BRPI0809646A2 - Compostod antivirais heterocíclicos - Google Patents

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOSTOS ANTIVIRAIS HETEROCÍCLICOS"

A presente invenção refere-se a derivados de piperidina úteis no tratamento de uma variedade de distúrbios nos quais modulação da ligação 5 de Iigante de receptor de CCR5 é benéfica. Mais particularmente, a compostos de 1-oxa-3,9-diaza-espiro [5.5] undecan-2-ona, a composições contendo referidos compostos, e a usos de tais derivados. Os distúrbios que podem ser tratados ou prevenidos pelos presentes compostos incluem HIV-1 e infecções retrovirais geneticamente relacionadas (e a síndrome da imune defi10 ciência adquirida resultante, AIDS), artrite, asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), e rejeição de órgãos transplantados.

Os compostos da presente invenção modulam a atividade dos receptores de quimioquina CCR5. O receptor de CCR5 é um membro de um subconjunto de uma grande família de receptores de quimioquina caracteri15 zada estruturalmente por dois resíduos de cisteína adjacentes. As quimioquinas humanas incluem aproximadamente 50 proteínas pequenas de 50 a 120 aminoácidos que são estruturalmente homólogos. (M. Baggiolini et al., Ann. Rev. Immunol. 1997 15:675-705). As quimioquinas são peptídeos próinflamatórios que são liberados por uma ampla variedade de células, tais 20 como macrófagos, monócitos, eosinófilos, neutrófilos, fibroblastos, células endoteliais vasculares, células de músculo liso, e células de mastro, em locais inflamatórios (revisto em Luster, New Eng. J Med. 1998 338:436-445 and Rollins, Blood 1997 90:909-928). O nome "quimioquina", é uma contração de "citoquinas quimiotáticas". As quimioquinas são uma família de prote25 ínas quimiotáticas de leucócito capazes de atraírem leucócitos em vários tecidos, que é uma resposta essencial à inflamação e infecção. As quimioquinas podem ser agrupadas em duas subfamílias, baseado em se os dois resíduos de cisteína amino terminais são imediatamente adjacentes (família CC), ou separados por um aminoácido (família CXC). As quimioquinas CXC, 30 tais como interleucin-8 (IL-8), proteína-2 de ativação de neutrófilo (NAP-2) e proteína de atividade estimulatória de crescimento de melanoma (MGSA) são quimiotáticas principalmente para neutrófilos e linfócitos T, pelo que as quimioquinas CC, tais como RANTES (CCL5), MIP-1a(CCL3, proteína inflamatória de macrófago), MIP-1p(CCL4), as proteínas quimiotáticas de monócito (MCP-1, MCP-2, MCP-3, MCP-4, e MCP-5) e as eotaxinas (-1 e -2) são quimiotáticas para, entre outros tipos de célula, macrófagos, linfócitos T, eo5 sinófilos, células dendríticas, e basófilos. As quimioquinas que ocorrem naturalmente que podem estimular o receptor CCR5 incluem MIP-1a, ΜΙΡ-1β e RANTES.

Consequentemente, as fármacos que inibem a ligação de qiomioquinas, tais como MIP-1a, ΜΙΡ-1β e RANTES para estes receptores, por 10 exemplo, antagonistas de receptor de quimioquina, podem ser úteis como agentes farmacêuticos que inibem a ação de quimioquinas, tais como MIP1α, ΜΙΡ-1β e RANTES nas células-alvos. A identificação de compostos que modulam a função de CCR5 representa uma excelente aproximação de desenho de fármaco para o desenvolvimento de agentes farmacológicos para o 15 tratamento de condições inflamatórias e doenças associadas a receptor de CCR5.

Os desafios farmacocinéticos associados com moléculas grandes, proteínas e peptídeos resultam no estabelecimento de programas para identificar antagonistas de baixo peso molecular de CCR5. Os esforços para 20 identificar moduladores de quimioquinas foram revistos (W. Kazmierski et al. Biorg Med. Chem. 2003 11:2663-76; L. Agrawal e G. Alkhatib, Expert Opin. Ther. Targets 2001 5(3):303-326; Chemokine CCR5 antagonists incorporating 4-aminopiperidina scaffold, Expert Opin. Ther. Patents 2003 13(9): 1469- 1473; Μ. A. Cascieri e M. S. Springer, Curr. Opin. Chem. Bioi 2000 4:420- 25 426, e referências citadas nos mesmos).

Antagonistas de CCR5 de Baixo Peso Molecular

Takeda identificou TAK-779 como um antagonista potencial de CCR5. (M. Shiraishi et al., J. Med. Chem. 2000 43(10):2049-2063; M. Babba et al. Proc. Nat. Acad. Sei. USA 1999 96:5698-5703), e TAK-220 (C. Tremblay et al. Antimicrob. Agents Chemother. 2005 49(8):3483-3485).

W00039125 (D. R. Armour et al.) e W00190106 (M. Perros et al.) descrevem compostos heterocíclicos que são antagonistas de CCR5 potentes e seletivos. UK-427.857 de Pfizer (MVC) avança para ensaios clínicos de fase Ille mostra atividade contra isolados de HIV-1 e cepas laboratoriais (P. Dorr et al., Antimicrob. Agents Chemother. 2005 49(11):4721-4732; A. Wood e D. Armour1 Prog. Med. Chem. 2005 43:239-271; C. Watson et al., Mol. Pharm. 2005 67(4):1268-1282; M. J. Macartney et al., 43a lntersci. Conf.

5 Antimicrob. Agents Chemother. September 14-17, 2003, Abstract H-875).

Schering tem avançado em Sch-351125 (SCH-C) em estudos clínicos de Fase l/l I e reportou o avanço de um composto de reforço mais potente, Sch-417690 (SCH-D) nos estudos de Fase I. (S. W. McCrombie et al., W000066559; B. M. Baroudy et al. W000066558; A. Palani et al., J. 10 Med. Chem. 2001 44(21 ):3339-3342; J. R. Tagat et al., J. Med. Chem. 2001 44(21 ):3343-3346; J. A. Esté, Cur. Opin. Invest. Drugs 2002 3(3):379-383; J. M. Struzki et al. Proc. Nat. Acad Sei. USA 2001 98:12718-12723).

Merck descreveu a preparação de (2S)-2-(3-clorofenil)-1-N(metil)-N-(fenilsulfonil)amino]-4-[espiro(2,3-di-hidrobenzotiofeno-3,4'15 piperidin-1'-il)butano S-óxido (1) e derivados relacionados, pirrolidinas trisubstituídas 2 e piperidinas substituídas 3 com boa afinidade para o receptor de CCR5 e atividade potente de HIV-1. (P. E. Finke et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001 11:265-270; P. E. Finke et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001 11:2469-2475; P. E. Finke et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001 20 11:2475-2479; J. J. Hale et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001 11:2741- 22745; D. Kim et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001 11:3099-3102) C. L. Lynch et al. Org Lett. 2003 5:2473-2475; R. S. Veazey et al. J. Exp. Med. 2003198:1551-1562.

ONO-4128, E-913, AK-602 foram identificados em um programa iniciado em Kumamoto University (K. Maeda et al. J. Bioi. Chem. 2001 276:35194-35200; H. Nakata et al. J. Viroi. 2005 79(4):2087-2096)

Em WOOO/166525; WOOO/187839; W002/076948; W002/076948; W002/079156, W02002070749, W02003080574, W02003042178, W02004056773, W02004018425 da Astra Zeneca descrevem compostos de 4-amino piperidina que são antagonistas de CCR5.

EP1236726 (H. Habashita et al.) descreve derivados de triazaespiro [5.5] undecano exemplificados por AK602 que modulam os receptores de citoquina. Os compostos se encontram fora do escopo da presente invenção. (H. Nakata et al. Poster 546a, 11a Conference on Retroviruses e Opportunistic Infections, San Francisco, CA, February 8-11, 2004; outros análogos foram também descritos, ver, por exemplo, K. Maeda et al., J. Biol. Chem. 2001 276(37): 35194-35200)

Os compostos antes mencionados se encontram fora do escopo

da presente invenção.

No Pedido de Patente US 20050176703 publicada em 1 de agosto de 2005, S. D. Gabriel et al. descrevem derivados de 1-oxa-3,8-diazaespiro[4.5]decan-2-ona e 1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona que são antagonistas de receptor de CCR5.

A presente invenção se refere a um composto de acordo com a fórmula I e composições farmacêuticas para tratamento de doenças mediadas ativação ou ligação de receptor de CCR5, referido composto tendo uma estrutura de acordo com a fórmula I, misturado com pelo menos um transportador, diluente ou excipiente, em que:

5

R2

ΓΛΓΛ R\W P

(i) R4

O

R1 é:

(a) C3-6 cicloalquila, em que referido cicloalquila é opcionalmente substituído com um a três grupos independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidróxi, C1-3 alquila, oxo, halogênio, C1-6 alcóxi

oximino e Ci.6 alcóxi-Ci-6 alcóxi;

(b) C3-6 cicloalquil-C-i-3 alquila, em que referido cicloalquila é opcionalmente substituído com um a três grupos independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em hidróxi, C1-3 alquila, oxo, halogênio, C1-6 alcóxi-oximino e C-i-6 alcóxi-Ci-6 alcóxi, com a condição que referido C3-6

cicloalquil-Ci-3 alquila não é 4,4-difluorociclo-hexil-metil ou 1-hidroxil-ciclohexil-metil

^ -(€ΗΛ 6

(c) em que R é hidrogênio ou halogênio;

(d)

^r"yCH2>p

0 0 em que m é O ou 2; (g) heteroarila, heteroaril C1.3 alquila, fenil C1-3 alquila, em que

referido heteroarila é piridina, pirimidina, pirazina ou piridazina, e referido heteroaril ou referido fenila é independentemente substituído com 1 a 3 substituintes independentemente selecionados de C1-6 alquila, halogênio, C-i

6 alcóxi, ciano ou nitro;

R2 é C-1-6 alquila;

R3 é hidrogênio ou C1.3 alquila;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em (a)-(i) e 0):

(a) 4,6-dimetil-pirimidin-5-ila;

(b) 4,6-dimetil-2-trifluorometil-pirimidin-5-ila;

(c) 2,4-dimetil-piridin-3-ila;

(d) 2,4-dimetil-1 -oxi-piridin-3-ila

(e) 6-ciano-2,4-dimetil-pridin-3-ila;

(f) 2,4-dimetil-6-oxo-6H-piran-3-ila

(g) 2,4-dimetil-6-oxo-1,6-dihidro-piridin-3-ila;

(h) 1,2,4-trimetil-6-oxo-1,6-dihidro-piridin-3-ila;

(i) 3,5-dimetil-1-oxi-1H-pirazol-4-ila; e,

(j) 5-ciano-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-ila; ou,

(h) C1-6 haloalquila;

/—\

Ü) (k) 3-metil-5-trifluorometil-isoxazol-4-ila

(I) 3,5-dimetil-1 -hidróxi-pirazol-4-ila;

R5 é C-i-6 acila, C-|.6 alcoxicarbonila, Ci.6 alquila SO2, C1.6 haloalquila, C3.6 cicloalquila, oxetanila, tetra-hidrofuranil ou tetra-hidropiranila, e n é 0-3;

p é 1 ou 3; ou

um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

A presente invenção adicionalmente se refere a um método para tratamento de uma infecção de HIV-1 por administração de um composto de 10 fórmula I, ou sozinho ou em combinação com um ou mais compostos que inibem replicação de HIV-1. Os compostos que inibem infecção de HIV-1 incluem inibidores de transcriptase reversos, inibidores de protease, e inibidores de fusão viral.

A presente invenção se refere adicionalmente a um método para tratamento de artrite utilizando um composto de fórmula I, ou sozinho ou em combinação com outros agentes antiinflamatórios úteis para alívio de artrite.

A presente invenção também se refere a um método para tratamento de doenças inflamatórias do pulmão e vias aéreas, incluindo asma e doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD).

A presente invenção se refere adicionalmente a um método para

tratamento de rejeição de transplante utilizando um composto de fórmula I, ou sozinho ou em combinação com outros fármacos antirrejeição, ou moduIadores de sistema imune.

A terapia de combinação utilizando os presentes compostos pode ser efetuada com ambos compostos de baixo peso molecular e com anticorpos.

A frase "uma" ou "umas" entidade(s), conforme aqui usada, se refere a uma ou mais daquela entidade; por exemplo, um composto se refere a um ou mais compostos ou pelo menos um composto. Como tal, os termos "um" (ou "uma"), "um ou mais", e "pelo menos um" podem ser usados permutavelmente aqui.

A frase, "conforme definido aqui acima", se refere à definição mais ampla para cada grupo conforme provido no resumo da Invenção ou na reivindicação mais ampla. Em todas as outras concretizações providas abaixo, substituintes que podem estar presentes em cada concretização e que não são explicitamente definidos retêm a definição mais ampla provida no Sumário da Invenção.

5 Conforme usado neste relatório descritivo, se em uma frase de

transição ou no corpo da reivindicação, os termos "compreende(m)" e "compreendendo" são para serem interpretados como tendo um significado de final aberto. Isto é, os termos são para serem interpretados sinonimamente com as frases "tendo pelo menos", ou "incluindo pelo menos". Quando usa10 do no contexto de um processo, o termo "compreendendo" significa que o processo inclui pelo menos as etapas citadas, mas pode incluir etapas adicionais. Quando usado no contexto de um composto ou composição, o termo "compreendendo" significa que o composto ou composição inclui pelo menos as características ou componentes recitados, mas pode também in15 cluir características ou componentes adicionais.

Conforme aqui usado, a menos que especificamente indicado de outro modo, a palavra "ou" é usada no sentido "inclusivo" de "e/ou", e não no sentido "exclusivo" de "qualquer/ou".

Em uma concretização da presente invenção, é provido um 20 composto de acordo com a fórmula I no qual R1, R21 R3, R4, R5, R6, m, n e p são conforme definidos aqui acima, provendo-se que R1 não é 4,4- difluorociclo-hexil-metil ou 1-hidroxil-ciclo-hexil-metil. Definições substituintes nesta e nas concretizações seguintes que não estão especificamente limitadas na descrição da concretização mantêm o escopo mais amplo definido no 25 Sumário da Invenção. Além disso, todas as concretizações incluem sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de fórmula I.

Em outra concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R5 é (a) a (g) ou (i); R4 é (a) a

(i) ou (j), e n é 1 a 3; ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Na segunda concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é 4-alcóxi-ciclo-hexilmetila, ou 4-hidróxi-ciclo-hexilmetila, R3 é metila, e R4 é (a), (c) ou (e), ou a sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em outra concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é 4-alcóxi-ciclo-hexilmetila, R3 é metila, e R4 é (a), (c) ou (e), ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em ainda outra concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é 4-metóxi-ciclohexilmetil ou 4-etóxi-ciclo-hexilmetila, R3 é metila, e R4 é (a), (c) ou (e), ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em uma terceira concretização da presente invenção é provido

um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é 4-alcóxi-ciclohexilmetila, ou 4-hidróxi-ciclo-hexilmetila, R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), e a configuração de C-5 é S, ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em outra concretização da presente invenção é provido um

composto de acordo com a fórmula I em que R1 é 4-alcóxi-ciclo-hexilmetila, R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), e a configuração de C-5 é S, ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em uma quarta concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (e), (j), (k) ou (I), R3 é metila, e R4 é (a), (c) ou (e), ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em outra concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (e), m é 1, R3 é metila, e R4 é (a), (c) ou (e), ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em ainda outra concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (j), (k) ou (I), p é 1, R3 é metila, e R4 é (a), (c) ou (e), ou a sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável deste.

Em uma quinta concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I no qual R1 é (e), (j), (k) ou (I), R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), e R5 é C1^alcoxicarbonil ou 2,2-difluoroetila, ou a sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em ainda outra concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (e), R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), e R5 é C1.6 alcoxicarbonil ou 2,2-difluoroetila, ou a sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em ainda outra concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (j), (k) ou (I), R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), e R5 é C1-6 alcoxicarbonil ou C1-6 fluoroalquila, ou a sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em uma sexta concretização da presente invenção é provido um

composto de acordo com a fórmula I no qual R1 é (e), (j), (k) ou (I), R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), R5 é Ci.6 alcoxicarbonil ou 2,2-difluoroetila, e a configuração de C-5 é S, ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em ainda outra concretização da presente invenção é provido

um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (e), R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), R5 é C1-6 alcoxicarbonil ou 2,2-difluoroetila, e a configuração de C-5 é S, ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em uma sétima concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (c), (d) ou (i), R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), e a configuração de C-5 é S, ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em outra concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (c), (d) ou (i), p é 1, R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), e a configuração de C-5 é S, ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável deste.

Em ainda outra concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (c) ou (d), p é 1, R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), e a configuração de C-5 é S, ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em ainda outra concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (c), p é 1, R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), e a configuração de C-5 é S, ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em outra concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (d), p é 1, R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), e a configuração de C-5 é S, ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em uma oitava concretização da presente invenção é provido um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (g), R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), e a configuração de C-5 é S, ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em outra concretização da presente invenção é provido um

composto de acordo com a fórmula I em que R1 é piridinil pirimidinil ou pirimidinilmetila, R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), e a configuração de C-5 é S, ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

Em ainda outra concretização da presente invenção, R1 é (h), R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), e a configuração de C-5 é S.

Em outra concretização da presente invenção é provido um composto selecionado dos compostos 1-1 a 1-10 na TABELA 1, compostos Il

1 a 11-13 na TABELA II, compostos IN-1 a III-26 na TABELA III, ou compostos IV-1 a IV-14 na TABELA IV.

Em ainda outra concretização da presente invenção é provido

um composto selecionado dos compostos 1-1 a I-9 na TABELA 1, compostos 11-1 a II-8 na TABELA II, compostos 111-1 a 111-12 na TABELA III, ou compostos IV-1 a IV-12 na TABELA IV.

Na décima concretização da presente invenção é provido um 25 método de tratamento ou prevenção de uma infecção de vírus da imunodeficiência humana (HIV), ou tratamento de AIDS ou ARC, em um paciente em necessidade deste, que compreende administração ao paciente em necessidade deste de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a fórmula I em que R1, R2, R3, R4, R5, R6, m, n e p são conforme 30 definidos aqui acima provendo que R1 não é 4,4-difluorociclo-hexil-metil ou

1 -hidroxil-ciclo-hexil-metil.

Em uma décima primeira concretização da presente invenção é provido um método de tratamento ou prevenção de uma infecção de vírus da imunodeficiência humana (HIV), ou tratamento de AIDS ou ARC, em um paciente em necessidade deste, que compreende administrar ao paciente em necessidade deste uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é c/s- ou trans-A-a\cóx\-c\c\o5 hexilmetila, ou c/s- ou frans-4-hidróxi-ciclo-hexilmetila, R3 é metila, R4 é (a),

(c) ou (e), a configuração de C-5 é S, e R2é conforme definido aqui acima.

Em uma décima segunda concretização da presente invenção é provido um método de tratamento ou prevenção de uma infecção de vírus da imunodeficiência humana (HIV), ou tratamento de AIDS ou ARC, em um pa10 ciente em necessidade deste, que compreende administrar ao paciente em necessidade deste uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (e), Q), (k) ou (I), R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), R5 é C-|.6 alcoxicarbonil ou 2,2,-difluoroetila, n é 1, a configuração de C-5 é S, e R2 é conforme definido aqui acima.

Em uma outra concretização da presente invenção é provido um

método de tratamento ou prevenção de uma infecção de vírus da imunodeficiência humana (HIV), ou tratamento de AIDS ou ARC, em um paciente em necessidade deste, que compreende administrar ao paciente em necessidade deste uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acor20 do com a fórmula I em que R1 é (e), R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), R5 é metóxicarbonila, n é 1, a configuração de C-5 é S, e R2 é conforme definido aqui acima.

Em uma décima terceira concretização da presente invenção é provido um método de tratamento ou prevenção de uma infecção de vírus da 25 imunodeficiência humana (HIV), ou tratamento de AIDS ou ARC, em um paciente em necessidade deste, que compreende administrar ao paciente em necessidade deste uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a fórmula I em que R1 é (c), (d) ou (i), p é 1, R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e), a configuração de C-5 é S, e R2 é conforme definido aqui 30 acima.

Em uma décima quarta concretização da presente invenção é provido um método de tratamento ou prevenção de uma infecção de vírus da imunodeficiência humana (HIV), ou tratamento de AIDS ou ARC, em um paciente em necessidade deste, que compreende co-administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais inibidores selecionados a partir do grupo consistindo de inibidores de transcriptase reversa de nucleosídeo de HIV-1, inibidores de transcriptase reversa de não-nucleosídeo, inibidores 5 de protease de HIV-1 e inibidores de fusão viral de HIV-1 e um composto da reivindicação 1 em que R11 R2, R31 R4, R51 R61 m, n e p são conforme definidos aqui acima provendo que R1 não é 4,4-difluorociclo-hexil-metil ou 1- hidroxil-ciclo-hexil-metil.

Em uma décima quinta concretização da presente invenção é 10 provido um método para tratamento de artrite reumatoide compreendendo administrar a um paciente em necessidade deste uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a fórmula I da reivindicação em que R1, R21 R31 R41 R5, R6, m, n e p são conforme definidos aqui acima provendo que R1 não é 4,4-difluorociclo-hexil-metil ou 1-hidroxil-ciclo-hexil15 metil.

Em uma décima sexta concretização da presente invenção é provido um método para tratamento de artrite reumatoide compreendendo coadministrar a um paciente em necessidade deste um ou mais compostos antiinflamatórios ou analgésicos e um composto de acordo com a fórmula I 20 da reivindicação em que R11 R2, R3, R41 R51 R61 m, n e p são conforme definidos aqui acima provendo que R1 não é 4,4-difluorociclo-hexil-metil ou 1- hidroxil-ciclo-hexil-metil.

Em uma décima sétima concretização da presente invenção é provido um método para tratamento de asma ou doença pulmonar obstrutiva 25 congestiva (COPD), compreendendo administrar a um paciente em necessidade deste uma quantidade terapêutica de um composto de acordo com a fórmula I da reivindicação, no qual R1, R2, R3, R4, R5, R6, m, n e p são conforme definidos aqui acima provendo que R1 não é 4,4-difluorociclo-hexilmetil ou 1-hidroxil-ciclo-hexil-metil.

Em uma décima oitava concretização da presente invenção é

provido um método para tratamento de rejeição de transplante de órgão sólido compreendendo administrar a um paciente em necessidade deste uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a fórmula I da reivindicação, em que R11 R21 R31 R41 R51 R6, m, n e p são conforme definidos aqui acima provendo que R1 não é 4,4-difluorociclo-hexil-metil ou 1-hidroxil-ciclo-hexil-metil.

Em uma décima nona concretização da presente invenção é 5 provido um método para tratamento de rejeição de transplante de órgão sólido compreendendo coadministrar a um paciente em necessidade deste uma ou mais fármacos antirrejeição ou imunomoduladores e um composto de acordo com a fórmula I em que R1, R2, R3, R4, R5, R6, m, n e p são conforme definidos aqui acima provendo que R1 não é 4,4-difluorociclo-hexil-metil ou 10 1-hidroxil-ciclo-hexil-metil.

Em uma vigésima concretização da presente invenção é provida uma composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com a fórmula I em que a um paciente em necessidade deste e pelo menos um transportador farmaceuticamente aceitável, diluente ou excipiente.

Métodos para tratamento de infecções de HIV-1

O HIV-1 infecta células da linhagem monócito-macrófago e linfócitos de célula T auxiliadoras por exploração de uma interação de alta afinidade da glicoproteína envelopada viral (Env) com o antígeno CD-4. O antígeno CD-4 foi verificado ser um requerimento necessário, mas não suficiente 20 para entrada de célula e pelo menos uma outra proteína de superfície foi requerida para infectar as células (E. A. Berger et al., Ann. Rev. Immunol. 1999 17:657-700). Dois receptores de quimioquinas, ou o receptor de CCR5 ou o receptor de CXCR4 foram subsequentemente verificados serem correceptores junto com CD4 que são requeridos para infecção de células pelo 25 vírus de imunodeficiência humana (HIV). O papel central do CCR5 na patogênese de HIV foi inferido por identificação epidemiológica de efeitos poderosos de modificação de doença do alelo nulo que ocorre naturalmente CCR5 Δ32. A mutação Δ32 tem uma anulação de 32 pares bases no gene CCR5 resultando em uma proteína truncada designada Δ32. Em relação à 30 população geral, homozigotos Δ32/Δ32 são significantemente comuns em indivíduos expostos/não-infectados, sugerindo o papel de CCR5 na entrada de célula de HIV (R. Liu et al., Cell 1996 86(3):367-377; M. Samson et al., Nature 1996 382(6593):722-725). O local de ligação de CD-4 no gp120 de HIV parece interagir com a molécula de CD4 na superfície da célula, e suporta mudanças conformacionais que permitem que o mesmo se ligue a outro receptor de superfície de célula, tal como CCR5 e/ou CXCR-4. Isto traz o envelope viral mais próximo à superfície da célula e permite interação entre 5 gp41 no envelope viral e um domínio de fusão na superfície da célula, fusão com a membrana da célula, e entrada do núcleo viral na célula. Consequentemente, um agente que pode bloquear receptores de quimioquina em humanos que possui receptores de quimioquinas normais deve prevenir infecção em indivíduos saudáveis e diminuir ou parar progressão viral em pacien10 tes infectados.

RANTES e um análogo quimicamente modificado no terminal N, aminooxipentano RANTES, foram verificados bloquear entrada de HIV nas células. (G. Simmons et al., Science 1997 276:276-279). Outros compostos foram demonstrados inibir a replicação de HIV, incluindo proteína CD4 solú15 vel e derivados sintéticos (Smith, et al., Science 1987 238:1704-1707), sulfato de dextran, os corantes Direct Yellow 50, Evans Blue, e certos corantes azo (Patente U.S. N0 5.468.469). Alguns destes agentes antivirais foram mostrados agirem pelo bloqueio da ligação de gp120, a proteína de revestimento de HIV, para seu alvo, a glicoproteína CD4 da célula.

A-M. Vandamme et al. (Antiviral Chemistry & Chemotherapy,

1998 9:187-203) descrevem tratamentos clínicos de HAART atuais de infecções de HIV-1 no homem incluindo pelo menos combinações de troca triplas. Terapias anti-retrovirais altamente ativas (HAART) consistem tradicionalmente de terapia de combinação com inibidores de transcriptase reversa 25 de nucleoside (NRTI), inibidores de transcriptase reversa de não-nucleoside (NNRTI) e inibidores de protease (PI). Estes compostos inibem processos bioquímicos requeridos para replicação viral. Enquanto HAART tem alterado dramaticamente o prognóstico de pessoas infectadas por HIV, permanecem muitos problemas para a terapia atual incluindo regimes de dosagem alta30 mente complexos e efeitos colaterais que podem ser muito severos (A. Carr e D. A. Cooper, Lancet 2000 356(9239): 1423-1430). Além disso, estas terapias de multifármaco não eliminam HIV-1 e tratamento de longo prazo usualmente resulta em resistência a multifármaco, limitando, desse modo, sua utilidade em terapia de longo prazo. O desenvolvimento de novos terapêuticos que podem ser usados em combinação com NRTIs, NNRTIs, Pls e inibidores de fusão viral para proporcionar melhor tratamento de HIV-1 permanece uma prioridade.

5 NRTIs adequados típicos incluem zidovudina (AZT; RETRO

VIR®); didanosina (ddl; VIDEX®); zalcitabina (ddC; HIVID®); stavudina (d4T; ZERIT®); Iamivudina (3TC; EPIVIR®); abacavir (ZIAGEN®); adefovir dipivoxil [bis(POM)-PMEA; PREVON®]; Iobucavir (BMS-180194), um inibidor de transcriptase reversa de nucleoside descrito no EP-0358154 e EP-0736533; 10 BCH-10652, um inibidor de transcriptase reversa (na forma de uma mistura racêmica de BCH-10618 e BCH-10619) sob desenvolvimento por Biochem Pharma; emitricitabina [(-)-FTC] no desenvolvimento por Triangle Pharmaceuticals; p-L-FD4 (também denominado P-L-D4C e denominado β -L-2', 3’dicleoxi-5-flúor-citideno) licenciado por Vion Pharmaceuticals; DAPD, a puri15 na nucleoside, (-)-p-D-2,6-diamino-purina dioxolano revelado na EP-0656778 e Iicensiado para Triangle Pharmaceuticals; e Iodenosina (FddA), 9-(2,3- dideoxi-2-flúor^-D-treo-pentofuranosil)adenina, um inibidor baseado em purina estável ácido de transcriptase reversa sob desenvolvimento por U.S. Bioscience Inc.

NNRTIs adequados típicos incluem nevirapina (BI-RG-587; Vl

RAMUNE®); delaviradina (BHAP, U-90152; RESCRIPTOR®); efavirenz (DMP-266; SUSTIVA®); PNU-142721, uma furopiridina-tio-pirimidina sob desenvolvimento por Pfizer; AG-1549 (primeiramente Shionogi # S-1153); 5- (3,5-diclorofenil)-tio-4-isopropil-1 -(4-piridil)metil-1 H-imidazol-2-ilmetil carbo25 nato descrito em WO 96/10019; MKC-442 (1-(etóxi-metil)-5-(1-metiletil)-6- (fenilmetil)-(2,4(1H, 3H)-pirimidinadiona); e (+)-calanolide A (NSC-675451) e B, derivados de coumarin revelados na Patente dos Estados Unidos No. 5.489.697.

Pls adequados típicos incluem saquinavir (Ro 31-8959; INVIRASE®; FORTOVASE®); ritonavir (ABT-538; NORVIR®); indinavir (MK-639; CRIXIVAN®); nelfnavir (AG-1343; VIRACEPT®); amprenavir (141W94; AGENERASE®); Iasinavir (BMS-234475); DMP-450, uma uréia cíclica sob desenvolvimento por Triangle Pharmaceuticals; BMS-2322623, um azapeptídeo sob desenvolvimento por Bristol-Myers Squibb como uma 2a geração de HIV-1 PI; ABT-378 sob desenvolvimento por Abbott; e AG-1549, um imidazoIe carbamato sob desenvolvimento por Agouron Pharmaceuticals, Inc.

Outros agentes antivirais incluem hidroxiureia, ribavirin, IL-2, IL12, pentafuside. Hidroxiureia (Droxia), um inibidor de ribonucleoside trifosfato reductase mostrado para ter um efeito sinergístico na atividade de didanosina, e foi estudado com stavudina. IL-2 (aldesleukin; PROLEUKIN®) é descrita em Ajinomoto EP-0142268, Takeda EP-0176299, e Chiron Patente U.S. Nos. RE 33.653, 4.530.787, 4.569.790, 4.604.377, 4.748.234, 4.752.585, e 4.949.314. Pentafuside (FUZEON®), um peptídeo sintético de 36 aminoácidos que inibe fusão de HIV-1 em membranas-alvo. Pentafuside (3 a 100 mg/dia) é dada como uma infusão sc contínua ou injeção junto com efavirenz e 2 Pl’s para pacientes positivos de HIV-1 refratários a uma terapia de combinação tripla; use de 100 mg/dia é preferido. Ribavirin, Ι-β-Dribofuranosil-1 H-1,2,4-triazol-3-carboxamida.

Em adição ao potencial para moduladores de CCR5 no controle de infecções de HIV, o receptor de CCR5 é um regulador importante de função imune e os compostos da presente invenção podem se comprovar valiosos no tratamento de distúrbios do sistema imune. Tratamento de rejeição 20 de transplante de órgão sólido, enxerto vs. doença hospedeira, artrite, artrite reumatoide, doença inflamatória de intestino, dermatite atópica, psoríase, asma, alergias ou esclerose múltipla por administração a um humano em necessidade de tal tratamento de uma quantidade eficaz de um composto antagonista de CCR5 da presente invenção é também possível.

Métodos para tratamento de artrite reumatoide

Moduladores do receptor de CCR5 podem ser úteis no tratamento de várias condições inflamatórias. A artrite reumatoide é caracterizada por infiltração de linfócitos T de memória e monócitos em juntas inflamadas. Como fatores quimiotáticos de leucócito, quimioquinas desempenham um 30 papel indispensável na atração de macrófagos para vários tecidos do corpo, um processo que é essencial para ambas inflamação e a resposta do corpo à infecção. Devido à quimioquinas e seus receptores regularem o tráfego e ativação de leucócitos que contribuem para a patofisiologia de doenças inflamatórias e infecciosas, agentes que modulam a atividade de CCR5, preferivelmente antagonizando interações de quimioquinas e seus receptores, são úteis no tratamento terapêutico de tais doenças inflamatórias.

Níveis elevados de quimioquinas CC1 especialmente CCL2, C5 CL3 e CCL5, foram verificados nas juntas de pacientes com artrite reumatoide e foram correlacionados com o recrutamento em monócitos e células T nos tecidos sinoviais (I. F. Charo e R. M. Ransohoff, New Eng. J. Med. 2006 354:610-621). As células T recuperadas de fluido sinovial de artrite reumatoide mostraram expressar CCR5 e CXCR3. P. Gao et al., J. Leukocyte Biol. 10 2003 73:273-280) Met-RANTES é um derivado de RANTES amino-terminal modificado que bloqueia ligação de RANTES aos receptores de CCR1 e CCR5 com potência nanomolar. (A. E. Proudfoot et al., J. Biol. Chem. 1996 271:2599-2603). A severidade de artrite em artrite induzida adjuvante de rato foi reduzida pela administração de Met-RANTES. Em adição, os níveis de 15 citoquinas pró-inflamatórias TNF-α e IL-1 β. (S. Shahrara et al. Arthr. & Rheum. 2005 52:1907-1919). Met-RANTES mostrou melhorar o desenvolvimento de inflamação em um modelo de roedor reconhecido na técnica de inflamação, a artrite induzida por colágeno. (C. Plater-Zyberk et al. Immunol. Lett. 1997 57:117-120)

TAK-779 também mostrou reduzir ambas a incidência e severi

dade de artrite no modelo de artrite induzida por colágeno. O antagonista inibe a infiltração de células CCR5+ T inflamatórias na junta. (Y.-F. Yang et al., Eur. J. Immunol. 2002 32:2124-2132). Outro antagonista de CCR5, SCHX, foi mostrado reduzir a incidência e severidade de artrite induzida por colá25 geno em macacos rhesus. (Μ. P. M. Vierboom et al., Arthr. & Rheum. 2005 52(20):627-636).

Em algumas condições anti-inflamatórias, os compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com outros fármacos anti-inflamatórios que podem ter um modo alternativo de ação. Os compostos que podem ser combinados com antagonistas de CCR5 incluem, mas não estão limitados a:

Métodos para tratamento de artrite reumatoide

Moduladores do receptor de CCR5 podem ser úteis no tratamento de várias condições inflamatórias. A artrite reumatoide é caracterizada por infiltração de linfócitos T de memória e monócitos nas juntas inflamadas. Como fatores quimiotáticos de leucócito, as quimioquinas desempenham um papel indispensável na atração de macrófagos para vários tecidos do corpo, 5 um processo que é essencial para ambas inflamação e a resposta do corpo à infecção. Devido à quimioquinas e seus receptores regularem o tráfego e ativação de leucócitos que contribuem para a patofisiologia de doenças inflamatórias e infecciosas, agentes que modulam atividade de CCR5, preferivelmente antagonizando interações de quimioquinas e seus receptores, são 10 úteis no tratamento terapêutico de tais doenças inflamatórias.

Níveis elevados de quimioquinas CC, especialmente CCL2, CCL3 e CCL5, foram verificados nas juntas de pacientes com artrite reumatoide e foram correlacionados com o recrutamento em monócitos e células T nos tecidos sinoviais (I. F. Charo e R. M. Ransohoff, New Eng. J. Med. 2006 15 354:610-621). As células T recuperadas de fluido sinovial de artrite reumatoide mostraram expressar CCR5 e CXCR3. P. Gao et al., J. Leukocyte Biol. 2003 73:273-280). Met-RANTES é um derivado de RANTES amino-terminal modificado que bloqueia ligação de RANTES aos receptores de CCR1 e CCR5 com potência nanomolar. (A. E. Proudfoot et al., J. Biol. Chem. 1996 20 271:2599-2603). A severidade de artrite em artrite induzida adjuvante de rato foi reduzida pela administração de Met-RANTES. Em adição, os níveis de citoquinas pró-inflamatórias TNF-α e IL-1 β. (S. Shahrara et al. Arthr. & Rheum. 2005 52:1907-1919). Met-RANTES mostrou melhorar o desenvolvimento de inflamação em um modelo de roedor reconhecido na técnica de 25 inflamação, a artrite induzida por colágeno. (C. Plater-Zyberk et al. Immunol. Lett. 1997 57:117-120)

TAK-779 também mostrou reduzir ambas a incidência e severidade de artrite no modelo de artrite induzida por colágeno. O antagonista inibe a infiltração de células CCR5+ T inflamatórias na junta. (Y.-F. Yang et 30 al., Eur. J. Immunol. 2002 32:2124-2132). Outro antagonista de CCR5, SCHX, foi mostrado reduzir a incidência e severidade de artrite induzida por colágeno em macacos rhesus. (Μ. P. M. Vierboom et al., Arthr. & Rheum. 2005 52(20):627-636). Em algumas condições anti-inflamatórias, os compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com outras fármacos anti-inflamatórios que podem ter um modo alternativo de ação. Os compostos que podem ser combinados com antagonistas de CCR5 incluem, mas não estão limitados a:

(a) um antagonista de Iipoxigenase ou inibidor de biosíntese tal como um inibidor de 5-lipoxigenase, antagonistas de Ieucotrieno (por exemplo, zafirlukast, montelukast, pranlukast, iralukast, pobilukast, SKB-106,203), inibidores de biosíntese de Ieucotrieno (por exemplo, zileuton, BAY-1005);

(b) um agente anti-inflamatório não-esteroidal ou inibidor de ci

clo-oxigenase (C0X1 e/ou C0X2) tal como derivados de ácido propiônico (por exemplo, alminoprofen, benoxaprofen, ácido buclóxico, carprofen, fenbufen, fenoprofen, fluprofen, flurbiprofen, ibuprofen, indoprofen, cetoprofen, miroprofen, naproxen, oxaprozin, pirprofen, pranoprofen, suprofen, ácido 15 tiaprofênico, e tioxaprofen), derivados de ácido acético (por exemplo, indometacin, acemetacin, alclofenac, clidanac, diclofenac, fenclofenac, ácido fenclózico, fentiazac, furofenac, ibufenac, isoxepac, oxpinac, sulindac, tiopinac, tolmetin, zidometacin, e zomepirac), derivados de ácido fenárnico (ácido flufenárnico, ácido meclofenâmico, ácido mefenâmico, ácido niflúmico e áci20 do tolfenárnico), derivados de ácido bifenilcarboxílico (diflunisal e flufenisal), oxicarns (isoxicarn, piroxicam, sudoxicam e tenoxican), salicilatos (ácido acetil salicílico, sulfasalazina), pirazolonas (apazona, bezpiperilon, feprazona, mofebutazona, oxifenbutazona, fenilbutazona) e celecoxib;

(c) um inibidor de TNF tal como infliximab (REMICADE®), etanercept (ENBREL®), ou adalimumab (HUMIRA®);

(d) esteroides anti-inflamatórios tais como beclometasona, metilprednisolona, betametasona, prednisona, dexametasona, e hidrocortisona;

(e) imunomoduladores tais como ciclosporina, Ieflunomida (Arava®), azatioprina (Azasan®), penicilamina e levamisol;

(f) antagonistas de flutuação, tais como metotrexato;

(g) compostos de ouro tais como aurotioglicose, ouro sódio tiomalato ou auranofin.

Métodos para Tratamento de Rejeição de Transplante A rejeição seguindo transplante de órgão sólido é caracterizada por infiltração de células T e macrófagos que expressam o receptor de CCR5 na área intersticial. (J. Pattison et al., Lancet 1994 343:209-211). Pacientes de transplante renal homozigotos para a anulação de CCR5A32 tem 5 uma vantagem de sobrevivência significante de pacientes heterozigotos para a anulação de CCR5A32 ou homozigotos de pacientes tipo selvagem. (M. Fischerderet al., Lancet 2001 357:1758-1761). Camundongos de eliminação de CCR5'7' mostraram sobrevivência de enxerto prolongada significante após transplante de coração e tecido de ilhota. (W. Gao et al., Transplantation 10 2001 72:1199-1205; R. Abdi et al., Diabetes 2002 51:2489-2495. O bloqueio da ativação de receptor de CCR5 verificou-se estender significantemente a sobrevivência alográfica cardíaca. (W. W. Hancock et al., Curr. Opin. Immunol. 2003 15:479-486).

No tratamento de rejeição de transplante ou enxerto vs. doenças 15 hospedeiras, os antagonistas de CCR5 da presente invenção podem ser administrados em combinação com outros agentes imunosupressivos incluindo, mas não limitados a, ciclosporina (SANDIMMUNE®), tacrolimus (PROGRAF®, FK-506), sirolimus (RAPAMUNE®, rapamicin), micofenolato mofetil (CELLCEPT®), metotrexato, anticorpos de receptor anti-IL-2 (anti-CD25), tais 20 como daclizumab (ZENAPAX®) ou basiliximab (SIMULECT®), anticorpos de anti-CD3 visilizumab (NUVION®) ou muromonab (OKT3, ORTHOCLONE®). Métodos para Tratamento de Asma e COPD

O antagonismo do receptor de CCR5 sugeriu como um alvo inibir a progressão de asma e COPD pelo antagonismo de ativação de Th1: B. Ma et al., J. Immunol. 2006 176(8):4968-4978, B. Ma et al., J. Clin. Investig.

2005 115(12):3460-3472 e J. K. L. Walker et al., Am. J. Respir. Cell Mo. Biol.

2006 34:711-718.

Os termos "opcional" ou "opcionalmente", conforme aqui usado, significa que um evento descrito subsequentemente ou circunstância pode, 30 mas não necessita ocorrer, e que a descrição inclui exemplos onde o evento ou circunstância ocorre, e exemplos em que ele não ocorre. Por exemplo, "ligação opcional" significa que a ligação pode ou não pode estar presente, e que a descrição inclui ligações simples, duplas ou triplas. O termo "independentemente" é usado aqui para indicar que uma variável é aplicada em qualquer um exemplo sem relação à presença ou ausência de uma variável tendo esta mesma ou uma definição diferente dentro do mesmo composto. Desse modo, em um composto no qual R" apa5 rece duas vezes e é definido como "independentemente carbono ou nitrogênio", ambos R"s podem ser carbono, ambos R"s podem ser nitrogênio, ou um R" pode ser carbono e o outro nitrogênio.

O termo "alquila", conforme aqui usado, denota um resíduo de hidrocarboneto monovalente, saturado, de cadeia não-ramificada ou ramifi10 cada contendo 1 a 10 átomos de carbono. O termo "alquila inferior" denota um resíduo de hidrocarboneto de cadeia reta ou ramificada contendo 1 a 6 átomos de carbono. "Cn0 alquila", conforme aqui usado, se refere a uma alquila composto de 1 a 10 carbonos. Exemplos de grupos alquila incluem, mas não estão limitados a, grupos alquila inferiores que incluem metila, etila, 15 propila, /'-propila, A7-butila, /-butila, f-butila ou pentila, isopentila, neopentila, hexila, heptila, e octila.

O termo "alquileno", conforme aqui usado, denota um radical hidrocarboneto linear divalente saturado de 1 a 8 átomos de carbono, ou um radical hidrocarboneto ramificado saturado divalente de 3 a 8 átomos de 20 carbono, a menos que de outro modo indicado. Exemplos de radicais alquiIenos incluem, mas não estão limitados a, metileno, etileno, propileno, 2- metil-propileno, butileno e 2-etilbutileno.

O termo "alcóxi", conforme aqui usado, significa um -O-grupo alquila, em que alquila é conforme definido acima tal como metóxi, etóxi, n25 propilóxi, /'-propilóxi, n-butilóxi, /-butilóxi, f-butilóxi, pentilóxi, hexilóxi, incluindo seus isômeros. "Alcóxi inferior", conforme aqui usado, denota um grupo alcóxi com um grupo "alquila inferior", conforme anteriormente definido. "Cno alcóxi", conforme aqui usado, se refere a um -O-alquila em que alquila é C-|. io. O termo "alcoxialcoxi", conforme aqui usado, se refere a um alcóxi substi30 tuinte no qual um a três hidrogênios são substituídos por um grupo alcóxi. O termo "alcóxi-imino", conforme aqui usado, se refere a um =NOR em que R é uma porção alquila conforme aqui definida, e o nitrogênio forma uma dupla ligação fixada ao carbono substituído. O termo "oxo", conforme aqui usado, se refere a um grupo carbonila (=O). Desse modo, ciclo-hexano com um oxo substituinte é ciclohexanona.

O termo "cicloalquila", conforme aqui usado, denota um anel car5 bocíclico saturado contendo 3 a 8 átomos de carbono, isto é, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, cicloheptil ou ciclo-octila. "C3.7 cicloalquila", conforme aqui usado, se refere a um cicloalquila coimposto de 3 a 7 carbonos no anel carbocíclico.

O termo "cicloalquil alquila", conforme aqui usado, se refere ao 10 radical R'R"-, em que R' é um radical cicloalquila conforme definido aqui, e R" é um radical alquileno conforme definido aqui com a compreensão que o ponto de fixação da porção de cicloalquilalquila estará mo radical alquileno. Exemplos de radicais cicloalquilalquil incluem, mas não estão limitados a, ciclopropilmetila, ciclo-hexilmetila, ciclopentiletila. C3.7 cicloalquil-C-1-3 alquila 15 se refere ao radical R’R" onde R' é C3-7 ciclolalquil e R" é C1-3 alquileno, conforme definido aqui.

O termo "acila", conforme aqui usado, denota um grupo de fórmula -C(=0)R no qual R é hidrogênio ou alquila inferior» conforme definido aqui. O termo "alquilcarbonila", conforme aqui usado, denota um grupo de 20 fórmula C(=0)R no qual R é alquila, conforme definido aqui. O termo "arilcarbonil", conforme aqui usado, significa um grupo de formula C(=0)R em que R é um grupo arila; o termo "benzoila", conforme aqui usado, um grupo "arilcarbonila" no qual R é fenila.

Os termos "alcoxicarbonila" e "ariloxicarbonila", conforme aqui usados, denotam um grupo de fórmula -C(=0)0U em que R é alquila ou arila respectivamente, e alquila e arila são conforme definidos aqui.

O termo "haloalquila", conforme aqui usado, denota um grupo alquila de cadeia não-ramificada ou ramificada, conforme definido acima, no qual 1, 2, 3 ou mais átomos de hidrogênio são substituídlos por um halogê30 nio. "C1-3 haloalquila", conforme aqui usado, se refere a um haloalquila composto de 1 a 3 carbonos e 1-8 halogênio substituintes. Exemplos são 1- fluorometila, 1-clorometila, 1-bromometila, 1-iodometila, trifluorometila, triclorometila, tribromometila, triiodometila, 1-fluoroetila, 1-clorcnetila, 1-bromoetila, 1-iodoetila, 2-fluoroetila, 2-cloroetila, 2-bromoetila, 2-iodoetila, 2,2- dicloroetila, 3-bromopropila, 2,2,2-trifluoroetil ou difluorometila.

O termo "Ci-6 fluoroalquila", conforme aqui usado, denota um grupo alquila de cadeia não-ramificada ou ramificada, conforme definido a5 cima, no qual 1, 2, 3 ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por um flúor.

Os termos "oxetanila", "tetra-hidrofuranila" e "tetra-hidropiranila" se referem a anel heterocíclico não-fundido quatro, cinco e seis-membrado respectivamente, cada um contendo um átomo de oxigênio. O termo "piridi10 na" se refere a um anel heteroaromático seis-membrado com um átomo de nitrogênio. Os termos "pirimidina", "pirazina" e "piridazina" se referem a um anel heteroaromático não-fundido seis-membrado com dois átomos de nitrogênio dispostos em um relacionamento 1,3, 1,4 e 1,2 respectivamente.

Abreviações comumente usadas incluem: acetil (Ac), azo-bisisobutirilnitrila (AIBN), atmosferas (Atm), 9-borabiciclo[3.3.1]nonano (9-BBN ou BBN), ferc-butoxicarbonila (Boc), pirocarbonato de di-terc-butila ou boc anidrido (BOC2O), benzil (Bn), butila (Bu), Chemical Abstracts Registration Number (CASRN), benziloxicarbonila (CBZ ou Z), carbonil di-imidazol (CDI), 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO), dietilaminosulfur trifluoreto (DAST), dibenzilidenoacetona (dba), 1,5-diazabiciclo[4.3.0]non-5-eno (DBN), 1,8- diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU), Ν,Ν'-diciclo-hexilcarbodiimida (DCC), 1,2-dicloroetano (DCE), diclorometano (DCM), azodicarboxilato de dietila (DEAD), di-/'so-propilazodicarboxilato (DIAD), di-/'so-butilaluminiohidreto (DlBAL ou DIBAL-H), di-iso-propiletilamina (DIPEA), Ν,Ν-dimetil acetamida (DMA), 4-N,N-dimetilaminopiridina (DMAP), Ν,Ν-dimetilformamida (DMF), dimetil sulfóxido (DMSO), 1,1’-jb/'s-(difenilfosfino)etano (dppe), 1,1'-ò/s(difenilfosfino)ferroceno (dppf), 1 -(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida hidrocloreto (EDCI), etil (Et), acetato de etila (EtOAc), etanol (EtOH), etila éster de ácido 2-etóxi-2/-/-quinolina-1-carboxílico (EEDQ), éter de dietila (Et2O), 0-(7-Azabenzotriazol-1-il)-N, Ν,Ν’Ν’-tetrametiluronio hexafluorofosfato ácido acético (HATU), ácido acético (HOAc), 1-N-hidroxibenzotriazol (HOBt), cromatografia líquida de alta pressão (HPLC), iso-propanol (IPA), lítio hexametil disilazano (LiHMDS), metanol (MeOH), ponto de fusão (mp), MeSO2- (mesil ou Ms), metil (Me)1 acetonitrila (MeCN), ácido mcloroperbenzoico (MCPBA), espectro de massa (ms), metil í-butila éter (MTBE), N-bromosuccinimida (NBS), N-carboxianidrido (NCA), Nclorosuccinimida (NCS), N-metilmorfolina (NMM), N-metilpirrolidona (NMP), 5 piridinio clorocromato (PCC), piridinio dicromato (PDC), fenil (Ph), propila (Pr), iso-propila (/-Pr), libras por polegada quadrada (psi), piridina (pyr), temperatura ambiente (rt ou RT), terc-butildimetilsilila ou NBuMe2Si (TBDMS), trietilamina (TEA ou Et3N), 2,2,6,6-tetrametilpiperidina 1-oxil (TEMPO), triflato ou CF3SO2- (Tf), ácido trifluoroacético (TFA), 1 ,V-bis-2,2,6,6- 10 tetrametilheptano-2,6-diona (TMHD), O-benzotriazol-l-il-Ν,Ν,Ν',Ν'tetrametiluronio tetrafluoroborato (TBTU), cromatografia de camada delgada (TLC), tetra-hidrofuran (THF), trimetilsilila ou Me3Si (TMS), ácido ptoluenosulfônico monohidrato (TsOH ou pTsOH), 4-Me-C6H4S02- ou tosil (Ts), N-uretano-N-carboxianidrido (UNCA). Nomenclatura convencional in15 cluindo os prefixos normais (n), iso (/-), secundário (sec-), terciário (tert-) e neo têm seu significado costumeiro quando usado com uma porção alquila. (J. Rigaudy e D. P. Klesney, Nomenciature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford.).

Exemplos de compostos representativos envolvidos pela presen20 te invenção e dentro do escopo da invenção são providos na Tabela seguinte. Estes Exemplos e preparações que se seguem são providos para capacitor aqueles técnicos no assunto a compreender mais claramente e a praticar a presente invenção. Eles não devem ser considerados como limitando o escopo da invenção, mas meramente como sendo ilustrativos e representa25 tivos da mesma.

Os símbolos no final de uma ligação ou "...... " colocados

através de uma ligação cada um se refere ao ponto de fixação de um grupo funcional ou outra porção química ao restante da molécula da qual ela é uma parte. Desse modo, por exemplo: Em geral, a nomenclatura usada nesta Aplicação é baseada em AUTONOM® v.4.0, um sistema computadorizado de Beilstein Institute para a geração de nomenclatura sistemática IUPAC. Se existe uma discrepância entre uma estrutura representada e um nome dado a esta estrutura, a estru5 tura representada é para ser concedida com mais peso. Em adição, se a estereoquímica de uma estrutura ou uma porção de uma estrutura não é indicada com, por exemplo, negrito ou linhas tracejadas, a estrutura ou porção da estrutura é para ser interpretada como envolvendo todos os estereoisômeros da mesma.

TABELA I

N0 do '^dcpo-ζ. - mw ms mp Com¬ O R1 R4 C51 1-1 MeO Me RS 583,81 584 í * ^=N CV *-í /> /-N Me I-2 _ * Me S 583,81 584 MeO ---^ ^ Me I-3 _ * Me S 583,81 584 150,8- MeO Me 152,9 I-4 _ * Me S 569,79 570 HO / Me I-5 HO-Q-/* Me S 569,79 570 Me I-6 _ * Me S 597,84 598 EtO-^ *1 ^=N *-4 /> /-N Me N0 do O mw ms mp R1 R4 C51 1-7 * Me S 597,84 598 188,3- Eto -çyj ^=N 189,7 /> Me 1-8 OMe Me S 613,84 614 ^=N *-í /> >“N Me 1-9 OMe Me S 613,84 614 ^ /~\J ^=N o n»< v---' *“í /> ?“N Me 1-10 _ * Me S 593,81 594 Ho *^^“CN Me TABELA Il

N0 do O mw ms mp Com¬ posto R1 R4 C51 11-1 H Me S 553,74 554 CK \=N H *v_ /-N Me II-2 H Me S 577,77 578 Cr"'v* *-^-CN H Me II-3 H Me S 621,44 622 oCrn-^. *>}~CFí H Me N0 do O mw ms mp Com¬ posto R1 R4 C51 11-4 H Me S 602,76 603 oCp^. *-Q_CHF H Me 11-5 Me S 583,77 584 Me 11-6 Me S 583,77 584 \=N /-N Me 11-7 O^Ov Me S 607,79 608 cc^. Me 11-8 O^Ov Me RS 582,78 583 cc^. Me 11-9 O- Me S 557,73 558 Me 11-10 O- Me S 581,75 582 Me 11-11 O- Me S 557,73 558 *■^5 Me 11-12 O- Me S 581,75 582 .-^-CN Me N0 do ^dosCH » mw ms mp Com¬ o posto R1 R4 C51 11-13 oc Me 571,73 572 Me TABELA IN

N0 do O mw ms mp R1 R4 C51 111-1 acnCV* Me RS 596,81 597 e *■£} 619 Me III-2 AcN-\ * Me RS 624,87 625 CV V=N >-N Me III-3 mKV Me RS 610,84 611 O N-' Me III-4 ^Qrr' Me RS 632,87 633 ^=N /> T-N Me III-5 MeSQ2N^ ^-( Me S 612,81 613 125,Ο¬ Me Ι 28,0 III-6 MeO2CN^ ^( Me RS 612,81 613 Me N0 do ■k3cpck » mw ms mp Com¬ O R1 R4 C51 111-7 MeO7CN-v * Me S 626,84 627 e 102,7- W Me 649 105 111-8 EtO2CN^ ^-f Me S 610,84 611 Me 111-9 o-yV* Me S 594,84 595 ^=N *“í /> r-N Me 111-10 Me S 618,81 619 e V=N 641 /> r-N Me 111-11 Me S 642,83 643 V=N /~N Me 111-12 F2CvH Me RS 616,84 617 H>· cN Me 111-13 EtO2CN I Me S 612,81 613 Me 111-14 MeO2CN I * Me S 598,78 599 Me 111-15 F2HCCH2N I * Me S 604,78 605 Me N0 do "*çHcpcK « mw ms mp Com¬ O R1 R4 C51 111-16 MeO2CN Me S 624,82 625 H Me 111-17 EtO2CN ·\ Me S 624,82 625 H * Me 111-18 /.H Me S 638,85 639 I-PrO1CN Me H 111-19 ___»H Me S 616,79 617 f2hch2cn^J^~"\ Me III-20 MeO2CN mW S 653,74 654 H IM V^CF3 111-21 Me * S 637,74 638 xOx^CF3 III-22 Me02CNQ^^ Me S 622,85 623 V=N *-í} /-N Me III-23 MeSO2N^ ^-( Me * S 675,85 676 %^CF, III-24 MeO2Cf/ ^-f Me * S 655,75 656 V-CFj III-25 Me * S 639,76 640 V-CF3 N0 do ■i^CPCK » mw ms mp Com¬ O R1 R4 C51 III-26 AcN---v * Me * RS 596,81 597 e ^CF3 619 N0 do O mw ms mp R1 R4 C51 IV-7 x> Me S 575,74 576 V=N /> /”N Me IV-8 N=\ Me S 534,70 535 Me IV-9 N=\ Me S 558,72 559 *~o Me IV-10 Me S 569,79 570 92,0- V=N 94,7 *”W> >-N Me IV-11 MeON=^ Me S 596,81 597 ' ' * Me IV-12 EtON=/ y---\ Me S 610,84 610 * Me IV-13 Me S 541,73 542 Me IV-14 F2CHCH2- Me S 545,67 546 Me 1. Configuração em C5-RS = racêmica Os compostos da presente invenção podem ser produzidos por uma variedade de métodos representados nos esquemas de reação sintéti

cos ilustrativos mostrados e descritos abaixo. Os materiais de partida e reagentes usados na preparação destes compostos geralmente são ou disponíveis de fornecedores comerciais, tal como Aldrich Chemical Co., ou são preparados por métodos conhecidos àqueles técnicos no assunto seguindo procedimentos colocados nas referências tais como Fieser e Fieser’s Reagents 5 for Organic Synthesis; Wiley & Sons: New York, Volumes 1-21; R. C. LaRock, Comprehensive Organic Transformations, 2a edição Wiley-VCH, New York 1999; Comprehensive Organic Synthesis, B. Trost e I. Fleming (Eds.) vol. 1-9 Pergamon, Oxford, 1991; Comprehensive Heterocyclie Chemistry, A. R. Katritzky e C. W. Rees (Eds) Pergamon, Oxford 1984, vol. 1-9; Compre10 hensive Heterocyclie Chemistry II, A. R. Katritzky e C. W. Rees (Eds) Pergamon, Oxford 1996, vol. 1-11; e Organic Reactions, Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-40. Os seguintes esquemas de reação sintéticos são meramente ilustrativos de alguns métodos pelos quais os compostos da presente invenção podem ser sintetizados, e várias modificações a estes es15 quemas de reação sintéticos podem ser feitas e serão sugeridas a um técnico no assunto tendo se referido à revelação contida neste Pedido.

Os materiais de partida e os intermediários dos esquemas de reação sintéticos podem ser isolados e purificados se desejado usando-se técnicas convencionais, incluindo, mas não limitada a, filtração, destilação, 20 cristalização, cromatografia, e similares. Tais materiais podem ser caracterizados usando-se meios convencionais, incluindo constantes físicas e dados espectrais.

A menos que especificado ao contrário, as reações aqui descritas preferivelmente são conduzidas sob uma atmosfera inerte à pressão at25 mosférica a uma faixa de temperatura de reação de cerca de -78 0C a cerca de 150 °C, mais preferivelmente de cerca de O0C a cerca de 125 °C, e mais preferivelmente e convenientemente a cerca de temperatura ambiente (ou ambiente), por exemplo, cerca de 20 °C.

Alguns compostos nos esquemas seguintes são representados com substituintes generalizados; contudo, um técnico no assunto apreciará imediatamente que a natureza dos grupos R pode variar para proporcionar os vários compostos contemplados nesta invenção. Além disso, as condições de reação são exemplares e condições alternativas são bemconhecidas. As seqüências de reação nos seguintes Exemplos são não significativas para limitar o escopo da invenção conforme colocada nas reivindicações.

Esquema A

Cf

Boc

Etapa 2

Etapa 1

A-I a: Z = O A-lb: Z = CH-n-Bu

A-2: R = OH

A-4a: R= CN A-4b: R = CH2NH2 .

A-3

J

Etapa 5

Etapa 4

Etapa 6

I

O NH

/NvJ^C4H9

Il' H

O R

■-A-5a: R" = Boc

Etapa 7 L-^-A-SbrRn = H

O N

*N.___J

Etapa 11

X ^R'

Q N

Nv^rC4H9

A-7

I-A-8a: R" = H

Etapa 12 L_».A_8b: R» = COR"

Etapa 12 Me· A-6b -—

Ah Jf

Cb<Aa«^

R"

Ra

......A-IO

•—►

A-9a: Ra =H Etapa 13 1—A-9b: Ra = CORb

A síntese quiral de A-6b (ESQUEMA A) foi alcançada utilizando

se um procedimento análogo àquele descrito para S. D. Gabriel e D. M. Rotstein na Publicação de Patente U.S. 20050176703. O precursor olefínico trisubstituído A-1b foi preparado por olefinação de Wittig de A-1a com pentilideno-trifenil-A5-fosfano. Di-hidroxilação assimétrica de A-1b foi conduzida com AD-mix-β que consiste em uma pré-mistura contendo K3Fe(CN)6, K2CO3, K2OsO2(OH)4 e hidroquinidina diéter de 1,4-diftalazinediila. Hidroxilação assimétrica é bem conhecida na técnica, por exemplo, H. C. Kolb et al.

5 Chem. Rev. 1994 94:2483-2547, Κ. B. Sharpless et al. J. Org. Chem. 1992 57:2768-2771. O diol assimétrico resultante A-2 foi seletivamente mesilatado no álcool secundário e convertido a epóxido A-3. Abertura de epóxido mediada por Et3AICN proporcionou a hidroxinitrila A-4a que foi reduzida a amino álcool A-4b e ciclizada com fosgene para produzir A-5 que contém o 10 C-5 na configuração de S.

A porção de 4-metil-N-Boc-piperidina foi introduzida pela remoção do grupo de proteção com TFA/DCM para proporcionar A-5b. A remoção de um grupo de proteção Boc é efetuada usando-se condições acídicas, tipicamente por tratamento com TFA e DCM ou HCI e dioxano. A condensa15 ção mediada por Ti(O-I-Pr)4 da amina secundária com N-Boc-4-oxopiperidina e prendendo a imina intermediária com Et2AICN proporcionou A-6a que foi subsequentemente convertido a A-6b pela substituição da nitrila com metil brometo de magnésio para proporcionar A-6b (A. Palani et al. J. Med. Chem. 2001 44(21 ):3339-42).

Os compostos da presente invenção tipicamente contém uma

porção no carbamoil nitrogênio que é introduzido por N-alquilação do carbamato. Os agentes de alquilação são preparados por metodologia bemconhecida na técnica partindo-se de compostos comercialmente disponíveis ou compostos que são descritos na literatura. Tipicamente um álcool é dis25 ponível ou pode ser preparado pela redução de derivados de ácido carboxílico. Tais reduções são transformações de grupo funcional-padrão. O álcool é, em seguida, substituído com um haleto ou sulfonilatado com cloreto de tosila ou cloreto de mesila. Agentes de alquilatação representativos e condições para a alquilação podem ser encontrados nos Exemplos que se seguem que 30 são exemplares e não limitantes. A alquilação de carbamatos é tipicamente efetuada em solventes similares a DMF, NMP, MeCN1 acetona, DCM e DCE, em temperaturas entre O0 C e 100° C. Bases tipicamente usadas incluem, mas não estão limitadas a, K2CO3, NaH, lítio hexametildisilazida, sódio hexametildisilazida e potássio hexametildisilazida. Nos exemplos onde os substituintes N-alquila contêm carbonos assimétricos, a presente invenção inclui ambos estereoisômeros e misturas destes. Os procedimentos para preparar os substituintes de carbamoil nitrogênio podem ser encontrados na literatura ou nos Exemplos que se seguem.

A introdução da amida na piperidina nitrogênio foi efetuada por condensação da amina secundária com um ácido carboxílico ativado. Os agentes de ativação de ácido carboxílico incluem, mas não estão limitados a, EDCI ou DCC, com ou sem HOBt ou bases, incluindo mas não limitado a, 10 TEA ou DIPEA em um solvente inerte, tais como DMF1 THF ou DCM em temperaturas entre O0C e 60°C. A reação pode alternativamente ser efetuada na presença de 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-/S/,/V,A/‘,A/-tetrametiluronio hexafIuorofosfato (HATU) ou 1-hidróxi-7-azabenzotriazol (HOAt). (J. March, Advanced Organic Chemistry, John Wiley & Sons: New York, NY, 1992, 15 pp.417-425; H. G. Benz, Synthesis of Amides e Related Compounds in Comprehensive Organic Synthesis, E. Winterfeldt, ed., vol. 6, Pergamon Press, Oxford 1991 pp. 381-411).

Um técnico no assunto reconhecerá que a seqüência Nalquiiação/desproteção/acilação pode ser prontamente modificada para desproteção/acilação/N-alquilação sem fugir da metodologia aqui descrita. A última seqüência é ilustrada nas etapas 12-14 do ESQUEMA Aea escolha é representada pela conveniência do operador.

ENSAIOS BIOLÓGICOS

A capacidade de novos compostos da presente invenção se ligar 25 ao receptor de CCR5 e, desse modo, antagonizar a função de CCR5 pode ser avaliada com sistemas de ensaio conhecidos na técnica. A capacidade dos compostos da presente invenção inibir infecção de CD4+/CCR5+ expressando células pode ser determinada usando-se um ensaio de fusão célulacélula conforme descrito no Exemplo 8 ou um ensaio antiviral, conforme 30 descrito no Exemplo 9.

Ensaios funcionais medem diretamente a capacidade de um composto produzir uma resposta biologicamente relevante, ou inibir uma resposta produzida por um Iigante natural (isto é, caracteriza as propriedades agonísticas vs. antagonistas dos compostos testes). Em um ensaio de fluxo de cálcio, as células que expressam o CCR5 são carregadas com corantes sensíveis a cálcio antes da adição de composto, ou de Iigante de CCR5 natural. Os compostos com propriedades agonísticas induzirão um 5 sinal de fluxo de cálcio na célula, enquanto os compostos desta invenção são identificados como compostos que não induzem sinalização por si, mas são capazes de bloquear sinalização por RANTES de Iigante natural.

Um ensaio de quimiotaxia é um ensaio funcional que mede a capacidade de uma linha de célula não-aderente expressar receptor de ΟΙ 0 CR5 humano para migrar através de uma membrana em resposta a ou compostos testes ou ligante(s) de atração natural (isto é, RANTES, ΜΙΡ-1β). Geralmente, os ensaios de quimiotaxia monitoram o movimento direcional ou migração de uma célula adequada (tal como um leucócito (por exemplo, Iinfócito, eosinófilo, basófilo) em ou através de uma barreira (por exemplo, endotélio, uma membrana de filtro permeável), de uma primeira superfície da barreira em direção a uma segunda superfície oposta contendo Iigantes de atração. As membranas ou filtros proporcionam barreiras convenientes para monitorar o movimento direcional ou migração de uma célula adequada em ou através de um filtro, em direção a níveis aumentados de uma atração. Em alguns ensaios, a membrana é revestida com uma substância para facilitar adesão, tais como ICAM-1, fibronectin ou colágeno. Tais ensaios proporcionam uma aproximação in vitro de leucócito "autodirecional". Os compostos que são antagonistas não somente falham em induzir quimiotaxia, mas são também capazes de inibir migração de célula em resposta a Iigantes de CCR5 conhecidos.

Uma membrana adequada tendo um tamanho de poro adequado para monitoramento de migração específica em resposta a composto, incluindo, por exemplo, nitrocelulose, policarbonato, é selecionada. Por exemplo, tamanhos de poro de cerca de 3 a 8 mícrons, e, preferivelmente cerca de 5- 30 8 mícrons, podem ser usados. O tamanho de poro pode ser uniforme em um filtro ou dentro de uma faixa de tamanhos de poro adequados.

Para avaliar a migração e inibição de migração, a distância de migração no filtro, o número de células cruzando o filtro que permanece aderente à segunda superfície do filtro, e/ou o número de células que se acumulam na segunda câmara pode ser determinado usando-se técnicas-padrão (por exemplo, microscopia). Em uma concretização, as células são etiquetadas com uma etiqueta detectável (por exemplo, radioisótopo, etiqueta fluo5 rescente, antígeno ou etiqueta de epítopo), e migração pode ser avaliada na presença e ausência do anticorpo por determinação da presença da etiqueta aderente à membrana e/ou presente na segunda câmara usando um método apropriado (por exemplo, por detecção da radioatividade, fluorescência, imunoensaio).

Em uma variação mais fisiologicamente relevante de um ensaio

de quimiotaxia, particularmente para células T, monócitos ou células que expressam um CCR5 de mamífero, migração transendotelial são monitorados. Tais ensaios imitam migração de leucócitos de vasos sanguíneos em direção aos quimioatraentes presentes nos tecidos em locais de inflamação 15 pelo cruzamento da camada de célula endotelial que reveste a parede do vaso.

As células endoteliais podem ser cultivadas e formam uma camada confluente em um filtro microporoso ou membrana, opcionalmente revestidas com uma substância, tais como colágeno, fibronectin, ou outras pro20 teínas de matriz extracelular, para facilitar a fixação de células endoteliais. Uma variedade de células endoteliais de mamífero é disponível para formação de monocamada, incluindo, por exemplo, veia, artéria ou endotélio microvascular. Geralmente, o ensaio é realizado por detecção da migração direcional de células em ou através de uma membrana ou filtro.

Em uma composição compreendendo células capazes de migra

ção e expressão, um receptor de CCR5 de mamífero pode ser colocado na primeira câmara. Uma composição compreendendo um ou mais Iigantes de atração naturais capazes de induzir quimiotaxia das células na primeira câmara é colocada na segunda câmara. Preferivelmente brevemente antes as 30 células são colocadas na primeira câmara, ou simultaneamente com as células, uma composição compreendendo o composto a ser testado é colocada, preferivelmente, na primeira câmara. Os compostos que podem ligar receptor e inibir a indução de quimiotaxia por Iigantes de atração naturais das células que expressam um CCR5 de mamífero são inibidores de função de receptor. Uma redução na extensão de migração induzida pelo Iigante ou promotor na presença do anticorpo é indicativa de atividade inibitória. Dosagem e Administração 5 Os compostos da presente invenção podem ser formulados em

uma ampla variedade de formas de dosagem de administração oral e transportadores. A administração oral pode ser na forma de comprimidos, comprimidos revestidos, drágeas, cápsulas de gelatina dura e macia, soluções, emulsões, xaropes, ou suspensões. Os compostos da presente invenção 10 são eficazes quando administrados por outras rotas de administração, incluindo administração contínua (gotejamento intravenoso), tópica parenteral, intramuscular, intravenosa, subcutânea, transdermal (que pode incluir um agente de intensificação de penetração), bucal, nasal, por inalação e supositório, entre outras rotas de administração. A maneira preferida de adminis15 tração é geralmente oral usando-se um regime de dosagem diária conveniente que pode ser ajustado de acordo com o grau de aflição e da resposta do paciente ao ingrediente ativo.

Um composto ou compostos da presente invenção, bem como seus sais farmaceuticamente utilizáveis, juntos com um ou mais excipientes 20 convencionais, transportadores, ou diluentes, podem ser colocados na forma de composições farmacêuticas e dosagens unitárias. As composições farmacêuticas e formas de dosagem unitárias podem ser compreendidas de ingredientes convencionais em proporções convencionais, com ou sem compostos ativos adicionais ou princípios, e as formas de dosagem unitárias 25 podem conter qualquer quantidade efetiva adequada do ingrediente ativo comensurado com a faixa de dosagem diária pretendida a ser empregada. As composições farmacêuticas podem ser empregadas como sólidos, tais como comprimidos ou cápsulas preenchidas, semissolidões, pós, formulações de liberação sustentada, ou líquidos, tais como soluções, suspensões, 30 emulsões, elixires, ou cápsulas preenchidas para uso oral; ou na forma de supositórios para administração retal ou vaginal; ou na forma de soluções injetáveis estéreis para uso parenteral. Uma preparação típica conterá de cerca de 5% a cerca de 95% de composto ativo ou compostos (p/p). O termo "preparação" ou "forma de dosagem" é pretendido para incluir formulações sólidas e líquidas do composto ativo, e um técnico no assunto apreciará que um ingrediente ativo pode existir em preparações diferentes dependendo do órgão ou tecido alvo e da dose desejada e parâmetros farmacocinéticos.

5 O termo "excipiente", conforme aqui usado, se refere a um com

posto que é útil na preparação de uma composição farmacêutica, geralmente segura, não-tóxica e nem biologicamente nem, de outro modo, indesejável, e inclui excipientes que são aceitáveis para uso veterinário, bem como uso farmacêutico humano. Os compostos desta invenção podem ser admi10 nistrados sozinhos, mas geralmente serão administrados em mistura com um ou mais excipientes farmacêuticos adequados, diluentes ou transportadores selecionados com relação à rota pretendida de administração e prática farmacêutica-padrão.

Uma forma de "sal farmaceuticamente aceitável" de um ingrediente ativo pode também inicialmente conferir uma propriedade farmacocinética desejável no ingrediente ativo que estava ausente na forma de não-sal, e pode ainda afetar positivamente as farmacodinâmicas do ingrediente ativo com relação a sua atividade terapêutica no corpo. A frase "sal farmaceuticamente aceitável" de um composto significa um sal que seja farmaceuticamente aceitável, e que possua a atividade farmacológica desejada do composto de origem. Tais sais incluem: (1) sais de adição ácidos, formados com ácidos inorgânicos, tais como ácido hidroclórico, ácido hidrobrômico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, e similares; ou formados com ácidos orgânicos, tais como ácido acético, ácido propiônico, ácido hexanoico, ácido ciclopentanopropiônico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malônico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido 3-(4-hidroxibenzoil)benzoico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido metanosulfônico, ácido etanosulfônico, ácido 1,2-etano-disulfônico, ácido 2-hidroxietanosulfônico, ácido benzenosulfônico, ácido 4-clorobenzenosulfônico, ácido 2-naftalenosulfônico, ácido

4-toluenosulfônico, ácido canforsulfônico, ácido 4-metilbiciclo[2.2.2]-oct-2- eno-1-carboxílico, ácido glucoheptônico, ácido 3-fenilpropiônico, ácido trimetilacético, ácido butilacético terciário, ácido Iauril sulfúrico, ácido glucônico, ácido glutâmico, ácido hidroxinaftoico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido mucônico, e similares; ou (2) sais formados quando um próton acídico presente no composto de origem ou é substituído por um íon de metal, por exemplo, um íon de metal alcalino, um íon alcalino-terroso, ou um íon de alu5 mínio; ou coordenado com uma base orgânica, tal como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, trometamina, N-metilglucamina, e similares. Deve ser compreendido que todas as referências a sais farmaceuticamente aceitáveis incluem formas de adição de solvente (solvatos), ou formas de cristal (polimorfos), conforme aqui definido, do mesmo sal de adição ácido.

"Farmaceuticamente aceitável" significa que a porção é útil na

preparação de uma composição farmacêutica que é geralmente segura, nãotóxica, e nem biologicamente nem, de outro modo, indesejável.

Preparações de forma sólida incluem pós, comprimidos, pílulas, cápsulas, supositórios, e grânulos dispersíveis. Um transportador sólido po15 de ser uma ou mais substâncias que podem também agir como diluentes, agentes aromatizantes, solubilizadores, lubrificantes, agentes de suspensão, ligantes, conservantes, agentes desintegrantes de comprimido, ou um material de encapsulamento. Nos pós, o transportador geralmente é um sólido finamente dividido que é uma mistura com o componente ativo finamente 20 dividido. Nos comprimidos, o componente ativo geralmente é misturado com o transportador tendo a capacidade de ligação necessária em proporções adequadas, e compactado na forma e tamanho desejados. Transportadores adequados incluem, mas não estão limitados a, carbonato de magnésio, estearato de magnésio, talco, açúcar, lactose, pectin, dextrin, amido, gelatina, 25 tragacanto, metilcelulose, sódio carboximetilcelulose, uma cera de baixa fusão, manteiga de cacau, e similares. As preparações de forma sólida podem conter, em adição ao componente ativo, corantes, aromatizantes, estabilizadores, tampões, adoçantes artificiais e naturais, dispersantes, espessadores, agentes de solubilização, e similares.

As formulações líquidas também são adequadas para adminis

tração oral, incluindo emulsões, xaropes, elixires, soluções aquosas, suspensões aquosas. Estas incluem preparações de forma sólida que são pretendidas para serem convertidas em preparações de forma líquida imediatamente antes do uso. Emulsões podem ser preparadas em soluções, por exemplo, em soluções aquosas de propileno glicol, ou podem conter agentes de emulsificação, tais como lecitin, sorbitan mono-oleato, ou acácia. As soluções aquosas podem ser preparadas por dissolução do componente ativo 5 em água e adição de corantes adequados, aromatizantes, estabilizantes, e agentes de espessamento. As suspensões aquosas podem ser preparadas por dispersão do componente ativo finamente dividido em água com material viscoso, tais como gomas naturais ou sintéticas, resinas, metilcelulose, sódio carboximetilcelulose, e outros agentes de suspensão bem-conhecidos.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para

administração parenteral (por exemplo, por injeção, por exemplo, injeção de massa ou infusão contínua), e podem ser apresentados em forma de dose unitária em ampolas, seringas pré-enchidas, infusão de volume pequeno, ou em recipientes de multidose com um conservante adicionado. As composições podem tomar formas tais como suspensões, soluções, ou emulsões em veículos oleosos ou aquosos, por exemplo, soluções em polietileno glicol aquoso. Exemplos de transportadores oleosos ou não-aquosos, diluentes, solventes ou veículos, incluem propileno glicol, polietileno glicol, óleos vegetais (por exemplo, óleo de oliva), e ésteres orgânicos injetáveis (por exempio, oleato de etila), e podem conter agentes formulatórios, tais como agentes conservantes, umedecedores, emulsificantes ou de suspensão, estabilizantes e/ou dispersantes. Alternativamente, o ingrediente ativo pode estar na forma de pó, obtido por isolamento asséptico de sólido estérila, ou por liofilização de solução para constituição antes do uso com um veículo adequado, por exemplo, água, livre de pirogênio, estéril.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração tópica à epiderme como unguentos, cremes ou loções, ou como um emplastro transdermal. Unguentos e cremes podem, por exemplo, serem formulados com uma base aquosa ou oleosa com a adição de agen30 tes de espessamento e/ou gelificação adequados. As loções podem ser formuladas com uma base aquosa ou oleosa e, em geral, também conterão um ou mais agentes de emulsificação, agentes de estabilização, agentes de dispersão, agentes de suspensão, agentes de espessamento, ou agentes de coloração. Formulações adequadas para administração tópica na boca incluem pastilhas compreendendo agentes ativos em uma base aromatizada, usualmente sucrose e acácia ou tragacanto; pastilhas compreendendo o ingrediente ativo em uma base inerte, tal como gelatina e glicerina ou sucrose 5 e acácia; e lavadores de boca compreendendo o ingrediente ativo em um transportador líquido adequado.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração como supositórios. Uma cera de baixa fusão, tal como uma mistura de ácido graxo glicerídeos ou manteiga de cacau é primeiro fundida, 10 e o componente ativo é disperso homogeneamente, por exemplo, por agitação. A mistura homogênea fundida é, em seguida, derramada em moldes dimensionados convenientes, permitida resfriar, e solidificar.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração vaginal. Supositórios vaginais, tampões, cremes, géis, pastas, espumas ou pulverizações contendo, em adição ao ingrediente ativo, tais transportadores, são conhecidas na técnica como sendo apropriadas.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração nasal. As soluções ou suspensões são aplicadas diretamente à poço nasal por meios convencionais, por exemplo, com um gotejador, pi20 peta ou pulverizador. As formulações podem ser providas em uma forma simples ou em multidose. No último caso de um gotejador ou pipeta, isto pode ser alcançado pela administração ao paciente de um volume predeterminado apropriado da solução ou suspensão. No caso de um pulverizador, isto pode ser alcançado, por exemplo, por meio de uma bomba de pulverização 25 de atomização de medição.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração aerosol, particularmente ao trato respiratório, e incluindo administração intranasal. O composto geralmente terá um tamanho de partícula pequeno, por exemplo, da ordem de cinco (5) mícrons ou menos. Tal ta30 manho de partícula pode ser obtido por meios conhecidos na técnica, por exemplo, por micronização. O ingrediente ativo é provido em um acondicionador pressurizado com um propelente adequado, tal como um clorofluorocarbono (CFC), por exemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, ou diclorotetrafluoroetano, ou dióxido de carbono, ou outro gás adequado. O aerossol pode convenientemente também conter um surfactante, tal como lecitin. A dose de fármaco pode ser controlada por uma válvula medida. Alternativamente os ingredientes ativos podem ser providos em uma forma de 5 um pó seco, por exemplo, uma mistura de pó do composto em uma base de pó adequada, tal como lactose, amido, derivados de amido, tais como hidroxipropilmetil celulose e polivinilpirrolidina (PVP). O transportador de pó formará um gel na poço nasal. A composição de pó pode ser apresentada na forma de dose unitária, por exemplo, em cápsulas ou cartuchos de, por e10 xemplo, gelatina ou acondicionamentos de bolha dos quais o pó pode ser administrado por meio de um inalador.

Quando desejado, as formulações podem ser preparadas com revestimentos entéricos adaptados para administração de liberação sustentada ou controlada do ingrediente ativo. Por exemplo, os compostos da presente invenção podem ser formulados em dispositivos de liberação de fármaco transdermais ou subcutâneos. Estes sistemas de distribuição são vantajosos quando liberação sustentada do composto é necessária, e quando a flexibilidade do paciente com um regime de tratamento é crucial. Os compostos em sistemas de distribuição transdermais são frequentemente fixados a um suporte sólido de adesivo de pele. O composto de interesse pode também ser combinado com um intensificador de penetração, por exemplo, Azone (1-dodecilaza-ciclo-heptan-2-ona). Os sistemas de distribuição de liberação sustentada são inseridos subcutaneamente na camada subdermal por cirurgia ou injeção. Os implantes subdermais encapsulam o composto em uma membrana solúvel de lipídeo, por exemplo, borracha de silicone, ou um polímero biodegradável, por exemplo, ácido poliáctico.

As formulações adequadas junto com transportadores farmacêuticos, diluentes e excipientes, são descritas em Remington: The Science e Practice of Pharmacy 1995, editado por E. W. Martin, Mack Publishing Com30 pany, 19th edition, Easton, Pennsilvania. Os cientistas técnicos em formulação podem modificar as formulações dentro dos ensinamentos do relatório descritivo para proporcionar numerosas formulações para uma rota particular de administração sem tornar as composições da presente invenção instáveis, ou comprometendo sua atividade terapêutica.

A modificação dos presentes compostos para torná-los mais solúveis em água ou outro veículo, por exemplo, pode ser facilmente acompanhada por modificações menores (formulação de sal, esterificação, etc.), que 5 são bem-conhecidas pelo técnico no assunto. Está também bem dentro do técnico no assunto modificar a rota de administração e regime de dosagem de um composto particular de modo a controlar as farmacocinéticas dos presentes compostos para efeito benéfico máximo nos pacientes.

O termo "quantidade terapeuticamente eficaz", conforme aqui usado, significa uma quantidade requerida para reduzir sintomas da doença em um indivíduo. A dose será ajustada aos requerimentos do indivíduo em cada caso particular. Esta dosagem pode variar dentro de limites amplos dependendo de numerosos fatores, tais como a severidade da doença a ser tratada, a idade e condição de saúde geral do paciente, outros medicamentos com os quais o paciente está sendo tratado, a rota e forma de administração, e as preferências e experiência do médico envolvido. Para administração oral, uma dosagem diária de entre cerca de 0,01 e cerca de 1000 mg/kg de peso corpóreo por dia deve ser apropriada em monoterapia, e/ou em terapia de combinação. Uma dosagem diária preferida está entre cerca de 0,1 e cerca de 500 mg/kg de peso corpóreo, mais preferido 0,1 e cerca de 100 mg/kg de peso corpóreo, e, mais preferido, 1,0 e cerca de 10 mg/kg de peso corpóreo por dia. Desse modo, para administração a uma pessoa de 70 kg, a faixa de dosagem seria cerca de 7 mg a 0,7 g por dia. A dosagem diária pode ser administrada como uma dosagem simples, ou em dosagens divididas, tipicamente entre 1 e 5 dosagens por dia. Geralmente, o tratamento é iniciado com dosagens menores que são menos do que a dose ótima do composto. Em seguida, a dosagem é aumentada por pequenos incrementos até que o efeito ótimo para o paciente individual seja alcançado. Um técnico no assunto no tratamento de doenças aqui descrito será capaz, sem experimentação indevida e confiança no conhecimento pessoal, experiência e as revelações deste pedido, de determinar uma quantidade terapeuticamente eficaz dos compostos da presente invenção para uma dada doença e paciente. Nas concretizações da invenção, o composto ativo ou um sal pode ser administrado em combinação com um ou mais agentes antivirais, tais como um inibidor de nucleoside de transcriptase reversa, outro inibidor de não-nucleoside de transcriptase reversa, um inibidor de HIV protease, ou um inibidor de entrada viral. Quando o composto ativo ou seu derivado ou sal são administrados em combinação com outro agente antiviral, a atividade pode ser aumentada sobre o composto de origem. Quando o tratamento é terapia de combinação, tal administração pode ser concorrente ou seqüencial com relação àquela dos derivados de nucleoside. "Administração concorrente", conforme aqui usado, desse modo, inclui administração dos agentes ao mesmo tempo, ou em tempos diferentes. A administração de dois ou mais agentes ao mesmo tempo pode ser alcançada por uma formulação simples contendo dois ou mais ingredientes ativos, ou por administração substancialmente simultânea de duas ou mais formas de dosagem com um agente ativo simples.

Os métodos da presente invenção são pretendidos para uso |

I

com qualquer mamífero que pode experimentar os benefícios dos métodos da invenção. Entre tais mamíferos estão os humanos, embora a invenção não seja pretendida para ser assim limitada, e é aplicável a usos veteriná20 rios. Desse modo, de acordo com a invenção, "mamíferos", ou "mamífero em necessidade", incluem humanos, bem como mamíferos não-humanos, particularmente animais domésticos incluindo, sem limitação, gatos, cães, e cavalos.

Exemplo 1

5-Butil-3-(3,3-diflúor-ciclobutilmetil)-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4- metil-piperidin-4-il]-1 -oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona (IV-I, ESQUEMA A)

etapa a - 1 (3,3-Diflúor-ciclobutil)-metanol (20) - A uma pasta fluida de NaBH4 (55 mg, 1,47 mmol) em THF (5mL) resfriada a O0 C, foi adi30 cionada gota a gota uma solução de 3,3-diflúor-ciclobutano ácido carboxílico (CASRN 107496-54-8, 0,2 g, 1,47 mmol) em THF (5 mL). A mistura de reação foi agitada por 1 hora, resfriada a O0 C, e BF3-Et2O (0,18 mL) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 18 horas à temperatura ambiente, resfriada a O0C1 em seguida resfriada rapidamente por adição gota a gota de 95% de EtOH. Após 1 hora os solventes foram evaporados em vácuo, o resíduo foi repartido entre DCM e salmoura. A camada orgânica foi secada (MgSO4), filtrada e concentrada para proporcionar 0,12 g de (3,3-diflúor5 ciclobutil)-metanol (22).

etapa b - éster de ácido 2 tolueno-4- sulfônico 3,3-diflúorciclobutilmetila (24)

- A uma solução de 22 (0,12 g, 0,98 mmol) e piridina (3 mL) resfriada a O0 C, foi adicionado cloreto de p-toluenosulfonila (0,3 g, 1,57 mmol) 10 em várias porções. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas, derramada em 10 mL de gelo-água e extraída duas vezes com DCM (3x10 mL). Os extratos orgânicos combinados foram secados (MgSO4), filtrados, concentrados em vácuo. O produto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com EtOAc/hexano (1:10) para proporcionar 0,1 g 15 de 24.

etapa 12 - Uma solução de A-6b (2,5802 g, 6,1 mmols), TFA (1,7 mL, 61 mmols) e DCM (25 mL) foi agitada durante a noite à temperatura ambiente, em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi triturado com tolueno e reevaporado. O resíduo foi repartido entre 2M de NaOH e EtOAc. 20 A camada orgânica foi isolada e uma camada aquosa foi concentrada a metade de seu volume, tratada com NaCI sólido, em seguida retro-extraída três vezes com EtOAc. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura e secados (MgSO4) para proporcionar 1,3 g (rendimento 67%) de A-9a como uma espuma esbranquiçada: MS [M+1]+ 324 e [2M+1]+ 647.

etapa 13 - A uma solução de A-9a (1,32 g, 4 mmols) e 4,6-

dimetil-pirimidina-5-ácido carboxílico (0,745 g, 5 mmols) e DMF (10 mL) foram adicionados seqüencialmente HOBt (0,717 g, 5 mmols), EDCI (1,017 g, 5 mmol) e DIPEA (2,1 mL, 12 mmols). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 72 horas. O solvente foi removido sob alto vácuo 30 e o resíduo foi suspenso em EtOAc e tratado com uma pequena quantidade de NaHCO3 saturado. A camada aquosa foi retro-extraída três vezes com EtOAc e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas (MgSO4)1 filtradas e evaporadas. O produto bruto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM/MB (100-60% DCM MB = DCM/MeOH/NH4OH, 60: 10: 1) para proporcionar 0,90 g (48%) de A-9b (Ra = 4,6-dimetil-pirimidin-5-ila) como uma espuma branca: MS [M+1]+=458.

etapa 14 - A uma solução de A9-b da etapa 13 (80 mg, 0,175

mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado NaH (7 mg, 0,29 mmol). Após agitação por 15 minutos, uma solução de 24 (100 mg, 0,36 mmol) e DMF (1 mL) foi adicionada, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas. O DMF foi removido in vácuo, e o resíduo foi repartido entre EtOAc e 10 água. A camada orgânica foi secada (MgSO4), filtrada, concentrada in vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com MeOH/DCM (1:10) para proporcionar 10 mg de IV-1: M+ = 562.

Exemplo 2

5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4- ilj-S-íírans-S-metóxi-ciclo-hexilmetiO-l -oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2- ona (1-1)

(3-Metóxi-ciclo-hexiD-metanol (26) - Preparado de 3-metóxi-ciclo-hexano ácido carboxílico (1,2 g, 7,59 mmols) conforme descrito na etapa a do Exemplo 1 para proporcionar 1 g (90%) de 26.

3-metóxi-ciclo-hexilmetila éster de ácido fr-ans-tolueno-4-sulfônico (28) Preparado de 26 (1 g, 6,9 mmols) conforme descrito na etapa b do Exemplo 1. Os isômeros cis e trans foram separados por cromatografia de SiO2 eluindo com EtOAc/hexano (1:4) para proporcionar 150 mg of ácido transtolueno-4-sulfônico 3-metóxi-ciclo-hexilmetila éster e 150 mg de 28.

etapa 10 - A uma solução de A-6b (0,21 g, 0, 5 mmol) em DMF

(3 mL) foi adicionado NaH (30 mg) e a suspensão resultante agitada por 15 minutos. Uma solução de 28 (150 mg, 0,5 mmol) foi adicionada, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas. O DMF foi removido in vácuo e o resíduo foi repartido entre EtOAc e água. A camada orgâ30 nica foi secada (MgSO4), filtrada, concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com MeOH/DCM (1:10) para proporcionar 130 mg de A-7 (R' = frans-3-metóxi-ciclo-hexilmetil).

etapa 11 - Uma solução de A-7 da etapa 10 (130 mg, 0, 23 mmol) TFA (1 mL) e DCM (5 mL) foi agitada por 1 hora, em seguida concentrada in vácuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (20 mL) e lavado com Na2CO3 saturado (3x5 mL). A camada orgânica foi secada (MgSO4), filtrada, concentrada e secada in vácuo para proporcionar 80 mg de A-8à (R' = frans-3-metóxi-ciclo-hexilmetil).

etapa 12 - A uma solução de A-8a da etapa 11 (80 mg, 0,178 mmol), 4,6-dimetil-pirimidina-5-ácido carboxílico (50 mg, 0,33 mmol) e HOBT (45 mg, 0,33 M) em DMF (2 mL) foi adicionado EDCI (63 mg, 0,33 mmol), seguido por DIPEA (0,15 mL). A mistura de reação foi agitada a 40° 10 C por 4 horas, em seguida à temperatura ambiente por 18 horas e, finalmente, concentrada in vácuo. O resíduo foi diluído com EtOAc (80 mL), lavado com IN NaOH (10 mL), seguido por salmoura (10 mL). A camada orgânica foi secada (MgSO4), filtrada, concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com MeOH/DCM (1:10) para proporcionar 25 mg 15 de 1-1: M+=584.

I-2 foi preparado analogamente (M+=584), exceto na etapa 10, 3- metóxi-ciclo-hexilmetila éster de ácido c/'s-tolueno-4-sulfônico foi usado no lugar de 3-metóxi-ciclo-hexilmetila éster de ácido trans-tolueno-4-sulfônico. Exemplo 3

5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-

il]-3-(frans-4-metóxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2- ona (I-3)

4-metóxi-ciclo-hexilmetila éster de ácido cis- e trans -tolueno-4-sulfônico (30) foi preparado de ácido carboxílico de 4-metóxi-ciclo-hexano conforme descrito no Exemplo 2. Os isômeros cis e trans foram separados por cromatografia de SiO2 eluindo com EtOAc/hexano (1:4).

I-3 (M+=584) foi preparado de A-6b conforme descrito nas etapas 10-12 do Exemplo 2, exceto na etapa 10, o 3-metóxi-ciclo-hexilmetila éster o ácido frans-tolueno-4-sulfônico foi substituído com trans 30.

5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-

il]-3-(c/'s-4-metóxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona foi preparado analogamente, exceto na etapa 10, o 4-metóxi-ciclo-hexilmetila éster de ácido íra/is-tolueno-4-sulfônico foi substituído com cis 30 para proporcionar 1-2: Μ+=584.

5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4- il]-3-(írans-4-etóxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona e 5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-3-(c/s-4- 5 etóxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona foram preparados analogamente, exceto que 30 foi substituído por etila éster ácido trans- e cis- 4-etóxi-ciclo-hexano carboxílico, para proporcionar I-7 (M+=598) e I-6 (M+=598), respectivamente. Os cis e trans-tosilatos foram separados por cromatografia de SiO2.

Exemplo 4

5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4- il]-3-(c/s-4-metóximetóxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan

2-ona (I-8)

Ácido 3 tolueno-4-sulfônico 4-metóximetóxi-ciclo-hexilmetila éster Ácido 4-Metóximetóxi-ciclo-hexano carboxílico etila éster (32)

A uma solução de ácido 4-hidróxi-ciclo-hexano carboxílico etila éster (1 g, 5,8 mmols) e DIPEA (4,2 mL, 0,024 mol), foi adicionado cloro-metóxi-metano (1,89 g, 0,0235 mol). A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente, em seguida concentrada em vácuo. O resíduo foi dissol20 vido em DCM (50 mL), lavado com água (2x10 mL), secado (MgSO4), filtrado e concentrado para dar 1,2 g de 32.

(4-Metóximetóxi-ciclo-hexil)-metanol (34) - A uma solução de 32 (1,2 g, 5,5 mmols) em THF (30 mL) resfriada a -20° C, foi adicionada gota a gota uma solução de LiAIH4 em THF (1M de solução, 16,5 mL). A agitação 25 foi continuada a -20° C por 1 hora, em seguida aquecida à temperatura ambiente e agitada por 18 horas. A mistura de reação foi resfriada a -5o C, resfriada rapidamente com 20% de NaHSO4 aquoso, agitada à temperatura ambiente por 1 hora, diluída com EtOAc (50 mL) e agitada por 30 minutos. O precipitado resultante foi filtrado, os solventes evaporados e o resíduo seca30 do in vácuo para proporcionar 0,95 g de 34.

4-metóximetóxi-ciclo-hexilmetila éster do ácido tolueno-4- sulfônico (36) - Preparado de 34 (0,95 g, 5,4 mmols) e cloreto a ptoluenosulfonil (1,3 g, 7 mmols) conforme descrito no Exemplo 1. Os isômeros cis- e trans- foram separados por cromatografia de SiO2 eluindo com EtOAc/hexano (1:4) para proporcionar os tosilatos cis e trans.

I-8 (M+ = 614) e I-9 (M+ = 614) foram preparados de A-9b (Rb =

4-metoximetóxi-ciclo-hexilmetila) conforme descrito na etapa 14 do Exemplo 1, exceto que tosilato difluorociclobutil metóxi foi substituído por ou cis 36 ou trans 36.

Exemplo 5

5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4- il]-3-(frans-4-hidróxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2- ona (I-4)

Etila éster do ácido 4-(terc-Butil-dimetil-silanilóxi)-ciclo-hexano carboxílico (38) - A uma solução de etila éster do ácido 4-oxi-ciclo-hexano carboxílico (CASRN 17159-80-7,1,7 g, 0,01 mol) em DMF (14 mL) foi adicionado DMAP (58 mg, 0, 47 mmol), TEA (1.54 mL) e cloreto de ferc-butil-dimetilsilila (1,65 15 g, 0,011 mol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas, derramada em gelo (10 g), extraída com EtOAc (3 x 50 mL). Os extratos orgânicos foram secados (MgSO4), filtrados e concentrados. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com EtOAc/hexano (1:20) para proporcionar 2,25 g (79%) de ácido etila éster 4-(terc-butil-dimetil20 silanilóxi)-ciclo-hexano carboxílico (38) como óleo incolor.

O éster 38 foi reduzido ao álcool e convertido ao tosilato 40 conforme descrito no Exemplo 1. Os isômeros cis- e trans- foram separados por cromatografia de SiO2 eluindo com EtOAc/hexano (1:20).

5-Butil-3-[f/"aA7s- 4-(terf-butil-dimetil-silanilóxi)-ciclo-hexilmetila]-9- 25 [1 -(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-1 -oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona foi preparado de ácido tolueno-4-sulfônico, 40 (200 mg, 0,5 mmol) e A-9b (Rb = 4,6-dimetil-pirimidin-5-ila, 170 mg, 0,38 mmol) conforme descrito na etapa 14 do Exemplo 1 para proporcionar A-10 (R1 = frans-4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-ciclo-hexilmetil e R" = 4,6-dimetil30 pirimidin-5-ilcarbonil).

Uma solução de A-10 a partir da etapa anterior (0,15 g, 0,219 mmol) na mistura de H2SO4 (0,5 mL) e MeCN (2 mL) foi agitada por 18 horas à temperatura ambiente, em seguida concentrada in vácuo. O resíduo foi dissolvido em EtOAc (15 mL) e lavado com NaHC03 saturado. A camada orgânica foi secada (MgSO4)1 filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com MeOH/DCM (1:10) para proporcionar 100 mg de I-4 como espuma branca: MS [M+] = 570.

5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-

il]-3-(c/'s-4-hidróxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona (1-5) foi preparado analogamente partindo-se de c/s-40 para proporcionar 1-5: MS [M+] = 570.

1-10 pode ser preparado analogamente exceto que A-9b (Rb = 4,6-dimetil-pirimidin-5-il) foi substituído com a amida correspondente no qual Rb = ácido 3-ciano-2,4-dimetil-nicotínico.

Exemplo 6

5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4- il]-3-(4-oxo-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona (IV-2) A uma solução de I-5 (720 mg, 12,6 mmols) e DCM (50 mL) foi

adicionado peneiras moleculares de 4Â e NMM (0,42 g, 3,6 mmols). Após agitação da mistura por 10 minutos, tetrapropilamônio perrutenato (211 mg, 0,0006 M) foi adicionado. Após 1 hora, a solução se tornou negra e a reação foi quase completa. A mistura de reação foi diluída com DCM (50 mL), Iava20 da com solução de Na2S03 (10 mL) e com salmoura (10 mL). A camada orgânica foi secada (MgSO4), filtrada e concentrada in vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com MeOH/DCM (1:10) para proporcionar 500 mg de IV-2: MS [M+]=567.

Exemplo 7

8-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-

il]-3-(4-hidróxi-4-metil-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-9-aza-espiro[5.5]undecan-2-ona (IV-4)

A uma solução de IV-2 (0,15 g, 0,26 mmol) em THF (10 mL) resfriada a -30° C foi adicionado MeMgI (0,25 mL, 0,75 mmol, 3M em Et2O). A 30 mistura de reação foi agitada a -30° C por 90 minutos, em seguida NH4CI aquoso (4 mL), água (2 mL) e EtOAc (10 mL) foram adicionados seqüencialmente. A camada orgânica foi lavada com salmoura (5 mL), secada (MgSO4), filtrada e concentrada in vácuo. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com DCM/MeOH/NH4OH (450:50:0.5) para proporcionar 47 mg de IV-4 como uma espuma branca: MS [M+] = 584.

Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]

3-(4-metóxiimino-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-9-aza-espiro[5.5]undecan-2-ona (IV11)

A uma solução de cloridrato metoxiamina (250 mg, 3,24 mmols) em 60% (v/v) de MeOH aquoso (4,5 mL) foi adicionado NaOAc (0,27 g, 3,27 mmols). Uma solução de IV-2 (96 mg, 0,16 mmol) em 60% de MeOH aquoso (5 mL) foi adicionada gota a gota à temperatura ambiente. A mistura foi agi10 tada por 18 horas, em seguida EtOAc (5 mL) foi adicionado. A camada orgânica foi lavada com água (2x5 mL), secada (MgSO4), filtrada e concentrada in vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com MeOH/DCM (1:10) para proporcionar 48 mg de IV-11: MS M+=597.

8-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4- il]-3-(4-etoxiimino-ciclo-hexilmetil)-1 -oxa-9-aza-espiro[5.5]undecan-2-ona foi preparado analogamente exceto que MeONH3 Cl foi substituído por EtONH3 Cl para proporcionar IV-12: MS M+=610.

Exemplo 8

5-Butil-9-[1-(2,4-dimetil-piridina-3-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]3-(hexa-hidro-furo[2,3-b]furan-3-ilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan

2-ona (II-5)

Q

42 44 ,- 46a: R = H

l—46b: R = Ts

(Hexa-hidro-furo[2,3-b]furan-3-il)-metanol (46a) foi preparado N,N’-ò/'s(salicilideno)-etilenodiamino-cobalto (II) mediado por ciclização radical intramolecular e subsequente prendimento com oxigênio molecular. (T. Bamhaoud e J. Prandi, Chem. Commun. 1996 1229; S. Mayer et al., Tetrahedron 1998 54:8753)

O tosilato correspondente 46b foi preparado conforme descrito na etapa b do Exemplo 1. O resíduo de tosilato bruto foi purificado por cromatografia instantânea eluindo com EtOAc/hexano (1:10) para proporcionar 46b como uma mistura diastereomérica. Esta mistura foi separada por HPLC preparativa usando uma coluna Chiralpak IA e eluindo com 40% de EtOH/hexano. Os tosilatos diastereoméricos foram separados limpamente: pico 1 tinha tempo de retenção de 33,7 minutos, e o pico 2 tinha tempo de retenção de 48,5 minutos.

A uma solução de A-9b (Rb = 4,6-dimetil-pirimidin5-ila, 91 mg, 0,2 mmol) e DMF (2 mL) foi adicionado NaH (16 mg, 0,66 mmol). Após a reação agitada por 15 minutos, uma solução de 46b (pico 1, 100 mg, 0,33 mmol) e DMF (1 mL) foi adicionada e a mistura resultante foi agitada à tem10 peratura ambiente por 18 horas. O DMF foi removido in vácuo e o resíduo foi repartido entre EtOAc e água. A camada orgânica foi secada (MgSO4), filtrada, concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com MeOH/DCM (1:10) para proporcionar 96 mg de II-5: MS [M+] = 584.

O outro diastereômero foi preparado identicamente usando pico 2 a partir da separação quiral dos tosilatos para proporcionar II-6: MS [M+] = 584.

Exemplo 9

5-Butil-9-[1-(2,4-dimetil-piridina-3-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]

3-(hexa-hidro-furo[2,3-b]furan-3-ilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan2-ona (II-8)

etapa 10 - Alquilação de A-6b (0,2 g, 0,47 mmol) com 46b (mistura de diastereômeros, 0,25 g, 0,83 mmol) do Exemplo 8 usando o procedimento descrito na etapa 10 do Exemplo 2 proporcionou 180 mg de A-7 (R' = hexa-hidro-furo[2,3-b]furan-3-ilmetila).

O composto do título foi preparado por desproteção do produto

da etapa 10 conforme descrito na etapa 11 do Exemplo 2. O sal de trifluoroacetato de 5-butil-9-[1 -(2,4-dimetil-piridina-3-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-3- (hexa-hidro-furo[2,3-b]furan-3-ilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2- ona (II-8) foi preparado pelo procedimento descrito na etapa 12 do Exemplo 30 2, exceto que ácido 4,6-dimetil-pirimidina-5-carboxílico foi substituído com ácido 2,4-dimetil nicotínico. O produto foi purificado por HPLC preparativa (acetonitrila-0,01 M de TFA)

5-{4-[5-Butil-3-(hexa-hidro-furo[2,3-b]furan-3-ilmetil)-2-oxo-1-oxa3,9-diaza-espiro[5.5]undec-9-il]-4-metil-piperidina-1-carbonil}-4,6-dimetilpiridina-2-carbonitrila foi preparada analogamente, exceto que na etapa 12, ácido 2,4-dimetil nicotínico foi substituído por ácido 6-ciano-2,4-dimetilnicotínico (CASRN 871492-97-6). O produto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com MeOH/DCM (1:10) para proporcionar 11-7.

Exemplo 10

4-{5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin

4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3-ilmetil}-benzonitrila (IV-3)

O composto do título foi preparado de A-6b conforme descrito nas etapas 10-12 do Exemplo 2, exceto que na etapa 10, 3-metóxi-ciclohexilmetila éster ácido frans-tolueno-4-sulfônico foi substituído com brometo

4-ciano-benzil. O produto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com MeOH/DCM (1:10) para proporcionar 60 mg de IV-3: MS [M+] = 573. ExemploH

5-Butil-9-[1 -(2,4-dimetil-piridina-3-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]

3-pirimidin-2-ilmetil-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona (IV-5) Metanosulfonato pirimidin-2-ilmetila (48) - A uma solução de pirimidin-2-ilmetanol (CASRN 42839-09-8, 2 g, 1,8 mmol) e DCM (1 mL) e solução resfriada a O0 C foi adicionado seqüencialmente TEA (0,062 mL) e cloreto de me

tanossulfonila (0,2 mL). A mistura de reação foi agitada por 3 horas, em seguida lavada com NH4CI aquoso. O solvente foi removido in vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com MeOH/DCM (1:20) para proporcionar 0,2 g (58%) de 48.

O composto do título foi preparado pelo procedimento descrito 25 nas etapas 10-12 do Exemplo, 2 exceto que na etapa 10, tosilato de 3- metóxi-ciclo-hexilmetil foi substituído com 48, e na etapa 12, ácido 4,6- dimetil-pirimidina-5-carboxílico foi substituído com ácido 2,4-dimetilnicotínico. O produto foi purificado por HPLC preparativa (acetonitrila-0,01M TFA) para proporcionar IV-5 como o sal de trifluoroacetato: MS [M+] = 549.

Exemplo 12

5-{4-[7-Butil-9-(4,6-dimetil-pirimidin-5-ilmetil)-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3-il]

4-metil-piperidina-1-carbonil}-4,6-dimetil-piridina-2-carbonitrila (IV-6) (4,6-Dimetil-pirimidin-5-iO-metanol (50) - Uma solução de ácido 4,6-dimetil-pirimidina-5-carboxílico, etila éster (CASRN 305794-79-0, 0,6 g, 3,61 mols) e THF (10 mL) foi resfriada a -50° C e DIBAL (13 mL, 0,013 mol,

1 M em tolueno) foi adicionada gota a gota, e agitação foi continuada a 50°C por 2 horas. A reação foi resfriada rapidamente com gelo/NH4CI, e a 5 mistura extraída com EtOAc (2 x 20 mL). Os extratos combinados foram lavados com salmoura (10 mL), secados (MgSO4), filtrados e concentrados para proporcionar 0,33 g (67%) de 50.

Ácido 2 metanossulfônico, 4,6-dimetil-pirimidin-5-ilmetila éster (52) - A uma solução de (4,6-dimetil-pirimidin-5-il)-metanol (0,33 g, 2,4 10 mmols) e DCM (3 mL) resfriada a O0 C, foram adicionados seqüencialmente TEA (0,18 mL) e cloreto de metanosulfonila (0,3 mL). A mistura de reação foi agitada por 3 horas, lavada com NH4CI aquoso e concentrada em vácuo para proporcionar 0,38 g (78%) do 52.

O composto do título foi preparado pelo procedimento descrito 15 nas etapas 10-12 do Exemplo 2, exceto que na etapa 10, tosilato de 3- metóxi-ciclo-hexilmetil foi substituído com 52, e na etapa 12, ácido 4,6- dimetil-pirimidina-5-carboxílico foi substituído com ácido 6-ciano-2,4-dimetilnicotínico. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (acetonitrila0,01 M TFA) para proporcionar IV-6 como o sal de trifluoroacetato: MS [M+] = 20 586.

Exemplo 13

5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-3-(3-oxabiciclo[3.1.0]hex-6-ilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona (11-1)

Ácido 3-Oxa-biciclo[3.1 .QIhexano-6-carboxílico etila éster(54) 25 Uma suspensão agitada de 2,5-dihidrofuran (14 g, 200 mmols) e Cu(ll)(acac) (1,05 g, 4 mmols) foi aquecida a 90-100° C e uma solução de etil diazoacetato (27,3 g, 240 mmols) em PhH (240 mL) foi adicionada vagarosamente por 3 horas. Após a adição ser completada, ela foi resfriada à temperatura ambiente e os solventes evaporados. O resíduo foi dissolvido em éter de petróleo 30 e adsorvido em uma coluna de alumina neutra (240 g de alumina por 10 mmols de diazoéster) e eluído com 500 mL de éter de petróleo e 500 mL de Et2O. O solvente foi removido e proporcionando éster impuro que foi destilado à aproximadamente 105° C (18-19 mm Hg). A destilação foi adicionalmente purificada por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de EtOAc/hexano (0 a 30% de EtOAc) para proporcionar 15,39 g (45,8%) de 54 (I. Reichelte H.J. Reissig, Chem. Ber. 1983 116:3895).

(3-Oxa-biciclof3.1.01hex-6-il)-metanol (56)- Uma solução 1M de 5 LiAIH4 em THF (16,77 mL, 16,77 mmols) foi resfriada em um banho de geloágua/acetona e uma solução de 56 (2,62 g, 16,77 mmol) em THF (25 mL) foi adicionada vagarosamente com agitação. A reação foi aquecida à temperatura ambiente por 30 minutos e agitada por 1 hora. A reação foi resfriada rapidamente por adição de porção vagarosa de 4,8 g de Na2SO4-IOH2O. Agi10 tação foi continuada por 1 hora adicional após a reação vigorosa assentar. MgSO4 foi adicionado e os sólidos foram removidos por filtração, enxaguados com THF fresco e os solventes evaporados. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de EtOAc/hexano (0 a 50% EtOAc) para proporcionar 0,98 g (51,3 %) de 56 como um líquido incolor.

etapa 10 - A uma solução de 56 (0,98 g, 8,58 mmol) e uma mis

tura 1:1 de DCM/piridina (10 mL), foi adicionado tosil cloreto (1,72 g, 9,01 mmols) com agitação. Agitação foi continuada por 18 horas à temperatura ambiente. Nenhum tosilato observado por LCMS ou TLC. A polaridade do produto e do MS sugere que o produto era o sal de piridinium. O solvente foi evaporado e o resíduo usado sem tratamento adicional.

Uma suspensão de sal de piridinium putativo (assumido 8,58 mmols), A-6b (2,42 g, 5,72 mmols), NaOH (0,92 g, 22,89 mmols) e tetrabutilamônio brometo (0,092 g, 0,28 mmol) em tolueno (30 mL) foi aquecido a 50° C com agitação por 24 horas. A solução foi resfriada e NaHCO3 aquoso sa25 turado foi adicionado e o produto extraído com DCM (4 x 50 mL). Os extratos combinados foram secados (MgSO4), filtrados e concentrados. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM/MB (0 a 30% MB; MB=60:10:1; DCM:MeOH:NH4OH) para proporcionar 1,12 g (38%) de A-7 (R' = 3-oxa-biciclo[3.1.0]hex-6-ilmetil) como uma espuma ama30 rela pálida: MS [M+H]+=520,2.

O composto do título foi preparado de A-7 na etapa 10 utilizando o procedimento descrito nas etapas 11 e 12 do Exemplo 2. O produto bruto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM/MB (0 a 30% de MB; MB=60:10:1, DCM:MeOH:NH4OH) para proporcionar 0,249 g de 11-1 como uma espuma clara: MS (ESI) [M+H]+=554.

5-(4-{(S )-5-B util-3-[( 1 R,5S,6S)-1-(3-oxa-biciclo[3.1.0]hex-6- il)metil]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-9-il}-4-metil-piperidina-1- 5 carbonil)-4,6-dimetil-piridina-2-carbonitrila foi preparada analogamente, exceto que na etapa 12, ácido 4,6-dimetil-pirimidina-5-carboxílico foi substituído com ácido 2,4-dimetil-nicotínico para proporcionar II-2: MS (ESI) [M+H]+=578.

(S)-5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-2-trifluorometil-pirimidina-5-carbonil)10 4-metil-piperidin-4-il]-3-[(1R,5S,6S)-1-(3-oxa-biciclo[3.1.0]hex-6-il)metil]-1- oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona (II-3) foi preparado analogamente, exceto que na etapa 12, ácido 4,6-dimetil-pirimidina-5-carboxílico foi substituído com ácido 4,6-dimetil-2-trifluorometilpirimidina-5-carboxílico (A. Palani et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2003 13:709-712.) para proporcionar II-3 15 Exemplo 14

3-(1 -Acetil-piperidin-4-ilmetil)-5-butil-9-[1 -(4,6-dimetil-pirimidina

5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona

(HH)

A-9b(Rb=4,6-dimetil-pirimidin-5-il) Etapa 2 I 58a: R-Boc

j—»» SShrR = H Etapa 3 L^m-IrR = Ac

etapa 1 - A uma solução de A-9b (Rb = 4,6-dimetil-pirimidin5-ila, 20 0,130 g, 0,3 mmol) e DMF (2,0 mL) foi adicionado NaH (0,023 g, 0,6 mmol, 60% de dispersão de óleo mineral) e a suspensão foi agitada à temperatura ambiente por 20 minutos. À solução resultante foi adicionado 60 (CASRN 158407-04-6, 0,119 g, 0,45 mmol) e a mistura foi agitada durante a noite. LCMS indicou somente conversão parcial, portanto, NaH adicional (0,023 g, 25 0,6 mmol) foi adicionado, seguido após 20 minutos pela adição de 60 (0,119 g, 0,45 mmol). A mistura de reação foi agitada por outras 24 horas após a qual LCMS mostrou ainda algum material de partida não-reagido. Após uma terceira adição de NaH e 60, a mistura de reação foi deixada durante a noite. O teor do frasco foi resfriado rapidamente com água e, em seguida, solução 5 saturada de NH4CI foi adicionada. A suspensão resultante foi concentrada para secagem e o resíduo triturado com EtOAc. Após filtração e evaporação, o resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM/MB (100% a 67% de DCM, MB=DCM: MeOH: NH4OH, 60:10:1) para proporcionar 0,053 g (28%) de 58a como uma espuma: MS [M+1]+=655.

etapa 2 - A uma solução de 58a e Et20/Me0H (3 mL, 2:1) foi

adicionado HCI 4N em dioxano (1 mL) e a solução resultante foi agitada durante a noite a 40° C. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e o solvente evaporado. O resíduo contendo 58b (MS: [M+1]+=555) foi usado na próxima etapa com purificação adicional.

etapa 3 - A uma solução agitada de 58b (0,045 g, 0,08 mmol),

DCM (1.5 mL) e piridina (0,650 mL) foi adicionado anidrido acético de DCM (0,046 mL, 0,49 mmol) e a solução resultante foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado in vácuo. O resíduo foi levado duas vezes em tolueno e reevaporado. O produto bruto foi purificado, 20 duas cromatografias de placa de sílica-gel preparativas desenvolvidas com MeOH/DCM (13% de MeOH) para proporcionar 0,025g (52%) de Ill-I como uma espuma branca: MS [M+1]+ 597, [M+Na]+ 619.

III-25 pode ser preparado analogamente, exceto que na etapa 1, A-9b no qual Rb = 4,6-dimetil-pirimidin-5-ila é substituído com o composto correspondente no qual Rb é 3-metil-5-trifluorometil-isoxazol-4-ila.

Exemplo 15

5-Butil-9-[1-(4,6-dimeti!-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-píperidin-4-

il]-3-(1-isobutiril-piperidin-4-ilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona

(111-3)

Cloreto de isobutirila (0,0072 g, 0,065 mmol) foi adicionado a

uma solução do composto 58b (0,025 g, 0,045 mmol), DIPEA (0,016 mL, 0,09 mmol) e DCM (1 mL). A solução foi agitada por 72 horas à temperatura ambiente. A reação foi resfriada rapidamente com NaHCOs saturado (0,200 mL) e filtrada através de um cartucho de CHEMELUTE®. O cartucho foi lavado várias vezes com DCM e os eluentes combinados foram concentrados para secagem. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM/MB (0 a 20% de MB, MB = DCM: MeOH: NH4OH1 5 60: 10: 1) para proporcionar 0,027 g (95%) de III-3 como uma espuma nãobranca: MS [M+1]+ 625.

Exemplo 16

5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4- il]-3-(1 -metanosulfonil-piperidin-4-ilmetil)-1 -oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona (III-5)

O composto do título foi preparado utilizando-se um procedimento análogo ao Exemplo 15, exceto que o cloreto isobutirila foi substituído com cloreto de metanossulfonila. O produto bruto foi purificado conforme descrito no Exemplo anterior para proporcionar III-5 como uma espuma: MS [M+1]+=633.

III-24 pode ser preparado analogamente, exceto que na etapa 1, A-9b no qual Rb = 4,6-dimetil-pirimidin-5-ila é substituída com o composto correspondente no qual Rb é 3-metil-5-trifluorometil-isoxazol-4-il.

Exemplo 17

Metil éster do ácido 4-{(S)-5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-

carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3- ilmetil}-piperidina-1-ácido carboxílico metila éster (III-6)

O composto do título foi preparado utilizando-se um procedimento análogo ao Exemplo 15, exceto que cloreto isobutirila foi substituído com cloroformiato metila. O produto bruto foi purificado por SiO2 TLC preparativa desenvolvida com 1:1 de DCM:MB (MB = DCM: MeOH: NH4OH, 60: 10: 1) para proporcionar 111-6 como uma espuma branca: MS [M+1]+ 613.

Etila éster do ácido 4-{(S)-5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5- carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3- 30 ilmetil}-piperidina-1 -ácido carboxílico (III-8) foi preparado analogamente, exceto que cloroformiato metila foi substituído por cloroformiato etila. O bruto foi purificado em uma placa de SiO2 TLC preparativa desenvolvida com 10% de MeOH/DCM, para proporcionar III-8 como uma espuma: MS [M+1]+=627 e [M+Na]+=649.

III-23 pode ser preparado analogamente, exceto que na etapa 1, A-9b no qual Rb = 4,6-dimetil-pirimidin-5-ila é substituída com o composto correspondente no qual Rb é 3-metil-5-trifluorometil-isoxazol-4-ila.

Exemplo 18

3-(1 -Acetil-piperidin-3-ilmetil)-5-butil-9-[1 -(4,6-dimetil-pirimidina

5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona (III-2)

O composto do título foi preparado utilizando-se um procedimento análogo ao Exemplo 14, exceto que ferc-butila éster do ácido 4- bromometil-piperidina-1-carboxílico foi substituído com ferc-butila éster do ácido 3-bromometil-piperidina-1 -carboxílico (CASRN 193629-39-9) para proporcionar III-2: MS [M+1]+=597, [M+Na]+=619.

metila éster do ácido 3-{5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5- carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1 -oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3-

ilmetil}-piperidina-1- carboxílico (III-7) foi preparado analogamente, exceto que na etapa 3 anidrido acético foi substituído com metil cloroformiato para proporcionar III-7 como espuma branca: MS [M+1]+=613.

III-26 pode ser preparado analogamente, exceto que na etapa 1, A-9b no qual Rb = 4,6-dimetil-pirimidin-5-ila é substituída com o composto correspondente no qual Rb é 3-metil-5-trifluorometil-isoxazol-4-ila.

Exemplo 19

(S)-5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(1-oxetan-3-il-piperidin-4-ilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona (III-9)

A uma solução de A-9b (R1 = 4,6-dimetil-pirimidin-5-ila, 0,040g, 0,072 mmol) e MeOH (2 mL), foi adicionado HOAc (0,043 g, 0,7 mmol). Após agitação à temperatura ambiente por 5 minutos, 3-cetooxetano (0,021 g, 0,29 mmol) foi adicionado à solução, seguido por NaBH4 (0,014g, 0,22 30 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas, em seguida os solventes foram evaporados. O resíduo foi tomado em EtOAc, lavado com NaOH 1N, secado (MgSO4), filtrado e evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM/MB em sílica-gel (0 a 33% de MB, MB = DCM/Me0H/NH40H, 60: 10: 1) para proporcionar 0,007 g (16%) de III-9 como uma espuma não-branca: MS [M+1]+=611 e [M+Na]+=633.

Exemplo 20

(S)-5-Butil-3-(1 -ciclopropil-piperidin-4-ilmetil)-9-[1 -(4,6-dimetil

pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-ila]-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona (111-10)

A uma solução de A-9b (Rb = 4,6-dimetil-pirimidin-5-ila, 0,030 g, 0,054 mmol), 1-etoxiciclopropoxi trimetilsilil (0,014 g, 0,08 mmol) em DCM (2 10 mL) foi adicionado NaBH(OAc)3 (0,036 g, 0,13 mmol), e a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas. A reação foi resfriada rapidamente com 5% de solução de NaHCOs e a camada aquosa foi extraída duas vezes com DCM. Os extratos combinados foram secados (MgS04), filtrados e concentrados. O bruto foi purificado em uma placa de S1O2 TLC 15 preparativa desenvolvida com 1:2 DCM:MB (MB = DCM/MeOH/NH4OH, 60: 10: 1) para proporcionar 0,008 g (25%) de 111-10 como uma espuma nãobranca: MS [M+1]+=595 e [M+Na]+=617.

Exemplo 21

(S)-5-Butil-3-[1-(2,2-diflúor-etil)-piperidin-4-ilmetil]-9-[1-(4,6- dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona (111-11)

A uma solução de A-9b (Rb = 4,6-dimetil-pirimidin-5-ila, 0,100 g, 0,18 mmol), DIPEA (1,8 mmol) e MeCN (3 mL) resfriada a O0 C foi adicionado gota a gota trifluorometanossulfonato de 2,2-difluoroetila (0,058 g, 0,27 25 mmol). A mistura resultante foi agitada por 16 horas enquanto alcança vagarosamente temperatura ambiente. Após resfriamento rápido com NaHCOa saturado (0,200 mL), 0 resíduo foi concentrado e purificado por coluna de cromatografia de S1O2 eluindo com um gradiente de DCM/MB (0 a 33% de MB, MB = DCM/Me0H/NH40H, 60:10:1) para proporcionar 0,033 g (30%) of 30 111-11 como uma espuma não-branca: MS [M+1]+=619 e [M+Na]+=641. Exemplo 22

3-[2-(1 -Acetil-piperidin-4-il)-etil]-5-butil-9-[1 -(4,6-dimetilpirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona (111-4)

etapa 1 - A uma solução de A-9a (Rb = 4,6-dimetil-pirimidin-5-ila, 0,105 g, 0,23 mmol) em DMF (3 mL) foi adicionado NaH (0,028 g, 0,71 mmol, 60% de dispersão de óleo mineral), e a suspensão foi agitada à temperatura ambiente por 20 minutos, ferc-butila éster ácido 4-[2-(Tolueno-4- sulfonilóxi)-etil]-piperidina-1-carboxílico (62, CASRN 169457-73-2, 0,132 g, 0,034 mmol) foi adicionado à solução, e a mistura foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. LCMS indicou conversão parcial, portanto, NaH adicional (0,028 g) foi adicionado, seguido após 20 minutos por adicional 62 (0,105 g) e agitação continuada. Após 6 horas uma terceira alíquota de NaH e 62 foi adicionada e a reação agitada durante a noite. A mistura de reação foi resfriada rapidamente com água e, em seguida, com solução saturada de NH4CI. A suspensão resultante foi concentrada para secagem e o resíduo triturado com EtOAc. Os sais foram filtrados e o filtrado foi concentrado em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de S1O2 eluindo com um gradiente de DCM/MB (0-25% de MB, MB = DCM/Me0H/NH40H, 60:10:1) para proporcionar 0,055 g (36%) de 4-(2-{5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3- il}-etil)-piperidina-1-ácido carboxílico terc-butila éster (64) como um óleo amarelo-claro: MS [M+1]+=669.

etapa 2 - TFA (0,141 g, 1,2 mmol) foi adicionado a uma solução de 64 (0,055 g, 0,08 mmol) e DCM (2 mL), e a solução resultante foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo foi em seguida tratado duas vezes com tolueno e concentrado para 25 secagem. O produto obtido foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional: MS [M+1]+=669.

etapa 3 - O composto do título foi preparado pelo procedimento descrito na etapa 3 do Exemplo 14 a partir da piperidina desprotegida na etapa 2 seguindo o procedimento reportado na etapa 3 do Exemplo 14 para proporcionar III-4: MS [M+1 ]+=611.

Exemplo 23

5-(4-{(S)-5-Butil-3-[1-(2,2-diflúor-etil)-piperidin-4-ilmetil]-2-oxo-1-oxa-3,9-

diaza-espiro[5.5]undec-9-il}-4-metil-piperidina-1-carbonil)-4,6-dimetil-piridina2-carbonitrila (111-12) Λ.

O NH

Me -νΟλ

C1H,

ry

OCH2Ph

Ftnnn 1 I- Α'9a Etapa 3 I- 66a: R = Boc

tiaPa ' I—A-9b (Rb = CBZ) j—»► 66b: R=H

Etapa 4 I ~ 66c; R = CH2CHF2

EtapaerT 68:R" = H

—► 111-12: R = 6-cjano-2,4-dimety-Djridin-3-il.

etapa 1 - A uma suspensão de A-9a (3,00 g, 6,9 mmols) e DCM (15,0 mL) à temperatura ambiente foi adicionada piridina (5,59 mL, 69 mmols) e a solução resultante agitada por 30 minutos. A solução resultante 5 foi resfriada em um banho de gelo e cloroformiato benzila (1,773 g, 10 mmols) foi adicionado gota a gota, em seguida agitada por 1 hora. O banho de resfriamento foi removido e a mistura de reação agitada durante a noite. A mistura de reação foi repartida em DCM, NaOH 3N e a camada aquosa foi duas vezes extraída com DCM. Os extratos combinados foram lavados com 10 salmoura, secados (MgSO4), filtrados e concentrados em vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia de S1O2 eluindo com um gradiente de DCM/MB (0 a 10% de MB, MB = DCM/Me0H/NH40H, 60:10:1) para proporcionar 1,726g (54%) de A-9b (Rb = CBZ) como um óleo amarelo-claro: MS [M+1]+=458.

etapa 2 - A uma solução de A-9b (Rb = CBZ, 1,720 g, 3,76

mmols) e tolueno (4,0 mL) foi adicionado ferc-butila éster ácido 4- bromometil-piperidina-1-carboxílico (1,673 g, 6 mmols), seguido por NaOH DM pó (0,601 g, 15 mmol) e Bu4NBr (0,061 g, 0,19 mmol). A suspensão resultante foi aqueci8da a 50° C e agitada a alta velocidade por 72 horas. A mistura de reação foi repartida entre Et0Ac/H20 e a camada aquosa foi retro-extraída duas vezes com EtOAc. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secados (MgSO4), filtrados e concentrados em vácuo. O produto bruto foi purificado por eluição de cromatografia de SiO2 com um gradiente de DCM/MeOH (0 a 5% MeOH) para proporcionar 2,006 g (82%) de 66a como uma espuma branca: MS [M+1]+=655.

etapa 3 - A uma solução de 66a (2,00 g, 3,1 mmols) e DCM (5 mL) foi adicionado TFA (3,53 mL, 46 mmols) e a reação foi agitada por 16 horas à temperatura ambiente. A solução foi concentrada quase para secagem e o solvente remanescente foi removido por coevaporação com tolueno. 10 O resíduo foi repartido entre NaOH 5M e DCM. As camadas foram separadas e a camada aquosa extraída duas vezes com DCM. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas (MgSO4)1 filtradas, e concentradas para proporcionar 66b (1,740 g, rendimento 100%) como um xarope amarelo-claro que estava sem purificação adicional: MS [M+1]+= 555. 15 etapa 4 - A difluoroetilamina 66c foi preparada de 66b e trifluo

rometanosulfonato de 2,2-difluoroetila conforme descrito no Exemplo 21 para proporcionar 66c: MS [M+1]+= 619.

etapa 5 - A uma solução de 66c (0,630 g, 1 mmol) e EtOH (50 mL) em um frasco inundado com argônio foi adicionada catalisador de Pear20 Iman (20% de Pd(OH)2ZC, 0,100 g). O frasco foi inundado novamente com argônio, em seguida com hidrogênio. Um balão de hidrogênio ligado a uma seringa com uma agulha foi inserido através de um septo de modo que o hidrogênio borbulha através da solução. A reação foi agitada por 16 horas. O catalisador foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado para seca25 gem. O bruto obtido foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM/MB (0 a 50% de MB, MB = DCM/Me0H/NH40H, 60:10:1) para proporcionar 0,415 g (84%) de 68 como uma espuma amarela clara: MS [M+1]+= 485.

etapa 6 - Uma solução de 68 e DMF, ácido 6-ciano-2,4-dimetilnicotínico, DIPEA e HATU foram agitados durante a noite à temperatura ambiente. O solvente foi removido em vácuo e o resíduo repartido entre DCM e NaOH 3N. A camada aquosa foi retroextraída com DCM e os orgânicos combinados foram secados (MgSO4), filtrados e evaporados. O produto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM/MB (MB = DCM/Me0H/NH40H, 60:10:1) para proporcionar 111-12: MS [M+1]+=643.

Exemplo 24

(S)-5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil

piperidin-4-il]-3-[2-(tetrahidro-piran-4-il)-etil]-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona (IV-10)

etapa 1 -2-(tetrahidro-piran-4-il)-etila éster ácido tolueno-4- sulfônico (70) - cloreto de p-Toluenossulfonila (2,998 g, 16 mmol) foi adicio10 nado a uma solução de 2-(tetrahidro-piran-4-il)etanol (CASRN 4677-18-3, 1,706 g, 13 mmols), piridina (1,16 mL, 14 mmols) e DCM (10 mL). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 72 horas. A solução foi repartida entre EtOAc e NH4CI saturado. A camada aquosa foi retroextraída duas vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secadas 15 (MgSO4), filtradas e concentradas em vácuo para proporcionar 70 como óleo incolor.

etapa 2 - íerc-butila éster ácido 4-{(S)-5-Butil-2-oxo-3-[2- (tetrahidro-piran-4-il)-etil]-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-9-il}-4-metilpiperidina-1-carboxílico (72) foi preparado de A-6b e 70 pelo procedimento descrito na etapa 1 do Exemplo 22 para proporcionar 72: MS [M+1]+=536.

etapa 3 - A uma solução de 72 (0,529 g, 1 mmol) e tolueno (5 mL) foi adicionado HCI 3M (0,530 mL) e a mistura de reação foi aquecida a 45° C e agitada em alta velocidade por 1,5 hora. O frasco de reação foi aquecido à temperatura ambiente e a camada aquosa foi separada e ajustada 25 para pH 14 com 40% de NaOH, em seguida extraída duas vezes com 2-metil tetrahidrofurano, e os orgânicos combinados foram secados (MgSO4), filtrados e concentrados para proporcionar 0,307 g (rendimento de 71%) de 74 como um óleo amarelo claro que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

etapa 4 - A uma solução de 74 (0,307 g, 0,7 mmol) e ácido 4,6-

dimetil-pirimidina-5-ácido (0,118 g, 0,78 mmol) em 2-metil-tetrahidrofurano (3,5 mL, MeTHF) foi adicionado seqüencialmente HOBt (0,105 g, 0,78 mmol), EDCI (0,149 g, 0,78 mmol) e DIPEA (0,250 mL, 1,4 mmol). A reação foi aquecida a 50° C e agitada por 16 horas. A reação foi resfriada rapidamente por adição de NaOH 3N (1,3 mL). A camada orgânica foi isolada e a camada aquosa foi retro-extraída duas vezes com MeTHF (1 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados (MgSO4), filtrados 5 e concentrados em vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM/MB (0 a 33% de MB, MB = DCM/MeOH/NH4OH, 60:10:1) para proporcionar 0,233 g (58%) de IV-10 como uma espuma branca: MS [M+1]+=570.

Exemplo 25

(S)-5-Butil-3-(4,4-diflúor-ciclo-hexil)-9-[1 -(4,6-dimetil-pirimidina-5-

carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona (IV7)

etapa 1 - A uma solução de 1,4-ciclo-hexanodiol (20,0 g, 172 mmols) e piridina (100 mL) resfriada a O0 C foi adicionado gota a gota por 2 horas uma solução de 32,0 g (168 mmols) de cloreto de p-toluenosulfonil em CHCb (100 mL). Após a adição ser completada, a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 17 horas. O solvente foi evaporado em vácuo e o resíduo foi levado em refluxo de tolueno e éter de petróleo foi adicionado até que a solução se tornasse turva. A mistura foi resfriada e o sobrenadante foi decantado. O sólido remanescente foi dissolvido em DCM e filtrado a vácuo através de uma almofada de SiO2. A massa de filtrado foi lavada com uma mistura de DCM/MeOH (95:5). O óleo dourado-escuro foi secado sob vácuo para proporcionar 35,6 g (78%) de 4-hidróxi-ciclo-hexila éster ácido tolueno-4-sulfônico (76) contaminado com uma quantidade pequena de bis-tositato: 1H RMN (CDCI3, 300 MHz): δ 7,79 (dd, 2H), 7,73 (dd, 2H), 4,64-4,48 (m, 1H), 3,75-3,69 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 1,95-1,83 (m, 3H), 1,70-1,26 (m, 6H).

etapa 2 - A uma solução de 76 (2,23 g, 8,22 mmols) e CHCI3 (30 mL) foi adicionado PCC (1,77 g, 8,22 mmols) e CHCI3 (20 mL). Uma gota de 30 HOAc foi adicionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 2,5 dias. Um adicional de 1,77 g (8,22 mmols) de PCC foi adicionado e agitação continuada à temperatura ambiente por um adicional de 6 horas. A reação foi diluída com Et2O e filtrada através de um leito de SiO2. A massa foi lavada com Et2O e o filtrado foi passado através de um segundo obturador de SiO2, enquanto se lava a massa com Et2O. O filtrado foi retirado em vácuo e o material bruto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM/MeOH (0 a 4% de MeOH). O material recuperado foi re5 purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de hexano/acetona (15 a 25% de acetona) para proporcionar 1,32 g (58%) de 4-oxociclo-hexila éster ácido tolueno-4-sulfônico (78) como um óleo incolor: 1H RMN (CDCI3, 300 ΜΗζ): δ 7,83 (d, 2H), 7,37 (d, 2H), 4,92-4,86 (m, 1H), 2,78-2,53 (m, 2H), 2,46 (s, 3H), 2,34-2,13 (m, 4H), 2,03-1,83 (m, 2H).

etapa 3 - A uma solução de 78 (200 mg, 0,75 mmol) e DCM (7

rni_) resfriada a O0C foi adicionado DAST (363 mg, 2,25 mmols). O banho de resfriamento foi removido e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. A reação foi resfriada rapidamente com água e diluída com DCM. A fase de DCM foi lavada sucessivamente com HCI 1M, NaHCO3 saturado, e 15 salmoura, secada (Na2SO4) e concentrada em vácuo. O material cru foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com hexano/EtOAc (75:25) para proporcionar. O sólido branco foi secado para dar 135 mg (62%) de 4,4- diflúor-ciclo-hexila éster ácido tolueno-4-sulfônico (80): 1H RMN (CDCI3, 300 ΜΗζ): δ 7,80 (d, 2H), 7,35 (d, 2H), 4,77-4,69 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,39-1,76 20 (m, 8H).

etapa 4 - A uma solução de A-9b (Rb = 4,6-dimetilpirimdin-ila, 649 mg, 1,42 mmol) e DMF (7 mL) foi adicionado NaH (284 mg, 7,10 mmols, 60% de dispersão em óleo mineral). A mistura foi agitada à temperatura ambiente sob argônio por 5 minutos, em seguida uma solução de 80 (495 mg, 25 1,70 mmol) e DMF (6 mL) foi adicionada. A mistura de reação foi aquecida a 160°C por 6 minutos sob irradiação de microondas. Uma alíquota adicional de NaH (142 mg, 3,55 mmols) e 80 (55 mg, 0,19 mmol) foi adicionada e a mistura foi aquecida a 160°C por 10 minutos sob irradiação de microondas. A mistura de reação foi resfriada e diluída com água e EtOAc e agitada vigo30 rosamente por 10 minutos. A mistura foi filtrada através de CELITE® e a massa do filtro lavada com EtOAc. A fase aquosa foi extraída duas vezes com EtOAc, e os extratos orgânicos combinados foram lavados com água, 50% de salmoura e salmoura, secados (Na2SO4), e evaporados para proporcionar um óleo dourado. O produto bruto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM/MeOH (4 a 7% de MeOH) para proporcionar 60 mg (7%) de IV-7 como um pó amarelo-claro: MS (ESI) [M + H]+= 576.

5 Exemplo 26

(S)-5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-piridin-2-il-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona (IV-8)

etapa 1 - Uma solução de Pd2(DBA)3 (114 mg, 0,125 mmol),

9,9-dimetil-4,5-bis(difenilfosfino)xanteno (14 mg, 0,05 mmol) e tolueno (1 mL) foi agitada sob argônio por 20 minutos. A esta solução foi adicionado A-6b (91 mg, 0,95 mmoi), Nau-rerc-Bu (91 mg, 0,95 mmol), 2-bromopiridina (48 pL, 0,5 mmol) com 1 mL de tolueno e a reação foi aquecida a refluxo sob argônio. Após 24 horas a reação foi resfriada, resfriada rapidamente com água e diluída com EtOAc. A mistura foi filtrada através de CELITE® e as fases foram separadas. A camada orgânica foi lavada com água e salmoura, secada (Na2SO4), filtrada e evaporada para proporcionar um xarope marrom. O produto bruto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um DCM/MeOH (0 a 8% de MeOH) para proporcionar 250 mg (100%) de 4-(5- butil-2-oxo-3-piridin-2-il-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-9-il)- 4-metilpiperidina-1-ácido carboxílico terc-butila éster (82) como um vidro marrom: MS (ESI) [M+H]+= 501.

etapa 2 - Uma solução de 82 (250 mg, 0,5 mmol), DCM (10 mL) e TFA (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente por 17 horas. O solvente foi evaporado em vácuo e o resíduo repartido entre NaOH 5M e EtOAc. As fa25 ses foram separadas e a aquosa extraída quatro vezes com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água, 50% de salmoura e salmoura, secadas (Na2SO4) e evaporadas para proporcionar 64 mg da piperidina desprotegida 84 como um xarope marrom espesso. A uma solução de 84 (64 mg, 0,16 mmol), ácido 4,6-dimetil-pirimidina-5-carboxílico (29 mg, 0,19 30 mmol), HOBt (28 mg, 0,21 mmol), EDCI (40 mg, 0,21 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado DIPEA (84 pL, 0,48 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 2,5 dias. A reação foi resfriada rapidamente com água e diluída com EtOAc. As fases foram separadas e a aquosa extraída duas vezes com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados duas vezes com água e salmoura, secados (Na2SO4) e evaporados. O material bruto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com DCM/MeOH (95:5) para proporcionar 57 mg (67%) de IV-8 como uma espuma branca: MS (ESI) (M + H)+= 535, [M + Na]+=557.

5-[4-((S)-5-Butil-2-oxo-3-piridin-2-il-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undec-9-il)-4-metil-piperidina-1-carbonil]-4,6-dimetil-piridina-2- carbonitrila (IV-9) foi preparada analogamente, exceto que na etapa 2, ácido

4,6-dimetil-pirimidina-5-carboxílico foi substituído com ácido 6-ciano-2,4- dimetilnicotínico. O material bruto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo corn um DCívl/MeOH (0 a 7% de MeOH) para proporcionar 97 mg (62%) de IV-9 como um sólido não-branco: MS (ESI) [M+H]+= 559.

Exemplo 27

etila éster ácido (1R,5S,6R)-6-{(S)-5-Butil-9-[1-(4,6-dimetilpirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1 -oxa-3,9-diaza

espiro[5.5]undec-3-ilmetil}-3-aza-biciclo[3.1.0]hexano-3-carboxílico (111-16)

H Etapa 6

- 4 9 _

CBZ—N -► ^1 _________111-16

Etapal = " ^---R"

K 90b: R = Ts

Etapa 3 [~T* 92a: R' =CBZ; R" = Boc Etapa 4 Γ” 92b: R' = CBZ; R" = H

pt* 92c: R' = CBZ; R" = COR"' Etapa 5 92d. R, = H; R„ = COR..t

R'" = 4,6-dimetil-pirimidin-5-il benzila éster ácido 3-Aza-biciclo[3.1.0]hexano-3-carboxílico (90a) foi preparado seguindo os procedimentos descritos por Κ. E. Brightly et al. EP 0 413 456 B1.

etapa 1 - cloreto de p-toluenesulfonil (1.378 g, 7,23 mmols) foi

adicionado a uma solução de 90a (1,49 g, 6,02 mmols) e DCM (30 mL) e TEA (1,26 mL, 9,0 mmols) de TEA resfriada a O0 C. A mistura resultante foi agitada por 20 minutos a O0C e, em seguida, permitida aquecer à temperatura ambiente e agitada durante a noite. A solução foi repartida entre DCM e solução saturada de NH4CI e a camada aquosa foi extraída duas vezes com DCM. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados (MgS04), filtrados e evaporados. O óleo amarelo-claro resultante foi 5 purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de EtOAc/hexano (0 a 30% de EtOAc) para proporcionar 0,556 g (23%) de 90b como um óleo incolor.

etapa 2 - A uma solução de A-9b (Rb = terc-butóxi, 0,25 g, 0,59 mmol) e tolueno (1,5 mL) foi adicionado seqüencialmente NaOH em pó 10 (0,094 g, 2,361 mmols), NBu4Br (0,01 g, 0,03 mmol) e uma solução de 90b (0,38 g, 0,944 mmoi) e íoiueno (I mL). A mistura de reação foi aquecida a 55°C por 3 horas, resfriada à temperatura ambiente, resfriada rapidamente com H2O e repartida entre H2O e EtOAc. A camada aquosa foi extraída com EtOAc e os extratos combinados foram secados (Na2SO4), filtrados e evapo15 rados. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de a MeOH/DCM (0 a 3% de MeOH) para proporcionar 0,328 g (85%) de 92a como uma espuma branca.

etapa 3 - O grupo Boc foi removido por tratamento com HCI 4N em dioxano conforme descrito na etapa 2 do Exemplo 14 para proporcionar 92b.

etapa 4 - Acilação de 92b com ácido 4,6-dimetil-pirimidina-5- carboxílico foi efetuada conforme descrito na etapa 13 do Exemplo 1 para proporcionar 92c.

etapa 5 - Um frasco foi carregado com 92c (0,3g, 0,437 mmol), 25 e Pd(OH)2 (0,06 g, 20% peso) e EtOH (5 mL) e evacuado e inundado duas vezes com N2 e, em seguida, três vezes com H2. A mistura de reação foi agitada sob 1 atm de H2, durante a noite à temperatura ambiente. O paládio foi filtrado através de um leito de CELITE e o filtrado foi evaporado e secado sob alto vácuo para proporcionar 0,223 g (92%) de 92d como uma espuma 30 marrom pálida.

etapa 6 - A uma solução de 92d (0,05 g, 0,09 mmol) e DIPEA (0,03 mL, 0,181 mmol) e DCM (1 mL) foi adicionado cloroformiato metila (0,01 mL, 0,136 mmol) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi repartida entre DCM e NaHCOs aquoso e a camada aquosa foi extraída duas vezes com DCM. Os extratos combinados foram secados (Na2SO4), filtrados e evaporados. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de Me5 OH/DCM (0 a 5% de MeOH) para proporcionar 0,027 g (49%) de 111-16 como uma espuma amareia pálida: ms [M+H]+ 611.

111-17 e 111-18 foram preparados analogamente, exceto que na etapa 6, cloroformiato metila foi substituído com cloroformiato etila e cloroformiato isopropila respectivamente. 111-19 foi preparado analogamente, exceto que a 10 acilação na etapa 6 foi substituída por alquilação de 92d com triflato de 2,2- difluoroetila conforme descrito no Exempio 21. iii-19 e ííi-14 foram preparados analogamente usando-se cloroformiato etila e anidrido acético como o agente de acilação na etapa 6 e substituindo ácido 4,6-dimetil-pirimidina-5- carboxílico com ácido 3-metil-5-(trifluorometil)-isoxazol-4-carboxílico na eta

carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3- ilmetil}-pirrolidina-1- carboxílico (111-14)

24-8] e (R)-1-terc-butoxicarbonilpirrolidina-3-metanol [CASRN 138108-72-2] pode ser convertido ao brometo correspondente pelo procedimento de M.O. Polla et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2004 12:1151-1175.

pa 4

Exemplo 28

metila éster ácido (S)-3-{(S)-5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-

R

\

Boc

Br

A-9b

Rb = terc-butóxi

Etapa 1

94

111-14: R = CO2Me

20

(S)- 1-terc-Butoxicarbonilpirrolidina-3-metanol [CASRN 199174-

etapa 1 - Alquilação de A-9b (Rb = terc-butóxi, 0,25 g, 0,59 mmol) por 94 foi efetuada usando-se o procedimento descrito na etapa 2 do Exemplo 27 para proporcionar 96a.

etapa 2 - O grupo Boc de 96a foi removido pelo tratamento com HCI 4N em dioxano conforme descrito na etapa 2 do Exemplo 14 para proporcionar 96b.

etapa 3 - O grupo amino de 96b foi aciiado com cloroformiato metila conforme descrito na etapa 6 do Exemplo 27 para proporcionar 111-14: ms [M+1]+ 599, [M+Na]+ 619.

111-13 foi preparado analogamente, exceto que cloroformiato etila foi usado no lugar de cloroformiato metila na etapa 3. 111-15 foi preparado analogamente, exceto que a aciisçao ■ ·<η eicipci ο ioí suúSiíiüiQã por aiquhação de 96b com 2,2-difluoroetil triflato conforme descrito no Exemplo 21. Exemplo 29

metila éster de ácido (1S,3R,5R)-3-{(S)-5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5- carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1 -oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3- ilmetil}-8-aza-biciclo[3.2.1]octano-8-carboxílico (III-22)

ÇBZ N>

λ-λ ch,y Etapa 6 I ^jLc4Hj

ΡΐεΗΛ;^„ rnQX — ίξι*

EtePM F!£ü:5£y“oh ■«

tiapa z 98c. χ = H CH20H Etapa 5 !_► 100c: R = CBZ Y = 0Ts

i»ic

ΙΠ-22

Etapas 7-10

etapa 1 - Metiltrifenilfosfonium brometo/sódio amida (2,4 mmol/g, 0,261 g, 0,627 mmol, Aldrich) foi suspenso em THF (50 mL) e agitado à temperatura ambiente por ca. 30 minutos. (1R,5S)-8-benzil-8-aza20 biciclo[3.2.1]octan-3-ona (98a) (5 g, 23,22 mmols) foi dissolvido em THF (50 mL) e adicionado vagarosamente ao frasco de reação e a suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi filtrada através de CELITE e a massa do filtro foi lavada com EtOAc. O filtrado foi evaporado e secado sob alto vácuo. O óleo marrom remanes25 cente foi triturado em hexanos e filtrado dando um sólido pegajoso, que foi tomado e triturado duaz vezes mais em hexanos. O filtrado foi evaporado e secado sob alto vácuo deixando 4,0 g (81%) de 98b como um líquido amarelo pálido.

etapa 2 - Uma solução de 98b (0,155 g, 0,727 mmol) e THF (1,5 mL) foi adicionada a uma solução de água fria de dissiamilborano e THF (1M em THF, 3,63 mL, 3,63 mmols). A mistura de reação foi, em seguida, permitida aquecer a temperatura ambiente e agitada por 3 horas. A solução clara incolor foi resfriada a 0°C e NaOH (aquosa 3M, 0,73 mL, 2,18 mmols) foi adicionada, seguido por solução de H2O2 (aquosa 30 peso%, 0,35 mL, 3,633 mmols). A mistura torna-se bifásica e foi permitida aquecer até temperatura ambiente. Após ca. 30 minutos, a mistura de reação foi repartida entre Et2O e H2O, e a camada aquosa foi extraída com Et2O. Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secados (Na2SO4), filtrados e concentrados. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM e uma solução de DCM/Me0H/NH40H (60/10/1) (100 a 60% de DCM) para proporcionar 0,110 g (65%) de 98c como um óleo incolor.

etapa 3 - Um frasco foi carregado com EtOH (50 mL), 98c (4,71 g, 20,36 mmols) e Pd(OH)2 (0,95 g, 20 % em peso). O frasco foi evacuado e inundado duas vezes com N2 e inundado em seguida três vezes com H2. A 20 mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 48 horas sob 1 atm de H2. O catalisador palácio foi removido por filtração através de um leito de CELITE e o filtrado foi evaporado e secado sob alto vácuo para proporcionar 2,98 g (100%) de 100a como um sólido branco.

etapa 4 - Trietilamina (4,4 mL, 31,65 mmols) foi adicionada a 25 uma suspensão de 100a (2,98 g, 21,103 mmols) em MeCN (70 mL) e o frasco de reação foi resfriado a O0 C. Benzil cloroformato (4,8 mL, 31,65 mmols) foi adicionado à solução e a mistura de reação foi permitida aquecer à temperatura ambiente e agitada por 2 horas. O resíduo foi repartido entre água e DCM e a camada aquosa foi retro-extraída duas vezes com DCM. Os extra30 tos combinados foram secados (Na2SO4), filtrados e evaporados. O óleo laranja remanescente foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de MeOH/DCM (0 a 4% de MeOH) para proporcionar 3,57 g (61%) de 100b como um óleo amarelo-claro. etapa 5 - Tosilação de 100b foi efetuada conforme descrito na etapa 1 do Exemplo 27 para proporcionar 100c.

Alquilação de A-9b (Rb = ferc-butoxi) com 100c (etapa 6) foi efetuada conforme descrito na etapa 2 do Exemplo 27. Remoção do grupo de 5 proteção Boc (etapa 7) foi efetuada com HCI 4N em dioxano conforme descrito na etapa 2 do Exemplo 14. Acilação (etapa 8) da amina secundária resultante com ácido 2,6-dimetil-pirimidina-5-carboxílico foi efetuada conforme descrito na etapa 13 do Exemplo 1. Remoção do grupo de proteção CBZ (etapa 9) e acilação da amina resultante com cloroformiato metila (etapa 10) 10 foram efetuadas conforme descrito nas etapas 5 e 6 do Exemplo 27 para proporcionar III-22: ms [M+H]+ 639.

A completação da síntese foi efetuada conforme descrito previamente. Após remoção catalisada de ácido do grupo Boc1 o nitrogênio de piperidina foi acilatado com ácido 4,6-dimetil-pirimidina-5-carboxílico, em se15 guida remoção hidrogenolítica do grupo de proteção CBZ e acilação da amina com cloroformiato metila.

Exemplo 30

(S)-5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(tetrahidro-piran-4-il)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2- 20 ona (IV-13)

H £A lWc4H9

rhn. — —

NBoc r-T*· O V-N X ,NR"

Etapa 2 \_/ ^_£ \_I Etapa 3

O

I-A-4b: R = H I

•—^104: R=tetrahidropiran-4-il step 3 |_

106b: R" = H

;Etapa 1

odm>=r o-ao^o

o °

108 c I-110a: R' = O-Zert-Bu

rllOb: R' = H

Etapa 5 I

I

Etapa 6 | ^ iy. 1 =4)6-dimetil-pirimidin-5-il

etapa 1 - Uma solução de A-4b (3,33 mmols), 4- cetotetrahidropiran (349 mg, 3,49 mmols), titânio tetraisopropóxido (1,33 g, 4,66 mmols) em DCE (22 mL) foi agitada à temperatura ambiente por 17 horas, em seguida NaBH4 (1,06 g, 5,00 mmols) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada vigorosamente por 4,5 horas, em seguida resfriada rapidamente com NaOH 1M. A mistura foi repartida com água e DCM, agitada 5 vigorosamente por 15 minutos e filtrada através de CELITE. A massa foi lavada com DCM e as fases foram separadas. A aquosa foi extraída duas vezes com DCM e os extratos orgânicos combinados foram secados (Na2SO4), filtrados e evaporados a um óleo amarelo. O resíduo foi secado em vácuo para proporcionar 800 mg (63%) de 104 que foram usados sem purificação 10 adicional: ms (ESI): m/z 385 (Μ + H).

etapa 2 - A uma solução de 104 (800 mg, 2,08 mmols) e THF (25 mL) foi adicionada uma solução de carbonil diimidazol (506 mg, 3,12 mmols) e THF (10 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 23 horas. A reação foi resfriada rapidamente com HCI 1M e concentrada em 15 vácuo. A fase aquosa oleosa foi extraída duas vezes com EtOAc. Os extratos combinados foram lavados sucessivamente com NaHCOs saturado, água e salmoura, secados (Na2SO4), filtrados e evaporados. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de MeOH/DCM (0 a 10% de MeOH), e o óleo recuperado em vácuo para proporcionar 164 mg 20 (19%) de 106: MS (ESI): m/z 411 (Μ + H).

etapa 3 - A uma solução de 106a (164 mg, 0,40 mmol) e DCM (5 mL) foi adicionado TFA (1 mL) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 17 horas. O solvente foi evaporado em vácuo e o resíduo repartido entre KOH 5M e EtOAc. As fases foram separadas e a camada aquosa ex25 traída duas vezes com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados (Na2SO4), filtrados e evaporados. O xarope amarelo foi secado em vácuo para proporcionar100 mg (81%) de 106b. A uma solução do material bruto em DCE (3 mL) foi adicionada seqüencialmente uma solução de N-BOC 4-piperidona (68 mg, 0,34 mmol) e DCE (2 30 mL) e titânio tetraisopropóxido (I28 mg, 0,45 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas após dietilaluminumcianida (480 μΙ, 0,48 mmol, 1M em tolueno) ser adicionado. A reação foi agitada à temperatura ambiente por 3,5 horas, em seguida resfriada rapidamente com NaOH 1M e repartida entre CH2CI2 e H2O. A mistura foi filtrada através de CELITE e a massa do filtro lavada com DCM. As fases foram separadas e a fase orgânica foi secada (Na2SO4)1 filtrada e evaporada. O solvente foi retirado em vácuo para proporcionar 108 como um xarope claro que foi usado sem purifi5 cação adicional. MS (ESI): m/z 520 (Μ + H).

etapa 4 - A uma solução de 108 (166 mg, 0,32 mmol) e THF (10 mL) foi adicionado brometo de metilmagnésio (533 pL, 1,60 mmol, 3M em éter), e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 4 horas. Uma alíquota adicional de MeMgBr (533 μΙ) foi adicionada e a reação foi agitada por 10 1 hora. Uma segunda alíquota de MeMgBr (267 pL, 0,80 mmol) foi adicionada e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 17 horas. A reação foi resfriada rapidamente com água e diluída com EtOAc. NH4CI saturado foi adicionado até que as fases estivessem claras (a fase aquosa era ainda básica). As fases foram separadas e a camada aquosa extraída com EtOAc. 15 Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados (Na2SO4), filtrados e evaporados. O material bruto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de MeOH/DCM (0 a 10% de MeOH) para proporcionar 51 mg (31%) de 110a como um vidro claro: MS (ESI): m/z 509 (Μ + H).

etapas 5 e 6 - A uma solução de 110a (51 mg, 0,10 mmol) e

DCM (5 mL) foi adicionado TFA (1 mL) e a reação foi agitada à temperatura ambiente por 6 horas. O solvente foi evaporado em vácuo e o resíduo repartido entre KOH 5M e EtOAc. As fases foram separadas e a aquosa extraída duas vezes com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados 25 com água e salmoura, secados (Na2SO4), filtrados e evaporados para proporcionar 110b. A uma solução de 110b (17 mg, 0,04 mmol), ácido 4,6- dimetilpiperidina-5 carboxílico (7 mg, 0,044 mmol), HOBt (7 mg, 0,052 mmol) e DMF (0,5 mL) foi adicionado EDCI (10 mg, 0,052 mmol), seguido por DlPEA (21 μΙ, 0,12 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 18 30 horas. A reação foi resfriada rapidamente com água e diluída com EtOAc. As fases foram separadas e a aquosa extraída duas vezes com EtOAc. Os extratos de EtOAc combinados foram secados (Na2SO4), filtrados e evaporados. O material bruto foi purificado por Prep HPLC para dar 8,1 mg (37%) de IV-13 como um sólido branco: MS (ESI), m/z 542 (M+H).

Exemplo 31

5-{4-[(S)-5-Butil-3-(2,2-difluoroetil)-2-oxo-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undec-9- il]-4-metilpiperidina-1-carbonil}-4,6-dimetilpiridina-2-carbonitrila (III-26)

tein no Pedido de Patente dos Estados Unidos 2005/0176703. A-5a foi convertido em 112b através da remoção do grupo Boc, aminação redutiva com N-Boc-4-piperidona, introdução do 4-metila e Boc de desproteção essencialmente conforme descrito nas etapas 3-5 do Exemplo 30.

4-ciano-2,6-dimetil-3-piridinil carboxílico (366 mg, 2,08 mmols), HOBt (365 mg, 2,70 mmols) HOBT e DMF (10 mL) foi adicionado EDCI (518 mg, 2,70 mmols), seguido por DIPEA (1,1 mL, 6,24 mmols). A reação foi agitada à temperatura ambiente por 50 horas. A reação foi resfriada rapidamente com 15 água e diluída com EtOAc. AS fases foram separadas e a aquosa extraída duas vezes com DCM. A fase orgânica combinada foi secada (Na2SO4), filtrada e evaporada. O material bruto foi purificado por Prep HPLC para proporcionar 8,1 mg (37%) de 112c como um sólido branco: MS (ESI) m/z 542 (M+H).

etapa 4 - A uma solução de 112c (33 mg, 0,069 mmol) e DMF (1

mL) foi adicionado NaH (14 mg, 0,34 mmol, 60% de dispersão de óleo mineral). A mistura foi agitada à temperatura ambiente sob argônio por 15 minutos, em seguida uma solução de triflato de 1,1 -difIuoroetila (44 mg, 0,21 mmol) em DMF (0,5 mL) foi adicionada. A reação foi agitada à temperatura 25 ambiente por 46 horas. A reação foi resfriada rapidamente com água e diluída com EtOAc. As fases foram separadas e a aquosa extraída com EtOAc.

A-5a

Etapa 1

rO^

O NCH2CHF.

Etapa 2 Etapa 3

112a: R = Boc 112b: R= H 112c: R=R-1CO R'

O

111-26

5

A síntese de A-5a conforme descrito por S.D. Gabriel e D. Rots

10

etapa 3 - A uma solução de 112b (672 mg, 2,08 mmols), ácido Os extratos combinados foram secados (Na2SO4)1 filtrados e evaporados. O material bruto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de MeOH/DCM (0 a 2% de MeOH), seguido por Prep HPLC para proporcionar 8,0 mg (21%) de III-26 como um sólido branco: MS (ESI) m/z 546 (M+H).

Exemplo 32

piperidin-4-il]-3-[1,4]dioxin-2-(f?)-ilmetil-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan2-ona (111-9):

mmols) e DCE (280 mL) foi adicionado 2-cloroetanol (6,3 mL, 93,74 mmols), seguido por uma solução de BF3 Et2O (1,1 mL, 8,927 mmols)e DCE (20 mL). A solução amarela pálida foi agitada a 45°C por 2 horas. A mistura de reação foi permitida resfriar a temperatura ambiente, evaporada e secada em 15 vácuo durante a noite (rendimento >95%) para proporcionar 1-cloro-3-(2- cloro-etóxi)-propan-2-ol.

1M (185 mL, 185 mmols) foram misturados e a mistura bifásica agitada à temperatura ambiente. Após 2,5 horas a mistura de reação foi aquecida a 20 90°C por 2,5 horas, em seguida permitida resfriar à temperatura ambiente e evaporada. A pasta fluida remanescente foi lavada com DCM/MeOH (95:5) três vezes, filtrada e o filtrado foi evaporado. Os 9,5 g remanescentes de óleo foi purificado por cromatografia de SiO2 (400 g de SiO2), eluindo com um gradiente de MeOH/DCM (0-4% de MeOH por 40 minutos) para propor25 cionar um rendimento de 30% de [1,4]dioxan-2-il-metanol (114a).

5-(S)-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil

114a: X = OH 114b: X = OTs -N.

CORb

Etapa 3

10

step 5 ΓΓ 116a: RDb = °-tór'-Bu

—^ III-9: R =4,6-dimetil-pirimidin-5-il

etapa 1 - A uma solução de R-(-)-epiclorohidrin (7 mL, 89,27

etapa 2 - O produto da etapa 1 (16,06 g, 92,81 mmols) e NaOH etapa 3 - A uma solução de 114a (4,45 g, 37,67 mmols), TEA

(6,3 mL, 45,2 mmols) e DCE resfriada a O0 C foi adicionado tosil cloreto (8,6 g, 45,2 mmols). A mistura de reação foi permitida aquecer à temperatura ambiente e agitada durante a noite. A mistura de reação foi repartida com 5 NH4CI aquoso. A camada aquosa foi lavada com DCM e os extratos combinados secados (Na2SO4)1 filtrados e evaporados. O resíduo foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de EtOAc/hexano (0-30% de EtOAc por 40 minutos) para proporcionar 95% de rendimento de 114b.

Boc e acilação da amina secundária resultante com ácido 4,6-dimetilpirimidin-5-carboxílico foi efetuada analogamente aos procedimentos descritos nas etapas 2-4 do Exemplo 27.

4,6-dimetil-pirimidin-5-carboxílico foi substituído com ácido 6-ciano-2,4- dimetil nicotínico. 11-11 e 11-12 foram preparados analogamente partindo-se de S-(+)-epiclorohidrina para preparar a porção de dioxano.

Exemplo 33

piperidin-4-il]-3-(6-flúor-3-oxa-biciclo[3.1.0]hex-6-ilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona (11-13)

mL) resfriada a -78° C foi adicionada gota a gota uma solução de LiAIH4 em THF (0,5 mL, 1,0M solução em THF). A solução foi agitada a -78°C por 15 minutos, em seguida permitida aquecer à temperatura ambiente e agitada por 1 hora. A reação foi resfriada rapidamente com Na2SO4-IOH2O (ca. 0,5

Alquilação de A-9b com 114b, clivagem do grupo de proteção

11-10 foi preparado analogamente, exceto que na etapa 5, ácido

(S)-5-Butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil

F

COR

b

120a: R = CO,Et

122a: Rb = O-tert-Bu 11-13: R0 = 4,6-dimetil-pirimidin-5-il

Etapa 4

etapa 1 - A uma solução de 120a (0,086 g, 0,49 mmol) e THF (5 g) e a mistura agitada resultante por outra hora. A solução resultante foi filtrada através de um leito de CELITE que foi lavado com DCM e a solução orgânica foi evaporada para proporcionar 120b que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

5 etapa 2 - A uma solução de 120b da etapa 1 (ca. 0,49 mmol)

dissolvida em piridina/DCM (2 mL. 1:1) foi adicionado cloreto de tosila (0,0988 g, 0,51 mmol) na resultante. Após 2 alíquotas de adição de TsCI serem adicionadas e agitação continuada à temperatura ambiente por 72 horas, o material de partida permaneceu na solução de reação. A solução foi 10 transferida para um frasco de microondas e um adicional de 0,099 g de TsCI adicionado e a solução resultante aquecida a 150°C por 1 hora. A solução resultante foi resfriada e repartida entre DCM e 10% de HCI. O ácido aquoso foi extraído com DCM e os extratos de DCM combinados lavados com água, secados, filtrados e evaporados para proporcionar 120c que foi usado dire15 tamente na etapa 3.

etapa 3 - Um frasco de reação foi carregado com A-9b (Rb = terc-butóxi, 0,323 g, 0,74 mmol), 120c (ca. 0,49 mmol), NaOH (0,079 g, 1,97 mmol), NBu4Br (0,008 g, 0,025 mmol) e tolueno (3 mL), e a mistura resultante aquecida a 55°C por 100 horas, em seguida à temperatura ambiente por 20 170 horas. A solução foi repartida entre H2O e DCM. A fase aquosa foi extraída 4 vezes com DCM (50 mL cada), e os extratos combinados secados (MgSO4), filtrados e evaporados. O produto bruto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM e uma solução de DCM/MeOH/NH4OH (60/10/1) (100 a 30% de DCM) para proporcionar 0,19 g 25 de 122a.

etapa 4 - Uma solução de 122a (0,19 g) foi dissolvida em DCM/TFA (5 mL. 1:1) e agitada à temperatura ambiente por 18 horas. O solvente foi evaporado e o resíduo duas vezes tomado em 10 mL de tolueno e reevaporado. O produto bruto foi purificado por cromatografia de SiO2 eluin30 do com um gradiente de DCM e uma solução de DCM/MeOH/NH4OH (60/10/1) (100 a 20% de DCM) para proporcionar 0,060 g da amina suficientemente pura para uso na acilação subsequente. Uma solução da amina, ácido 2,4-dimetil-pirimidina-5-carboxílico, EDCI (0,022g, 0,1027 mmol), HOBt (0,014 g, 0,1027 mmol), DIPEA (0,048 mL, 0,274 mmol) e DCM (3 mL) foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas. Uma segunda alíquota de todo reagente foi adicionada e agitação continuada por um adicional de 18 horas. Os solventes foram evaporados e o resíduo purificado por cromato5 grafia de SiO2 eluindo com um gradiente de DCM e uma solução de DCM/MeOH/NH4OH (60/10/1) (100 a 70% de DCM). O material recuperado foi adicionalmente cromatografado em uma coluna de SiO2 eluindo com um MeOH/DCM (0 a 10% de MeOH) e secado em vácuo para proporcionar Il

13.

Exemplo 34

Proiocoio de ensaio de ligação de Iigante de receptor CCR5 humano

Receptor de CCR5 humano (Identificação no Banco de Gene: 29169292) foi clonado em vetor de expressão de mamífero, pTarget (Promega). O constructo foi transfectado em células de CHO-Ga-I6 pelo uso de 15 Reagente Fugene (Roche). Os clones foram selecionados sob pressão antibiótica (G418 e Hygromycin) e classificados 4 vezes com um classificador de célula que ativa fluorescência e um anticorpo monoclonal específico para receptor de CCR5 (BD Biosciences Pharmigen, Mab 2D7, Cat. N0 555993). O clone com expressão mais alta (100.000 cópias por célula) foi escolhido 20 para os ensaios de ligação.

Células aderentes em frasco de cultura de tecido de 225 mL (ca. 90% confluente) foram colhidas usando-se 1 mM de EDTA em PBS (salina tamponada por fosfato) sem Ca2+ e Mg2+ . AS células foram lavadas duas vezes com PBS não contendo Ca2+ e Mg2+. As células CHO-Gai6-hCCR5 25 foram, em seguida, ressuspensas (1x106/mL) em tampão de ligação frio (50 mM de HEPES, 1 mM CaCI2, 5 mM de MgCI2, 0,5% de BSA, 0,05% de NaN3i pH 7,24), pH 7,4), suplementadas recentemente produzem 0,5% de BSA e

0,05% de NaN3.

Oitenta μΙ de células CHO-G(16-hCCR5 (1x10 6/mL) foram adicionadas a 96 placas de poço. Todas as diluições foram produzidas em tampão de ligação (50 mM de HEPES, 1 mM de CaCI2, 5 mM de MgCI2, 0,5% de BSA, 0,05% de NaN3, pH 7,24).

As placas foram incubadas em um oscilador de célula à tempe1 oc

ratura ambiente por 2 horas com uma concentração final de 0,1 nM I RANTES ou 125I MIP-Ia ou 125I MIP-1. As diluições do composto foram feitas em PBS, 1% de BSA. O volume de reação total foi 100 μΙ por poço. Os compostos de teste foram adicionados às células antes da adição de radioli5 gante.

Após incubação, as células foram colhidas em placas de filtro GF/C usando colhedores de célula Packard. Os filtros foram pré-tratados com 0,3% de PEI /0,2% de BSA por 30 minutos. A placa de filtro foi lavada rapidamente 5 vezes com 25 mM de HEPES, 500 mM de NaCI, 1 mM de 10 CaCI2 e 5mM de MgCI2 ajustado para pH 7,1. As placas foram secadas no forno (70oC) por 20 minutos, adicionadas com 40 μΙ de fluido de cintilação e vedadas com Packard TopSeaI-A. Contagem de Packard Top foi usada para medir a radioatividade por 1 minuto por poço.

A ligação total foi determinada com poços de controle adiciona15 das com radioisótopo e tampão, e a ligação não-específica foi determinada usando-se um excesso de RANTES frio para algumas das poços de controle. A ligação específica foi determinada pela subtração da ligação total de forma específica. Os resultados são expressos como a percentagem de ligação de 125I RANTES específica. Os valores IC5o foram determinadas usando20 se variação de concentrações do Iigante teste em triplicatas e o dado foi analisado usando-se Prisma GraphPad (GraphPad, San Diego, CA). Os dados típicos são tabulados na TABELA V.

TABELA V

N0 do Composto IC50 (μΜ) I-2 0,0162 II-4 0,0108 II-6 0,038 11-10 0,0172 III-6 0,0465 111-12 0,0494 III-20 0,014 III-22 0,0212 N0 do Composto IC50 (pM) III-23 0,0388 IV-7 0,0192 IV-13 0,0492 Exemplo 35

Ensaio de CCF Mediado por CCR5.

O ensaio CCF foi realizado conforme descrito antes (C. Ji1 J. Zhang1 N. Cammack e S. Sankuratri, J. Biomol. Screen. 2006 11 (6):652- 5 663). Células Hela-R5 (expressa gp160 de vírus R5-trópico e HIV-1 Tat) foram colocadas em !ocais de cultura brancas de 384 poços (BD Bioscience, Palo Alto, CA) a 7,5 x 103 células por poço em Meio Eagle Modificado Dulbecco de fenol livre vermelho (DMEM) suplementado com 10% de FBS, 1x Pen-Strep1 300 pg/mL de G418, 100 pg /mL de higromicina, e 1 pg/mL de 10 Doxiciclina (Dox) (BD Bioscience, Palo Alto, CA), usando-se Multimek (Beckman, Fullerton, CA) e incubadas a 37°C durante a noite para induzir a expressão de gp160. Dez pL de compostos diluídos em meio contendo 5% de DMSO foram adicionados às células, seguido pela adição de CEM-NKrCCR5-Luc (obtido de NIH AIDS Research & Reference Reagents Program) 15 que expressa CD4 e CCR5 e transporta gene receptor de Iuciferase acionado (LTR) por repetição terminal longa a 1,5 x 104 células/15 pL/poço e incubados por 24 horas. No final de cocultura, 15 pL de substrato de Iuciferase Steady-Glo foi adicionado em cada poço, e as culturas foram vedadas e brandamente agitadas por 45 minutos. A atividade de Iuciferase foi medida 20 por 10 segundos por poço como luminescência pelo uso de TopCount NXT de 16 canais (PerkinElmer, Shelton, CT) com 10 minutos de adaptação no escuro e etapa de leitura é contada por segundo (CPS). Para os experimentos de interação de fármaco, compostos de molécula pequena ou anticorpos foram diluídos em série em RPMI livre de soro e fenol vermelho livre conten25 do 5% de DMSO (CalBiochem, La Jolla, CA) e 1 x Pen-Strep.Cinco pL cada dos dois compostos diluídos ou mAb a serem testados para interações de fármaco-fármaco foram adicionados às células Hela-R5 antes da adição de células-alvos. TABELA Vl

N0 do Composto Ensaio de Fusão de Célula-Célula (CCF) IC50(MM) 111-1 0,0252 III-2 0,0174 11-10 0,001 III-22 0,003 IV-13 0,02 III-20 <0,0025 III-23 <0,0025 Exemplo 36

Ensaio Antivirai de Ciclo Simples de HIV-1

A sensibilidade de um vírus HIV-1 recombinante pseudotipado com as proteínas envelopes do vírus CCR5-trópico NLBaI para compostos de teste foi determinada em um ensaio relator de Luciferase usando células JC53BL. HIV-1 pseudotipado por NLBaI foi gerado por transfecção de fosfato de cálcio de células 293T (ATCC) com quantidades iguais de DNA de um plasmídeo de HIV-1 anulado de envelope e de um plasmídeo de expressão envelope de NLBal. O meio (DMEM, 10% de soro bovino fetal, 1% de Penicilina/estreptomicina, 1% de Glutamina1 todos de Gibco) foi mudado 16 horas de pós-transfecção e vírus contendo sobrenadante foi colhido 48 horas póstransfecção. Para determinar a sensibilidade de HIV-1 pseudotipado por NLBal, 25.000 células JC53BL (NIH AIDS Reagent Program) foram infectadas com HIV-1 pseudotipado por NLBaI na presença de uma gradiente de fármaco em placas de 96 poços (Greiner Bio-one). O volume foi adotado para 200 pL usando meio de ensaio (DMEM, 10% de soro bovino fetal, 1% de Penicilina/estreptomicina, 1% de Glutamina). Após incubação a 37°C, 90% de umidade relativa, 5% de CO2 por 3 dias, 50 pL de reagente de SteadyGlo® Luciferase (Promega) foi adicionado, incubado por 5 minutos à temperatura ambiente e luminescência foi medida usando um luminômetro (Luminoskan, Thermo). As 50% e 90% de concentrações inibitórias foram calculadas usando software Microsoft XL Fit 4. TABELA Vll

N0 do Composto Ensaio Antiviral IC50 (μΜ) 1-8 0,0052 1-9 0,0025 11-10 0,0026 III-22 0,0022 IV-13 0,084 III-20 0,003 III-23 0.006 Exemplo 37

Ensaio de Quimiotaxia

Células L1.2hCCR5 são cultivadas em RPMI 1640 contendo 5 10% de soro bovino fetal, 10 pg/mL de penicilina/estreptomicina, 0,1 mM de glutamina, piruvato de sódio 1M, 55 μΜ β-mercaptoetanol, e 250 μς/ητιί de geneticin (todos de Invitrogen). Imediatamente antes ao ajuste do ensaio de quimiotaxia, as células são giradas descendentemente e ressuspensas em Tampão de Quimiotaxia (Solução de Sal Equilibrada de Hank HBSS (Invitro10 gen) contendo 0,1% de BSA e 10mM de HEPES). As células são usadas no ensaio de quimiotaxia a uma concentração final de 5x106células/mL.

Ligantes de CCR5 hMIPIa, hMIPip ou hRANTES (R&D Systems) são diluídos em Tampão de Quimiotaxia e são usados a uma concentração final de 10 nM. As substâncias de teste e o controle de veículo apropriado são diluídos em Tampão de Quimiotaxia.

O ensaio de quimiotaxia é ajustado no sistema ChemoTx® de 96 poços de poro de 0,5 μιη (Neuroprobe). Cada teste ou substância de controle é misturado com um dos Iigantes de CCR5 e 30 μί desta mistura é colocado no poço de fundo do sistema ChemoTx®. A peneira de filtro é colocada 20 no topo dos poços de fundo e forma os poços de topo. Cada teste ou substância de controle é misturado com as células L1.2hCCR5 e 20 μί desta mistura é colocado nas poços de topo. As placas são em seguida colocadas em uma câmara umidificada e incubadas a 37°C e 5% de CO2 por 3 horas. Após o período de incubação, as células são raspadas e o filtro e as placas são giradas em uma centrífuga de topo de mesa a 2.000 rpm por 10 minutos. O filtro é, em seguida, removido e a densidade das células que migraram para as poços de fundo é detectada usando-se kit de ensaio de prolife5 ração de célula CyQUANT® (Invitrogen) e a leitora de placa Spectra MAX GeminiXS (Molecular Devices) de acordo com instruções do fabricante. Usando-se as medições de fluorescência, a migração de percentagem é determinada por % de migração = [1-(máx-obs)/(máx-mín)]x100. O valor observado (obs) é o valor observado na poço de teste. O máximo (máx) é a 10 média de Iigante + controle e o mínimo (mín) é média do não Iigante + controle. O IC5O é definido no ponto médio entre o mínimo e máximo da curva de resposta de dose. Este é calculado com Excel Fit._

TAB ELA Vlll N0 do Composto Quimiotaxia Inibição1 IC5o (μΜ) I-2 0,237 I-5 0,023 1. Inibição de quimiotaxia estimulada por RANTES Exemplo 38

Composições farmacêuticas dos Compostos objetos para administração via várias rotas foram preparadas conforme descrito neste Exemplo.

Composição para Administração Oral (A)

Ingrediente % peso/peso Ingrediente ativo 20,0% Lactose 79,5% Estearato de magnésio 0,5% Os ingredientes são misturados e dispensados em cápsulas con

tendo cerca de 100 mg cada; uma cápsula se aproximaria de uma dosagem diária total. Composição para Administração Oral (B)

Ingrediente % peso/peso Ingrediente ativo 20,0% Estearato de magnésio 0,5% Crosscarmelose sódio 2,0% Lactose 76,5% PVP (polivinilpirrolidina) 1,0% Os ingredientes são combinados e granulados usando-se um

solvente, tal como metanol. A formulação é, em seguida, secada e formada em comprimidos (contendo cerca de 20 mg de composto ativo) com uma máquina de comprimido apropriada.

Composição para Administração Oral (C)

Ingrediente % peso/peso. Composto ativo 1,0 g Ácido fumárico 0,5 g Cloreto de sódio 2,0 g Metil parabeno 0,15 g Propil parabeno 0,05 g Açúcar granulado 25,5 g Sorbitol (70% de solução) 12,85 g Veegum K (Vanderbilt Co.) 1,0 g Aromatizante 0,035 mL Corantes 0,5 mg Água destilada q.s. a 100 mL Os ingredientes são misturados para formar uma suspensão para administração oral.

Formulação Parenteral (D)

Ingrediente % peso/peso. Ingrediente ativo 0,25 g Cloreto de Sódio qs para produzir isotônico Água para injeção 100 mL O ingrediente ativo é dissolvido em uma porção da água para injeção. Uma quantidade suficiente de cloreto de sódio é, em seguida, adicionada com agitação para produzir a solução isotônica. A solução é feita para somar com o restante da água para injeção, filtrada através de um filtro 5 de membrana de 0,2 mícron e acondicionada sob condições estéreis. Formulação de Supositório (E)

Ingrediente % peso/peso Ingrediente ativo 1,0% Polietileno glicol 1000 74,5% Polietileno alicol 4000 ο λ m/ 70 Os ingredientes são fundidos juntos e misturados em um banho de vapor, e derramados em moldes contendo 2,5 g de peso total.

Formulação Tópica (F)

Ingredientes gramas Composto ativo 0,2-2 Span 60 2 Tween 60 2 Óleo mineral 5 Petrolatum 10 Metil parabeno 0,15 Propil parabeno 0,05 BHA (anisole hidróxi butilatado) 0,01 Água q.s. 100 Todos os ingredientes, exceto água, são combinados e aqueci

dos a cerca de 60°C com agitação. Uma quantidade suficiente de água a cerca de 60°C é em seguida adicionada com agitação vigorosa para emulsificar os ingredientes, e água, em seguida, adicionada q.s. cerca de 100 g. Formulações de Pulverização Nasal (G)

Várias suspensões aquosas de cerca de 0,025-0,5 por cento de

composto ativo são preparadas como formulações de pulverização casal. As formulações opcionalmente contêm ingredientes inativos tais como, por exemplo, celulose microcristalina, sódio carboximetilcelulose, dextrose, e similares. Ácido clorídrico pode ser adicionado para ajustar o pH. AS formulações de pulverização nasal podem ser distribuídas via uma bomba medida de pulverização nasal tipicamente distribuindo cerca de 50-100 microlitros de 5 formulação por atuação. Uma tabela de dosagem típica é 2-4 pulverizações toda 4-12 horas.

As características reveladas na descrição precedente, ou nas reivindicações que se seguem, expressas em suas formas específicas, ou em termos de um meio para realizar a função revelada, ou um método ou 10 processo para alcançar o resultado revelado, conforme apropriado, podem, separadamente, ou em qualquer combinação de tais características, serem utilizadas para realização da invenção em diversas formas desta.

A invenção precedente foi descrita em algum detalhe por meio de ilustração e Exemplo, para propostas de clareza e compreensão. Será 15 óbvio a um técnico no assunto que mudanças e modificações podem ser praticadas dentro do escopo das reivindicações em anexo. Portanto, é para ser compreendido que a descrição acima é pretendida para ser ilustrativa e não restritiva. O escopo da invenção deve, portanto, ser determinado, não com referência à descrição acima, mas deve, ao invés, ser determinada com 20 referência às seguintes reivindicações em anexo, junto com o escopo total de equivalentes aos quais tais reivindicações são intituladas.

Todas as patentes, pedidos de patente e publicações citados neste pedido são, desse modo, incorporados por referência em sua totalidade para todas as propostas para a mesma extensão como se cada patente individual, pedido de patente ou publicação fosse, desse modo, individualmente denotado.

Claims (20)

1. Composto, de acordo com a fórmula I no qual: <formula>formula see original document page92</formula> (a) C3.6 cicloalquila, na qual referida cicloalquila é opcionalmente substituído com um a três grupos independentemente selecionados a partir nalmente substituída com um a três grupos independentemente selecionados a partir do grupo consistindo de hidróxi, C1.3 alquila, oxo, halogênio, C1-6 alcóxi-oximino e C-|.6 alcóxi-C-i-6 alquilóxi com a condição que a referida C3.6 cicloalquil-C-i-3 alquila não é 4,4-difluorociclo-hexil-metila ou 1-hidroxil-ciclohexil-metila do grupo consistindo em hidróxi, C1-3 aiquiia, oxo, naiogênio, C1-6 alcóxioximino, e C1-6 alcóxi-C-i-6 alquilóxi; (b) C3.6 cicloalquil-Ci-3 alquila, na qual referida cicloalquila é opcio(c) no qual R6 é hidrogênio ou halogênio; (d)<formula>formula see original document page 92</formula> (e) (f) no qual méOou 2; heteroarila, heteroa(g) ril C1-S alquila, fenila C1-3 alquila na qual a referido heteroarila é piridina, pirimidina, pirazina ou piridazina e referida heteroarila ou referida fenila é independentemente substituída com 1 a 3 substituintes independentemente selecionados de C1-6 alquila, halogênio, C1-6 alcóxi, ciano ou nitro; (h) C-i-6 haloalquila; <formula>formula see original document page 93</formula> R2 é G1-6 aiquiia; R3 é hidrogênio ou C1-3 alquila; R4 é selecionado a partir do grupo consistindo de (a)-(i) e (j): (a) 4,6-dimetil-pirimidin-5-ila; (b) 4,6-dimetil-2-trifluorometil-pirimidin-5-ila; (c) 2,4-dimetil-piridin-3-ila; (d) 2,4-dimetil-1 -oxi-piridin-3-il (e) 6-ciano-2,4-dimetil-pridin-3-ila; (f) 2,4-dimetil-6-oxo-6H-piran-3-il (g) 2,4-dimetil-6-oxo-1,6-dihidro-piridin-3-ila; (h) 1,2,4-trimetil-6-oxo-1,6-dihidro-piridin-3-ila; (i) 3,5-dimetil-1-oxi-1H-pirazol-4-ila; e, (j) 5-ciano-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-ila; ou, (k) 3-metil-5-trifluorometil-isoxazol-4-il (I) 3,5-dimetit-1-hidróxi-pirazol-4-ila; R5 é C1-6 acila, C1-6 alcoxicarbonila, Ci-6 alquil SO2, Ci-6 haloalquila, C3-6 cicloalquila, oxetanila, tetrahidrofuranila ou tetrahidropiranila, e n é 0-3; p é 1 ou 3; ou um sal de adição ácido farmaceuticamente aceitável destes.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, no qual R1 é 4- alcóxi-ciclo-hexilmetila, ou 4-hidróxi-ciclo-hexilmetila, R3 é metila e R4 é (a), (c) ou (e).

3. Composto, de acordo com a reivindicação 2, no qual a configuração de C-5 é S.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, no qual R1 é (e), (j), (k) ou (I), R3 é metila e R4 é (a), (c) ou (e).

5. Composto, de acordo com a reivindicação 4, no qual R5 é C1-6 alcoxicarbonila ou 2,2-difluoroetila.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 5, no qual a configuração de C-5 é S.

7. Composto, de acordo com a reivindicação 1, no qual R1 é (c), (d) ou (i), R3 é metila e R4 é (a), (c) ou (e).

8. Composto, de acordo com a reivindicação 1, no qual R1 é (g), R3 é metila, R4 é (a), (c) ou (e) e a configuração de C-5 é S.

9. Composto, de acordo com a reivindicação 1, cujo composto é selecionado a partir do grupo consistindo em:5-butil-9-[1 -(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4- il]-3-((1S,3S)-3-metóxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan- 2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(4-metóxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(4-metóxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(4-hidróxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carboni!)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(4-hidróxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(4-etóxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan- 2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(4-etóxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(4-metóximetóxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metiipiperidin-4-il]-3-(4-metóximetóxi-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, 5-{4-[(S)-5-butil-3-(4-hidróxi-ciclo-hexilmetil)-2-oxo-1-oxa-3,9- diaza-espiro[5.5]undec-9-il]-4-metil-piperidina-1-carbonil}-4,6-dimetil-piridina2-carbonitriIa, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-[(1R,5S,6S)-1-(3-oxa-biciclo[3.1.0]hex-6-il)metil]-1-oxa-3,9- diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona, 5-(4-{(S)-5-butil-3-[(1R,5S,6S)-1-(3-oxa-biciclo[3.1.0]hex-6- il)metil]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-9-il}-4-metil-piperidina-1- carbonil)-4,6-dimetil-piridina-2-carbonitrila, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-2-trifluorometil-pirimidina-5-carbonil)4-metil-piperidin-4-il]-3-[(1R,5S,6S)-1-(3-oxa-biciclo[3.1.0]hex-6-il)metil]-1- oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(6-difluorometil-2,4-dimetil-piridina-3-carbonil)-4- metil-piperidin-4-il]-3-(3-oxa-biciclo[3.1.0]hex-6-ilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(hexa-hidro-furo[2,3-b]furan-3-ilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(hexa-hidro-furo[2,3-b]furan-3-ilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, 5-{4-[(S)-5-butil-3-(hexa-hidro-furo[2,3-b]furan-3-ilmetil)-2-oxo-1- oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-9-il]-4-metil-piperidina-1-carbonil}-4,6-dimetilpiridina-2-carbonitrila, 5-butil-9-[1-(2,4-dimetil-piridina-3-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]3-(hexa-hidro-furo[2,3-b]furan-3-ilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan2-ona; (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(R)-1 -[1,4]dioxan-2-ilmetil-1 -oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, 5-[4-((S)-5-butil-3-(R)-1-[1,4]dioxan-2-ilmetil-2-oxo-1-oxa-3,9- diaza-espiro[5.5]undec-9-il)-4-metil-piperidina-1-carbonil]-4,6-dimetil-piridina2-carbonitriia, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(S)-1 -[1,4]dioxan-2-ilmetil-1 -oxa-3,9-diazaespíro[5.5]undecan-2-ona, 5-[4-((S)-5-butil-3-(S)-1 -[1,4]dioxan-2-ilmetil-2-oxo-1 -oxa-3,9- diaza-espiro[5.5]undec-9-il)-4-metil-piperidina-1-carbonil]-4,6-dimetil-piridina2-carbonitrila, (S)-5-butil-9-[1 -(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-((1S,5R,6R)-6-flúor-3-oxa-biciclo[3.1.0]hex-6-ilmetil)-1-oxa- .3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona, 3-(1-acetil-piperidin-4-ilmetil)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5- carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona, 3-(1-acetil-piperidin-3-ilmetil)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5- carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona, 5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4- il]-3-(1-isobutiril-piperidin-4-ilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2- ona, 3-[2-(1 -acetil-piperidin-4-il)-etil]-5-butil-9-[1 -(4,6-dimetilpirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, 5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4- il]-3-(1-metanosulfonil-piperidin-4-ilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, metila éster ácido 4-{(S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5- carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3- ilmetil}-piperidina-1-carboxílico, metila éster ácido 3-{5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5- carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3- ilmetil}-piperidina-1-carboxílico, etila éster ácido 4-{(S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5- carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3- ilmetil}-piperidina-1-carboxílico, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(1-oxetan-3-il-piperidin-4-ilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-3-(1 -ciclopropil-piperidin-4-ilmetil)-9-[1 -(4,6-dimetilpirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-3-[1-(2,2-diflúor-etil)-piperidin-4-ilmetil]-9-[1-(4,6- dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, 5-(4-{(S)-5-butil-3-[1-(2,2-diflúor-etil)-piperidin-4-ilmetil]-2-oxo-1- oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-9-il}-4-metil-piperidina-1-carbonil)-4,6-dimetilpiridina-2-carbonitrila, etila éster ácido (S)-3-{(S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5- carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3- ilmetil}-pirrolidina-1 - carboxílico, metila éster ácido (S)-3-{(S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5- carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3- ilmetil}-pirrolidina-1 - carboxílico, (S)-5-butil-3-[(S)-1 -(2,2-diflúor-etil)-pirrolidin-3-ilmetil]-9-[1 -(4,6- dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, metila éster ácido (R)-3-{(S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5- carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3- ilmetil}-pirrolidina-1- carboxílico, etila éster ácido (1R,5S,6R)-6-{(S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetilpirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undec-3-ilmetil}-3-aza-biciclo[3.1.0]hexano-3- carboxílico, (S)-5-butil-3-[(1R,5S,6R)-3-(2,2-difluor-etil)-3-azabiciclo[3.1.0]hex-6-ilmetil]-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-3-[(1R,5S,6R)-3-(2,2-difluor-etil)-3-azabiciclo[3.1.0]hex-6-ilmetil]-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona, metila ester acido (1 R,5S,6R)-6-{(S)-5-butil-9-[4-metil-1 -(3-metil-5-trifluorometil-isoxazol-4-carbonil)-piperidin-4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3-ilmetil}-3-aza-biciclo[3.1.0]hexano-3- carboxilico, (S)-3-((1R,5S,6R)-3-acetil-3-aza-biciclo[3.1.0]hex-6-ilmetil)-5- butii-9-[4-metil-1-(3-metil-5-trifluorometil-isoxazol-4-carbonil)-piperidin-4-il]-1- oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona, metila ester acido (1S,3R,5R)-3-{(S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3-ilmetil}-8-aza-biciclo[3.2.1]octano-8- carboxNico, (S)-5-butil-3-(1-metanosulfonii-piperidin-4-ilmetil)-9-[4-metil-1-(3- metil-5-trifluorometil-isoxazcH-4-carbonil)-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, metila ester acido 4-{(S)-5-butil-9-[4-metil-1-(3-metil-5-trifluorometil-isoxazol-4-carbonil)-piperidin4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3-ilmetil}-piperidina-1 - carboxilico, (S)-3-(1-acetil-piperidin-4-ilmetil)-5-butil-9-[4-metil-1-(3-metil-5- trifluorometil-isoxazol-4-carbonil)-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona; (S)-3-(1-acetil-piperidin-3-ilmetil)-5-butil-9-[4-metil-1-(3-metil-5-trifluorometil-isoxazol-4-carbonil)-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona; composto com acido formico,5-butil-3-(3,3-difluor-ciclobutilmetil)-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5- carbonil)-4-metil-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(4-oxo-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona,4-{5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metil-piperidin4-il]-2-oxo-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undec-3-ilmetil}-benzonitrila, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(4-hidróxi-4-metil-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(2,4-dimetil-piridina-3-carbonil)-4-metil-piperidin4-il]-3-pirimidin-2-ilmetil-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona, 5-{4-[(S)-5-butil-3-(4,6-dimetil-pirimidin-5-ilmetil)-2-oxo-1-oxa-3,9- diaza-espiro[5.5]undec-9-il]-4-metil-piperidina-1-carbonil}-4,6-dimetil-piridina2-carbonitrila, (S)-5-butil-3-(4,4-diflúor-ciclo-hexil)-9-[1 -(4,6-dimetil-pirimidina-5- carbonii)-4-metÍi-piperidin-4-il]-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-piridin-2-il-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2-ona, 5-[4-((S)-5-butil-2-oxo-3-piridin-2-il-1-oxa-3,9-diaza- espiro[5.5]undec-9-il)-4-metil-piperidina-1 -carbonil]-4,6-dimetil-piridina-2- carbonitrila, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-[2-(tetrahidropiran-4-il)-etil]-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(4-metóxiimino-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(4-etoxiimino-ciclo-hexilmetil)-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undecan-2-ona, (S)-5-butil-9-[1-(4,6-dimetil-pirimidina-5-carbonil)-4-metilpiperidin-4-il]-3-(tetrahidro-piran-4-il)-1-oxa-3,9-diaza-espiro[5.5]undecan-2- ona, e, 5-{4-[(S)-5-butil-3-(2,2-diflúor-etil)-2-oxo-1-oxa-3,9-diazaespiro[5.5]undec-9-il]-4-metil-piperidina-1-carbonil}-4,6-dimetil-piridina-2- carbonitrila, e sais farmaceuticamente aceitáveis destes.

10. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, para uso como medicamento.

11. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, para uso como medicamento para tratamento ou prevenção de uma infecção de vírus da imunodeficiência humana (HIV), ou tratamento de AIDS ou ARC.

12. Uso do composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, para a fabricação de um medicamento para tratamento ou prevenção de uma infecção de vírus da imunodeficiência humana (HIV), ou tratamento de AIDS ou ARC.

13. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, para uso como medicamento para tratamento de artrite reumatoide.

14. Uso do composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, para a fabricação de um medicamento para tratamento de artrite reumatoide.

15. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, para uso como medicamento para tratamento de asma ou doença pulmonar obstrutiva congestiva (COPD).

16. Uso do composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, para a fabricação de um medicamento para tratamento de asma ou doença pulmonar obstrutiva congestiva (COPD).

17. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, para uso como medicamento para tratamento de rejeição de transplante de órgão sólido.

18. Uso do composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9 para a fabricação de um medicamento para tratamento de rejeição de transplante de órgão sólido.

19. Composição farmacêutica compreendendo um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, e pelo menos um transportador farmaceuticamente aceitável, diluente, ou excipiente.

20. Invenção conforme aqui antes descrita.