BRPI0808941A2 - Método para o tratamento de dor ou sintomas residuais em depressão, uso de um composto, e, composto - Google Patents

Description

“MÉTODO PARA O TRATAMENTO DE DOR OU SINTOMAS RESIDUAIS EM DEPRESSÃO, USO DE UM COMPOSTO, E, COMPOSTO”

Fundamentos

O composto l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina é revelado no pedido de patente internacional WO 03/029232. É dito que o composto é um inibidor do transportador de serotonina e tem afinidade pelo receptor 2C de serotonina (5-HT2c), e como tal é útil no tratamento de distúrbios de humor, tais com depressão e ansiedade.

Como mostrado nos exemplos, contudo, o composto tem um perfil farmacológico mais amplo que também toma o composto útil no tratamento de outras doenças. Este perfil farmacológico tem sido revelado no pedido de patente internacional WO 2007/144005 junto com o uso de dito composto para o tratamento de doenças adicionais.

A percepção de dor é mais complicada do que uma transmissão de sinais direta de uma parte lesionada do corpo para receptores específicos no cérebro, e sendo que a dor percebida é proporcional à lesão. Mais propriamente, dano em tecido periférico e lesão em nervos podem causar alterações nas estruturas neurais centrais envolvidas em percepção de dor afetando sensibilidade à dor subseqüente. Esta neuroplasticidade pode ocasionar uma sensibilização central em resposta aos estímulos nóxios de duração mais longa, que podem se manifestar como e.g. dor crônica, i.e. que a percepção de dor permanece até mesmo após ter sido interrompido o estímulo nóxio, ou como hiperalgesia, i.e. uma resposta aumentada a um estímulo, que é normalmente dolorosa. Um dos exemplos mais misteriosos e dramáticos disto é a "síndrome de membro fantasma", i.e. a persistência de dor que existe em um membro antes de sua amputação. Para uma revisão recente de neuroplasticidade central e dor veja Melzack et al. em Ann. N.Y. Acad. Sci., Dor crônica, tal como dor neuropática manifesta-se diferentemente de outros tipos de dor, e.g. dor somática ou visceral. A dor é freqüentemente descrita como aguda, ardente, de alfinetes e agulhas, dormente ou penetrante. Causas comuns de dor neuropática incluem 5 alcoolismo, amputação, problemas dorsais, nas pernas e no quadril, quimioterapia, diabete, HIV, esclerose múltipla, cirurgia espinhal, e infecção pelo vírus do herpes zoster.

O componente central para cor crônica pode explicar o porquê da dor crônica, tal como e.g. dor neuropática freqüentemente responde insatisfatoriamente aos analgésicos clássicos, tais como drogas antiinflamatórias não-estereoidais (NSAIDS) e analgésicos opióides. Antidepressivos tricíclicos (TCA), tipificados por amitrilina, têm se tomado padrão para o tratamento de dor neuropática, e acredita-se que o efeito é mediado pelo efeito inibitório combinado sobre o transportador de serotonina e o transportador de norepinefrina [Clin Ther., 26, 951-979, 2004 ]. Mais recentemente, os denominados antidepressivos de ação dupla tendo um efeito inibitório sobre ambas as recaptações de serotonina e de norepinefrina têm sido usados clinicamente para o tratamento de dor neuropática [Human Psychopharm., 19, S21-S25, 2004]. Exemplos de antidepressivos de ação dupla são venlafaxina e duloxetina, e esta classe de antidepressivos é freqüentemente chamada de SNRI.

Dados sobre o uso de inibidores da recaptação de serotonina (SSRI) para dor neuropática são escassos, mas geralmente sugerem um efeito limitado [Bas. Clin. Pharmaeol., 96, 399-409, 2005]. De fato, tem sido 25 levantada a hipótese de que SSRTs são apenas fracamente antinociceptivos em e de si mesmos mas que inibição do transportador de serotonina aumenta o efeito antinociceptivo de inibição da recaptação de norepinefrina. Esta noção é confirmada por uma revisão de 22 estudos em animais e cinco estudos em humanos mostrando que SNRI1S têm efeito antinociceptivo superior comparados como inibidores da recaptação de norepinefrina, que de novo são superiores a SSRI [Pain Med. 4, 310-316, 2000].

O uso de antidepressivos tricíclicos está, contudo, associado com efeitos colaterais anticolinérgicos, conhecidos, tais como e.g. sonolência, ansiedade, inquietação, e dificuldades cognitivas e de memória. Disso, há uma necessidade na arte de se encontrarem modos alternativos de tratar dor.

Pacientes deprimidos recebendo antidepressivos, tais como e.g. SSRTs freqüentemente respondem apenas parcialmente ao tratamento no sentido de que sintomas, em particular relacionados com sono e cognição, permanecem \J.Psychopharmacol., 20(3), 29-34, 2006]. Estes sintomas residuais aumentam o risco de recaída e são perturbação geral para o paciente.

Sumário da invenção

Em uma modalidade, a invenção refere-se a um método de tratar dor ou sintomas residuais em depressão, o método compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de l-[2-(2,4- dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina e um seu sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável (composto I) a um paciente em necessidade da mesma.

Em uma modalidade, a invenção refere-se ao uso de l-[2-(2,4- dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina e um seu sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável na fabricação de um medicamento para o tratamento de dor ou sintomas residuais em depressão.

Em uma modalidade, a invenção refere-se à l-[2-(2,4-dimetilfenil-sulfanil)-fenil]-piperazina e seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis para uso no tratamento de dor ou sintomas residuais em depressão.

Figuras

Figura 1: XRPD de base cristalina de composto I.

Figura 2: XRPD de forma alfa de sal de bromidrato de composto I.

Figura 3: XRPD de forma beta de sal de bromidrato de

composto I.

Figura 4: XRPD de forma gama de bromidrato de composto I.

Figura 5: XRPD de semi-hidrato de bromidrato de composto I.

Figura 6: XRPD da mistura de solvato de acetato de etila e forma alfa do sal de bromidrato de composto I.

Figura 7: XRPD de sal de cloridrato de composto I.

Figura 8: XRPD de mono-hidrato de sal de cloridrato de

composto I.

Figura 9: XRPD de sal de mesilato de composto I.

Figura 10: XRPD sal de fumarato de composto I.

Figura 11: XRPD de sal de maleato de composto I.

Figura 12: XRPD de sal de meso-tartarato de composto I.

Figura 13: XRPD de sal de L-(+)-tartarato de composto I.

Figura 14: XRPD de sal de D-(-)-tartarato de composto I.

Figura 15: XRPD de sal de sulfato de composto I.

Figura 16: XRPD de sal de fosfato de composto I.

Figura 17: XRPD de sal de nitrato de composto I.

Figura 18: Efeito de composto I no teste de formalina

intradermal. Eixo-X mostra a quantidade de composto administrada; eixo-Y mostra a quantidade de tempo (s) gasto lambendo a pata. Figura 18a: Resposta no período de 0-5 minutos; Figura 18b: Resposta no período de 20- 30 minutos.

Figura 19a: Níveis extra-celulares de acetil-colina em córtex

pré-frontal em ratos livremente móveis sob administração de sal de HBr de 1- [2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina.

Figura 19b: Níveis extra-celulares de acetil-colina em hipocampo ventral em ratos livremente móveis sob administração de sal de HBr de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina. Figura 20: Efeito de sal de HBr de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina sobre o condicionamento de medo contextual em ratos Sprague-Dawley quando dado 60 minutos antes de aquisição. Comportamento indiferente foi classificado durante período de habituação de 58-s antes do choque US em pata (aquisição de pré-choque) {barras brancas). Comportamento indiferente foi medido 24 h após treinamento (teste de retenção) (<barras pretas).

Figura 21: Efeito de sal de FCBr de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina sobre o condicionamento de medo contextual em ratos Sprague-Dawley quando dado 1 h antes do teste de retenção. Comportamento indiferente foi classificado durante 58-s, antes do choque US em pata (aquisição de pré-choque) {barras brancas). Comportamento indiferente foi medido 24 h após treinamento (teste de retenção) {barras pretas).

Figura 22: Efeito de sal de HBr de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina sobre o condicionamento de medo contextual em ratos Sprague-Dawley quando dado 60 imediatamente após aquisição. Comportamento indiferente foi classificado durante 58-s, antes do choque US em pata (aquisição de pré-choque) {barras brancas). Comportamento indiferente foi medido 24 h após treinamento (teste de retenção) {barras pretas).

Figura 23: Mudança no item 4 (Insônia Precoce) da classificação HAM-D para placebo, 5 mg e 10 mg de composto I (sal de HBr) durante 6 semanas. Houve aproximadamente 100 pacientes em cada grupo.

Figura 24: Mudança no item 5 (Insônia Intermediária) da classificação HAM-D para placebo, 5 mg e 10 mg de composto I (sal de HBr) durante 6 semanas. Houve aproximadamente 100 pacientes em cada grupo.

Figura 25: Mudança no item 6 (Insônia Tardia) da classificação HAM-D para placebo, 5 mg e 10 mg de composto I (sal de HBr) durante 6 semanas. Houve aproximadamente 100 pacientes em cada grupo.

Figura 26: Efeito de composto I sobre limite de remoção em um modelo de lesão por constrição crônica em rato.

Descrição detalhada da invenção

A invenção refere-se ao uso de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina e seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis (composto I). A estrutura de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]piperazina é

/

Em uma modalidade, ditos sais de adição de ácido

farmaceuticamente aceitáveis são sais de adição de ácido de ácidos que são não-tóxicos. Ditos sais incluem sais feitos de ácidos orgânicos, tais como ácidos maleico, fumárico, benzóico, ascórbico, succínico, oxálico, bismetileno-salicílico, metano-sulfônico, etano-dissulfônico, acético, propiônico, 15 tartárico, salicílico, cítrico, glicônico, lático, málico, mandélico, cinâmico, citracônico, aspártico, esteárico, palmítico, itacônico, glicólico, p-aminobenzóico, glutâmico, benzeno-sulfônico, teofilina-acético, bem como as 8- halo-teofilinas, por exemplo 8-bromo-teofilina. Ditos sais também podem ser feitos de sais inorgânicos, tais como ácidos clorídrico, bromídrico, sulfürico, 20 sulfâmico, fosfórico e nítrico. Menção particular é feita aos sais preparados a partir de ácido metano-sulfônico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido mesotartárico, ácido (+)-tartárico, ácido (-)-tartárico, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfurico, ácido fosforoso e ácido nítrico. Menção distinta é feita ao sal de bromidrato.

Formas de dosagem oral, e em particular tabletes, são freqüentemente preferidas pelos pacientes e o médico devido à facilidade de administração e à conseqüente aceitação. Para tabletes, é preferível que os ingredientes ativos sejam cristalinos. Em uma modalidade, o composto I é cristalino.

Em uma modalidade os cristais usados na presente invenção são solvatos, i.e. cristais nos quais moléculas de solvente formam parte da estrutura do cristal. O solvato pode ser formado de água, em cujo caso os 10 solvatos são freqüentemente chamados de hidratos. Alternativamente, os solvatos podem ser formados de outros solventes, tais como e.g. etanol, acetona, ou acetato de etila. A quantidade exata de solvato freqüentemente depende das condições. Por exemplo, hidratos tipicamente perderão água à medida que a temperatura é aumentada ou a umidade relativa é diminuída.

Em uma modalidade, o composto I é um cristal não-solvatado.

Alguns compostos são higroscópicos, i.e. absorvem água quando expostos à umidade. Higroscopicidade é geralmente considerada como uma propriedade indesejada para os compostos que são para estarem presentes em uma formulação farmacêutica, em particular em uma 20 formulação seca, tais como tabletes. Em uma modalidade, a invenção proporciona o uso de cristais com higroscopicidade baixa. Para formas de dosagem oral usando ingredientes ativos cristalinos também é benéfico se ditos cristais estão bem definidos. No presente contexto, o termo "bem definido" em particular significa que a estequiometria está bem definida, i.e. 25 que a razão entre os íons formando o sal é a razão entre números inteiros pequenos, tais como 1:1, 1:2, 2:1, 1:1:1, etc. Em uma modalidade, o composto

I forma cristais bem definidos.

O composto I cristalino pode existir em mais de uma forma,

i.e. pode existir em formas polimórficas. Formas polimórficas existem se um composto pode se cristalizar em mais de uma forma. A presente invenção é intencionada para incluir todas tais formas polimórficas, quer como compostos puros quer como suas misturas.

Em uma modalidade, os compostos da presente invenção estão em uma forma purificada. O termo "forma purificada" é intencionado para indicar que o composto está essencialmente livre de outros compostos ou outras formas do mesmo composto, conforme for o caso.

Em uma modalidade, a invenção proporciona o uso de sais cristalinos de composto I com XRDP como mostrado em Figuras 1-17, e em particular figuras 2, 3, 4 e 5.

A tabela abaixo mostra as reflexões de XRDP maiores para

composto I.

Posições de pico de raios-X selecionadas (°2Θ), Todos valores

±0,1°

Base cristalina 11,10 16,88 17,42 22,23 -bromidrato (a) 5,85 9,30 17,49 18,58 -bromidrato (β) 6,89 9,73 13,78 14,62 -bromidrato (γ) 11,82 16,01 17,22 18,84 -bromidrato (hidrato) 10,69 11,66 15,40 17,86 -bromidrato (solvato de acetato de etila) 8,29 13,01 13,39 16,62 -cloridrato 9,41 12,37 19,66 22,55 -cloridrato (mono-hidrato) 7,72 13,45 15,39 17,10 -mesilato 8,93 13,39 15,22 17,09 -hidrogeno-fumarato 5,08 11,32 17,12 18,04 -hidrogeno-maleato 9,72 13,19 14,72 17,88 -meso-hidrogeno-tartarato 9,51 10,17 16,10 25,58 -L-(+)-hidrogeno-tartarato 13,32 13,65 14,41 15,80 -D-(-)-hidrogeno-tartarato 13,32 13,65 14,41 15,80 -hidrogeno-sulfato 11,82 17,22 17,72 20,13 -di-hidrogeno-fosfato 7,91 11,83 15,69 17,24 -nitrato 12,50 17,41 18,12 18,47 Como evidenciado e.g. pelas figuras 2-5, compostos da

presente invenção, in casu o sal de bromidrato, podem existir em várias formas, i.e. serem polimórficos. As formas polimórficas têm propriedades diferentes como mostradas nos exemplos. A forma beta do sal de bromidrato é a mais estável como demonstrado pelo ponto de fusão em DSC mais alto e pela solubilidade mais baixa. Além disso, a forma beta tem uma combinação atrativa de higroscopicidade e solubilidade baixas, que toma este composto particular adequado para preparação de tabletes. Por isso, em uma modalidade, a invenção fornece o sal de bromidrato de l-[2-(2,4-dimetil5 fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina com reflexões em XRDP em aproximadamente 6,89, 9,73, 13,78 e 14.62 (°2Θ), e em particular com uma XRPD como mostrada em figura 3.

A solubilidade de um ingrediente ativo é também significativa para a escolha da forma de dosagem porque pode ter um impacto direto sobre a biodisponibilidade. Para formas de dosagem oral, acredita-se que uma solubilidade mais alta do ingrediente ativo é geralmente benéfica porque aumenta a biodisponibilidade.

O perfil farmacológico de composto I é fornecido nos exemplos, mas podem ser sumariados como segue. Composto I é um inibidor do transportador de serotonina, ele antagoniza o receptor 3 de serotonina (5- HT3) e é um agonista parcial do receptor IA de serotonina (5-HTia).

Os dados relatados em exemplos 14 e 17 mostram que o composto I é útil no tratamento de dor, e que até podem ter um efeito analgésico

Em uma modalidade dita dor é dor crônica incluindo dor de

membro fantasma, dor neuropática, neuropatia diabética, neuralgia pósherpética (PHN), síndrome do túnel carpal (CTS), neuropatia por HIV, síndrome da dor regional complexa (CPRS), neuralgia do trigêmeo, tique doloroso, intervenção cirúrgica (e.g. analgésicos pós-operativos), vasculopatia 25 diabética, resistência capilar, sintomas diabéticos associados com insulite, dor associada com menstruação, dor associada com câncer, dor dental, dor de cabeça, enxaqueca, dor de cabeça do tipo tensão, neuralgia trigeminal, síndrome de articulação temporomandibular, dor miofascial, lesão muscular, síndrome de fibromialgia, dor de osso e articulação (osteoartrite), artrite reumatóide e edema resultante de trauma associado com queimaduras, luxações ou dor de fratura de osso devido à osteoartrite, osteoporose, metástase óssea ou razões desconhecidas, gota, fibrosite, dor miofascial, síndromes da saída do tórax, dor dorsal superior ou dorsal inferior (sendo que 5 dor dorsal resulta de doença espinhal sistemática, regional ou primária (radiculopatia), dor pélvica, dor torácica cardíaca, dos torácica não-cardíaca, dor associada à lesão na medula espinhal (SCI), dor central após derrame cerebral, neuropatia de câncer, dor de AIDS, dor de célula falciforme ou dor geriátrica. Em uma modalidade, dor é síndrome do intestino irritável (IBS).

Uma fração de pacientes com distúrbio depressivo maior

responderá ao tratamento com e.g. SSRI no sentido de que melhorarão em escalas clinicamente relevantes, tais como HAMD ou MADRS, mas onde outros sintomas, tais como sintomas cognitivos e/ou de sono permanecem. No presente contexto, estes pacientes são chamados de sofredores de depressão com sintomas residuais.

Sintomas cognitivos incluem um declínio em funções cognitivas ou domínios cognitivos, e.g. memória de trabalho, atenção e vigilância, memória e aprendizado verbais, memória e aprendizado visuais, raciocínio e solução de problema e.g. função executiva, velocidade de 20 processamento e/ou cognição social. Em particular, sintomas cognitivos podem indicar déficits em atenção, pensamento desorganizado, fala lenta, dificuldade em entendimento, concentração insatisfatória, enfraquecimento de solução de problema, memória fraca, dificuldades em expressão de pensamentos e/ou dificuldades em integrar pensamentos, sensações e 25 comportamento, ou dificuldades em extinção de pensamentos irrelevantes.

Como mostrado em exemplo 15, composto I causa um aumento no nível extracelular de acetil-colina no córtex pré-frontal e no hipocampo ventral em ratos. E esperado que estas descobertas pré-clínicas se traduzam em um efeito clínico no tratamento de enfraquecimentos cognitivos, cf. o uso de inibidores de acetil-colina esterase no tratamento de enfraquecimentos cognitivos, e.g. em mal de Alzheimer. Confirmação adicional desta posição pode ser encontrada em exemplo 16, no qual dados mostram que composto I intensifica memória contextual em ratos. No todo, os 5 efeitos sobre níveis de acetil-colina e memória em ratos fortemente sugerem que o composto I tem um efeito benéfico sobre enfraquecimento cognitivo. Disso, acredita-se que o composto I é particularmente útil no tratamento de depressão com sintomas residuais, em particular com sintomas residuais relacionados com cognição.

Composto I tem sido testado em testes clínicos em pacientes

usando HAM-D (Escala de classificação de Hamilton para depressão) como ponto fmal clínico. A escala HAM-D pode ser usada para avaliar a severidade de depressão em pacientes por meio de um questionário de 24 itens. Itens 4, 5 e 6 da escala referem-se a como os pacientes dormem, i.e. é fácil cair no sono 15 (insônia precoce), o paciente acorda durante a noite (insônia intermediária), e o paciente acorda cedo pela manhã (insônia tardia). O composto foi testado a 5 e 10 mg diariamente contra placebo com aproximadamente 100 pacientes por tipo de insônia. Os dados em Figuras 23-25 mostram claramente que o composto I causa uma melhoria grande e dependente de dose do padrão de 20 sono que é superior àquele proporcionado pelo placebo. Disso, acredita-se que o composto I é particularmente útil no tratamento de depressão com sintomas residuais, em particular sintomas residuais relacionados com o sono.

r

E bem sabido que distúrbios de sono são um efeito colateral adverso da maioria dos antidepressivos. Em particular é relatado que SSRTs e 25 compostos que inibem o transportador de noradrenalina causam problemas com iniciação e manutenção do sono e problemas com insônia também são freqüentemente relatados [Int.Clin.Psychpharm., 21 (suppl. 1), S25-S29, 2006]. Outros relatam que tais compostos causam sono REM suprimido, latência de sono aumentada, aumento em ação de acordar durante a noite, e fragmentação de sono [Hum.Psychopharm.Clin.Exp., 20, 533-559, 2005]. Portanto é um resultado surpreendente que a administração de composto I não está associada com efeitos adversos no solo, mas de fato proporciona uma melhoria de padrão do sono.

É bem sabido que o tratamento com antidepressivos em geral e

com SSRTs em particular pode estar associado com disfunção sexual, que freqüentemente causa descontinuação do tratamento. Tanto quanto 30-70% dos pacientes em SSRIs relatam déficits em função sexual [J.Clin.Psych., 66, 844-848, 2005], cujos déficits incluem libido diminuída, orgasmos retardados, reduzidos ou ausentes, excitação diminuída, e disfunção erétil.

Um total de 114 sujeitos saudáveis tem sido exposto ao composto I em testes clínicos; destes 114 sujeitos, apenas um sujeito relatou disfunção sexual. Estes dados sugerem que intervenção clínica usando composto I está associada com surpreendentemente poucos déficits em funcionamento sexual.

Esta noção foi adicionalmente confirmada por testes clínicos conduzidos em pacientes. O teste clínico mencionado acima em pacientes também capturou efeitos sexuais adversos relatados pelos pacientes. A tabela abaixo mostra o número de pacientes relatando os tipos específicos de efeitos adversos sexualmente relacionados.

Efeito adverso relatado Placebo 5 mg 10 mg Anorgasmia 0 0 0 Ejaculação atrasada 0 0 0 Disfunção erétil 0 0 0 Libido decrescida 0 1 1 Orgasmo anormal 2 0 0 Perda de libido 0 1 0 Sensação orgásmica diminuída 0 0 0 Os resultados acima que mostram que o efeito adverso sexual

de composto I é similar ao placebo e assim muito melhor do que o que normalmente seria esperado de um antidepressivo, e em particular de um SSRL Disso, acredita-se que uma intervenção clínica compreendendo a administração de composto I é particularmente benéfica para o paciente pelo fato de que os efeitos adversos sexualmente relacionados estão diminuídos (ou até ausentes) comparada com uma intervenção clínica compreendendo a administração de um SSRL 5 Em uma modalidade, a invenção refere-se a um método para o

tratamento de dor ou sintomas residuais em depressão, o método compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina e seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis (composto I) a um paciente em 10 necessidade da mesma. Em uma modalidade, dito paciente tem sido diagnosticado com as doenças mencionadas acima.

Uma "quantidade terapeuticamente eficaz" de um composto como aqui usada significa uma quantidade suficiente para curar, aliviar ou parcialmente deter as manifestações clínicas de uma dada doença e suas 15 complicações em uma intervenção terapêutica compreendendo a administração de dito composto. Uma quantidade adequada para realizar isto é definida como "quantidade terapeuticamente eficaz". Quantidades eficazes para cada propósito dependerão da severidade da doença ou lesão bem como do peso e do estado geral do sujeito. Será entendido que determinação de uma 20 dosagem apropriada pode ser realizada usando experimentação rotineira, por construção de uma matriz de valores e teste de pontos diferentes na matriz, que está toda dentro das capacidades ordinárias de um médico treinado.

Os termos "tratamento" e "tratar" como aqui usados significam o manejo e o cuidado de um paciente para o propósito de combater uma condição, tal como uma doença ou um distúrbio. Os termos são intencionados para incluírem o espectro total de tratamentos para uma dada condição da qual

o paciente está sofrendo, tal como administração do composto ativo para aliviar os sintomas ou as complicações, para atrasar a progressão da doença, do distúrbio ou da condição, para aliviar ou atenuar os sintomas e as complicações, e/ou para curar ou eliminar a doença, o distúrbio ou a condição bem como para prevenir a condição, sendo que a prevenção é para ser entendida como o manejo e o cuidado de um paciente para o propósito de combater a doença, a condição, ou o distúrbio e inclui a administração dos 5 compostos ativos para prevenir o início dos sintomas ou das complicações. Contudo, tratamento profilático (preventivo) ou terapêutico (curativo) são dois aspectos separados da invenção. O paciente a ser tratado é preferivelmente um mamífero, em particular um ser humano.

Tipicamente, o tratamento da presente invenção envolverá administração diária de composto I. Isto pode envolver administração uma vez ao dia, ou administração duas vezes ao dia ou até mais freqüentemente.

Em uma modalidade, a invenção refere-se ao uso de l-[2-(2,4- dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina e seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis (composto I) na fabricação de um medicamento para o tratamento de dor ou sintomas residuais em depressão.

Em uma modalidade, a invenção refere-se à l-[2-(2,4-dimetilfenil-sulfanil)-fenil]-piperazina e aos seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis (composto I) para uso no tratamento de dor ou sintomas residuais em depressão.

As formulações farmacêuticas da invenção podem ser

preparadas por métodos convencionais na arte. Menção particular é feita à preparação de tabletes, que podem ser preparados por misturação do ingrediente ativo com adjuvantes e/ou diluentes ordinários e substancialmente compressão da mistura em uma máquina de preparação de tabletes 25 convencional. Exemplos de adjuvantes ou diluentes compreendem: hidrogeno-fosfato de cálcio anidro, PVP5 copolímeros de PVP-VA, celulose microcristalina, amido-glicolato de sódio, amido de milho, manitol, amido de batata, talco, estearato de magnésio, gelatina, lactose, gomas, e semelhantes. Quaisquer outros adjuvantes ou aditivos costumeiramente usados para tais propósitos tais como corantes, aromatizantes, conservantes etc. podem ser utilizados desde que sejam compatíveis com os ingredientes ativos.

Soluções para injeção podem ser preparadas por dissolução do ingrediente ativo e dos possíveis aditivos em uma parte do solvente para injeção, preferivelmente água estéril, ajuste da solução para o volume desejado, esterilização da solução e enchimentos de frascos ou ampolas com a mesma. Qualquer aditivo adequado convencionalmente usado na arte pode ser adicionado, tal como agentes de tonicidade, conservantes, antioxidantes, etc.

As composições farmacêuticas desta invenção ou aquelas que são fabricadas de acordo com esta invenção podem ser administradas por qualquer rota adequada, por exemplo oralmente na forma de tabletes, cápsulas, pós, xaropes, etc., ou parenteralmente na forma de solução para injeção. Para preparação de tais composições, métodos bem conhecidos na arte podem ser usados, e quaisquer veículos, diluentes, excipientes ou outros aditivos farmaceuticamente aceitáveis normalmente usados na arte podem ser utilizados.

Convenientemente, composto I é administrado em forma de dosagem unitária contendo ditos compostos em uma quantidade de cerca de 1 a 50 mg. Acredita-se que um limite superior é ajustado pela dependência de concentração da atividade de 5-HT3. A dose diária total está costumeiramente dentro da faixa de cerca de 1-20 mg, tal como cerca de 1 a 10 mg, cerca de 5- mg, cerca de 10-20 mg, ou cerca de 10-15 mg de composto da invenção. Menção particular é feita às doses diárias de 1, 2,5, 5, 10, 15 ou 20 mg.

Tabletes compreendendo composto I podem ser convenientemente preparados por granulação úmida. Usando este método, os sólidos secos (ingredientes ativos, carga, aglutinante, etc.) são misturados e umidificados com água ou outro agente umectante (e.g. um álcool) e são formados aglomerados ou grânulos dos sólidos umedecidos. Amassamento úmido é continuado até um tamanho de partícula homogêneo desejado ter sido alcançado depois do qual o produto granulado é seco. Composto I é tipicamente misturado com lactose mono-hidratada, amido de milho e copovidona em um misturador de cisalhamento alto junto com água. Após formação de granulados, estes granulados podem ser peneirados em uma 5 peneira com um tamanho de peneira adequado, e secos. Os granulados secos, resultantes são então misturados com celulose microcristalina, croscarmelose sódica e estearato de magnésio, depois do que os tabletes são prensados. Alternativamente, granulação úmida de composto I pode ser realizada usando manitol, amido de milho e copovidona, cujos granulados são misturados com 10 celulose microcristalina, amido-glicolato de sódio e estearato de magnésio antes de os tabletes serem prensados. Alternativamente, granulação úmida dos compostos da presente invenção pode ser realizada pelo uso de hidrogenofosfato de cálcio anidro, amido de milho e copovidona, cujos granulados são misturados com celulose microcristalina, amido-glicolato de sódio (tipo A), 15 talco e estearato de magnésio antes de os tablete serem prensados. Copovidona é um copolímero de PVP-VA.

A base livre do composto I pode ser preparada como revelado em WO 2003/029232. Sais da presente invenção podem ser preparados por dissolução da base livre em um solvente apropriado, adição de ácido 20 relevante, seguida por precipitação. Precipitação pode ser realizada quer pela adição de um segundo solvente, e/ou evaporação, e/ou esfriamento. Alternativamente, a base livre da presente invenção e enfim os compostos da presente invenção podem ser sintetizados em uma reação catalisada por paládio como descrita em WO 2007/144005.

Todas as referências, incluindo publicações, pedidos de

patente, e patentes, aqui citadas são aqui incorporadas como referências em sua totalidade e na mesma extensão como se cada referência fosse individual e especificamente indicada para ser incorporada como referência e fosse mostrada aqui em sua totalidade (na extensão máxima permitida por lei), independente de qualquer incorporação separadamente fornecida de documentos particulares feita aqui alhures.

O uso dos termos "um", "uma", "o" e "a" e referentes similares no contexto da descrição da invenção é para ser entendido para cobrir tanto o 5 singular quando o plural, a não ser que seja indicado de outro modo ou claramente contradito pelo contexto. For exemplo, a frase "o composto" é para ser entendida como se referindo a vários "compostos" da invenção ou aspecto particular descrito, a não ser se indicado de outra maneira.

A não ser que indicado de outro modo, todos os valores exatos 10 aqui fornecidos são representativos de valores aproximados correspondentes (e.g., todos os valores exemplares exatos fornecidos com respeito a um fator particular ou uma medição particular podem ser considerados para também fornecerem uma medição aproximada correspondente, modificada por "cerca de", onde apropriado).

A descrição aqui de qualquer aspecto ou aspecto da invenção

usando termos tais como "compreendendo", "tendo", "incluindo" ou "contendo" com referência a um elemento ou a elementos é intencionada para fornecer confirmação para um aspecto similar ou aspecto da invenção que "consiste de, "consiste essencialmente de, ou "substancialmente compreende" 20 aquele elemento particular ou aqueles elementos particulares, a não ser que seja indicado de outro modo ou claramente contradito pelo contexto (e.g., uma composição aqui descrita como compreendendo um elemento particular deve ser entendida como também descrevendo uma composição consistindo daquele elemento, a não ser que seja indicado de outro modo ou claramente 25 contradito pelo contexto).

Exemplos

Métodos analíticos

Espectros de 1H RMN são registrados a 500,13 MHz em um instrumento Bruker Avance DRX500. Dimetil-sulfóxido (99,8%D) é usado como um solvente, e tetrametil-silano (TMS) é usado como padrão de referência interno.

Os pontos de fusão são medidos usando Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC). O equipamento é um TA-Instruments DSCQlOOO calibrado a 5°/min para dar o ponto de fusão como valor inicial. Cerca de 2 mg de amostra são aquecidos 5°/min em um recipiente frouxamente fechado sob fluxo de nitrogênio.

Análise termogravimétrica (TGA) usada para estimativa de teor de solvente / água de material seco é realizada usando um TAInstruments TGA-Q500. 1-10 mg de amostra é aquecido 10°/min em um recipiente frouxamente fechado sob fluxo de nitrogênio.

Difractogramas de raios-X em pó foram medidos em um PANalytical X1Pert PRO X-Ray Diffractometer usando radiação de CuKal. As amostras foram medidas no modo de reflexão na faixa 20 5-40° usando um detector X'celerator.

Exemplo 1 Farmacologia de receptor in vitro Transportador de serotonina de rato: IC50 5,3 nM (bloqueio de captação de 5-HT)

Transportador de serotonina de humano: IC5o 40 nM (bloqueio de captação de 5-HT)

Receptor de 5-HTiA de humano: Ki 40 nM com agonismo parcial (eficácia 85%)

Receptor de 5-HT3 de rato: IC5o 0,2 nM (antagonismo em ensaio funcional)

Receptor de 5-HT3A de humano: IC50 cerca de 20 nM

(antagonismo em ensaio funcional). Em concentração mais alta, o composto exibe atividade agonística com uma ED50 de 2,1 μΜ. O composto da invenção também mostrou afinidade alta para receptor 5-HT3 de humano em um ensaio de ligação in vitro (Ki 4,5 nM). Exemplo 2a Preparação da base livre de composto I 10 gramas de bromidrato de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)fenilj-piperazina foram tratados com uma mistura agitada de 100 ml de NaOH 3 M e 100 ml de acetato de etila por 10 minutos. A fase orgânica foi separada, lavada com 100 ml de NaCl (aq) 15% em peso, seca sobre MgSO4, filtrada e concentrada em um vácuo produzindo 7,7 gramas (98%) de base de composto

I como um óleo incolor límpido.

RMN está de acordo com a estrutura.

Exemplo2b Preparação de base cristalina de composto I

3.0 gramas de óleo incolor de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)fenil]-piperazina foram tratados com 70 ml de acetonitrila e aquecidos para refluxar. A solução quase límpida foi filtrada e o filtrado límpido foi espontaneamente esfriado durante o qual começou a precipitação logo após a filtração. A mistura foi agitada na temperatura ambiente (22°C) por 2 horas e

o produto foi isolado por filtração e seco em vácuo (40°C) durante a noite. A base cristalina foi isolada como um sólido branco em in 2,7 gramas (90%). RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 72,40%C, 9,28%N, 7,58%H (teoria: 72,26%C, 9,36%N, 7,42%H)

Exemplo 2c Caracterização da base cristalina de composto I

A base, como preparada em exemplo 2b, é cristalina (XRPD) veja Figura I. Ela tem um ponto de fusão de ~117°C. Não é higroscópica e tem uma solubilidade de 0,1 mg/ml em água.

Exemplo 3 a Preparação da forma alfa do sal de bromidrato de

composto I

2.0 gramas de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]piperazina foram dissolvidos em 30 ml de acetato de etila quente e foi adicionado 0,73 ml de HBr (aq) 48% em peso. Esta adição causou formação de uma lama espessa e 10 ml adicionais de acetato de etila foram adicionados com o propósito de se ter agitação apropriada. A lama foi agitada na temperatura ambiente por uma hora. Após filtração e secagem em vácuo (20°C) durante a noite foram produzidos 2,0 gramas de produto como um sólido branco (80%). RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 57,05%C, 7,18%N, 6,16%H (teoria para sal 1:1: 56,99%C, 7,39%N, 6,11%H) Exemplo 3 b Caracterização da forma alfa do bromidrato de

composto I

A forma alfa do bromidrato, como preparada em exemplo 3a, é cristalina (XRPD) - veja Figura 2. Tem um ponto de fusão de ~226°C. Absorve cerca de 0,3% de água quando exposta à umidade relativa alta e tem uma solubilidade de 2 mg/ml em água.

Exemplo 3 c Preparação da forma beta do sal de bromidrato de

composto I

49,5 gramas de óleo incolor de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina foram dissolvidos em 500 ml de acetato de etila e adicionados 18,5 ml de HBr (aq) 48% em peso. Esta adição causou formação de uma lama espessa que foi agitada durante a noite na temperatura ambiente.

Após filtração e secagem em vácuo (5 0°C) durante a noite foi produzido o produto em 29,6 gramas como sólido branco (47%).

RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 56,86%C, 7,35%N, 6,24%H (Teoria para sal 1:1: 56,99%C, 7,39%N, 6,11%H)

Exemplo 3 d Caracterização da forma beta do sal de bromidrato

de composto I

A forma beta do bromidrato, como preparada em exemplo 3 c, é cristalina (XRPD) veja Figura 3. Tem um ponto de fusão de —231°C. Absorve cerca de 0,6% de água quando exposta à umidade relativa alta e tem uma solubilidade de 1,2 mg/ml em água.

Exemplo 3e Preparação da forma gama do sal de bromidrato

de composto I 1 g de bromidrato de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]piperazina como preparado em exemplo 4a foi adicionado em 20 ml de água e aquecido para 85°C. A solução foi quase límpida. Adição de 1 gota de HBr tomou-a límpida. HBr foi adicionado até que fosse observado ponto de névoa.

A solução foi esfriada para a temperatura ambiente e seca. RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 56,63%C, 7,18%N, 6,21%H (Teoria para sal 1:1: 56,99%C, 7,39%N, 6,11%H)

Exemplo 3f Caracterização da forma gama do bromidrato de

composto I

O bromidrato, como preparado em exemplo 3e, é cristalino

(XRPD) - veja Figura 4. A curva de DSC mostra alguns eventos térmicos a cerca de 100°C; provavelmente mudança em forma de cristal. Então ele se funde a cerca de 220°C. Absorve cerca de 4,5% de água quando exposto à umidade relativa alta e em umidade relativa de 30% na temperatura ambiente cerca de 2% de água são absorvidos.

Exemplo 3g Preparação do hidrato de bromidrato de composto

1

1,4 gramas de óleo de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]piperazina foram adicionados em 20 ml de água, e aquecidos para 60°C. pH 20 foi ajustado para 1 usando HBr 48%. A solução foi esfriada para a temperatura ambiente e seca. RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 55,21%C, 7,16%N, 6,34%H (Teoria para sal 1:1 semi-hidrato: 55,68%C, 7,21%N, 6,23%H)

Exemplo 3h Caracterização do semi-hidrato do bromidrato de

composto I

O hidrato como preparado em Exemplo 3g é cristalino (XRPD) - veja figura 5.

O teor de água depende fortemente da umidade relativa. Na temperatura ambiente e em umidade relativa de 95% o teor de água é cerca de 3,7%. Desidratação ocorre por aquecimento para cerca de 100°C.

Exemplo 3i Preparação de solvato de acetato de etila do sal de bromidrato de composto I

0,9 grama de óleo de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]5 piperazina foi dissolvido em 35 ml de acetato de etila e adicionado 0,5 ml de HBr (aq) 48% em peso. Esta adição causou formação de uma lama espessa que foi agitada durante a noite na temperatura ambiente. Após filtração e lavagem com 30 ml de dietil-éter seguidas por secagem em vácuo (50°C) durante a noite foi produzido o solvato de EtOAc de sal de HBr de l-[2-(2,4- 10 dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina em 1,0 grama (65%). RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 56,19%C, 6,60%N, 6,56%H (Teoria para sal 1:1 quando corrigido para 8% de acetato de etila e 0,5% de água como determinado por TGA e KF: 56,51%C, 6,76%N, 6,38%H)

Exemplo 3i Caracterização do solvato de acetato de etila do bromidrato de composto I

O solvato de acetato de etila, como preparado em exemplo 3i, é cristalino (XRPD) - veja Figura 6. A batelada contém uma mistura do solvato e a forma alfa de composto 1, provavelmente devido à secagem ter causado dessolvatação parcial. A dessolvatação inicia a -75°C quando aquecido 10°/min. Após dessolvatação a forma alta é formada.

Se exposta à umidade alta, o acetato de etila é substituído por água, que é liberada quando a umidade é subseqüentemente abaixada. O sólido resultante é higroscópico e absorve 3,2% de água em umidade relativa alta.

Exemplo 4a Preparação de sal de cloridrato de composto I

1,0 grama de óleo de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]piperazina foi dissolvido em 20 ml de acetato de etila usando aquecimento suave (30°C). Quando uma solução límpida foi obtida uma solução de HCl 2 M em dietil-éter foi adicionada lentamente até que o pH fosse aproximadamente 1-2. Durante a adição foi observada precipitação espontânea. Após final da adição a suspensão foi agitada por 1 hora antes que o precitado branco fosse isolado por filtração e seco em vácuo (40°C) durante a noite. Cloridrato de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina foi 5 isolado em 1,1 gramas (99 %). RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 64,18%C, 8,25%N, 6,96%H (Teoria para sal 1:1 quando corrigida para 0,66% de água conforme determinado por TGA: 64,13%C, 8,31%N, 6,95%H)

Exemplo 4b Caracterização do cloridrato de composto I O cloridrato, como preparado em exemplo 4a, é cristalino

(XRPD) - veja Figura 7. Tem um ponto de fusão de ~236°C. Absorve cerca de 1,5% de água quando exposto à umidade relativa alta e tem uma solubilidade de 3 mg/ml em água.

Exemplo 4c Preparação do mono-hidrato de cloridrato de

composto I

11,9 gramas de óleo de óleo de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina foram dissolvidos em 100 ml de etanol usando aquecimento. Quando uma solução homogênea foi obtida adição de 3,5 ml de HCl (aq) concentrado causou a precipitação imediata de um sólido branco. A 20 suspensão foi agitada por 5 minutos inicialmente e então sobre banho de gelo outra hora antes da filtração. O sólido branco foi lavado usando 100 ml de etanol frio novo (colocado em um congelador a -18°C por 2 horas), 50 ml de acetona e finalmente 50 ml de dietil-éter antes de ser seco em vácuo (50°C) durante a noite. l-[2-(2,4-Dimetil-fenil-sulfanil)- fenil]-piperazina HCl foi 25 isolado em 5,1 gramas (38 %).

RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 61,23%C, 7,91%N, 7,16%H (Teoria para sal 1:1 mono-hidrato: 61,26%C, 7,94%N, 7,14%H)

Exemplo 4d Caracterização de mono-hidrato de cloridrato de composto I

O mono-hidrato de cloridrato, como preparado em exemplo 4c, é cristalino (XRPD) - veja Figura 8. Desidrata iniciando a cerca de 50°C. Alguns eventos térmicos, provavelmente rearranjo, ocorrem por aquecimento 5 adicional, e se funde a cerca de 23O0C seguido por recristalização e fusão a cerca de 236°C. Não absorve quantidade adicional de água quando exposto à umidade relativa alta e o água ligada de hidrato não é liberada até que a umidade relativa seja diminuída para abaixo de umidade relativa de 10% na temperatura ambiente. Tem uma solubilidade de cerca de 2 mg/ml em água.

Exemplo 5a Preparação de sal de mesilato de composto I

1,0 grama de óleo de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]piperazina foi dissolvido em 20 ml de acetato de etila por aquecimento (70 °C). Quando uma solução límpida foi obtida 0,35 grama de ácido metanosulfônico (1,1 eqv.) foi adicionado lentamente. Após final da adição a solução 15 foi esfriada e dietil-éter foi adicionado lentamente causando a precipitação do produto. A suspensão foi agitada por 2 horas sobre gelo antes que o precipitado branco fosse isolado por filtração e seco em vácuo (40°C) durante a noite. Mesilato de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina foi isolado em 1,1 grama (85 %). RMN está de acordo com a estrutura. Análise 20 elementar: 57,81%C, 6,81%N, 6,68%H (Teoria para um sal 1:1: 57,81%C, 7,10%N, 6,64%H)

Exemplo 5b Caracterização do mesilato de composto I O mesilato, como preparado em exemplo 5 a, é cristalino (XRPD) - veja Figura 9. Tem um ponto de fusão de ~163°C. É higroscópico 25 (absorve cerca de 8% de água quando exposto à umidade relativa de 80% e é deste modo transformado em uma forma hidratada. Os últimos 6% da água absorvida não são liberados até que a umidade relativa esteja abaixo de umidade relativa de 10%. Tem uma solubilidade muito alta em água (> 45mg/ml). Exemplo 6a Preparação de fumarato de composto I 5.5 gramas de óleo de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]piperazina foram aquecidos para refluxar em uma mistura de 50 ml de metanol e 50 ml de acetato de etila. A solução foi deixada esfriar lentamente antes da realização da adição de 2,1 gramas de ácido fumárico, a qual causou uma reação exotérmica e precipitação de um sólido branco. A suspensão foi agitada enquanto era permitida esfriar para a temperatura ambiente seguido por 2 horas no congelador a -18°C. O sólido branco foi colhido por filtração e lavado com 20 ml de acetato de etila frio antes de secagem em vácuo (50°C) durante a noite. O produto foi isolado em 3,1 gramas (44 %).

RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 63,42%C, 6,64%N, 6,42%H (Teoria para um sal 1:1: 63,74%C, 6,76%N, 6,32%H)

Exemplo 6b Caracterização do fumarato de composto I

O fumarato, como preparado em exemplo 6a, é cristalino (XRPD) - veja Figura 10. Tem um ponto de fusão de ~194°C. A solubilidade em água é 0,4 mg/ml.

Exemplo 7a Preparação de maleato de composto I

2.5 gramas de óleo de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]piperazina foram dissolvidos em 50 ml de acetato de etila e aquecidos para 60°C seguido pela adição de 1,1 gramas de ácido maleico. A mistura foi aquecida de novo para refluxar por 5 minutos e deixada esfriar para a temperatura ambiente mantendo agitação. Durante o esfriamento precipitação iniciou e foi finalizada por 4 horas no congelador (-18°C). O sólido branco foi colhido por filtração e lavado com 50 mL de dietil-éter antes de secagem em vácuo (50°C) durante a noite. Isto produziu 1,3 gramas de maleato de l-[2- (2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina (38 %) que foram cristalizados pelo tratamento com 40 ml de acetato de etila e 5 ml de metanol sob refluxo. A solução límpida foi esfriada para temperatura ambiente seguido por 2 horas no congelador (-18°C) antes da filtração e foi lavada duas vezes com 10 ml de acetato de etila frio seguido por secagem em vácuo (50°C) por dois dias. Maleato de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina foi isolado em 0,9 grama (69 %). RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 5 63,57%C, 6,79%N, 6,39%H (Teoria para um sal 1:1: 63,74%C, 6,76%N, 6,3 2%H)

Exemplo 7b Caracterização do maleato de composto I

O maleato, como preparado em exemplo 7a, é cristalino (XRPD) - veja Figura 11. Tem um ponto de fusão de ~152°C. A solubilidade em água é ~1 mg/ml.

Exemplo 8a Preparação de meso-tartarato de composto I

11.1 ml de uma solução 0,30 M de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina em acetona foram tratados com 0,5 grama de ácido meso-tartárico dissolvido em 5 ml de acetona. A mistura foi agitada na

temperatura ambiente por 30 minutos durante os quais ocorreu precipitação. Após filtração e lavagem primeiro com 5 ml de acetona e depois com 5 ml de acetona foi produzido o produto como um sólido branco que foi seco em vácuo (50°C) durante a noite. Meso-tartarato de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina foi isolado em 1,4 gramas (93 %). RMN está de 20 acordo com a estrutura. Análise elementar: 58,58%C, 6,29%N, 6,40%H (Teoria para um sal 1:1: 58,91%C, 6,25%N, 6,29%H)

Exemplo 8b Caracterização do meso-tartarato de composto I

O meso-tartarato, como preparado em exemplo8a, é cristalino (XRPD) - veja Figura 12. Tem um ponto de fusão de ~164°C. A solubilidade em água é -0,7 mg/ml.

Exemplo 9a Preparação de L-(+)-tartarato de composto I

11.1 ml de uma solução 0,30 M de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina em acetona foram tratados com 0,5 grama de ácido L-(+)-tartárico dissolvido em 5 ml de acetona. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 30 minutos durante os quais ocorreu precipitação. Após filtração e lavagem primeiro com 5 ml de acetona e depois 3 ml de dietil-éter foi obtido o produto como um sólido branco que foi seco em vácuo (50 °C) durante a noite. l-[2-(2,4-Dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina 5 ácido (+)-tartárico foi isolado em 1,2 gramas (81 %). RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 58,86%C, 6,30%N, 6,38%H (Teoria para um sal 1:1: 58,91%C, 6,25%N, 6,29%H)

Exemplo 9b Caracterização do L-f+Vtartarato de composto I O L-(+)-tartarato, como preparado em exemplo 9a, é cristalino (XRPD) - veja Figura 13. Tem um ponto de fusão de ~171°C. A solubilidade em água é -0,4 mg/ml.

Exemplo I Oa Preparação de D-C-Vtartarato de composto I

11.1 ml de uma solução 0,30 M de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina em acetona foram tratados com 0,5 grama de ácido

D-(-)-tartárico dissolvido em 5 ml de acetona. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 30 minutos durante os quais ocorreu precipitação. Após filtração e lavagem primeiro com 5 ml de acetona e depois 3 ml de dietil-éter foi produzido o produto como um sólido branco que foi seco em vácuo (50°C) durante a noite. l-[2-(2,4-Dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]20 piperazina - ácido D-(-)-tartárico foi isolado em 1,0 grama (68%). RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 58,90%C, 6,26%N, 6,3 5%H (Teoria para um sal 1:1: 58,91%C, 6,25%N, 6,29%H)

Exemplo IOb Caracterização do D-(-Vtartarato de composto I O D-(+)-tartarato como preparado em exemplo 10a, é cristalino (XRPD) - veja Figura 14. Tem um ponto de fusão de ~175°C. A solubilidade em água é -0,4 mg/ml.

Exemplo Ila Preparação de sulfato de composto I

11.1 ml de uma solução 0,30 M de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina em acetona foram tratados com 2,2 ml de uma solução 3 M de H2SO4 (aq). A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 30 minutos e então sobre gelo por outras 4 horas antes da precipitação ocorrer e foi finalizada. Após filtração e lavagem primeiro com 5 ml de acetona e depois 3 ml de dietil-éter foi produzido o produto como um sólido 5 branco que foi seco em vácuo (50°C) durante a noite. Sulfato de l-[2-(2,4- dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina foi isolado em 0,51 grama (39 %). RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 54,53%C, 7,22%N, 6,28%H (Teoria para um sal 1:1: 54,52%C, 7,07%N, 6,10%H)

Exemplo Ilb Caracterização do sulfato de composto I O sulfato, como preparado em exemplo 11a, é cristalino

(XRPD) - veja Figura 15. Tem um ponto de fusão de ~166°C. A solubilidade em água é -0,1 mg/ml.

Exemplo 12a Preparação de fosfato de composto I

11.1 ml de uma solução 0,30 M de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina em acetona foram tratados com 0,2 ml de H3PO4

(aq) 65 %. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 30 minutos durante os quais ocorreu precipitação. Após filtração e lavagem primeiro com ml de acetona e depois 3 ml de dietil-éter foi produzido o produto como um sólido branco que foi seco em vácuo (50°C) durante a noite. Fosfato de l-[2- (2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina foi isolado em 1,23 gramas (94%). RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 54,21%C, 7,15%N, 6,43%H (Teoria para um sal 1:1: 54,53%C, 7,07%N, 6,36%H) Exemplo 12b Caracterização do fosfato de composto I O fosfato, como preparado em exemplo 12a, é cristalino (XRPD) veja Figura 16. Tem um ponto de fusão de ~224°C. A solubilidade em água é ~1 mg/ml.

Exemplo 13a Preparação de nitrato de composto I

11.1 ml de uma solução 0,30 M de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina em acetona foram tratados com 0,2m de HNO3 (aq) 16,5M. A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 30 minutos durante os quais ocorreu precipitação. Após filtração e lavagem primeiro com 5 ml de acetona e depois 3 ml de dietil-éter foi produzido o produto como um sólido branco que foi seco em vácuo (50°C) durante a noite. Nitrato de l-[2-(2,4- 5 dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina foi isolado em 0,87 grama (73%). RMN está de acordo com a estrutura. Análise elementar: 59,80%C, 11,67%N, 6,51%H (Teoria para um sal 1:1: 59,81%C, 11,63%N, 6,41%H)

Exemplo 13b Caracterização composto I O nitrato, como preparado em exemplo 13 a, é cristalino (XRPD) - veja Figura 17. Não se funde mas se decompõe sob uma reação exotérmica a cerca de 160°C. A solubilidade em água é -0,8 mg/ml.

Exemplo 14 Efeitos de dor no teste de formalina intradermal em camundongo

Neste modelo, camundongos receberam uma injeção de 15 formalina (4,5%, 20 μΐ) na para traseira esquerda. A irritação causada pela formalina induz uma resposta comportamental bifásica característica, conforme quantificada pela quantidade de tempo consumida lambendo a pata lesionada. A primeira fase (-0-10 minutos) representa nocicepção e irritação química direta, enquanto que é considerado que a segunda (-20-30 minutos) 20 representa dor de origem neuropática. As duas fases são separadas por um período quiescente no qual o comportamento retoma para normal. A efetividade dos compostos de teste em reduzir os estímulos dolorosos é avaliada pela contagem da quantidade de tempo consumida lambendo a pata lesionada nas duas fases.

Composto I mostrou uma redução significativa em escores de

dor de segunda fase (Figura 18b), indicando eficácia contra dor de origem neuropática. Ademais, os compostos da presente invenção mostraram uma redução significativa nos escores de primeira fase (Figura 18a), indicando uma ação mais analgésica na dose mais alta. Em sumário, estes resultados indicam que os compostos da presente invenção são provavelmente eficazes no tratamento de distúrbios de dor.

Exemplo 15 Efeitos sobre níveis extracelulares de acetil-colina no cérebro de ratos livremente móveis

Métodos

Os animais foram administrados com l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina, sal de HBr.

Animais

Ratos machos Sprague-Dawley, inicialmente pesando 275-300 g, foram usados. Os animais foram alojados sob um ciclo de luz / escuro de 12 h sob condições controladas para temperatura interna regular (21±2°C) e umidade interna regular (55±5%) com alimento e água de torneira disponíveis ad libitum.

Experimentos de cirurgia e mierodiãlise

Ratos foram anestesiados com hipnorm/dormicum (2 ml/kg) e cânulas guia intracerebrais (CMA/12) foram estereotaxicamente implantadas no cérebro, almejando posicionar a ponta da sonda de diálise no hipocampo ventral (coordenadas: 5,6 mm posterior ao bregma, lateral -5,0 mm, 7,0 mm ventral à dura) ou no córtex pré-frontal (coordenadas: 3,2 mm anterior ao bregma; lateral, 0,8 mm; 4,0 mm ventral à dura). Parafusos de ancoragem e cimento acrílico foram usados para fixação das cânulas guia. A temperatura corporal dos animais foi monitorada por sonda retal e mantida a 37°C. Os ratos foram permitidos se recuperarem da cirurgia por 2 dias, alojados individualmente em gaiolas. No dia do experimento uma sonda de microdiálise (CMA/12, diâmetro de 0,5 mm, comprimento de 3 mm) foi inserida na cânula guia.

As sondas foram conectadas via um swivel de dois canais em uma bomba de microinjeção. Perfusão da sonda de microdiálise com solução de Ringer filtrada (NaCl 145 mM, KCl 3 mM, MgCl2 I mM, CaCl2 1,2 mM contendo neostigmina 0,5 μΜ) foi iniciada lentamente antes da inserção da sonda no cérebro e continuada durante o experimento em uma vazão de fluxo constante de 1 μΐ/min. Após 180 min de estabilização, os experimentos foram iniciados. Dialisados foram colhidos a cada 20 min. Após os experimentos os 5 animais foram mortos, seus cérebros removidos, congelados e fatiados para verificação de posicionamento de sonda.

O composto foi dissolvido em HPbetaCD 10% e injetados subcutaneamente (2,5 - 10 mg/kg). Doses são expressadas como mg de sal / kg de peso corporal. O composto foi administrado em um volume de 2,5 ml/kg.

Análise de acetil-colina em dialisado

Concentração de acetil-colina (ACh) nos dialisados foi analisada por meio de HPLC com detecção eletroquímica usando uma fase móvel consistindo de hidrogeno-fosfato de dissódio 100 mM, ácido octano15 sulfônico 2,0 mM, cloreto de tetrametil-amônio 0,5 mM e MB (ESA) 0,005%, pH 8,0. Um reator de enzima de pré-coluna (ESA) contendo colina oxidase imobilizada eliminou colina da amostra injetada (10 μΐ) antes da separação de ACh na coluna analítica (ESA ACH-250); vazão de fluxo 0,35 ml/min, temperatura: 35°C. Após a coluna analítica a amostra passou através de um 20 reator de fase sólida de pós-coluna (ESA) contendo acetil-colina-esterase e colina oxidase imobilizadas. O último reator converteu ACh em colina e subseqüentemente colina em betaína e H2O2. A última foi detectada eletroquimicamente pelo uso de um eletrodo de platina (Célula analítica: ES A, modelo 5040).

Apresentação de dados

Em experimentos de injeção única o valor médio de 3 amostras consecutivas de ACh imediatamente precedendo a administração de composto serviu como o nível basal para cada experimento e dados foram convertidos em percentagem de basal (valores de pré-injeção basais médios normalizados para 100%). Os dados são apresentados em Figuras Ia e lb.

Resultados

O composto significativamente aumentou níveis extracelulares de Ach no córtex pré-frontal de rato e no hipocampo ventral - veja figuras 19a e 19b.

Exemplo 16 Condicionamento de medo contextual em ratos

O composto administrado no presente experimento foi sal de HBr de l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]-piperazina.

Temos estudado o efeito do composto sobre aquisição, consolidação e recordação de condicionamento de medo contextual em ratos. No paradigma de condicionamento de medo animais aprendem a associar um ambiente neutro (contexto, a câmara de treinamento, CS) com uma experiência repulsiva (um choque elétrico na pata, estímulo incondicionado EI). Durante re-exposição à câmara de treinamento, animais expressam um comportamento indiferente, que é considerado uma medição direta da memória relacionada com o medo [Pavlov J. Biol. Sci., 15, 177-182, 1980]. A neuroanatomia de condicionamento de medo contextual tem sido inteiramente investigada e vários estudos têm demonstrado que o hipocampo e a amídala são necessários para a formação desta memória [Hippocampus, 11, 8-17, 2001; J. Neurosei., 19, 1106-1114, 1999; Behav. Neurosei., 106, 274-285, 1992],

Animais e drogas

Foram usados ratos adultos machos Sprague-Dawley (pesando 250-300 g no momento do treinamento) de Charles River Laboratories, 25 alojados dois por gaiola sob um ciclo de luz/escuro de 12 h. Alimento e água estavam disponíveis ad libitum. Ratos foram utilizados 1 semana após a chegada. O composto foi dissolvido em HPbetaCD 10% e injetado subcutaneamente. A droga foi administrada em um volume de 2,5 ml/kg.

Aparelho Treinamento e teste foram conduzidos em uma câmara à prova de som (30 cm x 20 cm x 40 cm) instalada em uma sala isolada e conectada a um sistema de ventilação. Iluminação foi fornecida por uma luz branca (60 Watt). O piso da câmara consistiu de uma grade de metal ligada em um 5 gerador de choque elétrico. Antes do treinamento e do teste, a câmara foi limpa com uma solução de etanol 70%. Uma câmara de vídeo permitiu observações comportamentais e gravação da sessão de treinamento para análise desconectada.

Teste de aquisição e retenção Durante a aquisição os animais foram permitidos livremente

explorar o ambiente novo por um período de habituação de 1 min, que coterminou com um choque na pata inescapável (estímulo incondicionado, EI) através do piso de grade eletrificável. O choque na pata teve uma duração de

2 s e uma intensidade de 0,75 mA. Animais permaneceram na câmara de 15 condicionamento por mais r 60 s após o EI. Foi determinado o escore do comportamento indiferente durante os primeiros 58 s (aquisição de préchoque; experimentador cego em relação aos grupos) para determinar as respostas de indiferença de linha base ao contexto. No final da aquisição os animais foram cuidadosamente removidos e deixados em suas gaiolas de 20 moradia.

Após 24 h os mesmos animais foram reintroduzidos no contexto de treinamento (câmara de condicionamento de medo) e um teste de retenção de 2 min foi realizado. Durante este período não foram aplicados choques nas patas. Foi determinado o escore do comportamento indiferente 25 durante todo o período de teste com o experimentador cego em relação aos grupos e apresentado como percentagem do período de teste total.

Resultados e discussão

Efeito do composto sobre a cognição de medo contextual em

ratos O efeito do composto sobre o condicionamento de medo contextual em ratos foi estudado (i) sobre aquisição (droga aplicada antes da aquisição, Figura 20), (ii) sobre recordação de memória (droga aplicada antes do teste, Figura 21) e (iii) sobre consolidação (droga aplicada imediatamente 5 após a aquisição, Figura 22). No primeiro conjunto de experimentos, o composto (1, 5 e 10 mg/kg) foi administrado 1 h antes da sessão de aquisição. Figura 20 mostra a aquisição de comportamento indiferente durante treinamento (58 s antes do coque em pata) e o teste de retenção após 24 h. As seguintes descobertas foram observadas:

-O composto não afeta o comportamento indiferente de

linha base antes da apresentação de choque na para em qualquer dose testada.

O composto a 5 mg/kg tem uma tendência para aumentar o tempo consumido de indiferença durante o teste de retenção, 24 h após a aquisição (39,24 ± 13,76 %, n= 6, versus 24,30 ± 4,40 %, n= 16, nos animais tratados com veículo).

O composto a 10 mg/kg significativamente aumenta o tempo consumido de indiferença durante o teste de retenção, 24 h após a aquisição (52,15 ± 5,68 %, n= 10, versus 24,30 ± 4,40 %, n= 16, nos animais tratados com veículo, p< 0,01).

O modelo de condicionamento de medo, como descrito em

Figura 20, é um procedimento padrão descrito na literatura para a investigação de aprendizado e memória. Com o propósito de adicionalmente elucidar os efeitos agudos desta droga sobre recordação da memória, o composto (5,10 e 20 mg/kg) foi aplicado 1 h antes do teste de retenção. Foi 25 observado que o composto inibe a expressão de comportamento indiferente a 5 mg/kg durante o teste de memória (12,86 ±3,57 %, n= 9, versus 33,61 ± 4,29 %, n= 13, nos animais tratados com veículo, p< 0,05) (Figura 21).

Como descrito acima, o composto em si mesmo não afeta o comportamento indiferente de linha base antes do início do EI (Figura 20), assim a hipótese mais plausível é que o efeito observado em Figura 21 é devido a um efeito ansiolítico. A memória condicionada é avaliada via comportamento indiferente, uma resposta que é reduzida pelos compostos com efeitos ansiolíticos potenciais. Este experimento demonstra que o 5 composto dado agudamente antes da recordação de memória tem eficácia ansiolítica, é portanto improvável que indiferença crescente mostrada em Figura 20 seja devido a um efeito ansiogênico do composto.

Com o propósito de reforçar que o composto não é ansiogênico mas possui potencial pró-cognitivo, o composto foi administrado 10 a 5, 10 e 20 mg/kg após a sessão de aquisição. Conseqüentemente, neste conjunto de experimentos, o composto não estava a bordo durante a aquisição bem no decorrer do teste de retenção. Aqui, foi observado que o composto a 5 mg/kg significativamente intensifica o tempo consumido em indiferença durante o teste de retenção, 24 h após a sessão de aquisição (45,58 ± 4,50 %, 15 n= 8, versus 25,26 ± 3,57 %, n= 19, nos animais tratados com veículo, p<

0,05). A percentagem de tempo consumido em indiferença durante a reexposição contextual tem sido descrita como uma medição de uma memória relacionada com medo [.Pavlov J. BioL Sei, 15, 177-182, 1980], que é intensificada em ratos tratados com composto quando comparados com os 20 animais tratados com veículo (Figuras 20 e 21). Tomados juntos, os dados mostram que o composto intensifica a memória contextual.

Exemplo 17 Efeito do composto I no modelo de lesão de constrição crônica de nervo

Composto I foi avaliado no modelo de lesão de constrição 25 crônica [Dor, 33, 87-107, 1988]. Este modelo de dor neuropática envolve a aplicação de quatro ligações frouxas ao redor de um nervo ciático do rato durante um período de tempo para desenvolver ambas hiperalgesia e alodínia. O efeito de compostos de teste neste teste é medido como o tempo para remover a pata de um estímulo térmico. Composto I (sal de HBr) a 7,9 mg/kg s.c. 60 minutos) produziu uma latência de remoção dependente de dose e significativa após um estímulo térmico. Estes dados (veja figura 26) demonstram que o composto I tem um efeito analgésico-semelhante.

Claims (15)

1. Método para o tratamento de dor ou sintomas residuais em depressão, o método caracterizado pelo fato de compreender a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de l-[2-(2,4-dimetil-fenilsulfanil)-fenil]-piperazina e seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis (composto I) a um paciente em necessidade do mesmo.

2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto I é o sal de adição de ácido HBr.

3. Método de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o dito sal de adição de ácido HBr é cristalino com reflexões de XRPD em 6,89, 9,73, 13,78 e 14,64 (°2Θ).

4. Método de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que dito sal de adição de ácido HBr tem um XRPD como mostrado na Figura 3.

5. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-4, caracterizado pelo fato de que o composto I é administrado em doses diárias de cerca de 1-20 mg.

6. Uso de um composto sendo l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)fenil]-piperazina e seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis (composto I), caracterizado pelo fato de ser na fabricação de um medicamento para o tratamento de dor ou sintomas residuais em depressão.

7. Uso de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que o composto I é um sal de adição de ácido HBr.

8. Uso de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o dito sal de adição de ácido HBr é cristalino com reflexões de XRPD em 6,89, 9,73, 13,78 e 14,64 (°20).

9. Uso de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que dito sal de adição de ácido HBr tem um XRPD como mostrado na Figura 3.

10. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 6-9, caracterizado pelo fato de que dita droga é intencionada para administração em doses diárias de cerca de 1-20 mg.

11. Composto sendo l-[2-(2,4-dimetil-fenil-sulfanil)-fenil]piperazina e seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis (composto I), caracterizados pelo fato de serem para uso no tratamento de dor ou sintomas residuais em depressão.

12. Composto de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de o composto I ser sal de adição de ácido HBr.

13. Composto de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que o dito sal de adição de ácido HBr é cristalino com reflexões de XRPD em 6,89, 9,73, 13,78 e 14,64 (°20).

14. Composto de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que dito sal de adição de ácido HBr tem um XRPD como mostrado na Figura 3.

15. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 11-14, caracterizado pelo fato de que dito composto é administrado em doses diárias de cerca de 1-20 mg.