BR112021015149A2

BR112021015149A2 - Análogo de indolo heptamil oxima como inibidor de parp

Info

Publication number: BR112021015149A2
Application number: BR112021015149-4A
Authority: BR
Inventors: Yanbin Hu; Gang Li; Fei Sun; Zhigang CHI; Jin Luo; Charles Z. Ding; Shuhui Chen
Original assignee: Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co., Ltd
Priority date: 2019-02-02
Filing date: 2020-02-03
Publication date: 2021-09-28
Also published as: US20220144850A1; CN113365998B; AU2020214351A1; EP3919495A4; CN113365998A; WO2020156577A1; SG11202108399PA; IL285223A; KR20210125024A; EP3919495A1; CA3128435A1; JP2022519268A; CN116804019A

Abstract

análogo de indolo heptamil oxima como inibidor de parp referência cruzada a pedidos relacionados. é revelado um tipo de compostos de indolo heptamil oxima como um inibidor de parp. são especificamente revelados um composto como representado pela fórmula (ii) e um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Description

“ANÁLOGO DE INDOLO HEPTAMIL OXIMA COMO INIBIDOR DE PARP”

REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS O presente pedido reivindica a prioridade e o benefício do Pedido de Patente Chinês nº 201910107947.5 depositado na Administração Nacional de Propriedade Intelectual da China em 2 de fevereiro de 2019, o Pedido de Patente Chinês nº 201910111576.8 depositado na Administração Nacional de Propriedade Intelectual da China em 12 de fevereiro , 2019 e o Pedido de Patente Chinesa nº

201910684020.8 depositado na Administração Nacional de Propriedade Intelectual da China em 26 de julho de 2019, cuja revelação é incorporada no presente documento a título de referência em sua totalidade.

CAMPO DA TÉCNICA O presente pedido se refere a um novo tipo de compostos de indolo heptamil oxima como um inibidor de PARP e, em particular, a um composto representado pela fórmula (I), um isômero do mesmo e um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

ANTECEDENTES Ploy(ADP-ribose)polimerase (PARP) é uma família de enzimas e pode ser usada para catalisar a adição de resíduos de ADP-ribose a uma variedade de proteínas alvo. Até o momento, um total de 18 subtipos foram identificados e caracterizados. Apesar da grande variedade de enzimas na família PARP, PARP-1 é responsável por mais de 90% da ribosilação de ADP nas células e, portanto, os inibidores de PARP-1 são o foco da pesquisa de inibidores de PARP. No ambiente de vida humano, o DNA humano está sempre danificado devido à influência do ambiente natural (como estresse oxidativo, radioterapia e quimioterapia). PARP-1 está intimamente relacionado ao reparo do DNA e manutenção da função do genoma. Após o dano ao DNA, normalmente quebra de fita simples (SSB), PARP-1 primeiro se liga à quebra de DNA e é então ativada, e conforme a estrutura da enzima PARP1 muda, a enzima começa a recrutar NAD + (coenzima II) para a síntese de poli (ADP) ribose, que ao mesmo tempo serve como um sinal para o funcionamento de outras enzimas de reparo, como DNA ligase e DNA polimerase β.

Este processo de ligação e ativação de PARP-1 é denominado reparo por excisão de base (BER) e contribui para o processo de reparo da amplificação do DNA.

Quando PARP-1 é inibido por um inibidor de PARP, um DNA quebrado não pode ser reparado através de SSB; em vez disso, a quebra de filamento duplo (DSB) é ativada.

O corpo repara DSB principalmente através de duas formas: recombinação homóloga (HR) e junção final não homóloga (NHEJ) de DNA, em que a recombinação homóloga é a principal forma de reparo DSB e apresenta alta confiabilidade de reparo.

BRCA1 e BRCA2 desempenham papéis importantes na recombinação homóloga (Nature, 2005, 913-917). Pesquisas mostram que a mutação BRCA1/2 é encontrada no câncer de ovário, câncer de mama e câncer de próstata, e o inibidor de PARP é uma boa escolha para tumores deficientes em BRCA1/2. O inibidor de PARP pode ser usado sozinho ou em combinação com drogas quimioterápicas e drogas radioterapêuticas, reduzindo assim a dosagem e melhorando a eficácia.

Com base nisso, uma série de diferentes tipos de compostos (J.

Med.

Chem. 2010, 4561) foram desenvolvidos e, entre esses compostos, olaparibe, rucaparibe, niraparibe (MK-4827) e talazoparibe (BMN-673) foram comercializados com sucesso.

No entanto, como as indicações de inibidores de PARP continuam a se expandir, a aplicação de inibidores de PARP também está se aprofundando do tratamento do tumor para o de acidente vascular cerebral, isquemia miocárdica, inflamação e diabetes.

Um grande número de ensaios clínicos está em andamento.

Embora os esforços para desenvolver inibidores de PARP para o tratamento de câncer e outras doenças estejam em andamento, um tratamento satisfatório não foi alcançado e, portanto, ainda há uma necessidade premente de desenvolver novos inibidores de PARP.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO O presente pedido fornece um composto da fórmula (II), um isômero do mesmo ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que, é selecionado a partir do grupo que consiste em uma ligação única e uma ligação dupla; X é selecionado a partir do grupo que consiste em CR3 e N; Y é selecionado a partir do grupo que consiste em CR1 e C; L1 é selecionado a partir do grupo que consiste em uma ligação única e - (CR8R9)n-;

L2 é selecionado a partir do grupo que consiste em uma ligação única, -CR8R9- e =CH-; L1 e L2 são não ligações únicas ao mesmo tempo; quandoL2 for selecionado a partir de uma ligação única, é selecionado a partir de uma ligação única; L3 e L4 são, cada um, independentemente selecionados a partir de -CR8R9-; n é 1 ou 2; R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, D, F, Cl, Br, I e C1-3 alquila, em que a C1-3 alquila é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Ra, e quando L2 é selecionado a partir de =CH-, R1 está ausente; R2 e R10 são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em H, F, Cl, Br, I e C1-3 alquila, em que a C1-3 alquila é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Rb; R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, F, Cl, Br, I, CN e C1-3 alquila, em que a C1-3 alquila é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Rc; R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e F; R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila, em que a C1-3 alquila é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Rd; R6 e R7 são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em H e D; R8 e R9 são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em H, F, Cl, Br, I e C1-3 alquila, em que a C1-3 alquila é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Re, ou R8 e R9, juntamente com um mesmo átomo de carbono conectado ao mesmo, formam o anel A opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 Rg; O anel A é selecionado a partir do grupo que consiste em C3-8 cicloalquila e heterocicloalquila de 3-8 membros;

Ra, Rb, Rc, Rd, Re e Rg são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em F, Cl, Br, I, OH, CN, NH2, COOH, C(=O)NH2, CH3, CH3CH2, CF3, CHF2, CH2F, NHCH3 e N(CH3)2; a heterocicloalquila de 3-8 membros compreende 1, 2, 3 ou 4 átomos ou grupos de átomos, cada um independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em O, N, S e NH.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, que é selecionado a partir da fórmula (II-1)

, em que R1, R2, X, R4, R5, R6, R7, R10, L1, L2, L3 e L4 são conforme no composto da fórmula (II) revelada no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, que é selecionado a partir da fórmula (II-1')

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima,

que é selecionado a partir da fórmula (II-1'')

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, que é selecionado a partir da fórmula (II-1-a)

, em que R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, L1 e L2 são conforme definido no composto da fórmula (II) revelada no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, que é selecionado a partir da fórmula (II-1-a-1)

, em que R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, L1, L2 e anel A são conforme definido no composto da fórmula (II) revelada no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, que é selecionado a partir da fórmula (II-1-a-2)

, em que R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 e R10 são conforme definido no composto da fórmula (II) revelada no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, que é selecionado a partir da fórmula (II-1-a-2')

, em que

R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9 e R10 são conforme definido no composto da fórmula (II) revelada no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, que é selecionado a partir da fórmula (II-1-a-2'')

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, que é selecionado a partir da fórmula (II-2)

, em que R2, X, R4, R5, R6, R7, R10, L1, L3 e L4 são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que Y é selecionado a partir de CR1 e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, D, F e CH3, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que R2 e R10 são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em H e F, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que X é selecionado a partir de CR3, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, F, CN, Cl e CF3, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e F, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, metila, etila, propila e isopropila, em que a metila, etila, propila e isopropila são opcionalmente substituídos por 1, 2 ou 3 Rd, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

em que R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, metila, e isopropila, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que L1 é selecionado a partir do grupo que consiste em uma ligação única e - CR8R9-, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que L1 é selecionado a partir de -CR8R9-, L2 é selecionado a partir de -CR8R9-, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto,

o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que L1 é selecionado a partir de uma ligação única, L2 é selecionado a partir de - CR8R9-, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que L1 é selecionado a partir de -CR8R9-, L2 é selecionado a partir de uma ligação única, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que L1 é selecionado a partir de uma ligação única, L2 é selecionado a partir de =CH, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que L1 é selecionado a partir de -(CR8R9)2-, L2 é selecionado a partir de uma ligação única, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que R8 e R9 são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em H e F, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que R8 e R9 são ambos selecionados a partir de H, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que um dentre R8 e R9 é selecionado a partir de H e o outro é selecionado a partir de F, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que o anel A é selecionado a partir de heterocicloalquila de 5-6 membros, em que a heterocicloalquila de 5-6 membros é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Rg, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

em que o anel A é selecionado a partir de , e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que R6 e R7 são ambos H, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que R6 e R7 são ambos D, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que Ra, Rb, Rc, Rd, Re e Rg são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em F e OH.

em que a unidade estrutural é selecionada a partir do grupo que consiste em , , , , , , e ,e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

em que a unidade estrutural é selecionada a partir do grupo que consiste em , , , , , e , e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

em que a unidade estrutural é selecionada a partir de , e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

em que a unidade estrutural é selecionada a partir do grupo que consiste em , , , , e , e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

em que a unidade estrutural é selecionada a partir do grupo que consiste em , e , e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

O presente pedido fornece um composto da fórmula (II), um isômero do mesmo ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,

em que, L1 e L2 são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em uma ligação única e -CH2-, e L1 e L2 não são ligações únicas ao mesmo tempo; R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, D e C1-3 alquila, em que a C1-3 alquila é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Rd; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, halogênio, e C1-3 alquila, em que a C1-3 alquila é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Rb; R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, halogênio , e C1-3 alquila, em que a C1-3 alquila é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Rc; R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e F; Ra, Rb e Rc são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em F, Cl, Br, I, OH, CN, NH2, COOH, C(=O)NH2, CH3, CH3CH2, CF3, CHF2, CH2F, NHCH3 e N(CH3)2. Em algumas modalidades do composto da fórmula (I) revelada no presente documento, R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, D e CH3. Em algumas modalidades do composto da fórmula (I) revelada no presente documento, R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e F.

Em algumas modalidades do composto da fórmula (I) revelada no presente documento, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e F.

Em algumas modalidades do composto da fórmula (I) revelada no presente documento, a unidade estrutural é selecionada a partir do grupo que consiste em , HN , , , e . Em algumas modalidades do composto da fórmula (I) revelada no presente documento, a unidade estrutural é selecionada a partir do grupo que consiste em , e . Em algumas modalidades do composto da fórmula (I) revelada no presente documento, R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, D e CH3, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do composto da fórmula (I) revelada no presente documento, R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e F, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do composto da fórmula (I) revelada no presente documento, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e F, e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do composto da fórmula (I) revelada no presente documento, a unidade estrutural é selecionada a partir do grupo que consiste em , HN , , , e , e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do composto da fórmula (I) revelada no presente documento, a unidade estrutural é selecionada a partir do grupo que consiste em , e , e outras variáveis são conforme definido no presente documento.

Em algumas modalidades do composto da fórmula (I) revelada no presente documento, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito acima, em que o composto é selecionado a partir do grupo que consiste em e , em que R1, R2, R3 e R4 são conforme definido no presente documento.

O presente pedido também fornece um composto de uma fórmula abaixo, um isômero do mesmo ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado a partir do grupo que consiste em

H N O O F

F N N H H . Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado a partir do grupo que consiste em

H H H N O N O N O O O O

F F D Me Me

N N N N N N H H H H H H

. O presente pedido fornece adicionalmente uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto, o isómero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo revelado no presente documento e um transportador farmaceuticamente aceitável.

O presente pedido fornece adicionalmente o uso do composto, do isómero do mesmo ou do sal farmaceuticamente aceitável do mesmo revelado no presente documento na preparação de um medicamento para uso no tratamento de uma doença relacionada ao receptor de PARP. O presente pedido fornece adicionalmente um método para o tratamento de uma doença relacionada ao receptor de PARP, compreendendo a administração a um mamífero, de preferência um humano, em necessidade de tal tratamento de uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto, do isômero do mesmo ou do sal farmaceuticamente aceitável do mesmo revelado no presente documento. O presente pedido fornece adicionalmente o uso do composto, do isómero do mesmo ou do sal farmaceuticamente aceitável do mesmo revelado no presente documento no tratamento de uma doença relacionada ao receptor de PARP. O presente pedido fornece adicionalmente o composto de fórmula (II), o isómero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo revelado no presente documento para uso no tratamento de uma doença relacionada ao receptor de PARP. Em algumas modalidades do presente pedido, a doença relacionada ao receptor de PARP é selecionada a partir do grupo que consiste em um tumor e um câncer. Em algumas modalidades do presente pedido, a doença relacionada ao receptor de PARP é selecionada de câncer de mama. Algumas outras modalidades do presente pedido são derivadas de qualquer combinação das variáveis conforme descrito acima.

EFEITOS TÉCNICOS O composto revelado no presente documento tem forte atividade inibitória contra a quinase PARP1 e excelente atividade antiproliferativa contra células MDA-MB-436 mutadas com BRCA1 e, entretanto, não tem atividade inibidora contra células MDA-MB-231 de tipo selvagem BRCA, mostrando que o composto revelado no presente documento é excelente em seletividade e segurança. O composto revelado no presente documento também tem certo efeito inibidor contra poli ADP- ribosilação. Além disso, o composto revelado no presente documento tem excelentes propriedades farmacocinéticas, uma vez que é estável no metabolismo in vivo e alta biodisponibilidade. Em geral, o composto revelado no presente documento não é apenas excelente em atividade e fácil de sintetizar, mas também excelente em propriedades farmacocinéticas.

DEFINIÇÕES E DESCRIÇÃO Salvo declarado de outro modo, os seguintes termos e frases conforme usados no presente documento destinam-se a ter os seguintes significados. Um termo ou frase particular, a menos que definido de outra forma especificamente, não deve ser considerado incerto ou obscuro, mas interpretado de acordo com seu significado comum. Ao referir-se a um nome comercial, pretende-se referir-se ao seu produto comercial correspondente ou ao seu ingrediente ativo. O termo “farmaceuticamente aceitável" é usado no presente documento para aqueles compostos, materiais, composições, e/ou formas de dosagem que estão abrangidos no escopo de opinião clínica sadia, adequado para uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade excessiva, irritação, resposta alérgica, ou outros problemas ou complicações e proporcional a uma razão de benefício/risco razoável. O termo "sal farmaceuticamente aceitável" se refere a um sal do composto revelado no presente documento, que é preparado a partir do composto com substituintes particulares revelados no presente documento e um ácido ou base relativamente não tóxico. Quando o composto revelado no presente documento contém um grupo funcional relativamente ácido, um sal de adição de base pode ser obtido por contato de tal composto com uma quantidade suficiente de uma base em uma solução pura ou um solvente inerte adequado.

Os sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis incluem sódio, potássio, cálcio, amônio, amina orgânica, ou sais de magnésio ou sais semelhantes.

Quando o composto revelado no presente documento contém um grupo funcional relativamente básico, um sal de adição de ácido pode ser obtido por contato de tal composto com uma quantidade suficiente de um ácido em uma solução pura ou um solvente inerte adequado.

Exemplos de sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis incluem sais derivados de ácidos inorgânicos, tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido nítrico, ácido carbônico, radical bicarbonato, ácido fosfórico, mono-hidrogenofosfato, di-hidrogenofosfato, ácido sulfúrico, hidrogenossulfato, ácido iodídrico e fósforo ácido; e sais derivados de ácidos orgânicos, tais como ácido acético, ácido propiônico, ácido isobutírico, ácido maleico, ácido malônico, ácido benzoico, ácido succínico, ácido subérico, ácido fumárico, ácido láctico, ácido mandélico, ácido ftálico, ácido benzenossulfônico, p- ácido toluenossulfônico, ácido cítrico, ácido tartárico e ácido metanossulfônico.

Também estão incluídos os sais de aminoácidos (por exemplo, arginina) e os sais de ácidos orgânicos, como o ácido glucurônico.

Certos compostos específicos revelados no presente documento contêm grupos funcionais básicos e ácidos que permitem que os compostos sejam convertidos em sais de adição de base ou de ácido.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis divulgados neste documento podem ser sintetizados a partir de um composto parental possuindo um grupo ácido ou básico por métodos químicos convencionais.

Em geral, tais sais são preparados pelo seguinte método: a forma de ácido ou base livre do composto reagindo com uma quantidade estequiométrica da base ou ácido apropriado em água ou um solvente orgânico ou uma mistura dos mesmos.

Os compostos revelados no presente documento podem estar na forma de um isômero geométrico ou estereoisômero.

Todos esses compostos são aqui contemplados, incluindo isômeros cis e trans, enantiômeros (-)- e (+)-, (R) - e (S) - enantiômeros, diastereoisômeros, (D)-isômeros, (L) -isômeros, e misturas racêmicas e outras misturas das mesmas, tais como uma mistura enriquecida em enantiômero ou diastereoisômero, todas as quais estão incluídas no escopo do presente pedido.

Substituintes como alquila podem ter um átomo de carbono assimétrico adicional.

Todos estes isómeros e suas misturas estão incluídos no âmbito do presente pedido.

Salvo declarado de outro modo, a configuração absoluta de um centro estereogênico é representada por uma ligação sólida em cunha ( ) e a ligação tracejada em cunha ( ), e a configuração relativa de um centro estereogênico é representada por uma ligação sólida reta ( ) e uma ligação tracejada reta ( ). Uma linha ondulada ( ) representa uma ligação sólida em cunha ( ) ou uma ligação tracejada em cunha ( ), ou uma linha ondulada ( ) representa uma ligação sólida reta ( ) e uma ligação tracejada reta ( ). Os (R)- e (S)-isômeros opticamente ativos e os D e L isômeros podem ser preparados pela síntese quiral ou reagentes quirais ou outras técnicas convencionais.

Um enantiômero de certo composto revelado no presente documento pode ser preparado por síntese assimétrica ou derivatização usando um auxiliar quiral, em que a mistura diastereoisomérica resultante é separada e o grupo auxiliar é clivado de modo a fornecer o enantiômero puro desejado.

Alternativamente, quando a molécula contém um grupo funcional básico (como amino) ou um grupo funcional ácido (como carboxila), o composto reage com um ácido ou base opticamente ativo apropriado para formar um sal do diastereoisômero, que é então submetido a resolução diastereoisomérica através de métodos convencionais na técnica para obter o enantiômero puro.

Além disso, o enantiômero e o diastereoisômero são geralmente isolados por meio de cromatografia usando uma fase estacionária quiral, opcionalmente em combinação com derivatização química (por exemplo, carbamato gerado a partir de aminas).

O composto revelado no presente documento pode conter uma proporção não natural de isótopo atômico em um ou mais dos átomos que constituem o composto.

Por exemplo, o composto pode ser marcado com um radioisótopo, como trítio (D, 3H), iodo-125 (125I) ou C-14 (14C). Em outro exemplo, o hidrogênio pode ser substituído por deutério para formar um fármaco deuterado, e a ligação formada por deutério e carbono é mais firme do que aquela formada por hidrogênio comum e carbono.

Comparado com um fármaco não deuterado, o fármaco deuterado tem as vantagens de efeito colateral tóxico reduzido, estabilidade aumentada, eficácia aprimorada, meia-vida biológica prolongada e semelhantes.

Todas as variações isotópicas do composto aqui descrito, sejam radioativas ou não, estão incluídas no escopo do presente pedido. "Opcional" ou "opcionalmente" significa que o evento ou circunstância subsequentemente descrito pode, mas não necessariamente, ocorrer, e a descrição inclui casos em que o evento ou circunstância ocorre e casos em que não ocorre.

O termo "substituído" significa que um ou mais átomos de hidrogênio em um átomo específico são substituídos por substituintes que podem incluir deutério e variantes de hidrogênio, desde que a valência do átomo específico seja normal e o composto substituído seja estável.

Quando o substituinte for um oxigênio (isto é, =O), significa que dois átomos de hidrogênio são substituídos.

A substituição por oxigênio não ocorre em grupos aromáticos.

O termo "opcionalmente substituído" significa que um átomo pode ser substituído por um substituinte ou não.

A menos que especificado de outra forma, o tipo e o número do substituinte podem ser arbitrários, desde que sejam quimicamente alcançáveis.

Quando qualquer variável (por exemplo, R) ocorre mais de uma vez na constituição ou estrutura de um composto, a variável é definida independentemente em cada caso.

Assim, por exemplo, se um grupo é substituído por 0-2 R, o grupo pode ser opcionalmente substituído por dois R no máximo, e a definição de R em cada caso é independente.

Além disso, uma combinação de um substituinte e/ou uma variante do mesmo é permitida apenas se a combinação puder resultar em um composto estável.

Quando o número de um grupo de ligação for 0, por exemplo, -(CRR)0-, significa que o grupo de ligação é uma ligação única.

Quando uma das variantes é selecionada a partir de ligação simples, então dois grupos ligados por esta variante são ligados diretamente.

Por exemplo, em ALZ, quando L representa uma ligação simples, significa que a estrutura é, na verdade, AZ.

Quando um substituinte estiver ausente, significa que o substituinte não existe.

Por exemplo, quando X em AX está ausente, a estrutura é realmente A.

A menos que especificado de outra forma, quando um grupo tem um ou mais locais conectáveis, qualquer um ou mais dos locais do grupo podem ser conectados a outros grupos por ligações químicas.

A ligação química que conecta o local a outro grupo pode ser representada por uma ligação sólida direta ( ), uma ligação de linha reta tracejada ( ), ou uma linha ondulada ( ) Por exemplo, a linha reta sólida em -OCH 3 indica que o grupo está conectado a outro grupo através do átomo de oxigênio; em , a linha reta tracejada indica que o grupo está conectado a outro grupo pelas duas extremidades do átomo de nitrogênio; em

, a linha ondulada indica que o grupo fenil está conectado a outros grupos através dos átomos de carbono nas posições 1 e 2. A menos que especificado de outra forma, o número de átomos em um anel é geralmente definido como o número do membro do anel.

Por exemplo, "anel de 5-7 membros" se refere a um "anel" no qual 5 a 7 átomos estão dispostos em um círculo.

A menos que especificado de outra forma, " C3-8 cicloalquila " se refere a um grupo hidrocarboneto cíclico saturado consistindo de 3 a 8 átomos de carbono.

Isso inclui sistemas monocíclicos e bicíclicos, em que o sistema bicíclico inclui anéis espirocíclicos, fundidos e em ponte.

A C3-8 cicloalquila inclui C3-6, C3-5, C4-8, C4-6, C4-5, C5-8, C5-6 cicloalquila, ou similares, e pode ser monovalente, divalente, ou polivalente.

Exemplos de C3-8 cicloalquila incluem, mas não estão limitados a, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclohexila, cicloheptila, norbornila, [2.2.2]biciclooctano e semelhantes.

A menos que especificado de outra forma, o termo "heterocicloalquila de 3-8 membros", por si só ou em combinação com outros termos, se refere a um grupo cíclico saturado que consiste em 3 a 8 átomos no anel, dos quais 1, 2, 3 ou 4 átomos no anel são heteroátomos selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em O, S e N, com os restantes sendo átomos de carbono.

O átomo de nitrogênio é opcionalmente quaternizado e os heteroátomos de carbono, nitrogênio e enxofre podem ser opcionalmente oxidados (isto é, C = O, NO e S (O) p , em que p é 1 ou 2). Isso inclui sistemas monocíclicos e bicíclicos, em que o sistema bicíclico inclui anéis espirocíclicos, fundidos e em ponte.

Além disso, no que diz respeito ao "heterocicloalquila de 3-8 membros", um heteroátomo pode ocupar a posição onde o heterocicloalquila está conectado ao resto da molécula.

O heterocicloalquila de 3-8 membros inclui heterocicloalquila de 3-6 membros, 3-5 membros, 4-6 membros, 5-6 membros, 4 membros, 5 membros e 6 membros e semelhantes.

Exemplos de heterocicloalquila de 3-8 membros incluem, mas não estão limitados a, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, pirazolidinila, imidazolidinila, tetrahidrotienil (incluindo tetrahidrotien-2-ila, tetrahidrotien-3-ilo, etc.), tetrahidrofuranil (incluindo tetrahidrofuranila, etc.) -2-ila, etc.), tetra-hidropiranila, piperidinila (incluindo 1- piperidinila, 2-piperidinila, 3-piperidinila, etc.), piperazinila (incluindo 1-piperazinila, 2- piperazinila, etc.), morfolinila (incluindo 3-morfolinila, 4-morfolinila, etc.), dioxanila, ditianila, isoxazolidinila, isotiazolidinila, 1,2-oxazinila, 1,2-tiazinila, hexa- hidropiridazinila, homopiperazinila, homopiperidinila, dioxepanila ou semelhantes.

A menos que especificado de outra forma, o termo "heterocicloalquila de 5-6 membros", por si só ou em combinação com outros termos, se refere a um grupo cíclico saturado que consiste em 5 a 6 átomos no anel, dos quais 1, 2, 3 ou 4 átomos no anel são heteroátomos independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em O, S e N, com os restantes sendo átomos de carbono.

Além disso, no que diz respeito ao "heterocicloalquila de 5-6 membros", um heteroátomo pode ocupar a posição onde o heterocicloalquila está conectado ao resto da molécula.

O heterocicloalquila de 5-6 membros inclui heterocicloalquila de 5 membros e heterocicloalquila de 6 membros.

Exemplos de heterocicloalquila de 5-6 membros incluem, mas não estão limitados a, pirrolidinila, pirazolidinila, imidazolidinila, tetra-hidrotienila (incluindo tetra-hidrotien-2- ila, tetra-hidrotien-3-ila, etc.), tetra-hidrofuranil (incluindo tetra-hidrofuran-2-ila, etc. .), tetra-hidropiranila, piperidinil (incluindo 1-piperidinila, 2-piperidinila, 3-piperidinila, etc.), piperazinil (incluindo 1-piperazinila, 2-piperazinila, etc.), morfolinil (incluindo 3- morfolinila, 4-morfolinila, etc.), dioxanila, ditianila, isoxazolidinila, isotiazolidinila, 1,2- oxazinila, 1,2-tiazinila, hexa-hidropiridazinila, homopiperazinila, homopiperidinil ou semelhantes.

A menos que especificado de outra forma, o termo " alquil C1-3 " se refere a um grupo hidrocarboneto saturado linear ou ramificado que consiste em 1 a 3 átomos de carbono.

A C1-3 alquila inclui, sem limitação, C1-2 e C2-3 alquila, etc., e pode ser monovalente (por exemplo, metila), divalente (por exemplo, metileno) ou polivalente (por exemplo, metenila). Exemplos de C1-3 alquila incluem, mas não estão limitados a, metil (Me), etil (Et), propila (incluindo n- propila e isopropila) e semelhantes.

Os compostos revelados no presente documento podem ser preparados por uma variedade de métodos sintéticos bem conhecidos por aqueles versados na técnica, incluindo as modalidades específicas listadas abaixo, as modalidades formadas por combinações dos mesmos com outros métodos sintéticos químicos, e equivalentes dos mesmos conhecidos por aqueles versados na técnica. As modalidades preferenciais incluem, sem limitação, os exemplos revelados no presente documento. Os solventes usados no presente documento podem estar comercialmente disponíveis. As seguintes abreviaturas são usadas no presente pedido: Boc representa terc-butiloxicarbonila, um grupo de proteção amina; pht representa ftaloila, um grupo de proteção para uma amina primária; Ms representa metilsulfonila.

DESCRIÇÃO DETALHADA O presente pedido é descrito em detalhes abaixo a título de exemplos. Entretanto, esse não está de forma alguma limitando o escopo do presente escopo. Os compostos revelados no presente documento podem ser preparados por uma variedade de métodos sintéticos bem conhecidos por aqueles versados na técnica, incluindo as modalidades específicas listadas abaixo, as modalidades formadas por combinações dos mesmos com outros métodos sintéticos químicos, e equivalentes dos mesmos conhecidos por aqueles versados na técnica. As modalidades preferenciais incluem, sem limitação, os exemplos revelados no presente documento. Será evidente para aqueles versados na técnica que várias mudanças e modificações podem ser feitas às modalidades específicas sem se afastar do espírito e escopo do presente pedido. EXEMPLO 1 (1_A E 1_B)

Etapa A: 1-1 (50 g, 285,41 mmol) foi dissolvido em diclorometano (500 ml), e trietilamina (43,32 g, 428,12 mmol), 4-dimetilaminopiridina (3,49 g, 28,54 mmol), dicarbonato de di-terc-butila (68,52 g, 313.96 mmol) foram adicionados a 0 °C.

O sistema de reação foi agitado a 25 °C durante 0,5 h.

O sistema de reação foi concentrada por evaporação giratória sob pressão reduzida e, então, adicionou-se acetato de etila (500 ml). A fase orgânica foi lavada com solução de cloreto de amônio aquosa saturada (300 ml × 3) e salmoura saturada (300 ml × 2), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar 1-2. Etapa B: Diisopropilamina (46,1 g, 456,23 mmol) foi dissolvida em tetra- hidrofurano (250 ml) e n- butil-lítio (2,5 M, 159,68 ml) foi adicionado em gotas ao sistema de reação a -78 °C sob atmosfera de nitrogênio, e a adição em gotas foi concluída dentro de meia hora.

O sistema de reação foi agitado a 0 °C durante meia hora e, em seguida, adicionado em gotas a outro frasco de três tubuladuras contendo uma solução de 1-2 (78,5 g, 285,14 mmol) e triisopropil borato (80,44 g, 427,72 mmol) em tetrahidrofurano (750 ml) a 0 °C sob atmosfera de nitrogênio, e a adição em gotas foi completada dentro de uma hora e meia.

O sistema de reação resultante foi agitado a 0 °C durante 1 h.

O sistema de reação foi então adicionado com solução de ácido acético (200 ml) para extinguir a reação, diluído com água (600 ml) e extraído com acetato de etila (500 ml × 2). A fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução de cloreto de amônio aquosa saturada (200 ml × 3) e salmoura saturada (200 ml × 2), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar um produto em bruto.

O produto bruto foi suspenso com acetonitrila (100 ml) e solução aquosa (500 ml), e o bolo de filtro foi seco com uma bomba de óleo para gerar 1-3. Etapa C: 1-3 foi adicionado a uma solução de ácido trifluoroacético (556,25 ml) a 0 °C em três porções, e o sistema de reação foi agitado a 0 °C durante uma hora sob atmosfera de nitrogênio.

O sistema de reação foi então vertido em água gelada (600 ml) para precipitar um sólido, e uma torta de filtro foi obtida e concentrada sob pressão reduzida com uma bomba de óleo para gerar 1-4. Etapa D: 1-5 (60 g, 212,09 mmol) e ácido 3-piridinborônico (26,07 g, 212,09 mmol) foram dissolvidos em 1,4-dioxano (600 ml) e água (120 ml) e, em seguida, dicloreto de [1,1-bis(trifenilfosfino)ferroceno] paládio (573,14 mg, 879,39 μmol, 44,64 ml) e carbonato de potássio (1,48 g, 17,59 mmol) foram adicionados.

O sistema de reação foi agitado a 90 °C durante 16 h sob atmosfera de nitrogênio.

Após a reação ter sido concluída, o sistema de reação foi filtrado, e o filtrado foi extraído com acetato de etila (500 ml × 3). As fases orgânicas foram combinadas, secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por uma coluna de gel de sílica (eluente (V/V): éter de petróleo/acetato de etil = 10/1 a 2/1) para gerar 1-6. Etapa E: 1-6 (20 g, 85,44 mmol) foi dissolvido em metanol (200 ml), e dióxido de platina (3,88 g, 17,09 mmol) e solução aquosa de ácido clorídrico (1 N, 85,44 ml) foram adicionados à temperatura ambiente, e o sistema de reação foi agitado a 10 °C durante 16 h sob atmosfera de hidrogênio de 0,34 MPa (50 Psi). Depois que a reação foi completada, o sistema de reação foi filtrado para gerar um filtrado, que foi concentrado sob pressão reduzida para gerar 1-7. Etapa F: 1-7 (23,63 g, 85,43 mmol) foi dissolvido em metanol (300 ml), e N,N-diisopropiletilamina (33,12 g, 256,29 mmol, 44,64 ml) e anidrido de Boc (37,29 g, 170,86 mmol, 39,25 ml) foram adicionados à temperatura ambiente.

O sistema de reação foi agitado à temperatura ambiente durante 1 h.

O sistema de reação foi então concentrado sob pressão reduzida para remover o solvente e extraído com acetato de etila (300 ml × 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (100 ml × 1), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar 1-8. Etapa G: 1-8 (4 g, 8,79 mmol) e ácido 4-metoxicarbonilindol-2-borônico (1,93 g, 8,79 mmol) foram dissolvidos em éter dimetílico de etilenoglicol (40 ml) e água (8 ml), e dicloreto de [1,1-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno]paládio (573,14 mg, 879,39 μmol, 44,64 ml) e bicarbonato de sódio (1,48 g, 17,59 mmol) foram adicionados à temperatura ambiente.

O sistema de reação foi agitado a 80 °C durante 16 h.

Depois que a reação foi completada, o sistema de reação foi adicionado com água (60 ml) e extraído com acetato de etila (50 ml × 2). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (30 ml × 1), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por uma coluna de gel de sílica (eluente (V/V): éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 3/1) para gerar 1-9. Etapa H: Cloreto de oxalila (1,87 g, 14,73 mmol, 1,29 ml) foi dissolvido em diclorometano (20 ml) enquanto se controlava a temperatura a 0 °C.

N,N- dimetilformamida (1,61 g, 22,09 mmol, 1,7 ml) foi adicionada a 0 °C sob atmosfera de nitrogênio.

O sistema de reação foi agitado a 0 °C durante 0,25 h. 1-9 (3,2 g, 7,36 mmol) foi dissolvido em diclorometano (10 ml) e adicionado em gotas ao sistema de reação enquanto controlava a temperatura a 0 °C.

O sistema de reação reagiu a 0- 15 °C durante 0,5 h.

Depois que a reação foi completada, o sistema de reação foi adicionado com uma solução de acetato de amônio (10%, 150 ml) e agitado a 15 °C durante 1 h.

O sistema de reação foi concentrado sob pressão reduzida para remover o solvente e, em seguida, extraído com acetato de etila (60 ml × 2). A fases orgânicas foram combinadas, lavadas com cloreto de amônio saturado (30 ml × 2) e salmoura saturada (30 ml × 3), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar 1-10. Etapa I: 1-10 (3,5 g, 7,57 mmol) foi dissolvido em diclorometano (50 ml) e Boc anidrido\carbonato de di- terc-butila (1,98 g, 9,08 mmol, 2,09 ml), trietilamina (1,53 g, 15,13 mmol, 2,11 ml) e 4-dimetilaminopiridina (92,44 mg, 756,70 μmol) foram adicionados com agitação enquanto controlava a temperatura a 20 °C.

O sistema de reação foi agitado a 20 °C durante 1 h.

Depois que a reação foi completada, a fase orgânica foi lavada com solução saturada de cloreto de amônio (150 ml × 2), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar 1-11. Etapa J: 1-11 (4,3 g, 7,64 mmol) foi dissolvido em tetrahidrofurano (40 ml) e metanol (10 ml), e borohidreto de sódio (578,22 mg, 15,28 mmol) foi adicionado sob atmosfera de nitrogênio enquanto controlava a temperatura a 0 °C.

O sistema de reação reagiu a 0 °C durante 0,5 h.

Depois que a reação foi concluída, o sistema de reação foi adicionado com cloreto de amônio saturado (80 ml) para extinguir a reação e extraído com acetato de etila (100 ml × 2). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (50 ml × 1), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar 1-12. Etapa K: 1-12 (4,0 g, 7,08 mmol) foi dissolvido em diclorometano (50 ml) e trietilamina (2,15 g, 21,25 mmol, 2,96 ml) e cloreto de metanossulfonila (1,62 g, 14,17 mmol) foram adicionados a 0 °C.

O sistema de reação foi agitado a 15 °C durante 16 h.

Depois que a reação foi completada, o sistema de reação foi adicionado com diclorometano (100 ml). A fase orgânica foi lavada com solução saturada de cloreto de amônio (100 ml × 2), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar 1-13 . Etapa L: 1-13 (4,0 g, 6,22 mmol) foi dissolvido em N , N- dimetilformamida (50 ml) e carbonato de sódio (1,32 g, 12,45 mmol) e N- hidroxiftalimida (2,03 g, 12,45 mmol) foram adicionados.

O sistema de reação foi agitado a 50 °C durante 16 h.

Depois que a reação foi completada, o sistema de reação foi lavado com acetato de etil (150 ml) e salmoura saturada (180 ml × 4), seco sobre sulfato de sódio anidro, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para gerar 1-14. Etapa M: 1-14 (4,0 g, 5,64 mmol) foi dissolvido em metanol (40 ml) e foi adicionado hidrato de hidrazina (1,15 g, 22,54 mmol, 1,12 ml, 98% de pureza). O sistema de reação foi agitado a 70 °C durante 2h sob atmosfera de nitrogênio.

Após a reação ter sido concluída, o sistema de reação foi concentrado sob pressão reduzida para remover o solvente orgânico, e o sólido resultante foi purificado por cromatografia líquida de alto desempenho preparativa (HPLC prep) (coluna: Phenomenex Synergi

Max-RP (250 mm×50 mm, 10 μm); fase móvel: água (0,225% de ácido fórmico)- acetonitrila; gradiente de eluição: 60%-90%, 29 min) para gerar um sólido amarelo.

O sólido foi então separado por coluna de cromatografia quiral (coluna de separação: AD-H (250 mm × 30 mm, 5 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em isopropanol; gradiente de eluição: 30% -30%, 2,1 min; 300 min) para gerar 1-15A (tempo de retenção = 1,704 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e 1-15B (tempo de retenção = 1,782 min, valor ee (excesso enantiomérico): 97%). Etapa N: 1-15A (420 mg, 764,09 μmol) foi dissolvido em diclorometano (6 ml), e ácido trifluoroacético (2 ml) foi adicionado.

O sistema de reação foi agitado a 20 °C durante 1h sob atmosfera de nitrogênio.

Após a reação ter sido concluída, o sistema de reação foi concentrado sob pressão reduzida para remover o solvente orgânico, e o sólido resultante foi purificado por HPLC prep (coluna: Phenomenex Gemini (150 mm×25 mm, 10 μm); fase móvel: água (bicarbonato de amônio 10 mM)- acetonitrila; gradiente de eluição: 30%-51%, 7 min) para gerar o Exemplo 1_A (tempo de retenção = 6,63 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 94%). SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Chiralpak AD-3 (100 mm×4,6 mm, I.D. 3 μm); fase móvel: 40% isopropanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

RMN de 1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 7,80 (dd, J = 0,86, 7,58 Hz, 1H), 7,62-7,70 (m, 1H), 7,48-7,54 (m, 2H), 7,39-7,46 (m, 2H), 7,31 (t, J = 7,83 Hz, 1H), 5,41-5,50 (m, 1H), 5,26-5,36 (m, 1H), 3,16 (br t, J = 12,90 Hz, 2H), 2,68-2,86 (m, 3H), 2,04 (br s, 1H), 1,83-1,94 (m, 1H), 1,68-1,80 (m, 2H). Etapa O: 1-15B (440 mg, 803,45 μmol) foi dissolvido em diclorometano (6 ml), e ácido trifluoroacético (2 ml) foi adicionado.

Após a reação ter sido concluída, o sistema de reação foi concentrado sob pressão reduzida para remover o solvente orgânico, e o sólido resultante foi purificado por HPLC prep (coluna: Phenomenex

Gemini (150 mm×25 mm, 10 μm); fase móvel: água (bicarbonato de amônio 10 mM)- acetonitrila; gradiente de eluição: 30%-51%, 7 min) para gerar o Exemplo 1_B (tempo de retenção = 5,62 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 94%). SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Chiralpak AD-3 (100 mm×4,6 mm, I.D. 3 μm); fase móvel: 40% isopropanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

RMN de 1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 7,80 (dd, J = 0,86, 7,58 Hz, 1H), 7,64-7,70 (m, 1H), 7,48-7,53 (m, 2H), 7,41-7,46 (m, 2H), 7,31 (t, J = 7,83 Hz, 1H), 5,41-5,50 (m, 1H), 5,27-5,35 (m, 1H), 3,13-3,19 (m, 2H), 2,71-2,84 (m, 3H), 2,04 (br s, 1H), 1,84-1,91 (m, 1H), 1,71-1,79 (m, 2H)

EXEMPLO 2 (2_A E 2_B)

Referência foi feita ao Exemplo 1 para método de síntese.

Para o Exemplo 2, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: WHELK-O1 (250 mm × 50 mm, 10 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em metanol; gradiente de eluição: 40% -40%, 4 min; 260 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: Exemplo 2_AA (tempo de retenção = 4,453 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 2_BB (tempo de retenção = 4,735 min, valor ee (excesso enantiomérico): 98%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 2_A (tempo de retenção = 1,276 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 2_B (tempo de retenção = 1,632 min, valor ee (excesso enantiomérico): 98%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Chiralcel OJ-3 (50 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 40% isopropanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 2_A: RMN de 1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 8,52 (s, 1H), 7,82 (d, J = 7,21 Hz, 1H), 7,60-7,72 (m, 5H), 7,34 (t, J = 7,76 Hz, 1H), 5,43-5,52 (m, 1H), 5,25-5,35 (m, 1H), 4,32 (br d, J = 11,86 Hz, 1H), 3,51 (br d, J = 12,72 Hz, 1H), 3,16-3,29 (m, 1H), 1.95-2,21 (m, 4H), 1,73-1.93 (m, 2H). Exemplo 2_B: RMN de 1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 8,55 (s, 1H), 7,82 (d, J = 7,34 Hz, 1H), 7,59-7,72 (m, 5H), 7,34 (t, J = 7,83 Hz, 1H), 5,43-5,56 (m, 1H), 5,24-5,36 (m, 1H), 4,28 (br d, J = 11,86 Hz, 1H), 3,49 (br d, J = 11,98 Hz, 1H), 3,11-3,26 (m, 1H), 1,92-2,21 (m, 4H), 1,71-1,90 (m, 2H). EXEMPLO 3

Etapa A: 1,4-dibromobenzeno (8,92 g, 37,79 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (35,00 ml) e, em seguida, adicionado em gotas a um frasco de três gargalos contendo chips de magnésio (918,56 mg, 37,79 mmol) e iodo (137,03 mg, 539,9 μmol) em 70 °C sob atmosfera de nitrogênio, e a adição em gotas foi completada dentro de meia hora.

O sistema de reação foi agitado a 70 °C durante 1 h e depois arrefecido a 20 °C.

O sistema de reação foi adicionado em gotas a outro frasco de três gargalos contendo uma solução de 3-1 (5 g, 26,99 mmol) em tetrahidrofurano (15 ml) a -70 °C sob atmosfera de nitrogênio, e a adição em gotas foi completada dentro de metade de um hora.

O sistema de reação resultante foi agitado a -70 °C durante 2 h e, em seguida, aquecido a 15 °C e agitado durante 1 h.

O sistema de reação foi adicionado com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (60 ml) para extinguir a reação e extraída com acetato de etila (50 ml × 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (50 ml), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida.

O resíduo foi purificado por uma coluna de gel de sílica (eluente (V/V): éter de petróleo/acetato de etila = 30/1 a 10/1) para gerar 3-2. Etapa B: 3-2 (5 g, 14,61 mmol) foi adicionado a ácido trifluoroacético (25 ml). O sistema de reação foi agitado a 25 °C durante 4 h.

O sistema de reação foi então concentrado por evaporação rotativa sob pressão reduzida e adicionado com água (40 ml). A mistura foi ajustada a pH = 14 com solução aquosa de hidróxido de sódio a 40% e precipitou um sólido branco.

A mistura resultante foi filtrada e o bolo do filtro foi lavado com uma pequena quantidade de água e sujeito a evaporação rotativa para gerar 3-3. Etapa C: 3-3 (2,8 g, 4,97 mmol) foi dissolvido em metanol (30 ml) e água (7 ml). O sistema de reação foi resfriado a -41 °C e adicionado com boro-hidreto de sódio (945,34 mg, 24,99 mmol). O sistema de reação foi agitado a -41 °C durante 4 h.

Em seguida, o sistema de reação foi adicionado com ácido clorídrico 2 mol/L (50 ml) a 0 °C para extinguir a reação e adicionado com acetato de etil (100 ml). A fase orgânica foi lavada com água (50 ml), seguida por separação líquida.

A fase aquosa foi ajustada a pH = 14 com hidróxido de sódio 4 mol/L e extraída com acetato de etila (150 ml × 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com água (50 ml × 2), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar 3-4. Etapa D: 3-4 (3 g, 13,15 mmol) foi dissolvido em diclorometano (30 ml), e trietilamina (3,99 g, 39,45 mmol) e dicarbonato de di- terc- butila (3,16 g, 14,47 mmol) foram adicionados.

O sistema de reação foi agitado a 25 °C durante 1 h.

O sistema de reação foi concentrado por evaporação rotativa sob pressão reduzida e, em seguida, adicionado com acetato de etila (60 ml). A fase orgânica foi lavada com solução de cloreto de amônio aquosa saturada (30 ml × 3) e salmoura saturada (50 ml), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar 3-5. Com referência ao método no Exemplo 1, o Composto 3-5 foi separado por HPLC quiral (coluna de separação: AD-H (250 mm × 30 mm, 5 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em isopropanol; gradiente de eluição: 30% -30%, 2,1 min; 85 min) a 3-12A (tempo de retenção = 1,627 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e 3- 12B (tempo de retenção = 1,711 min, valor ee (excesso enantiomérico): 98%), que foram desprotegidos para gerar o Exemplo 3_A (tempo de retenção = 0,732 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 3_B (tempo de retenção = 1,402 min, valor ee (excesso enantiomérico): 97,32%), respectivamente.

Método para medir o valor ee (excesso enantiomérico): coluna de separação: Chiralcel OJ-3 (50 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 40% de etanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 3_A: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,76-2,00 (m, 3H) 2,23-2,34 (m, 1H) 3,07-3,15 (m, 1H) 3,21 (dt, J=10,18, 7,26 Hz, 1H) 4,36 (br t, J=8,01 Hz, 1H) 5,17-5,27 (m, 1H) 5,36-5,49 (m, 1H) 7,29 (t, J = 7,76 Hz, 1H) 7,58 (d, J=0,86 Hz, 4H) 7,64-7,71 (m, 2H) 8,33 (s, 1H) 11,06 (br s, 1H) 11,85 (s, 1H). Exemplo 3_B: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,73-1,97 (m, 3H) 2,19-2,35 (m, 1H) 3,04-3,24 (m, 2H) 4,33 (br t, J=8,07 Hz, 1H) 5,14-5,26 (m, 1H) 5,36-5,50 (m, 1H) 7,29 (t, J = 7,76 Hz, 1H) 7,58 (d, J = 0,98 Hz, 4H) 7,63-7,71 (m, 2H) 8,31 (s, 1H) 11,06 (br s, 1H) 11,83 (s, 1H). EXEMPLO 4 (4_A E 4_B)

Referência foi feita ao Exemplo 1 para método de síntese.

O Exemplo 4 foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: IC (250 mm × 30 mm, 10 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em etanol; gradiente de eluição: 55%-55%, 3,6 min; 80 min) para gerar o Exemplo 4_A (tempo de retenção = 2,353 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 4_B (tempo de retenção = 3,177 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%). SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Chiralpak IC-3 (50 mm×4,6 mm, I.D. 3 μm); fase móvel: 40% isopropanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 4_A: RMN de 1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 7,46-7,59 (m, 5H), 7,38 (br d, J = 7,70 Hz, 1H), 5,38-5,50 (m, 1H), 5,23-5,34 (m, 1H), 3,49 (br d, J = 11,00 Hz, 2H), 3,02-3,24 (m, 3H), 2,12 (br d, J = 10,39 Hz, 2H), 1,79-2,02 (m, 2H). Exemplo 4_B: RMN de1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 7,30-7,55 (m, 6H), 5,38-5,48 (m, 1H), 5,24-5,34 (m, 1H), 3,11 (br t, J = 13,82 Hz, 2H), 2,57-2,89 (m, 3H), 2,03 (br d, J = 8,80 Hz, 1H), 1,85 (br d, J = 10,27 Hz, 1H), 1,62-1,78 (m, 2H) EXEMPLO 5 (5_A E 5_B)

Referência foi feita ao Exemplo 1 para método de síntese.

Para o Exemplo 5, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: AD-H (250 mm × 30 mm, 5 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em isopropanol; gradiente de eluição: 30% - 30%, 6,0 min; 350 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 5_AA (tempo de retenção = 1,669 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 98%) e 5_BB (tempo de retenção = 1,725 min, valor ee (excesso enantiomérico): 97%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 5_A (tempo de retenção = 4,468 min, valor ee (excesso enantiomérico): 97%) e Exemplo 5_B (tempo de retenção = 3,784 min, valor ee (excesso enantiomérico): 94%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Chiralpak IC-3 (50 mm×4,6 mm, I.D. 3 μm); fase móvel: 40% de etanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 5_A: RMN de 1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 8,54 (s, 1H), 7,82 (d, J = 7,50 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 7,63 Hz, 1H), 7,47-7,59 (m, 1H), 7,22-7,39 (m, 3H), 5,26-5,38 (m, 1H), 5,05-5,17 (m, 1H), 3,41-3,57 (m, 2H), 3,00-3,22 (m, 3H), 2,10 (br d, J = 13,51 Hz, 2H), 1,77-2,01 (m, 2H). Exemplo 5_B: RMN de 1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 8,54 (s, 1H), 7,78-7,88 (m, 1H), 7,65-7,74 (m, 1H), 7,51-7,60 (m, 1H), 7,24-7,40 (m, 3H), 5,27- 5,40 (m, 1H), 5,05-5,20 (m, 1H), 3,42-3,55 (m, 2H), 2,99-3,23 (m, 3H), 2,05-2,17 (m, 2H), 1,79-2,01 (m, 2H) EXEMPLO 6 (6_A E 6_B)

Referência foi feita ao Exemplo 3 para método de síntese.

Para o Exemplo 6, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: WHELK-O1 (250 mm × 50 mm, 10 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em metanol; gradiente de eluição: 40% -40%, 3,7 min; 450 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: Exemplo 6_AA (tempo de retenção = 2,483 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 6_BB (tempo de retenção = 2,691 min, valor ee (excesso enantiomérico): 94%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 6_A (tempo de retenção = 1,955 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 6_B (tempo de retenção = 3,339 min, valor ee (excesso enantiomérico): 94%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: OJ-3 (50 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 30% isopropanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 6_A: RMN de 1H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 1,48 (s, 3H) 1,81 (br s, 1H) 1,93-2,17 (m, 3H) 2,94-3,35 (m, 2H) 5,23 (br dd, J = 14,67, 3,55 Hz, 1H) 5,38-5,48 (m, 1H) 7,29 (t, J = 7,76 Hz, 1H) 7,54-7,61 (m, 2H) 7,62-7,73 (m, 4H) 8,18-8,33 (m, 1H) 11,07 (s, 1H) 11,80 (br s, 1H) Exemplo 6_B: RMN de 1H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 1,48 (br d, J = 2,69 Hz, 3H) 1,79 (br s, 1H) 1,95-2,18 (m, 3H) 2,93-3,30 (m, 2H) 5,23 (br dd, J = 14,61, 3,12 Hz, 1H) 5,43 (br d, J = 14,79 Hz, 1H) 7,19-7,35 (m, 1H) 7,53-7,60 (m, 2H) 7,61-7,77 (m, 4H) 8,19-8,35 (m, 1H) 11,06 (s, 1H) 11,80 (br d, J = 4,65 Hz, 1H) EXEMPLO 7 (7_A E 7_B)

Referência foi feita ao Exemplo 1 para método de síntese.

O Exemplo 7 foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: IC (250 mm × 30 mm, 10 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em etanol; gradiente de eluição: 50% -50%, 4,3 min; 120 min) para gerar dois isômeros de configurações diferentes: Exemplo 7_A (tempo de retenção = 1,889 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 7_B (tempo de retenção = 2,411 min, valor ee (excesso enantiomérico): 94%). SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: IC-3 (50 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 40% isopropanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 7_A: RMN de 1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 7,49-7,64 (m, 2H), 7,26-7,45 (m, 3H), 5,40-5,48 (m, 1H), 5,25-5,34 (m, 1H), 3,37-3,56 (m, 3H), 2,98-3,24 (m, 2H), 2,04-2,18 (m, 2H), 1,81-2,01 (m, 2H). Exemplo 7_B: RMN de 1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 7,43-7,57 (m, 2H), 7,38 (dd, J = 2,14, 8,99 Hz, 1H), 7,23-7,32 (m, 2H), 5,39-5,47 (m, 1H), 5,26- 5,35 (m, 1H), 3,02-3,21 (m, 3H), 2,60-2,82 (m, 2H), 1,95-2,08 (m, 1H), 1,64-1,89 (m, 3H). EXEMPLO 8 (8_A E 8_B)

Referência foi feita ao Exemplo 1 para método de síntese.

Para o Exemplo 8, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: AD-H (250 mm × 30 mm, 5 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em isopropanol; gradiente de eluição: 30% - 30%, 5,0 min; 110 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 8_AA (tempo de retenção = 1,570 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e 8_BB

(tempo de retenção = 1,674 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 8_A (tempo de retenção = 1,262 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 8_B (tempo de retenção = 2,511 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: OJ-3 (50 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 30% de metanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 8_A: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,71-1,80 (m, 1H) 1,82-1,99 (m, 2H) 2,22-2,31 (m, 1H) 3,05-3,28 (m, 2H) 5,22 (br d, J=14,55 Hz, 1H) 5,43 (br d, J=14,55 Hz, 1H) 7,29 (t, J = 7,76 Hz, 1H) 7,53-7,71 (m, 6H) 8,30 (s, 1H) 11,06 (br s, 1H) 11,82 (s, 1H) Exemplo 8_B: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,70-1,79 (m, 1H) 1,86-1,97 (m, 2H) 2,21-2,35 (m, 1H) 3,02-3,23 (m, 2H) 5,16-5,27 (m, 1H) 5,37- 5,48 (m, 1H) 7,29 (t, J = 7,76 Hz, 1H) 7,52-7,72 (m, 6H) 8,29 (s, 1H) 11,06 (br s, 1H) 11,81 (s, 1H) EXEMPLO 9

Após a obtenção do Composto 9-5 por referência ao método de preparação do Exemplo 3, 9-5 reagiu com 1-4, referindo-se ao Exemplo 1, para gerar 9-6, que foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: AD (250 mm × 30 mm, 10 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em metanol; gradiente de eluição: 60% -60%, 6,6 min; 190 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 9-6_AA (tempo de retenção = 0,625 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e 9-6_BB (tempo de retenção = 1,657 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%), que foram submetidos a procedimento semelhante no Exemplo 1 para gerar o Exemplo 9_A (tempo de retenção = 0,716 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 9_B (tempo de retenção = 0,559 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: AD-3 (50 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 40% de metanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 9_A: RMN de 1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 8,51 (s, 1H), 7,83 (d, J = 7,46 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,07 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 8,25 Hz, 1H), 7,41- 7,51 (m, 2H), 7,37 (t, J = 7,83 Hz, 1H), 5,44-5,53 (m, 1H), 5,27-5,38 (m, 1H), 3,52-3,62 (m, 1H), 3,40-3,50 (m, 1H), 2,43-2,62 (m, 2H), 2,18-2,41 (m, 2H), 1,72 (s, 3H). Exemplo 9_B: RMN de 1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 8,49 (s, 1H), 7,83 (d, J = 7,46 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,07 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 8,19 Hz, 1H), 7,41- 7,52 (m, 2H), 7,36 (t, J = 7,82 Hz, 1H), 5,42-5,58 (m, 1H), 5,25-5,38 (m, 1H), 3,53-3,63 (m, 1H), 3,41-3,52 (m, 1H), 2,43-2,64 (m, 2H), 2,18-2,42 (m, 2H), 1,73 (s, 3H). EXEMPLO 10

Foi feita referência ao Exemplo 1 para o método de síntese; no entanto, o racemato Exemplo 10 foi obtido diretamente sem resolução quiral.

Exemplo 10: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,57-1,82 (m, 3H) 1,93 (br s, 1H) 2,68 (br s, 1H) 2,75-2,91 (m, 2H) 2,99-3,23 (m, 2H) 5,03-5,13 (m, 1H) 5,14-5,28 (m, 1H) 7,24-7,39 (m, 2H) 7,41-7,57 (m, 3H) 8,34 (br s, 1H) 11,27 (br s, 1H) 11,87 (br s, 1H). EXEMPLO 11 (11_A E 11_B)

Referência foi feita ao Exemplo 1 para método de síntese.

Após a desproteção com ácido trifluoroacético, Exemplo 11_A (tempo de retenção = 2,020 min, valor ee (excesso enantiomérico): 96,33%) e Exemplo 11_B (tempo de retenção = 1,402 min, valor ee (excesso enantiomérico): 97,32%) foram obtidos.

Método para medir o valor ee (excesso enantiomérico): coluna de separação: OJ-3 (50 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 5%-40% de etanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 11_A: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,74-2,00 (m, 3H) 2,23-2,36 (m, 1H) 3,07-3,22 (m, 2 H) 4,57 (br t, J = 7,95 Hz, 1H) 5,17-5,32 (m, 1H) 5,38-5,52 (m, 1H) 7,28-7,52 (m, 3H) 7,63-7,76 (m, 3H) 8,25 (s, 1H) 11,09 (br s, 1H) 11,90 (s, 1H). Exemplo 11_B: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,68-2,05 (m, 3H) 2,19-2,37 (m, 1H) 3,05-3,22 (m, 2H) 4,42-4,60 (m, 1H) 5,17-5,32 (m, 1H) 5,38- 5,51 (m, 1H) 7,29-7,52 (m, 3H) 7,56-7,75 (m, 3H) 8,29 (s, 1H) 11,09 (br s, 1H) 11,92 (s, 1H). EXEMPLO 12

Etapa A: 12-1 (5,0 g, 26,99 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (50 ml) e hexametildisilazida de lítio (29,69 mmol, 1 mol/L) foi adicionada com agitação enquanto controlava a temperatura a -78 °C.

O sistema de reação foi agitado a -78 °C durante 0,5 h.

N-fenilbis (trifluorometanossulfonil) imida (11,57 g, 32,39 mmol) foi então dissolvido em tetra-hidrofurano (100 ml) e lentamente adicionado em gotas ao sistema de reação.

O sistema de reação resultante foi agitado de -78 °C a 0 °C durante 2 h.

Depois que a reação foi completada, o sistema de reação foi adicionado com bicarbonato de sódio saturado (500 ml) para extinguir a reação e extraído com acetato de etila (200 ml × 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (200 ml × 2), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar 12-2. Etapa B: 12-2 (6,0 g, 18,91 mmol) foi dissolvido em dioxano (60 ml) e bis (pinacolato) diboro (4,8 g, 18,91 mmol), acetato de potássio (3,71 g, 37,82 mmol) e [1,1-bis (trifenilfosfino)) ferroceno] complexo de dicloreto de paládio diclorometano (1,54 g, 1,89 mmol) foram adicionados à temperatura ambiente.

O sistema de reação foi agitado a 80 °C durante 16 h.

Depois que a reação foi completada, nenhum tratamento adicional foi realizado no sistema de reação e 12-3 foi obtido, o qual foi usado diretamente na próxima etapa.

Etapa C: 12-3 (1,2 g, 3,70 mmol) e 1-bromo-4-iodobenzeno (4,79 g,

16,94 mmol) foram dissolvidos em dioxano (60 ml) e água (12 ml), e [1,1-bis (trifenilfosfino) ferroceno] complexo de dicloreto de paládio diclorometano (1,38 g, 1,69 mmol) e carbonato de potássio (4,68 g, 33,88 mmol) foram adicionados.

O sistema de reação foi agitado a 80 °C durante 5 h.

Depois que a reação foi completada, o sistema de reação foi adicionado com água (200 ml) e extraído com acetato de etila (100 ml × 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (100 ml × 1), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por uma coluna de gel de sílica (eluente (V/V): éter de petróleo/acetato de etila (proporção de volume) = 50: 1 a 10: 1) para gerar 12-4. Etapa D: 12-4 (1,2 g, 3,70 mmol) e ácido 4-metoxicarbonilindol-2- borônico (810,59 mg, 3,70 mmol) foram dissolvidos em éter dimetílico de etilenoglicol (15 ml) e água (3 ml), e [1,1- foram adicionados dicloreto de bis (di- terc- butilfosfino) ferroceno] paládio (241,23 mg, 370,13 μmol) e bicarbonato de sódio (621,89 mg, 7,40 mmol). O sistema de reação foi agitado a 80 °C durante 16 h.

Depois que a reação foi completada, o sistema de reação foi adicionado com água (100 ml) e extraído com acetato de etila (100 ml × 2). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (100 ml × 1), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por uma coluna de gel de sílica (eluente (V/V): éter de petróleo/acetato de etila (proporção de volume) = 10: 1 a 2: 1) para gerar 12-5. Etapa E: 12-5 (1,1 g, 32,43 mmol) foi dissolvido em metanol (10 ml) e paládio sobre carbono (100 mg, 10% de pureza) foi adicionado à temperatura ambiente.

O sistema de reação foi agitado a 25 °C durante 16 h sob atmosfera de hidrogênio de 15 Psi.

Depois que a reação foi completada, o sistema de reação foi filtrado e concentrado sob pressão reduzida para gerar 12-6. Para o Composto 12-6, foi feita referência ao método do Exemplo 1 para gerar o composto antes da desproteção de Boc, que foi então separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: AD-H (250 mm × 30 mm, 5 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em etanol; gradiente de eluição: 35% -35%, 2,3 min; 50 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 12_AA (tempo de retenção = 2,771 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 98%) e 12_BB (tempo de retenção = 2,875 min, valor ee (excesso enantiomérico): 98%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 12_A (tempo de retenção = 4,564 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 12_B (tempo de retenção = 4,148 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: AS-3 (100 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 30%-45% de isopropanol (0,05% de isopropilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 12_A: RMN de 1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 8,56 (s, 1H), 7,81 (d, J = 7,09 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 7,95 Hz, 1H), 7,48-7,59 (m, 4H), 7,32 (t, J = 7,82 Hz, 1H), 5,42-5,52 (m, 1H), 5,25-5,35 (m, 1H), 3,77 (br s, 1H), 3,60 (br s, 2H), 3,42 (br d, J = 7,58 Hz, 1H), 3,28 (br d, J = 9,66 Hz, 1H), 2,52 (br s, 1H), 2,08-2,30 (m, 1H). Exemplo 12_B: RMN de 1H (400 MHz, metanol deuterado) δ 8,55 (br s, 1H), 7,78-7,85 (m, 1H), 7,67 (d, J = 7,58 Hz, 1H), 7,49-7,60 (m, 4H), 7,33 (t, J = 7,83 Hz, 1H), 5,41-5,51 (m, 1H), 5,25-5,36 (m, 1H), 3,72-3,83 (m, 1H), 3,58-3,65 (m, 2H), 3,38-3,52 (m, 1H), 3,27 (br s, 1H), 2,53 (br d, J = 4,16 Hz, 1H), 2,11-2,26 (m, 1H). EXEMPLO 13 (13_A E 13_B)

Referência foi feita ao Exemplo 1 para método de síntese.

Para o Exemplo 13, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: AD-H (250 mm × 30 mm, 5 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em isopropanol; gradiente de eluição: 25% - 25%, 2,0 min; 500 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 13_AA (tempo de retenção = 3,090 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 85%) e 13_BB (tempo de retenção = 3,357 min, valor ee (excesso enantiomérico): 86%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 13_A (tempo de retenção = 1,477 min, valor ee (excesso enantiomérico): 93%) e Exemplo 13_B (tempo de retenção = 1,162 min, valor ee (excesso enantiomérico): 50%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Chiralpak AD-3 (50 mm×4,6 mm, I.D. 3 μm); fase móvel: 40% isopropanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 13_A: RMN de H (400 MHz, metanol deuterado) δ 7,69 (d, J = 7,46 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 7,95 Hz, 1H), 7,32-7,38 (m, 1H), 7,15-7,22 (m, 3H), 5,30- 5,38 (m, 1H), 5,16-5,25 (m, 1H), 3,02 (br d, J = 10,03 Hz, 2H), 2,48-2,70 (m, 3H), 1,88 (br d, J = 12,10 Hz, 1H), 1,66-1,78 (m, 3H). Exemplo 13_B: RMN de H (400 MHz, metanol deuterado) δ 7,69 (d, J = 6,85 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 7,95 Hz, 1H), 7,36-7,43 (m, 1H), 7,18-7,27 (m, 3H), 5,30- 5,38 (m, 1H), 5,16-5,24 (m, 1H), 3,15 (br t, J = 11,92 Hz, 3H), 2,68-2,88 (m, 2H), 1,83- 1,96 (m, 2H), 1,69-1,78 (m, 2H). EXEMPLO 14 (14_A E 14_B)

Referência foi feita ao Exemplo 3 para método de síntese.

Para o Exemplo 14, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: Whelk-O1 (250 mm × 50 mm, 10 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em metanol; gradiente de eluição: 40% -40%, 3,6 min; 150 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 14_AA (tempo de retenção = 4,092 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e 14_BB (tempo de retenção = 4,411 min, valor ee (excesso enantiomérico): 98%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 14_A (tempo de retenção = 1,489 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 14_B (tempo de retenção = 2.700 min, valor ee (excesso enantiomérico): 91%), respectivamente.

Exemplo 14_A: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ = 11,82 (s, 1H), 11,25-10,87 (m, 1H), 8,30 (s, 1H), 7,74-7,65 (m, 2H), 7,60-7,54 (m, 1H), 7,52-7,45 (m, 1H), 7,44-7,39 (m, 1H), 7,36-7,28 (m, 1H), 5,30-5,17 (m, 1H), 5,13- 4,99 (m, 1H), 4,37 (br t, J = 7,9 Hz, 1H), 3,21-3,07 (m, 2H), 2,34-2,25 (m, 1H), 1,97- 1,72 (m, 3H) Exemplo 14_B: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ = 11,80-11,74 (m, 1H), 11,15-11,03 (m, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,73-7,65 (m, 2H), 7,58-

7,52 (m, 1H), 7,48-7,38 (m, 2H), 7,31 (s, 1H), 5,28-5,18 (m, 1H), 5,11-5,02 (m, 1H), 4,32-4,27 (m, 1H), 3,15-3,10 (m, 1H), 3,08-3,03 (m, 1H), 2,30-2,22 (m, 1H), 1,92-1,80 (m, 2H), 1,72-1,62 (m, 1H) EXEMPLO 15 (15_A E 15_B)

Referência foi feita ao Exemplo 8 para método de síntese.

Para o Exemplo 15, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: AD-H (250 mm × 30 mm, 5 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em isopropanol; gradiente de eluição: 20% - 20%, 3,1 min; 250 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 15_AA (tempo de retenção = 3,191 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e 15_BB (tempo de retenção = 3,511 min, valor ee (excesso enantiomérico): 97%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 15_A (tempo de retenção = 2,28 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 15_B (tempo de retenção = 2,101 min, valor ee (excesso enantiomérico): 87%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Chiralpak OD-3 (50 mm×4,6 mm, I.D. 3 μm); fase móvel: 5%-40% de etanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 15_A: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 1,64 (br s, 1H) 1,75-1,89 (m, 2H) 2,17-2,30 (m, 1H) 3,07 (br d, J = 17,69 Hz, 2H) 5,14-5,32 (m, 1H) 5,37-5,52 (m, 1H) 7,31 (t, J = 7,72 Hz, 1H) 7,39 (br s, 2H) 7,65 (d, J = 8,03 Hz, 1H) 7,68-7,75 (m, 2H) 8,23 (br s, 1H) 11,08 (s, 1H) 11,85 (br s, 1H)

Exemplo 15_B: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 1,66 (br s, 1H) 1,86 (br s, 2H) 2,25 (br s, 1H) 3,09 (br s, 2H) 5,24 (br d, J = 14,05 Hz, 1H) 5,39-5,49 (m, 1H) 7,31 (t, J = 7,78 Hz, 1H) 7,39 (br s, 2H) 7,66 (d, J = 8,03 Hz, 1H) 7,69-7,74 (m, 2H) 8,16 (br s, 1H) 11,08 (s, 1H) 11,83 (s, 1H) EXEMPLO 16 (16_A E 16_B)

Referência foi feita ao Exemplo 3 para método de síntese.

Para o Exemplo 16, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: AD (250 mm × 30 mm, 10 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em isopropanol; gradiente de eluição: 50% -50%, 3,7 min; 52 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 16_AA (tempo de retenção = 0,567 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e 16_BB (tempo de retenção = 0,835 min, valor ee (excesso enantiomérico): 99%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 16_A (tempo de retenção = 0,702 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 16_B (tempo de retenção = 1,301 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Amycoat (50 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 60% isopropanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 16_A: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ = 11,98 (s, 1H), 11,11 (s, 1H), 8,79-8,73 (m, 1H), 8,04-7,98 (m, 1H), 7,74-7,66 (m, 3H), 7,33 (s, 1H), 5,47 (d, J = 14,7 Hz, 1H), 5,31-5,19 (m, 1H), 4,56-4,46 (m, 1H), 3,23-

3,09 (m, 3H), 1,95-1,83 (m, 3H). Exemplo 16_B: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ = 11,99 (s, 1H), 11,23-11,04 (m, 1H), 8,77 (s, 1H), 8,27-8,17 (m, 1H), 8,08-7,99 (m, 1H), 7,73-7,66 (m, 3H), 7,34 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 5,53-5,42 (m, 1H), 5,29-5,20 (m, 1H), 4,64-4,52 (m, 1H), 3,27-3,14 (m, 3H), 1,86 (br s, 3H). EXEMPLO 17 (17_A E 17_B)

Referência foi feita ao Exemplo 3 para método de síntese.

Para o Exemplo 17, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: WHELK-O1 (250 mm × 50 mm, 10 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em etanol; gradiente de eluição: 45% -45%, 3,2 min; 150 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 17_AA (tempo de retenção = 2,145 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e 17_BB (tempo de retenção = 2,396 min, valor ee (excesso enantiomérico): 93%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 17_A (tempo de retenção = 0,622 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 17_B (tempo de retenção = 1,114 min, valor ee (excesso enantiomérico): 95%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Chiralpak OD-3 (50 mm×4,6 mm, I.D. 3 μm); fase móvel: 40% de etanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 17_A: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado)

δ = 11,96 (s, 1H), 11,16-11,06 (m, 1H), 8,31-8,17 (m, 1H), 7,69 (dd, J = 7,6, 15,4 Hz, 2H), 7,37-7,28 (m, 3H), 5,51-5,40 (m, 1H), 5,31-5,19 (m, 1H), 4,67-4,56 (m, 1H), 3,17- 3,11 (m, 1H), 3,09-3,03 (m, 1H), 2,28-2,18 (m, 1H), 2,03-1,82 (m, 3H). Exemplo 17_B: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ = 11,94-11,87 (m, 1H), 11,14-11,05 (m, 1H), 8,24-8,21 (m, 1H), 7,74-7,63 (m, 2H), 7,37-7,25 (m, 3H), 5,44 (s, 1H), 5,30-5,21 (m, 1H), 4,54-4,47 (m, 1H), 3,10-3,05 (m, 1H), 2,96-2,91 (m, 1H), 2,15 (br s, 1H), 1,98-1,77 (m, 3H). EXEMPLO 18

Referência foi feita ao Exemplo 12 para método de síntese.

Exemplo 18: RMN de H (400 MHz, metanol deuterado) δ 8,53 (s, 1H), 7,79-7,89 (m, 1H), 7,57-7,73 (m, 2H), 7,23-7,50 (m, 3H), 6,54 (br s, 1H), 5,41-5,54 (m, 1H), 5,25-5,38 (m, 1H), 4,51 (br s, 2H), 4,30 (br d, J = 2,08 Hz, 2H). EXEMPLO 19 (19_A E 19_B)

Etapa A: 19-1 (10 g, 33,23 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (100,00 ml), e n- butil-lítio (2,5 M, 13,29 ml) foi adicionado em gotas ao sistema de reação a -78 °C sob atmosfera de nitrogênio, e a adição em gotas foi concluído em meia hora.

Uma solução de N- terc -butoxicarbonil-3-piperidona (6,62 g, 33,23 mmol) em tetra-hidrofurano (20 ml) foi adicionada em gotas ao sistema de reação a -78 °C sob atmosfera de nitrogênio.

O sistema de reação resultante foi agitado a -78 °C durante 1,5 h.

O sistema de reação foi então adicionado com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (100 ml) para extinguir a reação e extraída com acetato de etila (100 ml × 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (100 ml), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida.

O resíduo foi purificado por uma coluna de gel de sílica (eluente: éter de petróleo/acetato de etil = 15/1-3/1) para gerar 19-2. Etapa B: 19-2 (9,56 g, 22,83 mmol) foi dissolvido em diclorometano (100 ml) e trifluoreto de dietilaminoenxofre (18,40 g, 114,14 mmol) foi adicionado ao sistema de reação a -78 °C sob atmosfera de nitrogênio.

O sistema de reação foi agitado a -78 °C durante 2 h.

O sistema de reação foi então adicionado com solução aquosa de bicarbonato de sódio (10 ml, pH = 7-8) para extinguir a reação e extraída com acetato de etila (10 ml × 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (10 ml × 3), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida.

O resíduo foi purificado por uma coluna de gel de sílica (eluente: éter de petróleo/acetato de etil = 30/1-5/1) para gerar 19-3. Para a síntese de 19-4 e compostos subsequentes, foi feita referência ao Exemplo 1. Para o Exemplo 19, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: AD-H (250 mm × 30 mm, 5 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em etanol; gradiente de eluição: 25% -25%, 2,7 min; 570 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 19_AA (tempo de retenção = 1,400 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e 19_BB (tempo de retenção = 1,489 min, valor ee (excesso enantiomérico): 91,2%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 19_A (tempo de retenção = 0,901 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 19_B (tempo de retenção = 1,325 min, valor ee (excesso enantiomérico): 92%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: AD-3 (50 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 40% isopropanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 19_A: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 11,92 (s, 1H), 11,09 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,72-7,67 (m, 1H), 7,65-7,64 (m, 2H), 7,474-7,465 (m, 2H), 7,34-7,32 (m, 1H), 5,46-5,42 (d, J = 14,80 Hz, 1H), 5,28-5,25 (d, J = 14,80 Hz, 1H), 3,29-3,22 (dd, J = 23,20 Hz, 4,40 Hz, 1H), 3,08-3,04 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 2,73 (s, 1H), 2,51-2,11 (m, 1H), 1,68-1,64 (m, 1H). Exemplo 19_B: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 11,90 (s, 1H), 11,09 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,71-7,69 (m, 1H), 7,67-7,64 (m, 2H), 7,463-7,457 (m, 2H), 7,34-7,32 (m, 1H), 5,45-5,42 (d, J = 14,80 Hz, 1H), 5,28-5,25 (d, J = 14,80 Hz, 1H), 3,22-3,15 (m, 2H), 3,03-3,00 (m, 2H), 2,67 (s, 1H), 2,50-2,09 (m, 2H), 1,83-1,79 (m, 1H), 1,63-1,60 (m, 1H). EXEMPLO 20 (20_A E 20_B)

c

Exemplo 11_A (50 mg, 142,3 μmol) e 2-bromoetanol (21,34 mg, 170,76 μmol) foram dissolvidos em N , N- dimetilformamida e, em seguida, carbonato de potássio (23,60 mg, 0,17 mmol) foi adicionado.

O sistema de reação resultante foi agitado a 60 °C durante 16 h.

Após a detecção da conclusão da reação, o sistema de reação foi filtrado para remover o material insolúvel e o líquido restante foi seco por evaporação rotativa e submetido à separação preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 (150 μm × 25 μm, 10 μm); fase móvel: água (0,225% de ácido fórmico) - acetonitrila; B%: 15%-45%, 9 min) para gerar o Exemplo 20_A (tempo de retenção = 2,523 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 99%). Exemplo 20_B (tempo de retenção = 2,130 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 99%) podem ser obtidos da mesma forma.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Cellucoat (50 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 5%-40% de etanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 20_A: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ = 11,91-11,77 (m, 1H), 11,08 (br s, 1H), 7,75-7,63 (m, 3H), 7,43-7,28 (m, 3H), 5,50- 5,37 (m, 1H), 5,30-5,19 (m, 1H), 4,50-4,38 (m, 1H), 3,74-3,65 (m, 1H), 3,51-3,43 (m, 1H), 3,40-3,23 (m, 1H), 3,16-2,94 (m, 2H), 2,31-2,13 (m, 2H), 2,04-1,71 (m, 3H), 1,71- 1,58 (m, 1H). Exemplo 20_B: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ = 11,84 (s, 1H), 11,42-10,86 (m, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,77-7,62 (m, 3H), 7,46-7,24 (m, 3H), 5,51-5,37 (m, 1H), 5,34-5,18 (m, 1H), 3,67 (s, 1H), 3,47 (br d, J = 3,2 Hz, 2H), 3,33 (br s, 1H), 2,37-2,14 (m, 5H), 1,88-1,79 (m, 2H), 1,58-1,49 (m, 1H). EXEMPLO 21 (21_A E 21_B)

Etapa A: Cloreto de oxalila (0,579 g, 4,56 mmol) foi adicionado a diclorometano (15 ml), e N , N- dimetilformamida deuterada (0,5 g, 6,84 mmol) foi adicionado lentamente em gotas a 0 °C sob atmosfera de nitrogênio.

O sistema de reação foi agitado a 0 °C durante 15 min. 21-1 (1 g, 2,28 mmol) foi então dissolvido em diclorometano (5 ml) e adicionado ao sistema de reação a 0 °C.

O sistema de reação foi agitado a 15 °C durante 0,5 h.

Após a detecção da conclusão da reação, o sistema de reação adicionou solução aquosa de acetato de amônio a 10% (30 ml) e tetra-hidrofurano (20 ml) para extinguir a reação.

O solvente orgânico foi removido por evaporação rotativa e o restante foi extraído com acetato de etila (30 ml × 2). A fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução de cloreto de amônio aquosa saturada (30 ml × 3) e salmoura saturada (30 ml × 3), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar 21-2. Etapa B: 21-2 (2,15 g, 5,08 mmol) foi dissolvido em diclorometano (10 ml) e trietilamina (0,65 g, 6,42 mmol), dicarbonato de di-terc-butila (0,7 g, 3,21 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (26 mg, 0,214 mmol) foram adicionados.

O sistema de reação foi agitado a 15 °C durante 1 h.

O sistema de reação foi concentrado por evaporação rotativa sob pressão reduzida e, em seguida, adicionado com acetato de etila (60 ml). A fase orgânica foi lavada com solução de cloreto de amônio aquosa saturada (30 ml × 3) e salmoura saturada (50 ml), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar 21-3. Etapa C: 21-3 (1,2 g, 2,11 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (8 ml) e metanol (2 ml). O sistema de reação foi resfriado a 0 °C e adicionado com boro- hidreto de sódio deuterado (120 mg, 3,17 mmol). O sistema de reação foi agitado a 0 °C durante 0,5 h.

O sistema de reação foi adicionado com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (30 ml) para extinguir a reação e extraída com acetato de etila (30 ml × 2). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com água (30 ml), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar 21-4. Pode ser feita referência ao método do Exemplo 3 para obter, a partir do Composto 21-4, dois isômeros com configurações diferentes: 21_AA (tempo de retenção = 1,489 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e 21_BB (tempo de retenção = 1,558 min, valor ee (excesso enantiomérico): 97%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 21_A (tempo de retenção = 1,857 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 21_B (tempo de retenção = 2,663 min, valor ee (excesso enantiomérico): 97%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Chiralpak IG-3 (50 mm×4,6 mm, I.D. 3 μm); fase móvel: 40% de metanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 21_A: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 1,58-1,74 (m, 1H), 1,85 (br dd, J = 13,63, 7,27 Hz, 2H), 2,25 (td, J = 12,17, 7,09

Hz, 1H), 2,99-3,16 (m, 2H), 4,38-4,53 (m, 1H), 7,24-7,48 (m, 3H), 7,60-7,80 (m, 3H), 8,22 (br s, 1H), 11,07 (br s, 1H), 11,85 (br s, 1H). Exemplo 21_B: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 1,61-2,01 (m, 3H), 2,21-2,35 (m, 1H), 3,04-3,22 (m, 2H), 4,54 (br s, 1H), 7,27- 7,47 (m, 3H), 7,60-7,81 (m, 3H), 8,26 (br s, 1H), 11,08 (br s, 1H), 11,89 (br s, 1H). EXEMPLO 22 (22_A E 22_B)

Referência foi feita ao Exemplo 3 para método de síntese.

Para o Exemplo 22, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: WHELK-O1 (250 mm × 50 mm, 10 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em etanol; gradiente de eluição: 40% -40%, 2,8 min; 120 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 22_AA (tempo de retenção = 1,411 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e 22_BB (tempo de retenção = 1,613 min, valor ee (excesso enantiomérico): 99%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 22_A (tempo de retenção = 1,523 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 22_B (tempo de retenção = 3,001 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Chiralpak AD-3 (50 mm×4,6 mm, I.D. 3 μm); fase móvel: 40% de metanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 22_A: RMN de H (400 MHz, metanol deuterado) δ ppm 8,49 (s, 1H), 7,63-7,61 (m, 1H), 7,55-7,53 (m, 1H), 7,473-7,468 (m, 2H), 7,45-7,38 (m, 1H),

5,32-5,28 (d, J = 14,4 Hz, 1H), 5,11-5,08 (d, J = 14,4 Hz, 1H), 4,70-4,68 (m, 1H), 3,50- 3,44 (m, 2H), 2,57-2,51 (m. 1H), 2,26-2,18 (m, 3H). Exemplo 22_B: RMN de H (400 MHz, metanol deuterado) δ ppm 8,53 (s, 1H), 7,63-7,57 (m, 1H), 7,553-7,547 (m, 1H), 7,49-7,47 (m, 2H), 7,43-7,40 (m, 1H), 5,34-5,31 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 5,14-5,10 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 4,70-4,66 (m, 1H), 3,49- 3,44 (m, 2H), 2,55 (s. 1H), 2,30-2,22 (m, 3H). EXEMPLO 23 (23_A E 23_B)

Referência foi feita ao Exemplo 21 para método de síntese.

Para o Exemplo 23, após a desproteção com ácido trifluoroacético, Exemplo 23_A (tempo de retenção = 3,712 min, valor ee (excesso enantiomérico): 99%) e Exemplo 23_B (tempo de retenção = 3,397 min, valor ee (excesso enantiomérico): 97%) foram obtidos.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Cellucoat (50 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 10%-40% de isopropanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 23_A: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 1,50 (s, 3H) 1,68-1,79 (m, 1H) 1,87-1,98 (m, 1H) 2,07-2,18 (m, 2H) 2,91-3,01 (m, 1H) 3,13-3,28 (m, 1H) 7,22-7,49 (m, 3H) 7,61-7,82 (m, 3H) 8,20 (s, 1H) 11,07 (s, 1H) 11,85 (s, 1H) Exemplo 23_B: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 1,50 (s, 3H) 1,69-1,81 (m, 1H) 1,88-1,98 (m, 1H) 2,08-2,18 (m, 2H) 2,89-3,06 (m, 1H) 3,14-3,31 (m, 1H) 7,25-7,48 (m, 3H) 7,62-7,82 (m, 3H) 8,23 (s, 1H) 11,08 (s,

1H) 11,87 (s, 1H). EXEMPLO 24 (24_A E 24_B)

Referência foi feita ao Exemplo 3 para método de síntese.

Para o Exemplo 24, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: AD-H (250 mm × 30 mm, 5 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em isopropanol; gradiente de eluição: 30% - 30%, 1,5 min; 45 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 24_AA (tempo de retenção = 1,474 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 99%) e 24_BB (tempo de retenção = 1,560 min, valor ee (excesso enantiomérico): 94%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 24_A (tempo de retenção = 2,298 min, valor ee (excesso enantiomérico): 99%) e Exemplo 24_B (tempo de retenção = 2,115 min, valor ee (excesso enantiomérico): 88%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Cellucoat (50 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 5%-40% de isopropanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 24_A: RMN de H (400 MHz, metanol deuterado) δ 8,54 (br s, 1H), 7,60-7,70 (m, 4H), 7,54 (dd, J = 2,26, 10,54 Hz, 1H), 7,40 (dd, J = 2,26, 9,03 Hz, 1H), 5,40-5,55 (m, 1H), 5,23-5,37 (m, 1H), 4,70 (br dd, J = 6,90, 9,54 Hz, 1H), 3,40- 3,61 (m, 2H), 2,48-2,64 (m, 1H), 2,14-2,43 (m, 3H). Exemplo 24_B: RMN de H (400 MHz, metanol deuterado) δ 8,52 (br s, 1H), 7,63 (q, J = 8,41 Hz, 4H), 7,53 (dd, J = 2,20, 10,48 Hz, 1H), 7,38 (dd, J = 2,26, 9,03 Hz, 1H), 5,38-5,53 (m, 1H), 5,24-5,35 (m, 1H), 4,71 (br dd, J = 6,90, 9,41 Hz, 1H),

3,43-3,61 (m, 2H), 2,48-2,62 (m, 1H), 2,18-2,39 (m, 3H). EXEMPLO 25 (25_A E 25_B)

Etapa A: 25-1 (25 g, 129,42 mmol) foi dissolvido em diclorometano (250 ml) e trietilamina (26,19 g, 258,83 mmol), 4-dimetilaminopiridina (3,16 g, 25,88 mmol), dicarbonato de di-terc-butila (31,07 g, 142,36 mmol) foram adicionados a 0 °C.

O sistema de reação foi agitado a 25 °C durante 2 h.

O sistema de reação foi lavado com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (80 ml × 3) e salmoura saturada (50 ml × 2), seco sobre sulfato de sódio anidro, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para gerar 25-2. Etapa B: Diisopropilamina (13,80 g, 136,38 mmol) foi dissolvida em tetra-hidrofurano (60 ml) e n- butil-lítio (2,5 M, 47,73 ml) foi adicionado em gotas ao sistema de reação a -78 °C sob atmosfera de nitrogênio, e a adição em gotas foi concluída dentro de meia hora.

O sistema de reação foi agitado a 0 °C durante meia hora e, em seguida, adicionado em gotas a outro frasco de três tubuladuras contendo uma solução de 25-2 (25 g, 285,14 mmol) e borato de triisopropila (24,05 g, 127,86 mmol) em tetrahidrofurano (200 ml) a 0 °C sob atmosfera de nitrogênio, e a adição em gotas foi completada rapidamente a 0 °C.

O sistema de reação resultante foi agitado a 0 °C durante 1 h.

O sistema de reação foi então adicionado com solução de ácido acético (50 ml) para extinguir a reação, diluído com água (60 ml) e extraído com acetato de etila (60 ml × 3). A fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução de cloreto de amônio aquosa saturada (50 ml × 3) e salmoura saturada (40 ml × 2), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar um produto em bruto.

O produto bruto foi empastado com acetonitrila (100 ml) e solução aquosa (300 ml), e o bolo de filtro foi seco com uma bomba de óleo para gerar 25-3. Etapa C: 25-3 (45 g, 133,49 mmol) foi adicionado a uma solução de ácido trifluoroacético (200 ml) a 0 °C em três porções, e o sistema de reação foi agitado a 0 °C durante 1 h sob atmosfera de nitrogênio.

O sistema de reação foi então vertido em água gelada (300 ml) para precipitar um sólido, e uma torta de filtro foi obtida e concentrada sob pressão reduzida com uma bomba de óleo para gerar 25-4. Etapa D: 25-5 (25 g, 105,98 mmol) foi dissolvido em tetrahidrofurano (100,00 ml) e, em seguida, adicionado em gotas a um frasco de três gargalos contendo chips de magnésio (2,58 g, 105,98 mmol) e iodo (489,05 mg, 1,93 μmol) a 70 °C sob atmosfera de nitrogênio, e a adição em gotas foi completada dentro de meia hora.

O sistema de reação foi adicionado em gotas a outro frasco de três gargalos contendo uma solução de 2-oxopirrolidina-1-carboxilato de terc- butila (17,84 g, 96,34 mmol) em tetra-hidrofurano (150 ml) a -70 °C sob atmosfera de nitrogênio, e o a adição em gotas foi concluída em meia hora.

O sistema de reação resultante foi agitado a -70 °C durante 2 h e, em seguida, aquecido a 10 °C e agitado durante 1 h.

O sistema de reação foi adicionado com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (60 ml) para extinguir a reação e extraída com acetato de etila (60 ml × 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (50 ml), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida.

O resíduo foi purificado por uma coluna de gel de sílica para gerar 25-6. Etapa E: 25-6 (50 g, 146,10 mmol) foi adicionado a ácido trifluoroacético (250 ml) a 0 °C.

O sistema de reação foi agitado a 15 °C durante 12 h.

O sistema de reação foi ajustado para pH = 14 com solução aquosa de hidróxido de sódio a 40% e um sólido amarelo foi precipitado.

A mistura resultante foi filtrada e o bolo do filtro foi lavado com uma pequena quantidade de água e sujeito a evaporação rotativa para gerar 25-7. Etapa F: 25-7 (15 g, 66,94 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (150 ml). O sistema de reação foi resfriado a -78 °C sob atmosfera de nitrogênio, e dietil eterato de trifluoreto de boro (19 g, 133,87 mmol) foi adicionado em gotas ao sistema de reação, e a adição em gotas foi completada dentro de meia hora.

O sistema de reação foi agitado a -78 °C durante meia hora.

Solução de metillítio (1,6 M, 83,67 ml) foi então adicionada em gotas ao sistema de reação.

O sistema de reação foi aquecido lentamente a 78 °C e agitado durante 19,5 h.

O sistema de reação foi resfriado à temperatura ambiente, adicionado com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (100 ml) para extinguir a reação, adicionado com água (30 ml) e extraído com acetato de etila (80 ml × 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (30 ml × 2), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar 25-8. Etapa G: 25-8 (16 g, 66,63 mmol) foi dissolvido em diclorometano (150 ml) e trietilamina (20,23 g, 199,88 mmol) foi adicionada a 0 °C, seguido pela adição de dicarbonato de di-terc-butila (29,08 g, 133,26 mmol). O sistema de reação foi agitado a 15 °C durante 1 h.

O sistema de reação foi concentrado por evaporação rotativa sob pressão reduzida, adicionado com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (60 ml) e extraído com acetato de etila (80 ml × 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (30 ml × 3), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar 25-9. Etapa H: 25-9 (9 g, 26,45 mmol) e 25-4 (7,52 g, 31,74 mmol) foram dissolvidos em éter dimetílico de etilenoglicol (100 ml) e água (20 ml) e bicarbonato de sódio (6,67 g, 79,35 mmol) e Adicionou-se dicloreto de [1,1-bis (di- terc- butilfosfino) ferroceno]paládio (1,72 g, 2,65 mmol). Após purga com nitrogênio três vezes, o sistema de reação foi agitado a 80 °C durante 12 h sob atmosfera de nitrogênio.

O sistema de reação foi concentrado por evaporação rotativa sob pressão reduzida, adicionado com salmoura saturada (60 ml) e extraído com acetato de etila (60 ml × 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (50 ml), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar um resíduo.

O resíduo foi purificado por uma coluna de gel de sílica para gerar 25-10. Etapa I: Cloreto de oxalila (5,61 g, 44,20 mmol) foi adicionado a diclorometano (150 ml), e N , N- dimetilformamida (4,85 g, 66,30 mmol) foi adicionado lentamente em gotas a 0 °C sob atmosfera de nitrogênio.

O sistema de reação foi agitado a 0 °C durante 15 min. 25-10 (10 g, 22,10 mmol) foi então dissolvido em diclorometano (50 ml) e adicionado ao sistema de reação a 0 °C.

O sistema de reação foi agitado a 15 °C durante 0,5 h.

O sistema de reação foi adicionado com solução aquosa de acetato de amônio a 10% (100 ml) e tetra-hidrofurano (100 ml) para extinguir a reação e extraída com acetato de etila (45 ml × 2). A fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução de cloreto de amônio aquosa saturada (50 ml × 3) e salmoura saturada (50 ml × 3), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar 25-11. Etapa J: 25-11 (10,62 g, 22,10 mmol) foi dissolvido em diclorometano (80 ml) e trietilamina (6,71 g, 66,30 mmol), dicarbonato de di-terc-butila (9,65 g, 44,20 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (810,01 mg, 6,63 mmol) foram adicionados a 0 °C.

O sistema de reação foi agitado a 15 °C durante 1 h.

O sistema de reação foi concentrado por evaporação rotativa sob pressão reduzida, adicionado com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (60 ml) e extraído com acetato de etila (60 ml × 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura saturada (30 ml × 3), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar 25-12. Etapa K: 25-12 (12,75 g, 21,96 mmol) foi dissolvido em tetra- hidrofurano (100 ml) e metanol (25 ml). O sistema de reação foi resfriado a 0 °C e adicionado com boro-hidreto de sódio (1,25 g, 32,94 mmol). O sistema de reação foi agitado a 0 °C durante 40 min.

O sistema de reação foi adicionado com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (80 ml) para extinguir a reação e extraída com acetato de etila (80 ml × 2). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com água (50 ml), secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para gerar 25-13. Etapa L: 25-13 (12,79 g, 21,95 mmol) foi dissolvido em diclorometano (150 ml) e trietilamina (4,44 g, 43,90 mmol) foi adicionada, seguida pela adição de cloreto de metanossulfonila (3,02 g, 26,34 mmol) a 0 °C sob nitrogênio atmosfera.

O sistema de reação foi agitado a 0 °C durante 1 h.

O sistema de reação foi concentrado por evaporação rotativa sob pressão reduzida e, em seguida, adicionado com acetato de etila (80 ml). A fase orgânica foi lavada com solução de cloreto de amônio aquosa saturada (30 ml × 2) e salmoura saturada (20 ml × 2), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar 25-14. Etapa M: 25-14 (14,45 g, 21,87 mmol) foi dissolvido em N , N- dimetilformamida (150 ml) e carbonato de sódio (4,64 g, 43,74 mmol) e N- hidroxiftalimida (5,35 g, 32,80 mmol) foram adicionados.

O sistema de reação foi agitado a 65 °C durante 12 h.

O sistema de reação foi adicionado com solução aquosa (60 ml) e extraído com acetato de etila (80 ml × 2). A fase orgânica foi lavada com solução de cloreto de amônio aquosa saturada (50 ml × 3) e salmoura saturada (50 ml × 3), seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para gerar um resíduo.

O resíduo foi purificado por uma coluna de gel de sílica para gerar 25-15. Etapa N: 25-15 (15 g, 20,61 mmol) foi dissolvido em metanol (200 ml), e 98% de hidrato de hidrazina (3,10 g, 61,83 mmol) foi adicionado.

O sistema de reação foi agitado a 65 °C durante 2h sob atmosfera de nitrogênio.

O sistema de reação foi filtrado e concentrado sob pressão reduzida para gerar um resíduo.

O resíduo foi purificado por coluna de gel de sílica para gerar 25-16. Etapa O: O composto 25-16 foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: AD-H (250 mm × 30 mm, 5 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em isopropanol; gradiente de eluição: 25% -25%, 2,7 min; 400 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 25_AA (tempo de retenção = 2,161 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e 25_BB (tempo de retenção = 2,353 min, valor ee (excesso enantiomérico): 97%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 25_A (tempo = 3,461 min, valor ee (excesso enantiomérico): 98%) e Exemplo 25_B (tempo = 3,128 min, valor ee (excesso enantiomérico): 90%),

respectivamente.

Método para medir o valor ee (excesso enantiomérico): coluna de separação: Chiralcel Cellucoat (50 mm × 4,6 mm, ID 3 μm); fase móvel: 10%-40% de isopropanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 25_A: RMN de 1H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ = 12,00 (br s, 1H), 11,30 (br s, 1H), 8,23 (br s, 1H), 7,62 (br d, J = 7,75 Hz, 4H), 7,45 (br d, J = 9,13 Hz, 2H), 5,44 (br d, J = 14,51 Hz, 1H), 5,14-5,31 (m, 1H), 2,99-3,42 (m, 2H), 1,89-2,23 (m, 4H), 1,53 (br s, 3H) Exemplo 25_B: RMN de 1H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ = 12,01 (br s, 1H), 11,30 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,63 (s, 4H), 7,40-7,49 (m, 2H), 5,45 (br d, J = 14,55 Hz, 1H), 5,22 (dd, J = 7,40, 14,73 Hz, 1H), 3,28 (br d, J = 8,44 Hz, 2H), 1,98-2,31 (m, 4H), 1,56 (s, 3H). EXEMPLO 26 (26_A E 26_B)

Referência foi feita ao Exemplo 6 para método de síntese.

Finalmente, Exemplo 26_A (tempo de retenção = 11.430 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 26_B (tempo de retenção = 8,159 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) foram obtidos através da desproteção com ácido trifluoroacético.

Método de HPLC quiral: coluna de separação: Chiralpak IA-3 (50 mm × 4,6 mm, 3 μm); fase móvel: fase A, n- heptano (0,05% dietilamina), fase B, 8% isopropanol + acetonitrilo (4: 1) (0,05% dietilamina); quociente de vazão: 1 ml/min; comprimento de onda: 220 nm.

Exemplo 26_A: RMN de H (400 MHz, metanol deuterado) δ 8,54 (s, 1H), 7,63 (t, J = 8,19 Hz, 1H), 7,55 (dd, J = 2,25, 10,51 Hz, 1H), 7,37-7,48 (m, 3H), 5,41-5,52 (m, 1H), 5,27-5,37 (m, 1H), 3,47-3,56 (m, 1H), 3,37-3,45 (m, 1H), 2,39-2,58 (m, 2H), 2,11-2,38 (m, 2H), 1,70 (s, 3H). Exemplo 26_B: RMN de H (400 MHz, metanol deuterado) δ 8,52 (s, 1H), 7,63 (t, J = 8,25 Hz, 1H), 7,56 (dd, J = 2,31, 10,44 Hz, 1H), 7,37-7,50 (m, 3H), 5,43-5,51 (m, 1H), 5,28-5,36 (m, 1H), 3,55 (ddd, J = 4,82, 9,35, 11,85 Hz, 1H), 3,38- 3,48 (m, 1H), 2,41-2,62 (m, 2H), 2,16-2,39 (m, 2H), 1,72 (s, 3H). EXEMPLO 27 (27_A E 27_B)

Foi feita referência ao Exemplo 21 e Exemplo 8 para o método de síntese.

Para o Exemplo 27, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: AD-H (250 mm × 30 mm, 5 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em isopropanol; gradiente de eluição: 25% - 25%, 4,1 min; 104 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 27_AA (tempo de retenção = 1,391 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 98%) e 27_BB (tempo de retenção = 1,482 min, valor ee (excesso enantiomérico): 94%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 27_A (tempo de retenção = 2,294 min, valor ee (excesso enantiomérico): 99%) e Exemplo 27_B (tempo de retenção = 2,116 min, valor ee (excesso enantiomérico): 93%), respectivamente.

Exemplo 27_A: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 1,76-2,06 (m, 3H), 2,30 (ddd, J = 11,57, 7,13, 4,19 Hz, 1H), 3,11-3,23 (m, 2H), 7,32 (t, J = 7,75 Hz, 1H), 7,40-7,53 (m, 2H), 7,63-7,79 (m, 3H), 8,26 (s, 1H), 11,11 (br s, 1H), 11,93 (s, 1H). Exemplo 27_B: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 1,77-2,04 (m, 3H), 2,24-2,40 (m, 1H), 3,09-3,33 (m, 2H), 7,33 (t, J = 7,75 Hz, 1H), 7,40-7,51 (m, 2H), 7,64-7,78 (m, 3H), 8,21 (s, 1H), 11,11 (s, 1H), 11,92 (s, 1H). EXEMPLO 28 (28_A E 28_B)

Referência foi feita ao Exemplo 3 para método de síntese.

Para o Exemplo 28, antes da desproteção de Boc, o composto foi separado por coluna de HPLC quiral (coluna de separação: AD-H (250 mm × 30 mm, 5 μm); na fase móvel: 0,1% de amônia em isopropanol; gradiente de eluição: 20% - 20%, 2,3 min; 960 min) para gerar dois isômeros com configurações diferentes: 28_AA (tempo de retenção = 1,474 min, valor de ee (excesso enantiomérico): 99%) e 28_BB (tempo de retenção = 1,560 min, valor ee (excesso enantiomérico): 94%), que foram desprotegidos com ácido trifluoroacético para gerar o Exemplo 28_A (tempo de retenção = 2,619 min, valor ee (excesso enantiomérico): 100%) e Exemplo 28_B (tempo de retenção = 2,350 min, valor ee (excesso enantiomérico): 96%), respectivamente.

SFC (cromatografia de fluido supercrítico) método: coluna de separação: Chiralpak AD-3 (50 mm×4,6 mm, I.D. 3 μm); fase móvel: 40% isopropanol (0,05% de dietilamina) em CO2; taxa de fluxo: 3 ml/min; comprimento de onda: 220 nm. Exemplo 28_A: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 1,56-1,70 (m, 1H) 1,77-1,93 (m, 2H) 2,18-2,32 (m, 1H) 2,93-3,18 (m, 2H) 4,45 (br t, J = 7,47 Hz, 1 H) 5,18-5,50 (m, 2H) 7,31-7,52 (m, 4H) 7,72 (t, J = 7,97 Hz, 1H) 8,25 (s, 1H) 11,29 (br s, 1H) 12,01 (s, 1H). Exemplo 28_B: RMN de H (400 MHz, sulfóxido de dimetila deuterado) δ ppm 1,67 (dq, J = 12,25, 8,17 Hz, 1H), 1,78-1,98 (m, 2H), 2,18-2,33 (m, 1H), 2,99- 3,15 (m, 2H), 4,48 (br t, J = 7,65 Hz, 1H), 5,15-5,30 (m, 1H), 5,35-5,50 (m, 1H), 7,31- 7,52 (m, 4H), 7,64-7,79 (m, 1H), 8,27 (s, 1H), 11,30 (br s, 1H), 12,04 (s, 1H).

EXEMPLO EXPERIMENTAL 1: EXPERIMENTO ENZIMÁTICO PARP-1 Materiais experimentais: compostos de teste; Kit de ensaio HT Universal Chemiluminescent PARP (adquirido em TREVIGEN); PBS (adquirido de Wisent); Triton X-100 (adquirido na Macklin); Analisador de múltiplos marcadores Envision (PerkinElmer).

PROCEDIMENTOS EXPERIMENTAIS: (I)PREPARAÇÃO DE REAGENTES:

1.Solução de lavagem: Triton X-100 foi adicionado a PBS 1 vez e a concentração final de Triton X-100 foi de 0,1%.

2.Tampão PARP 1 vez: o tampão PARP 20 vezes no kit foi submetido a diluição 20 vezes com água para preparar um tampão PARP 1 vez. Este tampão foi usado para preparar o composto, solução de enzima e solução de substrato.

3.Solução de diluente de Strep 1 vez: o diluente de Strep 10 vezes no kit foi submetido a diluição de 10 vezes com água para preparar uma solução de diluente de Strep 1 vez. (II)PREPARAÇÃO DE COMPOSTOS DE TESTE: Os compostos de teste foram diluídos em série 5 vezes até a 8ª concentração com uma pipeta multicanal, ou seja, de 200 μM a 2,56 nM, com a concentração de

DMSO sendo 100%. 2 μl de cada um dos inibidores em vários gradientes de concentração foram adicionados a uma placa intermediária de composto e 38 μl do tampão PARP 1 vez foi então adicionado; os dois foram bem misturados para uso e a concentração de DMSO foi de 5%. (III)MÉTODO EXPERIMENTAL: a) O tampão PARP 1 vez foi adicionado a uma placa de teste a 50 μl por poço e incubado a 25 °C por 30 min. b) Depois que a incubação foi completada, o líquido na placa de teste foi descartado e cada um dos compostos em vários gradientes de concentração foi pipetado da placa intermediária de composto e adicionado à placa de teste a 10 μl por poço.

Um experimento de poço duplicado foi realizado. c) A placa de teste foi adicionada com a solução de enzima (0,5 UI) a 15 μl por poço.

O composto e a enzima foram incubados juntos a 25 °C durante 10 min. d) Depois que a incubação foi concluída, 25 μl do Cocktail PARP 1 vez (compreendendo 2,5 μl de Coquetel PARP 10 vezes, 2,5 μl de DNA Ativado 10 vezes e 20 μl de tampão PARP 1 vez) foram adicionados a cada poço de a placa de teste.

A placa de teste foi incubada a 25 °C durante 1 h.

A concentração final do composto foi de 2 μM a 0,0256 nM e a concentração de DMSO foi de 1%. e) Após a incubação ser concluída, a placa de teste foi lavada duas vezes com 200 μl de solução de lavagem por poço e, em seguida, lavada duas vezes com 200 μl de PBS por poço. f) O Strep-HRP no kit foi submetido a uma diluição de 500 vezes com a solução Strep-Diluent 1 vez, adicionado à placa de teste a 50 μl por poço e, em seguida, incubado a 25 °C por 1 h. g) Após a incubação ser concluída, a placa de teste foi lavada duas vezes com 200 μl de solução de lavagem por poço e, em seguida, lavada duas vezes com 200 μl de PBS por poço.

PeroxyGlow A e B no kit foram misturados na proporção de 1: 1 e a solução misturada foi adicionada à placa de teste a 100 μl por poço. A quimioluminescência foi lida imediatamente usando um analisador multi-marcador PerkinElmer Envision com um tempo de integração de 0,5 s. Análise de dados: os dados originais foram convertidos para inibição usando a equação (amostra - Min)/(Max - Min) × 100%, e o valor de IC50 foi então ajustado por curva usando quatro parâmetros (obtidos a partir do "log (inibidor) vs . modelo de inclinação variável de resposta "no GraphPad Prism). A Tabela 1 fornece a atividade inibitória enzimática dos compostos revelados no presente documento contra PARP1.

RESULTADOS EXPERIMENTAIS: A PARP-1 quinase atividades inibidoras dos compostos aqui descritos foram determinados pelo método experimental acima e a atividades inibidoras in vitro em enzimática (IC50) dos compostos estão apresentados na Tabela 1. Conclusão experimental: os compostos revelados no presente documento mostram excelente atividade inibidora contra PARP1.

TABELA 1. ATIVIDADE DE QUINASE DE PARP-1 DOS COMPOSTOS Número de Número de PARP1 (IC50, nM) PARP1 (IC50, nM) composto composto Exemplo 6_A 2,8 Exemplo 23_A 3,7 Exemplo 8_A 2,7 Exemplo 24_A 2,0 Exemplo 11_A 3,6 Exemplo 24_B 2,5 Exemplo 15_B 7,1 Exemplo 25_A 2,3 Exemplo 16_B 2,8 Exemplo 25_B 2,8 Exemplo 19_B 3,5 Exemplo 26_A 3,4 Exemplo 20_B 3,8 Exemplo 26_B 3,6 Exemplo 21_B 5,6 Exemplo 28_A 2,9 Exemplo 22_A 4,9 Exemplo 28_B 3,4 Exemplo 22_B 4,2 / /

EXEMPLO EXPERIMENTAL 2: EXPERIMENTO ANTI-PROLIFERAÇÃO EM CÉLULAS CTG DE MDA-MB-436 Materiais experimentais: compostos de teste; Meio RPMI-1640; soro fetal bovino; antibiótico penicilina/estreptomicina; Linha celular MDA-MB-436; Analisador de múltiplos marcadores Envision (PerkinElmer).

PROCEDIMENTOS EXPERIMENTAIS:

1. Método Experimental: As células MDA-MB-436 foram semeadas em uma placa branca de 96 poços adicionando 80 μl de suspensão de células (contendo 3.000 células MDA-MB- 436) a cada poço. A placa de células foi incubada durante a noite numa incubadora de CO 2. Os compostos de teste foram diluídos em série 5 vezes até a 8ª concentração com uma pipeta multicanal, ou seja, de 2 mM a 26 nM, e um experimento de poço duplicado foi realizado. 78 μl de meio foram adicionados a uma placa intermediária, 2 μl de cada um dos compostos diluídos em série foram transferidos para os poços correspondentes da placa intermediária e, após a mistura, a mistura foi transferida para a placa de células a 20 μl por poço. A placa de células foi incubada numa incubadora de CO2 durante 7 dias. Outra placa de células foi fornecida para ler os valores de sinal no dia da adição do composto e esses valores de sinal foram usados como valores máximos na análise de dados. O Promega CellTiter-Glo foi adicionado a esta placa de células a 25 μl por poço e os sinais de luminescência foram estabilizados por incubação por 10 min em temperatura ambiente. As leituras foram feitas usando um analisador de múltiplos marcadores PerkinElmer Envision. O Promega CellTiter-Glo foi adicionado à placa de células a 25 μl por poço e os sinais de luminescência foram estabilizados por incubação por 10 min em temperatura ambiente. As leituras foram feitas usando um analisador de múltiplos marcadores PerkinElmer Envision.

2. Análise de dados: os dados originais foram convertidos para inibição usando a equação (amostra - Min)/(Max - Min) × 100%, e o valor de IC50 foi então ajustado por curva usando quatro parâmetros (obtidos a partir do "log (inibidor) vs . modelo de inclinação variável de resposta "no GraphPad Prism). A Tabela 2 fornece a atividade inibidora dos compostos revelados no presente documento contra a proliferação de células MDA-MB-436. Resultados experimentais: as atividades antiproliferativas dos compostos divulgados neste documento contra células MDA-MB-436 mutadas com BRCA1 foram determinadas pelo método experimental acima, e a metade das concentrações inibitórias máximas (IC 50) dos compostos para anti-proliferação in vitro são mostrados na Tabela 2. Conclusão experimental: os compostos revelados no presente documento têm excelente atividade antiproliferativa contra células MDA-MB-436 mutadas em BRCA1.

TABELA 2. ATIVIDADE INIBIDORA DE COMPOSTOS REVELADOS NO PRESENTE DOCUMENTO EM RELAÇÃO À PROLIFERAÇÃO CELULAR DE MDA- MB-436 Número de Número de MDA-MB-436 (IC50, nM) MDA-MB-436 (IC50, nM) composto composto Exemplo 1_A 18,8 Exemplo 15_A 134,8 Exemplo 1_B 60,5 Exemplo 15_B 89,6 Exemplo 2_A 75,2 Exemplo 16_B 44,6 Exemplo 2_B 50,2 Exemplo 17_B 163,6 Exemplo 3_A 28,1 Exemplo 18 134,3 Exemplo 3_B 26,5 Exemplo 19_B 23,97 Exemplo 4_A 40,5 Exemplo 20_B 61,6 Exemplo 4_B 11,0 Exemplo 21_A 80,6 Exemplo 6_A 16,9 Exemplo 21_B 69,8 Exemplo 6_B 47,6 Exemplo 22_A 125,0 Exemplo 7_A 52,6 Exemplo 22_B 61,6 Exemplo 7_B 39,5 Exemplo 23_A 30,9 Exemplo 8_A 20,8 Exemplo 23_B 108,3

Exemplo 8_B 23,5 Exemplo 24_A 9,6 Exemplo 9_A 100,7 Exemplo 24_B 4,4 Exemplo 10 27 Exemplo 25_A 12,3 Exemplo 11_A 70,2 Exemplo 25_B 20,7 Exemplo 11_B 156,8 Exemplo 26_A 8,4 Exemplo 12_A 131,2 Exemplo 26_B 29,3 Exemplo 13_A 117,7 Exemplo 27_A 21,1 Exemplo 13_B 184,5 Exemplo 27_B 69,6 Exemplo 14_A 165,0 Exemplo 28_A 73 Exemplo 14_B 195,5 Exemplo 28_B 50

EXEMPLO EXPERIMENTAL 3: EXPERIMENTO ANTI-PROLIFERAÇÃO EM CÉLULAS CTG DE MDA-MB-231

Materiais experimentais: compostos de teste; Meio R DMEM; soro fetal bovino; antibiótico penicilina/estreptomicina; Linha celular MDA-MB-231; Analisador de múltiplos rótulos Envision.

Método Experimental: As células MDA-MB-231 foram semeadas em uma placa branca de 96 poços adicionando 80 μl de suspensão de células (contendo 5.000 células MDA-MB- 231) a cada poço.

A placa de células foi incubada durante a noite numa incubadora de CO2. Oito pontos de concentração foram definidos para cada composto, os compostos de teste foram diluídos em série 3 vezes até a 8ª concentração com uma pipeta multicanal, ou seja, de 2 mM a 920 nM, e um experimento de poço duplicado foi realizado. 78 μl de meio foram adicionados a uma placa intermediária, 2 μl de cada um dos compostos diluídos em série foram transferidos para os poços correspondentes da placa intermediária e, após a mistura, a mistura foi transferida para a placa de células a 20 μl por poço.

A placa de células foi incubada numa incubadora de CO2 durante 3 dias.

Outra placa de células foi fornecida para ler os valores de sinal no dia da adição do composto e esses valores de sinal foram usados como valores máximos na análise de dados.

O Promega CellTiter-Glo foi adicionado a esta placa de células a 25 μl por poço e os sinais de luminescência foram estabilizados por incubação por 10 min em temperatura ambiente. As leituras foram feitas usando um analisador de múltiplos marcadores PerkinElmer Envision. O Promega CellTiter-Glo foi adicionado à placa de células a 25 μl por poço e os sinais de luminescência foram estabilizados por incubação por 10 min em temperatura ambiente. As leituras foram feitas usando um analisador de múltiplos marcadores PerkinElmer Envision. Análise de dados: os dados originais foram convertidos para inibição usando a equação (amostra - Min)/(Max - Min) × 100% , e o valor de IC50 foi então ajustado por curva usando quatro parâmetros (obtidos a partir do "log (inibidor) vs . modelo de inclinação variável de resposta "no GraphPad Prism). A Tabela 1 fornece a atividade inibidora dos compostos revelados no presente documento contra a proliferação de células MDA-MB-231. Resultados experimentais: as atividades anti-proliferativas dos compostos aqui descritos contra o tipo selvagem de BRCA-MDA-MB-231 foram determinados pelo método experimental acima, e as concentrações máximas metade inibidoras (IC50) dos compostos para in vitro anti-proliferação são mostradas na Tabela

3.

TABELA 3. ATIVIDADE INIBIDORA DOS COMPOSTOS REVELADOS NO

PRESENTE DOCUMENTO EM RELAÇÃO A BRCA DE TIPO SELVAGEM Número de composto MDA-MB-231 (IC50, nM) Exemplo 6_A > 10 μm Exemplo 11_A > 10 μm Exemplo 22_B > 10 μm Exemplo 24_A > 10 μm Exemplo 25_A > 10 μm Exemplo 26_A > 10 μm

Conclusão experimental: os compostos revelados no presente documento têm pouca atividade inibitória contra células BRCA-MDA-MB-231 de tipo selvagem, o que mostra que os compostos têm excelente seletividade. Exemplo Experimental 4: Experimento Anti-Proliferação em PARilação Materiais experimentais: compostos de teste; Meio F12K; Células Lovo; Anticorpo monoclonal de camundongo anti-Poly (ADP-ribose); IgG de cabra anti-rato marcado com FITC; peróxido de hidrogênio; DAPI; PBS; metanol; acetona; Tween-20; leite em pó desnatado; Analisador de múltiplos marcadores Envision. PREPARAÇÃO DE REAGENTES: Dia um: Células Lovo foram plaqueadas numa placa a 60.000 células/poço, e depois incubadas durante a noite a 37 °C/5% de CO 2. Dia dois: os reagentes foram preparados:

1. Solução de lavagem: Tween-20 foi adicionado a PBS 1 vez e a concentração final de Tween-20 foi de 0,05%.

2. Solução bloqueadora: leite em pó desnatado foi adicionado à solução de lavagem e a concentração final de leite em pó desnatado foi de 5%.

3. Solução estacionária celular: metanol e acetona foram misturados na proporção de 7: 3. Preparação dos compostos de teste: composto placa intermediária 1: os compostos foram diluídos para concentrações finais de 10 μM a 0,13 nM com DMSO e PBS, e a concentração de DMSO foi de 1%. Placa intermediária de composto 2: os compostos foram diluídos para concentrações finais de 10 μM a 0,13 nM com DMSO e PBS contendo peróxido de hidrogênio 50 mM e a concentração de DMSO foi de 1%. PROCEDIMENTOS EXPERIMENTAIS:

1. O sobrenadante celular foi removido e o composto foi transferido da placa de composto intermediário 1 para a placa de células a 40 μl por poço e a mistura foi incubada a 37 °C por 30 min. Poços de composto: composto, DMSO 1%; Controles negativos e positivos: 1% de DMSO adicionado; Controles em branco: poços sem células, PBS adicionado.

2. Depois que a incubação foi concluída, o composto foi transferido da placa intermediária de composto 2 para a placa de células a 40 μl por poço e a concentração final de H 2 O 2 foi de 25 mM. Poços compostos: composto + 25 mM H 2 O 2 Controles positivos e negativos: 1% de DMSO + 25 mM de H2O2 Controles em branco: poços livres de células, PBS adicionado

4. Depois que a incubação foi concluída, a placa de células foi lavada uma vez com PBS pré-resfriado em gelo e adicionado com 100 μl de solução estacionária de células pré-resfriadas por poço. Depois que a placa de células foi deixada em repouso a -20 °C por 10 min, a solução estacionária de células foi sacudida.

5. Depois de secar ao ar, a placa de células foi lavada com PBS a 200 μl por poço e, em seguida, o PBS foi descartado.

6. A placa de células foi adicionada com solução de bloqueio a 100 μl por poço e incubada a 25 °C por 30 min, após o que a solução de bloqueio foi removida.

7. O anticorpo anti-PAR que foi diluído em solução de bloqueio na proporção de 1:50, foi adicionado à placa de células a 25 μl por poço e, em seguida, a mistura foi incubada a 25 °C por 60 min. Poços de controle negativo: solução de bloqueio adicionada a 25 μl/poço Poços de controle em branco: solução de bloqueio adicionada a 25 μl/poço

8. Após o término da incubação, a placa de células foi lavada 4 vezes com 200 μl de solução de lavagem por poço, 3 min de cada vez e, em seguida, a solução de lavagem foi removida com agitação.

9. A solução de bloqueio contendo 1:50 de IgG de cabra anti-camundongo conjugado com FITC e 0,5 μg/ml de DAPI foi adicionada à placa de células a 25 μl por poço e a mistura foi incubada a 25 °C por 60 min.

10. Após o término da incubação, a placa de células foi lavada 4 vezes com 200 μl de solução de lavagem por poço, 3 min de cada vez.

11. Após a remoção do líquido, os valores de fluorescência correspondentes foram lidos no Envision: FITC: 480 nm e 530 nm; DAPI: 360 nm e 460 nm. Análise de dados: os dados originais foram normalizados usando a equação (FITC - controle negativo)/(DAPI - controle em branco), e os dados normalizados foram convertidos em inibição usando a equação (amostra - controle positivo)/(controle negativo - controle positivo) x 100%, e o valor de IC 50 foi então curva ajustada usando quatro parâmetros (obtidos a partir do modelo de "log (inibidor) versus resposta inclinação variável" em GraphPad Prism). A Tabela 1 fornece a atividade inibidora dos compostos revelados no presente documento. Resultados experimentais: a metade das concentrações inibitórias (IC 50) dos compostos revelados no presente documento contra a PARrilação são mostradas na Tabela 4.

TABELA 4. ATIVIDADE INIBIDORA DOS COMPOSTOS REVELADOS NO

PRESENTE DOCUMENTO EM RELAÇÃO À PARILAÇÃO Número de composto PARilação (IC50, nM) Exemplo 6_A 19 Exemplo 11_A 27 Exemplo 24_A 23 Exemplo 25_A 19 Exemplo 26_A 25 Conclusão experimental: os compostos revelados no presente documento têm atividade inibidora significativa contra PARrylation.

EXEMPLO EXPERIMENTAL 5: ESTUDO SOBRE A TAXA DE LIGAÇÃO DE

PROTEÍNA DE PLASMA

As taxas de ligação às proteínas dos compostos revelados no presente documento no plasma de humanos, camundongos CD-1 e ratos SD foram determinadas. 796 μl de plasma em branco foram retirados de humanos, camundongos CD-1 e ratos SD, e adicionados com 4 μl de solução de trabalho do composto de teste (400. μM) ou solução de trabalho de varfarina (400 μM) para atingir uma concentração final de 2 μM de o composto de teste e a varfarina na amostra de plasma.

As amostras foram bem misturadas.

A concentração final de DMSO da fase orgânica foi de 0,5%; 50 μl de composto de teste e amostra de plasma de varfarina foram pipetados em uma placa de recepção de amostra (três paralelos), e um volume correspondente de plasma em branco ou tampão foi adicionado imediatamente de modo que o volume final de cada poço de amostra fosse 100 μl.

A proporção do volume de plasma para tampão de diálise foi de 1: 1, e 400 μl de solução de parada foram adicionados a essas amostras, que foram usadas como amostras T0 para determinação da taxa de recuperação e estabilidade.

As amostras T0 foram armazenadas a 2-8 °C para tratamento subsequente com outras amostras dialisadas; 150 μl do composto de teste e amostra de plasma de varfarina foram adicionados a uma extremidade de entrega de droga de cada poço de diálise, e 150 μl de tampão de diálise em branco foram adicionados a uma extremidade de recebimento correspondente do poço de diálise.

A placa de diálise foi depois selada com uma membrana permeável a gás e colocado num húmida, 5% de CO2 e incubadas a 37 °C durante 4 h enquanto se agita a cerca de 100 rpm.

Após a conclusão da diálise, 50 μl da amostra de tampão dialisado e da amostra de plasma dialisada foram pipetados para uma nova placa receptora de amostra.

Um volume correspondente de plasma ou tampão em branco correspondente foi adicionado às amostras de modo que o volume final de cada poço de amostra fosse 100 μl e a proporção do volume de plasma para tampão de diálise fosse 1: 1. Todas as amostras foram submetidas à análise LC/MS após a precipitação da proteína, e as taxas de ligação da proteína e as taxas de recuperação foram calculadas pelas seguintes fórmulas: taxa de separação da proteína (%) = 100 × concentração do fármaco passando pela membrana de diálise/concentração do fármaco não passando dialisado; taxa de ligação à proteína (%) = 100 - taxa de desligamento da proteína (%); taxa de recuperação (%) = 100 × (concentração do fármaco que passa pela membrana de diálise + concentração do fármaco que não passa pelo dialisado)/concentração total do fármaco antes da diálise. Resultados experimentais: os resultados são mostrados na Tabela 5. Conclusão experimental: os compostos revelados no presente documento têm boa taxa de ligação às proteínas plasmáticas. Conclusão experimental: os compostos revelados no presente documento têm uma taxa de ligação às proteínas plasmáticas apropriada.

TABELA 5. TAXAS DE LIGAÇÃO DE PROTEÍNA PLASMÁTICA DOS

COMPOSTOS REVELADOS NO PRESENTE DOCUMENTO EM ESPÉCIES

DIFERENTES Número de Taxa de ligação de proteína plasmática composto Humano Camundongos CD-1 Ratos SD Exemplo 6_A 81,9% 79,2% 82,4% Exemplo 11_A 76,5% 89,9% 96,5% Exemplo 24_A 92,7% 96,3% 96,4% Exemplo 25_A 85,1% 89,6% 92,3% Exemplo 26_A 94,3% 92,0% 90,3% EXEMPLO EXPERIMENTAL 6: ESTUDO PARA INIBIÇÃO CONTRA ISOENZIMO CITOCROMA P450 Foi determinada a inibição dos compostos de teste contra diferentes subtipos da isoenzima do citocromo P450 humano. Os compostos de teste, um inibidor padrão (100 × concentração final) e uma solução de trabalho de substrato misto foram preparados; os microssomas congelados em um refrigerador a -80 °C foram retirados e descongelados. 2 µl de uma solução do composto de teste e o inibidor padrão foram adicionados aos poços correspondentes, e 2 µl de um solvente correspondente foram adicionados a um poço de controle não inibidor (NIC) e um poço de controle em branco (Branco); em seguida, 20 µl de uma solução de substrato misturado foram adicionados aos poços correspondentes, exceto para o poço do Branco (adição de 20 µl de PB ao poço do Branco); uma solução de microssoma de fígado humano (marcando a data após o uso e imediatamente colocada de volta ao refrigerador) foi preparada e adicionada a todos os poços a 158 µl por poço; a placa de amostra foi colocada em banho-maria a 37 °C para pré-incubação e, em seguida, foi preparada uma solução de fator de coenzima (NADPH); após 10 min, a solução NADPH foi adicionada a todos os poços a 20 µl por poço, e a placa de amostra foi agitada para misturar bem a mistura e então incubada em banho-maria a 37 °C por 10 min; em pontos de tempo correspondentes, 400 μl de solução de acetonitrila fria (padrão interno: 200 ng/ml de tolbutamida e labetalol) foram adicionados para interromper a reação; após ter sido bem misturada, a mistura na placa de amostra foi centrifugada a 4.000 rpm por 20 min para precipitar as proteínas; 200 µl de sobrenadante foram recolhidos e adicionados a 100 µl de água, e a mistura foi bem misturada e depois testada por LC/MS/MS. Resultados experimentais: os resultados são mostrados na Tabela 6. Conclusão: os compostos revelados no presente documento apresentam nenhum ou fraco efeito inibidor contra as enzimas 5 CYP. TABELA 6. RESULTADOS DA INIBIÇÃO DOS COMPOSTOS DE TESTE EM RELAÇÃO À ISOENZIMA CITOCROMO P450 Compostos de IC50 (μM) teste CYP1A2 CYP2C9 CYP2C19 CYP2D6 CYP3A4-M Exemplo 6 >50 >50 24,6 10,4 >50 Exemplo 11_A >50 >50 15,5 19,2 35,0 Exemplo 24_A 29,5 >50 17,2 6,98 >50 Exemplo 25_A >50 >50 8,33 11,6 32,9 Exemplo 26_A >50 49,7 3,31 20,2 14,1 EXEMPLO EXPERIMENTAL 7. ESTABILIDADE METABÓLICA EM

MICROSSOMAS DO FÍGADO

Objetivo experimental: testar a estabilidade metabólica de compostos de teste em microssomas de fígado de três espécies. Método Experimental: 1 μM de composto de teste e um microssoma (0,5 mg/ml) foram incubados a 37 °C na presença de um sistema de regeneração NADPH; os controles positivos foram testosterona (substrato 3A4), propilamina propiofenona (substrato 2D6) e diclofenaco (substrato 2C9), e também a 37 °C, um controle positivo foi incubado com um microssoma (0,5 mg/ml) na presença de um regenerador NADPH sistema; a reação foi interrompida por mistura direta da amostra com acetonitrila fria contendo um padrão interno em vários pontos de tempo (0, 5, 10, 20, 30 e 60 min); o composto e o microssoma foram incubados por 60 min na ausência de um sistema de regeneração NADPH; um paralelo (n = 1) foi definido em cada ponto de tempo; as amostras foram analisadas por LC/MS/MS; a concentração do composto foi caracterizada pela razão entre a área do pico do analito e a área do pico do padrão interno. Resultados experimentais: os resultados são mostrados na Tabela 7.

TABELA 7. ESTABILIDADE DOS COMPOSTOS DE TESTE REVELADOS NO

PRESENTE DOCUMENTO EM MICROSSOMAS DO FÍGADO DE DIFERENTES

ESPÉCIES Número de Teor residual após 60 min de incubação composto Humano Rato Camundongo Exemplo 6_A 53,7% 55,4% 45,6% Exemplo 11_A 73,8% 58,1% 57,1% Exemplo 24_A 60,4% 60,6% 52,3% Exemplo 25_A 35,9% 31,8% 40,7% Exemplo 26_A 29,6% 34,5% 57,7% EXEMPLO EXPERIMENTAL 8: ESTUDO FARMACOCINÉTICO DE

DOSAGEM ÚNICA EM RATINHOS Objetivo experimental: avaliar o comportamento farmacocinético usando camundongos machos C57BL/6 como animais de teste e determinar as concentrações dos compostos no plasma, fígado e líquido cefalorraquidiano após administração de dose única. Método experimental: camundongos C57BL/6 machos adultos saudáveis foram selecionados para administração intragástrica. Um composto candidato foi misturado com uma quantidade apropriada de 10% DMSO/90% (20% hidroxipropil-β-ciclodextrina), agitado em vórtice e sonicado para preparar uma solução transparente de 0,5 mg/ml para uso posterior. Depois que os camundongos foram administrados por via intravenosa a 1 mg/kg e por via oral a 5 mg/kg, o sangue total foi coletado em determinados momentos, o plasma foi separado e o fígado e o líquido cefalorraquidiano foram coletados. Após o pré-tratamento das amostras, a concentração da droga foi medida por LC-MS/MS, e os parâmetros farmacocinéticos foram calculados usando o software Phoenix WinNonlin. Resultados experimentais: os resultados são mostrados na Tabela 8. Conclusão experimental: os compostos de teste têm boa AUC 0-last e biodisponibilidade em camundongos. TABELA 8. RESULTADOS DA EXPERIÊNCIA FARMACOCINÉTICA DE

COMPOSTOS DE TESTE EM RATOS E RATOS Resultados do experimento Rucapa Exemplo Exemp Exemplo Exemplo Exemplo farmacocinético ribe 6 lo 11 24_A 25_A 26_A (IV: 1 mg/kg PO: 5 mg/kg) Depuração 99,9 57,3 16,1 34,9 41,0 60,7 (ml/min/kg) Volume de distribuição 13,1 7,44 2,27 4,21 9,44 8,22 aparente(l/kg) AUC0-last (injeção 255 807 2782 1302 958 679 intravenosa, nM. h) AUC0-last (oral, nM. h) 145 1100 7919 1382 1186 1286 Meia-vida (h) 1,78 1,70 2,20 2,03 3,02 2,15

Concentração 24,8 273 1.630 433 240 285 Máxima (nM) Biodisponibilidade 14,6 27,3 53,9 21,2 24,8 37,9 (%) EXEMPLO EXPERIMENTAL 9: ESTUDO FARMACODINÂMICO IN VIVO DE COMPOSTOS EM MODELO DE CAMUNDONGO BALB/C NU DE TUMOR DE XENOENXERTO SUBCUTÂNEO DE CÉLULAS MDA-MB-436 DE CÂNCER DE

MAMA HUMANO Objetivo experimental: estudar a eficácia in vivo do composto de teste no modelo de camundongo BALB/c nu de tumor de xenoenxerto subcutâneo de células MDA-MB-436 de câncer de mama humano. Design experimental: TABELA9. REGIME DE AGRUPAMENTO E ADMINISTRAÇÃO DE ANIMAIS

NA EXPERIÊNCIA FARMACODINÂMICA IN VIVO DE COMPOSTOS DE TESTE Parâmetro de Rota de Tratamento de Dosagem volume de Frequência de N1 administr composto (mg/kg) administração administração ação (µl/g)2 6 Veículo -- 10 PO QD × 28 dias 6 Exemplo 25_A 12,5 10 PO QD × 28 dias 6 Exemplo 25_A 25 10 PO QD × 28 dias 6 Exemplo 25_A 50 10 PO QD × 28 dias Nota: 1. N: o número de camundongos em cada grupo; 2. volume de administração: 10 L/g com base no peso dos camundongos. Se o peso corporal diminuir em mais de 15%, o regime de administração deve ser ajustado em conformidade. 3. QD: uma vez ao dia; PO: administração oral. Materiais experimentais: semanas de idade e peso corporal: camundongos nus BALB/c fêmeas, 6-8 semanas de idade, 18-22 g de peso corporal. O experimento começou após 3-7 dias de alimentação adaptativa. O cartão de informações do animal de cada gaiola fornece as seguintes informações sobre os animais: número, sexo, linhagem, data de recebimento, regime de administração,

número do experimento, grupo e data de início do experimento. Todas as gaiolas, estofamento e água potável foram esterilizadas antes do uso. As gaiolas, a ração e a água potável eram trocadas duas vezes por semana. Os animais experimentais foram identificados com brincos. Amostras de Teste: Exemplo 24_A e Exemplo 25_A. Todas as amostras de teste foram preparadas com 10% DMSO + 90% (20% HP-β-CD) como veículo, e o grupo de controle em branco foi administrado com o veículo sozinho. MÉTODO EXPERIMENTAL:

1. Cultura de células. Células de câncer de mama humano MDA-MB- 436 (ATCC, Manassas, VA, nº de catálogo: HTB-130) foram cultivadas em meio de cultura RPMI-1640 contendo 10% de soro fetal bovino e 1% de Anti-anti por meio de cultura em monocamada in vitro em uma incubadora a 37 °C/5% de CO 2 . As células foram digeridas com tripsina-EDTA duas vezes por semana para passagem de acordo com a prática convencional. Com uma saturação celular de 80% -90% e um número necessário, as células foram coletadas, contadas e inoculadas.

2. Inoculação de células tumorais (inoculação tumoral). 0,2 ml (1 × 10 7 células) de células MDA-MB-436 (juntamente com matrigel em uma proporção de volume de 1: 1) foi inoculado por via subcutânea na parte traseira direita de cada camundongo, e os camundongos foram agrupados aleatoriamente quando o tumor médio o volume era 318 mm 3 .

3. Observação diária de animais experimentais: os animais foram monitorados diariamente quanto à saúde e morte, e os exames de rotina incluem a observação do efeito do crescimento do tumor e do tratamento com drogas no desempenho diário dos animais, como atividades comportamentais, ingestão de alimentos e água, alterações de peso, aparência ou outras condições anormais.

4. Medições do tumor e índices experimentais: os índices experimentais foram para investigar se o crescimento do tumor foi inibido, o crescimento do tumor foi atrasado ou o tumor foi curado. Os diâmetros do tumor foram medidos duas vezes por semana usando um paquímetro. O volume do tumor foi calculado usando a seguinte fórmula: V = 0,5a × b2, em que a e b representa o diâmetro longo e diâmetro curto do tumor, respectivamente. O efeito terapêutico antitumoral do composto foi avaliado por TGI (%) ou taxa de proliferação tumoral relativa T/C (%). TGI (%) se refere à taxa de inibição do crescimento do tumor. Cálculo de TGI (%): TGI (%) = [(1- (volume de tumor médio no fim da administração em um volume de tumor médio de grupo de tratamento no início da administração do grupo de tratamento))/(volume de tumor médio no fim do tratamento do grupo de controle de solvente-volume de tumor médio no início do tratamento do grupo de controle de solvente)] × 100%. A fórmula de cálculo para a taxa de proliferação tumoral relativa T/C (%) foi a seguinte: T/C (%) = T RTV/C RTV × 100% (T RTV : RTV do grupo de tratamento; C RTV : RTV do grupo de controle negativo). O volume relativo do tumor (RTV) foi calculado com base nos resultados da medição do tumor. A fórmula de cálculo foi: RTV = Vt/V0, em que V0 era o volume médio do tumor medido no momento do agrupamento e administração (ou seja, d0), Vt era o volume médio do tumor em uma determinada medição, e os dados de TRTV e CRTV usados foram obtidos no mesmo dia.

5. Análise estatística: incluindo a média e o erro padrão da média (SEM) do volume do tumor em cada ponto de tempo para cada grupo. O grupo de tratamento mostrou o melhor efeito do tratamento no dia 27 após a administração no final do experimento e, portanto, a análise estatística foi realizada com base nos dados para avaliar as diferenças entre os grupos. Os dados experimentais foram analisados usando um método ANOVA de uma via e um método de Games-Howell. Toda a análise de dados foi realizada com SPSS 17.0. p <0,05 foi definido como uma diferença significativa. Resultados experimentais: os resultados são mostrados na Tabela 10. TABELA 10. AVALIAÇÃO DA EFICÁCIA DO ANTI-TUMOR DO COMPOSTO

DE TESTE (COM BASE NO VOLUME DO TUMOR CALCULADO NO DIA 27 APÓS A ADMINISTRAÇÃO) Volume de tumor (mm3)a T/Cb TGIb Grupos valor p c (dia 27) (%) (%) Veículo 1586±267 -- -- -- Exemplo 25_A (12,5 mg/kg) 377±149 23,79 95,34 0,051 Exemplo 25_A (25 mg/kg) 132±32 8,31 114,69 0,025 Exemplo 25_A (50 mg/kg) 91±14 5,76 117,86 0,023

Observação: a. média±SEM. b.

Inibição do crescimento de tumor foi calculada com base em T/C e TGI. c.

O valor p é a significância de diferença entre o volume de tumor de cada grupo de tratamento e o volume de tumor do grupo de veículo no dia 27. Conclusão Experimental: o composto revelado no presente documento tem efeito de inibição satisfatório.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composto da fórmula (II), um isômero do mesmo ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, CARACTERIZADO pelo fato de que, é selecionado a partir do grupo que consiste em uma ligação única e uma ligação dupla; X é selecionado a partir do grupo que consiste em CR3 e N; Y é selecionado a partir do grupo que consiste em CR1 e C; L1 é selecionado a partir do grupo que consiste em uma ligação única e - (CR8R9)n; L2 é selecionado a partir do grupo que consiste em uma ligação única, -CR8R9- e =CH-; L1 e L2 são não ligações únicas ao mesmo tempo; quandoL2 for selecionado a partir de uma ligação única, é selecionado a partir de uma ligação única; L3 e L4 são, cada um, independentemente selecionados a partir de -CR8R9-; n é 1 ou 2; R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, D, F, Cl, Br, I e C1-3 alquila, em que a C1-3 alquila é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Ra, e quando L2 é selecionado a partir de =CH-, R1 está ausente; R2 e R10 são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em H, F, Cl, Br, I e C1-3 alquila, em que a C1-3 alquila é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Rb;

R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, F, Cl, Br, I, CN e C1-3 alquila, em que a C1-3 alquila é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Rc; R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e F; R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e C1-3 alquila, em que a C1-3 alquila é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Rd; R6 e R7 são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em H e D; R8 e R9 são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em H, F, Cl, Br, I e C1-3 alquila, em que a C1-3 alquila é opcionalmente substituída por 1, 2 ou 3 Re, ou R8 e R9, juntamente com um mesmo átomo de carbono conectado ao mesmo, formam o anel A opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 Rg; O anel A é selecionado a partir do grupo que consiste em C3-8 cicloalquila e heterocicloalquila de 3-8 membros; Ra, Rb, Rc, Rd, Re e Rg são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em F, Cl, Br, I, OH, CN, NH2, COOH, C(=O)NH2, CH3, CH3CH2, CF3, CHF2, CH2F, NHCH3 e N(CH3)2; a heterocicloalquila de 3-8 membros compreende 1, 2, 3 ou 4 átomos ou grupos de átomos, cada um independentemente selecionado a partir do grupo que consiste em O, N, S e NH.

2. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que é selecionado a partir da fórmula (II-1) , em que

R1, R2, X, R4, R5, R6, R7, R10, L1, L2, L3 e L4 são conforme definido na reivindicação 1.

3. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, D, F e CH3.

4. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R2 e R10 são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em H e F.

5. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, F, CN, Cl e CF3; de preferência, R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em H e F.

6. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, metila, etila, propila e isopropila, em que a metila, etila, propila e isopropila são opcionalmente substituídos por 1, 2, ou 3 Rd; de preferência, R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, metila, e isopropila.

7. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que L1 é selecionado a partir do grupo que consiste em uma ligação única e -CR8R9-.

8. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que L1 é selecionado a partir de -CR8R9-, e L2 é selecionado a partir de -CR8R9-.

9. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que L1 é selecionado a partir de -CR8R9-, e L2 é selecionado a partir de uma ligação única.

10. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R8 e R9 são, cada um, selecionados independentemente a partir do grupo que consiste em H e F; de preferência, tanto R8 quanto R9 são selecionados a partir de H, ou um dentre R8 e R9 é selecionado a partir de H e o outro é selecionado a partir de F.

11. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R6 e R7 são ambos H.

12. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a unidade estrutural é selecionada a partir do grupo que consiste em , , , , , , e .

13. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a unidade estrutural é selecionada a partir do grupo que consiste em , , , , , e .

14. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a unidade estrutural é selecionada a partir de .

15. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a unidade estrutural é selecionada a partir do grupo que consiste em , , , , e .

16. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a unidade estrutural é selecionada a partir do grupo que consiste em , e .

17. Composto de uma fórmula abaixo, um isômero do mesmo ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, CARACTERIZADO pelo fato de que é selecionado a partir do grupo que consiste em

H

N O

O

F

F N N H H .

18. Composto, o isômero do mesmo ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 17, CARACTERIZADO pelo fato de que é selecionado a partir do grupo que consiste em

H H H

N O N O N O

O O O

F F D Me Me

N N N N N N

H H H H H H

.

19. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto, do isômero do mesmo ou do sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-18, e um carreador farmaceuticamente aceitável.

20. Use do composto, do isômero do mesmo ou do sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1-18, CARACTERIZADO pelo fato de que é no preparo de um medicamento para uso no tratamento de uma doença relacionada ao receptor de PARP.

21. Método para tratar uma doença relacionada ao receptor de PARP, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende administrar a um mamífero, de preferência um humano, em necessidade desse tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto, do isômero do mesmo ou do sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1-18.