalino terroso, amônio e N+(Ci-4 alquila)4. Esta invenção também provê a quaternização de quaisquer grupos contendo nitrogênio básicos dos compostos descritos neste documento. Os produtos solúveis em água ou óleo ou dispersáveis podem ser obtidos por tal quaternização. Os sais de metal alcalino ou alcalino terroso representativos incluem sódio, lítio, potássio, cálcio, magnésio, e outros mais. Outros sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, quando apropriados, amônio não tóxico, amônio quaternário, e cátions de amina formados usando contraíons tais como haleto, hidróxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, sulfonato de alquila inferior e sulfonato de arila.
[00071] Como descrito acima, as composições farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção adicionalmente compreendem um veículo, adjuvante, ou veículo farmaceuticamente aceitável, que, como usado neste documento, inclui quaisquer e todos os solventes, diluentes ou outro veículo líquido, auxiliares de dispersão ou suspensão, agentes ativos de superfície, agentes isotônicos, agentes espessantes ou emulsificantes, conservantes, aglutinantes sólidos, lubrificantes e outros mais, como adequados para a forma de dosagem particular desejada. A Remington's Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980) descreve vários veículos usados na formulação de composições farmaceuticamente
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 26/99
22/84 aceitáveis e técnicas conhecidas para a sua preparação. Exceto na medida em que qualquer meio veículo convencional seja incompatível com os compostos da invenção, tal como através da produção de qualquer efeito biológico indesejável ou de outra forma da interação de uma maneira deletéria com qualquer outro componente da composição farmaceuticamente aceitável, sua utilização está prevista para estar dentro do escopo desta invenção. Alguns exemplos de materiais que podem servir como veículos farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não são limitados a estes, trocadores de íon, alumina, estearato de alumínio, lecitina, proteínas séricas, tais como albumina de soro humano, substâncias tampão tais como fosfatos, glicina, ácido sórbico, ou sorbato de potássio, misturas de glicerídeo parciais de ácidos graxos vegetais saturados, água, sais ou eletrólitos, tais como sulfato de protamina, hidrogênio fosfato dissódico, hidrogênio fosfato de potássio, cloreto de sódio, sais de zinco, sílica coloidal, trissilicato de magnésio, polivinil pirrolidona, poliacrilatos, ceras, polímeros de bloco de polietileno-polioxipropileno, gordura de lã, açúcares tais como lactose, glicose e sacarose; amidos tais como amido de milho e fécula de batata, celulose e seus derivados tais como carboximetil celulose de sódio, etil celulose e acetato de celulose; tragacanto em pó; malte; gelatina; talco; excipientes tais como manteiga de cacau e ceras de supositório; óleos tais como óleo de amendoim, óleo de algodão; óleo de cártamo, óleo de sésamo, óleo de oliva, óleo de milho e óleo de soja; glicóis; um tal propileno glicol ou polietileno glicol; ésteres tais como oleato de etila e laurato de etila; ágar; agentes tamponantes, tais como hidróxido de magnésio e hidróxido de alumínio; ácido algínico; água livre de pirogênio; salina isotônica; solução de Ringer; álcool etílico, e as soluções de tampão de fosfato, assim como outros lubrificantes compatíveis não tóxicos tais como lauril sulfato de sódio e estearato de magnésio, assim como agentes corantes, agentes de liberação, agen
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 27/99
23/84 tes de revestimento, adoçantes, aromatizantes e agentes perfumantes, conservantes e antioxidantes também podem estar presentes na composição, de acordo com a decisão do formulador.
Usos de Compostos e Composições Farmaceuticamente Aceitáveis [00072] Em mais outro aspecto, a presente invenção fornece um método de tratamento, ou diminuição da gravidade de uma condição, doença ou distúrbio implicados por mutação de CFTR. Em certas modalidades, a presente invenção fornece um método de tratamento de uma condição, doença ou distúrbio envolvido por uma deficiência da atividade de CFTR, o método compreendendo administrar uma composição que compreende um composto de Fórmula I a um indivíduo, de preferência um mamífero, com sua necessidade.
[00073] Em outro aspecto, a invenção também fornece um método de tratamento ou diminuição da gravidade de uma doença em um paciente compreendendo a administração ao dito paciente de uma das composições como aqui definidas, e a dita doença é selecionada de fibrose cística, asma, COPD induzida por fumo, bronquite crônica, rinossinusite, constipação, pancreatite, insuficiência pancreática, infertilidade masculina causada pela ausência congênita bilateral dos vasos deferentes (CBAVD), doença pulmonar leve, pancreatite idiopática, aspergilose broncopulmonar alérgica (ABPA), doença hepática, enfisema hereditário, hemocromatose hereditária, deficiências de coagulação por fibrinólise, tais como deficiência de proteína C, angioedema hereditário Tipo 1, deficiências de processamento de lipídeo, tais como a hipercolesterolemia familiar, quilomicronemia Tipo 1, abetalipoproteinemia, doenças de depósito lisossômico, tais como doença da célula I/pseudo-Hurler, mucopolissacaridoses, Sandhof/Tay-Sachs, CriglerNajjar tipo II, poliendocrinopatia/hiperinsulemia, Diabetes melito, nanismo Laron, deficiência de mileoperoxidase, hipoparatireoidismo primário, melanoma, glicanose CDG tipo 1, hipotireoidismo congênito,
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 28/99
24/84 osteogênese imperfeita, hipofibrinogenemia hereditária, deficiência de ACT, Diabetes insípido (DI), DI neurofiseal, DI neprogênico, síndrome de Charcot-Marie Tooth, doença de Perlizaeus-Merzbacher, doenças neurodegenerativas tais como doença de Alzheimer, doença de Parkinson, esclerose lateral amiotrófica, plasy supranuclear progressiva, doença de Pick, vários distúrbios neurológicos de poliglutamina tais como a de Huntington, ataxia espinocerebular tipo I, atrofia muscular espinhal e bulbar, dentatorrubal palidoluisiano, e distrofia miotônica, assim como encefalopatias espongiformes, tais como a doença de Creutzfeldt-Jakob hereditária (devido ao defeito de processamento da proteína príon), doença de Fabry, síndrome de Straussler-Scheinker, COPD, doença do olho seco, ou doença de Sjogren, Osteoporose, Osteopenia, cicatrização óssea e crescimento ósseo (incluindo reparação óssea, regeneração óssea, redução da reabsorção óssea e aumento da deposição óssea), Síndrome de Gorham, canalopatias de cloreto tais como miotonia congênita (formas Thomson e Becker), síndrome de Bartter tipo III, doença de Dent, hiperecplexia, epilepsia, hiperecplexia, doença de depósito lisossômico, síndrome de Angelman, e discinesia ciliar primária (PCD), um termo para os distúrbios hereditários da estrutura e/ou função dos cílios, incluindo PCD com situs inversus (também conhecido como síndrome de Kartagener), PCD sem situs inversus e aplasia ciliar.
[00074] Em algumas modalidades, o método inclui o tratamento ou diminuição da gravidade da fibrose cística em um paciente compreendendo a administração ao dito paciente de uma das composições como aqui definidas. Em certas modalidades, o paciente possui formas mutantes de CFTR humano. Em outras modalidades, o paciente possui um ou mais das seguintes mutações AF508, R117H e G551D de CFTR humano. Em uma modalidade, o método inclui o tratamento ou diminuição da gravidade da fibrose cística em um paciente que possui
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 29/99
25/84 a mutação AF508 de CFTR humano compreendendo administrar a dito paciente uma das composições como aqui definidas. Em uma modalidade, o método inclui o tratamento ou diminuição da gravidade da fibrose cística em um paciente que possui a mutação G551D de CFTR humano compreendendo administrar a dito paciente uma das composições como aqui definidas. Em uma modalidade, o método inclui o tratamento ou diminuição da gravidade da fibrose cística em um paciente que possui a mutação AF508 de CFTR humano em pelo menos um alelo compreendendo administrar a dito paciente uma das composições como aqui definidas. Em uma modalidade, o método inclui o tratamento ou diminuição da gravidade da fibrose cística em um paciente que possui a mutação AF508 de CFTR humano em ambos os alelos compreendendo administrar a dito paciente uma das composições como aqui definidas. Em uma modalidade, o método inclui o tratamento ou diminuição da gravidade da fibrose cística em um paciente que possui a mutação G551D de CFTR humano em pelo menos um alelo compreendendo administrar a dito paciente uma das composições como aqui definidas. Em uma modalidade, o método inclui o tratamento ou diminuição da gravidade da fibrose cística em um paciente que possui a mutação G551D de CFTR humano em ambos os alelos compreendendo administrar a dito paciente uma das composições como aqui definidas.
[00075] Em algumas modalidades, o método inclui diminuir a gravidade da fibrose cística em um paciente compreendendo a administração a dito paciente de uma das composições como aqui definidas. Em certas modalidades, o paciente possui formas mutantes de CFTR humano. Em outras modalidades, o paciente possui uma ou mais das seguintes mutações AF508, R117H e G551D de CFTR humano. Em uma modalidade, o método inclui diminuir a gravidade da fibrose cística em um paciente que possui a mutação AF508 de CFTR humano
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 30/99
26/84 compreendendo administrar a dito paciente uma das composições como aqui definidas. Em uma modalidade, o método inclui diminuir a gravidade da fibrose cística em um paciente que possui a mutação G551D de CFTR humano compreendendo administrar ao dito paciente uma das composições como aqui definidas. Em uma modalidade, o método inclui diminuir a gravidade da fibrose cística em um paciente que possui a mutação AF508 de CFTR humano em pelo menos um alelo compreendendo administrar ao dito paciente uma das composições como aqui definidas. Em uma modalidade, o método inclui diminuir a gravidade da fibrose cística em um paciente que possui a mutação DF508 de CFTR humano em ambos os alelos compreendendo a administração ao dito paciente de uma das composições como aqui definidas. Em uma modalidade, o método inclui diminuir a gravidade da fibrose cística em um paciente que possui a mutação G551D de CFTR humano em pelo menos um alelo compreendendo administrar ao dito paciente uma das composições como aqui definidas. Em uma modalidade, o método inclui diminuir a gravidade da fibrose cística em um paciente que possui a mutação G551D de CFTR humano em ambos os alelos compreendendo a administração ao dito paciente de uma das composições como aqui definidas.
[00076] Em alguns aspectos, a invenção fornece um método de tratamento ou diminuição da gravidade da osteoporose em um paciente que compreende administrar a dito paciente o composto de Fórmula 1 ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00077] Em certas modalidades, o método de tratamento ou diminuição da gravidade da osteoporose em um paciente compreende administrar ao dito paciente uma composição farmacêutica como aqui descrita.
[00078] Em alguns aspectos, a invenção fornece um método de tratamento ou diminuição da gravidade de osteopenia em uma paciente
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 31/99
27/84 que compreende administrar a dito paciente o composto de Fórmula 1 ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00079] Em certas modalidades, o método de tratamento ou diminuição da gravidade da Osteopenia em um paciente compreende administrar ao dito paciente uma composição farmacêutica como aqui descrita.
[00080] Em alguns aspectos, a invenção fornece um método de cicatrização óssea e/ou reparação óssea em um paciente compreendendo a administração a dito paciente do composto de Fórmula 1 ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00081] Em certas modalidades, o método de cicatrização óssea e/ou reparação óssea em um paciente compreende administrar ao dito paciente uma composição farmacêutica como aqui descrita.
[00082] Em alguns aspectos, a invenção fornece um método de reduzir a reabsorção óssea em um paciente compreendendo a administração ao dito paciente do composto de Fórmula 1 ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00083] Em alguns aspectos, a invenção fornece um método de aumentar a deposição óssea em um paciente compreendendo a administração a dito paciente do composto da Fórmula 1 ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00084] Em certas modalidades, o método de aumentar a deposição óssea em um paciente compreende administrar ao dito paciente uma composição farmacêutica como aqui descrita.
[00085] Em alguns aspectos, a invenção fornece um método de tratamento ou diminuição da gravidade de COPD em um paciente compreendendo a administração ao dito paciente do composto de Fórmula 1 ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00086] Em certas modalidades, o método de tratamento ou diminuição da gravidade de COPD em um paciente compreende adminis
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 32/99
28/84 trar ao dito paciente uma composição farmacêutica como aqui descrita.
[00087] Em alguns aspectos, a invenção fornece um método de tratamento ou diminuição da gravidade de COPD induzida pelo fumo em um paciente compreendendo a administração a dito paciente do composto de Fórmula 1 ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00088] Em certas modalidades, o método de tratamento ou diminuição da gravidade de COPD induzida pelo fumo em um paciente compreende administrar ao dito paciente uma composição farmacêutica como aqui descrita.
[00089] Em alguns aspectos, a invenção fornece um método de tratamento ou diminuição da gravidade de bronquite crônica em um paciente compreendendo a administração ao dito paciente do composto de Fórmula 1 ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[00090] Em certas modalidades, o método de tratamento ou diminuição da gravidade da bronquite crônica em um paciente compreende administrar a dito paciente uma composição farmacêutica como aqui descrita.
[00091] De acordo com uma modalidade alternativa preferida, a presente invenção fornece um método de tratamento da fibrose cística que compreende a etapa de administrar ao dito mamífero uma composição que compreende um composto da presente invenção.
[00092] De acordo com a invenção uma quantidade eficaz do composto ou composição farmaceuticamente aceitável é aquela quantidade eficaz para o tratamento ou diminuição da gravidade de uma ou mais das doenças, distúrbios ou condições como acima recitadas.
[00093] Outro aspecto da presente invenção fornece um método de administração de uma composição farmacêutica mediante a administração oral a um paciente pelo menos uma vez por dia da composição compreendendo um composto de Fórmula 1. Em uma modalidade, o
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 33/99
29/84 método compreende administrar uma composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula 1 a cada 24 horas. Em outra modalidade, o método compreende administrar uma composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula 1 a cada 12 horas. Em uma modalidade adicional, o método compreende administrar uma composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula 1 três vezes por dia. Em ainda uma modalidade, o método compreende administrar uma composição farmacêutica compreendendo um composto de Fórmula 1 a cada 4 horas.
[00094] Os compostos e composições, de acordo com o método da presente invenção, podem ser administrados utilizando qualquer quantidade e qualquer via de administração eficaz para o tratamento ou diminuição da gravidade de uma ou mais das doenças, distúrbios ou condições como acima recitadas.
[00095] Em certas modalidades, os compostos e composições da presente invenção são úteis para tratar ou diminuir a gravidade da fibrose cística em pacientes que apresentam atividade residual de CFTR na membrana apical do epitélio respiratório e não respiratório. A presença de atividade residual de CFTR na superfície epitelial pode ser facilmente detectada usando os métodos conhecidos na técnica, por exemplo, técnicas eletrofisiológicas, bioquímicas ou histoquímica padrão. Tais métodos identificam a atividade de CFTR utilizando técnicas eletrofisiológicas in vivo ou ex vivo, medição de concentrações de Cl- no suor ou saliva, ou técnicas bioquímica ou histoquímicas ex vivo para monitorar a densidade da superfície celular. A utilização de tais métodos, a atividade residual de CFTR pode ser facilmente detectada em pacientes heterozigotos ou homozigotos para uma variedade de diferentes mutações, incluindo pacientes homozigotos ou heterozigotos para a mutação mais comum, AF508.
[00096] Em outra modalidade, os compostos e composições da
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 34/99
30/84 presente invenção são úteis para tratar ou diminuir a gravidade da fibrose cística em pacientes que possuem atividade residual de CFTR induzida ou aumentada usando s métodos farmacológicos ou a terapia gênica. Tais métodos aumentam a quantidade de CFTR presente na superfície celular, induzindo assim uma atividade até então ausente de CFTR em um paciente ou aumentando o nível de atividade existente de CFTR residual em um paciente.
[00097] Em uma modalidade, os compostos e composições da presente invenção são úteis para tratar ou diminuir a gravidade da fibrose cística em pacientes dentro de certos genótipos que apresentam atividade de CFTR residual, por exemplo, as mutações de classe III (regulação ou obstrução prejudicada), mutações de classe IV (condutância alterada), ou mutações de classe V (síntese reduzida) (Lee R. ChooKang, Pamela L., Zeitlin, Type I, II, III, IV, and V cystic fibrosis Tansmembrane Conductance Regulator Defects and Opportunities of Therapy; Current Opinion in Pulmonary Medicine 6:521 - 529, 2000). Outros genótipos de paciente que apresentam atividade residual de CFTR incluem pacientes homozigotos para uma destas classes ou heterozigoto com qualquer outra classe de mutações, incluindo mutações de classe I, mutações de classe II, ou uma mutação que carece de classificação.
[00098] Em uma modalidade, os compostos e composições da presente invenção são úteis para tratar ou diminuir a gravidade da fibrose cística em pacientes dentro de certos fenótipos clínicos, por exemplo, um fenótipo clínico moderado a leve que tipicamente se correlaciona com a quantidade de atividade residual de CFTR na membrana apical do epitélio. Tais fenótipos incluem pacientes que apresentam insuficiência pancreática ou pacientes com diagnóstico de pancreatite idiopática e ausência congênita bilateral do canal deferente, ou doença pulmonar leve.
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 35/99
31/84 [00099] A quantidade exata requerida variará de indivíduo para indivíduo, dependendo da espécie, idade e estado geral do indivíduo, da gravidade da infecção, do agente particular, seu modo de administração, e assim por diante. Os compostos da invenção são preferivelmente formulados em forma de dose unitária para facilitar a administração e uniformidade da dose. A expressão forma da unidade de dosagem como usada neste documento refere-se a uma unidade fisicamente discreta do agente apropriado para o paciente a ser tratado. Ficará entendido, porém, que o uso diário total dos compostos e composições da presente invenção será decidido pelo médico assistente dentro do escopo do julgamento médico íntegro. O nível de dose eficaz específico para qualquer paciente ou organismo particular dependerá de uma variedade de fatores, incluindo o distúrbio a ser tratado e a gravidade do distúrbio; a atividade do composto específico empregado; a composição específica empregada; a idade, peso corporal, saúde geral, sexo e dieta do paciente; o tempo de administração, via de administração e taxa de excreção do composto específico empregado; a duração do tratamento; medicamentos usados em combinação ou coincidência com o composto específico empregado, e outros fatores bem conhecidos nas artes médicas. O termo paciente, como aqui usado, significa um animal, de preferência um mamífero, e mais preferivelmente um ser humano.
[000100] As composições farmaceuticamente aceitáveis desta invenção podem ser administradas aos seres humanos e outros animais por via oral, retal, parenteral, intracisternal, por via intravaginal, por via intraperitoneal, topicamente (como por pós, pomadas, gotas ou emplastros), por via bucal, como uma pulverização oral ou nasal, ou coisa parecida, dependendo da gravidade da infecção sendo tratada. Em certas modalidades, os compostos da invenção podem ser administrados por via oral ou parenteral em níveis de dosagem de cerca de 0,01
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 36/99
32/84 mg/kg a cerca de 50 mg/kg e preferivelmente de cerca de 0,5 mg/kg a cerca de 25 mg/kg, de peso corporal do indivíduo por dia, uma ou mais vezes ao dia, para obter o efeito terapêutico desejado.
[000101] As formas de dosagem líquidas para a administração oral incluem, mas não são limitadas a estas, emulsões farmaceuticamente aceitáveis, microemulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires. Além dos compostos ativos, as formas de dosagem líquidas podem conter diluentes inertes comumente usados na técnica tal como, por exemplo, água ou outros solventes, agentes solubilizantes e emulsificantes tais como álcool etílico, álcool isopropílico, carbonato de etila, acetato de etila, álcool benzílico, benzoato de benzila, propileno glicol, 1,3-butileno glicol, dimetilformamida, óleos (em particular, óleos de sementes de algodão, de amendoim, gérmen de milho, oliva, mamona, e gergelim), glicerol, álcool tetra-hidrofurfurílico, polietileno glicóis e ésteres de ácido graxo de sorbitano, e suas misturas. Além de diluentes inertes, as composições orais também podem incluir adjuvantes tais como agentes umectantes, emulsificantes e agentes de suspensão, adoçantes, aromatizantes, e agentes perfumantes.
[000102] As preparações injetáveis, por exemplo, suspensões aquosas ou oleaginosas estéreis injetáveis, podem ser formuladas de acordo com a técnica conhecida usando agentes dispersantes ou umectantes e agentes de suspensão adequados. A preparação injetável estéril também pode ser uma solução, suspensão ou emulsão estéril injetável em um diluente ou solvente parenteralmente aceitável não tóxico, por exemplo, como uma solução em 1,3-butanodiol. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregados estão a água, solução de Ringer, U.S.P. e solução de cloreto de sódio isotônico. Além disso, óleos fixos estéreis são convencionalmente empregados como um meio solvente ou de suspensão. Para este propósito qualquer óleo fixo suave pode ser empregado incluindo mono- ou diglicerídeos sinté
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 37/99
33/84 ticos. Além disso, os ácidos graxos tais como ácido oléico são utilizados na preparação de injetáveis.
[000103] As formulações injetáveis podem ser esterilizadas, por exemplo, pela filtração através de um filtro de retenção de bactérias, ou pela incorporação de agentes esterilizantes na forma de composições sólidas estéreis que podem ser dissolvidas ou dispersas em água estéril ou outro meio injetável estéril antes do uso.
[000104] A fim de prolongar o efeito de um composto da presente invenção, é sempre desejável retardar a absorção do composto a partir de injeção subcutânea ou intramuscular. Isto pode ser executado através da utilização de uma suspensão líquida de material cristalino ou amorfo com solubilidade fraca em água. A taxa de absorção do composto nesse caso depende da sua taxa de dissolução que, por sua vez, pode depender do tamanho de cristal e forma cristalina. Alternativamente, a absorção retardada de uma forma de composto administrada por via parenteral é executada pela dissolução ou suspensão do composto em um veículo de óleo. As formas de depósito injetáveis são feitas através da formação de matrizes microencapsuladas do composto em polímeros biodegradáveis tais como polilactídeopoliglicolídeo. Dependendo da relação de composto para polímero e da natureza do polímero particular empregado, a taxa de liberação de composto pode ser controlada. Exemplos de outros polímeros biodegradáveis incluem poli(ortoésteres) e poli(anidridos). As formulações injetáveis de depósito também são preparadas por capturar o composto em lipossomos ou microemulsões que são compatíveis com os tecidos do corpo.
[000105] As composições para a administração retal ou vaginal são preferivelmente supositórios que podem ser preparados através da mistura dos compostos desta invenção com excipientes ou veículos adequados não irritativos tais como manteiga de cacau, polietileno gli
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 38/99
34/84 col ou uma cera de supositório que são sólidos na temperatura ambiente, mas líquidos na temperatura do corpo e, portanto, derretem no reto ou na cavidade vaginal e liberam o composto ativo.
[000106] As formas de dosagem sólidas para a administração oral incluem cápsulas, tabletes, pílulas, pós e grânulos. Em tais formas de dosagem sólidas, o composto ativo é misturado com pelo menos um excipiente ou veículo inerte farmaceuticamente aceitável tal como citrato de sódio ou fosfato dicálcico e/ou a) cargas ou diluentes tais como amidos, lactose, sacarose, glicose, manitol e ácido silícico, b) aglutinantes tais como, por exemplo, carboximetilcelulose, alginato, gelatina, polivinilpirrolidinona, sacarose e acácia, c) umectantes tais como o glicerol, d) agentes desintegrantes tais como ágar - ágar, carbonato de cálcio, amido de batata ou tapioca, ácido algínico, certos silicatos, e carbonato de sódio, e) agentes retardantes de solução tais como parafina, f) aceleradores da absorção tais como compostos de amônio quaternário,g) agentes umectantes tais como, por exemplo, álcool cetílico e monoestearato de glicerol, h) absorventes tais como caulim e argila bentonítica, e i) lubrificantes tais como talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, polietileno glicóis sólidos, lauril sulfato de sódio, e suas misturas. No caso de cápsulas, tabletes e pílulas, a forma de dosagem também pode compreender agentes tamponantes.
[000107] As composições sólidas de um tipo semelhante também podem ser empregadas como cargas em cápsulas de gelatina carregadas macias e sólidas usando tais excipientes como a lactose ou açúcar do leite, assim como polietileno glicóis de peso molecular elevado e outros mais. As formas de dosagem sólidas de tabletes, drágeas, cápsulas, pílulas e grânulos podem ser preparadas com revestimentos e estruturas tais como revestimentos entéricos e outros revestimentos bem conhecidos na técnica de formulação farmacêutica. Elas podem opcionalmente conter agentes opacificantes e também
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 39/99
35/84 podem ser de uma composição que elas liberem apenas o(s) ingrediente(s) ativo(s), ou preferencialmente, em uma determinada parte do trato intestinal, opcionalmente, de uma forma retardada. Exemplos de inclusão de composições que podem ser usadas incluem as substâncias poliméricas e ceras. As composições sólidas de um tipo semelhante também podem ser empregadas como cargas nas cápsulas de gelatina carregadas macias e sólidas usando tais excipientes como lactose ou açúcar do leite assim como de polietileno glicóis de peso molecular elevado e outros mais.
[000108] Os compostos ativos também podem estar na forma microencapsulada com um ou mais excipientes como acima mencionados. As formas de dosagem sólidas de tabletes, drágeas, cápsulas, pílulas e grânulos podem ser preparadas com revestimentos e estruturas tais como revestimentos entéricos, revestimentos de controle da liberação e outros revestimentos bem conhecido na técnica de formulação farmacêutica. Em tais formas de dosagem sólidas o composto ativo pode ser misturado com pelo menos um diluente inerte tal como sacarose, lactose ou amido. Tais formas de dosagem também podem compreender, como é prática normal, substâncias adicionais diferentes dos diluentes inertes, por exemplo, lubrificantes de formação de tabletes e outros auxiliares de formação de tabletes tais como estearato de magnésio e celulose microcristalina. No caso de cápsulas, tabletes e pílulas, as formas de dosagem também podem compreender agentes tamponantes. Eles podem opcionalmente conter agentes opacificantes e também podem ser de uma composição que eles liberem apenas o(s) ingrediente(s) ativo(s), ou preferencialmente, em uma determinada parte do trato intestinal, opcionalmente, de uma forma retardada. Exemplos de inclusão de composições que podem ser usadas incluem substâncias poliméricas e ceras.
[000109] As formas de dosagem para a administração tópica ou
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 40/99
36/84 transdérmica de um composto desta invenção incluem pomadas, pastas, cremes, loções, géis, pós, soluções, pulverizações, inalantes ou emplastros. O componente ativo é misturado sob condições estéreis com um veículo farmaceuticamente aceitável e quaisquer conservantes ou tampões necessários que possam ser requeridos. Formulação oftálmica, gotas auriculares e colírios também são contemplados como estando dentro do escopo da presente invenção. Adicionalmente, a presente invenção contempla o uso de emplastros transdérmicos, que têm a vantagem adicional de fornecer liberação controlada de um composto ao corpo. Tais formas farmacêuticas são preparadas pela dissolução ou distribuição do composto no meio apropriado. Os intensificadores de absorção também podem ser usados para aumentar o fluxo do composto através da pele. A taxa pode ser controlada por fornecer uma membrana controladora da taxa ou por dispersar o composto em uma matriz polimérica ou gel.
[000110] A atividade de um composto utilizado nesta invenção como um modulador de CFTR pode ser analisada de acordo com os métodos descritos de uma forma geral na técnica e nos Exemplos neste documento.
[000111] Também será observado que os compostos e composições farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser empregados em terapias de combinação, isto é, os compostos e composições farmaceuticamente aceitável podem ser administrados concomitantemente com, antes ou após a um ou mais de outros procedimentos terapêuticos ou médicos desejados. A combinação particular de terapias (produtos terapêuticos ou procedimentos) para empregar em um esquema de combinação levará em conta a compatibilidade dos produtos terapêuticos e/ou procedimentos desejados e o efeito terapêutico desejado a ser alcançado. Também será observado que as terapias empregadas podem conseguir um efeito desejado para o
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 41/99
37/84 mesmo distúrbio (por exemplo, um composto da invenção pode ser administrado concomitantemente com outro agente usado para tratar o mesmo distúrbio), ou podem obter diferentes efeitos (por exemplo, controle de quaisquer efeitos adversos). Como aqui usado, os agentes terapêuticos adicionais que são normalmente administrados para tratar ou prevenir uma doença particular, ou condição, são conhecidos como apropriados para a doença ou condição a ser tratada.
[000112] Em uma modalidade, o agente adicional é selecionado de um agente mucolítico, broncodilatador, um antibiótico, um agente antiinfeccioso, um agente anti-inflamatório, um modulador de CFTR diferente de um composto da presente invenção, ou uma agente nutricional.
[000113] Em uma modalidade, o agente adicional é um antibiótico. Os antibióticos exemplares úteis aqui incluem tobramicina, incluindo pó inalatório de tobramicina (TIP), azitromicina, aztreonam, incluindo a forma de aerossol de aztreonam, amicacina, incluindo as suas formulações de lipossomas, ciprofloxacina, incluindo as suas formulações adequadas para administração por inalação, levoflaxacino, incluindo as suas formulações em aerossol, e combinações de dois antibióticos, por exemplo, fosfomicina e tobramicina.
[000114] Em uma outra modalidade, o agente adicional é um mucolítico. Os mucolíticos exemplares úteis neste documento incluem Pulmozyme®.
[000115] Em outra modalidade, o agente adicional é um broncodilatador. Os broncodilatadores exemplares incluem albuterol, sulfato de metaprotenerol, acetato de pirbuterol, salmeterol, ou sulfato de tetrabulina.
[000116] Em outra modalidade, o agente adicional é eficaz no restabelecimento da superfície líquida das vias aéreas do pulmão. Tais agentes melhoram a circulação de sal dentro e fora das células, permiPetição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 42/99
38/84 tindo que o muco nas vias aéreas do pulmão seja mais hidratado e, portanto, mais facilmente limpo. Tais agentes exemplares incluem salina hipertônica, denufosol tetrassódio ([[(3S, 5R)-5-(4-amino-2oxopirimidin-1-il)-3-hidroxioxolan-2-il]metóxi-hidroxifosforil] [[[(2R,3S,4R,5R)-5-(2,4-dioxopirimidin-1-il)-3,4 di-hidroxioxolan-2il]metóxi-hidroxifosforil]óxi-hidroxifosforil] fosfato de hidrogênio), ou bronquitol (formulação inalada de manitol).
[000117] Em uma outra modalidade, o agente adicional é um agente anti-inflamatório, isto é, um agente que pode reduzir a inflamação nos pulmões. Tais agentes exemplares úteis aqui incluem ibuprofeno, ácido docosaexanoico (DHA), sildenafil, glutationa inalada, pioglitazona, hidroxicloroquina, ou simavastatina.
[000118] Em uma outra modalidade, o agente adicional é um modulador de CFTR diferente do composto 1, isto é, um agente que tem o efeito de modular a atividade de CFTR. Tais agentes exemplares incluem ataluren (PTC124®; ácido 3-[5-(2-fluorofenil)-1,2,4-oxadiazol-3il]benzoico), sinapultide, lancovutide, depelestat (um inibidor da elastase neutrófila recombinante humana), cobiprostone (ácido 7-{(2R, 4aR, 5R, 7aR)-2-[(3S)-1,1-difluoro-3-metilpentil]-2-hidróxi-6-oxooctahidrociclopenta[b] pirano-5-il}heptanoico), ou ácido (3-(6-(1-(2,2difluorobenzo[d][1,3]dioxol-5-il) ciclopropanocarboxamido)-3metilpiridin-2-il)benzoico. Em outra modalidade, o agente adicional é ácido (3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioxol-5-il) ciclopropanocarboxamido)-3-metilpiridin-2-il)benzoico.
[000119] Em outra modalidade, o agente adicional é um agente nutricional. Tais agentes exemplares incluem pancrelipase (reposição da enzima pancreática), incluindo Pancrease®, Pancreacarb®, Ultrase® ou Creon®, Liprotomase® (anteriormente Trizitek®), Aquadeks®, ou inalação de glutationa. Em uma modalidade, o agente nutricional adicional é pancrelipase.
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 43/99
39/84 [000120] A quantidade de agente terapêutico adicional presente nas composições desta invenção não será mais do que a quantidade que seria normalmente administrada em uma composição que compreende este agente terapêutico como o único agente ativo. De preferência a quantidade de agente terapêutico adicional nas composições presentemente descritas variará de cerca de 50% a 100% da quantidade normalmente presente em uma composição que compreende este agente como o único agente terapeuticamente ativo.
[000121] Os compostos desta invenção ou composições farmaceuticamente aceitáveis também podem ser incorporados nas composições para o revestimento de um dispositivo médico implantado, tal como próteses, válvulas artificiais, enxertos vasculares, sondas e cateteres. Consequentemente, a presente invenção, em um outro aspecto, inclui uma composição para o revestimento de um dispositivo implantável compreendendo um composto da presente invenção, conforme descrito acima de uma forma geral, e em classes e subclasses inclusas, e um veículo adequado para o revestimento de dito dispositivo implantável. Em mais outro aspecto, a presente invenção inclui um dispositivo implantável revestido com uma composição que compreende um composto da presente invenção conforme descrito acima de uma forma geral, e em classes e subclasses inclusas, e um veículo adequado para o revestimento de dito dispositivo implantável. Os revestimentos adequados e a preparação geral dos dispositivos implantáveis revestidos são descritos nas Patentes US 6.099.562; 5.886.026 e 5.304.121. Os revestimentos são tipicamente materiais poliméricos biocompatíveis tais como um polímero de hidrogel, polimetildissiloxano, policaprolactona, polietileno glicol, ácido polilático, acetato de etileno vinila e suas misturas. Os revestimentos podem opcionalmente ser ainda cobertos por um acabamento adequado de fluorossilicona, polissacarídeos, polietileno glicol, fosfolipídios ou suas combinações para trans
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 44/99
40/84 mitir características de liberação controlada na composição.
[000122] Um outro aspecto da invenção refere-se à modulação da atividade de CFTR em uma amostra biológica ou um paciente (por exemplo, in vitro ou in vivo), cujo método compreende a administração ao paciente, ou colocar em contato a dita amostra biológica com um composto de Fórmula I ou uma composição que compreende dito composto. O termo amostra biológica, como usado neste documento, inclui, sem limitação, as culturas celulares ou seus extratos; material submetido aàbiopsia obtido de um mamífero ou seus extratos; e sangue, saliva, urina, fezes, sêmen, lágrimas, ou outros fluidos ou extratos corporais destes.
[000123] A modulação de CFTR em uma amostra biológica é útil para uma variedade de propósitos que são conhecidos por um indivíduo versado na técnica. Exemplos de tais propósitos incluem, mas não são limitados a estes, o estudo de CFTR em fenômenos biológicos e patológicos; e a avaliação comparativa de novos moduladores de CFTR.
[000124] Em mais outra modalidade, um método de modulação da atividade de um canal de ânion in vitro ou in vivo, é fornecido compreendendo a etapa de colocar em contato dito canal com um composto de Fórmula I. Nas modalidades preferidas, o canal de ânion é um canal de cloreto ou um canal de bicarbonato. Em outras modalidades preferidas, o canal de ânion é um canal de cloreto.
[000125] De acordo com uma modalidade alternativa, a presente invenção fornece um método de aumentar o número de CFTR funcional em uma membrana de uma célula, compreendendo a etapa de colocar em contato a dita célula com um composto de Fórmula I.
[000126] De acordo com outra modalidade preferida, a atividade do CFTR é medida através da medição do potencial de voltagem da transmembrana. Meios para medir o potencial de voltagem através de uma membrana na amostra biológica podem empregar qualquer um
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 45/99
41/84 dos métodos conhecidos na técnica, tal como o ensaio potencial de membrana ótica ou outros métodos eletrofisiológicos.
[000127] O ensaio potencial de membrana ótica utiliza sensores FRET sensíveis à voltagem descritos por Gonzalez e Tsien (Ver, Gonzalez, J. E. and R. Y. Tsien (1995) Voltage sensing by fluorescence resonance energy transfer in single cells. Biophys J 69(4): 1272-80, and Gonzalez, J. E. and R. Y. Tsien (1997); Improved indicators of cell membrane potential that use fluorescence resonance energy transfer Chem Biol 4(4): 269-77), em combinação com instrumentação para medir as mudanças de fluorescência tais como a Voltage/Ion Probe Reader (VIPR) (ver, Gonzalez, J. E., K. Oades, et al. (1999) Cellbased assays and instrumentation for screening ion-channel targets Drug Discov Today 4(9): 431-439).
[000128] Estes ensaios sensíveis a voltagem se baseiam na mudança na transferência de energia ressonante de fluorescência (FRET) entre a tintura solúvel na membrana, sensível à voltagem, DiSBAC2(3), e um fosfolipídio fluorescente, CC2-DMPE, que é anexado à cúspide externa da membrana plasmática e atua como um doador FRET. As mudanças no potencial da membrana (Vm) motivam o DiSBAC2(3) negativamente carregado a redistribuir através da membrana plasmática e a quantidade de transferência de energia de CC2-DMPE muda consequentemente. As mudanças na emissão de fluorescência podem ser monitoradas usando VIPR® II, que é um manipulador de líquido integrado e detector fluorescente designado para conduzir as peneiras com base celular em placas de microtitulação de 96 ou 384 reservatórios.
[000129] Em uma modalidade, a presente invenção fornece um método de modulação da atividade de CFTR em uma amostra biológica compreendendo a etapa de colocar em contato a dita amostra biológica com um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente acei
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 46/99
42/84 tável deste, em que R é definido como acima.
[000130] Em uma modalidade, a presente invenção fornece um método de modulação da atividade de CFTR em uma amostra biológica compreendendo a etapa de colocar em contato a dita amostra biológi ca com um composto da estrutura:
Figure BRPI1012549B1_D0032
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[000131] Em uma modalidade, a presente invenção fornece um método de modulação da atividade de CFTR em uma amostra biológica compreendendo a etapa de colocar em contato a dita amostra biológica com um composto da estrutura:
Figure BRPI1012549B1_D0033
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[000132] Em uma modalidade, a presente invenção fornece um método de tratamento ou diminuição da gravidade de uma doença em um paciente compreendendo a administração a dito paciente de uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, em que R é definido como acima, e a dita doença é selecionada de fibrose cística, asma, COPD induzida por fumo, bronquite crônica, rinossinusite, constipação, pancreatite, insuficiência pancreática, infertilidade masculina causada pela ausência congênita bilateral dos vasos deferentes (CBAVD), doença pulmonar leve, pancreatite idiopática, aspergilose broncopulmonar alérgica (ABPA), doença hepática, enfisema hereditário, hemocromatose hereditáPetição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 47/99
43/84 ria, deficiências de coagulação por fibrinólise, tais como deficiência de proteína C, angioedema hereditário Tipo 1, deficiências de processamento de lipídeo, tais como a hipercolesterolemia familiar, quilomicronemia Tipo 1, abetalipoproteinemia, doenças de depósito lisossômico, tais como doença da célula I/pseudo-Hurler, mucopolissacaridoses, Sandhof/Tay-Sachs, Crigler-Najjar tipo II, poliendocrinopatia/hiperinsulemia, Diabetes melito, nanismo Laron, deficiência de mileoperoxidase, hipoparatireoidismo primário, melanoma, glicanose CDG tipo 1, hipotireoidismo congênito, osteogênese imperfeita, hipofibrinogenemia hereditária, deficiência de ACT, Diabetes insípido (DI), DI neurofiseal, DI neprogênico, síndrome de Charcot-Marie Tooth, doença de Perlizaeus-Merzbacher, doenças neurodegenerativas tais como doença de Alzheimer, doença de Parkinson, esclerose lateral amiotrófica, plasy supranuclear progressiva, doença de Pick, vários distúrbios neurológicos de poliglutamina tais como a de Huntington, ataxia espinocerebular tipo I, atrofia muscular espinhal e bulbar, dentatorrubal palidoluisiano, e distrofia miotônica, assim como encefalopatias espongiformes, tais como a doença de Creutzfeldt-Jakob hereditária (devido ao defeito de processamento da proteína príon), doença de Fabry, síndrome de Straussler-Scheinker, COPD, doença do olho seco, ou doença de Sjogren.
[000133] Em uma modalidade, o método inclui o tratamento ou diminuição da gravidade de uma doença em um paciente mediante a administração a dito paciente de uma quantidade eficaz de um composto tendo a estrutura:
Figure BRPI1012549B1_D0034
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 48/99
44/84 [000134] Em outra modalidade, o método inclui o tratamento ou diminuição da gravidade de uma doença em um paciente mediante a administração a dito paciente de uma quantidade eficaz de um composto tendo a estrutura:
OH
H ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[000135] Em uma modalidade adicional, a doença é fibrose cística. [000136] Em outro aspecto a presente invenção fornece um kit para uso na medição da atividade de CFTR ou um fragmento deste em uma amostra biológica in vitro ou in vivo compreendendo (i) uma composição que compreende um composto de Fórmula I ou qualquer uma das modalidades acima; e (ii) instruções para a) colocar em contato a composição com a amostra biológica e b) medir a atividade de dito CFTR ou um fragmento deste.
[000137] Em uma modalidade, o kit ainda compreende instruções para a) colocar em contato uma composição adicional com a amostra biológica; b) medir a atividade de dito CFTR ou um fragmento deste na presença de dito composto adicional, e c) comparar a atividade do CFTR na presença do composto adicional com a densidade do CFTR na presença de uma composição de Fórmula I.
[000138] Nas modalidades preferidas, o kit é usado para medir a densidade do CFTR.
[000139] Em uma modalidade, o kit inclui uma composição que compreende um composto tendo a estrutura:
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 49/99
45/84
Figure BRPI1012549B1_D0035
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[000140] Em uma modalidade, o kit inclui uma composição que compreende um composto tendo a estrutura:
Figure BRPI1012549B1_D0036
ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.
[000141] Para que a invenção descrita neste documento possa ser mais completamente compreendida, os seguintes exemplos são apresentados. Deve ficar entendido que estes exemplos são apenas para propósitos ilustrativos e não devem ser interpretados como limitativos desta invenção de qualquer maneira.
EXEMPLOS
Preparação 1: Síntese Total de ácido 4-oxo-1,4-di-hidroquinolina-3carboxílico (26)
Figure BRPI1012549B1_D0037
Figure BRPI1012549B1_D0038
Figure BRPI1012549B1_D0039
Éter fenílico
228-232°C
24
Figure BRPI1012549B1_D0040
Método 2
1.2N NaOH
2. 2N HCI
Método 1
HCI/H2O
Figure BRPI1012549B1_D0041
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 50/99
46/84
Procedimento para a preparação de 4-oxo-1,4-di-hidroguinolina-3carboxilato de etila (25)
Figure BRPI1012549B1_D0042
Figure BRPI1012549B1_D0043
Figure BRPI1012549B1_D0044
Éter fenílico
228-232°C
Figure BRPI1012549B1_D0045
[000142] O composto 23 (4,77 g, 47,7 mmols) foi adicionado por gotejamento ao composto 22 (10 g, 46,3 mmols) com fluxo de N2 subsuperficial para expulsar etanol abaixo de 30°C durante 0,5 hora. A solução foi depois aquecida para 100 a 110°C e agitada durante 2,5 horas. Após esfriamento da mistura para baixo de 60°C, éter difenílico foi adicionado. A solução resultante foi adicionada por gotejamento em éter difenílico que foi aquecido para 228 a 232°C durante 1,5 hora com fluxo de N2 subsuperficial para expulsar etanol. A mistura foi agitada em 228 a 232°C durante mais 2 horas, esfriada para baixo de 100°C e depois heptano foi adicionado para precipitar o produto. A pasta fluida resultante foi agitada em 30°C durante 0,5 hora. Os sólidos foram depois filtrados, e a torta foi lavada com heptano e seca in vacuo para fornecer o composto 25 como sólido marrom. 1H RMN (DMSO-d6; 400 MHz) δ 12,25 (s), δ 8,49 (d), δ 8,10 (m), δ 7,64 (m), δ 7,55 (m), δ 7,34 (m), δ 4,16 (q), δ 1,23 (t).
Procedimento para a preparação de ácido 4-oxo-1,4-di-hidroquinolina-
3-carboxílico (26)
Figure BRPI1012549B1_D0046
hci/h2o
Método 2
1.2N NaOH
2. 2N HCI
Método 1
Figure BRPI1012549B1_D0047
Método 1 [000143] O composto 25 (1,0 eq) foi colocado em suspensão com uma solução de HCl (10,0 eq) e H2O (11,6 vol). A pasta fluida foi
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 51/99
47/84 aquecida para 85 a 90°C, embora temperaturas alternativas também sejam adequadas para esta etapa de hidrólise. Por exemplo, a hidrólise pode alternativamente ser executada em uma temperatura de cerca de 75 a cerca de 100°C. Em alguns exemplos, a hidrólise é executada em uma temperatura de cerca de 80 a cerca de 95°C. Em outro, a etapa de hidrólise é executada em uma temperatura de cerca de 82 a cerca de 93°C (por exemplo, de cerca de 82,5 a cerca de 92,5°C ou de cerca de 86 a cerca de 89°C). Após agitação em 85 a 90°C durante aproximadamente 6,5 horas, a reação foi experimentada para conclusão da reação. Agitação pode ser executada sob qualquer das temperaturas adequadas para a hidrólise. A solução foi depois esfriada para 20 a 25°C e filtrada. O reator/torta foi enxaguado com H2O (2 vol x 2). A torta foi depois lavada com 2 vol H2O até o pH > 3,0. A torta foi depois seca sob vácuo a 60°C para fornecer o composto 26.
Método 2 [000144] O composto 25 (11,3 g, 52 mmols) foi adicionado a um mistura de 10% NaOH (aq) (10 mL) e etanol (100 mL). A solução foi aquecida para refluxo durante 16 horas, esfriada para 20 a 25°C e depois o pH foi ajustado para 2 a 3 com HCl a 8%. A mistura foi depois agitada durante 0,5 hora e filtrada. A torta foi lavada com água (50 mL) e depois seca in vacuo para fornecer o composto 26 como um sólido marrom. 1H RMN (DMSO-d6; 400 MHz) δ 15,33 (s), δ 13,39 (s), δ 8,87 (s), δ 8,26 (m), δ 7,87 (m), δ 7,80 (m), δ 7,56 (m).
Exemplo 1: Síntese Total de N-(2-terc-butil-5-hidróxi-4-(1-hidróxi-2metilpropan-2-il)fenil)-4-oxo-1,4-di-hidroquinolina-3-carboxamida (27) [000145] O esquema global da síntese do composto 27 é mostrado abaixo, seguido pelo procedimento para a síntese de cada intermediário sintético.
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 52/99
48/84
Figure BRPI1012549B1_D0048
NaH, Mel
DMF
CH2CN
Figure BRPI1012549B1_D0049
OBn
Figure BRPI1012549B1_D0050
Figure BRPI1012549B1_D0051
NaBH4
MeOH
Figure BRPI1012549B1_D0052
Figure BRPI1012549B1_D0053
Figure BRPI1012549B1_D0054
Procedimento para a preparação de 2-hidróxi-5-terc-butilbenzaldeído (2)
Figure BRPI1012549B1_D0055
Figure BRPI1012549B1_D0056
(CHO)n MgCI2
Figure BRPI1012549B1_D0057
[000146] A uma solução agitada de composto 1 (700 g, 4,66 mols) em CH3CN (7,0 L) foi adicionado MgCb (887 g, 9,32 mols), ParaFormaldeído (1190g) e TEA (2,5 L, 17,9 mols) sob N2. A mistura foi aquecida para refluxo durante 5 horas. Após esfriamento para a temperatura ambiente, 2 L de água gelada foram adicionados à mistura, seguido por 6 L de HCl a 3 M (aq). A suspensão foi deixada agitar até que a solução se tornou transparente. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com MTBE (3 L*3). As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas para secura. O resíduo foi
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 53/99
49/84 dissolvido em MTBE (4000 mL), lavado com água (1000 mL*2) e salmoura (1000 mL), seco por Na2SO4 anidro, filtrado, depois concentrado para fornecer o composto 2 como um sólido amarelo-claro que foi usado na próxima reação sem mais secagem ou purificação. 1H RMN (CDCh; 400 MHz) δ 10,86 (s), δ 9,89 (s), δ 7,59 (m), δ 7,51 (d), δ 6,94 (d), δ 10,61 (s).
Procedimento para a preparação de 2-(benzilóxi)-5-tercbutilbenzaldeído (3)
Figure BRPI1012549B1_D0058
[000147] A uma solução agitada de composto 2 (614,5 g, 3,33 mols) em DMF (3,5 L) foi adicionado K2CO3 (953 g, 6,90 mols) e cloreto de benzila (480 g, 3,80 mols). A mistura foi aquecida para 90°C e deixada agitar durante 3 horas. A suspensão foi esfriada para a temperatura ambiente, depois MTBE (2 L) foi adicionado, seguido por água (12 L). A mistura foi depois agitada durante 10 minutos e a camada aquosa foi separada e extraída com MTBE (2 L*3). As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com água (2 L*2) e salmoura (1,5 L*1) e concentradas para fornecer o composto 3 como um sólido amarelo-claro. 1H RMN (DMSO-d6; 400 MHz) δ 10,42 (s), δ 7,71 (m), δ 7,51 (m), δ 7,43 (m), δ 7,35 (m), δ 7,24 (m), δ 5,27 (s), δ 1,26 (s).
Procedimento para a preparação de álcool 2-(benzilóxi)-5-tercbutilbenzílico (4)
Figure BRPI1012549B1_D0059
Figure BRPI1012549B1_D0060
OBn
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 54/99
50/84 [000148] A uma suspensão agitada de composto 3 (974 g, 3,63 mols) em MeOH (4000 mL) foi lentamente adicionado NaBH4 (121 g, 3,20 mols) em 0 a 20°C. A solução foi deixada agitar em 15°C durante 3 horas, e depois esfriada para 0°C. HCl a 2N (aq) (1300 mL) foi adicionado por gotejamento em abaixo de 20°C. A solução foi depois filtrada e evaporada para secura, e o resíduo foi dissolvido em MTBE (5 L). A solução foi depois lavada com água (2 L*2) e salmoura (1,5 L*1). A evaporação do solvente forneceu o composto 4 como um sólido amarelo-claro que foi usado na próxima reação sem mais purificação. 1H RMN (DMSO-d6; 400 MHz) δ 7,40 (m), δ 7,32 (m), δ 7,17 (m), δ 6,91 (m), δ 5,09 (s), δ 5,00 (t), δ 4,56 (d), δ 1,26 (s).
Procedimento para a preparação de cloreto de 2-(benzilóxi)-5-tercbutilbenzila (5)
Figure BRPI1012549B1_D0061
[000149] A uma solução agitada de composto 4 (963 g, 3,56 mols) em DCM anidro (2000 mL) foi adicionado lentamente SOCl2 (535 g, 4,5 mols) em 0°C. A mistura foi agitada em 20°C durante 2 horas, depois concentrada in vacuo para fornecer o composto 5 como um óleo, que foi usado na próxima reação sem mais secagem ou purificação.
Procedimento para a preparação de 2-(benzilóxi)-5-terc-butilbenzil nitrila (6)
Figure BRPI1012549B1_D0062
Figure BRPI1012549B1_D0063
[000150] A uma solução agitada de composto 5 (1045 g, 3,54 mols)
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 55/99
51/84 em DMF anidro (1000 mL) foi adicionado KCN (733 g, 11,3 mols). A mistura foi agitada em 35°C durante 24 horas, depois despejada em água (10 L). Acetato de etila (4 L) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 30 minutos. A camada orgânica foi depois separada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (3000 mL χ 2). As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com água (4 Lx2) e salmoura (3 Lx1), depois concentradas in vacuo para fornecer o composto 6 como um sólido amarelo. 1H RMN (DMSO-de; 400 MHz) δ 7,51 (m), δ 7,37 (m), 7,02 (d), δ 5,17 (s), δ 3,88 (s), 1,26 (s).
Procedimento para a preparação de 2-(2-(benzilóxi)-5-terc-butilfenil)-2metilpropanonitrila (7)
Figure BRPI1012549B1_D0064
Figure BRPI1012549B1_D0065
CH2CN
OBn
NaH, Mel
Figure BRPI1012549B1_D0066
[000151] A uma suspensão agitada de NaH (86 g, 2,15 mols, 60% em óleo mineral) em DMF (1000 mL) foi adicionado por gotejamento uma solução de composto 6 (100,0 g, 0,358 mol) em DMF (500 mL) a 20°C. Após agitação durante 30 minutos, Mel (205 g, 1,44 mol) em DMF (500 mL) foi adicionado por gotejamento em abaixo de 30°C durante um período de 2 horas. A suspensão foi agitada durante 1,5 hora em 25 a 30°C, depois gelo (100g) foi adicionado lentamente até que nenhum gás foi gerado. O pH foi ajustado para aproximadamente 7 mediante a adição lenta de HCl a 2N. A mistura foi diluída com água (4 L) e MTBE (2 L). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com MTBE (500 mLx2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas por Na2SO4, filtradas, e depois concentradas in vacuo para fornecer o composto 7 como um sólido branco. 1H RMN (DMSO-d6; 400 MHz) δ 7,56 (m), δ 7,40 (m), δ
7,34 (m), δ 7,10 (d), δ 5,21 (s), δ 1,73 (s), δ 1,27 (s).
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 56/99
52/84
Procedimento para a preparação de 2-(2-(benzilóxi)-5-terc-butilfenil)-2metilpropanal (8)
Figure BRPI1012549B1_D0067
8 [000152] A uma solução agitada de composto 7 (20 g, 0,065 mol) em tolueno (300 mL), foi adicionado por gotejamento DIBAH (80 mL, 1 M em tolueno) a cerca de -60 a -50°C. Após agitação durante 2 horas, HCl a 6 N (300 mL) foi adicionado à mistura de reação e a agitação continuou durante 30 minutos. A camada orgânica foi depois separada, lavada com HCl a 2 N seguido por uma solução de NaHCO3, depois uma solução de salmoura, seca por Na2SO4 e concentrada in vacuo para proporcionar o composto 8 como um óleo. O produto foi usado na próxima reação sem mais purificação. 1H RMN (CDCl3; 400 MHz) δ 9,61 (s), δ 7,36 (m), δ 7,25 (m), δ 6,87 (m), δ 5,06 (m), δ 1,43 (s), δ 1,33 (s).
Procedimento para a preparação de 2-(2-(benzilóxi)-5-terc-butilfenil)-2metilpropan-1-ol (9)
Figure BRPI1012549B1_D0068
Figure BRPI1012549B1_D0069
[000153] A uma solução agitada de composto 8 (9,21 g, 0,030 mol) em MeOH (150 mL) foi adicionado lentamente NaBH4 (2,3 g, 0,061 mol ) em 0°C. Após a mistura ter sido agitada a 20°C durante 3 horas, 12 mL de HCl a 6 N foram adicionados, e a mistura foi agitada durante um adicional de 30 minutos. A solução foi depois concentrada para cerca de um quarto do volume original e extraída com EtOAc. A camada or
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 57/99
53/84 gânica foi separada e lavada com água e salmoura, seca com Na2SÜ4, filtrada, e depois concentrada in vacuo para proporcionar o composto 9 como um sólido branco. 1H RMN (DMSO-d6; 400 MHz) δ 7,47 (m), δ 7,42 (m), δ 7,34 (m), δ 7,28 (m), δ 7,16 (m), δ 6,94 (m), δ 5,08 (s), δ 4,45 (t), δ 3,64 (d), δ 1,28 (s), δ 1,25 (s).
Procedimento para a preparação de 2-(2-hidróxi-5-terc-butilfenil)-2metilpropan-1-ol (10)
Figure BRPI1012549B1_D0070
[000154] Pd(OH)2 (1g) e composto 9 (9,26 g, 0,030 mol) em MeOH (200 mL) foram agitados sob hidrogênio em 0,137 a 0,206 MPa (20 a 30 psi) de pressão durante 16 a 18 horas. A mistura foi depois filtrada através de Celite®, e o filtrado foi concentrado para fornecer o composto 10 como um sólido branco. 1H RMN (DMSO-d6; 400 MHz) δ 9,16 (s), δ 7,16 (d), δ 7,00 (m), δ 6,65 (m), δ 4,71 (t), δ 3,62 (d), δ 1,27 (s), δ 1,22 (s).
Procedimento para a preparação de 1-((metilcarobóxi)óxi)-2-(1((metilcarobóxi)óxi)-2-metilpropan-2-il)-4-terc-butil benzeno (11)
Figure BRPI1012549B1_D0071
[000155] A uma solução agitada de composto 10 (23,2 g, 0,10 mol), DMAP (1,44g) e DIEA (72,8 g, 0,56 mol) em DCM anidro (720 mL) foi adicionado por gotejamento cloroformiato de metila (43,5 g, 0,46 mol) em DCM (160 mL) a 0°C. Após a mistura ter sido agitada em 20°C durante 16 horas, foi lavada com água, 1 N HCl e salmoura, seca com
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 58/99
54/84
MgSÜ4 e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado usando cromatografia de coluna em sílica-gel (1:20 EtOAc:éter de petróleo) para fornecer o composto 11 como um sólido branco. 1H RMN (DMSO-d6; 400 MHz) δ 7,32 (m), δ 7,10 (d), δ 4,26 (s), δ 3,84 (s), δ 3,64 (s), δ 1,31 (s), δ 1,28 (s).
Procedimento para a preparação de 1-((metilcarobóxi)óxi)-2-(1((metilcarobóxi)óxi)-2-metilpropan-2-il)-4-terc-butil-5-nitro benzeno (12)
Figure BRPI1012549B1_D0072
[000156] A uma solução agitada de composto 11 (32 g, 0,095 mol ) em DCM (550 mL) foi adicionado por gotejamento H2SO4 a 98% (43 g, 0,43 mol) a 0°C. Após agitação durante 20 minutos a 0°C, HNO3 a 65% (16,2 g, 0,17 mol) foi adicionado na mistura por gotejamento em 0°C. A mistura foi depois agitada em 1 a 10°C durante 4 horas e depois água gelada (200 mL) foi adicionada. A camada aquosa foi separada e extraída com DCM (200 mL χ 3) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (aq), NaHCOs e salmoura, depois secas com MgSO4 e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna em sílica-gel (1:20 EtOAc:Éter de petróleo) para proporcionar o composto bruto 12 como um óleo.
Procedimento para a preparação de 2-terc-butil-5-((metilcarobóxi)óxi)-
4-(1-((metilcarobóxi)óxi)-2-metilpropan-2-il) anilina (13)
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 59/99
55/84
Figure BRPI1012549B1_D0073
ο ο
13 [000157] Pd/C (2,6g) e composto 12 (14 g, bruto) foram agitados em MeOH (420 mL) na temperatura ambiente sob hidrogênio em 0,137 a 0,206 MPa (20 a 30 psi) de pressão durante 16 a 18 horas. A mistura foi depois filtrada com kieselguhr®, e o filtrado foi concentrado in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna em sílica-gel (1:10 EtOAc:Éter de petróleo) para fornecer o composto 13 como um sólido cinza. 1H RMN (CDCh; 400 MHz) δ 7,26 (s), δ 7,19 (s), δ 4,26 (s), δ 3,89 (s), δ 3,74 (s), δ 1,40 (s), δ 1,35 (s).
Procedimento para a preparação de N-(2-terc-butil-5((metilcarobóxi) óxi) -4-(1-((metilcarobóxi)óxi)-2-metilpropan-2-il)fenil)-4oxo-1,4-di-hidroquinolina-3-carboxamida (14)
Figure BRPI1012549B1_D0074
[000158] A uma solução agitada de composto 26 (5,0 g, 0,026 mol) em DMF anidro (120 mL) foi adicionado EDCI (5,6 g, 0,029 mol), HOBT (3,8 g, 0,028 mol) e DIEA (6,6 g, 0,051 mol) a 0°C. Após agitação durante 1 hora, a mistura foi adicionada por gotejamento a uma solução de composto 13 (3,0 g, 0,008 mol) em DCM (30 ml) a 0°C. A mistura foi agitada em 25°C durante 72 horas, e depois foi concentrada in vacuo. O resíduo foi dissolvido em EtOAc (225 mL) e lavado com água (120 mL*1), 1N HCl (120 mL) e salmoura, seco com Na2SO4 e concentrado in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatogra
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 60/99
56/84 fia de coluna em sílica-gel (1:1 EtOAc:Éter de petróleo) para fornecer o composto 14 como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CDCh) δ
12,34 (s, 1H), 11,58 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,42 (d, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,72 (s, 1H), 4,34 (s, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 1,41 (s, 9H), 1,40 (s, 6H).
Procedimento para a preparação de N-(2-terc-butil-5-hidróxi-4-(1hidróxi-2-metilpropan-2-il)fenil)-4-oxo-1,4-di-hidroquinolina-3carboxamida (27)
Figure BRPI1012549B1_D0075
27 [000159] A uma solução agitada de KOH (1,2 g, 0,02 mol) em MeOH (80 mL) foi adicionado o composto 14 (1,9 g, 0,0036 mol) a 0°C. Após agitação durante 2 a 3 horas em 5 a 15°C, a mistura foi concentrada para secura. O resíduo foi depois triturado em água (10 mL), filtrado, lavado com DCM e seco in vacuo durante 24 horas para fornecer o composto 27 como um sólido branco. 1H RMN (DMSO-d6; 400 MHz) δ 12,77 (s), δ 8,86 (s), δ 8,20 (d), δ 7,55 (d), δ 7,42 (t), δ 7,16 (q), δ 7,02 (s), δ 6,85 (m), δ 3,55 (s), δ 1,55 (s), δ 1,35 (s), δ 1,27 (s). MS Found (M + H) 409,2
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 61/99
57/84
Exemplo 2: Síntese Total Alternativa de N-(2-terc-butil-5-hidróxi-4-(1 hidróxi-2-metilpropan-2-il)fenil)-4-oxo-1,4-di-hidroquinolina-3carboxamida (27)
Figure BRPI1012549B1_D0076
Figure BRPI1012549B1_D0077
Pd(t-Bu3)2, ZnF2
DMF, 70 °C
Figure BRPI1012549B1_D0078
LiAIH4
THF
Figure BRPI1012549B1_D0079
TEA, DMAP DCM, 0 °C
Figure BRPI1012549B1_D0080
Figure BRPI1012549B1_D0081
Pd/C, H2
MeOH
Figure BRPI1012549B1_D0082
Figure BRPI1012549B1_D0083
T3P, piridina 2-MeTHF
Figure BRPI1012549B1_D0084
Figure BRPI1012549B1_D0085
Procedimento para a preparação de
2-(5-terc-butil-2-hidróxi-4nitrofenil)-2-metilpropanoato de metila (38):
Figure BRPI1012549B1_D0086
Figure BRPI1012549B1_D0087
Pd(t-Bu3)2, ZnF2
DMF, 70 °C
Figure BRPI1012549B1_D0088
[000160] Uma mistura de 2-bromo-4-terc-butil-5-nitrofenol (15,00 g, 54,72 mmols), bis(tri-terc-butilfosfina)paládio(0) (1,422 g, 2,783 mmols), fluoreto de zinco (2,82 g, 27,27 mmols), metil trimetilsilil dimetilceteno acetal (MTDA) (19,35 g, 111,0 mmols), e dimetilformamida (150 mL) foi aquecida em 70°C durante 18 h. A mistura foi esfriada para a temperatura ambiente e diluída com água. Após agitação durante uma hora, a fase aquosa foi extraída com MTBE. A fase orgânica foi seca in vacuo para proporcionar o produto bruto como um sólido marrom. A purificação do produto foi executada por trituração em n
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 62/99
58/84 heptano. 1H-RMN (400 MHZ, DMSO-d6) δ 10,38 (s, 1H); 7,37 (s, 1H);
6,79 (s, 1H); 3,54 (s, 3H); 1,45 (s, 6H); 1,32 (s, 9H).
Procedimento para a preparação de 4-terc-butil-2-(1-hidróxi-2metilpropan-2-il)-5-nitrofenol (39):
OH [000161] Uma solução de hidreto de lítio alumínio a 1M em THF (11,80 mL, 11,80 mmols) foi adicionada a uma solução de 2-(5-tercbutil-2-hidróxi-4-nitrofenil)-2-metilpropanoato de metila (5,36 g, 18,15 mmols) em THF (50 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 3 h, e depois diluída com metanol. A mistura foi acidificada com HCl a 1N (pH 1 a 2) e a fase aquosa foi extraída com MTBE. A fase orgânica foi seca in vacuo para proporcionar 4-terc-butil-2-(1hidróxi-2-metilpropan-2-il)-5-nitrofenol que foi usado sem mais purificação na próxima etapa. 1H-RMN (400 MHZ, DMSO-d6) δ 10,12 (s, 1H); 7,37 (s, 1H); 6,80 (s, 1H); 4,77 (s, 1H); 3,69-3,65 (m, 2H); 1,30 (s, 9H); 1,29 (s, 6H).
Procedimento para a preparação de carbonato de 4-terc-butil-2-(2metoxicarbonilóxi-1,1-dimetil-etil)-5-nitro-fenil] metila (12)
o.
ΌΗ cr o
TEA, DMAP DCM, 0 °C [000162] A uma solução de 4-terc-butil-2-(1-hidróxi-2-metilpropan-2il)-5-nitrofenol (1,92 g, 7,18 mmols), trietilamina (1,745 g, 17,24 mmols), e dimetilaminopiridina (87,74 mg, 0,718 mmol) em diclorometano (30 mL) a 0°C foi lentamente carregado metilcloroformiato (2,376
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 63/99
59/84 g, 25,14 mmols), mantendo a temperatura abaixo de 5°C. Após a adição, a mistura foi deixada aquecer para a temperatura ambiente e foi agitada até que a HPLC apresentou conversão completa do material de partida (2 a 8 h). A mistura de reação foi diluída com água e acidificada com HCl a 1N (pH 1 a 2). A fase aquosa foi extraída com DCM e os orgânicos combinados secos in vacuo. O semissólido âmbar bruto foi recristalizado a partir do metanol e diclorometano para fornecer o composto do título como um sólido cristalino amarelo. 1H-RMN (400 MHZ, DMSO-d6) δ 7,67 (s, 1H); 7,52 (s, 1H); 4,30 (s, 2H); 3,86 (s, 3H); 3,64 (s, 3H); 1,35 (s, 9H); 1,35 (s, 6H).
Procedimento para a preparação de carbonato de 5-amino-4-terc-butil2-(2-metoxicarbonilóxi-1,1-dimetil-etil)fenil] metila (13):
Figure BRPI1012549B1_D0089
Pd/C, h2
MeOH
Figure BRPI1012549B1_D0090
[000163] Uma mistura de carbonato de [4-terc-butil-2-(2metoxicarbonilóxi-1,1-dimetil-etil)-5-nitro-fenil] metila (1,27 g, 3,313 mmols) e Pd/C (75 mg, 0,035 mmol) em metanol (50 mL) foi expurga da com nitrogênio. Após o expurgo do frasco com hidrogênio, a mistura foi hidrogenada durante 18 horas em temperatura e pressão ambientes. A solução foi filtrada através de Celite® e seca in vacuo para obter o produto como um sólido. 1H-RMN (400 MHZ, DMSO-d6) δ 6,99 (s, 1H); 6,39 (s, 1H); 4,92(s, 2H); 4,13 (s, 2H); 3,82 (s, 3H); 3,65 (s, 3H); 1,32 (s, 9H); 1,23 (s, 6H).
Procedimento para a preparação de N-(2-terc-butil-5-hidróxi-4-(1hidróxi-2-metilpropan-2-il)fenil)-4-oxo-1,4-di-hidroquinolina-3carboxamida (27):
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 64/99
60/84
Figure BRPI1012549B1_D0091
[000164] A uma mistura de carbonato de [5-amino-4-terc-butil-2-(2metoxicarbonilóxi-1,1-dimetil-etil)fenil] metila (103 mg, 0,29 mmol), ácido 4-oxo-1,4-di-hidroquinolina-3-carboxílico (50 mg, 0,26 mmol), e piridina (42 mg, 0,53 mmol) em 2-MeTHF (3,0 mL) foi carregado T3P como uma solução de 50% em peso em 2-MeTHF (286 mg, 0,45 mmol). A mistura foi aquecida para 50°C durante 18 h. Após esfriamento para a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com água. A fase orgânica foi separada e novamente lavada com água. Metóxido de sódio (39 mg, 0,72 mmol) foi carregado na fase orgânica e a solução agitada durante 2 horas. A reação foi extinta com HCl a 1N, e após a separação das fases, a fase orgânica foi lavada com HCl a 0,1N. A fase orgânica foi depois seca in vacuo para produzir o composto 27 como um sólido. O espectro de 1H-RMN foi consistente com aquele relatado acima.
Exemplo 3: Síntese Total de ácido 2-(5-terc-butil-2-hidróxi-4-(4-oxo1,4-di-hidroquinolina-3-carboxamido)fenil)-2-metilpropanoico (28):
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 65/99
61/84
Figure BRPI1012549B1_D0092
Figure BRPI1012549B1_D0093
Figure BRPI1012549B1_D0094
Figure BRPI1012549B1_D0095
Procedimento para a preparação de 2-(5-terc-butil-2-hidroxifenil)-2metilpropanonitrila (15)
Figure BRPI1012549B1_D0096
H2, Pd(OH)2/C
MeOH,10Psi
CN
Figure BRPI1012549B1_D0097
[000165] Pd(OH)2/C (2,0g) e composto 7 (20,0 g, 0,104 mol) foram agitados em MeOH (150 mL) em temperatura ambiente sob hidrogênio em pressão de 0,068 MPa (10 psi) durante 16 a 18 horas. A mistura foi depois filtrada através de um tampão de Celite®, e o filtrado foi concentrado para fornecer o composto 15, que foi usado na próxima reação sem mais purificação. 1H RMN (DMSO-d6; 400 MHz) δ 9,83 (s), δ 7,24 (s), δ 7,18 (m), δ 6,80 (m), δ 1,71 (s), δ 1,24 (s).
Procedimento para a preparação de carbonato de 4-terc-butil-2-(2cianopropan-2-il)fenil metila (16)
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 66/99
62/84
Figure BRPI1012549B1_D0098
16 [000166] A uma mistura agitada de composto 15 (126,6 g, 0,564 mol), DMAP (6,0g) e DIEA (188 g, 1,46 mol) em DCM anidro (1500 mL) foi adicionado por gotejamento cloroformiato de metila (110 g, 1,17 mol) em DCM anidro (300 mL) a 0°C dentro de 2 horas. Após agitação durante 12 horas a 0°C, água gelada (1,5 L) foi adicionada e a mistura foi agitada em 0°C durante 30 minutos. A camada orgânica foi separada e lavada com HCl a 1 N, água, e salmoura. A solução de DCM foi seca por MgSO4 e concentrada in vacuo para fornecer o composto 16 como um sólido amarelo. 1H RMN (DMSO-d6; 400 MHz) δ 7,47 (m), δ 7,39 (d), δ 7,24 (d), δ 3,84 (s), δ 1,71 (s), δ 1,30 (s).
Procedimento para a preparação de carbonato de 2-(1-amino-2-metil1-oxopropan-2-il)-4-terc-butil-5-nitrofenil metila (17)
Figure BRPI1012549B1_D0099
[000167] A um mistura agitada de composto 16 (10,0 g, 36,3 mmols) e KNO3 (5,51 g, 54,5 mmols) em DCM (1000 mL) foi adicionado por gotejamento 98% H2SO4 (145,4 g, 1,45 mol) a 0°C. A mistura foi agitada em 30°C durante 4 dias. A camada de H2SO4 foi depois separada e despejada em água gelada (50g) e depois extraída com DCM (100 mLx3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, solução aquosa de NaHCO3 e salmoura, depois secas por MgSO4 e concentradas in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatogra
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 67/99
63/84 fia de coluna em sílica-gel (Éter de petróleo/EtOAc 20:1^10:1^5:1^3:1) para fornecer o composto 17 como um sólido amarelo. 1H RMN (CDCh; 400 MHz) δ 8,05 (s), δ 7,74 (s), δ 7,61 (s), δ 7,32 (s), δ 5,32 (s), δ 3,91 (s), δ 3,92 (s), δ 1,62 (s), δ 1,59 (s), δ 1,42 (s), δ 1,38 (s).
Procedimento para a preparação de ácido 2-(5-terc-butil-2-hidróxi-4nitrofenil)-2-metilpropanoico (18)
Figure BRPI1012549B1_D0100
Figure BRPI1012549B1_D0101
[000168] A uma mistura de composto 17 (7,3 g, 21,6 mmols) em metanol (180 mL) foi adicionada água (18 mL) e NaOH (8,64 g, 216 mmols). A solução foi aquecida e mantida em refluxo durante 3 dias. O solvente foi evaporado in vacuo e o resíduo foi dissolvido em 140 mL de água. Depois a solução foi acidificada para pH 2 mediante a adição de HCl a 2N. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (100 mLx3), e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas por Na2SO4 anidro e depois concentradas para fornecer o composto 18 como um sólido amarelo, que foi usado na próxima reação sem mais purificação.
Procedimento para a preparação de 5-terc-butil-3,3-dimetil-6nitrobenzofuran-2(3H)-ona (19)
Figure BRPI1012549B1_D0102
[000169] A uma solução de composto 18 (7,10 g, 25,2 mmols) em
710 mL de THF anidro foi adicionado EDCI (14,5 g, 75,6 mmols). A
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 68/99
64/84 suspensão resultante foi deixada agitar em 30°C durante a noite. O precipitado foi filtrado e completamente lavado com DCM. O filtrado foi concentrado para secura e o resíduo foi dissolvido em DCM (100 mL). A solução foi lavada com água (50 mL*2) e salmoura (50 mL*1). A camada de DCM foi depois seca por Na2SO4 anidro e concentrada para fornecer o produto bruto, que foi purificado através de cromatografia de coluna em sílica-gel (Éter de petróleo/EtOAc 200:1^100:1^50:1) para fornecer o composto 19 como um sólido branco. 1H RMN (CDCh; 400 MHz) δ 7,36 (s), δ 7,10 (s), δ 1,53 (s), δ 1,41 (s).
Procedimento para a preparação de dimetilbenzofuran-2(3H)-ona (20)
6-amino-5-terc-butil-3,3-
Figure BRPI1012549B1_D0103
Pd/C H2
THF
Figure BRPI1012549B1_D0104
Pd/C (1,50g) e composto 19 (3,00 g, 1,14 mmol) foram colocados em suspensão em THF (1500 mL) a 25°C sob hidrogênio em
0,206 MPa (30 psi) durante 4 horas. A mistura foi depois filtrada através de um tampão de Celite®, e o filtrado foi concentrado in vacuo para fornecer o composto 20 como um sólido branco. 1H RMN (DMSO-d6;
400 MHz) δ 7,05 (s), δ 6,49 (s), δ 5,01 (s), δ 1,35 (s), δ 1,33 (s). Procedimento para a preparação de N-(5-terc-butil-3,3-dimetil-2-oxo-
2,3-dihidrobenzofuran-6-il)-4-oxo-1,4-di-hidroquinolina-3-carboxamida (21)
Figure BRPI1012549B1_D0105
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 69/99
65/84 [000170] Uma suspensão de HATU (17,6 g, 46,3 mols) e composto 26 (8,36 g, 44,2 mmols) em acetonitrila anidra (1 L) foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O composto 20 (3,40 g, 14,6 mmols) foi adicionado à suspensão, e depois DIEA (11,5 g, 89,0 mmols) foi adicionado por gotejamento. A mistura foi agitada em 45°C durante 4 dias. O precipitado resultante foi filtrado e completamente lavado com DCM. O filtrado foi concentrado para secura e o resíduo foi dissolvido em DCM (200 mL) e lavado com HCl a 1N (200 mL*2) seguido por 5% NaHCO3 aquoso (200 mL*3) e depois salmoura (200 mLx1). A mistura foi depois seca por Na2SO4 e concentrada in vacuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia de coluna em sílicagel (CH2Cl2/MeOH 100:1^50:1) para fornecer o composto 21 como um sólido amarelo-claro. 1H-RMN (400MHZ, DMSO-d6) δ 12,96 (d J
6,4 Hz, 1H); 12,1 (s, 1H); 8,9 (d, J 6,4Hz, 1H); 8,33 (d, J 8Hz, 1H); 7,84 - 7,75 (m, 2H); 7,55 - 7,48 (m, 3H); 1,47 (s, 6H); 1,45 (s, 9H).
Procedimento para a preparação de ácido 2-(5-terc-butil-2-hidróxi-4-(4oxo- 1,4-di-hidroquinolina-3-carboxamido)fenil)-2-metilpropanoico (28)
Figure BRPI1012549B1_D0106
NaOH
MeOH
Figure BRPI1012549B1_D0107
[000171] A uma solução agitada de composto 21 (0,9 g, 2,45 mmols) em MeOH (50 mL) foi adicionado NaOH (1,5 g, 37,5 mmols) a 0°C. Após agitação durante 16 horas em 40°C, o solvente foi evaporado in vacuo, depois o resíduo foi dissolvido em H2O (50 ml). O precipitado foi filtrado e o filtrado foi lavado com DCM (100 mL*1) e acetato de etila (100 mL*1). A camada aquosa foi acidificada com 2N HCl para o pH 1 a 2. O precipitado foi filtrado e lavado com H2O (80 mL) e heptano (50 mL). Ele foi seco in vacuo para fornecer o composto 28 como
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 70/99
66/84 um sólido branco. 1H RMN (DMSO-d6; 400 MHz) δ 12,85 (s), δ 11,84 (s), δ 11,77 (s), δ 9,39 (s), δ 8,86 (s), δ 8,33 (s), δ 7,79 (m), δ 7,52 (m), δ 7,18 (s), δ 7,09 (s), δ 1,44 (s), δ 1,40 (s). MS observado (M + H) 423,08.
Exemplo 4: Segunda Síntese alternativa de N-(2-terc-butil-5-hidróxi-4(1-hidróxi-2-metilpropan-2-il)fenil)-4-oxo- 1,4-di-hidroquinolina-3carboxamida (27)
Figure BRPI1012549B1_D0108
[000172] Um frasco de fundo redondo de 50 ml de 3 gargalos foi equipado com agitador magnético, borbulhador de nitrogênio e par termoelétrico. O composto 21 (514 mg, 1,27 mmol) e 2-MeTHF (4 mL) são carregados no frasco. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente. Hidreto de lítio alumínio (204 mg, 6,6 mmols) foi adicionado como sólido até que 100% de conversão fosse alcançada, que foi monitorada usando HPLC. Sal de 2,3-di-hidroxibutanodioato tetrahidrato de potássio sódio (50 mL de uma solução de 400 g/L) e MTBE (50 mL) foi adicionado à mistura de reação. A solução resultante foi agitada durante 15 minutos e depois deixada agitar durante 15 min. A camada orgânica foi separada e o pH da camada aquosa foi ajustada para um pH de cerca de 6 a 7 mediante a adição de ácido tartárico. A camada aquosa foi extraída com MTBE. A camada orgânica foi concentrada e seca sob vácuo elevado para fornecer o composto do título como um pó esbranquiçado. O espectro de 1H-RMN foi consistente com aquele relatado acima.
Exemplo 5: Síntese Total Alternativa de ácido 2-(5-terc-butil-2-hidróxi4-(4-oxo-1,4-di-hidroquinolina-3-carboxamido)fenil)-2-metilpropanoico
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 71/99
67/84 (28):
Figure BRPI1012549B1_D0109
36
Figure BRPI1012549B1_D0110
Procedimento para a preparação de éster metílico de éster 2-brometo,
4-tercbutil fenílico de ácido carbônico (35)
Figure BRPI1012549B1_D0111
DMAP, MeOCCI
NEt3, DCM
Figure BRPI1012549B1_D0112
[000173] Um frasco de fundo redondo de 2 L de 3 gargalos foi equipado com agitador mecânico, borbulhador de nitrogênio e par termoelétrico. 2-Bromo-4-tercbutil fenol (50 g, 211,7 mmols) foi adicionado seguido por DCM (1,75 L), DMAP (1,29 g, 10,58 mmols) e Et3N (44,3 mL, 317,6 mmols). A mistura de reação foi esfriada para 0°C. Cloro
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 72/99
68/84 formiato de metila (19,62 mL, 254 mmols) foi adicionado por gotejamento na mistura de reação. A mistura foi deixada aquecer para a temperatura ambiente enquanto se agita durante a noite. Quando a reação estava completa, a mistura foi filtrada através de funil sinterizado. O filtrado foi transferido para dentro do funil separador de 1 L. Para extinção, HCl a 1N (300 mL) foi adicionado ao filtrado e a camada orgânica foi separada. A camada orgânica foi depois lavada com uma mistura de 291 mL de NaHCO3 saturado e 100 mL de água. As camadas foram separadas, e a camada aquosa foi determinada de ter um pH ao redor de 8. A camada orgânica foi concentrada e seca sob vácuo elevado durante cerca de 16 horas para fornecer o composto do título como um óleo amarelo transparente, que foi usado na próxima etapa sem mais purificação. 1H-RMN (400 MHz. DMSO-d6) 7,66 (d, J 2,0 Hz, 1H), 7,46 (dd, J 8,4, 2,0 Hz, 1H), 7,32 (d, J 8,4 Hz, 1H), 3,86 (s, 3H), 1,28 (s, 9H).
Procedimento para a preparação de carbonato de (2-bromo-4-tercbutil-5-nitro-fenil) metila (36)
Figure BRPI1012549B1_D0113
36 [000174] Um frasco de fundo redondo de 2 L de 3 gargalos foi equipado com agitador mecânico, borbulhador de nitrogênio e par termoelétrico. O composto 35 (176 g, 612,9 mmols) e ácido sulfúrico concentrado (264 mL) foram carregados no frasco. A mistura de reação foi esfriada para -5°C a 0°C. Ácido nítrico (28,6 mL, 612,9 mmols) foi adicionado por gotejamento e a mistura de reação foi agitada em 0°C durante 2 horas. Quando completo, água (264 mL) foi adicionada seguida por MTBE (264 mL). A solução foi agitada durante 15 minutos, de
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 73/99
69/84 pois deixada repousar durante 15 minutos. A camada orgânica foi separada, concentrada e seca sob vácuo elevado para fornecer o composto do título como um óleo marrom-escuro, que foi usado na próxima etapa sem mais purificação. 1H-RMN (400 MHz. DMSO-d6) 7,96 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 3,89 (s, 3H), 1,34 (s, 9H).
Procedimento para a preparação de 2-bromo-4-terc-butil-5-nitro-fenol (37)
Figure BRPI1012549B1_D0114
Figure BRPI1012549B1_D0115
[000175] Carbonato de (2-bromo-4-terc-butil-5-nitro-fenil)metila (72,9 g, 219,5 mmols) foi carregado a um reator e DCM (291,6 mL) foi adicionado. A solução de reação amarela foi esfriada usando um banho de gelo. Metóxido de sódio (67,04 g, 69,11 mL de 5,4 M, 373,2 mmols) foi adicionado em porções de 2,2 a 6,9°C. Após completar a adição, a reação foi lentamente aquecida para a temperatura ambiente. Quando completa, a reação foi esfriada para 0°C e extinta com HCl a 1M (373,2 mL, 373,2 mmols). A mistura bifásica foi agitada durante 20 min e transferida para um funil separador. A camada orgânica foi separada e lavada com água (300 mL) seguida por salmoura (300 ml). A camada orgânica foi concentrada e o produto bruto seco sob vácuo elevado. O produto foi ainda purificado usando separação por Cromatografia de Fluido Supercrítica (SFC) em um Berger MultiGram III (Mettler Toledo AutoChem, Newark DE). As condições do método foram 20% metanol em 250mL/min em uma coluna de PPU (30*150) da Princeton Chromatography, 10 MPa (100 bar), 35C, 220 nm. Uma injeção de 3,5 mL de uma solução 55 a 70 mg/mL foi injetada. Os dados foram coletados usando SFC ProNTo software. O produto purificado recebido da purifi
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 74/99
70/84 cação de SFC foi um solvato de metanol. Para remover o metanol, uma destilação azeotrópica foi executada. O sólido amarelo-escuro, 2bromo, 4-tercbutila, 5-nitro fenol metanol solvato, (111,3 g, 59,9 mmols) foi carregado em um frasco redondo de 1 L, seguido por heptano (500 mL). A pasta fluida é aquecida para 64°C para obter uma solução transparente. O solvente foi destilado sob pressão reduzida (0,0649 MPa(649 mbar)) durante 30 minutos e depois extraído para secura. Este procedimento foi repetido três vezes até que nenhum MeOH fosse detectado por 1H-RMN. O produto foi seco sob vácuo elevado durante 16 horas para fornecer o produto como um semissólido amarelo escuro. 1H-RMN (400 MHZ, DMSO-d6) δ 11,2 (bs, OH), 7,69 (s, 1H); 7,03 (s, 1H); 1,30 (s, 9H).
Procedimento para a preparação de 5-terc-butil-3,3-dimetil-6nitrobenzofuran-2(3H)-ona (19)
Figure BRPI1012549B1_D0116
Figure BRPI1012549B1_D0117
Pd(PPh3)2, ZnF2,
DMF, 80 °C, 71%
Figure BRPI1012549B1_D0118
[000176] Difluorozinco (6,093 g, 58,92 mmols) foi adicionado a um frasco de fundo redondo, que foi esguichado com nitrogênio. Pd(tBu3P)2 (2 g, 3,835 mmols) foi depois adicionado sob corrente de nitrogênio. 2-Bromo-4-terc-butil-5-nitro-fenol (16,15 g, 58,92 mmols) dissolvido em DMF (80,75 mL) foi depois adicionado ao frasco. A mistura de reação foi uma suspensão laranja. (1-Metóxi-2-metil-prop-1enóxi)trimetilsilano (21,61 g, 25,13 mL, 117,8 mmols) foi adicionado à mistura e a mistura resultante foi aquecida para 80°C e agitada durante 16 h. Quando completa, a mistura de reação foi esfriada para a temperatura ambiente e filtrada através de Celite®. A torta do filtro foi lavada com MTBE (536,0 mL) e água (893,3 mL) foi adicionada ao fil
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 75/99
71/84 trado. A mistura foi agitada durante 15 min e sedimentada durante mais 15 min. As camadas foram separadas e HCl a 0,5M (500 mL, 250,0 mmols) foi adicionado na fase orgânica. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com água (500 mL). As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com NaCl (500 mL; 8% em peso). A camada orgânica foi separada e o solvente removido in vacuo. O produto bruto foi obtido como um sólido cristalino marrom e foi depois purificado através de um tampão de sílica, usando hexano:MTBE 20:1 a10:1 como um eluente. As frações contendo produto foram combinadas e o solvente removido in vacuo para fornecer o produto puro como um sólido cristalino branco. 1H-RMN (400 MHZ, DMSO-d6) δ 7,80 (s, 1H); 7,62 (s, 1H); 1,49 (s, 6H); 1,34 (s, 9H).
Procedimento para a preparação de 6-amino-5-terc-butil-3,3dimetilbenzofuran-2(3H)-ona (20)
Figure BRPI1012549B1_D0119
Pd(C), h2
MeOH, 100%
Figure BRPI1012549B1_D0120
[000177] Paládio em carbono (úmido; 5% em peso) foi colocado em um frasco de fundo redondo sob fluxo de nitrogênio. 5-Terc-butil-3,3dimetil-6-nitro-benzofuran-2-ona (4,7 g, 17,85 mmols) foi depois adicionada ao recipiente. Metanol (120 mL) foi depois cuidadosamente carregado ao recipiente sob atmosfera de nitrogênio. O recipiente foi depois expurgado com N2, evacuado, depois carregado com gás de hidrogênio. O recipiente foi evacuado e recarregado com gás de hidrogênio, e depois uma corrente contínua de gás de hidrogênio foi introduzida. Após a conclusão, a reação foi filtrada através de Celite® e a torta foi lavada com MeOH (300 ml). O solvente foi removido in vacuo e o produto seco sob vácuo elevado para fornecer um sólido cristalino
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 76/99
72/84 branco. 1H-RMN (400 MHZ, DMSO-d6) δ 7,05 (s, 1H); 6,48 (s, 1H);
5,02 (s, 2H, NH2); 1,34 (s, 6H); 1,30 (s, 9H)
Procedimento para a preparação de N-(5-terc-butil-3,3-dimetil-2-oxo-
2,3-dihidrobenzofuran-6-il)-4-oxo-1,4-di-hidroquinolina-3-carboxamida (21)
Figure BRPI1012549B1_D0121
Figure BRPI1012549B1_D0122
N H
T3P, MeTHF
Piridina, 45°C
Figure BRPI1012549B1_D0123
[000178] Um recipiente de reação foi carregado com o composto 26 (2,926 g, 15,43 mmols), Composto 20 (4,32 g, 18,52 mmols), 2-MeTHF (35,99 mL), e subsequentemente 50% T3P em 2-MeTHF (13,36 g, 21,00 mmols). Piridina (2,441 g, 2,496 mL, 30,86 mmols) foi adicionada e a suspensão aquecida em 47,5°C ±5°C durante 18 h. Após conclusão, a reação foi esfriada para a temperatura ambiente e 2-MeTHF (36) e água (30 ml) foram adicionados. As camadas foram divididas e a camada orgânica foi lavada com 10% em peso de solução de ácido cítrico (30 ml), água (30 ml) e duas vezes com NaHCO3 (20 ml). A camada orgânica foi lavada com salmoura (50 ml), separada e o solvente removido in vacuo. O produto bruto foi dissolvido em MTBE (100 ml) e hexano (200 ml) foi adicionado como um antissolvente. Um sólido precipitou e a pasta fluida resultante foi agitada durante duas horas. O sólido foi coletado por filtração de sucção e a torta foi lavada com hexano. O produto resultante foi seco em um forno a vácuo em 55°C com drenagem de nitrogênio para fornecer o composto do título como um sólido bege. 1H-RMN (400 MHZ, DMSO-d6) δ 12,96 (d J 6,4 Hz, 1H);
12,1 (s, 1H); 8,9 (d, J 6,4Hz, 1H); 8,33 (d, J 8Hz, 1H); 7,84 - 7,75 (m, 2H); 7,55 - 7,48 (m, 3H); 1,47 (s, 6H); 1,45 (s, 9H).
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 77/99
73/84
Procedimento para a preparação de ácido 2-(5-terc-butil-2-hidróxi-4-(4oxo- 1,4-di-hidroquinolina-3-carboxamido)fenil)-2-metilpropanoico (28)
Figure BRPI1012549B1_D0124
o o
Figure BRPI1012549B1_D0125
T3P, MeTHF
Piridina, 45°C
Figure BRPI1012549B1_D0126
O O
LiOH
------►
MeTHF, 45 °C
Figure BRPI1012549B1_D0127
COOH [000179] O composto 26 (81,30 mg, 0,4288 mmol) e Composto 20 (110 mg, 0,4715 mmol) foram carregados em um frasco de fundo redondo. 2-MeTHF (1 mL) seguido por 50% T3P em 2-MeTHF (371,4 mg, 0,5836 mmol) e piridina (67,84 mg, 69,37 pL, 0,8576 mmol) em 2MeTHF foram depois adicionados. A suspensão foi aquecida em 47,5°C ±5°C durante a noite. Após a conclusão, a reação foi esfriada para a temperatura ambiente. 2-MeTHF (1,014 mL) e água (811,2 pL) foram adicionados. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com água (811,2 pL) e duas vezes com NaHCO3 (2 mL). A camada orgânica foi transferida para dentro de um frasco de fundo redondo. LiOH (38,6 mg, 0,9 mmol) dissolvido em água (2 mL) foi adicionado e a reação foi aquecida para 45°C. Após conclusão, as camadas foram separadas e a camada orgânica foi descartada. A camada aquosa foi esfriada com um banho de gelo e ácido clorídrico (10,72 mL de 1,0 M, 10,72 mmols) foi adicionado à solução até que o pH alcançou um pH de cerca de 3 a 4. A camada aquosa foi extraída duas ve
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 78/99
74/84 zes com 2-MeTHF (5 ml), e as camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura (5 ml). A camada orgânica foi separada e o solvente removido in vacuo. O sólido resultante foi seco em um forno a vácuo com drenagem de nitrogênio em 50°C para fornecer o composto do título. 1H-RMN (400 MHZ, DMSO-d6) δ 12,89 (d, J 6,8 Hz, 1H); 11,84 (s, 1H); 11,74 (s, 1H); 9,36 (s, 1H); 8,87 - 8,61 (d, J 6,4 Hz ,1H);
8,34 - 8,32 (d, J 9,1 Hz 1H); 7,83 - 7,745 (m, 2H); 7,17 - 7,09 (m, 1H); 7,17 (s, 1H); 7,09 (s, 1H); 1,43 (s, 6H); 1,40 (s, 9H).
Exemplo 6: Procedimento para a biossíntese de N-(2-terc-butil-5hidróxi-4-(1-hidróxi-2-metilpropan-2-il)fenil)-4-oxo- 1,4-di-hidroquinolina-
3-carboxamida (27) e ácido 2-(5-terc-butil-2-hidróxi-4-(4-oxo-1,4-dihidroquinolina-3-carboxamido)fenil)-2-metilpropanoico (28)
Figure BRPI1012549B1_D0128
Figure BRPI1012549B1_D0129
Streptomyces rimosus (DSM 40260) foi adquirido da DSMZ como cultura congelada. Esta cultura foi usada para inocular culturas inclinadas de ágar, que foram mantidas e armazenadas a 4°C. Meio de extrato de levedura-extrato de malte-peptona (YMP) contendo extrato de levedura (4 g/L), extrato de malte (10 g/L) e farinha de soja (5 g/L) foi preparado e esterilizado a 130°C durante 60 minutos. Cinco frascos contendo 1 L de meio de YMP foram diretamente inoculados com S. rimosus de culturas inclinadas de ágar. A cultura foi deixada crescer
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 79/99
75/84 durante 2 a 3 dias a 30°C com agitação suave de aproximadamente 100 rpm. Sob estas condições, dois tipos de crescimento foram observados uma solução turva, ou particulados esféricos que se agregam no fundo do frasco. Este tipo de crescimento foi demonstrado de resultar em conversões superiores em Composto 27. As células foram então giradas para baixo, colhidas e colocadas novamente em suspensão em dois frascos contendo 1 L de tampão fosfato de potássio a 0,1 M, pH 7,0. 5,0g de composto 34 em 50 mL de N,N-dimetilformamida (DMF) foram adicionados ao frascos. As reações prosseguiram durante 24 horas a 30°C com agitação suave ao redor de 100 rpm em cujo ponto conversões de 7,59% de Composto 27 e 1,17% de Composto 28 foram indicadas por HPLC.
[000180] Ambos os frascos foram combinados, centrifugados a 3500 rpm durante 10 minutos, colocados novamente em suspensão em 500 mL de metanol. Esta suspensão foi agitada vigorosamente durante 30 minutos e depois girou novamente a 6000 rpm durante 10 minutos. A camada orgânica foi coletada e o processo foi repetido duas vezes. Os extratos de metanol foram concentrados in vacuo para produzir 2,50 g, 1,57g e 1,11g de material sólido, respectivamente. Os sólidos a partir destes extratos foram mostrados de conter 74,78 a 91,96% de Composto 34, 7,66 a 19,73% de Composto 27 e 0,39 a 5,49% de Composto 28. Em um esforço para separar uma parte do Composto 34 dos produtos de bio-oxidação, os sólidos das duas primeiras extrações foram combinados, colocados em suspensão em 250 mL de metanol, agitados vigorosamente durante 1 hora e filtrados a vácuo. Embora os Compostos 27 e 28 tenham sido enriquecidos no filtrado (22,09 e 6,14%, respectivamente), os sólidos também continham ainda o Composto 27 (8,96%) e o Composto 28 (0,50%).
[000181] O filtrado de metanol contendo aproximadamente 2,2g de sólidos dissolvidos foi adsorvido em 4,5g de sílica e purificado por
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 80/99
76/84 cromatografia cintilante utilizando um gradiente de 100% de diclorometano a 88:12 diclorometano/metanol. As frações contendo o Composto 27 foram concentradas in vacuo e ainda mais secas por meio da secagem por congelamento para obtenção de 130 mg do Composto 27 (98,5% de pureza por HPLC). A fração contendo o Composto 28 impuro também foi concentrada in vacuo para produzir menos do que 10 mg de sólidos.
[000182] O grânulo celular foi colocado novamente em suspensão em 500 ml de metanol e homogeneizado em um BeadBeater para separar as células e recuperar todo o produto remanescente. A camada orgânica foi obtida por centrifugação da suspensão homogeneizada a 6000 rpm durante 10 minutos. Esta foi adicionada ao sólido obtido a partir da terceira extração e os sólidos filtrados do enriquecimento de pasta fluida das duas primeiras extrações e transformada em pasta fluida em refluxo durante a noite. A pasta fluida foi então esfriada e filtrada por sucção para obter 1,99g de sólido. O sólido foi dissolvido novamente em 300 mL de metanol que foi então adsorvido em aproximadamente 5g de sílica e purificado por cromatografia cintilante utilizando um gradiente de 100% de diclorometano a 94:6 diclorometano/metanol para fornecer 820 mg de sólido contendo o Composto 34 e o Composto 27, assim como outras impurezas. Este foi colocado novamente em coluna usando um gradiente de solvente mais gradual (100% DCM até uma mistura de 6% MeOH/94% DCM) para obter um adicional de 89 mg de Composto 27. O espectro de 1H-RMN foi consistente com o relatado acima.
Exemplo 7: Procedimento Geral para Testar a Solubilidade em pH 7,4 [000183] Um ensaio de frasco agitado de alto rendimento foi utilizado para determinar a solubilidade dos compostos em tampão pH 7,4. Para calcular a concentração de compostos em solução, duas condições por composto foram executadas: 300 uM em 100% DMSO e
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 81/99
77/84
200 uM em tampão de fosfato pH 7,4 com a presença de DMSO 2%. Cada amostra foi deixada agitar durante a noite, depois injetada em HPLC-UV para determinar a área do pico usando as seguintes condições: coluna Phenomenex 00A-4251-B0 - 30x2.00 mm Luna 3u C18(2) 100A; taxa de fluxo 0,8 mL/min; volume de injeção 20 uL; água de grau de HPLC com 0,1% ácido fórmico e acetonitrila de grau de HPLC com 0,1% ácido fórmico fases móveis; determinada a área de pico em 254 nm. Solubilidade em uM foi calculada usando a seguinte equação: conc. = (área de pico pH 7,4) / (área de pico 300 uM DMSO condição-padrão) * concentração 300 uM de condição-padrão. Os picos de interesse foram identificados em condições tampão com base no tempo de retenção (RT) do pico de maior área na condição padrão DMSO 300 uM.
ENSAIOS DE ATIVIDADE
Exemplo 8: Procedimento Geral para os Ensaios de Atividade [000184] Ensaios para Detectar e Medir as Propriedades de Potenciação AF508-CFTR dos Compostos [000185] Métodos óticos potenciais de membrana para avaliar as propriedades de modulação AF508-CFTR dos compostos [000186] O ensaio utiliza tinturas sensíveis de voltagem fluorescentes para medir as mudanças no potencial de membrana utilizando uma leitora de placas fluorescentes (por exemplo, FLIPR III, Molecular Devices, Inc.) como uma leitura para o aumento nas células funcionais AF508-CFTR em NIH 3T3. A força motriz para a resposta é a criação de um gradiente de íon de cloreto em conjunto com a ativação do canal por uma etapa única de adição de líquido após as células terem sido previamente tratadas com compostos e subsequentemente carregadas com uma tintura sensível a voltagem.
Identificação de Compostos Potencializadores [000187] Para identificar os potencializadores de AF508-CFTR, um
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 82/99
78/84 formato de ensaio HTS de adição dupla foi desenvolvido. Este ensaio HTS utiliza tinturas sensíveis a voltagem fluorescentes para medir as mudanças no potencial da membrana no FLIPR III como uma medida para o aumento da obstrução (condutância) de AF508 CFTR em células AF508 CFTR NIH 3T3 corrigidas na temperatura. A força motriz para a resposta é um gradiente iônico Cl- em conjunto com a ativação do canal com forscolina em uma etapa única de adição de líquido usando uma leitora de placas fluorescentes tais como FLIPR III após as células terem sido previamente tratadas com compostos potencializadores (ou controle de veículo DMSO) e subsequentemente carregadas com uma tintura de redistribuição.
Soluções [000188] Solução de banho #1: (em mM) NaCl 160, KCl 4,5, CaCl2 2, MgCl2 1, HEPES 10, pH 7,4 com NaOH.
[000189] Solução de banho livre de cloreto: sais de cloreto na Solução de Banho #1 são substituídos com sais de gluconato.
[000190] Cultura Celular. Fibroblastos de camundongo NIH3T3 que estavelmente expressam AF508-CFTR são usados para as medições óticas do potencial de membrana. As células são mantidas a 37°C em 5% CO2 e umidade de 90% em meio Dulbecco's modified Eagle's suplementado com 2 mM de glutamina, 10% de soro fetal bovino, 1 X NEAA, β-ME, 1 X pen/strep, e 25 mM HEPES em frascos de cultura de 175 cm2. Para todos os ensaios óticos, as células foram semeadas em ~20000/poço em placas revestidas de matrigel de 384 poços e cultivadas durante 2 horas a 37°C antes do cultivo a 27°C durante 24 horas para o ensaio de potencializador. Para os ensaios de correção, as células são cultivadas em 27°C ou 37°C com e sem compostos durante 16 a 24 horas. Ensaios eletrofisiológicos para avaliar as propriedades de modulação de AF508-CFTR dos compostos.
1. Ensaio com Câmara Ussing
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 83/99
79/84 [000191] Experiências com câmara Ussing foram executadas em células epiteliais das vias aéreas polarizadas que expressam AF508CFTR para caracterizar ainda mais os moduladores de AF508-CFTR identificados nos ensaios óticos. Os epitélios das vias aéreas de não CF e de CF foram isolados de tecido dos brônquios, cultivados como descrito anteriormente (Galietta, L.J.V., Lantero, S., Gazzolo, A., Sacco, O., Romano, L., Rossi, G.A., & Zegarra-Moran, O. (1998) In Vitro Cell. Dev. Biol. 34, 478-481), e chapeados em filtros Costar® SnapwellTM que foram pré-revestidos com meio condicionado de NIH3T3. Depois de quatro dias o meio apical foi removido e as células foram cultivadas em uma interface de ar líquido durante > 14 dias antes do uso. Isto resultou em uma monocamada de células colunares totalmente diferenciadas que foram ciliadas, traços que são característicos dos epitélios das vias aéreas. Os HBE não CF foram isolados de não fumantes que não tinham qualquer doença pulmonar conhecida. Os CF-HBE foram isolados de pacientes homozigotos para AF508CFTR.
[000192] Os HBE cultivados em inserções de cultura celular Costar® Snapwell™ foram montados em uma câmara Ussing (Physiologic Instruments, Inc., San Diego, CA), e a resistência transepitelial e corrente em curto-circuito na presença de um gradiente Cl- basolateral para apical (ISC) foram medidas usando um sistema de fixação de voltagem (Department of Bioengineering, University of Iowa, IA). Resumidamente, os HBE foram examinados sob condições de registro de fixação de voltagem (Vhold = 0 mV) a 37°C. A solução basolateral continha (em mM) 145 NaCl, 0,83 K2HPO4, 3,3 KH2PO4, 1,2 MgCb, 1,2 CaCl2, 10 Glicose, 10 HEPES (pH ajustado para 7,35 com NaOH) e a solução apical continha (em mM) 145 NaGluconato, 1,2 MgCl2, 1,2 CaCl2, 10 glicose, 10 HEPES (pH ajustado para 7,35 com NaOH). Identificação de Compostos Potencializadores
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 84/99
80/84 [000193] O protocolo típico utilizou um gradiente de concentração de Cl- da membrana basolateral a apical. Para configurar este gradiente, osciladores mecânicos normais foram utilizados na membrana basolateral, enquanto que NaCl apical foi substituído pelo gluconato de sódio equimolar (titulado até pH 7,4 com NaOH) para dar um gradiente de concentração de Cl- grande em todo o epitélio. Forscolina (10 μΜ) e todos os compostos de teste foram adicionados ao lado apical das inserções de cultura celular. A eficácia dos potenciadores de AF508CFTR putativos foi comparada com aquela do potencializador conhecido, genisteína.
2. Registros de Fixação de Remendo [000194] A corrente de Cl- total em células AF508-NIH3T3 foi monitorada usando a configuração de registro de gravação de remendo perfurado conforme descrito anteriormente (Rae, J., Cooper, K., Gates, P., & Watsky, M. (1991) J. Neurosci. Methods 37, 15-26). Os registros de fixação de voltagem foram executados a 22°C usando um amplificador de fixação de remendo Axopatch 200B (Axon Instruments Inc., Foster City, CA). A solução de pipeta continha (em mM) 150 N-metil-Dglucamina (NMDG)-Cl, 2 MgCb, 2 CaCl2, 10 EGTA, 10 HEPES, e 240 μg/ml anfotericina-B (pH ajustado para 7,35 com HCl). O meio extracelular continha (em mM) 150 NMDG-Cl, 2 MgCb, 2 CaCb, 10 HEPES (pH ajustado para 7,35 com HCl). A geração de pulso, aquisição de dados e análise foram executadas usando um PC equipado com um Digidata 1320 A/D interface em conjunto com Clampex 8 (Axon Instruments Inc.). Para ativar AF508-CFTR, 10 pM forscolina e 20 pM genisteína foram adicionados ao banho e a relação corrente-voltagem foi monitorada a cada 30 seg.
Identificação de Compostos Potencializadores [000195] A capacidade de potencializadores de AF508-CFTR para aumentar a corrente de Cl- de AF508-CFTR macroscópica (Iafõ08) em
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 85/99
81/84 células NIH3T3 estavelmente expressando AF508-CFTR também foi investigada usando as técnicas de registro de remendo perfurado. Os potencilizadores identificados a partir dos ensaios ópticos evocaram um aumento dependente da dose em IÁF508 com potência e eficácia similares observadas nos ensaios óticos. Em todas as células examinadas, o potencial de reversão antes e durante a aplicação do potencializador foi ao redor de -30 mV, que é o Eci calculado (-28 mV). Cultura de Células [000196] Fibroblastos de camundongo NIH3T3 estavelmente expressando ÁF508-CFTR são usados para registros células integrais. As células são mantidas a 37°C em 5% CO2 e umidade de 90% em meio Dulbecco's modified Eagle's suplementado com 2 mM de glutamina, 10% de soro fetal bovino, 1 X NEAA, β-ME, 1 X pen/strep, e 25 mM HEPES em frascos de cultura de 175 cm2. Para registros de células integrais, 2500 a 5000 células foram semeadas em lamínulas de vidro revestidas com poli-L-lisina e cultivadas durante 24 a 48 horas a 27°C antes do uso para testar a atividade dos potencializadores, e incubadas com ou sem o composto de correção a 37°C para medir a atividade dos corretores.
3. Registros de Canais Isolados [000197] A atividade de obstrução de wt-CFTR e ADF508-CFTR de temperatura corrigida expressa em células NIH3T3 foi observada usando registros de remendo de membrana de dentro para fora extirpado como descrito anteriormente (Dalemans, W., Barbry, P., Champigny, G., Jallat, S., Dott, K., Dreyer, D., Crystal, R.G., Pavirani, A., Lecocq, J-P., Lazdunski, M. (1991) Nature 354, 526 - 528) usando um amplificador de fixação de remendo Axopatch 200B (Axon Instruments Inc.). A pipeta continha (em mM): 150 NMDG, 150 ácido aspártico, 5 CaCl2, 2 MgCl2, e 10 HEPES (pH ajustado para 7,35 com base Tris). O banho continha (em mM): 150 NMDG-Cl, 2 MgCl2, 5 EGTA, 10 TES, e
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 86/99
82/84 base Tris (pH ajustado para 7,35 com HCl). Após a excisão, ambos wt- e AF508-CFTR foram ativados pela adição de 1 mM Mg-ATP, 75 nM da subunidade catalítica de proteína cinase dependente de cAMP (PKA; Promega Corp. Madison, WI), e 10 mM NaF para inibir as proteínas fosfatases, o que impediu o enfraquecimento corrente. O potencial de pipeta foi mantido a 80 mV. A atividade do canal foi analisada a partir de remendos de membrana contendo < 2 canais ativos. O número máximo de aberturas simultâneas determinou o número de canais ativos durante o curso de uma experiência. Para determinar a amplitude da corrente de canal isolado, os dados registrados a partir de 120 segundos de atividade de AF508-CFTR foram filtrados off-line em 100 Hz e depois utilizados para construir histogramas de amplitude de ponto total que foram equipadas com funções multigaussianas usando software Bio-Patch Analysis (Bio-Logic Comp. France). A corrente microscópica total e a probabilidade de abertura (Po) foram determinadas a partir de 120 segundos de atividade do canal. A Po foi determinada utilizando o software Bio- Patch, ou a partir da conexão Po = I/i(N), em que I = corrente média, i = amplitude corrente do canal isolado, e N = número de canais ativos no remendo.
Cultura de Células [000198] Fibroblastos de camundongo NIH3T3 que estavelmente expressam AF508-CFTR são usados para registros de fixação do remendo da membrana. As células são mantidas a 37°C em 5% CO2 e umidade de 90% em meio Dulbecco's modified Eagle's suplementado com 2 mM de glutamina, 10% de soro fetal bovino, 1 X NEAA, β-ME, 1 X pen/strep, e 25 mM HEPES em frascos de cultura de 175 cm2. Para registros de canais isolados, 2500 a 5000 células foram semeadas em lamínulas de vidro revestidas com poli-L-lisina e cultivadas durante 24 a 48 horas a 27°C antes do uso.
[000199] Os Compostos 27 e 28 foram testados com relação a solu
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 87/99
83/84 bilidade utilizando o procedimento fornecido no Exemplo 3 e para a atividade utilizando o procedimento fornecido nos ensaios do Exemplo
4. Os resultados são apresentados na Tabela 1. A atividade de composto é ilustrada com +++ se EC50 (ou IC50) foi medida ser menor do que 2,0 μ M, + + se a atividade foi medida ser de 2 μM a 5,0 μM, + se atividade foi medida ser maior do que 5,0 μΜ, e - se nenhum dado estiver disponível. A eficácia é ilustrada com +++ se a eficácia foi calculada ser maior do que 100%, ++ se a eficácia foi calculada ser de 100% a 25%, + se a eficácia foi calculada ser menor do que 25%, e - se nenhum dado estiver disponível.
Tabela 1: Exemplos de atividades e eficácias dos compostos da Fórmula I
Estrutura OH I ~ /V/K^OH 0 0 í| jP [1 J JJ H H Composto 27 OH I j? 0 0 0H J l| H H Composto 28
Solubilidade HTSF @ pH = 7,4 87 uM >200 uM
EC50 ótica +++ ++
EC50 Á508-HBE +++ +++
EC50 Á508/G551D-HBE +++ ++
HLM/RLM (% residual @ 30 min) ++ +++
CaV 1.2 IC50 + -
OUTRAS MODALIDADES [000200] Todas as publicações e patentes referidas nesta descrição são aqui incorporadas por referência na mesma medida como se cada publicação individual ou pedido de patente fosse específica e individualmente indicado para ser incorporado por referência. O significado
Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 88/99
84/84 dos termos em qualquer uma das patentes ou publicações incorporadas por referência deve divergir com o significado dos termos usados nesta divulgação, o significado dos termos nesta divulgação se destina a ser controlado. Além disso, o debate precedente divulga e descreve apenas as modalidades exemplares da presente invenção. Uma pessoa versada na técnica facilmente reconhecerá a partir de tal debate e a partir dos desenhos acompanhantes e reivindicações, que várias alterações, modificações e variações podem ser feitas sem se afastar do espírito e escopo da invenção como definidos nas reivindicações que seguem.

Claims (16)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a
    Fórmula I:
    Figure BRPI1012549B1_C0001
    I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, sendo que R é COOH ou CH2OH.
  2. 2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R é CH2OH.
  3. 3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R é COOH.
  4. 4. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende:
    um composto de fórmula I, como definido na reivindicação 1; e um portador ou adjuvante farmaceuticamente aceitável.
  5. 5. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 4, caracterizada pelo fato de que compreende um composto da estrutura:
    Figure BRPI1012549B1_C0002
    Figure BRPI1012549B1_C0003
  6. 6. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 4, caracterizada pelo fato de que compreende um composto de Fórmula I apresenta a estrutura:
    Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 90/99
    2/5
    Figure BRPI1012549B1_C0004
    OH ' '
  7. 7. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 4 a 6, caracterizada pelo fato de que compreende ainda um agente adicional selecionado dentre um agente mucolítico, um broncodilatador, um antibiótico, um agente anti-invectivo, um agente anti-inflamatório, um modulador do regulador da condutância transmembrana na fibrose cística (CFTR), ou um agente nutricional.
  8. 8. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é para uso no tratamento ou diminuição da gravidade de uma doença em um paciente que compreende a administração a dito paciente de uma quantidade eficaz de um composto de Fórmula I, como definido na reivindicação 1, sendo que dita doença é selecionada de fibrose cística, asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) induzida por fumo, bronquite crônica, rinossinusite, constipação, pancreatite, insuficiência pancreática, infertilidade masculina causada pela ausência congênita bilateral dos vasos deferentes (CBAVD), doença pulmonar leve, pancreatite idiopática, aspergilose broncopulmonar alérgica (ABPA), doença hepática, enfisema hereditário, hemocromatose hereditária, deficiências de coagulação por fibrinólise, tais como deficiência de proteína C, angioedema hereditário Tipo 1, deficiências de processamento de lipídeo, tais como a hipercolesterolemia familiar, quilomicronemia Tipo 1, abetalipoproteinemia, doenças de depósito lisossômico, tais como doença da célula I/pseudo-Hurler, mucopolissacaridoses, Sandhof/Tay-Sachs, Crigler-Najjar tipo II, poliendocrinopatia/hiperinsulemia, Diabete melito, nanismo Laron, deficiência de mileoperoxidase, hipoparatireoidismo primário, melanoma, glicanose da
    Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 91/99
    3/5 síndrome de glicoproteína deficiente em carboidratos (CDG) tipo 1, hipotireoidismo congênito, osteogênese imperfeita, hipofibrinogenemia hereditária, Diabetes insípido (DI), DI neurofiseal, DI neprogênico, síndrome de Charcot-Marie Tooth, doença de Perlizaeus-Merzbacher, doenças neurodegenerativas tais como doença de Alzheimer, doença de Parkinson, esclerose lateral amiotrófica, plasy supranuclear progressiva, doença de Pick, vários distúrbios neurológicos de poliglutamina tais como a de Huntington, ataxia espinocerebular tipo I, atrofia muscular espinhal e bulbar, dentatorrubal palidoluisiano, e distrofia miotônica, assim como encefalopatias espongiformes, tais como a doença de Creutzfeldt-Jakob hereditária (devido ao defeito de processamento da proteína príon), doença de Fabry, síndrome de StrausslerScheinker, COPD, doença do olho seco, ou doença de Sjogren.
  9. 9. Composto, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que o composto de Fórmula I apresenta a estrutura:
    Figure BRPI1012549B1_C0005
    Figure BRPI1012549B1_C0006
  10. 10. Composto, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que o composto de Fórmula I apresenta a estrutura:
    Figure BRPI1012549B1_C0007
    OH .
  11. 11. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 a 10, caracterizado pelo fato de que a dita doença é a fibrose cística.
    Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 92/99
    4/5
  12. 12. Kit, caracterizado pelo fato de que é para uso na medição da atividade de CFTR ou um fragmento deste em uma amostra biológica in vitro ou in vivo, compreendendo:
    (i) uma composição que compreende um composto de Fórmula I, como definido na reivindicação 1, e (ii) instruções para:
    (a) colocar em contato a composição com a amostra biológica; e (b) medir a atividade do referido CFTR ou um fragmento deste.
  13. 13. Kit, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que compreende ainda instruções para:
    (i) colocar em contato um composto adicional com a amostra biológica;
    (ii) medir a atividade do referido CFTR ou um fragmento deste na presença de dito composto adicional; e (iii) comparar a atividade do CFTR ou um fragmento deste na presença do composto adicional com a atividade do CFTR ou um fragmento deste na presença de uma composição de Fórmula I.
  14. 14. Kit, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a etapa de comparar a atividade do referido CFTR ou um fragmento deste fornece uma medida da densidade do referido CFTR ou um seu fragmento.
  15. 15. Kit, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 12 a 14, caracterizado pelo fato de que o composto de Fórmula I apresenta a estrutura:
    Figure BRPI1012549B1_C0008
    Figure BRPI1012549B1_C0009
    Petição 870190108264, de 25/10/2019, pág. 93/99
    5/5
  16. 16. Kit, de acordo com as reivindicações de 12 a 14, caracterizado pelo fato de que o composto de Fórmula I apresenta a estrutu- ra:
    Figure BRPI1012549B1_C0010
BRPI1012549A 2009-03-20 2010-03-19 moduladores do regulador da condutância transmembrana na fibrose cística, composição farmacêutica e kit BRPI1012549B8 (pt)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US16213009P 2009-03-20 2009-03-20
PCT/US2010/028062 WO2010108155A1 (en) 2009-03-20 2010-03-19 Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator

Publications (4)

Publication Number Publication Date
BRPI1012549A2 BRPI1012549A2 (pt) 2016-03-22
BRPI1012549A8 BRPI1012549A8 (pt) 2016-10-04
BRPI1012549B1 true BRPI1012549B1 (pt) 2020-04-07
BRPI1012549B8 BRPI1012549B8 (pt) 2021-05-25

Family

ID=42136194

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BRPI1012549A BRPI1012549B8 (pt) 2009-03-20 2010-03-19 moduladores do regulador da condutância transmembrana na fibrose cística, composição farmacêutica e kit

Country Status (22)

Country Link
US (4) US8614325B2 (pt)
EP (1) EP2408749B1 (pt)
JP (3) JP5636418B2 (pt)
CN (1) CN102361856A (pt)
AU (1) AU2010226393B2 (pt)
BR (1) BRPI1012549B8 (pt)
CA (1) CA2755969C (pt)
CY (1) CY1120593T1 (pt)
DK (1) DK2408749T3 (pt)
ES (1) ES2683633T3 (pt)
HR (1) HRP20181261T1 (pt)
HU (1) HUE038854T2 (pt)
IL (1) IL215261A (pt)
LT (1) LT2408749T (pt)
MX (1) MX2011009868A (pt)
NZ (1) NZ595151A (pt)
PL (1) PL2408749T3 (pt)
PT (1) PT2408749T (pt)
RU (1) RU2518897C2 (pt)
SI (1) SI2408749T1 (pt)
WO (1) WO2010108155A1 (pt)
ZA (1) ZA201106618B (pt)

Families Citing this family (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100074949A1 (en) 2008-08-13 2010-03-25 William Rowe Pharmaceutical composition and administration thereof
CN1898221A (zh) 2003-09-06 2007-01-17 沃泰克斯药物股份有限公司 Atp－结合弹夹转运蛋白的调控剂
US7977322B2 (en) 2004-08-20 2011-07-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-binding cassette transporters
EP2489659B1 (en) 2004-06-24 2017-12-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-binding cassette transporters
AU2006279810B2 (en) 2005-08-11 2011-10-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
SI2395002T1 (sl) 2005-11-08 2014-10-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Farmacevtski sestavek, vsebujoč heterociklični modulator prenašalcev z ATP-vezavno kaseto
ES2790700T3 (es) 2005-12-28 2020-10-28 Vertex Pharma Composiciones farmacéuticas de la forma amorfa de N-[2,4-bis(1,1-dimetiletil)-5-hidroxifenil]-1,4-dihidro-4-oxoquinolin-3-carboxamida
CA2635760C (en) 2005-12-28 2014-07-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of atp-binding cassette transporters
US10022352B2 (en) 2006-04-07 2018-07-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-binding cassette transporters
US7645789B2 (en) 2006-04-07 2010-01-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Indole derivatives as CFTR modulators
PT2674428T (pt) 2006-04-07 2016-07-14 Vertex Pharma Modeladores de transportadores de cassetes de ligação de atp
US8563573B2 (en) 2007-11-02 2013-10-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Azaindole derivatives as CFTR modulators
JP5497633B2 (ja) 2007-05-09 2014-05-21 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｃｆｔｒのモジュレーター
CN101827593B (zh) 2007-08-24 2013-07-24 沃泰克斯药物股份有限公司 用于治疗(特别是)囊性纤维化的异噻唑并吡啶酮
CA2705562C (en) 2007-11-16 2016-05-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Isoquinoline modulators of atp-binding cassette transporters
US20100036130A1 (en) 2007-12-07 2010-02-11 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes for producing cycloalkylcarboxamido-pyridine benzoic acids
AU2008335440B2 (en) 2007-12-07 2013-11-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes for producing cycloalkylcarboxamido-pyridine benzoic acids
WO2009073757A1 (en) 2007-12-07 2009-06-11 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Solid forms of 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3] dioxol-5-yl) cyclopropanecarboxamido)-3-methylpyridin-2-yl) benzoic acid
US8299099B2 (en) 2008-02-28 2012-10-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Heteroaryl derivatives as CFTR modulators
ES2552990T3 (es) 2008-03-31 2015-12-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Derivados de piridilo como moduladores del CFTR
CA2736545A1 (en) 2008-09-29 2010-04-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Dosage units of 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioxol-5-yl)cyclopropanecarboxamido)-3-methylpyridin-2-yl)benzoic acid
BRPI0919930A2 (pt) 2008-10-23 2016-02-16 Vertex Pharma moduladores de regulador de condutância transmembrana de fibrose cística
JP5636418B2 (ja) * 2009-03-20 2014-12-03 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＶｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ 嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子のモジュレーター
BRPI1011506B8 (pt) 2009-03-20 2021-05-25 Vertex Pharma processo para a fabricação de moduladores de regulador de condutância de transmembrana de fibrose cística
US8802868B2 (en) 2010-03-25 2014-08-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Solid forms of (R)-1(2,2-difluorobenzo[D][1,3]dioxo1-5-yl)-N-(1-(2,3-dihydroxypropyl-6-fluoro-2-(1-hydroxy-2-methylpropan2-yl)-1H-Indol-5-yl)-Cyclopropanecarboxamide
PL2555754T3 (pl) 2010-04-07 2016-09-30 Formy stałe kwasu 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-ilo)cyklopropanokarboksyamido)-3-metylopirydyn-2-ylo)benzoesowego
WO2011127241A2 (en) 2010-04-07 2011-10-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions of 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioxol-5-yl) cyclopropanecarboxamido)-3-methylpyriodin-2-yl)benzoic acid and administration thereof
US9035072B2 (en) 2010-04-22 2015-05-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Process of producing cycloalkylcarboxamido-indole compounds
US8563593B2 (en) 2010-06-08 2013-10-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Formulations of (R)-1-(2,2-difluorobenzo[D] [1,3] dioxol-5-yl)-N-(1-(2,3-dihydroxypropyl)-6-fluoro-2-(1-hydroxy-2-methylpropan-2-yl)-1H-indol-5-yl)cyclopropanecarboxamide
HUE047354T2 (hu) 2011-05-18 2020-04-28 Vertex Pharmaceuticals Europe Ltd Ivacaftor deuterizált származékai
MX357328B (es) 2011-11-08 2018-07-05 Vertex Pharma Moduladores de trasportadores de casete enlazante de atp.
CN104470518A (zh) 2012-02-27 2015-03-25 沃泰克斯药物股份有限公司 药物组合物及其施用
US8674108B2 (en) 2012-04-20 2014-03-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Solid forms of N-[2,4-bis(1,1-dimethylethy)-5-hydroxyphenyl]-1,4-dihydro-4-oxoquinoline-3-carboxamide
US9012496B2 (en) 2012-07-16 2015-04-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions of (R)-1-(2,2-difluorobenzo[D][1,3]dioxol-5-yl)-N-(1-(2,3-dihydroxypropyl)-6-fluoro-2-(1-hydroxy-2-methylpropan-2-yl)-1H-indol-5-yl)cyclopropanecarboxamide and administration thereof
CN104030981A (zh) * 2013-03-06 2014-09-10 上海特化医药科技有限公司 Ivacaftor的制备方法及其中间体
WO2014141110A2 (en) * 2013-03-14 2014-09-18 Curadev Pharma Pvt. Ltd. Aminonitriles as kynurenine pathway inhibitors
US9345023B2 (en) * 2013-04-24 2016-05-17 Alcatel Lucent Method and apparatus for determination of almost blank subframe pattern by network listening
WO2015073231A1 (en) 2013-11-12 2015-05-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Process of preparing pharmaceutical compositions for the treatment of cftr mediated diseases
PL3424534T3 (pl) 2014-04-15 2021-11-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Kompozycje farmaceutyczne do leczenia chorób, w których pośredniczy mukowiscydozowy przezbłonowy regulator przewodnictwa
EP4159717A1 (en) 2014-10-06 2023-04-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
WO2016057730A1 (en) 2014-10-07 2016-04-14 Strohmeier Mark Co-crystals of modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
KR101721029B1 (ko) * 2014-10-16 2017-03-29 연세대학교 산학협력단 인돌리지노[3,2-c]퀴놀린 유도체, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 낭포성 섬유증 예방 또는 치료용 약학조성물
WO2016081556A1 (en) 2014-11-18 2016-05-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Process of conducting high throughput testing high performance liquid chromatography
WO2017053711A2 (en) 2015-09-25 2017-03-30 Concert Pharmaceuticals, Inc. Deuterated cftr potentiators
US11102993B2 (en) 2016-02-22 2021-08-31 Mars, Incorporated Pet food
WO2018029336A1 (en) 2016-08-12 2018-02-15 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for determining whether a subject was administered with an activator of the ppar beta/delta pathway.
MX2019006637A (es) 2016-12-09 2019-08-21 Vertex Pharma Modulador del regulador de conductancia transmembrana de fibrosis quistica composiciones farmaceuticas metodos de tratamiento y proceso para producir el modulador.
CA3066084A1 (en) 2017-06-08 2018-12-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of treatment for cystic fibrosis
CA3069226A1 (en) 2017-07-17 2019-01-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of treatment for cystic fibrosis
CN117924170A (zh) 2017-12-01 2024-04-26 弗特克斯药品有限公司 用于制备囊性纤维化跨膜传导调节因子的调节剂的方法
KR20200097293A (ko) 2017-12-08 2020-08-18 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 낭포성 섬유증 막횡단 전도 조절자의 조정제의 제조 방법
EP3746105A4 (en) 2018-01-29 2022-05-18 Ohio State Innovation Foundation CAL-PDZ BINDING DOMAIN CYCLIC PEPTIDYL INHIBITORS

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2236751B (en) 1989-10-14 1993-04-28 Wyeth John & Brother Ltd Heterocyclic compounds
US5304121A (en) 1990-12-28 1994-04-19 Boston Scientific Corporation Drug delivery system making use of a hydrogel polymer coating
RU2047614C1 (ru) * 1992-06-15 1995-11-10 Джон Вайс энд Бразер Лимитед Гетероциклические соединения, или их фармацевтически приемлемые аддитивные соли кислоты, или n-оксид гетероциклического соединения, или его аддитивная соль кислоты
US5994341A (en) 1993-07-19 1999-11-30 Angiogenesis Technologies, Inc. Anti-angiogenic Compositions and methods for the treatment of arthritis
US6099562A (en) 1996-06-13 2000-08-08 Schneider (Usa) Inc. Drug coating with topcoat
US6248739B1 (en) 1999-01-08 2001-06-19 Pharmacia & Upjohn Company Quinolinecarboxamides as antiviral agents
EP2489659B1 (en) * 2004-06-24 2017-12-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-binding cassette transporters
JP2009521468A (ja) * 2005-12-24 2009-06-04 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ａｂｃ輸送体の調節因子としてのキノリン−４−オン誘導体
WO2007075946A1 (en) * 2005-12-27 2007-07-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds useful in cftr assays and methods therewith
ES2790700T3 (es) 2005-12-28 2020-10-28 Vertex Pharma Composiciones farmacéuticas de la forma amorfa de N-[2,4-bis(1,1-dimetiletil)-5-hidroxifenil]-1,4-dihidro-4-oxoquinolin-3-carboxamida
AU2008298545B2 (en) * 2007-09-14 2013-12-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
JP5636418B2 (ja) * 2009-03-20 2014-12-03 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＶｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ 嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子のモジュレーター

Also Published As

Publication number Publication date
PT2408749T (pt) 2018-10-08
HUE038854T2 (hu) 2018-12-28
LT2408749T (lt) 2018-09-25
EP2408749B1 (en) 2018-05-16
RU2011142297A (ru) 2013-04-27
MX2011009868A (es) 2012-01-12
HRP20181261T1 (hr) 2018-12-14
BRPI1012549A2 (pt) 2016-03-22
US20120071504A1 (en) 2012-03-22
US20140088142A1 (en) 2014-03-27
AU2010226393A1 (en) 2011-10-06
CY1120593T1 (el) 2019-12-11
ES2683633T3 (es) 2018-09-27
ZA201106618B (en) 2012-11-28
JP2016104788A (ja) 2016-06-09
NZ595151A (en) 2013-11-29
EP2408749A1 (en) 2012-01-25
US20140303205A1 (en) 2014-10-09
AU2010226393B2 (en) 2016-08-11
CA2755969C (en) 2018-05-08
RU2518897C2 (ru) 2014-06-10
US8796308B2 (en) 2014-08-05
BRPI1012549A8 (pt) 2016-10-04
US20140228400A2 (en) 2014-08-14
IL215261A (en) 2017-12-31
US8614325B2 (en) 2013-12-24
CA2755969A1 (en) 2010-09-23
DK2408749T3 (en) 2018-08-13
JP2012521361A (ja) 2012-09-13
JP5636418B2 (ja) 2014-12-03
PL2408749T3 (pl) 2018-11-30
JP2015013881A (ja) 2015-01-22
BRPI1012549B8 (pt) 2021-05-25
IL215261A0 (en) 2011-12-29
US20160221952A1 (en) 2016-08-04
SI2408749T1 (sl) 2018-10-30
WO2010108155A1 (en) 2010-09-23
CN102361856A (zh) 2012-02-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2518897C2 (ru) Производные 3-карбоксамида-4-оксохинолина, полезные в качестве модуляторов регулятора трансмембранной проводимости кистозного фиброза
AU2018204671B2 (en) Process for Making Modulators of Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator
JP5789611B2 (ja) 嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子のモジュレーターを調製するためのプロセス
CN102224141B (zh) N-(4-(7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)-2-(三氟甲基)苯基)-4-氧代-5-(三氟甲基)-1,4-二氢喹啉-3-甲酰胺的固体形式
RU2568608C2 (ru) Твердые формы n-(4-(7-азабицикло[2.2.1]гептан-7-ил)-2-(трифторметил)фенил)-4-оксо-5-(трифторметил)-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида

Legal Events

Date Code Title Description
B07D Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette]
B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B07E Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette]
B06T Formal requirements before examination [chapter 6.20 patent gazette]
B06A Patent application procedure suspended [chapter 6.1 patent gazette]
B09A Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette]
B16A Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 10 (DEZ) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 07/04/2020, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS.

B16C Correction of notification of the grant [chapter 16.3 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 19/03/2010 OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. PATENTE CONCEDIDA CONFORME ADI 5.529/DF