BR122023023137A2

BR122023023137A2 - Forma cristalina de sal de hcl de 2-[3-({1-[2- (dimetilamino)etil]-2-(2,2- dimetilpropil)-1h-1,3-benzodiazol- 5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol com ácido, uso da mesma para fabricação de um medicamento e processo de produção da mesma

Info

Publication number: BR122023023137A2
Application number: BR122023023137-6A
Authority: BR
Inventors: Yukari Inami; Yoshiyuki Okumura; Tracy WALKER
Original assignee: Askat Inc.
Priority date: 2020-11-12
Filing date: 2021-11-11
Publication date: 2024-01-16
Also published as: AU2021380315B2; CN116322672B; WO2022102713A1; KR20230093297A; CA3196706A1; IL301333A; EP4244220A1; CA3238129A1; NZ797451A; AU2021380315A1; US20230322737A1; JP2023544218A; CN116322672A; US11964963B2; KR20240052885A; BR112023003811A2; JP7427309B2; MX2023005430A; KR102660003B1

Abstract

forma cristalina de sal de hcl de 2-[3-({1-[2- (dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)-1h-1,3-benzodiazol- 5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol com ácido, uso da mesma para fabricação de um medicamento e processo de produção da mesma. são descritos novos sais e formas de cristal de 2-[3-({1-[2- (dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)-1h-1,3-benzodiazol-5- il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol, simplesmente abreviado como composto a, que é um agonista seletivo do receptor cb2. a presente invenção fornece um sal do composto a, uma forma de cristal dele, um método para preparar o referido sal e uma composição farmacêutica dele e seu uso. os sais do composto a da presente invenção mostram boas propriedades de formulação farmacêutica, tais como alta solubilidade aquosa, boa cristalinidade, alto ponto de fusão, boa estabilidade química e física ou não deliquescente.

Description

Campo Técnico

[001] Esta invenção se refere a novos sais e formas de cristal de 2-[3- ({1-[2-(dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)-1H-1,3-benzodiazol-5- il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol, que é um agonista seletivo do receptor CB2, em que o composto pode ser chamado de Composto A através do presente relatório descritivo.

Fundamentos da Técnica

[002] Os canabinoides clássicos, tais como o canabinoide (CB) derivado da maconha delta9-tetrahidro-cannabinol (delta9-THC), produzem seus efeitos farmacológicos por meio da interação com receptores canabinoides específicos no corpo. Os receptores canabinoides são membros do sistema endocanabinoide e estão envolvidos em uma variedade de processos fisiológicos, incluindo apetite, sensação de dor, humor e memória ({NPL 1} Goutopoulos A. et al., Pharmacol. Ther. 2002, 95: 103117; {NPL 2} Wright, K. L. et al., Br. J. Pharmacol. 2008, 153: 263-270; e {NPL 3} Aizpurua-Olaizola, O. et al., Drug Discovery Today 2017, 22: 105110), bem como desempenham um papel importante na regulação de respostas inflamatórias e imunes ({NPL 4} Tanaka M. et al., Front. Neurol. 2020, 11: 87). Esses receptores pertencem à família da rodopsina dos receptores acoplados à proteína G (GPCRs). Há atualmente dois subtipos conhecidos, denominados Receptor Canabinoide 1 (CB1) e Receptor Canabinoide 2 (CB2) ({NPL 5} Matsuda, L. A. et al., Nature 1990, 346: 561564; Gerard, C.M. et al., Biochem. J. 1991, 279: 129-134). O CB1 é expresso mais abundantemente nos neurônios do sistema nervoso central (SNC), mas também está presente em concentrações mais baixas em uma variedade de tecidos e células periféricos ({NPL 5}). Em contraste, o CB2 é expresso predominantemente, embora não exclusivamente, em tecidos não neurais, por exemplo, em células hematopoiéticas, células endoteliais, osteoblastos, osteoclastos, o pâncreas endócrino e linhagens celulares cancerosas ({NPL 6} Munro, S. et al., Nature 1993, 365: 61-65 e {NPL 7} Pacher, P. et al., Pharmacol. Rev. 2006, 58: 389-462). O CB2 também é amplamente distribuído no cérebro, onde é encontrado principalmente na micróglia e não nos neurônios ({NPL 8} Cabral, G. A. et al., Br. J. Pharmacol. 2008, 153: 240-51). Como tal, acredita-se que o CB1 seja principalmente responsável por mediar os efeitos psicotrópicos dos canabinoides no corpo, enquanto o CB2 não está relacionado à psicoatividade dos canabinoides e acredita-se ser principalmente responsável pela maioria de seus efeitos não neurais representados pela modulação imune induzida por canabinoides ({NPL 9} Howlett, A.C. et al., Pharmacol. Rev. 2002, 54: 161-202; e {NPL 10} Chung, Y. C. et al., Exp. Mol. Med. 2016, 48: e205). Há um interesse considerável no desenvolvimento de agonistas seletivos do receptor CB2, uma vez que se acredita que a alta seletividade para CB2 pode oferecer caminhos para aproveitar o efeito benéfico dos agonistas do receptor CB, enquanto se evitam os eventos adversos centrais observados com estruturas canabinoides ({NPL 11} Expert Opin. Investig. Drugs 2007, 16: 951-965).

[003] Em geral, os agonistas do receptor CB2 podem ser benéficos para o tratamento de uma variedade de indicações em diferentes áreas terapêuticas, incluindo dor crônica e aguda (por exemplo, dor inflamatória, dor nociceptiva, dor neuropática, fibromialgia, dor lombar crônica, dor visceral, síndrome de dor regional complexa, neuralgias); distúrbios imunológicos e inflamatórios também com um componente de dor (por exemplo, artrite, artrite reumatoide, osteoartrite, aterosclerose, doença de Crohn, colite ulcerativa, asma, alergia, psoríase, dermatite, rinite alérgica sazonal, lúpus eritematoso sistêmico); distúrbios gastrointestinais, síndrome do intestino irritável (IBS), doença do refluxo gastroesofágico (GERD), constipação, diarreia, distúrbio gastrointestinal funcional), oncologia (por exemplo, linfoma de células T cutâneas, câncer de pâncreas); distúrbios neurodegenerativos, tal como esclerose múltipla, doença de Alzheimer, doença de Parkinson, esclerose lateral amiotrófica; distúrbios fibróticos de etiologia heterogênea (fibrose sistêmica, esclerose sistêmica, vasculite, fibrose hepática, fibrose pulmonar, fibrose renal); distúrbios pulmonares (por exemplo, síndrome do desconforto respiratório agudo (ARDS), obstrução reversível das vias aéreas, síndrome da doença respiratória do adulto, doença pulmonar obstrutiva crônica ou COPD) e muitos distúrbios metabólicos e multietiológicos, incluindo diabetes, glaucoma, degeneração macular relacionada à idade, retinopatia diabética, uveíte, oclusão da veia retiniana, retinopatia da prematuridade, síndrome isquêmica ocular, atrofia geográfica, osteoporose, regulação da massa óssea, glomerulonefrite, isquemia renal, nefrite, hepatite, insuficiência hepática aguda, nefropatia crônica do aloenxerto, nefropatia diabética, cirrose hepática ou tumores, infarto do miocárdio, isquemia cerebral, lesão de reperfusão de isquemia, insuficiência cardíaca, acidente vascular cerebral, isquemia do miocárdio, cardiomiopatia, ataque isquêmico transitório, alveolite fibrosante criptogênica, bronquite, lesão térmica, lesão por queimadura, cicatrizes hipertróficas, queloides, gengivite, pirexia, doenças psiquiátricas, psicose, malária, encefalite e rejeição aguda de aloenxerto ({NPL 12} Hohmann, A. G. et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 2004, 308: 446-453; {NPL 13} Ibrahim, M. M. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2003, 100: 10529-10533; {NPL 14} Mathison, R. et al., Br. J. Pharmacol. 2004, 142: 1247-1254; {NPL 15} Pacher, P. et al., Prog. Lipid Res. 2011, 50: 193-211; {NPL 16} Van Der Stelt, M. et al., J. Med. Chem. 2011, 54: 7350-7362; {NPL 17} Guindon, J. et al., Br. J. Pharmacol. 2008, 153: 319-334; {NPL 18} Kusakabe, K. et al., Bioorg. Med. Chem. 2013, 21: 3154-3163; {NPL 19} Mukhopadhyay, P. et al., Free Radic. Biol. Med. 2010, 48: 457-467; {NPL 20} Gruden, G. et al., Br. J. Pharmacol. 2015, 173: 1116-1127; {NPL 21} Julien, B. et al., Gastroenterology 2005, 128; 742-755; {NPL 22} Batkai, S. et al., FASEB J. 2007, 21: 1788-1800; {NPL 23} Rajesh, M. et al., J. Leukoc. Biol. 2007, 82: 1382-1389; {NPL 24} Horvath, B. et al., Br. J. Pharmacol. 2012, 165: 2462-2478; e {NPL 25} Montecucco, F. et al., J. Mol. Cell. Cardiol. 2009, 46: 612-620). As classificações das doenças descritas acima são mostradas na Tabela A do Apêndice.

[004] Por conseguinte, os compostos de moléculas pequenas que têm atividade agonística seletiva do receptor CB2 são particularmente desejáveis como um meio para tratar ou prevenir estados de doença associados à estimulação de CB2. Uma dessas moléculas pequenas é 2-[3-({1-[2- (dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)-1H-1,3-benzodiazol-5- il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol, que tem a estrutura química:

[005] 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)-1H-1,3- benzodiazol-5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol (Composto A), sua preparação e seu uso como um medicamento para o tratamento de condições ou doenças mediadas pela atividade do receptor CB2 são descritas na {PL1} Patente dos EUA Número 8.653.063. O Composto A é exemplificado nesse documento na forma de base livre e a síntese também é descrita na parte experimental como Exemplo 23. Ademais, as atividades agonísticas in vitro para CB1 e CB2 humanos, parâmetros farmacocinéticos in vivo e in vitro e eficácia in vivo do Composto A são descritos em {NPL 26} Iwata, Y. et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2015, 25, 236, como Composto 40. A presente invenção se refere a um novo sal e forma sólida cristalina do referido sal de Composto A que demonstram propriedades melhoradas para uso em uma forma de dosagem farmacêutica, particularmente para formas de dosagem sólidas orais.

[006] Com base em uma estrutura química, não fora possível até o momento prever com qualquer grau de certeza se um composto cristalizaria sob qualquer condição, quantas formas sólidas cristalinas do composto podem existir ou a estrutura de estado sólido de qualquer uma dessas formas. Devido aos muitos fatores que influenciam a taxa e o mecanismo de cristalização, identificar um processo robusto e reproduzível que permita resultados consistentes na obtenção de cristais de boa qualidade e estáveis requer um processo longo e rigoroso de otimização. Uma característica chave de qualquer droga cristalina é o comportamento polimórfico de tal material. Em geral, as diferentes propriedades físicas exibidas por diferentes formas sólidas de um composto farmacêutico podem afetar parâmetros farmacêuticos importantes, tais como armazenamento, compressibilidade, densidade (importante na formulação e fabricação do produto) e taxas de dissolução (importante na determinação da biodisponibilidade). As diferenças de estabilidade podem resultar de mudanças na reatividade química (por exemplo, hidrólise ou oxidação diferencial, de modo que uma formulação compreendendo um certo polimorfo possa descolorir mais rapidamente do que uma formulação compreendendo um polimorfo diferente), mudanças mecânicas (por exemplo, comprimidos podem esfarelar no armazenamento à medida que uma forma cristalina cineticamente favorecida se converte em forma cristalina termodinamicamente mais estável), ou ambas as coisas (por exemplo, comprimidos de um polimorfo podem ser mais suscetíveis à quebra em alta umidade). Diferenças de solubilidade entre polimorfos podem, em situações extremas, resultar em transições para formas cristalinas que carecem de potência. Além disso, as propriedades físicas de uma forma cristalina também podem ser importantes no processamento farmacêutico. Por exemplo, uma forma cristalina particular pode formar solvatos mais prontamente ou pode ser mais difícil de filtrar e lavar livre de impurezas do que outras formas cristalinas (isto é, formato de partícula e distribuição de tamanho podem ser diferentes entre uma forma cristalina em relação a outras formas). Essa variedade de características é quase impossível de ser especulada ou esperada antes de se encontrarem fatos.

[007] Em geral, a forma física ideal de um produto farmacêutico não pode ser definida a priori porque diferentes formas físicas fornecem vantagens diferentes. Assim, é importante buscar uma variedade de formas de drogas únicas, por exemplo, sais, polimorfos, formas não cristalinas, que podem ser usadas em várias formulações. A seleção de uma forma de droga para uma formulação específica, por via de administração ou aplicação terapêutica requer consideração de uma variedade de propriedades, com um grau diferente de prioridade ou parâmetros de aceitabilidade com base em uma aplicação particular. Especificamente, uma forma de droga usada em formas de dosagem oral sólidas, incluindo comprimidos e cápsulas, deve ser suficientemente estável, deve manter sua forma polimorfa de cristal durante o processo de fabricação sólida e não deve se degradar durante um armazenamento de vida útil normal. Outrossim, as formas de baixo ponto de fusão são consideradas indesejáveis, pois podem ocorrer problemas de formulação, tais como exsudação e manchas devido à fusão da droga durante o diferente estágio de fabricação. No que diz respeito ao desenvolvimento de formulação sólida geral, o ponto de fusão não deve ser inferior a 80 °C e deve preferencialmente exceder 120 °C ({NPL 27} Stefan Balbach, Pharmaceutical evaluation of early development candidates “the 100 mg-approach”, International Journal of Pharmaceutics 275 (2004) 1-12).

[008] Diferentes formas sólidas cristalinas do mesmo composto muitas vezes possuem diferentes propriedades de estado sólido, tais como ponto de fusão, solubilidade, taxa de dissolução, higroscopicidade, fluxo de pó, propriedades mecânicas, estabilidade química e estabilidade física. Essas propriedades de estado sólido podem oferecer vantagens na filtração, secagem, operações de unidade de fabricação de forma de dosagem e, eventualmente, melhorar o desempenho in vivo em termos de DMPK e parâmetros de eficácia. Assim, uma vez que diferentes formas sólidas cristalinas do mesmo composto foram identificadas, pode ser determinada a forma sólida cristalina ideal sob qualquer dado conjunto de condições de processamento e fabricação, bem como as diferentes propriedades de estado sólido de cada forma sólida cristalina. No entanto, apenas formas sólidas cristalinas limitadas de um composto são adequadas para uso como ingredientes farmacêuticos ativos (APIs). Portanto, a identificação da forma com as propriedades desejáveis torna-se um componente essencial, mas também demorado e desafiador do desenvolvimento de drogas.

[009] Os polimorfos de uma molécula podem ser obtidos por uma série de métodos que não são totalmente previsíveis a priori e, portanto, podem constituir um componente importante da inovação e, consequentemente, da originalidade de uma invenção. Tais métodos incluem, mas não estão limitados a, recristalização por fusão, resfriamento por fusão, recristalização por solvente, dessolvatação, evaporação rápida, resfriamento rápido, resfriamento lento, difusão de vapor e sublimação. Os polimorfos podem ser detectados, identificados, classificados e caracterizados usando técnicas bem conhecidas, tais como, mas não limitadas a, calorimetria de varredura diferencial (DSC), termogravimetria (TGA), difratometria de pó de raios-X (XRPD), difratometria de raios-X de cristal único, ressonância magnética nuclear de estado sólido (NMR), espectroscopia de infravermelho (IR), espectroscopia Raman e microscopia óptica de estágio quente. Lista de Citações Literatura Patentária {PL 1} Patente dos EUA Número 8.653.063 Literatura Não Patentária {NPL 1} Goutopoulos A. et al., Pharmacol. Ther. 2002, 95: 103-117 {NPL 2} Wright, K. L. et al., Br. J. Pharmacol. 2008, 153: 263-270 {NPL 3} Aizpurua-Olaizola, O. et al., Drug Discovery Today 2017, 22: 105-110 {NPL 4} Tanaka M. et al., Front. Neurol. 2020, 11: 87 {NPL 5} Matsuda, L. A. et al., Nature 1990, 346: 561-564; Gerard, C. M. et al., Biochem. J. 1991, 279: 129-134 {NPL 6} Munro, S. et al., Nature 1993, 365: 61-65 {NPL 7} Pacher, P. et al., Pharmacol. Rev. 2006, 58: 389-462 {NPL 8} Cabral, G. A. et al., Br. J. Pharmacol. 2008, 153: 240-51 {NPL 9} Howlett, A. C. et al., Pharmacol. Rev. 2002, 54: 161-202 {NPL 10} Chung, Y. C. et al., Exp. Mol. Med. 2016, 48: e205 {NPL 11} Expert Opin. Investig. Drugs 2007, 16: 951-965 {NPL 12} Hohmann, A. G. et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 2004, 308: 446-453 {NPL 13} Ibrahim, M. M. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2003, 100: 10529-10533 {NPL 14} Mathison, R. et al., Br. J. Pharmacol. 2004, 142: 1247-1254 {NPL 15} Pacher, P. et al., Prog. Lipid Res. 2011, 50: 193-211 {NPL 16} Van Der Stelt, M. et al., J. Med. Chem. 2011, 54: 7350-7362 {NPL 17} Guindon, J. et al., Br. J. Pharmacol. 2008, 153: 319-334 {NPL 18} Kusakabe, K. et al., Bioorg. Med. Chem. 2013, 21: 3154-3163 {NPL 19} Mukhopadhyay, P. et al., Free Radic. Biol. Med. 2010, 48: 457-467 {NPL 20} Gruden, G. et al., Br. J. Pharmacol. 2015, 173: 1116-1127 {NPL 21} Julien, B. et al., Gastroenterology 2005, 128; 742-755 {NPL 22} Batkai, S. et al., FASEB J. 2007, 21: 1788-1800 {NPL 23} Rajesh, M. et al., J. Leukoc. Biol. 2007, 82: 1382-1389 {NPL 24} Horvath, B. et al., Br. J. Pharmacol. 2012, 165: 2462-2478 {NPL 25} Montecucco, F. et al., J. Mol. Cell. Cardiol. 2009, 46: 612-620 {NPL 26} Iwata, Y. et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2015, 25: 236-240 {NPL 27} Stefan Balbach, Pharmaceutical evaluation of early development candidates “the 100 mg-approach”, International Journal of Pharmaceutics 275 (2004) 1-12 Sumário da Invenção Problema Técnico

[010] O Composto A é divulgado em PL 1 e NPL 26 como um potente agonista seletivo do receptor CB2, que é útil no tratamento ou alívio da dor (isto é, síndrome da dor regional crônica, neuralgia do trigêmeo e outras neuralgias) e inflamação e também de distúrbios gastrointestinais (GI), tal como síndrome do intestino irritável (IBS), doença inflamatória intestinal (IBD) e colite.

[011] Os métodos de preparação anteriormente conhecidos, descritos em PL 1 e NPL 26, produziram uma base livre do Composto A como graxa ou sólidos, que não são cristalinos e não são passíveis de desenvolvimento e formulação de drogas.

[012] Portanto, a presente invenção visa a identificar e produzir uma forma farmaceuticamente aceitável do Composto A e/ou um sal do Composto A capaz de permitir composições farmacêuticas estáveis e eficazes, particularmente aquelas na forma de dosagem sólida. Critérios importantes a serem satisfeitos são, entre outros, que o sal selecionado deve ser cristalino, não deliquescente e possuir estabilidade e propriedades de estado sólido, ser de ponto de fusão adequado e ter características de solubilidade aceitáveis.

Solução para o Problema

[013] Assim, a invenção fornece: [1] Um sal de 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)-1H- 1,3-benzodiazol-5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol com um ácido, em que o ácido é selecionado a partir do grupo que consiste em ácido clorídrico (HCl), ácido maleico e ácido metanossulfônico. [2] O sal, de acordo com [1], em que o ácido é ácido clorídrico (HCl). [3] Uma forma cristalina do sal de HCl de 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]- 2-(2,2-dimetilpropil)-1H-1,3-benzodiazol-5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol. [4] O sal de HCl de 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)- 1H-1,3-benzodiazol-5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol de acordo com [2], em que o referido sal está no Padrão 2 de forma cristalina e o referido Padrão 2 é caracterizado por pelo menos um dos seguintes: (i) um padrão de difração de raios-X (XRPD) de pó compreendendo picos, em termos de 2-teta, em 5,9, 6,6, 8,9, 11,8, 13,2, 14,5, 15,6, 16,0, 17,4, 18,3, 19,5, 20,2, 22,0, 26,6 e 27,0 graus 2-teta +/- 0,2 graus 2-teta; (ii) substancialmente um padrão de XRPD e coincidindo com o padrão mostrado pela Fig. 1-1 (Figura A). [5] O sal de HCl de acordo com qualquer um de [2] a [4], com uma endotermia de fusão com início em 191 °C em calorimetria de varredura diferencial (DSC) ou com início em 192 °C em termogravimetria/análise térmica diferencial (TG/DTA). [6] O sal de HCl de 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)- 1H-1,3-benzodiazol-5-il} sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol de acordo com [3], em que o Padrão 2 do referido sal é pelo menos 90% em peso com base no peso do referido sal. [7] O sal de HCl de 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)- 1H-1,3-benzodiazol-5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol de acordo com [2], em que o referido sal está no Padrão 1 de forma cristalina e o referido Padrão 1 é caracterizado por pelo menos um dos seguintes: (i) um padrão de difração de raios-X (XRPD) de pó compreendendo picos, em termos de 2-teta, em 6,6, 13,2, 15,6, 16,0, 17,2, 17,4, 17,9, 18,9, 20,1, 22,1, 23,4, 26,6 e 27,0 graus 2-teta +/- 0,2 graus 2-teta; (ii) um padrão de XRPD substancialmente em conformidade com o padrão mostrado pela Fig. 1-4 (Figura D). [8] O sal de HCl de acordo com [7], com uma endotermia de fusão com início em 192 °C em calorimetria de varredura diferencial (DSC) ou com início em 200 °C em termogravimetria/análise térmica diferencial (TG/DTA). [9] O sal de HCl de 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)- 1H-1,3-benzodiazol-5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol de acordo com a reivindicação 5, em que o Padrão 1 do referido sal é pelo menos 90% em peso com base no peso do referido sal. [10] Uma composição farmacêutica compreendendo o sal de acordo com [1]. [11] Método para prevenir ou tratar um distúrbio ou condição selecionado a partir de dor, dor inflamatória, dor nociceptiva, dor neuropática, fibromialgia, dor crônica, dor visceral, enxaqueca, cefaleia em salvas, dor relacionada ao câncer, síndrome de dor regional complexa, neuralgias (por exemplo, neuralgia do trigêmeo), esclerose múltipla, doença de Alzheimer, doença de Parkinson, esclerose lateral amiotrófica, epilepsia, neuropatia do diabetes, polineuropatia do vírus da imunodeficiência humana (HIV), doenças psiquiátricas, psicose, distúrbio do espectro autista, síndrome do intestino irritável (IBS), doença inflamatória intestinal (IBD), colite ulcerativa, doença de Crohn, doença do refluxo gastroesofágico (GERD), constipação, diarreia, distúrbio gastrointestinal funcional, artrite, artrite reumatoide, osteoartrite, aterosclerose, doença de artrite psoriática, espondilite, asma, alergia, psoríase, dermatite, rinite alérgica sazonal, lúpus eritematoso sistêmico (SLE), rejeição aguda de aloenxerto, gengivite, encefalite, linfoma cutâneo de células T, câncer de pâncreas, fibrose sistêmica, esclerose sistêmica (SSc), vasculite, fibrose hepática, fibrose pulmonar, fibrose renal, queloides, cicatrizes hipertróficas, síndrome do desconforto respiratório agudo (ARDS), obstrução reversível das vias aéreas, síndrome da doença respiratória adulta, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), alveolite fibrosante criptogênica, bronquite, glaucoma, degeneração macular relacionada à idade (AMD), atrofia geográfica, retinopatia diabética, uveíte, oclusão da veia retiniana, retinopatia da prematuridade, síndrome isquêmica ocular, glumerulonefrite, isquemia renal, nefrite, nefropatia diabética, nefropatia crônica do aloenxerto, hepatite, insuficiência hepática aguda, cirrose hepática, esteatose hepática não-alcoólica (NASH), infarte do miocárdio, isquemia cerebral, lesão de reperfusão de isquemia, insuficiência cardíaca, acidente vascular cerebral, isquemia do miocárdio, cardiomiopatia, ataque isquêmico transitório, diabetes, osteoporose, regulação da massa óssea, fígado gorduroso não alcoólico (NAFL), transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (TDAH), ansiedade, transtorno do espectro autista, depressão, insônia/distúrbios do sono, transtorno obsessivo-compulsivo (TOC), transtorno de estresse pós-traumático (PTSD), síndrome de Tourette, malária e pirexia, compreendendo administrar a um sujeito que sofre da referida doença ou condição uma quantidade eficaz do sal de acordo com [1]. [12] O método de acordo com [11], em que a doença é dor. [13] O método de acordo com [11], em que a doença é inflamação. [14] O método de acordo com [11], em que a doença é a síndrome do intestino irritável (IBS). [15] O método, de acordo com [11], em que a doença é doença inflamatória intestinal (IBD). [16] O método de acordo com [11], em que a doença é colite. [17] Um processo de produção de um sal de HCl de 2-[3-({1-[2- (dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)-1H-1,3-benzodiazol-5- il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol, compreendendo dissolver 2-[3-({1-[2- (dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)-1H-1,3-benzodiazol-5- il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol em um solvente adequado. [18] O processo, de acordo com [17], em que o solvente adequado é selecionado a partir do grupo que consiste em acetona, acetonitrila, 1- butanol, ciclo-hexano, diclorometano, éter di-isopropílico, dimetilacetamida, dimetilsulfóxido, dioxano, etanol, acetato de etila, heptano, acetato de isopropila, éter metil-terc-butílico, metil-etil-cetona, metil-isobutil-cetona, metanol, 2-propanol, tolueno, tetra-hidrofurano, água e a mistura dos seus solventes.

[014] Em consideração a todos os itens acima, um estudo exaustivo e cuidadoso do Composto A e/ou sais do Composto A levou à conclusão nova e interessante de que certos sais do Composto A atendem aos requisitos anteriores e têm vantagens no que diz respeito à capacidade de preparar formas de dosagem sólidas sobre a base livre correspondente ou outros sais. Particularmente, formas polimorfas cristalinas novas e “essencialmente puras” (aqui significando pureza maior ou igual a 95% em peso) do cloridrato (sal de HCl) do Composto A têm os melhores caracteres como o API. Mais preferencialmente, o produto final será 98% em peso de pureza e idealmente pureza maior ou igual a 99% em peso.

[015] Em uma modalidade, a invenção é direcionada a um sal compreendendo o Composto A: e um ácido, em que o ácido é selecionado a partir do grupo que consiste em ácido acético, ácido L-ascórbico, ácido L-aspártico, ácido benzenossulfônico, ácido cítrico, ácido etano-1,2-dissulfônico (ácido edissílico, EDSA), ácido fumárico, ácido 2,5-di-hidroxibenzoico (ácido gentísico), ácido D-glucônico, ácido D-glucurônico, ácido L-glutâmico, ácido glutárico, ácido glicólico, ácido hipúrico, ácido clorídrico (HCl), ácido L-lático, ácido maleico, ácido L-málico, ácido metanossulfônico (MSA), ácido fosfórico, ácido p-toluenossulfônico (p-TSA), ácido succínico, ácido sulfúrico (H2SO4) e ácido L-tartárico.

[016] Em uma modalidade preferencial, o ácido é selecionado a partir do grupo que consiste em ácido acético, ácido etano-1,2-dissulfônico (ácido edissílico, EDSA), ácido fumárico, ácido glutárico, ácido glicólico, ácido clorídrico (HCl), ácido L-lático, ácido maleico, ácido metanossulfônico (MSA), ácido succínico e ácido sulfúrico (H2SO4).

[017] Em outra modalidade preferencial, o ácido é selecionado a partir do grupo que consiste em ácido glicólico, ácido clorídrico (HCl), ácido L- lático, ácido maleico e ácido metanossulfônico (MSA). Em uma modalidade, o sal é o sal de ácido clorídrico (HCl), o sal de ácido maleico ou o sal de ácido metanossulfônico (MSA). É contemplado que o sal de ácido clorídrico (HCl) do Composto A pode ser formado por protonação de um ou mais átomos de nitrogênio do Composto A. Em uma modalidade, o átomo de nitrogênio do grupo dimetilamino (-NMe2) do Composto A é protonado (-NHMe2+) para formar o sal.

[018] Em uma modalidade preferencial, o sal de ácido clorídrico (HCl) do Composto A é representado pela fórmula abaixo:

[019] Em outra modalidade, a presente invenção fornece sal de HCl essencialmente puro, cristalino, do Padrão 2 de forma polimórfica do Composto A Padrão 2, que é caracterizado por um padrão de difração de raios-X (XRPD) pelo método do pó com locais de pico característicos aproximados de 5,9, 6,6, 8,9, 11,8, 13,2, 14,5, 15,6, 16,0, 17,4, 18,3, 19,5, 20,2, 22,0, 26,6 e 27,0 graus 2-teta. Na invenção, é contemplado que os picos característicos aproximados terão um desvio de até cerca de +/- 0,2 graus 2-teta. O padrão XRPD do Padrão 2 é aproximado ao padrão mostrado pela Figura 1-1 (Figura A). O sal de HCl do Padrão 2 de forma polimórfica do Composto A é adicionalmente caracterizado por calorimetria de varredura diferencial (DSC) na qual exibe um evento térmico endotérmico a cerca de 191 °C. O padrão DSC do Padrão 2 é aproximado ao padrão mostrado pela Figura 1-2 (Figura B). O sal de HCl do Padrão 2 de forma particularmente polimórfica do Composto A é ainda adicionalmente caracterizado por termogravimetria/análise térmica diferencial (TG/DTA) na qual exibe um evento térmico endotérmico a cerca de 192 °C. O padrão de TG/DTA do Padrão 2 é aproximado ao padrão mostrado pela Figura 1-3 (Figura C). Esse polimorfo cristalino do sal de HCl do Composto A, Padrão 2 de forma polimórfica fornece uma forma reprodutível do Composto A adequada para uso na preparação de formulações farmacêuticas.

[020] Em ainda outra modalidade, a presente invenção fornece sal de HCl essencialmente puro e cristalino do Padrão 1 de forma polimórfica do Composto A, que é caracterizado por um padrão de XRPD com locais de pico característicos aproximados de 6,6, 13,2, 15,6, 16,0, 17,2, 17,4, 17,9, 18,9, 20,1, 22,1, 23,4, 26,6 e 27,0 graus 2-teta +/- 0,2 graus 2-teta. O padrão XRPD do Padrão 1 é o padrão mostrado pela Figura 1-4 (Figura D). O sal de HCl do Padrão 1 de forma polimórfica do Composto A é adicionalmente caracterizado por TG/DTA em que exibe um evento térmico endotérmico a cerca de 200 °C. O sal de HCl do Padrão 1 de forma polimórfica do Composto A é adicionalmente caracterizado por calorimetria de varredura diferencial (DSC) na qual exibe um evento térmico endotérmico a cerca de 192 °C. O padrão DSC do Padrão 1 é aproximado ao padrão mostrado pela Figura 1-5 (Figura E). O padrão de TG/DTA do Padrão 1 é aproximado ao padrão mostrado pela Figura 1-6 (Figura F). Esse polimorfo cristalino do sal de HCl do Composto A, Padrão 1 de forma particularmente polimórfica também fornece uma forma reprodutível do Composto A adequada para uso na preparação de formulações farmacêuticas.

[021] Em ainda outra modalidade, a presente invenção fornece sal de HCl essencialmente puro e cristalino do Padrão 3 de forma polimórfica do Composto A e do Padrão 4 de forma polimórfica. Será apreciado que essas formas de cristal não devem ser consideradas apenas como intermediários sintéticos que podem ser adicionalmente processados para o sal de HCl do Padrão 2 de forma polimórfica do Composto A e do Padrão 1 de forma polimórfica, mas também têm as mesmas propriedades terapêuticas. No entanto, o sal de HCl do Padrão 3 de forma polimórfica do Composto A e o Padrão 4 de forma polimórfica não são tão adequados quanto o Padrão 2 de forma polimórfica e o Padrão 1 de forma polimórfica para uso na preparação de formulações farmacêuticas, principalmente porque aquelas formas de cristal são menos estáveis em comparação com estas. O sal de HCl do Padrão 3 de forma polimórfica do Composto A e do Padrão 4 de forma polimórfica são caracterizados por PXRD, conforme detalhado na Tabela 11: [Tabela 1-1]

[022] Em uma modalidade adicional, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica para prevenir ou tratar condições ou doenças mediadas pela atividade do receptor CB2 em um mamífero compreendendo um carreador farmaceuticamente aceitável e uma quantidade terapeuticamente eficaz do sal de HCl do Composto A com uma forma polimórfica cristalina, Padrão 2 de forma polimórfica ou Padrão 1 de forma polimórfica.

[023] Em ainda outra modalidade, a presente invenção fornece um método para tratar um distúrbio ou condição usando um agonista seletivo do receptor CB2, particularmente para o tratamento curativo, profilático ou paliativo, incluindo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de sal de HCl do Padrão 2 de forma polimórfica do Composto A e do Padrão 1 de forma polimórfica a um mamífero, incluindo um ser humano, em necessidade de tal tratamento.

[024] Em uma modalidade alternativa, a presente invenção fornece um método para preparar um sal de HCl do Composto A com uma forma polimórfica cristalina, particularmente o Padrão 2 de forma polimórfica ou Padrão 1 de forma polimórfica. Os métodos incluem tipicamente suspender o Composto A em um solvente ou uma mistura de solventes, colocar HCl (ácido clorídrico ou gás de cloreto de hidrogênio) em contato com o Composto A para fornecer uma mistura, aquecer a mistura, resfriar a mistura e isolar o sal de HCl.

Breve Descrição dos Desenhos

[025] [Fig. 1-1] A Figura 1-1 (Figura A) fornece um padrão de difração de raios-X pelo método do pó (XRPD) do cloridrato (sal de HCl) do Padrão 2 de forma polimórfica do Composto A.

[026] [Fig. 1-2] A Figura 1-2 (Figura B) fornece um padrão de calorimetria de varredura diferencial (DSC) do cloridrato (sal de HCl) do Padrão 2 de forma polimórfica do Composto A.

[027] [Fig. 1-3] A Figura 1-3 (Figura C) fornece um padrão de termogravimetria/análise térmica diferencial (TG/DTA) do cloridrato (sal de HCl) do Padrão 2 de forma polimórfica do Composto A.

[028] [Fig. 1-4] A Figura 1-4 (Figura D) fornece um padrão de difração de raios-X pelo método do pó (XRPD) do cloridrato (sal de HCl) do Padrão 1 de forma polimórfica do Composto A.

[029] [Fig. 1-5] A Figura 1-5 (Figura E) fornece um padrão de calorimetria de varredura diferencial (DSC) do cloridrato (sal de HCl) do Padrão 1 de forma polimórfica do Composto A.

[030] [Fig. 1-6] A Figura 1-6 (Figura F) fornece um padrão de termogravimetria/análise térmica diferencial (TG/DTA) do cloridrato (sal de HCl) do Padrão 1 de forma polimórfica do Composto A.

[031] [Fig. 1-7] A Figura 1-7 (Figura G) fornece um padrão de difração de raios-X pelo método do pó (XRPD) do cloridrato (sal de HCl) do Padrão 3 de forma polimórfica do Composto A.

[032] [Fig. 1-8] A Figura 1-8 (Figura H) fornece um padrão de difração de raios-X pelo método do pó (XRPD) do cloridrato (sal de HCl) do Padrão 4 de forma polimórfica do Composto A.

[033] [Fig. 2-1] A Figura 2-1 fornece um padrão de XRPD de AAT-730 (Lote n° 33-13).

[034] [Fig. 2-2] A Figura 2-2 fornece um termograma TG/DTA para AAT- 730 analisado de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[035] [Fig. 2-3] A Figura 2-3 fornece um termograma DSC para AAT- 730 analisado de 30 a 150 °C a 10 °C por minuto.

[036] [Fig. 2-4] A Figura 2-4 fornece um espectro de 1H NMR de AAT- 730 (analisado em CD3OD).

[037] [Fig. 2-5] A Figura 2-5 fornece um espectro de 1H NMR de AAT- 730 (analisado em DMSO-d6).

[038] [Fig. 2-6] A Figura 2-6 fornece uma fotomicrografia de AAT-730.

[039] [Fig. 2-7] A Figura 2-7 fornece uma análise de XRPD de amostras de base livre AAT-730 após umidade relativa elevada e tensão de temperatura.

[040] [Fig. 2-8] A Figura 2-8 fornece um espectro de 1H NMR de base livre AAT-730 após 1 semana a 25 °C/60% RH.

[041] [Fig. 2-9] A Figura 2-9 fornece um espectro de 1H NMR de base livre AAT-730 após 1 semana a 40 °C/75% RH.

[042] [Fig. 2-10] A Figura 2-10 fornece um espectro de 1H NMR de base livre AAT-730 após 1 semana a 70 °C/75% RH.

[043] [Fig. 3-1] A Figura 3-1 fornece um traço de XRPD do material de Padrão A de AAT-730.

[044] [Fig. 3-2] A Figura 3-2 fornece um termograma TG/DTA do Padrão A de AAT-730 analisado de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[045] [Fig. 3-3] A Figura 3-3 fornece um traço de XRPD do material de Padrão B de AAT-730.

[046] [Fig. 3-4] A Figura 3-4 fornece um termograma TG/DTA de sólidos do Padrão B de AAT-730 analisados de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[047] [Fig. 3-5] A Figura 3-5 fornece uma sobreposição de XRPD que ilustra a tensão térmica do material de Padrão B.

[048] [Fig. 3-6] A Figura 3-6 fornece um traço de XRPD do material de Padrão C de AAT-730.

[049] [Fig. 3-7] A Figura 3-7 fornece um termograma TG/DTA de sólidos do Padrão C de AAT-730 analisados de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[050] [Fig. 3-8] A Figura 3-8 fornece um espectro de 1H NMR de material de Padrão C de AAT-730 analisado em CD3OD.

[051] [Fig. 3-9] A Figura 3-9 fornece um traço de XRPD da mistura do Padrão D + A (topo) e do Padrão A (fundo).

[052] [Fig. 4-1] A Figura 4-1 fornece um difratograma de XRPD mostrando (topo) o Lote AAT-730. N° 33-13 e difratograma típico (fundo) após moagem planetária.

[053] [Fig. 4-2] A Figura 4-2 fornece um difratograma de XRPD de possível acetato de AAT-730.

[054] [Fig. 4-3] A Figura 4-3 fornece um espectro de 1H NMR de possível acetato de AAT-730.

[055] [Fig. 4-4] A Figura 4-4 fornece um padrão de XRPD de sal de EDSA AAT-730.

[056] [Fig. 4-5] A Figura 4-5 fornece um espectro de 1H NMR de sal de EDSA AAT-730 suspeito.

[057] [Fig. 4-6] A Figura 4-6 fornece um padrão de XRPD de possível sal de EDSA AAT-730.

[058] [Fig. 4-7] A Figura 4-7 fornece um espectro de 1H NMR de possível sal de EDSA AAT-730.

[059] [Fig. 4-8] A Figura 4-8 fornece um padrão de XRPD de fumarato AAT-730 suspeito.

[060] [Fig. 4-9] A Figura 4-9 fornece um espectro de 1H NMR de fumarato de AAT-730 suspeito.

[061] [Fig. 4-10] A Figura 4-10 fornece um padrão de XRPD de glutarato AAT-730 suspeito.

[062] [Fig. 4-11] A Figura 4-11 fornece um espectro de 1H NMR de glutarato AAT-730.

[063] [Fig. 4-12] A Figura 4-12 fornece um termograma TG/DTA de glutarato AAT-730 suspeito analisado de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[064] [Fig. 4-13] A Figura 4-13 fornece um padrão de XRPD de glicolato AAT-730 suspeito.

[065] [Fig. 4-14] A Figura 4-14 fornece um espectro de 1H NMR de glicolato AAT-730 suspeito.

[066] [Fig. 4-15] A Figura 4-15 fornece um termograma TG/DTA de glicolato AAT-730 suspeito analisado de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[067] [Fig. 4-16] A Figura 4-16 fornece um padrão de XRPD de sal de HCl AAT-730 suspeito.

[068] [Fig. 4-17] A Figura 4-17 fornece um espectro de 1H NMR de sal de HCl AAT-730 suspeito.

[069] [Fig. 4-18] A Figura 4-18 fornece um termograma TG/DTA de sal de HCl AAT-730 suspeito analisado de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[070] [Fig. 4-19] A Figura 4-19 fornece um padrão de XRPD de sal de HCl AAT-730 suspeito (2 mol. eq. de HCl).

[071] [Fig. 4-20] A Figura 4-20 fornece um espectro de 1H NMR de sal de HCl AAT-730 suspeito (2 mol. eq. de HCl).

[072] [Fig. 4-21] A Figura 4-21 fornece um termograma TG/DTA de sal de HCl AAT-730 suspeito analisado de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[073] [Fig. 4-22] A Figura 4-22 fornece um padrão de XRPD de L- lactato AAT-730 suspeito.

[074] [Fig. 4-23] A Figura 4-23 fornece um espectro de 1H NMR de L- lactato AAT-730 suspeito.

[075] [Fig. 4-24] A Figura 4-24 fornece um termograma TG/DTA de L- lactato AAT-730 suspeito analisado de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[076] [Fig. 4-25] A Figura 4-25 fornece um padrão de XRPD de maleato AAT-730 suspeito.

[077] [Fig. 4-26] A Figura 4-26 fornece um espectro de 1H NMR de maleato de AAT-730 suspeito.

[078] [Fig. 4-27] A Figura 4-27 fornece um termograma TG/DTA de maleato AAT-730 suspeito analisado de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[079] [Fig. 4-28] A Figura 4-28 fornece um difratograma de XRPD de sal de MSA AAT-730 suspeito.

[080] [Fig. 4-29] A Figura 4-29 fornece um espectro de 1H NMR de sal de MSA AAT-730 suspeito.

[081] [Fig. 4-30] A Figura 4-30 fornece uma análise de TG/DTA do sal de MSA AAT-730 analisado de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[082] [Fig. 4-31] A Figura 4-31 fornece um difratograma de XRPD de sal de MSA AAT-730 suspeito.

[083] [Fig. 4-32] A Figura 4-32 fornece um espectro de 1H NMR de sal de MSA AAT-730 suspeito.

[084] [Fig. 4-33] A Figura 4-33 fornece um difratograma de XRPD de succinato AAT-730 suspeito.

[085] [Fig. 4-34] A Figura 4-34 fornece uma análise de 1H NMR de succinato AAT-730 suspeito.

[086] [Fig. 4-35] A Figura 4-35 fornece um difratograma de XRPD de sulfato AAT-730 suspeito.

[087] [Fig. 4-36] A Figura 4-36 fornece uma análise de 1H NMR de sulfato AAT-730 suspeito.

[088] [Fig. 4-37] A Figura 4-37 fornece um difratograma de XRPD de sulfato AAT-730 suspeito (Padrão B).

[089] [Fig. 5-1] A Figura 5-1 fornece um padrão de XRPD do Padrão A de sal de HCl AAT-730.

[090] [Fig. 5-2] A Figura 5-2 fornece um termograma TG/DTA do Padrão A de sal de HCl AAT-730 analisado de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[091] [Fig. 5-3] A Figura 5-3 fornece um termograma DSC para o Padrão A de sal de HCl AAT-730 analisado de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[092] [Fig. 5-4] A Figura 5-4 fornece um espectro de 1H NMR de sal de HCl AAT-730 (analisado em CD3OD).

[093] [Fig. 5-5] A Figura 5-5 fornece uma fotomicrografia de sal de HCl AAT-730.

[094] [Fig. 5-6] A Figura 5-6 fornece padrões de XRPD de sais de HCl AAT-730 pós-tensão.

[095] [Fig. 5-7] A Figura 5-7 fornece uma análise de 1H NMRde sal de HCl AAT-730 após tensão a 25 °C/60% RH.

[096] [Fig. 5-8] A Figura 5-8 fornece uma análise de 1H NMR de sal de HCl AAT-730 após tensão a 40 °C/75% RH.

[097] [Fig. 5-9] A Figura 5-9 fornece uma análise de 1H NMR de sal de HCl AAT-730 HCl após tensão a 70 °C/75% RH.

[098] [Fig. 5-10] A Figura 5-10 fornece um padrão de XRPD de maleato AAT-730.

[099] [Fig. 5-11] A Figura 5-11 fornece um termograma TG/DTA de maleato AAT-730 suspeito analisado de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[0100] [Fig. 5-12] A Figura 5-12 fornece um termograma DSC para maleato AAT-730 analisado de 30 a 300 °C a 10 °C por minuto.

[0101] [Fig. 5-13] A Figura 5-13 fornece um espectro de 1H NMR de maleato AAT-730 suspeito.

[0102] [Fig. 5-14] A Figura 5-14 fornece uma fotomicrografia de maleato AAT-730.

[0103] [Fig. 5-15] A Figura 5-15 fornece padrões de XRPD para maleato AAT-730 pós-tensão.

[0104] [Fig. 5-16] A Figura 5-16 fornece um espectro de 1H NMR de maleato AAT-730 após tensão por 7 dias a 25°C/60% RH.

[0105] [Fig. 5-17] A Figura 5-17 fornece um espectro de 1H NMR de maleato AAT-730 após tensão por 7 dias a 40 °C/75% RH.

[0106] [Fig. 6-1] A Figura 6-1 fornece um XRPD de material amorfo preparado por evaporação.

[0107] [Fig. 6-2] A Figura 6-2 fornece um traço de XRPD do Padrão 1 de sal de HCl AAT-730.

[0108] [Fig. 6-3] A Figura 6-3 fornece um espectro de 1H NMR do Padrão 1 de sal de HCl AAT-730 analisado em CD3OD.

[0109] [Fig. 6-4] A Figura 6-4 fornece um termograma TG/DTA para o Padrão 1 de sal de HCl AAT-730 entre 30 e 300 °C a 10 °C/min.

[0110] [Fig. 6-5] A Figura 6-5 fornece um traço de XRPD do Padrão 2 de sal de HCl AAT-730.

[0111] [Fig. 6-6] A Figura 6-6 fornece um espectro de 1H NMR do Padrão 2 de sal de HCl AAT-730 analisado em CD3OD.

[0112] [Fig. 6-7] A Figura 6-7 fornece um termograma TG/DTA para o Padrão 2 de sal de HCl AAT-730 analisado entre 30 e 300 °C a 10 °C/min.

[0113] [Fig. 6-8] A Figura 6-8 fornece uma comparação de XRPD do Padrão 1 de sal de HCl AAT-730 (topo) com o Padrão 2 (fundo).

[0114] [Fig. 6-9] A Figura 6-9 fornece um traço de XRPD do Padrão 3 de sal de HCl AAT-730.

[0115] [Fig. 6-10] A Figura 6-10 fornece um espectro de 1H NMR do Padrão 3 de sal de HCl AAT-730 analisado em CD3OD.

[0116] [Fig. 6-11] A Figura 6-11 fornece um termograma TG/DTA para o Padrão 3 de sal de HCl AAT-730 analisado entre 30 e 300 °C a 10 °C/min.

[0117] [Fig. 6-12] A Figura 6-12 fornece um traço de XRPD do Padrão 4 de sal de HCl AAT-730.

[0118] [Fig. 6-13] A Figura 6-13 fornece um traço de XRPD de experimentos de pasta fluida de interconversão.

[0119] [Fig. 6-14] A Figura 6-14 fornece um traço de XRPD de experimentos de atividade de água.

[0120] [Fig. 6-15] A Figura 6-15 fornece um termograma DSC do Padrão 2 de sal de HCl AAT-730 (a amostra usada foi uma amostra combinada da triagem de polimorfo).

[0121] [Fig. 6-16] A Figura 6-16 fornece padrões de XRPD de amostras estressadas por umidade.

[0122] [Fig. 6-17] A Figura 6-17 fornece um espectro de 1H NMR do Padrão 2 de sal de HCl AAT-730 (após tensão a 25 °C/60% RH) analisado em CD3OD.

[0123] [Fig. 6-18] A Figura 6-18 fornece um espectro de 1H NMR do Padrão 2 de sal de HCl AAT-730 (após tensão a 40 °C/75% RH) analisado em CD3OD.

[0124] [Fig. 6-19] A Figura 6-19 fornece um espectro de 1H NMR do Padrão 2 de sal de HCl AAT-730 (após tensão a 70 °C/75% RH) analisado em CD3OD.

[0125] [Fig. 7] A Figura 7 fornece um padrão de XRPD de Padrão 2 de sal de HCl AAT-730.

[0126] {0001}[Fig. 8] A Figura 8 fornece uma Tabela A em Apêndice que fornece as classificações de doenças relacionadas aos receptores CB2.

Descrição Detalhada da Invenção

[0127] PL1 e NPL 26 descrevem uma série de 5-sulfonilbenzimidazóis como agonistas potentes e seletivos do receptor CB2. A base livre do Composto A é especificamente descrita nesses documentos como uma forma não cristalina (graxa ou sólidos de baixa fusão) e é inadequada para a preparação de composições farmacêuticas, particularmente formas de dosagem sólidas. Portanto, buscamos identificar abordagens inovadoras e originais para estabelecer se poderíamos identificar e isolar de maneira robusta e consistente sais que mostram boas propriedades em termos de cristalinidade, estabilidade química e física e não deliquescentes em temperatura e pressão padrão (STP) e umidade.

[0128] Ao gerar diferentes tipologias de sais (por exemplo, cloridrato (sal de HCl), maleato e mesilato), fomos bem sucedidos em concluir que o sal de HCl (cloridrato) do Composto A, particularmente, exibe excelente cristalinidade, pureza, alto ponto de fusão, boa estabilidade química e física, sem deliquescência e alta solubilidade aquosa. O cloridrato do Composto A da presente invenção é útil para o tratamento de doenças mediadas pelo receptor CB2 em mamíferos.

Definição

[0129] A presente invenção pode ser compreendida mais prontamente por referência à seguinte descrição detalhada das modalidades da invenção e os exemplos incluídos neste documento. Adicionalmente, deve ser entendido que, a menos que especificamente definido neste documento, a terminologia usada neste documento deve receber seu significado tradicional, conforme conhecido na técnica relevante.

[0130] Conforme usado neste documento, a forma singular “um”, “uma” e “o/a” inclui referências plurais, a menos que indicado de outra forma. Por exemplo, “um” substituinte inclui um ou mais substituintes.

[0131] Conforme usado neste documento, a menos que indicado de outra forma, o termo “tratar” ou “que trata” significa reverter, aliviar, inibir o progresso ou prevenir o distúrbio ou condição a que tal termo se aplica, ou um ou mais sintomas de tal distúrbio ou condição. O termo “tratamento”, conforme usado neste documento, a menos que indicado de outra forma, se refere ao ato de tratar, conforme “tratar” é definido imediatamente acima.

[0132] Conforme usado neste documento, o termo “prevenção” significa o tratamento profilático de um paciente em necessidade dele. O tratamento profilático pode ser conseguido ao fornecer uma dose apropriada de um agente terapêutico a um sujeito em risco de sofrer de uma enfermidade, desse modo evitando substancialmente o início da enfermidade. Deve ser entendido que, na medicina humana, nem sempre é possível distinguir entre “prevenir” e “suprimir”, uma vez que o evento ou eventos indutivos finais podem ser desconhecidos, latentes ou o paciente não ser determinado até bem depois da ocorrência do evento ou eventos. Portanto, conforme usado neste documento, o termo “profilaxia” é pretendido como um elemento de “tratamento” para abranger “prevenção”, conforme definido neste documento.

[0133] O termo “quantidade terapeuticamente eficaz” significa a quantidade de um sal desta invenção, tipicamente distribuído como uma composição farmacêutica, que é suficiente para efetuar o tratamento, conforme definido neste documento, quando administrado a um sujeito em necessidade de tal tratamento. A quantidade terapeuticamente eficaz variará dependendo do sujeito e condição de doença sendo tratados, do peso e da idade do sujeito, da gravidade da condição de doença, da composição particular escolhida, do regime de dosagem a ser seguido, do tempo de administração, da maneira de administração e semelhantes, todos os quais podem ser prontamente determinados por um versado na técnica.

[0134] Conforme usado neste documento, o termo “condição” se refere a um estado de doença contra o qual os compostos, sais, composições e métodos da presente invenção estão sendo usados.

[0135] O termo “cerca de”, conforme usado neste documento, significa ter um valor dentro de um padrão de erro aceito da média, quando considerado por um versado na técnica, por exemplo +/- 20%, preferencialmente +/- 10% ou mais preferencialmente +/- 5% da média.

[0136] Conforme usado neste documento, o termo “aproximado a” significa que a variabilidade típica para um método particular é levada em consideração. Por exemplo, com referência às posições de pico de difração de raios-X, o termo “aproximado a” significa que a variabilidade típica na posição de pico e intensidade são levadas em consideração. Um versado na técnica apreciará que as posições de pico (2-teta) mostrarão alguma variabilidade, tipicamente até +/- 0,2 graus. Adicionalmente, um versado na técnica apreciará que as intensidades de pico relativas mostrarão variabilidade interaparatos, bem como variabilidade devido ao grau de cristalinidade, orientação preferencial, superfície de amostra preparada e outros fatores conhecidos pelos versados na técnica e devem ser tomados apenas como medidas qualitativas. Semelhantemente, nas medições de DSC ou TG/DTA há um certo grau de variabilidade nas temperaturas reais de início e pico medidas, tipicamente até +/- 1%, o que depende da taxa de aquecimento, formato e pureza do cristal e uma série de parâmetros de medição. Os valores de deslocamento químico de NMR (ppm de TMS) mostram variabilidade, tipicamente até +/- 0,2 ppm.

[0137] O termo “cristalino” ou “cristal”, conforme usado neste documento, significa ter um arranjo de moléculas ou planos de face externos que se repetem regularmente. Formas cristalinas ou formas de cristal podem diferir em relação à estabilidade termodinâmica, parâmetros físicos, estrutura de raios-X e processos de preparação.

[0138] Conforme usado neste documento, o termo “polimorfo” significa a forma cristalina de uma substância que é distinta de outra forma cristalina, mas que compartilha a mesma fórmula química.

[0139] A invenção descrita neste documento adequadamente pode ser praticada na ausência de qual(is)quer elemento(s) não especificamente divulgado(s) neste documento. Assim, por exemplo, em cada caso neste documento qualquer um dos termos “compreendendo”, “consistindo essencialmente em” e “consistindo em” pode ser substituído por qualquer um dos outros dois termos.

Composições farmacêuticas

[0140] As composições farmacêuticas da presente invenção podem ser usadas para prevenir ou tratar um sujeito que sofre de condições ou doenças, em que as condições ou doenças são mediadas por atividade do receptor CB2. Tais condições ou doenças incluem mas não estão limitadas a, mas por exemplo, dor, dor inflamatória, dor nociceptiva, dor neuropática, fibromialgia, dor crônica, dor visceral, enxaqueca, cefaleia em salvas, dor relacionada ao câncer, síndrome de dor regional complexa, neuralgias (por exemplo, neuralgia do trigêmeo), esclerose múltipla, doença de Alzheimer, doença de Parkinson, esclerose lateral amiotrófica, epilepsia, neuropatia do diabetes, polineuropatia do vírus da imunodeficiência humana (HIV), doenças psiquiátricas, psicose, distúrbio do espectro autista, síndrome do intestino irritável (IBS), doença inflamatória intestinal (IBD), colite ulcerativa, doença de Crohn, doença do refluxo gastroesofágico (GERD), constipação, diarreia, distúrbio gastrointestinal funcional, artrite, artrite reumatoide, osteoartrite, aterosclerose, doença de artrite psoriática, espondilite, asma, alergia, psoríase, dermatite, rinite alérgica sazonal, lúpus eritematoso sistêmico (SLE), rejeição aguda de aloenxerto, gengivite, encefalite, linfoma cutâneo de células T, câncer de pâncreas, fibrose sistêmica, esclerose sistêmica (SSc), vasculite, fibrose hepática, fibrose pulmonar, fibrose renal, queloides, cicatrizes hipertróficas, síndrome do desconforto respiratório agudo (ARDS), obstrução reversível das vias aéreas, síndrome da doença respiratória adulta, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), alveolite fibrosante criptogênica, bronquite, glaucoma, degeneração macular relacionada à idade (AMD), atrofia geográfica, retinopatia diabética, uveíte, oclusão da veia retiniana, retinopatia da prematuridade, síndrome isquêmica ocular, glumerulonefrite, isquemia renal, nefrite, nefropatia diabética, nefropatia crônica do aloenxerto, hepatite, falha hepática aguda, cirrose hepática, esteatose hepática não-alcoólica (NASH), infarte do miocárdio, isquemia cerebral, lesão de reperfusão de isquemia, insuficiência cardíaca, acidente vascular cerebral, isquemia do miocárdio, cardiomiopatia, ataque isquêmico transitório, diabetes, osteoporose, regulação da massa óssea, fígado gorduroso não alcoólico (NAFL), transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (TDAH), ansiedade, transtorno do espectro autista, depressão, insônia/distúrbios do sono, transtorno obsessivo-compulsivo (TOC), transtorno de estresse pós-traumático (PTSD), síndrome de Tourette, malária e pirexia.

[0141] As composições farmacêuticas da presente invenção são compostas por um excipiente, diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável e uma quantidade terapeuticamente aceitável do sal do Composto A, em que o sal é selecionado a partir do grupo que consiste em sal de ácido acético, sal de ácido L-ascórbico, sal de ácido L-aspártico, sal de ácido benzenossulfônico, sal de ácido cítrico, sal de ácido etano-1,2-dissulfônico (ácido edissílico, EDSA), sal de ácido fumárico, sal de ácido 2,5-di- hidroxibenzoico (ácido gentísico), sal de ácido D-glucônico, sal de ácido D- glucurônico, sal de ácido L-glutâmico, sal de ácido glutárico, sal de ácido glicólico, sal de ácido hipúrico, sal de ácido clorídrico (HCl), sal de ácido L- lático, sal de ácido maleico, sal de ácido L-málico, sal de ácido metanossulfônico (MSA), sal de ácido fosfórico, sal de ácido p- toluenossulfônico (p-TSA), sal de ácido succínico, sal de ácido sulfúrico (H2SO4) e sal de ácido L-tartárico. Na modalidade preferencial, as composições farmacêuticas da presente invenção são compreendidas por um excipiente, diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável e uma quantidade terapeuticamente aceitável do sal do Composto A, em que o sal é selecionado a partir do grupo que consiste em sal de HCl, sal de ácido maleico e sal de ácido metanossulfônico (MSA). Na modalidade mais preferencial, as composições farmacêuticas da presente invenção são compreendidas por um excipiente, diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável e uma quantidade terapeuticamente aceitável do sal de HCl do Composto A com uma forma polimórfica cristalina, o Padrão 2 de forma polimórfica ou o Padrão 1 polimórfico é exemplificado.

[0142] Assim, o composto da invenção pode ser administrado sozinho, mas geralmente será administrado em mistura com um excipiente, diluente ou carreador farmacêutico adequado selecionado em relação à via de administração pretendida e à prática farmacêutica padrão.

[0143] Por exemplo, o composto da invenção pode ser administrado por via oral na forma de comprimidos opcionalmente aromatizados e/ou coloridos, cápsulas, pílulas, pós, grânulos, elixires, soluções ou suspensões adequados para aplicações de liberação imediata, retardada ou controlada. O composto também pode ser administrado sistemicamente; por injeção parenteral como uma solução, suspensão ou emulsão estéril; por administração retal como um supositório; ou por inalação como um aerossol ou como pó ou nanopartículas micronizados inalados. A administração tópica pode ser atingida como um unguento, creme, gel, solução líquida ou supositório de emulsão.

[0144] Tais comprimidos podem conter excipientes, tais como celulose microcristalina, lactose, citrato de sódio, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio dibásico ou glicina, desintegrantes, tais como amido (preferencialmente amido de milho, batata ou tapioca), glicolato de amido de sódio, croscarmelose de sódio ou certos silicatos complexos e aglutinantes de granulação, tais como polivinilpirrolidona, hidroxipropilmetilcelulose (HPMC), hidroxipropilcelulose (HPC), sacarose, gelatina ou acácia. Adicionalmente, agentes lubrificantes, tais como estearato de magnésio, ácido esteárico, behenato de glicerila ou talco podem ser incluídos.

[0145] Composições sólidas de um tipo semelhante também podem ser empregadas como preenchedores em cápsulas de gelatina. Os excipientes preferenciais a esse respeito incluem lactose, amido, uma celulose, açúcar de leite ou um polietilenoglicol de alto peso molecular. Para suspensões aquosas e/ou elixires, o composto pode ser combinado com vários agentes adoçantes ou aromatizantes, matéria corante ou corantes, com agentes emulsionantes e/ou de suspensão e com diluentes, tais como água, etanol, propilenoglicol ou glicerina, ou combinações deles.

[0146] O composto também pode ser administrado por via parentérica, por exemplo, por via intravenosa, intra-arterial, intraperitoneal, intratecal, intraventricular, intrasternal, intracraniana, intramuscular ou subcutânea, ou pode ser administrado por técnicas de infusão. É melhor usado na forma de uma solução aquosa estéril que pode conter outras substâncias, por exemplo, sais ou glicose suficientes para tornar a solução isotônica com o sangue. Se necessário, as soluções aquosas podem ser adequadamente tamponadas, preferencialmente a um pH de 3 a 9. A preparação de formulações parenterais adequadas sob condições estéreis é prontamente conseguida por técnicas farmacêuticas padrões bem conhecidas pelos versados na técnica.

[0147] Para administração oral e parenteral a pacientes humanos, o nível de dosagem diária do composto da invenção será normalmente de 0,01 a 20 mg/kg (em doses únicas ou divididas). Assim, comprimidos, cápsulas ou pílulas do composto da invenção podem conter de 0,5 a 500 mg de composto ativo para administração uma ou duas ou mais de cada vez, conforme apropriado. O médico, em todo caso, determinará a dosagem real que será mais adequada para cada paciente individual e ela pode variar com a idade, peso e resposta do paciente em particular. As dosagens acima são exemplares do caso médio. É claro, pode haver instâncias individuais em que faixas de dosagem mais altas ou mais baixas são merecidas e estas estão no escopo desta invenção.

[0148] O composto da invenção também pode ser administrado por via intranasal ou por inalação e é convenientemente distribuído na forma de um inalador de pó seco ou uma apresentação de pulverizador de aerossol a partir de um recipiente pressurizado, bomba, pulverizador ou nebulizador usando um propulsor adequado, por exemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, um hidrofluoroalcano, tal como 1,1,1,2-tetrafluoroetano (norflurano, HFA-134a) ou 1,1,1,2,3,3,3- heptafluoropropano (apaflurano, HFC-227ea), dióxido de carbono ou outro gás adequado. No caso de um aerossol pressurizado, a unidade de dosagem pode ser determinada ao fornecer uma válvula para distribuir uma quantidade medida. O recipiente pressurizado, bomba, pulverizador ou nebulizador pode conter uma solução ou suspensão do composto ativo, por exemplo, ao usar uma mistura de etanol e o propelente como o solvente, que pode conter adicionalmente um lubrificante, por exemplo, trioleato de sorbitano. Cápsulas e cartuchos (feitos, por exemplo, de gelatina) para uso em um inalador ou insuflador podem ser formulados para conter uma mistura em pó do composto e uma base em pó adequada, tal como lactose ou amido.

[0149] Formulações de aerossol ou pó seco são preferencialmente arranjadas de modo que cada dose medida ou “sopro” contenha de 25 µg a 50 mg do composto da invenção para administração ao paciente. A dose diária global com um aerossol estará na faixa de 100 µg a 100 mg, que pode ser administrada em uma dose única ou, mais normalmente, em doses divididas ao longo do dia.

[0150] Alternativamente, o composto da invenção pode ser administrado na forma de um supositório ou pessário ou pode ser aplicado topicamente na forma de uma loção, solução, creme, unguento ou pó para polvilhar. O composto também pode ser administrado por via transdérmica, por exemplo, por meio de um adesivo cutâneo ou pela via ocular.

[0151] Para administração ocular, o composto da invenção pode ser formulado como suspensões micronizadas em solução salina estéril isotônica e ajustada ao pH ou, preferencialmente, como soluções em solução salina estéril isotônica e ajustada ao pH, opcionalmente em combinação com um conservante, tal como um cloreto de benzilalcônio. Alternativamente, pode ser formulado em um unguento, tal como petrolato.

[0152] Para aplicação tópica na pele, o composto da invenção pode ser formulado como um unguento adequado contendo o composto ativo suspenso ou dissolvido em, por exemplo, uma mistura com um ou mais dos seguintes: óleo mineral, petrolato líquido, petrolato branco, propilenoglicol, composto de polioxietileno polioxipropileno, cera emulsionante ou água. Alternativamente, pode ser formulado como uma loção ou creme adequado, suspenso ou dissolvido em, por exemplo, uma mistura de um ou mais dos seguintes: óleo mineral, monoestearato de sorbitano, um polietilenoglicol, parafina líquida, polissorbato 60, cera de ésteres cetílicos, álcool cetearílico, 2-octildodecanol, álcool benzílico ou água.

[0153] As composições particularmente preferenciais de acordo com a invenção incluem formas de dosagem convencionais, liberação controlada e dispersão rápida, tais como comprimidos, cápsulas, pílulas, pós ou grânulos, todos os quais podem ser prontamente preparados por meios convencionais usando a forma polimórfica da invenção.

[0154] Finalmente, a invenção também fornece o uso do sal do Composto A, formas polimórficas da invenção para a fabricação de um medicamento para o tratamento curativo, profilático ou paliativo de uma doença ou condição médicas para as quais um agonista dos receptores CB2 é indicado e para um método de tratamento curativo, profilático ou paliativo de uma doença ou condição médicas para as quais é indicado um agonista dos receptores CB2 que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz do sal das formas polimórficas do Composto A da invenção, em que o sal é selecionado a partir do grupo que consiste em sal de ácido acético, sal de ácido L-ascórbico, sal de ácido L-aspártico, sal de ácido benzenossulfônico, sal de ácido cítrico, sal de ácido etano-1,2- dissulfônico (ácido edissílico, EDSA), sal de ácido fumárico, sal de ácido 2,5- di-hidroxibenzoico (ácido gentísico), sal de ácido D-glucônico, sal de ácido D-glucurônico, sal de ácido L-glutâmico, sal de ácido glutárico, sal de ácido glicólico, sal de ácido hipúrico, sal de ácido clorídrico (HCl), sal de ácido L- lático, sal de ácido maleico, sal de ácido L-málico, sal de ácido metanossulfônico (MSA), sal de ácido fosfórico, sal de ácido p- toluenossulfônico (p-TSA), sal de ácido succínico, sal de ácido sulfúrico (H2SO4) e sal de ácido L-tartárico. Na modalidade preferencial, o sal é selecionado a partir do grupo que consiste em sal de HCl, sal de ácido maleico e sal de ácido metanossulfônico (MSA).

[0155] Na modalidade mais preferencial, o sal é o sal de HCl das formas polimórficas do Composto A da invenção, que é para a fabricação de um medicamento para o tratamento curativo, profilático ou paliativo de uma doença ou condição médicas para as quais um agonista dos receptores CB2 é indicado e para um método de tratamento curativo, profilático ou paliativo de uma doença ou condição médica para as quais um agonista dos receptores CB2 é indicado, que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz do sal de HCl das formas polimórficas do Composto A da invenção.

[0156] Tais doenças ou condições incluem dor, dor inflamatória, dor nociceptiva, dor neuropática, fibromialgia, dor crônica, dor visceral, enxaqueca, cefaleia em salvas, dor relacionada ao câncer, síndrome de dor regional complexa, neuralgias (por exemplo, neuralgia do trigêmeo), esclerose múltipla, doença de Alzheimer, doença de Parkinson, esclerose lateral amiotrófica, epilepsia, neuropatia do diabetes, polineuropatia do vírus da imunodeficiência humana (HIV), doenças psiquiátricas, psicose, distúrbio do espectro autista, síndrome do intestino irritável (IBS), doença inflamatória intestinal (IBD), colite ulcerativa, doença de Crohn, doença do refluxo gastroesofágico (GERD), constipação, diarreia, distúrbio gastrointestinal funcional, artrite, artrite reumatoide, osteoartrite, aterosclerose, doença de artrite psoriática, espondilite, asma, alergia, psoríase, dermatite, rinite alérgica sazonal, lúpus eritematoso sistêmico (SLE), rejeição aguda de aloenxerto, gengivite, encefalite, linfoma cutâneo de células T, câncer de pâncreas, fibrose sistêmica, esclerose sistêmica (SSc), vasculite, fibrose hepática, fibrose pulmonar, fibrose renal, queloides, cicatrizes hipertróficas, síndrome do desconforto respiratório agudo (ARDS), obstrução reversível das vias aéreas, síndrome da doença respiratória adulta, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), alveolite fibrosante criptogênica, bronquite, glaucoma, degeneração macular relacionada à idade (AMD), atrofia geográfica, retinopatia diabética, uveíte, oclusão da veia retiniana, retinopatia da prematuridade, síndrome isquêmica ocular, glumerulonefrite, isquemia renal, nefrite, nefropatia diabética, nefropatia crônica do aloenxerto, hepatite, insuficiência hepática aguda, cirrose hepática, esteatose hepática não- alcoólica (NASH), infarte do miocárdio, isquemia cerebral, lesão de reperfusão de isquemia, insuficiência cardíaca, acidente vascular cerebral, isquemia do miocárdio, cardiomiopatia, ataque isquêmico transitório, diabetes, osteoporose, regulação da massa óssea, fígado gorduroso não alcoólico (NAFL), transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (TDAH), ansiedade, transtorno do espectro autista, depressão, insônia/distúrbios do sono, transtorno obsessivo-compulsivo (TOC), transtorno de estresse pós- traumático (PTSD), síndrome de Tourette, malária e pirexia. Terapias Combinadas

[0157] Os sais da presente invenção também podem ser opcionalmente combinados com outro composto farmacologicamente ativo ou com dois ou mais outros compostos farmacologicamente ativos. Por exemplo, os sais da presente invenção, conforme definido acima, podem ser administrados simultaneamente, sequencialmente ou separadamente em combinação com um ou mais agentes selecionados a partir de: compostos analgésicos, tais como: acetaminofeno; e NSAIDs, por exemplo, aspirina, colina e salicinatos de magnésio, salicilato de colina, celecoxibe, diclofenaco de potássio ou sódio, diflunisal, etodolaco, flurbiprofeno, ibuprofeno, indometacina, cetoprofeno, salicilato de magnésio, meclofenamato de sódio, ácido mefenâmico, meloxicam, nabumetona, naltrexona, naproxeno, naproxeno sódico, oxaprozina, piroxicam, salsalato, salicilato de sódio, sulindac, tolmetina de sódio ou valdecoxibe; agentes anti-inflamatórios gastrointestinais, por exemplo, 5- aminosalicilatos (5-ASA), mesalamina, sulfassalazina e vedolizumabe; agentes imunossupressores, por exemplo, azatioprina; antagonistas de purina, por exemplo 6-mercaptopurina; terapêutica oral com corticosteroides, por exemplo, prednisona, budesonida ou esteroides equivalentes; agentes anti-inflamatórios, por exemplo, agentes anti-TNF-a, por exemplo, infliximabe, adalimumabe, ustequinumabe e certolizumabe pegol; probióticos, por exemplo Culturelle, Saccharomyces boulardii; antibióticos usados para o tratamento da doença de Crohn, por exemplo, ciprofloxacina e metronidazol; antidiarreicos, por exemplo, loperamida e difenoxilato com atropina; e os seus sais farmaceuticamente aceitos e solvatos.

[0158] A presente invenção se estende a uma combinação compreendendo os sais do Composto A e um ou mais agentes terapêuticos, tais como aqueles listados acima, para uso simultâneo, separado ou sequencial no tratamento curativo, profilático ou paliativo de condições ou doenças, em que as condições ou doenças são mediadas pela atividade do receptor CB2. Tais condições ou doenças não estão limitadas a, mas são, por exemplo, dor, dor inflamatória, dor nociceptiva, dor neuropática, fibromialgia, dor crônica, dor visceral, enxaqueca, cefaleia em salvas, dor relacionada ao câncer, síndrome de dor regional complexa, neuralgias (por exemplo, neuralgia do trigêmeo), esclerose múltipla, doença de Alzheimer, doença de Parkinson, esclerose lateral amiotrófica, epilepsia, neuropatia do diabetes, polineuropatia do vírus da imunodeficiência humana (HIV), doenças psiquiátricas, psicose, distúrbio do espectro autista, síndrome do intestino irritável (IBS), doença inflamatória intestinal (IBD), colite ulcerativa, doença de Crohn, doença do refluxo gastroesofágico (GERD), constipação, diarreia, distúrbio gastrointestinal funcional, artrite, artrite reumatoide, osteoartrite, aterosclerose, doença de artrite psoriática, espondilite, asma, alergia, psoríase, dermatite, rinite alérgica sazonal, lúpus eritematoso sistêmico (SLE), rejeição aguda de aloenxerto, gengivite, encefalite, linfoma cutâneo de células T, câncer de pâncreas, fibrose sistêmica, esclerose sistêmica (SSc), vasculite, fibrose hepática, fibrose pulmonar, fibrose renal, queloides, cicatrizes hipertróficas, síndrome do desconforto respiratório agudo (ARDS), obstrução reversível das vias aéreas, síndrome da doença respiratória adulta, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), alveolite fibrosante criptogênica, bronquite, glaucoma, degeneração macular relacionada à idade (AMD), atrofia geográfica, retinopatia diabética, uveíte, oclusão da veia retiniana, retinopatia da prematuridade, síndrome isquêmica ocular, glumerulonefrite, isquemia renal, nefrite, nefropatia diabética, nefropatia crônica do aloenxerto, hepatite, insuficiência hepática aguda, cirrose hepática, esteatose hepática não-alcoólica (NASH), infarte do miocárdio, isquemia cerebral, lesão de reperfusão de isquemia, insuficiência cardíaca, acidente vascular cerebral, isquemia do miocárdio, cardiomiopatia, ataque isquêmico transitório, diabetes, osteoporose, regulação da massa óssea, fígado gorduroso não alcoólico (NAFL), transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (TDAH), ansiedade, transtorno do espectro autista, depressão, insônia/distúrbios do sono, transtorno obsessivo-compulsivo (TOC), transtorno de estresse pós-traumático (PTSD), síndrome de Tourette, malária e pirexia. Preferencialmente, as condições ou doenças mediadas pela atividade do receptor CB2 são, por exemplo, dor e inflamação, distúrbios gastrointestinais (GI), tal como síndrome do intestino irritável (IBS), doença inflamatória intestinal (IBD) e colite. Em uma modalidade preferencial, o sal do Composto A é selecionado a partir do grupo que consiste em sal de ácido acético, sal de ácido L-ascórbico, sal de ácido L-aspártico, sal de ácido benzenossulfônico, sal de ácido cítrico, sal de ácido etano-1,2-dissulfônico (ácido edissílico, EDSA), sal de ácido fumárico, sal de ácido 2,5-di- hidroxibenzoico (ácido gentísico), sal de ácido D-glucônico, sal de ácido D- glucurônico, sal de ácido L-glutâmico, sal de ácido glutárico, sal de ácido glicólico, sal de ácido hipúrico, sal de ácido clorídrico (HCl), sal de ácido L- lático, sal de ácido maleico, sal de ácido L-málico, sal de ácido metanossulfônico (MSA), sal de ácido fosfórico, sal de ácido p- toluenossulfônico (p-TSA), sal de ácido succínico, sal de ácido sulfúrico (H2SO4) e sal de ácido L-tartárico. Na modalidade preferencial, o sal é selecionado a partir do grupo que consiste em sal de HCl, sal de ácido maleico e sal de ácido metanossulfônico (MSA). Na modalidade preferencial, o sal é selecionado a partir do grupo que consiste em sal de HCl, sal de ácido maleico e sal de ácido metanossulfônico (MSA). Na modalidade mais preferencial, o sal do Composto A é o sal de HCl. Método de preparação

[0159] A invenção também fornece um método para preparar um sal farmaceuticamente aceitável do Composto A. Em geral, o método inclui: (b) suspender a base livre do Composto A em um único solvente ou mistura de solventes; (c) colocar HCl (ácido clorídrico ou gás de cloreto de hidrogênio), ácido maleico ou ácido metanossulfônico em contato com o Composto A para fornecer uma mistura; (d) aquecer a mistura a uma temperatura de 20 °C a 100 °C; (e) resfriar a mistura à temperatura de -20 °C a 40 °C; (f) e isolar o sal.

[0160] Em algumas modalidades do método para preparar o sal, a mistura é resfriada e o sal é precipitado para fora da solução.

[0161] Em algumas modalidades do método para preparar o sal, a mistura é aquecida e submetida a refluxo antes do resfriamento.

[0162] Em algumas modalidades do método de preparação do sal, a etapa de isolamento inclui adicionalmente filtrar a mistura.

[0163] Em algumas modalidades, o solvente usado no método de preparação do sal é um solvente orgânico miscível com água.

[0164] Em outras modalidades da invenção, o solvente usado no método de preparação do sal é selecionado a partir do grupo que consiste em acetona, acetonitrila, 1-butanol, ciclo-hexano, diclorometano, éter di- isopropílico, dimetilacetamida, dimetilsulfóxido, dioxano, etanol, acetato de etila, heptano, acetato de isopropila, éter metil-terc-butílico, metil-etil-cetona, metil-isobutil-cetona, metanol, 2-propanol, tolueno, tetra-hidrofurano, água e combinações deles.

[0165] O sal do Composto A com uma forma cristalina cineticamente favorecida será convertido em uma forma cristalina termodinamicamente mais estável sob condições apropriadas.

[0166] O Composto A pode ser preparado de acordo com o procedimento descrito em Bioorg. Med. Chem. Lett. 2015, 25, 236 (NPL 26) como Composto 40 em uma escala de grama (< 100 g). Uma preparação em menor escala também é estabelecida na Patente dos EUA número 8.653.063 (PL 1) como Exemplo 23. Exemplos

[0167] A presente invenção é explicada em mais detalhes a seguir, referindo-se ao Exemplo e Exemplos de Referência, que não devem ser entendidos como exemplos limitativos, mas apenas típicos. Abreviações

[0168] As seguintes abreviações são usadas nos Exemplos: AAT-730: 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)-1H-1,3- benzodiazol-5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol (Composto A) µL: microlitro µM: micromolar 1H NMR: espectroscopia de ressonância magnética nuclear de prótons ACN: acetonitrila API: ingrediente farmacêutico ativo, isto é, AAT-730 aq.: aquoso Aw: atividade de água DCM: diclorometano DIPE: éter di-isopropílico DMAc: N,N-dimetilacetamida DMSO: sulfóxido de dimetila DMSO-d6: dimetilsulfóxido-d6 DSC: calorimetria de varredura diferencial EDSA: ácido etano-1,2-dissulfônico eq.: equivalente EtOAc: acetato de etila EtOH: etanol evap: evaporação g: grama H2SO4: ácido sulfúrico HCl: ácido clorídrico HPLC: cromatografia líquida de alta eficiência IPA: álcool isopropílico, 2-propanol i-PrOAc: acetato de isopropila IR: infravermelho KF: Karl Fischer kg: quilograma L: litro M: molar MEK: metil-etil-cetona MeOH: metanol MeOH-d4: metanol-d4 (CD3OD) mg: miligrama MHz: megahertz MIBK: metil-isobutil-cetona min: minuto mL: mililitro mm: milímetro MSA: ácido metanossulfônico MTBE: éter metil-terc-butílico N/A: não disponível N2: nitrogênio N°: número pH: potência do hidrogênio, potencial do hidrogênio, expoente do íon hidrogênio pKa: constante de dissociação ácida, constante de acidez PO: orientação preferencial pptn: precipitação PS: deslocamento de pico PSD: detector sensível à posição PTFE: politetrafluoretileno p-TSA: ácido p-toluenossulfônico RH: umidade relativa rpm: rotações por minuto T, Temp: temperatura TFA: ácido trifluoroacético TG/DTA: análise térmica diferencial termogravimétrica TGA: análise gravimétrica térmica THF: tetra-hidrofurano UV: ultravioleta XRPD: difração de raios-X pelo método do pó Técnicas experimentais Difração de Raios X pelo Método do Pó (XRPD)

[0169] As análises de XRPD foram realizadas usando um difratômetro Panalytical Xpert Pro equipado com um tubo de raios-X de Cu e um sistema detector Pixcel. As amostras isotérmicas foram analisadas em modo de transmissão e mantidas entre filmes de polietileno de baixa densidade. O programa XRPD padrão foi usado (faixa de 3-40 graus 2-teta, tamanho da etapa 0,013 graus, tempo de contagem 22 seg, no máximo 5 min de tempo de execução). Os padrões de XRPD foram classificados usando o software HighScore Plus 2.2c.

Calorimetria de Varredura Diferencial (DSC)

[0170] As análises de DSC foram realizadas em um Calorímetro de Varredura Diferencial Perkin Elmer Jade. Amostras pesadas com precisão foram colocadas em panelas de alumínio frisadas. Cada amostra foi aquecida sob nitrogênio a uma taxa de 10 °C/minuto até um máximo de 150 °C. As temperaturas foram relatadas no início da transição para o 0,01 grau mais próximo. Observe-se que os traços de DSC dentro deste relatório podem conter integrações de pico automatizadas que calculam delta H (?H) de fusão. Onde múltiplos eventos térmicos são observados em temperaturas semelhantes, esses valores de delta H são propensos a erros significativos.

Análise Térmica Diferencial Termogravimétrica (TG/DTA)

[0171] As análises termogravimétricas foram realizadas em um instrumento Mettler Toledo TGA/DSC1 STARe. As amostras foram pesadas com precisão em uma panela de amostra de alumínio em uma balança analítica e inseridas no forno TG. O sinal de fluxo de calor foi estabilizado durante um minuto a 30 °C, antes do aquecimento a 300 °C em uma corrente de nitrogênio a uma taxa de 10 °C/minuto.

Espectroscopia de Ressonância Magnética Nuclear 1H (1H-NMR)

[0172] A análise de 1H NMR foi realizada em um instrumento Bruker de 400 ou 500 MHz em CD3OD (MeOH-d4) ou DMSO-d6. Os parâmetros instrumentais estão listados nos gráficos de espectro relevantes. Microscopia óptica e de fase quente

[0173] As análises de microscopia foram realizadas usando um estereomicroscópio Olympus BX51 com luz polarizada cruzada e uma placa compensadora vermelha de 1aordem. As imagens fotomicrográficas foram capturadas usando uma câmera digital ColorView IIIu e software de imageamento SynchronizIR V5.0 com ampliação de lente objetiva de x10. As análises de microscopia de fase quente foram realizadas usando um acessório de fase quente Linkam. As amostras sólidas foram aquecidas usando programas de temperatura predefinidos que incluíam a taxa de rampa selecionada, temperatura final e tempos de retenção de intervalo, se necessário para amostras individuais.

Análise volumétrica de Karl Fischer (KF) para teor de água

[0174] A análise volumétrica de KF foi realizada usando um titulador Mettler Toledo V30 KF. Uma quantidade pesada de amostra sólida foi adicionada diretamente à célula de KF. A solução foi agitada e o teor de água da amostra foi então determinado por titulação automática contra o titulante reagente de KF padrão.

Exemplo de Referência, Preparação de AAT-730 (Composto A)

[0175] 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)-1H-1,3- benzodiazol-5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol (AAT-730) foi preparado de acordo com o procedimento descrito na Literatura Não Patentária 25 (Bioorg. Med. Chem. Lett. 2015, 25: 236-240). O produto de reação sólido foi adicionalmente purificado pelo seguinte procedimento de HPLC preparativa.

[0176] Os sólidos (22,8 g) foram dissolvidos em 10% de ACN contendo 0,1% de TFA em água (460 mL) e purificados por HPLC usando sílica ODS (Daiso SP-120-40/60 ODS-B, 110 x 1000 mm, 10 L de volume, OSAKA SODA CO.,LTD., Osaka, Japão), eluição de gradiente com 0,1% de sistema TFA/ACN (modo ascendente de ACN de 9% a 15%) a uma taxa de fluxo de 200 mL/min e detecção UV a 220 nm. As frações coletadas (24 L) foram evaporadas para remover ACN sob de 30 °C. Então, à mistura aquosa concentrada foi adicionado 0,5% de amônia aquosa (2 L) e clorofórmio (1 L) e a camada orgânica foi separada. A camada aquosa foi extraída com clorofórmio (1 L). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura, secas com sulfato de sódio e concentradas para produzir um resíduo. O resíduo foi seco sob pressão reduzida à temperatura ambiente durante a noite para gerar 12,4 g de AAT-730 (Lote n° 033-190725-1) como um óleo incolor.

[0177] O produto (12,4 g) foi recristalizado a partir de uma mistura de acetato de isopropila (15 mL) e n-heptano (30 mL) para fornecer 10,79 g de AAT-730 (Lote n° 33-13) como sólidos brancos.

Exemplo 1, Forma de base livre de AAT-730 (Composto A)

[0178] A forma de base livre de AAT-730 foi caracterizada por XRPD, microscopia de luz polarizada, TG/DTA, DSC e 1H NMR. A estabilidade também foi testada em uma faixa de condições de umidade relativa elevada por 7 dias. A solubilidade da base livre AAT-730 foi estimada em vários sistemas de solventes.

Exemplo 1-1, Caracterização de AAT-730 (Composto A)

[0179] O padrão de XRPD obtido para AAT-730 é mostrado na Figura 2-1. O padrão XRPD é indicativo de um material cristalino.

[0180] A Análise Termogravimétrica/Térmica Diferencial (TG/DTA) foi realizada para determinar o perfil térmico e as % de mudanças de peso associadas do AAT-730 (Figura 2-2).

[0181] Perda de peso de 0,05% foi observada de 30 °C a 225 °C, sugerindo teor mínimo de umidade ou solvente, indicando que AAT-730 é um material anidro. Uma segunda perda de peso a temperaturas maiores que aproximadamente 250 °C pode corresponder ao início da decomposição do material. Uma endotermia de fusão foi observada à temperatura inicial de 102,23 °C.

[0182] O termograma DSC obtido para AAT-730 a 10 °C/min é mostrado na Figura 2-3 e o início da fusão é de 100,67 °C.

[0183] O espectro de 1H NMR de AAT-730 analisado (Figura 2-4 e Figura 2-5) em conformidade com a estrutura molecular e o solvente não foi detectado.

[0184] A microscopia de luz polarizada de AAT-730 mostrou que o material é composto de partículas cristalinas de distribuição de tamanho de partícula variável. O hábito de cristal parece ser ripas, como mostrado na fotomicrografia (Figura 2-6).

[0185] A base livre de AAT-730 foi estressada a umidade relativa elevada e temperatura, como mostrado na Tabela 1-2. A análise de XRPD das amostras pós-tensão (Figura 2-7) mostrou uma mudança na forma para o hidrato a 40 °C/75% RH e a 70 °C/75% RH. O material permaneceu como um anidrato a 25 °C/60% RH. A análise de 1H NMR (Figura 2-8, Figura 2-9 e Figura 2-10) não mostrou nenhuma mudança. Tabela de experimentos de estresse por umidade [Tabela 1-2] Conclusões da caracterização 1) A análise de XRPD indicou que AAT-730 era um material cristalino e a microscopia de luz polarizada confirmou isso. 2) Os dados de TG/DTA mostraram perda de peso insignificante de 30 a 225°C, sugerindo umidade mínima ou teor de solvente residual e mostra que AAT-730 permanece termicamente estável até 250 °C. 3) Estudos de taxa de calor por DSC indicaram um início de fusão de 100,7 °C. 4) Espectroscopia de 1H NMR em conformidade com a estrutura molecular e nenhum solvente foi detectado. 5) As análises de XRPD e 1H NMR de amostras de base livre AAT-730 após umidade relativa elevada e tensão de temperatura sugeriram que o anidrato havia se convertido em um hidrato a 40 °C/75% RH e 70 °C/75% RH.

Exemplo 1-2, Estimativa de solubilidade

[0186] Alíquotas do solvente de teste foram adicionadas a uma amostra pesada com precisão (no máximo 25 mg) de AAT-730 à temperatura ambiente. Os volumes das alíquotas foram tipicamente de 20 a 200 µL. A dissolução completa do material de teste foi determinada por inspeção visual. A solubilidade foi estimada a partir desses experimentos com base no solvente total usado para fornecer dissolução completa. Deve-se observar que a solubilidade real pode ser maior que o valor calculado por causa do uso de alíquotas de solventes que eram grandes demais ou devido a uma taxa de dissolução lenta.

[0187] Se a dissolução não ocorreu após a última alíquota de solvente ter sido adicionada (tipicamente no máximo 40 volumes de solvente), a amostra foi submetida a dois ciclos do seguinte regime de ciclagem de temperatura na estação de cristalização Clarity:

[0188] Aquecer de 20 °C a 3 °C do ponto de ebulição do solvente (ou 100 °C, o que for mais baixo) a 0,5 °C/minuto.

[0189] Resfriar a 20 °C a 0,2 °C/minuto.

[0190] Velocidade de agitação 800 rpm.

[0191] A partir dos dados de transmissão de infravermelho (IR) dos frascos de amostra, os eventos de dissolução e precipitação foram registrados como o ponto de transmissão completa de IR e o início da turbidez por IR, respectivamente.

[0192] (Observação: a sonda IR não estava funcionando corretamente; não forneceu a temperatura de dissolução de MIBK)

[0193] As amostras foram mantidas à temperatura ambiente por pelo menos 18 horas para maximizar a chance de precipitação. Quaisquer sólidos recuperáveis foram analisados por XRPD. Os valores de solubilidade para AAT-730 foram expressos como uma faixa e arredondados para o número inteiro mais próximo.

Solubilidade estimada de AAT-730 (Composto A)

[0194] A solubilidade de AAT-730 foi estimada em 20 sistemas de solventes usando o método de adição de alíquotas. Estes incluíram 4 misturas aquosas/orgânicas em composições. AAT-730 tinha uma solubilidade de > 25 mg/mL em 11 dos solventes e 4 das misturas aquosas à temperatura ambiente. Os dados de solubilidade obtidos são mostrados na Tabela 1-3. AAT-730 tinha uma solubilidade aquosa de aproximadamente 367-514 mg/mL. Estimativas de solubilidade de AAT-730 a 20 °C [Tabela 1-3]

Conclusões da triagem de solventes

[0195] AAT-730 teve uma solubilidade maior ou igual a 25 mg/mL em 15 dos solventes e misturas aquosas testadas. Tinha uma solubilidade aquosa de aproximadamente 367-514 mg/mL.

Exemplo 2, triagem polimórfica de base livre de AAT-730 (Composto A)

[0196] Uma triagem polimórfica focada foi realizada na base livre de AAT-730, cujo objetivo era investigar a paisagem polimórfica da base livre de AAT-730. A abordagem foi gerar sólidos sob uma ampla e diversificada gama de condições de nucleação, projetadas para imitar as condições do processo e os solventes usados durante o desenvolvimento e a formulação. O material de partida usado neste estudo foi AAT-730 (Lote n° 33-13).

[0197] Todos os sólidos dos experimentos de cristalização foram analisados por XRPD e os padrões resultantes comparados aos exibidos pelo material de partida. Novos padrões de XRPD foram atribuídos a um descritor alfabético em ordem de aparecimento (Padrão A, Padrão B etc.). Quando material suficiente estava disponível, análises adicionais (por exemplo, 1H NMR ou TGA) foram conduzidas em sólidos com novos padrões de XRPD para permitir a atribuição provisória do novo padrão como um polimorfo, solvato, hidrato, degradante ou mistura deles.

Métodos de triagem de polimorfos do Exemplo 2 Método 2-1, Evaporação lenta

[0198] Uma solução de AAT-730 foi preparada em cada solvente e filtrada através de um filtro de PTFE de 0,2 µm. A solução filtrada foi evaporada em um exaustor à temperatura ambiente em um frasco coberto com folha de alumínio perfurada. Solventes de alta ebulição (ponto de ebulição > 100 °C) foram evaporados sob um fluxo de nitrogênio. Os sólidos resultantes foram analisados por XRPD.

Método 2-2, Precipitação de colisão

[0199] AAT-730 (20 mg) foi dissolvido em solvente (100 a 400 µL) e adicionado a um frasco contendo antissolvente (2,5 a 10 volumes) à temperatura ambiente e a mistura foi agitada durante a noite. Em alguns casos, um óleo foi gerado e as amostras foram aquecidas até 40 °C e/ou antissolvente adicional foi adicionado. Onde a precipitação não foi observada durante a noite, as amostras foram resfriadas a 5 °C para incentivar a precipitação.

Método 2-3, Experimentos de pasta fluida

[0200] AAT-730 suficiente (Lote n° 33-13 ou géis de experimentos anteriores) foi adicionado a um dado solvente até que os sólidos não dissolvidos permanecessem na temperatura desejada (5, 20 ou 40 °C). O frasco foi vedado e a pasta fluida foi mantida à temperatura selecionada e agitada por agitação magnética por 4 a 7 dias ou aproximadamente 2 horas para géis. Os sólidos foram isolados por centrifugação e secos ao ar antes da análise por XRPD.

Método 2-4, Resfriamento lento

[0201] AAT-730 (Lote n° 33-13, no máximo 20 mg) e solvente (100 a 1000 µL) foram adicionados a um frasco e agitados para formar uma solução quase saturada a 60 °C (o solvente foi adicionado em alíquotas). As soluções foram resfriadas sem agitação a 0,2 °C/min até uma temperatura final de 5 °C. Os experimentos que precipitaram sólidos foram filtrados e secos ao ar antes da análise por XRPD.

Método 2-5, Tensão de vapor

[0202] Aproximadamente 20 mg de AAT-730 amorfo foram preparados por resfriamento brusco, conforme detalhado no Exemplo 2-1. Cada frasco foi colocado sem vedação dentro de um recipiente vedado maior contendo 500 µL do solvente selecionado. Após até 7 dias, as amostras foram removidas e analisadas por XRPD.

Método 2-6, Tensão de umidade

[0203] Aproximadamente 20 mg de AAT-730 amorfo foram preparados por resfriamento brusco, conforme detalhado no Exemplo 2-1. Cada frasco foi colocado sem vedação dentro das seguintes câmaras de umidade relativa (armários vedados com condições de umidade relativa controladas por soluções salinas super saturadas) por 7 dias antes da análise por XRPD: Câmara 1 - 23% RH Câmara 2 - 59% RH Câmara 3 - 76% RH Câmara 4 - 98% RH

Método 2-7, Ciclagem de temperatura

[0204] O solvente de teste (100 µL) foi adicionado a uma amostra de AAT-730 (no máximo 20 mg) à temperatura ambiente e 10 ciclos do seguinte programa de temperatura foram realizados usando a estação de cristalização Clarity: Aquecer de 20 °C a 60-80 °C a 1 °C/min (dependendo do ponto de ebulição do solvente) Resfriamento a 20 °C a 1 °C/min Velocidade de agitação - 600 rpm

Método 2-8, Sonicação de pastas

[0205] AAT-730 (no máximo 20 mg) foi adicionado a um frasco com 10 µL do solvente selecionado para formar uma pasta. A mistura foi sonicada a 50% de intensidade usando um processador ultrassônico Cole-Parmer 130 Watt usando um programa pulsado (3 ciclos - 30 segundos ligado e 30 segundos desligado). Nos casos em que os sólidos se dissolveram à temperatura ambiente, a amostra foi deixada sem tampa para evaporar. As pastas úmidas recuperadas desses experimentos foram analisadas usando XRPD.

Método 2-9, Tensão térmica

[0206] Aproximadamente 20 mg de várias formas de AAT-730 foram adicionados a um frasco, lavados com nitrogênio, vedados e colocados em um bloco aquecedor a 40, 60 ou 80 °C por tempos variados antes da análise por XRPD.

Método 2-10, Difusão de vapor

[0207] Uma solução de AAT-730 foi preparada e o frasco foi colocado sem vedação dentro de frascos maiores, que continham uma alíquota de antissolvente. Os frascos maiores foram selados e deixados intactos sob condições ambientais por até 7 dias. Os sólidos foram isolados por centrifugação e secos ao ar antes da análise por XRPD. Ciclo-hexano (500 µL) foi adicionado a frascos que continham soluções, e estas foram agitadas por 16 horas antes do isolamento de sólidos e análise por XRPD.

Exemplo 2-1, Geração de AAT-730 amorfo (Composto A, resfriamento brusco)

[0208] AAT-730 amorfo foi gerado a partir de resfriamento brusco para triagem. AAT-730 (20 mg) foi adicionado a um frasco de HPLC e lavado com N2. Isso foi aquecido a 120 °C por até 5 minutos e foi rapidamente imerso em uma mistura de nitrogênio líquido/acetona para formar AAT-730 amorfo. O material amorfo resultante foi confirmado visualmente por microscopia.

Exemplo 2-2, Evaporação lenta

[0209] A evaporação lenta das soluções AAT-730 foi conduzida conforme descrito no Método 2-1. Os resultados estão mostrados na Tabela 2-1. Os sólidos foram isolados a partir de quatro experimentos de evaporação. O material de Padrão A foi isolado a partir de DCM e EtOAc e o material de Padrão C foi isolado a partir de acetona. O material de Padrão B foi isolado da água, embora algum conteúdo amorfo tenha sido observado. Todos os outros experimentos geraram géis e foram suspensos em ciclo- hexano (Tabela 2-3). Materiais únicos foram adicionalmente caracterizados e são adicionalmente discutidos nos Exemplos 2-11 a 2-14. Resultados da triagem de experimentos de evaporação lenta [Tabela 2-1] PO = orientação preferencial

Exemplo 2-3, Experimentos de precipitação de colisão

[0210] Experimentos de precipitação de colisão foram realizados conforme detalhado no Método 2-2. Solventes e antissolventes quimicamente diversos foram selecionados e os resultados são mostrados na Tabela 2-2. Em quatro casos, a precipitação não foi observada. Os experimentos que geraram sólidos foram confirmados como material de Padrão A, Padrão B e Padrão C por XRPD e estes são discutidos adicionalmente nos Exemplos 2-11 a 2-14. Precipitação de soluções de AAT-730 saturadas com antissolventes [Tabela 2-2]

Exemplo 2-4, Experimentos de pasta fluida

[0211] As suspensões de AAT-730 em vários solventes foram mantidas a 5, 20 e 40 °C por 5 a 7 dias antes do isolamento e análise por XRPD (Tabela 2-3), conforme detalhado no Método 2-3. Os materiais de Padrão B e do Padrão C foram isolados a partir de uma faixa de solventes e temperaturas na forma pura com o Padrão B + C também isolado a partir de alguns experimentos. Uma forma única, o Padrão D foi isolado a partir da reciclagem de um gel em ciclo-hexano, no entanto, este foi isolado como uma mistura com o material de Padrão A. Nenhuma análise adicional foi realizada nessa mistura. Resultados de triagem a partir de experimentos de pasta fluida [Tabela 2-3]

Exemplo 2-5, Resfriamento lento

[0212] O aumento lento da supersaturação permite que formas mais estáveis se nucleem. Uma temperatura final subambiente também sonda solvatos estáveis a temperaturas tipicamente acessadas durante a cristalização de resfriamento em escala de planta. Os experimentos foram realizados conforme detalhado no Método 2-4. A Tabela 2-4 mostra os resultados da triagem de experimentos de resfriamento lento. O material de Padrão C foi isolado da maioria dos experimentos. Uma mistura de Padrão C + A com orientação preferencial foi isolada a partir de EtOAc. A cristalização não foi observada a partir de um experimento com MIBK. Resultados de triagem de experimentos de resfriamento lento [Tabela 2-4] PO = orientação preferencial

Exemplo 2-6, Tensão de vapor e umidade

[0213] O material amorfo de raios-X gerado a partir de resfriamento brusco foi exposto ao ar saturado em vapor de solvente e várias condições de umidade controladas por até 7 dias antes da análise por XRPD, conforme detalhado no Método 2-5 e no Método 2-6. Os resultados são mostrados na Tabela 2-5. Como o material amorfo perdeu a ordem a longo alcance, ele está em um estado de alta energia. A exposição ao vapor plastifica o sólido, permitindo mobilidade molecular limitada e é, portanto, um excelente método de geração de solvatos e hidratos metaestáveis. Várias misturas de formas foram isoladas a partir desses experimentos (Padrões A+B, A+C e B+C). O material de Padrão C puro de fase foi isolado a partir da maioria desses experimentos de tensão. O material de Padrão B foi isolado a partir da tensão a 98% de umidade relativa. O material de Padrão A foi isolado a partir de três experimentos, mas com algum conteúdo amorfo presente a partir da tensão em ciclo-hexano, com deslocamento de pico da tensão em MTBE e com um pico extra presente na tensão em tolueno. Resultados de experimentos de tensão por vapor e umidade [Tabela 2-5] PO = orientação preferencial, PS = deslocamento de pico

Exemplo 2-7, Ciclagem de temperatura

[0214] As amostras foram submetidas ao programa de ciclagem de temperatura descrito no Método 2-7 e os resultados são mostrados na Tabela 2-6. O material de Padrão C foi isolado da maioria dos experimentos. Uma mistura do Padrão A + C foi isolada a partir da ciclagem de IPA.

[0215] Resultados da triagem de experimentos de ciclagem de temperatura [Tabela 2-6]

Exemplo 2-8, Sonicação

[0216] Os experimentos de sonicação foram realizados conforme detalhado no Método 2-8. Os resultados são mostrados na Tabela 2-7. A maioria dos experimentos gerou material de Padrão C. O material de Padrão B foi isolado a partir de um experimento com água. Uma mistura de formas, o Padrão A + C foi isolado a partir de um experimento com MTBE. As soluções foram isoladas a partir de quatro experimentos e nenhum trabalho adicional foi realizado nessas amostras. Resultados da triagem de experimentos de sonicação [Tabela 2-7]

Exemplo 2-9, Tensão térmica

[0217] AAT-730 foi termicamente tensionado a 40 ou 60°C por vários dias em um frasco vedado e analisado por XRPD conforme detalhado no Método 2-9. Os resultados são mostrados na Tabela 2-8. AAT-730 (Lote n° 33-13), Padrão A (isolado durante a triagem) e Padrão B eram fisicamente instáveis ao estresse nas temperaturas testadas. O Padrão C permaneceu fisicamente estável à tensão a 40 °C. O material de Padrão B também foi tensionado a 80 °C. Resultados da triagem a partir de experimentos de tensão térmica [Tabela 2-8]

Exemplo 2-10, Difusão de vapor

[0218] Experimentos de difusão de vapor foram realizados conforme detalhado no Método 2-10. Os resultados são mostrados na Tabela 2-9. Nenhum novo padrão foi isolado. Resultados da triagem de experimentos de difusão de vapor [Tabela 2-9]

Conclusões da triagem de polimorfos

[0219] Aproximadamente 100 experimentos foram realizados usando técnicas à base de solvente e não solvente. Quatro sólidos cristalinos (Tabela 2-10) foram observados durante esse estudo, incluindo AAT-730 (Lote n° 3313). O material amorfo também foi gerado a partir do resfriamento brusco de AAT-730. Resumo das formas físicas observadas durante este estudo [Tabela 2-10]

Exemplo 2-11, Preparação e caracterização de AAT-730 (Composto A), Padrão A

[0220] O material de Padrão A de AAT-730 foi isolado a partir de uma variedade de experimentos de triagem, como mostrado na Tabela 2-11. O material de Padrão A é um sólido cristalino e o difratograma de XRPD é mostrado na Figura 3-1. A análise de TG/DTA (Figura 3-2) sugere que o material de Padrão A é um anidrato com um início de fusão de até 99,5 °C. O material de Padrão A de tensão térmica a 40 °C produziu uma mistura do Padrão A + Padrão C sugerindo que o Padrão A é termicamente instável e se converte no Padrão C. Experimentos de triagem que renderam sólidos do Padrão A [Tabela 2-11]

Exemplo 2-12, Preparação e caracterização de AAT-730 (Composto A), Padrão B

[0221] O material de Padrão B de AAT-730 foi isolado a partir de uma variedade de experimentos usando vários solventes e técnicas, conforme mostrado na Tabela 2-12. O traço de XRPD é mostrado na Figura 3-3 e o material era cristalino. TG/DTA (Figura 3-4) mostrou uma perda de peso de no máximo 4,2% p/p entre aproximadamente 40 e 120 °C, o que correspondeu a no máximo 1 mol de água, sugerindo que o Padrão B era um monohidrato. O material de Padrão B era fisicamente instável à tensão a 40 e 60 °C, convertendo-se no Padrão C e no Padrão A, respectivamente, como mostrado na Figura 3-5. Experimentos de triagem que renderam sólidos do Padrão B [Tabela 2-12]

Exemplo 2-13, Preparação e caracterização de AAT-730 (Composto A), Padrão C

[0222] O material de Padrão C de AAT-730 foi isolado a partir de uma gama de experimentos usando vários solventes e técnicas, conforme mostrado na Tabela 2-13. O traço de XRPD é mostrado na Figura 3-6 e o material era cristalino. Os sólidos do padrão C foram analisados por 1H NMR (Figura 3-8) e análises de TG/DTA (Figura 3-7). A análise de TG/DTA mostrou no máximo 0,4% de perda de peso entre aproximadamente 30 e 200 °C, o que provavelmente foi devido a uma pequena quantidade de solvente residual. O espectro de 1H NMR confirmou a estrutura molecular e uma pequena quantidade de ciclo-hexano estava presente no espectro sugerindo que o material de Padrão C era um anidrato com um ponto de fusão muito semelhante ao material de Padrão A. O início da fusão do material de Padrão C, determinado por TG/DTA é de até 100,8 °C. Experimentos de triagem que renderam sólidos de Padrão C [Tabela 2-13]

Exemplo 2-14, Preparação e caracterização de AAT-730 (Composto A), Padrão D

[0223] O material de Padrão D foi isolado a partir de um experimento de pasta fluida (40°C) em ciclo-hexano como uma mistura com o Padrão A. O difratograma é mostrado na Figura 3-9 e era cristalino. Como o Padrão D foi isolado como uma mistura, nenhuma análise adicional foi realizada. Conclusões 6) A análise de XRPD indicou que AAT-730 (Lote No. 33-13) era uma mistura de duas formas cristalinas, Padrão A e Padrão C. 7) Aproximadamente 100 experimentos foram realizados usando técnicas à base de solvente e não solvente. Quatro padrões de XRPD cristalinos (Tabela 2-10) foram observados durante esse estudo, incluindo AAT-730 (Lote No. 33-13). O material amorfo também foi gerado a partir do resfriamento brusco de AAT-730. 8) Os materiais dos Padrões A e C parecem ser anidratos cristalinos com pontos de fusão semelhantes. O Padrão C parece ser a mais estável dessas formas, pois foi isolado da maioria dos experimentos de pasta fluida partindo de AAT-730 (Lote n° 33-13). 9) O material de Padrão B de AAT-730 é um monohidrato que desidrata no aquecimento do material de Padrão A ou de Padrão C.

Exemplo 3, triagem de sal

[0224] O material de partida usado neste estudo foi AAT-730 (Lote n° 33-13). A Tabela 3-1 mostra detalhes dos materiais e reagentes usados na triagem de sal. A lista foi escolhida com base nos seguintes fatores: pKa - AAT-730 tem valores de pKa de 7,1 e 2,1 e os contra-íons foram escolhidos com uma diferença de pKa de > 2 unidades de pKa para formação de sal.

[0225] Ácidos que são farmaceuticamente aceitáveis, geralmente de Classe 1, mas alguns formadores de sal Classe 2 também foram incluídos, pois podem produzir boas propriedades de sal e foram usados anteriormente em drogas comercializadas.

[0226] Na fase de triagem, foi escolhida uma gama de diferentes tipos de contra-íons: ácidos minerais, ácidos carboxílicos, ácidos aromáticos, mono, di e tri-ácidos, diferentes comprimentos de cadeia de carbono, ácidos cíclicos, ácidos quirais e não quirais, pois as propriedades do contra-íon afetam as propriedades dos sais.

[0227] Geralmente, um contra-íon de baixo peso molecular é preferencial, no entanto, neste caso, o aumento no peso molecular pode ser um benefício devido ao baixo ponto de fusão do API. Detalhes dos ácidos utilizados na triagem [Tabela 3-1]

[0228] A abordagem de triagem de sal foi gerar sais a partir de experimentos de precipitação com 24 ácidos e testar a estabilidade de quaisquer sais para umidade relativa elevada. A análise de TG/DTA também foi realizada em quaisquer sais estáveis para determinar o ponto de fusão.

[0229] Todos os sólidos dos experimentos de formação de sal foram analisados por XRPD e os padrões resultantes comparados aos exibidos pelo material de partida. Quando material suficiente estava disponível, análises adicionais (por exemplo, 1H NMR ou TGA) foram conduzidas em sólidos com novos padrões de XRPD para permitir a atribuição provisória do novo padrão como um sal.

Métodos de triagem de sal do Exemplo 3

[0230] Os experimentos foram realizados em uma escala de no máximo 30 mg com estequiometria 1:1, 1:0,5 e 1:2 (base livre de AAT-730: formador de sal). Soluções da base livre no solvente escolhido foram adicionadas a qualquer uma das soluções do formador de sal ou, se o sal não era solúvel no solvente, pastas dos formadores de sal. Quaisquer sólidos que precipitaram foram recuperados e analisados por análise de XRPD para determinar se o sólido era cristalino.

Método 3-1, Preparação da solução-mãe de AAT-730 (Composto A) em THF

[0231] O AAT-730 (1,059 g) foi adicionado a um balão volumétrico de 5 mL, dissolvido em THF e diluído em volume com THF. A concentração da solução-mãe foi de até 1 M.

Método 3-2, Preparação da solução-mãe de AAT-730 (Composto A) em THF/água

[0232] AAT-730 (1,058 g) foi adicionado a um balão volumétrico de 5 mL, dissolvido em THF/água (9/1) e diluído em volume com THF/água (9/1). A concentração da solução-mãe foi de até 1 M.

Método 3-3, Experimentos de precipitação

[0233] O ácido necessário (1 equivalente molar) foi adicionado a cada frasco de HPLC e a solução-mãe de API (contendo 30 mg de API) foi adicionada. As misturas foram agitadas a 300 rpm (temperatura ambiente) por até 16 horas. Quaisquer sólidos que precipitaram foram isolados por centrifugação, o solvente, decantado e sólidos, secos com tiras finas de papel de filtro antes da análise por XRPD. Todas as soluções foram evaporadas até a secura e os sólidos, analisados por XRPD. Os géis foram triturados ou submetidos a ciclagem de temperatura em MTBE.

Método 3-4, Experimentos de pasta fluida/precipitação

[0234] API (30 mg), co-formador de ácido (1 mol. eq.) e etanol (300 µL) foram adicionados aos frascos de HPLC e agitados a 40 °C por até 16 horas. Os sólidos foram recuperados por centrifugação, decantados com solvente e secos com tiras finas de papel de filtro antes da análise por XRPD. As soluções foram evaporadas até a secura.

Método 3-5, Trituração de géis em MTBE ou EtOAc

[0235] Os géis isolados a partir dos experimentos de triagem foram triturados em MTBE ou EtOAc para induzir a precipitação. MTBE ou EtOAc (200 µL) foi adicionado ao gel e agitado a 40 °C por até 3 horas antes do resfriamento até a temperatura ambiente e agitação por até 48 horas. Todos os sólidos foram isolados por centrifugação, o solvente, decantado e sólidos, secos com tiras finas de papel de filtro antes da análise por XRPD. Todas as soluções foram evaporadas até a secura.

Método 3-6, Ciclagem de temperatura de géis em MTBE

[0236] Os géis isolados a partir dos experimentos de triagem foram submetidos a ciclagem de temperatura em MTBE de acordo com o seguinte programa: Aquecimento de 20 °C a 40 °C a 0,2 °C/minuto. Resfriamento a 20 °C a 0,1 °C/minuto. Velocidade de agitação 400 rpm.

[0237] Os sólidos foram recuperados por centrifugação, o solvente, decantado e sólidos, secos com tiras finas de papel de filtro antes da análise por XRPD.

Método 3-7, Moagem Planetária

[0238] AAT-730 (no máximo 30 mg), co-formador de ácido (1 mol. eq.) e acetato de isopropila (/-PrOAc, 20 µL) foram adicionados a frascos com 3 esferas de moagem de aço. Os frascos foram selados e o conteúdo moído usando um moinho planetário Fritsch Pulverisette 5 (30 repetições de 20 minutos de moagem a 400 rpm e 20 minutos de pausa). O material resultante foi analisado usando XRPD.

Método 3-8, Tensão de umidade de possíveis sais

[0239] Amostras dos sais suspeitos foram adicionadas aos frascos de HPLC (se material suficiente estava disponível, o peso foi registrado). As amostras foram colocadas em uma câmara de RH a 40°C. A umidade relativa da câmara foi controlada por uma solução de sal supersaturada. As amostras foram removidas após 1 semana e qualquer deliquescência foi registrada.

Método 3-9, Solubilidade aquosa

[0240] Alíquotas da água foram adicionadas a uma amostra pesada com precisão (no máximo 5 mg) de AAT-730 à temperatura ambiente. Os volumes das alíquotas foram tipicamente de 10 a 20 µL. A dissolução completa do material de teste foi determinada por inspeção visual. A solubilidade foi estimada a partir desses experimentos com base no solvente total usado para fornecer dissolução completa.

Exemplo 3-1, Experimentos de precipitações em THF

[0241] Experimentos de precipitação em THF foram realizados conforme descrito no Método 3-3 e os resultados são mostrados na Tabela 3-2. A maioria dos experimentos rendeu géis após a evaporação. Sólidos/géis isolados a partir de experimentos com ácidos cítrico, L-málico e L-tartárico eram amorfos por XRPD. Essas amostras foram trituradas em MTBE para tentar induzir a cristalização (Método 3-5 e Exemplo 3-3). Os sólidos isolados a partir dos experimentos com ácido L-aspártico e ácido L- glutâmico eram compostos de co-formador de ácido e a formação de sal não ocorreu. Os sólidos que exibem novos padrões de XRPD foram isolados a partir dos experimentos com ácido fumárico, EDSA, ácido maleico e MSA e estes são possíveis sais. Esses sólidos foram adicionalmente analisados e são discutidos nos Exemplos de 3.8 a 3.18. Resultados de experimentos de formação de sal em THF [Tabela 3-2] *estes inicialmente pareceram conter sólidos, mas na preparação da amostra de XRPD foram determinados como sendo géis

Exemplo 3-2, Experimentos de precipitação em THF/água

[0242] Experimentos de precipitação em THF/água foram realizados conforme detalhado no Método 3-3 e os resultados são mostrados na Tabela 3-3. Os géis foram isolados a partir de quase todos os experimentos de triagem e isso pode ser devido à presença de água. Como a formação de sal pode ter ocorrido, esses géis foram submetidos a ciclagem de temperatura em MTBE para tentar induzir a cristalização (Método 3-6 e Exemplo 3-4).

[0243] Os sólidos que exibem novos padrões de XRPD foram isolados a partir dos experimentos com ácido L-lático, ácido maleico, MSA e ácido succínico e estes são possíveis sais. Estes foram adicionalmente analisados e são discutidos nos Exemplos de 3.8 a 3.18. Resultados de experimentos de formação de sal em THF [Tabela 3-3]

Exemplo 3-3, Trituração de géis em MTBE

[0244] Os géis isolados a partir dos experimentos de precipitação em THF foram triturados em MTBE conforme descrito no Método 3-5 e os resultados são mostrados na Tabela 3-4. Os sólidos foram isolados a partir de ácido glutárico, ácido L-lático, ácido sulfúrico e ácido L-tartárico e estes foram analisados por análise de XRPD. Os sólidos que exibem padrões de XRPD cristalinos foram analisados adicionalmente (Exemplos 3.8 a 3.18). Géis ou sólidos amorfos foram isolados dos experimentos restantes e, como estes não poderiam ser facilmente cristalizados, não se esperava que fossem úteis para escalonamento e caracterização adicionais dentro deste projeto. Resultados da triagem da ciclagem de temperatura de géis isolados a partir de THF [Tabela 3-4]

Exemplo 3-4, Ciclagem de temperatura de géis

[0245] Os géis isolados a partir de experimentos de triagem em THF/água foram submetidos a ciclagem de temperatura em MTBE conforme mostrado no Método 3-6 e os resultados são mostrados na Tabela 3-5. Todos os sólidos com novos padrões de XRPD cristalinos foram analisados adicionalmente e isso é mostrado nos Exemplos de 3.8 a 3.18. A formação de sal não ocorreu com ácidos L-aspárticos ou L-glutâmicos. Géis ou sólidos amorfos foram isolados dos experimentos restantes e, como estes não poderiam ser facilmente cristalizados, não se esperava que fossem úteis para escalonamento e caracterização adicionais dentro deste projeto. Resultados da triagem da ciclagem de temperatura de géis isolados a partir de THF/água [Tabela 3-5]

Exemplo 3-5, Experimentos de triagem em etanol ou dioxano

[0246] Os experimentos de triagem foram realizados em EtOH ou dioxano, conforme descrito no Método 3-3 e os resultados são mostrados na Tabela 3-6 e na Tabela 3-7. Esses experimentos foram realizados usando co-formadores de ácidos que não resultaram na formação de sal cristalino a partir das reações de precipitação em THF ou THF/água (Exemplo 3-1 e Exemplo 3-2). O dioxano foi usado para os experimentos com ácidos sulfônicos. Possíveis sais de glicolato, HCl e L-lactato de AAT-730 foram isolados. Os experimentos que renderam géis foram triturados em EtOAc e os resultados são mostrados na Tabela 3-8, os sais de acetato e succinato foram isolados. Quaisquer sais suspeitos que foram isolados são adicionalmente analisados nos Exemplos de 3.8 a 3.18. Resultados de experimentos de formação de sal em EtOH [Tabela 3-6] Resultados de experimentos de formação de sal em dioxano [Tabela 3-7] Resultados da trituração de géis em EtOAc [Tabela 3-8]

Exemplo 3-6, Moagem planetária

[0247] Os experimentos de triagem foram realizados usando o moinho planetário (Método 3-7) e esses resultados são mostrados na Tabela 3-9. Esse método foi escolhido para tentar eliminar a formação de géis, pois apenas uma pequena quantidade de solvente foi usada. A formação de sal não foi observada por essa técnica e a moagem pareceu fazer com que o AAT-730 se tornasse ligeiramente desordenado à medida que o alargamento do pico foi observado no difratograma (Figura 4-1). Resultados da triagem por moagem planetária [Tabela 3-9]

Exemplo 3-7, Experimentos com estequiometria alterada

[0248] Alguns dos co-formadores de ácidos tinham valores de pKa que eram adequados para formar hemi ou bis-sais e experimentos foram realizados usando esses ácidos. Os equivalentes molares usados são mostrados na Tabela 3-10. Os sólidos cristalinos foram isolados a partir dos experimentos usando 0,5 mol. eq. de EDSA, mas estes pareciam ser compostos de polimorfos da base livre e a formação de sal não ocorreu com 0,5 mol. eq. de EDSA. O sal de EDSA formado com 2 mol. eq. de EDSA rendeu sólidos com o mesmo padrão de XRPD que o sal de mono-EDSA. Dois sais cristalinos diferentes foram isolados a partir das reações com HCl e estes podem ser os sais mono e bis-HCl, no entanto, a estequiometria não pode ser determinada por 1H NMR. A formação de sal com MSA rendeu o sal bis-MSA e isso é discutido no Exemplo 3-16. O sal isolado com ácido glutárico tem o mesmo padrão de XRPD que o sal isolado com 1 mol. eq. de ácido glutárico e é um sal de monoglutarato (Exemplo 3-17). Um sólido foi isolado a partir do experimento com 2 mol. eq. de ácido sulfúrico e este pode ser um sulfato. Experimentos de triagem com estequiometria alternativa [Tabela 3-10] *IS = amostra insuficiente para análise de XRPD ** O padrão de XRPD do Padrão A de sal de HCl de AAT-730 é referido como Padrão 1 nos Exemplos 5 e 6.

Conclusões da triagem de sal

[0249] 1) Foram realizados aproximadamente 175 experimentos de triagem de sal. Catorze sais possíveis de 11 formadores de sal diferentes foram isolados conforme listado na Tabela 3-11.

[0250] 2) Estes foram tensionados a 40 °C/75% RH por 1 semana e visualmente verificados quanto a deliquescência. Uma análise adicional por 1H NMR, TGA e solubilidade aquosa foi realizada onde havia material suficiente disponível. Resumo dos sais observados durante esse estudo [Tabela 3-11]

Exemplo 3-8, Caracterização de acetato de AAT-730 (Composto A)

[0251] Um possível acetato (sal de ácido acético) de AAT-730 foi isolado após trituração em MTBE do gel isolado a partir da reação de AAT- 730 e ácido acético em THF/água ou de trituração em EtOAc após reação em etanol. Os sólidos foram analisados por análises de XRPD (Figura 4-2) e 1H NMR (Figura 4-3) e mostrados como sendo cristalinos por análise de XRPD. O espectro de 1H NMR sugeriu que o material era um sal não estequiométrico. O sal ganhou no máximo 18% p/p sob tensão a 40 °C/75% RH.

Exemplo 3-9, Caracterização do sal de EDSA de AAT-730 (Composto A)

[0252] O sal de mono-EDSA de AAT-730 foi isolado a partir de uma reação de precipitação de AAT-730 e EDSA (1 ou 2 mol. eq.) em THF. Os sólidos foram isolados e analisados por XRPD (Figura 4-4). Embora a amostra fosse fraca, o material era cristalino. A análise de 1H NMR (Figura 4-5) confirmou uma razão de 1:1 de API:ácido. O sal deliquesceu sob tensão a 40 °C/75% RH.

[0253] Os sólidos isolados a partir da reação de AAT-730 e EDSA (0,5 mol eq.) em EtOH renderam sólidos com um novo padrão de XRPD (Figura 4-6). Isso foi marcado como Padrão C de EDSA de AAT-730. A análise de 1H NMR (Figura 4-7) sugeriu que a formação de sal pode não ter ocorrido. Exemplo 3-10, Caracterização de fumarato de AAT-730

[0254] Sólidos precipitados a partir da reação de AAT-730 e ácido fumárico em THF. A análise de XRPD dos sólidos mostrou que eles eram cristalinos com um novo padrão de XRPD (Figura 4-8). O material foi analisado por análise de 1H NMR (Figura 4-9) que sugeriu a formação de um monofumarato. O material foi tensionado a 40 °C/75% RH por 7 dias e o sólido foi deliquescido.

Exemplo 3-11, Caracterização de glutarato de AAT-730 (Composto A)

[0255] O glutarato de AAT-730 (sal de ácido glutárico) foi isolado a partir de experimentos de triagem de AAT-730 e ácido glutárico em THF e THF/água. Os géis foram isolados a partir dos experimentos com 1 equivalente molar de ácido e estes foram triturados/submetidos a ciclagem de temperatura em MTBE para render sólidos que eram cristalinos por XRPD (Figura 4-10). A análise por 1H NMR (Figura 4-11) mostrou a formação de um monoglutarato (no máximo 5,4% p/p de MTBE também foi observado). A solubilidade aquosa aproximada foi de 163 a 245 mg/mL. TG/DTA do sal mostrou 3 eventos endotérmicos que podem ser devidos à fusão do material ou perda de solvente ou ácido no aquecimento (Figura 4-12).

Exemplo 3-12, Caracterização de glicolato de AAT-730 (Composto A)

[0256] Um sal suspeito foi isolado a partir de um experimento de triagem de AAT-730 e ácido glicólico em EtOH e foi analisado por análise de XRPD (Figura 4-13). O sólido era cristalino e isso foi analisado por análise 1H NMR (Figura 4-14) que sugeriu a formação de um monoglicolato.

[0257] A análise de TG/DTA (Figura 4-15) mostrou uma pequena perda de peso entre 30 e 160 °C, o que provavelmente se deve ao solvente residual. Uma endotermia no início até 133 ° C é provavelmente devido à fusão do material. O material foi fisicamente estável a tensão a 40 °C/75% RH por 1 semana.

Exemplo 3-13, Caracterização do Padrão A de sal de HCl de AAT-730 (Composto A)

[0258] Um sal de HCl suspeito foi isolado a partir de um experimento de precipitação de AAT-730 e HCl (1 mol. eq.) em etanol. Os sólidos foram analisados por análises de XRPD (Figura 4-16), TG/DTA (Figura 4-18) e 1H NMR (Figura 4-17). O difratograma de XRPD foi consistente com um sólido cristalino e o TG/DTA mostrou uma possível endotermia de fusão no início de até 184 °C. Nenhuma perda de peso foi observada, o que sugere um material anidro. Uma segunda endotermia no início até 234 °C pode ser devido à fusão de outra forma cristalina. O espectro de 1H NMR mostra deslocamento de pico consistente com a formação de sal e os sólidos estavam estáveis sob tensão a 40 °C/75% RH. A solubilidade do sal suspeito foi de aproximadamente 164 a 205 mg/mL.

[0259] Um segundo sal de HCl possível (Padrão B de sal de HCl de AAT-730) foi isolado a partir de um experimento de triagem de AAT-730 com 2 mols de HCl em etanol. Este pode ser um sal 1:2 (API:ácido), no entanto, a estequiometria não pode ser determinada por análise de 1H NMR (Figura 4-20). A análise de XRPD (Figura 4-19) mostrou que o material era cristalino com algum conteúdo amorfo e a análise de 1H NMR mostrou deslocamento de pico consistente com a formação de sal. A análise de TG/DTA mostrou uma endotermia no início 161,6 °C e uma segunda endotermia seguida imediatamente por uma exotermia (Figura 4-21). Os sólidos estavam estáveis sob tensão a 40 °C/75% RH por 1 semana.

Exemplo 3-14, Caracterização de L-lactato de AAT-730 (Composto A)

[0260] L-lactato de AAT-730 (sal de ácido L-lático) foi isolado a partir de um experimento de precipitação de AAT-730 e ácido L-lático (1 mol. eq.) em etanol ou THF/água. A análise de XRPD (Figura 4-22) mostrou que o material era composto por um sólido cristalino. A análise de1H NMR (Figura 4-23) sugeriu a formação de um sal de monolactato. O termograma TG/DTA (Figura 4-24) mostrou um provável início de fusão a até 117 °C e perda de peso mínima entre 30 e 150 °C devido ao solvente residual. O material tinha uma solubilidade de aproximadamente 320 a 640 mg/mL em água e estava estável sob tensão a 40°C/75% RH por 1 semana.

Exemplo 3-15, Caracterização de maleato de AAT-730 (Composto A)

[0261] Um maleato de AAT-730 suspeito (sal de ácido maleico) foi isolado a partir de experimentos de precipitação em THF e THF/água. O sólido era cristalino por análise de XRPD (Figura 4-25) e a análise de 1H NMR (Figura 4-26) sugeriu a formação de um monomaleato. TG/DTA (Figura 427) mostrou uma provável endotermia de fusão no início até 153 °C. A perda de peso observada no termograma provavelmente se deve ao THF residual, que também foi observado no espectro de 1H NMR. O sal tinha uma solubilidade aquosa de aproximadamente 280 a 560 mg/mL e era estável sob tensão a 40 °C/75% RH por 1 semana.

Exemplo 3-16, Caracterização do sal de MSA de AAT-730 (Composto A)

[0262] Um sal de MSA de AAT-730 suspeito foi isolado a partir de experimentos de precipitação em THF e

[0263] THF/água. O sólido era cristalino por análise de XRPD (Figura 4-28) e a análise de 1H NMR (Figura 4-29) sugeriu a formação de um sal de mono-MSA de AAT-730. A análise de TG/DTA (Figura 4-30) mostrou perda de peso mínima entre 30 e 150 °C, sugerindo uma forma anidra. Uma provável endotermia de fusão foi observada no início até 155 °C. Uma exotermia imediatamente após a fusão pode ser devido à recristalização ou decomposição. O sal tinha uma solubilidade de aproximadamente 228 a 260 mg/mL em água e estava estável sob tensão a 40 °C/75% RH por 1 semana.

[0264] Um segundo sal de MSA possível foi isolado a partir de um experimento de triagem de AAT-730 com 2 mols de MSA em THF. A análise de 1H NMR (Figura 4-32) sugere que esse pode ser um sal 1:2 (API:ácido). O material era cristalino por análise de XRPD (Figura 4-31) e se deliquesceu sob tensão a 40 °C/75% RH.

Exemplo 3-17, Caracterização de succinato de AAT-730 (Composto A)

[0265] O succinato (sal de ácido succínico) de AAT-730 foi isolado a partir de experimentos de formação de sal em THF/água ou etanol para formar géis que foram então triturados em MTBE ou EtOAc para formar um sólido que era cristalino por análise de XRPD (Figura 4-33). A análise de 1H NMR (Figura 4-34) sugeriu a formação de um monossuccinato que deliquesceu ao estressar a 40°C/75% RH.

Exemplo 3-18, Caracterização de sulfato de AAT-730 (Composto A)

[0266] O sulfato de AAT-730 foi isolado a partir de um experimento de formação de sal em THF que foi evaporado para render um gel. O gel foi triturado em MTBE para render o sal como um sólido que era cristalino por análise de XRPD (Figura 4-35). A análise de 1H NMR sugeriu a formação de um sal quando o deslocamento de pico foi observado no espectro de 1H NMR (Figura 4-36). A estequiometria não pôde ser determinada por análise de 1H NMR e os sólidos não deliquesceram sob tensão a 40 °C/75% RH.

[0267] Outro sulfato possível foi isolado a partir do experimento de triagem om 2 mol. eq. de H2SO4 e analisado por XRPD (Figura 4-37). Isso deliquesceu sob tensão a 40 °C/75% RH.

Exemplo 4, sal de HCl e maleato de AAT-730 (Composto A)

[0268] A preparação do sal de HCl e maleato (sal de ácido maleico) de AAT-730 foi escalonada para 250 mg. Ambos os sais foram caracterizados usando uma gama de técnicas, incluindo XRPD, DSC, TG/DTA, 1H NMR e microscopia. A estabilidade também foi testada em uma faixa de condições de umidade relativa elevada por 7 dias. A solubilidade do Padrão A de sal de HCl de AAT-730 foi estimada em vários sistemas de solventes.

Método 4-1, Método de estimativa de solubilidade

[0269] Alíquotas do solvente de teste foram adicionadas a uma amostra pesada com precisão (no máximo 20 mg) de sal de HCl de AAT-730 à temperatura ambiente. Os volumes das alíquotas foram tipicamente de 25 a 100 µL. A dissolução completa do material de teste foi determinada por inspeção visual. A solubilidade foi estimada a partir desses experimentos com base no solvente total usado para fornecer dissolução completa. Deve- se observar que a solubilidade real pode ser maior que o valor calculado por causa do uso de alíquotas de solventes que eram grandes demais ou devido a uma taxa de dissolução lenta.

[0270] Se a dissolução não ocorreu após a última alíquota de solvente ter sido adicionada (tipicamente até 50 volumes de solvente), a amostra foi submetida a dois ciclos do seguinte regime de ciclagem de temperatura na estação de cristalização Clarity: Aquecer de 20 °C a 3 °C do ponto de ebulição do solvente (ou 100 °C, o que for mais baixo) a 0,5 °C/minuto. Resfriar a 20 °C a 0,2 °C/minuto. Velocidade de agitação 600 rpm.

[0271] A partir dos dados de transmissão de infravermelho (IR) dos frascos de amostra, os eventos de dissolução e precipitação foram registrados como o ponto de transmissão completa de IR e o início da turbidez por IR, respectivamente.

[0272] As amostras foram mantidas à temperatura ambiente por 18 horas para maximizar a chance de precipitação. Quaisquer sólidos recuperáveis foram analisados por XRPD. Os valores de solubilidade para sal de HCl de AAT-730 foram expressos como uma faixa e arredondados para o número inteiro mais próximo. A partir desses dados, os solventes foram agrupados da seguinte maneira para guiar os experimentos de triagem: Solventes (A): o sal de HCl de AAT-730 era solúvel em menos ou igual a 50 volumes (maior ou igual a 20 mg/mL) à temperatura ambiente. Solúvel com aquecimento (B): o sal de HCl AAT-730 não era solúvel em 50 volumes à temperatura ambiente, mas dissolvia a temperaturas mais altas. Esses solventes podem ser considerados como possíveis solventes para cristalizações de resfriamento. Antissolventes (C): sal de HCl de AAT-730 não era solúvel em 50 volumes em todas as temperaturas estudadas.

Exemplo 4-1, Preparação do Padrão A de sal de HCl de AAT-730 (Composto A)

[0273] AAT-730 (250 mg) e THF (1,25 mL) foram agitados em um frasco e uma solução de HCl em dioxano (4 M, 177,5 µL) foi adicionada gota a gota. Isso foi agitado a 400 rpm por até 16 horas. Um gel se formou na superfície e uma porção adicional de THF (1 mL) foi adicionada. A crosta foi quebrada com uma pipeta e a mistura instantaneamente se tornou turva e um precipitado branco espesso se formou. A mistura foi centrifugada e o sobrenadante foi removido. THF (no máximo 1 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada, centrifugada e o solvente, decantado. Isso foi repetido e os sólidos foram secos sob N2 durante a noite para render o produto como um sólido branco (185 mg, 68% de rendimento).

Exemplo 4-2, Caracterização do Padrão A de sal de HCl de AAT-730 (Composto A)

[0274] O Padrão A de sal de HCl de AAT-730 foi preparado em escala de no máximo 185 mg a partir de um experimento de precipitação de AAT- 730 e HCl (1 mol. eq.) em THF. Os sólidos foram caracterizados e os resultados são detalhados abaixo. O difratograma de XRPD (Figura 5-1) foi consistente com um sólido cristalino e foi composto da mesma forma que o material de Padrão A de sal de HCl de AAT-730 previamente preparado.

[0275] A Análise Termogravimétrica/Térmica Diferencial (TG/DTA) foi realizada para determinar o perfil térmico e as % de mudanças de peso associadas do Padrão A de sal de HCl de AAT-730 (Figura 5-2). Os dados de TG/DTA mostraram uma endotermia de fusão no início até 200 °C. Perda de peso de no máximo 0,25% p/p foi observada entre aproximadamente 30 e 190 °C, o que sugere um material anidro com uma pequena quantidade de solvente residual. Uma exotermia no início até 212 °C pode ser devido à cristalização para outra forma ou decomposição.

[0276] O termograma de DSC obtido para o Padrão A de sal de HCl de AAT-730 HCl a 10 °C/min é mostrado na Figura 5-3 e o início da fusão é de 192,46 °C.

[0277] O espectro de 1H NMR do Padrão A de sal de HCl de AAT-730 analisado em CD3OD (Figura 5-4) em conformidade com a estrutura molecular e uma pequena quantidade de THF residual foi observada no espectro. Isso corrobora os dados de TG/DTA.

[0278] A microscopia de luz polarizada de sólidos do Padrão A de sal de HCl de AAT-730 (Figura 5-5) mostrou que o material é composto de partículas aciculares finas e alguma agregação e/ou aglomeração é observada.

[0279] A microscopia de estágio quente foi realizada usando um acessório de estágio quente Linkam e as fotomicrografias são mostradas na Tabela 4-1. O material permanece em grande parte sem mudança no aquecimento até aproximadamente 190 °C. Entre 190 ° C e 200 ° C, algumas mudanças na densidade aparente podem ser observadas à medida que os sólidos começam a se fundir. A densidade aparente foi adicionalmente reduzida a 210 °C e o material foi completamente liquefeito a 220 °C. Fotomicrografias de estágio quente do Padrão A de sal de HCl de AAT- 730 [Tabela 4-1]

Exemplo 4-3, Tensão de umidade do sal de HCl de AAT-730 (Composto A)

[0280] Amostra de sal de HCl de AAT-730 foi adicionada aos frascos de HPLC. Os frascos foram colocados, sem tampa, em câmaras de RH como mostrado na Tabela 4-2.

[0281] A umidade relativa das câmaras foi controlada por soluções salinas supersaturadas. As amostras foram removidas após 1 semana e os padrões de XRPD foram adquiridos.

[0282] Sal de HCl de AAT-730 (no máximo 20 mg) foi adicionado a cada uma das câmaras de umidade como descrito acima. Os padrões de XRPD das amostras pós-tensão são mostrados na Figura 5-6. A análise de 1H NMR (Figura 5-7, Figura 5-8 e Figura 5-9) das amostras pós-tensão não mostrou nenhuma mudança. Tabela de experimentos de estresse por umidade [Tabela 4-2]

Exemplo 4-4, Solubilidade de equilíbrio aquoso do sal de HCl de AAT- 730 (Composto A)

[0283] Sal de HCl de AAT-730 (50 mg) foi adicionado a um frasco e água (100 µL) foi adicionada. A mistura foi agitada e após 30 minutos uma suspensão espessa foi formada. Alíquotas adicionais (20 µL) de água foram adicionadas até que uma suspensão fina fosse formada. Isso foi agitado a 25 °C durante a noite e filtrado para render uma solução límpida. A solução foi pesada e evaporada até peso constante para determinar a solubilidade.

[0284] De acordo com o método acima, a solubilidade do sal de HCl de AAT-730 foi determinada e era de aproximadamente 220 mg/mL em água a pH de 6,6 a 7,0.

Exemplo 4-5, Solubilidade estimada do sal de HCl de AAT-730 (Composto A)

[0285] A solubilidade de sal de HCl de AAT-730 foi estimada em 10 sistemas de solventes usando o método de adição de alíquotas. Estes incluíram 4 misturas aquosas/orgânicas. O composto tinha uma solubilidade de > 20 mg/mL em 2 das misturas aquosas à temperatura ambiente. Os dados de solubilidade obtidos são mostrados na Tabela 4-3. Os experimentos que não mostraram dissolução em no máximo 50 volumes foram submetidos a ciclagem de temperatura conforme descrito no Método 4-1. A partir desses dados e da triagem de solubilidade, os solventes foram classificados em três grupos descritos na Tabela 4-4 para definir o escopo dos experimentos de triagem.

[0286] A solubilidade do sal de HCl de AAT-730 foi averiguada por adição de alíquota e verificou-se ter solubilidade maior ou igual a 20 mg/mL em DMSO/água e EtOH/água. Estimativas de solubilidade de sal de HCl de AAT-730 a 20 °C [Tabela 4-3] Sistemas de solventes agrupados em categorias [Tabela 4-4]

Exemplo 4-6, Determinação do teor de cloreto

[0287] Sal de HCl de AAT-730 (6 mg) foi adicionado a um frasco e água (1 mL) foi adicionada. Uma tira de teste de cloreto foi adicionada e a solução deixada se deslocar tira acima. O nível foi registrado e o teor de cloreto calculado.

[0288] De acordo com o método acima, a tira leu 2,8 que correspondeu a um teor de cloreto de 393 ppm. A concentração teórica para um sal de mono-HCl foi de 428 ppm. Esses resultados sugerem que o Padrão A de AAT-730 é um sal de mono-HCl (monocloridrato). Conclusões da caracterização do sal de HCl de AAT-730 10) A análise de XRPD indicou que HCl de AAT-730 era um material cristalino e a microscopia de luz polarizada confirmou isso. 11) Os dados de TG/DTA mostraram perda de peso de 0,25% de 30 a 190 °C, sugerindo umidade mínima ou teor de solvente residual e mostra que sal de HCl de AAT-730 permanece termicamente estável até 220 °C. 12) Estudos de taxa de calor por DSC indicaram um início de fusão de 192,46 °C. 13) Espectroscopia de 1H NMR em conformidade com a estrutura molecular e uma pequena quantidade de THF residual foi detectada. 14) O sal de HCl de AAT-730 foi submetido a tensão por 7 dias a 25 °C/60% RH, 40 °C/75% RH e 70 °C/75% RH. 15) As amostras pós-tensão foram analisadas por análises de XRPD e 1H NMR. Nenhuma mudança na forma física foi observada em todas as amostras e 1H NMR sugeriu que era quimicamente estável. 16) A solubilidade do Padrão A de sal de HCl de AAT-730 foi averiguada por adição de alíquota e verificou-se ter solubilidade maior ou igual a 20 mg/mL em DMSO/água e EtOH/água. O sal de HCl de AAT-730 tinha uma solubilidade ou até aproximadamente 220 mg/mL em água a pH 6,6 a 7,0. 17) A análise de cloreto sugere que o Padrão A de HCl de AAT-730 é um sal de mono-HCl.

Exemplo 4-7, Preparação de maleato de AAT-730 (Composto A)

[0289] AAT-730 (250 mg) e THF (1,25 mL) foram agitados em um frasco e uma solução de ácido maleico (69 mg) em THF (500 µL) foi adicionada gota a gota. Isso foi agitado a 400 rpm por até 16 horas. Um precipitado branco espesso formou-se imediatamente e uma porção adicional (1 mL) de THF foi adicionada para auxiliar a agitação. A mistura foi centrifugada e o sobrenadante foi removido. THF (no máximo 1 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada, centrifugada e o solvente, decantado. Isso foi repetido e os sólidos foram secos sob N2 durante a noite para render o produto como um sólido branco (198,7 mg, 62% de rendimento).

Exemplo 4-8, Caracterização de maleato de AAT-730 (Composto A)

[0290] O maleato AAT-730 foi isolado a partir de um experimento de precipitação em THF conforme descrito no Exemplo 4-7. Os sólidos foram caracterizados conforme detalhado abaixo. Os sólidos eram cristalinos por análise de XRPD (Figura 5-10) e foi composto da forma desejada que foi previamente isolada a partir dos experimentos de triagem.

[0291] A análise de KF foi realizada conforme descrito e o maleato tinha um teor de água de 0,77% p/p. O maleato não é um hidrato.

[0292] A Análise Termogravimétrica/Térmica Diferencial (TG/DTA) foi realizada para determinar o perfil térmico e as % de mudanças de peso associadas do maleato de AAT-730 (Figura 5-11). Os dados de TG/DTA mostraram uma endotermia de fusão no início até 138 °C. Perda de peso de no máximo 1,8% p/p foi observada entre aproximadamente 30 e 130 °C, o que provavelmente é devido ao solvente residual ou umidade. Uma segunda endotermia no início até 179 °C pode ser devido à fusão de outra forma. A perda de peso de no máximo 5,45% p/p entre aproximadamente 130 e 175 °C pode ser devida à perda de ácido maleico que se decompõe termicamente a 135 °C.

[0293] O termograma de DSC obtido para maleato de AAT-730 a 10 °C/min é mostrado na Figura 5-12 e o início da fusão é de 132,91 °C. Eventos térmicos adicionais são observados, uma exotermia no início até 167 °C e outra endotermia no início até 184 °C. A exotermia pode ser devido à recristalização de outra forma e, então, fusão subsequente. Isso confirma as imagens de microscopia de estágio quente (Tabela 4-4).

[0294] A análise de1H NMR foi realizada em CD3OD e o espectro é mostrado na Figura 5-13. Isso sugere a formação de um monomaleato. O solvente residual é detectado no espectro.

[0295] Uma fotomicrografia do maleato de AAT-730 é mostrada na Figura 5-14 e o material é composto de pequenas partículas irregulares. Agregação e/ou aglomeração também é observada.

[0296] A microscopia de estágio quente foi realizada usando um acessório de estágio quente Linkam e as fotomicrografias são mostradas na Tabela 4-5. O material permanece em grande parte sem mudança no aquecimento até 110 °C. Entre 110 ° C e 130 ° C, algumas mudanças na densidade aparente podem ser observadas à medida que os sólidos começam a se fundir. A 140 °C o material se liquefez e alguma recristalização é observada. Entre 150 °C e 180 °C, observa-se uma recristalização adicional e o material se liquefez a 190 °C. Fotomicrografias de fase quente de maleato de AAT-730 [Tabela 4-5]

Exemplo 4-9, Tensão de umidade de maleato de AAT-730 (Composto A) (sal de ácido maleico)

[0297] Amostra de sal de maleato de AAT-730 foi adicionada aos frascos de HPLC. Os frascos foram colocados, sem tampa, em câmaras de RH como mostrado na Tabela 4-6.

[0298] A umidade relativa das câmaras foi controlada por soluções salinas supersaturadas. As amostras foram removidas após 1 semana e os padrões de XRPD foram adquiridos.

[0299] Maleato de AAT-730 (no máximo 20 mg) foi adicionado a cada uma das câmaras de umidade como descrito acima. Os padrões de XRPD das amostras pós-tensão são mostrados na Figura 5-15. A 70 °C/75% RH, o material se deliquesceu. Os difratogramas de XRPD das amostras sugerem mudanças na forma física e as análises de 1HNMR das amostras pós-tensão mostram que a razão de ácido maleico para API mudou (Figura 5-16 e Figura 5-17). Esses resultados sugerem que o maleato de AAT-730 é instável à tensão de umidade relativa elevada e não seria adequado para desenvolvimento adicional. Tabela de experimentos de estresse por umidade [Tabela 4-6]

Exemplo 4-10, Tentativa de solubilidade em equilíbrio aquoso de maleato de AAT-730 (Composto A)

[0300] Maleato de AAT-730 (50 mg) foi adicionado a um frasco e água (100 µL) foi adicionada. Uma solução límpida resultou e uma porção adicional de maleato de AAT-730 (20 mg) foi adicionada. Isso se dissolveu imediatamente.

[0301] O maleato de AAT-730 teve uma solubilidade ou > 700 mg/mL em água a pH 6 a 7. Conclusões da caracterização do maleato de AAT-730 (Composto A) 18) A análise de XRPD indicou que maleato de AAT-730 era um material cristalino e a microscopia de luz polarizada confirmou isso. 19) Os dados de TG/DTA mostraram perda de peso de 1,8% de 30 a 130 °C, sugerindo algum teor de solvente residual. Perda de peso adicional é observada de até 130 °C e mostra que o maleato de AAT-730 pode ser termicamente instável. 20) Estudos de taxa de calor por DSC indicaram um início de fusão de 132,91 °C. 21) Espectroscopia de 1H NMR se conformou com a estrutura molecular e sugeriu a formação de um monomaleato. THF residual foi detectado. 22) O sal de maleato de AAT-730 foi submetido a tensão por 7 dias a 25 °C/60% RH, 40 °C/75% RH e 70 °C/75% RH. As amostras pós-tensão foram analisadas por análises de XRPD e 1H NMR. A mudança na forma física foi observada em todas as amostras por análise de XRPD e a análise de 1H NMR também sugeriu que o maleato de AAT-730 era instável à tensão. 23) O sal de maleato de AAT-730 teve uma solubilidade ou > 700 mg/mL em água a pH 6 a 7.

Exemplo 5, triagem polimorfo de sal de HCl de AAT-730 (Composto A)

[0302] Uma triagem polimórfica focada foi realizada no sal de HCl de AAT-730, cujo objetivo era investigar a paisagem polimórfica do sal de HCl de AAT-730. A abordagem foi gerar sólidos sob uma ampla e diversificada gama de condições de nucleação, projetadas para imitar as condições do processo e os solventes usados durante o desenvolvimento e a formulação.

[0303] O padrão de XRPD do Padrão A de sal de HCl de AAT-730 HCl é doravante referido como Padrão 1.

[0304] Todos os sólidos dos experimentos de cristalização foram analisados por XRPD e os padrões resultantes comparados aos exibidos pelo material de partida. Novos padrões de XRPD foram atribuídos a um descritor em ordem de aparecimento (Padrão 2, Padrão 3 etc.). Quando material suficiente estava disponível, análises adicionais (por exemplo, 1H NMR ou TGA) foram conduzidas em sólidos com novos padrões de XRPD para permitir a atribuição provisória do novo padrão como um polimorfo, solvato, hidrato, degradante ou mistura deles. O material de partida usado neste estudo foi o sal de HCl de AAT-730, conforme preparado no Exemplo 5-1.

Métodos de triagem de polimorfos do Exemplo 5 Método 5-1, Ciclagem de temperatura

[0305] O solvente de teste (1 mL) foi adicionado a uma amostra de sal de HCl de AAT-730 (no máximo 20 mg) à temperatura ambiente e 15 ciclos do seguinte programa de temperatura foram realizados usando a estação de cristalização Clarity: Aquecer de 5 °C a 60 °C a 0,5 °C/min (dependendo do ponto de ebulição do solvente) Resfriamento a 5 °C a 0,5 °C/min Velocidade de agitação - 300 rpm

Método 5-2, Evaporação lenta

[0306] Uma solução de sal de HCl de AAT-730 foi preparada em cada solvente e evaporada em um exaustor à temperatura ambiente em um frasco coberto com folha de alumínio perfurada. Após 2 semanas, todas as amostras que ainda eram soluções foram evaporadas sob um fluxo de nitrogênio. Os sólidos resultantes foram analisados por XRPD.

Método 5-3, Precipitação de colisão

[0307] O sal de HCl de AAT-730 (no máximo 20 mg) foi dissolvido em água (100 µL) e filtrado em antissolvente (1 mL) com agitação. Experimentos que não resultaram em precipitação foram colocados no refrigerador por até 7 dias, então destampados e deixados evaporar em um exaustor à temperatura ambiente até que sólidos fossem observados. Os sólidos resultantes foram analisados por XRPD.

Método 5-4, Resfriamento lento

[0308] Adicionou-se solvente suficiente ao sal de HCl de AAT-730 (20 mg) até a dissolução a 60 °C. As soluções foram resfriadas com agitação a 0,2 °C/min até uma temperatura final de 5°C e todos os sólidos foram recuperados por centrifugação e secos ao ar antes da análise por XRPD.

Método 5-5, Experimentos de pasta fluida

[0309] Sal de HCl de AAT-730 suficiente foi adicionado a um dado solvente até que sólidos não dissolvidos permanecessem na temperatura desejada (5, 20, 40 e 50 °C). O frasco foi vedado e a pasta fluida foi mantida à temperatura selecionada e agitada por agitação magnética por 5 a 7 dias. Os sólidos foram isolados por centrifugação e secos ao ar antes da análise por XRPD.

Método 5-6, Sonicação de pastas

[0310] Sal de HCl de AAT-730 (no máximo 20 mg) foi adicionado a um frasco com 80 µL do solvente selecionado para formar uma pasta. A mistura foi sonicada a 70% de intensidade usando um processador ultrassônico Cole-Parmer 130 Watt usando um programa pulsado. Nos casos em que os sólidos se dissolveram à temperatura ambiente, a amostra foi deixada sem tampa para evaporar. As pastas úmidas recuperadas desses experimentos foram analisadas usando XRPD.

Método 5-7, Tensão de vapor cristalino

[0311] Aproximadamente 20 mg de sal de HCl de AAT-730 cristalino foram adicionados a um frasco e colocados sem vedação dentro de um receptáculo vedado maior contendo 1 mL do solvente selecionado. Após 7 dias, as amostras foram removidas e analisadas por XRPD.

Método 5-8, Tensão de vapor amorfo

[0312] O sal de HCl de AAT-730 amorfo foi gerado a partir da evaporação do sal de HCl de AAT-730 a partir de solução aquosa sob uma corrente constante de N2. Os sólidos resultantes foram colocados sem vedação dentro de um receptáculo vedado maior contendo 1 mL do solvente selecionado. Após 7 dias, as amostras foram removidas e analisadas por XRPD.

Método 5-9, Tensão de umidade

[0313] Aproximadamente 20 mg de sal de HCl de AAT-730 de Padrão 1 foram adicionados a três frascos individuais e colocados sem vedação nas seguintes câmaras de umidade relativa (gabinetes vedados com condições de umidade relativa controladas por soluções de sal supersaturadas) por 7 dias antes da análise por XRPD: Câmara 1 - 23% RH Câmara 2 - 76% RH Câmara 3 - 98% RH

Método 5-10, Moagem planetária

[0314] Aproximadamente 20 mg de sal de HCl de AAT-730 foram adicionados a frascos com esferas de moagem de aço. Os frascos foram selados e o conteúdo moído usando um moinho planetário Fritsch Pulverisette 5 e o seguinte ciclo: Moagem por 60 minutos a uma velocidade de rotação de 400 rpm. Repouso por 15 minutos. Tempo total 18 horas

[0315] Solvente (30 µL) foi adicionado e o conteúdo foi moído de novo usando o seguinte ciclo: Moagem por 60 minutos a uma velocidade de rotação de 400 rpm. Repouso por 15 minutos. Tempo total 18 horas

Exemplo 5-1, Preparação do Padrão 1 de sal de HCl de AAT-730 (Composto A)

[0316] AAT-730 (2 g) e THF (10 mL) foram adicionados a um frasco de fundo redondo e agitados. A dissolução estava incompleta após até 10 minutos e uma porção adicional (1 mL) de THF foi adicionada. A mistura foi agitada até a dissolução e HCl em dioxano (4 M, 1,5 mL) foi adicionado gota a gota. Uma crosta se formou no topo e isso foi quebrado com uma pipeta. A formação de bolhas foi observada e uma porção adicional (3 mL) de THF foi adicionada e a mistura foi agitada para quebrar os sólidos. Os sólidos foram isolados por filtração, lavados com THF (3 mL) e secos ao ar no funil de Buchner. Os sólidos foram transferidos para um frasco e secos até peso constante, sob um fluxo de N2 para render o sal como um sólido branco (2,128 g, até 98% de rendimento).

Exemplo 5-2, Geração de sal de HCl de AAT-730 (Composto A) amorfo Liofilização

[0317] O sal de HCl de AAT-730 (25 mg) foi dissolvido em água (1 mL), filtrado através de um filtro de 0,45 µm em um frasco de HPLC. Isso foi congelado em nitrogênio líquido e liofilizado sob vácuo (0,08 milibar) por 18 horas. O material amorfo não foi obtido.

Resfriamento brusco

[0318] Sal de HCl de AAT-730 (no máximo 20 mg) foi adicionado a um frasco de HPLC e lavado com N2. Isso foi aquecido a 200 °C e foi rapidamente imerso em um banho de gelo/água. Um sólido marrom escuro foi formado, o qual se degradou. Sal de HCl de AAT-730 (no máximo 20 mg) foi adicionado a um frasco de HPLC e lavado com N2. Isso foi aquecido até 180 °C e foi rapidamente imerso em um banho de gelo/água. Formou-se um sólido marrom que se degradou.

[0319] Evaporação

[0320] Sal de HCl de AAT-730 (no máximo 20 mg) foi adicionado a um frasco de HPLC e água (1 mL) foi adicionada para formar uma solução. Isto foi evaporado sob um fluxo de nitrogênio para render material amorfo.

Exemplo 5-3, Ciclagem de temperatura

[0321] As amostras foram submetidas ao programa de ciclagem de temperatura descrito no Método 5-1 e os resultados são mostrados na Tabela 5-1. Os materiais de Padrão 1 ou Padrão 2 foram isolados a partir dos experimentos de triagem e são discutidos adicionalmente no Exemplo 5-12 e no Exemplo 5-13. Resultados da triagem de experimentos de ciclagem de temperatura [Tabela 5-1]

Exemplo 5-4, Evaporação lenta

[0322] A evaporação lenta de soluções de sal de HCl de AAT-730 foi conduzida conforme descrito no Método 5-2 e os resultados são mostrados na Tabela 5-2. O Padrão 4 foi isolado a partir da evaporação de EtOH/água e esse material não foi caracterizado adicionalmente, mas foi incluído nos experimentos de interconversão e atividade de água, conforme detalhado no Exemplo 5-16. O material amorfo foi isolado a partir da evaporação em água e esse método foi então usado para preparar material amorfo para tensão de vapor. Resultados de triagem de evaporações em frascos [Tabela 5-2]

Exemplo 5-5, Precipitação de colisão

[0323] Experimentos de precipitação de colisão foram realizados conforme detalhado no Método 5-3 e os resultados são mostrados na Tabela 5-3. A maioria dos sólidos isolados continha material amorfo. Os padrões 3 e 4 foram isolados e eles são discutidos no Exemplo 5-14 e Exemplo 5-15. Resultados de triagem de experimentos de precipitação de colisão [Tabela 5-3]

Exemplo 5-6, Resfriamento lento

[0324] O aumento lento da supersaturação permite que formas mais estáveis se nucleem. Uma temperatura final sub-ambiente também sonda solvatos estáveis a temperaturas tipicamente acessadas durante a cristalização de resfriamento em escala de planta. A Tabela 5-4 mostra os resultados da triagem de experimentos de resfriamento lento e o material de Padrão 1 foi isolado a partir de todos os experimentos. Resultados de triagem de experimentos de resfriamento lento [Tabela 5-4]

Exemplo 5-7, Experimentos de pasta fluida

[0325] Suspensões do Padrão 1 de sal de HCl de AAT-730 em vários solventes foram mantidas a 5, 20 °C e 50 °C por 5 a 7 dias antes do isolamento e análise por XRPD (Tabela 5-5). Os materiais de Padrão 1 ou 2 foram isolados a partir de cada experimento. O Padrão 1 foi isolado a partir da maioria dos experimentos a 5 °C. Os sólidos do Padrão 2 foram isolados a partir dos experimentos de pasta fluida a 20 e 50°C, exceto em solventes aquosos onde o Padrão 1 ou 2 foi isolado. Resultados de triagem a partir de experimentos de pasta fluida [Tabela 5-5]

Exemplo 5-8, Sonicação de pastas

[0326] Os experimentos de sonicação foram realizados conforme detalhado no Método 5-6 e os resultados são exibidos na Tabela 5-6. Os sólidos do Padrão 2 foram isolados a partir da maioria dos experimentos de triagem e estes são discutidos no Exemplo 5-13. O material de Padrão 1 foi isolado a partir dos experimentos de sonicação em solventes aquosos e em MeOH. Resultados da triagem de experimentos de sonicação [Tabela 5-6]

Exemplo 5-9. Tensão de vapor e umidade

[0327] O material amorfo de raios-X gerado a partir da evaporação em água foi exposto ao ar saturado em vapor de solvente antes da análise por XRPD. Como o material amorfo perdeu a ordem a longo alcance, ele está em um estado de alta energia. A exposição ao vapor plastifica o sólido, permitindo mobilidade molecular limitada e é, portanto, um excelente método de geração de solvatos e hidratos metaestáveis. O material amorfo cristalizou no material de Padrão 1 em todos os experimentos. Isso pode ser auxiliado pela água residual presente no material amorfo. Experimentos adicionais de tensão de vapor e umidade foram configurados usando material de Padrão 1 e os resultados são todos mostrados na Tabela 5-7. Em quase todos os casos, o material de Padrão 1 foi convertido para o Padrão 2 em tensão de vapor. Os sólidos do Padrão 1 foram convertidos no Padrão 2 ao tensionar menos ou igual a 75% RH, mas permaneceram como Padrão 1 a 98% RH. Resultados de experimentos de tensão por vapor e umidade [Tabela 5-7]

Exemplo 5-10, Moagem planetária

[0328] Experimentos de moagem planetária foram realizados conforme detalhado no Método 5-10 e os resultados são mostrados na Tabela 5-8. O Padrão 1 foi isolado a partir da maioria desses experimentos. Resultados de triagem de experimentos de moagem planetária [Tabela 5-8]

Conclusões da triagem de polimorfos

[0329] 1) Aproximadamente 100 experimentos foram realizados usando técnicas à base de solvente e não solvente. 2) Quatro padrões de XRPD cristalinos (Tabela 5-9) foram observados durante esse estudo. O material amorfo também foi gerado a partir da evaporação de uma solução de sal de HCl de AAT-730 em água. Resumo das formas físicas observadas durante este estudo [Tabela 5-9]

Exemplo 5-11, Preparação e caracterização da forma amorfa de sal de HCl de AAT-730 (Composto A)

[0330] O sal de HCl de AAT-730 amorfo de raios-X foi gerado a partir da evaporação de uma solução aquosa de sal de HCl de AAT-730 sob uma corrente constante de N2. A análise de XRPD exibiu um padrão de halo indicativo de material amorfo de raios-X (Figura 6-1).

[0331] A estabilidade física do material amorfo foi averiguada por exposição a vapores orgânicos selecionados e o material cristalizado sob tensão de vapor orgânico ao material de Padrão 1.

Exemplo 5-12, Preparação e caracterização do Padrão 1 de sal de HCl de AAT-730 (Composto A)

[0332] O Padrão 1 de sal de HCl de AAT-730 foi isolado a partir da reação de formação de sal e foi frequentemente isolado durante a triagem de polimorfo (Tabela 5-10). A análise de XRPD mostrou que o material é cristalino (Figura 6-2). A análise de NMR de prótons foi realizada em uma amostra isolada a partir da triagem de sal em conformidade com a estrutura molecular do composto e nenhum solvente residual foi detectado (Figura 63). Os dados de TG/DTA mostraram uma endotermia de fusão no início até 200 °C (Figura 6-4). Perda de peso de no máximo 0,25% p/p foi observada entre aproximadamente 30 e 190 °C, o que sugere um material anidro com uma pequena quantidade de solvente residual/água, experimentos de interconversão e atividade de água discordam disso e sugerem que o Padrão 1 é um hidrato (Exemplo 5-16). Uma exotermia no início até 212 °C pode ser devido à cristalização para outra forma ou decomposição. Experimentos de triagem que renderam material de Padrão 1 [Tabela 5-10]

Exemplo 5-13, Preparação e caracterização do Padrão 2 de sal de HC de AAT-730 (Composto A)

[0333] O Padrão 2 de sal de HCl de AAT-730 foi isolado a partir de um grande número de experimentos de triagem (Tabela 5-11). A análise de XRPD mostrou que o material é cristalino (Figura 6-5). A análise de NMR de prótons (Figura 6-6) está em conformidade com a estrutura molecular do composto e nenhum solvente residual foi detectado. A análise de TG/DTA (Figura 6-7) realizada no Padrão 2 de sal de HCl de AAT-730 mostrou uma endotermia de fusão no início até 192 °C. Perda de peso de no máximo 0,85% p/p foi observada entre aproximadamente 30 e 180 °C, o que sugere um material anidro com uma pequena quantidade de solvente residual/água. A comparação de XRPD do Padrão 1 de sal de HCl de AAT-730 com o Padrão 2 é mostrada na Figura 6-8. Experimentos de triagem que renderam material de Padrão 2 [Tabela 5-11]

Exemplo 5-14, Preparação e caracterização do Padrão 3 de sal de HC de AAT-730 (Composto A)

[0334] O material de Padrão 3 do sal de HCl de AAT-730 foi isolado a partir dos experimentos mostrados na Tabela 5-12. A análise de XRPD (Figura 6-9) mostrou que o material é cristalino. A análise de NMR de prótons da amostra isolada a partir do experimento de precipitação de colisão de água/IPA (Figura 6-10) em conformidade com a estrutura molecular do composto e IPA (no máximo 7,6% p/p) foi detectada. TG/DTA realizado na mesma amostra do Padrão 3 de sal de HCl de AAT-730 mostrou uma perda de peso de no máximo 2,7% p/p entre aproximadamente 30 e 145 °C e uma perda de peso adicional de 3,6% entre aproximadamente 145 e 180 °C (Figura 6-11). A perda de peso pode ser devido à perda de IPA e/ou água e sugere que o composto pode ser um solvato/hidrato. Os outros sólidos do Padrão 3 podem ser hidratos ou solvatos isoestruturais. Experimentos que renderam sólidos de Padrão 3 [Tabela 5-12]

Exemplo 5-15, Preparação e caracterização do Padrão 4 de sal de HC de AAT-730 (Composto A)

[0335] O Padrão 4 de sal de HCl de AAT-730 foi isolado a partir dos experimentos de triagem mostrados na Tabela 5-13. O difratograma de XRPD é mostrado na Figura 6-12 e é concordante com um material cristalino. Os sólidos do Padrão 4 não foram analisados adicionalmente, pois havia uma quantidade muito pequena de material, mas pode ser um hidrato. No entanto, foi incluído em experimentos de interconversão (Exemplo 5-16). Experimentos de triagem que renderam material de Padrão 4 [Tabela 5-13]

Exemplo 5-16, Determinação da forma mais estável

[0336] O método mais robusto para determinar a Forma termodinamicamente mais estável a uma dada temperatura envolve a suspensão de todas as formas observadas em uma solução saturada, pois o sistema gravitará naturalmente para a forma de energia livre mais baixa. Nas conversões mediadas por solvente, sementes de todas as formas estão presentes e não há barreira de energia de ativação para a interconversão. Essa técnica é usada para identificar a temperatura de transição “verdadeira” e a relação termodinâmica entre as formas. Pastas fluidas de interconversão de sal de HCl de AAT-730 (Composto A)

[0337] As pastas fluidas saturadas do Padrão 2 de sal de HCl de AAT- 730 foram preparadas em THF e agitadas durante a noite. A pasta fluida foi semeada com os Padrões 1, 2, 3 e 4 de sal de HCl de AAT-730 e agitada por até 10 dias antes do isolamento e análise por XRPD (Figura 6-13). Os resultados são mostrados na Tabela 5-14 e sugerem que o material de Padrão 2 é a forma mais estável em solvente anidro na faixa de temperatura de 5 a 50 °C. Resultados de experimentos de pasta fluida de interconversão [Tabela 5-14]

Experimentos de atividade de água do sal de HCl de AAT-730 (Composto A)

[0338] Experimentos de atividade de água foram realizados para determinar se a atividade de água do solvente influenciou qual forma foi isolada. Os resultados são mostrados na Tabela 5-15 e Figura 6-14. A Aw de no máximo 0,2, o Padrão 2 foi a forma mais estável. Uma mistura foi isolada em Aw de no máximo 0,4 e isso pode estar próximo da atividade crítica da água. Em Aw maior ou igual a 0,6, o Padrão 1 foi a forma mais estável. Esses resultados sugerem que o Padrão 1 pode ser um hidrato, pois sua formação é influenciada pela atividade de água. Resultados de experimentos de atividade de água [Tabela 5-15]

Exemplo 5-17, Caracterização adicional de Padrão 2 de sal de HCl de AAT-730 (Composto A)

[0339] O Padrão 2 de sal de HCl de AAT-730 foi adicionalmente caracterizado por DSC e tensão por umidade. A solubilidade aquosa também foi determinada por adição de alíquota.

[0340] O termograma de DSC obtido para o Padrão 2 de sal de HCl de AAT-730 a 10 °C/min é mostrado na Figura 6-15 e mostra uma endotermia de fusão no início 190,84 °C que é concordante com os dados de TG/DTA.

[0341] O Padrão 2 de sal de HCl de AAT-730 foi tensionado em uma gama de condições de umidade relativa por 7 dias, como mostrado na Tabela 5-16. O sal foi adicionado a frascos de HPLC e colocado, sem tampa, nas condições de umidade relativa mostradas na Tabela 5-16. Os materiais permaneceram como Padrão 2 sob as condições testadas (Figura 6-16). A análise de 1H NMR(Figura 6-17, Figura 6-18 e Figura 6-19) das amostras pós-tensionadas não mostrou mudança. Resultados de experimentos de triagem de RH [Tabela 5-16]

[0342] A solubilidade aquosa foi determinada conforme detalhado no Método 4-1 por adição de alíquota. A solubilidade do Padrão 2 de sal de HCl de AAT-730 em água foi de 197 a 263 mg/mL a pH de 6 a 7. Conclusões 1) Quatro novos sólidos foram isolados a partir dos experimentos de triagem. Os difratogramas de XRPD foram todos muito semelhantes, sugerindo que os sólidos todos têm uma estrutura de cristal muito semelhante. 2) As pastas fluidas de interconversão em solvente seco a 5, 25 e 50 °C renderam material de Padrão 2 sugerindo que essa era a forma estável em solvente seco entre 5 e 50 °C. 3) Os experimentos de atividade de água renderam Padrão 1 de AAT- 730 em Aw maior ou igual a 0,6. O Padrão 2 estava estável a Aw de no máximo 0,2 e em Aw de no máximo 0,4, uma mistura foi isolada, o que sugere que a atividade de água crítica é de no máximo 0,4. 4) O Padrão 2 de sal de HCl de AAT-730 era um anidrato cristalino com um início de fusão de 190,84 °C. 5) O Padrão 2 de sal de HCl de AAT-730 foi submetido a tensão por 7 dias a 25 °C/60% RH, 40 °C/75% RH e 70 °C/75% RH. As amostras pós- tensão foram analisadas por análises de XRPD e 1H NMR. Nenhuma mudança na forma física foi observada em todas as amostras e 1H NMR sugeriu que era quimicamente estável. 6) A solubilidade do Padrão 2 de sal de HCl de AAT-730 foi de 197 a 263 mg/mL (pH de 6 a 7).

Exemplo 6, Isolamento do Padrão 2 de sal de HCl de AAT-730 (Composto A)

[0343] AAT-730 (2 g) e THF (10 mL) foram adicionados a um frasco de fundo redondo e agitados. A dissolução estava incompleta após até 10 minutos e uma porção adicional (1 mL) de THF foi adicionada. A mistura foi agitada até a dissolução e HCl em dioxano (4 M, 1,5 mL) foi adicionado gota a gota. Uma crosta se formou no topo e isso foi quebrado com uma pipeta. A formação de bolhas foi observada e uma porção adicional (3 mL) de THF foi adicionada e a mistura foi agitada para quebrar os sólidos. Os sólidos foram isolados por filtração, lavados com THF (3 mL) e secos ao ar no funil de Buchner. Os sólidos foram transferidos para um frasco e secos até peso constante, sob um fluxo de N2 para render o sal como um sólido branco (2,128 g, até 98% de rendimento). A análise de XRPD confirmou a formação do Padrão 1 de sal de HCl de AAT-730.

[0344] O Padrão 1 de sal de HCl de AAT-730 foi adicionado a THF (10 a 20 volumes) e agitado por 5 dias a 20 °C (temperaturas entre 5 e 50 °C também eram adequadas). As amostras foram isoladas e secas ao ar antes da análise por XRPD (Figura 7). O Padrão 2 de sal de HCl de AAT-730 foi isolado. O material de Padrão 2 pode ser produzido mais rapidamente semeando a pasta fluida.

Claims

1. Forma cristalina caracterizada pelo fato de que é de sal de ácido clorídrico (HCl) de 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]-2-(2,2-dimetilpropil)-1H-1,3- benzodiazol-5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol.

2. Forma cristalina de sal de HCl de 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]-2- (2,2-dimetilpropil)-1H-1,3-benzodiazol-5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol caracterizada pelo fato de que possui o Padrão 2 de forma cristalina compreendendo um padrão de difração de raios-X de pó (XRPD) que compreende picos em termos de 2-teta a 5,9, 6,6, 8,9, 11,8, 13,2, 14,5, 15,6, 16,0, 17,4, 18,3, 19,5, 20,2, 22,0, 26,6 e 27,0 graus 2-teta +/- 0,2 graus 2- teta.

3. Forma cristalina de sal de HCl de 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]-2- (2,2-dimetilpropil)-1H-1,3-benzodiazol-5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol caracterizada pelo fato de que possui o Padrão 2 de forma cristalina que compreende um padrão XRPD coincidente com o padrão mostrado pela Figura 1-1.

4. Forma cristalina, de acordo com a reivindicação 2 ou 3, caracterizada pelo fato de que tem uma endotermia de fusão com início em 191 °C em calorimetria de varredura diferencial (DSC) e/ou com início em 192 °C em termogravimetria/análise térmica diferencial (TG/DTA).

5. Forma cristalina, de acordo com qualquer uma das reivindicações 2 a 4, caracterizada pelo fato de que o Padrão 2 de forma cristalina possui pelo menos 90% em peso com base no peso de sal de HCl.

6. Forma cristalina de sal de HCl de 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]-2- (2,2-dimetilpropil)-1H-1,3-benzodiazol-5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol caracterizada pelo fato de que possui o Padrão 1 de forma cristalina compreendendo um padrão de XRPD que compreende picos em termos de 2-teta a 6,6, 13,2, 15,6, 16,0, 17,2, 17,4, 17,9, 18,9, 20,1, 22,1, 23,4, 26,6 e 27,0 graus 2-teta +/- 0,2 graus 2-teta.

7. Forma cristalina de sal de HCl de 2-[3-({1-[2-(dimetilamino)etil]-2- (2,2-dimetilpropil)-1H-1,3-benzodiazol-5-il}sulfonil)azetidin-1-il]etan-1-ol caracterizada pelo fato de que possui o Padrão 1 de forma cristalina que compreende um padrão XRPD coincidente com o padrão mostrado pela Figura 1-4.

8. Forma cristalina, de acordo com a reivindicação 6 ou 7, caracterizado pelo fato de que tem uma endotermia de fusão com início em 192 °C em calorimetria de varredura diferencial (DSC) e/ou com início em 200 °C em termogravimetria/análise térmica diferencial (TG/DTA).

9. Forma cristalina, de acordo com qualquer uma das reivindicações 6 a 8, caracterizado pelo fato de que o Padrão 1 de forma cristalina possui pelo menos 90% em peso com base no peso de sal de HCl.

10. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende a forma cristalina de sal de HCl conforme definida na reivindicação 1, o Padrão 2 de forma cristalina conforme definido em qualquer uma das reivindicações 2 a 5 e/ou o Padrão 1 de forma cristalina conforme definido em qualquer uma das reivindicações 6 a 9.

11. Uso da forma cristalina de sal de HCl conforme definida na reivindicação 1, o Padrão 2 de forma cristalina conforme definido em qualquer uma das reivindicações 2 a 5 e/ou o Padrão 1 de forma cristalina conforme definido em qualquer uma das reivindicações 6 a 9, caracterizado pelo fato de que é para fabricação de um medicamento para prevenir ou tratar um distúrbio ou condição selecionado a partir de dor, dor inflamatória, dor nociceptiva, dor neuropática, fibromialgia, dor crônica, dor visceral, enxaqueca, cefaleia em salvas, dor relacionada ao câncer, síndrome de dor regional complexa, neuralgias (por exemplo, neuralgia do trigêmeo), esclerose múltipla, doença de Alzheimer, doença de Parkinson, esclerose lateral amiotrófica, epilepsia, neuropatia do diabetes, polineuropatia do vírus da imunodeficiência humana (HIV), doenças psiquiátricas, psicose, distúrbio do espectro autista, síndrome do intestino irritável (IBS), doença inflamatória intestinal (IBD), colite ulcerativa, doença de Crohn, doença do refluxo gastroesofágico (GERD), constipação, diarreia, distúrbio gastrointestinal funcional, artrite, artrite reumatoide, osteoartrite, aterosclerose, doença de artrite psoriática, espondilite, asma, alergia, psoríase, dermatite, rinite alérgica sazonal, lúpus eritematoso sistêmico (SLE), rejeição aguda de aloenxerto, gengivite, encefalite, linfoma cutâneo de células T, câncer de pâncreas, fibrose sistêmica, esclerose sistêmica (SSc), vasculite, fibrose hepática, fibrose pulmonar, fibrose renal, queloides, cicatrizes hipertróficas, síndrome do desconforto respiratório agudo (ARDS), obstrução reversível das vias aéreas, síndrome da doença respiratória adulta, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), alveolite fibrosante criptogênica, bronquite, glaucoma, degeneração macular relacionada à idade (AMD) e atrofia geográfica, retinopatia diabética, uveíte, oclusão da veia retiniana, retinopatia da prematuridade, síndrome isquêmica ocular, glumerulonefrite, isquemia renal, nefrite, nefropatia diabética, nefropatia crônica do aloenxerto, hepatite, insuficiência hepática aguda, cirrose hepática, esteatose hepática não- alcoólica (NASH), infarte do miocárdio, isquemia cerebral, lesão de reperfusão de isquemia, insuficiência cardíaca, derrame, isquemia do miocárdio, cardiomiopatia, ataque isquêmico transitório, diabetes, osteoporose, regulação da massa óssea, fígado gorduroso não alcoólico (NAFL), transtorno de déficit de atenção e hiperatividade (TDAH), ansiedade, transtorno do espectro autista, depressão, insônia/distúrbios do sono, transtorno obsessivo-compulsivo (TOC), transtorno de estresse pós- traumático (PTSD), síndrome de Tourette, malária e pirexia.

12. Uso, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a doença é dor.

13. Uso, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a doença é inflamação.

14. Uso, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a doença é síndrome do intestino irritável (IBS).

15. Uso, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a doença é doença inflamatória intestinal (IBD).

16. Uso, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a doença é colite.

17. Processo de produção da forma cristalina do sal de HCl conforme definida na reivindicação 1, do Padrão 2 de forma cristalina conforme definido em qualquer uma das reivindicações 2 a 5, e/ou do Padrão 1 de forma cristalina conforme definido em qualquer uma das reivindicações de 6 a 9, caracterizado pelo fato de que se realiza com um solvente adequado.

18. Processo, de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que o solvente adequado é selecionado a partir do grupo que consiste em acetona, acetonitrila, 1-butanol, ciclo-hexano, diclorometano, éter di- isopropílico, dimetilacetamida, dimetilsulfóxido, dioxano, etanol, acetato de etila, heptano, acetato de isopropila, éter metil-terc-butílico, metil-etil-cetona, metil-isobutil-cetona, metanol, 2-propanol, tolueno, tetra-hidrofurano, água e a mistura dos seus solventes.