BR112020026688A2 - Pó para bebida instantânea com base em blg - Google Patents

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instant drink
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BR112020026688-4A
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Kasper Bøgelund Lauridsen
Hans Bertelsen
Søren Bang Nielsen
Guilherme De Moura Maciel
Kåre Søndergaard
Behnaz Razi Parjikolaei
Tanja Christine Jæger
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Arla Foods Amba
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Abstract

pó para bebida instantânea com base em blg. a presente invenção se refere a um produto de pó para bebida instantânea e um método para preparar o produto de pó para bebida instantânea, um produto alimentício líquido produzido a partir do pó para bebida instantânea e um método para preparar o alimento líquido, uso do alimento líquido e um kit que compreende o produto de pó para bebida instantânea.

Description

1 / 145
PÓ PARA BEBIDA INSTANTÂNEA COM BASE EM BLG Campo da Invenção
[001] A presente invenção se refere a um produto de pó para bebida instantânea e um método para preparar o produto de pó para bebida instantânea, um produto alimentício líquido produzido a partir do pó para bebida instantânea e um método para preparar o alimento líquido, uso do alimento líquido e um kit que compreende o produto de pó para bebida instantânea. Fundamentos
[002] Suplementos nutricionais compreendendo proteínas do soro de leite são comumente usados para síntese muscular, para controle de peso e para manter os músculos e o peso corporal. Suplementos nutricionais são direcionados a diferentes tipos de consumidores, por exemplo, esportistas, atletas, crianças, idosos e pacientes com ou em risco de desnutrição e/ou com necessidades proteicas aumentadas. Desta forma, a percepção do consumidor em relação ao suplemento nutricional é de grande importância, como o consumidor deve se sentir ao beber o produto.
[003] As proteínas do soro de leite podem ser isoladas do soro de leite ou do soro de queijo. O soro de queijo normalmente compreende uma mistura de beta-lactoglobulina (BLG), alfa-lactalbumina (ALA), albumina sérica e imunoglobulinas, das quais BLG é a mais dominante. Os concentrados de proteína de soro de queijo (WPC), portanto, compreendem uma mistura dessas proteínas. Isolados de proteína de soro de queijo (WPI) contêm menos gordura e lactose do que WPC.
[004] O isolamento da beta-lactoglobulina (BLG) do soro de leite ou soro de queijo é o tópico de uma série de publicações e normalmente envolve várias etapas de separação e, muitas vezes, técnicas cromatográficas para chegar a um produto de beta-lactoglobulina purificado.
[005] O pedido de patente internacional WO2002/056707 (Nestlé) se
2 / 145 refere a uma composição de mistura em pó balanceada com pelo menos uma fonte de gordura ou óleo, pelo menos uma fonte de carboidrato e pelo menos uma fonte de proteína. Esta composição é vantajosamente adicionada a um alimento para suplementar o valor nutricional do alimento, mas sem alterar substancialmente o sabor do alimento.
[006] WO 2018/115520 A1 descreve um método de produção de composições comestíveis isoladas de beta-lactoglobulina e/ou composições contendo beta-lactoglobulina cristalizada com base na cristalização de BLG no modo salting-in. A BLG cristalizada pode ser subsequentemente separada dos licores-mãe restantes.
[007] WO 2011/112695 A1 descreve composições nutricionais e métodos para fazer e usar as composições nutricionais. As composições nutricionais compreendem micelas de proteína de soro de queijo e leucina e proveem uma quantidade suficiente de leucina para melhorar a síntese de proteínas em humanos, enquanto também mantém uma matriz fluida de baixa viscosidade e propriedades organolépticas aceitáveis.
[008] WO2011/051436 A1 descreve uma composição pelo menos parcialmente transparente destinada ao consumo humano ou animal e se refere ao acondicionamento de tais composições. Uma modalidade da presente invenção se refere a um recipiente pelo menos parcialmente transparente contendo uma composição aquosa não alcoólica pelo menos parcialmente transparente. O recipiente compreende pelo menos um polarizador que torna visíveis os cristais líquidos presentes na composição.
[009] WO2004/049819 A2 descreve um método para melhorar as propriedades funcionais de proteínas globulares, compreendendo as etapas de prover uma solução de uma ou mais proteínas globulares, em cuja solução a(s) proteína(s) é/são pelo menos parcialmente agregada(s) em fibrilas; e realizar uma ou mais das seguintes etapas em ordem aleatória: aumentar o pH; aumentar a concentração de sal; concentração da solução; e alterar a
3 / 145 qualidade do solvente da solução. Preferivelmente, a solução de uma ou mais proteínas globulares é fornecida por aquecimento a um pH baixo ou pela adição de um agente desnaturante. É também descrito o aditivo proteico assim obtido, a seu uso para aplicações alimentícias e não alimentícias e para os produtos alimentícios e não alimentícios contendo o aditivo proteico.
[0010] WO 2010/037736 A1 descreve o isolamento de proteínas do soro de queijo e a preparação de um produto do soro de queijo e um isolado do soro de queijo. Em particular, a presente invenção se refere ao isolamento de um produto de β-lactoglobulina e ao isolamento de um isolado de proteína de soro de queijo enriquecido com α a partir do soro de queijo obtido de um animal. O isolado de proteína de soro de queijo enriquecido com α fornecido pela presente invenção é, além de baixo em β-lactoglobulina, também rico em α-lactalbumina e imunoglobulina G.
[0011] FR 2 296 428 descreve composições de proteínas para uso dietético e terapêutico com base em proteínas do soro de leite obtidas por qualquer processo de separação conhecido. As composições podem ser usadas para o tratamento ou profilaxia de distúrbios digestivos em bebês e adultos (por exemplo, diarreia), para aumentar a resistência a infecções intestinais e para tratar certos distúrbios metabólicos (por exemplo, hiperfenilalaninemia). Podem também ser usados dermatologicamente ou cosmeticamente e podem fazer parte de uma dieta pobre em proteínas. Sumário da Invenção
[0012] Os inventores proveram produtos de pó para bebidas instantâneas com um alto teor de BLG. Os produtos são de longa durabilidade, enquanto ao mesmo tempo resultam em produtos alimentícios que são apetecíveis; ou seja, a aparência e o sabor do produto são atraentes para o cliente.
[0013] Desta forma, um aspecto da invenção se refere a um pó para bebida instantânea compreendendo pelo menos 1% p/p de BLG,
4 / 145 preferivelmente pelo menos 5%, em que: i. a cristalinidade de BLG é de pelo menos 20%, preferivelmente pelo menos 40%, e/ou ii. pelo menos 85% p/p da quantidade total de proteína é composta por BLG, e, além disso, compreendendo pelo menos um ingrediente adicional selecionado do grupo que consiste em vitaminas, agente flavorizante, agente corante, minerais, adoçantes, antioxidantes, ácido alimentício, lipídios, carboidratos, prebióticos, probióticos, agentes antiespuma e proteína que não é de soro de queijo.
[0014] Outro aspecto da invenção se refere a um método para preparar um pó para bebida instantânea compreendendo BLG e pelo menos um ingrediente opcional, o referido método compreendendo a mistura de um isolado de BLG seco com pelo menos um ingrediente adicional selecionado do grupo que consiste em vitaminas, agente flavorizante, corante agente, minerais, adoçantes, antioxidantes, ácido alimentício, lipídios, carboidratos, prebióticos, probióticos, agentes antiespuma e proteína que não seja de soro de queijo para obter um pó para bebida instantânea.
[0015] Ainda um aspecto da invenção se refere a um produto alimentício líquido que compreende um líquido e o pó de acordo com a invenção.
[0016] Um outro aspecto da invenção se refere a um método para preparar um produto alimentício líquido de acordo com a invenção, o referido método compreendendo: i. Adicionar um pó para bebida instantânea de acordo com a invenção, ii. Opcionalmente, adicionar pelo menos um outro ingrediente, e
5 / 145 iii. Misturar o pó e o líquido obtido para formar uma mistura uniforme.
[0017] Um outro aspecto da invenção se refere a um pó para bebida instantânea de acordo com a invenção, para uso como um suplemento nutricional.
[0018] Um outro aspecto da invenção se refere a um kit compreendendo o pó de acordo com a invenção, i. uma ferramenta para medir o referido pó; e ii. um recipiente com uma tampa para abrir e fechar o recipiente, em que o referido recipiente é para misturar o referido pó com um líquido para formar um produto alimentício, e o referido recipiente é adaptado para beber o produto alimentício diretamente do recipiente. Breve Descrição das Figuras
[0019] A Figura 1 é uma foto de microscópio dos cristais de BLG recuperados do alimento 3 do Exemplo 3 do pedido PCT PCT/EP2017/084553.
[0020] A Figura 2 mostra uma foto de microscópio dos cristais de BLG, inteiros e fragmentados, obtidos a partir do alimento 2 do Exemplo 3 do pedido PCT PCT/EP2017/084553.
[0021] A Figura 3 é uma foto de tubos de ensaio contendo subamostras das seis bebidas com baixo teor de fósforo preparadas no Exemplo 5. Definições
[0022] No contexto da presente invenção, o termo “beta- lactoglobulina” ou “BLG” se refere a beta-lactoglobulina de espécies de mamíferos, por exemplo, em formas nativas, desdobradas e/ou glicosiladas e inclui as variantes genéticas de ocorrência natural. Além disso, o termo inclui BLG agregada, BLG precipitada e BLG cristalina. Quando se refere à
6 / 145 quantidade de BLG, é feita referência à quantidade total de BLG incluindo BLG agregada. A quantidade total de BLG é determinada de acordo com o Exemplo 1.31. O termo “BLG agregada” pertence à BLG que é pelo menos parcialmente desdobrada e que, além disso, se agregou com outras moléculas de BLG desnaturadas e/ou outras proteínas do soro de queijo desnaturadas, tipicamente por meio de interações hidrofóbicas e/ou ligações covalentes.
[0023] A BLG é a proteína mais predominante no soro de queijo e no soro de leite bovinos e existe em várias variantes genéticas, sendo as principais no leite de vaca marcadas como A e B. A BLG é uma proteína lipocalina e pode se ligar a muitas moléculas hidrofóbicas, sugerindo um papel no seu transporte. A BLG também demonstrou ser capaz de se ligar ao ferro por meio de sideróforos e pode ter um papel no combate a patógenos. Um homólogo de BLG é faltante no leite materno.
[0024] A BLG bovina é uma proteína relativamente pequena de aproximadamente 162 resíduos de aminoácidos com um peso molecular de aproximadamente 18,3 a 18,4 kDa. Em condições fisiológicas, é predominantemente dimérica, mas se dissocia em um monômero abaixo de cerca de pH 3, preservando seu estado nativo conforme determinado usando espectroscopia de Ressonância Magnética Nuclear. Por outro lado, a BLG também ocorre em formas de agregação tetramérica, octamérica e outras multiméricas sob uma variedade de condições naturais.
[0025] No contexto da presente invenção, o termo “beta- lactoglobulina não agregada” ou “BLG não agregada” também se refere à beta-lactoglobulina de espécies de mamíferos, por exemplo, em formas nativas, desdobradas e/ou glicosiladas e inclui as variantes genéticas de ocorrência natural. No entanto, o termo não inclui BLG agregada, BLG precipitada ou BLG cristalizada. A quantidade ou concentração de BLG não agregada é determinada de acordo com o Exemplo 1.6.
[0026] A porcentagem de BLG não agregada em relação à BLG total
7 / 145 é determinada por cálculo (mBLG total - mBLG não agregada)/mBLG total *100%. mBLG total é a concentração ou quantidade de BLG determinada de acordo com o Exemplo 1.31 e mBLG não agregada é a concentração ou quantidade de BLG não agregada determinada de acordo com o Exemplo 1.6
[0027] No contexto da presente invenção, o termo “cristal” se refere a um material sólido cujos constituintes (como átomos, moléculas ou íons) estão dispostos em uma estrutura microscópica altamente ordenada, formando uma rede cristalina que se estende em todas as direções.
[0028] No contexto da presente invenção, o termo “cristal de BLG” se refere a cristais de proteínas que contêm principalmente BLG não agregada e preferivelmente nativa disposta em uma estrutura microscópica altamente ordenada, formando uma rede cristalina que se estende em todas as direções. Os cristais de BLG podem, por exemplo, ser monolíticos ou policristalinos e podem, por exemplo, ser cristais intactos, fragmentos de cristais ou uma combinação dos mesmos. Fragmentos de cristal são, por exemplo, formados quando cristais intactos são submetidos a cisalhamento mecânico durante o processamento. Fragmentos de cristais também têm a estrutura microscópica de cristal altamente ordenada, mas podem não ter a superfície uniforme e/ou mesmo as bordas ou cantos de um cristal intacto. Veja, por exemplo a Figura 1 para um exemplo de muitos cristais de BLG intactos e a Figura 2 para um exemplo de fragmentos de cristais de BLG. Em ambos os casos, o cristal de BLG ou fragmentos de cristal podem ser identificados visualmente como estruturas bem definidas, compactas e coerentes usando microscopia de luz. O cristal de BLG ou fragmentos de cristal são frequentemente pelo menos parcialmente transparentes. Além disso, os cristais de proteínas são conhecidos por serem birrefringentes e esta propriedade óptica pode ser usada para identificar partículas desconhecidas com uma estrutura cristalina. Os agregados de BLG não cristalinos, por outro lado, frequentemente aparecem como mal definidos, não transparentes e como pedaços abertos ou porosos de
8 / 145 tamanho irregular.
[0029] No contexto da presente invenção, o termo “cristalizar” se refere à formação de cristais de proteína. A cristalização pode, por exemplo, acontecer espontaneamente ou ser iniciada pela adição de sementes de cristalização.
[0030] No contexto da presente invenção, o termo “composição comestível” se refere a uma composição que é segura para consumo humano e uso como ingrediente alimentício e que não contém quantidades problemáticas de componentes tóxicos, como tolueno ou outros solventes orgânicos indesejados.
[0031] No contexto da presente invenção, o termo “ALA” ou “alfa- lactalbumina” se refere a alfa-lactalbumina de espécies de mamíferos, por exemplo, em formas nativas e/ou glicosiladas e inclui as variantes genéticas de ocorrência natural. O termo inclui, além disso, ALA agregada e BLG precipitada. Quando se refere à quantidade de ALA, é feita referência à quantidade total de ALA incluindo, por exemplo, ALA agregada. A quantidade total de ALA é determinada de acordo com o Exemplo 1.31. O termo “ALA agregada” se refere à ALA que normalmente é pelo menos parcialmente desdobrada e que, além disso, se agregou a outras moléculas ALA desnaturadas e/ou outras proteínas do soro de queijo desnaturadas, normalmente por meio de interações hidrofóbicas e/ou ligações covalentes.
[0032] A alfa-lactalbumina (ALA) é uma proteína presente no leite de quase todas as espécies de mamíferos. A ALA forma a subunidade reguladora do heterodímero da lactose sintase (LS) e a β-1,4-galactosiltransferase (beta4Gal-T1) forma o componente catalítico. Juntas, essas proteínas permitem que a LS produza lactose por meio da transferência de frações de galactose para a glicose. Uma das principais diferenças estruturais com a beta- lactoglobulina é que a ALA não tem nenhum grupo tiol livre que possa servir como ponto de partida para uma reação de agregação covalente.
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[0033] No contexto da presente invenção, o termo “ALA não agregada” também se refere à ALA de espécies de mamíferos, por exemplo, em formas nativas, desdobradas e/ou glicosiladas e inclui as variantes genéticas de ocorrência natural. No entanto, o termo não inclui ALA agregada ou ALA precipitada. A quantidade ou concentração de BLG não agregada é determinada de acordo com o Exemplo 1.6.
[0034] A porcentagem de ALA não agregada em relação à ALA total é determinada por cálculo (mALA total - mALA não agregada)/mALA total *100%. mALA total é a concentração ou quantidade de ALA determinada de acordo com o Exemplo 1.31 e mALA não agregada é a concentração ou quantidade de ALA não agregada determinada de acordo com o Exemplo 1.6.
[0035] No contexto da presente invenção, o termo “caseinomacropeptídeo” ou “CMP” se refere ao peptídeo hidrofílico, resíduo 106 a 169, originado da hidrólise de “κ-CN” ou “kappa-caseína” de espécies de mamíferos, por exemplo, em formas nativas e/ou glicosiladas e inclui as variantes genéticas de ocorrência natural, por uma proteinase aspártica, por exemplo, quimosina.
[0036] No contexto da presente invenção, o termo “isolado de BLG” significa uma composição que contém BLG em uma quantidade de pelo menos 85% p/p em relação à proteína total. Um isolado de BLG preferivelmente tem um teor de proteína total de pelo menos 30% p/p, e preferivelmente pelo menos 80% p/p em relação aos sólidos totais.
[0037] No contexto da presente invenção, o termo “isolado de BLG em pó” se refere a um isolado de BLG na forma de pó e preferivelmente um pó de fluxo livre.
[0038] No contexto da presente invenção, o termo “isolado de BLG líquido” se refere a um isolado de BLG na forma líquida e preferivelmente um líquido aquoso.
[0039] O termo “soro de queijo” se refere à fase líquida que resta
10 / 145 depois que a caseína do leite foi precipitada e removida. A precipitação da caseína pode, por exemplo, ser realizada por acidificação do leite e/ou pelo uso da enzima coalho. Existem vários tipos do soro de queijo, como “soro de queijo doce”, que é o produto do soro produzido por precipitação de caseína à base de coalho, e “soro de queijo ácido” ou “soro de queijo azedo”, que é o produto do soro de queijo produzido por precipitação de caseína. A precipitação de caseína à base de ácido pode, por exemplo, ser realizada por adição de ácidos alimentícios ou por meio de culturas bacterianas.
[0040] O termo “soro de leite” se refere ao líquido que permanece quando a caseína e os glóbulos de gordura do leite foram removidos do leite, por exemplo, por microfiltração ou ultrafiltração de poros grandes. O soro de leite também pode ser referido como “soro de queijo ideal”.
[0041] O termo “proteína de soro de leite “ ou “proteína de soro” se refere à proteína que está presente no soro de leite.
[0042] No contexto da presente invenção, o termo “proteína de soro de queijo” se refere à proteína que é encontrada no soro de queijo ou no soro de leite. A proteína de soro de queijo pode ser um subconjunto das espécies de proteínas encontradas no soro de queijo ou soro de leite, e até mesmo uma única espécie de proteína de soro de queijo ou pode ser o conjunto completo de espécies de proteínas encontradas no soro de queijo ou/e no soro de leite.
[0043] No contexto da presente invenção, as principais proteínas não BLG de um concentrado de proteína de soro de queijo padrão do soro de queijo doce são ALA, CMP, albumina do soro bovino, imunoglobulina, osteopontina, lactoferrina e lactoperoxidase. No contexto da presente invenção, as percentagens em peso das principais proteínas do soro de queijo não BLG de um concentrado de proteína de soro de queijo padrão do soro de queijo doce são: ALA em uma quantidade de 18% p/p em relação à proteína total,
11 / 145 CMP em uma quantidade de 18% p/p em relação à proteína total, BSA em uma quantidade de 4% p/p em relação à proteína total, Espécies de caseína em uma quantidade de 5% p/p em relação à proteína total, Imunoglobulina em uma quantidade de 6% p/p em relação à proteína total, Osteopontina em uma quantidade de 0,5% p/p em relação à proteína total, Lactoferrina em uma quantidade de 0,1% p/p em relação à proteína total, e Lactoperoxidase em uma quantidade de 0,1% p/p em relação à proteína total.
[0044] O termo “caseína” pertence à proteína caseína encontrada no leite e abrange tanto a caseína microbiana nativa como encontrada no leite cru, quanto as espécies individuais de caseína e caseinatos.
[0045] No contexto da presente invenção, um líquido que é “supersaturado” ou “supersaturado em relação à BLG” contém uma concentração de BLG dissolvida e não agregada que está acima do ponto de saturação da BLG não agregada nesse líquido em dadas as condições físicas e químicas. O termo “supersaturado” é bem conhecido no campo da cristalização (ver, por exemplo, Gérard Coquerela, “Crystallization of molecular systems from solution: phase diagrams, supersaturation and other basic concepts”, Chemical Society Reviews, págs. 2286 a 2300, Edição 7, 2014) e a supersaturação pode ser determinada por uma série de técnicas de medição diferentes (por exemplo, por espectroscopia ou análise de tamanho de partícula). No contexto da presente invenção, a supersaturação em relação à BLG é determinada pelo seguinte procedimento.
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[0046] Procedimento para testar se um líquido em um conjunto específico de condições está supersaturado em relação à BLG: a) Transferir uma amostra de 50 ml do líquido a ser testado para um tubo para centrífuga (Catálogo VWR nº 525-0402) com uma altura de 115 mm, um diâmetro interno de 25 mm e uma capacidade de 50 mL. É necessário ter cuidado para manter a amostra e suas frações subsequentes nas condições físicas e químicas originais do líquido durante as etapas a) a h). b) A amostra é imediatamente centrifugada a 3000 g por 3,0 minutos com no máximo 30 segundos de aceleração e no máximo 30 segundos de desaceleração. c) Imediatamente após a centrifugação, transferir o máximo possível do sobrenadante (sem perturbar o sedimento se um sedimento se formou) para um segundo tubo para centrífuga (mesmo tipo da etapa a)). d) Pegar uma subamostra de 0,05 mL do sobrenadante (subamostra A). e) Adicionar 10 mg de cristais de BLG (pelo menos 98% puro, BLG não agregada em relação aos sólidos totais) com um tamanho de partícula de no máximo 200 mícrons em um segundo tubo para centrífuga e agitar a mistura. f) Deixe o segundo tubo para centrífuga em repouso por 60 minutos na temperatura original. g) Imediatamente após a etapa f), centrifugar o segundo tubo para centrífuga a 500 g por 10 minutos e, em seguida, pegar outra subamostra de 0,05 mL do sobrenadante (subamostra B). h) Recuperar o sedimento de centrifugação da etapa g), se houver, ressuspendê-la em água Milli-Q e inspecionar imediatamente a suspensão quanto à presença de cristais que são visíveis por microscópio. i) Determinar a concentração de BLG não agregada nas subamostras A e B usando o método descrito no Exemplo 1.6 - os resultados
13 / 145 são expressos como % de BLG p/p em relação ao peso total das subamostras. A concentração de BLG não agregada da subamostra A é referida como CBLG, A, e a concentração de BLG não agregada da subamostra B é referida como CBLG, B. j) O líquido do qual a amostra da etapa a) foi retirada estava supersaturado (nas condições específicas) se CBLG, B for menor do que CBLG, A e se cristais forem observados na etapa i).
[0047] No contexto da presente invenção, os termos “líquido” e “solução” abrangem ambas as composições que são livres de matéria particulada e composições que contêm uma combinação de partículas líquidas e sólidas e/ou semissólidas, tais como, por exemplo, cristais de proteína ou outras partículas de proteína. Um “líquido” ou uma “solução” pode, portanto, ser uma suspensão ou mesmo uma pasta. No entanto, um “líquido” e uma “solução” são preferivelmente bombeáveis.
[0048] No contexto da presente invenção, os termos “concentrado de proteína de soro de queijo” (WPC) e “concentrado de proteína de soro” (CPS) se referem a composições secas ou aquosas que contêm uma quantidade total de proteína de 20% a 89% p/p em relação a sólidos totais.
[0049] Um WPC ou um CPS contém preferivelmente: de 20% a 89% p/p de proteína em relação aos sólidos totais, de 15% a 70% p/p de BLG em relação à proteína total, de 8% a 50% p/p de ALA em relação à proteína total, e de 0% a 40% p/p de CMP em relação à proteína.
[0050] Alternativamente, mas também preferido, um WPC ou um CPS pode conter: de 20% a 89% p/p de proteína em relação aos sólidos totais, de 15% a 90% p/p de BLG em relação à proteína total, de 4% a 50% p/p de ALA em relação à proteína total, e de 0% a 40% p/p de CMP em relação à proteína.
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[0051] Preferivelmente, um WPC ou um CPS contém: 20% a 89% p/p de proteína em relação aos sólidos totais, 15% a 80% p/p de BLG em relação à proteína total, 4% a 50% p/p de ALA em relação à proteína total, e 0% a 40% p/p de CMP em relação à proteína.
[0052] Mais preferivelmente, um WPC ou um CPS contém: de 70% a 89% p/p de proteína em relação aos sólidos totais, de 30% a 90% p/p de BLG em relação à proteína total, de 4% a 35% p/p de ALA em relação à proteína total, e de 0% a 25% p/p de CMP em relação à proteína.
[0053] O CPS normalmente não contém CMP ou apenas traços de CMP.
[0054] Os termos “isolado de proteína de soro de queijo” (WPI) e “isolado de proteína de soro” (SPI) se referem a composições secas ou aquosas que contêm uma quantidade total de proteína de 90% a 100% p/p em relação aos sólidos totais.
[0055] Um WPI ou um SPI contém preferivelmente: de 90% a 100% p/p de proteína em relação aos sólidos totais, de 15% a 70% p/p de BLG em relação à proteína total, de 8% a 50% p/p de ALA em relação à proteína total, e de 0% a 40% p/p de CMP em relação à proteína total.
[0056] Alternativamente, mas também preferido, um WPI ou um SPI pode conter: de 90% a 100% p/p de proteína em relação aos sólidos totais, de 30% a 95% p/p de BLG em relação à proteína total, de 4% a 35% p/p de ALA em relação à proteína total, e de 0% a 25% p/p de CMP em relação à proteína total.
[0057] Mais preferivelmente, um WPI ou um SPI pode conter: de 90% a 100% p/p de proteína em relação aos sólidos totais,
15 / 145 de 30% a 90% p/p de BLG em relação à proteína total, de 4% a 35% p/p de ALA em relação à proteína total, e de 0% a 25% p/p de CMP em relação à proteína total.
[0058] O SPI normalmente não contém CMP ou apenas traços de CMP.
[0059] No contexto da presente invenção, o termo “proteína adicional” significa uma proteína não BLG. A proteína adicional que está presente na solução de proteína de soro de queijo compreende tipicamente uma ou mais das proteínas não BLG que são encontradas no soro de leite ou soro de queijo. Exemplos não limitativos de tais proteínas são alfa- lactalbumina, albumina do soro bovino, imunoglobulinas, caseinomacropeptídeo (CMP), osteopontina, lactoferrina e proteínas da membrana de glóbulos de gordura do leite.
[0060] Os termos “consiste essencialmente em” e “consistindo essencialmente em” significam que a reivindicação ou recurso em questão abrange os materiais ou etapas especificados e aqueles que não afetam materialmente as características básicas e novas da invenção reivindicada.
[0061] No contexto da presente invenção, a frase “Y e/ou X” significa “Y” ou “X” ou “Y e X”. Na mesma linha de lógica, a frase “n1, n2, ..., ni-1 e/ou ni” significa “n1” ou “n2” ou ... ou “ni-1” ou “ni” ou qualquer combinação dos componentes: n1, n2, ... ni-1 e ni.
[0062] No contexto da presente invenção, o termo “seco(a)” ou “secado(a)” significa que a composição ou produto em questão compreende no máximo 10% p/p de água, preferivelmente no máximo 6% p/p e mais preferivelmente ainda menos.
[0063] No contexto da presente invenção, o termo “redução microbiana física” se refere à interação física com uma composição que resulta na redução da quantidade total de microrganismos viáveis da composição. O termo não abrange a adição de produtos químicos que
16 / 145 resultam na morte de microrganismos. O termo, além disso, não abrange a exposição ao calor a que as gotículas de líquido atomizadas são expostas durante a secagem por pulverização, mas inclui o possível pré-aquecimento antes da secagem por pulverização.
[0064] No contexto da presente invenção, o pH de um pó se refere ao pH de 10 g do pó misturado em 90 g de água desmineralizada e é medido de acordo com o Exemplo 1.16.
[0065] No contexto da presente invenção, a porcentagem em peso (% p/p) de um componente de uma certa composição, produto ou material significa a porcentagem em peso desse componente em relação ao peso da composição, produto ou material específico, a menos que outra referência (por exemplo, sólidos totais ou proteína total) seja especificamente mencionada.
[0066] No contexto da presente invenção, a etapa do processo “concentração” e o verbo “concentrar” se referem à concentração de proteína e abrangem a concentração de proteína com base em sólidos totais e concentração de proteína com base em peso total. Isso significa, por exemplo, que essa concentração não requer necessariamente que a concentração absoluta p/p de proteína de uma composição aumente, desde que o teor de proteína aumente em relação ao total de sólidos.
[0067] No contexto da presente invenção, o termo “razão do peso” entre o componente X e o componente Y significa o valor obtido pelo cálculo mX/mY em que mX é a quantidade (peso) dos componentes X e mY é a quantidade (peso) de componentes Y.
[0068] No contexto da presente invenção, o termo “pelo menos pasteurização” se refere a um tratamento térmico que tem efeito de morte microbiana igual ou superior a um tratamento térmico de 70ºC por 10 segundos. A referência para determinar o efeito de eliminação de bactérias é E. coli O157: H7.
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[0069] No contexto da presente invenção, o termo “alimento de proteína de soro de queijo” se refere à fonte de proteína de soro de queijo da qual o isolado de BLG líquido é derivado. O alimento de proteína de soro de queijo tem um teor mais baixo de BLG em relação à proteína total do que o isolado de BLG líquido e é tipicamente um WPC, um WPI, um CPS ou um SPI.
[0070] No contexto da presente invenção, o termo “composição enriquecida com BLG” se refere à composição enriquecida com BLG resultante do isolamento de BLG do alimento com proteína de soro de queijo. A composição enriquecida com BLG normalmente compreende as mesmas proteínas do soro de queijo que o alimento de proteína de soro de queijo, mas a BLG está presente em uma concentração significativamente maior em relação à proteína total do que no alimento de proteína de soro de queijo. A composição enriquecida com BLG pode, por exemplo, ser preparada a partir do alimento de proteína de soro de queijo por cromatografia, cristalização de proteínas e/ou fracionamento de proteínas com base em membrana. A composição enriquecida com BLG compreende BLG em uma quantidade de pelo menos 85% p/p em relação à proteína total e, preferivelmente, pelo menos 90% p/p. Em alguns casos, a composição enriquecida com BLG pode ser usada diretamente como o isolado de BLG líquido. No entanto, muitas vezes o processamento adicional é necessário para converter a composição enriquecida com BLG no isolado de BLG líquido.
[0071] No contexto da presente invenção, o termo “solução de proteína de soro de queijo” é usado para descrever a composição de proteína de soro de queijo aquosa especial que é supersaturada em relação à BLG no modo salting-in e útil para a preparação de cristais de BLG.
[0072] No contexto da presente invenção, o termo “estéril” significa que a composição ou produto estéril em questão não contém nenhum microrganismo viável e, portanto, é desprovido de crescimento microbiano
18 / 145 durante o armazenamento em temperatura ambiente. Uma composição que foi esterilizada é estéril.
[0073] Quando um líquido, como uma preparação de bebida, é esterilizado e embalado assepticamente em um recipiente estéril, ele normalmente tem uma vida útil de pelo menos seis meses em temperatura ambiente. O tratamento de esterilização mata esporos e microrganismos que podem causar a deterioração do líquido.
[0074] No contexto da presente invenção, o termo “teor de energia” significa o teor total de energia contido em um produto alimentício. O teor de energia pode ser medido em quilojoule (kJ) ou quilocalorias (kcal) e são referidos como calorias por quantidade de produto alimentício, por exemplo, kcal por 100 g do produto alimentício. Um exemplo é um pó para bebida instantânea com um teor energético de 350 kcal/100 g do pó para bebida instantânea.
[0075] O teor total de energia de um produto alimentício inclui a contribuição de energia de todos os macronutrientes presentes no produto alimentício, por exemplo, energia proveniente de proteínas, lipídios e carboidratos. A distribuição de energia dos macronutrientes no produto alimentício pode ser calculada com base na quantidade de macronutrientes no produto alimentício e na contribuição do macronutriente para o teor energético total do produto alimentício. A distribuição de energia pode ser declarada como porcentagem de energia (E%) do teor total de energia do produto alimentício. Por exemplo, para um pó para bebida instantânea que compreende 20 E% de proteína, 50 E% de carboidratos e 30 E% de lipídios, isso significa que 20% da energia total vem de proteínas, 50% da energia total vem de carboidratos e 30% da energia total vem da gordura (lipídio).
[0076] No contexto da presente invenção, o termo “suplemento nutricional” se refere a um produto alimentício que compreende um ou mais macronutrientes, como proteínas, lipídios e/ou carboidratos e, opcionalmente,
19 / 145 compreende vitaminas e minerais. Os suplementos nutricionais podem ser completos ou incompletos.
[0077] Pelo termo “suplemento nutricional nutricionalmente completo” são entendidos produtos alimentícios compreendendo proteínas, lipídios e carboidratos e ainda compreendendo vitaminas, minerais e oligoelementos, onde o produto alimentício tem um perfil nutricional correspondente a uma dieta completa e saudável.
[0078] O termo “suplemento nutricionalmente incompleto” significa produtos alimentícios compreendendo um ou mais macronutrientes e, opcionalmente, compreendendo vitaminas, minerais e oligoelementos. Um suplemento nutricional incompleto pode compreender proteínas como os únicos nutrientes ou pode compreender proteínas, lipídios e um carboidrato.
[0079] O termo “alimento para fins medicinais especiais (FSMP)” ou “alimento medicinal” são produtos alimentícios para ingestão oral ou alimentação por sonda, que são usados para distúrbios medicinais específicos, doenças ou condições para as quais existem requisitos nutricionais distintos e que são usados sob supervisão médica. Um alimento medicinal pode ser um suplemento nutricionalmente completo ou um suplemento nutricionalmente incompleto.
[0080] O termo “nutriente” significa uma substância usada por um organismo para sobreviver, crescer e se reproduzir. Os nutrientes podem ser macronutrientes ou micronutrientes. Os macronutrientes são nutrientes que proveem energia quando consumidos, por exemplo, proteínas, lipídios e carboidratos. Os micronutrientes são nutrientes, são vitaminas, minerais e oligoelementos.
[0081] Pelo termo “pó para bebida instantânea” ou “produto de pó para bebida instantânea” é entendido um pó que pode ser convertido em uma bebida líquida pela adição de um líquido, como água.
[0082] No contexto da presente invenção, os termos “preparação de
20 / 145 bebida” e “preparação” usados como substantivos se referem a qualquer líquido à base de água que pode ser ingerido como uma bebida por, por exemplo, verter, sorver ou alimentação por sonda.
[0083] No contexto da presente invenção, o termo “fração de proteína” se refere a proteínas da composição em questão, por exemplo, as proteínas de um pó ou de uma preparação de bebida.
[0084] No contexto da presente invenção, o termo “adstringência” se refere a uma sensação bucal. A adstringência parece uma contração dos músculos da bochecha e resulta em aumento da produção de saliva. Desta forma, a adstringência não é um sabor propriamente dito, mas uma sensação bucal física e uma sensação na boca dependente do tempo.
[0085] No contexto da presente invenção, o termo “sensação de secura bucal” se refere a uma sensação na boca, como uma secura na boca e nos dentes e resulta na minimização da produção de saliva. Desta forma, a sensação de secagem bucal não é um sabor propriamente dito, mas uma sensação bucal física e uma sensação na boca dependente do tempo.
[0086] No contexto da presente invenção, o termo “minerais”, tal como aqui usado, a menos que de outra forma especificado, se refere a qualquer um dos minerais principais, traços ou minerais secundários, outros minerais e suas combinações. Os minerais principais incluem cálcio, fósforo, potássio, enxofre, sódio, cloro, magnésio. Traços ou minerais menores incluem ferro, cobalto, cobre, zinco, molibdênio, iodo, selênio, manganês e outros minerais incluem cromo, fluorina, boro, lítio e estrôncio.
[0087] No contexto da presente invenção, os termos “lipídio”, “gordura” e “óleo”, conforme usados neste documento, a menos que especificado de outra forma, são usados indistintamente para se referir a materiais lipídicos derivados ou processados de plantas ou animais. Esses termos também incluem materiais lipídicos sintéticos, desde que tais materiais sintéticos sejam adequados para consumo humano.
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[0088] No contexto da presente invenção, o termo “transparente” abrange uma preparação de bebida com uma aparência visivelmente clara e que permite a passagem de luz e através da qual aparecem imagens distintas. Uma bebida transparente tem uma turbidez de no máximo 200 NTU.
[0089] No contexto da presente invenção, o termo “opaco” engloba uma preparação de bebida com uma aparência visivelmente pouco clara e com uma turbidez de mais de 200 NTU.
[0090] No contexto da presente invenção, o termo “licor-mãe” se refere à solução de proteína de soro de queijo que permanece após a BLG ter sido cristalizada e os cristais de BLG terem sido pelo menos parcialmente removidos. O licor-mãe ainda pode conter alguns cristais de BLG, mas normalmente apenas pequenos cristais de BLG que escaparam da separação.
[0091] Pelo termo “pó para bebida instantânea” ou “produto de pó para bebida instantânea” é entendido um pó que pode ser convertido em uma bebida líquida pela adição de um líquido, como água. Descrição Detalhada
[0092] A concepção geral do suplemento nutricional é percebida pelo consumidor. O suplemento nutricional deve ser apetecível no sabor e na aparência; caso contrário, será rejeitado pelo consumidor. Além disso, o consumidor valoriza os produtos naturais sem aditivos. Outro parâmetro importante para o consumidor é o prazo de validade do produto.
[0093] Um aspecto da invenção se refere a um pó para bebida instantânea compreendendo pelo menos 1% p/p de BLG, preferivelmente pelo menos 5%, em que: - a cristalinidade de BLG é de pelo menos 20%, preferivelmente pelo menos 40%; e/ou - pelo menos 85% p/p da quantidade total de proteína é composta por BLG, e, além disso, compreendendo pelo menos um ingrediente
22 / 145 adicional selecionado do grupo que consiste em vitaminas, agente flavorizante, agente corante, minerais, adoçantes, antioxidantes, ácido alimentício, lipídios, carboidratos, prebióticos, probióticos, agentes antiespuma e proteína que não seja de soro de queijo.
[0094] A fonte de BLG usada no pó para bebida instantânea pode ser o isolado de BLG ou o isolado de BLG em pó conforme descrito no presente pedido de patente. Em algumas modalidades preferidas da invenção, a fonte de BLG contribui com pelo menos 90% p/p da proteína total do pó para bebida instantânea, mais preferivelmente pelo menos 95% p/p, ainda mais preferido pelo menos 98% p/p e mais preferivelmente todas as proteínas do pó para bebida instantânea.
[0095] Em algumas modalidades preferidas da invenção, a fonte de BLG é o isolado de BLG em pó e é a única fonte de proteína no pó para bebida instantânea.
[0096] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o pó para bebida instantânea é preparada por mistura a seco do isolado de BLG em pó e os outros ingredientes.
[0097] Em outras modalidades preferidas da invenção, o pó para bebida instantânea é preparada usando pelo menos um ingrediente na forma dissolvida e subsequentemente executando uma etapa de secagem. A etapa de secagem pode, por exemplo, formar parte de um processo de granulação úmida ou uma etapa de secagem por pulverização.
[0098] A BLG do pó para bebida instantânea da presente invenção preferivelmente tem um baixo grau de desnaturação, tal como no máximo 10%, preferivelmente no máximo 4%, mais preferivelmente no máximo 1%, ainda mais preferivelmente no máximo 0,4% e ainda mais preferivelmente no máximo 0,1%. Mais preferivelmente, a BLG não é desnaturada. Para pó para bebidas instantâneas, é vantajoso que a BLG tenha um baixo grau de desnaturação, pois isso reduz a tendência de formação de espuma quando
23 / 145 misturadas com um líquido.
[0099] O pó para bebida instantânea tem preferivelmente um grau de desnaturação de proteínas de no máximo 10%, preferivelmente no máximo 4%, mais preferivelmente no máximo 1%, ainda mais preferivelmente no máximo 0,4% e ainda mais preferivelmente no máximo 0,1%. Mais preferivelmente, a proteína não é danificada absolutamente.
[00100] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea compreende de 1 a 90% p/p de BLG. Em uma modalidade preferida da invenção, o pó para bebida instantânea compreende de 30 a 90% p/p de BLG, mais preferivelmente na faixa de 40 a 90% p/p de BLG ou ainda mais preferivelmente na faixa de 50 a 90% p/p de BLG.
[00101] Em outras modalidades preferidas da invenção, o pó para bebida instantânea compreende de 10 a 97% p/p de BLG. Em uma modalidade preferida da invenção, o pó para bebida instantânea compreende de 30 a 96% p/p de BLG, mais preferivelmente na faixa de 40 a 95% p/p de BLG ou ainda mais preferivelmente na faixa de 50 a 94% p/p de BLG.
[00102] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea compreende de 1 a 50% p/p de BLG. Em uma modalidade preferida da invenção, o pó para bebida instantânea compreende de 2% a 45% p/p de BLG, mais preferivelmente na faixa de 3% a 40% p/p de BLG ou ainda mais preferivelmente na faixa de 3% a 35% p/p de BLG.
[00103] Em uma modalidade preferida da invenção, o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p da quantidade total de proteína BLG.
[00104] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, tal como pelo menos 86% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 87% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 88% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 89% p/p de BLG em relação à proteína
24 / 145 total.
[00105] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 91% p/p de BLG em relação à proteína total, como pelo menos 92% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 93% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 94% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 95% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 96% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 97% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 98% p/p de BLG em relação à proteína total ou pelo menos 99% p/p de BLG em relação à proteína total.
[00106] Em algumas modalidades preferidas do pó para bebida instantânea da invenção, pelo menos 85% p/p da proteína é BLG. Preferivelmente, pelo menos 88% p/p da proteína é BLG, mais preferivelmente pelo menos 90% p/p, ainda mais preferivelmente pelo menos 91% p/p, e mais preferivelmente pelo menos 92% p/p da proteína é BLG.
[00107] Quantidades relativas ainda mais elevadas de BLG são viáveis e desejáveis, portanto, em algumas modalidades preferidas da invenção, pelo menos 94% p/p da proteína do pó para bebida instantânea é BLG, mais preferivelmente pelo menos 96% p/p da proteína é BLG, ainda mais preferivelmente pelo menos 98% p/p da proteína é BLG, e mais preferivelmente aproximadamente 100% p/p da proteína é BLG.
[00108] Por exemplo, o pó para bebida instantânea preferivelmente compreende BLG em uma quantidade de pelo menos 97,5% p/p em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 98,0% p/p, mais preferivelmente pelo menos 98,5% p/p, ainda mais preferivelmente pelo menos 99,0%, e mais preferivelmente BLG em uma quantidade de pelo menos 99,5% p/p em relação à proteína total, tal como aproximadamente 100,0% p/p em relação à proteína total.
[00109] A proteína do pó para bebida instantânea é preferivelmente preparada a partir de leite de mamíferos, e preferivelmente de leite de
25 / 145 ruminante tal como, por exemplo, leite de vaca, ovelha, cabra, búfala, camela, lhama, égua e/ou corça. A proteína derivada do leite bovino é particularmente preferida. A proteína do pó para bebida instantânea é, portanto, preferivelmente proteína de leite bovino.
[00110] A proteína do pó para bebida instantânea é preferivelmente proteína de soro de queijo ou proteína de soro de leite e ainda mais preferivelmente proteína de soro de queijo ou proteína de soro de leite bovinos.
[00111] A razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330 nm/I350 nm) é uma medida do grau de desdobramento de BLG, e os inventores descobriram que em altas razões de emissão de fluorescência de triptofano de BLG, que se correlacionam com baixo ou nenhum desdobramento de BLG, a razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330 nm/I350 nm) é medida de acordo com o Exame 1.1.
[00112] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o pó para bebida instantânea tem uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330 nm/I350 nm) de pelo menos 1,11.
[00113] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o pó para bebida instantânea tem uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330 nm/I350 nm) de pelo menos 1,12, preferivelmente pelo menos 1,13, mais preferivelmente pelo menos 1,15, ainda mais preferivelmente pelo menos 1,17, e mais preferivelmente pelo menos 1,19.
[00114] Se o pó para bebida instantânea contém quantidades consideráveis de matéria não proteica, é preferível isolar a fração de proteína antes de medir a razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca. Desta forma, em algumas modalidades preferidas da invenção, a fração de proteína do pó para bebida instantânea tem uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca de pelo menos 1,11.
[00115] Em algumas modalidades preferidas da invenção, a fração de
26 / 145 proteína do pó para bebida instantânea tem uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330 nm/I350 nm) de pelo menos 1,12, preferivelmente pelo menos 1,13, mais preferivelmente pelo menos 1,15, ainda mais preferivelmente em pelo menos 1,17 e, mais preferivelmente, pelo menos 1,19.
[00116] A fração de proteína pode, por exemplo, ser separada do pó para bebida instantânea dissolvendo o pó para bebida instantânea em água desmineralizada e submetendo a solução a diálise ou diafiltração baseada em ultrafiltração usando um filtro que retém a proteína.
[00117] Em algumas modalidades preferidas da invenção, a cristalinidade de BLG do pó para bebida instantânea é de pelo menos 20%, preferivelmente pelo menos 40%, mais preferivelmente pelo menos 60%, ainda mais preferivelmente pelo menos 80% e mais preferivelmente pelo menos 90%. Ter uma cristalinidade de BLG de pelo menos 20% significa que uma quantidade significativa de BLG está presente na forma de cristais de BLG secos no pó para bebida instantânea.
[00118] Os presentes inventores descobriram que uma cristalinidade de BLG de pelo menos 20% é vantajosa, pois significa que a proteína está presente em uma forma que tem uma densidade mais alta do que o WPI tradicional. Isso fornece uma densidade aparente geral mais alta para o pó para bebida instantânea e a torna menos árida e mais fácil de manusear para o usuário final. Os inventores também observaram uma tendência reduzida a segregação de partículas em pó para bebidas instantâneas misturadas a seco que, por exemplo, contêm um carboidrato em pó e/ou ácido alimentício em pó, além de uma proteína em pó.
[00119] A presente invenção torna possível prover pó para bebida instantânea com baixo teor de carboidratos, que tem doçura e um alto teor de proteína.
[00120] Desta forma, em algumas modalidades preferidas da invenção,
27 / 145 o pó para bebida instantânea compreende: - um teor de energia na faixa de 320 a 380 kcal/100 g de pó e, preferivelmente, na faixa de 350 a 370 kcal/100 g, - uma contribuição da energia da proteína na faixa de 90 a 100 E%, e preferivelmente na faixa de 95 a 100 E%, - BLG em uma quantidade de pelo menos 85% p/p em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p em relação à proteína total, e mais preferivelmente pelo menos 94% p/p em relação à proteína total, - uma contribuição da energia do carboidrato na faixa de 0 a 10 E%, e preferivelmente na faixa de 0 a 5 E%, - uma quantidade total de adoçantes de alta intensidade na faixa de 0,01% a 4% p/p, preferivelmente na faixa de 0,05% a 3%, - ter uma densidade aparente de pelo menos 0,45 g/mL, preferivelmente pelo menos 0,50 g/mL, e mais preferida de pelo menos 0,6 g/mL.
[00121] A proteína do pó para bebida instantânea é preferivelmente fornecida por um isolado de BLG em pó que: tem um pH na faixa de i) 2 a 4,9, ii) 6,1 a 8,5, ou iii) 5,0 a 6,0 e compreende: - proteína total em uma quantidade de pelo menos 90% p/p, preferivelmente pelo menos 95% p/p, - BLG em uma quantidade de pelo menos 85% p/p em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p em relação à proteína total, e mais preferivelmente pelo menos 94% p/p em relação à proteína total, o referido isolado de BLG em pó tendo: - uma densidade aparente de pelo menos 0,45 g/mL, preferivelmente pelo menos 0,50 g/mL, e mais preferivelmente pelo menos 0,6 g/mL, e
28 / 145 - um ou mais dos seguintes: - uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330/I350) de pelo menos 1,11, preferivelmente pelo menos 1,13, e mais preferivelmente pelo menos 1,15, - um grau de desnaturação da proteína de no máximo 10%, preferivelmente pelo menos 5%, - uma estabilidade ao calor em pH 3,9 de no máximo 200 NTU, e - no máximo 1000 unidades formadoras de colônias/g.
[00122] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea compreende ainda pelo menos um ingrediente adicional selecionado do grupo que consiste em vitaminas, agente flavorizante, agente corante, minerais, adoçantes, antioxidantes, ácido alimentício, lipídios, carboidratos, prebióticos, probióticos e proteína que não seja de soro de queijo.
[00123] O ingrediente adicional garante que o pó para bebida instantânea contenha os nutrientes desejados, ou seja, nutrientes especificamente adaptados a pacientes com ou em risco de desnutrição, para pacientes que sofrem de doença renal, para ganho de peso ou pode ser usada como um suplemento nutricional, por exemplo por esportistas ou atletas.
[00124] Em uma modalidade preferida da invenção, o pó para bebida instantânea pode incluir uma vitamina selecionada do grupo que consiste em vitamina A, vitamina B1 (tiamina), vitamina B2 (riboflavina), vitamina B3 (niacina), vitamina B5 (ácido pantotênico), vitamina B6 (piridoxina), vitamina B7 (biotina), vitamina B9 (ácido fólico) e vitamina B12 (cobalamina), vitamina C, vitamina D, vitamina E, vitamina K, colina, inositol, seus sais, seus derivados e suas combinações.
[00125] Em uma modalidade, o pó para bebida instantânea pode compreender um agente flavorizante selecionado do grupo que consiste em sal, flavorizantes, intensificadores de flavor e/ou especiarias. Em uma
29 / 145 modalidade preferida da invenção, o flavor compreende chocolate, cacau, limão, laranja, lima, morango, banana, flavor de fruta silvestre ou suas combinações.
[00126] Em uma modalidade, o pó para bebida instantânea pode incluir um mineral selecionado do grupo que consiste em boro, cálcio, cromo, cobre, iodo, ferro, magnésio, manganês, molibdênio, níquel, fósforo, potássio, sódio, selênio, silício, estanho, vanádio, zinco ou combinações dos mesmos.
[00127] O pó para bebida instantânea pode ainda conter sais e minerais que estão tipicamente presentes no soro de queijo ou produtos derivados do leite. O teor de minerais do pó para bebida instantânea é tipicamente representado como o teor de cinzas do ingrediente ou produto alimentício. Em uma modalidade preferida, o pó para bebida instantânea pode compreender um antioxidante selecionado do grupo que consiste em betacaroteno, vitamina C, vitamina E, selênio ou suas combinações.
[00128] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea pode compreender um ou mais adoçantes, tais como adoçantes de carboidratos, polióis e/ou adoçantes de alta intensidade. O pó para bebida instantânea pode, por exemplo, compreender uma quantidade total de adoçante de carboidrato na faixa de 0,001% a 20% p/p em relação ao peso total do pó para bebida instantânea. Alternativamente, o pó para bebida instantânea pode compreender uma quantidade total de adoçante de carboidrato na faixa de 0,1% a 15% p/p em relação ao peso total do produto alimentício.
[00129] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea compreende pelo menos um adoçante de alta intensidade. Em uma modalidade, o pelo menos um adoçante de alta intensidade é selecionado do grupo que consiste em aspartame, ciclamato, sucralose, sal de acessulfame, neotame, sacarina, extrato de estévia, um glicosídeo de esteviol tal como, por exemplo, rebaudiosídeo A, ou uma combinação dos mesmos. Em algumas
30 / 145 modalidades da invenção, é particularmente preferido que o adoçante compreenda ou mesmo consista em um ou mais adoçantes de alta intensidade (AAI).
[00130] Os adoçantes de alta intensidade são encontrados entre os adoçantes naturais e artificiais e normalmente têm uma intensidade adoçante de pelo menos 10 vezes a da sacarose.
[00131] Se usados, a quantidade total de adoçantes de alta intensidade está normalmente na faixa de 0,01% a 4% p/p. Por exemplo, a quantidade total de adoçantes de alta intensidade pode estar na faixa de 0,05% a 3% p/p. Alternativamente, a quantidade total de adoçantes de alta intensidade pode estar na faixa de 0,1% a 2,0% p/p.
[00132] A escolha do adoçante pode depender da bebida a ser produzida e do consumidor do produto, por exemplo, pode ser ajustado a um diagnóstico específico de um paciente. Adoçantes de açúcar de alta intensidade (por exemplo, aspartame, acesulfame-K ou sucralose) podem ser usados em bebidas onde nenhuma contribuição de energia do adoçante é desejada, enquanto para bebidas com um perfil natural, adoçantes naturais (por exemplo, glicosídeos de esteviol, sorbitol ou sacarose) podem ser usados.
[00133] Além disso, pode ser preferido que o adoçante compreenda ou mesmo consista em um ou mais edulcorante(s) poliol. Exemplos não limitativos de adoçantes poliol úteis são maltitol, manitol, lactitol, sorbitol, inositol, xilitol, treitol, galactitol ou suas combinações. Se usado, a quantidade total de adoçante poliol está normalmente na faixa de 1% a 40% p/p. Por exemplo, a quantidade total de adoçante poliol pode estar na faixa de 2% a 30% p/p. Alternativamente, a quantidade total de adoçante poliol pode estar na faixa de 4% a 20% p/p.
[00134] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea pode compreender um ou mais de:
31 / 145 i. um adoçante, por exemplo, um adoçante de açúcar e/ou um adoçante sem açúcar, ii. um agente flavorizante, iii. pelo menos um ácido alimentício, por exemplo, ácido cítrico ou outros ácidos alimentícios adequados, iv. a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca da bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína e em que uma solução a 10% p/p do pó em água desmineralizada tem um pH na faixa de 2 a 8.
[00135] O pH do pó para bebida instantânea pode ser medido dissolvendo 10 g do pó para bebida instantânea em 90 ml de água desmineralizada em temperatura ambiente, conforme descrito no Exemplo
1.16.
[00136] Os inventores descobriram que é vantajoso usar um isolado de BLG em pó com baixo teor de fósforo/baixo potássio no pó para bebida instantânea, por exemplo, para pó para bebidas instantâneas que são particularmente úteis para pacientes com doenças renais.
[00137] Ao adicionar adoçantes, agentes flavorizantes e/ou ácidos alimentícios, o sabor do produto pode ser projetado de modo que o pó para bebida instantânea seja atraente para o consumidor. Em uma modalidade da invenção, o consumidor pode ser um paciente para o qual o flavor, adoçante e perfil ácido do pó para bebida instantânea são ajustados para se adaptarem às necessidades e ao diagnóstico do paciente.
[00138] Em uma modalidade preferida da invenção, o pó para bebida instantânea pode compreender um adoçante de alta intensidade e um agente flavorizante. Em uma modalidade ainda mais preferida da invenção, o pó para bebida instantânea compreende 0,001% a 0,05% p/p de sucralose e 0,01% a 0,2% p/p e um flavor selecionado de chocolate, cacau, limão, laranja, lima, morango, banana, flavor de fruta silvestre ou suas combinações.
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[00139] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea compreende um agente antiespuma. O agente antiespuma pode ser selecionado a partir de agentes antiespuma adequados para produtos alimentícios. O agente antiespuma pode ser selecionado a partir de agentes antiespuma à base de óleo, agentes antiespuma à base de água, agentes antiespuma à base de silicone, agentes antiespuma à base de EP/PO ou uma combinação dos mesmos.
[00140] O pó para bebida instantânea tem um teor de água de no máximo 6% p/p. Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea compreende no máximo 5% p/p de água, preferivelmente no máximo 4% p/p de água, mais preferivelmente no máximo 3% p/p de água, e ainda mais preferivelmente no máximo 2% p/p de água.
[00141] A estabilidade de armazenamento do pó para bebida instantânea pode aumentar ao diminuir o teor de água do pó.
[00142] Os presentes inventores descobriram que pode ser vantajoso controlar o teor mineral a fim de alcançar algumas das propriedades desejadas do pó para bebida instantânea.
[00143] Em algumas modalidades preferidas da invenção, a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína. Preferivelmente, a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 6 mmol/g de proteína, mais preferivelmente no máximo 4 mmol/g de proteína, ainda mais preferivelmente no máximo 2 mmol/g de proteína.
[00144] Em outras modalidades preferidas da invenção, a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 1 mmol/g de proteína. Preferivelmente, a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 0,6 mmol/g de proteína, mais preferivelmente no máximo 0,4 mmol/g de proteína, ainda mais preferivelmente no máximo 0,2 mmol/g de proteína, e mais preferivelmente
33 / 145 no máximo 0,1 mmol/g de proteína.
[00145] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea compreende cristais de BLG secos, por exemplo, obteníveis por um ou mais métodos descritos em PCT/EP2017/084553. O pó para bebida instantânea contendo cristais de BLG pode ter uma densidade aparente de pelo menos 0,30 g/mL, preferivelmente pelo menos 0,4 g/mL.
[00146] Os inventores observaram que o pó para bebida instantânea em que pelo menos parte de BLG está na forma de cristal tem uma densidade mais alta do que composições de BLG instantâneas comparáveis sem cristais de BLG. Desta forma, em algumas modalidades preferidas da invenção, o pó para bebida instantânea tem uma densidade aparente de pelo menos 0,30 g/mL, preferivelmente pelo menos 0,40 g/mL. Preferivelmente, o pó para bebida instantânea tem uma densidade aparente de pelo menos 0,45 g/mL. Mais preferivelmente, o pó para bebida instantânea tem uma densidade aparente de pelo menos 0,50 g/mL. É ainda mais preferido que o pó para bebida instantânea tenha uma densidade aparente de pelo menos 0,6 g/mL. O pó para bebida instantânea pode, por exemplo, ter uma densidade aparente de pelo menos 0,7 g/mL.
[00147] O pó para bebida instantânea da presente invenção tem preferivelmente uma densidade aparente na faixa de 0,3 a 1,0 g/mL, preferivelmente na faixa de 0,40 a 0,9 g/mL, mais preferivelmente na faixa de 0,45 a 0,8 g/mL, ainda mais preferivelmente na faixa de 0,45 a 0,75 g/mL, ainda mais preferivelmente na faixa de 0,50 a 0,75 g/mL, e mais preferivelmente na faixa de 0,6 a 0,75 g/mL.
[00148] A densidade aparente de um pó pode ser medida de acordo com o Exemplo 1.17.
[00149] O teor de proteína total e o teor de energia no pó para bebida instantânea da invenção dependem do uso pretendido do pó para bebida instantânea. O teor de energia de um pó para bebida instantânea está na faixa
34 / 145 de 200 a 500 kcal/100 g de pó.
[00150] Para pó para bebidas instantâneas, a contribuição da energia da proteína pode ser de pelo menos 7 E%, preferivelmente pelo menos 25 E%, mais preferivelmente pelo menos 30 E%, ainda mais preferivelmente pelo menos 40 E%.
[00151] Em uma modalidade preferida da invenção, a contribuição da energia da proteína está na faixa de 10 a 30 E%, preferivelmente na faixa de 10 a 15 E% ou ainda mais preferivelmente 11 E%. Alternativamente, a contribuição da energia da proteína está na faixa de 15 a 25 E%, preferivelmente na faixa de 18 a 22 E%.
[00152] Em uma modalidade preferida da invenção, a contribuição da energia da proteína está na faixa de 7 a 25 E%, preferivelmente na faixa de 10 a 25 E%, mais preferivelmente 15 a 20 E% ou ainda mais preferivelmente no momento a bebida em pó contém 15 E% de proteína ou 20 E% de proteína, ou a contribuição da energia da proteína está na faixa de 8 a 15 E%.
[00153] Em outra modalidade preferida da invenção, a contribuição da energia da proteína é de pelo menos 50 E%, preferivelmente pelo menos 60 E% ou pelo menos 70 E% ou ainda mais preferida de pelo menos 80 E%. Em uma modalidade preferida da invenção, a contribuição da energia da proteína está na faixa de 80 a 100 E%, preferivelmente na faixa de 90 a 100 E% ou ainda mais preferivelmente na faixa de 95 a 100 E%.
[00154] Em uma modalidade preferida da invenção, a contribuição da energia da proteína está na faixa de 30 a 80 E%, preferivelmente na faixa de 60 a 80 E%. Em outra modalidade da invenção, a contribuição da energia da proteína está na faixa de 30 a 40 E% ou ainda mais preferivelmente o pó para bebida instantânea contém 33 E% da proteína.
[00155] O pó para bebida instantânea pode ser usada como um suplemento nutricional, por exemplo, para tratar pacientes com ou em risco de desnutrição, para pacientes que sofrem de doença renal, para ganho de peso
35 / 145 ou pode ser usada como um suplemento nutricional, por exemplo, por esportistas ou atletas, antes, durante ou após o exercício.
[00156] O pó para bebida instantânea da presente invenção pode compreender outros macronutrientes além da proteína. O pó para bebida instantânea pode compreender carboidratos e/ou lipídios além da proteína. O teor total de lipídios no pó para bebida instantânea da invenção depende do uso pretendido do pó para bebida instantânea. Em uma modalidade da invenção, a contribuição da energia do lipídio está na faixa de 0 a 60 E%
[00157] Em uma modalidade preferida da invenção, a contribuição da energia do lipídio está na faixa de 0 a 5 E%, preferivelmente na faixa de 0 a 3 E% ou mais preferivelmente na faixa de 0 a 2 E% do lipídio.
[00158] Ainda menos lipídio pode ser preferido, portanto, em uma modalidade preferida da invenção, a contribuição de energia do lipídio está na faixa de 0 a 1 E%, preferivelmente na faixa de 0 a 0,1 E% ou mais preferida na faixa de 0 a 0,01 E% de lipídio.
[00159] Em uma modalidade preferida da invenção, a contribuição da energia do lipídio está na faixa de 30 a 60 E%, preferivelmente na faixa de 30 a 50 E% ou ainda mais preferivelmente o pó para bebida instantânea contém 35 E% de lipídio, 45 E% de lipídio ou 50 E% de lipídio. Alternativamente, a contribuição da energia do lipídio está na faixa de 25 a 45 E%.
[00160] Em uma modalidade preferida da invenção, a contribuição da energia do lipídio está na faixa de 15 a 20 E%, preferivelmente na faixa de 16 a 18 E% ou ainda mais preferivelmente o pó para bebida instantânea contém 16 E% de lipídio.
[00161] O pó para bebida instantânea pode ser usada como um suplemento nutricional, por exemplo, para tratar pacientes com ou em risco de desnutrição, para pacientes que sofrem de doença renal, para ganho de peso ou pode ser usada como um suplemento nutricional, por exemplo, por esportistas ou atletas, antes, durante ou após o exercício.
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[00162] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea pode compreender um carboidrato além da proteína. A contribuição energética do carboidrato para a energia total do pó para bebida instantânea pode estar na faixa de 0 a 90 E%.
[00163] O carboidrato pode ser selecionado a partir de açúcares, oligossacarídeos ou polissacarídeos. Exemplos de açúcares são mono-, dissacarídeos e polióis. Exemplos de oligossacarídeos são malto- oligossacarídeos, como maltodextrinas ou outros oligossacarídeos, como rafinose, estaquiose ou fruto-oligossacarídeos. Exemplos de polissacarídeos são amidos, como amilose, amilopectinas ou amidos modificados e polissacarídeos não amiláceos, como fibras mortas, celulose, pectinas e hidrocolóides. Em uma modalidade preferida da invenção, o carboidrato é selecionado a partir de maltodextrina, sacarose ou xarope de glicose.
[00164] O teor total de carboidratos no pó para bebida instantânea da invenção depende do uso pretendido do pó para bebida instantânea. Para pó para bebidas instantâneas usadas por esportistas ou atletas, carboidratos na forma de açúcares podem ser adicionados a fim de aumentar a energia imediata para o esportista ou carboidratos na forma de carboidratos lentos ou fibra alimentícia podem ser adicionados a fim de prolongar a saciedade.
[00165] Em uma modalidade preferida da invenção, a contribuição de energia do carboidrato está na faixa de 70 a 90 E%, preferivelmente na faixa de 75 a 85 E% ou mais preferivelmente o pó para bebida instantânea contém 89 E% de carboidrato.
[00166] Em uma modalidade preferida da invenção, a contribuição da energia do carboidrato está na faixa de 30 a 50 E%, preferivelmente na faixa de 35 a 45 E% ou ainda mais preferivelmente o pó para bebida instantânea contém 35 E% de carboidratos, 45 E% de carboidratos ou 50 E% de carboidratos. Alternativamente, a contribuição da energia do carboidrato está na faixa de 40 a 60 E%, como na faixa de 45 a 55 E%.
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[00167] Em outra modalidade preferida da invenção, a contribuição da energia do carboidrato está na faixa de 0 a 20 E%. Em uma modalidade preferida da invenção, a contribuição da energia do carboidrato está na faixa de 0 a 10 E%, preferivelmente na faixa de 0 a 5 E%.
[00168] Ainda Em uma modalidade preferida da invenção, a contribuição da energia do carboidrato está na faixa de 0 a 4 E%, mais preferivelmente 0 a 1 E%, e ainda mais preferivelmente 0 a 0,2 E%.
[00169] Em outra modalidade preferida da invenção, a contribuição da energia do carboidrato está na faixa de 3 a 20 E%. Em uma modalidade preferencial da invenção, a contribuição da energia do carboidrato está na faixa de 4 a 15 E%. Em outra modalidade da invenção, a contribuição da energia do carboidrato está na faixa de 45 a 55 E%.
[00170] O pó para bebida instantânea pode ser usada como um suplemento nutricional, por exemplo, para tratar pacientes com ou em risco de desnutrição, para pacientes que sofrem de doença renal, para ganho de peso ou pode ser usado como um suplemento nutricional, por exemplo, por esportistas ou atletas, antes, durante ou após o exercício.
[00171] O pó para bebida instantânea da presente invenção compreende proteínas e pode, em adição à proteína, compreender lipídios e/ou carboidratos, dependendo do uso pretendido do pó para bebida instantânea.
[00172] Em uma modalidade preferida da invenção, o pó instantâneo compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos. O pó para bebida instantânea pode ser usada como um suplemento nutricional, por exemplo, para o tratamento de pacientes com ou em risco de desnutrição, para pacientes que sofrem de doença renal, para ganho de peso ou pode ser usado como um suplemento nutricional, por exemplo, por esportistas ou atletas.
[00173] O teor de energia de um pó para bebida instantânea pode estar na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó. Em uma modalidade preferida da
38 / 145 invenção, o teor de energia do pó para bebida instantânea está na faixa de 300 a 400 kcal/100 g de pó, ainda mais preferido o teor de energia do pó para bebida instantânea está na faixa de 320 a 380 kcal/100 g de pó, ou o mais preferido na faixa de 350 a 370 kcal/100 g de pó.
[00174] Em uma modalidade preferida da invenção, o suplemento de bebida instantânea tem uma distribuição de energia como se segue; 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidratos e 0 a 5 E% de lipídio. Em uma modalidade mais preferida da invenção, o suplemento de bebida instantânea tem uma distribuição de energia de 10 a 15 E% de proteína, 75 a 85 E% de carboidratos e 0 a 1 E% de lipídio. Em uma modalidade preferida da invenção, o suplemento de bebida instantânea tem uma distribuição de energia de 11 E% de proteína, 89 E% de carboidratos e 0 E% de lipídio.
[00175] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea compreende proteínas, carboidratos e lipídios e, opcionalmente, compreende vitaminas, minerais e oligoelementos. O pó para bebida instantânea pode ser projetada de forma que a ingestão diária recomendada da bebida em pó forneça a ingestão diária recomendada de vitaminas, minerais e oligoelementos. No entanto, este não é um requisito.
[00176] Tal pó para bebida instantânea pode ser útil como suplemento nutricional onde o consumidor está interessado em um suplemento nutricional com uma proporção de macronutrientes refletindo uma dieta saudável no que diz respeito à distribuição de energia, macronutrientes e micronutrientes, por exemplo, onde o suplemento nutricional é administrado sob supervisão de um profissional da saúde.
[00177] O teor de energia de um pó para bebida instantânea está na faixa de 400 a 500 kcal/100 g de pó. Em uma modalidade preferida da invenção, o teor de energia do pó para bebida instantânea está na faixa de 410 a 490 kcal/100 g de pó, ainda mais preferivelmente o teor de energia do pó para bebida instantânea está na faixa de 420 a 480 kcal/100 g de pó ou o mais
39 / 145 preferido na faixa de 440 a 460 kcal/100 g de pó.
[00178] Em uma modalidade preferida da invenção, o suplemento de bebida instantânea tem uma distribuição de energia como se segue; 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidratos e 30 a 55 E% de lipídio. Em uma modalidade mais preferida da invenção, o suplemento de bebida instantânea tem uma distribuição de energia de 10 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidratos e 30 a 55 E% de lipídio, ou ainda mais preferivelmente 15 a 20 E% de proteína, 35 a 45 E% de carboidratos e 35 a 50 E% de lipídio. Em uma modalidade ainda mais preferida da invenção, o suplemento de bebida instantânea tem uma distribuição de energia de 15 E% de proteína, 35 E% de carboidratos e 50 E% de lipídio, tem uma distribuição de energia de 20 E% de proteína, 45 E% de carboidratos e 35 E% de lipídio ou tem uma distribuição de energia de 8 a 15 E% de proteínas, 40 a 47 E% de carboidratos e 45 E% de lipídio.
[00179] Em uma modalidade preferida da invenção, o pó instantâneo compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00180] O pó para bebida instantânea pode ser usada como um suplemento nutricional, por exemplo, para tratar pacientes com ou em risco de desnutrição, para pacientes que sofrem de doença renal, para ganho de peso ou pode ser usado como um suplemento nutricional, por exemplo, por esportistas ou atletas, antes, durante ou após o exercício.
[00181] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea compreende proteína, carboidrato e lipídio. Tal pó para bebida instantânea pode ser útil como suplemento nutricional onde a ingestão de proteína é a mais alta prioridade do consumidor, por exemplo, onde o consumidor gostaria de complementar as refeições regulares. O teor de energia de um pó para bebida instantânea está na faixa de 200 a 500 kcal/100 g de pó. Em uma modalidade preferida da invenção, o teor de energia do pó para bebida instantânea está na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó, ou ainda mais
40 / 145 preferivelmente o teor de energia do pó para bebida instantânea está na faixa de 200 a 300 kcal/100 g de pó.
[00182] Em uma modalidade preferida da invenção, o suplemento de bebida instantânea tem uma distribuição de energia como se segue 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidratos e 0 a 5 E% de lipídio. Em uma modalidade mais preferida da invenção, o suplemento de bebida instantânea tem uma distribuição de energia de 90 a 98 E% de proteína, 0 a 10 E% de carboidratos e 0 a 3 E% de lipídio. Em uma modalidade ainda mais preferida da invenção, o suplemento de bebida instantânea tem uma distribuição de energia de 95 a 98 E% de proteína, 0 a 5 E% de carboidratos e 0 a 2 E% de lipídio.
[00183] Em uma modalidade da invenção, o pó instantâneo compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos. Em uma modalidade preferida da invenção, o pó instantâneo compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos. O pó para bebida instantânea pode ser usada como um suplemento nutricional, por exemplo, para tratamento de pacientes com ou em risco de desnutrição, para pacientes que sofrem de doença renal, para ganho de peso ou pode ser usada como um suplemento nutricional, por exemplo, por esportistas ou atletas.
[00184] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea compreende proteína, carboidrato e lipídio. O teor de energia de um pó para bebida instantânea está na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó. Em uma modalidade preferida da invenção, o teor de energia do pó para bebida instantânea está na faixa de 300 a 420 kcal/100 g de pó ou, mais preferivelmente, o teor de energia do pó para bebida instantânea está na faixa de 320 a 380 kcal/100 g de pó, ou ainda mais preferido, o teor de energia do pó para bebida instantânea está na faixa de 350 a 370 kcal/100 g de pó.
[00185] Em uma modalidade preferida da invenção, o suplemento de bebida instantânea tem uma distribuição de energia como se segue; 30 a 80
41 / 145 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidratos e 15 a 20 E% de lipídio. Em uma modalidade mais preferida da invenção, o suplemento de bebida instantânea tem uma distribuição de energia de 60 a 80 E% de proteína, 4 a 15 E% de carboidratos e 16 a 18 E% de lipídio. Em uma modalidade ainda mais preferida da invenção, o suplemento de bebida instantânea tem uma distribuição de energia de 30 a 40 E% de proteína, 45 a 55 E% de carboidratos e 12 a 18 E% de lipídio, tal como, por exemplo, 33 E% de proteína, 46 E% de carboidratos e 15 E% de lipídio.
[00186] Alternativamente, o teor de energia de um pó para bebida instantânea pode estar na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó com uma distribuição de energia como segue; 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidratos e 25 a 45 E% de lipídio, ou preferivelmente 15 a 25 E% de proteína, 45 a 55 E% de carboidratos e 30 a 40 E% de lipídio.
[00187] Em uma modalidade da invenção, o pó instantâneo compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00188] Em uma modalidade preferida da invenção, o pó instantâneo compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos. O pó para bebida instantânea pode ser usada como um suplemento nutricional, por exemplo, para o tratamento de pacientes com ou em risco de desnutrição, para pacientes que sofrem de doença renal, para ganho de peso ou pode ser usado como um suplemento nutricional, por exemplo, por esportistas ou atletas.
[00189] Em uma modalidade preferida da invenção, o pó para bebida instantânea pode ainda compreender um agente flavorizante, agente corante, adoçantes, antioxidantes, ácido alimentício, lipídios, carboidratos, prebióticos, probióticos ou proteína que não seja de soro de queijo.
[00190] Por razões de conveniência, o pó para bebida instantânea pode ser vendida em um kit que compreende o pó instantâneo da invenção, uma ferramenta para medir o referido pó e um recipiente com uma tampa para abrir e fechar o recipiente, em que o referido recipiente é para misturar o
42 / 145 referido pó com um líquido para formar um produto alimentício, e o referido recipiente é adaptado para beber o produto alimentício diretamente do recipiente. Exemplos de recipientes úteis são, por exemplo, garrafas, caixas, recipientes do tipo tijolo, bolsas e/ou sacos.
[00191] O consumidor que compra o kit obterá todos os itens para preparar prontamente um produto alimentício líquido de acordo com a invenção. A ferramenta de medição garante que o consumidor pondere a quantidade correta de pó instantâneo para a quantidade de água no recipiente.
[00192] Em uma modalidade da invenção, a ferramenta para medir o pó instantâneo é uma colher e o recipiente é uma garrafa de bebida. Em uma modalidade da invenção, o recipiente tem uma indicação interna de o quanto de líquido se deve encher o recipiente. Em uma modalidade da invenção, a tampa tem uma abertura adaptada para beber o produto alimentício líquido diretamente do recipiente e para fechar enquanto se mistura o produto alimentício líquido.
[00193] O pH do pó para bebida instantânea é importante porque o sabor do produto preparado a partir do pó para bebida instantânea depende do pH do produto. O pH do pó pode ser determinado medindo o pH em uma solução de 10% p/p do pó para bebida instantânea em água desmineralizada a 25 °C, como descrito no Exemplo 1.16. Em uma modalidade da invenção, o pH do pó para bebida instantânea. Em uma solução a 10% p/p em água desmineralizada está na faixa de 2 a 8 a 25 °C.
[00194] Em uma modalidade da invenção, o pH está na faixa de 2,0 a 4,9, tal como na faixa de 2,5 a 4,7, mais preferivelmente 2,8 a 4,3, ainda mais preferivelmente 3,2 a 4,0, e mais preferivelmente 3,4 a 3,9. Alternativamente, mas também preferido, o pó para bebida instantânea pode ter um pH na faixa de 3,6 a 4,3.
[00195] Alternativamente, o pH do pó para bebida instantânea em uma solução de 10% p/p em água desmineralizada é um pH na faixa de 5,0 a 6,0 a
43 / 145 25 °C, preferivelmente, o pó tem um pH na faixa de 5,1 a 5,9, mais preferivelmente 5,2 a 5,8, ainda mais preferivelmente 5,3 a 5,7, e mais preferivelmente 5,4 a 5,6.
[00196] Alternativamente, o pH do pó para bebida instantânea está na faixa de 6,1 a 8,5, mais preferivelmente 6,2 a 8,0, ainda mais preferivelmente 6,3 a 7,7, e mais preferivelmente 6,5 a 7,5.
[00197] Ainda um aspecto da invenção se refere ao uso da bebida instantânea conforme aqui definida como ingrediente alimentício.
[00198] Um aspecto da invenção se refere a um pó para bebida instantânea embalada compreendendo um recipiente contendo o pó para bebida instantânea conforme descrito neste documento.
[00199] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea é hermeticamente selada no recipiente, opcionalmente embalada com um gás inerte.
[00200] Uma ampla variedade de recipientes diferentes pode ser usada para armazenar o produto de pó para bebida instantânea. Por exemplo, o recipiente pode ser um recipiente selecionado do grupo que consiste em uma garrafa, uma lata, um saco, uma bolsa e um sachê.
[00201] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 500 kcal/100 g de pó e o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total.
[00202] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 500kcal/100 g de pó e o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente em pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2 a 8.
[00203] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea
44 / 145 tem um teor de energia na faixa de 200 a 500kcal/100 g de pó e o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente em pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9.
[00204] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 500kcal/100 g de pó e o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente em pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0.
[00205] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 500 kcal/100 g de pó e o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, e o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5.
[00206] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 500 kcal/100 g de pó e o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, e o pH do pó está na faixa de 2 a 8 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00207] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 500 kcal/100 g de pó e o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, e o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00208] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 500 kcal/100 g de pó e o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à
45 / 145 proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00209] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 500 kcal/100 g de pó e o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5 e a bebida em pó compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00210] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 500 kcal/100 g de pó e o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 2 a 8, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00211] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 500 kcal/100 g de pó e o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00212] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 500 kcal/100 g de pó e o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à
46 / 145 proteína total, o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00213] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 500 kcal/100 g de pó e o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00214] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 400 a 500 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidrato e 30 a 55 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total.
[00215] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 400 a 500kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidrato e 30 a 55 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2 a 8.
[00216] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 400 a 500kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidrato e 30 a 55 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende
47 / 145 pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9.
[00217] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 400 a 500kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidrato e 30 a 55 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 5.0 a 6.0.
[00218] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 400 a 500 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidrato e 30 a 55 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, e o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5.
[00219] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 400 a 500 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidrato e 30 a 55 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, e o pH do pó está na faixa de 2 a 8 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00220] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 400 a 500 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidrato e 30 a 55 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende
48 / 145 pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, e o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00221] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 400 a 500 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidrato e 30 a 55 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00222] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 400 a 500 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidrato e 30 a 55 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00223] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 400 a 500 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidrato e 30 a 55 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 2 a 8, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
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[00224] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 400 a 500 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidrato e 30 a 55 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00225] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 400 a 500 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidrato e 30 a 55 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00226] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 400 a 500 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 7 a 25 E% de proteína, 30 a 50 E% de carboidrato e 30 a 55 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00227] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó e a distribuição
50 / 145 de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total.
[00228] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2 a 8.
[00229] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9.
[00230] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0.
[00231] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo
51 / 145 menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5.
[00232] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2 a 8 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00233] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00234] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00235] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó e a distribuição
52 / 145 de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00236] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 2 a 8, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00237] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00238] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo
53 / 145 menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00239] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 400 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 70 a 90 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00240] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total.
[00241] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2 a 8.
[00242] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidrato
54 / 145 e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 95% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9.
[00243] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0.
[00244] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5.
[00245] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2 a 8 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00246] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidrato
55 / 145 e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00247] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00248] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00249] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 2 a 8, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó
56 / 145 para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00250] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00251] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00252] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 350 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 80 a 98 E% de proteína, 0 a 20 E% de carboidrato e 0 a 5 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00253] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea
57 / 145 tem um teor de energia na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 30 a 80 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidrato e 15 a 20 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total.
[00254] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 30 a 80 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidrato e 15 a 20 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2 a 8.
[00255] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 30 a 80 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidrato e 15 a 20 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9.
[00256] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 30 a 80 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidrato e 15 a 20 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0.
[00257] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 30 a 80 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidrato
58 / 145 e 15 a 20 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5.
[00258] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 30 a 80 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidrato e 15 a 20 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2 a 8 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00259] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 30 a 80 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidrato e 15 a 20 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00260] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 30 a 80 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidrato e 15 a 20 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00261] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea
59 / 145 tem um teor de energia na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 30 a 80 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidrato e 15 a 20 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00262] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 30 a 80 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidrato e 15 a 20 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 2 a 8, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00263] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 30 a 80 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidrato e 15 a 20 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00264] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 30 a 80 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidrato e 15 a 20 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende
60 / 145 pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00265] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 200 a 420 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 30 a 80 E% de proteína, 3 a 20 E% de carboidrato e 15 a 20 E% de lipídio, em que o pó para bebida instantânea compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00266] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidrato e 25 a 45 E% de lipídio, em que a bebida em pó contém pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total.
[00267] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidrato e 25 a 45 E% de lipídio, em que a bebida em pó compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2 a 8.
[00268] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidrato
61 / 145 e 25 a 45 E% de lipídio, em que a bebida em pó compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9.
[00269] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidrato e 25 a 45 E% de lipídio, em que a bebida em pó compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0.
[00270] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidrato e 25 a 45 E% de lipídio, em que a bebida em pó compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5.
[00271] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidrato e 25 a 45 E% de lipídio, em que a bebida em pó compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2 a 8 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00272] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidrato e 25 a 45 E% de lipídio, em que a bebida em pó compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9 e o
62 / 145 pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00273] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidrato e 25 a 45 E% de lipídio, em que a bebida em pó compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00274] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidrato e 25 a 45 E% de lipídio, em que a bebida em pó compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total e o pH do o pó está na faixa de 6,1 a 8,5 e o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos.
[00275] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidrato e 25 a 45 E% de lipídio, em que a bebida em pó compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 2 a 8, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligo- elementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00276] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó e a distribuição
63 / 145 de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidrato e 25 a 45 E% de lipídio, em que a bebida em pó compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 2,0 a 4,9, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó instantâneo de bebida é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00277] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidrato e 25 a 45 E% de lipídio, em que a bebida em pó compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 5,0 a 6,0, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó para bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00278] Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea tem um teor de energia na faixa de 150 a 250 kcal/100 g de pó e a distribuição de energia está na faixa de 10 a 30 E% de proteína, 40 a 60 E% de carboidrato e 25 a 45 E% de lipídio, em que a bebida em pó compreende pelo menos 85% p/p de BLG em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p de BLG em relação à proteína total, o pH do pó está na faixa de 6,1 a 8,5, o pó para bebida instantânea compreende ainda vitaminas, minerais e oligoelementos e em que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do pó instantâneo de bebida é no máximo 10 mmol/g de proteína.
[00279] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o produto alimentício é um produto alimentício seco, por exemplo, uma barra ou um pó para bebida instantânea, compreendendo carboidratos e proteínas, o referido produto alimentício seco compreendendo pelo menos 1% p/p de BLG,
64 / 145 preferivelmente pelo menos 5%, em que: i) a cristalinidade de BLG é de pelo menos 20%, preferivelmente pelo menos 40%, e/ou ii) pelo menos 90% p/p da quantidade total de proteína é composta por BLG.
[00280] Em algumas modalidades particularmente preferidas da invenção, o produto alimentício é um produto alimentício com baixo teor de fósforo compreendendo no máximo 40 mg de fósforo por 100 g de proteína.
[00281] Exemplos não limitativos do produto alimentício são, por exemplo, um produto lácteo, um doce, uma bebida, uma bebida instantânea, uma barra de proteína, uma composição nutricional enteral, um produto de panificação.
[00282] Em outras modalidades preferidas da invenção, o produto alimentício é um pó para bebida instantânea compreendendo, ou mesmo consistindo essencialmente em: - uma composição de BLG comestível conforme definido neste documento na forma de um pó para prover uma quantidade total de BLG de pelo menos 1% p/p, preferivelmente pelo menos 5% p/p, a referida composição de BLG comestível tendo uma cristalinidade de BLG de pelo menos 20%, - um adoçante na forma de um pó, por exemplo, um adoçante de açúcar e/ou um adoçante sem açúcar, - opcionalmente, um agente flavorizante, - pelo menos um ácido alimentício na forma de um pó, por exemplo, ácido cítrico ou outros ácidos alimentícios adequados, e - no máximo 80 mg de fósforo/100 g de proteína, e em que uma solução a 10% do pó para bebida instantânea em água desmineralizada tem um pH na faixa de 2,5 a 4,0.
[00283] Em algumas modalidades preferidas da invenção, a composição de BLG comestível compreende:
65 / 145 - No máximo 6% p/p de água, - Pelo menos 80% de proteína total em relação aos sólidos totais, - Pelo menos 95% de BLG em relação à proteína total, e a referida composição de BLG comestível: - É um pó seco, e - Tem uma densidade aparente de pelo menos 0,50 g/mL e, preferivelmente, pelo menos 0,60 g/mL.
[00284] Em outras modalidades preferidas da invenção, a composição de BLG comestível compreende: - No máximo 6% p/p de água, - Pelo menos 80% de proteína total em relação aos sólidos totais, - Pelo menos 95% de BLG em relação à proteína total, e a referida composição de BLG comestível: - É um pó seco, - Tem uma densidade aparente de pelo menos 0,50 g/mL e preferivelmente pelo menos 0,60 g/mL, e - Tem uma cristalinidade de BLG de pelo menos 20% e preferivelmente pelo menos 40%.
[00285] Em outras modalidades preferidas da invenção, a composição de BLG comestível compreende: - No máximo 6% de p/p água, - Pelo menos 80% de proteína total em relação aos sólidos totais, - Pelo menos 95% de BLG em relação à proteína total, - No máximo 80 mg de fósforo por 100 g de proteína. A referida composição de BLG comestível: - É um pó seco.
66 / 145
[00286] Em modalidades ainda preferidas da invenção, a composição de BLG comestível compreende: - No máximo 6% de p/p água, - Pelo menos 90% de proteína total em relação aos sólidos totais, - Pelo menos 97% de BLG em relação à proteína total, - No máximo 50 mg de fósforo por 100 g de proteína. A referida composição de BLG comestível: - É um pó seco.
[00287] Em outras modalidades preferidas da invenção, a composição de BLG comestível compreende: - No máximo 6% p/p de água, - Pelo menos 80% de proteína total em relação aos sólidos totais, e preferivelmente pelo menos 90% de proteína total em relação aos sólidos totais, - 30% a 70% de BLG em relação à proteína total, - 8% a 25% p/p de ALA em relação à proteína total, a referida composição de BLG comestível: - É um pó seco, e - Tem uma cristalinidade de BLG de pelo menos 20% e preferivelmente pelo menos 40%.
[00288] Em um aspecto da invenção, um produto alimentício líquido é preparado a partir do pó para bebida instantânea. Pelo uso do pó para bebida instantânea de acordo com a invenção, é possível obter um produto alimentício líquido dentro de um período de tempo muito curto.
[00289] Desta forma, em um aspecto da invenção se refere a um método para preparar um produto alimentício líquido de acordo com a invenção, o referido método compreendendo:
67 / 145 i. Adicionar um pó para bebida instantânea de acordo com a invenção, ii. Opcionalmente, adicionar pelo menos um outro ingrediente, e iii. Misturar o pó e o líquido obtido para formar uma mistura uniforme.
[00290] Em uma modalidade, o líquido é selecionado a partir do grupo que consiste em água, produtos lácteos, suco de fruta, suco de vegetal, bebidas e suas combinações. Em uma modalidade, o ingrediente adicional é selecionado a partir de frutas ou vegetais.
[00291] Ao misturar o pó e o líquido, a mistura pode ser realizada agitando. Após agitar o produto alimentício líquido, o pó para bebida instantânea pode ser deixada em repouso por ½ a 2 minutos para se dissolver completamente. Uma vantagem do pó para bebida instantânea é que o pó para bebida instantânea se dissolve facilmente, forma uma solução uniforme e permanece uma solução uniforme, isto é, substancialmente não ocorre segregação.
[00292] Um problema geralmente associado às pó para bebidas instantâneas é que, ao preparar um produto alimentício líquido a partir do pó, é desenvolvida espuma. O pó para bebida instantânea da invenção tem tendência a não formar espuma quando se prepara um produto alimentício líquido a partir do pó.
[00293] Um produto alimentício líquido compreendendo um líquido e o pó de acordo com a invenção pode ser preparado misturando o pó para bebida instantânea da invenção com o líquido. Em uma modalidade da invenção, o pó para bebida instantânea pode compreender no máximo 40 g do referido pó por 100 g do referido líquido, tal como no máximo 30 g do referido pó por 100 g do referido líquido. Em uma modalidade preferida da invenção, o produto alimentício líquido compreende 1 a 30 g do referido pó
68 / 145 por 100 g do referido líquido, mais preferivelmente 1 a 20 g do referido pó, ainda mais preferivelmente 1 a 10 g do referido pó, ou preferivelmente 1 a 5 g do referido pó ou ainda mais preferivelmente 2,5 a 5 g do referido pó.
[00294] Em uma modalidade da invenção, o produto alimentício líquido compreende 5 a 25 g do referido pó por 100 g do líquido, preferivelmente 5 a 25 g do referido pó por 100 g do líquido, mais preferivelmente 10 a 15 g do referido pó, ainda mais preferivelmente 11 a 14 g do referido pó ou mais preferivelmente 11 a 12 g do referido pó.
[00295] Em uma modalidade da invenção, o produto alimentício tem teor de energia na faixa de 30 a 300 kcal/100 g de produto alimentício, preferivelmente na faixa de 30 a 100 kcal/100 g de produto alimentício, mais preferivelmente na faixa de 40 a 90 kcal/100 g de produto alimentício, ou ainda mais preferivelmente na faixa de 40 a 70 kcal/100 g de produto alimentício.
[00296] Alternativamente, o produto alimentício tem teor de energia na faixa de 100 a 300 kcal/100 g de produto alimentício, preferivelmente na faixa de 100 a 250 kcal/100 g de produto alimentício, ou mais preferivelmente na faixa de 125 a 225 kcal/100 g de produto alimentício.
[00297] O produto alimentício líquido pode compreender um líquido selecionado do grupo que consiste em água, produtos lácteos, suco de fruta, suco de vegetal, bebidas e suas combinações.
[00298] O aparecimento de produtos alimentícios líquidos, por exemplo, uma bebida preparada a partir do pó para bebida instantânea, é de grande importância para o consumidor. A transparência é um parâmetro que o consumidor usa para avaliar o produto. Uma forma de determinar a transparência do produto alimentício líquido é medindo a turvação do produto conforme descrito no Exemplo 1.7.
[00299] Em algumas modalidades da bebida preparada a partir do pó para bebida instantânea, é benéfico que a bebida seja transparente. Isso pode
69 / 145 ser vantajoso, por exemplo, quando a bebida é usada como bebida esportiva ou em “água proteica”, caso em que é benéfico que a bebida se assemelhe à água na aparência.
[00300] Em uma modalidade preferida da presente invenção, a bebida preparada a partir do pó para bebida instantânea tem uma turvação de no máximo 200 NTU e tal bebida é transparente e/ou translúcida.
[00301] Em alguma modalidade preferida da presente invenção, a bebida preparada a partir do pó para bebida instantânea tem uma turbidez de no máximo 150 NTU, ou preferivelmente uma turbidez de no máximo 100 NTU, ou preferivelmente uma turbidez de no máximo 80 NTU, ou preferivelmente uma turbidez de no máximo 60 NTU ou mais preferivelmente uma turbidez de no máximo 40 NTU, ou preferivelmente uma turbidez de no máximo 30 NTU, preferivelmente uma turbidez de no máximo 20 NTU, mais preferivelmente uma turbidez de no máximo 10 NTU, e mais preferivelmente uma turbidez de no máximo 5 NTU, ainda mais preferivelmente, tem uma turbidez de no máximo 2 NTU.
[00302] Em uma modalidade preferida da presente invenção, a bebida preparada a partir do pó para bebida instantânea tem uma turvação de mais de 200 NTU, tal bebida é opaca.
[00303] Em algumas modalidades da bebida preparada a partir do pó para bebida instantânea, é benéfico que a bebida seja opaca. O que é vantajoso, por exemplo, quando a bebida deve ser semelhante ao leite e ter uma aparência leitosa. A aparência de suplementos nutricionais nutricionalmente completos é geralmente opaca.
[00304] Em algumas modalidades preferidas da invenção, a bebida preparada a partir do pó para bebida instantânea tem uma turbidez de mais de 250 NTU. Preferivelmente, a bebida tem uma turbidez de mais de 300 NTU, mais preferivelmente, ela tem uma turbidez de mais de 500 NTU, mais preferivelmente ela tem uma turbidez de mais de 1000 NTU, preferivelmente
70 / 145 uma turbidez de mais de 1500 NTU, ainda mais preferivelmente tem uma turbidez de mais de 2.000 NTU.
[00305] A cor do produto é de grande importância para o consumidor. Produtos de pó para bebidas instantâneas contendo proteínas do soro de queijo têm uma cor ligeiramente amarela. No entanto, ao usar pó para bebida instantânea compreendendo BLG com uma cristalinidade de pelo menos 20% ou pó para bebida instantânea, onde pelo menos 90% da proteína é composta por BLG, a cor do produto é substancialmente menos amarela e o produto parece mais branco. Desta forma, a adição de cor à pó para bebida instantânea para mascarar a cor amarela não é necessária.
[00306] Uma forma de medir a cor de um produto é usando o espaço de cores CIELAB, que expressa a cor como três valores numéricos; L* para claridade e a* e b* para os componentes de cor verde/vermelho e azul/amarelo. O Exemplo 1.9 descreve como medir os valores L*, a* e b* para o produto alimentício líquido.
[00307] Em uma modalidade da invenção, a fração de proteína do produto alimentício líquido tem um valor de cor delta b* na faixa de -0,10 a +0,51 na escala de cores CIELAB, em que delta b* = b amostra padronizada para 6,0% p/p de proteína* - bágua desmineralizada*, medida em temperatura ambiente.
[00308] Outro aspecto da invenção se refere a um método para preparar um pó para bebida instantânea compreendendo BLG e pelo menos um ingrediente opcional, o referido método compreendendo a mistura de um isolado de BLG seco, com pelo menos um ingrediente adicional selecionado a partir do grupo que consiste em vitaminas, agente flavorizante, agente corante, minerais, adoçantes, antioxidantes, ácido alimentício, lipídios, carboidratos, prebióticos, probióticos, agentes antiespuma e proteína que não seja de soro de queijo para obter um pó para bebida instantânea.
[00309] Em uma modalidade da invenção, a BLG da fonte de BLG é revestida com um ácido orgânico. Se a fonte de BLG, por exemplo, é um pó,
71 / 145 isso significa que o pó é revestido com o ácido orgânico.
[00310] Ao preparar pó para bebidas instantâneas compreendendo proteína, a lecitina é comumente usada para melhorar a solubilidade da proteína. No entanto, a lecitina é uma fonte de fósforo. É, portanto, desejável encontrar outra forma de melhorar a solubilidade de pó para bebidas instantâneas que compreendem proteína.
[00311] Os inventores descobriram que ao revestir os cristais de BLG ou partículas de pó da fonte de BLG com um ou mais ácidos orgânicos, a solubilidade do pó para bebida instantânea melhora. O ácido orgânico ou sal de ácido orgânico pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em piruvato, aconitato, citrato, isocitrato, cetoglutarato, succinil-CoA, succinato, fumarato, malato, oxaloacetato, tartarato, acetato, ácido tânico, ácido benzoico, ácido maleico e lactato. Em uma modalidade preferida da invenção, os cristais de BLG são revestidos com ácido orgânico ou sal de ácido orgânico selecionado do grupo que consiste em piruvato, citrato, isocitrato, cetoglutarato, succinato, fumarato, malato, oxaloacetato, tartarato, acetato, maleico ácido e lactato e seus sais.
[00312] Em uma modalidade preferida da invenção, os cristais de BLG da fonte de BLG são revestidos com citrato, por exemplo, um citrato selecionado do grupo que consiste em citrato trissódico, citrato de potássio e citrato de cálcio.
[00313] Em uma modalidade preferida da invenção, a BLG da fonte de BLG é revestida com ácido orgânico por uso de secagem por pulverização ou leito fluidizado. É particularmente preferido que os cristais de BLG secos sejam revestidos com o ácido orgânico ou seus sais usando, por exemplo, secagem por pulverização ou leito fluidizado.
[00314] A fonte de BLG pode ser obtida a partir de um alimento de proteína de soro de queijo, do qual a BLG é isolada na forma de cristais. Um método de preparação do isolado de BLG é descrito no pedido de patente
72 / 145 internacional No. PCT/EP2017/084553, que é aqui incorporado por referência. O isolado de BLG pode ser preparado conforme descrito na página 6, linhas 23 a 32 do PCT/EP2017/084553 conforme depositado, onde a composição comestível compreendendo BLG na forma cristalizada e/ou isolada corresponde ao isolado de BLG da presente invenção. Em uma modalidade preferida, o isolado de BLG é preparado pelo método descrito na página 39, linhas 15 a 34 do PCT/EP2017/084553 conforme depositado. Em outra modalidade preferida, o isolado de BLG é preparado pelo método descrito na página 41, linhas 1 a 24 de PCT/EP2017/084553 conforme depositado.
[00315] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o pó para bebida instantânea compreende, ou mesmo consiste em, um isolado de BLG em pó compreendendo cristais de BLG secos, o referido isolado de BLG em pó é revestido com um ácido orgânico e/ou um sal de um ácido orgânico. A razão do peso entre o peso do isolado de BLG e o peso total da soma de ácidos orgânicos e ácidos orgânicos desprotonados é preferivelmente 5 a 100, mais preferivelmente 8 a 60, ainda mais preferivelmente 10 a 40, e mais preferivelmente 12 a 30.
[00316] Um aspecto da invenção se refere a um método de produção de um isolado de BLG em pó revestido com ácido orgânico e/ou um sal de um ácido orgânico, o método compreende as seguintes etapas: - Prover um isolado de BLG em pó a ser revestido, preferivelmente compreendendo, ou mesmo consistindo em cristais de BLG secos, preferivelmente obtidos pelo processo de cristalização de BLG aqui descrito, e - Aplicar ácido orgânico e/ou sal de um ácido orgânico ao isolado de BLG em pó a ser revestido, preferivelmente em uma quantidade suficiente para revestir o isolado de BLG em pó, mas evitando que ele seja dissolvido,
73 / 145 - Opcionalmente, evaporar a umidade residual do isolado de BLG em pó revestido.
[00317] O isolado de BLG em pó a ser revestido, preferivelmente tem um alto teor de proteína e uma alta pureza de BLG. O isolado de BLG em pó a ser revestido tem preferivelmente uma cristalinidade de BLG de pelo menos 20%, preferivelmente pelo menos 40%, mais preferivelmente pelo menos 60% e ainda mais preferivelmente pelo menos 80%.
[00318] O ácido orgânico e/ou sal de um ácido orgânico para o isolado de BLG em pó a ser revestido em uma quantidade suficiente para prover uma razão do peso entre o peso do isolado de BLG em pó e o peso total da soma de ácidos orgânicos e ácidos orgânicos desprotonados é/são preferivelmente 5 a 100, mais preferivelmente 8 a 60, ainda mais preferivelmente 10 a 40, e mais preferivelmente 12 a 30.
[00319] O ácido orgânico e/ou sal de um ácido orgânico é preferivelmente aplicado ao isolado de BLG em pó em um sistema de leito fluidizado por pulverização de ácido orgânico e/ou sal de um ácido orgânico, preferivelmente na forma dissolvida no leito fluidizado para revestir o isolado de BLG em pó. A temperatura durante a operação está preferivelmente na faixa de 5 a 70ºC, mais preferivelmente na faixa de 50 a 65ºC, tal como preferivelmente aproximadamente 60ºC.
[00320] Após a aplicação do ácido orgânico e/ou sal de um ácido orgânico, o isolado de BLG revestido pode ser processado para evaporar umidade adicional, preferivelmente até que o teor de água seja no máximo 6% p/p e mais preferivelmente no máximo 5% p/p.
[00321] Os ácidos orgânicos são preferivelmente ácidos orgânicos comestíveis, isto é, os chamados ácidos alimentícios.
[00322] Em algumas modalidades preferidas da invenção, a fonte de BLG usada para preparar o pó para bebida instantânea tem um teor de sólidos de pelo menos 20% p/p. Preferivelmente, a fonte de BLG tem um teor de
74 / 145 sólidos de pelo menos 30% p/p, mais preferivelmente, a fonte de BLG tem um teor de sólidos de pelo menos 40% p/p, ainda mais preferivelmente, a fonte de BLG tem um teor de sólidos de pelo menos 50% p/p, como por exemplo pelo menos 60% p/p.
[00323] Em outras modalidades preferidas da invenção, a fonte de BLG usada para preparar o pó para bebida instantânea tem um teor de sólidos na faixa de 20% a 80% p/p. Preferivelmente, a fonte de BLG tem um teor de sólidos na faixa de 30% a 70% p/p. Mais preferivelmente, a fonte de BLG tem um teor de sólidos na faixa de 40% a 65% p/p. Ainda mais preferivelmente, a fonte de BLG tem um teor de sólidos na faixa de 50% a 65% p/p, tal como, por exemplo, aproximadamente 60% p/p.
[00324] A fonte de BLG é preferivelmente um isolado de BLG em pó ou um isolado de BLG líquido contendo água e os sólidos do isolado de BLG em pó em uma quantidade na faixa de 1% a 50% p/p. É particularmente preferido que a fonte de BLG seja um isolado de BLG em pó.
[00325] O pó isolado de beta-lactoglobulina (BLG), preferivelmente preparado por secagem por pulverização, tem um pH na faixa de i) 2 a 4,9, ii) 6,1 a 8,5, ou iii) 5,0 a 6,0 e compreende: - proteína total em uma quantidade de pelo menos 30% p/p, - BLG em uma quantidade de pelo menos 85% p/p em relação à proteína total, e - água em uma quantidade de no máximo 10% p/p.
[00326] O isolado de BLG em pó tem preferivelmente um ou mais dos seguintes: - uma densidade aparente de pelo menos 0,2 g/cm3, - uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330/I350) de pelo menos 1,11, - um grau de desnaturação de proteínas de no máximo 10%, - uma estabilidade ao calor em pH 3,9 de no máximo 200
75 / 145 NTU, e - no máximo 1000 unidades formadoras de colônias/g.
[00327] O isolado de BLG em pó é preferivelmente uma composição comestível. Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó é uma composição de BLG comestível como aqui definido.
[00328] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um pH na faixa de 2 a 4,9. Esses pós são particularmente úteis para produtos alimentícios ácidos e bebidas particularmente ácidas.
[00329] Em outras modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um pH na faixa de 6,1 a 8,5.
[00330] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó compreende proteína total em uma quantidade de pelo menos 40% p/p, preferivelmente pelo menos 50% p/p, pelo menos 60% p/p, mais preferivelmente pelo menos 70% p/p, ainda mais preferivelmente pelo menos 80% p/p.
[00331] Teores de proteína ainda mais elevados podem ser necessários e em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó compreende proteína total em uma quantidade de pelo menos 85% p/p, preferivelmente pelo menos 90% p/p, pelo menos 92% p/p, mais preferivelmente pelo menos 94% p/p, e ainda mais preferivelmente pelo menos 95% p/p.
[00332] A proteína total é medida de acordo com o Exemplo 1.5.
[00333] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó compreende BLG em uma quantidade de pelo menos 92% p/p em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 95% p/p, mais preferivelmente pelo menos 97% p/p, ainda mais preferivelmente pelo menos 98%, e mais preferivelmente BLG em uma quantidade de pelo menos 99,5% p/p em relação à proteína total.
[00334] Em algumas modalidades preferidas da invenção, a soma de
76 / 145 alfa-lactalbumina (ALA) e caseinomacropeptídeo (CMP) compreende pelo menos 40% p/p da proteína não BLG do pó, preferivelmente pelo menos 60% p/p, ainda mais preferivelmente pelo menos 70% p/p, e mais preferivelmente pelo menos 90% p/p da proteína não BLG do pó.
[00335] Em outras modalidades preferidas da invenção, cada proteína de soro de queijo não BLG principal é apresentada em uma porcentagem em peso em relação à proteína total que é no máximo 25% de sua porcentagem em peso em relação à proteína total em um concentrado de proteína de soro de queijo padrão do soro de queijo doce, preferivelmente no máximo 20%, mais preferivelmente no máximo 15%, ainda mais preferivelmente no máximo 10%, mais preferivelmente no máximo 6%.
[00336] Mesmo concentrações mais baixas das principais proteínas do soro de queijo não BLG podem ser desejáveis. Desta forma, em modalidades preferidas adicionais da invenção, cada proteína de soro de queijo não BLG principal está presente em uma porcentagem em peso em relação à proteína total que é no máximo 4% de sua porcentagem em peso em relação à proteína total em um concentrado de proteína de soro de queijo padrão do soro de queijo doce, preferivelmente no máximo 3%, mais preferivelmente no máximo 2%, ainda mais preferivelmente no máximo 1%.
[00337] Os inventores viram indicações de que a redução da lactoferrina e/ou lactoperoxidase é particularmente vantajosa para a obtenção de um produto de proteína de soro de queijo neutro.
[00338] Desta forma, em algumas modalidades preferidas da invenção, a lactoferrina está presente em uma porcentagem em peso em relação à proteína total que é no máximo 25% de sua porcentagem em peso em relação à proteína total em um concentrado de proteína de soro de queijo padrão do soro de queijo doce, preferivelmente no máximo 20%, mais preferivelmente no máximo 15%, ainda mais preferivelmente no máximo 10%, mais preferivelmente no máximo 6%. Mesmo concentrações mais baixas de
77 / 145 lactoferrina podem ser desejáveis. Desta forma, em modalidades preferidas adicionais da invenção, a lactoferrina está presente em uma porcentagem em peso em relação à proteína total que é no máximo 4% de sua porcentagem em peso em relação à proteína total em um concentrado de proteína de soro de queijo padrão do soro de queijo doce, preferivelmente no máximo 3%, mais preferivelmente no máximo 2%, ainda mais preferivelmente no máximo 1%.
[00339] De forma similar, em algumas modalidades preferidas da invenção, a lactoperoxidase está presente em uma porcentagem em peso em relação à proteína total que é no máximo 25% de sua porcentagem em peso em relação à proteína total em um concentrado de proteína de soro de queijo padrão do soro de queijo doce, preferivelmente no máximo 20%, mais preferivelmente no máximo 15%, ainda mais preferivelmente no máximo 10%, mais preferivelmente no máximo 6%. Mesmo concentrações mais baixas de lactoperoxidase podem ser desejáveis. Desta forma, em modalidades preferidas adicionais da invenção, a lactoperoxidase está presente em uma porcentagem em peso em relação à proteína total que é no máximo 4% de sua porcentagem em peso em relação à proteína total em um concentrado de proteína de soro de queijo padrão do soro de queijo doce, preferivelmente no máximo 3%, mais preferivelmente no máximo 2%, ainda mais preferivelmente no máximo 1%.
[00340] A lactoferrina e a lactoperoxidase são quantificadas de acordo com o Exemplo 1.29.
[00341] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um teor de água em uma quantidade de no máximo 10% p/p, preferivelmente no máximo 7% p/p, mais preferivelmente no máximo 6% p/p, ainda mais preferivelmente no máximo 4% p/p, e mais preferivelmente no máximo 2% p/p.
[00342] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó compreende carboidrato em uma quantidade de no máximo 60%
78 / 145 p/p, preferivelmente no máximo 50% p/p, mais preferivelmente no máximo 20% p/p, ainda mais preferivelmente em mais 10% p/p, ainda mais preferivelmente no máximo 1% p/p, e mais preferivelmente no máximo 0,1%. O isolado de BLG em pó pode, por exemplo, conter carboidratos, tais como, por exemplo, lactose, oligossacarídeos e/ou produtos de hidrólise da lactose (ou seja, glicose e galactose), sacarose e/ou maltodextrina.
[00343] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó compreende lipídios em uma quantidade de no máximo 10% p/p, preferivelmente no máximo 5% p/p, mais preferivelmente no máximo 2% p/p, e ainda mais preferivelmente em a maioria 0,1% p/p.
[00344] Os presentes inventores descobriram que pode ser vantajoso controlar o teor mineral para atingir algumas das propriedades desejadas do isolado de BLG em pó.
[00345] Em algumas modalidades preferidas da invenção, a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do isolado de BLG em pó é no máximo 10 mmol/g de proteína. Preferivelmente, a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do isolado de BLG em pó é no máximo 6 mmol/g de proteína, mais preferivelmente no máximo 4 mmol/g de proteína, ainda mais preferivelmente no máximo 2 mmol/g de proteína.
[00346] Em outras modalidades preferidas da invenção, a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do isolado de BLG em pó é no máximo 1 mmol/g de proteína. Preferivelmente, a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca do isolado de BLG em pó é no máximo 0,6 mmol/g de proteína, mais preferivelmente no máximo 0,4 mmol/g de proteína, ainda mais preferivelmente no máximo 0,2 mmol/g de proteína, e mais preferivelmente no máximo 0,1 mmol/g de proteína.
[00347] Em outras modalidades preferidas da invenção, a soma das quantidades de Mg e Ca do isolado de BLG em pó é no máximo 5 mmol/g de proteína. Preferivelmente, a soma das quantidades de Mg e Ca do isolado de
79 / 145 BLG em pó é no máximo 3 mmol/g de proteína, mais preferivelmente no máximo 1,0 mmol/g de proteína, ainda mais preferivelmente no máximo 0,5 mmol/g de proteína.
[00348] Em outras modalidades preferidas da invenção, a soma das quantidades de Mg e Ca do isolado de BLG em pó é no máximo 0,3 mmol/g de proteína. Preferivelmente, a soma das quantidades de Mg e Ca do isolado de BLG em pó é no máximo 0,2 mmol/g de proteína, mais preferivelmente no máximo 0,1 mmol/g de proteína, ainda mais preferivelmente no máximo 0,03 mmol/g de proteína, e mais preferivelmente no máximo 0,01 mmol/g de proteína.
[00349] Os inventores descobriram que é possível usar variantes de baixo fósforo/baixo potássio do isolado de BLG em pó que são particularmente úteis para pacientes com doenças renais. Para fazer tal produto, o isolado de BLG em pó deve ter um teor igualmente baixo de fósforo e potássio.
[00350] Desta forma, em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um teor total de fósforo de no máximo 100 mg de fósforo por 100 g de proteína. Preferivelmente, o isolado de BLG em pó tem um teor total de no máximo 80 mg de fósforo por 100 g de proteína. Mais preferivelmente, o isolado de BLG em pó tem um teor total de no máximo 50 mg de fósforo por 100 g de proteína. Ainda mais preferivelmente, o isolado de BLG em pó tem um teor total de fósforo de no máximo 20 mg de fósforo por 100 g de proteína. O isolado de BLG em pó tem um teor total de fósforo de no máximo 5 mg de fósforo por 100 g de proteína.
[00351] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó compreende no máximo 600 mg de potássio por 100 g de proteína. Mais preferivelmente, o isolado de BLG em pó contém no máximo 500 mg de potássio por 100 g de proteína. Mais preferivelmente, o isolado de BLG em pó compreende no máximo 400 mg de potássio por 100 g de
80 / 145 proteína. Mais preferivelmente, o isolado de BLG em pó compreende no máximo 300 mg de potássio por 100 g de proteína. Ainda mais preferivelmente, o isolado de BLG em pó compreende no máximo 200 mg de potássio por 100 g de proteína. Ainda mais preferivelmente, o isolado de BLG em pó compreende no máximo 100 mg de potássio por 100 g de proteína. Ainda mais preferivelmente, o isolado de BLG em pó compreende no máximo 50 mg de potássio por 100 g de proteína e ainda mais preferivelmente, o isolado de BLG em pó compreende no máximo 10 mg de potássio por 100 g de proteína.
[00352] O teor de fósforo se refere à quantidade total de fósforo elementar da composição em questão e é determinado de acordo com o Exemplo 1.19. De forma similar, o teor de potássio se refere à quantidade total de potássio elementar da composição em questão e é determinado de acordo com o Exemplo 1.19.
[00353] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó compreende no máximo 100 mg de fósforo/100 g de proteína e no máximo 700 mg de potássio/100 g de proteína, preferivelmente no máximo 80 mg de fósforo/100 g de proteína e no máximo 600 mg de potássio/100 g de proteína, mais preferivelmente no máximo 60 mg de fósforo/100 g de proteína e no máximo 500 mg de potássio/100 g de proteína, mais preferivelmente no máximo 50 mg de fósforo/100 g de proteína e no máximo 400 mg de potássio/100 g de proteína, ou mais preferivelmente no máximo 20 mg de fósforo/100 g proteína e no máximo 200 mg de potássio/100 g de proteína, ou ainda mais preferivelmente no máximo 10 mg de fósforo/100 g de proteína e no máximo 50 mg de potássio/100 g de proteína. Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó compreende no máximo 100 mg de fósforo/100 g de proteína e no máximo 340 mg de potássio/100 g de proteína.
[00354] As composições com baixo teor de fósforo e/ou baixo teor de
81 / 145 potássio de acordo com a presente invenção podem ser usadas como ingrediente alimentício para a produção de um produto alimentício para grupos de pacientes com função renal reduzida.
[00355] Os presentes inventores descobriram que para algumas aplicações, por exemplo, produtos alimentícios ácidos e, em particular, bebidas ácidas, é particularmente vantajoso ter um isolado de BLG em pó ácido com um pH de no máximo 4,9 e ainda mais preferivelmente no máximo 4,3. O que é especialmente verdadeiro para bebidas ácidas transparentes com alto teor de proteína.
[00356] No contexto da presente invenção, um líquido transparente tem uma turbidez de no máximo 200 NTU medida de acordo com o Exemplo 1.7.
[00357] Desta forma, em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um pH na faixa de 2 a 4,9. Preferivelmente, o isolado de BLG em pó tem um pH na faixa de 2,5 a 4,7, mais preferivelmente 2,8 a 4,3, ainda mais preferivelmente 3,2 a 4,0 e mais preferivelmente 3,4 a 3,9. Alternativamente, mas também preferido, o isolado de BLG em pó pode ter um pH na faixa de 3,6 a 4,3.
[00358] Os presentes inventores descobriram que para algumas aplicações, por exemplo, produtos alimentícios com pH neutro e bebidas com pH particularmente neutro, é particularmente vantajoso ter um isolado de BLG em pó com pH neutro. O que é especialmente verdadeiro para bebidas de pH neutro com alto teor de proteína, transparentes ou opacas.
[00359] Desta forma, em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um pH na faixa de 6,1 a 8,5. Preferivelmente, o pó tem um pH na faixa de 6,1 a 8,5, mais preferivelmente 6,2 a 8,0, ainda mais preferivelmente 6,3 a 7,7 e mais preferivelmente 6,5 a 7,5.
[00360] Em outras modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um pH na faixa de 5,0 a 6,0. Preferivelmente, o pó tem um pH na faixa de 5,1 a 5,9, mais preferivelmente 5,2 a 5,8, ainda mais
82 / 145 preferivelmente 5,3 a 5,7, e mais preferivelmente 5,4 a 5,6.
[00361] Vantajosamente, o isolado de BLG em pó usado na presente invenção pode ter densidade aparente de pelo menos 0,20 g/cm3, preferivelmente pelo menos 0,30 g/cm3, mais preferivelmente pelo menos 0,40 g/cm3, ainda mais preferivelmente pelo menos 0,45 g/cm3, ainda mais preferivelmente pelo menos 0,50 g/cm3, e mais preferivelmente pelo menos 0,6 g/cm3.
[00362] Pós de baixa densidade, como isolados de BLG liofilizados, são fofos e facilmente arrastados para o ar do local de produção durante o uso. O que é problemático, pois aumenta o risco de contaminação cruzada do pó liofilizado com outros produtos alimentícios e um ambiente empoeirado é conhecido por ser uma causa de problemas de higiene. Em casos extremos, um ambiente empoeirado também aumenta o risco de explosões de poeira.
[00363] As variantes de alta densidade da presente invenção são mais fáceis de manusear e menos propensas a fluir para o ar circundante.
[00364] Uma vantagem adicional das variantes de alta densidade da presente invenção é que elas ocupam menos espaço durante o transporte e, desta forma, aumentam o peso do isolado de BLG em pó que pode ser transportado em uma unidade de volume.
[00365] No entanto, uma vantagem das variantes de alta densidade da presente invenção é que são menos propensas à segregação quando usadas em misturas de pó com outros ingredientes alimentícios em pó, tais como, por exemplo, açúcar em pó (densidade aparente de aproximadamente 0,56 g/cm3), açúcar granulado (densidade aparente de aproximadamente 0,71 g/cm3), ácido cítrico em pó (densidade aparente de aproximadamente 0,77 g/cm3).
[00366] O isolado de BLG em pó da presente invenção pode ter densidade aparente na faixa de 0,2 a 1,0 g/cm3, preferivelmente na faixa de 0,30 a 0,9 g/cm3, mais preferivelmente na faixa de 0,40 a 0,8 g/cm3, ainda mais preferivelmente na faixa de 0,45 a 0,75 g/cm3, ainda mais
83 / 145 preferivelmente na faixa de 0,50 a 0,75 g/cm3, e mais preferivelmente na faixa de 0,6 a 0,75 g/cm3.
[00367] A densidade aparente de um pó é medida de acordo com o Exemplo 1.17.
[00368] Os presentes inventores descobriram que é vantajoso manter a conformação nativa de BLG e viram indicações de que o desdobramento aumentado de BLG dá origem a um nível aumentado de sensação de secura bucal quando a BLG é usado para bebidas ácidas.
[00369] A razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330/I350) é uma medida do grau de desdobramento de BLG e os inventores descobriram que em altas razões intrínsecas de emissão de fluorescência de triptofano, que se correlacionam com baixo ou nenhum desdobramento de BLG, menos sensação de secura bucal foi observada. A razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330/I350) é medida de acordo com o Exemplo 1.1.
[00370] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330/I350) de pelo menos 1,11.
[00371] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330/I350) de pelo menos 1,12, preferivelmente pelo menos 1,13, mais preferivelmente pelo menos 1,15, ainda mais preferivelmente pelo menos 1,17, e mais preferivelmente pelo menos 1,19.
[00372] Se o isolado de BLG em pó contiver quantidades consideráveis de matéria não proteica, é preferível isolar a fração de proteína antes de medir a razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca. Desta forma, em algumas modalidades preferidas da invenção, a fração de proteína do isolado de BLG em pó tem uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca de pelo menos 1,11.
84 / 145
[00373] Em algumas modalidades preferidas da invenção, a fração de proteína do isolado de BLG em pó tem uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330/I350) de pelo menos 1,12, preferivelmente pelo menos 1,13, mais preferivelmente pelo menos 1,15, ainda mais preferivelmente pelo menos 1,17, e mais preferivelmente pelo menos 1,19.
[00374] A fração de proteína pode, por exemplo, ser separada do isolado de BLG em pó dissolvendo o isolado de BLG em pó em água desmineralizada e submetendo a solução a diálise ou diafiltração baseada em ultrafiltração usando um filtro que retém a proteína. Se o isolado de BLG em pó contiver níveis interferentes de lipídio, esse lipídio pode, por exemplo, ser removido por microfiltração. As etapas de microfiltração e ultrafiltração/diafiltração podem ser combinadas para remover lipídios e moléculas pequenas da fração de proteína.
[00375] É frequentemente preferido que uma quantidade substancial de BLG do isolado de BLG em pó seja BLG não agregada. Preferivelmente, pelo menos 50% da BLG é BLG não agregada. Mais preferivelmente, pelo menos 80% da BLG é BLG não agregada. Ainda mais preferido, pelo menos 90% da BLG é BLG não agregada. Mais preferido, pelo menos 95% da BLG é BLG não agregada. Ainda mais preferido aproximadamente 100% da BLG do isolado de BLG em pó é BLG não agregada.
[00376] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um grau de desnaturação de proteína de no máximo 10%, preferivelmente no máximo 8%, mais preferivelmente no máximo 6%, ainda mais preferivelmente no máximo 3%, ainda mais preferivelmente no máximo 1% e mais preferivelmente no máximo 0,2%.
[00377] No entanto, também pode ser preferido que o isolado de BLG em pó tenha um nível significativo de desnaturação de proteína, por exemplo, se uma bebida opaca é desejada. Desta forma, em outras modalidades
85 / 145 preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um grau de desnaturação de proteína de pelo menos 11%, preferivelmente pelo menos 20%, mais preferivelmente pelo menos 40%, ainda mais preferivelmente pelo menos 50%, ainda mais preferivelmente pelo menos 75%, e mais preferivelmente pelo menos 90%.
[00378] Se o isolado de BLG em pó tiver um nível significativo de desnaturação de proteína, é frequentemente preferido manter um baixo nível de matéria proteica insolúvel, isto é, matéria proteica precipitada que se depositaria em uma bebida durante o armazenamento. O nível de matéria insolúvel é medido de acordo com o Exemplo 1.10.
[00379] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó compreende no máximo 20% p/p de matéria proteica insolúvel, preferivelmente no máximo 10% p/p de matéria proteica insolúvel, mais preferivelmente no máximo 5% p/p de matéria proteica insolúvel, ainda mais preferido no máximo 3% p/p de matéria proteica insolúvel, e mais preferido no máximo 1% p/p de matéria proteica insolúvel. Pode até ser preferido que o isolado de BLG em pó não contenha matéria proteica insolúvel alguma.
[00380] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem uma cristalinidade de BLG de no máximo 19%, preferivelmente no máximo 10%, mais preferivelmente no máximo 5%, e mais preferivelmente 0%.
[00381] Em outras modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem uma cristalinidade de BLG de pelo menos 20%, preferivelmente pelo menos 40%, mais preferivelmente pelo menos 60%, e mais preferivelmente pelo menos 80%. Estas modalidades contêm uma quantidade significativa de cristais de BLG secos e proveem os benefícios de ter a fonte de proteína presente na forma compacta e sólida.
[00382] Os presentes inventores descobriram que a estabilidade ao calor a pH 3,9 de um isolado de BLG em pó é um bom indicador da sua
86 / 145 utilidade para bebidas transparentes com elevado teor de proteínas. A estabilidade ao calor em pH 3,9 é medida de acordo com o Exemplo 1.2.
[00383] É particularmente preferido que o isolado de BLG em pó tenha uma estabilidade ao calor em pH 3,9 de no máximo 200 NTU, preferivelmente no máximo 100 NTU, mais preferido no máximo 60 NTU, ainda mais preferido no máximo 40 NTU, e mais preferido no máximo 20 NTU. São possíveis ainda melhores estabilidades ao calor e o isolado de BLG em pó tem preferivelmente uma estabilidade ao calor a pH 3,9 de no máximo 10 NTU, preferivelmente no máximo 8 NTU, mais preferivelmente no máximo 4 NTU, ainda mais preferido no máximo 2 NTU.
[00384] O teor de microrganismos do isolado de BLG em pó é preferivelmente mantido em um mínimo. No entanto, é um desafio obter um alto grau de natalidade da proteína e um baixo teor de microrganismos, pois os processos de redução microbiana tendem a levar ao desdobramento e à desnaturação das proteínas. A presente invenção permite obter um teor muito baixo de microrganismos, ao mesmo tempo que mantém um alto nível de natalidade de BLG.
[00385] Desta forma, em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó contém no máximo 15000 unidades formadoras de colônia (UFC)/g. Preferivelmente, o isolado de BLG em pó contém no máximo 10.000 UFC/g. Mais preferivelmente, o isolado de BLG em pó contém no máximo 5000 UFC/g. Ainda mais preferivelmente, o isolado de BLG em pó contém no máximo 1000 UFC/g. Ainda mais preferivelmente, o isolado de BLG em pó contém no máximo 300 UFC/g. Mais preferivelmente, o isolado de BLG em pó contém no máximo 100 UFC/g, tal como, por exemplo, no máximo 10 UFC/g. Em uma modalidade particularmente preferida, o pó é estéril. Um isolado de BLG em pó estéril pode, por exemplo, ser preparado combinando vários processos de redução microbiana física durante a produção do isolado de BLG em pó, tal como, por exemplo,
87 / 145 microfiltração e tratamento térmico em pH ácido.
[00386] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um pH na faixa de i) 2 a 4,9, ii) 6,1 a 8,5 ou iii) 5,0 a 6,0 e compreende: - proteína total em uma quantidade de pelo menos 30% p/p, preferivelmente pelo menos 80% p/p, e ainda mais preferivelmente pelo menos 90% p/p, - beta-lactoglobulina (BLG) em uma quantidade de pelo menos 85% p/p em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p, - água em uma quantidade de no máximo 6% p/p, - lipídio em uma quantidade de no máximo 2% p/p, preferivelmente no máximo 0,5% p/p, o referido isolado de BLG em pó tendo: - uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330/I350) de pelo menos 1,11, - um grau de desnaturação de proteínas de no máximo 10%, e - uma estabilidade térmica em pH 3,9 de no máximo 200 NTU.
[00387] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um pH na faixa de i) 2 a 4,9 ou ii) 6,1 a 8,5 e compreende: - proteína total em uma quantidade de pelo menos 30% p/p, preferivelmente pelo menos 80% p/p, e ainda mais preferivelmente pelo menos 90% p/p, - beta-lactoglobulina (BLG) em uma quantidade de pelo menos 85% p/p em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p, e mais preferivelmente pelo menos 94% p/p em relação à proteína total, - água em uma quantidade de no máximo 6% p/p, - lipídio em uma quantidade de no máximo 2% p/p, preferivelmente no máximo 0,5% p/p,
88 / 145 o referido isolado de BLG em pó tendo: - uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330/I350) de pelo menos 1,11, - um grau de desnaturação de proteínas de no máximo 10%, preferivelmente no máximo 5%, e - uma estabilidade ao calor a pH 3,9 de no máximo 70 NTU, preferivelmente no máximo 50 NTU e ainda mais preferivelmente no máximo 40 NTU.
[00388] Em algumas modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um pH na faixa de i) 2 a 4,9 ou ii) 6,1 a 8,5 e compreende: - proteína total em uma quantidade de pelo menos 30% p/p, - beta-lactoglobulina (BLG) em uma quantidade de pelo menos 85% p/p em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p, - água em uma quantidade de no máximo 6% p/p, o referido isolado de BLG em pó tendo: - uma densidade aparente de pelo menos 0,2 g/cm3, - uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330/I350) de pelo menos 1,11, - um grau de desnaturação de proteínas de no máximo 10%, e - uma estabilidade térmica em pH 3,9 de no máximo 200 NTU.
[00389] Em outras modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um pH na faixa de 2 a 4,9 e compreende: - proteína total em uma quantidade de pelo menos 80% p/p, preferivelmente pelo menos 90% p/p, e ainda mais preferivelmente pelo menos 94% p/p, - beta-lactoglobulina (BLG) em uma quantidade de pelo menos 85% p/p em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p, e ainda mais preferivelmente pelo menos 94% p/p em relação à proteína
89 / 145 total, - água em uma quantidade de no máximo 6% p/p, - lipídio em uma quantidade de no máximo 2% p/p, preferivelmente no máximo 0,5% p/p, o referido isolado de BLG em pó tendo: - uma densidade aparente de pelo menos 0,2 g/cm3, preferivelmente pelo menos 0,3 g/cm3, e mais preferivelmente pelo menos 0,4 g/cm3, - uma razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330/I350) de pelo menos 1,11, - um grau de desnaturação da proteína de no máximo 10%, preferivelmente no máximo 5%, e mais preferivelmente no máximo 2%, e - uma estabilidade ao calor a pH 3,9 de no máximo 50 NTU, preferivelmente no máximo 30 NTU e ainda mais preferivelmente no máximo 10 NTU.
[00390] Em ainda outras modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um pH na faixa de 6,1 a 8,5 e compreende: - proteína total em uma quantidade de pelo menos 80% p/p, preferivelmente pelo menos 90% p/p, e ainda mais preferivelmente pelo menos 94% p/p, - beta-lactoglobulina (BLG) em uma quantidade de pelo menos 85% p/p em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p, e ainda mais preferivelmente pelo menos 94% p/p em relação à proteína total, - água em uma quantidade de no máximo 6% p/p, - lipídio em uma quantidade de no máximo 2% p/p, preferivelmente no máximo 0,5% p/p, o referido isolado de BLG em pó tendo: - uma densidade aparente de pelo menos 0,2 g/cm3,
90 / 145 preferivelmente pelo menos 0,3 g/cm3, e mais preferivelmente pelo menos 0,4 g/cm3, - um grau de desnaturação da proteína de no máximo 10%, preferivelmente no máximo 5%, e mais preferivelmente no máximo 2%, e - uma estabilidade ao calor em pH 3,9 de no máximo 50 NTU, preferivelmente no máximo 30 NTU, e ainda mais preferivelmente no máximo 10 NTU.
[00391] Em outras modalidades preferidas da invenção, o isolado de BLG em pó tem um pH na faixa de 6,1 a 8,5 e compreende: - proteína total em uma quantidade de pelo menos 80% p/p, preferivelmente pelo menos 90% p/p, e ainda mais preferivelmente pelo menos 94% p/p, - beta-lactoglobulina (BLG) em uma quantidade de pelo menos 85% p/p em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p, e ainda mais preferivelmente pelo menos 94% p/p em relação à proteína total, - água em uma quantidade de no máximo 6% p/p, - lipídio em uma quantidade de no máximo 2% p/p, preferivelmente no máximo 0,5% p/p, o referido isolado de BLG em pó tendo: - uma densidade aparente de pelo menos 0,2 g/cm3, preferivelmente pelo menos 0,3 g/cm3, e mais preferivelmente pelo menos 0,4 g/cm3, - um grau de desnaturação da proteína de no máximo 10%, preferivelmente no máximo 5%, e mais preferivelmente no máximo 2%, e - uma estabilidade ao calor em pH 3,9 de no máximo 50 NTU, preferivelmente no máximo 30 NTU, e ainda mais preferivelmente no máximo 10 NTU.
[00392] Em outras modalidades preferidas da invenção, o isolado de
91 / 145 BLG em pó tem um pH na faixa de 5,0 a 6,0 e compreende: - proteína total em uma quantidade de pelo menos 80% p/p, preferivelmente pelo menos 90% p/p, e ainda mais preferivelmente pelo menos 94% p/p, - beta-lactoglobulina (BLG) em uma quantidade de pelo menos 85% p/p em relação à proteína total, preferivelmente pelo menos 90% p/p, e ainda mais preferivelmente pelo menos 94% p/p em relação à proteína total, - água em uma quantidade de no máximo 6% p/p, - lipídio em uma quantidade de no máximo 2% p/p, preferivelmente no máximo 0,5% p/p, o referido isolado de BLG em pó tendo: - uma densidade aparente de pelo menos 0,2 g/cm3, preferivelmente pelo menos 0,3 g/cm3, e mais preferivelmente pelo menos 0,4 g/cm3, - um grau de desnaturação da proteína de no máximo 10%, preferivelmente no máximo 5%, e mais preferivelmente no máximo 2%, - uma estabilidade ao calor em pH 3,9 de no máximo 50 NTU, preferivelmente no máximo 30 NTU, e ainda mais preferivelmente no máximo 10 NTU, e - preferivelmente, uma cristalinidade de BLG inferior a 10%.
[00393] O isolado de BLG em pó contendo BLG em uma quantidade de pelo menos 85% p/p em relação à proteína total, é tipicamente fornecido por um método que compreende as etapas de: a) prover um isolado de BLG líquido com • um pH na faixa de 2 a 4,9, • um pH na faixa de 6,1 a 8,5, ou • um pH na faixa de 5,0 a 6,0
92 / 145 o referido isolado de BLG líquido contendo BLG em uma quantidade de pelo menos 85 p/p em relação à proteína total, b) opcionalmente, submeter o isolado de BLG líquido a uma redução microbiana física, c) secar o isolado de BLG líquido, preferivelmente por secagem por pulverização.
[00394] O isolado de BLG é preferivelmente preparado a partir de leite de mamífero, e preferivelmente de leite de ruminante tal como, por exemplo, leite de vaca, ovelha, cabra, búfala, camela, lhama, égua e/ou corça. A proteína derivada do leite bovino é particularmente preferida. A BLG é, portanto, preferivelmente BLG bovina.
[00395] O isolado de BLG líquido pode ser fornecido de várias maneiras diferentes.
[00396] Normalmente, a provisão do isolado de BLG líquido envolve, ou mesmo consiste em isolar BLG de um alimento de proteína de soro de queijo para prover uma composição enriquecida com BLG por um ou mais dos seguintes métodos: - cristalização ou precipitação de BLG por salting-in, - cristalização ou precipitação de BLG da BLG por salting-out, - cromatografia por troca iônica, e - fracionamento de proteínas do soro de queijo por ultrafiltração.
[00397] Uma forma particularmente preferida de prover a composição enriquecida com BLG é por cristalização de BLG, preferivelmente por salting-in ou, alternativamente, por salting-out.
[00398] O alimento de proteína de soro de queijo é preferivelmente um WPC, um WPI, um CPS, um SPI ou uma combinação dos mesmos.
[00399] O termo “alimento de proteína de soro de queijo” se refere à composição da qual a composição enriquecida com BLG e,
93 / 145 subsequentemente, o isolado de BLG líquido são derivados.
[00400] Em algumas modalidades da invenção, a preparação da composição enriquecida com BLG inclui, ou mesmo consiste em cristalização de BLG com alto teor de sal na faixa de pH 3,6 a 4,0 de acordo com US 2,790,790 A1.
[00401] Em outras modalidades da invenção, a preparação da composição enriquecida com BLG inclui, ou mesmo consiste, no método descrito por de Jongh et al (Mild Isolation Procedure Discloses New Protein Structural Properties of β-Lactoglobulin, J Dairy Sci., volume 84 (3), 2001, páginas 562 a 571) ou por Vyas et al (Scale-Up of Native β-Lactoglobulin Affinity Separation Process, J. Dairy Sci., vol. 85, 2002, pp. 1639 a 1645).
[00402] No entanto, em modalidades particularmente preferidas da invenção, a composição enriquecida com BLG é preparada por cristalização em pH 5 a 6 sob condições de salting-in, conforme descrito no pedido PCT PCT/EP2017/084553, que é incorporado aqui por referência para todos os propósitos.
[00403] Em algumas modalidades preferidas da invenção, a composição enriquecida com BLG é uma composição de BLG editável de acordo com PCT/EP2017/084553 contendo pelo menos 90% de BLG em relação à proteína total e preferivelmente contendo cristais de BLG.
[00404] Se ainda não tiver as características necessárias para ser usado como isolado de BLG líquido, a composição enriquecida com BLG que foi isolada do alimento de proteína de soro de queijo pode ser submetida a uma ou mais etapas selecionadas do grupo de: - desmineralização, - adição de minerais, - diluição, - concentração, - redução microbiana física, e
94 / 145 - ajuste de pH como parte da provisão do isolado de BLG líquido.
[00405] Os exemplos não limitativos de desmineralização incluem, por exemplo, diálise, filtração em gel, UF/diafiltração, NF/diafiltração e cromatografia por troca iônica.
[00406] Os exemplos não limitativos de adição de minerais incluem a adição de sais solúveis, aceitáveis para alimentos, tais como, por exemplo, sais de Na, K, Ca e/ou Mg. Tais sais podem, por exemplo, ser sais de fosfato, sais de cloreto ou sais de ácidos alimentícios, tais como, por exemplo, sal de citrato ou sal de lactato. Os minerais podem ser adicionados na forma sólida, suspensa ou dissolvida.
[00407] Exemplos não limitativos de diluição incluem, por exemplo, adição de diluente líquido, como água, água desmineralizada ou soluções aquosas de minerais, ácidos ou bases.
[00408] Os exemplos não limitativos de concentração incluem, por exemplo, evaporação, osmose reversa, nanofiltração, ultrafiltração e suas combinações.
[00409] Se a concentração tiver que aumentar a concentração de proteína em relação aos sólidos totais, é preferível usar etapas de concentração, como ultrafiltração ou, alternativamente, diálise. Se a concentração não tiver que aumentar a concentração de proteína em relação aos sólidos totais, métodos tais como, por exemplo, evaporação, nanofiltração e/ou osmose reversa podem ser úteis.
[00410] Os exemplos não limitativos de redução microbiana física incluem, por exemplo, tratamento térmico, filtragem de germe, radiação UV, tratamento de alta pressão, tratamento de campo elétrico pulsado e ultrassom. Estes métodos são bem conhecidos pelo versado na técnica.
[00411] Os exemplos não limitativos de ajuste de pH incluem, por exemplo, adição de bases e/ou ácidos e, preferivelmente, bases e/ou ácidos
95 / 145 aceitáveis para alimentos. É particularmente preferido empregar ácidos e/ou bases que são capazes de quelar cátions de metal divalente. Exemplos de tais ácidos e/ou bases são ácido cítrico, sal citrato, EDTA, ácido láctico, sal lactato, ácido fosfórico, sal fosfato e suas combinações.
[00412] A seguir, uma série de modalidades preferidas da provisão do isolado de BLG líquido da etapa a) a partir de composição enriquecida com BLG. As etapas do processo mencionadas neste contexto são aplicadas à corrente de produto contendo BLG após a composição enriquecida com BLG.
[00413] A presente invenção foi descrita acima com referência a modalidades específicas. No entanto, outras modalidades que não as descritas acima são igualmente possíveis dentro do escopo da invenção. As diferentes características e etapas de várias modalidades e aspectos da invenção podem ser combinados de outras maneiras diferentes das aqui descritas, a menos que seja indicado de outra forma. Exemplos Exemplo 1: Métodos de Análise Exemplo 1.1: Determinação da Natividade da Proteína por Fluorescência de Triptofano Intrínseca
[00414] A espectroscopia de fluorescência de triptofano (Trp) é uma ferramenta bem descrita para monitorar o dobramento e o desdobramento de proteínas. Resíduos Trp enterrados dentro de proteínas nativas normalmente exibem maior emissão de fluorescência em torno de 330 nm do que quando presentes em posições mais expostas a solvente, como proteínas desdobradas. Em proteínas desdobradas, os comprimentos de onda para emissão de fluorescência Trp normalmente mudam para comprimentos de onda mais altos e são frequentemente medidos em torno de 350 nm. Aqui, exploramos essa transição para monitorar o desdobramento induzido termicamente, calculando a razão entre a emissão de fluorescência em 330 nm e 350 nm para investigar a influência da temperatura de aquecimento.
96 / 145
[00415] A análise compreende as seguintes etapas: • As composições de bebidas foram diluídas para 0,6 mg/ml em água MQ. • A amostra de 300 µl foi transferida para uma placa branca de 96 poços evitando bolhas ou 3mL foram transferidos para uma cubeta de quartzo de 10 mm. • A intensidade de emissão de fluorescência de triptofano entre 310 e 400 nm foi registrada a partir do topo por excitação em 295 usando fendas de 5 nm. • As amostras foram medidas a 22ºC usando um espectrofotômetro de fluorescência Cary Eclipse equipado com um acessório leitor de placas (G9810A) ou porta-cubeta único. • A taxa de intensidade de emissão foi calculada dividindo a intensidade de emissão de fluorescência medida em 330 nm com a intensidade de emissão em 350 nm, R = I330/I350, e usada como uma medida da natividade da proteína. o R de pelo menos 1,11 descreve uma conformação de BLG nativa predominante e o R inferior a 1,11 relata pelo menos desdobramento e agregação parcial. Exemplo 1.2: Estabilidade ao Calor em pH 3.9 Estabilidade ao Calor em pH 3,9:
[00416] A estabilidade ao calor em pH 3,9 é uma medida da capacidade da composição da proteína de permanecer transparente após pasteurização prolongada em pH 3,9.
[00417] A estabilidade ao calor em pH 3,9 é determinada pela formação de uma solução aquosa com um pH de 3,9 e compreendendo 6,0% p/p de proteína pela mistura de uma amostra do pó ou líquido a ser testado com água (ou alternativamente sendo concentrando por evaporação a baixa
97 / 145 temperatura se for um líquido diluído) e ajustando o pH para 3,9 com a quantidade mínima necessária de NaOH 0,1 M ou HCl 0,1 M.
[00418] A mistura com pH adaptado é deixada em repouso por 30 minutos, após os quais 25 mL da mistura são transferidos para um tubo de ensaio de vidro de parede fina de 30 mL. É aquecido a 75,0ºC por 300 segundos por imersão em um banho-maria com uma temperatura de 75,0ºC. Imediatamente após o aquecimento, o tubo de ensaio de vidro é resfriado a 1 a 5ºC por meio de transferência para um banho gelado e a turbidez da amostra tratada termicamente é medida de acordo com o Exemplo 1.7. Exemplo 1.3: Determinação do Grau de Desnaturação de Proteína de uma Composição de Proteína de Soro de Queijo
[00419] A proteína de soro de queijo desnaturada é conhecida por ter uma solubilidade mais baixa em pH 4,6 do que em valores de pH abaixo ou acima de 4,6, portanto, o grau de desnaturação da composição de uma proteína de soro de queijo é determinado medindo a quantidade de proteína solúvel em pH 4,6 em relação à quantidade total de proteína em um pH onde as proteínas na solução são estáveis.
[00420] Mais especificamente para proteínas do soro de queijo, a composição de proteína de soro de queijo a ser analisada (por exemplo, um pó ou uma solução aquosa) é convertida em: - uma primeira solução aquosa contendo 5,0% (p/p) de proteína total e tendo um pH de 7,0 ou 3,0, e - uma segunda solução aquosa contendo 5,0% (p/p) de proteína total e com um pH de 4,6.
[00421] Os ajustes de pH são feitos usando 3% (p/p) NaOH (aq) ou 5% (p/p) HCl (aq).
[00422] O teor de proteína total (PpH 7,0 ou 3,0) da primeira solução aquosa é determinado de acordo com o Exemplo 1.5.
[00423] A segunda solução aquosa é armazenada durante 2 horas em
98 / 145 temperatura ambiente e subsequentemente centrifugada a 3000 g durante 5 minutos. Uma amostra do sobrenadante é recuperada e analisada de acordo com o Exemplo 1.5 para dar a concentração de proteína no sobrenadante (SpH4.6).
[00424] O grau de desnaturação da proteína, D, da composição da proteína de soro de queijo é calculado como: D = ((PpH 7.0 ou 3.0-SpH 4.6)/PpH 7.0 ou 3.0)*100% Exemplo 1.4 Determinação de Desnaturação de Proteína (com Precipitação de Ácido pH 4.6) Usando Análise UPLC de Fase Reversa
[00425] Amostras de BLG (como referência não aquecida e composições de bebidas de BLG aquecidas) foram diluídas para 2% em água MQ. 5mL de solução de proteína, 10 mL de Milli-Q, 4 mL de ácido acético a 10% e 6 mL de NaOAc 1,0 M são misturados e agitados por 20 minutos para permitir a precipitação da aglomeração de proteína desnaturada em torno de pH 4,6. A solução é filtrada através de um filtro de 0,22 µm para remover aglomerados e proteínas não nativas.
[00426] Todas as amostras foram submetidas ao mesmo grau de diluição pela adição de água polida.
[00427] Para cada amostra, o mesmo volume foi carregado em um sistema UPLC com uma coluna UPLC (Proteína BEH C4; 300Å; 1,7 µm; 150 x 2,1 mm) e detectado a 214 nm.
[00428] As amostras foram executadas usando as seguintes condições: Tampão A: água Milli-Q, 0,1% p/p de TFA Tampão B: acetonitrila de grau HPLC, 0,1% p/p de TFA Fluxo: 0,4 ml/min Gradiente: 0 a 6,00 minutos 24% a 45% B; 6,00 a 6,50 minutos 45% a 90% B; 6,50 a 7,00 minutos 90% B; 7,00 a 7,50 minutos 90%
99 / 145 a 24% B e 7,50 a 10,00 minutos 24% B.
[00429] A área dos picos de BLG contra um padrão de proteína (Sigma L0130) foi usada para determinar a concentração de BLG nativa nas amostras (curva de calibração de 5 níveis).
[00430] As amostras foram diluídas ainda mais e reinjetadas se fora da faixa linear. Exemplo 1.5: Determinação de Proteína Total
[00431] O teor de proteína total (proteína verdadeira) de uma amostra é determinado por: 1) Determinar o nitrogênio total da amostra de acordo com a ISO 8968-1/2 | IDF 020-1/2 - Milk - Determination of nitrogen content - Parte 1 de 2: Determination of nitrogen content using the Kjeldahl method. 2) Determinar o nitrogênio não proteico da amostra de acordo com a ISO 8968-4 | IDF 020-4 - Milk - Determination of nitrogen content - Parte 4: Determination of non-protein-nitrogen content. 3) Calculando a quantidade total de proteína como (mnitrogênio total - mnitrogênio não proteico)*6,38. Exemplo 1.6: Determinação de BLG, ALA e CMP Não Agregados
[00432] O teor de alfa-lactalbumina não agregada (ALA), beta- lactoglobulina (BLG) e caseinomacropeptídeo (CMP), respectivamente, foi analisado por análise de HPLC a 0,4 mL/min. A amostra filtrada de 25 microL é injetada em 2 colunas TSKgel3000PWxl (7,8 mm 30 cm, Tosohass, Japão) conectadas em série com a pré-coluna PWxl anexada (6 mm x 4 cm, Tosohass, Japão) equilibrada no eluente (consistindo em 465g Água Milli-Q, 417,3 g de acetonitrila e 1 mL de ácido trifluoroacético) e usando um detector de UV a 210 nm.
[00433] A determinação quantitativa dos teores de alfa-lactalbumina nativa (Calpha), beta-lactoglobulina (Cbeta) e caseinomacropeptídeo (CCMP) foi realizada comparando as áreas de pico obtidas para as proteínas padrão
100 / 145 correspondentes com as das amostras.
[00434] A quantidade total de proteína adicional (proteína não BLG) foi determinada subtraindo a quantidade de BLG da quantidade de proteína total (determinada de acordo com o Exemplo 1.5). Exemplo 1.7: Determinação de Turbidez
[00435] Turbidez é a turvação ou nebulosidade de um fluido causada por um grande número de partículas que geralmente são invisíveis a olho nu, semelhantes à fumaça no ar.
[00436] A turbidez é medida em unidades de turbidez nefelométrica (NTU).
[00437] Amostras/bebidas de 20mL foram adicionadas ao vidro de NTU e colocadas no turbidímetro Turbiquant® 3000 IR. O valor de NTU foi medido após a estabilização e repetido duas vezes. Exemplo 1.8: Determinação de Viscosidade
[00438] A viscosidade das preparações de bebidas foi medida usando um reômetro (Anton Paar, Physica MCR301).
[00439] 3,8 mL de amostra foram adicionados ao copo DG26.7. As amostras foram equilibradas a 22 °C e, em seguida, pré-cisalhadas durante 30 segundos a 50 s-1, seguido por 30 segundos de tempo de equilíbrio e varreduras de taxa de cisalhamento entre 1 s-1 e 200 s-1 e 1 s-1 foram realizadas.
[00440] A viscosidade é apresentada na unidade centipoise (cP) a uma taxa de cisalhamento de 100 s-1, a menos que seja especificado de outra forma. Quanto mais altos os valores de cP medidos, maior é a viscosidade.
[00441] Alternativamente, a viscosidade foi estimada usando um Viscoman da Gilson e relatada a uma taxa de cisalhamento de cerca de 300s-1. Exemplo 1.9: Determinação da Cor
[00442] A cor foi medida usando um medidor de croma (Konica Minolta, CR a 400). 15 g de amostra foram adicionados a uma pequena placa de Petri (55x14,2 mm, VWR Cat # 391 a 0895) evitando a formação de
101 / 145 bolhas. O teor de proteína das amostras foi padronizado para 6,0% p/p de proteína ou menos.
[00443] O Chroma Meter foi calibrado para uma placa de calibração de branco (nº 19033177). O iluminante foi ajustado para D65 e o observador para 2ºC. A cor (espaço de cor CIELAB, valor a*-, b*-, L*) foi medida com as tampas cobrindo a suspensão, como a média de três leituras individuais em diferentes locais da placa de Petri.
[00444] A referência de água desmineralizada tem os seguintes valores: L* 39,97 ± 0,3 a* 0,00 ± 0,06 b* -0,22 ± 0,09
[00445] As medições foram convertidas em valores delta/diferença com base na medição da água desmineralizada. delta L* = Lamostra padronizada para 6,0% p/p proteína* - Lágua desmineralizada*, medida em temperatura ambiente. delta a* = aamostra padronizada para 6,0% p/p proteína* - aágua desmineralizada*, medida em temperatura ambiente. delta b* = bamostra padronizada para 6,0% p/p proteína* - bágua desmineralizada*, medida em temperatura ambiente
[00446] As amostras são padronizadas para 6,0% p/p de proteína ou menos.
[00447] O espaço de cor L*a*b* (também conhecido como espaço CIELAB) é um dos espaços de cor uniformes definidos pela Comissão Internacional de Iluminação (CIE) em 1976 e foi usado para relatar quantitativamente a luminosidade e o matiz (ISO 11664-4: 2008 (E)/CIE S 014-4/E: 2007).
[00448] Neste espaço, L* indica claridade (valor de 0 a 100), o preto mais escuro em L* = 0 e o branco mais brilhante em L* = 100.
102 / 145
[00449] Os canais de cor a* e b* representam os verdadeiros valores de cinza neutro em a* = 0 e b* = 0. O eixo a* representa o componente verde/vermelho, com verde na direção negativa e vermelho na direção positiva. O eixo b* representa o componente azul/amarelo, com o azul na direção negativa e o amarelo na direção positiva. Exemplo 1.10 Teste de Estabilidade de Bebida/Matéria de Proteína Insolúvel
[00450] As composições de bebidas de proteína de soro de queijo foram consideradas estáveis se menos de 15% da proteína total em amostras aquecidas precipitadas após centrifugação a 3000 g por 5 minutos:
[00451] Amostras de aproximadamente 20 g foram adicionadas aos tubos de centrifugação e centrifugadas a 3000 g por 5 minutos.
[00452] A análise Kjeldahl da proteína antes da centrifugação e o sobrenadante após a centrifugação foram usados para quantificar a recuperação da proteína. Ver Exemplo 1.5
[00453] A perda de proteína é calculada: 𝑃𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 − 𝑃3000𝑥𝑔 𝐷𝑒𝑠𝑛𝑎𝑡𝑢𝑟𝑎çã𝑜% = ( ) ∗ 100% 𝑃𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙
[00454] Este parâmetro também é algumas vezes referido como o nível de matéria proteica insolúvel e pode ser usado para analisar amostras líquidas e em pó. Se a amostra for um pó, 10 g do pó são suspensos em 90 g de água desmineralizada e deixados hidratar a 22ºC sob agitação suave durante 1 hora. Aproximadamente 20 g de amostra (por exemplo, amostra líquida ou a amostra de pó suspensa) para tubos de centrifugação e centrifugados a 3000 g por 5 min. A análise Kjeldahl da proteína antes da centrifugação (Ptotal) e o sobrenadante após a centrifugação (P3000xg) foram usados para quantificar a recuperação da proteína de acordo com o Exemplo 1.5
[00455] A quantidade de matéria proteica insolúvel é calculada:
103 / 145 𝑃𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 − 𝑃3000𝑥𝑔 𝑝𝑜𝑟𝑐𝑒𝑛𝑡𝑎𝑔𝑒𝑚 𝑑𝑒 𝑚𝑎𝑡é𝑟𝑖𝑎 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑐𝑎 𝑖𝑛𝑠𝑜𝑙ú𝑣𝑒𝑙 = ( ) ∗ 100% 𝑃𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 Exemplo 1.11: Avaliação Sensorial
[00456] As preparações de bebidas tratadas termicamente foram submetidas a uma avaliação sensorial descritiva. As preparações de bebidas foram submetidas ao calor em trocadores de calor a placas.
[00457] 1 volume de amostra foi misturado com 1 volume de água e comparado ao isolado de proteína de soro de queijo não aquecido, ácido lático e ácido cítrico também são usados para formar uma lista de atributos antes da sessão de degustação final: Categoria Atributos: Aroma Soro de queijo, ácido (produto de leite azedo) Sabor básico Ácido, amargo Flavor Soro de queijo, ácido cítrico, ácido láctico Sensação na boca Secura, adstringência
[00458] Biscoitos, chá branco, melão e água foram usados para limpar a boca dos participantes entre cada amostra.
[00459] A amostra de teste de 15 mL em temperatura ambiente (20 a 25ºC) foi servida em pequenos copos.
[00460] Cada amostra de teste foi servida a 10 indivíduos três vezes em três blocos diferentes em ordem aleatória.
[00461] Os atributos (ver tabela acima) foram avaliados em uma escala de 15 cm com 0 = baixa intensidade e 15 = alta intensidade.
[00462] A análise estatística foi conduzida no software ‘Panelcheck’ usando um teste ANOVA de 3 vias para múltiplas repetições. As amostras foram fixadas e o painel foi definido como aleatório.
[00463] A correção de Bonferroni que implica valores de diferença de menor significância (comparações pareadas de grupos associados a uma letra)
104 / 145 foi usada para avaliar diferenças significativas entre as amostras. Exemplo 1.12: Determinação de Transparência por Imagem
[00464] Fotografias de preparações de bebidas foram conduzidas colocando amostras em frascos de medição NTU de turbidez tocando um pedaço de papel com o texto “lorem ipsum”. Os frascos foram fotografados usando um smartphone e os inventores avaliaram se o texto podia ser claramente observado através do frasco. Exemplo 1.13: Determinação do Teor de Cinzas
[00465] O teor de cinzas de um produto alimentício é determinado de acordo com NMKL 173, 2005, “Ash, gravimetric determination in foods”. Exemplo 1.14: Determinação de Condutividade
[00466] A “condutividade” (às vezes chamada de “condutância específica”) de uma solução aquosa é uma medida da capacidade da solução de conduzir eletricidade. A condutividade pode, por exemplo, ser determinada medindo a resistência AC da solução entre dois eletrodos e o resultado é tipicamente dado na unidade miliSiemens por cm (mS/cm). A condutividade pode, por exemplo, ser medida de acordo com o Método Nº 120.1 da EPA (Agência de Proteção Ambiental dos EUA).
[00467] Os valores de condutividade mencionados aqui foram normalizados para 25ºC, a menos que seja especificado de outra forma.
[00468] A condutividade é medida em um medidor de condutividade (WTW Cond 3210 com um eletrodo tetracon 325).
[00469] O sistema é calibrado conforme descrito no manual antes do uso. O eletrodo é enxaguado abundantemente no mesmo tipo de meio em que a medição é realizada, para evitar diluições locais. O eletrodo é abaixado até o meio para que a área onde a medição ocorre seja completamente submersa. O eletrodo é então agitado para que qualquer ar preso no eletrodo seja removido. O eletrodo é então mantido imóvel até que um valor estável possa ser obtido e registrado no visor.
105 / 145 Exemplo 1.15: Determinação dos Sólidos Totais de Uma Solução
[00470] O total de sólidos de uma solução pode ser determinado de acordo com NMKL 110 2ª Edição, 2005 (Total solids (Water) - Gravimetric determination in milk and milk products). NMKL é uma abreviatura de “Nordisk Metodikkomité for Næringsmidler”.
[00471] O teor de água da solução pode ser calculado como 100% menos a quantidade relativa de sólidos totais (% p/p). Exemplo 1.16: Determinação de pH
[00472] Todos os valores de pH são medidos usando um eletrodo de vidro de pH e são normalizados para 25ºC.
[00473] O eletrodo de vidro de pH (com compensação de temperatura) é enxaguado cuidadosamente e calibrado antes do uso.
[00474] Quando a amostra está na forma líquida, o pH é medido diretamente na solução líquida a 25ºC.
[00475] Quando a amostra é um pó, 10 g de um pó são dissolvidos em 90 ml de água desmineralizada em temperatura ambiente com agitação vigorosa. O pH da solução é então medido a 25ºC. Exemplo 1.17: Determinação de Densidade Solta e Densidade Aparente
[00476] A densidade de um pó seco é definida como a relação entre o peso e o volume do pó que é analisado usando um volúmetro Stampf especial (ou seja, um cilindro de medição) sob condições especificadas. A densidade é normalmente expressa em g/ml ou kg/L.
[00477] Neste método, uma amostra de pó seco é compactada em um cilindro de medição. Após um número especificado de batidas, o volume do produto é lido e a densidade calculada.
[00478] Três tipos de densidades podem ser definidos por este método: • Densidade vertida, que é a massa dividida pelo volume do pó após ter sido transferido para o cilindro de medição especificado.
106 / 145 • Densidade solta, que é a massa dividida com o volume do pó após 100 batidas de acordo com as condições especificadas nesta norma. • Densidade aparente, que é a massa dividida pelo volume do pó após 625 batidas de acordo com as condições especificadas nesta norma.
[00479] O método usa um cilindro de medição especial, 250 ml, graduado de 0 a 250 ml, peso de 190 ± 15 g (J. Engelsmann A. G. 67059 Ludwigshafen/Rh) e um volúmetro Stampf, por exemplo, J. Engelsmann A. G.
[00480] A densidade solta e a densidade aparente do produto seco são determinadas pelo seguinte procedimento. Pré-tratamento:
[00481] A amostra a ser medida é armazenada em temperatura ambiente.
[00482] A amostra é então completamente misturada girando e virando repetidamente o recipiente (evitar esmagar as partículas). O recipiente não é enchido mais do que 2/3. Procedimento:
[00483] Pesar 100,0 ± 0,1 grama de pó e transferi-lo para a proveta de medição. O volume V0 é lido em ml.
[00484] Se 100 g de pó não couberem no cilindro, a quantidade deve ser reduzida para 50 ou 25 g.
[00485] Fixar o cilindro de medição no volúmetro Stampf e deixá-lo bater 100 batidas. Nivelar a superfície com a espátula e leia o volume V100 em ml.
[00486] Alterar o número de guias para 625 (incluindo os 100 batidas). Após bater, nivelar a superfície e ler o volume V625 em ml. Cálculo de densidades:
[00487] Calcular as densidades soltas e aparentes expressas em g/ml de acordo com a seguinte fórmula:
107 / 145 Densidade aparente = M/V onde M designa a amostra pesada em gramas e V designa o volume após 625 batidas em ml. Exemplo 1.18: Determinação do Teor de Água de um Pó
[00488] O teor de água de um produto alimentício é determinado de acordo com a ISO 5537:2004 (Dried milk - Determination of moisture content (Reference method)). NMKL é uma abreviatura de “Nordisk Metodikkomité for Næringsmidler”. Exemplo 1.19: Determinação das Quantidades de Cálcio, Magnésio, Sódio, Potássio, Fósforo (Método ICP-MS)
[00489] As quantidades totais de cálcio, magnésio, sódio, potássio e fósforo são determinadas usando um procedimento em que as amostras são primeiro decompostas usando digestão de micro-ondas e, em seguida, a quantidade total de mineral/minerais é determinada usando um aparelho ICP. Aparelho:
[00490] O micro-ondas é da Anton Paar e o ICP é um Optima 2000DV da PerkinElmer Inc. Materiais:
[00491] 1 M HNO3 Ítrio em 2% HNO3 Padrões adequados para cálcio, magnésio, sódio, potássio e fósforo em 5% de HNO3 Pré-tratamento:
[00492] Pesar uma certa quantidade de pó e transferir o pó para um tubo de digestão de micro-ondas. Adicionar 5 mL de HNO3 1M. Digerir as amostras no micro-ondas de acordo com as instruções do micro-ondas. Colocar os tubos digeridos em uma capela de exaustão, remover a tampa e
108 / 145 deixar evaporar os gases voláteis. Procedimento de medição:
[00493] Transferir a amostra pré-tratada para o DigiTUBE usando uma quantidade conhecida de água Milli-Q. Adicionar uma solução de ítrio em 2% de HNO3 ao tubo de digestão (cerca de 0,25 mL por 50 mL de amostra diluída) e diluir até um volume conhecido usando água Milli-Q. Analisar as amostras no ICP usando o procedimento descrito pelo fabricante.
[00494] Uma amostra cega é preparada diluindo uma mistura de 10 mL de HNO3 1M e 0,5 mL de solução de ítrio em HNO3 a 2% para um volume final de 100 mL usando água Milli-Q.
[00495] Pelo menos 3 amostras padrão são preparadas tendo concentrações que abrangem as concentrações de amostra esperadas. Exemplo 1.20: Determinação do Valor de Furosina
[00496] O valor de furosina é determinado conforme descrito em “Maillard Reaction Evaluation by Furosine Determination During Infant Cereal Processing”, Guerra-Hernandez et al, Journal of Cereal Science 29 (1999) 171–176, e a quantidade total de proteína é determinada de acordo com o Exemplo 1,5. O valor de furosina é relatado na unidade de mg de furosina por 100 g de proteína. Exemplo 1.21: Determinação da Cristalinidade de BLG em um Líquido
[00497] O método a seguir é usado para determinar a cristalinidade de BLG em um líquido com um pH na faixa de 5 a 6. a) Transferir uma amostra de 10 mL do líquido em questão para um filtro Maxi-Spin com uma membrana CA de tamanho de poro de 0,45 mícron. b) Girar o filtro imediatamente a 1500 g por 5 minutos mantendo a centrífuga a 2ºC. c) Adicionar 2 mL de água Milli-Q fria (2ºC) ao lado retentado do filtro de rotação e imediatamente girar o filtro a 1500 g por 5 minutos,
109 / 145 mantendo a centrífuga resfriada a 2ºC, coletar o permeado (permeado A), medir o volume e determinar a concentração de BLG por meio de HPLC usando o método descrito no Exemplo 1.31. d) Adicionar 4 mL de NaCl 2M ao lado retentado do filtro, agitar rapidamente e deixar a mistura repousar por 15 minutos a 25ºC. e) Girar imediatamente o filtro a 1500 g por 5 minutos e coletar o permeado (permeado B). f) Determinar o peso total de BLG no permeado A e no permeado B usando o método delineado no Exemplo 1.31 e converter os resultados no peso total de BLG em vez de porcentagem em peso. O peso de BLG no permeado A é referido como mPermeado A e o peso de BLG no permeado B é referido como mpermeado B. g) A cristalinidade do líquido em relação à BLG é determinada como: cristalinidade = mPermeado B/( mPermeado A+ mPermeado B)*100% Exemplo 1.22: Determinação da cristalinidade de BLG em um pó seco
[00498] Este método é usado para determinar a cristalinidade de BLG em um pó seco. a) 5,0 g da amostra em pó são misturados com 20,0 g de água Milli-Q fria (2ºC) e deixados em repouso por 5 minutos a 2ºC. b) Transferir a amostra do líquido em questão para um filtro Maxi-Spin com membrana CA de 0,45 mícron. c) Girar o filtro imediatamente a 1500 g por 5 minutos mantendo a centrífuga a 2ºC. d) Adicionar 2 mL de água Milli-Q fria (2ºC) ao lado retentado do filtro de rotação e imediatamente, girar o filtro a 1500 g por 5 minutos, coletar o permeado (permeado A), medir o volume e determinar a
110 / 145 concentração de BLG via HPLC usando o método descrito no Exemplo 1.6 e converter os resultados para o peso total de BLG em vez de porcentagem em peso. O peso de BLG no permeado A é referido como mpermeado A. e) A cristalinidade de BLG no pó é então calculada usando a seguinte fórmula: 𝑚𝐵𝐿𝐺 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 − 𝑚𝑝𝑒𝑟𝑚𝑒𝑎𝑑𝑜 𝐴 𝑐𝑟𝑖𝑠𝑡𝑎𝑙𝑖𝑛𝑖𝑑𝑎𝑑𝑒 = ∗ 100% 𝑚𝐵𝐿𝐺 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 onde mBLG total é a quantidade total de BLG na amostra de pó da etapa a).
[00499] Se a quantidade total de BLG da amostra de pó for desconhecida, isso pode ser determinado suspendendo outra amostra de 5 g de pó (da mesma fonte de pó) em 20,0 g de água Milli-Q, ajustando o pH para 7,0 por adição de NaOH aquoso, deixando a mistura repousar por 1 hora a 25ºC sob agitação e, finalmente, determinando a quantidade total de BLG da amostra em pó usando o Exemplo 1.31. Exemplo 1.23: Determinação de Condutividade Permeada de UF
[00500] 15 mL da amostra são transferidos para Unidades de Filtro Centrífugo Amicon Ultra-15 com um corte de 3 kDa (3000 NMWL) e centrifugados a 4000 g por 20 a 30 minutos ou até que um volume suficiente de permeado de UF para medir a condutividade seja acumulado na parte inferior das unidades de filtro. A condutividade é medida imediatamente após a centrifugação. O manuseio da amostra e a centrifugação são realizados na temperatura da fonte da amostra. Exemplo 1.24: Detecção de Cristais de BLG Secos em Pó
[00501] A presença de cristais de BLG secos em pó pode ser identificada da seguinte maneira:
[00502] Uma amostra do pó a ser analisado é ressuspensa e suavemente misturada em água desmineralizada com uma temperatura de 4ºC
111 / 145 em uma razão do peso de 2 partes de água para 1 parte de pó, e deixada reidratar por 1 hora a 4ºC.
[00503] A amostra reidratada é inspecionada por microscopia para identificar a presença de cristais, preferivelmente usando luz polarizada plana para detectar a birrefringência.
[00504] A matéria cristalina é separada e submetida a cristalografia de raios-x para verificar a existência de estrutura cristalina, e preferivelmente verificar também se a estrutura cristalina (grupo espacial e dimensões unitárias da célula) corresponde a de um cristal de BLG.
[00505] A composição química da matéria cristalina separada é analisada para verificar se seus sólidos consistem principalmente em BLG. Exemplo 1.25: Determinação da Quantidade Total de Lactose
[00506] A quantidade total de lactose é determinada de acordo com a ISO 5765-2:2002 (IDF 79-2: 2002) “Dried milk, dried ice-mixes and processed cheese – Determination of lactose content - parte 2: Enzymatic method using the galactose moiety of the lactose”. Exemplo 1.26: Determinação da Quantidade Total de Carboidrato
[00507] A quantidade de carboidrato é determinada pelo uso do kit de ensaio Sigma Aldrich Total Carbohydrate Assay Kit (Cat MAK104-1KT), no qual os carboidratos são hidrolisados e convertidos em furfural e hidroxifurfurais que são convertidos em um cromogênio que é monitorado espectrofotometricamente a 490 nm. Exemplo 1.27: Determinação da Quantidade Total de Lipídios
[00508] A quantidade de lipídios é determinada de acordo com a ISO 1211:2010 (Determination of Fat Content - Röse-Gottlieb Gravimetric Method). Exemplo 1.28: Determinação de Brix
[00509] As medições de Brix foram realizadas usando um refratômetro portátil PAL-α (Atago) calibrado contra água polida (água filtrada por osmose
112 / 145 reversa para obter uma condutividade de no máximo 0,05 mS/cm).
[00510] Aproximadamente 500 µl de amostra foram transferidos para a superfície do prisma do instrumento e a medição foi iniciada. O valor medido foi lido e registrado.
[00511] O Brix de uma solução de proteína de soro de queijo é proporcional ao teor de sólidos totais (TS) e TS (% p/p) é de aproximadamente Brix * 0,85. Exemplo 1.29 Determinação de Lactoferrina e Lactoperoxidase
[00512] A concentração de lactoferrina é determinada por um imunoensaio ELISA, conforme descrito por Soyeurt, 2012 (Soyeurt et al; Mid-infrared prediction of lactoferrin content in bovine milk: potential indicator of mastitis; Animal (2012), 6:11, pp 1830 a 1838).
[00513] A concentração de lactoperoxidase é determinada usando um kit de lactoperoxidase bovina disponível no mercado. Exemplo 1.30: Determinação do Número de Unidades Formadoras de Colônia
[00514] A determinação do número de unidades formadoras de colônias por grama de amostra é realizada de acordo com a ISO 4833- 1:2013(E): Microbiology of food and animal feeding stuffs - horizontal method for the enumeration of microorganisms - Colony-count technique at 30°C. Exemplo 1.31: Determinação da Quantidade Total de BLG, ALA e CMP
[00515] Este procedimento é um método de cromatografia líquida (HPLC) para a análise quantitativa de proteínas como ALA, BLG e CMP e, opcionalmente, também outras espécies de proteínas em uma composição. Ao contrário do método do Exemplo 1.6, o presente método também mede proteínas que estão presentes agregadas e, portanto, fornece uma medida da quantidade total da espécie de proteína na composição em questão.
[00516] O modo de separação é cromatografia por exclusão de
113 / 145 tamanho (SEC) e o método usa tampão Guanidina HCI 6M como solvente da amostra e fase móvel de HPLC. O mercaptoetanol é usado como um agente redutor para reduzir o dissulfeto (S-S) nas proteínas ou agregados de proteínas para criar estruturas monoméricas desdobradas.
[00517] A preparação da amostra é facilmente obtida dissolvendo 10 mg de proteína equivalente na fase móvel.
[00518] Duas colunas TSK-GEL G3000SWXL (7,7 mm x 30,0 cm) (colunas GPC) e uma coluna de proteção são colocadas em série para alcançar a separação adequada das proteínas principais em materiais brutos.
[00519] Os analitos eluídos são detectados e quantificados por detecção de UV (280 nm).
[00520] Equipamentos/Materiais:
1. Bomba 515 HPLC com lavagem de vedação manual (Waters)
2. Módulo controlador de bomba HPLC (Pump Controller Module II, Waters)
3. Amostrador automático (Autosampler 717, Waters)
4. Detector duplo de absorbância (Dual Absorbance Detector 2487, Waters)
5. Software de computador capaz de gerar relatórios quantitativos (Empower 3, Waters)
6. Coluna analítica: Duas TSK-GEL G3000SWXL (7.8 x 300mm, P/N: 08541). Coluna de proteção: TSK- Guard Column SWxL (6.0 x 40mm, P/N: 08543).
7. Banho ultrassônico (Branson 5200)
8. Filtro de seringa de 25 mm com membrana de acetato de celulose de 0,2 µm. (514-0060, VWR) Procedimento:
114 / 145 Na fase móvel:
[00521] A. Solução tampão estoque.
1. Pesar 56,6 g de Na2HPO4, 3,5 g de NaH2PO4 e 2,9 g de EDTA em um copo de 1000 mL. Dissolver em 800mL de água.
2. Medir o pH e ajustar para 7,5 ± 0,1, se necessário, com HCl (diminuir o pH) ou NaOH (aumentar o pH).
3. Transferir para um balão volumétrico de 1000mL e diluir o volume com água.
[00522] B. Fase móvel de Guanidina HCl 6M.
1. Pesar 1146 g de Guanidina HCl em um béquer de 2.000mL e adicionar 200mL da solução tampão estoque (A) .
2. Diluir esta solução para cerca de 1600mL com água enquanto mistura com uma barra de agitação magnética (50 °C).
3. Ajustar o pH para 7,5 ± 0,1 com NaOH.
4. Transferir para um balão volumétrico de 2.000mL e diluir o volume com água.
5. Filtrar usando o aparelho de filtração de solvente com filtro de membrana de 0,22 μm. Padrões de calibração.
[00523] Os padrões de calibração de cada proteína a ser quantificada são preparados da seguinte maneira:
1. Pesar com precisão (até 0,01 mg) cerca de 25 mg do padrão de referência de proteína em um balão volumétrico de 10 mL e dissolver em 10 mL de água. Esta é a solução estoque de proteína padrão (S1) da proteína.
2. Pipetar 200 µl de S1 para um frasco volumétrico de 20ml e diluir para o volume com a fase móvel. Esta é a solução WS1 de baixo padrão de trabalho.
115 / 145
3. Pipetar 500 µL de S1 para um balão volumétrico de 10 mL e diluir para o volume com a fase móvel. Esta é a solução padrão WS2.
4. Pipetar 500 µL de S1 para um frasco volumétrico de 5mL e diluir até o volume com a fase móvel. Esta é a solução padrão WS3.
5. Pipetar 750 µL de S1 em um frasco volumétrico de 5mL e diluir para o volume com a fase móvel. Esta é a solução padrão WS4.
6. Pipetar 1,0 mL de S1 em um balão volumétrico de 5 mL e diluir para o volume com a fase móvel. Esta é a solução WS5 de alto padrão de trabalho.
7. Usando pipetas descartáveis graduadas, transferir 1,5mL de WS1-5 para frascos separados. Adicionar 10 μL de 2-mercaptoetanol em cada frasco e tampar. Agitar as soluções no vórtex por 10 segundos. Deixar os padrões permanecerem em temperatura ambiente por cerca de 1 hora.
8. Filtrar os padrões usando filtros de seringa de acetato de celulose de 0,22 µm.
[00524] A pureza da proteína é medida usando Kjeldahl (N x 6,38) e a% de área da solução padrão WS5 usando o HPLC.
proteína (mg) = “peso padrão de proteína” (mg) x P1 x P2 P1 = P% (Kjeldahl) P2 = % da área de proteína (HPLC)
[00525] Preparação de amostra
116 / 145
1. Pesar o equivalente a 25mg de proteína da amostra original em um frasco volumétrico de 25mL.
2. Adicionar aproximadamente 20mL de fase móvel e deixar a amostra dissolver por cerca de 30 minutos.
3. Adicionar a fase móvel ao volume e adicionar 167 μL de 2- mercaptoetanol à solução de amostra de 25 ml.
4. Fazer a ultrassonização por cerca de 30 minutos e depois deixar a amostra permanecer em temperatura ambiente por cerca de 1 hora e meia.
5. Misturar a solução e filtrar usando filtros de seringa de acetato de celulose de 0,22 µl. Sistema/colunas HPLC
[00526] Equilíbrio de coluna
1. Conectar a coluna de proteção GPC e as duas colunas analíticas GPC em série. As novas colunas são geralmente enviadas em um tampão de sal de fosfato.
2. Passar água por uma nova coluna gradualmente de 0,1 a 0,5mL/min. em 30 a 60 minutos. Continuar lavando por cerca de 1 hora.
3. Diminuir gradualmente a taxa de fluxo de 0,5mL/min. para 0,1mL/min. e substituir pela fase móvel no reservatório.
4. Aumentar a taxa de fluxo da bomba gradualmente de 0,1 a 0,5mL/min. em 30 a 60 minutos para evitar choque de pressão e deixar em 0,5mL/min..
5. Injetar dez amostras para permitir que a coluna seja saturada e aguardar a eluição dos picos. Isso ajudará no condicionamento da coluna. Esta etapa é realizada sem a necessidade de esperar que cada
117 / 145 injeção seja concluída antes de injetar a próxima.
6. Equilibrar com a fase móvel por pelo menos 1 hora. Cálculo dos resultados
[00527] A determinação quantitativa dos teores das proteínas a serem quantificadas, por exemplo, alfa-lactalbumina, beta-lactoglobulina e caseinomacropeptídeo, é realizada comparando as áreas de pico obtidas para as proteínas padrão correspondentes com as das amostras. Os resultados são relatados como g de proteína específica/100 g da amostra original ou porcentagem do peso da proteína específica em relação ao peso da amostra original. Exemplo 2: Cristalização de Beta-Lactoglobulina de um Concentrado de Proteína de Soro de Queijo Cru Protocolo:
[00528] O retentado de UF sem lactose derivado do soro de queijo doce de um processo de produção de queijo padrão e filtrado por um filtro de 1,2 mícron foi usado como alimento para o processo de cristalização de BLG. O alimento do soro de queijo doce foi condicionado em uma configuração de ultrafiltração usando uma membrana do tipo Koch HFK-328 com uma pressão de alimento de espaçador de 46 mil. de 1,5 a 3,0 bar, usando uma concentração de alimento de 21% TS (sólidos totais) ± 5 e água polida (água filtrado por osmose reversa para obter uma condutividade de no máximo 0,05 mS/cm) como meio de diafiltração. A temperatura do alimento e do retentado durante a ultrafiltração era de aproximadamente 12ºC. O pH foi então ajustado pela adição de HCl para obter um pH de aproximadamente 5,40. A diafiltração continuou até a queda na condutividade do retentado ser inferior a 0,03 mS/cm ao longo de um período de 20 minutos. O retentado foi então concentrado até aproximadamente 30% de TS (aproximadamente 23,1% de proteína total em relação ao peso total do retentado concentrado). Uma amostra do retentado concentrado foi centrifugada a 3000 g durante 5 minutos
118 / 145 mas não se formou nenhum sedimento visível. O sobrenadante foi submetido a análise por HPLC. A composição do alimento é mostrada na Tabela 1.
[00529] O retentado concentrado foi semeado com 0,5 g/L de material de cristal de BLG puro obtido de uma cristalização de BLG espontânea (como descrito no Exemplo 3 no contexto do alimento 2). O material de semeadura foi preparado lavando uma pasta de cristal de BLG 5 vezes em água Milli-Q, recolhendo os cristais de BLG após cada lavagem. Após a lavagem, os cristais de BLG foram liofilizados, triturados com pilão e almofariz e, em seguida, passados por uma peneira de 200 mícrons. As sementes de cristalização, portanto, tinham um tamanho de partícula inferior a 200 mícrons.
[00530] O retentado concentrado foi transferido para um tanque de cristalização de 300 L onde foi resfriado a cerca de 4ºC e mantido a esta temperatura durante a noite com agitação suave. Na manhã seguinte, uma amostra do retentado concentrado resfriado foi transferida para um tubo de ensaio e inspecionada tanto visual quanto microscopicamente. Cristais de semeadura rápida se formaram claramente durante a noite. Uma amostra de laboratório da mistura compreendendo cristais e licor-mãe foi ainda resfriada a 0ºC em um banho de água gelada. O licor-mãe e os cristais foram separados por centrifugação a 3000 g durante 5 minutos, e as amostras do sobrenadante e do sedimento foram retiradas para análise por HPLC. Os cristais foram lavados uma vez em água fria polida e depois centrifugados novamente antes da liofilização da pelota. Tabela 1 - Concentração de componentes selecionados do alimento padronizado para 95% p/p de sólidos totais. Alimento padronizado para 95% TS Composição de proteína (% p/p em relação à proteína total) ALA 17,7 BLG 51,6 CMP 19,5 Outros componentes (% p/p em relação ao peso total do alimento padronizado) Ca 0,357
119 / 145 K 0,200 Mg 0,058 Na 0,045 P 0,280 gordura 5,6 proteína 79
[00531] Quantificação do rendimento relativo BLG por HPLC:
[00532] Todas as amostras foram submetidas ao mesmo grau de diluição pela adição de água polida. As amostras foram filtradas em filtro de 0,22 mícrons. Para cada amostra, o mesmo volume foi carregado em um sistema de HPLC com um Phenomenex Jupiter® 5 µm C4 300 Å, coluna LC 250 x 4,6 mm (número da peça: 00G-4167-E0) e detectado a 214 nm.
[00533] As amostras foram executadas usando as seguintes condições: Tampão A: água Milli-Q, 0,1% p/p de TFA Tampão B: acetonitrila de grau HPLC, 0,085% p/p de TFA Fluxo: 1 ml/min. Gradiente: 0 a 30 minutos 82 a 55% A e 18 a 45% B; 30 a 32 minutos 55 a 10% A e 45 a 90% B; 32,5 a 37,5 minutos 10% A e 90% B; 38 a 48 minutos 10 a 82% A e 90 a 18% B. Tratamento de dados:
[00534] Como todas as amostras foram tratadas da mesma forma, podemos comparar diretamente a área dos picos de BLG para obter um rendimento relativo. Como os cristais contêm apenas BLG e as amostras foram todas tratadas da mesma maneira, a concentração de alfa-lactalbumina (ALA) e, portanto, a área de ALA deve ser a mesma em todas as amostras. Portanto, a área de ALA antes e depois da cristalização é usada como um fator de correção (fc) ao calcular o rendimento relativo.
á𝑟𝑒𝑎 𝑑𝑒 𝐴𝐿𝐴𝑎𝑛𝑡𝑒𝑠 𝑑𝑎 𝑐𝑟𝑖𝑠𝑡𝑎𝑙𝑖𝑧𝑎çã𝑜 𝑓𝑐𝛼 = á𝑟𝑒𝑎 𝑑𝑒 𝐴𝐿𝐴𝑎𝑝ó𝑠 𝑎 𝑐𝑟𝑖𝑠𝑡𝑎𝑙𝑖𝑧𝑎çã𝑜
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[00535] O rendimento relativo é calculado pela seguinte equação: 𝑓𝑐𝛼 × á𝑟𝑒𝑎 𝑑𝑒 𝐵𝐿𝐺𝑎𝑝ó𝑠 𝑎 𝑐𝑟𝑖𝑠𝑡𝑎𝑙𝑖𝑧𝑎çã𝑜 𝑅𝑒𝑛𝑑𝑖𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜𝐵𝐿𝐺 = (1 − ) × 100 á𝑟𝑒𝑎 𝑑𝑒 𝐵𝐿𝐺𝑎𝑛𝑡𝑒𝑠 𝑑𝑎 𝑐𝑟𝑖𝑠𝑡𝑎𝑙𝑖𝑧𝑎çã𝑜 Resultados:
[00536] A partir dos cromatogramas obtidos antes e depois da cristalização de BLG de um soro de queijo doce, é aparente que ocorreu uma grande diminuição na concentração de BLG e, usando o cálculo de rendimento, conforme descrito anteriormente, o rendimento de BLG removido foi determinado em 64,5% p/p.
[00537] A pasta de cristal foi investigada por microscopia. A amostra continha cristais hexagonais, muitos com um tamanho consideravelmente maior do que 200 mícrons, indicando que os cristais observados não são apenas os cristais de semeadura. Os cristais se estilhaçaram facilmente quando pressionados com uma agulha, o que confirmava que eram cristais de proteína.
[00538] Um cromatograma de um produto de cristal lavado mostra que BLG constitui 98,9% da área total do cromatograma. A pureza do produto de BLG pode ser aumentada ainda mais por lavagem adicional. Conclusão:
[00539] Este exemplo demonstra que, surpreendentemente, é possível cristalizar a BLG seletivamente a partir de um concentrado de proteína de soro de queijo cru que contém mais de 48% de proteína não BLG em relação à proteína total e que o isolado de cristal de BLG obtido tem uma pureza extremamente alta. Esta descoberta abre para uma nova abordagem para a separação industrial da proteína de leite, na qual a BLG é separada dos outros componentes da proteína de uma forma suave que preferivelmente evita a exposição prolongada a altas temperaturas e produtos químicos problemáticos.
121 / 145 Example 3: Cristalização de BLG em Três Tipos de Soluções de Proteína de Soro de Queijo Protocolo:
[00540] Usando a mesma configuração experimental e analítica do Exemplo 2, três tipos diferentes de matéria-prima contendo proteína de soro de queijo foram testados como alimentos para cristalização. No entanto, nenhuma semeadura foi usada no experimento realizado com o alimento 2. Os alimentos 1 e 2 eram baseados em soro de queijo doce e tinham redução de gordura por meio de uma membrana Synder FR antes do tratamento, como descrito no Exemplo 2. O alimento 3 foi derivado de um soro de queijo ácido.
[00541] A composição dos três alimentos pode ser vista abaixo na Tabela 2, Tabela 3 e Tabela 4. O alimento 3 foi cristalizado a 21% TS (proteína total de 13,3% p/p em relação ao peso total do alimento), concentração significativamente mais baixa do que nos outros dois (proteína total de 26,3% p/p no alimento 1 e 25,0% p/p no alimento 2).
[00542] A lama do alimento cristalizada 1 foi centrifugada em um filtro Maxi-Spin com uma membrana de 0,45 mícron CA a 1500 g por 5 minutos. Em seguida, 2 volumes de água Milli-Q foram adicionados ao bolo de filtro antes de ser centrifugado novamente. O bolo de filtro resultante foi analisado por HPLC. O sedimento do alimento 2 foi lavado com 2 volumes de água Milli-Q e centrifugado novamente sob condições padrão antes do sedimento ser analisado por HPLC. O sedimento do alimento 3 foi analisado sem lavagem.
[00543] Os cristais feitos a partir do alimento 2 foram diluídos para TS 10% e o pH ajustado para pH 7 usando NaOH 1M para reverter a cristalização. NaCl foi adicionado a uma pasta de cristal do alimento 2, 36% de TS para reverter a cristalização.
Tabela 2 - A concentração dos componentes selecionados do alimento 1
122 / 145
(concentrado de proteína de soro de queijo com base em soro de queijo doce). ALD = abaixo do limite de detecção na amostra úmida.
Alimento 1 (padronizado para 95% TS) Composição de proteína (% p/p em relação à proteína total) ALA 23,0 BLG 55,1 CMP 20,5 Outros componentes (% p/p em relação ao peso total do alimento padronizado) Ca 0,387 K 0,290 Mg 0,066 Na 0,068 P 0,207 gordura ALD concentração de proteína 90
Tabela 3 - A concentração de componentes selecionados do alimento 2 (concentrado de proteína de soro de queijo com redução de ALA com base em soro de queijo doce). ALD = abaixo do limite de detecção em amostra úmida não padronizada.
Alimento 2 (padronizado para 95% TS) Composição de proteína (% p/p em relação à proteína total) ALA 12,2 BLG 70,0 CMP 17,1 Outros componentes (% p/p em relação ao peso total do alimento padronizado) Ca 0,387 K 0,204 Mg 0,066 Na 0,051 P 0,174 gordura ALD concentração de proteína 89
Tabela 4 - A concentração dos componentes selecionados do alimento 3 (concentrado de proteína de soro de queijo com base em soro de queijo ácido). Alimento 3 (padronizado para 95% TS) Composição de proteína (% p/p em relação à proteína total)
123 / 145 ALA 24,0 BLG 63,6 Outras proteínas do soro de queijo 12,4 Outros componentes (% p/p em relação ao peso total do alimento padronizado) Ca 0,205 K 0,051 Mg 0,013 Na 0,108 P 0,240 gordura 5,1 concentração de proteína 79 Resultados:
[00544] Alimento 1: A partir dos cromatogramas da composição proteica do alimento e do licor-mãe, é evidente que uma grande parte da BLG foi recuperada como cristais pelo processo. O rendimento (calculado conforme descrito no Exemplo 2) de BLG isolado é de aproximadamente 65% em relação à quantidade total de BLG no alimento.
[00545] A partir de uma foto do microscópio de uma amostra tirada durante os estágios iniciais do período de cristalização e uma foto do microscópio de uma amostra que foi tirada quando a cristalização terminou, fica claro que os cristais de BLG são relativamente frágeis. Alguns dos cristais parecem quebrar durante a agitação e são convertidos da forma hexagonal ou rômbica em fragmentos de cristais que ainda parecem muito compactos e bem definidos, mas têm formas mais irregulares.
[00546] Em um cromatograma dos cristais de BLG que foram separados e lavados em um filtro de rotação, é possível ver que a pureza é muito alta e a remoção de outras proteínas do soro de queijo é extremamente eficiente.
[00547] Alimento 2: A partir dos cromatogramas da composição da proteína de
124 / 145 alimento 2 e do licor-mãe obtido, é evidente que uma grande porção de BLG foi removida e o rendimento calculado foi de 82% em relação à quantidade total de BLG no alimento 2.
[00548] Ao estudar o alimento 2 antes e depois da cristalização, é visto que durante a cristalização o alimento se transformou de um líquido transparente (no qual o ímã de agitação era visível) em um líquido branco leitoso opaco.
[00549] Uma foto de microscópio dos cristais de BLG mostra formas hexagonais, embora a maioria dos cristais esteja fraturada.
[00550] Um cromatograma do sedimento isolado de cristais de BLG após serem lavados com 2 volumes de água Milli-Q mostra claramente que os cristais contêm BLG em uma pureza muito alta.
[00551] O aumento da condutividade (pela adição de NaCl) ou alteração do pH (pelo ajuste do pH para 7 pela adição de NaOH) para que o ambiente não favoreça mais as cessões da estrutura cristalina, em ambos os casos mostram que a suspensão branca leitosa se transforma em um transparente líquido conforme os cristais de BLG são dissolvidos.
[00552] A composição mineral da preparação de cristal obtida do alimento 2 é fornecida na Tabela 5. Notamos que a proporção de fósforo para proteína era muito baixa, o que torna a preparação de cristal adequada como fonte de proteína para pacientes com doenças renais.
Tabela 5 - A concentração de componentes selecionados na preparação de cristal obtida do alimento 2.
Composição da preparação de cristal obtida do % p/p em relação à composição padronizada para alimento 2 95% TS Ca 0,119 K 0,047 Mg 0,019 Na ALD P ALD (inferior a 0,026) Proteína total 93,4
125 / 145
[00553] Alimento 3: A partir dos cromatogramas da composição proteica do alimento 3 e do licor-mãe resultante, é evidente que uma grande porção de BLG foi isolada (um rendimento calculado de 70,3% em relação à quantidade total de BLG no alimento). Se o teor de proteína fosse maior antes da cristalização, o rendimento obtido teria sido ainda maior.
[00554] Uma foto do microscópio dos cristais de BLG isolados do alimento 3 (substancialmente livre de CMP) mostra que os cristais tinham uma forma retangular em oposição a hexagonal. Os cristais retangulares pareciam mais robustos do que os hexagonais. Para um cromatograma do sedimento de cristal isolado sem lavagem; o cromatograma mostra claramente que os cristais eram cristais de BLG, apesar de terem uma forma retangular em vez de hexagonal.
Tabela 6 - A concentração de componentes selecionados da preparação de cristal obtida do alimento 3. Composição da preparação de cristal % p/p em relação à preparação de obtida do alimento 3 cristal padronizada para 95% TS Ca 0,103
K ALD Mg 0,006 Na 0,035 P 0,041 Proteína total 90
[00555] A preparação de cristal derivada do alimento 3 continha 45 mg P/100 g de proteína. Observamos que a proporção de fósforo para proteína é muito baixa, o que torna a preparação de cristal adequada como fonte de proteína para pacientes com doenças renais. Conclusão:
[00556] Todos os três alimentos foram adequados para o processo de cristalização de BLG. Os cristais de BLG foram facilmente dissolvidos
126 / 145 adicionando sal ou aumentando o pH ou a temperatura. O novo método permite preparar preparações de BLG com baixíssimos teores de fósforo, o que as torna adequadas como fonte de proteína para pacientes com doenças renais. Example 4: Preparação de Cristais de BLG Secos por Pulverização e Determinação da Densidade Aparente
[00557] Uma porção dos cristais de BLG produzidos no Exemplo 3 (usando o alimento 2) foi separada em uma centrífuga decantadora a 1200 g, 5180 RPM, 110 RPM Diff. com um espaçador de 64 mil (mil significa 1/1000 polegada) e um fluxo de 25 a 30 L/h. A fase de cristal de BLG foi então misturada 1:1 com água polida e, em seguida, separada novamente na centrífuga decantadora usando os mesmos ajustes. A fase de cristal de BLG foi então misturada com água polida a fim de torná-la uma pasta contendo aproximadamente 25% de matéria seca e tendo uma cristalinidade de BLG de aproximadamente 80, e subsequentemente seca em um secador por pulverização de planta piloto com uma temperatura de entrada de 180ºC e uma temperatura de saída de 85ºC sem qualquer pré-aquecimento. A temperatura das correntes de líquido até a secagem por pulverização era de 10 a 12ºC. O pó resultante amostrado na saída tinha um teor de água de 4,37% p/p.
[00558] A cristalinidade de BLG na pasta era de aproximadamente 90%.
[00559] Os inventores também separaram com sucesso uma pasta de cristais de BLG e licor-mãe em uma centrífuga decantadora a 350 g, 2750 RPM, 150 RPM Diff. com um espaçador de 64 mil e uma taxa de fluxo de 75 L/h. A fase de cristal de BLG foi subsequentemente misturada 1:2 com água polida. A fase de cristal de BLG foi então misturada com água polida a fim de torná-la uma pasta mais fina e, subsequentemente, seca em um secador por pulverização de planta piloto usando os mesmos parâmetros descritos acima.
127 / 145
[00560] A densidade aparente do pó secado por pulverização foi então medida de acordo com o Exemplo 1.17 e comparada com a densidade aparente de um WPI padrão seco no mesmo equipamento. Foi verificado que o WPI padrão tem uma densidade aparente (com base em 625 estampados) de 0,39 g/mL, que está no limite superior da faixa normal para um WPI em pó. No entanto, a preparação de cristal de BLG secado por pulverização tinha uma densidade aparente de 0,68 g/mL, mais de 75% mais alta do que a densidade aparente do WPI padrão. O que é realmente surpreendente e oferece uma série de vantagens logísticas e relacionadas ao pedido.
Tabela 7 - A concentração de componentes selecionados da preparação de cristal de BLG secado por pulverização do Exemplo 7. ALD = abaixo do limite de detecção. Pó de cristal de BLG secado por pulverização Composição de proteína (% p/p em relação à proteína total) ALA 0,7 BLG 97,4
CMP ALD Outros componentes (% p/p em relação ao peso total do pó de cristal de BLG) Ca 0,118 K 0,026 Mg 0,017 Na ALD
P ALD água 3,8 concentração de proteína 94
[00561] Uma amostra da preparação de cristal de BLG secada por pulverização foi subsequentemente ressuspensa em água desmineralizada fria e os cristais de BLG ainda eram claramente visíveis por microscopia. A adição de ácido cítrico ou NaCl causou a dissolução dos cristais de BLG e transformou a suspensão de cristal opaca em um líquido transparente.
[00562] Os inventores viram indicações de que o aquecimento prolongado durante a etapa de secagem reduz a quantidade de BLG que está
128 / 145 na forma de cristal. Portanto, é preferido que a exposição ao calor da preparação de cristal de BLG seja tão baixa quanto possível. Conclusão:
[00563] Este exemplo demonstra que pastas compreendendo cristais de BLG podem ser secas por pulverização e que os cristais de BLG ainda estão presentes no pó secado por pulverização ressuspenso se o aquecimento durante a etapa de secagem for controlado.
[00564] Além disso, os inventores descobriram que a densidade aparente de uma proteína de soro do queijo em pó que contém cristais de BLG é consideravelmente maior do que a obtida por secagem por pulverização normal de fluxos de proteína dissolvida. Os pós de alta densidade permitem um acondicionamento e logística mais econômicos do pó, pois menos material de acondicionamento é necessário por kg de pó e mais pó (massa) pode ser transportado por um determinado contêiner ou caminhão.
[00565] O pó de alta densidade também parece ser mais fácil de manusear e menos fofo e empoeirado durante a fabricação e o uso. Exemplo 5: Bebida de Baixa Proteína de Fósforo
[00566] Seis bebidas em pó com baixo teor de fósforo foram preparadas usando o produto de BLG purificado do Exemplo 3 (a preparação de cristal obtida do alimento 3). Todos os ingredientes secos foram misturados para obter um pó para bebida instantânea e, em seguida, misturados com água desmineralizada para obter 10 kg de cada amostra e deixados para hidratar por 1 hora a 10ºC.
Tabela 8 - Composição das seis amostras de bebidas. Ingrediente % p/p Amostra de bebida
A B C D E F BLG seca e purificada do 5,0 10,0 5,0 10,0 5,0 10,0 Exemplo 3, alimento 3 Ácido cítrico A pH 3,5 A pH 3,5 A pH 3,0 A pH 3,0 A pH 4,0 A pH 4,0 Sacarose 10,0 10,0 10,0 10,0 10 10 Água desmineralizada A 100% A 100% A 100% A 100% A 100% A 100%
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[00567] A turbidez das subamostras das seis amostras foi medida em um turbidímetro Turbiquant® 3000 IR e a viscosidade em um vicoman da Gilson. Os resultados são mostrados na tabela abaixo.
Tabela 9 - Viscosidade e turbidez medidas das seis amostras de bebidas. Amostra Viscosidade (Cp) NTU A 1,42 36,2 B 2,37 46,3 C 2,69 4,9 D 2,70 5,0 E 1,45 63,1 F 2,25 82,1
[00568] Uma foto de tubos de ensaio contendo subamostras das seis amostras de bebidas com baixo teor de fósforo é mostrada na Figura 3. Da esquerda para a direita, as subamostras foram as amostras A, B, C, D, E e F. O inspeção visual dos tubos de ensaio verificou as medições de turbidez e documentou que todas as amostras de bebidas eram transparentes e que particularmente as amostras C e D (pH 3,0) eram muito claras. As baixas viscosidades demonstram que as amostras de bebidas eram facilmente bebíveis.
[00569] Todos os ingredientes usados para preparar a bebida eram pobres em fósforo e não continham minerais desnecessários. As bebidas obtidas, portanto, tinham um teor de fósforo de aproximadamente 45 mg P/100 g de proteína e geralmente tinha um teor mineral muito baixo. Os seis produtos alimentícios líquidos preparados a partir do pó para bebida instantânea eram, portanto, adequados para uso como bebidas proteicas instantâneas para pacientes com doença renal. Exemplo 6: Separação de Cristal por Filtragem Dinâmica Cruzada
[00570] Retentado UF pobre em lactose derivado do soro de queijo doce de um processo padrão de produção de queijo, filtrado por um filtro de 1,2 mícron, foi usado como alimento para o processo de cristalização. O
130 / 145 alimento do soro de queijo doce foi condicionado em uma configuração de ultrafiltração usando uma membrana do tipo Koch HFK-328 com uma pressão de alimento de espaçador de 46 mil. de 1,5 a 3,0 bar, usando uma concentração de alimento de 10% de TS (sólidos totais) ± 5, e água polida (água filtrada por osmose reversa para obter uma condutividade de no máximo 0,05 mS/cm) como meio de diafiltração. A temperatura do alimento e do retentado durante a ultrafiltração era de aproximadamente 12ºC. O pH foi então ajustado pela adição de HCl para obter um pH de aproximadamente 5,60. A diafiltração continuou até que a condutividade do retentado fosse inferior a 1,30 mS/cm. O alimento foi então aquecido a 25ºC antes do retentado ser concentrado a aproximadamente 27% de TS (aproximadamente 21% de proteína total em relação ao peso total do retentado concentrado). A condutividade do permeado era de 0,33 mS/cm no final da concentração. Uma amostra do retentado concentrado foi centrifugado a 3000 g durante 5 minutos, mas não se formou sedimento visível algum.
[00571] O retentado concentrado foi transferido para um tanque de cristalização de 300L, onde foi resfriado a cerca de 6ºC e mantido a esta temperatura durante a noite com agitação suave. Na manhã seguinte, o retentado havia se cristalizado. O licor-mãe e os cristais foram separados por centrifugação a 3000 g durante 5 minutos, e as amostras do sobrenadante e do sedimento foram retiradas para análise por HPLC. O rendimento de BLG deste processo foi calculado em 67%.
[00572] A pasta de cristal do tanque de 300 L foi usada para alimentação em um sistema Andritz DCF 152S usando uma membrana de disco com um tamanho de poro de 500 nm. A filtração decorreu a 8ºC, a velocidade de rotação de 32 Hz e a pressão transmembrana de 0,4 bar. O sistema funciona como uma filtração sem saída, onde o retentado é acumulado na câmara de filtração, ao contrário de uma unidade maior onde o retentado seria removido continuamente. A filtração decorreu de forma
131 / 145 estável durante pouco mais de 40 minutos, altura em que os sólidos, que se tinham acumulado na câmara de filtração, começaram a influenciar a filtração.
[00573] A quantidade de massa de cristal aumentou significativamente durante a operação DFC.
[00574] Conclusão: O DCF fornece um meio estável e eficiente para separar os cristais do ML. Se necessário, o líquido de lavagem pode ser adicionado ao DCF. Example 7: Grau de Desnaturação de Proteína de Diferentes Produtos de Proteína de Soro de Queijo
[00575] O grau de desnaturação de proteínas de um produto comercial e quatro isolados de BLG foram comparados. Os isolados de BLG são adequados para preparar o pó para bebida instantânea da invenção. As amostras são descritas abaixo.
Amostras A: BiPro (WPI disponível comercialmente; Davisco, usa) B: Pasta de cristal de BLG como está - sem secagem (invenção) C: Pasta de cristal de BLG liofilizada (invenção) D: Cristais de BLG redissolvidos (pH 7) e liofilizados E: Pasta de cristal de BLG secada por pulverização (invenção)
[00576] As amostras B a E foram preparadas da seguinte maneira: A pasta de cristal foi preparada como descrito no Exemplo 6 e separada como descrito no Exemplo 4. Parte da pasta de BLG separada foi retirada e dividida em quatro porções.
[00577] Amostra B: A primeira porção da pasta de cristal de BLG separada foi redissolvida sem qualquer secagem ajustando o pH da pasta de cristal de BLG a 7,01 usando NaOH a 3%; e a amostra foi então diluída para Brix 6 a fim de fazer uma solução de proteína de aproximadamente 5%.
[00578] Amostra C: A segunda porção da pasta de cristal de BLG
132 / 145 separada foi liofilizada. O pó foi então ressuspenso em água polida, o pH foi ajustado para 7,09 usando NaOH a 3% e a amostra foi então diluída para Brix 6 a fim de fazer uma solução de proteína de aproximadamente 5%.
[00579] Amostra D: A terceira parte da pasta de cristal de BLG separada foi redissolvida ajustando o pH a 7,0 usando NaOH a 3% e, em seguida, liofilizada. O pó liofilizado foi então ressuspenso em água polida e o pH foi medido como sendo 7,07. A amostra foi então diluída para Brix 6 a fim de fazer uma solução de proteína de aproximadamente 5%.
[00580] Amostra E: A quarta porção da pasta de cristal de BLG separada foi tratada e secada por pulverização como descrito no Exemplo 4. O pó foi então ressuspenso em água polida e o pH foi ajustado para 7,04 usando NaOH a 3%. A amostra foi então diluída para Brix 6 a fim de fazer uma solução de proteína de aproximadamente 5%.
[00581] O grau de desnaturação da proteína de cada amostra foi determinado de acordo com o Exemplo 1.3 e os resultados são apresentados na tabela abaixo.
Tabela: Comparação do grau de desnaturação da proteína de um produto WPI comercialmente disponível (Bipro) com 4 produtos de BLG que podem ser usados no pó para bebida instantânea da invenção. Grau de Concentração total Concentração total desnaturação de Amostra de proteína solúvel de proteína em pH 7 proteínas em pH 4,6 (%) A: BiPro (WPI disponível 5,11 4,54 11,15 comercialmente) B: Pasta de cristal de BLG como está 4,62 4,56 1,30 (sem secagem) C: Pasta de cristal de BLG liofilizada 4,74 4,69 1,05 D: Cristais de BLG redissolvidos (pH 4,74 4,69 1,05 7) e liofilizados E: Pasta de cristal de BLG secada por 4,75 4,71 0,84 pulverização Conclusão:
[00582] Independentemente do método de secagem, o isolado de BLG
133 / 145 tem um grau surpreendentemente baixo de proteína desnaturada; apenas um décimo do que pode ser encontrado no WPI disponível comercialmente usado para comparação. É particularmente surpreendente que o produto de pasta de cristal de BLG secada por pulverização ainda tenha o menor grau de desnaturação de todos os produtos. Exemplo 8: Produção de um Isolado de BLG em Pó Ácido Secado por Pulverização Alimento com proteína de soro de queijo
[00583] O retentado de UF pobre em lactose derivado do soro de queijo doce de um processo de produção de queijo padrão foi filtrado através de um filtro de 1,2 mícron e teve sua gordura reduzida através de uma membrana Synder FR antes de ser usado como alimento para o processo de cristalização de BLG. A composição química do alimento pode ser vista na Tabela 10. Notamos que todas as porcentagens em peso de proteínas específicas, como BLG, ALA, mencionadas neste exemplo, pertencem à porcentagem em peso das proteínas não agregadas em relação à proteína total. Condicionamento
[00584] A alimento do soro de queijo doce foi condicionado em uma configuração de ultrafiltração a 20ºC, usando uma membrana do tipo Koch HFK-328 (membrana de 70 m2) com uma pressão de alimento de espaçador de 46 mil. de 1,5 a 3,0 bar, para uma concentração de alimento de 21% de sólidos totais (TS) ± 5, e usando como meio de diafiltração água polida (água filtrada por osmose reversa para obter uma condutividade de no máximo 0,05 mS/cm). O pH foi então ajustado pela adição de HCl de modo que o pH fosse de aproximadamente 5,5. A diafiltração continuou até a queda na condutividade do retentado ser inferior a 0,1 mS/cm ao longo de um período de 20 minutos. O retentado foi então concentrado até o fluxo de permeado ser inferior a 1,43 L/h/m2. Uma primeira amostra de retentado concentrado foi retirada e submetida a centrifugação a 3000 g por 5 minutos. O sobrenadante
134 / 145 da primeira amostra foi usado para a determinação do rendimento de BLG. Cristalização
[00585] O retentado concentrado foi transferido para um tanque de cristalização de 300 L onde foi semeado com material de cristal de BLG puro feito de cristais de BLG reidratados e secos por pulverização. Posteriormente, a solução de proteína de soro de queijo semeada foi resfriada de 20ºC a aproximadamente 6ºC em aproximadamente 10 horas para permitir que os cristais de BLG se formem e cresçam.
[00586] Após o resfriamento, uma amostra da solução de proteína de soro de queijo contendo cristais (a segunda amostra) foi retirada e os cristais de BLG foram separados por centrifugação a 3000 g por 5 minutos. O sobrenadante e os sedimentos de cristal da segunda amostra foram submetidos a análise por HPLC conforme descrito abaixo. O rendimento de cristalização foi calculado conforme descrito abaixo e determinado como 57%.
Tabela 10 - Composição química do alimento Alimento padronizado para 95% de sólidos totais Composição de proteína % p/p de proteína total ALA 10,2 BLG 59,6 Outras proteínas 30,2 Outros componentes selecionados % p/p Ca 0,438 K 0,537 Mg 0,077 Na 0,131 P 0,200 Gordura 0,220 concentração de proteína 87 Determinação do rendimento de BLG usando HPLC:
[00587] Os sobrenadantes da primeira e segunda amostras foram submetidos ao mesmo grau de diluição pela adição de água polida e os sobrenadantes diluídos foram filtrados em um filtro de 0,22 µm. Para cada
135 / 145 sobrenadante filtrado e diluído, o mesmo volume foi carregado em um sistema de HPLC com um Phenomenex Jupiter® 5 µm C4 300 Å, coluna LC 250 x 4,6 mm, cada e detectado a 214 nm.
[00588] As amostras foram executadas usando as seguintes condições: Tampão A: água Milli-Q, 0,1% p/p de TFA Tampão B: acetonitrila de grau HPLC, 0,085% p/p de TFA Fluxo: 1 mL/min. Temperatura da coluna: 40ºC Gradiente: 0 a 30 minutos 82 a 55% A e 18 a 45% B; 30 a 32 minutos 55 a 10% A e 45 a 90% B; 32,5 a 37,5 minutos 10% A e 90% B; 38 a 48 minutos 10 a 82% A e 90 a 18% B. Tratamento de dados:
[00589] Como ambos os sobrenadantes foram tratados da mesma maneira, é possível comparar diretamente a área dos picos de BLG para calcular um rendimento relativo. Como os cristais contêm apenas BLG e as amostras foram todas tratadas da mesma maneira, a concentração de alfa- lactalbumina (ALA) e, portanto, a área de ALA deve ser a mesma em todas as amostras. Portanto, a área de ALA antes e depois da cristalização é usada como um fator de correção (fc) ao calcular o rendimento relativo.
á𝑟𝑒𝑎 𝑑𝑒 𝐴𝐿𝐴𝑎𝑛𝑡𝑒𝑠 𝑑𝑎 𝑐𝑟𝑖𝑠𝑡𝑎𝑙𝑖𝑧𝑎çã𝑜 𝑓𝑐𝛼 = á𝑟𝑒𝑎 𝑑𝑒 𝐴𝐿𝐴𝑎𝑝ó𝑠 𝑎 𝑐𝑟𝑖𝑠𝑡𝑎𝑙𝑖𝑧𝑎çã𝑜
[00590] O rendimento relativo é calculado pela seguinte equação: 𝑓𝑐𝛼 × á𝑟𝑒𝑎 𝑑𝑒 𝐵𝐿𝐺𝑎𝑝ó𝑠 𝑎 𝑐𝑟𝑖𝑠𝑡𝑎𝑙𝑖𝑧𝑎çã𝑜 𝑅𝑒𝑛𝑑𝑖𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜𝐵𝐿𝐺 = (1 − ) × 100 á𝑟𝑒𝑎 𝑑𝑒 𝐵𝐿𝐺𝑎𝑛𝑡𝑒𝑠 𝑑𝑎 𝑐𝑟𝑖𝑠𝑡𝑎𝑙𝑖𝑧𝑎çã𝑜 Dissolução de ácido de cristais de BLC
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[00591] O restante do material do tanque de cristalização foi separado usando um decantador a 350 g, 2750 RPM, 150 RPM Diff. com um espaçador de 64 e um fluxo de alimentação de 75 L/h antes da separação, o alimento foi misturado 1:2 com água polida. A fase sólida/cristalina da BLG do decantador foi então misturada com água polida a fim de torná-la uma pasta mais fina antes de um ácido fosfórico ser adicionado para diminuir o pH para aproximadamente 3,0 a fim de rapidamente dissolver os cristais.
[00592] Depois de dissolver os cristais de BLG, a proteína BLG líquida pura foi concentrada a Brix 15 na mesma configuração de UF usada para preparar o alimento para cristalização e o pH foi ajustado para pH final de aproximadamente 3,8. O isolado de BLG líquido foi então aquecido a 75ºC por 5 minutos e, posteriormente, resfriado a 10ºC. O tratamento térmico foi encontrado para reduzir a carga microbiana de 137.000 UFC/g antes do tratamento térmico para <1000 UFC/g após o tratamento térmico. O tratamento térmico não causou qualquer desnaturação de proteína e a razão de fluorescência de triptofano intrínseca (330 nm /350 nm) foi determinada para 1,20, indicando confirmação nativa das moléculas de BLG.
[00593] A BLG foi seca em um secador por pulverização de planta piloto com uma temperatura de entrada de 180ºC e uma temperatura de saída de 75ºC. O pó resultante amostrado na saída tinha um teor de água de aproximadamente 4% p/p, a composição química do pó é mostrada na Tabela
11. Uma amostra do pó seco foi dissolvida e o grau de desnaturação da proteína foi determinado para 1,5% e a razão de emissão de fluorescência de triptofano intrínseca (I330/I350) foi medida para 1,20.
Tabela 11 - A composição do Isolado de BLG em pó (ALD = abaixo do limite de detecção) Isolado de BLG em pó padronizado para 95% de sólidos totais Composição de proteína % p/p de proteína total ALA 0,4
137 / 145 BLG 98,2 Outra proteína 1,4 Outros componentes selecionados Ca ALD
K ALD Mg ALD Na ALD P 0,781 gordura 0,09 concentração de proteína 90
[00594] A densidade aparente (625 batidas) do pó secado por pulverização foi estimada em 0,2 a 0,3 g/cm3.
[00595] Conclusão: Ao usar o processo descrito acima, fomos capazes de produzir um produto de BLG de alta pureza que pode ser tratado termicamente com substancialmente nenhuma desnaturação de proteína ou desdobramento de proteína durante o processamento. O tratamento térmico baixou muito os níveis de bactérias sem danificar o produto proteico.
[00596] Os inventores viram indicações de que uma densidade aparente ainda mais elevada pode ser obtida aumentando o teor de proteína antes da secagem por pulverização. Além disso, os inventores observaram que graus ainda mais baixos de desnaturação são obtidos se a temperatura de entrada e/ou saída usada para secagem por pulverização for reduzida. EXEMPLO 9: Produção de um Isolado de BLG em Pó com pH Neutro, Secado por Pulverização
[00597] Ao usar o mesmo protocolo e configuração experimental como no Exemplo 2, o isolado de proteína de soro de queijo com lactose reduzida mostrado na Tabela 12 foi condicionado e usado para alimento para cristalização. O rendimento da cristalização foi calculado em 68%.
[00598] Notamos que todas as percentagens em peso de proteínas específicas, como BLG e ALA, mencionadas neste exemplo, pertencem à porcentagem em peso das proteínas não agregadas em relação à proteína total.
138 / 145 Tabela 12 - Composição do alimento Alimento padronizado para 95% de sólidos totais Composição de proteína % p/p de proteína total ALA 9,1 BLG 59,1 Outra proteína incluindo CMP 31,6 Outros componentes selecionados % p/p Ca 0,445 K 0,574 Mg 0,074 Na 0,128 P 0,211 gordura 0,513 concentração de proteína 84
[00599] O restante do material do tanque de cristalização foi separado em um decantador a 350 g, 2750 RPM, 150 RPM Diff. com um espaçador de 64 e um fluxo de alimentação de 75 L/h. antes da separação, o alimento foi misturado 1:2 com água polida. O cristal/fase sólida da BLG do decantador foi então misturado com água polida a fim de torná-lo uma pasta mais fina antes de hidróxido de potássio 0,1 M ser adicionado para ajustar o pH a aproximadamente 7 para dissolver rapidamente os cristais.
[00600] Depois de dissolver os cristais, a proteína líquida de BLG pura foi concentrada até Brix 15 na mesma configuração UF usada para preparar a solução de proteína de soro de queijo para cristalização e o pH foi ajustado para o pH final de 7,0. A BLG foi seca em um secador por pulverização de planta piloto com uma temperatura de entrada de 180ºC e uma temperatura de saída de 75ºC. O pó resultante amostrado na saída tinha um teor de água de aproximadamente 4% p/p. A composição do pó é mostrada na Tabela 13. Após a secagem, parte do pó foi dissolvido em água desmineralizada e o grau de desnaturação da proteína foi determinado em 9,0% e a razão de fluorescência de triptofano intrínseca (330 nm/350 nm) foi 1,16.
Tabela 13 - Composição química do isolado de BLG em pó
139 / 145 Isolado de BLG em pó padronizado para 95% de sólidos totais Composição de proteína % p/p de proteína total ALA 0,2 BLG 98,9 Outra proteína 0,9 Outros componentes selecionados (% p/p) Ca 0,003 K 2,343 Mg ALD Na ALD P 0,629 gordura 0,329 concentração de proteína 88
[00601] A densidade aparente (625 batidas) do pó secado por pulverização foi estimada em 0,2 a 0,3 g/cm3.
[00602] Conclusão: usando o processo descrito acima, somos capazes de produzir um produto de BLG de pH neutro e alta pureza com mínima ou nenhuma desnaturação de proteína durante o processamento. Os inventores viram indicações de que uma densidade aparente ainda mais alta pode ser obtida aumentando o teor de proteína antes da secagem por pulverização. Além disso, os inventores observaram que graus ainda mais baixos de desnaturação são obtidos se a temperatura de entrada e/ou saída usada para secagem por pulverização for reduzida. O nível de desnaturação pode, além disso, ser reduzido reduzindo o teor mineral antes da secagem por pulverização. Exemplo 10: Preparação de Isolado de BLG em Pó Revestido
[00603] Usando um isolado de BLG secado por pulverização, produzido como descrito no Exemplo 4 ou Exemplo 9, um isolado de BLG revestido foi produzido em um leito fluidizado (DIOSNA, MINILAB XP No. 365 a 146l). A temperatura de entrada era de 60ºC. A temperatura do pó estava entre 40 e 50ºC durante o processo e o fluxo de ar era de 25 a 35 m3/h. O material de revestimento foi dissolvido em 50 g de água desmineralizada e
140 / 145 lentamente injetado no leito fluidizado, onde foi nebulizado. Para cada lote, foram usados 500 g do isolado de BLG secado por pulverização. Após o material de revestimento ter sido adicionado, a secagem continuou até que o isolado de BLG revestido tivesse um teor de umidade de 4 a 5%. Usando essa configuração, um isolado de BLG revestido com 25 g de ácido cítrico e um isolado de BLG revestido com 30 g de citrato trissódico foi produzida.
[00604] As amostras de teste foram preparadas conforme mostrado na tabela e analisadas em relação à solubilidade conforme descrito abaixo. Além da solução de 10% p/p descrita, uma solução de 30% p/p de isolado de BLG em pó foi preparada e testada. As amostras de teste foram posteriormente analisadas em relação à umectação conforme descrito abaixo. Além disso, as amostras de teste foram avaliadas sensorialmente por duas pessoas de teste treinadas de acordo com os parâmetros definidos no Exemplo 1.11.
[00605] Usando o isolado de BLG em pó do Exemplo 8, um pó revestido com lecitina foi produzido no mesmo leito fluidizado como acima. Foram adicionados 500 g de pó à temperatura de entrada do leito fluidizado de 75ºC e o fluxo de ar foi de 25 m3/h. Quando a temperatura do pó atingiu 38ºC, 50 mL de água foram adicionados lentamente através do nebulizador. A temperatura do pó foi deixada subir até 45ºC, e 5 ml de lecitina foram injetados através do nebulizador. O pó foi aquecido a 65ºC e seco até conter menos de 5% de umidade.
[00606] Teste de solubilidade: A solubilidade e a prontidão de um pó instantâneo para se dissolver podem ser medidas pelo presente teste. 10 g do pó são adicionados a 90 g de água desmineralizada (8ºC) em um tubo de ensaio transparente selável. A mistura é agitada vigorosamente à mão durante 30 segundos. A mistura é avaliada imediatamente e deixada em repouso por 1 minuto, após o que a mistura é avaliada novamente. A avaliação é realizada por inspeção visual dos seguintes parâmetros: transparência da fase líquida, formação de espuma, cor e extensão da dissolução do pó.
141 / 145 Resultados: Amostra # Pó % p/p 1 10% Isolado de BLG neutro não revestido, pH 7,02 2 10% WPI revestido com lecitina 3 10% Isolado de BLG revestido com lecitina 4 10% Isolado de BLG revestido com ácido cítrico 5 10% Isolado de BLG revestido com citrato trissódico 6 10% WPI padrão, sem revestimento 7 30% BLG revestida com citrato trissódico 8 30% Isolado de BLG neutro, sem revestimento, pH 7,02 9 30% WPI padrão, sem revestimento # Primeira avaliação Após 1 minuto de avaliação Sabor 1 Facilmente dissolvido, formação de Espuma estável, aumento de volume na Sabor do soro de espuma, sem partículas visíveis no fase líquida, fase líquida completamente queijo: 0 a 1 líquido ou na espuma transparente 2 Facilmente dissolvido, formação de Espuma estável, mas menos espuma em Sabor do soro de espuma, sem partículas visíveis no comparação com as outras misturas de queijo: 7, com um líquido ou na espuma, alguma cor teste. Fase líquida turva e um pouco pouco de sabor amarela amarela subjacente 3 Facilmente dissolvido, formação de Espuma estável, mas menos espuma em Sabor do soro de espuma, sem partículas visíveis no comparação com a amostra 2. Fase queijo: 1 a 2, com um líquido ou na espuma, cor líquida turva e um pouco amarela pouco de sabor ligeiramente amarela subjacente, assim como o #2 4 Facilmente dissolvido, formação de Espuma estável, fase líquida turva, mas agradável espuma, sem partículas visíveis no sem descoloração Sabor do soro de líquido ou na espuma queijo: 0 a 1 Ácido cítrico: 6 5 Facilmente dissolvido, formação de Espuma estável, fase líquida Leve sabor de espuma, sem partículas visíveis no ligeiramente turva, mas sem minerais líquido ou na espuma descoloração Sabor do soro de queijo: 2 a 3 6 Facilmente dissolvido, formação de Espuma estável, cor ligeiramente Sabor do soro de espuma, sem partículas visíveis no amarela queijo: 8 líquido ou na espuma, cor ligeiramente amarela 7 Facilmente dissolvido, formação de Espuma estável, fase líquida turva, mas Não foi experimentado espuma, sem partículas visíveis no sem descoloração líquido ou na espuma 8 Facilmente dissolvido, formação de Espuma estável, aumento de volume na Neutro, mas com um espuma, sem partículas visíveis no fase líquida, fase líquida completamente toque leitoso e um líquido ou na espuma transparente leve sabor proteico Sabor do soro de queijo: 6 9 Formação de espuma, algumas Espuma estável, alguma descoloração Não foi experimentado pequenas partículas visíveis na amarela espuma, alguma descoloração amarela
[00607] Conclusão: Os isolados de BLG em pó adquiridos tinham uma
142 / 145 boa estrutura aglomerada e facilmente dissolvidos em água. Todos os isolados de de BLG em pó revestidos (amostras 1, 3 a 5 e 7 e 8) tiveram desempenho igual ou melhor do que um WPI normalmente revestido (amostra de teste 2) neste teste. Ao testar a versão de 30%, foi surpreendentemente fácil dissolver os isolados de BLG, tanto revestidos quanto não revestidos (amostras de teste 1, 3 a 5 e 7 e 8) e, portanto, acredita-se que existe uma possibilidade de ir ainda mais alto que 30% na concentração de proteína. Ambos os isolados de BLG revestidos e não revestidos em solução a 30% (amostras 7 e 8) foram facilmente dissolvidos em comparação com o WPI padrão (amostra 9), que tinha partículas visíveis na espuma.
[00608] Umectação: o método é usado para descrever a umectação de um pó. A umectação é definida como o tempo que leva antes que toda a amostra seja umedecida. 0,5 g do pó são medidos e colocados na superfície de 100 g de água desmineralizada (5ºC) em um recipiente cilíndrico de 5 cm de diâmetro. É medido o tempo desde a colocação do pó na superfície da água até o pó estar dissolvido ou ter passado pela superfície da água.
Resultados Amostra # Pó Tempo para comentários dissolver (minutos) 10 Isolado de BLG 22 O pó não foi distribuído de maneira tão neutro, não uniforme sobre a superfície e acredita-se que revestido esta seja a razão para o umedecimento ligeiramente mais lento 11 WPI revestido com 18 lecitina 12 Isolado de BLG 16 neutro revestido com lecitina 13 Isolado de BLG +80 Quase não ocorreu umedecimento. revestido com ácido cítrico 14 Isolado de BLG 17 revestido com citrato trissódico 15 WPI padrão +80 Após 80 minutos, o teste foi encerrado e aproximadamente 2/3 do WPI foram dissolvidos neste ponto
143 / 145
[00609] Conclusão: Os isolados de BLG em pó revestidos (amostras 10, 12 e 14) umedecidos de maneira semelhante como no WPI normalizado instantâneo (amostras 11 e 15) com exceção do isolado de BLG em pó revestido com ácido cítrico (amostra 13). De forma surpreendente, o isolado de BLG em pó não revestido umedeceu muito melhor do que um WPI padrão (amostra 6). Exemplo 11: Umectação de Isolados de BLG Não Revestidos
[00610] No presente exemplo, a umectação de um isolado de BLG ácido não revestido e um isolado de BLG neutro não revestido é comparada com a umectação de um isolado de proteína de soro de queijo não revestido (WPI). A umectação é definida como o tempo que leva antes que toda a amostra seja umedecida. 0,5 g do pó são medidos e colocados na superfície de 100 g de água desmineralizada (10ºC) em um recipiente cilíndrico com um diâmetro de 5 cm. É medido o tempo desde a colocação do pó na superfície da água até o pó estar dissolvido ou ter passado pela superfície da água.
Resultados Amostra # Pó Tempo para comentários dissolver (minutos) 1 WPI +55 5 a 10% do pó ainda permanecia na superfície após 55 minutos 2 Isolado de BLG ácido (pH 27 Completamente umedecido e dissolvido 3,7), não revestido 3 Isolado de BLG neutro 15 Completamente umedecido e dissolvido (pH7), não revestido
[00611] Conclusão: De forma surpreendente, o isolado de BLG em pó não revestido (amostras 2 e 3) umedeceu muito melhor do que um WPI padrão (amostra 1). Exemplo 12: Preparação de Pó para bebida instantânea
[00612] Preparação de um pó instantâneo usado como suplemento nutricional.
[00613] 100 g do pó instantâneo são preparados misturando os
144 / 145 seguintes ingredientes: 91 g de concentrado de proteína de soro de queijo compreendendo pelo menos 85% p/p de BLG, como preparado no Exemplo 4, e 4 g de lecitina de soja.
[00614] 100 g do pó instantâneo contêm 360 Kcal com uma distribuição de energia da seguinte forma: 2 E% de lipídio, 1 E% de carboidratos e 97 E% de proteínas. Os produtos alimentícios preparados a partir do pó instantâneo podem ser usados como um suplemento de proteína para o tratamento de pacientes com ou em risco de desnutrição, por exemplo, misturando o pó instantâneo com água para obter uma bebida ou adicionando o pó às refeições regulares. 10 a 15 g do pó instantâneo são agitados em água a uma temperatura de 15 a 25ºC. O pó para bebida instantânea preparada tem sabor, cor e viscosidade agradáveis. Exemplo 13: Preparação de Pó para bebida instantânea
[00615] Preparação de um pó instantâneo nutricionalmente completo compreendendo BLG.
[00616] 100 g do pó instantâneo são preparados misturando 18,2 g de óleo vegetal (uma mistura que consiste em óleo de palmiste, óleo de coco, óleo de colza e óleo de girassol), 56,4 g de xarope de glicose e 20 g de concentrado de proteína de soro de queijo que compreende pelo menos 90% p/p de BLG, como preparado no Exemplo 4, e cerca de 3 g de lecitina de soja.
[00617] Além disso, são adicionados: citrato de potássio, citrato de sódio, cloreto de sódio, fosfato de hidrogênio de magnésio, hidrogenofosfato de potássio, cloreto de magnésio, cloreto de colina, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio, L-ascorbato de sódio, aroma, sulfato de ferro, l-ascorbina ácido, sulfato de zinco, citrato de magnésio, acetato de DL-alfa-tocoferil, sulfato de manganês, amida de nicotina, D-biotina, sulfato de cobre, cálcio-D- pantotenato, ácido pteroil monoglutamínico, fluoreto de sódio, DL-alfa- tocoferol, cloridrato de tiamina, cloridrato de piridoxina, carotenóides, palmitato de retinil, riboflavina, cianocobalamina, colecalciferol, cloreto de
145 / 145 cromo, molibdênio de sódio, iodeto de potássio, selenito de sódio e fitomenadiona para obter um pó instantâneo com o seguinte perfil nutricional: 381 µg RE vitamina A, 0,91 mg de caroteno 3,3 µg de vitamina D, 5,9 mg de vitamina E α-TE, 24 µg de vitamina K, 0,69 mg de vitamina B1, 0,74 mg de vitamina B2, 8,3 mg-NE de niacina, 2,5 mg de ácido pantotênico, 0,79 µg de vitamina B6, 123 µg de ácido fólico, 0,98 µg vitamina B12, 24 µg de biotina, 60 mg de vitamina C, 156 mg de colina, 1,17 grama de sal, 469 mg de sódio, 705 mg de potássio, 578 mg de cloreto, 371 mg de cálcio, 337 mg de fósforo, 107 mg de magnésio, 7,4 mg de ferro, 5,6 mg zinco, 0,83 mg de cobre, 1,5 mg de manganês, 0,5 g de fluoreto, 48 µg de molibdênio, 26 µg de selênio, 25 µg de cromo e 61 µg de iodeto.
[00618] O pó instantâneo contém 462 Kcal/100 g com uma distribuição de energia da seguinte forma: 35,6 E% de lipídios, 48,7 E% de carboidratos e 15,7 E% de proteínas. Os produtos alimentícios preparados a partir do pó instantâneo podem ser usados como produtos alimentícios nutricionalmente completos para o tratamento de pacientes com ou em risco de desnutrição, por exemplo, misturando o pó instantâneo com água para obter uma bebida ou para ser usado para alimentação por sonda. 22 g do pó instantâneo são misturados em 85 ml de água fria (que foi fervida) para obter uma bebida de 100 kcal. 33 g do pó instantâneo são misturados em 78 ml de água fria (que foi fervida) para obter uma bebida contendo 150 kcal. O pó para bebida instantânea preparada tem sabor, cor e viscosidade agradáveis.

Claims (21)

REIVINDICAÇÕES
1. Pó para bebida instantânea, caracterizado pelo fato de que compreende pelo menos 5% p/p de beta-lactoglobulina (BLG), em que: i. pelo menos 91% p/p da quantidade total de proteína é composta por BLG, e, além disso, compreende pelo menos um ingrediente adicional selecionado do grupo que consiste em vitaminas, agente flavorizante, agente corante, minerais, adoçantes, antioxidantes, ácido alimentício, lipídios, carboidratos, prebióticos, probióticos, agentes antiespuma e proteína que não é de soro de queijo.
2. Pó, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o pó compreende ainda um ou mais dos seguintes: i. um adoçante, por exemplo, um adoçante de açúcar e/ou um adoçante sem açúcar, ii. um agente flavorizante, iii. pelo menos um ácido alimentício, por exemplo, ácido cítrico ou outros ácidos alimentícios adequados, iv. a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca da bebida instantânea é no máximo 10 mmol/g de proteína e em que uma solução a 10% p/p do pó em água desmineralizada tem um pH na faixa de 2 a 8.
3. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 2, caracterizado pelo fato de que o pó compreende pelo menos 92% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 93% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 94% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 95% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 96% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 97% p/p de BLG em relação à proteína total, pelo menos 98% p/p de BLG em relação à proteína total ou pelo menos 99% p/p de BLG em relação à proteína total.
4. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o pó compreende um teor de água em uma quantidade de no máximo 6% p/p, tal como no máximo 5% p/p, preferivelmente no máximo 4% p/p, mais preferivelmente no máximo 3% p/p, e ainda mais preferivelmente no máximo 2% p/p.
5. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que o pó compreende: i. no máximo 6% p/p de água, ii. pelo menos 15% p/p de proteína total em relação aos sólidos totais, iii. pelo menos 91% p/p de BLG em relação à proteína total, em que o pó é um pó seco.
6. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que o pó tem uma densidade aparente de pelo menos 0,30 g/mL, preferivelmente pelo menos 0,4 g/mL, mais preferivelmente 0,5 g/mL ou ainda mais preferivelmente 0,5 g/mL.
7. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que a soma de ALA e caseinomacropeptídeo (CMP) compreende pelo menos 40% p/p da proteína de pó não BLG, preferivelmente pelo menos 60% p/p, ainda mais preferivelmente pelo menos 70% p/p, e mais preferivelmente pelo menos 85% p/p da proteína de pó não BLG.
8. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que a soma das quantidades de Na, K, Mg e Ca é no máximo 10 mmol/g de proteína.
9. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que o pó tem um teor de energia na faixa de cerca de 200 a 500 kcal/100 g de pó.
10. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que a quantidade de energia da proteína é de pelo menos 7 E%, preferivelmente pelo menos 25 E%, mais preferivelmente pelo menos 30 E%, ainda mais preferivelmente pelo menos 40 E%.
11. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que a contribuição de energia do lipídio está na faixa de 0 a 60 E%.
12. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que a contribuição de energia do carboidrato está na faixa de 0 a 90 E%.
13. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que o pó em uma solução a 10% p/p em água desmineralizada tem um pH na faixa de 2 a 8 em temperatura ambiente.
14. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizado pelo fato de que o pó tem um grau de desnaturação da proteína de no máximo 10%, preferivelmente no máximo 4%, mais preferivelmente no máximo 1%, ainda mais preferivelmente no máximo 0,4% e ainda mais preferivelmente no máximo 0,1%.
15. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizado pelo fato de que o referido pó tem uma cristalinidade de BLG de pelo menos 20%, preferivelmente pelo menos 40%.
16. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizado pelo fato de que é para uso em um método para o tratamento de pacientes com ou em risco de desnutrição.
17. Pó, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, caracterizado pelo fato de que é para uso em um método para o tratamento de doença renal.
18. Kit compreendendo o pó como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizado pelo fato de que o kit compreende i. uma ferramenta para medir o referido pó, e ii. um recipiente com tampa para abrir e fechar o recipiente, em que o recipiente é para misturar o pó com um líquido para formar um produto alimentício, e o recipiente é adaptado para beber o produto alimentício diretamente do recipiente.
19. Método para preparar um produto alimentício líquido que compreende um líquido e o pó para bebida instantânea, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 17, o referido método caracterizado pelo fato de que compreende i. adicionar um pó a um líquido como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 17, ii. opcionalmente adicionar pelo menos um outro ingrediente, e iii. misturar o pó e o líquido obtido para formar uma mistura uniforme.
20. Método, de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que o ingrediente adicional é selecionado a partir de frutas ou vegetais.
21. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 20, caracterizado pelo fato de que a mistura é realizada por agitação.
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