BR122022006547B1

BR122022006547B1 - Métodos de fabricação de uma película à base de plasma flexível, e películas à base de plasma flexível

Info

Publication number: BR122022006547B1
Application number: BR122022006547-3A
Authority: BR
Inventors: Daniel Grant Ericson
Original assignee: Octapharma Ag
Priority date: 2016-05-31
Filing date: 2017-05-31
Publication date: 2022-12-13
Also published as: CN109789245B; BR112018074591A2; EP3701973B1; AU2017275577B2; MX2018014889A; BR112018074591B1; RU2018146094A; CA3224181A1; IL284877B; ES2936807T3; US11383002B2; IL263093B; US20200297893A1; DK3701973T3; US11383001B2; MX2022001339A; AU2017275577A1; EP3463498A2; RU2018146094A3; EP4194017A1

Abstract

A presente invenção refere-se a películas à base de plasma e em particular a películas flexíveis à base de plasma. A invenção se refere ainda a métodos de fabricação e uso das películas flexíveis à base de plasma. Realizações da invenção foram desenvolvidas particularmente para a fabricação de películas flexíveis à base de plasma úteis como um hemostato no tratamento e/ou prevenção de sangramentos leves a severos assim como arteriais, como uma folha antiaderente para reduzir ou prevenir o desenvolvimento de aderências induzidas por cirurgia, como um emplastro para a cura de feridas, como um curativo para feridas ou como uma película útil no reparo da hérnia. Realizações da invenção serão descritas a seguir com referência a estas aplicações. No entanto, apreciar-se-á que a invenção não está limitada a este campo particular de uso.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção refere-se a películas à base de plasma e em particular a películas flexíveis à base de plasma. A invenção se refere ainda a métodos de fabricação de e uso das películas flexíveis à base de plasma.

[002] Realizações da invenção foram desenvolvidas particularmente para a fabricação de películas flexíveis à base de plasma úteis como um hemostato no tratamento e/ou prevenção de sangramentos leves a severos assim como arteriais, como uma folha antiaderente para reduzir ou prevenir o desenvolvimento de aderências induzidas por cirurgia, como um emplastro para a cura de feridas, como um curativo para feridas ou como uma película útil no reparo da hérnia. As realizações da invenção serão descritas a seguir com referência a estas aplicações. No entanto, apreciar-se-á que a invenção não está limitada a este campo particular de uso.

HISTÓRICO DA INVENÇÃO

[003] Qualquer discussão sobre a técnica anterior ao longo deste relatório descritivo não deve ser considerada de modo algum uma admissão de que tal técnica é amplamente conhecida ou faz parte do conhecimento geral comum no campo.

[004] Películas ou folhas para o uso como produtos médicos contêm frequentemente material embutido tal como fibras ou tecidos para alterar/melhorar as propriedades mecânicas de tais películas ou folhas, em particular para melhorar sua resistência à pressão. No entanto, dependendo do tipo de fibras e/ou tecidos usados, tais películas ou folhas aplicadas são conhecidas por desencadear complicações in situ devido à biodegradabilidade somente parcial das fibras e tecidos. As complicações típicas que surgem incluem o desenvolvimento de tecido conjuntivo entre tecidos e/ou órgãos de outra forma não relacionados que levam a aderências pós-cirúrgicas/induzidas por cirurgia.

[005] As aderências pós-cirúrgicas/induzidas por cirurgia podem levar a complicações clínicas severas tais como perda de sensação, infertilidade, bloqueio intestinal e dor pélvica. A severidade dos sintomas depende do local e tamanho da aderência. O número de pacientes que sofrem de aderências pós-cirúrgicas/induzidas por cirurgia está aumentando e 55% - 90% dos pacientes que sofrem cirurgias ginecológicas e/ou abdominais enfrentam complicações que surgem de aderências.

[006] Películas de fibrina totalmente biodegradáveis são conhecidas e películas à base de plasma foram descritas, por exemplo, vide EP 0485210 A2 e US 8.529.959 B2. Como já indicado acima, produtos médicos à base de plasma, tópicos ou implantáveis tais como películas ou folhas têm geralmente uma vantagem de biocompatibilidade em comparação com películas ou folhas similares compreendendo materiais não à base de plasma tais como fibras e/ou tecidos. Em adição às complicações descritas acima, produtos à base de plasma tais como películas são adequadas para prover pacientes individuais com um produto à base de plasma implantável gerado de seu próprio plasma provendo um grau muito alto de biocompatibilidade.

[007] O documento EP 0485210 A2 revela um método de fabricação para películas à base de plasma sanguíneo compreendendo a coagulação de 50 mL de plasma citratado com 8 - 10 unidades NIH de trombina em um aparelho de molde. No entanto, as películas à base de plasma sanguíneo preparadas de acordo com a descrição de EP 0485210 A2 são frágeis e, portanto, inflexíveis e exibem somente fraca resistência mecânica tal que as películas rompem mediante a dobra, tornando-as inadequadas para aplicações onde flexibilidade e/ou resistência à pressão é exigida.

[008] O documento US 8.529.959 B2 revela folhas compreendendo um plástico derivado de plasma sanguíneo. O plástico derivado de plasma sanguíneo é descrito como sendo obtido pela coagulação de sangue com cálcio, secagem do coágulo obtido e trituração do coágulo seco para produzir pó de coágulo de plasma, o qual é misturado com glicerol para preparar a massa compreendendo 65% pó de coágulo de plasma e 35% de glicerol, e em que a massa é subsequentemente moldada por pressão em uma temperatura elevada e alta pressão para formar as folhas. As folhas preparadas de acordo com a revelação de US 8.529.959 B2 têm uma flexibilidade muito limitada e fraca resistência mecânica tal que as folhas rompem mediante a dobra ornando-as inadequadas para aplicações onde flexibilidade e ou resistência à pressão é exigida.

[009] Consequentemente, existe no campo uma necessidade de películas ou folhas flexíveis à base de plasma biodegradáveis melhoradas. Em particular, películas ou folhas à base de plasma tendo um alto grau de flexibilidade assim como alta resistência mecânica são necessárias.

BREVE DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

[010] É um objetivo de a presente invenção superar ou melhorar pelo menos uma das desvantagens da técnica anterior ou prover uma alternativa útil. Em particular, é um objetivo de a presente invenção prover películas à base de plasma flexíveis melhoradas e prover métodos melhorados para a fabricação e uso de tais películas, por exemplo, no tratamento e/ou prevenção de indicações médicas.

[011] A presente invenção é inter alia baseada na descoberta surpreendente de que a flexibilidade e/ou elasticidade e/ou resistência mecânica de películas à base de plasma, quando expressas em função de número de dobras, resistência à dobra e/ou em função de uma resistência da película à base de plasma à pressão de ruptura, podem ser melhoradas pela mistura de plasma sanguíneo com trombina e/ou cálcio em excesso da quantidade exigida para induzir a coagulação do plasma, em que o plasma está contido dentro de um molde de um volume e formato desejados.

[012] Consequentemente, em um primeiro aspecto, a presente invenção se refere a um método de fabricação de uma película à base de plasma flexível compreendendo as etapas de: (a) mistura de plasma sanguíneo com mais do que 2 unidades internacionais (UI) de trombina por mililitro (mL) do plasma e/ou com cerca de 0,65 a 1,3 mg de íons de cálcio por mililitro (mL) do plasma para induzir a coagulação do plasma, em que o plasma está contido dentro de um molde e; (b) manutenção do plasma no molde pelo tempo exigido para que o plasma coagule e forme a película, em que opcionalmente durante ou no final do tempo uma pressão é aplicada ao plasma no molde.

[013] Além disso, verificou-se surpreendentemente que a flexibilidade de películas à base de plasma pode ser melhorada pela mistura de plasma sanguíneo com pelo menos um ativador do sistema de coagulação em um molde e aplicação de pressão ao plasma no molde durante ou no final do tempo exigido para que o plasma coagule.

[014] Consequentemente, em um segundo aspecto, a presente invenção se refere a um método de fabricação de uma película à base de plasma flexível compreendendo as etapas de: (a) mistura de plasma sanguíneo com um ativador do sistema de coagulação para induzir a coagulação do plasma, em que o plasma está contido dentro de um molde e; (b) manutenção do plasma no molde pelo tempo exigido para que o plasma coagule e forme a película, em que durante ou no final do tempo uma pressão que varia de cerca de 0,3 a 125 libras por polegada quadrada (psi) é aplicada ao plasma no molde para formar a película. (c)

[015] À luz do que foi dito acima, entender-se- á que a presente invenção, em uma ou mais realizações preferidas, também se refere a um método de fabricação de uma película à base de plasma flexível compreendendo as etapas de: (a) mistura de plasma sanguíneo com cerca de mais do que 2 unidades internacionais (UI) de trombina por mililitro (mL) do plasma e/ou com cerca de 0,65 a 1,3 mg de íons de cálcio por mililitro (mL) do plasma para induzir a coagulação do plasma, em que o plasma está contido dentro de um molde e; (b) manutenção do plasma no molde pelo tempo exigido para que o plasma coagule e forme a película, em que durante ou no final do tempo uma pressão que varia de cerca de 0,3 a 125 libras por polegada quadrada (psi) é aplicada ao plasma no molde.

[016] Nos métodos dos primeiro e segundo aspectos, assim como em realizações onde as etapas de método específicas dos dois primeiros aspectos são combinadas, o plasma sanguíneo é misturado com cerca de 2,9 a 3,1 UI de trombina por mL de plasma para induzir a coagulação no molde e é subsequentemente mantido no molde pelo tempo exigido para que o plasma coagule e forme a película, e uma pressão que varia de cerca de 40 a 45 psi é aplicada ao plasma no molde por cerca de 50 a 7 0 segundos durante ou no final do tempo exigido para que o plasma coagule.

[017] Em um terceiro aspecto, a presente invenção se refere a uma película à base de plasma flexível quando preparada pelos métodos de acordo com o primeiro ou segundo aspectos.

[018] Em um quarto aspecto, a presente invenção se refere a uma película à base de plasma flexível compreendendo entre 0,1 a 10 UI de trombina por mL de plasma e tendo uma espessura que varia de cerca de 0,005 a 0,1 mm, em que a película flexível é caracterizada por um número de dobras de pelo menos 1, tal como pelo menos 2, tal como pelo menos 4, tal como pelo menos 5. Preferivelmente, nas realizações da presente invenção, as películas flexíveis à base de plasma também podem ser caracterizadas: por uma resistência à dobra de pelo menos 10, tal como pelo menos 20, tal como pelo menos 30, tal como pelo menos 40, tal como pelo menos 50, tal como pelo menos 60, tal como pelo menos 70, tal como pelo menos 80, tal como pelo menos 90, tal como pelo menos 100; e/ou por uma pressão de ruptura de cerca de 50 a 1000 mm Hg ou de cerca de 100 a 1000 mm Hg ou de cerca de 100 a 800 mm Hg ou de cerca de 100 a 600 mm Hg ou de cerca de 100 a 500 mm Hg ou de cerca de 100 a 450 mm Hg ou de cerca de 140 mm Hg ou de cerca de 150 mm Hg ou de cerca de 175 mm Hg ou de cerca de 200 mm Hg ou de cerca de 225 mm Hg ou de cerca de 250 mm Hg ou de cerca de 275 mm Hg ou de cerca de 300 mm Hg ou de cerca de 325 mm Hg ou de cerca de 350 mm Hg ou de cerca de 375 mm Hg ou de cerca de 400 mm Hg.

[019] Em um quinto aspecto, a presente invenção se refere às películas flexíveis à base de plasma de acordo com o terceiro ou quarto aspectos para o uso como um hemostato, preferivelmente como um hemostato para interromper um sangramento leve a severo. Consequentemente, em realizações do quinto aspecto, a invenção também se refere a um método de interrupção de um sangramento leve a severo, compreendendo a aplicação da película à base de plasma flexível de acordo com o terceiro ou quarto aspecto como um hemostato.

[020] Em um sexto aspecto, a presente invenção se refere às películas flexíveis à base de plasma de acordo com o terceiro ou quarto aspectos para o uso como um hemostato para interromper um sangramento arterial. Consequentemente, em realizações do sexto aspecto, a invenção também se refere a um método de interrupção de um sangramento arterial, compreendendo a aplicação da película à base de plasma flexível de acordo com o terceiro ou quarto aspecto como um hemostato.

[021] Em um sétimo aspecto, a presente invenção se refere às películas flexíveis à base de plasma de acordo com o terceiro ou quarto aspectos para o uso como uma folha antiaderente para reduzir ou prevenir o desenvolvimento de uma aderência induzida por cirurgia. Consequentemente, em realizações do sétimo aspecto, a invenção também se refere a um método de redução ou prevenção do desenvolvimento de aderências induzidas por cirurgia, compreendendo a aplicação da película à base de plasma flexível de acordo com o terceiro ou quarto aspecto como uma folha antiaderente.

[022] Em um oitavo aspecto, a presente invenção se refere às películas flexíveis à base de plasma de acordo com o terceiro ou quarto aspectos para o uso como um emplastro para a cura de feridas. Consequentemente, em realizações do oitavo aspecto, a invenção também se refere a um método de tratamento de uma ferida, compreendendo a aplicação da película à base de plasma flexível de acordo com o terceiro ou quarto aspecto como um emplastro para a cura de feridas.

[023] Em um nono aspecto, a presente invenção se refere às películas flexíveis à base de plasma de acordo com o terceiro ou quarto aspectos para o uso como um curativo para feridas. Consequentemente, em realizações do nono aspecto, a invenção também se refere a um método de tratamento de uma ferida, compreendendo a aplicação da película à base de plasma flexível de acordo com o terceiro ou quarto aspecto como um curativo para feridas.

[024] Em um décimo aspecto, a presente invenção se refere às películas flexíveis à base de plasma de acordo com o terceiro ou quarto aspectos para uso no reparo da hérnia. Consequentemente, em realizações do décimo aspecto, a invenção também se refere a um método de tratamento de uma hérnia, compreendendo a aplicação da película à base de plasma flexível de acordo com o terceiro ou quarto aspecto.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[025] As realizações da invenção serão agora descritas, por meio de exemplo somente, com referência aos desenhos em anexo nos quais:

[026] A Figura 1 mostra esquematicamente uma película à base de plasma flexível (1), de acordo com uma realização da presente invenção.

[027] A Figura 2 ilustra esquematicamente uma película à base de plasma (1) como aquela mostrada na Figura 1 compreendendo um ou mais agentes farmaceuticamente ativos (2).

[028] A Figura 3 ilustra esquematicamente a película à base de plasma (1) como aquela mostrada na Figura 1 compreendendo um ou mais agentes farmaceuticamente ativos (2) embutidos ao longo da película na qual dois agentes farmaceuticamente ativos adicionais (3, 4) foram aplicados por subsequente secagem por atomização. Em algumas realizações, os dois agentes farmaceuticamente ativos adicionais podem ser plasma seco por atomização (3) e um ativador seco por atomização do sistema de coagulação (4).

[029] A Figura 4 ilustra esquematicamente um corte vertical através de um aparelho adequado para a fabricação da película à base de plasma da presente invenção, onde (5) é um pistão de força descendente, (6) é uma placa não porosa para a aplicação uniforme de pressão ao plasma que está coagulando/coagulado (não mostrado) no molde (7) e compreendendo um sistema de remoção de líquido de material absorvente (8) e sucção acionado por vácuo (9).

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[030] A fim de prover um entendimento claro e consistente do relatório descritivo e reivindicações e do escopo a ser fornecido a tais termos, as seguintes definições são providas.

Definições

[031] No contexto do presente pedido, o termo “flexível” significa que uma estrutura tal como uma película à base de plasma é capaz de dobrar, mesmo em curvas apertadas, sem romper. Em particular, uma película flexível no contexto do presente pedido é capaz de dobrar sem romper e, como tal, o grau de flexibilidade da película pode ser expresso por meio de números de dobras ou resistência à dobra como definido acima. Adicionalmente, um grau de flexibilidade da película pode ser expresso pela pressão de ruptura da película também como definido acima.

[032] No contexto do presente pedido, o termo “à base de plasma”, em geral, significa estruturas e materiais tais como as películas de acordo com a presente invenção e, no caso de películas de múltiplas camadas, as camadas da película individual, que são produzidas de plasma sanguíneo como o material de origem. Em particular, se a maioria dos componentes de tais estruturas ou materiais for plasma, eles são considerados estruturas ou materiais à base de plasma.

[033] No contexto do presente pedido, o termo “película”, em geral, significa estruturas membranosas, substancialmente planares, finas, que também podem ser descritas como folhas. Não obstante, o termo película no contexto do presente pedido abrange expressamente películas ou folhas de camada única assim como películas ou folhas compósitas de múltiplas camadas. Adicionalmente, uma película no contexto do presente pedido pode compreender agentes farmaceuticamente ativos sejam aplicados topicamente à película, distribuídos homogeneamente ao longo da película ou encapsulados entre as camadas de película de uma película de múltiplas camadas. O termo “película” também abrange estruturas tendo um grau de porosidade que permite uma absorção e/ou liberação de substâncias tais como agentes farmaceuticamente ativos da película. Como tal, o termo “película” no contexto do presente pedido também abrange uma estrutura membranosa, substancialmente planar, fina mediante a qual ou dentro da qual, agentes farmaceuticamente ativos podem estar contidos. Consequentemente, o termo película quando usado para descrever realizações da presente invenção também abrange recipientes ou dispositivos de distribuição à base de plasma para agentes farmaceuticamente ativos compreendidos sobre ou dentro da película.

[034] No contexto do presente pedido, o termo “agente farmaceuticamente ativo” significa uma substância, partícula e/ou fármaco usados para fornecer atividade farmacológica ou, de outra forma, ter um efeito direto no diagnóstico, cura, mitigação, tratamento ou prevenção de uma indicação médica ou ter um efeito direto na restauração, correção ou modificação de funções fisiológicas.

[035] No contexto do presente pedido, o termo “agente que aumenta o grau de reticulação entre polímeros de fibrina” signif ica agentes que aumentam o número de ligações entre as cadeias y e α de moléculas de fibrina dessa forma estabilizando as fibras de fibrina. Tais agentes, dentro outros, incluem fator de coagulação ativado XIII (FXIIIa), cloreto de cálcio, moléculas modificadas de fibrina tais como moléculas de fibrina truncadas, mutadas e anticorpos específicos de cadeia.

[036] No contexto do presente pedido, o termo “número de dobras” significa o número de vezes que uma estrutura tal como uma película à base de plasma pode ser dobrada em curvas apertadas até que a película rompa. Um teste simples de determinação do número de dobras é descrito abaixo.

[037] No contexto do presente pedido, o termo “resistência à dobra” significa o número de vezes que uma estrutura tal como uma película à base de plasma pode ser dobrada repetidamente em uma curva apertada e novamente desdobrada para sua posição original. A resistência à dobra no contexto do presente pedido provê um meio para a estimativa da resistência ao desgaste de uma estrutura flexível.

[038] No contexto do presente pedido, o termo “pressão de ruptura” significa a pressão máxima que uma estrutura pode suportar antes de romper ou quebrar. No contexto do presente pedido, o termo pressão de ruptura significa particularmente a pressão máxima que uma película à base de plasma pode suportar antes de romper ou quebrar.

[039] No contexto do presente pedido, o termo “tempo exigido para que o plasma coagule” recebe seu significado em Inglês simples, isto é, ele significa o tempo exigido para que o plasma usado na preparação das películas à base de plasma descritas aqui coagule.

[040] No contexto do presente pedido, o termo “ativador do sistema de coagulação” significa substâncias, partículas ou agentes que iniciam a coagulação. Tais ativadores podem iniciar a coagulação em qualquer estágio da cascata de coagulação e, como tal, incluem agentes que atuam sobre os caminhos de coagulação intrínsecos, extrínsecos e comuns.

[041] No contexto do presente pedido, o termo “hemostato” significa dispositivos adequados para reduzir e por fim interromper o sangramento. Em particular, o termo abrange películas à base de plasma adequadas para fechar os vasos sanguíneos. Como tais, hemostatos no contexto do presente pedido incluem películas à base de plasma que podem fechar os vasos sanguíneos como uma barreira física, películas à base de plasma que podem aplicar agentes hemostáticos ao local de sangramento para fechar o vaso sanguíneo assim como combinações destes.

[042] Em adição às definições acima e a menos que o contexto exija claramente o contrário, ao longo da descrição e das reivindicações, as palavras “compreendem”, “compreendendo” e similar devem ser interpretadas em um sentido inclusivo quando opostas a um sentido exclusivo ou exaustivo; ou seja, no sentido de “incluindo, entre outros”.

[043] Adicionalmente, referência ao longo deste relatório descritivo a “uma realização”, “algumas realizações” ou “uma realização” significa que uma função, estrutura ou característica particular descrita em conexão com a realização é incluída em pelo menos uma realização da presente invenção. Assim, aparências das expressões “em uma realização”, “em algumas realizações” ou “em uma realização” em vários lugares ao longo deste relatório descritivo não estão todas necessariamente se referindo à mesma realização, mas podem estar. Além disso, as funções, estruturas ou características particulares podem ser combinadas de qualquer maneira adequada, como seria aparente àquele técnico no assunto desta revelação, em uma ou mais realizações.

[044] Como usado aqui, a menos que especificado o contrário, o uso dos adjetivos ordinais “primeiro”, “segundo”, “terceiro”, etc., para descrever um objeto comum, indica meramente que diferentes exemplos de objetos similares estão sendo referidos e não são destinados a implicar que os objetos assim descritos devem estar em uma sequência dada, seja temporalmente, espacialmente, na classificação ou de qualquer outra maneira.

[045] Como usado aqui, o termo “exemplar” é usado no sentido de prover exemplos, quando oposto a indicar qualidade. Ou seja, uma “realização exemplar” é uma realização provida como um exemplo, quando oposta a ser necessariamente uma realização de qualidade exemplar. Películas à base de plasma flexíveis da invenção e métodos para a fabricação e uso das mesmas

[046] Como descrito acima, a flexibilidade, elasticidade e/ou resistência mecânica de películas à base de plasma é importante para que tais películas à base de plasma sejam usadas eficientemente e com sucesso como hemostatos para interromper sangramentos leves a severos e ainda para interromper sangramentos arteriais. Em particular, as películas à base de plasma da presente invenção proveem a exigida flexibilidade, elasticidade e resistência mecânica exigida para que as películas vedem tais sangramentos, isto é, a flexibilidade necessária para que a película se conforme à topologia fisiológica do local do sangramento e suporte ainda pressão sanguínea arterial no local do sangramento.

[047] Similarmente, a flexibilidade, elasticidade e resistência mecânica de películas à base de plasma de acordo com a presente invenção são importantes para que tais películas à base de plasma sejam eficientemente usadas como folhas antiaderentes para reduzir ou prevenir o desenvolvimento de aderências induzidas por cirurgia.

[048] Aderências pós-cirúrgicas/induzidas por cirurgia resultam da formação de tecido cicatricial após cirurgia. Embora a aderência seja parte da resposta de cura normal ao trauma no tecido, ela pode levar a severas complicações pós-cirúrgicas quando uma conexão cruzada estável entre tecidos desconectados de outra forma surge como um resultado de aderências.

[049] De fato, mais do que 90% dos pacientes desenvolvem aderências peritoneais após a cirurgia abdominal ou pélvica. Na maioria dos pacientes, o tecido aderente é subsequentemente remodelado e por fim dissolvido. No entanto, em milhões dos pacientes, as aderências se formam entre órgãos e/ou tecidos que são normalmente separados, tais como os intestinos, vísceras, útero, ovários e outros órgãos, causando disfunção e outras complicações possivelmente severas. Por exemplo, dentro da cavidade abdominal, as aderências podem levar à obstrução do intestino delgado, infertilidade feminina e dor. Em adição, as aderências frequentemente tornam a cirurgia subsequente mais difícil e limitam as opções de subsequente tratamento. Por exemplo, as aderências frequentemente impedem subsequente cirurgia minimamente invasiva.

[050] As películas à base de plasma da presente invenção são adequadas para prover folhas de barreira antiaderente projetadas para agir como uma proteção física mantendo tecido danificado separado do tecido circundante, dessa forma, prevenindo aderência indesejável. A película à base de plasma quando usada como uma folha antiaderente separa o tecido traumatizado durante seu tempo inicial de cura, mas no final romperá totalmente devido a sua biodegradação. Em relação a isso, é notável o fato de que o crescimento da aderência inicia dentro dos primeiros 3 - 5 dias após a cirurgia. Como tal, as películas à base de plasma da presente invenção são particularmente úteis como folhas antiaderentes permitindo a separação de tecido traumatizado do tecido circundante durante estes primeiros dias de cura pós-cirúrgica, dessa forma, reduzindo ou prevenindo o desenvolvimento de aderências induzidas por cirurgia e, por fim, reduzindo ou prevenindo o risco de complicações que surgem devido à formação de aderências induzidas por cirurgia. Como será apreciado, a flexibilidade das películas à base de plasma da presente invenção provê uma vantagem significativa quando tais películas são usadas como folhas antiaderentes devido a sua capacidade de se conformar à topologia fisiológica do tecido traumatizado, dessa forma, provendo uma eficiente barreira antiaderente entre o tecido traumatizado e os tecidos circundantes.

[051] Devido a sua biocompatibilidade e completa biodegradação ao longo do tempo, as películas flexíveis à base de plasma tais como a película (1) mostrada esquematicamente na Figura 1 também são particularmente adequadas para o uso como curativos para feridas, emplastros para a cura de feridas ou para o uso no reparo de hérnias ou lesões vasculares. Em relação a isso, é notável o fato de que as películas à base de plasma da presente invenção são tipicamente não tóxicas, não interferentes com a cura normal, não interferentes com funções imunológicas, aplicáveis em várias situações tais como sangramento, infecções e cirurgia anastomótica e são, devido a sua flexibilidade, elasticidade e alta resistência mecânica fáceis de manipular e fáceis de aplicar.

[052] Adicionalmente, as películas à base de plasma da presente invenção podem servir como veículos, recipientes e/ou dispositivos de distribuição para agentes farmaceuticamente ativos, por exemplo, para agentes úteis no tratamento das aplicações médicas mencionadas acima. Por exemplo, se a película for usada como um emplastro para a cura de feridas, a película pode transportar um ou mais agentes farmaceuticamente ativos de cura da ferida, isto é, agentes que suportam a cura de feridas. Alternativamente, as películas da presente invenção podem ser usadas como curativos simples para feridas.

[053] Como tais, as películas à base de plasma da presente invenção tais como a película (1) ilustrada esquematicamente na Figura 2 pode compreender pelo menos um agente farmaceuticamente ativo (2). Preferivelmente, o pelo menos um agente farmaceuticamente ativo é selecionado do grupo que consiste em: agentes antibióticos; agentes anti- inflamatórios; agentes anti-infecciosos; fatores de crescimento; quimiocinas; imunomoduladores; agentes de cura da ferida; ativadores do sistema de coagulação; agentes anticoagulação; agentes antiaderentes; agentes antifibrinolíticos; penicilina; prata; clorexidina; células; quimiocinas derivadas de células estromais; fator 1 alfa derivado de células estromais; fator 1 beta derivado de células estromais; fibrinogênio; Fator VIIa; CXCL-12; heparina; aprotinina; ácido tranexâmico; tensoativos não iônicos; Pluronic F68; TWEEN 80; Inibidores de COX-2; e Nimesulida.

[054] As películas da presente invenção podem ser projetadas especificamente como dispositivos de distribuição para os agentes farmaceuticamente ativos listados acima. Por exemplo, existe uma necessidade de películas flexíveis à base de plasma aplicáveis topicamente ou implantáveis, que possam conter os agentes farmaceuticamente ativos e/ou aplicá-los a um local de tratamento.

[055] Tensoativos não iônicos, tais como polioxietileno sorbitano ésteres, em particular polioxietileno (20) sorbitano mono-oleato (TWEEN-80®), copolímeros em bloco de polioxietileno-polioxipropileno, em particular Pluronic F68® ou inibidores de COX-2, em particular N-(4-Nitro-2-fenoxifenil)metanossulfonamida (Nimesulida®) ou combinações destes são particularmente úteis quando películas à base de plasma para o uso como folhas antiaderentes para reduzir ou prevenir o desenvolvimento de aderências induzidas por cirurgia devem ser preparadas. Em tais películas, estes agentes podem ser distribuídos homogeneamente ao longo da película ou podem ser aplicados topicamente à película, seja sozinho ou como uma combinação de agentes.

[056] Em algumas realizações, o agente é distribuído homogeneamente ao longo da película. Em outras realizações, o agente é aplicado topicamente à película. Ainda em outras realizações da presente invenção, a película à base de plasma pode compreender um agente farmaceuticamente ativo distribuído homogeneamente ao longo da película e compreender ainda o mesmo agente ou outro agente farmaceuticamente ativo aplicado topicamente a uma superfície da película.

[057] Em realizações onde os agentes são distribuídos homogeneamente ao longo da película, os agentes se tornam “presos” dentro da película durante a formação das películas à base de plasma devido à coagulação do plasma. Após a implantação, a película à base de plasma degradará (principalmente devido a fatores líticos, hidratação e desgaste mecânico) dessa forma liberando sucessivamente os agentes farmaceuticamente ativos distribuídos ao longo dela.

[058] Quando um agente é aplicado topicamente a uma película de acordo com a invenção, o agente pode ser aplicado por revestimento por pulverização, secagem por atomização, escovação e/ou imersão.

[059] As quimiocinas derivadas de células estromais são particularmente interessantes para o uso com películas da presente invenção. Os fatores 1-alfa e 1-beta derivados de células estromais são pequenas citocinas que pertencem à família da quimiocina, cujos membros ativam leucócitos e são frequentemente induzidos em resposta a estímulos pró-inflamatórios tais como lipopolissacarídeos, fator de necrose tumoral (TNF) ou interleucina-1 (IL1). Quimiocinas tais como CXCL-12 inibem a formação de tecido conjuntivo e são, portanto, agentes úteis para a aplicação a ou distribuição ao longo das películas da presente invenção quando usadas como folhas antiaderentes.

[060] Uma vez que as películas tenham sido preparadas, agentes que inibem a formação de fibrina adicional, tais como heparina, aprotinina, ácido tranexâmico ou outros antifibrinolíticos também podem ser adicionados a películas à base de plasma a serem usadas como folhas antiaderentes, por exemplo, por aplicação tópica.

[061] Em algumas realizações, o agente pode ser um agente único ou pode ser uma mistura de agentes tais como proteínas, por exemplo, compreendendo uma mistura de ativadores do sistema de coagulação tais como plasma por si só.

[062] Em algumas realizações, as películas à base de plasma da presente invenção podem compreender mais do que um agente farmaceuticamente ativo distribuído homogeneamente ao longo da película e/ou mais do que um agente farmaceuticamente ativo aplicado topicamente à película.

[063] Em uma ou mais realizações preferidas: (i) um primeiro agente farmaceuticamente ativo é aplicado topicamente à película, opcionalmente por secagem por atomização; (ii) uma camada de separação é subsequentemente aplicada sobre o primeiro agente aplicado topicamente e; (iii) um segundo agente farmaceuticamente ativo é aplicado topicamente sobre a camada de separação.

[064] Em tais realizações, o primeiro agente farmaceuticamente ativo pode ser fibrinogênio, a camada de separação pode compreender amido, opcionalmente amido gelatinizado, e o segundo agente farmaceuticamente ativo pode ser trombina. Preferivelmente, o fibrinogênio é aplicado por secagem por atomização sobre uma camada de película, aplicação de amido gelatinizado ainda líquido (preparado, por exemplo, por gelatinização de 2,5 g de amido em 50 mL de água por aquecimento a 125 °C) no topo da camada do fibrinogênio e aplicação de uma pressão ou cerca de 15,5 psi (105 kPa) à película. Tipicamente, 2 mL de amido gelatinizado são suficientes para cobrir uma película 4”x4” com uma camada de separação. Subsequentemente, trombina é aplicada sobre a camada de separação. A secagem por atomização de cerca de 5 mL de uma solução de 300 UI/mL de trombina em uma película 4”x4” provou ser mais eficaz.

[065] Em realizações alternativas, a película da presente invenção pode compreender um agente farmaceuticamente ativo aplicado topicamente para o uso como um hemostato em apenas uma superfície externa da película em camadas, enquanto uma das camadas internas compreende um agente diferente, por exemplo, um antibiótico. O agente hemostático aplicado topicamente sobre a superfície da película pode ser librado e agir imediatamente mediante a aplicação da película a uma ferida, dessa forma, provendo um efeito hemostático benéfico imediato, enquanto o agente antibiótico da camada(s) interna da película somente é liberado após o efeito hemostático imediato, dessa forma, provendo um efeito antibiótico durante subsequentes estágios da cura. Como tal, em tais realizações, a aplicação tópica pode prover um efeito de liberação imediato de um agente, enquanto a distribuição homogênea ao longo da película pode permitir um efeito de liberação retardada ou liberação lenta de um agente.

[066] Em outras realizações e se referindo à Figura 3, a película à base de plasma (1) opcionalmente compreendendo um agente farmaceuticamente ativo (2) distribuído homogeneamente ao longo dela também pode ser revestida com plasma seco por atomização (3) para prover uma camada de proteínas de plasma à superfície externa da película. A pistola de pulverização de ar comprimido pode ser utilizada para aplicação tópica de plasma visto que ela mantém a atividade das proteínas de plasma após a secagem. Em efeito, esta aplicação tópica por secagem por atomização provê uma película à base de plasma compreendendo proteínas de coagulação ativa em sua superfície externa. As atividades de fibrinogênio e FXa do sistema de coagulação permanecem intactas tal que a película possa ser usada como um curativo hemostático com uma camada seca de pulverização de proteínas de coagulação ativa. Em adição, uma camada final de um ativador do sistema de coagulação (4) tal como um conversor de trombina pode ser pulverizada sobre o topo do plasma seco por atomização. Por exemplo, o conversor de trombina pode ser selecionado de: fator tecidual, fator tecidual recombinante, trombina, caulim, terra diatomácea e ativadores do sistema de coagulação. A película à base de plasma assim modificada pode ser usada como um hemostato para sangramentos leves, moderados ou severos.

[067] Adicionalmente, uma película à base de plasma flexível de acordo com a presente invenção pode ser uma película compósita compreendendo várias camadas de película à base de plasma, isto é, uma película à base de plasma de múltiplas camadas. Em algumas películas de múltiplas camadas à base de plasma, cada camada de película individual pode compreender nenhum, o mesmo ou diferentes agentes farmaceuticamente ativos.

[068] O grau de reticulação entre polímeros de fibrina da película à base de plasma flexível influência na velocidade de degradação da película, em que um alto grau de reticulação se correlaciona com lenta degradação, e em que um baixo grau de reticulação se correlaciona com rápida degradação. Consequentemente, o controle do grau de reticulação permite o controle da taxa ou velocidade de degradação e, portanto, permite que a película seja customizada de acordo com sua aplicação.

[069] Por exemplo, se a película for usada como uma folha antiaderente, a película deve degradar dentro de uma a duas semanas da implantação. Em contraste, as películas usadas para o reparo da hérnia devem ter uma velocidade de degradação muito mais lenta levando a um implante quase permanente, preferivelmente exigindo várias semanas a meses ou, em casos particulares, ainda vários meses a anos, antes da completa degradação da película. Em geral, a velocidade de degradação pode ser otimizada para se adequar a uma função particular da película, isto é, para promover a cura, prover estabilidade mecânica para uma ruptura ou lesão coberta pela película, etc.

[070] Similarmente, o grau de reticulação entre polímeros de fibrina da película influencia no tempo de liberação de um agente farmaceuticamente ativo distribuído homogeneamente dentro da película, em que um alto grau de reticulação se correlaciona com tempos de liberação mais longos, e em que um baixo grau de reticulação se correlaciona com tempos de liberação mais curtos. Consequentemente, o controle do grau de reticulação permite o controle da taxa de liberação de um agente farmaceuticamente ativo distribuído homogeneamente ao longo das películas da presente invenção.

[071] A combinação das diferentes características das películas descritas aqui, isto é, películas de monocamada, películas de múltiplas camadas, diferentes agentes seja aplicado topicamente ou distribuído ao longo da película, permitem a produção de películas feitas sob medida para aplicações específicas e ainda pacientes individuais.

[072] A película à base de plasma flexível da presente invenção é tipicamente preparada de plasma líquido, onde o plasma pode ser plasma humano ou animal. Por exemplo, o plasma é plasma fresco congelado (FFP) ou é plasma seguro frente a patógenos. FFP pode ser obtido de um banco de sangue. No entanto, plasmas obtidos de um fabricante de plasma profissional tal como CLS Behring, Baxter ou Octapharma são tipicamente preferidos visto que eles proveem muito maior segurança frente a patógenos devido à remoção de patógenos e métodos de inativação incorporados em seus processos de produção. Plasmas de fabricantes de plasma são geralmente reunidos em plasmas seguros frente a patógenos.

[073] Em realizações onde o plasma seguro frente a patógenos é usado como o material de origem para as películas à base de plasma da presente invenção, o plasma preferivelmente foi submetido a tratamento de inativação viral, foi pasteurizado, foi irradiado e/ou foi nanofiltrado. Tipicamente, o plasma seguro frente a patógenos sendo usado como material de origem para as películas da presente invenção foi submetido a tratamento de solvente/detergente (tratamento S/D) para inativar quaisquer patógenos virais possivelmente contidos nele.

[074] Em uma ou mais realizações preferidas, as películas à base de plasma da presente invenção têm uma espessura que varia de cerca de 0,005 a 0,1 mm ou de cerca de 0,005 a 0,09 mm ou de cerca de 0,0075 a 0,08 mm ou de cerca de 0,01 a 0,08 mm ou de cerca de 0,01 a 0,07 mm ou de cerca de 0,015 a 0,065 mm ou de cerca de 0,02 a 0,06 mm ou de cerca de 0,02 a 0,055 mm ou de cerca de 0,02 a 0,05 mm ou de cerca de 0,02 a 0,04 mm ou de cerca de 0,02 a 0,03 mm ou cerca de 0,01 mm ou cerca de 0,02 mm ou cerca de 0,03 mm ou cerca de 0,04 mm ou cerca de 0,05 mm ou cerca de 0,06 mm.

[075] Como já indicado acima, a flexibilidade, elasticidade e resistência mecânica particularmente vantajosa das películas flexíveis à base de plasma da presente invenção podem ser expressas por meio de números de dobras, resistência à dobra e pressão de ruptura das películas.

[076] Um teste simples para determinar a flexibilidade da película é a avaliação de um número de dobras da película. Tal determinação é realizada ao dobrar metade da película no topo da outra metade, virando a pilha em 90° e novamente dobrando uma metade da pilha no topo da outra e assim por diante até que a película rompa ou quebre. Cada dobra sem acionar a ruptura da película aumenta o número de dobras em 1. Este teste é particularmente útil para a avaliação de uma capacidade da película à base de plasma de manter sua integridade ao ser dobrada em curvas apertadas. As películas flexíveis à base de plasma da presente invenção são tipicamente caracterizadas por um número de dobras de pelo menos 1, tal como pelo menos 2, tal como pelo menos 3, tal como pelo menos 4, tal como pelo menos 5.

[077] Outro teste para determinar a flexibilidade da película é a avaliação da resistência à dobra. Tal determinação é realizada ao dobrar repetidamente uma metade da película sobre o topo da outra metade e desdobrar até sua posição original. A resistência à dobra é expressa pelo número de tais repetições de dobra/desdobra e provê um meio para a estimativa da resistência ao desgaste. As películas flexíveis à base de plasma da presente invenção são tipicamente caracterizadas por uma resistência à dobra de pelo menos 10, tal como pelo menos 20, tal como pelo menos 30, tal como pelo menos 40, tal como pelo menos 50, tal como pelo menos 60, tal como pelo menos 70, tal como pelo menos 80, tal como pelo menos 90, tal como pelo menos 100.

[078] Ainda outro método para a determinação da flexibilidade da película é a determinação de pressão de ruptura de acordo com o método de teste padrão para resistência de ruptura de selantes cirúrgicos (ASTM-F 239204). Uma película é fixada em uma instalação de acordo com ASTM-F 2392-04 e a instalação é conectada a uma bomba com um transdutor de pressão sendo fixado em linha entre a bomba e a instalação de pressão de ruptura. Bombear um fluido para dentro do sistema aumenta a pressão até que a película rompa. Assim, a pressão de ruptura obtida é indicada como [mm Hg]. As películas flexíveis à base de plasma da presente invenção são tipicamente caracterizadas por uma pressão de ruptura de cerca de 50 a 1000 mm Hg ou de cerca de 100 a 1000 mm Hg ou de cerca de 100 a 800 mm Hg ou de cerca de 100 a 600 mm Hg ou de cerca de 100 a 500 mm Hg ou de cerca de 100 a 450 mm Hg ou de cerca de 140 mm Hg ou de cerca de 150 mm Hg ou de cerca de 175 mm Hg ou de cerca de 200 mm Hg ou de cerca de 225 mm Hg ou de cerca de 250 mm Hg ou de cerca de 275 mm Hg ou de cerca de 300 mm Hg ou de cerca de 325 mm Hg ou de cerca de 350 mm Hg ou de cerca de 375 mm Hg ou de cerca de 400 mm Hg.

[079] Em algumas realizações preferidas da presente invenção, uma película à base de plasma flexível caracterizada por uma pressão de ruptura de pelo menos 130 a 240 mm Hg, quando a película seca (com cerca de 4% de água residual) tem uma espessura de película de 0,03 mm, em particular por uma pressão de ruptura de 170 a 240 mm Hg para uma película de 0,03 mm em condição seca ou 130 a 180 mm Hg para uma película de 0,03 mm (espessura de película em condição seca) após a imersão por 10 minutos em uma solução aquosa contendo 10% de glicerol é provida.

[080] Em outras realizações preferidas da presente invenção, uma película à base de plasma flexível caracterizada por uma pressão de ruptura de pelo menos 190 a 450 mm Hg quando a película seca (com cerca de 4% de água residual) tem uma espessura de película de 0,05 - 0,06 mm, em particular por uma pressão de ruptura de 300 a 450 mm Hg para uma película de 0,05 - 0,06 mm em condição seca ou 190 a 400 mm Hg para uma película de 0, 05 - 0, 06 mm (espessura de película em condição seca) após a imersão por 10 minutos em uma solução aquosa contendo 10 % de glicerol é provida.

[081] A resistência à tração foi determinada de acordo com o método de teste padrão para propriedades de resistência de adesivos de tecido em juntas de cisalhamento por Carga de tensão (ASTM F2255-05) pela medição com um sistema de este mecânico de modelo Instron 58R4505 usando uma célula de carga de 50 N (~10#) e uma velocidade de cruzeta de 1,0 polegada por minuto. As amostras tinham formato de osso de cachorro com uma região estreita de 0,25” e foram colocadas no instrumento com garras pneumáticas revestidas de borracha com a pressão ajustada a 20 psi. A resistência à tração obtida é fornecida como libra-força [lbf]. As películas flexíveis à base de plasma da presente invenção são tipicamente caracterizadas por uma resistência à tração de pelo menos 0,25 lbf (aproximadamente 1,1 N), tal como pelo menos 0,5 lbf (aproximadamente 2,2 N), tal como pelo menos 0,75 lbf (aproximadamente 3,3 N), tal como pelo menos 1 lbf (aproximadamente 4,4 N), tal como pelo menos 1,2 lbf (aproximadamente 5,28 N) ou por uma resistência à tração que varia de cerca de 0,25 lbf (aproximadamente 1,1 N) a 1,5 lbf (aproximadamente 6,6 N), tal como de cerca de 0,5 lbf (aproximadamente 2,2 N) a 1,5 lbf (aproximadamente 6,6 N), tal como de cerca de 0,7 lbf (aproximadamente 3,08 N) a 1,5 (aproximadamente 6,6 N), tal como de cerca de 0,8 lbf (aproximadamente 3,52 N) a 1,5 lbf (aproximadamente 6,6 N), tal como de cerca de 0,9 lbf (aproximadamente 3,96 N) a 1,5 Ibf (aproximadamente 6,6 N), tal como de cerca de 1 lbf (aproximadamente 4,4 N) a 1,5 lbf (aproximadamente 6,6 N).

[082] Em algumas realizações preferidas, a película à base de plasma flexível da presente invenção compreende um ou mais umectantes. Em particular, a película pode ser revestida com umectantes tais como glicerol, por exemplo, por imersão em 10% de glicerol por 10 a 15 minutos, para impedir que a película se torne frágil durante o armazenamento. Também é possível misturar o umectante durante a coagulação do plasma quando preparando a película. Em tais realizações, a mistura de 1 - 2% de glicerol, com base no peso total da mistura de coagulação, é tipicamente suficiente para impedir que as películas se tornem frágeis durante o armazenamento.

[083] Alternativamente, a película pode ser acondicionada ou embalada em um recipiente com controle de umidade após a preparação para conservar a flexibilidade da película. A bolsa ou recipiente pode ser uma bolsa de alumínio ou outro recipiente de esterilização. Tipicamente, as películas à base de plasma da presente invenção são esterilizadas, preferivelmente por esterilização gama, esterilização por radiação por feixe de elétrons e/ou esterilização por UV

[084] Uma proteção do adesivo pode ser aplicada à película para prover aderência adicional da película ao tecido, se assim desejado. Não obstante, tipicamente, as películas à base de plasma da presente invenção sem uma proteção do adesivo aderem ao tecido, elas são aplicadas tal que suturas de ancoragem geralmente não fossem exigidas durante teste in situ em estudos animais.

[085] Como indicado acima, verificou-se surpreendentemente que as películas flexíveis à base de plasma da presente invenção tendo as características e funções descritas acima podem ser vantajosamente preparadas pelos métodos dos primeiro e segundo aspectos da presente invenção mencionados acima, isto é, que a flexibilidade, elasticidade e resistência mecânica de películas à base de plasma podem ser melhoradas pelos métodos de preparação particulares.

[086] A saber, no primeiro aspecto, a presente invenção se refere a um método de fabricação de uma película à base de plasma flexível compreendendo as etapas de: (a) mistura de plasma sanguíneo com mais do que 2 unidades internacionais (UI) de trombina por mililitro (mL) do plasma e/ou com cerca de 0,65 a 1,3 mg de íons de cálcio por mililitro (mL) do plasma para induzir coagulação do plasma, em que o plasma está contido dentro de um molde e; (b) manutenção do plasma no molde pelo tempo exigido para que o plasma coagule e forme a película, em que opcionalmente durante ou no final do tempo uma pressão é aplicada ao plasma no molde.

[087] Além disso, verificou-se surpreendentemente que a flexibilidade de películas à base de plasma pode ser melhorada pela mistura de plasma sanguíneo com pelo menos um ativador do sistema de coagulação em um molde e aplicação de pressão ao plasma no molde durante ou no final do tempo exigido para que o plasma coagule. O molde preferivelmente tem um volume e formato adequado para a preparação das películas da presente invenção.

[088] Como tal e de acordo com o segundo aspecto, a presente invenção se refere a um método de fabricação de uma película à base de plasma flexível compreendendo as etapas de: (a) mistura de plasma sanguíneo com um ativador do sistema de coagulação para induzir coagulação do plasma, em que o plasma está contido dentro de um molde e; (b) manutenção do plasma no molde pelo tempo exigido para que o plasma coagule, em que durante ou no final do tempo uma pressão que varia de cerca de 0,3 a 125 libras por polegada quadrada (psi) é aplicada ao plasma no molde para formar a película.

[089] Em uma ou mais realizações preferidas, a pressão varia de cerca de 30 a 95 psi ou de 30 a 56 psi ou de 40 a 50 psi ou de 40 a 45 psi ou é 44 psi. Preferivelmente, a pressão é aplicada por somente uma fração de tempo exigida para que o plasma coagule, tal como por 30 a 120 segundos, tal como por 45 a 85 segundos, tal como por 50 a 70 segundos, tal como por 60 segundos.

[090] Tipicamente, a trombina no método do primeiro aspecto ou o ativador do sistema de coagulação no método do segundo aspecto está presente em excesso, tal que o tempo exigido para que o plasma coagule é relativamente curto que varia de cerca de 5 a 20 minutos de mistura da trombina ou do ativador do sistema de coagulação com o plasma ou de cerca de 10 a 20 minutos ou de cerca de 12 a 18 minutos. Em algumas realizações, o tempo exigido para que o plasma coagule é 15 minutos. Consequentemente, em algumas realizações, a pressão é aplicada após cerca de 5 a 20 minutos de mistura da trombina do ativador do sistema de coagulação com o plasma ou após cerca de 10 a 20 minutos ou após cerca de 12 a 18 minutos ou após cerca de 15 minutos.

[091] Em relação a isso, é notável o fato de que a indução da coagulação pode ser alcançada em alguns casos simplesmente por recalcificação do plasma. Alternativamente, a coagulação pode ser induzida pela adição de agentes que convertem o fibrinogênio no plasma em fibrina tal como trombina e ativadores de coagulação tipo trombina. Em adição, o caminho extrínseco do sistema de coagulação pode ser ativado para induzir a coagulação do plasma. Tais ativadores extrínsecos são fosfolipídios, fosfolipídios contendo fosfatidilserina e fosfatidilcolina, fator tecidual, fator tecidual recombinante tal como Dade Innovin, terra diatomácea ou outros ativadores de caminho extrínseco comuns.

[092] Consequentemente, em algumas realizações dos métodos do segundo aspecto, o ativador do sistema de coagulação é preferivelmente selecionado de um ou mais membros do grupo que consiste em: trombina e ativadores de coagulação tipo trombina; cálcio; conversores de fibrinogênio em fibrina; fosfolipídios; fosfatidilcolina; fator tecidual; terra diatomácea; zeólitas; caulim; Fator VIIa; e Fator Xa. Em algumas realizações dos métodos do segundo aspecto, o ativador do sistema de coagulação é trombina e/ou cálcio.

[093] Em algumas realizações dos métodos dos primeiro ou segundo aspectos, o plasma é misturado com cerca de 0,1 a 10 unidades internacionais (UI) de trombina por mililitro (mL) do plasma e/ou com cerca de 0,65 a 1,3 mg de íons de cálcio por mililitro (mL) do plasma. Preferivelmente, o plasma é misturado com cerca de 0,1 a 7 UI de trombina por mL de plasma ou com cerca de 0,15 a 6 UI de trombina por mL de plasma ou com cerca de 1 a 5 UI de trombina por mL de plasma ou com cerca de 2 a 4 UI de trombina por mL de plasma ou com cerca de 2,5 a 3,5 UI de trombina por mL de plasma ou com cerca de 2,9 a 3,1 UI de trombina por mL de plasma ou o plasma é misturado com mais do que 2 UI de trombina por mL de plasma, tal como mais do que 2,5 UI de trombina por mL de plasma, tal como mais do que 2,75 UI de trombina por mL de plasma, tal como mais do que 3 UI de trombina por mL de plasma, tal como mais do que 3,25 UI de trombina por mL de plasma, tal como mais do que 3,5 UI de trombina por mL de plasma, tal como mais do que 3,75 UI de trombina por mL de plasma, tal como mais do que 4 UI de trombina por mL de plasma e/ou com cerca de 0,65 a 1,3 mg de íons de cálcio por mililitro (mL) do plasma.

[094] Em algumas realizações dos métodos dos primeiro ou segundo aspectos, as etapas de mistura e manutenção do plasma são realizadas em uma faixa de temperatura de temperatura ambiente a cerca de 40 °C ou de 36 a 38 °C ou a 37 °C.

[095] Em algumas outras realizações dos métodos dos primeiro ou segundo aspectos, a pressão é aplicada ao plasma dentro do molde por meio de uma placa para formar a película, preferivelmente, a placa é comprimida sobre o plasma no molde por uma prensa pneumática.

[096] Em algumas realizações, os métodos dos primeiro ou segundo aspectos compreendem ainda uma etapa de: (c) remoção de líquido em excesso do molde.

[097] Durante esta etapa adicional, o líquido em excesso é tipicamente extrudado do plasma coagulado ou em coagulação quando a pressão é aplicada. Preferivelmente, o líquido em excesso é removido por meio de um sistema de remoção de líquido, opcionalmente selecionado de: um sistema de sucção tal como um sistema de sucção acionado por vácuo; e um sistema compreendendo materiais adsorventes tais como panos absorventes, toalhas, membranas ou géis.

[098] Por exemplo, e se referindo à Figura 4, a pressão pode ser aplicada à mistura de coagulação (5) por meio de uma placa não porosa sólida (6) sendo levemente menor do que o perímetro externo do molde (7). A placa é a seguir colocada sob um sistema de remoção de líquido (8) que removerá a porção aquosa em excesso da película à base de plasma durante a compressão. Uma vez que o sistema de remoção aquosa (8) esteja no lugar, força é colocada uniformemente sobre a placa (6), por exemplo, por meio de um pistão de força descendente (9) de uma prensa pneumática. A força sobre a placa comprimindo a mistura de coagulação no molde pode ser muito baixa, por exemplo, tão baixa quanto 5 libras ou a força pode ser alta, por exemplo, 2000 libras. Durante a aplicação da pressão, a porção aquosa em excesso da película à base de plasma, que contém principalmente soro sanguíneo e água em excesso, é extrudada ou “esmagada” de modo que a porção aquosa em excesso da película à base de plasma seja deslocada para o perímetro externo da placa (6). Durante esta etapa de deslocamento, a fase aquosa é removida pelo sistema de remoção de líquido (8) por meio de uma sucção acionada por vácuo e também pode ser coletada por meio de material absorvente (10). No final da compressão, a película “esmagada” pode ser removida do recipiente como uma película plana, altamente comprimida, com baixo teor de água, de alta resistência.

[099] Em algumas realizações, os métodos dos primeiro ou segundo aspectos compreendem ainda uma etapa de: (d) secagem da película à base de plasma.

[0100] Durante esta etapa adicional, a película é tipicamente seca à temperatura ambiente e/ou sob condições de pressão negativa tais como em uma unidade de fluxo laminar ou uma unidade a vácuo ou em temperaturas aumentadas tais como em um forno.

[0101] Em algumas realizações, a película preparada compreende ainda pelo menos um agente farmaceuticamente ativo, preferivelmente o agente é distribuído homogeneamente ao longo da película ou é aplicado topicamente à película e pode ser selecionado do grupo que consiste em: agentes antibióticos; agentes anti- inflamatórios; agentes anti-infecciosos; fatores de crescimento; quimiocinas; imunomoduladores; agentes de cura da ferida; ativadores do sistema de coagulação; agentes anticoagulação; agentes antiaderentes; agentes antifibrinolíticos; penicilina; prata; clorexidina; quimiocinas derivadas de células estromais; fator 1 alfa derivado de células estromais; fator 1 beta derivado de células estromais; fibrinogênio; Fator VIIa; CXCL-12; heparina; aprotinina; ácido tranexâmico; tensoativos não iônicos; Pluronic F68; TWEEN 80; inibidores de COX-2; e Nimesulida.

[0102] Em algumas outras realizações dos métodos dos primeiro ou segundo aspectos, o pelo menos um agente farmaceuticamente ativo é distribuído homogeneamente ao longo da película. Em tais realizações, a etapa de mistura do plasma sanguíneo com a trombina e/ou cálcio ou com o ativador do sistema de coagulação também compreende a mistura do plasma com o pelo menos um agente farmaceuticamente ativo para prover uma mistura de coagulação com a condição de que o agente não pode ser um agente anticoagulação. Tipicamente, o pelo menos um agente farmaceuticamente ativo pode constituir até 5% do peso total da mistura de coagulação, tal como até 2%, preferivelmente entre 1 e 2%.

[0103] Em relação a isso, é notável o fato de que a mistura dos agentes até 5% do peso total da mistura de coagulação não comprometeu a estabilidade mecânica das películas produzidas. Como mostrado em mais detalhes nos Exemplos abaixo, a adição de 1 - 2% de agentes antiadesivos foi suficiente para que as películas exibissem nenhuma a muito pouca aderência em um estudo animal. No modelo de estudo animal quanto ao desenvolvimento de aderências, as folhas antiaderentes da presente invenção levaram a menos do que 25% da superfície da ferida inicialmente aplicada sendo coberta com aderências, em particular, elas exibiram 0 - 15% de cobertura da superfície da ferida. Em contraste, a película antiaderente com melhor desempenho comercialmente disponível testada no mesmo modelo animal quanto ao desenvolvimento de aderências levou a uma cobertura da superfície da ferida de pelo menos 40%.

[0104] Em algumas outras realizações dos métodos dos primeiro ou segundo aspectos, o pelo menos um agente farmaceuticamente ativo é aplicado topicamente à película, opcionalmente o agente pode ser aplicado por revestimento por pulverização, secagem por atomização, escovação e/ou imersão. Em algumas realizações preferidas, o agente pode ser uma mistura de proteínas compreendendo ativadores do sistema de coagulação tais como plasma.

[0105] Em algumas outras realizações dos métodos dos primeiro ou segundo aspectos, a película pode compreender várias camadas de película preparadas pela repetição sucessiva das etapas dos métodos da invenção no molde para formar uma película à base de plasma de múltiplas camadas, em que, opcionalmente, cada camada de película individual pode compreender nenhum, o mesmo ou diferentes agentes farmaceuticamente ativos. Preferivelmente, vários agentes farmaceuticamente ativos podem ser aplicados topicamente simultânea ou sucessivamente.

[0106] Em algumas outras realizações dos métodos dos primeiro ou segundo aspectos, a etapa de mistura do plasma sanguíneo com a trombina e/ou cálcio ou com o ativador do sistema de coagulação também compreende a mistura do plasma com um agente que aumenta o grau de reticulação entre os polímeros de fibrina gerados durante a coagulação do plasma, preferivelmente o agente é cloreto de cálcio.

[0107] A mistura com cloreto de cálcio adicional leva à formação de películas à base de plasma altamente reticuladas que são resistentes à degradação em ureia 8M durante dias, a semanas, a meses. Como tal, se a película à base de plasma a ser preparada for uma película que degrade mais rapidamente, cloreto de cálcio não deve ser adicionado. Na ausência de cloreto de cálcio, a fibrina na película à base de plasma tem um grau de reticulação muito baixo e é rapidamente degradável. Por exemplo, uma película com um baixo grau de reticulação dissolve em ureia 8M dentro de cerca de 4 horas. Não obstante o que foi dito acima, mesmo tendo um alto grau de reticulação, as películas da presente invenção são totalmente biodegradáveis.

[0108] O plasma sanguíneo adequado para o uso nos métodos do primeiro e segundo aspecto pode ser plasma sanguíneo animal ou humano. Tipicamente, o plasma é plasma fresco congelado (FFP) ou é plasma seguro frente a patógenos. Nos métodos onde plasma seguro frente a patógenos é usado, o plasma foi submetido a tratamento de inativação viral, preferivelmente tratamento de solvente/detergente (tratamento S/D), e/ou foi pasteurizado e/ou foi irradiado e/ou foi nanofiltrado.

[0109] Em algumas realizações, a película à base de plasma da presente invenção tem um teor de água de cerca de 3 a 6% em peso ou de cerca de 4 a 5% em peso ou de cerca de 4% em peso. O teor de água residual foi determinado por avaliação do peso da película antes da determinação (peso total) e após a secagem em um forno a 105 °C até o peso constante. A diferença no peso representa o peso de água residual (antes da secagem no forno) e é fornecida como % de água residual, com base no peso total antes da secagem no forno. Películas da presente invenção tendo um teor de água residual de cerca de 4% são referidos como películas “secas” nos Exemplos abaixo, enquanto tais películas após a imersão por 10 minutos em uma solução aquosa contendo 10 % de glicerol são referidos como “películas encharcadas”.

[0110] Os métodos dos primeiro e segundo aspectos são adequados para a fabricação de películas à base de plasma flexíveis tendo uma espessura que varia de cerca de 0,005 a 0,1 mm ou de cerca de 0,005 a 0,09 mm ou de cerca de 0,0075 a 0,08 mm ou de cerca de 0,01 a 0,08 mm ou de cerca de 0,01 a 0,07 mm ou de cerca de 0,015 a 0,065 mm ou de cerca de 0,02 a 0,06 mm ou de cerca de 0,02 a 0,055 mm ou de cerca de 0,02 a 0,05 mm ou de cerca de 0,02 a 0,04 mm ou de cerca de 0,02 a 0,03 mm ou cerca de 0,01 mm ou cerca de 0,02 mm ou cerca de 0,03 mm ou cerca de 0,04 mm ou cerca de 0,05 mm ou cerca de 0,06 mm. Não obstante, as películas com outras espessuras também são deriváveis ao simplesmente aumentar ou diminuir os volumes dos componentes usados nos métodos dos primeiro e segundo aspectos.

[0111] Adicionalmente, a espessura e resistência da película correspondem à quantidade de pressão colocada sobre a placa superior e a quantidade de plasma aplicada. As películas preparadas em um molde 4”x4” pressurizadas por 30 a 120 segundos com 700 libra força, isto é, cerca de 44 psi ou 300 kPa, têm uma espessura de cerca de 0,02 mm quando preparadas de 30 mL de mistura de coagulação (tais películas são referidas como “SUBC 30” abaixo). As películas preparadas correspondentemente, mas de 60 mL de mistura de coagulação têm uma espessura de cerca de 0,03 mm (tais películas são referidas como “SUBC 60” abaixo) e as películas preparadas correspondentemente, mas de 120 mL de mistura de coagulação têm uma espessura de 0, 05 - 0, 06 mm (tais películas são referidas como “SUBC 120” abaixo).

[0112] Como já descrito acima, as películas da presente invenção, isto é, as películas preparadas pelos métodos dos primeiro e segundo aspectos são caracterizadas por uma flexibilidade vantajosa e, portanto, por: um número de dobras de pelo menos 1, tal como pelo menos 2, tal como pelo menos 3, tal como pelo menos 4, tal como pelo menos 5; uma resistência à dobra de pelo menos 10, tal como pelo menos 20, tal como pelo menos 30, tal como pelo menos 40, tal como pelo menos 50, tal como pelo menos 60, tal como pelo menos 70, tal como pelo menos 80, tal como pelo menos 90, tal como pelo menos 100; e/ou uma pressão de ruptura de cerca de 50 a 1000 mm Hg ou de cerca de 100 a 1000 mm Hg ou de cerca de 100 a 800 mm Hg ou de cerca de 100 a 600 mm Hg ou de cerca de 100 a 500 mm Hg ou de cerca de 100 a 450 mm Hg ou de cerca de 140 mm Hg ou de cerca de 150 mm Hg ou de cerca de 175 mm Hg ou de cerca de 200 mm Hg ou de cerca de 225 mm Hg ou de cerca de 250 mm Hg ou de cerca de 275 mm Hg ou de cerca de 300 mm Hg ou de cerca de 325 mm Hg ou de cerca de 350 mm Hg ou de cerca de 375 mm Hg ou de cerca de 400 mm Hg.

[0113] Em uma realização preferida adicional, as películas flexíveis à base de plasma são caracterizadas por uma pressão de ruptura reduzida após terem sido encharcadas em uma solução aquosa contendo 10% de glicerol por 10 minutos. Em particular, tais películas encharcadas são caracterizadas por uma pressão de ruptura de 75% a 80% daquela de uma película “seca” correspondente, isto é, uma película tendo um teor de água residual de cerca de 4% e tendo a mesma espessura quando seca.

[0114] Em uma realização preferida adicional, a película à base de plasma flexível é caracterizada por uma razão de pressão de ruptura/espessura de película de 5000 a 9000 mm Hg/mm de espessura de película quando seca (isto é, quando tendo um teor de água residual de cerca de 4%) e tendo uma espessura de película de 0,05 - 0,06 mm ou por uma razão de pressão de ruptura/espessura de película de 6000 a 7500 mm Hg/mm de espessura de película quando seca (isto é, quando tendo um teor de água residual de cerca de 4%) e tendo uma espessura de película de 0,03 mm.

[0115] Consequentemente e como já indicado acima, as películas flexíveis à base de plasma da presente invenção são preparadas pelos métodos dos primeiro e segundo aspectos. Não obstante, as películas flexíveis à base de plasma da presente invenção também podem ser caracterizadas por suas características específicas já delineadas acima.

[0116] Como tal, em um quarto aspecto, a presente invenção se refere a uma película à base de plasma flexível compreendendo entre 0,1 a 10 UI de trombina por mL de plasma e tendo uma espessura que varia de cerca de 0,005 a 0,1 mm, em que a película flexível é caracterizada por um número de dobras de pelo menos 1, tal como pelo menos 2, tal como pelo menos 4, tal como pelo menos 5. Preferivelmente, a película à base de plasma flexível é caracterizada por uma resistência à dobra de pelo menos 10, tal como pelo menos 20, tal como pelo menos 30, tal como pelo menos 40, tal como pelo menos 50, tal como pelo menos 60, tal como pelo menos 70, tal como pelo menos 80, tal como pelo menos 90, tal como pelo menos 100, e/ou por uma pressão de ruptura de cerca de 50 a 1000 mm Hg ou de cerca de 100 a 1000 mm Hg ou de cerca de 100 a 800 mm Hg ou de cerca de 100 a 600 mm Hg ou de cerca de 100 a 500 mm Hg ou de cerca de 100 a 450 mm Hg ou de cerca de 140 mm Hg ou de cerca de 150 mm Hg ou de cerca de 175 mm Hg ou de cerca de 200 mm Hg ou de cerca de 225 mm Hg ou de cerca de 250 mm Hg ou de cerca de 275 mm Hg ou de cerca de 300 mm Hg ou de cerca de 325 mm Hg ou de cerca de 350 mm Hg ou de cerca de 375 mm Hg ou de cerca de 400 mm Hg.

[0117] Em particular, as películas flexíveis à base de plasma da presente invenção são adequadas para o uso como um hemostato, preferivelmente como um hemostato para interromper um sangramento leve a severo e/ou para interromper um sangramento arterial. Preferivelmente, as películas também são adequadas: para o uso como uma folha antiaderente para reduzir ou prevenir o desenvolvimento de uma aderência induzida por cirurgia; para o uso como um emplastro para a cura de feridas; para o uso como um curativo para feridas; ou para uso no reparo da hérnia.

Exemplos

[0118] A invenção é descrita ainda pelos seguintes Exemplos não limitantes.

Películas de SUBC SUBC 30

[0119] Uma película à base de plasma altamente flexível foi preparada pela mistura de 30 mL de plasma com 280-320 μL de trombina (300 UI/mL) ou 280 - 320 μL de solução de cálcio (2 M Ca2+) ou 280 - 320 μL de trombina (300 UI/mL) com cerca de 280 - 320 μL de solução de cálcio (2 M Ca2+), subsequentemente incubação da mistura a 25 - 37 °C por cerca de 15 minutos, em um molde 4”x4” e pressurização do coágulo de plasma obtido no molde com uma pressão de cerca de 44 psi por cerca de 60 segundos.

[0120] Finalmente, a película obtida foi seca em um exaustor laminar durante a noite até um teor de umidade residual de cerca de 4%. Esta película é indicada nas Tabelas 3 e 4 abaixo como “SUBC 30 (seca)”.

SUBC 60

[0121] Uma película à base de plasma altamente flexível foi preparada pela mistura de 60 mL de plasma com 580-620 μL de trombina (300 UI/mL) ou 580 - 620 μL de solução de cálcio (2 M Ca2+) ou 580 - 620 μL de trombina (300 UI/mL) com cerca de 580 - 620 μL de solução de cálcio (2 M Ca2+), subsequentemente incubação da mistura a 25 - 37 °C por cerca de 15 minutos, em um molde 4”x4” e pressurização do coágulo de plasma obtido no molde com uma pressão de cerca de 44 psi por cerca de 60 segundos.

[0122] Finalmente, a película obtida foi seca em um exaustor laminar durante a noite até um teor de umidade residual de cerca de 4%. Esta película é indicada nas Tabelas 3 e 4 abaixo como “SUBC 60 (seca)”.

[0123] Algumas das películas SUBC 60 (secas) foram subsequentemente encharcadas em 10 % de glicerol por 10 minutos. Tais películas são indicadas como “SUBC 60 (encharcadas)”.

SUBC 120

[0124] Uma película à base de plasma altamente flexível foi preparada pela mistura de 120 mL de plasma com 1180 - 1220 μL de trombina (300 UI/mL) ou 1180 - 1220 μL de solução de cálcio (2 M Ca2+) ou 1180 - 1220 μL de trombina (300 UI/mL) com cerca de 1180 - 1220 μL de solução de cálcio (2 M Ca2+), subsequentemente incubação da mistura a 25 - 37 °C por cerca de 15 minutos, em um molde 4”x4” e pressurização do coágulo de plasma obtido no molde com uma pressão de cerca de 44 psi por cerca de 60 segundos.

[0125] Finalmente, a película obtida foi seca em um exaustor laminar durante a noite até um teor de umidade residual de cerca de 4%. Esta película é indicada nas Tabelas 3 e 4 abaixo como “SUBC 120 (seca)”.

[0126] Algumas das películas SUBC 120 (secas) foram subsequentemente encharcadas em 10% de glicerol por 10 minutos. Tais películas são indicadas como “SUBC 120 (encharcadas)”.

Películas CE Exemplo Comparativo 1 - CE-1

[0127] Uma película à base de plasma sanguíneo da técnica anterior é conhecida de EP 0485210 A2. Método de produção 4. A “membrana plasmática” ensina a mistura de 50 mL de plasma citratado com 8 - 10 unidades NIH de trombina em um aparelho de molde a 4 °C e aquecimento até a temperatura ambiente ou 37 °C. As películas obtidas devem ser secas eventualmente durante a noite em um exaustor de fluxo laminar, comprimido ou desidratado. A fim de obter resultados mais comparáveis, a mistura foi aumentada até 60 mL. Em particular, 60 mL de plasma foram misturados com 12 unidades NIH de trombina. A mistura foi aquecida até 37 °C em um molde 4”x4” e foi mantida por 2 horas nesta temperatura. Finalmente, as películas foram comprimidas com 44 psi por 60 segundos, água em excesso e soro foi removido e as películas foram secas durante a noite sob um exaustor de fluxo laminar.

[0128] Assim, as películas preparadas são indicadas nas tabelas 1 e 2 como “CE-1 60 (secas)” e películas, que foram adicionalmente encharcadas em 10% de glicerol por 10 minutos, são indicadas como “CE-1 60 (encharcadas)”.

Exemplo Comparativo 2 - CE-2

[0129] O documento US 8.529.959 B2 revela uma folha compreendendo um plástico derivado de plasma sanguíneo, que é flexível, elástico ou uma combinação destes.

[0130] O material de origem (um pó de plasma coagulado) foi obtido como descrito no Exemplo 11 pela coagulação de 52,6 partes de plasma pela adição de 1 parte 1M cloreto de cálcio em água e liofilização do coágulo por 72 horas em uma pressão reduzida de 6 mTorr. Pó de plasma foi obtido pela trituração do material seco em um triturador mecânico a seguir peneiração através de uma peneira de 150 μm. Outros procedimentos para formular e formar o plástico derivado de plasma foram os seguintes. Para formular o plástico, 650 mg de pó de plasma e 350 mg de glicerol (como plasticizante) foram adicionados a um béquer pequeno. Os componentes foram misturados até se tornarem homogêneos e deixados incubar à temperatura ambiente em um recipiente fechado por aproximadamente 21 horas. A “massa” resultante foi moldada em uma prensa a 59 °C. Uma descrição atual de formação de uma folha ou película não é dada, mas o documento US 8.529.959 B2 se refere ao pedido de patente US No de série 11/495.115 (US 11/495.115) para processar as folhas elásticas.

[0131] O dito pedido de patente infelizmente contém somente informações acerca de produção de fibrinogênio e películas à base de gelatina. Pela combinação de ensinamentos revelados nos Exemplos 24, 16, 2 e 1, o processo comum de mistura de um pó (fibrina triturada, coágulo de plasma triturado, gelatina triturada ou fibrinogênio não polimerizado) com várias quantidades de um plasticizante (glicerol) para produzir uma “massa” e formação na massa em uma prensa aquecida foi dedutível. Também foi indicado que películas preparadas de uma massa contendo 12,5% de glicerol foram mais flexíveis e que películas poderiam ser feitas em qualquer pressão com 1000 a 8000 lbs.

[0132] Foi assim decidido realizar experiências com fibrinogênio não polimerizado e um pó de coágulo de plasma preparado como ensinado em US 8.529.959 B2, misturar 12,5% de glicerol como ensinado em US 11/495.115 ou 35% como ensinado em US 8.529.959 B2 e finalizar o processo de produção por moldagem por pressão em um molde de 2”x1,6” reduzido a 59 °C e 5000 libras. Experimentos iniciais com massas contendo 35% de glicerol revelaram que as películas obtidas eram bastante rígidas, dificilmente flexíveis e que não foi possível alcançar uma dobra única com tal película. As películas preparadas com 12,5% de glicerol eram até cera extensão flexíveis e esta abordagem foi examinada adicionalmente. As películas preparadas com 12,5% de água, as quais também são mencionadas na patente (pedido) como plasticizante, mas nenhum glicerol revelou praticamente nenhuma coesão.

[0133] Com base na experiência inicial de propriedades de película bastante pobres, foi decidido produzir películas comparáveis em teor de plasma a 120 mL de películas da presente invenção. A fim de obter resultados mais comparáveis, uma porção, sendo equivalente à área do molde de 4”x4” dividido pela área do molde reduzido, de 120 mL de plasma foi coagulada e liofilizada como ensinado em US 8.529.959 B2. O peso deste coágulo, isto é, 88 - 92 mg, em particular cerca de 90 mg, foi determinado e serviu como o peso do coágulo de plasma em pó a ser usado para os experimentos que se assemelham a uma película de 120 mL. As películas foram até algum grau maleável, flexível e quase conseguiu sobreviver a uma dobra no teste de número de dobras, mas finalmente elas falharam em alcançar um número de dobras de 1. Foi possível determinar a pressão de ruptura, mas os resultados de películas secas foram tão fracos que elas não foram testadas como películas encharcadas. As películas comparativas que se assemelham a uma película de 120 mL são indicadas nas tabelas 1 e 2 como “CE-2 120 (seca)”.

Exemplo Comparativo 3 (CE-3)

[0134] CE-3 é uma película antiaderente comercialmente disponível usada no estudo animal antiaderência.

Exemplo Comparativo 4 (CE-4)

[0135] CE-4 é uma película antiaderente comercialmente disponível usada no estudo animal antiaderência. Películas Antiadesivas 1 a 4 Película 1

[0136] Inicialmente, uma película de acordo com a preparação da película SUBC 120 (seca) descrita acima foi preparada.

[0137] Subsequentemente, a película foi encharcada em uma solução de agente antiadesivo antes do uso. Em particular, a película SUBC 120 (seca) foi encharcada em 7,5 mL de uma solução que consiste em 0,5 mL de Tween-80®, 0,25 mL de glicerina, 15 mg de heparina e 6,75 mL de água. Assim, películas encharcadas Tween-80® foram usadas em um estudo animal antiaderência e os resultados são fornecidos na Tabela 2 indicados como “Película 1”.

Película 2

[0138] Inicialmente, uma película de acordo com a preparação da película SUBC 120 (seca) descrita acima foi preparada.

[0139] No entanto, durante a preparação da película SUBC 120 (seca), 1 - 2% de um agente antiadesivo, tal como Pluronic F68®, foram administrados com o plasma. Esta película pode ser usada como película seca ou como uma película encharcada após a imersão. A imersão de um Pluronic F68® contendo 120 mL de película de plasma em 7,5 mL de uma solução que consiste em 0,75 mL de glicerina, 15 mg de heparina e 6,75 mL de água proveu uma boa barreira antiaderência.

[0140] Assim, as películas Pluronic encharcadas foram usadas em um estudo animal antiaderência e os resultados são fornecidos na Tabela 2 indicados como “Película 2”.

Película 3

[0141] Inicialmente, uma película de acordo com a preparação da película SUBC 120 (seca) descrita acima foi preparada.

[0142] No entanto, durante a preparação da película SUBC 120 (seca), 1 - 2% de dois agentes antiadesivos em peso igual foram misturados com o plasma. A saber, quantidades iguais de Tween-80® e Pluronic F68® em peso foram misturadas com o plasma-

[0143] Tais películas foram usadas em um estudo animal antiaderência e os resultados são fornecidos na Tabela 2 indicados como “Película 3”.

Película 4

[0144] Inicialmente, uma película de acordo com a preparação da película SUBC 120 (seca) descrita acima foi preparada.

[0145] Subsequentemente, agentes antiadesivos foram aplicados topicamente à película. A saber, um inibidor de COX-2, tal como Nimesulida® foi aplicado em 1 mg/cm2 por secagem por atomização e a película como usada como uma película seca.

[0146] Tais películas com Nimesulida® sendo aplicadas topicamente em 1 mg/cm2 foram usadas em um estudo animal antiaderência e os resultados são fornecidos na Tabela 2 indicados como “Película 4”.

Exemplo 1 Películas Hemostáticas - estudo animal para a determinação da eficácia.

[0147] Películas à base de plasma altamente flexíveis para o uso como hemostatos de acordo com a preparação da película SUBC 120 (seca) descrita acima foram preparadas.

[0148] As películas foram a seguir subsequentemente modificadas por aplicação tópica para rápida hemostase com trombina. Películas similares também foram preparadas com fibrinogênio sendo secas por atomização em um lado de uma película, seguido pela cobertura do fibrinogênio com uma camada de amido e finalmente secagem por atomização da trombina no topo do amido.

[0149] A eficácia das películas hemostáticas foi avaliada em um modelo de animal porcino pela indução de uma lesão no baço, rim ou fígado usando um dispositivo de sangramento modelo, que criou uma ferida superficial de aproximadamente 1 cm em diâmetro.

[0150] A avaliação da eficácia foi realizada após comprimir manualmente a película sobre a ferida por 3 minutos e esperar por 15 minutos depois disso sem comprimir. As películas flexíveis à base de plasma da presente invenção testadas tinham um agente farmaceuticamente ativo hemostático aplicado topicamente. A saber, hemostatos compreendendo trombina aplicada topicamente, fator de coagulação ativado VII (FVIIa) ou uma combinação de trombina e fibrinogênio foram testados.

[0151] As películas hemostáticas com trombina ou uma combinação de trombina e fibrinogênio foram mais eficazes e interromperam sangramentos dentro de 3 minutos. As películas com FVIIa foram levemente menos eficazes visto que um sangramento arterial particularmente forte não poderia ser completamente interrompido por uma película de FVIIa após vários minutos. A fim de interromper este sangramento, uma película revestida de trombina da presente invenção, que interrompeu este sangramento arterial, foi finalmente usada.

Exemplo 2 Folhas antiaderentes - estudo animal para a determinação da eficácia.

[0152] A eficácia de folhas antiaderentes de acordo com a presente invenção foi avaliada em um modelo animal de rato. Em cada animal, lesões cirúrgicas padronizadas (2,0 x 2,5 cm de área) foram aplicadas a ambos os peritônio e cornos uterinos da parede lateral direita e esquerda usando uma escova citológica até que sangramento pontual ocorresse.

[0153] As folhas de teste ou de controle designadas foram aplicadas para cobrir a abrasão em cada corno uterino e suturadas no lugar. As películas de controle foram implantes comercialmente disponíveis com função antiadesiva dedicada. No dia 7 após a cirurgia, todos os animais foram humanamente eutanasiados e submetidos à necrópsia para avaliação bruta das adesões.

[0154] A qualidade e quantidade de adesões foram avaliadas como a seguir:

[0155] Quantidade: A quantidade foi classificada de acordo com a incidência de áreas traumatizadas com adesões e a cobertura de aderência (que é calculada como uma fração de adesões e translada em uma porcentagem de área traumatizada).

[0156] Qualidade: A qualidade das adesões induzidas foi classificada de acordo com a Tabela 1. Os resultados de qualidade e quantidade são apresentados na Tabela 2. A qualidade da aderência foi considerada “muito fina” se a escala de uma régua fosse visível através do tecido e de outra forma considerada “densa”. Tabela 1 (Classificação da Qualidade de Aderência)

Tabela 2 (Qualidade e Quantidade de Resultados de

[0157] As películas 1 - 4 da presente invenção tiveram um desempenho consideravelmente melhor do que as películas antiaderentes comercialmente disponíveis.

Exemplo 3 Avaliação da flexibilidade da película.

[0158] A flexibilidade das películas à base de plasma da presente invenção, a saber para películas SUBC 30 (secas), SUBC 60 (secas) e (encharcadas), SUBC 120 (secas) e (encharcadas) e para as películas comparativas CE-1 60 (secas) e (encharcadas) e CE-2 120 (secas) foi avaliada pela determinação do número de dobras, resistência à dobra e pressão de rupturas como descrito acima. Resultados

[0159] Como nenhuma das películas comparativas CE-1 e CE-2 conseguiu alcançar uma dobra única sem rompê-la, não foi possível determinar uma resistência à dobra. Tabela 4 (Pressão de Ruptura)

[0160] As películas CE-1 (secas) eram tão frágeis e inflexíveis que elas não poderiam ser colocadas na instalação sem rompê-las. Assim, não foi possível determinar a pressão de ruptura para estas películas.

[0161] Muitas modificações e outras realizações da invenção apresentada aqui virão à mente daquele técnico no assunto ao qual a invenção pertence tendo o benefício dos ensinamentos apresentados na descrição anterior e nos desenhos associados. Portanto, deve-se entender que a invenção não deve ser limitada às realizações específicas reveladas e que as modificações e outras realizações são destinadas a serem incluídas dentro do escopo das reivindicações em anexo. Embora termos específicos sejam empregados aqui, eles são usados em um sentido genérico e descritivo somente e não para propósitos de limitação. Lista de Sinais de Referência 1 película à base de plasma 2 agente farmaceuticamente ativo 3 agente farmaceuticamente ativo adicional - plasma seco por atomização 4 agente farmaceuticamente ativo adicional - ativador seco por atomização do sistema de coagulação 5 mistura de coagulação 6 placa não porosa sólida 7 molde 8 sistema de remoção de líquido, tal como sucção acionada por vácuo 9 pistão descendente 10 material absorvente

Claims

1. Película à base de plasma flexível com uma espessura que varia de 0,005 a 0,1 mm, e uma pressão de ruptura de 50 a 1000 mm Hg (6,67 a 133,32 kPa), caracterizada por ser preparada por (a) mistura de plasma sanguíneo com um ou dois ativadores do sistema de coagulação selecionado(s) de: mais que 2,5 unidades internacionais (UI) de trombina por mililitro (ml) do dito plasma; e 0,65 a 1,3 mg de íons de cálcio por mililitro (ml) do dito plasma, para induzir a coagulação do dito plasma, em que o dito plasma está contido dentro de um molde; e (b) manutenção do dito plasma no dito molde pelo tempo necessário entre 5 a 20 minutos para que o plasma coagule e forme a dita película, em que opcionalmente durante ou no fim do dito tempo uma pressão entre 0,3 a 125 psi (2,07 a 861,85 kPa) é aplicada ao dito plasma no dito molde por entre 30 a 120 segundos.

2. Película à base de plasma flexível, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por ter uma pressão de ruptura de 100 a 1000 mm Hg (13,33 a 133,32 kPa) ou de 100 a 800 mm Hg (13,33 a 106,66 kPa) ou de 100 a 600 mm Hg (13,33 a 80 kPa).

3. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 2, caracterizada por ter um teor de água de 3 a 6% em peso.

4. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada por compreender pelo menos um agente farmaceuticamente ativo.

5. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada por compreender pelo menos um agente farmaceuticamente ativo distribuído homogeneamente ao longo da dita película.

6. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada por o pelo menos um agente farmaceuticamente ativo ser selecionado do grupo que consiste em: agentes antibióticos; agentes anti- inflamatórios; agentes anti-infecciosos; fatores de crescimento; quimiocinas; imunomoduladores; agentes de cura da feridas; ativadores do sistema de coagulação; agentes anticoagulação; agentes antiaderentes; agentes antifibrinolíticos; penicilina; prata; clorexidina; quimiocinas derivadas de células estromais; fator 1 alfa derivado de células estromais; fator 1 beta derivado de células estromais; fibrinogênio; Fator VIIa; CXCL-12; heparina; aprotinina; ácido tranexâmico; tensoativos não iônicos; poloxamer 188; polissorbato 80; inibidores de COX- 2; e Nimesulida.

7. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo dito plasma ser plasma sanguíneo animal ou humano.

8. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo dito plasma ser plasma fresco congelado (FFP) ou ser plasma seguro frente a patógenos.

9. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizada por compreender um ou mais umectantes.

10. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizada por compreender uma proteção do adesivo.

11. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada por ser uma película esterilizada.

12. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizada por ser acondicionada em um recipiente com controle de umidade.

13. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizada por ser para uso: (a) como um hemostato; (b) como um hemostato para interromper um sangramento leve a severo; (c) como um hemostato para interromper um sangramento arterial; (d) como uma folha antiaderente para reduzir ou prevenir o desenvolvimento de uma aderência induzida por cirurgia; (e) como um emplastro para a cura de feridas; (f) como um curativo para feridas; ou (g) no reparo de hérnias.

14. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizada por ser um hemostato para o tratamento de sangramento leve a severo ou sangramento arterial.

15. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizada por ser uma folha antiaderente para a redução ou prevenção do desenvolvimento de uma aderência induzida por cirurgia.

16. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizada por ser um emplastro ou um curativo para o tratamento de uma ferida.

17. Película à base de plasma flexível, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizada por ser uma película para o tratamento ou reparo de um reparo de hérnia.