BR112018009306B1 - Composição de fibras e/ou agregados hemostáticos à base de celulose, método de fabricação, gel, e método para formação de um gel - Google Patents

Abstract

mistura hemostática de fibras curtas e longas à base de celulose. a presente invenção refere-se a uma composição hemostática que compreende uma mistura de fibras curtas e longas à base de celulose, preparação e uso das mesmas.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção refere-se a uma composição hemos-tática que compreende uma mistura de fibras curtas e longas à base de celulose, preparação e uso das mesmas.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[002] Em uma ampla variedade de circunstâncias, os animais, incluindo os seres humanos, podem sofrer sangramento devido a ferimentos ou durante procedimentos cirúrgicos. Em algumas circunstâncias, o san- gramento é relativamente pequeno e somente é necessária a coagulação sanguínea normal em adição a aplicação de primeiros socorros simples. Em outras circunstâncias, pode ocorrer sangramento significativo. Tais situações geralmente necessitam de equipamentos e materiais especia-lizados, bem como de pessoas treinadas para administrar o auxílio adequado.

[003] O sangramento durante procedimentos cirúrgicos pode semanifestar de muitas formas. Ele pode ser isolado ou difuso a partir de uma área superficial grande. Pode ser de vasos grandes ou pequenos, arteriais (alta pressão) ou venosos (pressão baixa) de volume alto ou baixo. Ele pode ser facilmente acessível ou pode se originar de locais difíceis de acessar.

[004] Métodos convencionais para alcançar a hemostasia incluem ouso de técnicas cirúrgicas, suturas, ligaduras ou grampos, e coagulação ou cauterização baseada em energia. Quando essas medidas convencionais são ineficazes ou impraticáveis, técnicas e produtos de hemostasia auxiliar são tipicamente utilizados.

[005] A seleção de métodos ou produtos adequados para o controle do sangramento depende de muitos fatores, que incluem, mas não se limitam a, gravidade do sangramento, localização anatômica da fonte e proximidade de fonte a estruturas críticas adjacentes, se o sangramento é proveniente de uma fonte isolada ou de uma área superficial mais ampla, visibilidade e identificação precisa da fonte e do acesso à fonte.

[006] Muitos produtos foram desenvolvidos como compostosauxiliares para hemostasia. Esses produtos incluem agentes hemostáticos absorvíveis tópicos (TAH, de "topical absorbable hemostats"), como celulose regenerada oxidada, gelatina em várias formas com ou sem uma solução de trombina, colágeno em pó, produtos hemostáticos tópicos biologicamente ativos (soluções de trombina tópicas, selantes de fibrina, etc.) e uma variedade de selantes tópicos sintéticos.

[007] Hemostáticos absorvíveis tópicos (TAHs - Topical AbsorbableHemostats) são amplamente usados em aplicações cirúrgicas. Os TAHs abrangem produtos baseados em celulose oxidada (OC, de "oxidized cellulose"), celulose regenerada oxidada (ORC, de "oxidized regenerated cellulose"), gelatina, colágeno, quitina, quitosano, etc. Para melhorar o desempenho hemostático, armações baseadas nos materiais acima podem ser combinadas com fatores de coagulação derivados biologicamente, como trombina e fibrinogênio.

[008] Um dos agentes hemostáticos tópicos mais comumenteusados é o hemostático absorvível SURGICEL® Original, produzido a partir de celulose regenerada oxidada (ORC). A ORC foi introduzida em 1960 como um agente hemostático seguro e eficaz para muitos procedimentos cirúrgicos. O SURGICEL® Original é um material de ORC de malha solto que se adapta rapidamente aos seus arredores imediatos e é mais fácil de ser manuseado que outros agentes absorvíveis, pois não gruda em instrumentos cirúrgicos, e seu tamanho pode ser facilmente aparado. Isto permite que o cirurgião segure firmemente a celulose no lugar até que todas as hemorragias parem. O controle do sangramento é essencial e crítico em procedimentos cirúrgicos para minimizar a perda de sangue, reduzir complicações pós-cirúrgicas e encurtar a duração da cirurgia na sala de operação. Devido à sua biodegradabilidade e a suas propriedades bactericidas e hemostáticas, a celulose oxidada, assim como a celulose regenerada oxidada, têm sido usadas há muito tempo como um curativo hemostático tópico para ferimentos em uma variedade de procedimentos cirúrgicos, incluindo neurocirurgia, cirurgia abdominal, cirurgia cardiovascular, cirurgia torácica, cirurgia de cabeça e pescoço, cirurgia pélvica e procedimentos de tecido subcutâneo e de pele. São conhecidos vários métodos para a formação de vários tipos de hemostáticos com base em materiais de celulose oxidada, sejam estes fabricados sob a forma de pós, tecidos, não tecidos, malhas ou em outras formas. Os curativos para ferimentos hemostáticos atualmente utilizados incluem materiais de malha, tecidos ou não tecidos que compreendem celulose regenerada oxidada (ORC), que é celulose oxidada com homogeneidade aumentada da fibra de celulose.

[009] Os hemostáticos absorvíveis SURGICEL®são usados deforma auxiliar em procedimentos cirúrgicos para auxiliar no controle de hemorragia de capilares, venosa e arterial pequena quando a ligação ou outros métodos convencionais de controle são impraticáveis ou ineficazes. A família SURGICEL® de hemostáticos absorvíveis consiste em quatro grupos de produtos principais, com todos os curativos hemostáticos para ferimentos disponíveis comercialmente junto à Ethicon, Inc., Somerville, N.J., uma empresa Johnson & Johnson: o hemostático SURGICEL® Original é um material de malha branco com um matiz amarelo pálido e um aroma semelhante a caramelo, fraco. Esse material é forte e pode ser suturado ou cortado sem esfiapar;

[0010] O hemostático absorvível SURGICEL® NU-KNIT®é similar aoSURGICEL® Original, porém tem uma malha mais densa e, dessa forma, uma resistência à tração mais alta. Esse material é particularmente recomendado para uso em cirurgias de transplante e trauma, uma vez que o mesmo pode ser envolvido ou suturado no lugar para controlar o sangramento;

[0011] A forma do produto hemostático absorvível SURGICEL®FIBRILLAR™ tem uma estrutura em camadas que possibilita que o cirurgião descole e segure com um fórceps qualquer quantidade de material necessária para obter a hemostasia em um sítio de sangramento específico, e, portanto, pode ser mais conveniente do que a forma de malha para sítios de sangramento de difícil acesso e de formato irregular. É particularmente recomendado para uso em cirurgias ortopédicas/de coluna e neurológicas.

[0012] A forma do produto hemostático absorvível SURGICEL®SNoW™ é um material não tecido estruturado que pode ser mais conveniente que outras formas para uso endoscópico devido a seu material não tecido estruturado, sendo altamente adaptável e recomendado em procedimentos tanto abertos quanto minimamente invasivos.

[0013] Um outro exemplo de hemostático absorvível disponívelcomercialmente contendo celulose oxidada é a bandagem cirúrgica de celulose absorvível GELITA-CEL®, disponível junto à Gelita Medical BV, de Amsterdam, Países Baixos. O hemostático de celulose oxidada disponível para comercialização indicado acima está disponível em materiais não tecidos, de malha ou sob a forma de pó. Produtos hemostáticos adicionais, como pós que consistem em partículas de polissacarídeo microporoso e partículas à base de amido vegetal, também estão disponíveis comercialmente, como o PERCLOT® e a ARISTA™.

[0014] Antecedentes da invenção US 8.815.832; US 3.364.200;US 2008/0027365; US 2004/0005350; WO 2007/076415; US 6.627.749; US 6.309.454; US 5.696.191; US 6.627.749; US 6.225.461; WO 2001/024841 A1, EP1.323.436; US 2006/0233869

[0015] Howsmon, J. A., & Marchessault, R. H. (1959). The ballmilling of cellulose fibers and recrystallization effects. Journal of Applied Polymer Science J. Appl. Polym. Sci., 1 (3), 313-322. doi: 10.1002/app. 1959.070010308.

[0016] Cullen, B., Watt, P. W., Lundqvist, c., Silcock, D., Schmidt,R. J., Bogan, D., & Light, N. D. (2002). The role of oxidised regenerated cellulose/collagen in chronic wound repair and its potential mechanism of action. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 34 (12), 1544-1556. doi: 10.1016/s1357-2725(02)00054-7.

[0017] Rajkhowa, R., Wang, L., & Wang, X. (2008). Ultra-fine silkpowder preparation through rotary and ball milling. Powder Technology, 185(1), 87-95. doi:10.1016/j.powtec.2008.01.005.

[0018] Yasnitskii, B. G., Dol'berg, E. B., Oridoroga, V. A., Shuteeva, L.N., Sukhinina, T. V., & Bogun, T. A. (1984). Oxycelodex, a new hemostatic preparation. Pharmaceutical Chemistry Journal, 18(4), 279-281.doi:10.1007/bf00760712.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0019] A presente invenção refere-se a composições hemostáticasmelhoradas que compreendem uma mistura de fibras curtas e longas originadas de um material à base de celulose.

[0020] Em um aspecto, a invenção refere-se à composiçãohemostática de fibras e/ou agregados que compreendem fibras longas e finas à base de celulose, sendo que as fibras longas e finas estão em uma razão na faixa de 5% a 25% p/p e 95% a 75% p/p, respectivamente; sendo que a distribuição de tamanho das fibras longas é: D90 de mais de 177 μm e de D50 de mais de 95 μm, e sendo que a distribuição de tamanho das fibras finas é: D90 de menos de 177 μm, e D50 de menos de 95 μm. Todas as porcentagens estão em peso/peso (p/p) da composição total em peso.

[0021] Em algumas modalidades da invenção, o D90 das fibraslongas é menor que 350 μm e o D50 é menor que 167 μm.

[0022] Em algumas modalidades da invenção, a composiçãohemostática compreende adicionalmente ao menos um composto selecionado do grupo que consiste em:um cátion divalente selecionado dentre zinco, cálcio, magnésio, manganês e cobre;um peptídeo e/ou um polissacarídeo positivamente carregado;um ácido ômega amino carboxílico; euma combinação de quaisquer dos itens acima.

[0023] Em uma modalidade, a composição compreende um ácidoômega amino carboxílico em uma faixa de concentração de 2,5% a 5,0%, em peso, de toda a composição; sal de protamina a uma concentração de 2,5% a 5,0%, em peso de toda a composição; um sal de cátion divalente, a concentração de cátion no sal sendo de 1,3% a 1,8% p/p de toda a composição. O peso restante é contribuído pelas fibras à base de celulose para um peso total de 100% p/p.

[0024] Em algumas modalidades da invenção, a composiçãohemostática compreende adicionalmente sal de protamina, cloreto de cálcio e ácido ε-aminocaproico (εACA). O peso restante é contribuído pelas fibras à base de celulose para um peso total de 100% p/p.

[0025] Em uma modalidade, as faixas de concentração de εACA,sulfato de protamina e cloreto de cálcio são de 2,5% a 5,0%, 2,5% a 5,0%, 5,0% a 6,5% p/p, respectivamente. O peso restante é contribuído pelas fibras à base de celulose para um peso total de 100% p/p.

[0026] A composição compreende fibras longas em umaconcentração na faixa de 5% a 25% p/p. O peso restante é contribuído pelas fibras curtas (presentes em uma faixa de concentração de 75% a 95%) e, opcionalmente, outros compostos/aditivos, até um peso total de 100%.

[0027] Em algumas modalidades da invenção, as fibras à base decelulose são fibras de celulose regenerada oxidada.

[0028] Em algumas modalidades da invenção, a composiçãohemostática está sob a forma de agregados com um tamanho na faixa de 75 a 420 μm.

[0029] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um métodode fabricação de uma composição hemostática, que compreende as etapas de:reduzir um tamanho de um material à base de celulose, por exemplo, uma malha, para formar fibras longas e fibras finas, sendo que a distribuição de tamanho das fibras longas é: D90 de mais de 177 μm e de D50 de mais de 95 μm, e sendo que a distribuição de tamanho das fibras finas é: D90 de menos de 177 μm e D50 de menos de 95 μm; e misturar as fibras longas e as finas em uma razão na faixa de 5% a 25%, em peso, e 95% a 75%, em peso, respectivamente, obtendo assim uma composição de fibras hemostáticas;opcionalmente, a composição de fibras hemostáticas obtida na etapa a) é submetida a etapas adicionais para obter uma composição hemostática sob a forma de agregados.

[0030] Em algumas modalidades da invenção, os agregados sãoformados em etapas que compreendem:compactar a composição de fibras hemostáticas para obter uma composição de fibras hemostáticas compactadas; eii) reduzir o tamanho da composição compactada.

[0031] Em alguns aspectos, a invenção refere-se a um método defabricação de uma composição hemostática compreendendo as etapas de:reduzir o tamanho de um material à base de celulose para formar fibras longas e fibras finas, sendo que a distribuição de tamanho das fibras longas é: D90 de mais de 177 μm e de D50 de mais de 95 μm, e sendo que a distribuição de tamanho das fibras finas é: D90 de menos de 177 μm e D50 de menos de 95 μm; e misturar as fibras longas e as finas em uma razão na faixa de 5% a 25%, em peso, e 95% a 75%, em peso, respectivamente, obtendo assim uma composição de fibras hemostáticas;opcionalmente, a composição de fibras hemostáticas obtida na etapa a) é submetida a etapas adicionais para obter uma composição hemostática sob a forma de agregados, sendo que as etapas compreendem: i) compactar a composição de fibras hemostáticas para obter uma composição de fibras hemostáticas compactada; e opcionalmente ii) reduzir o tamanho da composição compactada.

[0032] Em algumas modalidades da invenção, o D90 das fibraslongas é menor que 350 μm e o D50 é menor que 167 μm.

[0033] Em algumas modalidades da invenção, a redução do tamanhoé executada por moagem.

[0034] Em algumas modalidades da invenção, a redução do tamanhona etapa a) é precedida por uma etapa de fendilhar e/ou cortar o material à base de celulose.

[0035] Em algumas modalidades da invenção, a redução dotamanho na etapa a) é um processo de duas partes, e sendo que a segunda parte é executada em um moinho classificador a ar.

[0036] Em algumas modalidades da invenção, a moagem nomoinho classificador a ar é executada uma vez (uma passagem) para obter as fibras longas e três vezes (três passagens) para obter as fibras finas.

[0037] Em algumas modalidades da invenção, a etapa decompactação i) é precedida por uma etapa de umidificação da composição de fibras hemostáticas, opcionalmente até um nível de conteúdo de água entre 11% e 18%, em peso.

[0038] Em algumas modalidades da invenção, a etapa deumidificação é executada pela inclusão, na composição de fibras hemostáticas, de um material higroscópico, opcionalmente cloreto de cálcio.

[0039] Em algumas modalidades da invenção, a redução do tamanhona etapa ii) é precedida por uma etapa de desumidificação da composição compactada.

[0040] Em algumas modalidades da invenção, a desumidificação éexecutada até um nível de conteúdo de água menor que 5%, em peso.

[0041] Em algumas modalidades da invenção, a compactação naetapa i) é executada com o uso de uma máquina de redução, opcionalmente sob uma força na faixa de 25 a 70 kN/cm.

[0042] Em algumas modalidades da invenção, a obtenção deagregados hemostáticos na etapa b) é direcionada para produzir agregados tendo uma dimensão na faixa de 75 a 420 μm.

[0043] Em algumas modalidades da invenção, o material à basede celulose é uma malha de celulose regenerada oxidada, um pano não tecida de celulose regenerada oxidada, um pano tecido de celulose regenerada oxidada, um tecido de malha de celulose regenerada oxidada, um material de celulose regenerada oxidada desfiada ou combinações dos mesmos.

[0044] Em algumas modalidades da invenção, o método compreendeadicionalmente a adição, às fibras longas e finas, de ao menos um composto selecionado do grupo que consiste em:um cátion divalente selecionado dentre zinco, cálcio,magnésio, manganês e cobre;um peptídeo e/ou um polissacarídeo positivamentecarregado;um ácido ômega amino carboxílico; euma combinação de quaisquer dos itens acima.

[0045] Em algumas modalidades da invenção, o método compreende adicionalmente a adição, às fibras longas e finas, de sal de protamina, sal de cálcio e ácido ε-aminocaproico.

[0046] Em outro aspecto, a invenção refere-se a uma composiçãohemostática sob a forma de fibras e/ou agregados obteníveis de acordo com o método da invenção.

[0047] Em outro aspecto, a invenção refere-se a um método para aformação de um gel que compreende a etapa de: colocar uma composição hemostática sob a forma de fibras e/ou agregados de acordo com a invenção em contato com sangue, formando, assim, um gel.

[0048] Em outro aspecto, a invenção refere-se a um gel obtenívelpelo método de acordo com a invenção.

[0049] Em outro aspecto, a invenção refere-se a um kit quecompreende um recipiente que inclui uma composição hemostática sob a forma de fibras e/ou agregados de acordo com a invenção e, opcionalmente, um aplicador, um veículo e/ou instruções de uso.

[0050] Em algumas modalidades, o recipiente é um aplicador.

[0051] Em outro aspecto, a invenção refere-se a um método paratratamento de um ferimento com sangramento, de uma infecção bacteriana no sítio de um ferimento, vedação de um vazamento em um sítio, prevenção da adesão em um sítio, e/ou minimizar ou evitar vazamento de um sítio anastomótico em um indivíduo que precisa de tal tratamento, o método compreendendo a etapa de: aplicar uma quantidade eficaz da composição hemostática de acordo com a invenção sob a forma de fibras e/ou agregados sobre e/ou dentro do ferimento e/ou sítio do indivíduo.

[0052] A invenção refere-se ao uso de uma composição hemostáticasob a forma de fibras e/ou agregados, de acordo com a invenção, como um agente antibactericida, para interromper o sangramento, vedar, evitar adesões e/ou minimizar ou prevenir vazamentos de sítios anastomóticos. Em algumas modalidades, o uso é para minimizar ou evitar vazamentos em uma cirurgia de enxerto de bypass da artéria coronária (CABG, de "coronary artery bypass graft").

[0053] Em uma modalidade, a aplicação é executada sem aplicarpressão sobre a composição em direção ao ferimento e/ou sítio. Por exemplo, a compressão manual com o uso de gaze não é necessária. Em vários produtos, o produto exige compactação manual durante a aplicação durante ao menos um minuto. A vantagem de se usar a composição hemostática sem compressão é que a composição hemostática pode ser aplicada em/sobre áreas de difícil acesso.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0054] A Figura 1 é um diagrama de barras que mostra a força deresistência/força coesiva obtida das diferentes composições de fibra com o uso de um teste de Bloom modificado. A força de resistência obtida a partir de fibras de ORC finas não suplementadas serviu como uma linha de base para todo o experimento. A adição de fibras de ORC longas (L-ORC) foi mostrada como aumentando a resistência de coágulos.

[0055] A Figura 2 é um diagrama de barras que mostra a eficáciahemostática das diferentes composições de agregados por um modelo de sutura ex vivo. A figura mostra que a adição de fibras de ORC longas (L-ORC) aumentou a eficácia hemostática.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0056] A invenção refere-se a composições de fibras e/ou agregados que têm propriedades físicas surpreendentes e efeitos altamente benéficos para a hemostasia na formação de gel ou coágulo para a preparação e uso das mesmas. A composição hemostática compreende uma mistura de fibras curtas e longas originadas de um material à base de celulose sob a forma de fibras e/ou agregados. Por exemplo, a composição de fibras e/ou agregados induz formação de gel ou de um coágulo que tem propriedades físicas benéficas, como força coesiva aumentada e capacidade hemostática benéfica.

[0057] O termo "fibras à base de celulose" refere-se a fibras quecompreendem uma cadeia principal de celulose. A cadeia principal de celulose pode ser modificada,por exemplo, pode incluir alterações nos níveis de carboxilação ou de oxidação. Exemplos não limitadores de materiais à base de celulose incluem celulose oxidada ou celulose regenerada oxidada, carboximetilcelulose, hidroxietil celulose, hidroxipropil celulose e metilcelulose.

[0058] Os materiais à base de celulose podem ser tecidos, nãotecidos, de malha e/ou outras formas de produtos têxteis.

[0059] Exemplos não limitadores de fibras à base de celulose sãofibras de ORC, fibras de algodão, fibras de raiom e fibras de viscose.

[0060] O termo "fibras" refere-se a estruturas que têm forma filamentaralongada.

[0061] A composição de fibras hemostáticas pode estar sob a formade pó.

[0062] Em uma modalidade da invenção, as fibras à base decelulose "finas ou curtas" na composição têm uma distribuição de tamanho de D90 menor que 177 μm e de D50 menor que 95 μm.

[0063] Em uma modalidade da invenção, as fibras à base de celulose"longas" na composição têm uma distribuição de tamanho de D90 de mais de 177 μm e de D50 de mais de 95 μm. Em uma outra modalidade, as fibras longas têm uma distribuição de tamanho menor que 350 μm e o D50 é menor que 167 μm.

[0064] A distribuição de tamanho de D50 também é conhecida comoo diâmetro mediano ou o valor médio das unidades na distribuição de tamanho de agregados/pó, e é o valor do diâmetro das unidades a 50% na distribuição cumulativa. Por exemplo, se D50 for X μm, então 50% das unidades na amostra são maiores que X μm e 50% são menores que X μm. A distribuição de tamanho é o número de unidades que está compreendido em cada uma das várias faixas de tamanho dadas como uma porcentagem do número total dos tamanhos de todas as unidades na amostra de interesse. Consequentemente, o valor de D90 refere-se a 90% das unidades com um tamanho que é menor que o valor de D90.

[0065] O termo "pó" refere-se a partículas sólidas secas dispersas.

[0066] O termo "agregados" refere-se a um material à base decelulose compactado que tem uma faixa de tamanho-alvo, por exemplo, o material compactado é submetido a redução de tamanho, como por moagem e, opcionalmente, peneiragem.

[0067] Exemplos não limitadores de redução de tamanho são rasgos,retalhamento, moagem, trituração e/ou peneiragem.

[0068] Em uma modalidade, os agregados são composição de fibrascompactadas submetidas à redução de tamanho, como por moagem.

[0069] O termo "hemostático" refere-se à capacidade de reduzir aintensidade de sangramento ou deter o sangramento.

[0070] Os resultados baseiam-se nas seguintes conclusões:

[0071] Descobriu-se, de acordo com a invenção, que a composiçãohemostática de acordo com a invenção exibe propriedades superiores quando comparadas a uma composição comparativa de fibras à base de celulose finas.

[0072] Descobriu-se que a suplementação de fibras de ORC finascom fibras de ORC longas aumentou a resistência de coágulos e a força coesiva.

[0073] Os resultados mostram que a mistura de fibras de ORCfinas com fibras de ORC longas aumentou a força coesiva de um coágulo formado quando ele entra em contato com o sangue em ao menos 1,5 vez.

[0074] O termo "resistência de um gel ou coágulo" refere-se aosresultados do teste de Bloom modificado (conforme exemplificado abaixo) que demonstram a força necessária da haste metálica para passar através do gel na extensão de 7 mm enquanto se move a uma velocidade de 5 mm/min. Essa força reflete o nível de resistência do gel (quanto maior a força, maior a resistência do gel), e, por sua vez, indica o nível de força coesiva de um gel. Quanto maior for a força necessária para que a haste prossiga com seu movimento constante, maior a resistência do gel.

[0075] Descobriu-se na presente invenção que o uso de fibras deORC com diferentes distribuições de tamanho pode aumentar a integridade estrutural resultante do coágulo produzido após a aplicação das fibras e/ou agregados.

[0076] Descobriu-se, também, que a suplementação de fibras deORC curtas com fibras de ORC longas poderia melhorar as capacidades hemostáticas da composição quase duas vezes mais em relação a uma composição incluindo fibras de ORC finas não suplementadas que tem fibras longas em uma concentração menor que 25% do peso total da composição.

[0077] Além disso, a suplementação de fibras de ORC finas comfibras longas e todos os três compostos seguintes de cloreto de cálcio, SP e εACA apresentou resultados superiores. O efeito positivo foi observado em uma razão específica dos suplementos.

[0078] Uma composição que compreende 80% de fibras de ORCfinas com 10% de fibras de ORC longas e que inclui 5% de CaCl2, 2,5% de SP e 2,5% de εACA exibiu resultados hemostáticos superiores, de duas dobras, em comparação com uma composição que consiste em fibras de ORC finas.

[0079] A composição de fibras e/ou agregados que compreendefibras de celulose regenerada oxidada (ORC) incluindo uma mistura de fibras com distribuição de tamanho diferente exibe propriedades superiores quando comparada a uma composição que inclui fibras de ORC preparadas apenas com fibras finas.

[0080] Sem ser limitado pelo mecanismo, a mistura de fibras à basede celulose com uma distribuição de tamanho diferente e, opcionalmente os compostos, contribui para a estrutura do coágulo obtida localmente.

[0081] Em um aspecto, a invenção refere-se à composição de fibrase/ou agregados que compreende fibras longas e finas à base de celulose, sendo que as fibras longas e finas estão em uma razão na faixa de 5% a 25% p/p e 95% a 75% p/p respectivamente, sendo que a distribuição de tamanho das fibras longas é: D90 de mais de 177 μm e de D50 de mais de 95 μm, e sendo que a distribuição de tamanho das fibras finas é: D90 de menos de 177 μm, e D50 de menos de 95 μm.

[0082] Onde aplicável, todas as faixas aqui reveladas incluem olimite superior e inferior.

[0083] Em algumas modalidades, as fibras longas estão em umaconcentração na faixa de 5% até menos que 25%.

[0084] Os materiais de celulose regenerada oxidada que podemser usados como um material de partida para a fabricação da composição hemostática da presente invenção são conhecidos e estão disponíveis comercialmente. Os materiais de partida podem incluir materiais tecidos absorvíveis tecidos ou de malha, ou não-tecidos, compreendendo polissacarídeos oxidados, particularmente celulose oxidada e os derivados neutralizados dos mesmos. Por exemplo, a celulose pode ser celulose oxidada por composto carboxílico ou oxidada por aldeído. Com mais preferência, podem ser usados polissacarídeos regenerados oxidados incluindo, mas não se limitando a, celulose regenerada oxidada. A celulose regenerada oxidada é preferencial devido a seu grau mais alto de uniformidade, em comparação a celulose que não foi regenerada. A celulose regenerada e uma descrição detalhada de como produzir celulose regenerada oxidada são apresentados nas patentes US N° 3.364.200, 5.180.398 e 4.626.253, cujos teores estão aqui incorporados a título de referência como se apresentados em sua totalidade.

[0085] Exemplos de materiais à base de celulose preferenciais quepodem ser utilizados incluem, mas não se limitam a, barreira de adesão absorvível INTERCEED®, hemostático absorvível SURGICEL® Original, hemostático absorvível SURGICEL® NU-KNIT®, hemostático absorvível SURGICEL® FIBRILLAR™ e hemostático absorvível SURGICEL® SNoW™.

[0086] As fibras e/ou os agregados hemostáticos da presenteinvenção podem ter o desempenho de um hemostático sob a forma de pasta ou de pó, com propriedades hemostáticas superiores e com boa fluidez e conformabilidade a tecidos. Além disso, as fibras e/ou os agregados hemostáticos podem ser fisicamente incorporados e/ou misturados com outros agentes e biopolímeros para melhorar a aderência aos tecidos, as propriedades vedantes e/ou as propriedades antiadesão.

[0087] Em um aspecto da presente invenção, é apresentado ummétodo para a produção de uma composição de fibras e/ou agregados com propriedades hemostáticas, cura de ferimentos e outras propriedades terapêuticas benéficas.

[0088] Um método possível da presente invenção compreende afabricação de fibras hemostáticas e/ou agregados diretamente a partir de materiais à base de celulose, como produtos de ORC, por exemplo, aqueles discutidos acima.

[0089] Em uma modalidade, fibras longas e curtas são obtidas pelaredução do tamanho de um material à base de celulose, as fibras longas podem ser obtidas por se incluir menos etapas de moagem e/ou um tempo de moagem mais curto em comparação com as etapas e/ou o tempo necessário para se obter as fibras finas.

[0090] Em uma modalidade alternativa, os pedaços de material à base de celulose cortados são convertidos diretamente em fibras finas em um moinho de bolas. O número de rodadas diferentes e ou os períodos de tempo de moagem no moinho de bolas resulta em diferentes tamanhos de fibra. As fibras maiores retiradas da etapa de moagem por bolas podem ser coletadas para uso futuro a fim de se incorporar diferentes tamanhos de fibra à composição final de fibras e/ou agregados.

[0091] As fibras finas à base de celulose obtidas após a moagempodem ser misturadas com as fibras à base de celulose longas anteriormente obtidas e, opcionalmente, podem ser adicionalmente misturadas com composto(s) e/ou aditivos, por exemplo, para melhorar a aderência aos tecidos, as propriedades vedantes, propriedades de hemostasia e/ou propriedades antiadesão.

[0092] A mistura das fibras longas e finas pode ser executada emuma razão na faixa de 5% a 25% e 95% a 75%, respectivamente, sendo que o D90 das fibras longas é maior que 177 μm e o D50 é maior que 95 μm, e sendo que o D90 das fibras finas é menor que 177 μm e o D50 é menor que 95 μm.

[0093] A composição de fibras hemostáticas produzidas pode seradicionalmente suplementada com um composto.

[0094] Em uma modalidade, o método para a produção dacomposição hemostática começa com um material à base de celulose, como um material de ORC, por exemplo, um hemostático absorvível SURGICEL® Original. O material de ORC é cortado em seções de 2,54 a 5,08 cm (1 a 2 polegadas) de largura antes de o material ser alimentado a uma lâmina que corta o material em pedaços menores. Os pedaços de material de ORC cortados são, então, triturados em fibras de ORC por dois processos de moagem consecutivos (moagem por martelos e moagem por classificador a ar). As fibras provenientes de etapas de moagem diferentes são tomadas para uso futuro, para incorporar diferentes tamanhos de fibra à(s) composição(ões) final(is) de fibras. A composição de fibras hemostáticas obtida pode ser submetida a etapas adicionais para se obter uma composição hemostática sob a forma de agregados.

[0095] Em algumas modalidades, o termo "tamanhos de fibrasdiferentes" refere-se a fibras com distribuições de tamanhos diferentes.

[0096] Em uma modalidade, as fibras à base de celulose nacomposição são compreendidas de uma mistura de fibras à base de celulose com uma distribuição de tamanho diferente. A mistura de fibras à base de celulose pode ser adicionalmente misturada com um composto(s). Em uma modalidade, a mistura pode passar por um processo de compactação e moagem para formar agregados. Os agregados de fibras à base de celulose, opcionalmente com o(s) composto(s), podem situar-se na faixa de 75 μm a 420 μm.

[0097] Em uma modalidade, antes da formação de agregados, amistura de fibras à base de celulose contendo fibras longas e finas, é submetida a uma etapa de umidificação até um nível de cerca de 11% e cerca de 18%, a cerca de 11% até cerca de 16%, com a máxima preferência, cerca de 12 a 16% (medida pelo analisador de umidade de halogênio Ohaus) para processamento subsequente. Esta etapa poderia ser omitida se uma quantidade suficiente de material higroscópico, como cloreto de cálcio, for adicionada às fibras. A quantidade suficiente de composto higroscópico é, por exemplo, uma quantidade que possibilita a umidificação até um nível de cerca de 11% a cerca de 18%, conforme medido pelo analisador de umidade de halogênio de Ohaus. As fibras misturadas úmidas resultantes são, então, compactadas.

[0098] O termo "material higroscópico"refere-se a uma substânciaque é capaz de atrair e reter moléculas de água a partir do ambiente circundante, normalmente em um ambiente de temperatura normal ou ambiente. Exemplos não limitadores incluem cloreto de zinco, cloreto de cálcio, hidróxido de potássio e hidróxido de sódio.

[0099] Em uma modalidade, a formação de agregados inclui umaetapa de desumidificação ou o processo de secagem, após a compactação e antes da redução de tamanho, e inclui uma etapa de peneiragem. A etapa de redução de tamanho e peneiragem possibilita tipicamente o direcionamento a agregados com uma certa dimensão. As próximas etapas podem ser dosar em dispositivos aplicadores e, então, submeter o dispositivo à embalagem e à esterilização.

[00100] Em uma modalidade, a umidade de armazenamento antes da dosagem em um aplicador é menor que cerca de 2% p/p na conclusão da secagem para se obter menos que 6% p/p de teor de umidade em um ambiente controlado (0,3 a 0,6%/h por 500 gramas de ganho de umidade da amostra, dependendo da umidade relativa, comumente de 25 a 55% de umidade relativa) para dosagem em aplicadores. Um método possível para a produção da(s) composição(ões) hemostática(s) compreende as etapas de: fender e cortar o material à base de celulose; reduzir o tamanho, por exemplo, por moagem do material resultante; a(s) etapa(s) de moagem em um classificador a ar para se obter fibras longas e finas; misturar as fibras dos diferentes tamanhos e, opcionalmente, adicionar o(s) composto(s).

[00101] Outro método possível para a produção da(s) compo- sição(ões) hemostática(s) compreende as etapas de: fender e cortar o material à base de celulose; reduzir o tamanho, por exemplo, por moagem do material resultante; a(s) etapa(s) de moagem em um classificador a ar para se obter fibras longas e finas; misturar as fibras dos diferentes tamanhos e, opcionalmente, adicionar o(s) composto(s); umidificação (poderia ser omitida em caso de uma quantidade suficiente de material higroscópico [por exemplo, cloreto de cálcio] ser adicionada); compactação; desumidificação ou secagem; redução do tamanho do material compactado; peneiramento; dosagem opcional em recipientes de armazenamento ou em dispositivos de aplicação, embalagem primária e embalagem secundária; e esterilização opcional.

[00102] A etapa de fender e cortar pode ser executada para fender e cortar o material em pedaços de um tamanho adequado que tem entre aproximadamente 2,54 cm por 7,62 cm, ou 5,08 cm por 7,62 cm (uma polegada por 3 polegadas, ou duas polegadas por 3 polegadas), embora pedaços menores também possam ser usados. As principais operações realizadas para fender e cortar são desenrolar um rolo de tecido, cortar o tecido em tiras, cortar as tiras para dimensionar e liberar os pedaços cortados na primeira etapa de moagem. Inúmeras máquinas de fenda e corte são conhecidas e comercialmente disponíveis, como AZCO Modelo FTW-1000, disponível junto à AZCO.

[00103] Em uma primeira etapa de moagem, os pedaçosprocessados de material de tecido à base de celulose são convertidos de uma fibra grossa intermediária produzida na etapa de fender e cortar em um material com um valor de D90 menor que 452 μm e um valor de D50 menor que 218 μm, enquanto tem impacto mínimo sobre o índice de cor e o teor solúvel em água do material. Várias máquinas para moagem estão comercialmente disponíveis, como os modelos DASO6 e WJ-RS-D6A produzidos pela Fitzpatrick, que são máquinas de moagem do tipo triturador, equipadas com uma peneira redonda de 497 μm e um conjunto de lâminas que rompe o tecido até que o mesmo passe através da peneira para produzir uma fibra de celulose grossa intermediária. Em uma passagem de exemplos de processo, a velocidade de moagem pode ser de cerca de 7.000 RPM; temperatura de processamento menor que 80°C; número de lâminas como 8 (2 hélices cada); tipo de lâmina como uma faca de 225, lâminas do tipo impactado; orientação da lâmina ajustada como "impacto".

[00104] A fibra produzida em uma etapa de moagem pode serreduzida ainda mais enquanto se mantém um impacto mínimo sobre o índice de cor e o conteúdo solúvel em água do material. Inúmeras máquinas estão disponíveis para a segunda etapa de moagem, como um classificador a ar/moedor F10 Quadro Fine da Quadro.

[00105] A fibra mais grossa intermediária da primeira etapa de moagem pode ser alimentada a uma taxa controlada no segundo moinho e passada através de duas câmaras de moagem que são separadas por uma tela de moagem. O material pode ser puxado através da câmara de moagem por um soprador de ar. A fibra grossa intermediária pode ser processada através do equipamento classificador a ar várias vezes para se obter o tamanho desejado. Além disso, as fibras podem ser retiradas dessas etapas de moagem para uso futuro, a fim de se incorporar diferentes tamanhos de fibra às fibras e/ou agregados finais. As fibras grossas intermediárias provenientes da primeira etapa de moagem podem ser alimentadas a uma taxa controlada para dentro do segundo moinho. As fibras grossas intermediárias podem ser processadas através do equipamento classificador a ar três vezes para se obter o tamanho desejado. Além disso, em certos experimentos, as fibras retiradas da primeira rodada através do classificador a ar podem ser extraídas para incorporar diferentes tamanhos de fibra aos agregados finais.

[00106] Em uma modalidade, as fibras coletadas da primeira e da terceira rodada através do classificador a ar são usadas para produzir uma composição de fibras/agregados aprimorada.

[00107] Nessa(s) etapa(s), um classificador a ar Quadro F10 pode ser usado com uma velocidade de moagem de 8.400 rpm, velocidade do soprador de 1.800 rpm e 3 passagens. Em tal modalidade, após uma passagem, as fibras longas resultantes podem ter um valor de D90 menor que 350 μm e um valor de D50 menor que 167 μm. Após 3 passagens, as fibras finas resultantes podem ter um valor de D90 menor que 177 μm e um valor de D50 menor que 95 μm.

[00108] A fibra fina também pode ser produzida em uma etapa por moagem com bolas em vez de em duas etapas de moagem, conforme descrito acima.

[00109] Em uma modalidade alternativa de moagem com bolas, 50 g de material à base de celulose pré-cortado [por exemplo, tecido de ORC] (5 x 5 cm (2" x 2") são moídos por moinho de bolas com 12 bolas de zircônia de alta densidade (dióxido de zircônio, ZrO2, 20 mm de diâmetro; Glen Mills Inc., Clifton, N.J., EUA) colocando-se as bolas e as amostras em um recipiente de trituração de 500 mL. O recipiente é preso aos suportes de fixação e, então, contrabalançado no moinho de bolas planetário PM100; Retsch, Inc., Newtown, Pa., USA). A moagem é, em seguida, realizada bidirecionalmente a 450 rpm durante 20 minutos. Com o uso de diferentes parâmetros de moagem, como tempo, diferentes tamanhos de fibras podem ser produzidos, os quais podem ser usados para incorporação futura à mistura, o que poderia resultar em agregados aprimorados.

[00110] Em uma modalidade, a câmara de umidade adequada para a etapa de umidificação está disponível comercialmente como modelo CEO- 916-4-B-WF4-QS junto à Thermal Product Solutions. A umidificação do ar da câmara é obtida por injeção de vapor d'água. A temperatura de regime permanente típica de 25°C pode ser utilizada, enquanto o nível de umidade pode ser ciclizado entre 75% e 85%, com um alvo preferencial de 85% de umidade do ar. O tempo de umidificação ou o tempo de residência do material dentro da câmara de umidade podem situar-se na faixa de várias horas a vários dias, dependendo da quantidade do material e da recirculação de ar. Em um ciclo típico e preferencial, o material terá de 12 a 13 horas de tempo de residência para cerca de 3.000 gramas de fibra fina de celulose dispostos em várias bandejas e expostos a 85% de umidade relativa e um alvo de 12% de teor de umidade das fibras após a umidificação.

[00111] Em uma modalidade, as fibras finas são misturadas com as fibras longas e, opcionalmente, com os compostos e/ou aditivos antes da compactação.

[00112] O material comprimido pode ser moído e peneirado, e agregados entre 75 e 420 μm podem ser coletados.

[00113] O equipamento de compactação é conhecido e disponível para comercialização. As fibras poderiam ser compactadas por máquinas de redução/trituração ou qualquer outra técnica de compactação conhecida na técnica. Unidades de compactação exemplificadoras são o Fitzpatrick Chilsonator IRR220-L1A com peneira manual Retsch durante a noite de 200 a tingido, com Retsch AS200 Screener e Fitzpatrick Chilsonator CCS220/M3B & RV-M5A com unidade de peneira Screener Sweco Vibroenergy integrada a M5A. O processamento de compactação pode ser realizado com o uso de dois subsistemas separados que são ligados por um sistema elétrico comum. Por exemplo, um primeiro subsistema (compactador por rolo: unidade principal) pode ser o compactador por rolo Fitzpatrick Chilsonator CCS220 e moinho M3B para pré-ruptura do material compactado, enquanto o segundo subsistema (compactador por rolo: unidade de moagem secundária) é o moinho M5A para a moagem final com um Sweco ou peneira Retch para a separação para obter os agregados de tamanho desejados.

[00114] A umidade pode ser removida após a compactação em uma etapa de desumidificação ou secagem. A etapa de desumidificação ou secagem, de preferência, não afeta significativamente quaisquer outros atributos de qualidade do produto, como cor, densidade aparente, teor solúvel em água e tamanho. Tipicamente, as fibras podem ser secas como uma batelada com o uso de um leito de ar fluidizado convencional.

[00115] O equipamento de desumidificação é conhecido e disponível para comercialização. Um leito de ar fluidizado de bancada exemplificador está disponível comercialmente junto à Retsch (TG- 200) com capacidade de 6 L. Alternativamente, um modelo de leito fluidizado n° 0002, disponível junto à Fluid Air (Aurora, IL) também pode ser usado.

[00116] Em algumas modalidades da invenção, um ou mais polissacarídeos com cargas positivas são adicionalmente adiciona- dos/incluídos nas composições de acordo com a invenção. Exemplos não limitadores de polissacarídeos com cargas positivas são o quito- sano e a goma guar catiônica.

[00117] Em algumas modalidades da invenção, um ou mais peptídeos com cargas positivas são adicionalmente adicionados/incluídos nas composições de acordo com a invenção. Exemplos não limitadores de tais peptídeos são: abaecina, apidaecinas, profenina, indoicidina, melitina, magaininas, LL-37, lactoferricina bovina, lactoferricina humana, cecropina A1, buforina II, tanatina, polifemusina 1, magainina 2, β-defensina-2 humana, defensina de rim de coelho, penetracina/antennapedia, TAT, SynB1, SynB3, PTD-4, PTD-5, revestimento de FHV - (35 a 49), BMV Gag- (7 a 25), HTLV-II Rex - (4 a 16), d-TaT, R9-tat transportan, MAP, SBP, FBP, MPG, MPG (ΔNLS), Pep-1, Pep-2.

[00118] Em um outro aspecto, a invenção apresenta um método para formar um gel, sendo que o método compreende a etapa de: colocar uma composição hemostática de acordo com a invenção em contato com sangue, formando, assim, um gel.

[00119] O termo "sangue" inclui frações de sangue como plasma.

[00120] O termo "gel" refere-se a um material viscoso e/ou semelhante a sólido que pode ter propriedades na faixa de macio e fraco a duro e rígido. O gel pode ser um hidrogel.

[00121] Tipicamente, um hidrogel é uma rede de cadeias de polímero que são hidrofílicas. Os hidrogéis podem conter mais de 90% de água e incluir redes poliméricas.

[00122] O gel pode ser um coágulo que é uma massa espessa de líquido coagulado, especialmente sangue.

[00123] O termo "colocar em contato"é usado em seu sentido mais amplo e refere-se, por exemplo, a qualquer tipo de ação de combinação que coloca a composição hemostática em proximidade suficientemente estreita com o sangue, de modo que um coágulo ou gel seja formado.

[00124] Em uma modalidade, o método forma um gel que tem uma resistência igual a ou maior que 1,5 vez acima daquela de um gel formado após o contato de uma composição comparativa com sangue, e/ou forma um gel que tem uma capacidade hemostática de cerca de duas vezes ou mais que aquela de um gel formado após o contato de uma composição comparativa com sangue, sendo que a composição comparativa compreende fibras finas à base de celulose e não tem fibras longas à base de celulose.

[00125] Em um outro aspecto, a invenção fornece um gel obtenível pelo método da invenção.

[00126] Em um outro aspecto, a invenção apresenta um kit que compreende um recipiente que inclui uma composição hemostática da invenção e, opcionalmente, um aplicador ou veículo, e, opcionalmente, instruções para uso.

[00127] O termo "veículo"refere-se a uma matriz física que compreende e/ou retém a composição hemostática. Exemplos de veículos incluem, mas não se limitam a, blocos para uso interno e/ou externo, como blocos à base de celulose, blocos à base de colágeno; implantes, como implantes ortodônticos e ortopédicos; selantes fluxíveis e/ou hemostáticos, como o SURGIFOAM® e o EVICEL®.

[00128] Em uma modalidade, as fibras hemostáticas e/ou a composição de agregados de acordo com a presente invenção são produzidas a partir de materiais de fibra à base de celulose oxidada (ORC) ou a partir de materiais à base de celulose oxidada (OC) pré- cortados.

[00129] As fibras hemostáticas e/ou a composição de agregados resultantes podem ser usadas para várias aplicações tópicas cirúrgicas e/ou de cura de ferimentos, como para tratamento antibactericida, hemostasia, antiadesão, vedação e/ou para minimizar ou evitar vazamentos, por exemplo, vazamentos a partir de sítios anastomóticos, como vazamentos criados durante o enxerto de bypass da artéria coronária (CABG).

[00130] A composição pode ser usada para interromper o sangramento em áreas de difícil acesso, por exemplo, durante cirurgia laparoscópica, em sítios anastomóticos como CABG e/ou anastomose arteriovenosa, e procedimentos onde a aplicação de pressão é injustificada, como cirurgia espinhal ou cirurgia neuronal.

[00131] Os pacientes que são submetidos à cirurgia de enxerto de bypass da artéria coronária (CABG) podem ter vazamentos a partir dos sítios anastomóticos criados durante o procedimento. Muitos desses vazamentos são abordados durante a cirurgia com o uso de suturas adicionais ou de várias pinças hemostáticas. Parar esses vazamentos durante a cirurgia e evitar que os mesmos se desenvolvam no período pós- operatório ajudará os cirurgiões a ter mais certeza de que seus pacientes não terão vazamentos anastomóticos pós-operatórios. O sangramento após procedimentos de CABG que requer transfusão ou reoperação está associado a um aumento significativo na morbidade e mortalidade. Em até 20% dos casos, um sítio específico de sangramento pode ser identificado durante a reoperação. As fontes típicas de sangramento cirúrgico incluem sítios de canulação, o sítio anastomótico proximal e distal, e as ramificações dos ITAs e enxertos de veia. De acordo com a literatura, de 2 a 3% dos pacientes com CABG necessitarão de re-exploração para parar sangramentos, e até 20% terão sangramento pós-operatório excessivo que exigirá transfusão de sangue.

[00132] A(s) composição(ões) hemostática(s) pode(m) ter uma ou mais das vantagens a seguir em relação a vários produtos conhecidos:1 - podem interromper sangramentos, por exemplo, emlinha de sutura de vasos sanguíneos grandes e, portanto, podem reduzir significativamente e interromper o sangramento das linhas de sutura dos vasos sanguíneos ao contrário de vários produtos conhecidos que têm eficácia limitada na obtenção da hemostasia em vasos sanguíneos;2 - podem atingir a hemostasia sem a necessidade de aplicação de pressão. Vários produtos conhecidos exigem a aplicação de pressão (por exemplo, compressão manual com uma gaze) para atingir a hemostasia;3 - são ativadas no sangue. Quando ativados por umidade, as fibras hemostáticas e/ou os agregados obtêm estrutura (por exemplo, sob a forma de um coágulo/gel) e podem atingir a hemostasia. Vários produtos conhecidos têm integridade estrutural pré-formada; 4 - podem ser colocados no sangue, não flutuam facilmente e podem atingir a hemostasia. Vários produtos conhecidos têm eficácia limitada em um ambiente molhado;5 - podem aderir ao sítio de sangramento, ainda assim são reversíveis, isto é, aderem ao sítio de sangramento e resistem à lavagem, mas podem ser raspadas para serem removidas para acesso se a correção cirúrgica for necessária. Vários produtos conhecidos têm aderência limitada em um campo molhado, ou os mesmos não podem ser facilmente removidos uma vez aplicados.

[00133] O teor de todas as publicações citadas está aqui incorporado, por referência, em sua totalidade.Exemplos Material e métodos.Tabela 1A: Fibras de celulose regenerada oxidada (ORC).

[00134] Consulte abaixo a elaboração sobre a preparação.Tabela 1B: Compostos usados para suplementar as fibras de ORC.

[00135] A Tabela 2 mostra a porcentagem (p/p com base no peso tota da composição) de cátions em CaCl2 usados nos experimentos.Tabela 2: % (p/p) de concentração de cátion equivalente em CaCh.

Preparação das fibras de celulose regenerada oxidada (ORC).

[00136] O processo de fabricação das fibras de ORC começou com o material hemostático absorvível de ORC SURGICEL® Original. O materialde ORC foi cortado em seções de 2,54 a 5,08 cm (uma a duas polegadas) de largura antes de o material ser alimentado a uma lâmina que corta o tecido em pedaços menores. Os pedaços de tecido de ORC cortados são, então, triturados em fibras de ORC finas por dois processos de moagem consecutivos (moagem por martelos e moagem por classificador a ar). As fibras de diferentes etapas de moagem foram tomadas para uso futuro a fim de se incorporar diferentes tamanhos de fibra aos agregados finais.

[00137] Mais especificamente, o processo para a fabricação das fibras compreendeu as etapas de: fender e cortar o tecido SURGICEL® Original; moer o material resultante com o uso de moagem por martelos; a(s) etapa(s) de moagem em um classificador a ar para se obter fibras longas e finas; e, opcionalmente, misturar as fibras dos diferentes tamanhos.

[00138] A etapa de fender e cortar foi executada para fender e cortar o tecido em pedaços de tamanhos adequados que são de aproximadamente 2,54 cm por 7,62 cm (uma polegada por 3 polegadas). As principais operações realizadas para fender e cortar foram desenrolar um rolo de tecido, fender o tecido em tiras, cortar as tiras para dimensionar e fornecer os pedaços cortados na primeira etapa de moagem.

[00139] Na primeira etapa de moagem, os pedaços de material de tecido à base de celulose processados foram convertidos de uma fibra grossa intermediária produzida na etapa de fender e cortar em um material com um valor de D90 menor que 452 μm e um valor de D50 menor que 218 μm, enquanto tinha impacto mínimo sobre o índice de cor e o teor solúvel em água do material. A máquina usada para moagem nesta etapa foi um tipo de triturador modelo WJ-RS-D6A, produzido pela Fitzpatrick. O triturador foi equipado com uma peneira redonda de 497 μm e um conjunto de lâminas que rompe o tecido até que o mesmo passe através da peneira para produzir uma fibra à base de celulose grossa intermediária. Os parâmetros da moagem foram: velocidade de moinho de cerca de 7.000 RPM; temperatura de processamento inferior a 80°C; número de lâminas 8 (2 hélices cada); lâmina tipo de uma faca 225, lâminas do tipo impacto; orientação da lâmina ajustada como "impacto".

[00140] As fibras grossas intermediárias da primeira etapa de moagem foram alimentadas a uma taxa controlada para dentro do segundo moinho. As fibras grossas intermediárias foram processadas através do equipamento classificador a ar três vezes para se obter o tamanho desejado. Além disso, em certos experimentos, as fibras retiradas da primeira rodada através do classificador de ar foram extraídas para incorporar diferentes tamanhos de fibra aos agregados finais.

[00141] Nessa(s) etapa(s), um classificador de ar Quadro F10 foi usado com uma velocidade de moagem de 8.400 rpm, velocidade do soprador de 1.800 rpm e 3 passagens. Após uma passagem, as fibras de ORC longas resultantes tinham D90 de mais de 177 μm e D50 de mais de 95 μm. Após 3 passagens, as fibras de ORC finas resultantes tinham um valor de D90 menor que 177 μm e um valor de D50 menor que 95 μm.

Preparação da composição em pó.

[00142] Todos os pós foram pesados com o uso de uma balança analítica em condições de umidade controladas. A umidade relativa não excedeu 20% durante todo o processo de preparação do pó. Todos os pós foram compreendidos de fibras de ORC finas com D90 menor que 177 μm e D50 menor que 95 μm, preparados conforme descrito acima (Tabela 1A) e suplementados com fibras de ORC longas tendo: D90 menor que 350 μm e D50 menor que 167 μm nas razões especificadas em cada exemplo. Todas as composições em pó no Exemplo 2 também foram suplementadas com 5% de CaCl2, 2,5% de SP e 2,5% de εACA. Por exemplo, no Exemplo 2 e Figura 2, a composição citada como 10% L-ORC consistia em 80% de fibras de ORC finas, 10% de fibras de ORC longas, 5% de CaCl2, 2,5% de SP e 2,5% de εACA. Todas asporcentagens estão em peso/peso (p/p) da composição total em peso.

[00143] Todos os compostos, elaborados na Tabela 1, foram fornecidos sob a forma de pó.

[00144] Cada mistura de pó foi transferida para um pilão e almofariz e misturada completamente até que as partículas de pó estivessem distribuídas de maneira homogênea/igual na composição. Para minimizar a adsorção de umidade, as composições em pó foram armazenadas em frascos e vedadas com um filme plástico de parafina (PARAFILM®).

Preparação do agregado.

[00145] Para obter agregados/grânulos que contêm uma maior razão de massa por volume, duas etapas foram executadas:I - Compactação do pó (capsulação); eII - Secagem, moagem/trituração e peneiração da cápsula.

[00146] Consulte a elaboração das etapasI e II abaixo.

Compactação do pó.

[00147] A compactação foi executada com o uso de uma prensa hidráulica manual (Specac Atlas de 13.608 quilogramas (15 toneladas), modelo GS15011) e uma matriz de pélete evacuável adequada, a matriz de pélete tendo um diâmetro de 10 mm (Specac GS03100). Cerca de 300 mg da composição em pó (preparada conforme descrito acima) foram carregados em uma matriz de pélete até uma altura de aproximadamente 1,5 a 2,0 cm. Na etapa seguinte, uma haste metálica (que faz parte do equipamento de prensa hidráulica manual) foi encaixada em cima do pó e usada para atingir uma pressão de 3.629 quilogramas (cerca de 1.179 quilogramas por cm2) (4 toneladas (cerca de 1,3 toneladas por cm2)) pela prensa hidráulica manual. Após esta etapa, foi formada uma cápsula (pó compactado) em um diâmetro de 10 mm e uma altura de aproximadamente 0,3 a 0,5 cm. A cápsula foi liberada da matriz de pélete e rompida em duas metades com um pilão e almofariz para aumentar a área superficial para a etapa de secagem seguinte.

Secagem, moagem/trituração e peneiração da cápsula.

[00148] As metades da cápsula foram secas em um forno a vácuo (forno a vácuo Cole Parmer modelo 05017-05) a 37°C durante aproximadamente 16 horas para remover qualquer excesso de umidade (e atingir uma umidade menor que 5% p/p) e possibilitar a moagem das cápsulas. As metades da cápsula secas foram trituradas/moídas a 20.000 rpm durante 30 segundos com o uso de moinho de tubo IKA® Works, Inc., controle 9737790. Na etapa seguinte, o pó foi peneirado vigorosamente utilizando-se um agitador de peneira MRC (fabricante da peneira) (modelo LS-200, em um nível de intensidade 2) por 1 minuto através de um conjunto de 2 peneiras: uma com um tamanho de poro de 420 μm e outra com um tamanho de poro de 75 μm. Os agregados remanescentes entre as duas peneiras foram coletados e armazenados à temperatura ambiente (20 a 27°C) em um frasco bem fechado e vedado com filme plástico de parafina até o uso. Ao final deste estágio, todos os componentes estavam presentes em cada composição de grânulo/agregado final e foram homogeneamente distribuídos dentro da mesma.

[00149] As composições no Exemplo 1 estavam sob a forma de pó e as composições nos Exemplos 2 e 3 estavam sob a forma agregada.

Preparação do sangue.

[00150] O sangue usado no experimento 1 foi coletado a partir de suínos exterminados pela Lahav Contract Research Organization (C.R.O.) e fornecido em recipiente gelado (4°C). Após a coleta do sangue, 5000 IU de heparina foram adicionados por litro de sangue [solução de heparina sódica fresenius de 5.000 IU/1 ml para injeção; Fabricante: BODENE (PTY) LTD., comercializando como Intramed; Cat. Número: 9207910LAB].

[00151] Para evitar a coagulação, após a chegada, heparina adicional foi adicionada (5000 UI por 1 litro de sangue). O sangue heparinizado foi misturado suavemente invertendo-se a garrafa várias vezes. Na etapa seguinte, para remover os coágulos residuais, o sangue heparinizado foi filtrado com um filtro de seringa de polipropileno de 20 μm (SVLl25D20HQSA25 da Entegris) e coletado em um recipiente de polipropileno (para evitar coagulação de sangue induzida por vidro). O sangue heparinizado filtrado foi armazenado a 4°C até o uso.

Teste de Bloom.

[00152] Bloom é um teste usado para medir a força coesiva de um gel ou gelatina. A força coesiva representa a ligação entre as moléculas de um material/composição testados. Em geral, o teste de Bloom refere-se à determinação da força (em gramas) que precisa ser aplicada a uma superfície livre de 6,67% de gel de gelatina (preparada pela dissolução de 7,5 g de gelatina em 105 g de água) por meio de um pistão cilíndrico (com um diâmetro de 12,7 mm) para produzir uma depressão de 4 mm. Para o teste, o gel é tipicamente formado em um copo com as seguintes dimensões: uma capacidade de 150 mm, um diâmetro interno de 59 mm e uma altura de 85 mm. A velocidade do pistão descendente é ajustada em 30 mm/minuto (consulte o teste de Bloom descrito na patente US 1540979).

[00153] Nos exemplos abaixo, um teste de Bloom modificado foi executado para testar a força coesiva de coágulos formados quando diferentes composições de pó testadas foram misturadas com sangue. Este parâmetro foi avaliado como uma indicação da eficácia hemostática potencial de cada composição testada. Em geral, uma força de resistência mais alta (um alto valor no teste de Bloom) se correlaciona com uma força coesiva mais alta e sugere que a composição tem uma alta eficácia hemostática; a força de resistência baixa se correlaciona com uma baixa força coesiva e sugere que a composição tem baixa eficácia hemostática. A força coesiva induzida por cada composição de pó testada foi avaliada em uma base comparativa para as fibras de ORC não suplementadas (finas). Os resultados são apresentados como aumento de vezes na força de resistência em relação às fibras de ORC não suplementadas (finas).

[00154] O teste de Bloom modificado foi executado da seguinte forma:

[00155] 300 mg de cada composição em pó testada foram pesadosem um tubo de 7 ml (diâmetro interno: 15 mm, altura: 50 mm).

[00156] 2,5 ml de sangue (preparados conforme descrito acima em"Preparação do sangue") foram adicionados a cada composição em pó.

[00157] o tubo foi submetido a um vórtice vigorosamente a 3.200 rpm até que nenhum pó seco fosse visualmente aparente. e a mistura de composição em pó-sangue foi incubada durante 3 minutos para permitir a formação do coágulo.

[00158] para medir a força coesiva, o frasco foi colocado em um instrumento "Lloyd LF plus" e uma haste metálica [1,27 cm (0,5 polegada)] foi inserida no frasco a uma velocidade decrescente pré- ajustada constante: 5 mm/minuto. A força de resistência do coágulo para o movimento da haste metálica no ponto de 7 mm de extensão no coágulo foi medida em unidades de megapascal (MPa). O teste foi executado à temperatura ambiente.

Modelo pré-clínico de sutura.

[00159] Um modelo de bypass cardiopulmonar ex vivo pulsante (CPB) foi usado para simular condições fisiológicas. O modelo é descrito em:

[00160] Sergeant, P., Kocharian, R., Patel, B., Pfefferkorn, M., & Matonick, J. (2016). A razão entre agulha e sutura, bem como o material de sutura, afeta o sangramento do orifício da agulha em anastomoses vasculares. Interactive CardioVascular and Thoracic Surgery, 22 (6), 813816. doi:10.1093/icvts/ivw042.

[00161] Brevemente, o modelo de bypass cardiopulmonar ex vivo pulsante usou uma série de bombas e câmaras para criar, controlar e manter a pressão arterial ao longo do sistema. O modelo consiste em um reservatório para filtrar o sangue que entra e retorna a partir de uma artéria carótida de porcino, um sistema de captura de dados integrado por computador, um oxigenador e um trocador de calor. Os ajustes da impedância do fluxo e do particionamento de volume estão presentes para permitir o ajuste preciso do fluxo de volume sanguíneo e do controle de pressão.

[00162] A perda de sangue a partir da sutura colocada na artéria carótida de porcino foi coletada e pesada para estabelecer uma taxa de vazamento. A taxa de vazamento foi calculada e registrada como o volume de sangue coletado ao longo de um período de tempo.

[00163] Para simular condições fisiológicas, os seguintes parâmetros foram usados:Pressão de 120/80 mmHgFrequência de pulso de 72/min.Temperatura do sangue de 33 a 35°C

[00164] 10.000 IU de heparina foram adicionados a 1 L de sangue deporcino doador e titulados com 10 mg/ml de sulfato de protamina para ajustar o tempo de coagulação ativado (ACT, de "activated clotting time") em aproximadamente 369 segundos. O ACT foi medido com uma unidade portátil i-STAT VetScan (Abbott Point of Care) e um cartucho de celite ACT I-STAT (Abbott Point of Care, peça n° 600-9006-10).

[00165] Uma artéria carótida de porcino foi isolada do tecido circundante e montada no sistema. Garras de tubulação foram usadas para prender o tecido aos encaixes. O fluxo sanguíneo em ambos os lados da carótida foi restrito e a carótida foi suturada em um padrão contínuo simples com uma sutura de 6-0 PROLENE (8806H) e uma agulha BV-1. A massa de perda de sangue durante 2 minutos foi medida como uma linha de base.

[00166] Os agregados foram aplicados sobre os sítios suturados e deixados curar durante 4 minutos após a aplicação completa. A restrição foi removida e a massa de perda de sangue ao longo de 2 minutos foi medida.

Modelo in vivo de punção de biópsia de fígado.

[00167] Uma porcina adulta, com cerca de 60 kg, foi colocada em jejum durante 24 horas antes do procedimento cirúrgico. O animal foi anestesiado com 1.150 mg a 1.400 mg de cetamina, 115 mg a 140 mg de xilazina, 7,5 mg de midazolam. A anestesia foi mantida com isoflurano, e o abdome foi aberto para revelar o fígado. A pressão arterial média, a temperatura corporal e a frequência cardíaca foram monitoradas continuamente durante todo o procedimento cirúrgico. O experimento foi interrompido quando a pressão arterial média caiu abaixo de 60 mmHg.

[00168] Uma punção de biópsia de 4 mm de diâmetro x 2 mm de profundidade foi executada no lóbulo do fígado, e o espécime foi removido com tesouras cirúrgicas. O sítio de punção foi deixado sangrar durante 30 segundos, e a intensidade de sangramento foi visualmente avaliada em uma escala de 0 a 5; sendo que nenhum sangramento recebeu um escore 0 e um sangramento intenso recebeu um escore de 5. Então, o sítio de punção foi limpo com gaze limpa para remover o excesso de sangue, e 100 mg da composição de agregado testada foram despejados na cavidade de perfuração (por exemplo, uma composição de agregado com 5,0% de CaCl2, 2,5% de SP e 2,5% de εACA é equivalente a: 40 mg/cm2 de CaCl2, 20 mg/cm2 de SP, 20 mg/cm2 de εACA).

[00169] Uma quantidade total de 100 mg da composição final é aplicada sobre uma punção circular com um diâmetro de 0,4 cm. Portanto, a composição de 100 mg foi aplicada sobre a área de superfície de punção que é π* (0,2 cm)2 cerca de 0,126 cm2. Significando que 793,65 mg/cm2 (resultantes do cálculo: 100 mg/0,126 cm2) da composição final foram usados.

[00170] O CaCl2 é usado a uma concentração de 5% da composição final; portanto, 793,65 * 0,05 é igual a cerca de 40 mg/cm2.

[00171] O SP é usado a uma concentração de 2,5% da composição final; portanto, 793,65 * 0,025 é igual a cerca de 20 mg/cm2.

[00172] O εACA é usado a uma concentração de 2,5% da composição final; portanto, 793,65 * 0,025 é igual a cerca de 20 mg/cm2.

[00173] Pressão moderada foi aplicada manualmente sobre a composição usando gaze limpa durante 1 minuto. O sangramento foi monitorado ao longo de um período de 4 minutos, após o qual a intensidade de sangramento foi classificada novamente em uma escala de 0 a 5. Os resultados são apresentados como porcentagem da taxa de hemostasia completa obtida a partir de todas as réplicas.

Exemplo 1: O efeito de suplementação de fibras de ORC finas com fibras de ORC longas sobre a força coesiva de um coágulo formado.

[00174] O propósito deste exemplo era examinar a força coesiva induzida pela suplementação de fibras de ORC finas com fibras de ORC longas. A suplementação foi executada pela adição de quantidades crescentes de fibras de ORC longas a fibras de ORC finas. O efeito foi avaliado com o uso de um teste de Bloom modificado executado conforme descrito acima. As fibras de ORC finas foram misturadas com fibras de ORC longas (p/p) nas seguintes razões: 100:0, 90:10, 80:20 e 70:30, respectivamente.

[00175] A Figura 1 é um gráfico de barras que mostra o aumento em vezes da força de resistência/força coesiva obtido para as diferentes composições testadas em comparação com fibras de ORC finas não suplementadas.

[00176] Os resultados do teste de Bloom modificado demonstram a força exigida pela haste metálica para passar através de um gel, formado com a composição testada ao entrar em contato com sangue, na extensão de 7 mm, enquanto se move a uma velocidade de 5 mm/min. Essa força reflete o nível de resistência do gel (quanto maior a força, maior a resistência do gel), e, por sua vez, indica o nível de força coesiva de um gel. A resistência coesiva representa a resistência pela qual as moléculas de uma composição são ligadas umas às outras. Quanto mais força for necessária para que a haste prossiga com seu movimento constante, maior a resistência do gel e maior a força coesiva.

[00177] Os resultados são apresentados como aumento em vezes da resistência do coágulo em relação àquela obtida a partir das fibras de ORC finas não suplementadas.

[00178] Em geral, pode-se notar que a suplementação das fibras de ORC finas com fibras de ORC longas aumentou a resistência de coágulos e a força coesiva.

[00179] Os resultados mostram que a mistura de fibras de ORC finas com fibras de ORC longas aumentou a força coesiva do coágulo em ao menos 1,5 vezes.

Exemplo 2: A eficácia hemostática da suplementação de fibras de ORC finas com fibras de ORC longas em um modelo ex vivo.

[00180] Os resultados obtidos no Exemplo 1 mostraram que a suplementação de fibras de ORC finas com fibras de ORC longas melhorou a força coesiva de um coágulo formado após a mistura das fibras com sangue.

[00181] A fim de examinar se a suplementação que melhorou a força coesiva pode também melhorar as capacidades hemostáticas, 3 composições contendo as seguintes quantidades de fibras de ORC longas: 0%, 10% ou 25%, em peso, da composição total, e todas incluindo 5% de CaCl2, 2,5% de SP, 2,5% de εACA, foram testadas em um modelo ex vivo de sutura.

[00182] Os resultados apresentados na Figura 2 demonstram um aumento de quase duas vezes na eficácia hemostática obtida quando as fibras de ORC finas são suplementadas com 10% de fibras de ORC longas. Quando 25% de ORC longas são usados, uma tendência positiva pode ser observada em relação às fibras de ORC finas não suplementadas.

[00183] Sem ser limitado pelo mecanismo, parece que as fibras longas fornecem uma base de apoio para o coágulo formado que melhora a integridade estrutural dos coágulos, reduzindo, assim, as chances de vazamento de sangue através do coágulo e melhorando a eficácia hemostática.

Exemplo 3: O efeito da suplementação de fibras finas com fibras longas e compostos sobre a eficácia hemostática, determinado por testes in vivo.

[00184] O exemplo a seguir examina o efeito hemostático in vivo dos compostos e da suplementação de fibras. Os resultados foram coletados a partir de diferentes experimentos pré-clínicos realizados em uma porcina com o uso de um modelo in vivo de punção de biópsia de fígado, conforme descrito acima. Os resultados de cada experimento são apresentados em uma tabela diferente: Tabelas 3, 4 e 5. Neste experimento, foram testadas várias composições de agregados. As composições de agregados testadas foram fibras de ORC com ou sem suplementação com compostos e fibras de ORC longas, sendo as concentrações dos compostos e fibras de ORC especificadas nas tabelas abaixo. Os agregados suplementados incluíram combinações de fibras de ORC de 10,0% (p/p do peso da mistura final) de fibras de ORC longas (consulte a distribuição de tamanho na Tabela 1A) e 77,5 a 85,0% de fibras de ORC finas.

[00185] A tabela lista as taxas de sucesso de hemóstase completa/parada total de sangramento. Em cada experimento, agregados de ORC finos (sem nenhuma suplementação) serviram como um controle de linha de base para examinar a eficácia hemostática da suplementação dos compostos e fibras de ORC longas.Tabelas 3, 4 e 5: Taxa de hemostasia completa obtida após a aplicação de composições de agregados em um modelo in vivo de punção de biópsia de fígado (número de réplicas em cada composição testada > 3).

[00186] Neste modelo in vivo e sob as condições testadas (Tabelas 3 a 5), resultados superiores pela suplementação de fibras de ORC finas com fibras longas e todos os três compostos (cloreto de cálcio, SP e εACA) foram observados. O efeito positivo foi observado em uma razão específica dos suplementos.

[00187] Os resultados no Exemplo 2 indicam que houve um aprimoramento na hemostasia pela suplementação com 10% de fibras longa e incluindo 5% de CaCl2, 2,5% de SP e 2,5% de ε ACA.

[00188] Neste experimento, também é mostrado que outras razões tiveram um efeito negativo e diminuíram a eficácia de hemostasia.

[00189] Diante da apresentação e da descrição de várias versões na presente divulgação, podem ser realizadas adaptações adicionais dos métodos e sistemas descritos no presente documento por meio de modificações adequadas feitas por um versado na técnica, sem que se afaste do escopo da presente invenção. Várias dessas possíveis modificações foram mencionadas, e outras ficarão evidentes aos versados na técnica. Por exemplo, os exemplos, as versões, a geometria, os materiais, as dimensões, as proporções, as etapas, e similares, discutidos acima são apenas ilustrativos e não são obrigatórios. Consequentemente, o escopo da presente invenção deve ser considerado de acordo com os termos das reivindicações a seguir e entende-se que o mesmo não está limitado aos detalhes da estrutura e operação mostrados e descritos no relatório descritivo e nos desenhos.

Claims (28)

1. Composição de fibras e/ou agregados hemostáticas, caracterizada pelo fato de que compreende fibras longas e finas à base de celulose, em que as fibras à base de celulose compreendem fibras de celulose regenerada oxidada (ORC) e/ou celulose oxidada; as fibras longas e finas estão a uma razão na faixa de 5% a 25%, em peso, e na faixa de 95% a 75%, em peso de toda a composição, respectivamente; a distribuição de tamanho das fibras longas é: D90 de mais de 177 μm e de D50 de mais de 95 μm, e sendo que a distribuição de tamanho das fibras finas é: D90 de menos de 177 μm, e D50 de menos de 95 μm.

2. Composição hemostática, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que D90 das fibras longas é menor que 350 μm e a D50 é menor que 167 μm.

3. Composição hemostática, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que compreende adicionalmente pelo menos um composto selecionado do grupo que consiste em:a) um cátion divalente selecionado dentre zinco, cálcio, magnésio, manganês e cobre;b) um peptídeo e/ou um polissacarídeo positivamente carregado;c) um ácido ômega amino carboxílico; ed) uma combinação de quaisquer dos itens acima.

4. Composição hemostática, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que compreende adicionalmente sal de protamina, sal de cálcio e ácido e-aminocapróico (εACA).

5. Composição hemostática, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que as fibras à base de celulose são fibras de ORC.

6. Composição hemostática, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que está sob a forma de agregados com um tamanho na faixa de 75 a 420 μm.

7. Método para fazer uma composição hemostática, caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de:a) reduzir o tamanho de um material à base de celulose, em que as fibras à base de celulose compreendem fibras de celulose regenerada oxidada (ORC) e/ou celulose oxidada para formar fibras longas e fibras finas, sendo que a distribuição de tamanho das fibras longas é: D90 de mais de 177 μm e de D50 de mais de 95 μm, e sendo que a distribuição de tamanho das fibras finas é: D90 de menos de 177 μm e D50 de menos de 95 μm; e misturar as fibras longas e as finas em uma razão na faixa de 5% a 25%, em peso, e 95% a 75%, em peso, respectivamente, obtendo assim uma composição de fibras hemos- táticas;b) opcionalmente a composição de fibras hemostáticas obtida na etapa a) é submetida a etapas adicionais para obter uma composição hemostática sob a forma de agregados, sendo que as etapas compreendem: i) compactar a composição de fibras hemostáticas para obter uma composição de fibras hemostáticas compactadas; e opcionalmente ii) reduzir o tamanho da composição compactada.

8. Método, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que a D90 das fibras longas é menor que 350 μm e a D50 é menor que 167 μm.

9. Método, de acordo com a reivindicação 7 ou 8, caracterizado pelo fato de que a redução do tamanho é feita por moagem.

10. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 9, caracterizado pelo fato de que a redução do tamanho na etapa a) é precedida por uma etapa de fender e/ou cortar o material à base de celulose.

11. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 10, caracterizado pelo fato de que a redução do tamanho na etapa a) é um processo de duas partes, no qual a segunda parte é executada em um moinho classificador a ar.

12. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que a moagem no moinho classificador a ar é feita uma vez para obter as fibras longas e três vezes para obter as fibras finas.

13. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 12, caracterizado pelo fato de que a compactação na etapa b) i) é precedida por uma etapa de umidificar a composição de fibras hemostáticas, opcionalmente até um teor de água entre 11% e 18%, em peso.

14. Método, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que a etapa de umidificação é executada pela inclusão, na composição de fibras hemostáticas, de um material higroscópico, opcionalmente cloreto de cálcio.

15. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 14, caracterizado pelo fato de que a redução do tamanho na etapa b) ii) é precedida por uma etapa de desumidificar a composição compactada.

16. Método, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que a desumidificação é feita até um teor de água menor que 5%, em peso.

17. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 16, caracterizado pelo fato de que a compactação na etapa b) i) é executada com o uso de uma prensa de moldagem, opcionalmente sob uma força na faixa de 25 a 70 kN/cm.

18. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 17, caracterizado pelo fato de que a obtenção de agregados hemostáticos na etapa b) tem por objetivo produzir agregados com uma dimensão na faixa de 75 a 420 μm.

19. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações7 a 18, caracterizado pelo fato de que o material à base de celulose é selecionado do grupo que consiste em tecido de celulose regenerada oxidada, tecido não-tecido de celulose regenerada oxidada, tecido tecido de celulose regenerada oxidada, tecido de malha de celulose regenerada oxidada, material esfarelado de celulose regenerada oxidada e combinações dos mesmos.

20. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 19, caracterizado pelo fato de que compreende, ainda, a adição, às fibras longas e finas, de ao menos um composto selecionado do grupo que consiste em:a) um cátion divalente selecionado dentre zinco, cálcio, magnésio, manganês e cobre;b) um peptídeo e/ou um polissacarídeo positivamente carregado;c) um ácido ômega amino carboxílico; ed) uma combinação de quaisquer dos itens acima.

21. Método, de acordo com as reivindicações de 7 a 19, caracterizado pelo fato de que compreende, ainda, a adição, às fibras longas e finas, de sal de protamina, sal de cálcio e ácido ε- aminocaproico.

22. Composição hemostática, caracterizada pelo fato de que está sob a forma de fibras e/ou agregados obtidos de acordo com o método como definido em qualquer uma das reivindicações 7 a 21.

23. Método para formação de um gel, caracterizado pelo fato de que compreende a etapa de colocar uma composição hemostática na forma de fibras e/ou agregados como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6 e 22, em contato com sangue, formando assim um gel.

24. Gel, caracterizado pelo fato de que é obtido pelo método como definido na reivindicação 23.

25. Composição hemostática de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6 e 22, caracterizada pelo fato de que é para uso no tratamento de um ferimento com sangramento ou de uma infecção bacteriana no local de um ferimento, para vedar um vazamento em um sítio, para evitar a adesão em um sítio, e/ou para minimizar ou evitar um vazamento de um sítio anastomótico em um indivíduo que precisa de tal tratamento, sob a forma de fibras e/ou agregados, sobre e/ou dentro do ferimento e/ou sítio do corpo do indivíduo.

26. Composição hemostática, de acordo com a reivindicação 25, caracterizada pelo fato de que a aplicação é feita sem aplicar pressão sobre a composição em direção ao ferimento e/ou o sítio.

27. Composição hemostática de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6 e 22, caracterizada pelo fato de que é para uso como um agente anti-bactericida para interromper o sangramento, para vedar, evitar a adesão e/ou minimizar ou evitar um vazamento de um sítio anastomótico.

28. Composição hemostática, de acordo com a reivindicação 27, caracterizado pelo fato de que é para minimizar ou evitar um vazamento em uma cirurgia de bypass coronariano (CABG).