BRPI0813420B1

BRPI0813420B1 - Uso de uma preparação, composição, e, método cosmético de cuidado para emagrecimento

Info

Publication number: BRPI0813420B1
Application number: BRPI0813420-0A
Authority: BR
Inventors: Bonnet Isabelle; Godard Nathalie; Perrier Eric
Original assignee: Basf Beauty Care Solutions France Sas
Priority date: 2007-06-28
Filing date: 2008-06-30
Publication date: 2018-05-15
Also published as: JP5693953B2; ES2616291T3; CN101686918B; JP2010531339A; EP2604254B1; KR20100040737A; ES2700111T3; CN101686918A; BRPI0813420A2; EP2170259B1; WO2009000935A1; EP2170259A1; KR101633938B1; EP2604254A1

Description

(54) Título: USO DE UMA PREPARAÇÃO, COMPOSIÇÃO, E, MÉTODO COSMÉTICO DE CUIDADO PARA EMAGRECIMENTO (51) Int.CI.: A61K 8/41; A61K 8/49; A61K 8/60; A61Q 19/06; A61K 31/132; A61P 3/04; A61P 17/00 (30) Prioridade Unionista: 08/01/2008 US 61/010332, 12/03/2008 FR 0801348, 28/06/2007 FR 0756112 (73) Titular(es): BASF BEAUTY CARE SOLUTIONS FRANCE SAS (72) Inventor(es): ISABELLE BONNET; NATHALIE GODARD; ERIC PERRIER “USO DE UMA PREPARAÇÃO, E, COMPOSIÇÃO COSMÉTICA DE EMAGRECIMENTO”

A invenção refere-se a ingredientes ativos de emagrecimento e um processo industrial para prepará-los.

ESTADO DA TÉCNICA

Um campo inteiro da cosmética e farmácia está envolvido com ingredientes ativos de emagrecimento. Vários ingredientes ativos neste campo são intencionados a superar problemas com tecidos inestéticos como “pele tipo casca de laranja” causados por adipócitos sobrecarregados com ácidos graxos.

Espermina e espermidina são poliaminas que estão presentes em tecido adiposo e especialmente em adipócitos em concentrações médias de 0,16 e 0,30 nmol/mg respectivamente (Pedersen et al., 1989, Mol. Cell. Endocrinol, 62, 161-166).

In vitro, estas poliaminas demonstraram estimular três enzimas principais do processo de lipogênese, um nome dado ao processo de armazenar ácidos graxos na forma de triglicerídeos nos adipócitos.

Estas enzimas são:

- sn-glicerol-3-fosfato aciltransferase ou GPAT;

- 1,2-diacil-sn-glicerol aciltransferase ou DGAT;

- Mg²+ fosfatidato fosfohidrolase ou MGPPH.

Em 1996, Jamdar et al. (1966, Enzyme protein, 49, 222-230) descobriram uma correlação em ratos obesos entre as concentrações de espermina e espermidina contidas em tecidos adiposos e um aumento em gorduras corporais. Este aumento correlaciona-se a um forte estímulo das enzimas envolvidas no processo de lipogênese, tais como GPAT, DGAT ou MGPPH, que demonstra in vivo o envolvimento significante de poliaminas no

Petição 870180009345, de 02/02/2018, pág. 12/21 processo de armazenamento de gordura.

Uma quarta enzima, a lipoproteína lipase (ou LPL) responsável pelo transporte de ácidos graxos na corrente sanguínea aos adipócitos, também mostra estímulo de sua atividade na presença de espermina e espermidina (Giudicelli et al., 1976, FEBS Lett., 62, 1, 74-76).

Finalmente, espermina e espermidina foram identificadas como agindo como fatores “semelhantes à insulina” no metabolismo de adipócitos, significando que estas poliaminas facilitam transporte de glicose, melhoram sua conversão em triglicerídeos por intermédio de estímulo de piruvato desidrogenase (Rutter et al, 1992, Biochem. J., 285, 435-439) e inibem atividades lipolíticos de adipócitos (Olefsky et al, 1979, Norm. Metab. Res., 11, 209-213; Lockwood et al., 3. Biol. Chem., 1974, 249, 24, 77177722; Richelsen et al., Biochem. J., 1989, 261, 2, 661-665).

Finalmente, Bethell et al., (1981, Biochim. Biophys. Res.

Commun., 102, 1, 272-278) mostraram que a diferenciação de fibroblastos em adipócitos é acompanhada por um aumento significante na taxa de espermidina. Esta poliamina portanto parece desempenhar um papel importante no processo de transformar fibroblastos em adipócitos.

Espermina e espermidina portanto promovem o armazenamento de gorduras nos adipócitos (por intermédio de estímulo das enzimas envolvidas no processo de lipogênese) e inibem a liberação destas gorduras (por intermédio de inibição da lipólise). Se estas duas poliaminas são bloqueadas, o efeito esperado seria a inibição do processo de lipogênese e estímulo da lipólise, consequentemente um efeito de emagrecimento global.

Até agora, nenhum ingrediente ativo é conhecido agir sobre espermina e/ou espermidina.

PROPÓSITOS DA INVENÇÃO

O objetivo principal da invenção é resolver o novo problema técnico que consiste em fornecer um processo industrial para a preparação de ingredientes ativos de emagrecimento.

Esta invenção é especialmente intencionada a resolver o novo problema técnico que consiste em agir sobre espermina e/ou espermidina, que são moléculas envolvidas em lipogênese/lipólise, especialmente no nível de adipócitos.

Esta invenção é intencionada a resolver os problemas técnicos descritos acima em uma maneira industrial, reproduzível e segura, no custo mais baixo, especialmente nos campos cosmético, nutracêutico e/ou farmacêutico.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

Foi surpreendentemente descoberto que composições compreendendo um ou vários ingredientes ativos capazes de capturar espermina e/ou espermidina podem ser preparadas, e assim agem sobre lipogênese e/ou lipólise no nível de adipócitos, especialmente em seres humanos.

Assim, esta invenção diz respeito a substâncias que capturam espermina e/ou espermidina.

A captura de espermina e/ou espermidina permite a redução de lipogênese e portanto uma diminuição no armazenamento de gorduras, mas também um aumento na lipólise promovendo assim a ruptura de gorduras, que induz deste modo uma ação duplicada para um efeito de emagrecimento.

Por “captura de espermina e/ou espermidina” os inventores significam: a associação de espermina e/ou espermidina com um composto chamado uma “substância que captura espermina e/ou espermidina” por qualquer meio, e preferivelmente por complexação.

Vantajosamente, uma substância captura espermina e/ou espermidina em uma maneira eficiente é uma substância que permite a inibição de pelo menos 50 % de lipogênese e/ou estímulo de pelo menos 50 % de lipólise, como testado em adipócitos humanos normais em suspensão.

A inibição da lipogênese é entendida ser a diminuição no armazenamento de gorduras (lipídeos) nos adipócitos. O estímulo da lipólise é entendido ser um aumento na concentração de ácidos graxos não esterificados e liberados de adipócitos.

Entre as substâncias potencialmente ativas tríadas, polissacarídeos sulfatados que pertencem à família de galactanos sulfatados, como por exemplo carragenanos ou ágars, mostraram efetividade inesperada.

Especificamente, os polissacarídeos sulfatados tendo as melhores propriedades são as estruturas contendo um máximo de 20 unidades sacarídicas, e preferivelmente um máximo de 10 unidades sacarídicas.

Estes compostos podem ser vantajósamente preparados por hidrólise de um ou vários polissacarídeos sulfatados.

Entre estes polissacarídeos ou oligossacarídeos preferidos, as capa carragenanos são preferidas para melhore resultados.

Dois métodos são vantajósamente usados para a hidrólise de carragenanos:

- Hidrólise enzimática feita com carragenases extraídas de Pseudomonas carrageenovora (Knutsen et al, 2001, carbohydr. res., 331, 101-106)

- Hidrólise química: hidrólise básica é geralmente lenta e pode resultar em aberturas de anel. Uma reação quente na presença de ácido clorídrico (Ekstrom et al, 1983, carbohydr. Res. 116, 89-94) ou ácido sulfurico (Rochas et al., 1981, Polym. Bulletin. 5, 81-86) é preferida.

Os oligossacarídeos produzidos pela hidrólise de carragenanos são compostos de cadeias de unidades de carrabiose, unidades de neocarrabiose e unidades de neocarratetraose. (conforme a fórmula 1). Fórmula 1 - carrabiose, neocarrabiose e neocarratetraose

Geralmente, é reconhecido que a hidrólise enzimática das carragenanos produz oligossacarídeos compreendendo unidades de neocarrabiose e que a hidrólise ácida nos permite obter oligossacarídeos com base nas unidades de carrabiose (Kona et al., Patente US 4.748.032).

Vantajosamente, esta invenção diz respeito a um processo de hidrólise melhorado compreendendo a introdução em uma solução de pelo menos uma carragenano, preferivelmente durante uma duração suficiente e em uma temperatura suficiente para dissolver as carragenanos no meio solvente, que é preferivelmente água. A temperatura é vantajosamente mais alta do que 30° C.

O processo de hidrólise vantajosamente compreende hidrólise em um meio ácido, usando-se por exemplo um ácido mineral tal como ácido clorídrico. Esta hidrólise é realizada durante uma duração suficiente e em uma temperatura suficiente para hidrolisar a carragenano em oligossacarídeos. O pEÍ da reação é vantajosamente menor do que 3, e preferivelmente menor do que 2. E geralmente preferível realizar a hidrólise de uma carragenano por um ácido, tal como um ácido mineral como ácido clorídrico, durante uma duração de mais do que 5 horas, e preferivelmente mais do que 10 horas, e ainda mais preferivelmente durante uma duração de mais do que 15 horas.

A reação é vantajosamente parada pela adição de uma solução básica, usando-se por exemplo uma base mineral tal como hidróxido de sódio.

O pH final da preparação é geralmente de 3,5 a 5.

Os inventores preferencialmente escolheram um processo de hidrólise ácida a partir de capa-carragenano. Este processo compreende uma variação inovadora preparada pelos inventores em um tal modo como para obter uma quantidade ideal de unidades de capa carrabiose (conforme a fórmula 2) compreendendo uma ligação beta-1,4 entre as duas unidades de sacarídeo. Entretanto, esta invenção não é limitada a um tal processo. Assim uma outra variação de hidrólise é usada a partir de iota e/ou lambda carragenano.

Fórmula 2 - unidade de capa-carrabiose

De acordo com a natureza e a concentração do ácido, a temperatura e o tempo de reação, as soluções de oligossacarídeo que são obtidas apresentam diferentes concentrações de carrabioses e neocarratetraoses.

Na presente invenção, as soluções de oligossacarídeo que apresentam uma capacidade para a captura de espermina e espermidina têm um grau de polimerização, ou dp, entre 2 (dp 1 = uma unidade de carrabiose) e 20, preferivelmente entre 2 e 10, e não obstante ainda mais preferivelmente uma concentração máxima de 2 unidades dp (ou carrabioses).

Vantajosamente, a seguir do processo de hidrólise (química ou enzimática), todas as partes insolúveis são removidas da mistura, por centrifugação ou por filtração.

Se necessário, as soluções de oligossacarídeo podem ser purificadas por exemplo por descoloração em carvão ativo ou resinas de troca de íon, ou separadas por exemplo em membranas ou cromatografia em gel.

As soluções podem ser transformadas por exemplo em pó especialmente por secagem por congelamento, atomização, cristalização, etc.

A solução de oligossacarídeos sulfatados é composta vantajosamente de pelo menos 0,1 % de carrabiose, vantajosamente pelo menos 0,2 % e preferivelmente pelo menos 0,5 % (p/p), e geralmente não compreende mais do que 10 % (p/p) de carrabiose, com respeito ao peso da solução total. A solução de oligossacarídeos sulfatados preferivelmente compreende menos do que 1 % de carrabioses. Entretanto, a solução de oligossacarídeos sulfatados pode ser seca por congelamento, permitindo assim a produção de uma porcentagem mais alta de carrabiose como por exemplo até 30 %, e ainda 40 % (p/p) ou mais da composição seca por congelamento.

Esta solução de oligossacarídeos sulfatados, que é considerada na presente invenção como sendo o ingrediente ativo, pode ser diluída na composição final. Tipicamente, a solução de oligossacarídeos sulfatados é usada em uma concentração entre 0,01 e 10 %, preferivelmente entre 0,1 e 5 % em peso da composição final. Assim a composição final compreende uma porcentagem de carrabiose geralmente entre 1,10'⁵ e 10 %, preferivelmente entre 2,10'⁵ e 0,1 % em peso.

A solução de oligossacarídeos sulfatados vantajosamente apresenta um pH abaixo de 7, e preferivelmente entre 3,5 e 5.

A solução de oligossacarídeos é entendida ser uma composição líquida, possivelmente na forma de um gel ou hidrogel, que é à base de água, mas não exclusivamente. Esta solução pode ser uma solução aquoso, possivelmente compreendendo diferentes tipos de íons ou soluções, e ainda compostos insolúveis ou parcialmente solúveis. Esta solução também pode ser uma solução compreendendo solventes exceto água, em que os oligossacarídeos sulfatados são solúveis. O solvente é vantajosamente aceitável em uma base dermatológica.

Os compostos de acordo com a presente invenção são usados para a preparação de composições, especialmente tópicas ou oralmente administradas, e especialmente na forma de composições cosméticas, nutracêuticas, dermo-farmacêuticas ou farmacêuticas. Assim, para estas composições, o excipiente contém por exemplo pelo menos um composto escolhido de um grupo que consiste de conservantes, emolientes, emulsificadores, tensoativos, umedecedores, espessantes, condicionantes, agentes de acabamento fosco, estabilizadores, antioxidantes, texturizantes, agentes de brilho, agentes de formação de película, agentes de solubilização, pigmentos, corantes, perfumes e protetores solares. Estes excipientes são preferivelmente escolhidos de um grupo que consiste de aminoácidos e seus derivados, poligliceróis, ésteres, polímeros e derivados de celulose, derivados de lanolina, fosfolipídeos, lactoferrinas, lactoperoxidases, estabilizadores com base em sacarose, vitaminas E e seus derivados, ceras naturais e sintéticas, óleos vegetais, triglicerídeos, matéria não saponificável, fitosteróis, ésteres de plantas, siliconas e seus derivados, hidrolisados de proteína, óleos de jojoba e seus derivados, ésteres lipo/hidrossolúveis, betaínas, aminóxidos, extratos de plantas, ésteres de sacarose, dióxido de titânio, glicinas, parabenos, e ainda preferivelmente o grupo que consiste de butileno glicol, steareth-2, stereath21, éter glicol-15 estearílico, álcool cetearílico, fenoxietanol, metilparabeno, etilparabeno, propilparabeno, butilparabeno, butileno glicol, tocoferóis naturais, glicerina, diidroxicetil fosfato de sódio, éter isopropil hidroxicetílico, estearato de glicol, trilsononanoína, cocoato de octila, poliacrilamida, isoparafma, laureth-7, um carbômero, propileno glicol, glicerol, bisabolol, uma dimeticona, hidróxido de sódio, PEG 30- dipoliidroxiesterato, triglicerídeos cápricos/caprílicos, octanoato de cetearila, adipato de dibutila, óleo de semente de uva, óleo de jojoba, sulfato de magnésio, EDTA, uma ciclometicona, goma xantana, ácido cítrico, lauril sulfato de sódio, ceras minerais e óleos minerais, isoestearato de isoestearila, dipelargonato de propileno glicol, isoestearato de propileno glicol, PEG 8 cera de abelha, glicerídeos de óleo de palma hidrogenado, óleo de lanolina, óleo de gergelim, lactato de cetila, álcool de lanolina, óleo de mamona, dióxido de titânio, lactose, sacarose, polietileno de densidade baixa, e solução salina isotônica.

Vantajosamente, as composições anteriormente mencionadas são formuladas sob uma forma escolhida do grupo que consiste de uma solução, aquosa ou à base de óleo, um creme ou um gel aquoso, ou um gel à base de óleo, especialmente em um jarro ou tubo, especialmente em um gel para banho, um xampu, uma loção, uma emulsão, uma micro-emulsão ou uma nano-emulsão, especialmente óleo-em-água ou água-em-óleo ou múltipla ou silicona; uma loção, especialmente em um frasco de vidro, em plástico ou em um dispensador de bomba ou em um aerossol; um frasco; um sabão líquido; uma barra dermatológica; um unguento; uma espuma; um produto anidro, preferivelmente líquido, pasta ou sólido, por exemplo na forma de um bastão notavelmente um batom.

Os termos “aplicação tópica”, como usado aqui, significam aplicar ou pulverizar a composição de acordo com esta invenção sobre a superfície cutânea e/ou sobre a superfície de membranas mucosas.

Os termos “dermatologicamente aceitável”, como usado aqui, significam que a composição ou os componentes da composição são adaptados para serem usados em contato com a pele humana sem toxicidade, incompatibilidade, instabilidade, resposta alérgica injustificáveis, ou seus equivalentes.

Numerosos ingredientes cosmeticamente ativos são conhecidos pelo técnico habilitado no ramo para melhorar a saúde e/ou a aparência física da pele. O técnico habilitado no ramo sabe como formular as composições cosméticas ou dermatológicas para obter os melhores efeitos. Além disso, os compostos descritos na presente invenção podem ter um efeito sinérgico quando combinados entre si. Estas combinações também são abrangidas por esta invenção. O CFTA Cosmetic Ingredient Handbook Segunda Edição (1992) descreve vários campos cosméticos e farmacêuticos frequentemente utilizados na indústria cosmética e farmacêutica, que são particularmente adaptados para a aplicação tópica. Alguns exemplos destas classes de ingredientes incluem, mas não são limitados, aos compostos seguintes: compostos abrasivos, absorventes, estéticos tais como perfumes, pigmentos, corantes, óleos essenciais, adstringentes, etc. (por exemplo, óleo de cravo, mentol, cânfora, óleo de eucalipto, eugenol, lactato de mentilo, destilado de hamamelis), agentes anti-acne, agentes anti-floculantes, agentes anti-espumantes, agentes anti-microbióticos (por exemplo: butilcarbamato de iodopropila), antioxidantes, agentes aglutinantes, agentes tamponantes, agentes de expansão, agentes quelantes, aditivos, agentes biocidas, agentes desnaturantes, analgésicos externos, materiais formadores de película, polímeros, opacificadores, ajustadores de pH, agentes de redução, agentes descolorantes ou clarificantes (por exemplo, hidroquinona, ácido kójico, ácido ascórbico, ascorbil fosfato de magnésio, ascorbil glicosamina), agentes condicionantes (por exemplo: agentes higroscópicos), agentes suavizantes para a pele e/ou agentes de cicatrização (por exemplo: pantenol e seus derivados, por exemplo: etil pantenol), aloe vera, ácido pantotênico e seus derivados, alantoína, bisabolol, e dipotássio de glicirrizinato), espessantes, vitaminas e seus derivados ou equivalentes.

Uma forma de realização vantajosa da presente invenção compreende a adição de pelo menos um outro ingrediente ativo de emagrecimento, notavelmente escolhido de um grupo que consiste de agente de inibição da enzima fosfodiesterase, agente de ativação de adenilato ciclase, AMP cíclico ou derivados lipolíticos e/ou misturas destes.

Preferivelmente, a presente invenção compreende a adição de pelo menos cafeína e/ou forscolina e/ou teofílina e/ou teobromina.

Diferentes extratos de plantas geralmente usados por operadores de formulação em formulações de emagrecimento tais como por exemplo extrato de raiz de Coleus Forskohlii, extrato da casca de cecropia obtusa ou alface-marinha (uva lactuca) também podem ser usados como ingrediente ativo de emagrecimento.

É particularmente vantajoso combinar os ingredientes ativos desta invenção com cafeína. Foi descoberto de fato, que estes ingredientes têm mecanismos de ação complementares. Preferivelmente, cafeína, possivelmente na forma de derivados e/ou sais de ácido de cafeína notavelmente um sal de ácido carboxílico de cafeína tais como aqueles descritos no pedido de patente Francês FR2624010 (Pierre Fabre Cosmetique), será administrada em combinação com um ingrediente ativo de acordo com a invenção, em uma dose entre 0,001 % e 10 % em peso da composição total, preferivelmente entre 1 e 5 %.

A combinação de ingredientes ativos de acordo com a presente invenção com pelo menos um agente de ativação de adenilato ciclase, em particular forscolina ou extrato de planta contendo forscolina é particularmente vantajosa.

Preferivelmente, forscolina, possivelmente como extrato de Coleus Forskohlii ou extrato de Plectranthus barbatus, será administrado combinado com ingredientes ativos de acordo com a presente invenção na dosagem entre 0,001 % e 1 %, preferivelmente entre 0,05 a 0,25 % em peso da composição total.

Também é particularmente vantajoso combinar os ingredientes ativos de acordo com a presente invenção com um composto escolhido entre:

- agentes estimulantes de glicosaminoglicanos (GAG), e/ou agentes estimulantes de elastina e/ou agentes estimulantes de colágeno, em particular retinol e/ou vitamina C assim como derivados destes, tetrapeptídeos contendo entre 50 a 500 ppm de palmitoil-Gly-Gln-pro-Arg tais como aqueles comercialmente disponíveis sob a marca Matrixyl® da Sederma, França;

- agente de inibição de lipoproteína lipase tais como aqueles descritos na patente US2003086949 (Coletica) em particular extrato de unhade-gato (Uncaria tomentosã} ou um extrato de erva-de-são-joão;

- componentes ativos que imitam o efeito de beta endorfina de modo a melhorar a função de barreira da pele, como por exemplo aqueles citados no pedido de patente US 2006069032, extrato de casca da semente de cacau;

- componentes ativos que estimulam a síntese de beta endorfina de modo a fornecer uma sensação de bem estar, por exemplo Tephroline, da planta Tephrosia purpurea (Soliance);

- componentes ativos estimulantes de proliferação celular e/ou diferenciação celular, intencionados a ter atividade anti-envelhecimento, tais como as moléculas seguintes: NGF, α-MSH, β endorfina, ou derivados, por exemplo aqueles descritos no pedido de patente FR 2857874, P3-endorfina;

- componentes ativos que protegem o Fator de Crescimento de Fibroblasto contra a degradação, notavelmente FGF2 tal como extrato vegetal descrito no pedido de patente depositado pelo Requerente publicado sob GB244036 em particular extrato de Hibiscus abelmoscus\

- componentes ativos que estimulam a atividade e/ou proliferação de fibroblastos tais como um peptídeo fermentado de soja como um produto comercializado pelo Requerente sob a marca Phytokine®, opcionalmente em combinação com um extrato de Hibiscus abelmoscus',

- componentes ativos que estimulam Hialuronase sintase, notavelmente Hialuronase sintase 2 como descrito na patente FR2893252;

- componentes ativos que estimulam a atividade e/ou síntese de Lisil Oxidase como LOXL tais como os componentes descritos na patente número FR2855968 em particular extrato de endro para o estímulo de fibras elásticas;

- componentes ativos com propriedades anti-inflamatórias tais como aqueles que inibem PLA2, e em particular os componentes descritos na patente FR2847267 e notavelmente um extrato de raízes de Pueraria lobata (Inhipase®);

- substâncias ativas que permitem uma mudança na cor da pele, tais como os componentes ativos para iluminação e/ou branqueamento da pele;

- substâncias ativas com propriedades de drenagem, como laurato de hesperitina (Flavagrum®), ou caprilato de quercitina (Flavenger®).

A invenção abrange uma composição compreendendo (i) uma preparação de oligossacarídeos sulfatados que capturam espermina e/ou espermidina, e preferivelmente como definido mais particularmente na descrição inteira e exemplos da invenção, e (ii) pelo menos um do grupo que consiste de cafeína, teofilina, teobromina, e forscolina, ou derivados e/ou sais destes.

Um derivado é um composto que é formado de um composto similar ou um composto que pode ser imaginado para surgir de um outro composto, se um átomo for substituído com um outro átomo ou grupo de átomos. Esta definição é comum na química orgânica.

A presente invenção abrange uma combinação de (i) uma preparação de oligossacarídeos sulfatados que capturam espermina e/ou espermidina, e preferivelmente como definido mais particularmente na descrição inteira e exemplos da invenção, e (ii) pelo menos um do grupo que consiste de cafeína, teofilina, teobromina, e forscolina, ou derivados e/ou sais destes, usados como um ingrediente ativo de emagrecimento.

Esta invenção assim diz respeito a um método para um cuidado para emagrecimento compreendendo o uso de pelo menos um ingrediente ativo, ou de uma composição cosmética compreendendo um tal ingrediente ativo, como referenciado acima ou daqui por diante. Este cuidado cosmético inclui a aplicação tópica do ingrediente ativo sobre as áreas cutâneas a serem tratadas. Este cuidado cosmético pode ser realizado por intermédio da administração de uma composição nutracêutica (administração oral). A área cutânea a ser tratada em um paciente é vantajosamente uma área compreendendo adipócitos com mais ácidos graxos do que o restante dos adipócitos do tecido cutâneo.

Estas áreas são tipicamente áreas da pele tipo casca de laranja.

Esta invenção também diz respeito a um método de tratamento terapêutico para reduzir a quantidade de lipídeos armazenados pelos adipócitos, incluindo especialmente a administração ou a aplicação tópica de pelo menos um ingrediente ativo, ou de uma composição cosmética compreendendo um tal ingrediente ativo, como referenciado acima ou daqui em diante. O tratamento vantajosamente combina tanto uma diminuição na lipogênese quanto um aumento na lipólise. Este tratamento pode estar localizado nas áreas cutâneas a serem tratadas.

Outros objetivos, características e vantagens da invenção estarão claramente evidentes para o técnico habilitado no ramo quando da leitura da descrição explanatória que refere-se aos exemplos que são dados apenas para os propósitos de ilustração e que de nenhum modo são intencionados a limitar o escopo da invenção.

Os exemplos são uma parte integral desta invenção e qualquer característica que parece nova com respeito a qualquer estado da técnica anterior tomado da descrição em sua totalidade, incluindo os exemplos, é uma parte integral da invenção em sua função e em sua generalidade.

Assim, cada exemplo é geral em escopo.

Além disso, nos exemplos, todas as porcentagens são dadas em peso, a menos que de outro modo indicado, e a temperatura é expressada em graus Celsius a menos que de outro modo indicado, e a pressão é a pressão atmosférica, a menos que de outro modo indicado.

EXEMPLOS

Exemplo 1: Preparação dos oligossacarídeos

38,5 mL de água laboratorial pura foi aquecida até 60° C.

0,49 g de cloreto de sódio foi adicionado, assim como 1,67 g de capa-carragenanos.

A solução foi deixada sob agitação, a 60° C durante 25 minutos. A reação da hidrólise foi iniciada pela adição de 8,33 g de uma solução de um 1 N de ácido clorídrico e a mistura foi mantida em uma temperatura de 60° C durante todo o processo. No tempo da hidrólise desejada, a reação depois foi parada pela adição de 9 mL de uma solução de hidróxido de sódio 1 N. O pH da preparação foi portanto entre 4 e 4,5.

A solução depois foi filtrada através de um filtro 500 nm e depois conservantes, assim como um agente de gelação, pode ser adicionado à preparação.

Na maioria dos seguintes exemplos, os experimentos foram realizados no filtrado (sem um conservante e sem agente de gelação).

Exemplo 2: Evolução da composição das preparações de oligossacarídeos com respeito ao tempo da hidrólise.

Soluções de oligossacarídeo sulfatadas foram preparadas de acordo com o exemplo 1, com tempos de hidrólise de 2, 5 e 16 horas.

Estas soluções depois foram analisadas por HPLC (Waters Alliance 2685, column TSK gel 2000 PWXL) unidas com um detector refratômetro.

Uma faixa padrão de glicose foi analisada em paralelo, que deste modo permite conhecer a composição de nossa mistura nos termos de carrabiose e neocarratetraose.

Os resultados, apresentados na tabela 1, mostram que quanto mais longo é o tempo de hidrólise, mais significante a concentração de carrabiose será.

Tabela 1

Tempo de hidrólise (horas)	% de carrabiose	% de neocarratetraose
2	0,106	0,228
5	0,365	0,180
16	0,890	0,043

% de carrabiose ou neocarratetraose indicada em % em peso, com base no peso do filtrado total, o dito filtrado sendo ajustado em um pH entre 4 e 4,5.

Exemplo 3:Demonstração in vitro da efetividade de oligossacarídeos na captura de espermina e espermidina

Princípio:

Se espermina e espermidina são colocadas na presença de ácido desoxiribonuclêico (DNA), precipitação de DNA depois foi observada e a densidade óptica da mistura, lida em 600 mn, aumentou muito significativamente.

Se um composto que “captura” espermina ou espermidina é adicionado anteriormente à solução da dita poliamina, nenhuma precipitação aparece quando a solução de DNA é adicionada.

Nós depois poderemos calcular uma porcentagem da proteção fornecida pelo ingrediente ativo testado nos termos da precipitação do DNA induzida pelas poliaminas.

Protocolo:

0,4 g de DNA de peixe (Sigma) é adicionado a 160 g de um tampão de fosfato de pH 6 (fosfato de potássio 0,06 M e fosfato de sódio 0,001 M).

pL de uma solução aquosa de 50 mM de espermina (Sigma) é distribuída em cada reservatório de uma placa de 96 reservatórios:

Depois o seguinte é distribuído:

- 90 pL de uma solução de oligossacarídeos sulfatados (ingrediente ativo) ou de uma solução aquosa de 150 mM de trifosfato de adenosina (ou ATP, Sigma)

- ou 90 pL de água laboratorial pura (no “controle” dos reservatórios ou “100 %” dos reservatórios)

A placa é deixada sob agitação durante 5 minutos na temperatura na ambiente, depois 100 pL da solução do DNA é adicionada a todos dos reservatórios.

Depois de 5 segundos de agitação manual, a densidade óptica do reservatório é lida a 600 nm.

A porcentagem das proteção fornecida pelo ingrediente ativo nos termos da precipitação do DNA na presença de espermina é calculada como segue:

% de proteção = 100 - [(OD _Ativaou atp < OD i₀₀%) x 100]

Por “OD Ativa ou atp” nós significamos a densidade óptica do reservatório contendo DNA, espermina ou espermidina, e o Ingrediente Ativo em ATP depois da reação.

“OD ioo o/_o” significa a densidade óptica do reservatório contendo DNA e espermina ou espermidina, depois da precipitação.

O mais significante da porcentagem de proteção é, quanto maior a “captura” de espermina pelo ingrediente ativo menor é a precipitação do DNA.

O mesmo experimento pode ser realizado substituindo-se a solução de 50 mM de espermina com uma solução aquosa de 300 mM de espermidina (Sigma).

Soluções de oligossacarídeos foram produzidas de acordo com o exemplo 1, com 2, 5 e 16 horas de tempo de hidrólise.

Depois da diluição a 10 % em água laboratorial pura, as soluções diferentes foram testadas.

Os resultados são dados na tabela 2 abaixo:

Tabela 2

Tempo de hidrólise	% de proteção de espermina	% de proteção de espermidina
2	3,9	29,9
5	4,5	28,2
16	10,3	34,3

Quanto mais longo o tempo de hidrólise for, mais rica a solução de oligossacarídeos é em carrabiose e maior é a ação de captura da espermina e espermidina.

Assim os ingredientes ativos contendo pelo menos 0,2 % de carrabiose são preferidos, e ainda mais preferidos, pelo menos 0,5 % em peso da solução de oligossacarídeos sulfatados.

Exemplo 4: Comparação da taxa de carrabiose depois da hidrólise de vários galactanos sulfatados

As soluções de oligossacarídeos sulfatados foram preparadas usando capa, iota e lambda carragenanos e ágar de acordo com o exemplo 1, com um tempo de hidrólise de 16 horas.

Os extratos depois foram analisados por HPLC de acordo com a técnica descrita no exemplo 2, com a exceção de hidrolisados de ágar que não podem ser analisados sob as mesmas condições (unidades de agarobiose).

Depois da diluição a 3 % em água laboratorial pura, um teste de captura da espermidina foi realizado, de acordo com o protocolo descrito no exemplo 3.

Tabela 3:

Galactanos hidrolisados	% de Captura	% de Carrabiose	% de Neocarratetraose
Capa-Carragenanos	16,1 %	0,878	0,155
Iota-Carragenanos	13,1 %	0,292	0,344
Lamda-Carragenanos	13,5%	0,179	0,197
ágar	8,9 %	Não aplicável	Não aplicável

Os hidrolisados de carragenano (capa, iota e lambda) mostraram a melhor efetividade nos termos da espermidina de captura. Esta captura é correlacionada em uma porcentagem de carrabiases no produto. Exemplo 5: Demonstração da efetividade de oligossacarídeos sobre a inibição de lipogênese em adipócitos humanos normais.

A inibição ex vivo de lipogênese foi avaliada em suspensões de adipócitos humanos que foram isoladas de uma amostragem tomada durante uma plastia abdominal realizada em uma mulher de 42 anos.

A suspensão de adipócitos foi incubada durante uma hora a

37° C com 3 ou 5 % de uma solução de oligossacarídeos sulfatados preparada de acordo com o exemplo 1 (tempo de hidrólise: 16 horas), ou com um solução do estudo padrão (1 mM de teofilina ou cafeína), na ausência destas soluções (controle).

Cada ensaio foi realizado em triplicata.

Um marcador radioativo [2-¹⁴C] acetato depois foi adicionado aos vários ensaios em uma concentração de 2,5 pCi/mL.

Depois de 4 horas de incubação a 37° C, os lipídeos foram extraídos por uma mistura de metanol/clorofórmio/água e depois desidratados. A radioatividade, expressa em contagens por minuto (cpm), é depois quantificada através de cintigrafia líquida (LKB 1210 Rackbeta).

Os resultados são dados na tabela 4 abaixo.

A análise estatística foi realizada de acordo com o teste de comparação múltipla de Dunnett. Tabela 4

Tratamento	Concentração em água	cpm	Desvio padrão	% de Controle	P
Controle	-	472253	4474	100
Teofilina	1 mM	27225	6195	6	P<0,01
Cafeína	1 mM	20741	2932	4	P < 0,01
Oligossacarídeos sulfatados	5%	109647	7064	23	P<0,01
	3 %	97139	9691	21	P<0,01

De acordo com as condições experimentais, a solução de oligossacarídeos sulfatados testada em 3 % a 5 % significativamente inibe lipogênese e em uma maneira dependente de dose.

Exemplo 6: Demonstração da efetividade da preparação sobre o estímulo de lipólise em adipócitos humanos normais

A atividade de estímulo da lipólise foi avaliada em suspensões de adipócitos humanos isolados de um amostra tomada durante uma plastia abdominal realizada em uma mulher de 34.

A suspensão de adipócitos foi incubada durante 2 horas a 37° C com 3 ou 5 % de uma solução de oligossacarídeos sulfatados preparada de acordo com o exemplo 1(16 horas de tempo de hidrólise) em porcentagem do peso total da cultura, ou com soluções de estudo padrão (1 mM de teofilina ou cafeína) ou na ausência de soluções (controle). Cada ensaio foi realizado 6 vezes.

No final do período de incubação, os ácidos graxos não esterificados (NEFA) que estiveram presentes nos meios de incubação foram medidos com kits de dosagem comercialmente disponíveis (OXOID 46 551).

Os resultados são dados na tabela 5 abaixo.

Tabela 5

Tratamento	Cone.	NEFA em μΜ	Desvio padrão	% de Controle	P
Controle	-	96	6	100
Teofilina	1 mM	537	45	560	P<0,01
Cafeína	1 mM	525	40	547	P<0,01
Oligossacarídeos	5%	200	10	209	P<0,01
sulfatados	3 %	180	12	187	P < 0,01

De acordo com as condições experimentais, a solução de oligossacarídeos sulfatados testada em 3 % e 5 % significativamente estimula a lipólise e em uma maneira dependente de dose.

Exemplo 7: Demonstração de um efeito de emagrecimento dos oligossacarídeos de acordo com a invenção em combinação com cafeína

A efetividade de emagrecimento de um gel hidro-alcoólico contendo uma mistura de “3 % de cafeína + 3 % de uma solução de oligossacarídeos sulfatados preparada de acordo com o exemplo 1 (16 horas de tempo de hidrólise)” foi comparada a um gel hidro-alcoólico contendo 3 % de cafeína.

Os produtos foram aplicados às coxas de voluntários saudáveis e o efeito de emagrecimento foi avaliado durante um período de 8 semanas por medição em centímetros.

Na prática, 25 voluntários de 21 a 49 anos de idade foram selecionados e testados de acordo com critérios específicos (índice de Massa Corporal, presença de celulite). O peso de cada voluntário foi monitorado durante o estudo inteiro e não poderia variar de ± 2 kg. Os produtos foram aplicados de acordo com uma randomização de coxa direita/coxa esquerda: uma coxa tratada pela associação (solução de cafeína + oligossacarídeos) e uma coxa tratada por cafeína. Os géis foram aplicados duas vezes por dia durante 8 semanas consecutivas, usando movimentos circulares pequenos até que o produto inteiro penetrasse.

A formulação escolhida para este estudo foi um gel hidroalcoólico na base de uma razão de 75 % de água para 25 % de álcool desnaturado.

A medição em centímetros da circunferência das coxas foi feita no meio das coxas dos voluntários usando uma fita métrica aplicada sem compressão pelo mesmo técnico pelo estudo inteiro.

Um sistema de acerto no alvo a laser para as zonas de medição foi usado para garantir que o mesmo posicionamento para cada coxa avaliada foi reproduzido e preciso.

As medições foram realizadas antes da aplicação dos produtos (TO) e então, depois de 14 dias, 1 mês e 2 meses.

Os resultados deste estudo estão na tabela 6 abaixo.

Tabela 6:

Tempo	Cafeína	Cafeína + oligossacarídeos sulfatados	Significância dos resultados (“Cafeína + oligossacarídeos sulfatados” versus “cafeína”)
14 dias	0 cm	-0,1 cm	Não significante
28 dias	-0,1 cm	-0,4 cm	p< 0,001
56 dias	-0,3 cm	-0,6 cm	p<0,01

Depois de apenas 14 dias de tratamento, uma diminuição na circunferência das coxas dos voluntários que receberam aplicações do gel contendo a cafeína e os oligossacarídeos sulfatados foi observada. Deve ser observado que o gel contendo cafeína sozinha não teve nenhum efeito de emagrecimento.

Esta efetividade excelente devido à combinação de cafeína e oligossacarídeos sulfatados é ainda mais evidente depois de 28 e 56 dias de tratamento.

De fato, em 56 dias, a diminuição média da circunferência da coxa é de 0,6 cm para os voluntários que usam o gel de cafeína + oligossacarídeo, enquanto a diminuição é de apenas 0,3 cm para os voluntários que aplicaram o gel de cafeína (diferença significante, p < 0,01).

Exemplo 8: Uso dos produtos da invenção em formulações cosméticas ou farmacêuticas do tipo “emulsão oleosa em água”

Formulação 8a

Água

Butileno glicol

Glicerina

Diidroxicetil fosfato de sódio, Éter isopropil hidroxicetílico qsp 100 2 3 2

Estearato de glicol SE Triisononaoína Cocoato de octila

Butileno glicol,

Metilparabeno,

Etilparabeno, Propilparabeno pH ajustado para 5,5

D | Produtos da invenção

0,01 a 10% íulação 8b

Agua

Butileno glicol Glicerina

Poliacrilamida, Isoparafina, Laureth-7 qsp 100

2,8

Butileno glicol,

Metilparabeno,

Etilparabeno, Propilparabeno;

Fenoxietanol,

Metilparabeno,

Propilparabeno, Butilparabeno

Etilparabeno

Butileno glicol

0,5

D | Produtos da invenção

0,01 a 10%

Formulação 8c

Carbômero Propileno glicol Glicerol

0,50

	Água	qsp 1000
B	Cocoato de octila	5
	Bisabolol	0,30
	Dimeticona	0,30
c	Hidróxido de sódio	1,60
D	Fenoxietanol, Metilparabeno, Propilparabeno, Butilparabeno, Etilparabeno	0,50
E	Perfume	0,30
F	Produtos da invenção	0,01 a 10%
Exemplo 9: Uso dos produtos da invenção	em uma formulação do tipo “água
em ó	leo
A	PEG 30-dipoliidroxiestearato	3
	Triglicerídeos cápricos	3
	Octanoato de cetearila	4
	Adipato de dibutila	3
	Oleo de semente de uva	1,5
	Óleo de jojoba	1,5
	Fenoxietanol, Metilparabeno, Propilparabeno, Butilparabeno, Etilparabeno	0,5
B	Glicerina	3
	Butileno glicol	3
	Sulfato de magnésio	0,5
	EDTA	0,05
	Água	qsp 100
C	Ciclometicona	1
	Dimeticona	1
D	Perfume	0,3
E	Produtos da invenção	0,01 a 10 %
Exemplo 10: Uso de produtos da invenção em uma formulação do tipo
“xampu ou gel para banho”
A	Goma xantana	0,8
	Água	qsp 100

Β

0,5

Butileno glicol,

Metilparabeno,

Etilparabeno, Propilparabeno

C	Fenoxietanol, Metilparabeno, Propilparabeno, Butilparabeno, Etilparabeno Ácido cítrico	0,5 0,8
D	Laureth sulfato de sódio	40,0
E	Produto da invenção	0,01 a 10%
Exemplo 11: Uso de produtos da invenção em uma formulação de géis
aquosos
A	Água	qsp 100
	Carbômero	0,5
	Butileno Glicol	15
	Fenoxietanol, Metilparabeno Propilparabeno, Butilparabeno Etilparabeno	0,5
B	Produtos da invenção	0,01 a 10%

Exemplo 12: Uso de produtos da invenção em um tipo de formulação “emulsão tripla”

Emu A	são primária Wl/O PEG-30 Dipoliidroxiestearato Triglicerídeos cápricos Isoexadecano Éter Estearílico PPG-15	4 7,5 15 7,5
B	Produto da invenção	0,01 a 10 %
	Água	qsp 65,3
C	Fenoxietanol Metilparabeno Propilparabeno, Butilparabeno Etilparabeno	0,7
Emu	são secundária W1/0/W2
A	Emulsão primária	60
B	Poloxâmero 407	2
	Fenoxietanol Metilparabeno Propilparabeno,2-bromo-2nitropropanol,3diol	0,3
	Água	qsp 100
C	Carbômero	15

D I Trietanolamina pH 6,0 a 6,5

Exemplo 13: Preparação de formulações farmacêuticas contendo o produto da invenção

Formulação 13a: preparação na forma de tablete Excipientes Em g por tablete

Lactose 0,359

Sacarose 0,240

Β I Produtos da invenção*

0,001 a 0,1 *O produto da invenção é obtido, por exemplo, de acordo com o processo de extração descrito no exemplo 1 (16 horas de tempo de hidrólise) seguido por um estágio de secagem.

Formulação 13b: preparação de um unguento

Excipientes

Polietileno de densidade baixa Parafina líquida

5,5 qsp 100

B | Produtos da invenção* 0,001 a 0,1 *O produto da invenção é obtido, por exemplo, de acordo com o processo de extração descrito no exemplo 1 (16 horas de tempo de hidrólise) seguido por um estágio de secagem.

Formulação 13c: preparação de uma fórmula injetável

Excipiente

Solução salina isotônica mL

B | Produtos da invenção* 0,001 a 0,1 g *O produto da invenção é obtido, por exemplo, de acordo com o processo de extração descrito no exemplo 1 (16 horas de tempo de hidrólise) seguido por um estágio de secagem.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Uso de uma preparação compreendendo oligossacarídeos sulfatados capazes de capturar espermina e/ou espermidina, caracterizado pelo fato de ser como um ingrediente ativo de emagrecimento em uma

5 composição cosmética ou nutracêutica.
2. Uso de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que os oligossacarídeos são compostos de um máximo de 20 unidades de galactose.
3. Uso de uma preparação de oligossacarídeo sulfatado de 10 acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado pelo fato de que a preparação de oligossacarídeos sulfatados é obtida por um processo compreendendo uma etapa de hidrólise de um polissacarídeo, preferivelmente da família de galactanos sulfatados, e preferivelmente pertencendo à família de carragenanos.

15
4. Uso de uma preparação de oligossacarídeo sulfatado de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado pelo fato de que o polissacarídeo pertence à família de capa carragenanos.
5. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado pelo fato de que a preparação predominantemente

20 compreende, entre os oligossacarídeos sulfatados presentes, pelo menos um oligossacarídeo com base em duas unidades sacarídicas (carrabiose e neocarrabiose) e possivelmente, pelo menos um oligossacarídeo com base em quatro unidades sacarídicas (neocarratetraose).
6. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações

25 precedentes, caracterizado pelo fato de que a preparação de oligossacarídeos sulfatados está entre 1,10^-5 e 10 % em peso da composição total.
7. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado pelo fato de que a preparação de oligossacarídeos sulfatados é uma solução usada em uma concentração entre 0,01 e 10 % em

Petição 870180009345, de 02/02/2018, pág. 13/21 peso da composição final.
8. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado pelo fato de que a preparação de oligossacarídeos sulfatados é uma solução compreendendo pelo menos 0,1 % de carrabiose,

5 preferencialmente pelo menos 0,2 %, porém não mais do que 10 % (p/p) de carrabiose, com respeito ao peso da solução total.
9. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado pelo fato de que a preparação de oligossacarídeos sulfatados é uma solução de oligossacarídeos sulfatados compreendendo
10 menos do que 1 % de carrabiose.

10. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado pelo fato de que a composição também compreende pelo menos um ingrediente ativo de emagrecimento selecionado do grupo que consiste de cafeína, teofilina, teobromina, forscolina, ou

15 derivados e/ou sais destes, extrato de raiz de Coleus Forskohlii, extrato da casca de cecropia obtusa e extrato de alface-marinha (uva lactuca).
11. Composição cosmética de emagrecimento, caracterizada pelo fato de que compreende uma preparação de oligossacarídeos sulfatados capazes de capturar espermina e/ou espermidina, como um ingrediente ativo

20 de emagrecimento, possivelmente em associação com um outro ingrediente ativo de emagrecimento, tal como cafeína, teofilina, teobromina, forscolina, extrato de raiz de Coleus Forskohlii, extrato da casca de cecropia obtusa, extrato de alface-marinha (uva lactuca) e/ou misturas dos mesmos.

Petição 870180009345, de 02/02/2018, pág. 14/21