MXPA05013821A

MXPA05013821A - Composicion farmaceutica que comprende analogos de somatostatina ciclicos.

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Publication number: MXPA05013821A
Application number: MXPA05013821A
Authority: MX
Inventors: Katrin Moser
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2003-06-24
Filing date: 2004-06-23
Publication date: 2006-02-28
Also published as: IL172329A0; SI1648934T1; HRP20090571T1; AR044852A1; BRPI0411820B8; ATE438659T1; HK1089776A1; EP1648934A2; EP1648934B1; KR20060030052A; US8299209B2; PL1648934T3; RU2355418C2; NZ544157A; MY145375A; NO20060375L; BRPI0411820A; WO2005000893A2; IL172329A; US20090137462A1

Abstract

La presente invencion describe composiciones farmaceuticas parenterales que comprenden un analogo de somatostatina, y analogos de somatostatina novedosos.

Description

COMPOSICIÓN FARMACÉUTICA QUE COMPRENDE ANÁLOGOS DE SOMATOSTATINA CÍCLICOS La presente invención se refiere a composiciones farmacéuticas parenterales que comprenden un análogo de somatostatina, y a análogos de somatostatina novedosos. La somatostatina es un tetradecapéptido que tiene la estructu ra : H-AJa-GJy-Cys-Lys-Asn-Phe-Pbe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH 1 2 3 4 S 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Debido al aislamiento y a la caracterización de la somatostatina, ha continuado una extensa búsqueda de análogos más potentes y más estables. Los análogos de somatostatina se han descrito, por ejemplo, en la Publicación Internacional Número WO 97/01579. Estos análogos de somatostatina comprenden la secuencia de aminoácidos de la Fórmula I: -(D/DTrp-Lys-Xí-Xa- en donde Xi es un radical de la Fórmula (a) ó (b): — NH — ¡ — CO— — NH — j — CO— -O-CH^ (a) C¾ (b) CH. en donde R¾ es fenilo opcionalmente sustituido, R2 es -Z!-CHa-Ri, -CH2-CO-0-CH2-R 1 ¦ en donde Z, es O ó S, y es un a-aminoácido que tiene un residuo aromático sobre la cadena lateral CQ, o una unidad de aminoácido seleccionada a partir de Dab, Dpr, Dpm, His, (Bzl)HyPro, t i e n i I - A i a , ci c I o h exi I - Al a , y terbutil-Ala, correspondiendo el residuo Lys de esta secuencia al residuo Lys9 de la somatostatina-14 nativa. Análogo de somatostatina, como se utiliza en la presente, significa un péptido de cadena recta o cíclico derivado a partir de aquél de la somatostatina-14 que se presenta naturalmente, que comprende la secuencia de la Fórmula I, y en donde adicionalmente se han omitido y/o se han reemplazado una o más unidades de aminoácidos, por uno o más radicales de aminoácidos diferentes, y/o en donde uno o más grupos funcionales han sido reemplazados por uno o más grupos funcionales diferentes, y/o uno o más grupos han sido reemplazados por uno o varios grupos isoestéricos diferentes. En general, el término cubre todos los derivados modificados de la somatostatina-14 nativa, que comprende la secuencia de la Fórmula I anterior, que tienen afinidad de enlace en el intervalo de nM con cuando menos un subtipo de receptor de somatostatina, como se define posteriormente en la presente. Se prefieren los análogos de somatostatina en donde los residuos en las posiciones 8 a 11 de la somatostatina-14 están representados por la secuencia de la Fórmula I como se define anteriormente. Se prefieren más los análogos de somatostatina como se dan a conocer anteriormente, que comprenden una unidad de hexapéptido, comprendiendo los residuos en las posiciones 3 a 6 de esta unidad de hexapéptido a la secuencia de la Fórmula I. Todavía de una manera más preferible, los residuos en las posiciones 1 y 2 de la unidad de hexapéptido del hexapéptido de somatostatina pueden ser cualesquiera de aquéllos conocidos en la materia, por ejemplo como son dados a conocer por A. S. Dutta en Small Peptides, Volumen 19, 292-354, Elsevier, 1993, o como sustituyentes para Phe6 y/o Phe7 de la somatostatina-14. Todavía se prefieren más los hexapéptidos de somatostatina cíclicos, por ejemplo los hexapéptidos de somatostatina cíclicos que comprenden una unidad de hexapéptido numerada de 1 a 6, teniendo los residuos en las posiciones 3 a 6 de la unidad de hexapéptido, la secuencia de aminoácidos de la Fórmula I como se indica anteriormente, por ejemplo un compuesto de la Fórmula la: ciclotA-ZZa-iD/LJTrp-Lys-X!-Xa] I 1 2 3 4 5 6 en donde X-i y X2 son como se definen anteriormente, A es un residuo divalente seleccionado a partir de Pro, (Ra-NH-CO-OJPro-, F¼-*}-R7-Rro-f HO-RrPra-, \ Re x en donde R3 es NR8R9-alquileno de 2 a 6 átomos de carbono, guanidino-alquileno de 2 a 6 átomos de carbono, o alquileno de 2 a 6 átomos de carbono-COOH; R3a es H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, o tiene independientemente uno de los significados dados para R3; R3b es H ó alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; Ra es OH ó NR5R6; Rb es -CH(CH3)-; R4 es H ó CH3; R4a es bencilo opcionalmente sustituido en el anillo; cada uno de R5 y R6 es independientemente H , alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, ?-amino-alquileno de 1 a 4 átomos de carbono, ?-hidroxi-alquileno de 1 a 4 átomos de carbono, ó acilo; R7 es un enlace directo o alquileno de 1 a 6 átomos de carbono, cada uno de R8 y Rg es independientemente H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, ?-hidroxi-alq uileno de 2 a 4 átomos de carbono, acilo, ó CH2OH-(CHOH)c-CH2-, en donde c es 0, 1, 2, 3, ó 4; ó R8 y R9 forman, junto con el átomo de nitrógeno con el que están unidos, un grupo heterocíclico que puede comprender un heteroátomo adicional; y R-n es bencilo opcionalmente sustituido en el anillo, -(CH2)i-3-OH, CH3-CH(OH)-, ó -( CH2)i -5-N R5R6, y ZZa es una unidad de ct-aminoácido natural o no natural. Se prefieren en particular los compuestos de la Fórmula: en donde la configuración en C-2 es (R) ó (S), o una mezcla de las mismas, y en donde R es NR R2-alquileno de 2 a 6 átomos de carbono, o guanidina-alquileno de 2 a 6 átomos de carbono, y cada uno de R1 y R2 es independientemente H o alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, en forma libre, en forma de sal, o en forma protegida.

De preferencia, R es NRi R2-alquileno de 2 a 6 átomos de carbono. Los compuestos preferidos de la Fórmula II son los compuestos en donde R es 2-amino-etiIo, es decir, ciclo[{4-(NH2-C2H4-NH-CO-0-)Pro}-Phg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)-Phe] (referido en la presente como el Compuesto A) y ciclo[{4-(NH2-C2H4-NH-CO-0-)Pro}-DPhg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)-Phe], en forma libre, en forma de sal, o en forma protegida. Phg significa -HN-CH(C6H5)-CO-, y Bzl significa bencilo. Estos compuestos en forma libre, en forma de sal, o en forma protegida, son referidos posteriormente en la presente como los "compuestos de la invención". Debido a la degradación proteolítica de los análogos de somatostatina de la presente invención, es altamente deseable el suministro sistémico, por ejemplo la administración parenteral. Sin embargo, la administración parenteral puede ser muy dolorosa en el sitio de la administración, en especial en la administración repetida. Ahora se ha encontrado que las composiciones parenterales que comprenden un compuesto de la invención y ácido tartárico, muestran propiedades particularmente interesantes, por ejemplo una buena to I e ra b i I i d a d y una alta estabilidad. Un compuesto de la invención en forma protegida corresponde a un análogo de somatostatina, en donde cuando menos uno de los grupos amino está protegido, y que, mediante desprotección, conduce a un compuesto de la Fórmula II, de preferencia fisiológicamente removible. Los grupos protectores de amino adecuados son, por ejemplo, como se dan a conocer en "Protective Groups in Organic Synthesis", T. W . Greene, J. Wiley & Sons N Y (1981), 219-287, incorporándose su contenido a la presente como referencia. Un ejemplo de este grupo protector de amino es el acetilo. Un compuesto de la invención puede existir, por ejemplo, en forma libre o de sal. Las sales incluyen a las sales de adición de ácido, por ejemplo con ácidos inorgánicos, ácidos poliméricos, o ácidos orgánicos, por ejemplo con ácido clorhídrico, ácido acético, ácido láctico, ácido aspártico, ácido benzoico, ácido succínico, o ácido pamoico. Las sales de adición de ácido pueden existir como sales mono- ó di-valentes, por ejemplo dependiendo de si se agregan 1 ó 2 equivalentes de ácido. Las sales preferidas son las sales de lactato, aspartato, benzoato, succinato, y pamoato, incluyendo mono- y di-sales, más preferiblemente la di-sal de aspartato y la mono-sal de pamoato. Los compuestos de la invención se pueden preparar de acuerdo con los métodos convencionales. En un primer aspecto, la presente invención proporciona una composición parenteral que comprende un compuesto de la invención y ácido tartárico.

De conformidad con la invención, típicamente la concentración del compuesto de la invención en la composición de la invención es de aproximadamente 0.05 a aproximadamente 1 miligramo por mililitro de composición, en particular de 0.1 a 1 miligramo/mililitro. De una manera conveniente, la proporción del compuesto de la invención (cantidad correspondiente a la forma libre) al ácido tartárico es de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 2 por peso en peso, de preferencia de aproximadamente 0.05 a aproximadamente 0.6. La cantidad del compuesto de la invención en la composición de la invención es de aproximadamente el 0.005 por ciento a aproximadamente el 0.1 por ciento, basándose en el peso total de la formulación. De preferencia, el ácido tartárico está en una forma cristalina fina. De una manera más preferible, se utiliza ácido tartárico D(-)- ó L( + ) cristalino. La cantidad de ácido tartárico es de preferencia de aproximadamente el 0.01 por ciento a aproximadamente el 1.5 por ciento en peso/peso de la formulación, de preferencia de aproximadamente el 0.01 por ciento a aproximadamente el 0.3 por ciento, más preferiblemente de aproximadamente el 0.15 por ciento. De preferencia, la molaridad del ácido tartárico en la composición final es de aproximadamente 10 m M . De acuerdo con la presente invención, en adición al ácido tartárico y un compuesto de la invención, la composición farmacéutica de preferencia comprende también un componente básico seleccionado y agregado a la composición de tal manera que el pH de la composición farmacéutica regulada con ácido tartárico se ajuste a un pH de aproximadamente 4 a aproximadamente 4.5, de preferencia de aproximadamente 4.2. De una manera preferible, el componente básico es una base, por ejemplo hidróxido de sodio o hidróxido de potasio, o una sal básica, por ejemplo carbonato ácido de sodio, carbonato de sodio, carbonato ácido de potasio, o carbonato de potasio. De preferencia, el componente básico se agrega en una cantidad tal que la composición farmacéutica resultante tenga un pH regulado como se indica anteriormente. Preferiblemente, la composición farmacéutica de la invención se basa en agua. Las composiciones de la invención pueden comprender adicionalmente un agente de tonicidad, tal como manitol, cloruro de sodio, glucosa, dextrosa, sacarosa, o glicerinas. De preferencia, el agente de tonicidad es manitol. La cantidad del agente de tonicidad se selecciona para ajustar la isotonicidad de la composición de la invención, por ejemplo el manitol puede ser de preferencia de aproximadamente el 1 por ciento a aproximadamente el 5 por ciento en peso de la composición, de preferencia aproximadamente el 4.95 por ciento. De una manera conveniente, el manitol está presente en una proporción del manitol al ácido tartárico de aproximadamente 20 a 5 aproximadamente 40, de preferencia de aproximadamente 33. Las composiciones de la invención pueden contener excipientes convencionales comúnmente empleados en las composiciones parenterales, con el objeto de proporcionar la estabilidad y eficacia terapéutica requeridas. Los excipientes 2Q pueden incluir, por ejemplo, un antioxidante o un agente conservador. Los antioxidantes se pueden emplear para proteger al agente activo de la degradación oxidativa, en particular bajo condiciones aceleradas de esterilización térmica. Los 15 antioxidantes se pueden seleccionar a partir de cualquiera de los compuestos conocidos en la materia. De una manera similar, la cantidad de antioxidante empleada se puede determinar empleando experimentación de rutina. De preferencia, las composiciones de la invención no contienen 2o un antioxidante. De una manera preferible, se puede agregar a la composición un agente conservador, por ejemplo fenol, cuando se formule como frascos de múltiples dosis, cartuchos, o jeringas. De preferencia, las composiciones de „ la invención no contienen un agente conservador.

Se hace referencia a la extensa literatura sobre la materia para estos y otros excipientes y procedimientos mencionados en la presente, ver en particular Handbook of P h a rm a ce u t i ca I Excipients, Segunda Edición, editado por Ainley Wade y Paul J. Weller, American Pharmaceutical Association, Washington, EUA, y Pharmaceutical Press, Londres; y Lexikon der Hilfsstoffe für Pharmazie, Kosmetik and angrenzende Gebiete, editado por H.P. Fiedler, 4a Edición, Editio Cantor, Aulendorf, y las ediciones anteriores, las cuales se incorporan a la presente como referencia. De preferencia, la composición de la invención contiene, como ingrediente activo, solamente el compuesto de la invención, por ejemplo un compuesto de la Fórmula II, por ejemplo el Compuesto A. Los procedimientos que se pueden emplear para preparar las composiciones de la invención pueden ser los convencionales o los conocidos en la técnica, o se pueden basar en tales procedimientos, por ejemplo los descritos en L. Lachman y colaboradores, The Theory and Practice of Industrial Pharmacy, 3a Edición, 1986, H. Sucker y colaboradores, Pharmazeutische Technologie, Thieme, 1991, Hager's Handbuch der pharmazeutischen Praxis, 4a Edición (Springer Verlag, 1971) y Remington's Pharmaceutical Sciences, 13a Edición, (Mack Publ., Co., 1970), o las ediciones posteriores.

Típicamente, el compuesto de la invención, el ácido tartárico, y o p c i o n a I m e n te los otros ingredientes mencionados en la cantidad deseada, se disuelven en un solvente acgoso, de preferencia en agua para inyecciones, y se ajusta el pH con la base. La solución resultante se puede diluir entonces con agua para reconstituirla hasta el volumen final deseado. La solución resultante se puede filtrar a través de un filtro estéril, por ejemplo un filtro Millipak®. De preferencia, durante la preparación anterior, el oxígeno (aire) es desplazado del contacto con la solución del compuesto de la invención. Esto normalmente se lleva a cabo purgando, por ejemplo con nitrógeno, un recipiente que contenga a la solución. La composición farmacéutica se puede empacar bajo dióxido de carbono u otro gas inerte para prevenir la degradación, de preferencia bajo dióxido de carbono, por ejemplo cargado en los frascos, por ejemplo frascos de vidrio, ampolletas, por ejemplo ampolletas de vidrio, o jeringas, por ejemplo jeringas previamente llenadas, y se esterilizan con vapor o con calor. La solución se puede secar por congelación mediante un método convencional bajo condiciones asépticas para dar un polvo para inyección, el cual se puede utilizar para reconstituir la solución deseada para administración parenteral poco antes de su administración, mediante la mezcla del polvo con la cantidad deseada de solvente, por ejemplo con agua para inyecciones. De una manera alternativa, la presente invención proporciona, en otro aspecto, una composición para administración parenteral regulada a un pH 4 a aproximadamente 4.5, de preferencia a aproximadamente 4.2, y comprendiendo, como ingrediente acti o, al Compuesto A o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, por ejemplo un lactato, mono- ó di-aspartato, succinato, de preferencia una di-sal de aspartato. Estas composiciones pueden comprender a los mismos componentes que se describen anteriormente para las com osiciones que comprenden ácido tartárico, en donde el ácido tartárico/tartrato es reemplazado por otro regulador, tal como acetato/ácido acético, lactato/ácido láctico, y glicina/HCI. Las composiciones de la invención son útiles: a) para la prevención o el tratamiento de trastornos con una etiología que comprenda o que esté asociada con un exceso de secreción de GH y/o un exceso de IGF-1 , por ejemplo en el tratamiento de acromegalia, así como en el tratamiento de diabetes mellitus tipo I ó tipo II, en especial complicaciones de la misma, por ejemplo angiopatía, retinopatía proliferativa diabética, edema macular diabético, nefropatía, neuropatía y fenómeno del amanecer, y otros trastornos metabólicos relacionados con la liberación de insulina o glucagon, por ejemplo obesidad, por ejemplo obesidad patológica u obesidad hipotalámica o hiperinsulinémica, b) en el tratamiento de fístula enterocutánea y pancreaticocutánea, síndrome de intestino irritable, enfermedades inflamatorias, por ejemplo Enfermedad de Graves, enfermedad inflamatoria del intestino, psoriasis o artritis inf lamatoide, enfermedad de riñon policístico, síndrome de volteo, síndrome de diarrea acuosa, diarrea relacionada con SIDA, diarrea inducida por quimioterapia, pancreatitis aguda o crónica, y tumores secretores de hormonas gastrointestinales (por ejemplo, tumores GEP, por ejemplo vipomas, glucagonomas, insulinomas, carcinoides, y similares), malignidades de linfocitos, por ejemplo linfomas o leucemias, carcinoma hepatocel u lar, así como sangrado gastrointestinal, por ejemplo sangrado esofágico variceal. c) para la prevención o el tratamiento de angiogénesis , trastornos inflamatorios como se indican anteriormente, incluyendo enfermedades inflamatorias de los ojos, edema macular, por ejemplo edema macular cistoide, edema macular cistoide idiopático, degeneración macular exudativa relacionada con la edad, trastornos relacionados con neovascularización coroidal, y retinopatía proliferativa, d) para prevenir o combatir enfermedades de los vasos de injerto, por ejemplo vasculopatías de halo- ó xeno- trasplantes, por ejemplo ateroesclerosis de vasos de injerto, por ejemplo en un trasplante de órgano, por ejemplo en trasplantes de corazón, pulmón, corazón-pulmón combinados, hígado, riñon, o páncreas, o para prevenir o tratar estenosis de injerto de venas, restenosis, y/u oclusión vascular en seguida de lesión vascular, por ejemplo causada por procedimientos de cateterización o procedimientos de raspado vascular, tales como angioplastía transluminal percutánea, tratamiento con láser, u otros procedimientos invasivos que alteren la integridad de la íntima o el endotelio vascular, e) para el tratamiento de tumores que expresen o acumulen al receptor de somatostatina , tales como tumores de pituitaria, por ejemplo Enfermedad de Cushíng, tumores gastro-enteropancreáticos, carcinoides, del sistema nervioso central, de mama, prostéticos (incluyendo cáncer de próstata refractario a hormonas avanzado), de ovario, o colónicos, cáncer pulmonar de células pequeñas, obstrucción maligna del intestino, paragangliomas, cáncer de riñon, cáncer de pile, neuroblastomas, feocromocitomas, carcinomas de tiroides medulares, mielomas, linfomas, linfomas de Hodgkins y que no son de Hodgkins, tumores óseos y sus metástasis, así como trastornos autoinmunes o inflamatorios, por ejemplo artritis reumatoide, enfermedad de Graves, u otras enfermedades inflamatorias de los ojos.

De preferencia, las composiciones de la invención son útiles en el tratamiento de acromegalia y cáncer, por ejemplo Enfermedad de Cushing. La actividad y las características de las composiciones de la invención se pueden indicar en pruebas clínicas o animales convencionales. La dosificación apropiada de la composición de la invención, por supuesto, variará, por ejemplo, dependiendo de la condición que se vaya a tratar (por ejemplo, el tipo de enfermedad o la naturaleza de la resistencia), del fármaco utilizado, del efecto deseado, y del modo de administración. Cuando se da continuamente, se puede dar una cantidad efectiva del fármaco en dos o tres dosis extendidas a través del tiempo, tal como mediante administración parenteral, por ejemplo goteo intravenoso, inyecciones intramusculares o subcutáneas, o infusión subcutánea, por ejemplo infusión subcutánea continua, de preferencia inyección o infusión subcutánea, extendiéndose la dosis diaria total a través de la porción o de todo el período de administración. Cuando se da mediante inyección subcutánea, se administra más preferiblemente de tres veces por semana a tres veces al día, de preferencia dos veces por semana hasta una ó dos veces al día. Un compuesto de la invención también se puede administrar en la forma, por ejemplo, de una inyección de bolo subcutánea.

La composición de la invención de preferencia es adecuada para administración subcutánea. Después de la inyección, la composición de la invención es localmente bien tolerada. En particular, la administración parenteral de una composición de la invención, por ejemplo inyección subcutánea, conduce a una sensación de quemadura leve o ninguna en el sitio de la inyección . En adición a la buena tolerancia local después de la inyección, la composición de la invención exhibe buenas características de estabilidad. Por ejemplo, se encontró menos del 2.5 por ciento de productos de degradación después de cuatro semanas de almacenamiento a 60°C. Por ejemplo, si se almacena con protección de luz a 2°C-8°C, las composiciones de la invención son estables durante 24 meses. Se puede observar una estabilidad particularmente buena con la sal de di-aspartato del Compuesto A. En general, se obtienen resultados satisfactorios después de la administración, por ejemplo la administración subcutánea, en dosificaciones del orden de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 1.2 miligramos, de preferencia de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 0.6 miligramos del compuesto de la invención por inyección, o de aproximadamente 0.001 a aproximadamente 0.009 miligramos por kilogramo de peso corporal del animal al día, administrados una vez o en dosis divididas hasta cuatro veces al día. Por consiguiente, las dosificaciones diarias adecuadas para los pacientes son del orden de aproximadamente 0-1 miligramos a aproximadamente 0.6 miligramos de un compuesto de la invención, por ejemplo un compuesto de la Fórmula II, por ejemplo el Compuesto A. Los siguientes Ejemplos sirven para ilustrar las composiciones de la invención.

Ejemplos 1 a 7: Se disuelven ácido tartárico y manitol en agua para inyecciones, mientras que se purga la solución con nitrógeno. Luego se agrega la sal de di-aspartato del Compuesto A, la solución se ajusta con hidróxido de sodio a un pH de 4.20, y se agrega agua para inyecciones hasta 1.0 mililitros. Bajo condiciones asépticas, la solución se filtra a través de un filtro estéril Millipak-200® con un tamaño de poros de £.0.22 mieras, se rellena en ampolletas, y se esterilizan pasándolas por autoclave.

En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona compuestos novedosos de la Fórmula III: en donde R es N R-i R2-a I q u i I e n o de 2 a 6 átomos de carbono, o guanidina-alquileno de 2 a 6 átomos de carbono, y cada uno de R-, y R2 es independientemente H ó alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, en forma libre, en forma de sal o en forma de complejo, o en forma protegida. De preferencia, R es N R , R2- a l q u i I e n o de 2 a 6 átomos de carbono. Un compuesto preferido de la Fórmula III es el compuesto en donde R es 2-amino-etilo, también denominado ciclo[{4-(NH2-C2H4-NH-CO-0-)Pro}-DPhg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)-Phe], y referido en la presente como el Compuesto B, en forma libre, en forma de sal o de complejo, o en forma protegida. Phg y Bzl son como se definen anteriormente. Estos compuestos en forma libre, en forma de sal, o en forma de complejo, o en forma protegida, son referidos posteriormente en la presente como los "compuestos novedosos de la invención". Un compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, en forma protegida, corresponde a la molécula anterior, en donde cuando menos uno de los grupos amino está protegido, y que, mediante desprotección, conduce a un compuesto de la Fórmula III, de preferencia fisiológicamente removibles. Los grupos protectores de amino adecuados son, por ejemplo, como se dan a conocer en "Protective Groups in Organic Synthesis", T. W. Greene, J. Wiley & Sons N Y (1981 ), 219-287, cuyo contenido se incorpora a la presente como referencia. Un ejemplo de este grupo protector de amino es el acetilo. Cuando un compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, existe en una forma de complejo, puede ser convenientemente un compuesto de la Fórmula III que lleve un grupo quelante sobre el grupo amino de la cadena lateral de Pro, y forma complejo con un elemento detectable o radioterapéutico. El Compuesto B que lleva un grupo quelante es referido en la presente como el Compuesto B conjugado. Los ejemplos de los grupos quelantes incluyen, por ejemplo, los derivados a partir de ácidos o anhídridos poli-amino-policarboxílicos, por ejemplo los derivados a partir de ligandos no cíclicos, por ejemplo ácido dietilen-triamina- penta-acético (DTPA), ácido etilengl¡col-0,0'-bis(2-amino-eti I )- N , N , N ' , N'-tetra-acético (EGTA), ácido N , N ' -b i s ( h id ro xi -bencil)-etilen-diamina-N,N'-diacético (HBED), y ácido trietilen-tetramina-hexa-acético (TTHA), aquéllos derivados a partir de DTPA sustituido, por ejemplo p-isotiocianato-bencil-DTPA, aquéllos derivados a partir de ligandos macrocíclicos , por ejemplo ácido 1,4,7,10-tetra-azaciclo-dodecano-N,N',N"-N'"-tetra-acético (DOTA), ácido 1 ,4,8, 11 -tetra-azaciclo-tetradecano-N,N',N",N"'-tetra-acético (TETA), ó ácido 1,4,7,10-tetra-azac¡clo-trídecano-N,N\N",N"'-tetra-acético (TITRA). El grupo quelante se puede unir directamente o a través de un espaciador al grupo amino de la cadena lateral de Pro. Los espaciadores adecuados incluyen aquéllos conocidos en este campo, por ejemplo como se dan a conocer en la Patente Británica Número GB-A-2,225,579, por ejemplo el residuo divalente de un amino-ácido carboxílico, por ejemplo ß-Ala, o un residuo divalente derivado a partir del ácido 6-am i no-cap ro ico. Los grupos quelantes preferidos son los derivados a partir de DTPA, DOTA, ó TETA. Los grupos quelantes derivados a partir de DTPA ó DOTA son los más preferidos. Un elemento detectable significa cualquier elemento, de preferencia un ion de metal, que exhiba una propiedad detectable en técnicas de diagnóstico in vivo, por ejemplo un ion de metal que emita una radiación detectable, o un ion de metal que sea capaz de tener influencia sobre las propiedades de relajación de la resonancia magnética 5 nuclear. Un elemento radioterapéutico significa cualquier elemento que emita una radiación que tenga un efecto benéfico sobre las condiciones que se vayan a tratar. Los elementos adecuados incluyen, por ejemplo, los elementos pesados o los iones de tierras raras, por ejemplo Q como se utilizan en la exploración de CAT (Tomografía Axial por Computadora), iones paramagnéticos, por ejemplo Gd + , Fe3+, Mn2+, y Cr2+, iones de metales fluorescentes, por ejemplo Eu3+, y radionúclidos, por ejemplo un radiolantánido, en particular un radionúclido emisor de ?, un radionúclido 5 emisor de ß, un radionúclido emisor de a, un radionúclido emisor de Auger-e, ó un radionúclido emisor de positrones, por ejemplo 68Ga, 18F, ó 86Y. Los radionúclidos emisores de ? adecuados incluyen aquéllos que son útiles en las técnicas de 0 diagnóstico. Los radionúclidos emisores de ? convenientemente tienen una vida media desde 1 hora hasta 40 días, de preferencia desde 5 horas hasta 4 días, más preferiblemente desde 12 horas hasta 3 días. Los ejemplos son los radioisótopos de Galio, Indio, Tecnecio, Iter io, s Renio, Terbio, Lutecio, Talio, y Samario, por ejemplo 87Ga, 11??, 99mTc, 161Tb, 169Yb, 186Re ó 177Lu. Los radionúclidos emisores de ß adecuados incluyen aquéllos que son útiles en las aplicaciones radioterapéuticas, por ejemplo 90Y, 67Cu, 186Re, 188Re, 169Er, 121Sn, 27Te, 177Lu, 143Pr, 196Au, 0SPd, 165Dy, 14 Pr, ó 153Sm. Los radionúclidos emisores de a adecuados son aquéllos que se utilizan en tratamientos terapéuticos, por ejemplo 2 1At, 212Bi, ó 201T¡. Los compuestos de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, pueden existir, por ejemplo, en forma libre o de sal. Las sales incluyen las sales de adición de ácido, por ejemplo, con ácidos inorgánicos, ácidos poliméricos, o ácidos orgánicos, por ejemplo con ácido clorhídrico, ácido acético, ácido láctico, ácido aspártico, ácido benzoico, ácido succínico, o ácido pamoico. Las sales de adición de ácido pueden existir como sales mono- ó di-valentes, por ejemplo dependiendo de si se agregan uno o dos equivalentes de ácido al Compuesto B en forma de base libre. Las sales preferidas son las sales de lactato, aspartato, benzoato, succinato, y pamoato, incluyendo las mono- y di-sales, más preferiblemente la di-sal de aspartato y la mono-sal de pamoato. Los compuestos conjugados de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, pueden existir adicionalmente en forma de sales que se pueden obtener con los grupos de ácido carboxílico cuando estén presentes en el grupo quelante, por ejemplo sales de metales alcalinos, tales como sodio o potasio, o sales de amonio sustituido o insustituido. La presente invención también incluye un proceso para la producción de un compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B. Se puede producir en analogía a los métodos conocidos, por ejemplo: a) ciclar un péptido lineal en forma protegida, enlazada con polímero, o no protegida, de tal manera que se obtenga un compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, y luego remover opcionalmente los grupos protectores, b) para producir un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, enlazar entre sí un grupo quelante y el compuesto de la Fórmula 111, por ejemplo el Compuesto B, en forma protegida o no protegida, y luego remover opcionalmente el grupo protector, y recuperar el compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, o un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado así obtenido, en forma libre, en forma de sal, o formando complejo opcionalmente con un elemento detectable o radioterapéutico. En general, no es crítico cuál aminoácido se seleccione para estar en la posición C-terminal para iniciar la cadena peptídica, debido a que el péptido lineal se ciclará, en el entendido solamente de que la secuencia de aminoácidos en el péptido linea) corresponda a aquélla en el compuesto deseado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B. Sin embargo, puede haber otros factores que puedan preferir un aminoácido inicial sobre otro. Cuando se prepara un compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, mediante síntesis en fase sólida, el primer aminoácido de preferencia se une a la resina, por ejemplo una resina basada en poliestireno comercialmente disponible, a través de un enlazador adecuado, por ejemplo un enlazador que sea disociable bajo condiciones ligeras, para mantener intacta la protección de la cadena lateral, por ejemplo SASRIN o un enlazador basado en tritilo opcionalmente sustituido, por ejemplo ácido 4-(hidroxi-difenil-metil)-benzoico, en donde uno de los grupos fenilo puede estar opcionalmente sustituido, por ejemplo por Cl. La construcción de la cadena peptídica deseada se puede efectuar de una manera convencional, por ejemplo utilizando unidades de aminoácidos, en donde el grupo amino terminal sea protegido por Fmoc, estando los grupos amino de la cadena lateral, cuando estén presentes, protegidos con un grupo protector de amino diferente, por ejemplo Boc ó CBO. De preferencia el péptido lineal se cicla de tal manera que se produzca un enlace entre Tyr(4-Bzl)-0H y Phe, por ejemplo Phe-{4-(NHR1-C2H4-NH-CO-0-)Pro}-DPhg-DTrp(R2)-Lys(£-NHR3)-Tyr(4-Bzl)-OH ó u derivado funcional del mismo, en donde cada uno de R-i , R2, y 3 es un grupo protector de amino. El paso de ciclación a) se puede llevar a cabo convenientemente de acuerdo con el método conocido, por ejemplo mediante una azida, un éster activo, un anhídrido mixto, o una carbodi-imida. Posteriormente, se remueven los grupos protectores, por ejemplo mediante disociación, por ejemplo con ácido trifluoroacético, o mediante hidrogenación. La ciclación del péptido también se puede llevar a cabo directamente sobre el soporte sólido, estando el primer aminoácido en una forma protegida Na- y C-terminal, y unido a través de una cadena lateral, por ejemplo una función de e-amino Lys, o mediante anclaje de la estructura base. Entonces se sintetiza la secuencia lineal siguiendo los procedimientos convencionales de síntesis en fase sólida (SPPS). Después de la disociación de la protección C-terminal, se cicla el péptido, por ejemplo como se describe en lo anterior. Posteriormente, se disocia el péptido cíclico a partir de la resina, y se desprotege. Si se desea, la cadena lateral presente sobre Pro, se puede introducir en el aminoácido antes o después del paso de ciclación del péptido a). Por consiguiente, Pro como un aminoácido inicial o como un péptido lineal o cíclico inicial, en donde, en cada caso, Pro está sustituido en el anillo por OH, se puede convertir para proporcionar un compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, o la unidad Pro deseada, o el péptido lineal correspondiente, respectivamente, en donde Pro está sustituido por NHR La formación de complejo de un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, se puede llevar a cabo mediante la reacción del compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, con un elemento detectable o radioterapéutico correspondiente, produciendo un compuesto, por ejemplo una sal de metal, de preferencia una sal soluble en agua. La reacción se puede llevar a cabo en analogía con los métodos conocidos, por ejemplo como se da a conocer en Perrin, Organic Ligand, Chemical Data Series 22, NY Pergamon Press (1982); en Krejcarit y Tucker, Biophys. Biochem. Res. Com. 7J_:581 (1977), y en Wagner y Welch, J. Nucí. Med. 20_:428 (1979). Los siguientes ejemplos son ilustrativos de los compuestos novedosos de la invención de la Fórmula III. Todas las temperaturas están en °C.

Abreviaturas: AcOH = Ácido acético. Boc = Terbutoxi-carbonilo. Bzl = Bencilo. CBO = Carbobenzoxilo. DIPCI = N,N'-di-¡sopropil-carbodi-im¡da DIPEA - di-isopropil-etil-amina. DMF = Dimetil-formamida. DPPA = Difenil-fosforil-azida. Fmoc = Fluorenil-metoxi-carbonilo. HOBT = 1-hidroxi-benzotriazol. Osu = N- idroxi-succinimida. TFA = Ácido trifluoroacético. THF Tetrahidrofurano.

Ejemplo 8: Ciclo[{4-(NH2-C2H4-NH-CO-0-)Pro}-DPhg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)-Phe] a) Síntesis de Fmoc-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-Boc)-OH. Se hace reaccionar clorhidrato de metil-éster de L-hidroxi-prolina con Fmoc-Osu en carbonato de sodio 1.0 N acuoso/tetrahidrofurano, a temperatura ambiente. Después de que se termina la reacción, se aisla el Fmoc-Pro(4-OH)-OMe mediante precipitación. Luego se agrega por goteo Fmoc-Pro(4-OH)-OMe en una solución de trifosgeno (0.6 equivalentes) en tetrahidrofurano, para dar un intermediario de clorocarbonato. Después de 1 hora, se agregan dimetil-amino-piridina (1.0 equivalentes) y N-Boc-diamino-etano (6.0 equivalentes), y la reacción se agita a temperatura ambiente. Después de que se termina la reacción, se remueve el solvente al vacío, y se extrae el Fmoc-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-Boc)-OMe resultante a partir de un sistema de dos fases de acetato de etilo/HCl 0.1 M, para dar el producto crudo (MH + = 554), el cual se purifica mediante cristalización a partir de acetato de etilo. Entonces se disocia el metil-éster hasta el ácido libre mediante su tratamiento con NaOH 1N en d i oxa n o/a g u a , y se purifica el producto de Fmoc-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-Boc)-OH sobre gel de sílice, [(M + Na)] + = 562. b) H-Phe-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-Boc)-DPhg-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Tyr(Bzl)-OH. Se utiliza la resina de Fmoc-Tyr(Bzl)-0-CH2-Ph(3-OCH3)-0-CH2-poliestireno (resina-S AS Rl N , 2.4 mM) comercialmente disponible como material de partida, y se lleva a través de un protocolo convencional consistente en ciclos repetitivos de desprotección con Na (Piperidina/dimetil-formamida, 2:8), lavados repetidos con dimetil-formamida, y acoplamiento (DIPCI: 4.8 mM HOBT: 6 mM, DMF). Se acoplan en secuencia los siguientes derivados de aminoácidos: Fmoc-Lys(Boc)-OH , Fmoc-DTrp(Boc)-OH, Fmoc-DPhg-OH, Fmoc-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-Boc)-OH, Fmoc-Phe-OH. Se continúan los acoplamientos (2 equivalentes de aminoácidos) o se repiten hasta terminar, es decir, hasta que desaparezcan completamente los grupos amino residuales, lo cual se monitorea mediante una prueba de ninhidrina de "Kaiser" negativa. Antes de la disociación del péptido lineal protegido completamente ensamblado de su soporte de resina, se remueve la protección de ?a-Fmoc del último residuo. c) H-Phe-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH-Boc)-DPhg-DTrp(Boc)-Lys(Boc)-Tyr(Bzl)-OH. Después de los lavados con CH2CI2, la resina de péptido se transfiere a una columna o a un filtro de succión agitado, y se disocia el fragmento de péptido y se eluye con un corto tratamiento con TFA al 2 por ciento en CH2CI2 dentro de 1 hora. El eluato se neutraliza inmediatamente con una solución saturada de NaHC03. La solución orgánica se separa y se evapora, y se cicla el precursor protegido con la cadena lateral (MH÷ = 1366) sin mayor purificación. d) cicIo[-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH2)-DPhg-DTrp-Lys-Tyr(Bzl)-Phe-], trifluoroacetato. El fragmento lineal anterior se disuelve en dimetil-formamida (4 mM), se enfría hasta -5°C, y se trata con 2 equivalentes de DIPEA, y luego 1.5 equivalentes de DPPA, y se agita hasta terminar (aproximadamente 20 horas) a 0-4°C. El solvente se remueve casi completamente al vacío; el concentrado se diluye con acetato de etilo, se lava con NaHC03, agua, se seca, y se evapora al vacío. Para la desprotección, el residuo se disuelve a 0°C en TFA/H20, 95:5 (aproximadamente 50 mM), y se agita en frío durante 30 minutos. Luego se precipita el producto con éter conteniendo aproximadamente 10 equivalentes de HCI, se filtra, se lava con éter, y se seca. Con el objeto de descomponer completamente el ácido indol-N-carbamínico restante, el producto se disuelve en AcOH al 5 por ciento, y se liofiliza después de 15 horas a aproximadamente 5°C. Se lleva a cabo la RP-HPLC de preparación sobre una columna STAGROMA C-18 de 10 mieras (de 5 a 25 centímetros), utilizando un gradiente de TFA al 0.5 por ciento hasta TFA al 0.5 por ciento en acetonitrilo al 70 por ciento. Las fracciones que contienen al compuesto del título puro se combinan, se diluyen con agua, y se liofilizan. El liofilizado se disuelve en agua, seguido por precipitación con a2C03 al 10 por ciento en agua. La base libre sólida se filtra, se lava con agua, y se seca al vacío a temperatura ambiente. El polvo blanco resultante se utiliza directamente para las diferentes sales.

Ejemplo 9: Ciclo[{4-( H2-C2H4- H-CO-0-)Pro}-DPhg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)-Phe] en forma de sal. a. Acetato. La conversión hasta la forma de sal de acetato se lleva a cabo utilizando una resina de intercambio de iones (por ejemplo, AG 3-X4). S (ESI): m/z 524.5 [M + 2H]2*. [a]D20= -41.6°; c = 0.56; AcOH 95%; T = 20°C; 589.3 nm. b. As partato . La conversión hasta el mono- ó di-aspartato se obtiene mediante la reacción de 1 equivalente del compuesto del Ejemplo 8, con 1 ó 2 equivalentes de ácido aspártico en una mezcla de acetonitrilo/agua, 1 :3. La mezcla resultante se congela y se liofiliza. El di-aspartato también se puede obtener mediante la disolución del compuesto del Ejemplo 8 en agua/acetonitrilo, 4:1 , filtración, carga sobre una resina de intercambio de iones, por ejemplo, columna BioRad AG4X4, y elución con agua/acetonitrilo, 4:1. El eluato se concentra, se congela, y se liofiliza. c. Benzoato La conversión hasta el benzoato se puede obtener mediante la disolución del compuesto del Ejemplo 8 con 2 equivalentes de ácido benzoico en una mezcla de acetonitrilo/agua, 1:2. La mezcla resultante se congela y se I i o f i I i z a . d. Pamoato Un equivalente del compuesto del Ejemplo 8 se disuelve junto con un equivalente de ácido embónico en una mezcla de acetonitrilo/tetrahidrofurano/agua, 2:2:1. La mezcla resultante se congela y se liofiliza.

Ejemplo 10: Ciclo[{4-(DOTA-NH-C2H4-NH-CO-0-)Pro}-DPhg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)-Phe. a) ciclo[-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH2)-DPhg-DTrp-Lys(Cbo)-Tyr(Bzl)-Phe-], trifluoroacetato. El compuesto se sintetiza de la misma manera que el ciclo[-Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH2)-DPhg-DTrp-Lys(CBO)-Tyr( Bzl )-Phe-] , trifluoroacetato, mediante la utilización de Fmoc-Lys(Cbo)-OH en lugar de Fmoc-Lys(Boc)-OH . b) Se disuelven 400 miligramos de DOTA comercialmente disponible x 2H20 (SYMAFEX - Francia) en 20 mililitros de agua. Después de la adición de 20 mililitros de dimetil-formamida, se agregan 170 miligramos de ciclo[Pro(4-OCO-NH-CH2-CH2-NH2)-DPhg-DTrp-Lys(CBO)-Tyr(Bzl)-Prie-], junto con 190 miligramos de DCCI y 60 miligramos de N -hidroxi-succinimida. La suspensión resultante se mantiene a temperatura ambiente durante 72 horas. Después de la filtración, el solvente se remueve bajo presión reducida, y el crudo restante se purifica sobre gel de sílice (DCM/MeOH/HOAc50% 8/2/0.25 7/3/1 como una fase móvil), c) Para la d es p rotecci ó n del DOTA anterior, el conjugado se trata con 5 mililitros de ácido trifluoroacético/tioanisol (9/1) durante 2 horas a temperatura ambiente. Después de eso, la solución se vierte en una mezcla de 100 mililitros de dietil-éter + 5 mililitros de HCI 3N/dietil-éter, y el precipitado resultante se aisla mediante filtración. La purificación se lleva a cabo sobre gel de sílice utilizando DCM/MeOH/HOAc50% 7/4/2 7/5/4, como la fase móvil. Se obtiene un producto final analíticamente puro después de un paso de desalación utilizando un gradiente de ácido trifluoroacético al 0.1 por ciento hasta ácido trifluoroacético al 0.1 por ciento en CH3CN al 90 por ciento sobre una columna de RP18-HPLC (Spherisorb 250x4.6 milímetros). MH + : 1434.7. Los compuestos de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, en forma libre o en la forma de sales farmacéuticamente aceptables y complejos, exhiben valiosas propiedades farmacológicas, como se indica en las pruebas ¡n vltro e ¡n vivo, y por consiguiente, se indican para terapia. De una manera más particular, los compuestos de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, exhiben un perfil de enlace interesante para los receptores de somatostatina humana (hsst). Se han clonado y caracterizado 5 subtipos de receptor de somatostatina, sst1 , sst2, sst3, sst4, y sst5. Los hsstl , hsst2, y hsst3, y sus secuencias, han sido dados a conocer por Y. Yamada y colaboradores, en Proc. Nat. Acad. Sci., 89., 251-255 (1992). El hsst4 y su secuencia ha sido descrito por L. Rohrer y colaboradores, en Proc. Acad. Sci., 90, 4196-4200 (1993). El hsst5 y su secuencia han sido descritos por R. Panetta y colaboradores, en Mol. Pharmacol . 45, 417-427, 1993. Los ensayos de enlace se pueden llevar a cabo como se da a conocer más adelante en la presente, utilizando membranas de líneas celulares que expresen de una manera selectiva y estable los hsstl, hsst2, hsst3, hsst4, ó hsst5, por ejemplo células CHO ó COS. Se preparan membranas de acuerdo con los métodos conocidos, por ejemplo como es dado a conocer por C. Bruns y colaboradores en Biochem. J., 1990, 65., páginas 39-44. Las membranas preparadas a partir de las líneas celulares selectivas de hsst, por ejemplo células CHO ó COS que expresen establemente hsstl ó hsst2 ó hsst3 ó hsst4 ó hsst5 se incuban por triplicado en un volumen total de 300 microlitros a 22°C durante 30 minutos, con concentraciones crecientes de [125l-Tyr11]-SRIF-14 en 10 milimoles/litro de regulador Hepes (pH de 7.6) conteniendo albúmina de suero bovino al 0.5 por ciento. La incubación se termina mediante filtración rápida, y los filtros se cuentan en un contador. El enlace específico es el enlace total menos el enlace no específico en la presencia de 1 micromol/litro de somatostatina-14. Los experimentos se llevan a cabo por triplicado. La constante de afinidad (KD) y el número de sitios de enlace, se calculan utilizando estadísticas y programas gráficos apropiados. Los compuestos de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, no tienen una afinidad de enlace significativa en los ensayos de enlace anteriores hacia hsstl, hsst2, y hsst4, una baja afinidad de enlace hacia hsst3, y una buena afinidad de enlace hacia hsst5 expresada como un valor IC50 en el rango nanomolar (IC50 = concentración para la inhibición media-máxima en un ensayo de enlace competitivo utilizando [125 l-Ty r11 ]-S Rl F- 14 como el radioligando específico).

IC 50 Los compuestos de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, muestran una actividad inhibidora de la liberación de GH, como se indica por la inhibición de la liberación de GH in vitro a partir de células de pituitaria cultivadas. Por ejemplo, las glándulas de pituitaria anteriores de ratas machos adultas se cortan en pequeños pedazos, y se dispersan utilizando tripsina al 0.1 por ciento en regulador HEPES 20 mM. Las células dispersadas se cultivan durante 4 días en MEM (Gibco) complementado con suero fetal de becerro al 5 por ciento, suero de caballo al 5 por ciento, NaHC03 1 mM, dexametasona 2.5 nM, 2.5 miligramos/mililitro de insulina, y 20 unidades/mililitro de Pen/Strep. En el día del experimento, las células unidades se lavan dos veces con medio Krebs-Ringer regulado con HEPES 20 mM, y complementado con glucosa 5 mM y albúmina de suero bovino al 0.2 por ciento. Subsecuentemente, las células se incuban durante 3 horas con el Compuesto B en la presencia de factor de liberación de hormona de crecimiento 3 x 10"10 M. La cantidad de hormona de crecimiento liberada hacia el medio se mide mediante RIA. Los compuestos de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, inhiben la liberación de hormona del crecimiento (GH) en ratas. El Compuesto B se administra subcutáneamente a ratas anestesiadas. Se recolecta la sangre después de la decapitación 1 hora después de la administración del compuesto. La duración de acción se estima con base en la inhibición de la secreción de GH basal 6 horas después del tratamiento con el fármaco. Los niveles de hormonas se miden mediante RIA 1 hora y 6 horas después del tratamiento. El valor ID50 para la inhibición de la secreción de hormona se determina gráficamente (log-probit) para cada experimento, y los valores resultantes se promedian logarítmicamente. En este modelo in vivo, el Compuesto B inhibe la liberación de la hormona de crecimiento. Los compuestos de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, también son útiles en el tratamiento de tumores que sean positivos para el receptor de hsst3 y/o hsst5, como se indica en las pruebas de proliferación con diferentes líneas celulares de cáncer que llevan hsst3 y/o hsst5. Los compuestos de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, de conformidad con lo anterior, son útiles para la prevención o el tratamiento de trastornos con una etiología que comprenda o que esté asociada con la presencia o con la activación de hsst3 y/o hsst5, por ejemplo trastornos o enfermedades asociadas con un exceso de secreción de hormona de crecimiento, por ejemplo en el tratamiento de acromegalia, o para el tratamiento de enfermedades proliferativas de células malignas, por ejemplo tumores de cáncer que lleven hsst3 y/o hsst5, por ejemplo como se dan a conocer más adelante en la presente para el compuesto de conjugado en complejo. Para todas las indicaciones anteriores, la dosificación requerida, por supuesto, variará dependiendo, por ejemplo, del huésped, del modo de administración, y de la severidad de la condición que se vaya a tratar. Sin embargo, en general se obtienen resultados satisfactorios mediante la administración en el orden de 1 microgramo a 0.7 miligramos/kilogramo/día del compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B. Una dosificación diaria indicada para los pacientes está en el intervalo de aproximadamente 2 microgramos a aproximadamente 50 miligramos, de preferencia de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 40 miligramos, por ejemplo de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 3 miligramos subcutáneamente, del compuesto, convenientemente administrados en dosis divididas hasta tres veces al día, en una forma de dosificación unitaria que contenga, por ejemplo, de aproximadamente 0.5 microgramos a aproximadamente 25 miligramos, por ejemplo de aproximadamente 2 microgramos a 20 miligramos, por ejemplo de 2 microgramos a 1.5 miligramos del compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B . Los compuestos de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, se pueden administrar en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable o de complejos. Estas sales y complejos se pueden preparar de una manera convencional, y exhiben el mismo orden de actividad que el compuesto libre. La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, en forma de base libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable o en forma de complejo, junto con uno o más diluyentes o vehículos farmacéuticamente aceptables. Estas composiciones se pueden formular de una manera convencional. Los compuestos de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, también se pueden administrar en una forma de liberación sostenida, por ejemplo en la forma de implantes, microcápsulas, microesferas, o nanoesferas que comprendan, por ejemplo, un polímero o copolímero biodegradable, en la forma de una formulación liposomal, o en la forma de un autogel, por ejemplo una composición sólida o semi-sólida capaz de formar un gel después de su interacción con los fluidos corporales del paciente. Los compuestos de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, o una sal farmacéuticamente aceptable o complejo de los mismos, se pueden administrar por cualquier vía convencional, por ejemplo parenteralmente, por ejemplo en la forma de soluciones o suspensiones inyectables (incluyendo, por ejemplo, la forma de liberación sostenida indicada anteriormente), oralmente utilizando un mejorador de absorción convencional, en una forma nasal o de supositorio, o tópicamente, por ejemplo en la forma de un líquido oftálmico, un gel, un ungüento, o una preparación en suspensión, por ejemplo una formulación li pos o mal, en microesfera o nanoesfera, por ejemplo para instilación, o inyecciones subconjuntivas o intra- o peri-oculares.

De conformidad con lo anterior, la presente invención proporciona además: 1. un compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, o una sal farmacéuticamente aceptable o complejo del mismo, para utilizarse como un producto farmacéutico; 2. un método para prevenir o tratar enfermedades o trastornos como se Indican en la presente, en un sujeto que necesite dicho tratamiento, cuyo método comprende administrar a este sujeto una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, o una sal farmacéuticamente aceptable o complejo del mismo; o 3. un compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, o una sal farmacéuticamente aceptable o complejo del mismo, para utilizarse en la preparación de una composición farmacéutica para utilizarse en cualquier método como se define en 2 anterior. Un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es útil ya sea como un agente de formación de imágenes, por ejemplo de vi s u a I iza ci ó n de tejidos y células positivos para el receptor de hsst3 y/o hsst5, por ejemplo tumores y metástasis positivos para el receptor de hsst3 y/o hsst5, trastornos inflamatorios o autoinmunes que exhiban a los receptores de somatostatina, tuberculosis o rechazo de órgano después de trasplante, al formar complejo con un elemento detectable, por ejemplo un núclido emisor de ? ó de positrones, un ion de metal fluorescente, o un ion paramagnético, por ejemplo 111ln, 18 Tb, 177Lu, 86Y, 68Ga, Eu3 + , Gd3+, Fe3+, Mn2+, ó Cr2+, o como un producto radiofarmacéutico para el tratamiento in vivo de tumores y metástasis positivos para el receptor de hsst3 y/o hsst5, artritis reumatoide y condiciones de inflamación severas al formar complejo con un núclido emisor de a ó ß, o un núclido con cascadas de Auger-e", por ejemplo 90Y, 1 s Tb, 177Lu, 211At, 213BI, ó 20 TI, como se indica mediante las pruebas convencionales. En particular, se observa que el Compuesto A conjugado se enlaza con los receptores de somatostatina con valores p i de aproximadamente 8 a 10. El compuesto del Ejemplo 10, formando complejo, por ejemplo, con 111ln, 88Y, 90Y, ó 177Lu, se enlaza en el intervalo de n M con los subtipos sst respectivos, de acuerdo con el perfil de enlace del Compuesto B. La afinidad de un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, y sus complejos para los receptores de hsst3 y/o hsst5, también se puede demostrar mediante prueba in vivo, de acuerdo con los métodos de prueba convencionales, por ejemplo como se dan a conocer en la Patente Británica Número GB-A-2,225,579. Por ejemplo, el compuesto del Ejemplo 10 formando complejo, por ejemplo, con 111ln, 68Y, 90Y, ó 17,7Lu, da una acumulación de tumor significativa 4 horas después de su inyección en ratones o ratas que lleven un tumor pancreático exocrino que exprese a los receptores de hsst5. Después de la administración de un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, en una forma de complejo, por ejemplo radiomarcado con 111ln, 177Lu, 86Y, ó 181Tb, en una dosificación de 1 a 5 microgramos/kilogramo, marcado con 0.1 a 5 mCi de radionúclido, de preferencia de 0.1 a 2 mCi, el sitio del tumor se hace detectable. El compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, cuando se radiomarca con un radionúclido emisor de a ó ß, o un núclido con cascadas de Auger-e", exhibe un efecto antiproliferativo y/o citotóxico sobre las células tumorales que llevan receptores de hsst3 y/o hsst5, por ejemplo como se indica en pruebas con ratones sin pelo. Los ratones sin pelo se inoculan con células tumorales que llevan hsst5. Cuando los tumores han alcanzado un volumen de 1 a 2 centímetros cúbicos, los animales se seleccionan aleatoriamente en grupos de control y de tratamiento. Un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado en forma de complejo, se administra mediante inyecciones ¡ntraperitoneales o intravenosas. Se dan dosis de hasta 40 mCi/kilogramo por ratón. El tamaño de los tumores se determina con un calibre como se da a conocer anteriormente. Para los cálculos estadísticos, se aplica la prueba-T de Student. En esta prueba, se observa un encogimiento transitorio del tumor después de una semana, y se demora el crecimiento del tumor durante dos semanas con una sola aplicación del compuesto del Ejemplo 10 formando complejo con 90Y ó 77Lu. En contraste, los grupos de control mostraron un crecimiento tumoral continuo, duplicándose el volumen en un tiempo de aproximadamente 7 días.

De conformidad con lo anterior, en una serie de modalidades específicas o alternativas, la presente invención también proporciona: 4. el uso de un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, formando complejo con un elemento detectable para la detección ¡n vivo de células y tejidos positivos para hsst3 y/o hsst5, por ejemplo tumores y metástasis positivos para hsst3 ó hsst5, en un sujeto, y registrar la localización de los receptores dirigidos por este complejo; 5. un método para la detección ¡n vivo de tejidos y células positivos para hsst3 y/o hsst5, por ejemplo tumores y metástasis positivos para hsst3 ó hsst5, en un sujeto, el cual comprende administrar a este sujeto, un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, formando complejo con un elemento detectable, o una forma de sal farmacéuticamente aceptable, y registrar la localización de los receptores dirigidos por este complejo. El compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, en forma de complejo para utilizarse como un agente de formación de imágenes, se puede administrar, por ejemplo intravenosamente, por ejemplo en la forma de soluciones o suspensiones inyectables, de preferencia en la forma de una sola inyección. El radiomarcado de preferencia se puede llevar a cabo poco antes de administrarse a un sujeto. En los animales, un intervalo de dosificación indicado puede ser de 0.01 a 1 microgramo/kilogramo de un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, formando complejo con 0.02 a 0.5 mCi de radionúclido emisor de ?. En los mamíferos superiores, por ejemplo en los seres humanos, un intervalo de dosificación indicado puede ser de 1 a 100 microgramos/metro cuadrado de Compuesto B conjugado, formando complejo, por ejemplo, con 1 a 100 mCi/metro cuadrado de elemento detectable, por ejemplo 1 1ln, 86Y, ó 177Lu. 6. El uso de un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, formando complejo con un núclido emisor de a ó ß, o un núclido con cascadas de Auger-e", para el tratamiento ¡n vivo de tumores y metástasis positivos para hsst3 y/o hsst5. 7. Un método para el tratamiento in vivo de tumores y metástasis positivos para hsst3 y/o hsst5, por ejemplo para el tratamiento de invasividad de estos tumores, o de los síntomas asociados con este crecimiento tumoral, en un sujeto que necesite dicho tratamiento, el cual comprende administrar a este sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, formando complejo con un núclido emisor de a ó ß, o un núclido con cascadas de Auger-e". 8. El uso de un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un agente de formación de imágenes, o de una composición radiofarmacéutica. Las dosificaciones empleadas en la práctica del uso radioterapéutico de la presente invención, por supuesto, variarán dependiendo, por ejemplo, de la condición particular que se vaya a tratar, por ejemplo de la radiotoxicidad conocida para los órganos normales que expresen hsst5, del volumen del tumor, y de la terapia deseada. En general, la dosis se calcula con base en los datos farmacocinéticos y de distribución de radioactividad obtenidos en los órganos sanos, y basándose en la recuperación objetiva observada. Un complejo emisor de ß de un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, se puede administrar repetidamente, por ejemplo durante un período de 1 a 3 meses. En los animales, un intervalo de dosificación indicado puede ser de 20 a 100 microgramos/kilogramo de compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, formando complejo con 15 a 70 mCi de un núclido emisor de a ó ß, o un núclido con cascadas de Auger-e", por ejemplo 90Y, 77Lu, ó 16 Tb. En los mamíferos superiores, por ejemplo en los seres humanos, un intervalo de dosificación indicado puede ser de 1 a 100 m i ero g ra mo s/m e t ro cuadrado de compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, formando complejo, por ejemplo, con 1 a 100 mCi/metro cuadrado de un núclido emisor de a ó ß, o un núclido con cascadas de Auger-e", por ejemplo 90Y, 177Lu, ó 16 Tb.

Un compuesto conjugado de la Fórmula 111, por ejemplo el Compuesto B conjugado, en forma de complejo para utilizarse como un agente radioterapéutico, se puede administrar mediante cualquier vía convencional, por ejemplo intravenosamente, por ejemplo en la forma de soluciones inyectables. También se puede administrar convenientemente mediante infusión, por ejemplo una infusión durante 15 a 60 minutos. Dependiendo del sitio del tumor, se puede administrar tan cerca como sea posible del sitio del tumor, por ejemplo por medio de un catéter. La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B conjugado, en forma de base libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, o formando complejo con un agente detectable o radioterapéutico, junto con uno o más diluyentes o vehículos farmacéuticamente aceptables . Un compuesto de la Fórmula III, o un compuesto conjugado de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B o el Compuesto B conjugado, en forma de complejo, puede ser adecuado para tomar imágenes o para el tratamiento de la expresión o acumulación de hsst3 y/o hsst5, tal como de tumores de pituitaria, por ejemplo adenomas o prolactinomas , tumores gastro-enteropancreáticos, tumores carcinoides, del sistema nervioso central, de mama, prostáticos (incluyendo cáncer de próstata refractario a hormonas avanzado), de ovario, o colónicos, cáncer pulmonar de células pequeñas, obstrucción maligna del intestino, paragangliomas, cáncer de riñon, cáncer de piel, neuroblastomas, feocromocitomas, carcinomas de tiroides medulares, mielomas, linfomas, linfomas de Hodgkins y que no son de Hodgkins, tumores óseos y metástasis de los mismos, así como trastornos autoinmunes o inflamatorios, por ejemplo artritis reumatoide, enfermedad de Graves, u otras enfermedades inflamatorias de los ojos. De acuerdo con un aspecto adicional de la invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto conjugado de la Fórmula 111, por ejemplo el Compuesto B conjugado, o un complejo del mismo, junto con uno o más vehículos o diluyentes farmacéuticamente aceptables para el mismo. Estas composiciones se pueden fabricar de una manera convencional, y se pueden presentar, por ejemplo para la toma de imágenes, en la forma de un estuche que comprenda dos dosificaciones separadas, siendo una del ra d i o n ú el i d o , y la otra del compuesto de la Fórmula III conjugado, por ejemplo el Compuesto B conjugado, con instrucciones para mezclarlos. Para la radioterapia, el compuesto de la Fórmula III conjugado, por ejemplo el Compuesto B conjugado, en forma de complejo, de preferencia puede estar en la forma de una formulación líquida caliente. Un compuesto de la Fórmula III opcionalmente conjugado, por ejemplo el Compuesto B, o un Compuesto B conjugado, en forma de complejo, se puede administrar como el único ingrediente activo, o en conjunto con, por ejemplo como un adyuvante para, otros fármacos. Por ejemplo, un compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, se puede utilizar en combinación con un agente inmunosupresor, por ejemplo un inhibidor de calcineurina, por ejemplo ciclosporina A, Isa Tx247, ó FK 506; un inhibidor de mTOR, por ejemplo rapamicina, CCI779, ABT578, ó 40-O-(2-h¡droxi-etil)-rapamicina; una ascomicina que tenga propiedades inmunosupresoras, por ejemplo ABT-281, ASM981, etcétera; corticosteroides ; ciclofosfamida; azatiopreno; metotrexato; leflunomida; mizoribina; ácido micofenólico o una sal del mismo, por ejemplo Myfortic®; micofenolato-mofetil; 15-desoxi-espergualina o un homólogo inmunosupresor, análogo, o derivado de la misma; un agonista del receptor de S1P, por ejemplo FTY720; anticuerpos monoclonales inmuno-supresores, por ejemplo anticuerpos monoclonales para los receptores de leucocitos, por ejemplo MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD8, CD25, CD28, CD4Q, CD45, CD58, CD80, CD86 o sus ligandos; otros compuestos inmunomoduladores, por ejemplo una molécula de enlace recombinante que tenga cuando menos una porción de dominio extracelular de CTLA4 o un muíante del mismo, por ejemplo cuando menos una porción extraceluiar de CTLA4 o un muíante del mismo, unida a una secuencia de proíeína que no sea CTLA4, por ejemplo CLTA4lg (por ejemplo, designada como ATCC 68629), o un mulaníe de la misma, por ejemplo LEA29Y; inhibidores de moléculas de adhesión, por ejemplo antagonislas de LFA-1 , aníagonisías de ICAM-1 ó -3, antagonisías de VCAM-4, ó antagonisías de VLA-4. Un compuesto de la Fórmula III, por ejemplo el Compuesto B, íambién se puede utilizar en combinación con un ageníe aníi-inflamaíorio, un ageníe modulador del recepíor de secreíagogo de hormona de crecimienío, por ejemplo ghrelina o hexarelina, un aníagonista del receptor de hormona de crecimiento, por ejemplo pegvisomant. Un compuesto de la Fórmula III opcionalmente conjugado, por ejemplo el Compuesto B, o un Compuesto B conjugado, en forma de complejo, también se puede utilizar en combinación con un agente anti-proliferativo, por ejemplo un fármaco q u i m i o terapé ut ico , por ejemplo pacliíaxel, gemciíabina, cisplaíino, doxorrubicina, 5-fluorouracilo, o íaxol, un ageníe o anfagonisía hormonal, por ejemplo un anti-andrógeno, o mitoxantrona (especialmeníe en el caso de cáncer de próstata), o un anti-estrógeno, como letrozo) (especialmente en el caso de cáncer de mama), un anti-meíaboliío, un alcaloide de planta, un modificador de respuesta biológica, de preferencia una linfocina o i n te rf e ro n e s , un inhibidor de quinasa de proteína tirosina y/o de quinasa de serina/treonina, o un agente con otro mecanismo de acción desconocido, por ejemplo cualquier epotilona o derivado de epotilona, o un inhibidor de mTOR, por ejemplo como se indica anteriormente. Cuando se administra un compuesto de la Fórmula III o p ci o n a I m e n te conjugado, por ejemplo el Compuesto B, o un Compuesto B conjugado, en forma de complejo, en conjunto con otro fármaco, las dosificaciones del fármaco coadministrado, por supuesto, variarán dependiendo del tipo de co-fármaco empleado, del fármaco específico empleado, de la condición que se vaya a tratar, etcétera. Los términos "coadministración" o "administración combinada", o similares, como se utilizan en la presente, significan que abarcan la administración de los agentes terapéuticos seleccionados a un solo paciente, y pretenden incluir regímenes de tratamiento en los que no necesariamente se administren los agentes por la misma vía de administración o al mismo tiempo.

De conformidad con lo anterior, la presente invención proporciona, en un aspecto todavía adicional: 9. Una combinación farmacéutica que comprende: a) un primer agente que es un compuesto de la Fórmula III opcionalmente conjugado, por ejemplo el Compuesto B, o un Compuesto B conjugado, en forma de complejo, y b) un coagente, por ejemplo como se define anteriormente. 10. Un método como se define anteriormente, el cual comprende la co-administración, por ejemplo de una manera concomitante o en secuencia, de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula III opcionalmente conjugado, por ejemplo el Compuesto B, o un Compuesto B conjugado en forma de complejo, y una segunda sustancia de fármaco, siendo la segunda sustancia de fármaco, por ejemplo, como se indica anteriormente.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composición farmacéutica para administración parenterai, la cual comprende un análogo de somatostatina que comprende la secuencia de aminoácidos de la Fórmula I: -(D/L)Trp-Lys-X,-X2- | en donde X es un radical de la Fórmula (a) ó (b): — NUCO— — tt- -j — co— ¾ <M CH, ¾ en donde R-¡ es fenilo opcionalmente sustituido, R2 es -ZrCH2-Ri, -CH2-CO-0-CH2-R1 , X2 es un a-aminoácido que tiene un residuo aromático sobre la cadena lateral Ca, o una unidad de aminoácido seleccionada a partir de Dab, Dpr, Dpm, His, (Bzl)HyPro, tienil-Ala, ciclonexil-Ala, y terbutil-Ala, correspondiendo el residuo Lys de esta secuencia al residuo Lys9 de la somatostatina-14 nativa, en forma libre, en forma de sal, o en forma protegida, y ácido tartárico.

2. Una composición de acuerdo con la reivindicación 1 , en donde el análogo de somatostatina es un compuesto de la Fórmula: en donde la configuración en C-2 es (R) ó (S), o una mezcla de las mismas, y en donde R es N R ·, R2-a I q u i I e n o de 2 a 6 átomos de carbono, o guanidina-alquileno de 2 a 6 átomos de carbono, y cada uno de R-i y R2 es independientemente H o alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, en forma libre, en forma de sal, o en forma proteg id a .

3. Una composición de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en donde el compuesto del análogo de somatostatina está en la forma de di-sal de aspartato.

4. Una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la composición se ajusta a un pH de aproximadamente 4 a aproximadamente 4.

5. 5. Una composición para administración parenteral, regulada a un pH de aproximadamente 4 a aproximadamente 4.5, y la cual comprende, como ingrediente activo, ciclo[{4-(NH2-C2H4-NH-CO-0-)Pro}-Phg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)-Phe] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

6. Una composición de acuerdo con la reivindicación 5, en donde la composición se regula mediante un regulador de acetato/ácido acético, lactato/ácido láctico, o glicina/HCI.

7. El uso de una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, para la preparación de un medicamento para acromegalia o cáncer.

8. El uso de acuerdo con la reivindicación 6, para la preparación de un medicamento para Enfermedad de Cushing .

9. Un método para el tratamiento de acromegalia o cáncer en un sujeto que lo necesite, el cual comprende administrar una composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 al sujeto.

10. Un compuesto de la Fórmula III: III en donde R es NRiR2-alquileno de 2 a 6 átomos de carbono, o guanidina-alquileno de 2 a 6 átomos de carbono, y cada uno de R-i y R2 es independientemente H ó alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, en forma libre, en forma de sal o en forma de complejo, o en forma protegida, por ejemplo ci c I o [{4- ( H 2-C2H4-NH-CO-0-)Pro}-DPhg-DTrp-Lys-Tyr(4-Bzl)-Phe].