RU2811039C2 - Аналог индологептамилоксима в качестве ингибитора parp - Google Patents
Аналог индологептамилоксима в качестве ингибитора parp Download PDFInfo
- Publication number
- RU2811039C2 RU2811039C2 RU2021124017A RU2021124017A RU2811039C2 RU 2811039 C2 RU2811039 C2 RU 2811039C2 RU 2021124017 A RU2021124017 A RU 2021124017A RU 2021124017 A RU2021124017 A RU 2021124017A RU 2811039 C2 RU2811039 C2 RU 2811039C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- compound
- group
- pharmaceutically acceptable
- stereoisomer
- acceptable salt
- Prior art date
Links
- 239000012661 PARP inhibitor Substances 0.000 title abstract description 12
- 229940121906 Poly ADP ribose polymerase inhibitor Drugs 0.000 title abstract description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 211
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 62
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 61
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 33
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims abstract description 18
- 229920000776 Poly(Adenosine diphosphate-ribose) polymerase Polymers 0.000 claims abstract description 17
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 15
- 102100023712 Poly [ADP-ribose] polymerase 1 Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims abstract description 11
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 claims abstract description 10
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 9
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 3
- 101710179684 Poly [ADP-ribose] polymerase Proteins 0.000 claims abstract 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 21
- 108010064218 Poly (ADP-Ribose) Polymerase-1 Proteins 0.000 claims description 14
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 11
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 8
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 5
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 125000006273 (C1-C3) alkyl group Chemical group 0.000 abstract 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 84
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 76
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 60
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 55
- -1 bicarbonate radical Chemical class 0.000 description 47
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 43
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 42
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 42
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 42
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 42
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- 238000004808 supercritical fluid chromatography Methods 0.000 description 40
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 31
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 26
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 24
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 22
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 22
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 21
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 19
- 238000004296 chiral HPLC Methods 0.000 description 18
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 18
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 17
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 17
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 17
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 102000012338 Poly(ADP-ribose) Polymerases Human genes 0.000 description 14
- 108010061844 Poly(ADP-ribose) Polymerases Proteins 0.000 description 14
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 14
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 14
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 13
- 125000000592 heterocycloalkyl group Chemical group 0.000 description 13
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 13
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 13
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 12
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 12
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 10
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 10
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 10
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 10
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 10
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 9
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 9
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 9
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 8
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 7
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 7
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 7
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- 101000652482 Homo sapiens TBC1 domain family member 8 Proteins 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N N-Butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 102100030302 TBC1 domain family member 8 Human genes 0.000 description 6
- 125000002619 bicyclic group Chemical group 0.000 description 6
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 6
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 6
- UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N diisopropylamine Chemical compound CC(C)NC(C)C UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 6
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 238000002390 rotary evaporation Methods 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N tert-butoxycarbonyl anhydride Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(=O)OC(C)(C)C DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 5
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 5
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 5
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 5
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 5
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108700020463 BRCA1 Proteins 0.000 description 4
- 102000036365 BRCA1 Human genes 0.000 description 4
- 101150072950 BRCA1 gene Proteins 0.000 description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100037171 Protein JTB Human genes 0.000 description 4
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 4
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 4
- 210000001589 microsome Anatomy 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N oxalyl chloride Chemical compound ClC(=O)C(Cl)=O CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 4
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 125000006413 ring segment Chemical group 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 4
- PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N warfarin Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2OC(=O)C=1C(CC(=O)C)C1=CC=CC=C1 PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960005080 warfarin Drugs 0.000 description 4
- 125000006552 (C3-C8) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 3
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 3
- 238000011729 BALB/c nude mouse Methods 0.000 description 3
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 3
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 3
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 3
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 3
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000005782 double-strand break Effects 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 210000001853 liver microsome Anatomy 0.000 description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 125000002950 monocyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 3
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 3
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 3
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 3
- 230000005783 single-strand break Effects 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 3
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091007743 BRCA1/2 Proteins 0.000 description 2
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000002004 Cytochrome P-450 Enzyme System Human genes 0.000 description 2
- 108010015742 Cytochrome P-450 Enzyme System Proteins 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000033590 base-excision repair Effects 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 2
- CSJLBAMHHLJAAS-UHFFFAOYSA-N diethylaminosulfur trifluoride Chemical compound CCN(CC)S(F)(F)F CSJLBAMHHLJAAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940043279 diisopropylamine Drugs 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000532 dioxanyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000005883 dithianyl group Chemical group 0.000 description 2
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 2
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 2
- KTWOOEGAPBSYNW-UHFFFAOYSA-N ferrocene Chemical compound [Fe+2].C=1C=C[CH-]C=1.C=1C=C[CH-]C=1 KTWOOEGAPBSYNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 2
- 125000002632 imidazolidinyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N isobutyric acid Chemical compound CC(C)C(O)=O KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004628 isothiazolidinyl group Chemical group S1N(CCC1)* 0.000 description 2
- 125000003965 isoxazolidinyl group Chemical group 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 125000004572 morpholin-3-yl group Chemical group N1C(COCC1)* 0.000 description 2
- 125000004573 morpholin-4-yl group Chemical group N1(CCOCC1)* 0.000 description 2
- 125000002757 morpholinyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- PCHKPVIQAHNQLW-CQSZACIVSA-N niraparib Chemical compound N1=C2C(C(=O)N)=CC=CC2=CN1C(C=C1)=CC=C1[C@@H]1CCCNC1 PCHKPVIQAHNQLW-CQSZACIVSA-N 0.000 description 2
- 229950011068 niraparib Drugs 0.000 description 2
- 230000006780 non-homologous end joining Effects 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- PIBWKRNGBLPSSY-UHFFFAOYSA-L palladium(II) chloride Chemical compound Cl[Pd]Cl PIBWKRNGBLPSSY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 2
- XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N phthalic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C(O)=O XNGIFLGASWRNHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004193 piperazinyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000587 piperidin-1-yl group Chemical group [H]C1([H])N(*)C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 2
- 125000004483 piperidin-3-yl group Chemical group N1CC(CCC1)* 0.000 description 2
- 125000003386 piperidinyl group Chemical group 0.000 description 2
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 2
- 125000003072 pyrazolidinyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000719 pyrrolidinyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- TYFQFVWCELRYAO-UHFFFAOYSA-N suberic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCCC(O)=O TYFQFVWCELRYAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 125000004192 tetrahydrofuran-2-yl group Chemical group [H]C1([H])OC([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 2
- 125000003718 tetrahydrofuranyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000001412 tetrahydropyranyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000005958 tetrahydrothienyl group Chemical group 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N trappsol cyclo Chemical compound CC(O)COC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](COCC(C)O)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)COCC(O)C)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1COCC(C)O ODLHGICHYURWBS-LKONHMLTSA-N 0.000 description 2
- NHDIQVFFNDKAQU-UHFFFAOYSA-N tripropan-2-yl borate Chemical compound CC(C)OB(OC(C)C)OC(C)C NHDIQVFFNDKAQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N (2R)-2-hydroxy-2-phenylacetic acid Chemical compound O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1.O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1 QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N 0.000 description 1
- 125000006704 (C5-C6) cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- SWJPEBQEEAHIGZ-UHFFFAOYSA-N 1,4-dibromobenzene Chemical compound BrC1=CC=C(Br)C=C1 SWJPEBQEEAHIGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCCUXODGPMAHRL-UHFFFAOYSA-N 1-bromo-4-iodobenzene Chemical compound BrC1=CC=C(I)C=C1 UCCUXODGPMAHRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LDLCZOVUSADOIV-UHFFFAOYSA-N 2-bromoethanol Chemical compound OCCBr LDLCZOVUSADOIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SGUAFYQXFOLMHL-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-5-{1-hydroxy-2-[(4-phenylbutan-2-yl)amino]ethyl}benzamide Chemical compound C=1C=C(O)C(C(N)=O)=CC=1C(O)CNC(C)CCC1=CC=CC=C1 SGUAFYQXFOLMHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005730 ADP ribosylation Effects 0.000 description 1
- SRNWOUGRCWSEMX-KEOHHSTQSA-N ADP-beta-D-ribose Chemical group C([C@H]1O[C@H]([C@@H]([C@@H]1O)O)N1C=2N=CN=C(C=2N=C1)N)OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SRNWOUGRCWSEMX-KEOHHSTQSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 108700020462 BRCA2 Proteins 0.000 description 1
- 102000052609 BRCA2 Human genes 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 241000283724 Bison bonasus Species 0.000 description 1
- 101150008921 Brca2 gene Proteins 0.000 description 1
- JDOBVODTZBMFAZ-UHFFFAOYSA-N C(CC)(=O)C1=CC=CC=C1.C(CC)N Chemical compound C(CC)(=O)C1=CC=CC=C1.C(CC)N JDOBVODTZBMFAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical compound NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 102000012410 DNA Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108010061982 DNA Ligases Proteins 0.000 description 1
- 102000001996 DNA Polymerase beta Human genes 0.000 description 1
- 108010001132 DNA Polymerase beta Proteins 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 230000033616 DNA repair Effects 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 208000009525 Myocarditis Diseases 0.000 description 1
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-O NAD(+) Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-O 0.000 description 1
- XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N NADP zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000233805 Phoenix Species 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-L Phosphate ion(2-) Chemical compound OP([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108091026813 Poly(ADPribose) Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N R-2-phenyl-2-hydroxyacetic acid Natural products OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLRGJRBPOGGCBT-UHFFFAOYSA-N Tolbutamide Chemical compound CCCCNC(=O)NS(=O)(=O)C1=CC=C(C)C=C1 JLRGJRBPOGGCBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N aldehydo-D-glucuronic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001857 anti-mycotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000002543 antimycotic Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 238000011914 asymmetric synthesis Methods 0.000 description 1
- 125000002393 azetidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- IPWKHHSGDUIRAH-UHFFFAOYSA-N bis(pinacolato)diboron Chemical compound O1C(C)(C)C(C)(C)OB1B1OC(C)(C)C(C)(C)O1 IPWKHHSGDUIRAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- HWGQMRYQVZSGDQ-HZPDHXFCSA-N chembl3137320 Chemical compound CN1N=CN=C1[C@H]([C@H](N1)C=2C=CC(F)=CC=2)C2=NNC(=O)C3=C2C1=CC(F)=C3 HWGQMRYQVZSGDQ-HZPDHXFCSA-N 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012069 chiral reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001995 cyclobutyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000582 cycloheptyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- NLUNLVTVUDIHFE-UHFFFAOYSA-N cyclooctylcyclooctane Chemical compound C1CCCCCCC1C1CCCCCCC1 NLUNLVTVUDIHFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N diclofenac Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1NC1=C(Cl)C=CC=C1Cl DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001259 diclofenac Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M dihydrogenphosphate Chemical compound OP(O)([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ODCCJTMPMUFERV-UHFFFAOYSA-N ditert-butyl carbonate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(C)(C)C ODCCJTMPMUFERV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M hydrogensulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940071870 hydroiodic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000003949 imides Chemical class 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-YPZZEJLDSA-N iodane Chemical compound [125IH] XMBWDFGMSWQBCA-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229940044173 iodine-125 Drugs 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001632 labetalol Drugs 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- YNESATAKKCNGOF-UHFFFAOYSA-N lithium bis(trimethylsilyl)amide Chemical compound [Li+].C[Si](C)(C)[N-][Si](C)(C)C YNESATAKKCNGOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 229960002510 mandelic acid Drugs 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 1
- 125000004170 methylsulfonyl group Chemical group [H]C([H])([H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002868 norbornyl group Chemical group C12(CCC(CC1)C2)* 0.000 description 1
- FAQDUNYVKQKNLD-UHFFFAOYSA-N olaparib Chemical compound FC1=CC=C(CC2=C3[CH]C=CC=C3C(=O)N=N2)C=C1C(=O)N(CC1)CCN1C(=O)C1CC1 FAQDUNYVKQKNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000572 olaparib Drugs 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 125000003566 oxetanyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000005731 poly ADP ribosylation Effects 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011056 potassium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical group 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- HMABYWSNWIZPAG-UHFFFAOYSA-N rucaparib Chemical compound C1=CC(CNC)=CC=C1C(N1)=C2CCNC(=O)C3=C2C1=CC(F)=C3 HMABYWSNWIZPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950004707 rucaparib Drugs 0.000 description 1
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012354 sodium borodeuteride Substances 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- ISIJQEHRDSCQIU-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2,7-diazaspiro[4.5]decane-7-carboxylate Chemical compound C1N(C(=O)OC(C)(C)C)CCCC11CNCC1 ISIJQEHRDSCQIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RIFXIGDBUBXKEI-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 3-oxopiperidine-1-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CCCC(=O)C1 RIFXIGDBUBXKEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002053 thietanyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229960005371 tolbutamide Drugs 0.000 description 1
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N toluene Substances CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
Abstract
Группа изобретений относится к новому типу соединений индологептамилоксима в качестве ингибитора PARP. Раскрыто соединение формулы (II), его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль,
,
где выбрана из группы, состоящей из одинарной связи и двойной связи; X выбран из группы, состоящей из CR3 и N; Y выбран из группы, состоящей из CR1 и С; L1 выбран из группы, состоящей из одинарной связи и -(CR8R9)n; L2 выбран из группы, состоящей из одинарной связи, -CR8R9- и =СН-; L1 и L2 не представляют собой одинарные связи одновременно; если L2 выбран из одинарной связи, то выбрана из одинарной связи; каждый из L3 и L4 независимо выбран из -CR8R9-; n равняется 1 или 2; R1 выбран из группы, состоящей из Н, D, F, Cl, Br, I и С1-3алкила, и если L2 выбран из =СН-, то R1 отсутствует; каждый из R2 и R10 независимо выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br и I; R3 выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br и I; R4 выбран из группы, состоящей из Н и F; R5 выбран из группы, состоящей из Н и С1-3алкила; каждый из R6 и R7 независимо выбран из группы, состоящей из Н и D; каждый из R8 и R9 представляет собой Н. Также раскрыты соединения, попадающие под формулу (II), фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (II), способ лечения заболевания, связанного с рецептором PARP, с использованием соединения формулы (II) и применение соединения формулы (II) для лечения заболевания, связанного с рецептором PARP. Группа изобретений обеспечивает предоставление соединений индолгептамилоксима в качестве ингибитора PARP. 5 н. и 19 з.п. ф-лы, 10 табл., 89 пр.
Description
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
Настоящая заявка испрашивает преимущество и приоритет заявки на патент Китая №201910107947.5, поданной в Национальное управление интеллектуальной собственности КНР 2 февраля 2019 года, заявки на патент Китая №201910111576.8, поданной в Национальное управление интеллектуальной собственности КНР 12 февраля 2019 года, и заявки на патент Китая №201910684020.8, поданной в Национальное управление интеллектуальной собственности КНР 26 июля 2019 года, раскрытие каждой из которых включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящая заявка относится к новому типу соединений индологептамилоксима в качестве ингибитора PARP и, в частности, к соединению, представленному формулой (I), его стереоизомеру и его фармацевтически приемлемой соли.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Поли(АДФ-рибоза)-полимераза (PARP) представляет собой семейство ферментов и может применяться для катализирования добавления остатков АДФ-рибозы к разнообразным целевым белкам. На сегодняшний день были идентифицированы и описаны в общей сложности 18 подтипов. Несмотря на широкое разнообразие ферментов в семействе PARP, PARP-1 является ответственной за более чем 90% случаев АДФ-рибозилирования в клетках, и, таким образом, ингибиторы PARP-1 являются центральным объектом при изучении ингибиторов PARP.
В живом человеческом организме постоянно происходит повреждение человеческой ДНК по причине воздействия факторов окружающей среды (таких как окислительный стресс, лучевая терапия и химиотерапия). PARP-1 тесно связана с репарацией ДНК и поддержанием функции генома. При повреждении ДНК, как правило, при однонитевом разрыве (SSB), PARP-1 сначала связывается с местом разрыва ДНК и затем активируется, и в ходе изменения структуры фермента PARP1 фермент начинает рекрутировать NAD+ (кофермент II) для синтеза поли(АДФ)рибозы, что одновременно служит в качестве сигнала для осуществления функции других репаративных ферментов, таких как ДНК-лигаза и ДНК-полимераза β. Данный процесс связывания и активации PARP-1 называется эксцизионной репарацией оснований (BER) и способствует репаративному процессу на основе амплификации ДНК. Если PARP-1 подавляется с помощью ингибитора PARP, поврежденная ДНК не может быть восстановлена посредством SSB; вместо этого активируется двухнитевой разрыв (DSB). В организме DSB восстанавливается в основном двумя путями: путем гомологичной рекомбинации (HR) и путем негомологичного соединения концов (NHEJ) ДНК, где гомологичная рекомбинация представляет собой основной путь репарации DSB и характеризуется высокой степенью надежности репарации. BRCA1 и BRCA2 играют важные роли в процессе гомологичной рекомбинации (Nature, 2005, 913-917). Результаты исследований показывают, что мутация BRCA1/2 обнаруживается при раке яичников, раке молочной железы и раке предстательной железы, и ингибитор PARP является хорошим выбором при опухолях, дефектных в отношении BRCA1/2. Ингибитор PARP может применяться по отдельности или в комбинации с химиотерапевтическими лекарственными средствами и радиотерапевтическими лекарственными средствами, вследствие чего снижается доза и повышается эффективность. На данной основе была разработана серия разных типов соединений (J. Med. Chem. 2010, 4561), и среди данных соединений олапариб, рукапариб, нирапариб (MK-4827) и талазопариб (BMN-673) были успешно выведены на рынок. Тем не менее, одновременно с продолжающимся расширением перечня показаний к применению ингибиторов PARP практическое применение ингибиторов PARP также углубляется от лечения опухоли до лечения инсульта, ишемии миокарда, воспаления и сахарного диабета. В настоящее время проводится очень большое число клинических испытаний.
Несмотря на постоянные усилия, направленные на разработку ингибиторов PARP для лечения рака и других заболеваний, соответствующее требованиям средство для лечения не было получено и, таким образом, сохраняется острая необходимость в разработке новых ингибиторов PARP.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящей заявке предусмотрено соединение формулы (II), его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль,
где
выбрана из группы, состоящей из одинарной связи и двойной связи;
X выбран из группы, состоящей из CR3 и N;
Y выбран из группы, состоящей из CR1 и С;
L1 выбран из группы, состоящей из одинарной связи и -(CR8R9)n-;
L2 выбран из группы, состоящей из одинарной связи, -CR8R9- и =СН-;
L1 и L2 не представляют собой одинарные связи одновременно;
если L2 выбран из одинарной связи, то выбрана из одинарной связи;
каждый из L3 и L4 независимо выбран из -CR8R9-;
n равняется 1 или 2;
R1 выбран из группы, состоящей из Н, D, F, Cl, Br, I и С1-3алкила, и если L2 выбран из =СН-, то R1 отсутствует;
каждый из R2 и R10 независимо выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br и I;
R3 выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br и I;
R4 выбран из группы, состоящей из Н и F;
R5 выбран из группы, состоящей из Н и С1-3алкила, где С1-3алкил необязательно замещен 1 Rd;
каждый из R6 и R7 независимо выбран из группы, состоящей из Н и D;
каждый из R8 и R9 представляет собой Н;
Rd представляет собой ОН.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, которое выбрано из формулы (II-1)
где
R1, R2, X, R4, R5, R6, R7, R10, L1, L2, L3 и L4 являются такими, как определено для соединения формулы (II), раскрытого в данном документе.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где R1 выбран из группы, состоящей из Н, D, F и СН3.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где каждый из R2 и R10 независимо выбран из группы, состоящей из Н и F.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где R3 выбран из группы, состоящей из Н, F и Cl.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где R3 выбран из группы, состоящей из Н и F.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где R5 выбран из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила и изопропила, при этом метил, этил, пропил и изопропил необязательно замещены Rd.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где R5 выбран из группы, состоящей из Н, метила, и изопропила.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где L1 выбран из группы, состоящей из одинарной связи и -CR8R9-.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где L1 выбран из -CR8R9-, L2 выбран из -CR8R9-.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где L1 выбран из -CR8R9-, L2 выбран из одинарной связи.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где оба из R6 и R7 представляют собой Н.
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где структурное звено выбрано из группы, состоящей из и
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где структурное звено выбрано из группы, состоящей из и
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где структурное звено выбрано из
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где структурное звено выбрано из группы, состоящей из и
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, описанное выше, где структурное звено выбрано из группы, состоящей из
В настоящей заявке также предусмотрено соединение формулы, указанной ниже, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, выбранное из группы, состоящей из
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящей заявки предусмотрено соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, выбранное из группы, состоящей из
В настоящей заявке дополнительно предусмотрена фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении PARP-1, содержащая терапевтически эффективное количество соединения, его стереоизомера или его фармацевтически приемлемой соли, раскрытого в данном документе, и фармацевтически приемлемый носитель.
В настоящей заявке дополнительно предусмотрено применение соединения, его стереоизомера или его фармацевтически приемлемой соли, раскрытого в данном документе, в получении лекарственного препарата для применения в лечении заболевания, связанного с рецептором PARP.
В настоящей заявке дополнительно предусмотрен способ лечения заболевания, связанного с рецептором PARP, включающий введение млекопитающему, предпочтительно человеку, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения, его изомера или его фармацевтически приемлемой соли, раскрытого в данном документе.
Некоторые другие варианты осуществления настоящей заявки получены за счет любой комбинации переменных, описанных выше.
Технические эффекты
Соединение, раскрытое в данном документе, обладает выраженной ингибирующей активностью в отношении PARP1-киназы и превосходной антипролиферативной активностью в отношении клеток MDA-MB-436 с мутацией BRCA1, и в то же время оно не имеет ингибирующей активности в отношении клеток MDA-MB-231 с BRCA дикого типа, что показывает, что соединение, раскрытое в данном документе, является превосходным в отношении селективности и безопасности. Соединение, раскрытое в данном документе, также обладает некоторым ингибирующим эффектом в отношении поли-АДФ-рибозилирования. Кроме того, соединение, раскрытое в данном документе, имеет превосходные фармакокинетические свойства, так как оно является стабильным в процессе метаболизма in vivo и характеризуется высокой биологической доступностью. В целом, соединение, раскрытое в данном документе, не только является превосходным по активности и легко синтезируемым, а также является превосходным по фармакокинетическим свойствам.
Определения и описание
Если не указано иное, то предполагается, что следующие термины и фразы, применяемые в данном документе, имеют следующие значения. Определенные термин или фразу, если четко не определено иное, не следует считать неопределенными или неясными, а следует понимать в соответствии с их общепринятым значением. Предполагается, что ссылка на торговое наименование относится к соответствующему ему коммерческому продукту или его активному ингредиенту.
Термин «фармацевтически приемлемый» используется в данном документе в отношении тех соединений, материалов, композиций и/или лекарственных форм, которые в пределах объема тщательной медицинской оценки являются подходящими для применения в контакте с тканями людей и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или других проблем или осложнений и соизмеримо с приемлемым соотношением польза/риск.
Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к соли соединения, раскрытого в данном документе, которая получена из соединения, содержащего определенные заместители, раскрытые в данном документе, и относительно нетоксичных кислоты или основания. Если соединение, раскрытое в данном документе, содержит относительно кислотную функциональную группу, то соль присоединения основания может быть получена посредством приведения такого соединения в контакт с достаточным количеством основания в чистом растворе или подходящем инертном растворителе. Фармацевтически приемлемые соли присоединения основания включают соли натрия, калия, кальция, аммония, соли органического амина или магния или подобные соли. Если соединение, раскрытое в данном документе, содержит относительно основную функциональную группу, то соль присоединения кислоты можно получать посредством приведения такого соединения в контакт с достаточным количеством кислоты в чистом растворе или подходящем инертном растворителе. Примеры фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты включают соли, полученные из неорганических кислот, таких как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, азотная кислота, угольная кислота, бикарбонатный радикал, фосфорная кислота, моногидрофосфат, дигидрофосфат, серная кислота, гидросульфат, йодистоводородная кислота и фосфористая кислота; и соли, полученные из органических кислот, таких как уксусная кислота, пропионовая кислота, изомасляная кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, бензойная кислота, янтарная кислота, субериновая кислота, фумаровая кислота, молочная кислота, миндальная кислота, фталевая кислота, бензолсульфоновая кислота, п-толуол су ль фоновая кислота, лимонная кислота, винная кислота и метансульфоновая кислота. Также включены соли аминокислот (например, аргинина) и соли органических кислот, таких как глюкуроновая кислота. Определенные конкретные соединения, раскрытые в данном документе, содержат как основную, так и кислотную функциональную группы, которые позволяют превращать соединения либо в соли присоединения основания, либо в соли присоединения кислоты.
Фармацевтически приемлемые соли, раскрытые в данном документе, могут быть синтезированы из исходного соединения, имеющего кислотную или основную группу, с помощью традиционных химических способов. В целом такие соли получают с помощью следующего способа: соединение в форме свободной кислоты или основания приводят в реакцию со стехиометрическим количеством подходящего основания или кислоты в воде или в органическом растворителе или их смеси.
Соединения, раскрытые в данном документе, могут находиться в форме геометрического изомера или стереоизомера. Все такие соединения предусмотрены в данном документе, в том числе цис- и транс-изомеры, (-)- и (+)-энантиомеры, (R)- и (S)-энантиомеры, диастереоизомеры, (D)-изомеры, (L)-изомеры и их рацемические смеси и другие смеси, такие как обогащенные энантиомерами или диастереоизомерами смеси, все из которых охвачены объемом настоящей заявки. Заместители, такие как алкил, могут иметь дополнительный асимметричный атом углерода. Все такие изомеры и их смеси охвачены объемом настоящей заявки.
Если не указано иное, абсолютная конфигурация стереогенного центра представлена сплошной клиновидной связью и пунктирной клиновидной связью а относительная конфигурация стереогенного центра представлена прямой сплошной связью и прямой пунктирной связью Волнистая линия представляет собой сплошную клиновидную связь или сплошную пунктирную связь или волнистая линия представляет собой прямую сплошную связь и прямую пунктирную связь
Оптически активные (R)- и (S)-изомеры, а также D- и L-изомеры могут быть получены посредством хирального синтеза, или хиральных реагентов, или других общепринятых методик. Энантиомер определенного соединения, раскрытого в данном документе, может быть получен посредством асимметричного синтеза или дериватизации с применением хирального вспомогательного средства, где полученную диастереоизомерную смесь разделяют и вспомогательную группу отщепляют таким образом, чтобы обеспечить получение требуемого чистого энантиомера. В качестве альтернативы, если молекула содержит основную функциональную группу (такую как аминогруппа) или кислотную функциональную группу (такую как карбоксильная группа), то соединение вступает в реакцию с подходящими оптически активными кислотой или основанием с образованием соли диастереоизомера, которую затем подвергают диастереоизомерному разделению посредством общепринятых в уровне техники способов с получением чистого энантиомера. Кроме того, энантиомер и диастереизомер, как правило, выделяют посредством хроматографии с применением хиральной неподвижной фазы, необязательно в комбинации с химической дериватизацией (например, карбамат, получаемый из аминов).
Соединение, раскрытое в данном документе, может содержать не встречающуюся в природе пропорцию атомных изотопов на одном или более атомов, которые образуют соединение. Например, соединение может быть меченным с помощью радиоактивного изотопа, такого как тритий (D, 3Н), йод-125 (125I) или С-14 (14С). В качестве другого примера, водород может быть замещен дейтерием с образованием дейтерированного лекарственного средства и связь, образованная между дейтерием и углеродом, прочнее связи, образованной между обычным водородом и углеродом. По сравнению с недейтерированным лекарственным средством дейтерированное лекарственное средство имеет преимущества в виде сниженного токсического побочного эффекта, повышенной стабильности, увеличенной эффективности, продленного биологического времени полужизни и т.п. Все изотопные варианты соединения, описанного в данном документе, являются они радиоактивными или нет, включены в объем настоящего изобретения.
«Необязательный» или «необязательно» означает, что далее описанное событие или обстоятельство может, но не обязательно, произойти, при этом описание включает случаи, когда событие или обстоятельство происходит, и случаи, когда это не происходит.
Термин «замещенный» означает, что один или более атомов водорода при конкретном атоме замещены заместителями, которые могут включать варианты дейтерия и водорода, при условии, что валентность конкретного атома является нормальной, и замещенное соединение является стабильным. Если заместитель представляет собой кислород (т.е. =O), это означает, что замещены два атома водорода. Замещение кислородом не происходит в ароматических группах. Термин «необязательно замещенный» означает, что атом может быть замещен заместителем или не замещен заместителем. Если не указано иное, тип и количество заместителей могут быть произвольными, при условии, что это достижимо с химической точки зрения.
Если любая переменная (например, R) встречается больше одного раза в составе или структуре соединения, то в каждом случае переменная определяется независимо. Таким образом, например, если группа замещена 0-2 R, то группа может быть необязательно замещена не более чем двумя R, и определение R в каждом случае является независимым. Кроме того, комбинация заместителя и/или его варианта допустима, только если комбинация может привести к получению стабильного соединения.
Если число связывающих групп равняется 0, например -(CRR)0-, это означает, что связывающая группа представляет собой одинарную связь.
Если один из вариантов выбран из одинарной связи, то две группы, связанные с помощью такого варианта, являются связанными непосредственно. Например, если L в A-L-Z представляет собой одинарную связь, это означает, что структура фактически представляет собой A-Z.
Если заместитель отсутствует, это означает, что заместителя не существует. Например, если X в А-Х отсутствует, то структура фактически представляет собой А.
Если не указано иное, то если группа имеет один или более соединяемых участков, то любые один или более таких участков группы могут быть присоединены к другим группам посредством химических связей. Химическая связь, которая соединяет такой участок с другой группой, может быть представлена прямой сплошной связью прямой пунктирной линией связи или волнистой линией Например, сплошная прямая линия в -ОСН3 указывает на то, что группа присоединена к другой группе посредством атома кислорода; в прямая пунктирная линия указывает на то, что группа присоединена к другой группе посредством атома азота с двух концов; в волнистая линия указывает на то, что фенильная группа присоединена к другой группе посредством атомов углерода в положениях 1 и 2.
Если не указано иное, количество атомов в кольце, как правило, определяется как количество членов кольца. Например, «5-7-членное кольцо» относится к «кольцу», в котором 5-7 атомов расположены в виде кольца.
Если не указано иное, «С3-8циклоалкил» относится к насыщенной циклической углеводородной группе, состоящей из 3-8 атомов углерода. Он включает моноциклические и бициклические системы, где бициклическая система включает спироциклические, конденсированные и мостиковые кольца. С3-8циклоалкил включает С3-6, С3-5, С4-8, С4-6, С4-5, С5-8, С5-6циклоалкил или т.п., и может быть одновалентным, двухвалентным или поливалентным. Примеры С3-8циклоалкила включают без ограничения циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, норборнил, [2.2.2]бициклооктан и т.п.
Если не указано иное, то термин «3-8-членный гетероциклоалкил», отдельно или в комбинации с другими терминами, относится к насыщенной циклической группе, состоящей из 3-8 атомов кольца, из которых 1, 2, 3 или 4 атома кольца являются гетероатомами, независимо выбранными из группы, состоящей из О, S и N, при этом остальные атомы представляют собой атомы углерода. Атом азота является необязательно кватернизированным, и гетероатомы углерода, азота и серы могут быть необязательно окисленными (т.е. С=O, NO и S(O)p, где р равняется 1 или 2). Включены моноциклические и бициклические системы, где бициклическая система включает спироциклические, конденсированные и соединенные мостиковой связью кольца. Кроме того, применительно к «3-8-членному гетероциклоалкилу» гетероатом может занимать положение, где гетероциклоалкил присоединен к остальной части молекулы. 3-8-членный гетероциклоалкил включает 3-6-членный, 3-5-членный, 4-6-членный, 5-6-членный, 4-членный, 5-членный и 6-членный гетероциклоалкил и т.п. Примеры 3-8-членного гетероциклоалкила включают без ограничения азетидинил, оксетанил, тиетанил, пирролидинил, пиразолидинил, имидазолидинил, тетрагидротиенил (включая тетрагидротиен-2-ил, тетрагидротиен-3-ил и т.д.), тетрагидрофуранил (включая тетрагидрофуран-2-ил и т.д.), тетрагидропиранил, пиперидинил (включая 1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3-пиперидинил и т.д.), пиперазинил (включая 1-пиперазинил, 2-пиперазинил и т.д.), морфолинил (включая 3-морфолинил, 4-морфолинил и т.д.), диоксанил, дитианил, изоксазолидинил, изотиазолидинил, 1,2-оксазинил, 1,2-тиазинил, гексагидропиридазинил, гомопиперазинил, гомопиперидинил, диоксепанил или т.п.
Если не указано иное, то термин «5-6-членный гетероциклоалкил», отдельно или в комбинации с другими терминами, относится к насыщенной циклической группе, состоящей из 5 6 атомов кольца, из которых 1, 2, 3 или 4 атома кольца являются гетероатомами, независимо выбранными из группы, состоящей из О, S и N, при этом остальные атомы представляют собой атомы углерода. Атом азота является необязательно кватернизированным, и гетероатомы углерода, азота и серы могут быть необязательно окисленными (т.е. С=O, NO и S(O)p, где р равняется 1 или 2). Включены моноциклические и бициклические системы, где бициклическая система включает спироциклические, конденсированные и соединенные мостиковой связью кольца. Кроме того, применительно к «5 6-членному гетероциклоалкилу» гетероатом может занимать положение, где гетероциклоалкил присоединен к остальной части молекулы. 5 6-членный гетероциклоалкил включает 5-членный гетероциклоалкил и 6-членный гетероциклоалкил. Примеры 5-6-членного гетероциклоалкила включают без ограничения пирролидинил, пиразолидинил, имидазолидинил, тетрагидротиенил (включая тетрагидротиен-2-ил, тетрагидротиен-3-ил и т.д.), тетрагидрофуранил (включая тетрагидрофуран-2-ил и т.д.), тетрагидропиранил, пиперидинил (включая 1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3-пиперидинил и т.д.), пиперазинил (включая 1-пиперазинил, 2-пиперазинил и т.д.), морфолинил (включая 3-морфолинил, 4-морфолинил и т.д.), диоксанил, дитианил, изоксазолидинил, изотиазолидинил, 1,2-оксазинил, 1,2-тиазинил, гексагидропиридазинил, гомопиперазинил, гомопиперидинил или т.п.
Если не указано иное, то термин «С1-3алкил» относится к линейной или разветвленной насыщенной углеводородной группе, состоящей из 1-3 атомов углерода. С1-3алкил включает без ограничения C1-2-, С2-3алкил и т.д. и может быть одновалентным (например, метил), двухвалентным (например, метилен) или многовалентным (например, метенил). Примеры С1-3алкила включают без ограничения метил (Me), этил (Et), пропил (включая н-пропил и изопропил) и т.п.
Соединения, раскрытые в данном документе, могут быть получены с помощью разнообразных способов синтеза, хорошо известных специалистам в данной области, в том числе конкретных вариантов осуществления, перечисленных ниже, вариантов осуществления, полученных путем их комбинирования с другими способами химического синтеза, и их эквивалентов, известных специалистам в данной области. Предпочтительные варианты осуществления включают без ограничения примеры, раскрытые в данном документе.
Растворители, применяемые в данном документе, могут являться коммерчески доступными.
В настоящей заявке применяют следующие сокращения: Boc обозначает трет-бутилоксикарбонил, защитную группу для аминогруппы; pht обозначает фталоил, защитную группу для первичного амина; Ms обозначает метилсульфонил.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
Ниже настоящее изобретение подробно описано с помощью примеров. Однако это не ограничивает объем настоящей заявки неблагоприятным образом. Соединения, раскрытые в данном документе, могут быть получены с помощью разнообразных способов синтеза, хорошо известных специалистам в данной области, в том числе конкретных вариантов осуществления, перечисленных ниже, вариантов осуществления, полученных путем их комбинирования с другими способами химического синтеза, и их эквивалентов, известных специалистам в данной области. Предпочтительные варианты осуществления включают без ограничения примеры, раскрытые в данном документе. Специалистам в данной области будет очевидно, что могут быть сделаны различные изменения и модификации в отношении конкретных вариантов осуществления без отступления от сути и объема настоящей заявки.
Пример 1 (1_А и 1_В)
Стадия A: 1-1 (50 г, 285,41 ммоль) растворяли в дихлорметане (500 мл) и добавляли триэтиламин (43,32 г, 428,12 ммоль), 4-диметиламинопиридин (3,49 г, 28,54 ммоль), ди-трет-бутилдикарбонат (68,52 г, 313,96 ммоль) при 0°С. Реакционную систему перемешивали при 25°С в течение 0,5 ч. Реакционную систему концентрировали посредством ротационного выпаривания при пониженном давлении и затем добавляли этилацетат (500 мл). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (300 мл × 3) и насыщенным солевым раствором (300 мл × 2), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1-2.
Стадия В: диизопропиламин (46,1 г, 456,23 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (250 мл), и к реакционной системе по каплям добавляли н-бутиллитий (2,5 М, 159,68 мл) при -78°С в атмосфере азота, и добавление по каплям завершали в пределах получаса. Реакционную систему перемешивали при 0°С в течение получаса, и затем по каплям добавляли в другую трехгорлую колбу, содержащую раствор 1-2 (78,5 г, 285,14 ммоль) и триизопропилборат (80,44 г, 427,72 ммоль) в тетрагидрофуране (750 мл), при 0°С в атмосфере азота, и добавление по каплям завершали в пределах полутора часов. Полученную реакционную систему перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Затем к реакционной системе добавляли раствор уксусной кислоты (200 мл) для гашения реакции, разбавляли водой (600 мл) и экстрагировали с помощью этилацетата (500 мл × 2). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (200 мл × 3) и насыщенным солевым раствором (200 мл × 2), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт суспендировали с ацетонитрилом (100 мл) и водным раствором (500 мл), и осадок на фильтре высушивали с применением масляного насоса с получением 1-3.
Стадия С: 1-3 добавляли к раствору три фторуксусной кислоты (556,25 мл) при 0°С в виде трех частей и реакционную систему перемешивали при 0°С в течение одного часа в атмосфере азота. Затем реакционную систему выливали в ледяную воду (600 мл) с осаждением твердого вещества и получали осадок на фильтре и концентрировали его при пониженном давлении с применением масляного насоса с получением 1-4.
Стадия D: 1-5 (60 г, 212,09 ммоль) и 3-пиридинбороновую кислоту (26,07 г, 212,09 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (600 мл) и воде (120 мл), и затем добавляли дихлорид [1,1-бис(трифенилфосфино)ферроцен]палладия (573,14 мг, 879,39 мкмоль, 44,64 мл) и карбонат калия (1,48 г, 17,59 ммоль). Реакционную систему перемешивали при 90°С в течение 16 ч. в атмосфере азота. После завершения реакции реакционную систему фильтровали и фильтрат экстрагировали с помощью этилацетата (500 мл × 3). Органические фазы объединяли, высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали при пониженном давлении и очищали на колонке с силикагелем (элюент (V/V): петролейный эфир/этилацетат = 10/1-2/1) с получением 1-6.
Стадия Е: 1-6 (20 г, 85,44 ммоль) растворяли в метаноле (200 мл), и добавляли диоксид платины (3.88 г, 17.09 ммоль) и водный раствор хлористоводородной кислоты (1 н., 85,44 мл) при комнатной температуре, и реакционную систему перемешивали при 10°С в течение 16 ч. в атмосфере водорода при давлении 50 фунтов/кв. дюйм. После завершения реакции реакционную систему фильтровали с получением фильтрата, который концентрировали при пониженном давлении с получением 1-7.
Стадия F: 1-7 (23,63 г, 85,43 ммоль) растворяли в метаноле (300 мл) и добавляли N,N-диизопропилэтиламин (33,12 г, 256,29 ммоль, 44,64 мл) и Вос-ангидрид (37,29 г, 170,86 ммоль, 39,25 мл) при комнатной температуре. Реакционную систему перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем реакционную систему концентрировали при пониженном давлении с удалением растворителя и экстрагировали с помощью этилацетата (300 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (100 мл × 1), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1-8.
Стадия G: 1-8 (4 г, 8,79 ммоль) и 4-метоксикарбонилиндол-2-бороновую кислоту (1,93 г, 8,79 ммоль) растворяли в диметиловом эфире этиленгликоля (40 мл) и воде (8 мл) и добавляли дихлорид [1,1-бис(ди-трет-бутилфосфино)ферроцен]палладия (573,14 мг, 879,39 мкмоль, 44,64 мл) и бикарбонат натрия (1,48 г, 17,59 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную систему перемешивали при 80°С в течение 16 ч. После завершения реакции к реакционной системе добавляли воду (60 мл) и экстрагировали с помощью этилацетата (50 мл × 2). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 1), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали при пониженном давлении и очищали на колонке с силикагелем (элюент (V/V): петролейный эфир/этилацетат = 10/1-3/1) с получением 1-9.
Стадия Н: оксалилхлорид (1,87 г, 14,73 ммоль, 1,29 мл) растворяли в дихлорметане (20 мл) при поддержании температуры на уровне 0°С.Добавляли N,N-диметилформамид (1,61 г, 22,09 ммоль, 1,7 мл) при 0°С в атмосфере азота. Реакционную систему перемешивали при 0°С в течение 0,25 ч. 1-9 (3,2 г, 7,36 ммоль) растворяли в дихлорметане (10 мл) и по каплям добавляли к реакционной системе при поддержании температуры на уровне 0°С. Обеспечивали протекание реакции в реакционной системе при 0-15°С в течение 0,5 ч. После завершения реакции к реакционной системе добавляли раствор ацетата аммония (10%, 150 мл) и перемешивали при 15°С в течение 1 ч. Реакционную систему концентрировали при пониженном давлении с удалением растворителя и затем экстрагировали с помощью этилацетата (60 мл × 2). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным хлоридом аммония (30 мл × 2) и насыщенным солевым раствором (30 мл × 3), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1-10.
Стадия I: 1-10 (3,5 г, 7,57 ммоль) растворяли в дихлорметане (50 мл) и добавляли Вос-ангидрид/ди-трет-бутилкарбонат (1,98 г, 9,08 ммоль, 2,09 мл), триэтиламин (1,53 г, 15,13 ммоль, 2,11 мл) и 4-диметиламинопиридин (92,44 мг, 756,70 мкмоль) при перемешивании с поддержанием температуры на уровне 20°С. Реакционную систему перемешивали при 20°С в течение 1 ч. После завершения реакции органическую фазу промывали насыщенным раствором хлорида аммония (150 мл × 2), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1-11.
Стадия J: 1-11 (4,3 г, 7,64 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (40 мл) и метаноле (10 мл) и добавляли борогидрид натрия (578,22 мг, 15,28 ммоль) в атмосфере азота при поддержании температуры на уровне 0°С. Обеспечивали протекание реакции в реакционной системе при 0°С в течение 0,5 ч. После завершения реакции к реакционной системе добавляли насыщенный хлорид аммония (80 мл) для гашения реакции и экстрагировали с помощью этилацетата (100 мл × 2). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (50 мл × 1), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1-12.
Стадия K: 1-12 (4,0 г, 7,08 ммоль) растворяли в дихлорметане (50 мл) и добавляли триэтиламин (2,15 г, 21,25 ммоль, 2,96 мл) и метансульфонилхлорид (1,62 г, 14,17 ммоль) при 0°С. Реакционную систему перемешивали при 15°С в течение 16 ч. После завершения реакции к реакционной системе добавляли дихлорметан (100 мл). Органическую фазу промывали насыщенным раствором хлорида аммония (100 мл × 2), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1-13.
Стадия L: 1-13 (4,0 г, 6,22 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (50 мл) и добавляли карбонат натрия (1,32 г, 12,45 ммоль) и N-гидроксифталимид (2,03 г, 12,45 ммоль). Реакционную систему перемешивали при 50°С в течение 16 ч. После завершения реакции реакционную систему промывали этилацетатом (150 мл) и насыщенным солевым раствором (180 мл × 4); высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1-14.
Стадия М: 1-14 (4,0 г, 5,64 ммоль) растворяли в метаноле (40 мл) и добавляли гидразингидрат (1,15 г, 22,54 ммоль, 1,12 мл, чистота 98%). Реакционную систему перемешивали при 70°С в течение 2 ч. в атмосфере азота. После завершения реакции реакционную систему концентрировали при пониженном давлении с удалением органического растворителя и полученное твердое вещество очищали посредством препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии (препаративной HPLC) (колонка: Phenomenex Synergi Max-RP (250 мм × 50 мм, 10 мкм); подвижная фаза: вода (0,225% муравьиная кислота)-ацетонитрил; градиент элюирования: 60%-90%, 29 мин.) с получением желтого твердого вещества. Затем твердое вещество разделяли на колонке для хиральной хроматографии (разделительная колонка: AD-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: 0,1%) аммиак в изопропаноле; градиент элюирования: 30%-30%, 2,1 мин.; 300 мин.) с получением 1-15А (время удерживания = 1,704 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и 1-15В (время удерживания = 1,782 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 97%).
Стадия N: 1-15А (420 мг, 764,09 мкмоль) растворяли в дихлорметане (6 мл) и добавляли трифторуксусную кислоту (2 мл). Реакционную систему перемешивали при 20°С в течение 1 ч. в атмосфере азота. После завершения реакции реакционную систему концентрировали при пониженном давлении с удалением органического растворителя и полученное твердое вещество очищали посредством препаративной HPLC (колонка: Phenomenex Gemini (150 мм × 25 мм, 10 мкм); подвижная фаза: вода (10 мМ бикарбонат аммония)-ацетонитрил; градиент элюирования: 30%-51%, 7 мин.) с получением соединения примера 1А (время удерживания = 6,63 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 94%). Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Chiralpak AD-3 (100 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% изопропанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 7,80 (dd, J=0,86, 7,58 Гц, 1H), 7,62-7,70 (m, 1H), 7,48-7,54 (m, 2Н), 7,39-7,46 (m, 2Н), 7,31 (t, J=7,83 Гц, 1H), 5,41-5,50 (m, 1Н), 5,26-5,36 (m, 1Н), 3,16 (br t, J=12,90 Гц, 2Н), 2,68-2,86 (m, ЗН), 2,04 (br s, 1H), 1,83-1,94 (m, 1H), 1,68-1,80 (m, 2Н).
Стадия О: 1-15 В (440 мг, 803,45 мкмоль) растворяли в дихлорметане (6 мл) и добавляли трифторуксусную кислоту (2 мл). Реакционную систему перемешивали при 20°С в течение 1 ч. в атмосфере азота. После завершения реакции реакционную систему концентрировали при пониженном давлении с удалением органического растворителя и полученное твердое вещество очищали посредством препаративной HPLC (колонка: Phenomenex Gemini (150 мм × 25 мм, 10 мкм); подвижная фаза: вода (10 мМ бикарбонат аммония)-ацетонитрил; градиент элюирования: 30%-51%, 7 мин.) с получением соединения примера 1_В (время удерживания = 5,62 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 94%). Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Chiralpak AD-3 (100 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40%) изопропанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 7,80 (dd, J=0,86, 7,58 Гц, 1H), 7,64-7,70 (m, 1Н), 7,48-7,53 (m, 2Н), 7,41-7,46 (m, 2Н), 7,31 (t, J=7,83 Гц, 1H), 5,41-5,50 (m, 1H), 5,27-5,35 (m, 1H), 3,13-3,19 (m, 2Н), 2,71-2,84 (m, 3Н), 2,04 (br s, 1H), 1,84-1,91 (m, 1H), 1,71-1,79 (m, 2Н)
Пример 2 (2_А и 2_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 1.
В случае примера 2 перед удалением защитной группы Вое соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: WHELK-O1 (250 мм × 50 мм, 10 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в метаноле; градиент элюирования: 40%-40%, 4 мин.; 260 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: примера 2_АА (время удерживания = 4,453 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и примера 2_ВВ (время удерживания = 4,735 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 98%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 2_А (время удерживания = 1,276 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 2_В (время удерживания = 1,632 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 98%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Chiralcel OJ-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% изопропанол (0,05%) диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 2_А: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 8,52 (s, 1Н), 7,82 (d, J=7,21 Гц, 1H), 7,60-7,72 (m, 5Н), 7,34 (t, J=7,76 Гц, 1H), 5,43-5,52 (m, 1H), 5,25-5,35 (m, 1Н), 4,32 (br d, J=11,86 Гц, 1H), 3,51 (br d, J=12,72 Гц, 1H), 3,16-3,29 (m, 1H), 1,95-2,21 (m, 4Н), 1,73-1,93 (m, 2Н).
Пример 2_В: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 8,55 (s, 1Н), 7,82 (d, J=7,34 Гц, 1H), 7,59-7,72 (m, 5Н), 7,34 (t, J=7,83 Гц, 1H), 5,43-5,56 (m, 1H), 5,24-5,36 (m, 1Н), 4,28 (br d, J=11,86 Гц, 1Н), 3,49 (br d, J=11,98 Гц, 1H), 3,11-3,26 (m, 1H), 1,92-2,21 (m, 4H), 1,71-1,90 (m, 2H).
Пример 3
Стадия А: 1,4-дибромбензол (8,92 г, 37,79 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (35,00 мл), и затем по каплям добавляли в трехгорлую колбу, содержащую магниевую стружку (918,56 мг, 37,79 ммоль) и йод (137,03 мг, 539,9 мкмоль), при 70°С в атмосфере азота, и добавление по каплям завершали в пределах получаса. Реакционную систему перемешивали при 70°С в течение 1 ч. и затем охлаждали до 20°С. Реакционную систему по каплям добавляли в другую трехгорлую колбу, содержащую раствор 3-1 (5 г, 26,99 ммоль) в тетрагидрофуране (15 мл), при -70°С в атмосфере азота, и добавление по каплям завершали в пределах получаса. Полученную реакционную систему перемешивали при -70°С в течение 2 ч. и затем нагревали до 15°С и перемешивали в течение 1 ч. К реакционной системе добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (60 мл) для гашения реакции и экстрагировали с помощью этилацетата (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на колонке с силикагелем (элюент (V/V): петролейный эфир/этилацетат = 30/1-10/1) с получением 3-2.
Стадия В: 3-2 (5 г, 14,61 ммоль) добавляли к трифторуксусной кислоте (25 мл). Реакционную систему перемешивали при 25°С в течение 4 ч. Затем реакционную систему концентрировали посредством ротационного выпаривания при пониженном давлении и добавляли воду (40 мл). Смесь доводили до рН=14 с помощью 40% водного раствора гидроксида натрия и осаждали белое твердое вещество. Полученную смесь фильтровали и осадок на фильтре промывали небольшим количеством воды и подвергали ротационному выпариванию с получением 3-3.
Стадия С: 3-3 (2,8 г, 4,97 ммоль) растворяли в метаноле (30 мл) и воде (7 мл). Реакционную систему охлаждали до -41°С и добавляли борогидрид натрия (945,34 мг, 24,99 ммоль). Реакционную систему перемешивали при -41°С в течение 4 ч. Затем к реакционной системе добавляли хлористоводородную кислоту в концентрации 2 моль/л (50 мл) при 0°С для гашения реакции и добавляли этилацетат (100 мл). Органическую фазу промывали водой (50 мл) с последующим разделением жидкостей. Водную фазу доводили до рН=14 с помощью гидроксида натрия в концентрации 4 моль/л и экстрагировали с помощью этилацетата (150 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали водой (50 мл × 2), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 3-4.
Стадия D: 3-4 (3 г, 13,15 ммоль) растворяли в дихлорметане (30 мл) и добавляли триэтиламин (3,99 г, 39,45 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонат (3,16 г, 14,47 ммоль). Реакционную систему перемешивали при 25°С в течение 1 ч. Реакционную систему концентрировали посредством ротационного выпаривания при пониженном давлении и затем добавляли этилацетат (60 мл). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (30 мл × 3) и насыщенным солевым раствором (50 мл), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 3-5.
Согласно способу в примере 1 соединение 3-5 разделяли посредством хиральной HPLC (разделительная колонка: AD-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в изопропаноле; градиент элюирования: 30%-30%, 2,1 мин.; 85 мин.) на 3-12А (время удерживания = 1,627 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и 3-12В (время удерживания = 1,711 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 98%), в которых удаляли защитную группу с получением соединения примера 3А (время удерживания = 0,732 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 3_В (время удерживания = 1,402 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 97,32%) соответственно.
Способ измерения значения ее (энантиомерного избытка): разделительная колонка: Chiralcel OJ-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% этанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 3_А: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 1,76 2,00 (m, 3Н), 2,23 2,34 (m, 1H), 3,07-3,15 (m, 1H), 3,21 (dt, J=10,18, 7,26 Гц, 1H), 4,36 (br t,.7=8,01 Гц, 1H), 5,17-5,27 (m, 1H), 5,36-5,49 (m, 1H), 7,29 (t, J=7,76 Гц, 1H), 7,58 (d, J=0,86 Гц, 4H), 7,64-7,71 (m, 2H), 8,33 (s, 1H), 11,06 (br s, 1H), 11,85 (s, 1H).
Пример 3_В: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 1,73-1,97 (m, 3H), 2,19-2,35 (m, 1H), 3,04-3,24 (m, 2H), 4,33 (brt, J=8,07 Гц, 1H), 5,14-5,26 (m, 1H), 5,36-5,50 (m, 1H), 7,29 (t, J=7,76 Гц, 1H), 7,58 (d, J=0,98 Гц, 4H), 7,63-7,71 (m, 2H), 8,31 (s, 1H), 11,06 (br s, 1H), 11,83 (s, 1H).
Пример 4 (4_А и 4_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 1.
Соединение примера 4 разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: IC (250 мм × 30 мм, 10 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в этаноле; градиент элюирования: 55% 55%, 3,6 мин.; 80 мин.) с получением соединения примера 4_А (время удерживания = 2,353 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 4_В (время удерживания = 3,177 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%).
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Chiralpak IC-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% изопропанол (0,05%о диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 4_А: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 7,46-7,59 (m, 5Н), 7,38 (br d,J=7,70 Гц, 1Н), 5,38-5,50 (m, 1Н), 5,23-5,34 (m, 1Н), 3,49 (br d, J=11,00 Гц, 2Н), 3,02-3,24 (m, 3Н), 2,12 (br d,J=10,39 Гц, 2Н), 1,79-2,02 (m, 2Н).
Пример 4_В: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 7,30-7,55 (m, 6Н), 5,38-5,48 (m, 1Н), 5,24-5,34 (m, 1H), 3,11 (br t, J=13,82 Гц, 2Н), 2,57-2,89 (m, 3Н), 2,03 (br d,J=8,80 Гц, 1H), 1,85 (br d, J=10,27 Гц, 1Н), 1,62-1,78 (m, 2Н).
Пример 5 (5_А и 5_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 1.
В случае примера 5 перед удалением защитной группы Boc соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: AD-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в изопропаноле; градиент элюирования: 30%-30%, 6,0 мин.; 350 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 5_АА (время удерживания = 1,669 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 98%) и 5_ВВ (время удерживания = 1,725 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 97%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 5_А (время удерживания = 4,468 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 97%) и соединения примера 5_В (время удерживания = 3,784 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 94%) соответственно. Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Chiralpak IC-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% этанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 5_А: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 8,54 (s, 1Н), 7,82 (d, J=7,50 Гц, 1H), 7,69 (d, J=7,63 Гц, 1Н), 7,47-7,59 (m, 1Н), 7,22-7,39 (m, 3Н), 5,26-5,38 (m, 1Н), 5,05-5,17 (m, 1Н), 3,41-3,57 (m, 2Н), 3,00-3,22 (m, 3Н), 2,10(br d, J=13,51 Гц, 2Н), 1,77-2,01 (m, 2Н).
Пример 5_В: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 8,54 (s, 1Н), 7,78-7,88 (m, 1H), 7,65-7,74 (m, 1Н), 7,51-7,60 (m, 1H), 7,24-7,40 (m, 3Н), 5,27-5,40 (m, 1H), 5,05-5,20 (m, 1Н), 3,42-3,55 (m, 2Н), 2,99-3,23 (m, 3Н), 2,05-2,17 (m, 2Н), 1,79-2,01 (m, 2Н).
Пример 35 (35_А и 35_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 3.
В случае примера 6 перед удалением защитной группы Boc соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: WHELK-01 (250 мм × 50 мм, 10 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в метаноле; градиент элюирования: 40%-40%, 3,7 мин.; 450 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: примера 6_АА (время удерживания = 2,483 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и примера 6_ВВ (время удерживания = 2,691 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 94%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 6_А (время удерживания = 1,955 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 6_В (время удерживания = 3,339 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 94%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: OJ-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 30% изопропанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 6_А: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ ppm 1,48 (s, 3Н), 1,81 (br s, 1Н), 1,93-2,17 (m, 3Н), 2,94-3,35 (m, 2Н), 5,23 (br dd, J=14,67, 3,55 Гц, 1H), 5,38-5,48 (m, 1H), 7,29 (t, J=7,76 Гц, 1Н), 7,54-7,61 (m, 2Н), 7,62-7,73 (m, 4Н), 8,18-8,33 (m, 1H), 11,07 (s, 1Н), 11,80 (br s, 1Н).
Пример 6_В: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ ppm 1,48 (br d, J=2,69 Гц, 3Н), 1,79 (br s, 1Н) 1,95-2,18 (m, 3Н), 2,93-3,30 (m, 2Н), 5,23 (br dd, J=14,61, 3,12 Гц, 1H), 5,43 (br d, J=14,79 Гц, 1H), 7,19-7,35 (m, 1H), 7,53-7,60 (m, 2H), 7,61-7,77 (m, 4H), 8,19-8,35 (m, 1H), 11,06 (s, 1H), 11,80 (brd, J=4,65 Гц, 1H).
Пример 7 (7_A и 7_B)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 1.
Соединение примера 7 разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: IC (250 мм × 30 мм, 10 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в этаноле; градиент элюирования: 50%-50%, 4,3 мин.; 120 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: примера 7_А (время удерживания = 1,889 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и примера 7_В (время удерживания = 2,411 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 94%).
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: IC-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% изопропанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 7_А: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 7,49-7,64 (m, 2Н), 7,26-7,45 (m, 3Н), 5,40-5,48 (m, 1H), 5,25-5,34 (m, 1Н), 3,37-3,56 (m, 3Н), 2,98-3,24 (m, 2Н), 2,04-2,18 (m, 2Н), 1,81-2,01 (m, 2Н).
Пример 7_В: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 7,43 7,57 (m, 2Н), 7,38 (dd, J=2,14, 8,99 Гц, 1Н), 7,23-7,32 (m, 2Н), 5,39-5,47 (m, 1Н), 5,26-5,35 (m, 1H), 3,02-3,21 (m, 3Н), 2,60-2,82 (m, 2Н), 1,95-2,08 (m, 1Н), 1,64-1,89 (m, 3Н).
Пример 37 (37_А и 8_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 1.
В случае примера 8 перед удалением защитной группы Boc соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: AD-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в изопропаноле; градиент элюирования: 30%-30%, 5,0 мин.; 110 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 8_АА (время удерживания = 1,570 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и 8_ВВ (время удерживания = 1,674 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 8_А (время удерживания = 1,262 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 8_В (время удерживания = 2,511 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: OJ-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 30% метанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 8_А: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 1,71 1,80 (m, 1Н), 1,82 1,99 (m, 2H), 2,22-2,31 (m, 1H), 3,05-3,28 (m, 2H), 5,22 (br d, J=14,55 Гц, 1H), 5,43 (br d, J=14,55 Гц, 1H), 7,29 (t, J=1,76 Гц, 1H), 7,53-7,71 (m, 6H), 8,30 (s, 1H), 11,06 (brs, 1H), 11,82 (s, 1H).
Пример 8_В: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 1,70-1,79 (m, 1H), 1,86-1,97 (m, 2H), 2,21-2,35 (m, 1H), 3,02-3,23 (m, 2H), 5,16-5,27 (m, 1H), 5,37-5,48 (m, 1H), 7,29 (t, J=7,76 Гц, 1H), 7,52-7,72 (m, 6H), 8,29 (s, 1H), 11,06 (br s, 1H), 11,81 (s, 1H).
Пример 9
После получения соединения 9-5 согласно способу получения, представленному в примере 3, обеспечивали протекание реакции между 9-5 и 1-4 согласно примеру 1 с получением 9-6, которое разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: AD (250 мм × 30 мм, 10 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в метаноле; градиент элюирования: 60%-60%, 6,6 мин.; 190 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 9-6_АА (время удерживания = 0,625 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и 9-6_ВВ (время удерживания = 1,657 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%), которые подвергали процедуре, схожей с процедурой, представленной в примере 1, с получением соединения примера 9_А (время удерживания = 0,716 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 9_В (время удерживания = 0,559 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: AD-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% метанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 9_А: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 8,51 (s, 1H), 7,83 (d, J=7,46 Гц, 1Н), 7,69 (d, J=8,07 Гц, 1Н), 7,61 (t, J=8,25 Гц, 1Н), 7,41-7,51 (m, 2Н), 7,37 (t, J=7,83 Гц, 1H), 5,44-5,53 (m, 1Н), 5,27-5,38 (m, 1H), 3,52-3,62 (m, 1Н), 3,40-3,50 (m, 1Н), 2,43-2,62 (m, 2Н), 2,18-2,41 (m, 2Н), 1,72 (s, 3Н).
Пример 9_В: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 8,49 (s, 1H), 7,83 (d, J=7,46 Гц, 1Н), 7,69 (d, J=8,07 Гц, 1Н), 7,61 (t, J=8,19 Гц, 1Н), 7,41-7,52 (m, 2Н), 7,36 (t, J=7,82 Гц, 1H), 5,42-5,58 (m, 1Н), 5,25-5,38 (m, 1H), 3,53-3,63 (m, 1Н), 3,41-3,52 (m, 1Н), 2,43-2,64 (m, 2Н), 2,18-2,42 (m, 2Н), 1,73 (s, 3Н).
Пример 10
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 1; однако рацемат в примере 10 получали непосредственно без хирального разделения.
Пример 10: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 1,57-1,82 (m, ЗН), 1,93 (br s, 1H), 2,68 (br s, 1H), 2,75-2,91 (m, 2H), 2,99-3,23 (m, 2H), 5,03-5,13 (m, 1H), 5,14-5,28 (m, 1H), 7,24-7,39 (m, 2H), 7,41-7,57 (m, 3H), 8,34 (br s, 1H), 11,27 (br s, 1H), 11,87 (br s, 1H).
Пример 11 (11_А и 11_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 1.
После удаления защитной группы с помощью трифторуксусной кислоты получали соединение примера 11_А (время удерживания = 2,020 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 96,33%) и соединение примера 11_В (время удерживания = 1,402 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 97,32%).
Способ измерения значения ее (энантиомерного избытка): разделительная колонка: OJ-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 5%-40% этанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 11_А: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 1,74 2,00 (m, 3Н), 2,23-2,36 (m, 1Н), 3,07-3,22 (m, 2 H), 4,57 (br t, J=7,95 Гц, 1H), 5,17-5,32 (m, 1H), 5,38-5,52 (m, 1H), 7,28-7,52 (m, 3H), 7,63-7,76 (m, 3H), 8,25 (s, 1H), 11,09 (br s, 1H), 11,90 (s, 1H).
Пример 11_B: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ ppm 1,68 2,05 (m, 3H), 2,19-2,37 (m, 1H), 3,05-3,22 (m, 2H), 4,42-4,60 (m, 1H), 5,17-5,32 (m, 1H), 5,38-5,51 (m, 1H), 7,29-7,52 (m, 3H), 7,56-7,75 (m, 3H), 8,29 (s, 1H), 11,09 (br s, 1H), 11,92 (s, 1H).
Пример 12
Стадия А: 12-1 (5,0 г, 26,99 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (50 мл) и добавляли гексаметилдисилазид лития (29,69 ммоль, 1 моль/л) при перемешивании с поддержанием температуры на уровне -78°С. Реакционную систему перемешивали при -78°С в течение 0,5 ч. Затем N-фенилбис(трифторметансульфонил)имид (11,57 г, 32,39 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100 мл) и медленно по каплям добавляли к реакционной системе. Полученную реакционную систему перемешивали при температуре в диапазоне от -78°С до 0°С в течение 2 ч. После завершения реакции к реакционной системе добавляли насыщенный бикарбонат натрия (500 мл) для гашения реакции и экстрагировали с помощью этилацетата (200 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (200 мл × 2), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 12-2.
Стадия В: 12-2 (6,0 г, 18,91 ммоль) растворяли в диоксане (60 мл) и добавляли бис(пинаколато)дибор (4,8 г, 18,91 ммоль), ацетат калия (3,71 г, 37,82 ммоль) и комплекс дихлорида [1,1-бис(трифенилфосфино)ферроцен]палладия с дихлорметаном (1,54 г, 1,89 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную систему перемешивали при 80°С в течение 16 ч. После завершения реакции в отношении реакционной системы не проводили дополнительную обработку и получали 12-3, которое непосредственно применяли на следующей стадии.
Стадия С: 12-3 (1,2 г, 3,70 ммоль) и 1-бром-4-йодбензол (4,79 г, 16,94 ммоль) растворяли в диоксане (60 мл) и воде (12 мл) и добавляли комплекс дихлорида [1,1-бис(трифенилфосфино)ферроцен]палладия с дихлорметаном (1,38 г, 1,69 ммоль) и карбонат калия (4,68 г, 33,88 ммоль). Реакционную систему перемешивали при 80°С в течение 5 ч. После завершения реакции к реакционной системе добавляли воду (200 мл) и экстрагировали с помощью этилацетата (100 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (100 мл × 1), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали при пониженном давлении и очищали на колонке с силикагелем (элюент (V/V): петролейный эфир/этилацетат (объемное соотношение) = 50:1-10:1) с получением 12-4.
Стадия D: 12-4 (1,2 г, 3,70 ммоль) и 4-метоксикарбонилиндол-2-бороновую кислоту (810,59 мг, 3,70 ммоль) растворяли в диметиловом эфире этиленгликоля (15 мл) и воде (3 мл) и добавляли дихлорид [1,1-бис(ди-трет-бутилфосфино)ферроцен]палладия (241,23 мг, 370,13 мкмоль) и бикарбонат натрия (621,89 мг, 7,40 ммоль). Реакционную систему перемешивали при 80°С в течение 16 ч. После завершения реакции к реакционной системе добавляли воду (100 мл) и экстрагировали с помощью этилацетата (100 мл × 2). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (100 мл × 1), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали при пониженном давлении и очищали на колонке с силикагелем (элюент (V/V): петролейный эфир/этилацетат (объемное соотношение) = 10:1-2:1) с получением 12-5.
Стадия Е: 12-5 (1,1 г, 32,43 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл) и добавляли палладий на углероде (100 мг, чистота 10%) при комнатной температуре. Реакционную систему перемешивали при 25°С в течение 16 ч. в атмосфере водорода при давлении 15 фунтов/кв. дюйм. После завершения реакции реакционную систему фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 12-6.
Получение соединения 12-6 осуществляли согласно способу, представленному в примере 1, с получением соединения до удаления защитной группы Boc, которое затем разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: AD-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в этаноле; градиент элюирования: 35%-35%, 2,3 мин.; 50 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 12_АА (время удерживания = 2,771 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 98%) и 12_ВВ (время удерживания = 2,875 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 98%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 12_А (время удерживания = 4,564 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%о) и соединения примера 12_В (время удерживания = 4,148 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: AS-3 (100 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 30%-45% изопропанол (0,05%) изопропиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 12_А: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 8,56 (s, 1Н), 7.81 (d, J=7,09 Гц, 1H), 7,67 (d, J=7,95 Гц, 1H), 7,48-7,59 (m, 4Н), 7,32 (t, J=7.82 Гц, 1Н), 5,42-5,52 (m, 1Н), 5,25-5,35 (m, 1Н), 3,77 (br s, 1H), 3,60 (br s, 2H), 3,42 (br d,J=7,58 Гц, 1H), 3,28 (br d, J=9,66 Гц, 1H), 2,52 (br s, 1H), 2,08-2,30 (m, 1H).
Пример 12_B: 1H ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 8,55 (br s, 1H), 7,78-7,85 (m, 1H), 7,67 (d, J=7,58 Гц, 1H), 7,49-7,60 (m, 4H), 7,33 (t, J=7,83 Гц, 1H), 5,41-5,51 (m, 1H), 5,25-5,36 (m, 1H), 3,72-3,83 (m, 1H), 3,58-3,65 (m, 2H), 3,38-3,52 (m, 1H), 3,27 (br s, 1H), 2,53 (br d, J=4,16 Гц, 1H), 2,11-2,26 (m, 1H).
Пример 13 (13_А и 13_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 1.
В случае примера 13 перед удалением защитной группы Boc соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: AD-H (250 мм х 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в изопропаноле; градиент элюирования: 25%-25%, 2,0 мин.; 500 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 13_АА (время удерживания = 3,090 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 85%) и 13_ВВ (время удерживания = 3,357 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 86%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 13_А (время удерживания = 1,477 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 93%) и соединения примера 13_В (время удерживания = 1,162 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 50%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Chiralpak AD-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% изопропанол (0,05%) диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 13_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 7,69 (d, J=7,46 Гц, 1H), 7,55 (d, J=7,95 Гц, 1H), 7,32-7,38 (m, 1H), 7,15-7,22 (m, 3Н), 5,30-5,38 (m, 1Н), 5,16-5,25 (m, 1Н), 3,02 (br d, J=10,03 Гц, 2Н), 2,48-2,70 (m, 3Н), l,88(br d, J=12,10 Гц, 1Н), 1,66-1,78 (m, 3Н).
Пример 13_В: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 7,69 (d, J=6,85 Гц, 1H), 7,57 (d, J=7,95 Гц, 1H), 7,36-7,43 (m, 1H), 7,18-7,27 (m, 3Н), 5,30-5,38 (m, 1H), 5,16-5,24 (m, 1H), 3,15 (br t, J=11,92 Гц, 3Н), 2,68-2,88 (m, 2H), 1,83-1,96 (m, 2H), 1,69-1,78 (m, 2H).
Пример 14 (14_A и 14_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 3.
В случае примера 14 перед удалением защитной группы Boc соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: Whelk-Ol (250 мм × 50 мм, 10 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в метаноле; градиент элюирования: 40%-40%, 3,6 мин.; 150 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 14_АА (время удерживания = 4,092 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и 14_ВВ (время удерживания = 4,411 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 98%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 14_А (время удерживания = 1,489 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 14_В (время удерживания = 2,700 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 91%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Chiralpak AD-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% изопропанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 14_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ=11,82 (s, 1H), 11,25-10,87 (m, 1Н), 8,30 (s, 1Н), 7,74-7,65 (m, 2Н), 7,60-7,54 (m, 1H), 7,52-7,45 (m, 1H), 7,44-7,39 (m, 1H), 7,36-7,28 (m, 1Н), 5,30-5,17 (m, 1H), 5,13-4,99 (m, 1H), 4,37 (br t, J=7,9 Гц, 1H), 3,21-3,07 (m, 2H), 2,34-2,25 (m, 1H), 1,97-1,72 (m, 3H).
Пример 14_B: H ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ=11,80-11,74 (m, 1H), 11,15-11,03 (m, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,73-7,65 (m, 2H), 7,58-7,52 (m, 1H), 7,48-7,38 (m, 2H), 7,31 (s, 1H), 5,28-5,18 (m, 1H), 5,11-5,02 (m, 1H), 4,32-4,27 (m, 1H), 3,15-3,10 (m, 1H), 3,08-3,03 (m, 1H), 2,30-2,22 (m, 1H), 1,92-1,80 (m, 2H), 1,72-1,62 (m, 1H).
Пример 15 (15_А и 15_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 8.
В случае примера 15 перед удалением защитной группы Boc соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: AD-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в изопропаноле; градиент элюирования: 20%-20%, 3,1 мин.; 250 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 15_АА (время удерживания = 3,191 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и 15_ВВ (время удерживания = 3,511 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 97%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 15_А (время удерживания = 2,28 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 15_В (время удерживания = 2,101 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 87%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Chiralpak OD-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 5%-40% этанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 15_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульф оксид) δ ppm 1,64 (br s, 1Н), 1,75-1,89 (m, 2Н), 2,17-2,30 (m, 1H), 3,07 (br d, J=17,69 Гц, 2Н), 5,14-5,32 (m, 1H), 5,37-5,52 (m, 1H), 7,31 (t, J=7,72 Гц, 1Н), 7,39 (br s, 2Н), 7,65 (d, J=8,03 Гц, 1Н), 7,68-7,75 (m, 2Н), 8,23 (br s, 1Н), 11,08 (s, 1H), 11,85 (br s, 1H).
Пример 15_B: H ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ ppm 1,66 (br s, 1H), 1,86 (br s, 2H), 2,25 (br s, 1H), 3,09 (br s, 2H), 5,24 (br d, J=14,05 Гц, 1H), 5,39-5,49 (m, 1H), 7,31 (t, J=7,78 Гц, 1H), 7,39 (br s, 2H), 7,66 (d, J=8,03 Гц, 1H), 7,69 7,74 (m, 2H), 8,16 (br s, 1H), 11,08 (s, 1H), 11,83 (s, 1H).
Пример 16 (16_A и 16_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 3.
В случае примера 16 перед удалением защитной группы Boc соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: AD (250 мм × 30 мм, 10 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в изопропаноле; градиент элюирования: 50%-50%, 3,7 мин.; 52 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 16_АА (время удерживания = 0,567 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и 16_ВВ (время удерживания = 0,835 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 99%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 16_А (время удерживания = 0,702 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 16_В (время удерживания = 1,301 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Amycoat (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 60% изопропанол (0,05%) диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 16_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ=11.98 (s, 1H), 11,11 (s, 1Н), 8,79-8,73 (m, 1H), 8,04-7,98 (m, 1Н), 7,74-7,66 (m, 3Н), 7,33 (s, 1H), 5,47 (d, J=14,7 Гц, 1Н), 5,31-5,19 (m, 1Н), 4,56-4,46 (m, 1H), 3,23-3,09 (m, 3Н), 1,95-1,83 (m, 3Н).
Пример 16_В: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ=11.99 (s, 1H), 11,23-11,04 (m, 1Н), 8,77 (s, 1Н), 8,27-8,17 (m, 1H), 8,08-7,99 (m, 1H), 7,73-7,66 (m, 3Н), 7,34 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 5,53-5,42 (m, 1H), 5,29-5,20 (m, 1H), 4,64-4,52 (m, 1H), 3,27-3,14 (m, 3Н), 1,86 (br s, 3Н).
Пример 17 (17_А и 17_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 3.
В случае примера 17 перед удалением защитной группы Boc соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: WHELK-01 (250 мм × 50 мм, 10 мкм); подвижная фаза: 0,1%) аммиак в этаноле; градиент элюирования: 45%-45%, 3,2 мин.; 150 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 17_АА (время удерживания = 2,145 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и 17_ВВ (время удерживания = 2,396 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 93%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 17_А (время удерживания = 0,622 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 17_В (время удерживания = 1,114 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 95%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Chiralpak OD-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% этанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 17_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ=11,96 (s, 1Н), 11,16 11,06 (m, 1Н), 8,31 8,17 (m, 1Н), 7,69 (dd, J=7,6, 15,4 Гц, 2Н), 7,37-7,28 (m, 3Н), 5,51-5,40 (m, 1Н), 5,31-5,19 (m, 1Н), 4,67-4,56 (m, 1H), 3,17-3,11 (m, 1H), 3,09-3,03 (m, 1Н), 2,28-2,18 (m, 1Н), 2,03-1,82 (m, 3Н).
Пример 17_В: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ=11,94-11,87 (m, 1H), 11,14-11,05 (m, 1Н), 8,24-8,21 (m, 1Н), 7,74-7,63 (m, 2Н), 7,37-7,25 (m, 3Н), 5,44 (s, 1H), 5,30-5,21 (m, 1Н), 4,54-4,47 (m, 1Н), 3,10-3,05 (m, 1H), 2,96-2,91 (m, 1H), 2,15 (br s, 1H), 1,98-1,77 (m, 3Н).
Пример 18
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 12.
Пример 18: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 8,53 (s, 1Н), 7,79-7,89 (m, 1H), 7,57-7,73 (m, 2Н), 7,23-7,50 (m, 3Н), 6,54 (br s, 1H), 5,41-5,54 (m, 1H), 5,25-5,38 (m, 1Н), 4,51 (br s, 2Н), 4,30 (br d, J=2,08 Гц, 2H).
Пример 19 (19_А и 19_В)
Стадия А: 19-1 (10 г, 33,23 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100,00 мл) и к реакционной системе по каплям добавляли н-бутиллитий (2,5 М, 13,29 мл) при -78°С в атмосфере азота и добавление по каплям завершали в пределах получаса. Раствор N-трет-бутоксикарбонил-3-пиперидона (6,62 г, 33,23 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) добавляли по каплям к реакционной системе при -78°С в атмосфере азота. Полученную реакционную систему перемешивали при -78°С в течение 1,5 ч. Затем к реакционной системе добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (100 мл) для гашения реакции и экстрагировали с помощью этилацетата (100 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на колонке с силикагелем (элюент: петролейный эфир / этилацетат = 15/13/1) с получением 19-2.
Стадия В: 19-2 (9,56 г, 22,83 ммоль) растворяли в дихлорметане (100 мл) и добавляли трифторид диэтиламиносеры (18,40 г, 114,14 ммоль) к реакционной системе при -78°С в атмосфере азота. Реакционную систему перемешивали при -78°С в течение 2 ч. Затем к реакционной системе добавляли водный раствор бикарбоната натрия (10 мл, рН=7-8) для гашения реакции и экстрагировали с помощью этилацетата (10 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (10 мл × 3), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на колонке с силикагелем (элюент: петролейный эфир / этилацетат = 30/1-5/1) с получением 19-3.
Синтез 19-4 и последующих соединений осуществляли согласно примеру 1.
В случае примера 19 перед удалением защитной группы Boc соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: AD-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в этаноле; градиент элюирования: 25%-25%, 2,7 мин.; 570 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 19_АА (время удерживания = 1,400 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и 19_ВВ (время удерживания = 1,489 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 91,2%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 19_А (время удерживания = 0,901 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 19_В (время удерживания = 1,325 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 92%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: AD-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% изопропанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 19_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ ppm 11,92 (s, 1H), 11,09 (s, 1Н), 8,24 (s, 1H), 7,72-7,67 (m, 1Н), 7,65-7,64 (m, 2Н), 7,474-7,465 (m, 2Н), 7,34-7,32 (m, 1Н), 5,46-5,42 (d, J=14,80 Гц, 1H), 5,28-5,25 (d, J=14,80 Гц, 1Н), 3,29-3,22 (dd, J=23,20 Гц, 4,40 Гц, 1Н), 3,08-3,04 (d, J=12,8 Гц, 1Н), 2,73 (s, 1H), 2,51-2,11 (m, 1Н), 1,68-1,64 (m, 1Н).
Пример 19_В: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ ppm 11,90 (s, 1H), 11,09 (s, 1Н), 8,24 (s, 1H), 7,71-7,69 (m, 1Н), 7,67-7,64 (m, 2Н), 7,463-7,457 (m, 2Н), 7,34-7,32 (m, 1Н), 5,45-5,42 (d, J=14,80 Гц, 1H), 5,28-5,25 (d, J=14,80 Гц, 1H), 3,22-3,15 (m, 2H), 3,03-3,00 (m, 2H), 2,67 (s, 1H), 2,50-2,09 (m, 2H), 1,83 1,79 (m, 1H), 1,63-1,60 (m, 1H).
Пример 20 (20_А и 20_В)
Соединение примера 11_А (50 мг, 142,3 мкмоль) и 2-бромэтанол (21,34 мг, 170,76 мкмоль) растворяли в N,N-диметилформамиде и затем добавляли карбонат калия (23,60 мг, 0,17 ммоль). Полученную реакционную систему перемешивали при 60°С в течение 16 ч. После выявления завершения реакции реакционную систему фильтровали с удалением нерастворимого материала и оставшуюся жидкость высушивали посредством ротационного выпаривания и подвергали препаративному разделению (колонка: Phenomenex Synergi С18 (150 мкм × 25 мкм, 10 мкм); подвижная фаза: вода (0,225% муравьиная кислота)-ацетонитрил; В%: 15%-45%, 9 мин.) с получением соединения примера 20_А (время удерживания = 2,523 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 99%). Соединение примера 20_В (время удерживания = 2,130 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 99%) может быть получено таким же путем.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Cellucoat (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 5%-40% этанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 20_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ=11,91-11,77 (m, 1Н), 11,08 (br s, 1Н), 7,75-7,63 (m, 3Н), 7,43-7,28 (m, 3Н), 5,50-5,37 (m, 1H), 5,30-5,19 (m, 1Н), 4,50-4,38 (m, 1H), 3,74-3,65 (m, 1Н), 3,51-3,43 (m, 1Н), 3,40-3,23 (m, 1Н), 3,16-2,94 (m, 2Н), 2,31-2,13 (m, 2Н), 2,04-1,71 (m, 3Н), 1,71-1,58 (m, 1Н).
Пример 20_В: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ=11,84 (s, 1H), 11,42-10,86 (m, 1Н), 8,22 (s, 1Н), 7,77-7,62 (m, 3Н), 7,46-7,24 (m, 3Н), 5,51-5,37 (m, 1H), 5,34-5,18 (m, 1H), 3,67 (s, 1H), 3,47 (br d, J=3,2 Гц, 2Н), 3,33 (br s, 1H), 2,37-2,14 (m, 5H), 1,88-1,79 (m, 2H), 1,58-1,49 (m, 1H).
Пример 21 (21_А и 21_В)
Стадия А: оксалилхлорид (0,579 г, 4,56 ммоль) добавляли к дихлорметану (15 мл) и медленно по каплям добавляли дейтерированный N,N-диметилформамид (0,5 г, 6,84 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. Реакционную систему перемешивали при 0°С в течение 15 мин. 21-1 (1 г, 2,28 ммоль) затем растворяли в дихлорметане (5 мл) и добавляли к реакционной системе при 0°С. Реакционную систему перемешивали при 15°С в течение 0,5 ч. После выявления завершения реакции к реакционной системе добавляли 10% водный раствор ацетата аммония (30 мл) и тетрагидрофуран (20 мл) для гашения реакции. Органический растворитель удаляли посредством ротационного выпаривания, и остальную часть экстрагировали с помощью этилацетата (30 мл × 2). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (30 мл × 3) и насыщенным солевым раствором (30 мл × 3); высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 21-2.
Стадия В: 21-2 (2,15 г, 5,08 ммоль) растворяли в дихлорметане (10 мл) и добавляли триэтиламин (0,65 г, 6,42 ммоль), ди-трет-бутилдикарбонат (0,7 г, 3,21 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (26 мг, 0,214 ммоль). Реакционную систему перемешивали при 15°С в течение 1 ч. Реакционную систему концентрировали посредством ротационного выпаривания при пониженном давлении и затем добавляли этилацетат (60 мл). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (30 мл × 3) и насыщенным солевым раствором (50 мл), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 21-3.
Стадия С: 21-3 (1,2 г, 2,11 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (8 мл) и метаноле (2 мл). Реакционную систему охлаждали до 0°С и добавляли дейтерированный борогидрид натрия (120 мг, 3,17 ммоль). Реакционную систему перемешивали при 0°С в течение 0,5 ч. К реакционной системе добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (30 мл) для гашения реакции и экстрагировали с помощью этилацетата (30 мл × 2). Органические фазы объединяли, промывали водой (30 мл), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 21-4.
Можно ссылаться на способ, представленный в примере 3, для получения из соединения 21-4 двух изомеров с разными конфигурациями: 21_АА (время удерживания = 1,489 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и 21_ВВ (время удерживания = 1,558 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 97%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 21_А (время удерживания = 1,857 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 21_В (время удерживания = 2,663 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 97%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Chiralpak IG-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% метанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 21_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ ppm 1,58-1,74 (m, 1Н), 1,85 (br dd, J=13,63, 7,27 Гц, 2Н), 2,25 (td, J=12,17, 7,09 Гц, 1H), 2,99-3,16 (m, 2Н), 4,38^,53 (m, 1Н), 7,24-7,48 (m, 3Н), 7,60-7,80 (m, 3Н), 8,22 (br s, 1H), 11,07 (br s, 1H), 11,85 (br s, 1H).
Пример 21_B: H ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ ppm 1,61-2,01 (m, 3Н), 2,21-2,35 (m, 1H), 3,04-3,22 (m, 2H), 4,54 (br s, 1H), 7,27-7,47 (m, 3H), 7,60-7,81 (m, 3H), 8,26 (br s, 1H), 11,08 (br s, 1H), 11,89 (br s, 1H).
Пример 22 (22_А и 22_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 3.
В случае примера 22 перед удалением защитной группы Boc соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: WHELK-O1 (250 мм × 50 мм, 10 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в этаноле; градиент элюирования: 40%-40%, 2,8 мин.; 120 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 22_АА (время удерживания = 1,411 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и 22_ВВ (время удерживания = 1,613 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 99%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 22_А (время удерживания = 1,523 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 22_В (время удерживания = 3,001 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Chiralpak AD-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% метанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 22_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ ppm 8,49 (s, 1H), 7,63-7,61 (m, 1H), 7,55-7,53 (m, 1H), 7,473-7,468 (m, 2Н), 7,45-7,38 (m, 1H), 5,32-5,28 (d, J=14,4 Гц, 1Н), 5,11-5,08 (d, J=14,4 Гц, 1H), 4,70-4,68 (m, 1H), 3,50-3,44 (m, 2Н), 2,57-2,51 (m, 1H), 2,26-2,18 (m, 3Н).
Пример 22_В: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ ppm 8,53 (s, 1H), 7,63-7,57 (m, 1H), 7,553-7,547 (m, 1Н), 7,49-7,47 (m, 2Н), 7,43-7,40 (m, 1Н), 5,34 5,31 (d, J=14,8 Гц, 1Н), 5,14-5,10 (d, J=14,8 Гц, 1H), 4,70-4,66 (m, 1H), 3,49-3,44 (m, 2Н), 2,55 (s, 1H), 2,30-2,22 (m, 3Н).
Пример 23 (23_А и 23_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 21.
В случае примера 23 после удаления защитной группы с помощью трифторуксусной кислоты получали соединение примера 23_А (время удерживания = 3,712 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 99%) и соединение примера 23_В (время удерживания = 3,397 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 97%).
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Cellucoat (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 10%-40% изопропанол (0,05%) диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 23_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ ppm 1,50 (s, 3Н), 1,68-1,79 (m, 1Н), 1,87-1,98 (m, 1Н), 2,07-2,18 (m, 2Н), 2,91-3,01 (m, 1Н), 3,13-3,28 (m, 1Н), 7,22-7,49 (m, 3Н), 7,61-7,82 (m, 3Н), 8,20 (s, 1H), 11,07 (s, 1H), 11,85 (s, 1Н).
Пример 23_В: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ ppm 1,50 (s, 3Н), 1,69-1,81 (m, 1Н), 1,88-1,98 (m, 1Н), 2,08-2,18 (m, 2Н), 2,89-3,06 (m, 1Н), 3,14-3,31 (m, 1Н), 7,25-7,48 (m, 3Н), 7,62-7,82 (m, 3Н), 8,23 (s, 1H), 11,08 (s, 1H), 11,87 (s, 1Н).
Пример 24 (24_А и 24_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 3.
В случае примера 24 перед удалением защитной группы Boc соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: AD-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в изопропаноле; градиент элюирования: 30%-30%, 1,5 мин.; 45 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 24_АА (время удерживания = 1,474 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 99%) и 24_ВВ (время удерживания = 1,560 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 94%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 24_А (время удерживания = 2,298 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 99%) и соединения примера 24_В (время удерживания = 2,115 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 88%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Cellucoat (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 5%-40% изопропанол (0,05%) диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 24_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 8,54 (br s, 1Н), 7,60-7,70 (m, 4H), 7,54 (dd, J=2,26, 10,54 Гц, 1H), 7,40 (dd, J=2,26, 9,03 Гц, 1H), 5,40-5,55 (m, 1H), 5,23-5,37 (m, 1H), 4,70 (br dd, J=6,90, 9,54 Гц, 1H), 3,40-3,61 (m, 2H), 2,48-2,64 (m, 1H), 2,14-2,43 (m, 3H).
Пример 24_B: H ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 8,52 (br s, 1H), 7,63 (q, J=8,41 Гц, 4H), 7,53 (dd, J=2,20, 10,48 Гц, 1H), 7,38 (dd, J=2,26, 9,03 Гц, 1Н), 5,38-5,53 (m, 1H), 5,24-5,35 (m, 1H), 4,71 (br dd, J=6,90, 9,41 Гц, 1H), 3,43-3,61 (m, 2H), 2,48-2,62 (m, 1H), 2,18-2,39 (m, 3H).
Пример 25 (25_А и 25_В)
Стадия А: 25-1 (25 г, 129,42 ммоль) растворяли в дихлорметане (250 мл) и добавляли триэтиламин (26,19 г, 258,83 ммоль), 4-диметиламинопиридин (3,16 г, 25,88 ммоль), ди-шреш-бутилдикарбонат (31,07 г, 142,36 ммоль) при 0°С. Реакционную систему перемешивали при 25°С в течение 2 ч. Реакционную систему промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (80 мл × 3) и насыщенным солевым раствором (50 мл × 2), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 25-2.
Стадия В: диизопропиламин (13,80 г, 136,38 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (60 мл), и к реакционной системе по каплям добавляли н-бутиллитий (2,5 М, 47,73 мл) при -78°С в атмосфере азота, и добавление по каплям завершали в пределах получаса. Реакционную систему перемешивали при 0°С в течение получаса и затем по каплям добавляли в другую трехгорлую колбу, содержащую раствор 25-2 (25 г, 285,14 ммоль) и триизопропилбората (24,05 г, 127,86 ммоль) в тетрагидрофуране (200 мл), при 0°С в атмосфере азота, и добавление по каплям быстро завершали при 0°С. Полученную реакционную систему перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Затем к реакционной системе добавляли раствор уксусной кислоты (50 мл) для гашения реакции, разбавляли водой (60 мл) и экстрагировали с помощью этилацетата (60 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (50 мл × 3) и насыщенным солевым раствором (40 мл × 2), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт суспендировали с ацетонитрилом (100 мл) и водным раствором (300 мл) и осадок на фильтре высушивали с применением масляного насоса с получением 25-3.
Стадия С: 25-3 (45 г, 133,49 ммоль) добавляли к раствору трифторуксусной кислоты (200 мл) при 0°С в виде трех частей и реакционную систему перемешивали при 0°С в течение 1 ч. в атмосфере азота. Затем реакционную систему выливали в ледяную воду (300 мл) с осаждением твердого вещества и получали осадок на фильтре и концентрировали его при пониженном давлении с применением масляного насоса с получением 25-4.
Стадия D: 25-5 (25 г, 105,98 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100,00 мл) и затем по каплям добавляли в трехгорлую колбу, содержащую магниевую стружку (2,58 г, 105,98 ммоль) и йод (489,05 мг, 1,93 мкмоль) при 70°С в атмосфере азота, и добавление по каплям завершали в пределах получаса. Реакционную систему перемешивали при 70°С в течение 1 ч. и затем охлаждали до 20°С. Реакционную систему по каплям добавляли в другую трехгорлую колбу, содержащую раствор трет-бутил-2-оксопирролидин-1-карбоксилата (17,84 г, 96,34 ммоль) в тетрагидрофуране (150 мл) при -70°С в атмосфере азота, и добавление по каплям завершали в пределах получаса. Полученную реакционную систему перемешивали при -70°С в течение 2 ч. и затем нагревали до 10°С и перемешивали в течение 1 ч. К реакционной системе добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (60 мл) для гашения реакции и экстрагировали с помощью этилацетата (60 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на колонке с силикагелем с получением 25-6.
Стадия Е: 25-6 (50 г, 146,10 ммоль) добавляли к трифторуксусной кислоте (250 мл) при 0°С. Реакционную систему перемешивали при 15°С в течение 12 ч. Реакционную систему доводили до значения рН=14 с помощью 40% водного раствора гидроксида натрия и осаждали желтое твердое вещество. Полученную смесь фильтровали и осадок на фильтре промывали небольшим количеством воды и подвергали ротационному выпариванию с получением 25-7.
Стадия F: 25-7 (15 г, 66,94 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (150 мл). Реакционную систему охлаждали до -78°С в атмосфере азота, и к реакционной системе по каплям добавляли диэтилэфират три фторида бора (19 г, 133,87 ммоль), и добавление по каплям завершали в пределах получаса. Реакционную систему перемешивали при -78°С в течение получаса. Затем к реакционной системе по каплям добавляли раствор метиллития (1,6 М, 83,67 мл). Реакционную систему медленно нагревали до 78°С и перемешивали в течение 19,5 ч. Реакционную систему охлаждали до комнатной температуры, добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (100 мл) для гашения реакции, добавляли воду (30 мл) и экстрагировали с помощью этилацетата (80 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 2), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 25-8.
Стадия G: 25-8 (16 г, 66,63 ммоль) растворяли в дихлорметане (150 мл) и добавляли триэтиламин (20,23 г, 199,88 ммоль) при 0°С с последующим добавлением ди-трет-бутилдикарбоната (29,08 г, 133,26 ммоль). Реакционную систему перемешивали при 15°С в течение 1 ч. Реакционную систему концентрировали посредством ротационного выпаривания при пониженном давлении, добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (60 мл) и экстрагировали с помощью этилацетата (80 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 3), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 25-9.
Стадия Н: 25-9 (9 г, 26,45 ммоль) и 25-4 (7,52 г, 31,74 ммоль) растворяли в диметиловом эфире этиленгликоля (100 мл) и воде (20 мл) и добавляли бикарбонат натрия (6,67 г, 79,35 ммоль) и дихлорид [1,1-бис(ди-трет-бутилфосфино)ферроцен]палладия (1,72 г, 2,65 ммоль). После трехкратной продувки азотом реакционную систему перемешивали при 80°С в течение 12 ч. в атмосфере азота. Реакционную систему концентрировали посредством ротационного выпаривания при пониженном давлении, добавляли насыщенный солевой раствор (60 мл) и экстрагировали с помощью этилацетата (60 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали на колонке с силикагелем с получением 25-10.
Стадия I: оксалилхлорид (5,61 г, 44,20 ммоль) добавляли к дихлорметану (150 мл) и медленно по каплям добавляли N,N-диметилформамид (4,85 г, 66,30 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. Реакционную систему перемешивали при 0°С в течение 15 мин. Затем 25-10 (10 г, 22,10 ммоль) растворяли в дихлорметане (50 мл) и добавляли к реакционной системе при 0°С. Реакционную систему перемешивали при 15°С в течение 0,5 ч. К реакционной системе добавляли 10% водный раствор ацетата аммония (100 мл) и тетрагидрофуран (100 мл) для гашения реакции и экстрагировали с помощью этилацетата (45 мл × 2). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (50 мл × 3) и насыщенным солевым раствором (50 мл × 3), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 25-11.
Стадия J: 25-11 (10,62 г, 22,10 ммоль) растворяли в дихлорметане (80 мл) и добавляли триэтиламин (6,71 г, 66,30 ммоль), ди-трет-бутилдикарбонат (9,65 г, 44,20 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (810,01 мг, 6,63 ммоль) при 0°С. Реакционную систему перемешивали при 15°С в течение 1 ч. Реакционную систему концентрировали посредством ротационного выпаривания при пониженном давлении, добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (60 мл) и экстрагировали с помощью этилацетата (60 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 3), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 25-12.
Стадия К: 25-12 (12,75 г, 21,96 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100 мл) и метаноле (25 мл). Реакционную систему охлаждали до 0°С и добавляли борогидрид натрия (1,25 г, 32,94 ммоль). Реакционную систему перемешивали при 0°С в течение 40 мин. К реакционной системе добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (80 мл) для гашения реакции и экстрагировали с помощью этилацетата (80 мл × 2). Органические фазы объединяли, промывали водой (50 мл), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 25-13.
Стадия L: 25-13 (12,79 г, 21,95 ммоль) растворяли в дихлорметане (150 мл) и добавляли триэтиламин (4,44 г, 43,90 ммоль) с последующим добавлением метансульфонилхлорида (3,02 г, 26,34 ммоль) при 0°С в атмосфере азота. Реакционную систему перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Реакционную систему концентрировали посредством ротационного выпаривания при пониженном давлении и затем добавляли этилацетат (80 мл). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (30 мл × 2) и насыщенным солевым раствором (20 мл × 2), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 25-14.
Стадия М: 25-14 (14,45 г, 21,87 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (150 мл) и добавляли карбонат натрия (4,64 г, 43,74 ммоль) и N-гидроксифталимид (5,35 г, 32,80 ммоль). Реакционную систему перемешивали при 65°С в течение 12 ч. К реакционной системе добавляли водный раствор (60 мл) и экстрагировали с помощью этилацетата (80 мл × 2). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (50 мл × 3) и насыщенным солевым раствором (50 мл × 3), высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали на колонке с силикагелем с получением 25-15.
Стадия N: 25-15 (15 г, 20,61 ммоль) растворяли в метаноле (200 мл) и добавляли 98% гидразингидрат (3,10 г, 61,83 ммоль). Реакционную систему перемешивали при 65°С в течение 2 ч. в атмосфере азота. Реакционную систему фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали на колонке с силикагелем с получением 25-16.
Стадия О: соединение 25-16 разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: AD-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в изопропаноле; градиент элюирования: 25%-25%, 2,7 мин.; 400 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 25_АА (время удерживания = 2,161 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и 25_ВВ (время удерживания = 2,353 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 97%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 25_А (время=3,461 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 98%) и соединения примера 25_В (время=3,128 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 90%) соответственно.
Способ измерения значения ее (энантиомерного избытка): разделительная колонка: Chiralcel Cellucoat (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 10%-40% изопропанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 25_А: 1Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ=12.00 (br s, 1H), 11,30 (br s, 1Н), 8,23 (br s, 1Н), 7,62 (br d, J=7,75 Гц, 4H), 7,45 (br d, J=9,13 Гц, 2H), 5,44 (br d, J=14,51 Гц, 1H), 5,14-5,31 (m, 1H), 2,99-3,42 (m, 2H), 1,89-2,23 (m, 4H), 1,53 (br s, 3H).
Пример 25_B: 1H ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ=12.01 (br s, 1H), 11,30 (s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,63 (s, 4H), 7,40-7,49 (m, 2H), 5,45 (br d,J=14,55 Гц, 1H), 5,22 (dd, J=7,40, 14,73 Гц, 1H), 3,28 (br d, J=8,44 Гц, 2H), 1,98-2,31 (m, 4H), 1,56 (s, 3H).
Пример 26 (26_А и 26_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 6.
Наконец, получали соединение примера 26_А (время удерживания = 11,430 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединение примера 26_В (время удерживания = 8,159 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) посредством удаления защитной группы с помощью трифторуксусной кислоты.
Способ хиральной HPLC: разделительная колонка: Chiralpak IA-3 (50 мм × 4;6 мм, 3 мкм); подвижная фаза: фаза А, н-гептан (0,05%) диэтиламин), фаза В, 8% изопропанол + ацетонитрил (4:1) (0,05%) диэтиламин); скорость потока: 1 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 26_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 8,54 (s, 1Н), 7,63 (t, J=8,19 Гц, 1Н), 7,55 (dd, J=2,25, 10,51 Гц, 1Н), 7,37-7,48 (m, 3Н), 5,41-5,52 (m, 1H), 5,27-5,37 (m, 1Н), 3,47-3,56 (m, 1H), 3,37-3,45 (m, 1Н), 2,39-2,58 (m, 2Н), 2,11-2,38 (m, 2Н), 1,70 (s, 3Н).
Пример 26_В: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный метанол) δ 8,52 (s, 1Н), 7,63 (t, J=8,25 Гц, 1Н), 7,56 (dd, J=2,31, 10,44 Гц, 1Н), 7,37-7,50 (m, 3Н), 5,43-5,51 (m, 1H), 5,28-5,36 (m, 1H), 3,55 (ddd, J=4,82, 9,35, 11,85 Гц, 1H), 3,38-3,48 (m, 1H), 2,41-2,62 (m, 2Н), 2,16-2,39 (m, 2Н), 1,72 (s, 3Н).
Пример 27 (27_А и 27_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 21 и примере 8.
В случае примера 27 перед удалением защитной группы Boc соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: AD-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в изопропаноле; градиент элюирования: 25%-25%, 4,1 мин.; 104 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 27_АА (время удерживания = 1,391 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 98%) и 27_ВВ (время удерживания = 1,482 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 94%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 27_А (время удерживания = 2,294 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 99%) и соединения примера 27_В (время удерживания = 2,116 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 93%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Cellucoat (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 5%-40% этанол (0,05% диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 27_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ ppm 1,76-2,06 (m, 3Н), 2,30 (ddd, J=11,57, 7,13, 4,19 Гц, 1Н), 3,11-3,23 (m, 2Н), 7,32 (t, J=7,75 Гц, 1H), 7,40-7,53 (m, 2Н), 7,63-7,79 (m, 3Н), 8,26 (s, 1Н), 11,11 (brs, 1H), 11,93 (s, 1Н).
Пример 27_В: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ ppm 1,77-2,04 (m, 3Н), 2,24-2,40 (m, 1H), 3,09-3,33 (m, 2Н), 7,33 (X, J=1,15 Гц, 1H), 7,40-7,51 (m, 2Н), 7,64-7,78 (m, 3Н), 8,21 (s, 1H), 11,11 (s, 1Н), 11,92 (s, 1Н).
Пример 28 (28_А и 28_В)
Синтез осуществляли согласно способу, представленному в примере 3.
В случае примера 28 перед удалением защитной группы Boc соединение разделяли на колонке для хиральной HPLC (разделительная колонка: AD-H (250 мм × 30 мм, 5 мкм); подвижная фаза: 0,1% аммиак в изопропаноле; градиент элюирования: 20%-20%, 2,3 мин.; 960 мин.) с получением двух изомеров с разными конфигурациями: 28_АА (время удерживания = 1,474 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 99%) и 28_ВВ (время удерживания = 1,560 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 94%), в которых удаляли защитную группу с помощью трифторуксусной кислоты с получением соединения примера 28_А (время удерживания = 2,619 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 100%) и соединения примера 28_В (время удерживания = 2,350 мин., значение ее (энантиомерный избыток): 96%) соответственно.
Способ SFC (сверхкритическая флюидная хроматография): разделительная колонка: Chiralpak AD-3 (50 мм × 4,6 мм, I.D. 3 мкм); подвижная фаза: 40% изопропанол (0,05%) диэтиламин) в CO2; скорость потока: 3 мл/мин.; длина волны: 220 нм.
Пример 28_А: Н ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ ppm 1,56-1,70 (m, 1Н), 1,77-1,93 (m, 2Н), 2,18-2,32 (m, 1Н), 2,93 3,18 (m, 2Н), 4,45 (br t, J=7,47 Гц, 1 Н), 5,18-5,50 (m, 2Н), 7,31-7,52 (m, 4Н), 7,72 (t, J=7,97 Гц, 1Н), 8,25 (s, 1H), 11,29 (br s, 1Н), 12,01 (s, 1H).
Пример 28_B: H ЯМР (400 МГц, дейтерированный диметилсульфоксид) δ ppm 1,67 (dq, J=12,25, 8,17 Гц, 1Н), 1,78-1,98 (m, 2Н), 2,18-2,33 (m, 1Н), 2,99-3,15 (m, 2Н), 4,48 (br t, J=7,65 Гц, 1Н), 5,15-5,30 (m, 1H), 5,35-5,50 (m, 1H), 7,31-7,52 (m, 4Н), 7,64-7,79 (m, 1H), 8,27 (s, 1Н), 11,30 (br s, 1Н), 12,04 (s, 1H).
Экспериментальный пример 1. Эксперимент с применением фермента PARP-1
Материалы для осуществления эксперимента: тестируемые соединения; набор для анализа НТ Universal Chemiluminescent PARP (приобретен в TREVIGEN); PBS (приобретен в Wisent); Triton X-100 (приобретен в Macklin); многомаркерный анализатор Envision (PerkinElmer).
Методики проведения эксперимента
(I) Получение реагентов.
1. Промывочный раствор: Triton Х-100 добавляли к 1-кратному PBS, и конечная концентрация Triton Х-100 составляла 0,1%.
2. 1-кратный буфер PARP: 20-кратный буфер PARP из набора подвергали 20-кратному разбавлению водой с получением 1-кратного буфера PARP. Данный буфер применяли для получения соединения, раствора фермента и раствора субстрата.
3. 1-кратный раствор Strep-Diluent: 10-кратный Strep-Diluent из набора подвергали 10-кратному разбавлению водой с получением 1-кратного раствора Strep-Diluent.
(II) Получение тестируемых соединений.
Тестируемые соединения последовательно 5-кратно разбавляли с помощью многоканальной пипетки до получения 8-й концентрации, т.е. от 200 мкМ до 2,56 нМ, при этом концентрация DMSO составляла 100%. 2 мкл каждого из ингибиторов при различных градиентах концентрации добавляли в промежуточный планшет, содержащий соединение, и затем добавляли 38 мкл 1-кратного буфера PARP; их двоих хорошо перемешивали для применения, и концентрация DMSO составляла 5%.
(III) Способ проведения эксперимента.
a) 1-кратный буфер PARP добавляли в тестовый планшет в расчете 50 мкл на лунку и инкубировали при 25°С в течение 30 мин.
b) После завершения инкубации жидкость в тестовом планшете отбрасывали и каждое из соединений с различными градиентами концентрации пипетировали из промежуточного планшета, содержащего соединение, и добавляли в тестовый планшет в расчете 10 мкл на лунку. Эксперимент проводили в двух повторностях для каждой лунки.
c) В тестовый планшет добавляли раствор фермента (0,5 ME) в расчете 15 мкл на лунку. Соединение и фермент инкубировали совместно при 25°С в течение 10 мин.
d) После завершения инкубации 25 мкл 1-кратной смеси PARP (содержащей 2,5 мкл 10-кратной смеси PARP, 2,5 мкл 10-кратной активированной ДНК и 20 мкл 1-кратного буфера PARP) добавляли в каждую лунку тестового планшета. Тестовый планшет инкубировали при 25°С в течение 1 ч. Конечная концентрация соединения составляла от 2 мкМ до 0,0256 нМ, и концентрация DMSO составляла 1%.
e) После завершения инкубации тестовый планшет дважды промывали промывочным раствором в расчете 200 мкл на лунку и затем дважды промывали PBS в расчете 200 мкл на лунку.
f) Strep-HRP из набора подвергали 500-кратному разбавлению с помощью 1-кратного раствора Strep-Diluent, добавляли в тестовый планшет в расчете 50 мкл на лунку и затем инкубировали при 25°С в течение 1 ч.
g) После завершения инкубации тестовый планшет дважды промывали промывочным раствором в расчете 200 мкл на лунку и затем дважды промывали PBS в расчете 200 мкл на лунку.
PeroxyGlow А и В из набора смешивали в соотношении 1:1 и смешанный раствор добавляли в тестовый планшет в расчете 100 мкл на лунку. Результаты хемилюминесценции непосредственно считывали с применением многомаркерного анализатора PerkinElmer Envision со временем интеграции, составляющим 0,5 с.
Анализ данных. Исходные данные преобразовывали в степень ингибирования с применением уравнения (образец мин.) / (макс. мин.) × 100% и аппроксимацию кривой значения IC50 осуществляли с применением четырех параметров (полученных из модели «вариабельный наклон кривой log(ингибитор) в сравнении с вариабельным наклоном кривой отклика» в GraphPad Prism). В таблице 1 представлена ингибирующая активность соединений, раскрытых в данном документе, в отношении фермента PARP1.
Результаты эксперимента
Показатели ингибирующей активности соединений, раскрытых в данном документе, в отношении PARP-1-киназы определяли посредством вышеописанного способа проведения эксперимента и показатели ингибирующей активности (IC50) соединений в отношении фермента in vitro показаны в таблице 1.
Вывод, сделанный в ходе эксперимента: соединения, раскрытые в данном документе, демонстрируют превосходную ингибирующую активность в отношении PARP1.
Экспериментальный пример 2. Эксперимент по изучению антипролиферативной активности с использованием клеток MDA-MB-436 CTG
Материалы для осуществления эксперимента: тестируемые соединения; среда RPMI-1640; фетальная бычья сыворотка; антибиотик пенициллин/стрептомицин; линия клеток MDA-MB-436; многомаркерный анализатор Envision (PerkinElmer).
Методики проведения эксперимента
1. Способ проведения эксперимента.
Клетки MDA-MB-436 высевали в белый 96-луночный планшет посредством добавления 80 мкл суспензии клеток (содержащих 3000 клеток MDA-MB-436) в каждую лунку. Планшет с клетками инкубировали в инкубаторе с CO2 в течение ночи.
Тестируемые соединения последовательно 5-кратно разбавляли с помощью многоканальной пипетки до получения 8-й концентрации, т.е. от 2 мМ до 26 нМ, и эксперимент проводили в двух повторностях для каждой лунки. 78 мкл среды добавляли в промежуточный планшет, 2 мкл каждого из последовательно разбавленных соединений переносили в соответствующие лунки промежуточного планшета и после перемешивания смесь переносили в планшет с клетками в расчете 20 мкл на лунку. Планшет с клетками инкубировали в инкубаторе с CO2 в течение 7 дней. Другой планшет с клетками предоставляли для считывания значений сигнала в день добавления соединения и такие значения сигнала применяли в качестве максимальных значений при проведении анализа данных. Promega CellTiter-Glo добавляли в данный планшет с клетками в расчете 25 мкл на лунку и сигналы люминесценции стабилизировали посредством инкубации в течение 10 мин. при комнатной температуре. Считывание осуществляли с применением многомаркерного анализатора PerkinElmer Envision.
Promega CellTiter-Glo добавляли в планшет с клетками в расчете 25 мкл на лунку и сигналы люминесценции стабилизировали посредством инкубации в течение 10 мин. при комнатной температуре. Считывание осуществляли с применением многомаркерного анализатора PerkinElmer Envision.
2. Анализ данных. Исходные данные преобразовывали в степень ингибирования с применением уравнения (образец - мин.) / (макс.- мин.) × 100% и аппроксимацию кривой значения IC50 осуществляли с применением четырех параметров (полученных из модели «вариабельный наклон кривой log(ингибитор) в сравнении с вариабельным наклоном кривой отклика» в GraphPad Prism). В таблице 2 представлена ингибирующая активность соединений, раскрытых в данном документе, в отношении пролиферации клеток MDA-MB-436.
Результаты эксперимента: показатели антипролиферативной активности соединений, раскрытых в данном документе, в отношении клеток MDA-MB-436 с мутацией BRCA1 определяли посредством способа проведения эксперимента, описанного выше, и полумаксимальные ингибирующие концентрации (IC50) соединений для антипролиферативной активности in vitro показаны в таблице 2.
Вывод, сделанный в ходе эксперимента: соединения, раскрытые в данном документе, обладают превосходной антипролиферативной активностью в отношении клеток MDA-MB-436 с мутацией BRCA1.
Экспериментальный пример 3. Эксперимент по изучению антипролиферативной активности с использованием клеток MDA-MB-231 CTG
Материалы для осуществления эксперимента: тестируемые соединения; среда R DMEM; фетальная бычья сыворотка; антибиотик пенициллин/стрептомицин; линия клеток MDA-MB-231; многоканальный анализатор Envision.
Способ проведения эксперимента.
Клетки MDA-MB-231 высевали в белый 96-луночный планшет посредством добавления 80 мкл суспензии клеток (содержащих 5000 клеток MDA-MB-231) в каждую лунку. Планшет с клетками инкубировали в инкубаторе с CO2 в течение ночи.
Восемь точек концентрации подготавливали для каждого соединения, тестируемые соединения последовательно 3-кратно разбавляли с помощью многоканальной пипетки до получения 8-й концентрации, т.е. от 2 мМ до 920 нМ, и эксперимент проводили в двух повторностях для каждой лунки. 78 мкл среды добавляли в промежуточный планшет, 2 мкл каждого из последовательно разбавленных соединений переносили в соответствующие лунки промежуточного планшета и после перемешивания смесь переносили в планшет с клетками в расчете 20 мкл на лунку. Планшет с клетками инкубировали в инкубаторе с CO2 в течение 3 дней. Другой планшет с клетками предоставляли для считывания значений сигнала в день добавления соединения и такие значения сигнала применяли в качестве максимальных значений при проведении анализа данных. Promega CellTiter-Glo добавляли в данный планшет с клетками в расчете 25 мкл на лунку и сигналы люминесценции стабилизировали посредством инкубации в течение 10 мин. при комнатной температуре. Считывание осуществляли с применением многомаркерного анализатора PerkinElmer Envision.
Promega CellTiter-Glo добавляли в планшет с клетками в расчете 25 мкл на лунку и сигналы люминесценции стабилизировали посредством инкубации в течение 10 мин. при комнатной температуре. Считывание осуществляли с применением многомаркерного анализатора PerkinElmer Envision.
Анализ данных. Исходные данные преобразовывали в степень ингибирования с применением уравнения (образец - мин.) / (макс.- мин.) × 100% и аппроксимацию кривой значения IC50 осуществляли с применением четырех параметров (полученных из модели «вариабельный наклон кривой log(ингибитор) в сравнении с вариабельным наклоном кривой отклика» в GraphPad Prism). В таблице 1 представлена ингибирующая активность соединений, раскрытых в данном документе, в отношении пролиферации клеток MDA-MB-231.
Результаты эксперимента: показатели антипролиферативной активности соединений, раскрытых в данном документе, в отношении клеток MDA-MB-231 с BRCA дикого типа определяли посредством способа проведения эксперимента, описанного выше, и полумаксимальные ингибирующие концентрации (IC50) соединений для антипролиферативной активности in vitro показаны в таблице 3.
Вывод, сделанный в ходе эксперимента: соединения, раскрытые в данном документе, обладают низкой ингибирующей активностью в отношении клеток MDA-MB-231 с BRCA дикого типа, что показывает, что соединения обладают превосходной селективностью.
Экспериментальный пример 4. Эксперимент по изучению антипролиферативной активности в отношении рибозилирования, опосредованного PAR
Материалы для осуществления эксперимента: тестируемые соединения; среда F12K; клетки LoVo; мышиные моноклональные антитела к поли(АДФ-рибоза); козьи антитела к IgG мыши, меченные FITC; пероксид водорода; DAPI; PBS; метанол; ацетон; Tween-20; сухое обезжиренное молоко; многомаркерный анализатор Envision.
Получение реагентов
День первый: клетки LoVo высевали в планшет в расчете 60000 клеток/лунка и затем инкубировали в течение ночи при 37°С/5% CO2.
День второй: получали реагенты.
1. Промывочный раствор: Tween-20 добавляли к 1-кратному PBS, и конечная концентрация Tween-20 составляла 0,05%.
2. Блокирующий раствор: сухое обезжиренное молоко добавляли в промывочный раствор, и конечная концентрация сухого обезжиренного молока составляла 5%.
3. Раствор для фиксации клеток: метанол и ацетон смешивали в соотношении 7:3.
Получение тестируемых соединений: промежуточный планшет 1, содержащий соединение: соединения разбавляли с помощью DMSO и PBS до получения конечных концентраций, составляющих от 10 мкМ до 0,13 нМ, и концентрация DMSO составляла 1%. Промежуточный планшет 2, содержащий соединение: соединения разбавляли с помощью DMSO и PBS, содержащего 50 мМ пероксида водорода, до получения конечных концентраций, составляющих от 10 мкМ до 0,13 нМ, и концентрация DMSO составляла 1%.
Методики проведения эксперимента
1. Клеточный супернатант удаляли и соединение переносили из промежуточного планшета 1, содержащего соединение, в планшет с клетками в расчете 40 мкл на лунку, и смесь инкубировали при 37°С в течение 30 мин.
Лунки, содержащие соединение: соединение, 1% DMSO.
Отрицательный и положительный контроль: добавляли 1% DMSO.
Холостой контроль: лунки без клеток, добавляли PBS.
2. После завершения инкубации соединение переносили из промежуточного планшета 2, содержащего соединение, в планшет с клетками в расчете 40 мкл на лунку, и конечная концентрация H2O2 составляла 25 мМ.
Лунки, содержащие соединение: соединение + 25 мМ H2O2.
Положительный и отрицательный контроль: 1% DMSO + 25 мМ H2O2.
Холостой контроль: лунки без клеток, добавляли PBS.
4. После завершения инкубации планшет с клетками промывали один раз с помощью PBS, предварительно охлажденного на льду и добавляли предварительно охлажденный раствор для фиксации клеток в расчете 100 мкл на лунку. После того, как планшет с клетками оставляли в покое при -20°С в течение 10 мин., раствор для фиксации клеток стряхивали.
5. После сушки на воздухе планшет с клетками промывали с помощью PBS в расчете 200 мкл на лунку и затем PBS отбрасывали.
6. В планшет с клетками добавляли блокирующий раствор в расчете 100 мкл на лунку и инкубировали при 25°С в течение 30 мин., после чего блокирующий раствор стряхивали.
7. Антитела к PAR, которые разбавляли в блокирующем растворе в соотношении 1:50, добавляли в планшет с клетками в расчете 25 мкл на лунку, и затем смесь инкубировали при 25°С в течение 60 мин.
Лунки с отрицательным контролем: блокирующий раствор добавляли в расчете 25 мкл/лунка.
Лунки с холостым контролем: блокирующий раствор добавляли в расчете 25 мкл/лунка.
8. После завершения инкубации планшет с клетками 4 раза промывали промывочным раствором в расчете 200 мкл на лунку, каждый раз составлял 3 мин., и затем промывочный раствор стряхивали.
9. Блокирующий раствор, содержащий разбавленные в соотношении 1:50 козьи антитела к IgG мыши, меченные FITC, и 0,5 мкг/мл DAPI, добавляли в планшет с клетками в расчете 25 мкл на лунку, и смесь инкубировали при 25°С в течение 60 мин.
10. После завершения инкубации планшет с клетками 4 раза промывали промывочным раствором в расчете 200 мкл на лунку, каждый раз составлял 3 мин.
11. После удаления жидкости соответствующие показатели флуоресценции считывали с применением Envision: FITC: 480 нм и 530 нм; DAPI: 360 нм и 460 нм.
Анализ данных: исходные данные нормализовали с применением уравнения (FITC - отрицательный контроль) / (DAPI - холостой контроль), и нормализованные данные преобразовывали в показатели ингибирования с применением уравнения (образец положительный контроль) / (отрицательный контроль - положительный контроль) × 100%, и затем осуществляли аппроксимацию кривой значения IC50 с применением четырех параметров (полученных из модели «вариабельный наклон кривой log(ингибитор) в сравнении с вариабельным наклоном кривой отклика» в GraphPad Prism). В таблице 1 представлена ингибирующая активность соединений, раскрытых в данном документе.
Результаты эксперимента: полумаксимальные ингибирующие концентрации (IC50) соединений, раскрытых в данном документе, в отношении рибозилирования, опосредованного PAR, показаны в таблице 4.
Вывод, сделанный в ходе эксперимента: соединения, раскрытые в данном документе, обладают значительной ингибирующей активностью в отношении рибозилирования, опосредованного PAR.
Экспериментальный пример 5. Исследование степени связывания с белками плазмы крови
Определяли показатели степени связывания с белками для соединений, раскрытых в данном документе, в плазме крови человека, мышей CD-1 и крыс SD. 796 мкл необработанной плазмы крови получали от человека, мышей CD-1 и крыс SD и добавляли 4 мкл рабочего раствора тестируемого соединения (400 мкМ) или рабочего раствора варфарина (400 мкМ) с получением конечной концентрации, составляющей 2 мкМ, как тестируемого соединения, так и варфарина в образце плазмы крови. Образцы хорошо перемешивали. Конечная концентрация органической фазы DMSO составляла 0,5%; 50 мкл образца плазмы крови, содержащего тестируемое соединение и варфарин, пипетировали в планшет для загрузки образцов (в трех параллелях) и соответствующий объем необработанной плазмы крови или буфера непосредственно добавляли таким образом, чтобы конечный объем в каждой лунке, содержащей образец, составлял 100 мкл. Объемное соотношение плазмы крови и буфера для диализа составляло 1:1, и к данным образцам добавляли 400 мкл останавливающего раствора, их применяли в качестве образцов Т0 для определения объема извлечения и стабильности. Образцы Т0 хранили при 2-8°С для последовательной обработки совместно с другими образцами, подвергнутыми диализу; 150 мкл образца плазмы крови, содержащего тестируемое соединение и варфарин, добавляли в конец для загрузки лекарственного средства каждой лунки для диализа и 150 мкл необработанного буфера для диализа добавляли в соответствующий принимающий конец лунки для диализа. Затем планшет для диализа закрывали с помощью газопроницаемой мембраны и помещали в инкубатор при влажных условиях, 5%CO2 и инкубировали при 37°С в течение 4 ч. со встряхиванием при приблизительно 100 об./мин. После завершения диализа 50 мкл образца буфера, подвергнутого диализу, и образца плазмы крови, подвергнутого диализу, пипетировали в новый планшет для загрузки образцов. Соответствующий объем соответствующего образца необработанной плазмы крови или буфера добавляли к образцам таким образом, чтобы конечный объем в каждой лунке, содержащей образец, составлял 100 мкл, и объемное соотношение плазмы крови к буферу для диализа составляло 1:1. Все образцы подвергали анализу посредством LC/MS после осаждения белка и показатели степени связывания с белками и объема извлечения рассчитывали с применением следующих формул: степень отсутствия связывания с белками (%) = 100 × концентрация лекарственного средства, пропускаемая через мембрану для диализа/концентрация лекарственного средства, не пропускаемая через диализат; степень связывания с белками (%)=100 - степень отсутствия связывания с белками (%); объем извлечения (%) = 100 × (концентрация лекарственного средства, пропускаемая через мембрану для диализа + концентрация лекарственного средства, не пропускаемая через диализат) / общая концентрация лекарственного средства перед проведением диализа.
Результаты эксперимента: результаты показаны в таблице 5.
Вывод, сделанный в ходе эксперимента: соединения, раскрытые в данном документе, характеризуются высокой степенью связывания с белками плазмы крови.
Вывод, сделанный в ходе эксперимента: соединения, раскрытые в данном документе, характеризуются подходящей степенью связывания с белками плазмы крови.
Экспериментальный пример 6. Исследование ингибирующей активности в отношении изофермента цитохрома Р450
Определяли ингибирующую активность тестируемых соединений в отношении разных подтипов человеческого изофермента цитохрома Р450. Получали тестируемые соединения, стандартный ингибитор (100 × конечная концентрация) и рабочий раствор смешанного субстрата; замороженные в холодильнике при -80°С микросомы доставали и размораживали. 2 мкл раствора тестируемого соединения и стандартного ингибитора добавляли в соответствующие лунки, и 2 мкл соответствующего растворителя добавляли в лунку с контролем без ингибитора (NIC) и в лунку с холостым контролем (холостой); затем 20 мкл раствора смешанного субстрата добавляли в соответствующие лунки за исключением лунки с холостым контролем (в лунку с холостым контролем добавляли 20 мкл РВ); получали раствор микросом печени человека (помечали дату после применения и непосредственно возвращали в холодильник) и затем добавляли во все лунки в расчете 158 мкл на лунку; планшет для образцов помещали на водяную баню при 37°С для предварительной инкубации и затем получали раствор коферментного фактора (NADPH); через 10 мин. раствор NADPH добавляли во все лунки в расчете 20 мкл на лунку и встряхивали планшет для образцов для хорошего перемешивания и затем инкубировали на водяной бане при 37°С в течение 10 мин.; в соответствующие моменты времени добавляли 400 мкл холодного раствора ацетонитрила (внутренний стандарт: 200 нг/мл толбутамида и лабеталола) для остановки реакции; после хорошего перемешивания смесь в планшете для образцов центрифугировали при 4000 об./мин. в течение 20 мин. с осаждением белков; собирали 200 мкл надосадочной жидкости и добавляли к 100 мкл воды, и смесь хорошо перемешивали и затем анализировали посредством LC/MS/MS.
Результаты эксперимента: результаты показаны в таблице 6.
Вывод: соединения, раскрытые в данном документе, демонстрируют отсутствие или наличие слабого ингибирующего эффекта в отношении 5 ферментов CYP.
Экспериментальный пример 7. Метаболическая стабильность в микросомах печени
Цель эксперимента: испытание метаболической стабильности тестируемых соединений в микросомах печени, полученных от трех видов.
Способ проведения эксперимента. 1 мкМ тестируемого соединения и микросому (0,5 мг/мл) инкубировали при 37°С в присутствии системы для регенерации NADPH; положительные контроли представляли собой тестостерон (субстрат 3А4), пропиламин-пропиофенон (субстрат 2D6) и диклофенак (субстрат 2С9), и также при 37°С инкубировали положительный контроль с микросомой (0,5 мг/мл) в присутствии системы для регенерации NADPH; реакцию останавливали посредством прямого смешивания образца с холодным ацетонитрилом, содержащим внутренний стандарт, в различные моменты времени (0, 5, 10, 20, 30 и 60 мин.); соединение и микросому инкубировали в течение 60 мин. при отсутствии системы для регенерации NADPH; подготавливали одну параллель (n=1) в каждый момент времени; образцы анализировали посредством LC/MS/MS; концентрация соединения характеризовалась отношением площади пика к площади пика внутреннего стандарта.
Результаты эксперимента: результаты показаны в таблице 7.
Экспериментальный пример 8. Исследование фармакокинетики однократной дозы у мышей
Цель эксперимента: оценка фармакокинетических свойств с использованием самцов мышей C57BL/6 в качестве подопытных животных и определение концентраций соединений в плазме крови, печени и спинномозговой жидкости после однократного введения дозы.
Способ проведения эксперимента: выбирали здоровых взрослых самцов мышей C57BL/6 для осуществления внутрижелудочного введения. Кандидатное соединение смешивали с подходящим количеством 10% DMSO/90% (20% гидроксипропил-β-циклодекстрин), перемешивали вихревым способом и подвергали воздействию ультразвука с получением 0,5 мг/мл прозрачного раствора для дальнейшего применения. После введения мышам дозы 1 мг/кг внутривенно и дозы 5 мг/кг перорально собирали цельную кровь в определенные моменты времени и отделяли плазму крови, а также собирали печень и спинномозговую жидкость. После предварительной обработки образцов измеряли концентрацию лекарственного средства посредством LC-MS/MS, и рассчитывали фармакокинетические параметры с применением программного обеспечения Phoenix WinNonlin.
Результаты эксперимента: результаты показаны в таблице 8.
Вывод, сделанный в ходе эксперимента: тестируемые соединения характеризуются хорошей AUC0-послед. и биологической доступностью у мышей.
Экспериментальный пример 9. Исследование фармакодинамики соединений in vivo с применением модели, представляющей собой «голых» мышей BALB/c с подкожным ксенотрансплантатом клеток рака молочной железы человека MDA-MB-436
Цель эксперимента: исследование эффективности in vivo тестируемого соединения с применением модели, представляющей собой «голых» мышей BALB/c с подкожным ксенотрансплантатом клеток рака молочной железы человека MDA-MB-436.
План эксперимента
Материалы для осуществления эксперимента: возраст в неделях и вес тела: самки «голых» мышей BALB/c в возрасте 6-8 недель с весом тела 18-22 г. Эксперимент начинали после 3-7-дневного периода адаптивного кормления. В информационной карте животных каждой клетки представлена следующая информация о животных: число особей, пол, линия, дата прибытия, схема введения, номер эксперимента, группа и дата начала эксперимента. Все клетки, подстилку и питьевую воду стерилизовали перед применением. Клетки, корм и питьевую воду меняли два раза в неделю. Подопытных животных идентифицировали с помощью ушных бирок. Тестируемые образцы: пример 24_А и пример 25_А. Все тестируемые образцы получали с 10% DMSO + 90% (20%) HP-β-CD) в качестве среды-носителя и группе холостого контроля вводили только среду-носитель.
Способ проведения эксперимента.
1. Культивирование клеток. Клетки рака молочной железы человека MDA-MB-436 (АТСС, Манассас, штат Вирджиния, США, номер по каталогу: НТВ-130) культивировали в среде для культивирования RPMI-1640, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки и 1% антибиотика-антимикотика, из монослойной культуры in vitro в инкубаторе при 37°С/5% CO2. Клетки расщепляли трипсином-EDTA два раза в неделю для пересевания согласно традиционной практике. При достижении насыщенности клеток, составлявшей 80%-90%, и требуемого количества, клетки собирали, подсчитывали и инокулировали.
2. Инокуляция опухолевых клеток (инокуляция опухоли). 0,2 мл (1 × 10 клеток) клеток MDA-MB-436 (вместе с матригелем в объемном соотношении 1:1) инокулировали подкожно в правый бок каждой мыши, и мышей произвольным образом распределяли по группам при достижении среднего объема опухоли, составлявшего 318 мм.
3. Ежедневное наблюдение за подопытными животными: ежедневно велось наблюдение за состоянием здоровья и случаями гибели животных, и регулярные обследования включали наблюдение за влиянием роста опухоли и обработки лекарственным средством на ежедневные показатели животных, такие как поведение, потребление корма и воды, изменение веса, внешний вид или наличие других отклоняющихся от нормы состояний.
4. Измерение опухоли и экспериментальные индексы: экспериментальные индексы требовались для определения подавления роста опухоли, замедления роста опухоли или излечения опухоли. Диаметр опухоли измеряли два раза в неделю с помощью штангенциркуля. Объем опухоли рассчитывали с применением следующей формулы: V=0,5а×b2, где а и b обозначают диаметр по длинной оси и диаметр по короткой оси опухоли соответственно. Противоопухолевый терапевтический эффект соединения оценивали с помощью TGI (%) или относительной скорости пролиферации опухоли Т/С (%). TGI (%) относится к степени подавления роста опухоли. Расчет TGI (%) : TGI (%) = [(1 - (средний объем опухоли в конце введения в группе с обработкой средний объем опухоли в начале введения в группе с обработкой)) / (средний объем опухоли в конце обработки в контрольной группе, получавшей растворитель - средний объем опухоли в начале обработки в контрольной группе, получавшей растворитель)] × 100%. Формула для расчета относительной скорости пролиферации опухоли Т/С (%) являлась следующей: Т/С(%)=TRTV/CRTV×100%) (TRTV: RTV для группы с обработкой; CRTV: RTV для группы отрицательного контроля). Относительный объем опухоли (RTV) рассчитывали на основе результатов измерения опухоли. Формула для расчета являлась следующей: RTV=Vt/V0, где V0 представлял собой средний объем опухоли, измеренный при разделении на группы и при введении (т.е. d0), Vt представлял собой средний объем опухоли при конкретном измерении, и используемые данные TRTV и CRTV получали в тот же день.
5. Статистический анализ включал среднее значение и стандартное отклонение среднего значения (SEM) объема опухоли в каждый момент времени для каждой группы. Группа с обработкой демонстрировала самый лучший эффект от обработки в день 27 после введения в конце эксперимента и, следовательно, статистический анализ осуществляли на основе данных для оценки различий между группами. Экспериментальные данные анализировали с помощью способа однофакторного ANOVA и способа Геймса-Ховелла. Анализ всех данных осуществляли с помощью SPSS 17.0. р<0,05 определяли как значительное отличие.
Результаты эксперимента: результаты показаны в таблице 10.
Вывод, сделанный в ходе эксперимента: соединение, раскрытое в данном документе, обладает хорошим эффектом в отношении подавления роста опухоли.
Claims (55)
1. Соединение формулы (II), его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль,
,
где выбрана из группы, состоящей из одинарной связи и двойной связи;
X выбран из группы, состоящей из CR3 и N;
Y выбран из группы, состоящей из CR1 и С;
L1 выбран из группы, состоящей из одинарной связи и -(CR8R9)n;
L2 выбран из группы, состоящей из одинарной связи, -CR8R9- и =СН-;
L1 и L2 не представляют собой одинарные связи одновременно;
если L2 выбран из одинарной связи, то выбрана из одинарной связи;
каждый из L3 и L4 независимо выбран из -CR8R9-;
n равняется 1 или 2;
R1 выбран из группы, состоящей из Н, D, F, Cl, Br, I и С1-3алкила, и если L2 выбран из =СН-, то R1 отсутствует;
каждый из R2 и R10 независимо выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br и I;
R3 выбран из группы, состоящей из Н, F, Cl, Br и I;
R4 выбран из группы, состоящей из Н и F;
R5 выбран из группы, состоящей из Н и С1-3 алкила;
каждый из R6 и R7 независимо выбран из группы, состоящей из Н и D;
каждый из R8 и R9 представляет собой Н.
2. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где С1-3алкил замещен одним Rd, где Rd представляет собой ОН.
3. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 2, выбранные из формулы (II-1)
,
где R1, R2, X, R4, R5, R6, R7, R10, L1, L2, L3 и L4 являются такими, как определено в п. 1 или 2.
4. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-3, где R1 выбран из группы, состоящей из Н, D, F и СН3.
5. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп.1-4, где каждый из R2 и R10 независимо выбран из группы, состоящей из Н и F.
6. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-5, где R3 выбран из группы, состоящей из Н, F и Cl.
7. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по п.6, где R3 выбран из группы, состоящей из Н и F.
8. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-7, где R5 выбран из группы, состоящей из Н, метила, этила, пропила и изопропила, при этом метил, этил, пропил и изопропил необязательно замещены Rd.
9. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по п. 8, где R5 выбран из группы, состоящей из Н, метила, и изопропила.
10. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-9, где L1 выбран из группы, состоящей из одинарной связи и -CR8R9-.
11. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-9, где L1 выбран из -CR8R9- и L2 выбран из -CR8R9-.
12. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-9, где L1 выбран из -CR8R9- и L2 выбран из одинарной связи.
13. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-12, где оба из R6 и R7 представляют собой Н.
14. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где структурное звено выбрано из группы, состоящей из
.
15. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, где структурное звено выбрано из группы, состоящей из
.
16. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где структурное звено выбрано из .
17. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где структурное звено выбрано из группы, состоящей из
.
18. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где структурное звено выбрано из группы, состоящей из
, и .
19. Соединение формулы, указанной ниже, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль, выбранные из группы, состоящей из
.
20. Соединение, его стереоизомер или его фармацевтически приемлемая соль по п. 19, выбранные из группы, состоящей из
.
21. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении PARP-1, содержащая терапевтически эффективное количество соединения, его стереоизомера или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-20 и фармацевтически приемлемый носитель.
22. Применение соединения, его стереоизомера или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-20 для получения лекарственного препарата для лечения заболевания, связанного с рецептором PARR.
23. Способ лечения заболевания, связанного с рецептором PARP, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения, его стереоизомера или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-20.
24. Способ по п. 23, где млекопитающее представляет собой человека.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910107947.5 | 2019-02-02 | ||
| CN201910111576.8 | 2019-02-12 | ||
| CN201910684020.8 | 2019-07-26 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2021124017A RU2021124017A (ru) | 2023-02-13 |
| RU2811039C2 true RU2811039C2 (ru) | 2024-01-10 |
Family
ID=
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000042040A1 (en) * | 1999-01-11 | 2000-07-20 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Tricyclic inhibitors of poly(adp-ribose) polymerases |
| WO2015166398A1 (en) * | 2014-04-30 | 2015-11-05 | Aurigene Discovery Technologies Limited | 3h-imidazo[4,5-b]pyridine derivatives as dihydroorotate dehydrogenase inhibitors |
| RU2660429C2 (ru) * | 2012-09-28 | 2018-07-06 | Мерк Шарп И Доум Корп. | Новые соединения, которые являются ингибиторами erk |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000042040A1 (en) * | 1999-01-11 | 2000-07-20 | Agouron Pharmaceuticals, Inc. | Tricyclic inhibitors of poly(adp-ribose) polymerases |
| RU2660429C2 (ru) * | 2012-09-28 | 2018-07-06 | Мерк Шарп И Доум Корп. | Новые соединения, которые являются ингибиторами erk |
| WO2015166398A1 (en) * | 2014-04-30 | 2015-11-05 | Aurigene Discovery Technologies Limited | 3h-imidazo[4,5-b]pyridine derivatives as dihydroorotate dehydrogenase inhibitors |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| FERRARIS D.V. Evolution of Poly(ADP-ribose) Polymerase-1 (PARP-1) Inhibitors // J Med Chem, 2010, V.53, N 12, pp.4561-4584. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6877407B2 (ja) | Ｎｔｒｋ関連障害の治療に有用な化合物および組成物 | |
| JP6948659B1 (ja) | ピリダジニルチアアゾールカルボキシアミド化合物 | |
| US11345703B2 (en) | Substituted pyrazolo[1,5-a]pyrimidine macrocyclic compound | |
| EP3878852A1 (en) | Substituted pyrazolo[1,5-a]pyridine compound, composition containing the same and use thereof | |
| WO2020061375A1 (en) | Antibacterial compounds | |
| EP3919495A1 (en) | Indolo heptamyl oxime analogue as parp inhibitor | |
| WO2018028664A1 (zh) | Fgfr4抑制剂及其制备方法和应用 | |
| JP2023508097A (ja) | タンパク質分解剤化合物の製造方法及び使用 | |
| EP4365178A1 (en) | Nitrogen-containing heterocyclic compound, and preparation method therefor, intermediate thereof, and application thereof | |
| CN113527299B (zh) | 一类含氮稠环类化合物、制备方法和用途 | |
| EP4349833A1 (en) | Pyridazinone compound as parp7 inhibitor | |
| CN114436976A (zh) | 一种新型喹唑啉类衍生物及其制备和应用 | |
| CN116496271A (zh) | 含有哌嗪基的化合物 | |
| BR112021005989A2 (pt) | derivados de quinolino-pirrolidin-2-ona e aplicação dos mesmos | |
| RU2811039C2 (ru) | Аналог индологептамилоксима в качестве ингибитора parp | |
| CA3158749A1 (en) | Pyrrolotriazine compounds acting as mnk inhibitor | |
| CN109942665B (zh) | 雷公藤内酯醇衍生物及其制备方法和应用 | |
| WO2023143147A1 (zh) | 一种哒嗪并吡啶酮类化合物、其药物组合物及应用 | |
| WO2023083200A1 (zh) | 吡唑并环化合物及其应用 | |
| WO2023241414A1 (zh) | 一种哒嗪类化合物、其药物组合物及应用 | |
| WO2024066986A1 (zh) | 2-氨基嘧啶类化合物及其应用、药用组合物 | |
| EP4293029A1 (en) | Azaheteroaryl compound, preparation method therefor, and application thereof | |
| WO2023116763A1 (zh) | 一种哒嗪类化合物、其药物组合物及应用 | |
| WO2022227987A1 (zh) | 杂环类衍生物及其制备方法和用途 | |
| WO2023151635A1 (zh) | 基于喹唑啉取代戊二酰亚胺骨架的化合物及其应用 |