BRPI0808804A2 - Administração de apaziquona intravesical seguindo ressecção transuretral para tratamento de câncer - Google Patents

Description

“ADMINISTRAÇÃO DE APAZIQUONA INTRAVESICAL SEGUINDO RESSECÇÃO TRANSURETRAL PARA TRATAMENTO DE CÂNCER”

Referência Cruzada a Pedidos de Patente Relacionados

Este pedido de patente reivindica o benefício de pedido de patente provisório U.S.

60/894 610, depositado em 13 de março de 2007.

Campo da Invenção

Os processos aqui descritos referem-se a tratamentos para cânceres de bexiga. Mais especificamente, os processos descritos referem-se à administração intravesical de apaziquona seguindo ressecção transuretral.

Antecedentes da Invenção

Câncer de bexiga é o sétimo câncer mais comum em todo mundo. Em 2006, existiram 280 000 casos estimados de câncer de bexiga na Europa e mais de 60 000 novos casos foram esperados nos Estados Unidos. O tipo mais comum de câncer de bexiga (90%) é carcinoma de célula transicional (TCC) que deriva do urotélio, o forro celular do sistema ure15 trai (ureteres, bexiga e uretra). Cerca de 75% de cânceres de bexiga recentemente detectados são superficiais em apresentação inicial, significando que sua totalidade permanece próxima da superfície do urothelium. Mais especificamente, tumores superficiais consistem em tumores papilares que são confinados à mucosa (Ta), tumores papilares ou sésseis estendendo-se na lamina própria (T1) e carcinoma in situ (CIS). Todos os tipos são limitados à 20 camada de mucosa ou sub-mucosa sem invasão de músculo.

Cânceres de bexiga superficiais podem ser estratificados em classes de risco de prognóstico de acordo com estágio de tumor, grau, tamanho, número e padrão de recorrência. Tumores primários de baixo grau, baixo estágio (estágio Ta, graus G1-G2) têm uma taxa de recorrência de 30% em 2 anos e usualmente não progridem para invasão de múscu25 Io, enquanto no outro extremo, tumores G3 T1 grandes ou altamente recorrentes, múltiplos, têm uma taxa de recorrência de até 70-80% e uma taxa de progressão de 10%-30% para um estágio de invasão de músculo. Carcinoma in situ (CIS) apresenta o mais alto risco de progressão de tumor.

Tratamento inicial para TCC papilar apresentando-se em estágios Ta e T1 é usual30 mente completa ressecção transuretral de tumor de bexiga (TU-BT) (isto é, remoção cirúrgica) de todas as lesões visíveis, embora a presença de CIS genericamente indique outras medidas adicionais devido ao alto risco de progressão. Por exemplo, pacientes CIS frequentemente recebem tratamentos adjuvantes com instilação intravesical de um agente citotóxico ou imunológico (comente Bacillus Calmette-Guérin (BCG)). Tratamentos BCG consistente35 mente mostraram uma vantagem sobre TUR-BT sozinho em termos de sobrevivência livre de reincidência. Tratamento adjuvante com BCG também pode diminuir a taxa de progressão para doença invasiva. Embora o risco de progressão para um estágio invasivo seja pequeno em tumores de baixo risco, os padrões de recorrência múltipla destes cânceres de bexiga superficiais frequentemente requerem repetidas intervenções e causam considerável problema para o paciente. Por isso, tratamentos mais efetivos que reduzam a recorrência de cânceres de bexiga superficiais podem prover um importante avanço no tratamento destes tumores.

Resumo da Invenção

A presente exposição é direcionada a um processo de tratamento de câncer compreendendo administração a um paciente em sua necessidade, de uma composição compreendendo uma quantidade terapeuticamente efetiva de apaziquona (E09) após ressecção transuretral de tumor de bexiga (TUR-BT).

Em uma realização, a presente exposição descreve um processo de tratamento de câncer compreendendo as etapas de realização de TUR-BT em pacientes em sua necessidade, seguida por administração via instilação intravesical de uma composição terapêutica compreendendo uma quantidade terapêutica de apaziquona. Em um aspecto, a composição 15 terapêutica é administrada dentro de 6 horas seguindo TUR-BT. Em um outro aspecto, a composição terapêutica é administrada dentro de 5 horas seguindo TUR-BT. Em um outro aspecto, a composição terapêutica é administrada dentro de cerca de 4 horas seguindo TUR-BT. Em um outro aspecto, a composição terapêutica é administrada dentro de cerca de 3 horas seguindo TUR-BT. Em um outro aspecto, a composição terapêutica pode ser admi20 nistrada em uma dose simples. Em um outro aspecto, a composição terapêutica pode ser reconstituída e/ou Iiofilizada antes ou após realização de TUR-BT em pacientes em sua necessidade.

Em uma realização, os presentes processos são usados para o tratamento de câncer de bexiga. Em uma outra realização, os presentes processos são usados para o trata25 mento de câncer de bexiga não-invasivo (SBCs). Em uma outra realização, os presentes processos são usados para o tratamento de carcinoma de célula transicional da bexiga. Em uma outra realização, os presentes processos são usados para o tratamento de um câncer que é TNM estágio Ta ou T1 e grau histológico G1 ou G2 antes de TUR.

Em uma realização, o processo de tratamento de câncer pode incluir administração 30 de uma quantidade terapeuticamente efetiva de cerca de 1 mg a cerca de 8 mg por dose de apaziquona em uma composição terapêutica Iiofilizada reconstituída. Em uma outra realização, o processo de tratamento de câncer pode incluir administração de uma quantidade terapeuticamente efetiva de cerca de 2 mg a cerca de 6 mg por dose de apaziquona, opcionalmente cerca de 10 mg a cerca de 200 mg de manitol, e opcionalmente cerca de 2 mg a 35 cerca de 300 mg de bicarbonato de sódio em uma composição terapêutica. Em uma outra realização, o processo de tratamento de câncer pode incluir administração de uma composição terapêutica compreendendo de cerca de 0 mL a cerca de 24 mL de propileno glicol, e cerca de O mg a cerca de 10 mg de EDTA. Estas composições terapêuticas podem ser administradas a um paciente em necessidade de tratamento para câncer seguindo TUR-BT. Em uma outra realização, a composição terapêutica reconstituída Iiofilizada pode ser administrada via uma instilação intravesical simples.

Em um aspecto, o processo de tratamento de câncer pode incluir administração de um volume de composição terapêutica Iiofilizada reconstituída de entre cerca de 2 ml_ e cerca de 80 ml_. Em um outro aspecto, o processo de tratamento de câncer pode incluir administração de um volume de composição terapêutica Iiofilizada reconstituída de entre cerca de 30 mL e cerca de 60 mL. Em um outro aspecto, o processo de tratamento de câncer pode incluir administração de um volume de composição terapêutica Iiofilizada reconstituída de cerca de 40 mL.

Em uma realização, a composição terapêutica administrada seguindo TUR-BT pode ser preparada usando diluentes tendo cerca de 0% a cerca de 60% vol / vol de propileno glicol, cerca de 0 mg/mL a cerca de 5 mg/mL de EDTA, e cerca de 0 mg/ml_ a cerca de 20 mg/mL de bicarbonato de sódio, e água. Em uma outra realização, os diluentes podem ter cerca de 20% a cerca de 40% vol/vol de propileno glicol, cerca de 0,01 mg/mL a cerca de 1 mg/mL de EDTA, e cerca de 1 mg/mL a cerca de 10 mg/mL de bicarbonato de sódio, e água. Em uma outra realização, os diluentes podem ter cerca de 30% (vol / vol) de propileno glicol, cerca de 0,1 mg/mL de EDTA, cerca de 5 mg/mL de bicarbonato de sódio, e água. Em um aspecto, a composição terapêutica pode ser administrada via administração intravesical. Em um outro aspecto, a composição terapêutica pode ser reconstituída e/ou Iiofilizada antes ou após realização de TUR-BT em pacientes em sua necessidade. Em um outro aspecto, a composição terapêutica pode ser administrada em uma instilação simples dada dentro de seis horas de TUR-BT.

Descrição Detalhada

Compostos indoloquinona são conhecidos serem úteis como agentes citostáticos para tratamento de câncer em humanos. Ver, por exemplo, patente US 5 079 257 aqui incorporada em sua totalidade por referência para todos os ensinamentos relacionados a síntese de indoloquinona, metabolismo e atividade terapêutica. Em adição, ver, por exemplo, patente US 6 894 071 aqui incorporada em sua totalidade por referência para todos seus ensinamentos relacionados a formulações de apaziquona.

A presente exposição descreve o uso de preparações compreendendo indoloquinona alquilante biorredutora com efeitos anti-tumor tal como, mas não Içimitado a, apaziquona (E09), seguindo ressecção transuretral de tumor de bexiga (TUR-BT) para o tratamento de câncer de bexiga, câncer de bexiga não-invasivo, cânceres de bexiga superficiais (SBCs), carcinoma de célula transicional da bexiga, ou um câncer que é TNM estágio Ta ou T1 e/ou grau histológico G1 ou G2. Apaziquona (recomendado INN) é também conhecida como E09 ou NSC-382459. Quimicamente é 5-(aziridin-1-il)-3-(hidroxi metil)-2-[(1E)-3-hidroxi prop-1-enil]-1-metil-1Hindol-4,7-diona (INN) com a fórmula estrutural:

Apaziquona é uma indoloquinona alquilante biorredutora inteiramente sintética. É uma pródroga que gera espécies citotóxicas após ativação enzimática. A enzima DTD (DTdiaforase, também chamada NAD(P)H:quinona óxido redutase-1, ou NQ01)desempenha um papel proeminente na ativação de apaziquona sob condições aeróbicas. Apaziquona também é citotóxica sob condições hipóxicas, tais como em células com baixa atividade DTD. O mecanismo básico de ativação de apaziquona é acreditado ser similar àquele de outras indoloquinonas, envolvendo redução através de enzimas celulares que transferem um ou dois elétrons, formando semiquinona e hidroquinona, respectivamente. Oxidação da semiquinona sob condições aeróbicas resulta em um ciclo redoz que pode causar morte de célula através de formação de espécies oxigênio reativo (ROS), resultando em quebra de fitas de ADN. A semiquinona / hidroquinona pode, particular sob condições hipóxicas, alquiIar e reticular ADN e outras macromoléculas, causando morte de célula.

As redutases expressas em tumores podem desempenhar um papel importante na seletividade de apaziquona. NQ01 (NAD(P)H: quinona óxido redutase), uma enzima redutase de dois elétrons, pode alvejar seletivamente células oxigenadas, enquanto enzimas redutoras de um elétron como Citocromo P450 redutase podem ser mais efetivas no alvejamento de células hipóxicas. Loadman et al., 137, Br. J. Pharmacol. 701-709, 2002.

Preparações Iiofilizadas de apaziquona t~em estabilidade aperfeiçoada. Tais preparações podem incluir um agente de volume tal como, mas não limitado a, maltitol, manitol, xilitol, sorbitol, isomaltose, oligofrutose e polidextrose. A preparação de apaziquona Iiofilizada também pode incluir um agente de controle de pH em uma quantidade suficiente para auxiliar na manutenção de pH em uma faixa próxima de neutro. O agente de controle de pH pode incluir, mas não é limitado a, carbonato de sódio, carbonato de potássio, hidróxido de cálcio, hidróxido de sódio, hidróxido de magnésio, hidróxido de potássio, bicarbonato de sódio, óxido de magnésio ou óxido de cálcio.

As preparações Iiofilizadas de apaziquona como aqui descrito podem ser reconstitu5 idas com qualquer diluente farmaceuticamente aceitável para preparar uma solução farmaceuticamente aceitável para administração ao paciente após TUR. Os diluentes farmacêuticos úteis para reconstituição de preparações Iiofilizadas da presente exposição podem incluir, mas não são limitados a, diluentes tendo propileno glicol, bicarbonato de sódio, EDTA, e/ou água. Uma rota de dosagem preferida é através de instilação intravesical. Quantidades 10 de dosagens podem variar devido a vários fatores incluindo, mas não limitado a, características individuais de paciente, tipo e/ou estágio de câncer, ou a específica formulação.

Em experimentos clínicos de Fase I e Fase Il anteriores com apaziquonacomo um tratamento de câncer, apaziquona foi dada intravenosamente. A droga foi relativamente bem tolerada pelos 129 pacientes tratados através de injeção intravenosa de apaziquona. Toxi15 dez Iimitante de dose seguindo administração intravenosa foi proteinuria. À despeito de relatos de três respostas parciais em estudos de fase I, nenhuma resposta foi observada em experimentos clínicos de fase Il quando a droga foi administrada intravenosamente. A mais provável explicação para a ausência de resposta de tumor é que apaziquona tem uma meia

- vida de 0-19 minutos na corrente sanguínea e por isso, quando administrada intravenosamente, sua rápida eliminação fármaco - cinética efetivamente comprometeu liberação de droga para tumores.

As propriedades fármaco - cinéticas de apaziquona que a tornam desfavorável para administração intravenosa podem ser vantajosas no tratamento de cânceres superficiais que surgem em um terceiro compartimento facilmente acessível como a bexiga urinária por25 que administração intravesical dribla os problemas descritos de liberação intravenosa de droga. Retenção da droga dentro da bexiga por uma hora pode aperfeiçoar penetração de droga e a liberação de significantes quantidades em tumores enquanto sua absorção na corrente sanguínea permanece improvável. Mesmo, entretanto, se qualquer droga atingiu a circulação sistêmica ela pode ser rapidamente depurada , minimizando o risco de toxidez 30 sistêmica. Baseado nos estudos anteriores e seguintes confirmando a presença de ambos, elevados níveis de DTD e regiões de hipoxia em câncer de bexiga superficial, apaziquona foi formulada como EOquinR para uso em instilação intravesical no tratamento de SBCs.

Composições farmacêuticas contendo o ingrediente ativo de acordo com a presente exposição são apropriadas para administração a humanos ou outros mamíferos. Tipicamente, as composições farmacêuticas são estéreis, e não contêm compostos tóxicos, carcinogênicos ou mutagênicos que possam causar uma reação adversa quando administrados. Administração da composição farmacêutica pode ser realizada antes, durante, ou após o início de crescimento de tumor sólido.

O “ingrediente ativo” refere-se à metade ativa na composição e pode incluir, mas não está limitado a, apaziquona. Uma composição terapêutica pode conter ingredientes ativos como descrito, ou um seu sal, derivado, pró-droga, ou solvato fisiologicamente aceitável.

Os ingredientes ativos podem ser administrados como o composto puro, ou como uma composição farmacêutica contendo uma ou mais entidades.

A “composição farmacêutica” ou “composição terapêutica” inclui aquelas onde os ingredientes ativos são administrados em uma quantidade efetiva para obter seu propósito pretendido. Mais especificamente, uma “quantidade terapeuticamente efetiva” ou “quantida10 de terapêutica” significa uma quantidade efetiva para prevenir o desenvolvimento de, ou eliminar, retardar a progressão de, ou para reduzir o tamanho de um tumor sólido. Determinação de uma quantidade terapeuticamente efetiva está dentro da capacidade daqueles versados na técnica, especialmente à Iuz da detalhada exposição aqui provida.

Uma “dose terapeuticamente efetiva” ou “efetiva terapeuticamente” refere-se àquela quantidade dos ingredientes ativos que resulta na obtenção de desejado efeito. Toxidez e eficácia terapêutica de tais ingredientes podem ser determinadas através de procedimentos padrões farmacêuticos em culturas de células ou animais experimentais, por exemplo, determinando a LD50 (a dose letal para 50% da população) e a ED50 (a dose terapeuticamente efetiva em 50% da população). A razão de dose entre efeitos tóxicos e terapêuticos é o índice terapêutico, que é expresso como a razão entre LD50 e ED50. Um alto índice terapêutico é preferido. Os dados obtidos podem ser usados em formulação de uma faixa de dosagens para uso em humanos. A dosagem dos ingredientes ativos preferivelmente está dentro de uma faixa de concentrações circulantes que incluem a ED50 com pequena ou nenhuma toxidez. A dosagem pode variar dentro desta faixa dependendo da forma de dosagem empregada, e a rota de administração utilizada.

As exatas formulação e dosagem podem ser determinadas por um médico individual em vista da condição do paciente e o tipo ou estágio de câncer.

A quantidade de composição farmacêutica administrada pode ser dependente do sujeito sendo tratado, do peso de sujeito, a severidade da doença, o modo de administração, e o julgamento do médico receitando.

Os ingredientes ativos podem ser administrados sozinhos, ou em mistura com um carreador farmacêutico selecionado com relação à rota de administração pretendida e prática farmacêutica padrão. Composições farmacêuticas para uso de acordo com a presente exposição assim podem ser formuladas em uma maneira convencional usando um ou mais 35 carreadores fisiologicamente aceitáveis compreendendo excipientes e auxiliares que facilitam processamento dos ingredientes ativos nas preparações que podem ser usadas farmaceuticamente. Quando uma quantidade terapeuticamente efetiva dos ingredientes ativos é administrada, a composição pode estar na forma de uma solução aquosa parenteralmente aceitável, livre de pirogênio. A preparação de tais soluções parenteralmente aceitáveis, com relação a pH, isotonicidade, estabilidade, e semelhantes, está dentro do conhecimento na técnica.

“Início de instilação” é o momento de início de instilação de composição terapêutica, seguindo TUR-BT, enquanto o “fim de retenção” é o tempo que a composição terapêutica administrada e outros conteúdos de bexiga são drenados ou esvaziados, isto é, o tempo no qual retenção da droga na bexiga é terminada.

Para uso veterinário, os ingredientes ativos são administrados como uma formula

ção apropriadamente aceitável de acordo com prática veterinária normal. O veterinário pode determinar facilmente o regime de dosagem que é mais apropriado para um animal particular.

Os exemplos que se seguem são providos como realizações ilustrativas da presen15 te exposição. Entretanto, a presente exposição não deve ser limitada de qualquer maneira pelos exemplos mostrados abaixo. Qualquer uma ou mais características de qualquer exemplo podem ser combinadas com qualquer uma ou mais característica de qualquer outra realização ou Exemplo dos processos presentemente descritos, sem se fugir do escopo da presente exposição.

Estudos de Instilação Intravesical de Apaziquona

Para estudos descritos nos Exemplos 1 e 2, EOquin foi reconstituído com 20 mL de seu diluente, e ainda diluído com 20 mL de água para injeção para um volume total de instiIado de 40 mL. Este foi instilado na bexiga urinária de pacientes através de um cateter uretral, duas semanas após ressecção transuretral der tumor de bexiga (TUR-BT). O instilado 25 foi retido na bexiga por uma hora. Um curso de tratamento consistiu em 6 instilações separadas por uma semana.

Exemplo 1

Em um primeiro estudo usando administração intravesical, EOquin foi dado a 12 pacientes com SBC, TNM estágios Ta ou T1, grau histológico G1 ou G2. Todos os pacientes 30 tiveram tumores superficiais múltiplos (2 a 10), recorrentes, dos quais todos exceto um “marcador de lesão”, 0,5-1 cm em diâmetro, foram excisados por ressecção transuretral (TUR-BT) antes do experimento. Resposta de tumor foi definida como resposta completa (CR), nenhuma resposta (NR) ou doença progressiva (PD) confirmada por cistoscopia e histologia (biópsia do sítio de lesão marcador inicial, ou completa ressecção de qualquer 35 lesão residual ou nova) quatro semanas após a última instilação. EOquin foi administrado semanalmente por seis semanas, partindo duas semanas após TUR-BT.

Na parte de fase I do estudo, seis pacientes foram tratados com concentrações de EOquin que foram aumentadas semanalmente por 100% (0,0125 mg/mL; 0,025 mg/mL; 0,05 mg/mL; 0,1 mg/mL; 0,2 mg/mL; e 0,4 mg/mL e neste exemplo particular, 0,5, 1, 2, 4, 8 e 16 mg em 40 mL). Seguindo a determinação de uma dose recomendada nesta coorte de expansão de dose intra-paciente, seis pacientes adicionais receberam tratamento em uma 5 dose fixada semanalmente de 0,1 mg/mL (neste exemplo particular, 4 mg de EOquin em 40 mL de fluido). Dois pacientes na coorte de expansão de dose intra-paciente experimentaram efeitos colaterais locais relacionados a EOquin após a dose de 0,2 mg/mL e receberam 0,1 mg/mL em sua 6a instilação. A dose recomendada foi de 0,1 mg/mL (4 mg em 40 mL de fluido de instilação).

Eficácia.Resposta de tumor quatro semanas após a última instilação foi 4/6 Respos

tas Completas na coorte de dose fixada. Ela também foi 4 CR de 6 na coorte de expansão de dose.

Segurança.Durante a expansão de dose intra-paciente, dor de bexiga suave ou moderada e disuria foram vistas em todos os níveis de dose. Hematuria foi somente vista 15 nos níveis de dose de 0,2 mg/mL e 0,4 mg/mL. Outras queixas reportadas (um caso cada) foram náusea, descoloração de língua e rubor quente no nível de 0,0125 mg/mL e um evento vasovagal em 0,2 mg/mL. Quase todos os efeitos adversos foram grau 1 ou 2. Não houve mortes no estudo.

Exemplo 2

Este estudo foi um estudo de fase Il de rótulo aberto, não-randomizado, multi

centros em pacientes com lesões primárias ou recorrentes, múltiplas (2-10) de Ta ou T1, G1 ou G2 de SBC de célula transicional. Pacientes sofreram TUR-BT de todas exceto uma lesão (marcadora), 0,5-1 cm em diâmetro, antes de entrada em estudo.

Instilações foram realizadas semanalmente por seis semanas. Resposta de tumor foi confirmada por biópsia, ou completa ressecção de qualquer tumor residual, duas a quatro semanas após a última instilação. Resposta de tumor foi avaliada como resposta completa (CR), nenhuma resposta (NR) ou doença progressiva PD).

De 46 pacientes que entraram, 37 tiveram SBC recorrente. Mais de 50% dos pacientes tiveram TUR-BT plus imunoterapia intravesical e/ou quimioterapia. No total 17% sofreram TUR-BT sozinha e 17% não receberam tratamento anterior. Grau de tumor foi reclassificado como G3 em revisão de histologia em dois pacientes.

Eficácia.Resposta de tumor foi 31 CR em 46 pacientes (67%). Não existiram casos de “doença progressiva”, isto é, progressão para um grau T maior que 1 no momento de avaliação de resposta, como definido no protocolo.

Segurança.Tratamento foi bem tolerado pela maioria dos pacientes e existiram

poucos efeitos adversos sistêmicos (não relacionados a bexiga) que foram relacionados a EOquin. A atividade de instilação intravesical de EOquin compara favoravelmente àquela de outros agentes citotóxicos ou imunológicos estudados em lesões marcadoras de câncer de bexiga superficial. Dados de segurança em um total de 58 pacientes nos estudos de Fase I e Fase Il também comparam bem àqueles de outros agentes quimioterapêuticos atualmente 5 usados em instilação intravesical. Efeitos colaterais sistêmicos foram reportados infrequentemente. A dose de instilação intravesical total de 4 mg corresponde a 20% ou menos da dose i.v. tolerável semanal (12 mg/m2 equivalente a uma dose total de 20 mg em um paciente com 1,7 m2 de área de superfície de corpo) foi dada a 111 pacientes. Em um estudo fármaco - cinético realizado através de análises de HPLC durante o curso do primeiro estudo 10 (fase l/ll) de administração intravesical, nenhum nível detectável de apaziquona ou seu principal metabólito foi encontrado no plasma.

Exemplo 3

Tradicionalmente, tratamento de instilação de adjuvante foi iniciado aproximadamente 2 semanas após TUR-BT. A prática de uma instilação simples dada dentro de 6 horas 15 (a partir do momento quando TUR-BT é realizada a cerca de 6 horas após TUR-BT) seguindo TUR-BT é mais recente. Instilação intravesical após TUR-BT no mesmo dia ou “imediata” (dentro de 6 horas) de agentes citotóxicos foi empregada na Europa sem relatos de toxidez excessiva quando comparado àqueles recebendo tratamento 2 ou mais semanas seguindo TUR-BT. Como os exemplos 1 e 2 demonstram, EOquin como um agente simples é seguro 20 e genericamente bem tolerado em uma dose de 0,1 mg/mL (aqui, 4 mg em 40 mL), dado semanalmente por 6 semanas consecutivas em pacientes que sofreram TUR-BT, começando aproximadamente 2 semanas após TUR-BT.

Este estudo avaliou a tolerabilidade e segurança de administração de EOquin imediatamente (isto é, dentro de cerca de 6 horas) seguindo TUR-BT em pacientes com câncer de bexiga superficial. Níveis em plasma foram medidos em pacientes em sítios selecionados para avaliar o grau de absorção sistêmica de EOquin seguindo instilação intravesical imediatamente (isto é, dentro de cerca de 6 horas) seguindo TUR-BT.

Critérios de inclusão de paciente incluíram: (1) Carcinoma de célula transicional da bexiga, TNM clínico estágio Ta ou T1 e grau histológico G1 ou G2 antes de ressecção tran30 suretral; (2) contagem de neutrófilos absolutos > 1,5 x 109/L, plaquetas > 100 x 109/L, creatinina e bilirubina de soro < 1,5 x limites superiores de norma local (ULN), GOT e GPT (AST/ALT) de soro < 3 x ULN; (3) resultados de teste de gravidez negativos em mulheres de idade de gravidez; (4) Concordância de todos os pacientes para uso de um processo efetivo de contracepção; (5) status de performance de Eastern Cooperative Oncology Group 35 (ECOG) de 0-2 (escala ECOG: 0: inteiramente ativo, capaz de realizar toda a performance pré-doença sem restrição; 1: restringido em atividade fisicamente enérgica mas ambulatório e capaz de realizar trabalho de uma natureza leve ou sedentária, por exemplo, trabalho doméstico leve, trabalho de escritório; 2: ambulatório e capaz de todos os cuidados pessoais mas incapaz de realizar quaisquer atividades de trabalho. Até e mais que 50% de horas acordadas; 3: capaz de cuidados pessoais somente limitados, confinado a camada ou cadeia mais de 50% de horas acordadas; e 4: completamente incapaz. Não pode realizar qualquer cuidado pessoal. Totalmente confinado ao leito ou cadeira; (6) idade > 18; e (7) paciente inteiramente informado da natureza investigativa do estudo; assinaram por escrito informando consentimento.

Seguindo TUR-BT, após assegurar completa homeostase e ausência de perfuração de bexiga, pacientes receberam 0,1 mg/mL (4 mg de apaziquona em 40 mL de instilado). EOquin foi dado intravesicalmente dentro de 6 horas, de término de TUR-BT e retido por 1 hora. Ressecção transuretral incluiu ressecção de todos os tumores visíveis, atingindo a lamina própria, e biópsia de todos os sítios suspeitos. O material ressectado e biopsado , que conteve músculo para ser avaliável para profundidade de tumor, foi preservado de acordo com procedimentos padrões. Os patologistas examinaram o tumor para grau histológico e estágio de tumor. O resumo de operação, incluindo tamanho e localização de tumores, foram enviados no apropriado CRF.

Seguindo TUR-BT, pacientes tiveram um cateter uretral residindo. A solução de droga foi instilada na bexiga por drenagem por gravidade, ou lentamente injetada usando uma seringa de ponta de cateter pré-enchida com a droga preparada. O cateter foi grampeado uma vez a droga tenha sido liberada. Foi feito esforço para evitar instilação de bolhas de ar na bexiga.

EOquin foi retido na bexiga por uma (1) hora. Pacientes foram monitorados durante o tempo de retenção e por 1 hora seguindo drenagem (tempo total de 2 horas) para o desenvolvimento de toxidez local e sistêmica. A bexiga foi drenada para um recipiente apropriado no fim do tempo de retenção.

Sinais vitais (pressão do sangue, frequência cardíaca e frequência respiratória) foram anotados antes de instilação, 30 minutos após o início de instilação e seguindo o fim de retenção.

Investigações fármaco - cinéticas foram realizadas em pacientes em sítios selecionados os quais deram consentimento informado para amostragem de sangue para estes estudos. O volume apropriado de sangue (genericamente 1,5 mL) foi retirado da cânula ou cateter, coletado em tubos heparinizados e imediatamente colocados sobre gelo. O esquema de amostram foi como se segue:

Amostra 1:Antes de início de instilação de EOquin;

Amostra 2:5 minutos após o início de instilação;

Amostra 3:15 minutos após o início de instilação;

Amostra 4:30 minutos após o início de instilação. Amostra 5:45 minutos após o início de instilação; e

Amostra 6:60 minutos após o início de instilação (correspondendo ao tempo de drenagem de EOquin como pelo protocolo).

Tão logo possível após coleta, o sangue foi centrifugado em 4000 rpm por 5 minutos e o plasma transferido para 2 tubos limpos parra imediata estocagem em -70 a -80°C.

O ponto final primário do estudo foi determinado através de 2 avaliações principais:

(1) Presença, severidade e frequência de eventos adversos / toxidez nas 2 semanas seguindo a instilação; e (2) para os primeiros 10 pacientes com histologia de baixo risco (estágio Ta-Tl, grau G1-G2), avaliação cistoscópica de epitélio de bexiga aproximadamente 3 meses (+/- 2 semanas) após imediata instilação pós-TUR-BT.

Pacientes serão inicialmente arrolados no estudo baseado na avaliação visual de investigadores do estágio e grau do tumor. Avaliação clínica dos prováveis estágio e grau de tumor e adequação da ressecção foram confirmados somente depois por exame histopatológico do espécime de ressecção. Como um resultado, todos os pacientes arrolados no estudo receberam uma imediata instilação pós-TUR-BT de Eoquin.

As seguintes medidas foram tomadas entre Dias 6 e 12 (contando a partir de dia de TUR-BT e daqui por diante referido como “Dia 8”): (1) exame físico (incluindo avaliação de status de performance); (2) anotação de sinais vitais (pressão de sangue, pulso, temperatura), peso; (3) hematologia: hemoglobina, contagem de plaquetas, WBC e contagem diferen20 ciai; (4) química de soro: creatinina de soro, uréia ou BUN, sódio, potássio, cálcio, albumina, SGOT/SGPT (AST/ALT); açúcar no sangue; (5) análises de urina: exame macroscópico com pH, peso específico, glicose, proteína, nitritos no sangue. Exame microscópico notando WBC, RBC, moldes, outros; e (6) anotação de concomitantes medicações e eventos adversos.

As seguintes medidas foram tomadas entre dias 13 e 17 (contando a partir de dia

de TUR-BT e daqui por diante referido como “Dia 15”): (1) exame físico (incluindo avaliação de status de performance); (2) anotação de sinais vitais (pressão de sangue, pulso, temperatura), peso; (3) hematologia: hemoglobina, contagem de plaqueta, WBC e contagem diferencial; (4) química de soro: creatinina de soro, uréia ou BUN, sódio, potássio, cálcio, albu30 mina, SGOT / SGPT (AST/ALT) e açúcar no sangue; (5) análise de urina: exame macroscópico, pH, peso específico, glicose, proteína, nitritos e sangue; exame microscópico notando WBC, RBC, cilindros, outros; e (6) anotando concomitantes medicações e eventos adversos.

Na cistoscopia programada 3 meses após TUR-BT, o investigador avaliou o estado da mucosa de bexiga em adição a seleção para possível reincidência de tumor. Observações sobre ferimentos, cicatrização e outras lesões de bexiga foram anotadas. Biópsias foram tomadas no discernimento do Investigador. As seguintes medições também foram tomadas dentro de ± 2 semanas do fim do terceiro mês seguindo TUR-BT: (1) exame físico; (2) anotação de sinais vitais (pressão do sangue, pulso, temperatura), peso; (3) hematologia: hemoglobina, contagem de plaquetas, contagem diferencial e WBC; (4) química de soro: creatinina de soro, uréia ou BUN, sódio, potássio, cálcio, albumina, SGOT/SGPT (AST/ALT) e açúcar no sangue; (5) análises de urina: exame microscópico, pH, peso específico, glico5 se, proteína, nitritos e sangue: exame microscópico notando WBC, RBC, cilindros, e outros; (6) citologia de urina; (7) anotação de concomitantes medicações e eventos adversos (antes de cistoscopia); e (8) acompanhamento de cistoscopia, notando as verificações sobre Cistoscopia CRF, com citologia de urina, e fotografia se disponível. Pacientes com verificações inesperadas ou anormais na cistoscopia realizada no fim do terceiro mês seguindo TUR-BT 10 foram seguidos até a anormalidade ser resolvida ou estabilizada.

A tabela que segue resume várias atividades e medidas e o ponto de tempo em relação a TUR-BT no qual elas foram tomadas:

Exame, Procedimento Seleção Dia no Estudo 1 8 15 Mo 32 História médica X Exame físico X X X X X Sinais vitais X3 X X X X Hematologia X X X X X Química de sangue X X X X X Análise de urina X X X X X Citologia de urina X X Teste de gravidez (paci¬ X entes fêmeas) TUR X Instilação de EOquin X Exame histológico X Amostras de sangue X1 para fármaco - cinéticas Cistoscopia X Eventos Adversos X X X X Medicações Concomi¬ X X X X X tantes Este foi um estudo de tolerabilidade e segurança, de dose simples, multicentros. 20 pacientes toram dosados com 4 mg de apaziquona. A dose foi administrada intravesicalmente dentro de 6 horas de TUR-BT. A dose foi segura e bem tolerada na maioria dos pacientes. A cistoscopia pós-tratamento de 3 meses mostrou reepitealização no sítio de ressecção. Adicionalmente, dados fármaco - cinéticos não detectaram nem apaziquona nem me5 tabólitos na amostra de plasma seguindo TUR-BT e drenagem de instilado. Eventos adversos incluíram sintomas genito-urinários incluindo disuria, hematuria, retenção e frequência urinária, similares àqueles vistos seguindo TUR-BT. Nenhuma morte foi reportada.

Exemplo 4

Em contraste a mitomicina (MMC), EOquin não irrita a pele e não é absorvido atra10 vés de mucosa de bexiga quando dado intravesicalmente (peso molecular 288). EOquin anteriormente demonstrou atividade contra câncer de bexiga superficial em estudos anteriores. O estudo descrito a seguir avaliou a tolerabilidade e segurança de EOquin, assim como seu efeito sobre cura de ferimento cirúrgico e absorção sistêmica quando dado intravesicalmente como uma dose simples imediatamente após TUR-BT (ressecção transuretral de tu15 mor de bexiga) em pacientes com câncer de bexiga superficial.

Este foi um estudo de segurança, rótulo aberto, braço simples, multicentros. Pacientes (N = 22) com < 4 tumores com um diâmetro máximo de 3,5 cm, clinicamente em estágio Ta-Tl e grau G1-G2, receberam 4 mg de EOquin em 40 mL de instilado dentro de 6 horas de TUR-BT. EOquin foi instilado via um cateter Foley residente que foi então grampeado 20 por uma gora. Após uma hora, a bexiga foi drenada e o cateter foi removido. Pacientes foram avaliados para eventos adversos durante a retenção de uma hora e em visitas de acompanhamento em dias 8 e 15 após operação. Cura de ferimento foi avaliada através de cistoscopia realizada no dia 85 após operação. Amostras de plasma para ensaios de nível de droga foram obtidas de seis pacientes em seis pontos de tempo: antes de instilação, e 25 em 5, 15, 30, 45 e 60 minutos de instilação. As amostras foram analisadas por um processo inteiramente validado através do uso de cromatografia líquida de alta performance com espectrometria de massa tandem (HPLC-MS/MS). O limite inferior de quantificação (LLOQ) para EOquin foi 5 mg/mL e para seu metabólito, E05a, o LLOQ foi de 10 ng/mL.

23 pacientes foram arrolados e 20 pacientes foram dosados. Razões para não do30 sagem foram: episódio sincopai no dia anterior a TUR-BT em um paciente e a ausência de tumor em dois pacientes. Instilação e retenção de EOquin foram bem toleradas por todos os pacientes. Nenhuma morte ou desistência foi anotada. Quatro severos eventos adversos foram reportados em três pacientes: hematuria (x2), cistite e retenção urinária. Cistoscopia no dia 85 mostrou reepitelialização sem evidência de cura de ferimento prejudicada. Ainda, 35 nem a droga parente nem seu metabólito foi detectada em amostras de plasma.

Em resumo, dose intravesical de EOquin foi bem tolerada e segura quando administrada a pacientes seguindo imediatamente TUR-BT para câncer de bexiga superficial (não-invasivo). EOquin não foi absorvido na corrente sanguínea a partir da mucosa de bexiga.

Várias adaptações e modificações das realizações podem ser feitas e usadas sem se fugir do escopo e espírito da presente invenção que pode ser praticada de outro modo que não como aqui especificamente descrito. A descrição acima é pretendida ser ilustrativa, e não restritiva. O escopo da exposição presentemente descrita é para ser determinado somente pelas reivindicações.

Os termos e expressões que foram aqui empregados são usados como termos de descrição e não de limitação, e não há intenção no uso de tais termos e expressões de excluir equivalentes das características mostradas e descritas, ou suas porções, sendo reconhecido que várias modificações são possíveis dentro do escopo da presente exposição reivindicada. Além disso, qualquer um ou mais características de qualquer realização dos processos presentemente descritos pode ser combinada com qualquer uma ou mais outras características de qualquer outra realização da presente exposição, sem se fugir do escopo da presente exposição.

A menos que de outro modo indicado, todos os números expressando quantidades de ingredientes, propriedades como peso molecular, condições de reação, e assim por diante usados no relatório descritivo e reivindicações são para serem entendidos como sendo modificados em todos os exemplos pelo termo “cerca”. Da mesma maneira, a menos que indicado ao contrário, os parâmetros numéricos mostrados no seguinte relatório descritivo e reivindicações apostas são aproximações que podem variar dependendo das propriedades desejadas buscadas serem obtidas pela presente exposição. Pelo menos, e não como uma tentativa de limitar a aplicação da doutrina de equivalentes ao escopo das reivindicações, cada parâmetro numérico deve pelo menos ser construído à Iuz do número de dígitos significantes reportado e através de técnicas de arredondamento comuns. Não obstante que as faixas numéricas e parâmetros mostrando o amplo escopo da presente exposição sejam aproximações, os valores numéricos mostrados nos exemplos específicos são reportados tão precisamente quanto possível. Qualquer valor numérico, entretanto, inerentemente contem certos erros necessariamente resultantes do desvio padrão encontrado em suas respectivas medições de testes.

Os termos “um” e “uma” e “o” e referências similares usadas no contexto de descrição dos processos descritos (especialmente no contexto das reivindicações que se seguem) são para serem construídos para cobrirem ambos o singular e o plural, a menos que de outro modo indicado aqui ou claramente contradito pelo texto. Recitação de faixas de valores aqui é meramente pretendida para servir como processo de estenografia de referência individual para cada valor separado caindo dentro da faixa. A menos que aqui de outro modo indicado, cada valor individual é incorporado no relatório descritivo como se ele fosse individualmente ali recitado. Todos os processos aqui descritos podem ser realizados em qualquer ordem apropriada a menos que aqui indicado de outro modo ou de outro modo claramente contradito pelo contexto. O uso de qualquer um e todos os exemplos, ou linguagem exemplar (por exemplo, “tal como”) aqui provido é pretendido meramente para melhor ilumi5 nar a exposição e não possui uma limitação sobre o escopo da presente exposição de outro modo reivindicada. Nenhuma linguagem no relatório descritivo deve ser construída como indicando qualquer elemento não-reivindicado essencial para a prática da presente exposição.

Agrupamentos de elementos alternativos ou realizações dos processos presente10 mente descritos não são para serem construídos como limitações. Cada membro de grupo pode ser referido e reivindicado individualmente ou em qualquer combinação com outros membros do grupo ou outros elementos ali encontrados. É antecipado que um ou mais membros de um grupo podem ser incluídos em, ou suprimidos de, um grupo por razões de conveniência e/ou patenteabilidade. Quando qualquer tal inclusão ou supressão ocorre, o 15 relatório descritivo é aqui julgado conter o grupo como modificado assim satisfazendo a descrição escrita de todos os grupos Markush usados nas reivindicações apostas.

Certas realizações de acordo com a presente exposição são aqui descritas, incluindo o melhor modo conhecido pelos inventores para realização dos processos presentemente descritos. É claro, variações destas realizações tornar-se-ão aparentes para aqueles ver20 sados na técnica com leitura da descrição anterior. O inventor espera que técnicos versados empreguem tais variações quando apropriado, e os inventores pretendem para os processos presentemente descritos serem praticados de outro modo que não especificamente aqui descrito. Da mesma maneira, esta exposição inclui todas as modificações e equivalentes da matéria objeto recitada nas reivindicações apostas como permitido por Iei aplicável. Além 25 disso, qualquer combinação dos elementos descritos acima em todas as suas variações possíveis é abrangida pelos processos aqui descritos a menos que de outro modo aqui indicado ou de outro modo claramente contradito pelo contexto.

Além disso, numerosas referências foram feitas a patentes e publicações impressas por todo este relatório descritivo. Cada uma das referências citadas acima e publicações impressas é aqui individualmente incorporada por referência em sua totalidade.

Por último, é para ser entendido que as realizações da presente exposição são ilustrativas dos princípios dos processos presentemente descritos. Outras modificações que podem ser empregadas estão dentro do escopo da presente exposição. Assim, por meio de exemplo, mas não de limitação, configurações alternativas da presente exposição podem 35 ser utilizadas de acordo com os presentes ensinamentos. Da mesma maneira, a presente exposição não é limitada àquela precisamente como mostrada e descrita.

Claims (14)

1. Uso de apaziquona (E09), CARACTERIZADO pelo fato de ser na manufatura de um medicamento para o tratamento de câncer, compreendendo administração de uma composição terapêutica compreendendo uma quantidade terapêutica de apaziquona (E09) após ressecção transuretral de tumor de bexiga (TUR-BT).

2. Uso, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a dita administração é via instilação intravesical.

3. Uso, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a dita administração ocorre dentro de cerca de 6 horas após a TUR-BT, preferencialmente dentro de cerca de 5 horas após a TUR-BT, mais preferencialmente dentro de cerca de 4 horas após a TUR-BT, e mais preferencialmente dentro de cerca de 3 horas após a TUR-BT..

4. Uso, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o dito câncer é câncer de bexiga, câncer de bexiga não-invasivo, carcinoma de célula transicional da bexiga, estágio de TNM Ta ou T1, ou grau histológico G1 ou G2.

5. Uso, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a dita composição terapêutica compreende de cerca de 1 mg a cerca de 8 mg por dose de apaziquona, preferencialmente de cerca de 2 mg a cerca de 6 mg por dose de apaziquona, e mais preferencialmente de cerca de 3 mg a cerca de 5 mg por dose de apaziquona.

6. Uso de apaziquona (E09), CARACTERIZADO pelo fato de ser para a manufatura de um medicamento para o tratamento de câncer compreendendo as etapas de: (a) realização de TUR em pacientes em sua necessidade; (b) provimento de uma quantidade terapeuticamente efetiva de uma composição terapêutica Iiofilizada reconstituída compreendendo de cerca de 1 mg a cerca de 8 mg por dose de apaziquona; e (c) administração via instilação intravesical da dita composição terapêutica Iiofilizada reconstituída, após a dita TUR.

7. Uso, de acordo com a reivindicação 6, CARACTERIZADO pelo fato de que a etapa (b) pode ser realizada antes ou após a etapa (a).

8. Apaziquona (E09), CARACTERIZADA pelo fato de ser para o tratamento de câncer através da administração de uma composição terapêutica compreendendo uma quantidade terapêutica de apaziquona (E09) após ressecção transuretral de tumor de bexiga (TUR-BT).

9. Apaziquona (E09), de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADA pelo fato de que a dita administração é via instilação intravesical.

10. Apaziquona (E09), de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADA pelo fato de que a dita administração ocorre dentro de cerca de 6 horas após a TUR-BT, preferenciaimeme aemro de cerca de 5 horas após a TUR-BT, mais preferencialmente dentro de cerca de 4 horas após a TUR-BT, e mais preferencialmente dentro de cerca de 3 horas após a TUR-BT.

11. Apaziquona (E09), de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADA pelo fato de que o dito câncer é câncer de bexiga, câncer de bexiga não-invasivo, carcinoma de célula transicional da bexiga, estágio de TNM Ta ou T1, ou grau histológico G1 ou G2.

12. Apaziquona (E09), de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADA pelo fato de que a dita composição terapêutica compreende de cerca de 1 mg a cerca de 8 mg por dose de apaziquona, preferencialmente de cerca de 2 mg a cerca de 6 mg por dose de apaziquona, e mais preferencialmente de cerca de 3 mg a cerca de 5 mg por dose de apaziquona.

13. Apaziquona (E09), CARACTERIZADA pelo fato de ser para o tratamento de câncer compreendendo as etapas de: (a) realização de TUR em pacientes em sua necessidade; (b) provimento de uma quantidade terapeuticamente efetiva de uma composição terapêutica Iiofilizada reconstituída compreendendo de cerca de 1 mg a cerca de8 mg por dose de apaziquona; e (c) administração via instilação intravesical da dita composição terapêutica Iiofilizada reconstituída, após a dita TUR.

14. Apaziquona (E09), de acordo com a reivindicação 13, CARACTERIZADA pelo fato de que a etapa (b) pode ser realizada antes ou após a etapa (a).