BRPI0411820B1

BRPI0411820B1 - Composição farmacêutica para administração parenteral, e seus usos

Info

Publication number: BRPI0411820B1
Application number: BRPI0411820-0A
Authority: BR
Inventors: Olivier Lambert; Katrin Moser
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2003-06-24
Filing date: 2004-06-23
Publication date: 2019-06-25
Also published as: IL172329A0; ATE438659T1; US8299209B2; MY145375A; DK1648934T3; IS2705B; NO330706B1; IS8247A; MXPA05013821A; EP1648934A2; AU2004251866B2; ES2328144T3; SI1648934T1; PT1648934E; KR20060030052A; MA27862A1; KR101124136B1; HRP20090571T1; BRPI0411820A; PE20050285A1

Abstract

"composição farmacêutica". a presente invenção refere-se a composições farmacêuticas parenterais compreendendo um análogo de somatostatina e novos análogos de somatostatina.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA PARA ADMINISTRAÇÃO PARENTERAL, E SEUS USOS".

[001] A presente invenção se refere a composições farmacêuticas parenterais compreendendo um análogo de somatostatina e a novos análogos de somatostatina.

[002] A somatostatina é um tetradecapeptídeo apresentando a estrutura [003] Desde o isolamento e a caracterização da somatostatina, uma pesquisa extensa quanto a análogos mais potentes e mais estáveis continuou.

[004] Os análogos de somatostatina foram descritos, por exemplo, no WO 97/01579. Os ditos análogos de somatostatina compreendem a sequência de aminoácido da Fórmula I -(D/L)Trp-Lys-Xi-X2-[005] na qual [006] Xi é um radical da Fórmula (a) ou (b) [007] na qual [008] Ri é fenila opcionalmente substituída, [009] R2 é -Z1-CH2-R1-, -CH2-CO-O-CH2-R1, [0010] na qual [0011] ZiéOouS, e [0012] X2 é um α-aminoácido apresentando um resíduo aromático na cadeia lateral Ca, ou uma unidade de aminoácido selecionada de Dab, Dpr, Dpm, His, (Bzl)HyPro, tienil-Ala, ciclohexil-Ala e t-butil-Ala, o resíduo Lys da dita sequência correspondendo ao resíduo Lys9 da somatostatina-14 nativa.

[0013] Por análogo de somatostatina conforme aqui usado se quer dizer um peptídeo de cadeia reta ou cíclico derivado daquele da soma-tostatina-14 de ocorrência natural, compreendendo a sequência da Fórmula I e onde ainda uma ou mais unidades de aminoácido foram omitidas e/ou substituídas por um ou mais outros radical(ais) de aminoácido e/ou onde um ou mais grupos funcionais foram substituídos por um ou mais outros grupos funcionais e/ou um ou mais grupos foram substituídos por um ou vários grupos isostéricos. Em geral, o termo compreende todos os derivados modificados da somatostatina-14 nativa compreendendo a sequência acima da Fórmula I que tem afinidade de ligação na faixa de nM com pelo menos um subtipo de receptor de somatostatina conforme definido a seguir.

[0014] Preferidos são análogos de somatostatina onde os resíduos nas posições 8 a 11 da somatostatina-14 são representados pela sequência da Fórmula I conforme acima definido.

[0015] Mais preferidos são análogos de somatostatina conforme acima descrito compreendendo uma unidade de hexapeptídeo, os resíduos nas posições 3 a 6 da dita unidade hexapeptídeo compreendendo a sequência da Fórmula I. Com mais preferência ainda, os resíduos nas posições 1 e 2 da unidade hexapeptídeo do hexapeptídeo de somatostatina podem ser qualquer um daqueles conhecidos na técnica, por exemplo, conforme descrito por A.S. Dutra em Small Peptides, Vol. 19, 292-354, Elsevier, 1993, ou como substituintes para, Phe6 e/ou Phe7 de somatostatina-14.

[0016] Mais preferido ainda são hexapeptídeos de somatostatina cíclicos, por exemplo, hexapeptídeos de somatostatina cíclicos com- preendendo uma unidade de hexapeptídeo numerada de 1 a 6, os resíduos nas posições 3 a 6 da dita unidade de hexapeptídeo apresentando a sequência de amino da Fórmula I conforme indicado acima, por exemplo, um composto da Fórmula la [0017] na qual [0018] Xi e X2 são conforme acima definido, [0019] A é um resíduo divalente selecionado de Pro, [0020] nas quais R3 é NR8R9-C2-6alquileno, guanidino-C2-6alquileno ou C2-6alquileno-COOH, R3a é H, Ci-4alquila ou tem independentemente um dos significados dados para R3, R3b é H ou Ci-4alquila, Ra é OH ou NR5R6, Rb é -(CH2)i-3- ou -CH(CH3)-, R4 é H ou CH3, R4aé benzila opcionalmente substituída no anel, cada um de Rse R6 é independentemente H, C1-4 alquila, u)-amino-Ci-4alquileno, u)-hidróxi-Ci-4alquileno ou acila, R7 é uma ligação direta ou Ci-6alquileno, cada um de Re e Rg é independentemente H, Ci-4alquila, u-hidróxi-C2-4alquileno, acila ou CH2OH-(CHOH)c-CH2- onde c é 0, 1, 2, 3 ou 4 e Rg forma junto com o átomo de nitrogênio ao qual está ligado um grupo heterocíclico que pode compreender um heteroátomo adicional, e Rn é opcionalmente benzila substituída no anel, -(CH2)i-3-OH, CH3-CH(OH)- ou -(CH2)i-s-NR5R6 e ZZa é uma unidade de α-aminoácido natural ou não-natural. [0021] Particularmente preferidos são compostos da Fórmula II: [0022] onde a configuração em C-2 é (R) ou (S) ou uma mistura deles, e [0023] onde R é NRiR2-C2-6alquileno ou guanidina-C2-63lquileno, e cada um de Ri e R2 é independentemente H ou Ci-4alquila, [0024] na forma livre, na forma de sal ou forma protegida.

[0025] De preferência, R é NRiR2-C2-6alquileno. Os compostos preferidos da Fórmula II são os compostos onde R é 2-amino-etila, a saber ciclo[{4-(NH2-C2H4-NH-CO-O-)Pro}-Phg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)Phe] (referido aqui como Composto A) e ciclo[{4-(NH2-C2H4-NH-CO-O)Pro}-DPhg-DTpr-Lys-Tyr(4-Bzl)-Phe], na forma livre, forma de sal ou forma protegida. Phg significa -HN-CH(C6H5)-CO- e Bzl significa benzila. [0026] Esses compostos na forma livre, forma de sal ou forma protegida são referidos daqui em diante como "compostos da invenção". [0027] Devido à degradação proteolítica dos análogos de somatostatina da presente invenção, aplicação sistêmica, isto é, administração parenteral, é altamente desejável. No entanto, administração parenteral pode ser muito dolorida no local de administração, especialmente em administração repetida.

[0028] Foi agora verificado que composições parenterais compreendendo um composto da invenção e ácido tartárico mostram propriedades particularmente interessantes, por exemplo, boa tolerabilidade e alta estabilidade.

[0029] Um composto da invenção na forma protegida corresponde a um análogo de somatostatina onde pelo menos um dos grupos amino é protegido e que através de desproteção leva a um composto da Fórmula II, de preferência fisiologicamente removível. Grupos de proteção amina adequados são, por exemplo, conforme descrito em "Protective Groups in Organic Synthesis", T.W. Greene, J. Wiley & Sons, NY (1981), 219-287, cujos conteúdos são aqui incorporados a título de referência. Exemplo de tal grupo de proteção amina é acetila.

[0030] Um composto da invenção pode existir, por exemplo, na forma livre ou de sal. Sais incluem sais de adição ácidos com, por exemplo, ácidos inorgânicos, ácidos poliméricos ou ácidos orgânicos, por exemplo, com ácido clorídrico, ácido acético, ácido láctico, ácido aspártico, ácido benzóico, ácido succínico ou ácido pamóico. Sais de adição ácidos podem existir como sais mono- ou divalentes, por exemplo, dependendo de se 1 ou 2 equivalentes ácidos são adicionados. Os sais preferidos são o lactato, aspartato, benzoato, succinato e pamoato incluindo mono- e di-sais, com mais preferência o di-sal de aspartato e o monossal de pamoato.

[0031] Os compostos da invenção podem ser preparados de acordo com métodos convencionais. Em um primeiro aspecto, a presente invenção provê uma composição parenteral compreendendo um composto da invenção e ácido tartárico.

[0032] De acordo com a invenção, tipicamente a concentração do composto da invenção na composição da invenção é de a partir de cerca de 0,05 a cerca de 1 mg por mL de composição, particularmente 0,1 a 1 mg/mL.

[0033] Convenientemente, a razão do composto da invenção (quantidade correspondendo à forma livre) para ácido tartárico é cerca de 0,001 a cerca de 2 por cento em peso, de preferência cerca de 0,05 a cerca de 0,6.

[0034] A quantidade do composto da invenção na composição da invenção é de a partir de cerca de 0,005% a cerca de 0,1% com base em um peso total da formulação.

[0035] De preferência, o ácido tartárico está na forma cristalina fina. Com mais preferência, o ácido tartárico cristalino D(-) ou L(+) é usado. A quantidade de ácido tartárico é de preferência de a partir de cerca de 0,01% a cerca de 1,5% p/p da formulação, de preferência cerca de 0,01% a cerca de 0,3%, com mais preferência cerca de 0,15%. De preferência, a molaridade do ácido tartárico na composição final é cerca de 10 mM.

[0036] De acordo com a presente invenção, em adição ao ácido tartárico e um composto da invenção, a composição farmacêutica de preferência compreende também um componente básico selecionado e adicionado à composição de modo tal que o pH da composição farmacêutica tamponada com ácido tartárico seja ajustado para pH de cerca de 4 a cerca de 4,5, de preferência cerca de 4,2.

[0037] De preferência, o componente básico é uma base, por exemplo, hidróxido de sódio ou hidróxido de potássio, ou um sal básico, por exemplo, hidrogeno carbonato de sódio, carbonato de sódio, hidrogeno carbonato de potássio ou carbonato de potássio. De preferência, o componente básico é adicionado em tal quantidade de modo que a composição farmacêutica resultante tenha um pH tamponado conforme acima indicado.

[0038] De preferência, a composição farmacêutica da invenção é à base de água.

[0039] As composições da invenção podem compreender ainda um agente de tonicidade tal como manitol, cloreto de sódio, glicose, dextrose, sacarose ou glicerinas. De preferência, o agente de tonicidade é manitol.

[0040] A quantidade de agente de tonicidade é escolhida para ajustar a isotonicidade da composição da invenção, por exemplo, o manitol pode ser de preferência de a partir de cerca de 1% a cerca de 5% em peso da composição, de preferência cerca de 4,95%. Convenientemente, o manitol está presente em uma razão de manitol para ácido tartárico de cerca de 20 a cerca de 40, de preferência cerca de 33.

[0041] As composições da invenção podem conter excipientes adicionais geralmente empregados nas composições parenterais a fim de prover a estabilidade e a eficácia terapêutica requeridas. Excipientes podem incluir, por exemplo, um agente antioxidante ou preservan-te.

[0042] Antioxidantes podem ser empregados para proteger o agente ativo de degradação oxidativa, particularmente sob as condições aceleradas de esterilização térmica. Antioxidantes podem ser selecionados de qualquer um daqueles compostos conhecidos na técnica. Similarmente, a quantidade de antioxidante empregada pode ser determinada usando experimentação de rotina. De preferência, as composições da invenção não contêm um antioxidante.

[0043] Um agente preservante, por exemplo, fenol, pode ser de preferência adicionado à composição quando ela for formulada como frascos, cartuchos ou seringas multidose. De preferência, as composições da invenção não contêm um agente preservativo.

[0044] Referência é feita à literatura extensiva sobre o objeto para esses et al. excipientes e procedimentos mencionados aqui, vide em particular Handbook of Pharmaceutical Excipients, Segunda Edição, editado por Ainley Wade e Paul J. Weller, American Pharmaceutical Association, Washington, USA e Pharmaceutical Press, Londres; e Le-xikon der Hilfsstoffe fur Pharmazie, Kosmetik and angrenzende Gabi-ete editado por H.P. Fiedler, 4a Edição, Editio Cantor, Aulendorf e edições anteriores que são aqui incorporadas a título de referência.

[0045] De preferência, a composição da invenção contém como um ingrediente ativo apenas compostos da invenção, por exemplo, um composto da Fórmula II, por exemplo, Composto A.

[0046] Os procedimentos que podem ser usados para preparar as composições da invenção podem ser convencionais ou conhecidos na técnica ou à base de tais procedimentos tal como, por exemplo, aqueles descritos em L. Lachman et al., The Theory and Practice of Industrial Pharmacy, 3a Ed., 1986, H. Sucker et al., Pharmazeutische Technologie, Thieme, 1991, Hageris Handbuch der pharmazeutischen Praxis, 4a Ed. (Springer Verlag, 1971) e Remington's Pharmaceutical Sciences, 13a Ed., (Mack Publishing, Co., 1970) ou edições posteriores.

[0047] Tipicamente, o composto da invenção, o ácido tartárico e opcionalmente outros ingredientes conforme mencionado na quantidade desejada são dissolvidos em um solvente aquoso, de preferência em água para injeção, e o pH é ajustado com a base. A solução resultante pode então ser diluída com água para levá-la para o volume desejado. A solução resultante pode ser filtrada em um filtro estéril, por exemplo, um filtro Millipak®. De preferência, durante a preparação acima, oxigênio (ar) é deslocado de contato com a solução do composto da invenção. Isso é geralmente realizado purgando com, por exemplo, nitrogênio, um recipiente contendo a solução. A composição farmacêutica pode ser embalada sob dióxido de carbono ou outro gás inerte para prevenir degradação, de preferência sob dióxido de carbono, por exemplo, carregada em frascos, por exemplo, frascos de vidro, ampolas, por exemplo, ampolas de vidro, ou seringas, por exemplo, seringas preenchidas, e esterilizadas a vapor ou calor.

[0048] A solução pode ser seca com congelamento através de um método convencional sob condições assépticas para dar um pó para injeção que pode ser usado para reconstituir a solução desejada para administração parenteral um pouco antes da administração através de mistura do pó com a quantidade desejada de solvente, por exemplo, com água para injeção.

[0049] Alternativamente, a presente invenção provê em um outro aspecto uma composição para administração parenteral tamponada em um pH de cerca de 4 a cerca de 4,5, de preferência, cerca de 4,2, e compreendendo como ingrediente ativo o composto A ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, por exemplo, um lactato, mono- ou di-aspartato, succinato, de preferência um di-sal de aspartato. [0050] Essas composições podem compreender os mesmos componentes conforme acima descrito para composições compreendendo ácido tartárico onde o ácido tartárico/tartrato é substituído por um outro tampão tal como acetato/ácido acético, lactato/ácido acético e Glici-na/HCI.

[0051] As composições da invenção são úteis: [0052] a) para a prevenção ou tratamento de distúrbios com uma etiologia compreendendo ou associada com secreção de GH em excesso e/ou excesso de IGF-1, por exemplo, no tratamento de acromegalia bem como no tratamento de diabetes mellitus do tipo I ou tipo II, especialmente suas complicações, por exemplo, angiopatia, retinopa-tia proliferativa diabética, edema macular diabético, nefropatia, neuropatia e fenômeno de dawn, et al. distúrbios metabólicos relacionados com liberação de insulina ou glucagon, por exemplo, obesidade, por exemplo, obesidade mórbida ou obesidade hipotalâmica ou hiperinsu-linêmica.

[0053] b) no tratamento de fístula enterocutânea e pancreaticocu-tânea, síndrome do intestino irritável, doenças inflamatórias, por exemplo, Doença de Grave, doença do intestino inflamatório, psoríase ou artrite reumatóide, doença do rim policístico, síndrome do esvaziamento rápido, síndrome da diarréia aguada, diarréia relacionada com AIDS, diarréia induzida por quimioterapia, pancreatite aguda ou crônica e tumores de secreção de hormônio gastrintestinal (por exemplo, tumores GEP, por exemplo, vipomas, glucagonomas, insulinomas, carcinóides e similar), males linfocíticos, por exemplo, linfomas ou leucemias, carcinoma hepatocelular bem como sangramento gastrintestinal, por exemplo, sangramento esofagial variceal.

[0054] c) para a prevenção ou tratamento de angiogênese, distúrbios inflamatórios conforme indicado acima incluindo doença inflama-tória do olho, edema macular, por exemplo, edema macular cistóide, edema macular cistóide idiopático, degeneração macular relacionada com a idade exudativa, distúrbios relacionados com neovascularização coroidal e retinopatia proliferativa.

[0055] d) para prevenção ou combate de doenças de vasos de enxerto, por exemplo, vasculopatias de alo- ou xenotransplante, por exemplo, aterosclerose de vaso de enxerto, por exemplo, em um transplante de órgão, por exemplo, transplantes de coração, pulmão, coração-pulmão combinado, fígado, rim ou pancreáticos, ou para prevenção ou tratamento de estenose de enxerto veia, restenose e/ou oclusão vascular seguindo dano vascular, por exemplo, causada por procedimentos de cauterização ou procedimentos de atrito vascular tal como angioplastia transluminal percutânea, tratamento a laser ou outros procedimentos invasivos que rompem a integridade da íntima ou endotélio vascular.

[0056] e) para tratamento de tumores expressando ou acumulando receptor de somatostatina tal como tumores da pituitária, por exemplo, Doença de Cushing, tumores gastro-enteropancreáticos, carcinóides, do sistema nervoso central, de mama, prostático (incluindo câncer de próstata refratário a hormônio avançado), ovarianos e colônicos, câncer de pulmão de célula pequena, obstrução intestinal maligna, paragangliomas, câncer de rim, câncer de pele, neuroblastomas, feocro- mocitomas, carcinomas da tireóide medulares, mielomas, linfomas, linfomas de Hodgkin e não-Hodgkins, tumores ósseos e suas metástases, bem como distúrbios autoimunes ou inflamatórios, por exemplo, artrite reumatóide, doença de Grave ou outras doenças inflamatórias do olho.

[0057] De preferência, as composições da invenção são úteis no tratamento de acromegalia e câncer, por exemplo, Doença de Cushing.

[0058] A atividade e as características das composições da invenção podem ser indicadas nos testes clínicos ou de animal padrão. [0059] A dosagem apropriada da composição da invenção vai variar com certeza, por exemplo, dependendo da condição a ser tratada (por exemplo, do tipo de doença ou da natureza da resistência), da droga usada, do efeito desejado e do modo de administração.

[0060] Quando dada continuamente, uma quantidade eficaz de droga pode ser dada em duas ou três doses espalhadas com o tempo tal como através de administração parenteral, por exemplo, goteja-mento intravenoso, injeção(ões) intramuscular(es) ou subcutânea(s), ou infusão subcutânea, por exemplo, infusão subcutânea contínua, de preferência injeção ou infusão subcutânea, com uma dose diária total sendo espalhada na porção ou no período de administração todo. Quando dada através de injeção subcutânea, ela é administrada com mais preferência de 3 vezes por semana até 3 vezes por dia, de preferência duas vezes por semana a uma ou duas vezes por dia. Um composto da invenção pode ser também administrado na forma de, por exemplo, uma injeção de bolo subcutânea.

[0061] A composição da invenção é de preferência adequada para administração subcutânea.

[0062] Após injeção, a composição da invenção é localmente bem tolerada. Particularmente, a administração parenteral de uma compo- sição da invenção, por exemplo, injeção subcutânea, leva a uma sensação de queima suave ou de nenhuma queima no local da injeção. [0063] Em adição à boa tolerância local após injeção, a composição da invenção exibe boas características de estabilidade. Por exemplo, menos de 2,5% de produtos de degradação foram encontrados após 4 semanas de armazenamento a 60O. Por exemplo, se armazenadas com proteção contra luz a 2Ό a 8Ό, as compo sições da invenção são estáveis durante 24 meses. Estabilidade particularmente boa pode ser observada com o sal de diaspartato do Composto A.

[0064] Em geral, resultados satisfatórios são obtidos com a administração, por exemplo, administração subcutânea, em dosagens da ordem de a partir de cerca de 0,01 a cerca de 1,2 mg, de preferência de a partir de cerca de 0,1 a cerca de 0,6 mg do composto da invenção por injeção ou cerca de 0,001 a cerca de 0,009 mg por kg de peso do corpo por dia, administrada uma vez ou em doses divididas até 4 vezes por dia. As dosagens diárias adequadas para pacientes são então da ordem de cerca de 0,1 mg a cerca de 0,6 mg de um composto da invenção, por exemplo, um composto da Fórmula II, por exemplo, Composto A.

[0065] Os Exemplos que seguem servem para ilustrar as composições da invenção.

Exemplo 1 a 7: [0066] Ácido tartárico e manitol são dissolvidos em água para injeção, enquanto a solução é purgada com nitrogênio. Então sal de diaspartato do composto A é adicionado, a solução é ajustada com hidróxido de sódio para pH 4,20 e água para injeção até 1,0 mL é adicionada. Sob condições assépticas, a solução é filtrada em um filtro estéril Millipak-200® com um tamanho de poro de £ 0,22 pm, enchida em ampolas e esterilizada através de autoclave.

[0067] Em ainda um outro aspecto, a presente invenção provê compostos da Fórmula III: [0068] onde R é NRiR2-C2-6alquileno ou guanidina-C2-6alquileno, e [0069] cada um de Ri e R2 é independentemente H ou Ci-4alquila, [0070] na forma livre, forma de sal ou forma de complexo, ou na forma protegida.

[0071] De preferência, R é NRiR2-C2-6alquileno. Um composto preferido da Fórmula III é o composto onde R é 2-amino-etila, também chamado ciclo [{4-(NH2-C2H4-NH-CO-O-)Pro}-Phg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)Phe] (referido aqui como Composto B), na forma livre, forma de sal ou complexo ou forma protegida. Phg e Bzl são conforme acima definido.

[0072] Esses compostos na forma livre, forma de sal ou forma complexa, ou forma protegida são referidos daqui em diante como "compostos da invenção".

[0073] Um composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B, na forma protegida corresponde à molécula acima onde pelo menos um dos grupos amino é protegido e que através de desproteção leva a um composto da Fórmula III, de preferência fisiologicamente removível. Grupos de proteção amina adequados são, por exemplo, conforme descrito em "Protective Groups in Organic Synthesis", T.W. Greene, J. Wiley & Sons, NY (1981), cujos conteúdos são aqui incorporados a título de referência. Exemplo de tal grupo de proteção amina é acetila. [0074] Quando um composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B, existe na forma complexa, ele pode ser convenientemente um composto da Fórmula III carregando um grupo de quelação no grupo amina da cadeia lateral de Pro e complexado com um elemento detectável ou radioterapêutico. O Composto B carregando um grupo de quelação é referido aqui como Composto B conjugado.

[0075] Exemplos de grupos de quelação incluem, por exemplo, aqueles derivados de ácidos poliaminopolicarboxílicos ou anidridos, por exemplo, aqueles derivados de ligantes não-cíclicos, por exemplo, ácido dietileno triamina pentaacético (DTPA), ácido etileno glicol-0,0'- bis(2-aminometil)-N,N,N'N'-tetraacético (EGTA), ácido N,N'-bis(hidroxibenzil)etilenodiamino-N,N'-diacético (HBED) e ácido trietile-no tetraamina hexaacético (TTHA), aqueles derivados de DTPA substituído, por exemplo, p-isotiocianato-benzil-DTPA, aqueles derivados de ligantes macrocíclicos, por exemplo, ácido 1,4,7,10-tetra-azaciclododecano-N,N,,N",N",-tetraacético (DOTA), ácido 1,4,8,11-tetraazaciclotetradecano-N,N,,N",N",-tetraacético (TETA) ou ácido 1,4,7,10-tetraazaciclotridecano-N,N,,N",N",-tetraacético (TITRA).

[0076] O grupo de quelação pode ser ligado ou diretamente ou através de um espaçador ao grupo amina da cadeia lateral de Pro. Espaçadores adequados incluem aqueles conhecidos na técnica, por exemplo, conforme descrito na GB-A-2.225.579, por exemplo, o resíduo divalente de um ácido amino-carboxílico, por exemplo, β-Ala ou um resíduo divalente derivado de ácido 6-amino-capróico.

[0077] Os grupos de quelação preferidos são aqueles de DTPA, DOTA e TETA. Os grupos de quelação derivados de DTPA e DOTA são os mais preferidos.

[0078] Por elemento detectável se quer dizer qualquer elemento, de preferência, um íon de metal que exibe uma técnica de diagnóstico in vivo apropriadamente detectável, por exemplo, íon de metal que emite uma radiação detectável ou um íon de metal que é capaz de influenciar propriedades de relaxamento de RMN. Por elemento radioterapêutico se quer dizer qualquer elemento que emita uma radiação apresentando um efeito benéfico sobre as condições a serem tratadas. [0079] Elementos adequados incluem, por exemplo, elementos pesados ou íons terrosos raros, por exemplo, conforme usado na varredura CAT (Tomografia axial de computador), íons paramagnéticos, por exemplo, Gd3+, Fe3+, Mn2+ e Cr2+, íons de metal fluorescentes, por exemplo, Eu3+· e radionuclídeos, por exemplo, radiolantanídeo, particularmente um radionuclídeo de emissão de γ, radionuclídeo de emissão de β, radionuclídeo de emissão de a, radionuclídeo de emissão de Au-ter-e' ou um radionuclídeo de emissão de positron, por exemplo, 68Ga, 18F ou 86Y.

[0080] Os radionuclídeos de emissão de γ adequados incluem aqueles que são úteis em técnicas de diagnóstico. Os radionuclídeos de emissão de γ vantajosamente têm uma meia-vida de a partir de 1 hora a 40 dias, de preferência, de a partir de 5 horas a 4 dias, com mais preferência de a partir de 12 horas a 3 dias. Exemplos são radioi-sótopos de Gálio, índio, Tecnécio, Itérbio, Rênio, Térbio, Lutécio, Tálio e Samário, por exemplo, 87Ga, 111ln, 99mTc, 161Tb, 169Yb, 186Re ou 177Lu. [0081] Os radionuclídeos de emissão de β adequados incluem aqueles que são úteis em aplicações radioterapêuticas, por exemplo, 90Y, 67Cu, 186Re, 188Re, 169Er, 121Sn, 127Te, 177Lu, 143Pr, 198Au, 109Pd, 165Dy, 142pr QU 153gm [0082] Os radionuclídeos de emissão de α adequados são aqueles que são usados em tratamentos terapêuticos, por exemplo, 211At, 212Bi ou 201TI.

[0083] Os compostos da Fórmula III, por exemplo, Composto B, podem existir, por exemplo, na forma livre ou de sal. Os sais incluem sais de adição ácidos com, por exemplo, ácidos inorgânicos, ácidos poliméricos ou ácidos orgânicos, por exemplo, com ácido clorídrico, ácido acético, ácido láctico, ácido aspártico, ácido benzóico, ácido succínico ou ácido pamóico. Os sais de adição ácidos podem existir como sais mono ou divalentes, por exemplo, dependendo de se 1 ou 2 equivalentes ácidos são adicionados ao Composto B na forma de base livre. Os sais preferidos são os lactato, aspartato, benzoato, succinato e pamoato incluindo mono- e di-sais, com mais preferência, di-sal de aspartato e o monossal de pamoato.

[0084] Os compostos conjugados da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, podem ainda existir nas formas de sal obtení- veis com os grupos de ácido carboxílico quando presentes no grupo de quelação, por exemplo, sais de metal alcalino tal como sódio ou potássio, ou sais de amônio substituídos ou não-substituídos.

[0085] A presente invenção também inclui um processo para a produção de um composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B. Ele pode ser produzido em analogia a métodos conhecidos, por exemplo: [0086] a) ciclização de um peptídeo linear na forma protegida, ligada a polímero ou não-protegida, de modo que um composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B, é obtido e então opcionalmente remoção do(s) grupo(s) de proteção).

[0087] b) para produzir um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto conjugado B, ligando junto um grupo de quelação e o composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B, na forma protegida e não-protegida e então opcionalmente remoção do grupo de proteção, [0088] e recuperação do composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B, ou um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado desse modo obtido, na forma livre, na forma de sal ou opcional mente complexado com um elemento detectável ou radioterapêutico.

[0089] Geralmente não é crítico que o aminoácido seja selecionado para estar na posição C-terminal para começar a cadeia de peptídeo uma vez que o peptídeo linear vai ciclizar, contanto apenas que a sequência de aminoácidos no peptídeo linear corresponda àquela no composto desejado da Fórmula III, por exemplo, Composto B. No entanto, podem haver outros fatores que podem preferir que uma pessoa comece o aminoácido sobre outro. Quando um composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B, é preparado através de síntese de fase sólida, o primeiro aminoácido é de preferência ligado à resina, por exemplo, uma resina à base de poliestireno comercial mente disponível, através de um ligante adequado, por exemplo, um ligante que é clivável sob condições suaves para manter a proteção da cadeia lateral intacta, por exemplo, SASRIN, ou um ligante à base de tritila opcionalmente substituído, por exemplo, ácido 4-(hidróxi-difenil-metil)-benzóico onde um dos grupos fenila pode ser opcionalmente substituído, por exemplo, por Cl. A formação da cadeia de peptídeo desejada pode ser realizada de maneira convencional, por exemplo, usando unidades de aminoácido onde o grupo amina terminal é Fmoc-protegido, os grupos amina da cadeia lateral onde presentes sendo protegidos com um grupo de proteção amina diferente, por exemplo, Boc ou CBO. De preferência, o peptídeo linear é ciclizado de tal maneira a produzir uma ligação entre Tyr(4-Bzl)-OH e Phe, por exemplo, Phr-{4-(NHRi-C2H4-NH-CO-O)-Pro}-DPhg-DTrp(R2)-Lys(e-NHR3)-Tyr(4-Bzl)-OH ou um seu derivado funcional, onde cada um de Ri, R2 e R3 é um grupo de proteção amina. A etapa de ciclização a) pode ser convenientemente realizada de acordo com método conhecido, por exemplo, através de uma azida, um éster ativo, um anidrido misto ou uma carbodiimida. Em seguida, os grupos de proteção são removidos, por exemplo, através de divagem, por exemplo, com trifluoracético ou através de hidrogenação.

[0090] A ciclização do peptídeo pode ser também realizada diretamente no apoio sólido, o primeiro aminoácido estando em uma forma Na- e C-terminal protegida e ligado através de uma cadeia lateral, por exemplo, função ε-amino ou Lys ou através de ancoramente de estrutura principal. A sequência linear é então sintetizada seguindo procedimentos de síntese de fase sólida (SPPS). Após divagem da proteção C-terminal, o peptídeo é ciclizado, por exemplo, conforme acima descrito. Em seguida, o peptídeo cíclico é clivado da resina e desprotegido.

[0091] Se desejado, a cadeia lateral presente em Pro pode ser introduzida no aminoácido antes ou após a etapa a) de ciclização do peptídeo. Desse modo, Pro como um aminoácido de partida ou um peptídeo linear ou cíclico de partida onde em cada caso Pro é substituído no anel por OH pode ser convertido para prover um composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B, ou a unidade Pro desejada ou o peptídeo linear correspondente, respectivamente, onde Pro é substituído por NHR1-C2H4-NH-CO-O-.

[0092] A complexação de um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, pode ser realizada reagindo o composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, com um elemento detectável ou radioterapêutico correspondente dando composto, por exemplo, sal de metal, de preferência, um sal solúvel em água. A reação pode ser realizada através de analogia com métodos conhecidos, por exemplo, conforme descrito em Perrin. Organic Ligand, Chemical Data Series 22. NY Pergamon Press (1982); em Krejcarit e Tucker, Biophys. Biochem. Res. Com. 77:581 (1977) e em Wagner e Welch, J. Nucl. Med., 20:428 (1979).

[0093] Os exemplos que seguem são ilustrativos dos novos compostos da invenção da Fórmula III. Todas as temperaturas estão em °C.

Abreviações: AcOH = ácido acético Boc = terc-butoxi-carbonila Bzl = benzila CBO = carbobenzóxi DIPCI = N.N-diisopropilcarbodiimida DIPEA = diisopropiletilamina DMF = dimetilformamida DPPA = difenilfosforilazida Fmoc = fluorenilmetoxicarbonila HOBT = 1-hidroxibenzotriazol Osu = N-hidroxissuccinimida TFA = ácido trifluoracético THF = tetrahidrofurano Exemplo 8: Ciclorf4-(NH?-C?H4-NH-CO-O-)ProbDPhq-DTrp-Lvs-Tvr(4-Bzl)-Phe] a) Síntese de Fmoc-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-Boc)-OH

[0094] Cloridrato de metil éster de L-hidroxiprolina é reagido com Fmoc-OSu em carbonato de sódio aquoso 1,0N/THF em temperatura ambiente. Após o término da reação, Fmoc-Pro(4-OH)-OMe é isolado através de precipitação. Fmoc-Pro(4-OH)-OMe é então adicionado em gotas a uma solução de trifosgênio (0,6 equivalente) em THF para dar um intermediário de clorocarbonato. Após 1 hora, dimetilaminopiridina (1,0 equivalente) e N-Boc-diaminoetano (6,0 equivalente) são adicionados e a reação é agitada em temperatura ambiente. Após o término da reação, o solvente é removido a vacuo e o Fmoc-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-Boc)-OMe é extraído de um sistema de duas fases de acetato de etila/0,1 M de HCI para dar o produto bruto (MH+ = 554) que é purificado através de cristalização a partir de acetato de etila. O metil éster é então clivado para o ácido livre através de tratamento com NaOH 1N em dioxana/água e o produto Fmoc-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-Boc)-OH é purificado em sílica gel. [(M+Na)]+ = 562). b) _______H-Phe-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-Boc)-DPhçi-DTrD(Boc)- Lvs(Boc)-Tyr(Bzl)-OH

[0095] Resina de poliestireno Fmoc-Tyr(Bzl)-O-CH2-Ph(3-OCH3)-O-CH2 comercial mente disponível (resina SASRIN, 2,4 mM) é usada como material de partida e realizada através de um protocolo padrão consistindo em ciclos repetitivos de desproteção de Na (Piperidi-na/DMF, 2:8) lavagens repetidas com DMF e acoplamento (DIPCI: 4,8 mM/HOBT: 6 mM, DMF). Os derivados de aminoácido que seguem são sequencialmente acoplados: Fmoc-Lys(Boc)-OH, Fmoc-DTrp(Boc)-OH, Fmoc-DPhg-OH, Fmoc-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-Boc)-OH, Fmoc-Phe-OH. Os acoplamentos (2 equivalente de aminoácidos) são continuados ou repetidos até o término, isto é, até o desaparecimento completo dos grupos amino residuais que é monitorado por um teste de Niidrina 'Kaiser' negativo. Antes da divagem do peptí-deo linear completamente montado protegido de seu apoio de resina a proteção de Να-Fmoc do último resíduo é removida. ç)_______H-Phe-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-Boc)-DPhçi-DTrD(Boc)- Lvs(Boc)-Tyr(Bzl)-OH

[0096] Após lavagens com CH2CI2, o peptídeo-resina é transferido para uma coluna em um filtro de sucção agitado e o fragmento de pep-tídeo é clivado e eluído com um tratamento curto com TFA a 2% em CH2CI2 dentro de 1 hora. O eluato é imediatamente neutralizado com uma solução de NaHCO3 saturada. A solução orgânica é separada e evaporada e o precursor protegido da cadeia lateral (MH+ = 1366) é ciclizado sem purificação adicional. d) f-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH2)-DPhçi-DTrD-Lvs-Tvr(Bzl)-Phe-l, trifluoracetato [0097] O fragmento linear acima é dissolvido em DMF (4 mM), resfriado para menos 5Ό e tratado com 2 equivalente de DIPEA, então 1,5 equivalente de DPPA e agitado até o término (ca. 20 horas) a 0-4Ό. O solvente foi quase que completamente removido a vácuo; o concentrado é diluído com acetato de etila, lavado com NaHCO3, água, seco e evaporado a vácuo.

[0098] Para desproteção o resíduo é dissolvido a 0° C em TFA/H2O 95:5 (ca. de 50 mM) e agitado no frio por 30 minutos. O produto é então precipitado com éter contendo cerca de 10 equivalente de HCI, filtrado, lavado com éter e seco. A fim de decompor completa- mente o restante do ácido Indol-N-carbâmico o produto é dissolvido em AcOH a 5% e liofilizado após 15 horas a cerca de 5° C. RP-HPLC preparativa é realizada em uma coluna STAGROMA C-18 de 10 pm (5-25 cm) usando um gradiente de TFA a 0,5% a TFA a 0,5% em 70% de acetonitrila. As frações contendo o composto título puro são combinadas, diluídas com água e liofilizadas. O liofilisato é dissolvido em água seguido por precipitação com Na2CO3 a 10% em água. A base livre sólida é filtrada, lavada com água e seca em vácuo em temperatura ambiente. O pó branco resultante é diretamente usado para os sais diferentes.

Exemplo 9: Ciclo[{4-(NH2-C2H4-NH-CO-O-)Pro}-DPhg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)-Phe] na forma de sal a. Acetato [0099] Conversão na forma de sal de acetato é realizada usando uma resina de troca de íon (por exemplo, AG 3-X4). MS (ESI): m/z 524,5 [M+2H]2+ [00100] [a]D20 = -41,6* c=0,56; AcOH 95%; T = 20C; 589,3 nm b. Aspartato [00101] A conversão no mono- ou di-aspartato é obtida reagindo 1 equivalente do composto do Exemplo 8 com 1 ou 2 equivalentes de ácido aspártico em uma mistura de acetonitrila/água 1:3. A mistura resultante é congelada e liofilizada.

[00102] O di-aspartato pode ser também obtido através de dissolução do composto do Exemplo 8 em água/acetonitrila 4:1, filtragem, carregamento em uma resina de troca de íon, por exemplo, coluna BioRad AG4x4 e eluição com água/acetonitrila 4:1. O eluato é concentrado, congelado e liofilizado. c. Benzoato [00103] Conversão para o benzoato pode ser obtida dissolvendo o composto do Exemplo 8 com 2 equivalentes de ácido benzóico em uma mistura de acetonitrila/água 1:2. A mistura resultante é congelada e liofilizada. d. Pamoato [00104] 1 equivalente do composto do Exemplo 8 é dissolvido junto com 1 equivalente de ácido embóico em uma mistura de acetonitri-la/THF/água 2:2:1. A mistura resultante é congelada e liofilizada. Exemplo 10: Ciclo[{4-(DOTA-NH-C2H4-NH-CO-O-)Pro}-DPhg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)-Phe [00105] a) ciclo[-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH2)-DPhg-DTrp- Lys(Cbo)-Tyr(Bzl)-Phe~], trifluoroacetato [00106] O composto é sintetizado da mesma maneira que ciclo[-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH2)-DPhg-DTrp-Lys(Cbo)-Tyr(Bzl)-Phe-], trifluoroacetato usando Fmoc-Lys(Cbo)-OH ao invés de Fmoc-Lys(Boc)-OH.

[00107] b) 400 mg de DOTA x 2Η2Ο comercialmente disponível (SYMAFEX - França) são dissolvidos em 20 mL de água. Após adição de 20 mL de DMF, 170 mg de ciclo[-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH2)-DPhg-DTrp-Lys(CBO)-Tyr(Bzl)-Phe-], junto com 190 mg de DCCL e 60 mg de N-hidroxissuccinimida são adicionados. A suspensão resultante é mantida em temperatura ambiente por 72 horas. Após filtragem, o solvente é removido sob pressão reduzida e o bruto restante é purificado em sílica gel (DCM/MeOH/HOAc50% 8/2/0,25 -> 7/3/1 como fase móvel).

[00108] c) Para desproteção do DOTA acima - conjugado é tratado com 5 mL de ácido trifluoracético/tioanisol (9/1) por duas horas em temperatura ambiente. Após isso a solução é vertida em uma mistura de 100 mL de éter de dietila + 5 mL de HCI 3N/éter de dietila e o precipitado resultante é isolado através de filtragem. Purificação é realizada em sílica gel usando DCM/MeOH/HOAC50% 7/4/2 -> 7/5/4 como fase móvel. O produto final analiticamente puro é obtido após uma etapa de retirada de sal usando TFA a 0,1% para TFA a 0,1% em gradiente de 90% de CH3CN em uma coluna RPie-HPLC (Spherisorb 250 x 4,6 mm). MH+: 1434,7.

[00109] Compostos da Fórmula III, por exemplo, Composto B, na forma livre ou na forma de sais farmaceuticamente aceitáveis e complexos exibem propriedades farmacológicas valiosas conforme indicado em testes in vitro e in vivo e são então indicados para terapia. [00110] Mais particularmente, os compostos da Fórmula III, por exemplo, Composto B, exibem um perfil de ligação interessante para receptores de somatostatina humanos (hsst). 5 subtipos de receptores de somatostatina, sst1, sst2, sst3, sst4 e sst5 foram clonados e caracterizados. hsstl, hsst2 e hsst3 e suas sequências foram descritos por Y. Yamada et al. em Proc. Nat. Acad. Sei., 89, 251-255 (1992). hsst4 e suas sequências foram descritos por L. Rohrer et al. em Proc. Acad. Sei., 90, 4196-4200 (1993). hsst5 e sua sequência foram descritos por R. Panetta et al. em Mol. Pharmacol. 45, 417-427, 1993.

[00111] Os ensaios de ligação podem ser realizados conforme descrito abaixo usando membranas de tipos de célula expressando seletivamente e estavelmente hsstl, hsst2, hsst3, hsst4 ou hsst5, por exemplo, células CHO ou COS.

[00112] As membranas são preparadas de acordo com métodos conhecidos, por exemplo, conforme descrito por C. Bruns et al., em Biochem. J., 1990, 65, páginas 39-44. As membranas preparadas a partir de tipos de célula seletivas a hsst, por exemplo, células CHO ou COS, expressando estavelmente hsstl ou hsst2 ou hsst3 ou hsst4 ou hsst5 são incubadas em triplicata em um volume total de 300 pi a 22Ό por 30 minutos com concentrações altas de [125l-Tyr11]-SRIF-14 em 10 mmol/l de tampão Hepes (pH 7,6) contendo 0,5% de BSA. A incubação é terminada através de filtragem rápida e as cargas são contadas em um contador. A ligação específica é ligação total menos ligação não-específica na presença de 1 pmol/l de somatostatina-14. Os experimentos são realizados em triplicata. A constante de afinidade (KD) e o número de locais de ligação são calculados usando programas de estatística e gráficos apropriados.

[00113] Os compostos da Fórmula III, por exemplo, Composto B, não têm qualquer afinidade de ligação significante nos ensaio de ligação acima com relação a hsstl, hsst2 e hsst4, uma afinidade de ligação baixa com hsst3 e uma afinidade de ligação boa com relação a hsst5 expressão como um valor IC50 na faixa molar (IC50 = concentração para metade de inibição máxima em um ensaio de ligação de competição usando [125l-Tyr11]-SRIF-14 como radioligante específico). IC50 hsstl hsst2 hsst3 hsst4 hsst5 Composto B >1000 >1000 22 nM 840 nM 0,53nM

[00114] Compostos da Fórmula II, por exemplo, Composto B, mostram atividade de inibição de liberação de GH conforme indicado pela inibição da liberação de GH in vitro de células da pituitária culturadas. Por exemplo, glândulas da pituitária anteriores de ratos machos adultos são cortadas em pedaços pequenos e dispersas usando 0,1% de tripsina em 20 mM de tampão HEPES. As células dispersas são culturadas por quatro dias em MEM (Gibco) suplementado com 5% de soro bovino fetal, 5% de soro de cavalo, 1 mM de NaHCO3, 2,5 nM de de-xametasona, 2,5 mg/mL de insulina e 20 U/mL de Pen/Strep. No dia do experimento, as células ligadas são lavadas duas vezes com meio Krebs-Ringer tamponado com 20 mM de HEPES e suplementado com 5 mM de glicose e 0,2% de BSA. Subsequentemente, as células são incubadas por três horas com o Composto B na presença de 3 x 10'1° M de fator de liberação de hormônio do crescimento. A quantidade de hormônio do crescimento liberada no meio é medida através de RIA. [00115] Os compostos da Fórmula III, por exemplo, Composto B, inibem a liberação de hormônio do crescimento (GH) em ratos. O Composto B é administrado s.c. a ratos anestesiados. Sangue é coletado após decapitação 1 hora após a administração do composto. A duração da ação é estimada com base na inibição de secreção de GH basal 6 horas após tratamento com droga. Os níveis de hormônio são medidos através de RIA 1 hora e 6 horas após o tratamento. O valor de ID50 para a inibição da secreção de hormônio é determinada graficamente (log-probit) para cada experimento e os valores resultantes têm a média tirada logaritmicamente. Neste modelo in vivo, o Composto B inibe a liberação de hormônio do crescimento.

[00116] Os compostos da Fórmula III, por exemplo, Composto B, são também úteis no tratamento de tumores que são positivos a receptor hsst3 e/ou hsstõ, conforme indicado em testes de proliferação com vários tipos de célula de câncer carregando gsst3 e/ou hsstõ.

[00117] Os compostos da Fórmula III, por exemplo, Composto B, são então úteis para a prevenção ou tratamento de distúrbios com uma etiologia compreendendo ou associada com a presença de ativação de hsst3 e/ou hsstõ, por exemplo, distúrbios ou doenças associados com secreção de GH em excesso, por exemplo, no tratamento de acromegalia ou para o tratamento de doenças proliferativas de célula maligna, por exemplo, tumores de câncer carregando hsst3 e/ou hsstõ, por exemplo, conforme descrito abaixo para o Composto B conjugado complexado.

[00118] Para todas as indicações acima, a dosagem requerida vai com certeza depender, por exemplo, do hospedeiro, do modo de administração e da severidade da condição a ser tratada. Em geral, no entanto, resultados satisfatórios são obtidos através da administração na ordem de a partir de 1 a pg a 0,7 mg/kg/dia de composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B. Conforme indicado, dosagem diária para pacientes está na faixa de a partir de cerca de 2 pg a cerca de 50 mg, de preferência cerca de 0,01 a cerca de 40 mg, por exemplo, cerca de 0,01 a cerca de 3 mg s.c. do composto convenientemente administrado em doses divididas até 3 vezes por dia em forma de dosagem unitária contendo, por exemplo, de a partir de cerca de 0,5 pg a cerca de 25 mg, por exemplo, de a partir de cerca de 2 pg a 20 mg, por exemplo, de a partir de 2 pg a 1,5 mg de composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B.

[00119] Os compostos da Fórmula III, por exemplo, Composto B, podem ser administrados na forma livre ou na forma de sal ou complexos farmaceuticamente aceitáveis. Tais sais e complexos podem ser preparados de maneira convencional e exibem a mesma ordem de atividade que o composto livre. A presente invenção também provê uma composição farmacêutica compreendendo um composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B, na forma de base livre ou em forma de sal ou forma de complexo farmaceuticamente aceitável, junto com um ou mais diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável. Tais composições podem ser formuladas de maneira convencional. Os compostos da Fórmula III, por exemplo, Composto B, podem ser também administrados em forma de liberação prolongada, por exemplo, na forma de implantes, microcápsulas, microesferas ou nanoesferas compreendendo, por exemplo, um polímero ou copolímero biodegradável, na forma de uma formulação lipossomal, ou na forma de uma autogel, por exemplo, uma composição sólida ou semi-sólida capaz de formar um gel após interação com os fluidos do corpo do paciente.

[00120] Os compostos da Fórmula III, por exemplo, Composto B, ou um seu sal ou complexo farmaceuticamente aceitável, podem ser administrados através de qualquer via convencional, por exemplo, paren-teralmente, na forma de soluções ou suspensões injetáveis (incluindo, por exemplo, a forma de liberação prolongada conforme acima indicado), oralmente usando um aumentador de absorção convencional, em uma forma nasal ou de supositório ou topicamente, por exemplo, na forma de líquido oftálmico, gel, unguento ou preparação de suspensão, por exemplo, uma formulação lipossomal, de microesfera ou nanoesfe-ra, por exemplo, para instilação ou injeções subconjuntivais ou intra-ou peri-oculares.

[00121] De acordo com o acima, a presente invenção provê ainda: [00122] 1. Um composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B, ou um seu sal ou complexo farmaceuticamente aceitável para uso como um agente farmacêutico;

[00123] 2. Um método para prevenção ou tratamento de doenças ou distúrbios conforme aqui indicado em um indivíduo com necessidade de tal tratamento, método que compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz de um composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B, ou um seu sal ou complexo farmaceuticamente aceitável; ou [00124] 3. Um composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B, ou um seu sal ou complexo farmaceuticamente aceitável para uso na preparação de uma composição farmacêutica para uso em qualquer método conforme definido sob 2 acima.

[00125] Um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável é útil ou como uma gente de imagem, por exemplo, visualização de tecidos e células positivos para receptor hsst3 e/ou hsst5, por exemplo, tumores e metástases positivos de receptor hsst3 e/ou hsst5, distúrbios inflama-tórios ou autoimunes exibindo receptores de somatostatina, tuberculose ou rejeição de órgão após transplante, quando complexados com um elemento detectável, por exemplo, um nuclídeo emitindo γ- ou po-sitron, um íon de metal fluorescente ou um íon paramagnético, por exemplo, 111ln, 161Tb, 177Lu, 86Y, 68Ga Eu 3+, Gd3+, Fe3+, Mn2+ ou Cr2+, ou como um radiofarmacêutico para o tratamento in vivo de tumores e metástases positivos para receptor hsst3 e/ou hsst5, artrite reumatóide e condições de inflamação severas quando complexados com um nuclídeo de emissão de a- ou β- ou um nuclídeo com cascatas de Auger-e", por exemplo, θθΥ, 161Tb, 177Lu, 211At, 213Bi ou 201TI, conforme indicado por testes padrão.

[00126] Em particular, é observado que o Composto A conjugado se liga a receptores de somatostatina com valores pKi de a partir de cerca de 8 a 10. O Composto do Exemplo 10 complexado com, por exemplo, 111 In, 88Y, θθΥ or 177Lu se liga na faixa de nM aos respectivos subtipos de sst de acordo com o perfil de ligação do Composto B. [00127] A afinidade de um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, e seus complexos para receptores hsst3 e/ou hsstõ pode ser também mostrada através de teste in vivo, de acordo com métodos de teste padrão, por exemplo, conforme descrito na GB-A-2.225.579. Por exemplo, o composto do Exemplo 10 complexado com, por exemplo, 111 In, 88Y, θθΥ or 177Lu, dá um acúmulo de tumor significante de 4 horas após injeção em camundongos ou ratos carregando um tumor pancreático exócrino expressando receptores hsstõ.

[00128] Após administração de um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, na forma complexada, por exemplo, radiomarcado com 111 In, 177Lu, 86Y ou 161Tb, em uma dosagem de a partir de 1 a 5 pg/kg marcado com 0,1 a 5 mCi de radionu-clídeo, de preferência, 0,1 a 2 mCi, o local do tumor se torna detectável.

[00129] O composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, quando radiomarcado com radionuclídeo de emissão de a- ou β- ou um nuclídeo com cascatas Auger-e' exibe um efeito antiproliferativo e/ou citotóxico sobre as células de tumor carregando receptores hsst3 e/ou hsstõ, por exemplo, conforme indicado em tes- tes de camundongo nus.

[00130] Camundongos nus são inculados com células de tumor carregando hsst5. Quando os tumores atingiram um volume de 1 a 2 cm3 os animais foram aleatorizados em grupos de controle e tratamento. Um composto conjugado da Fórmula II, por exemplo, Composto B conjugado, na forma complexada, é administrado através de injeções i.p. ou i.v. Doses de até 40 mCi/kg são dadas por camundongo. O tamanho dos tumores é determinado com um medidor conforme acima descrito. Para cálculos estatísticos, teste t de Student é aplicado. Neste teste, reticulação de tumor transiente é observada após uma semana e o crescimento do tumor é retardado por duas semanas quando de uma única aplicação do composto do Exemplo 10 complexado com θθΥ ou 177Lu. Em contraste, os grupos de controle mostraram crescimento de tumor contínuo com um tempo de duplicação de volume de cerca de sete dias.

[00131] Desse modo, em uma série de modalidades específicas ou alternativas, a presente invenção também provê: [00132] 4. Uso de um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, complexado com um elemento detectável para detecção in vivo de células e tecidos positivos para hsst3 e/ou hsst5, por exemplo, tumores e metástases positivos para hsst3 ou hsst5, em um indivíduo e registro da localização dos receptores marcados pelo dito complexo;

[00133] 5. Método para detecção in vivo de tecidos e células positi- vos para hsst3 e/ou hsst5, por exemplo, tumores e metástases positivos para hsst3 ou hsst5, em um indivíduo compreendendo administrar ao dito indivíduo um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, complexado com um elemento detectável, ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável, e registro da localização dos receptores marcados pelo dito complexo.

[00134] O composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, em forma complexada para uso como um agente de imagem pode ser administrado, por exemplo, intravenosamente, por exemplo, na forma de soluções ou suspensões injetáveis, de preferência na forma de uma injeção única. A radiomarcação pode ser de preferência realizada um pouco antes da administração a um indivíduo.

[00135] Em animais uma faixa de dosagem indicada pode ser de a partir de 0,01 a 1 pg/kg de um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, complexado com 0,02 a 0,5 mCi de radionuclídeo de emissão de γ. Em mamíferos maiores, por exemplo, seres humanos, uma faixa de dosagem indicada pode ser de a partir de 1 a 100 pg/m2 de Composto B conjugado complexado com, por exemplo, 1 a 100 mCi/m2 de elemento detectável, por exemplo, 111ln, 86Y ou 177Lu.

[00136] 6. Uso de um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, complexado com um nuclídeo de emissão de a- ou β- ou um nuclídeo com cascatas Auger-e', para tratamento in vivo de tumores e metástases positivas para hsst3 e/ou hsst5.

[00137] 7. Método para tratamento in vivo de tumores e metástases positivas para hsst3 e/ou hsst5, por exemplo, para tratamento de invasão de tais tumores ou sintomas associados com crescimento de tal tumor, em um indivíduo com necessidade de tal tratamento que compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, complexado com um nuclídeo de emissão de a- ou β- ou um nuclídeo com cascatas de Auger-e'.

[00138] 8. Uso de um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, na fabricação de um agente de imagem ou uma composição radiofarmacêutica.

[00139] As dosagens empregadas na prática do uso radioterapêuti-co da presente invenção vão depender com certeza, por exemplo, da condição particular a ser tratada, por exemplo, da radiotoxidade conhecida a órgãos normais expressando hsst5, do volume do tumor e da terapia desejada. Em geral, a dose é calculada com base nos dados farmacocinéticos e de distribuição de radioatividade obtidos nos órgãos saudáveis e à base da absorção alvo observada. Um complexo de emissão de β de um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, pode ser administrado repetidamente, por exemplo, durante um período de 1 a 3 meses.

[00140] Em animais, uma faixa de dosagem indicada pode ser de a partir de 20 a 100 pg/kg de composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, complexado com 15 a 70 mCi de um nuclídeo de emissão de a- ou β- ou um nuclídeo com cascatas de Auger-e", por exemplo, θθΥ, 177Lu ou 161Tb. Em animais maiores, por exemplo, humanos, uma faixa de dosagem indicada pode ser de a partir de 1 a 100 pg/m2 de composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, complexado, por exemplo, com 1 a 100 mCi/m2 de um nuclídeo de emissão a- ou β- ou um nuclídeo com cascatas de Auger-e", por exemplo, θθΥ, 177Lu ou 161Tb.

[00141] Um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, na forma complexada para uso como um agente radioterapêutico pode ser administrado através de qualquer via convencional, por exemplo, intravenosamente, por exemplo, na forma de soluções injetáveis. Ele pode ser também administrado vantajosamente através de infusão, por exemplo, uma infusão de 15 a 60 minutos. Dependendo do local do tumor, ele pode ser administrado o mais próximo possível do local do tumor, por exemplo, por meio de um cate- ter. A presente invenção também provê uma composição farmacêutica compreendendo um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, na forma de base livre ou na forma de sal farmaceuticamente aceitável, ou complexado com um agente detectá-vel ou radioterapêutico, junto com um ou mais diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável.

[00142] Um composto da Fórmula III ou um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B ou o Composto B conjugado, em forma complexada pode ser adequado para imagem ou tratamento de hsst3 e/ou hsst5 expressando ou acumulando tal como tumores da pituitária, por exemplo, adenomas ou prolactinomas, tumores gastro-enteropancreáticos, carcinóides, do sistema nervoso central, mama, prostático (incluindo câncer de próstata refratário a hormônio), tumores ovarianos ou colônicos, câncer de pulmão de célula pequena, obstrução do intestino maligna, paragangliomas, câncer renal, câncer de pele, neuroblastomas, feocromocitomas, carcinomas da tireóide medulares, mielomas, linfomas, linfomas de Hodgkin e não-Hodgikin, tumores ósseos e suas metástases, bem como distúrbios autoimunes ou infla-matórios, por exemplo, artrite reumatóide, doença de Grave ou outras doenças inflamatórias do olho.

[00143] De acordo com um aspecto adicional da invenção, é provida uma composição farmacêutica compreendendo um composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, ou um seu complexo junto com um ou mais carreadores ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis dele. Tais composições podem ser fabricadas de maneira convencional e podem ser apresentadas, por exemplo, para imagem, na forma de um estojo compreendendo duas dosagens separadas, uma sendo o radionuclídeo e a outra o composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, Composto B conjugado, com instruções para sua mistura. Para radioterapia, o composto conjugado da Fórmula III, por exemplo, composto B conjugado, na forma complexada pode estar de preferência na forma de uma formulação líquida quente.

[00144] Um composto da Fórmula III opcionalmente conjugado, por exemplo, Composto B ou um Composto B conjugado, na forma complexada, pode ser administrado como o ingrediente ativo único ou em conjunto com, por exemplo, como um adjuvante, outras drogas. Por exemplo, um composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B, pode ser usado em combinação com um agente imunossupressor, por exemplo, um inibidor de calcineurina, por exemplo, ciclosporina A, Isa Tx247 ou FK 506; um inibidor de mTOR, por exemplo, rapamicina, CCI779, ABT578 ou 40-O-(2-hidroxietil)-rapamicina; uma ascomicina apresentando propriedades imunossupressoras, por exemplo, ABT-281, ASM981, etc; corticosteróides; ciclofosfamida; azatiopreno; meto-trexato; leflunomida; mizoribina; ácido micofenólico ou um seu sal, por exemplo, Myfortic®; mofetil micofenolato; 15-desoxiespergualina ou um homólogo imunossupressor, seu análogo ou derivado; um agonista de receptor de S1P, por exemplo, FTY720; anticorpos monoclonais imu-nossupressores, por exemplo, anticorpos monoclonais para receptores de leucócito, por exemplo, MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD8, CD25, CD28, CD40, CD45, CD58, CD80, CD86 ou seus ligantes; outros compostos imunomoduladores, por exemplo, uma molécula de ligação recombinante apresentando pelo menos uma porção do domínio ex-tracelular de CTLA4 ou um seu mutante, por exemplo, uma pelo menos porção extracelular de CTI_A4 ou um seu mutante unido a uma sequência de proteína não-CTI_A4, por exemplo, CTLA4lg (por exemplo, ATCC 68629) ou um seu mutante, por exemplo, LEA29Y; inibidores de molécula de adesão, por exemplo, antagonistas de LFA-1, antagonistas de ICAM-1 ou -3, antagonistas de VCAM-4 ou antagonistas de VLA-4. Um composto da Fórmula III, por exemplo, Composto B, pode ser também usado em combinação com um agente antiinflamató-rio, um agente de modulação de receptor de secretagogo de GH, por exemplo, grelina ou hexarelina, um antagonista de receptor de GH, por exemplo, pegvisomant.

[00145] Um composto da Fórmula III opcionalmente conjugado, por exemplo, Composto B ou um Composto B conjugado, em forma com-plexada pode ser também usado em combinação com um agente anti-proliferativo, por exemplo, droga quimioterapêutica, por exemplo, paclitaxel, gemcitabina, cisplatina, doxorrubicina, 5-fluoruracila ou taxol, um agente hormonal ou antagonista, por exemplo, um antiandrogênio ou um mitoxantrona (especialmente no caso de câncer de próstata), ou um antiestrogênio, tal como letrozol (especialmente no caso de câncer de mama), um antimetabólito, um alcalóide de planta, um modificador de resposta biológico, de preferência uma linfocina ou interferons, um inibidor de proteína tirosina cinase e/ou serina/treonina cinase, ou um agente com um outro mecanismo de ação ou um desconhecido, por exemplo, qualquer epotilona ou derivado de epotilona, ou um inibidor de mTOR, por exemplo, conforme acima indicado.

[00146] Onde um composto da Fórmula III opcionalmente conjugado, por exemplo, Composto B ou um Composto B conjugado, na forma complexada for administrado em conjunto com uma outra droga, as dosagens da droga co-administrada vão com certeza depender do tipo de co-droga empregada, da droga específica usada, da condição a ser tratada e assim por diante. O termo "co-administração" ou "administração combinada" ou similar conforme aqui usado pretende compreender administração dos agentes terapêuticos selecionados a um único paciente, e pretendem incluir regimes de tratamento onde os agentes não são necessariamente administrados através da mesma via de administração ou ao mesmo tempo.

[00147] De acordo com o acima, a presente invenção provê ainda em um aspecto adicional: [00148] 9. Uma combinação farmacêutica compreendendo a) um primeiro agente que é um composto da Fórmula III opcionalmente conjugado, por exemplo, Composto B ou um Composto B conjugado, em forma complexada e b) um co-agente, por exemplo, conforme acima definido.

[00149] 10. Um método conforme acima definido compreendendo co-administração, por exemplo, concomitantemente ou em sequência, de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula III opcionalmente conjugado, por exemplo, Composto B ou um Composto B conjugado em forma complexada, e uma segunda substância de droga, a dita segunda substância de droga sendo, por exemplo, conforme acima indicado.

REIVINDICAÇÕES

Claims

1. Composição farmacêutica para administração parenteral, caracterizada pelo fato de que compreende um análogo de somatosta-tina compreendendo a sequência de aminoácido da Fórmula I -(D/L)Trp-LYs-Xi -X2 - na qual Xi é um radical da Fórmula (a) ou (b) nas quais Ri é fenila opcionalmente substituída, R2 é -Zi-CH2-Ri, -CH2-CO-O-CH2-Ri, nas quais Z1 é O ou S, e X2 é um α-aminoácido apresentando um resíduo aromático na cadeia lateral Ca, ou uma unidade de aminoácido selecionada dentre Dab, Dpr, Dpm, His, (Bzl)HyPro, tienil-Ala, ciclohexil-Ala e t-butil-Ala, o resíduo Lys da dita sequência correspondendo ao resíduo Lys9 da somatostatina-14 nativa, na forma livre, na forma de sal ou na forma protegida, e ácido tartárico.

2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o análogo de somatostatina é um composto da Fórmula II na qual a configuração em C-2 é (R) ou (S) ou uma mistura deles, e R é NRiR2-C2-6alquileno ou guanidina-C2-6alquileno, e cada um de Ri e R2 é independentemente H ou Ci-4alquila, na forma livre, forma de sal ou forma protegida.

3. Composição, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que o análogo de somatostatina é ciclo[{4-(NH2-C2H4-NH-CO-O-)Pro}-Phg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)-Phe] (Composto A), sendo que Phg significa -HN-CH(C6H5)-CO- e Bzl significa benzila.

4. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que o análogo de somatostatina está na forma de di-sal de aspartato.

5. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que é ajustada para um pH de 4 a 4,5.

6. Composição, de acordo com a reivindicação 5, caracterizada pelo fato de que é tomponada por um tampão de acetato/ácido acético, lactato/ácido acético ou Glicina/HCI.

7. Uso de uma composição farmacêutica, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é para preparação de um medicamento para acromegalia ou câncer.

8. Uso de uma composição farmacêutica, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é para preparação de um medicamento para Doença de Cushing.