BR112021015122A2

BR112021015122A2 - Cristal de composto de diariltio-hidantoína

Info

Publication number: BR112021015122A2
Application number: BR112021015122-2A
Authority: BR
Inventors: Chunli SHEN; Shenglin CHEN; Ting Wang; Fei Liu; Xin Tian; Yuying Guo; Lin Zhang; Jiahu Wu
Original assignee: Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co., Ltd
Priority date: 2019-02-01
Filing date: 2020-01-22
Publication date: 2021-09-28
Also published as: JP7464613B2; WO2020156448A1; SG11202108300VA; EP3919493A4; EP3919493A1; CN113439083B; MX2021009170A; AU2020214494A1; US20220009925A1; JP2022518605A; CN113439083A; KR20210124333A; IL285219A; CA3128074A1

Abstract

cristal de composto de diariltio-hidantoína. o presente pedido pertence ao campo da medicina, e em particular se refere a um cristal de um composto de diariltio-hidantoína tendo uma estrutura da seguinte fórmula (i), um método de preparação do mesmo, e uso do mesmo na preparação de medicamentos para tratar doenças relacionadas que são mediadas por andrógeno.

Description

“CRISTAL DE COMPOSTO DE DIARILTIO-HIDANTOÍNA” REFERÊNCIA CRUZADA AOS PEDIDOS RELACIONADOS

[001] O presente pedido reivindica o benefício e a prioridade ao Pedido de Patente Chinês No CN201910104953.5 depositado pela China National Intellectual Property Administration em 01 de fevereiro de 2019, cujo conteúdo é incorporado aqui por referência em sua totalidade.

CAMPO DA TÉCNICA

[002] O presente pedido pertence do campo da medicina, e, em particular, se refere a um cristal de um composto de diariltio-hidantoína, a um método de preparação do mesmo, e ao uso do mesmo na preparação de medicamentos para tratar doenças relacionadas que são mediadas por andrógeno.

FUNDAMENTOS

[003] O receptor de andrógeno (AR) é um receptor de esteroide na superfamília de receptor nuclear. Quando ligado a andrógenos (tal como testosterona e di-hidrotestosterona), AR é liberado de um complexo formado por proteínas de choque térmico para uma reação de fosforilação para formar um dímero. O dímero é transferido em um núcleo e ligado a um fragmento de DNA associado com o mesmo, estimulando desse modo a transcrição de seu gene alvo. A atividade transcricional de receptores de andrógeno ativados por ligação a ligante é coordenada por proteínas co-ativadoras. Antagonistas de AR têm a função principal de tratar câncer prostático prevenindo-se diretamente a ligação de testosterona ou di-hidrotestosterona a receptores de andrógeno e bloqueando assim a ação de andrógenos sobre as células, desempenhando os papéis de resistência a andrógenos e inibição do crescimento celular e finalmente resultando em apoptose. Enzalutamide, um antagonista do receptor de andrógeno desenvolvido pela Medivation & Astell as, foi comercializado.

[004] Devido ao papel importante dos antagonistas do receptor de andrógeno, é particularmente importante desenvolver antagonistas do receptor de andrógeno adequados para uso como fármacos terapêuticos.

SUMÁRIO

[005] O presente pedido fornece um cristal de um composto de diariltio- hidantoína 2-cloro-4-(3-(2-etil-9-fluoro-4-oxo-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-7-il)-4,4-dimetil- 5-oxo-2-tioimidazolidin-1-il)benzonitrila (composto da fórmula I) para o uso como um antagonista do receptor de andrógeno, que é excelente em termos de pelo menos um de atividade biológica, segurança, farmacocinética, biodisponibilidade, higroscopicidade, estabilidade, solubilidade, pureza, facilidade de preparação e semelhantes, e cumpre assim os requisitos de produção, armazenamento, preparação e semelhantes de medicamentos.

[006] Em um aspecto, o presente pedido fornece um cristal de um composto da fórmula I, . Fórmula I

[007] Em um outro aspecto, o presente pedido fornece um cristal de um composto da fórmula I, em que, em um padrão de difração de pó de raio X usando radiação de Cu Kα, existem picos de difração nos seguintes 2θ de 13,47°±0,2°, 15,32°±0,2°, 15,98°±0,2°, 18,68°±0,2°, 23,11°±0,2° e 26,41°±0,2°.

[008] Em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o cristal do composto da fórmula I revelado na presente invenção, em que em um padrão de difração de pó de raio X usando radiação de Cu Kα, existem picos de difração nos seguintes 2θ de 13,01°±0,2°, 13,47°±0,2°, 14,00°±0,2°, 15,32°±0,2°, 15,98°±0,2°, 18,68°±0,2°, 22,78°±0,2°, 23,11°±0,2°, 24,49°±0,2° e 26,41°±0,2°; em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o cristal do composto da fórmula I revelado na presente invenção, em que em um padrão de difração de pó de raio X usando radiação de Cu Kα, existem picos de difração nos seguintes 2θ de 9,34°±0,2°,

13,01°±0,2°, 13,47°±0,2°, 14,00°±0,2°, 15,32°±0,2°, 15,98°±0,2°, 18,68°±0,2°, 22,78°±0,2°, 23,11°±0,2°, 24,49°±0,2°, 25,85°±0,2°, 26,41°±0,2° e 30,73°±0,2°; em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o cristal do composto da fórmula I revelado na presente invenção, em que em um padrão de difração de pó de raio X usando radiação de Cu Kα, existem picos de difração nos seguintes 2θ de 9,34°±0,2°, 13,01°±0,2°, 13,47°±0,2°, 13,78°±0,2°, 14,00°±0,2°, 15,32°±0,2°, 15,72°±0,2°, 15,98°±0,2°, 18,68°±0,2°, 22,31°±0,2°, 22,78°±0,2°, 23,11°±0,2°, 24,49°±0,2°, 25,85°±0,2°, 26,05°±0,2°, 26,41°±0,2°, 26,65°±0,2° e 30,73°±0,2°; em algumas modalidades do presente pedido, é fornecido o cristal do composto da fórmula I revelado na presente invenção, em que em um padrão de difração de pó de raio X usando radiação de Cu Kα, existem picos de difração nos seguintes 2θ de 9,34°±0,2°, 13,01°±0,2°, 13,47°±0,2°, 13,78°±0,2°, 14,00°±0,2°, 15,32°±0,2°, 15,72°±0,2°, 15,98°±0,2°, 18,68°±0,2°, 19,12°±0,2°, 21,69°±0,2°, 22,31°±0,2°, 22,78°±0,2°, 23,11°±0,2°, 23,39°±0,2°, 24,49°±0,2°, 24,83°±0,2°, 25,38°±0,2°, 25,85°±0,2°, 26,05°±0,2°, 26,41°±0,2°, 26,65°±0,2°, 30,73°±0,2°, 31,08°±0,2°, 32,15°±0,2°, 32,75°±0,2°, 35,50°±0,2° e 35,87°±0,2°.

[009] Em algumas modalidades do presente pedido, no padrão de difração de pó de raio X do cristal do composto da fórmula I revelado na presente invenção usando radiação de Cu Kα, as posições de pico e as intensidades relativas dos picos de difração são mostradas na Tabela 1 abaixo: Tabela 1. Posições de pico e intensidades relativas de picos de difração do padrão de difração de pó de raio X do cristal do composto da fórmula I 2θ±0,2 intensidade relativa número 2θ±0,2 (o) intensidade relativa (%) número (o) (%) 1 9,34 9,7 15 23,39 4,5 2 13,01 15,8 16 24,49 15,6 3 13,47 43,6 17 24,83 4,6 4 13,78 7,6 18 25,38 6,4 5 14,00 21,3 19 25,85 13,8

6 15,32 100,0 20 26,05 14,2 7 15,72 9,0 21 26,41 37,0 8 15,98 32,0 22 26,65 11,4 9 18,68 38,5 23 30,73 14,1 10 19,12 7,2 24 31,08 5,7 11 21,69 4,9 25 32,15 6,4 12 22,31 7,6 26 32,75 4,7 13 22,78 19,7 27 35,50 6,7 14 23,11 39,3 28 35,87 4,3

[010] Em algumas modalidades do presente pedido, um padrão de difração de pó de raio X (XRPD) do cristal do composto da fórmula I revelado na presente invenção é mostrado na FIG. 1.

[011] Em algumas modalidades do presente pedido, o cristal do composto da fórmula I revelado na presente invenção tem um pico de absorção a 238,92 °C de acordo com a análise de calorimetria diferencial de varredura (DSC) do mesmo.

[012] Em algumas modalidades do presente pedido, um padrão de calorimetria diferencial de varredura (DSC) do cristal do composto da fórmula I revelado na presente invenção é mostrado na FIG. 2.

[013] Em algumas modalidades do presente pedido, um padrão de análise termogravimétrica (TGA) do cristal do composto da fórmula I revelado na presente invenção é mostrado na FIG. 3.

[014] Em um outro aspecto, o presente pedido fornece um método de preparação para o cristal do composto da fórmula I, compreendendo misturar o composto da fórmula I com um solvente para precipitar o cristal.

[015] Em algumas modalidades do presente pedido, no método de preparação para o cristal do composto da fórmula I descrito acima, o tempo de mistura não é menos do que 48 h.

[016] Em algumas modalidades do presente pedido, no método de preparação para o cristal do composto da fórmula I descrito acima, a mistura é realizada sob uma condição de vibração ou agitação. Em algumas modalidades do presente pedido, a mistura é realizada sob uma condição de agitação.

[017] Em algumas modalidades do presente pedido, o método de preparação para o cristal do composto da fórmula I descrito acima compreende adicionar o composto da fórmula I a um solvente para preparar uma suspensão e então misturar a suspensão para precipitar o cristal.

[018] Em algumas modalidades do presente pedido, no método de preparação para o cristal do composto da fórmula I descrita acima, o solvente é selecionado a partir do grupo consistindo em metanol, etanol, acetato de etila, tetra-hidrofurano, acetonitrila, acetona, uma combinação de metanol e água, uma combinação de etanol e água, e uma combinação de acetona e água.

[019] Em algumas modalidades do presente pedido, no método de preparação para o cristal do composto da fórmula I descrita acima, o solvente é selecionado a partir de metanol.

[020] Em algumas modalidades do presente pedido, o volume do solvente requerido é 5 a 50 mL para 1 g do composto da fórmula I.

[021] Em algumas modalidades do presente pedido, o volume do solvente requerido é 40 mL para 1 g do composto da fórmula I.

[022] Em algumas modalidades do presente pedido, o método de preparação para o cristal do composto da fórmula I descrita acima é realizado sob uma condição de aquecimento, por exemplo, a uma temperatura de aquecimento de 35 a 70 °C; em algumas modalidades do presente pedido, a temperatura de aquecimento é 40 a 60 °C; em algumas modalidades do presente pedido, a temperatura de aquecimento é 40 °C.

[023] Em algumas modalidades do presente pedido, no método de preparação para o cristal do composto da fórmula I, a etapa de mistura é realizada na ausência de luz.

[024] Em algumas modalidades do presente pedido, o método de preparação para o cristal do composto da fórmula I compreende ainda isolar o cristal precipitado, por exemplo, isolar por filtração ou centrifugação; em algumas modalidades específicas do presente pedido, o método compreende ainda secar o cristal isolado.

[025] Em um outro aspecto, o presente pedido fornece uma composição cristalina, compreendendo não menos do que 50 % em peso, preferivelmente não menos do que 80 % em peso, mais preferivelmente não menos do que 90 % em peso, o mais preferivelmente não menos do que 95 % em peso do cristal do composto da fórmula I.

[026] Em um outro aspecto, o presente pedido fornece uma composição farmacêutica, compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz do cristal do composto da fórmula I ou da composição cristalina do mesmo. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica revelada na presente invenção compreende ainda um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[027] Ainda em um outro aspecto, o presente pedido fornece um método para tratar doenças mediadas por andrógeno em mamíferos, compreendendo administrar a um mamífero, preferivelmente um humano, em necessidade de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz do cristal do composto da fórmula I, ou da composição cristalina do mesmo ou da composição farmacêutica do mesmo, em que as doenças incluem, mas não são limitadas a, uma doença proliferativa celular (por exemplo, câncer).

[028] Ainda em um outro aspecto, o presente pedido fornece o uso do cristal do composto da fórmula I ou da composição cristalina do mesmo, ou da composição farmacêutica do mesmo, na preparação de medicamentos para tratar doenças mediadas por andrógeno, em que as doenças incluem, mas não são limitadas a, uma doença proliferativa celular (por exemplo, câncer).

[029] Ainda em um outro aspecto, o presente pedido fornece o uso do cristal do composto da fórmula I ou da composição cristalina do mesmo, ou da composição farmacêutica do mesmo, no tratamento de doenças mediadas por andrógeno, em que as doenças incluem, mas não são limitadas a, uma doença proliferativa celular (por exemplo, câncer).

[030] Ainda em um outro aspecto, o presente pedido fornece o cristal do composto da fórmula I ou da composição cristalina do mesmo, ou da composição farmacêutica do mesmo, para tratar doenças mediadas por andrógeno, em que as doenças incluem, mas não são limitadas a, uma doença proliferativa celular (por exemplo, câncer).

[031] Em algumas modalidades do presente pedido, a doença é câncer de próstata.

[032] No presente pedido, o instrumento para espectrometria de difração de pó de raio X é difratômetro de raio Bruker D8 Advance (tubo de raio X: Cu, K-Alpha, (u, K-AlpǺ)).

[033] No presente pedido, o espectro de DSC é determinado sob as seguintes condições: instrumento: calorímetro diferencial de varredura TA Q2000; faixa de temperatura: 30 a 300 °C; taxa de aquecimento: 10 °C/min com N2 a 50 mL/min.

[034] No presente pedido, a análise termogravimétrica de TGA é determinada sob as seguintes condições: instrumento: analisador termogravimétrico TA Q5000IR; faixa de temperatura: temperatura ambiente até 300 °C ou perda na secagem de 20 %; taxa de aquecimento: 10 °C/min com N2 a 50 mL/min.

[035] Para qualquer forma cristalina dada, as intensidades relativas de picos de difração podem variar devido às orientações preferidas resultantes, por exemplo, de morfologia cristalina, como é bem conhecido no campo de cristalografia. A intensidade de pico varia em um local onde existe efeito de orientação preferido, embora seja impossível que a posição de pico de difração da forma cristalina varie. Além disso, pode haver erros leves nas posições de pico para qualquer forma cristalina dada, como também é bem conhecido no campo de cristalografia. Por exemplo, as posições de pico podem mudar devido a mudanças de temperatura, movimento ou calibração da amostra do instrumento ao analisar uma amostra, e o erro na medição de 2θ é, algumas vezes, cerca de ±0,2 grau, e portanto, é bem conhecido àqueles habilitados na técnica que este erro deve ser levado em conta ao determinar cada estrutura cristalina.

[036] A temperatura de transição é determinada por DSC quando um cristal absorve ou libera calor devido a uma mudança na estrutura cristalina ou fusão do cristal. Para as mesmas formas cristalinas do mesmo composto, os erros de temperatura de transição térmica e de ponto de fusão em análises sucessivas estão tipicamente dentro de cerca de 5 °C, e um pico de DSC ou ponto de fusão dado de um composto, quando referido, significa o pico de DSC ou ponto de fusão ±5 °C. DSC fornece um método auxiliar para identificar diferentes formas cristalinas. Diferentes morfologias cristalinas podem ser identificadas por suas diferentes temperaturas de transição. Deve ser observado que, para uma mistura, seu pico de DSC ou ponto de fusão pode variar em uma faixa maior. Além disso, a temperatura de fusão é relacionada à taxa de aquecimento devido à decomposição de uma substância no processo de fusão.

[037] O termo “farmaceuticamente aceitável” é usado na presente invenção para aqueles compostos, materiais, composições, e/ou formas de dosagem que são, dentro do escopo do bom julgamento médico, adequados para o uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade excessiva, irritação, resposta alérgica, ou outro problemas ou complicações, e proporcionais a uma razão risco/benefício razoável.

[038] O termo “sal farmaceuticamente aceitável”, como um sal farmaceuticamente aceitável, pode se referir a um sal metálico, um sal de amônio, um sal formado com uma base orgânica, um sal formado com um ácido inorgânico, um sal formado com um ácido orgânico, um sal formado com um aminoácido básico ou ácido, e semelhantes.

[039] O “excipiente farmaceuticamente aceitável” se refere a uma substância inerte administrada com o ingrediente ativo para facilitar a administração do ingrediente ativo, incluindo, mas não limitado a, qualquer deslizante, adoçante, diluente, preservante, tintura/corante, realçacor de sabor, surfactante, agente umectante, dispersante, desintegrante, agente de suspensão, estabilizante, agente isotonizante, solvente ou emulsionante aceitável para o uso em humanos ou animais (por exemplo, animais domesticados) como permitido pelo National Medical Products Administration. Exemplos não limitantes dos excipientes incluem carbonato de cálcio, fosfato de cálcio, vários açúcares e tipos de amido, derivados de celulose, gelatina, óleos vegetais, e polietilenoglicóis.

[040] O termo “composição farmacêutica” se refere a uma mistura consistindo em um ou mais dos compostos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos revelados na presente invenção e um excipiente farmaceuticamente aceitável. A composição farmacêutica é intencionada a facilitar a administração do composto a uma entidade orgânica.

[041] A composição farmacêutica revelada na presente invenção pode ser preparada combinando-se o composto revelado na presente invenção com um excipiente farmaceuticamente aceitável adequado, e pode ser formulada, por exemplo, em uma formulação sólida, semissólida, líquida, ou gasosa tal como comprimido, pílula, cápsula, pó, grânulo, unguento, emulsão, suspensão, supositório, injeção, inalante, gel, microesfera, e aerossol.

[042] As vias típicas de administração da forma cristalina ou da composição farmacêutica da mesma descrita na presente invenção incluem, mas não são limitadas a, administração oral, retal, tópica, por inalação, parenteral, sublingual, intravaginal, intranasal, intraocular, intraperitoneal, intramuscular, subcutânea e intravenosa.

[043] A composição farmacêutica revelada na presente invenção pode ser fabricada por métodos bem conhecidos na técnica, tais como mistura, dissolução, granulação, drageamento, levigação, emulsificação, e liofilização convencionais.

[044] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica está em uma forma oral. Para administração oral, a composição farmacêutica pode ser formulada misturando-se os compostos ativos com excipientes farmaceuticamente aceitáveis bem conhecidos na técnica. Estes excipientes permitem que os compostos revelados na presente invenção sejam formulados em comprimidos, pílulas, pastilhas, drágeas, cápsulas, líquidos, géis, pastas fluidas, suspensões e semelhantes para administração oral de um paciente.

[045] As dosagens terapêuticas do composto revelado na presente invenção podem ser determinadas, por exemplo: pelo uso específico do tratamento, pelo modo de administração do composto, pela saúde e condição do paciente, e pelo julgamento do médico prescritor. A proporção ou a concentração do composto revelado na presente invenção na composição farmacêutica pode não ser fixa e depende de uma variedade de fatores, incluindo dosagem, propriedades químicas (por exemplo, hidrofobicidade), e da via de administração.

[046] O termo “tratamento” significa a administração do composto ou formulação descritos na presente invenção para melhorar ou eliminar uma doença ou um ou mais sintomas associados com a doença, e inclui: (i) inibir uma doença ou estado de doença, isto é, parar seu desenvolvimento; e (ii) aliviar uma doença ou estado de doença, isto é, causar sua regressão.

[047] O termo “prevenção” significa a administração do composto ou formulação descritos na presente invenção para prevenir um ou mais sintomas associados com a doença, e inclui: prevenir a ocorrência da doença ou estado de doença em um mamífero, particularmente quando um tal mamífero está predisposto ao estado de doença mas ainda não foi diagnosticado como tendo o tendo.

[048] Uma quantidade terapeuticamente eficaz da forma cristalina descrita na presente invenção é de cerca de 0,0001 a 20 mg/Kg de peso corpóreo/dia, por exemplo, de 0,001 a 10 mg/Kg de peso corpóreo/dia.

[049] A frequência de administração da forma cristalina descrita na presente invenção é determinada pelas necessidades de cada paciente, por exemplo, uma vez ao dia, duas vezes ao dia, ou mais vezes ao dia. A administração pode ser intermitente, por exemplo, um paciente recebe uma dosagem diária da forma cristalina durante um período de vários dias, seguido por um período de vários dias ou mais durante o qual o paciente não recebe uma dosagem diária da forma cristalina.

[050] O termo “quantidade terapeuticamente eficaz” se refere a uma quantidade do composto revelado na presente invenção para (i) tratar ou prevenir uma doença, condição ou transtorno específicos; (ii) aliviar, abrandar ou eliminar um ou mais sintomas da doença, condição ou transtorno específicos, ou (iii) prevenir ou retardar o início de um ou mais sintomas da doença, condição ou transtorno específicos descritos na presente invenção. A quantidade do composto revelado na presente invenção que compõe a “quantidade terapeuticamente eficaz” varia dependentemente do composto, do estado de doença e de sua severidade, do modo de administração, e da idade do mamífero a ser tratado, mas pode ser determinada rotineiramente pelos técnicos no assunto de acordo com seu conhecimento e a presente revelação.

[051] Na descrição seguinte, certos detalhes específicos são incluídos para fornecer um entendimento completo de várias modalidades reveladas. Entretanto, os técnicos no assunto reconhecerão que as modalidades podem ser praticadas com outros métodos, componentes, materiais, e semelhantes ao invés de com um ou mais dos detalhes específicos.

[052] A menos que de outro modo requerido, a palavra “compreendem” e variações da mesma tais como “compreende” e “compreendendo”, usadas no relatório descritivo e reivindicações que seguem, devem ser entendidas em um sentido aberto e inclusivo, isto é, “incluindo, mas não limitado a”.

[053] “Uma modalidade”, “uma modalidade”, “em uma outra modalidade” ou “em algumas modalidades” usadas no relatório descritivo significa que um elemento, estrutura ou característica de referência específicos descritos em relação à modalidade são incluídos em pelo menos uma modalidade. Assim, as frases “em uma modalidade”, “em uma modalidade”, “em uma outra modalidade” e “em algumas modalidades” em vários locais por todo o relatório descritivo não estão todos necessariamente se referindo à mesma modalidade. Além disso, os elementos, estruturas, ou características específicos podem ser combinados em qualquer maneira adequada em uma ou mais modalidades.

[054] Deve ser entendido que, a menos que de outro modo especificado claramente, as formas no singular “um”, “uma”, e “o”, “a” usadas no relatório descritivo e nas reivindicações anexas incluem referentes no plural. Assim, por exemplo, a reação mencionada incluindo “um catalisador” inclui um catalisador, ou dois ou mais catalisadores. Deve ser entendido que, a menos que de outro modo especificado claramente, o termo “ou” é geralmente utilizado em seu sentido incluindo “e/ou”.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[055] A FIG. 1 é um padrão de XRPD de um cristal de um composto da fórmula I preparado no Exemplo 2;

[056] A FIG. 2 é um padrão de DSC de um cristal de um composto da fórmula I preparado no Exemplo 2;

[057] A FIG. 3 é um padrão de TGA de um cristal de um composto da fórmula I preparado no Exemplo 2; e

[058] A FIG. 4 é um padrão de DVS de um cristal de um composto da fórmula I preparado no Exemplo 2.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[059] Os seguintes exemplos específicos são apresentados para permitir que os técnicos no assunto entendam e pratiquem mais claramente o presente pedido. Estes exemplos específicos não devem ser considerados como limitando o escopo do presente pedido, mas meramente como sendo descrição exemplar e representativos do presente pedido. Deve ser entendido pelos técnicos no assunto que existem outras vias de síntese para os compostos do presente pedido, e os seguintes exemplos não limitantes são fornecidos.

[060] A menos que de outro modo estabelecido, todos os materiais de partida usados no presente pedido estavam comercialmente disponíveis e foram usados sem purificação adicional. Todos os solventes usados no presente pedido estão comercialmente disponíveis e são usados sem tratamento especial. Exemplo 1: Preparação do Composto da Fórmula I

[061] Etapa 1: A um frasco de gargalo único foi adicionada água (10 mL), seguido pela adição gota a gota de tiofosgênio (1,13 g). A solução de reação foi agitada a 25 °C por 0,5 h sob atmosfera de nitrogênio, então adicionada com o Composto a (1,00 g) em porções e agitada a 25 °C por 2 h. A solução de reação foi extraída com diclorometano (10 mL × 3), e a fase orgânica foi lavada com salmoura saturada (15 mL), seca em sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o Composto b. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,67 (d, J = 8,38 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 1,98 Hz, 1H) 7,21 (dd, J = 8,38, 1,98 Hz, 1H).

[062] Etapa 2: A uma solução de Composto c (4,00 g) em ácido acético (40 mL) foi adicionado propionilacetato de metila (4,00 g). A solução de reação foi aquecida a 110 °C e agitada por 94 h. A solução de reação depois foi suplementada com propionilacetato de metila (8,26 g), agitada por 16 h, e concentrada. O concentrado foi diluído com acetato de etila (80 mL), e adicionado com uma solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada (80 mL). Depois da separação de líquido, a fase orgânica foi lavada com salmoura saturada (80 mL), seca em sulfato de sódio anidro, filtrada, e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica para fornecer o Composto d. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8,89 (s, 1H), 7,45 (dd, J = 2,0, 8,0 Hz, 1H), 6,36 (s, 1H), 2,70 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 1,25 (t, J = 7,5 Hz, 3H).

[063] Etapa 3: A um tubo de micro-ondas foram adicionados Composto d (500 mg), carbamato de terc-butila (324 mg), carbonato de césio (1,50 g), 4,5- bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (107 mg), bis(dibenzilidenoacetona) paládio (170 mg) e tolueno (6 mL). O tubo foi selado e a solução de reação foi reagida sob micro- ondas a 120 °C por 30 min. A solução de reação foi filtrada e lavada com acetato de etila (20 mL), e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica para fornecer o Composto e. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8,90 (s, 1H), 8,15 (br s, 1H), 7,57 (br s, 1H), 6,32 (s, 1H), 2,71 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 1,49 (s, 9H), 1,26 (t, J = 7,5 Hz, 3H).

[064] Etapa 4: A uma solução de Composto e (200 mg) em diclorometano (2 mL) foi adicionado ácido trifluoroacético (0,4 mL). A solução de reação resultante foi agitada a 26 °C por 4 h, adicionada com uma solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada (pH de cerca de 7) e extraída com diclorometano (20 mL). A fase orgânica foi lavada com salmoura saturada (15 mL), seca em sulfato de sódio anidro, e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o Composto f. LCMS (ESI) m/z: 208 (M+1).

[065] Etapa 5: A um frasco de reação seco foram adicionados Composto f (300 mg), cloreto de zinco (59 mg), sulfato de sódio (823 mg), acetona (505 mg), cianeto de trimetilsilila (431 mg) e tetra-hidrofurano (3 mL). A solução de reação foi reagida a 25 °C por 4 h sob atmosfera de nitrogênio. A solução de reação foi diretamente concentrada, e o resíduo foi purificado por TLC preparativa para fornecer o Composto g. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8,52 (s, 1H), 7,33 (dd, J = 9,98, 2,32 Hz, 1H), 6,46 (s, 1H), 2,78 (q, J = 7,65 Hz, 2H), 1,78 (s, 6H), 1,33 (t, J = 7,59 Hz, 3H).

[066] Etapa 6: A um frasco de reação seco foram adicionados Composto g (200 mg), Composto b (568 mg), tolueno (2 mL) e DMF (0,5 mL). Sob atmosfera de nitrogênio, a solução de reação foi adicionada com hidreto de sódio (44 mg, 60 % de pureza) e reagida a 25 °C por 0,5 h. A solução de reação foi concentrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o Composto h.

[067] Etapa 7: A um frasco de reação seco foram adicionados Composto h (110 mg), tolueno (1,1 mL) e ácido acético glacial (1,1 mL). A solução de reação foi reagida a 110 °C por 16 h sob atmosfera de nitrogênio. A solução de reação foi concentrada, e o resíduo foi purificado por prep-HPLC para fornecer um composto da fórmula I na forma amorfa como determinado por difração de pó de raio X. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8,83 (s, 1H), 7,84 (d, J = 8,16 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 1,98 Hz, 1H), 7,51 (dd, J = 8,27, 2,09 Hz, 1H), 7,41 (dd, J = 8,71, 2,09 Hz, 1H), 6,49 (s, 1H), 2,82 (q, J = 7,57 Hz, 2H), 1,68 (s, 6H), 1,36 (t, J = 7,61 Hz, 3H). LCMS (ESI) m/z: 470 (M+1).

Exemplo 2: Preparação do Cristal do Composto da Fórmula I

[068] A um frasco de reação (4,0 mL) foram adicionados o composto da fórmula I (50,1 mg) preparado de acordo com o Exemplo 1 e metanol (2,0 mL) para fornecer uma suspensão. A suspensão foi colocada em um agitador magnético de aquecimento (40 °C) para agitação (na ausência de luz), agitada a 40 °C por 2 dias, e centrifugada para separar um sólido. O sólido foi seco durante a noite para fornecer um cristal do composto da fórmula I. Os resultados de XRPD do cristal resultante são mostrados na FIG. 1, os resultados de DSC são mostrados na FIG. 2, e os resultados de TGA são mostrados na FIG. 3. Exemplo 3: Antagonismo do Transporte Nuclear do Receptor de Andrógeno (AR) pelo Composto da Fórmula I

1. A linhagem de célula NHR PathHunter foi descongelada, cultivada e amplificada.

2. As células foram semeadas sobre uma placa de 384 poços antes do teste e incubadas a 37 °C. O soro da cultura foi filtrado com carvão vegetal-dextrano para reduzir o nível hormonal no mesmo.

3. Na detecção da função antagonística, o composto foi adicionado às células e incubado por 60 min, e as concentrações de trabalho do composto da fórmula I, obtido por diluição de 10 μM em um gradiente de concentração de 3 vezes, foram 10000 nM, 3333,3 nM, 1111,1 nM, 370,4 nM, 123,5 nM, 41,2 nM, 13,7 nM e 4,67 nM. Então um agonista 6α-fluoroestosterona a 0,06 μM (a concentração é EC80, isto é, concentração de composto para 80 % de agonismo). Então a mistura foi incubada a 37 °C ou temperatura ambiente por 3 a 16 h.

4. Detecção do sinal: mistura de detecção PathHunter de 12,5 μL ou 15 μL (50 %, v/v) (kit: DiscoverX; catálogo No: 93-0001 series) foi adicionada e a mistura foi incubada à temperatura ambiente por 1 h. O sinal de quimiluminescência foi lido por um instrumento EnvisionTM PerkinElmer.

5. Análise de dados: a atividade do composto foi analisada usando o software de análise de dados CBIS (ChemInnovation, CA), e a porcentagem de inibição do antagonista foi calculada como segue: taxa de inibição de IC50 (%) = 100 % × (1 - (valor de RLU médio do composto de teste - valor de RLU médio do grupo de controle em branco)/(valor de RLU médio de controle de EC80 - valor de RLU médio do grupo de controle em branco)).

[069] Os resultados do teste de antagonismo do transporte nuclear do receptor de andrógeno (AR) pelo composto da fórmula I do Exemplo 1 mostram que IC50 é 0,95 μM. Exemplo 4: Teste Farmacocinético do Composto da Fórmula I

1. Resumo

[070] Tomando camundongos machos CD-1 como animais de teste, as concentrações de fármaco no plasma dos camundongos em diferentes pontos no tempo depois da administração intravenosa e intragástrica do composto da fórmula I foram determinadas por um método de LC/MS/MS. Este exemplo visa investigar o desempenho farmacocinético do composto da fórmula I em camundongos e avaliar as características farmacocinéticas.

2. Esquema experimental

2.1 Fármaco de teste: composto da fórmula I

2.2 Animais de teste: 4 camundongos machos CD-1 adultos saudáveis, que foram divididos em 2 grupos (2 camundongos em cada grupo) de acordo com o peso corpóreo. Os animais foram adquiridos da Shanghai Sippe-Bk Lab Animal Co., Ltd., e o número de licença de produção de animal foi SCXK (Shanghai) 2013-0016.

2.3 Preparação do fármaco

[071] Uma quantidade apropriada de amostra foi pesada, e sequencialmente adicionada com uma quantidade apropriada de DMSO, PEG400 e água de acordo com a razão de volume de 10:40:50, e a mistura foi agitada e ultrassonicada a um estado claro (0,4 mg/mL) para administração intravenosa.

[072] Uma quantidade apropriada de amostra foi pesada e adicionada em solução de CMC a 0,5 % + Tween 80 a 0,2 %, e a mistura foi agitada e ultrassonicada a um estado de suspensão (0,4 mg/mL) para administração intragástrica.

2.4 Administração

[073] Quatro camundongos machos CD-1 foram divididos em 2 grupos, e depois de jejuar durante a noite, os camundongos no primeiro grupo foram submetidos à administração intravenosa a um volume de 2,5 mL/kg e uma dosagem de 1 mg/kg, e os camundongos no segundo grupo foram submetidos à administração intragástrica a um volume de 5 mL/kg e uma dosagem de 2 mg/kg.

3. Operações

[074] Camundongos machos CD-1, depois da administração intravenosa do composto da fórmula I, foram submetidos a 30 μL de coleta de sangue a 0,0833, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 24, e 48 h, e o sangue foi colocado em tubos contendo 2 μL de EDTA- K2. Camundongos machos CD-1, depois da administração intragástrica do composto da fórmula I, foram submetidos a 30 μL de coleta de sangue a 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 24, e 48 h, e o sangue foi colocado em tubos contendo 2 μL de EDTA-K2. Os tubos foram centrifugados a 3000 g por 15 min para separar o plasma, que foi armazenado a - 60 °C. Os animais foram permitidos comer 4 h depois da administração.

[075] O método de LC/MS/MS foi usado para determinar o teor do composto de teste no plasma de camundongos depois da administração intravenosa e intragástrica. A faixa linear do método foi 2,00 a 6000 nmol/L; amostras de plasma foram analisadas depois do tratamento com acetonitrila para precipitar as proteínas.

[076] Os resultados do teste farmacocinético do composto da fórmula I são mostrados na Tabela 2 abaixo. Tabela 2. Resultados do teste farmacocinético do composto da fórmula I Volume Área Área Concentra- Temp Composto Modo de Dosagem Meia aparente da da Biodisponibi ção o até Depuração de teste adminis- de adminis- vida da curva curva -lidade sanguínea o pico tração tração distribuição (0-t) (0-inf) Cmax (nM) Tmax T1/2 (h) Vdss (L/kg) Cl AUC0- AUC0-inf (%)

(h) (mL/min/kg) last (nM.h) (nM.h) Composto da Adminis- fórmula I tração 27145 1mg/kg — — 36,6 0,248 0,0794 447238 — do intraveno- 3 Exemplo sa 1 Adminis- tração 36965 2mg/kg 12850 8,00 ND — — ND 68,1 intragástri 9 -ca Nota: “—” indica que o item não precisa ser testado; ND indica que os dados não são detectados. Exemplo 5: Teste de Distribuição Tecidual do Composto da Fórmula I

1. Resumo

[077] Tomando camundongos machos CD-1 como animais de teste, as concentrações de fármaco no plasma e cérebro dos camundongos depois da administração intragástrica do composto da fórmula I foram determinadas por um método de LC/MS/MS.

2. Esquema experimental

2.1 Fármaco de teste: composto da fórmula I

2.2 Animais de teste: 2 camundongos machos CD-1 adultos saudáveis. Os animais foram adquiridos da Shanghai Sippe-Bk Lab Animal Co., Ltd.

2.3 Preparação do fármaco

[078] Uma quantidade apropriada de amostra foi adicionada em solução aquosa de CMC a 0,5 %/Tween a 0,2 %, e a mistura foi agitada e ultrassonicada a um estado de suspensão (0,4 mg/mL).

2.4 Administração

[079] Dois camundongos machos CD-1, depois de jejuar durante a noite, foram submetidos à administração intragástrica a um volume de 5 mL/kg e uma dosagem de 2 mg/kg.

3. Operações

[080] Camundongos machos CD-1, depois da administração intragástrica do composto da fórmula I, foram submetidos a 100 μL de coleta de sangue por punção cardíaca a 4 h, e o sangue foi colocado em tubos contendo 2 μL de EDTA-K2 e centrifugado a 3000 g por 15 min para separar 30 μL de plasma, que foi armazenado a -60 °C. Entretanto, os tecidos cerebrais foram coletados, lavados, homogeneizados com 9 vezes PBS/MeOH a 15 mM (v:v, 2:1), e armazenados a -60 °C. Os animais foram permitidos comer 4 h depois da administração.

[081] O método de LC/MS/MS foi usado para determinar o teor do composto de teste no plasma e cérebro de camundongos depois da administração intragástrica. A faixa linear do método foi 2,00 a 6000 nmol/L; amostras de plasma foram analisadas depois do tratamento com acetonitrila para precipitar as proteínas.

[082] Os resultados do teste de distribuição tecidual são mostrados na Tabela

3. Tabela 3. Resultados do teste de distribuição tecidual Concentração no Concentração no Razão de cérebro-para- Composto plasma cérebro sangue (nM) (nmol/kg) Composto da fórmula I do 8260 265 0,0322 Exemplo 1 Exemplo 6: Estudo Farmacocinético In Vivo do Composto da Fórmula I sobre Modelo Tumoral de Xenoenxerto Subcutâneo de Células LNCaP-FGC de Câncer de Próstata Humano

1. Projeto experimental Tabela 4. Método de preparação para a substância de teste Concentração Condições de Composto Método de preparação (mg/mL) armazenamento DMSO a 5 % + PEG400 a 40 % + Solutol a 10 Veículo — 4 °C % + H2O a 45 % 12,6 mg do composto da fórmula I foram Composto da pesados e dissolvidos em 0,63 mL de DMSO fórmula I do por vórtice, e a solução resultante foi adicionada 1 4 °C Exemplo 1 com 5,04 mL de PEG400, 1,26 mL de Solutol e 10 mg/kg 5,67 mL de H2O, e agitada em vórtice para fornecer uma solução homogênea 25,2 mg do composto da fórmula I foram Composto da pesados e dissolvidos em 0,63 mL de DMSO fórmula I do por vórtice, e a solução resultante foi adicionada 2 4 °C Exemplo 1 com 5,04 mL de PEG400, 1,26 mL de Solutol e 20 mg/kg 5,67 mL de H2O, e agitada em vórtice para fornecer uma solução homogênea

Nota: é necessário que os fármacos sejam suavemente bem misturados antes da administração aos animais. Tabela 5. Agrupamento de animais e regime de administração em experimento farmacodinâmico in vivo Parâmetro do Número Tratamento Dosagem volume de Via de Frequência de Grupo de com composto (mg/kg) administração administração administração animais (µL/g) 1 6 Veículo — 10 PO QD × 21 dias Composto da 2 6 fórmula I do 10 10 PO QD × 21 dias Exemplo 1 Composto da 3 6 fórmula I do 20 10 PO QD × 21 dias Exemplo 1

2. Materiais experimentais

2.1 Animais experimentais

[083] Espécie: camundongo

[084] Cepa: camundongo SCID CB-17

[085] Semana de idade e peso corpóreo: 6 a 8 semanas de idade, 18 a 22 g de peso corpóreo

[086] Sexo: masculino

[087] Fornecedor: Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.

[088] Número de certificação do animal: 11400700184227

3. Métodos e procedimentos experimentais

3.1 Cultura celular

[089] Células LNCaP-FGC do câncer de próstata humano (ATCC, Manassas, VA) foram cultivadas in vitro, em um modo de monocamada, em um meio RPMI1640 contendo soro fetal bovino a 10 % a 37 °C e CO2 a 5 %. Tratamento de digestão de rotina com pancreatina-EDTA foi realizado duas vezes por semana para a passagem. Quando o grau de saturação das células é de 80 a 90 %, as células foram coletadas, contadas e inoculadas.

3.2 Inoculação da célula tumoral

[090] 0,2 mL (10×106) de células LNCaP-FGC (10×106 + Matrigel, 1:1) foram inoculados subcutaneamente no lado direito do dorso de cada camundongo SCID CB-

17. Os camundongos foram divididos em grupos para administração quando o volume médio do tumor atingiu 100 a 150 mm3.

3.3 Medição do tumor

[091] Os diâmetros de tumor foram medidos duas vezes por semana usando um compasso de calibre vernier. A fórmula de cálculo para o volume do tumor foi: V = 0,5a × b2, com a e b representando os diâmetros longos e curtos do tumor, respectivamente. O efeito terapêutico antitumoral do composto foi avaliado por TGI (%) ou taxa de proliferação de tumor relativa T/C (%). TGI (%) = [(1-(volume médio de tumor de um grupo de tratamento no final da administração - volume médio de tumor do grupo de tratamento no início da administração))/(volume médio de tumor de um grupo de controle de veículo no final do tratamento - volume médio de tumor do grupo de controle de veículo no início do tratamento)] × 100 %. A fórmula de cálculo para a taxa de proliferação de tumor relativa T/C (%) foi como segue: T/C % = TRTV/CRTV × 100 % (TRTV: RTV do grupo de tratamento; CRTV: RTV do grupo de controle negativo). O volume de tumor relativo (RTV) foi calculado com base nos resultados da medição do tumor. A fórmula de cálculo foi: RTV = Vt/V0, em que V0 foi o volume médio de tumor medido no momento do agrupamento e administração (isto é, d0), Vt foi o volume médio de tumor em uma certa medição, e os dados de TRTV e CRTV foram obtidos no mesmo dia.

3.4 Análise estatística

[092] A análise estatística incluiu a média e o erro padrão da média (SEM) do volume de tumor em cada ponto no tempo para cada grupo. O grupo de tratamento mostrou o melhor efeito de tratamento no dia 21 depois da administração no final do experimento, e portanto, a análise estatística foi realizada com base nos dados para avaliar as diferenças entre os grupos. A comparação entre os dois grupos foi analisada usando o teste T, a comparação entre três ou mais grupos foi analisada usando ANOVA de uma via. Se os valores de F foram significativamente diferentes, o método de Games-Howell foi usado para o teste. Se não houve nenhuma diferença significativa em valores de F, o método de Dunnet (de dois lados) foi usado para a análise. Toda a análise de dados foi realizada com SPSS 17.0. “P < 0,05” foi definido como uma diferença significativa.

4. Resultados experimentais

[093] Depois de 21 dias de administração, o composto da fórmula I mostrou efeito significativo de inibição de tumor tanto em dosagens de 10 mg/kg quanto de 20 mg/kg em comparação ao grupo de controle de solvente (T/C = 43,93 % e 32,37 %, respectivamente; TGI = 62,75 % e 76,16 %, respectivamente; p = 0,003 e p < 0,001, respectivamente). Entretanto, os animais tiveram boa tolerância ao composto de teste descrito acima. Exemplo 7: Estudo sobre a Higroscopicidade do Cristal do Composto da Fórmula I

[094] Modelo do instrumento: SMS DVS Advantage

[095] Condições de teste: uma amostra (10 a 15 mg) do cristal do composto da fórmula I preparado no Exemplo 2 foi colocada em uma bandeja de amostra de DVS para o teste.

[096] Os parâmetros detalhados de DVS foram como segue:

[097] Balanceamento: dm/dt = 0,01 %/min (mais curto: 10 min, mais longo: 180 min)

[098] Secagem: secagem a 0 % de RH por 120 min

[099] Temperatura: 25 °C

[0100] Gradiente de teste de RH (%): 10 %

[0101] Faixa de gradiente de teste de RH (%): 0 %-90 %-0 % Resultados experimentais:

[0102] O padrão de sorção de vapor dinâmico (DVS) resultante é mostrado na FIG. 4, em que △W % = 1,018 %.

[0103] Nota: ΔW % representa o ganho de umidade do composto de teste a 25±1 °C e 80±2 % de RH. Exemplo 8: Experimento sobre a Estabilidade Sólida do Cristal do Composto da Fórmula I

[0104] Referências foram feitas aos requisitos nas “Guidelines for the Stability Test of APIs and Preparations” (Appendix XIX C of the Volume Two of the Chinese Pharmacopoeia, 2010 Edition) para as condições e o método para o teste de estabilidade do cristal, e a estabilidade do sólido cristalino sob condições de diferentes fatores de influência foi estudada com o cristal preparado no Exemplo 2 como uma amostra de teste.

[0105] Cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC): coluna: Waters xbridge shiled RP18 (150 mm*4,6 mm, 3,5 μm); PN: 186003045; comprimento de onda: 228 nm; fase móvel A: pH 4,5, solução tampão de acetato de sódio a 5 mmol/L (pH ajustado com ácido fosfórico); fase móvel B: acetonitrila; modo de eluição: eluição por gradiente. Os resultados experimentais são mostrados na Tabela 6. Tabela 6. Análise de Estabilidade do Cristal do Composto da Fórmula I Pureza do cristal do Condições para o estudo de estabilidade composto da fórmula

I Amostra de teste inicial 99,17 % 92,5 % de RH, temperatura ambiente, 10 dias 99,18 % 92,5 % de RH, temperatura ambiente, 10 dias 99,14 % 75 % de RH, 40 °C, 10 dias 99,15 % 75 % de RH, 40 °C, 1 mês 99,17 % 75 % de RH, 40 °C, 2 meses 99,14 % 75 % de RH, 40 °C, 3 meses 99,16 % 75 % de RH, 60 °C, 10 dias 99,16 % 75 % de RH, 60 °C, 1 dia 99,14 % A amostra foi envolvida com papel alumínio e 99,13 % completamente exposta à luz visível de 1200000 Lux e UV de 200 W à temperatura ambiente

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Cristal, CARACTERIZADO pelo fato de ser de um composto da fórmula I, . Fórmula I

2. Cristal do composto da fórmula I, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que, em um padrão de difração de pó de raio X usando radiação de Cu Kα, existem picos de difração nos seguintes 2θ de 13,47°±0,2°, 15,32°±0,2°, 15,98°±0,2°, 18,68°±0,2°, 23,11°±0,2° e 26,41°±0,2°; ou existem picos de difração nos seguintes 2θ de 13,01°±0,2°, 13,47°±0,2°, 14,00°±0,2°, 15,32°±0,2°, 15,98°±0,2°, 18,68°±0,2°, 22,78°±0,2°, 23,11°±0,2°, 24,49°±0,2° e 26,41°±0,2°; ou existem picos de difração nos seguintes 2θ de 9,34°±0,2°, 13,01°±0,2°, 13,47°±0,2°, 14,00°±0,2°, 15,32°±0,2°, 15,98°±0,2°, 18,68°±0,2°, 22,78°±0,2°, 23,11°±0,2°, 24,49°±0,2°, 25,85°±0,2°, 26,41°±0,2° e 30,73°±0,2°; ou existem picos de difração nos seguintes 2θ de 9,34°±0,2°, 13,01°±0,2°, 13,47°±0,2°, 13,78°±0,2°, 14,00°±0,2°, 15,32°±0,2°, 15,72°±0,2°, 15,98°±0,2°, 18,68°±0,2°, 22,31°±0,2°, 22,78°±0,2°, 23,11°±0,2°, 24,49°±0,2°, 25,85°±0,2°, 26,05°±0,2°, 26,41°±0,2°, 26,65°±0,2° e 30,73°±0,2°.

3. Cristal do composto da fórmula I, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que um padrão de difração de pó de raio X do cristal é mostrado na FIG. 1.

4. Cristal de um composto da fórmula I, CARACTERIZADO pelo fato de que tem um pico de absorção a 238,92 °C de acordo com a análise de calorimetria diferencial de varredura do mesmo . Fórmula I

5. Cristal do composto da fórmula I, de acordo com a reivindicação 4, CARACTERIZADO pelo fato de que um padrão de calorimetria diferencial de varredura do cristal é mostrado na FIG. 2.

6. Método de preparação para o cristal do composto da fórmula I, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende misturar o composto da fórmula I com um solvente para precipitar o cristal.

7. Método de preparação para o cristal do composto da fórmula I, de acordo com a reivindicação 6, CARACTERIZADO pelo fato de que o solvente é selecionado a partir do grupo consistindo em metanol, etanol, acetato de etila, tetra-hidrofurano, acetonitrila, acetona, uma combinação de metanol e água, uma combinação de etanol e água, e uma combinação de acetona e água.

8. Método de preparação para o cristal do composto da fórmula I, de acordo com a reivindicação 6, CARACTERIZADO pelo fato de que o volume do solvente requerido é 5 a 50 mL para 1 g do composto da fórmula I.

9. Composição cristalina, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende não menos do que 50 % em peso, preferivelmente não menos do que 80 % em peso, mais preferivelmente não menos do que 90 % em peso, o mais preferivelmente não menos do que 95 % em peso do cristal do composto da fórmula I de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5.

10. Composição farmacêutica, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do cristal do composto da fórmula I de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5 ou da composição cristalina de acordo com a reivindicação 9, e opcionalmente compreende ainda um excipiente farmaceuticamente aceitável.

11. Método para tratar doenças mediadas por andrógeno em mamíferos, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende administrar a um mamífero,

preferivelmente um humano, em necessidade de tal tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz do cristal do composto da fórmula I de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5 ou da composição cristalina de acordo com a reivindicação 9 ou da composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 10, em que as doenças incluem uma doença proliferativa celular.

12. Uso do cristal do composto da fórmula I, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5 ou da composição cristalina de acordo com a reivindicação 9 ou da composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 10, CARACTERIZADO pelo fato de ser na preparação de medicamentos para tratar doenças mediadas por andrógeno, em que as doenças incluem uma doença proliferativa celular.

13. Uso do cristal do composto da fórmula I, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8 ou da composição cristalina de acordo com a reivindicação 9 ou da composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 10, CARACTERIZADO pelo fato de ser no tratamento de doenças mediadas por andrógeno, em que as doenças incluem uma doença proliferativa celular.

14. Cristal do composto da fórmula I, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5 ou da composição cristalina de acordo com a reivindicação 9 ou da composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 10, CARACTERIZADO pelo fato de ser para tratar doenças mediadas por andrógeno, em que as doenças incluem uma doença proliferativa celular.

15. Método, de acordo com a reivindicação 11, uso, de acordo com as reivindicações 12 a 13 ou cristal, composição cristalina ou composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 14, CARACTERIZADOS pelo fato de que a doença proliferativa celular é selecionada a partir de câncer de próstata.