JP2021529528A - ＰＨ中性βラクトグロブリン飲料の調製物 - Google Patents

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Abstract

本発明は、５．５〜８．０の範囲のｐＨを有する、新たな包装された熱処理飲料調製物に関する。本発明はさらに、包装された熱処理飲料調製物を製造する方法、及び包装された熱処理飲料調製物の種々の用途に関する。

Description

本発明は、５．５〜８．０の範囲のｐＨを有する、新たな包装された熱処理飲料調製物に関する。本発明はさらに、包装された熱処理飲料調製物を製造する方法、及び包装された熱処理飲料調製物の種々の用途に関する。
スポーツ栄養のために開発された飲料は、アスリートにとって独自の栄養上の利点のため組み込まれているホエイタンパク質を含む可能性が特に高い。幾つかの医療用及び治療用栄養飲料には、タンパク質合成、消化性、及び健康上の利点に不可欠なアミノ酸が豊富に含まれていることから、ホエイタンパク質も含まれている。
ホエイタンパク質は、乳清又はホエイから単離することができる。ホエイは典型的には、βラクトグロブリン（ＢＬＧ）、アルファ−ラクトアルブミン（ＡＬＡ）、血清アルブミン、及び免疫グロブリンの混合物を含み、ＢＬＧが最も優勢である。そのため、ホエイタンパク質濃縮物（ＷＰＣ）は、これらのタンパク質の混合物を含む。ホエイタンパク質単離物（ＷＰＩ）は、ＷＰＣよりも脂肪及び乳糖が少ない。
ホエイ製品は黄色になる場合がある。したがって、ホエイ製品の黄色を除去又は低減するために、過去に多くの試みが行われた。
ホエイを白くする／漂白する従来の方法は、過酸化水素（ＨＰ、Ｈ２Ｏ２）を使用してホエイを化学的に漂白することであり、これらの方法は味に悪影響を及ぼし、ホエイタンパク質のアンフォールディング及び凝集を促進する可能性がある（Ｋｒａｍｅｒ ｅｔ ａｌ，２０１７．「Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｕｎｆｏｌｄｉｎｇ ｏｎ Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｉｎｇ ｏｆ ｂｅｔａ−Ｌａｃｔｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ａｎｄ ａｌｆａ−Ｌａｃｔａｌｂｕｍｉｎ」，Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．２０１７，６５，１０２５８−１０２６９。
国際公開第２００５／００４６１６号公報Ａ１は、乳製品にリポキシゲナーゼ（ＬＯＸ）を添加することを含む、乳製品を漂白又は白くする方法を記載している。この方法をホエイ及び乳製品を白くするために使用することができる。
ホエイを白くする他の方法としては、乳製品へのクロロフィルの添加又は二酸化チタン（ＴｉＯ２）の使用が挙げられる。二酸化チタンは、チーズミルク、キャンディー、チューインガム、歯磨き粉等に使用される無機不活性白色顔料であり、食品グレードとしてＦＤＡによって承認されている。
国際公開第２０１８／１１５５２０号公報Ａ１は、塩溶様式のＢＬＧの結晶化に基づいて、食用の単離されたβラクトグロブリン組成物及び／又は結晶化βラクトグロブリンを含む組成物を製造する方法を開示している。その後、結晶化したＢＬＧを、残りの母液から分離することができる。
国際公開第２０１１／１１２６９５号公報Ａ１は、栄養組成物、並びに該栄養組成物を作製及び使用する方法を開示している。栄養組成物は、ホエイタンパク質ミセル及びロイシンを含み、低粘度の流体マトリックス及び許容可能な官能特性を維持しながら、ヒトにおけるタンパク質合成を改善するのに十分な量のロイシンを提供する。
国際公開第２０１１／０５１４３６号公報Ａ１は、ヒト又は動物の消費を目的とした少なくとも部分的に透明な組成物を開示し、またかかる組成物の包装に関する。本発明の一実施形態は、少なくとも部分的に透明な水性非アルコール組成物を含む少なくとも部分的に透明な容器に関する。該容器は、組成物中に存在する液晶を可視化する少なくとも１つの偏光子を含む。
国際公開第２００４／０４９８１９号公報Ａ２は、１つ以上の球状タンパク質の溶液を提供する工程であって、その溶液において、タンパク質（複数の場合がある）は、少なくとも部分的にフィブリルに凝集している工程、以下の工程：ｐＨを上げること；塩濃度を上げること；溶液を濃縮すること；溶液の溶媒品質を変更すること、の１つ以上をランダムな順序で実行する工程を含む、球状タンパク質の機能特性を改善するための方法を開示する。好ましくは、１つ以上の球状タンパク質の溶液は、低ｐＨでの加熱又は変性剤の添加によって提供される。このようにして得られたタンパク質添加物、食品及び非食品へのその使用、並びに該タンパク質添加物を含む食品及び非食品製品も開示されている。
国際公開第２０１０／０３７７３６号公報Ａ１は、ホエイタンパク質の単離、並びにホエイ製品及びホエイ単離物の調製を開示している。特に、本発明は、β−ラクトグロブリン生成物の単離、及び動物から得られたホエイからのαに富むホエイタンパク質単離物の単離に関する。本発明によって提供されるαに富むホエイタンパク質単離物は、β−ラクトグロブリンが低いことに加えて、アルファ−ラクトアルブミン及び免疫グロブリンＧが高い。
フランス国特許第２ ２９６ ４２８号は、任意の既知の分離プロセスによって得られた乳清タンパク質に基づく栄養学的及び治療的使用のためのタンパク質組成物を開示している。該組成物を、乳児及び成人の消化器障害（例えば、下痢）の治療又は予防、腸感染症に対する抵抗性の増加、及び特定の代謝障害（例えば、高フェニルアラニン血症）の治療に使用することができる。それらはまた、皮膚科学的又は美容的に使用することができ、低タンパク食の一部を形成することができる。
本発明者らは、ホエイタンパク質を含む飲料が無彩色又は白色である程度が、ホエイタンパク質を含む飲料に対する消費者の認識に影響を与えることを観察した。黄色がかった透明な飲料又は黄色がかった乳白色の飲料は、消費者にとって魅力的ではない。
本発明の目的は、従来のホエイ含有飲料よりも無彩色である、包装されたｐＨ中性の熱処理飲料調製物を提供することである。
もう１つの目的は、黄色を減らすためのより穏やかな方法を利用することである。更なる目的は、それが飲料の安定性に悪影響を与えてはならないということである。
本発明者らは、かかる包装された熱処理飲料が、５．５〜８．０の広い中性ｐＨ範囲内で、及び１〜２０重量％の広いタンパク質濃度内で、依然として低粘度を有し、安定であり、より無彩色で提供され得ることを発見した。本発明は、透明である飲料、及び他の実施形態では不透明である飲料の両方を提供する。
そのため、本発明の一態様は、５．５〜８．０の範囲のｐＨを有する、包装された熱処理飲料調製物であって、飲料が、
−飲料の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）であるタンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、
を含む飲料に関する。
本発明の別の態様は、５．５〜８．０の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物を製造する方法であって、以下の工程：
ａ）
−１〜２０重量％の総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５％がβラクトグロブリン（ＢＬＧ）であるタンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含む液体溶液を提供する工程、
ｂ）液体溶液を包装する工程、
を含み、
工程ａ）の液体溶液及び／又は工程ｂ）の包装された液体溶液が、少なくとも低温殺菌を含む熱処理に供される、方法に関する。
本発明のさらに別の態様は、溶液の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含むタンパク質溶液の使用に関し、５．５〜８．０の範囲のｐＨを有する滅菌飲料調製物の白色度を制御するため、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％がβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である。
本発明のさらに別の態様は、タンパク質欠乏症に関連する疾患の治療方法で使用するための、本明細書で定義される包装された熱処理飲料調製物に関する。
本発明の更なる態様は、本明細書で栄養補助食品として定義される、包装された熱処理飲料調製物の使用に関する。
ｐＨ６．０にて９４℃で１４分間加熱された乳白色のＢＬＧサンプルの画像を示す。 ｐＨ６．０にて９４℃で１４分間加熱されたゲル化ＷＰＩサンプルの画像を示す。 例９、Ａ（ＢＬＧ ９８．２ｗ／ｗ％）、Ｂ（ＢＬＧ ９５．９ｗ／ｗ％）及びＣ（ＷＰＩ）の例示的なホエイタンパク質飲料における不溶性タンパク質物質、ネイティブホエイタンパク質、可溶性ホエイタンパク質凝集物及びタンパク質ナノゲルの量を示す。 例示的な飲料Ａ（ＢＬＧ ９８．２ｗ／ｗ％）、Ｂ（ＢＬＧ ９５．９ｗ／ｗ％）、及びＣ（ＷＰＩ）のセミダイナミックｉｎ ｖｉｔｒｏ消化を示す。 次を示す：上部：サンプルのセミダイナミックｉｎ ｖｉｔｒｏ消化中に、選択した時点（１７．５〜１０５分）で回収されたタンパク質アリコートのＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析。下部：サンプルを分解している間のｐＨトレース。 胃における酸性化のシミュレーションを示す。ゲル強度を、主に可溶性ホエイタンパク質凝集物（飲料Ａ及びＷＰＩ）又はタンパク質ナノゲル（飲料Ｂ）のいずれかを含む３種類の飲料の酸性化の間に測定した。 ９０℃で５分間熱処理した後の、１０〜１６ｗ／ｗ％タンパク質の液体飲料を示す。 １０〜１６ｗ／ｗ％タンパク質において、９０℃で５分間で熱処理した後の粘度測定を示す。 １０〜１６ｗ／ｗ％タンパク質の熱処理飲料の粒子径を示す。 左からＢＬＧ粉末Ａを使用したそれぞれｐＨ６．０及びｐＨ７．０の１０ｗ／ｗ％飲料を示す。右にＢＬＧ粉末Ａ（表９より）を使用したｐＨ６．０の１２ｗ／ｗ％飲料を示す。
定義
本発明の文脈では、「βラクトグロブリン」又は「ＢＬＧ」という用語は、哺乳動物種に由来し、例えば、ネイティブの、折りたたまれていない及び／又はグリコシル化された形態であり、天然に存在する遺伝的変異体を含むβラクトグロブリンに関する。該用語はさらに、凝集性ＢＬＧ、沈殿したＢＬＧ及び結晶性ＢＬＧを含む。ＢＬＧの量に言及する場合、凝集性ＢＬＧを含むＢＬＧの総量が言及される。ＢＬＧの総量は、例１．３１に従って決定される。「凝集性ＢＬＧ」という用語は、少なくとも部分的に折りたたまれておらず、さらに、典型的には疎水性相互作用及び／又は共有結合によって、他の変性ＢＬＧ分子及び／又は他の変性ホエイタンパク質と凝集しているＢＬＧに関する。
ＢＬＧは、ウシホエイ及び乳清で最も優勢なタンパク質であり、幾つかの遺伝的変異体で存在し、牛乳の主なものはＡ及びＢと標識されている。ＢＬＧはリポカリンタンパク質であり、多くの疎水性分子に結合することができ、それらの輸送における役割を示唆している。ＢＬＧは、シデロホアを介して鉄に結合できることも示されており、病原体と戦う役割を果たしている可能性がある。ＢＬＧのホモログはヒトの母乳にはない。
ウシＢＬＧは、約１６２アミノ酸残基の比較的小さなタンパク質で、分子量は約１８．３〜１８．４ｋＤａである。生理学的条件下では、ウシＢＬＧは主に二量体であるが、核磁気共鳴分光法を使用して決定されるように、そのネイティブ状態を保持しながら、約ｐＨ３未満で単量体に解離する。逆に、ＢＬＧはまた、様々な自然条件下で、四量体、八量体、及びその他の多量体の凝集形態でも生じる。
本発明の文脈では、「非凝集性βラクトグロブリン」又は「非凝集性ＢＬＧ」という用語はまた、哺乳動物種に由来し、例えば、ネイティブの、折りたたまれていない及び／又はグリコシル化された形態であり、天然に存在する遺伝的変異体を含むβラクトグロブリンに関する。しかしながら、該用語には、凝集性ＢＬＧ、沈殿したＢＬＧ、又は結晶化ＢＬＧは含まれない。非凝集性ＢＬＧの量又は濃度は、例１．６に従って決定される。
総ＢＬＧに対する非凝集性ＢＬＧのパーセンテージは、計算（ｍ総ＢＬＧ−ｍ非凝集性ＢＬＧ）／ｍ総ＢＬＧ ＊１００％によって決定される。ｍ総ＢＬＧは、例１．３１に従って決定されるＢＬＧの濃度又は量であり、ｍ非凝集性ＢＬＧは、例１．６に従って決定される非凝集性ＢＬＧの濃度又は量である。
本発明の文脈では、「結晶」という用語は、その構成要素（原子、分子、又はイオン等）が高度に秩序化された微視的構造に配置され、全ての方向に延びる結晶格子を形成する固体材料に関する。
本発明の文脈では、「ＢＬＧ結晶」という用語は、高度に秩序化された微視的構造に配置され、全ての方向に延びる結晶格子を形成する、主に非凝集性の好ましくはネイティブのＢＬＧを含むタンパク質結晶に関する。ＢＬＧ結晶は、例えば、モノリシック又は多結晶であってもよく、例えば無傷の結晶、結晶のフラグメント、又はそれらの組み合わせであってもよい。結晶のフラグメントは、例えば、無傷の結晶が加工中に機械的剪断に供される場合に形成される。結晶のフラグメントはまた、結晶の高度に秩序化された微視的構造を有するが、無傷の結晶の均一な表面及び／又は均一な端若しくは角を欠いている場合がある。例えば、多くの無傷のＢＬＧ結晶の例についてはＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＥＰ２０１７／０８４５５３号の図１８、及びＢＬＧ結晶のフラグメントの例についてはＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＥＰ２０１７／０８４５５３号の図１３を参照されたい。いずれの場合も、ＢＬＧ結晶又は結晶フラグメントは、光学顕微鏡を使用して、明確に定義されたコンパクトでコヒーレントな構造として視覚的に識別できる。ＢＬＧ結晶又は結晶フラグメントは、多くの場合、少なくとも部分的に透明である。タンパク質結晶はさらに複屈折性であることが知られており、この光学特性を使用して、結晶構造を有する未知の粒子を識別することができる。一方、非結晶性ＢＬＧ凝集物は、輪郭がはっきりしておらず、不透明であり、不規則なサイズの開口した又は多孔性の塊として現れることがよくある。
本発明の文脈では、「結晶化」という用語は、タンパク質結晶の形成に関する。結晶化は、例えば、自発的に発生し得るか、又は結晶化シードの添加によって開始され得る。
本発明の文脈では、「食用組成物」という用語は、ヒトの消費及び食品原料としての使用に安全であり、トルエン又は他の望ましくない有機溶媒等の問題のある量の有毒な成分を含まない組成物に関する。
本発明の文脈では、「ＡＬＡ」又は「アルファ−ラクトアルブミン」という用語は、哺乳動物種に由来し、例えば、ネイティブ及び／又はグリコシル化された形態であり、天然に存在する遺伝的変異体を含むアルファ−ラクトアルブミンに関する。該用語はさらに、凝集性ＡＬＡ及び沈殿したＢＬＧを含む。ＡＬＡの量に言及する場合、例えば、凝集性ＡＬＡを含むＡＬＡの総量が言及される。ＡＬＡの総量は、例１．３１に従って決定される。「凝集性ＡＬＡ」という用語は、典型的には少なくとも部分的に折りたたまれておらず、さらに、典型的には疎水性相互作用及び／又は共有結合によって、他の変性ＡＬＡ分子及び／又は他の変性ホエイタンパク質と凝集しているＡＬＡに関する。
アルファ−ラクトアルブミン（ＡＬＡ）は、ほとんど全ての哺乳動物種の乳に存在するタンパク質である。ＡＬＡはラクトースシンターゼ（ＬＳ）ヘテロ二量体の調節サブユニットを形成し、β−１，４−ガラクトシルトランスフェラーゼ（β４Ｇａｌ−Ｔ１）は触媒成分を形成する。一緒に、これらのタンパク質は、ＬＳがガラクトース部分をグルコースに転移することによってラクトースを生成することを可能にする。βラクトグロブリンによる主な構造の違いの１つは、ＡＬＡには共有結合凝集反応の開始点としての役割を果たし得る任意の遊離チオール基がないことである。
本発明の文脈では、「非凝集性ＡＬＡ」という用語もまた、哺乳動物種に由来し、例えば、ネイティブの、折りたたまれていない及び／又はグリコシル化された形態であり、天然に存在する遺伝的変異体を含むＡＬＡに関する。しかしながら、該用語には、凝集性ＡＬＡ又は沈殿したＡＬＡは含まれない。非凝集性ＢＬＧの量又は濃度は、例１．６に従って決定される。
総ＡＬＡに対する非凝集性ＡＬＡのパーセンテージは、計算（ｍ総ＡＬＡ−ｍ非凝集性ＡＬＡ）／ｍ総ＡＬＡ ＊１００％によって決定される。ｍ総ＡＬＡは、例１．３１に従って決定されるＡＬＡの濃度又は量であり、ｍ非凝集性ＡＬＡは、例１．６に従って決定される非凝集性ＡＬＡの濃度又は量である。
本発明の文脈では、「カゼイノマクロペプチド」又は「ＣＭＰ」という用語は、例えば、ネイティブ及び／又はグリコシル化された形態であり、アスパラギン酸プロテイナーゼによる天然に存在する遺伝的変異体、例えばキモシンを含む、哺乳動物種からの「κ−ＣＮ」又は「カッパーカゼイン」の加水分解に由来する親水性ペプチド、残基１０６〜１６９に関する。
本発明の文脈では、「ＢＬＧ単離物」という用語は、総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗの量でＢＬＧを含む組成物を意味する。ＢＬＧ単離物は、好ましくは、全固形分に対して少なくとも３０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも８０％ｗ／ｗの総タンパク質含量を有する。
本発明の文脈において、「ＢＬＧ単離粉末」という用語は、粉末形態のＢＬＧ単離物、好ましくは自由流動性粉末に関する。
本発明の文脈では、「ＢＬＧ分離液」という用語は、液体形態、好ましくは水溶液のＢＬＧ単離物に関する。
「ホエイ」という用語は、乳のカゼインが沈殿して除去された後に残る液相に関する。カゼインの沈殿は、例えば乳の酸性化及び／又はレンネット酵素の使用によって達成され得る。カゼインのレンネットベースの沈殿によって生成されるホエイ生成物である「スイートホエイ」、及びカゼインの酸ベースの沈殿によって生成されるホエイ生成物である「酸ホエイ」又は「サワーホエイ」等、幾つかのタイプのホエイが存在する。カゼインの酸ベースの沈殿は、例えば、食用酸の添加又は細菌培養によって達成され得る。
「乳清」という用語は、例えば、精密濾過又は大孔径限外濾過によってカゼイン及び乳脂肪球が乳から除去されたときに残る液体に関する。乳清は、「理想的なホエイ」と称されることもある。
「乳清タンパク質」又は「血清タンパク質」という用語は、乳清中に存在するタンパク質に関する。
本発明の文脈では、「ホエイタンパク質」という用語は、ホエイ又は乳清中に見られるタンパク質に関する。ホエイタンパク質は、ホエイ若しくは乳清に見られるタンパク質種のサブセットである場合、またさらには単一のホエイタンパク質種の場合もあり、又はホエイ若しくは／及び乳清に見られるタンパク質種の完全なセットである場合がある。
本発明の文脈では、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物の主な非ＢＬＧタンパク質は、ＡＬＡ、ＣＭＰ、ウシ血清アルブミン、免疫グロブリン、オステオポンチン、ラクトフェリン、及びラクトペルオキシダーゼである。本発明の文脈では、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物の主な非ＢＬＧホエイタンパク質の重量パーセントは、以下のとおりである：
総タンパク質に対して１８％ｗ／ｗの量のＡＬＡ、
総タンパク質に対して１８％ｗ／ｗの量のＣＭＰ、
総タンパク質に対して４％ｗ／ｗの量のＢＳＡ、
総タンパク質に対して５％ｗ／ｗの量のカゼイン種、
総タンパク質に対して６％ｗ／ｗの量の免疫グロブリン、
総タンパク質に対して０．５％ｗ／ｗの量のオステオポンチン、
総タンパク質に対して０．１％ｗ／ｗの量のラクトフェリン、及び
総タンパク質に対して０．１％ｗ／ｗの量のラクトペルオキシダーゼ。
カゼインという用語は、乳に見られるカゼインタンパク質に関し、個々のカゼイン種である生乳に見られるネイティブミセルカゼインとカゼインの両方を包含する。
本発明の文脈では、「母液」という用語は、ＢＬＧが結晶化され、ＢＬＧ結晶が少なくとも部分的に除去された後に残るホエイタンパク質溶液に関する。母液にはまだ幾つかのＢＬＧ結晶が含まれている可能性があるが、通常は分離を免れた小さなＢＬＧ結晶のみが含まれている。
本発明の文脈では、「過飽和」又は「ＢＬＧに関して過飽和」である液体は、所与の物理的及び化学的条件でその液体中の非凝集性ＢＬＧの飽和点を超える溶解した非凝集性ＢＬＧの濃度を含む。「過飽和」という用語は、結晶化の分野でよく知られており（例えば、Ｇｅｒａｒｄ Ｃｏｑｕｅｒｅｌａ，「Ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｓｙｓｔｅｍｓ ｆｒｏｍ ｓｏｌｕｔｉｏｎ：ｐｈａｓｅ ｄｉａｇｒａｍｓ，ｓｕｐｅｒｓａｔｕｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｂａｓｉｃ ｃｏｎｃｅｐｔｓ」，Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ，ｐ．２２８６−２３００，Ｉｓｓｕｅ ７，２０１４を参照されたい）、過飽和は、様々な測定手法（例えば、分光法又は粒子径分析）によって決定され得る。本発明の文脈では、ＢＬＧに関する過飽和を、以下の手順によって決定する。
特定の条件設定で液体がＢＬＧに関して過飽和であるかどうかを試験する手順：
ａ）試験する液体のサンプル５０ｍＬを、高さ１１５ｍｍ、内径２５ｍｍ、及び容量５０ｍｌの遠心管（ＶＷＲカタログ番号５２５−０４０２）に移す。工程ａ）〜ｈ）の間、サンプル及びその後続する画分を液体の元の物理的及び化学的条件に保つように注意する必要がある：
ｂ）サンプルを直ちに３０００ｇで３．０分間、最大３０秒の加速及び最大３０秒の減速で遠心分離する。
ｃ）遠心分離の直後に、上清をできるだけ多く（ペレットが形成された場合にペレットを乱さずに）第２の遠心管（工程ａと同じタイプ）に移す。
ｄ）上清のサブサンプル０．０５ｍＬ（サブサンプルＡ）を採取する。
ｅ）粒子径が最大２００ミクロンのＢＬＧ結晶１０ｍｇ（全固形分に対して少なくとも９８％の純粋な非凝集性ＢＬＧ）を第２の遠心管に加え、混合物を攪拌する。
ｆ）第２の遠心管を元の温度で６０分間放置する。
）工程ｆ）の直後に、第２の遠心管を５００ｇで１０分間遠心分離し、上清の別のサブサンプル（サブサンプルＢ）０．０５ｍＬを採取する。
ｈ）工程ｇ）の遠心分離ペレットを回収し、存在する場合は、ｍｉｌｌｉＱ水に再懸濁し、顕微鏡で見える結晶の存在について懸濁液を直ちに調べる。
ｉ）例１．６に概説されている方法を使用して、サブサンプルＡ及びＢの非凝集性ＢＬＧの濃度を決定する。結果を、サブサンプルの総重量に対する％ＢＬＧｗ／ｗとして表す。サブサンプルＡの非凝集性ＢＬＧの濃度はＣＢＬＧ，Ａと称され、サブサンプルＢの非凝集性ＢＬＧの濃度はＣＢＬＧ，Ｂと称される。
ｊ）工程ａ）のサンプルを採取した液体は、ＣＢＬＧ，ＢがＣＢＬＧ，Ａよりも低く、且つ工程ｉ）で結晶が観察される場合、（特定の条件で）過飽和であった。
本発明の文脈では、「液体」及び「溶液」という用語は、例えば、タンパク質結晶又は他のタンパク質粒子等の粒子状物質を含まない組成物と、液体並びに固体及び／又は半固体粒子の組み合わせを含む組成物の両方を包含する。したがって、「液体」又は「溶液」は、懸濁液であり得るか、さらにはスラリーであり得る。ただし、「液体」及び「溶液」は、好ましくはポンプ輸送可能である。
本発明の文脈では、「ホエイタンパク質濃縮物」（ＷＰＣ）及び「血清タンパク質濃縮物」（ＳＰＣ）という用語は、全固形分に対して２０〜８９％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む乾燥又は水性組成物に関する。
ＷＰＣ又はＳＰＣは、好ましくは以下を含む：
全固形分に対して２０〜８９％ｗ／ｗのタンパク質、
総タンパク質に対して１５〜７０％ｗ／ｗのＢＬＧ、
総タンパク質に対して８〜５０％ｗ／ｗのＡＬＡ、及び
タンパク質に対して０〜４０％ｗ／ｗのＣＭＰ。
或いは、しかしまた好ましいことに、ＷＰＣ又はＳＰＣは以下を含み得る：
全固形分に対して２０〜８９％ｗ／ｗのタンパク質、
総タンパク質に対して１５〜９０％ｗ／ｗのＢＬＧ、
総タンパク質に対して４〜５０％ｗ／ｗのＡＬＡ、及び
タンパク質に対して０〜４０％ｗ／ｗのＣＭＰ。
好ましくは、ＷＰＣ又はＳＰＣは以下を含む：
全固形分に対して２０〜８９％ｗ／ｗのタンパク質、
総タンパク質に対して１５〜８０％ｗ／ｗのＢＬＧ、
総タンパク質に対して４〜５０％ｗ／ｗのＡＬＡ、及び
タンパク質に対して０〜４０％ｗ／ｗのＣＭＰ。
より好ましくは、ＷＰＣ又はＳＰＣは以下を含む：
全固形分に対して７０〜８９％ｗ／ｗのタンパク質、
総タンパク質に対して３０〜９０％ｗ／ｗのＢＬＧ、
総タンパク質に対して４〜３５％ｗ／ｗのＡＬＡ、及び
タンパク質に対して０〜２５％ｗ／ｗのＣＭＰ。
ＳＰＣには典型的には、ＣＭＰが含まれていないか、微量のＣＭＰのみが含まれている。
「ホエイタンパク質単離物」（ＷＰＩ）及び「血清タンパク質単離物」（ＳＰＩ）という用語は、全固形分に対して９０〜１００％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む乾燥又は水性組成物に関する。
ＷＰＩ又はＳＰＩは、好ましくは以下を含む：
全固形分に対して９０〜１００％ｗ／ｗのタンパク質、
総タンパク質に対して１５〜７０％ｗ／ｗのＢＬＧ、
総タンパク質に対して８〜５０％ｗ／ｗのＡＬＡ、及び
総タンパク質に対して０〜４０％ｗ／ｗのＣＭＰ。
或いは、しかしまた好ましいことに、ＷＰＩ又はＳＰＩは以下を含み得る：
全固形分に対して９０〜１００％ｗ／ｗのタンパク質、
総タンパク質に対して３０〜９５％ｗ／ｗのＢＬＧ、
総タンパク質に対して４〜３５％ｗ／ｗのＡＬＡ、及び
総タンパク質に対して０〜２５％ｗ／ｗのＣＭＰ。
より好ましくは、ＷＰＩ又はＳＰＩは以下を含み得る：
全固形分に対して９０〜１００％ｗ／ｗのタンパク質、
総タンパク質に対して３０〜９０％ｗ／ｗのＢＬＧ、
総タンパク質に対して４〜３５％ｗ／ｗのＡＬＡ、及び
総タンパク質に対して０〜２５％ｗ／ｗのＣＭＰ。
ＳＰＩには典型的には、ＣＭＰが含まれていないか、微量のＣＭＰのみが含まれている。
本発明の文脈では、「追加のタンパク質」という用語は、ＢＬＧではないタンパク質を意味する。ホエイタンパク質溶液に存在する追加のタンパク質は、典型的には、乳清又はホエイに見られる非ＢＬＧタンパク質の１つ以上を含む。かかるタンパク質の非限定的な例は、アルファ−ラクトアルブミン、ウシ血清アルブミン、免疫グロブリン、カゼイノマクロペプチド（ＣＭＰ）、オステオポンチン、ラクトフェリン、及び乳脂肪球膜タンパク質である。
「から本質的になる」及び「から本質的になっている」という用語は、問題の請求項又は特徴が、特定の材料又は工程、並びに特許請求の範囲に記載された発明の基本的及び新規の特性（複数の場合がある）に実質的に影響を与えないものを包含することを意味する。
本発明の文脈では、「Ｙ及び／又はＸ」という句は、「Ｙ」若しくは「Ｘ」又は「Ｙ及びＸ」を意味する。同じ論理に沿って、「ｎ１、ｎ２、…、ｎｉ−１、及び／又はｎｉ」という句は、「ｎ１」若しくは「ｎ２」若しくは…若しくは「ｎｉ−１」若しくは「ｎｉ」、又は成分：ｎ１、ｎ２、…ｎｉ−１、及びｎｉの任意の組み合わせを意味する。
本発明の文脈では、「乾燥する」又は「乾燥した」という用語は、問題の組成物又は生成物が、最大１０％ｗ／ｗの水、好ましくは最大６％ｗ／ｗ、より好ましくはさらに少ない水を含むことを意味する。
本発明の文脈では、「物理的微生物減少」という用語は、組成物の生存可能な微生物の総量の減少をもたらす組成物との物理的相互作用に関する。該用語は、結果として微生物を死滅させる化学物質の添加を包含しない。該用語はさらに、噴霧乾燥中に噴霧された液滴がさらされる熱曝露を含まないが、噴霧乾燥前の可能な予熱を含む。
本発明の文脈では、粉末のｐＨは、９０ｇの脱塩水に混合した１０ｇの粉末のｐＨを指し、例１．１６に従って測定される。
本発明の文脈では、特定の組成物の成分、製品、又は材料の重量パーセント（％ｗ／ｗ）は、別の基準（例えば、全固形分又は総タンパク質）が具体的に言及されていない限り、特定の組成物、製品、又は材料の重量に対するその成分の重量パーセントを意味する。
本発明の文脈では、プロセスの工程である「濃縮」及び動詞「濃縮する」は、タンパク質の濃度に関するものであり、全固形分ベースのタンパク質の濃度及び総重量ベースのタンパク質の濃度の両方を包含する。これは、例えばその濃度は、タンパク質の含有量が全固形分に対して増加する限り、組成物のタンパク質の絶対濃度ｗ／ｗが増加することを必ずしも必要としない。
本発明の文脈では、成分Ｘと成分Ｙとの間の「重量比」という用語は、計算ｍＸ／ｍＹによって得られる値を意味し、式中、ｍＸは、成分Ｘの量（重量）であり、ｍＹは、成分Ｙの量（重量）である。
本発明の文脈では、「少なくとも低温殺菌」という用語は、７０℃で１０秒間の熱処理以上の微生物死滅効果を有する熱処理に関する。殺菌効果を決定するための基準は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）Ｏ１５７：Ｈ７である。
本発明の文脈では、「ホエイタンパク質フィード」という用語は、液体ＢＬＧ単離物が由来するホエイタンパク質源に関する。ホエイタンパク質フィードは、液体ＢＬＧ単離物よりも総タンパク質に対するＢＬＧの含有量が少なく、典型的にはＷＰＣ、ＷＰＩ、ＳＰＣ、又はＳＰＩである。
本発明の文脈では、「ＢＬＧに富む組成物」という用語は、ホエイタンパク質フィードからＢＬＧを単離することから生じるＢＬＧに富む組成物に関する。ＢＬＧに富む組成物は、典型的には、ホエイタンパク質フィードと同じホエイタンパク質を含むが、ホエイタンパク質フィードよりも総タンパク質に対して著しく高い濃度でＢＬＧが存在する。ＢＬＧに富む組成物は、例えば、クロマトグラフィー、タンパク質結晶化及び／又は膜ベースのタンパク質分画によってホエイタンパク質フィードから調製され得る。ＢＬＧに富む組成物は、総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗの量のＢＬＧを含む。場合によっては、ＢＬＧに富む組成物を液体ＢＬＧ単離物として直接使用することができる。ただし、ＢＬＧに富む組成物を液体ＢＬＧ単離物に変換するには、多くの場合、追加の処理が必要である。
本発明の文脈では、「ホエイタンパク質溶液」という用語は、塩溶様式でＢＬＧに関して過飽和であり、ＢＬＧ結晶を調製するのに有用である特殊な水性ホエイタンパク質組成物を説明するために使用される。
本発明の文脈では、「滅菌」という用語は、問題の滅菌組成物、又は製品がいかなる生存可能な微生物も含まず、したがって、室温での貯蔵中に微生物の増殖がないことを意味する。滅菌された組成物は無菌である。
飲料調製物等の液体を滅菌し、滅菌容器に無菌的に包装する場合、典型的には、室温で少なくとも６ヵ月の貯蔵寿命がある。滅菌処理は、液体の腐敗を引き起こす可能性のある胞子及び微生物を死滅させる。
本発明の文脈では、「エネルギー含量」という用語は、食品に含まれるエネルギーの総含有量を意味する。エネルギー含量は、キロジュール（ｋＪ）又はキロカロリー（ｋｃａｌ）で測定でき、食品の量あたりのカロリー、例えば、食品１００グラムあたりのｋｃａｌと称される。一例は、３５０ｋｃａｌ／１００グラムの飲料のエネルギー含量を有する飲料である。
食品の総エネルギー含量には、食品に存在する全ての多量栄養素からのエネルギー寄与、例えばタンパク質、脂質、及び炭水化物からのエネルギーが含まれる。食品中の多量栄養素からのエネルギーの分布は、食品中の多量栄養素の量、及び食品中の総エネルギー含量に対する多量栄養素の寄与に基づいて計算できる。エネルギー分布は、食品の総エネルギー含量のエネルギーパーセント（Ｅ％）として表すことができる。例えば、タンパク質２０Ｅ％、炭水化物５０Ｅ％、脂質３０Ｅ％を含む飲料の場合、これは、総エネルギーの２０％がタンパク質に由来し、総エネルギーの５０％が炭水化物に由来し、総エネルギーの３０％が脂肪（脂質）に由来することを意味する。
「栄養的に完全な栄養補助食品」という用語は、タンパク質、脂質、及び炭水化物を含み、さらにビタミン、ミネラル、及び微量元素を含む食品を意味し、該食品は完全で健康的な食事に一致する栄養プロファイルを有する。
本発明の文脈において、「栄養的に不完全な栄養補助食品」という用語は、１つ以上の多量栄養素を含み、任意に、さらにビタミン、ミネラル、及び微量元素を含む食品を意味する。栄養的に不完全な飲料は、唯一の栄養素としてタンパク質を含んでもよく、又は例えば、タンパク質及び炭水化物を含んでもよい。
「特別な医療目的の食品（ＦＳＭＰ：ｆｏｏｄ ｆｏｒ ｓｐｅｃｉａｌ ｍｅｄｉｃａｌ ｐｕｒｐｏｓｅｓ）」又は「医療用食品」という用語は、経口摂取又は経管栄養用の食品であり、特有の栄養要求がある特定の医学的障害、疾患、又は状態に対して使用され、また医学的管理下で使用される。医療用食品は、栄養的に完全な栄養補助食品／飲料であってもよく、又は栄養的に不完全な栄養補助食品／飲料であってもよい。
「栄養素」という用語は、生物が生き残り、成長し、繁殖するために使用する物質を意味する。栄養素は、多量栄養素又は微量栄養素のいずれであってもよい。多量栄養素は、消費されたときにエネルギーを提供する栄養素、例えば、タンパク質、脂質、及び炭水化物である。微量栄養素は、ビタミン、ミネラル、及び微量元素のような栄養素である。
「栄養素」という用語は、生物が生き残り、成長し、繁殖するために使用する物質を意味する。栄養素は、多量栄養素又は微量栄養素のいずれであってもよい。多量栄養素は、消費されたときにエネルギーを提供する栄養素、例えば、タンパク質、脂質、及び炭水化物である。微量栄養素は、ビタミン、ミネラル、及び微量元素の栄養素である。
「インスタント飲料粉末」又は「インスタント飲料粉末製品」という用語は、水等の液体の添加によって液体飲料に変換することができる粉末を意味する。
本発明の文脈では、実質的なものとして使用される「飲料調製物」及び「調製物」という用語は、例えば、注ぐ、すする、又は経管栄養によって飲料として摂取することができる任意の水ベースの液体に関する。
本発明の文脈では、「タンパク質画分」という用語は、問題の組成物のタンパク質、例えば、粉末又は飲料調製物のタンパク質に関する。
本発明の文脈では、「渋味」という用語は、口当たりに関する。渋味は頬の筋肉の収縮のように感じ、唾液の産生を増加させる。したがって、渋味は、それ自体が味ではなく、物理的な口当たり及び口の中の時間依存性の感覚である。
本発明の文脈では、「乾いた口当たり」という用語は、口の中の感触に関し、口及び歯が乾燥しているように感じ、唾液の産生が最小限に抑えられる。
そのため、乾いた口当たりは、それ自体は味ではないが、物理的な口当たり及び口の中の時間依存性の感覚である。
本発明の文脈では、本明細書で使用される「ミネラル」という用語は、別段の指定がない限り、主要なミネラル、微量又は少数のミネラル、他のミネラル、及びそれらの組み合わせのいずれか１つを指す。主なミネラルとしては、カルシウム、リン、カリウム、硫黄、ナトリウム、塩素、マグネシウムが挙げられる。微量又は少数のミネラルとしては、鉄、コバルト、銅、亜鉛、モリブデン、ヨウ素、セレン、マンガンが挙げられ、その他のミネラルとしては、クロム、フッ素、ホウ素、リチウム、及びストロンチウムが挙げられる。
本発明の文脈では、本明細書で使用される「脂質」、「脂肪」、及び「油」という用語は、別段の指定がない限り、植物若しくは動物に由来するか、又はそれらから加工される脂質材料を指すために同じ意味で使用される。これらの用語には、合成脂質材料がヒトの消費に適している限り、かかる合成脂質材料も含まれる。
本発明の文脈では、「透明」という用語は、視覚的に清澄な外観を有し、光を通し、それを通して明瞭な画像が現れる飲料調製物を包含する。透明な飲料の濁度は最大２００ＮＴＵである。
本発明の文脈では、「不透明」という用語は、目に見えて不明瞭な外観を有する飲料調製物を包含し、それは２００ＮＴＵを超える濁度を有する。
本発明の一態様は、５．５〜８．０の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、飲料が
−飲料の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５％ｗ／ｗがβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、タンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含む飲料に関する。
本発明の利点は、中性のｐＨ及び低粘度を有する飲用飲料を製造できることである。
包装された熱処理飲料調製物のタンパク質の少なくとも８５％ｗ／ｗがＢＬＧであることは、多くの理由で非常に有益である。
利点は、本発明による包装された熱処理飲料調製物が、同様のＷＰＩ飲料と比較して、より安定であり、着色が少ないことである。
これは、本発明の包装された熱処理飲料調製物によって得られる。そのため、驚くべきことに、より黄色がかった色を有する熱処理されたｐＨ中性のＷＰＩ飲料と比較して、高タンパク質濃度が適用された場合であっても、包装された熱処理飲料はより着色が少ないことがわかった。
そのため、本発明の包装された熱処理飲料の本発明の組成物に起因して、黄色を除去又は低減するために漂白又は追加の白色化が必要とされないことが利点である。
本発明の包装された熱処理飲料調製物の幾つかの好ましい実施形態では、タンパク質の少なくとも８５％ｗ／ｗがＢＬＧである。好ましくは、タンパク質の少なくとも８８％ｗ／ｗがＢＬＧであり、より好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも９１％ｗ／ｗ、最も好ましくは少なくとも９２％ｗ／ｗのタンパク質がＢＬＧである。
さらに高い相対量のＢＬＧが実現可能かつ望ましいため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物のタンパク質の少なくとも９４％ｗ／ｗはＢＬＧであり、より好ましくは、タンパク質の少なくとも９６％ｗ／ｗがＢＬＧであり、さらにより好ましくは、タンパク質の少なくとも９８％ｗ／ｗがＢＬＧであり、最も好ましくは、タンパク質のおよそ１００％ｗ／ｗがＢＬＧである。
例えば、包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは、総タンパク質に対して少なくとも９７．５％ｗ／ｗの量、好ましくは少なくとも９８．０％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも９８．５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも９９．０％の量のＢＬＧ、最も好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９９．５％ｗ／ｗ、総タンパク質に対しておよそ１００．０％ｗ／ｗ等の量のＢＬＧを含む。
包装された熱処理飲料調製物のタンパク質は、好ましくは哺乳動物の乳から、好ましくは反芻動物の乳、例えばウシ、ヒツジ、ヤギ、スイギュウ、ラクダ、ラマ、ウマ及び／又はシカ由来の乳から調製される。ウシの乳由来のタンパク質が特に好ましい。したがって、包装された熱処理飲料調製物のタンパク質は、好ましくはウシの乳タンパク質である。
包装された熱処理飲料調製物のタンパク質は、好ましくはホエイタンパク質又は乳清タンパク質であり、さらにより好ましくはウシのホエイタンパク質又は乳清タンパク質である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、少なくとも低温殺菌されている。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、無菌である。
飲料調製物の外観は、透明及び不透明の飲料の両方に関して消費者にとって重要である。特に、清澄で水のような飲料、又は白色で乳白色の飲料の場合、本発明者らは、飲料の色を制御できること、又はむしろ飲料の色の欠如を制御できることが有利であることを見出した。
しかしながら、飲料の製造中に専用の着色剤が添加されたとしても、本発明者らは、飲料の望ましくない変動又は外観の変化を回避するために、追加の色源を回避できることが有利であることを見出した。本発明者らは、本明細書に記載の高いＢＬＧタンパク質プロファイルが、従来のＷＰＩよりも色が無彩色／無色であり、従来のＷＰＩよりも少ない色の変化で寄与することを見出した。従来のＷＰＩは黄色がかった外観をしており、これは、漂白剤等の酸化剤を添加することである程度減少する可能性がある。しかしながら、酸化剤の添加はしばしば望ましくなく、本発明ではそれはもはや必要でさえない。
例１．９で説明されているＣＩＥＬＡＢカラースケールは、飲料の色を決定するために使用される。例として、正のデルタｂ＊値は、脱塩水よりも黄色がかった色を示し、一方、負のデルタｂ＊値は、脱塩水よりも青みがかった飲料を示す。したがって、消費者には、黄色でも青色でもない飲料を得るために、色デルタｂ＊値を０に近づけることがしばしば好まれる。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、特に調製物が最大２００ＮＴＵ、より好ましくは最大４０ＮＴＵの濁度を有する場合、包装された熱処理飲料調製物は、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで−０．１０〜＋０．５１の範囲の色値デルタｂ＊を有する。
本発明の他の好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで０．０〜０．４０の範囲、好ましくは＋０．１０〜＋０．２５の範囲の色値デルタｂ＊を有する。
例えば、２００ＮＴＵ超、好ましくは１０００ＮＴＵ超の濁度を有する不透明な飲料の調製の場合、包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで−６〜−１．７の範囲、好ましくは−５．０〜−２．０の範囲の色値デルタｂ＊を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、特に調製物が最大２００ＮＴＵ、より好ましくは最大４０ＮＴＵの濁度を有する場合、包装された熱処理飲料調製物のタンパク質画分は、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで−０．１０〜＋０．５１の範囲の色値デルタｂ＊を有する。
これらの飲料は、デルタｂ＊値が高く黄色が多いＷＰＩを含む飲料と比較して、黄色が少なくなっている。
本発明の幾つかの他の好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物のタンパク質画分は、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで０．０〜０．４０の範囲、好ましくは＋０．１０〜＋０．２５の範囲の色値デルタｂ＊を有する。
ａ＊値は緑及び赤の成分を表し、緑は負の方向、赤は正の方向である。赤でも緑でもない飲料を得るには、色デルタａ＊値をほぼゼロにすることがしばしば好ましい。
典型的には、特に調製物が最大２００ＮＴＵ、より好ましくは最大４０ＮＴＵの濁度を有する場合、包装された熱処理飲料調製物のタンパク質画分は、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで−０．２〜０．２の範囲のデルタａ＊を有する。
好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで−０．１５〜０．１５の範囲、好ましくは−０．１０〜０．１０の範囲の色値デルタａ＊を有する。
本発明者らは、包装された熱処理飲料調製物の所望の特性の幾つかに達するようにミネラル含量を制御することが有利となり得ることを見出した。
本発明者らは、驚くべきことに、本明細書で定義されるＢＬＧ単離物を使用すると、粘度を損なうことなく、ゲル化を回避して、高ミネラル濃度を有する飲料調製物を製造できることを見出した（例２を参照されたい）。これにより、高いミネラル含量を有する包装された熱処理飲料調製物を製造できる可能性があり、栄養的に完全な栄養補助食品又は栄養的に不完全な栄養補助食品である飲料を製造できる可能性がある。
本発明の幾つかの実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、複数のミネラルを含む。例示的な一実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、少なくとも４種類のミネラルを含む。一実施形態では、４種類のミネラルは、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、及びカルシウムである。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、Ｎａ、Ｋ、Ｍｇ及びＣａの量の合計は、包装された熱処理飲料調製物中に０〜４００ｍＭの範囲内、好ましくは１０〜２００ｍＭの範囲内、又は好ましくは２０〜１００ｍＭの範囲内である。
本発明の他の好ましい実施形態では、Ｎａ、Ｋ、Ｍｇ及びＣａの量の合計は、包装された熱処理飲料調製物中に０〜１００ｍＭの範囲であり、より好ましくは５〜５０ｍＭの範囲であり、さらにより好ましくは１０〜３５ｍＭの範囲である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、Ｎａ、Ｋ、Ｍｇ及びＣａの量の合計は、包装された熱処理飲料調製物中に最大４００ｍＭである。
本発明の他の好ましい実施形態では、Ｎａ、Ｋ、Ｍｇ及びＣａの量の合計は、包装された熱処理飲料調製物中に最大３００ｍＭ、好ましくは最大２００ｍＭ、好ましくは最大１００ｍＭ、又は好ましくは最大８０ｍＭ、又は好ましくは最大６０ｍＭ、又は好ましくは最大４０ｍＭ、又は好ましくは最大３０ｍＭ、又は好ましくは最大２０ｍＭ、又は好ましくは最大２０ｍＭ、又は好ましくは最大１０ｍＭ、又は好ましくは最大５ｍＭ、又は好ましくは最大１ｍＭである。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、Ｍｇ及びＣａの量の合計は、包装された、熱処理飲料調製物中に最大７５ｍＭ、より好ましくは包装された熱処理飲料調製物中に最大４０ｍＭ、より好ましくは包装された熱処理飲料調製物中に最大２０ｍＭである。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、Ｍｇ及びＣａの量の合計は、包装された熱処理飲料調製物中に最大１０ｍＭ、より好ましくは包装された熱処理飲料調製物中に最大８．０ｍＭ、より好ましくは包装された熱処理飲料調製物中に最大６．０ｍＭ、さらにより好ましくは包装された熱処理飲料調製物中に最大４．０ｍＭ、最も好ましくは包装された熱処理飲料調製物中に最大２．０ｍＭである。
本発明の別の例示的な実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、カルシウム、ヨウ素、亜鉛、銅、クロム、鉄、リン、マグネシウム、セレン、マンガン、モリブデン、ナトリウム、カリウム、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される複数のミネラルを含む。
本発明の他の好ましい実施形態では、熱処理された飲料調製物は、低ミネラル飲料である。
本発明の文脈において、「低ミネラル」という用語は、以下：
−全固形分に対して最大１．２％ｗ／ｗ透明の灰分、
−全固形分に対して最大０．３％ｗ／ｗのカルシウム及びマグネシウムの総含有量、
−全固形分に対して最大０．１０％ｗ／ｗのナトリウム及びカリウムの総含有量、
−タンパク質１００ｇあたり最大１００ｍｇのリンの総含有量、の少なくとも１つ、好ましくは２つ、さらにより好ましくは全てを有する組成物、例えば、液体、飲料、粉末又は別の食品に関する。
好ましくは、低ミネラル組成物は、以下：
−全固形分に対して最大０．７％ｗ／ｗの灰分、
−全固形分に対して最大０．２％ｗ／ｗのカルシウム及びマグネシウムの総含有量、
−全固形分に対して最大０．０８％ｗ／ｗのナトリウム及びカリウムの総含有量、
−タンパク質１００ｇあたり最大８０ｍｇのリンの総含有量、の少なくとも１つ、好ましくは２つ以上、さらにより好ましくは全てを有する。
さらにより好ましくは、低ミネラル組成物は、以下：
−全固形分に対して最大０．５％ｗ／ｗの灰分、
−全固形分に対して最大０．１５％ｗ／ｗのカルシウム及びマグネシウムの総含有量、
−全固形分に対して最大０．０６％ｗ／ｗのナトリウム及びカリウムの総含有量、
−タンパク質１００ｇあたり最大５０ｍｇのリンの総含有量、の少なくとも１つ、好ましくは２つ以上、さらにより好ましくは全てを有する。
低ミネラル組成物は、以下：
−全固形分に対して最大０．５％ｗ／ｗの灰分、
−全固形分に対して最大０．１５％ｗ／ｗのカルシウム及びマグネシウムの総含有量、
−全固形分に対して最大０．０６％ｗ／ｗのナトリウム及びカリウムの総含有量、
−タンパク質１００ｇあたり最大５０ｍｇのリンの総含有量、を有することが特に好ましい。
本発明の別の例示的な実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、カルシウム、ヨウ素、亜鉛、銅、クロム、鉄、リン、マグネシウム、セレン、マンガン、モリブデン、ナトリウム、カリウム、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される複数のミネラルを含む。
本発明者らは、本発明により、腎疾患を患っているか、そうでなければ腎機能が低下している患者に有利である、リン、及びカリウム等の他のミネラルの含有量が非常に少ない包装された熱処理飲料調製物を調製できることを見出した。
包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは低リン飲料調製物である。
包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは低カリウム飲料調製物である。
包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは、低リン及び低カリウム飲料調製物である。
本発明の文脈において、「低リン」という用語は、タンパク質１００ｇあたり最大１００ｍｇのリンの総含有量を有する組成物、例えば、液体、粉末、又はその他の食品に関する。好ましくは、低リン組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大８０ｍｇのリンの総含有量を有する。より好ましくは、低リン組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大５０ｍｇのリンの総含有量を有し得る。さらにより好ましくは、低リン組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大２０ｍｇのリンのリン総含有量を有し得る。さらにより好ましくは、低リン組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大５ｍｇのリンのリン総含有量を有し得る。本発明による低リン組成物を、腎機能が低下している患者群に対する食品を製造するための食品原料として使用することができる。
そのため、本発明の幾つかの特に好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質１００ｇあたり最大８０ｍｇのリンを含む。好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質１００ｇあたり最大３０ｍｇのリンを含む。より好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質１００ｇあたり最大２０ｍｇのリンを含む。さらにより好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質１００ｇあたり最大１０ｍｇのリンを含む。最も好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質１００ｇあたり最大５ｍｇのリンを含む。
リンの含有量は、問題の組成物の元素リンの総量に関連し、例１．１９に従って決定される。
本発明の文脈において、「低カリウム」という用語は、タンパク質１００ｇあたり最大７００ｍｇのカリウムの総含有量を有する組成物、例えば、液体、粉末、又はその他の食品に関する。好ましくは、低カリウム組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大６００ｍｇのカリウムの総含有量を有する。より好ましくは、低カリウム組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大５００ｍｇのカリウムの総含有量を有し得る。より好ましくは、低カリウム組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大４００ｍｇのカリウムのカリウム総含有量を有し得る。より好ましくは、低カリウム組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大３００ｍｇのカリウムのカリウム総含有量を有し得る。さらにより好ましくは、低カリウム組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大２００ｍｇのカリウムのカリウム総含有量を有し得る。さらにより好ましくは、低カリウム組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大１００ｍｇのカリウムのカリウム総含有量を有し得る。さらにより好ましくは、低カリウム組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大５０ｍｇのカリウムのカリウム総含有量を有し得て、さらにより好ましくは、低カリウム組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大１０ｍｇのカリウムのカリウム総含有量を有し得る。
本発明による低カリウム組成物を、腎機能が低下している患者群に対する食品を製造するための食品原料として使用することができる。
そのため、本発明の幾つかの特に好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質１００ｇあたり最大６００ｍｇのカリウムを含む。より好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質１００ｇあたり最大５００ｍｇのカリウムを含む。より好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質１００ｇあたり最大４００ｍｇのカリウムを含む。より好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質１００ｇあたり最大３００ｍｇのカリウムを含む。より好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質１００ｇあたり最大２００ｍｇのカリウムを含む。より好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質１００ｇあたり最大１００ｍｇのカリウムを含む。さらにより好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質１００ｇあたり最大５０ｍｇのカリウムを含み、さらにより好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質１００ｇあたり最大１０ｍｇのカリウムを含む。
カリウムの含有量は、問題の組成物の元素カリウムの総量に関連し、例１．１９に従って決定される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、リン最大１００ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大７００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、好ましくはリン最大８０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大６００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、より好ましくはリン最大６０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大５００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、より好ましくはリン最大５０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大４００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、又はより好ましくはリン最大２０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大２００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、又はさらにより好ましくはリン最大１０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大５０ｍｇ／タンパク質１００ｇを含む。本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、リン最大１００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、及びカリウム最大３４０ｍｇ／タンパク質１００ｇを含む。
少量のリン及びカリウムを含む熱処理飲料調製は、有利には炭水化物及び脂質で補充することができ、熱処理飲料調製物は、好ましくは飲料の総エネルギー含量の３０〜６０％の範囲、好ましくは３５〜５０Ｅ％の範囲の炭水化物の総量、及び総エネルギー含量の２０〜６０％の範囲、好ましくは、３０〜５０Ｅ％の範囲の脂質の総量をさらに含む。
本発明の一実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、複数のビタミンを含む。例示的な一実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、少なくとも１０種類のビタミンを含む。例示的な一実施形態では、実質的に清澄な液体栄養組成物は、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ３、ビタミンＢ５、ビタミンＢ６、ビタミンＢ７、ビタミンＢ９、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＫ、リボフラビン、パントテン酸、ビタミンＥ、チアミン、ナイアシン、葉酸、ビオチン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される複数のビタミンを含む。
本発明の一実施形態では、包装された熱処理飲料は、複数のビタミン及び複数のミネラルを含む。
本発明の幾つかの実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、酢酸、安息香酸、酪酸、乳酸、ラクトビオン酸、フマル酸、コハク酸、アスコルビン酸、アジピン酸、リン酸、及びそれらの混合物からなる群から選択される１つ以上の食用酸を含む。
幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、任意に、甘味料、糖ポリマー、及び／又は香料を含む。
本発明の一実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、塩、調味料、うまみ調味料及び／又は香辛料からなる群から選択される香料を含む。本発明の好ましい実施形態では、香料は、チョコレート、ココア、レモン、オレンジ、ライム、ストロベリー、バナナ、フォレストフルーツフレーバー又はそれらの組み合わせを含む。香料の選択は、製造する飲料によって異なり得る。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、６．５〜７．５の範囲のｐＨを有する。最も好ましくは、採用されるｐＨは、６．５〜７．０のｐＨ又は６．８〜７．２のｐＨである。
外観に関して、驚くべきことに、タンパク質の少なくとも８５％ｗ／ｗがＢＬＧであるホエイタンパク質飲料の使用により、熱処理ＷＰＩ飲料と比較した場合に視覚（色及び濁度）と粘度の両方を改善する可能性があることがわかった。
包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは５．５〜６．２の範囲のｐＨを有し、或いは包装された熱処理飲料調製物は６．２〜８．０の範囲のｐＨを有する。
或いは、包装された熱処理飲料調製物は、６．８〜８．０の範囲のｐＨを有し、より好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は６．２〜８．０の範囲のｐＨを有する。
本発明の包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは、清澄で透明であり、６．２〜８．０の範囲のｐＨ、好ましくはｐＨ６．３〜７．６、より好ましくは６．５〜７．２のｐＨで低粘度を有することがわかった。
本発明の包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは、ｐＨ５．５〜８．０の範囲のｐＨで、好ましくは５．７〜６．８、より好ましくは５．８〜６．０のｐＨで低粘度及び乳白色の外観を有することがわかった。。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、本発明の飲料調製物は、ｐＨ５．６〜６．２の範囲のｐＨ、好ましくは５．６〜８．０のｐＨで熱処理され、任意に炭水化物、脂肪、ミネラル及びビタミンの供給源と混合され、６．２〜８．０の好ましいｐＨに調整され、第２の熱処理（ＵＨＴ）に供されることが好ましいとわかった。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、最大２００ＮＴＵの濁度を有する。
包装された熱処理飲料調製物の外観が消費者に着目される。透明性は、消費者が製品を評価するために使用するパラメーターである。飲料調製物の透明度を決定する１つの方法は、例１．７に記載されているように飲料の濁度を測定することによるものである。
包装された熱処理飲料調製物の幾つかの実施形態では、飲料調製物が透明であることが有益である。これは、例えば、飲料がスポーツ飲料として、又は「タンパク質水」で使用される場合に有利である可能性があり、その場合、飲料は外観が水に似ていることが有益である。
本発明の好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、最大２００ＮＴＵの濁度を有し、かかる飲料は、透明及び／又は透明である。
驚くべきことに、本発明による熱処理された飲料調製物によって、最大２００ＮＴＵの濁度を有する透明な熱処理された飲料調製物が得られたことが本発明者らによって見出された。
これは、適用された熱処理が滅菌及び低温殺菌のいずれの場合でも認められた。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、最大１５０ＮＴＵの濁度、又は好ましくは最大１００ＮＴＵの濁度、又は好ましくは最大８０ＮＴＵの濁度、又は好ましくは最大６０ＮＴＵの濁度、又はより好ましくは最大４０ＮＴＵの濁度、又は好ましくは最大３０ＮＴＵの濁度、好ましくは最大２０ＮＴＵの濁度、より好ましくは最大１０ＮＴＵの濁度、より好ましくは最大５ＮＴＵの濁度を有し、さらにより好ましくは、最大２ＮＴＵの濁度を有する。
本発明の好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、２００ＮＴＵを超える濁度を有し、かかる飲料は不透明である。
包装された熱処理飲料調製物の幾つかの実施形態では、飲料調製物が不透明であることが有益である。これは、例えば、飲料が乳に似ていて、乳白色の外観を有するべきである場合に有利である。栄養的に完全な栄養補助食品の外観は、典型的には、不透明である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、２５０ＮＴＵを超える濁度を有する。好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、３００ＮＴＵを超える濁度を有し、より好ましくは、５００ＮＴＵを超える濁度を有し、より好ましくは、１０００を超える濁度、好ましくは１５００ＮＴＵを超える濁度を有し、さらにより好ましくは、２０００ＮＴＵを超える濁度を有する。
熱処理された飲料調製物中の不溶性物質の量は、飲料の不安定性、及びどの程度まで沈殿物の沈降が経時的に起こるのかという尺度である。不溶性物質を多く含む飲料は、通常、不安定であると見なされる。
本発明の文脈において、ホエイタンパク質飲料調製物は、加熱されたサンプル中の総タンパク質の最大１５％が３０００ｇで５分間の遠心分離で沈殿する場合、「安定」であると見なされる。例１．１０の分析方法を参照されたい。
驚くべきことに、ＢＬＧが少なくとも８５ｗ／ｗ％の量でタンパク質源として使用される場合、より低いＢＬＧ含量を有するＷＰＩがタンパク質源として使用される場合と比較して、タンパク質画分は、３０００ｇで５分間遠心分離した後に最大１５％の不溶性物質を含むことがわかり、該飲料調製物が安定していることを実証した。
したがって、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、熱処理飲料調製物のタンパク質画分は、最大１５％の不溶性物質を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、最大１５％の不溶性物質を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは最大１２％の不溶性物質、より好ましくは最大１０％の不溶性物質、さらにより好ましくは最大８％の不溶性物質、最も好ましくは最大６％の不溶性物質を含む。
さらに低レベルの不溶性物質がしばしば好ましく、幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、最大４％の不溶性物質、好ましくは最大２％の不溶性物質、より好ましくは最大１％の不溶性物質を含み、最も好ましくは、検出可能な不溶性物質が全くない。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、１００／秒の剪断速度で２２℃で測定した場合、最大２００ｃＰセンチポアズの粘度を有する。
消費者は、熱処理された飲料がゲルではなく液体であることを好む。
飲料調製物の粘度を決定する１つの方法は、例１．８に記載されているように飲料の粘度を測定することによるものである。
包装された熱処理飲料調製物の幾つかの実施形態では、飲料調製物が低粘度であることが有益である。これは、飲料がスポーツ飲料として、又は幾つかの実施形態では栄養的に完全な飲料として使用される場合に有利である。
驚くべきことに、本発明者らは、中性のｐＨを有し、低温殺菌等の熱処理に供され、さらには滅菌された飲料調製物が、２２℃で１００／秒の剪断速度で測定した場合、最大２００センチポアズの粘度を有することを見出した。
したがって、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、最大２００ｃＰの粘度を有する。
好ましくは、包装された熱処理飲料調製物の粘度は、最大１５０ｃＰ、好ましくは最大１００ｃＰ、より好ましくは最大８０ｃＰ、さらにより好ましくは最大５０ｃＰ、最も好ましくは最大４０ｃＰである。
さらに低い粘度がしばしば好ましいため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物の粘度は、最大２０ｃＰ、好ましくは最大１０ｃＰ、より好ましくは最大５ｃＰ、さらにより好ましくは最大３ｃＰ、さらにより好ましくは最大２ｃＰ、さらにより好ましくは最大１ｃＰである。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、飲料調製物の重量に対して２〜１８％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。
本発明の他の好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、飲料の重量に対して３〜２０％ｗ／ｗ、より好ましくは３〜１８％ｗ／ｗ、さらに好ましくは３〜１５％ｗ／ｗ、最も好ましくは３〜１０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。
本発明の幾つかの実施形態では、包装された熱処理飲料調製物が、飲料の重量に対して１．０〜１０．０％ｗ／ｗのタンパク質含量を有することが有利である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、飲料調製物の重量に対して１〜１０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。
包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは飲料の重量に対して２．０〜９．０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含むか、又は包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは飲料の重量に対して３．０〜８．０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含むか、又包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは飲料の重量に対して５．０〜７．５％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含むか、又は包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは飲料の重量に対して４．０〜６．０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。
最も好ましくは、包装された熱処理飲料調製物は、飲料の重量に対して４．０〜６．０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。このタンパク質の範囲は、熱処理された飲料調製物がスポーツ飲料である場合に特に関係がある。しかしながら、この範囲は、飲料の幾つかの医療用途にも関連している。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、飲料調製物の重量に対して１０〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。
本発明の幾つかの実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは、飲料の重量に対して１０〜１８％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含むか、又は好ましくは、飲料の重量に対して１２．０〜１６．０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含むか、又は好ましくは、飲料の重量に対して１３．０〜１５．０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。
幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、飲料の重量に対して１．０〜６．０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含み、他の好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、飲料の重量に対して６．０〜１２．０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。
又は、他の好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、飲料の重量に対して１２．０〜２０．０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。
飲料の全てのタンパク質は、好ましくはホエイタンパク質及び／又は乳清タンパク質である。
本発明の包装された熱処理飲料調製物は、スポーツ飲料として特に有用であり、その場合、好ましくは、任意に限られた量の脂質のみ及び／又は任意に限られた量の炭水化物も含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、調製物は、スポーツ飲料として特に有用であり、例えば、飲料の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗ、好ましくは飲料の重量に対して２〜１５％ｗ／ｗ、又は好ましくは飲料の重量に対して２〜１０％ｗ／ｗ、最も好ましくは飲料の重量に対して２〜６％ｗ／ｗの範囲の総量のタンパク質を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、栄養的に不完全な栄養補助食品として特に有用であり、例えば、飲料の重量に対して２〜２０％ｗ／ｗ、又は好ましくは飲料の重量に対して３〜１０％ｗ／ｗの範囲の総量のタンパク質を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、栄養的に完全な栄養補助食品として特に有用であり、例えば、飲料の重量に対して４〜２０％ｗ／ｗ、又は好ましくは飲料の重量に対して５〜１８％ｗ／ｗの範囲の総量のタンパク質を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、腎疾患を患っている、又はそうでなければ腎機能が低下している患者にとって特に有利である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、例えば、飲料の重量に対して２〜２０％ｗ／ｗ、又は好ましくは飲料の重量に対して３〜１２％ｗ／ｗ、又は好ましくは飲料の重量に対して３〜１０％ｗ／ｗの範囲の総量のタンパク質を含む。
包装された熱処理飲料調製物は、例えば、好ましくは主要なタンパク質源として、そしてさらにはおそらく唯一のタンパク質源として、他のタンパク質源と組み合わせてＢＬＧ単離物を含むことが特に好ましい。
タンパク質のネイティブ性の程度は、タンパク質の濃度、ｐＨ、温度、熱処理時間等の幾つかの要因に依存する。
固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０ｎｍ／Ｉ３５０ｎｍ）は、ＢＬＧのアンフォールディングの程度の尺度であり、本発明者らは、ＢＬＧのアンフォールディングが低いか全くないことと相関する高いＢＬＧトリプトファン蛍光発光比では、固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０ｎｍ／Ｉ３５０ｎｍ）は、例１．１に従って測定される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、少なくとも１．１１の固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０ｎｍ／Ｉ３５０ｎｍ）を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、少なくとも１．１２、好ましくは少なくとも１．１３、より好ましくは少なくとも１．１５、さらにより好ましくは少なくとも１．１７、最も好ましくは少なくとも１．１９の固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０ｎｍ／Ｉ３５０ｎｍ）を有する。
ＢＬＧ単離粉末にかなりの量の非タンパク質物質が含まれている場合は、固有トリプトファン蛍光発光比を測定する前にタンパク質画分を単離することが好ましい。そのため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末のタンパク質画分は、少なくとも１．１１の固有トリプトファン蛍光発光比を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末のタンパク質画分は、少なくとも１．１２、好ましくは少なくとも１．１３、より好ましくは少なくとも１．１５、さらにより好ましくは少なくとも１．１７、最も好ましくは少なくとも１．１９の固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０ｎｍ／Ｉ３５０ｎｍ）を有する。
例えば、ＢＬＧ単離粉末を脱塩水に溶解し、タンパク質を保持するフィルターを使用して溶液を透析又は限外濾過に基づくダイアフィルトレーションに供することにより、ＢＬＧ単離粉末からタンパク質画分を分離することができる。
タンパク質の変性は、Ｔｒｐ蛍光以外の分析方法でも説明できる。この方法は、例１．３で説明されている。この方法の原理は、変性ホエイタンパク質が、ｐＨ４．６未満又はｐＨ４．６超のｐＨ値よりもｐＨ４．６での溶解度が低いことが知られているため、ホエイタンパク質組成物の変性度は、溶液中のタンパク質が安定しているｐＨでの総量のタンパク質に対するｐＨ４．６での可溶性タンパク質の量を測定することによって決定されることである。
そのため、ホエイタンパク質組成物のタンパク質変性度、Ｄを次のとおり計算する：
Ｄ＝（（ＰｐＨ７．０又は３．０−ＳｐＨ４．６）／ＰｐＨ７．０又は３．０）＊１００％
式中、（ＰｐＨ７．０又は３．０）はｐＨ７．０又は３．０での総タンパク質含量であり、（ＳｐＨ４．６）はｐＨ４．６での上清中の総タンパク質含量である。例１．３を参照されたい。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、最大１０％、好ましくは最大８％、より好ましくは最大６％、さらにより好ましくは最大３％、さらにより好ましくは最大１％、最も好ましくは最大０．２％のタンパク質変性度を有する。
本発明の幾つかの実施形態では、タンパク質画分及び又は飲料調製物が、例えば、高温熱処理に供されると、タンパク質変性度は、１０％超、好ましくは２０％超、好ましくは３０％超、好ましくは４０％超、又は好ましくは５０％超、又は好ましくは７０％超、又は好ましくは８０％超、又は好ましくは９０％超、又は好ましくは９５％超、又は好ましくは９９％超である。
本発明の包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質以外の多量栄養素を含み得る。本発明の幾つかの実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、炭水化物をさらに含む。本発明の熱処理飲料調製物中の総炭水化物含量は、熱処理飲料調製物の使用目的に依存する。
本発明の幾つかの実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、少なくとも１つの炭水化物源をさらに含む。１つの例示的な実施形態では、少なくとも１つの炭水化物源は、スクロース、サッカロース、マルトース、デキストロース、ガラクトース、マルトデキストリン、コーンシロップ固形物、スクロマルト、グルコースポリマー、コーンシロップ、加工デンプン、難消化性デンプン、米由来の炭水化物、イソマルツロース、白糖、グルコース、フルクトース、ラクトース、高フルクトースコム（ｃｏｍ）シロップ、ハチミツ、糖アルコール、フルクトオリゴ糖、ダイズ繊維、トウモロコシ繊維、グアーガム、コンニャク粉、ポリデキストロース、ファイバーソル（Ｆｉｂｅｒｓｏｌ）、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。本発明の幾つかの実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、フルクタンのような非消化性糖を含み、フルクタンは、イヌリン又はフラクトオリゴ糖を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物及び液体溶液は、糖ポリマー、すなわちオリゴ糖及び／又は多糖を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、調製物の総エネルギー含量の０〜９５％、好ましくは調製物の総エネルギー含量の１０〜８５％の範囲、好ましくは調製物の総エネルギー含量の２０〜７５％の範囲、又は好ましくは調製物の総エネルギー含量の３０〜６０％の範囲の炭水化物を含む。
さらに低い炭水化物含量がしばしば好ましいため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、好ましくは調製物の総エネルギー含量の０〜３０％の範囲、より好ましくは調製物の総エネルギー含量の０〜２０％の範囲、さらにより好ましくは調製物の総エネルギー含量の０〜１０％の範囲である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物の炭水化物含量は、調製物の総エネルギー含量の最大３％、より好ましくは、調製物の総エネルギー含量の最大１％、さらにより好ましくは調製物の総エネルギー含量の最大０．１％である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、調製物は、スポーツ飲料として特に有用であり、例えば、飲料の総エネルギー含量（Ｅ）の最大７５％、好ましくは最大４０Ｅ％、好ましくは最大１０Ｅ％、又は好ましくは最大５Ｅ％の炭水化物の総量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、栄養的に不完全な栄養補助食品として特に有用であり、例えば、飲料の総エネルギー含量（Ｅ）の７０〜９５％の範囲、好ましくは８０〜９０Ｅ％の炭水化物の総量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、栄養的に完全な栄養補助食品として特に有用であり、例えば、飲料の総エネルギー含量の３０〜６０％の範囲、好ましくは３５〜５０Ｅ％の範囲の炭水化物の総量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、腎疾患を患っている、又はそうでなければ腎機能が低下している患者にとって特に有利である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、例えば、飲料の総エネルギー含量の３０〜６０％の範囲、好ましくは３５〜５０Ｅ％の範囲の炭水化物の総量を含む。
本発明の一実施形態では、包装された熱処理飲料調製物はさらに、ビタミン、調味料、ミネラル、甘味料、抗酸化剤、食用酸、脂質、炭水化物、プレバイオティクス、プロバイオティクス、及び非ホエイタンパク質からなる群から選択される少なくとも１つの追加の原料を含む。
更なる原料は、包装された熱処理飲料調製物が、所望の栄養素、すなわち、タンパク質欠乏症に苦しむ患者又は筋肉を増強したい運動選手に特に適合した栄養素を含むことを確実にする。
本発明の一実施形態では、液体溶液は、少なくとも１つの高甘味度甘味料をさらに含む。一実施形態では、少なくとも１つの高甘味度甘味料は、アスパルテーム、シクラメート、スクラロース、アセスルファム塩、ネオテーム、サッカリン、ステビア抽出物、例えばレバウジオシドＡ等のステビア配糖体、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。本発明の幾つかの実施形態では、甘味料は、１つ以上の高甘味度甘味料（ＨＩＳ）を含むか、さらにはそれからなることが特に好ましい。
ＨＩＳは、天然甘味料及び人工甘味料の両方に含まれており、典型的には、スクロースの少なくとも１０倍の甘味強度を持っている。
使用する場合、ＨＩＳの総量は典型的には０．０１〜２％ｗ／ｗの範囲である。例えば、ＨＩＳの総量は、０．０５〜１．５％ｗ／ｗの範囲であり得る。或いは、ＨＩＳの総量は、０．１〜１．０％ｗ／ｗの範囲であり得る。
甘味料の選択は、製造される飲料に依存し得て、例えば、高甘味度甘味料（例えば、アスパルテーム、アセスルファムＫ、スクラロース等）は、甘味料からのエネルギー寄与が望まれない飲料に使用され得るが、天然プロファイルを有する飲料には、天然甘味料（例えば、ステビオールグリコシド、ソルビトール、又はスクロース）が使用され得る。
さらに、甘味料は、１つ以上のポリオール甘味料（複数の場合がある）を含むか、さらにはそれからなることが好ましい場合がある。有用なポリオール甘味料の非限定的な例は、マルチトール、マンニトール、ラクチトール、ソルビトール、イノシトール、キシリトール、トレイトール、ガラクチトール又はそれらの組み合わせである。使用する場合、ポリオール甘味料の総量は、典型的には、１〜２０％ｗ／ｗの範囲である。例えば、ポリオール甘味料の総量は、２〜１５％ｗ／ｗの範囲であり得る。或いは、ポリオール甘味料の総量は、４〜１０％ｗ／ｗの範囲であり得る。
本発明の包装された熱処理飲料調製物は、タンパク質以外の多量栄養素を含み得る。本発明の幾つかの実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、さらに脂質を含む。本発明の熱処理飲料調製物中の総脂質含量は、熱処理飲料調製物の使用目的に依存する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、調製物の総エネルギー含量の０〜５０％、又は好ましくは調製物の総エネルギー含量の０〜４０％の範囲、又は好ましくは調製物の総エネルギー含量の０〜３０％の範囲、又は好ましくは調製物の総エネルギー含量の０〜２０％の範囲、又は好ましくは調製物の総エネルギー含量の０〜１０％の範囲、又は好ましくは調製物の総エネルギー含量の０〜５％の範囲の脂質含量を有する。
脂質の量は、ＩＳＯ １２１１：２０１０（脂肪含量の決定−Ｒｏｅｓｅ−Ｇｏｔｔｌｉｅｂ重量分析法）に従って決定される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物の脂質含量は、調製物の総エネルギー含量の最大３％、より好ましくは、調製物の総エネルギー含量の最大１％、さらにより好ましくは調製物の総エネルギー含量の最大０．１％である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、調製物は、スポーツ飲料として特に有用であり、例えば、最大１０Ｅ％、好ましくは最大最大１Ｅ％の脂質の総量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、栄養的に不完全な栄養補助食品として特に有用であり、例えば、飲料の総エネルギー含量の最大１０％、好ましくは最大最大１Ｅ％の脂質の総量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、栄養的に完全な栄養補助食品として特に有用であり、例えば、総エネルギー含量の２０〜５０％の範囲、好ましくは３０〜４０Ｅ％の範囲、又はより好ましくは２５〜４０Ｅ％の脂質の総量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、腎疾患を患っている、又はそうでなければ腎機能が低下している患者にとって特に有利である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、例えば、総エネルギー含量の２０〜６０％の範囲、好ましくは３０〜５０Ｅ％の範囲の脂質の総量を含む。
本発明の一実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、食品グレードの脂肪、例えばキャノーラ油及び／又はＭＣＴ（中鎖トリグリセリド）を、好ましくは２〜１０重量％の量で含む。好ましくは、これらの脂肪はかなりの割合、例えば、少なくとも４０％、好ましくは少なくとも６０％の不飽和脂肪酸、最も好ましくは多価不飽和脂肪酸を含む。最も好ましいのは、飲料は乳化された形態であり、脂質は、飲料調製物の水相に乳化された液滴として存在することが好ましい。
飲料調製物は、典型的には、５０〜９９％ｗ／ｗの範囲、好ましくは４５〜９７％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは４０〜９５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは３５〜９０％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは３０〜８５％ｗ／ｗの範囲の水を総量含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、飲料調製物は、５５〜９０％ｗ／ｗの範囲、好ましくは５７〜８５％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは６０〜８０％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは６２〜７５％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは６５〜７０％ｗ／ｗの範囲の水の総量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、飲料調製物は、９０〜９９％ｗ／ｗの範囲、好ましくは９２〜９８．５％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは９４〜９８％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは９５〜９８％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは９６〜９８％ｗ／ｗの範囲の水の総量を含む。これらの実施形態は、例えば、透明で水のような飲料に有用である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、飲料調製物は、最大１．０％ｗ／ｗのエタノール、より好ましくは最大０．５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは最大０．１％ｗ／ｗを含み、最も好ましくは、検出可能なエタノールがないことを意味するノンアルコールである。
飲料調製物は、典型的には、１〜４５％ｗ／ｗの範囲、好ましくは５〜４０％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは１０〜３５％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは１２〜３０％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは１６〜２５％ｗ／ｗの範囲の全固形分量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、飲料調製物は、１０〜４５％ｗ／ｗの範囲、好ましくは１５〜４３％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは２０〜４０％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは２５〜３８％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは３０〜３５％ｗ／ｗの範囲の全固形分量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、飲料調製物は、１〜１０％ｗ／ｗの範囲、好ましくは１．５〜８％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは２〜６％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは２〜５％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは２〜４％ｗ／ｗの範囲の全固形分量を含む。これらの実施形態は、例えば、透明で水のような飲料に有用である。
固形物ではない飲料調製物の部分は、好ましくは水である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、アルファ−ラクトアルブミン（ＡＬＡ）及びカゼイノマクロペプチド（ＣＭＰ）の合計は、飲料の非ＢＬＧタンパク質の少なくとも４０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも６０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも７０％ｗ／ｗ、最も好ましくは飲料の非ＢＬＧタンパク質の少なくとも９０％ｗ／ｗを構成する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＡＬＡは、飲料調製物の非ＢＬＧタンパク質の最大８０％ｗ／ｗ、好ましくは最大６０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは最大４０％ｗ／ｗ、最も好ましくは飲料調製物の非ＢＬＧタンパク質の最大３０％ｗ／ｗを構成する。
さらに低いＡＬＡの含有量が好ましい場合があるため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＡＬＡは、飲料調製物の非ＢＬＧタンパク質の最大２０％ｗ／ｗ、好ましくは最大１５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは最大１０％ｗ／ｗ、最も好ましくは飲料調製物の非ＢＬＧタンパク質の最大５％ｗ／ｗを構成する。
本発明の他の好ましい実施形態では、各主要な非ＢＬＧホエイタンパク質は、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージで最大２５％、好ましくは最大２０％、より好ましくは最大１５％、さらにより好ましくは最大１０％、最も好ましくは最大６％である。
さらに低い濃度の主要な非ＢＬＧホエイタンパク質が望ましい場合がある。そのため、本発明の追加の好ましい実施形態では、各主要な非ＢＬＧホエイタンパク質は、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージで最大４％、好ましくは最大３％、より好ましくは最大２％、さらにより好ましくは最大１％である。
本発明者らは、ラクトフェリン及び／又はラクトペルオキシダーゼの減少が、無彩色のホエイタンパク質生成物を得るのに特に有利であるという徴候を見た。
そのため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ラクトフェリンは、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージの最大２５％、好ましくは最大２０％、より好ましくは最大１５％、さらにより好ましくは最大１０％、最も好ましくは最大６％である。さらに低濃度のラクトフェリンが望ましい場合がある。そのため、本発明の追加の好ましい実施形態では、ラクトフェリンは、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージの最大４％、好ましくは最大３％、より好ましくは最大２％、さらにより好ましくは最大１％である。
同様に、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ラクトペルオキシダーゼは、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージの最大２５％、好ましくは最大２０％、より好ましくは最大１５％、さらにより好ましくは最大１０％、最も好ましくは最大６％である。さらに低濃度のラクトペルオキシダーゼが望ましい場合がある。そのため、本発明の追加の好ましい実施形態では、ラクトペルオキシダーゼは、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージの最大４％、好ましくは最大３％、より好ましくは最大２％、さらにより好ましくは最大１％である。
ラクトフェリン及びラクトペルオキシダーゼは、例１．２９に従って定量される。
本発明の一実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、栄養的に完全な栄養補助食品である。
本発明の一実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、栄養的に不完全な栄養補助食品である。
本発明の一実施形態では、包装された熱処理飲料調製物はスポーツ飲料である。
本発明の一実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、腎疾患を患っている、又はそうでなければ腎機能が低下している患者に適した低リン及び低カリウム飲料である。
本発明の包装された熱処理飲料調製物は、スポーツ飲料として特に有用であり、その場合、好ましくは、任意に限られた量の脂質のみ及び／又は任意に限られた量の炭水化物も含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、調製物は、スポーツ飲料として特に有用であり、例えば、以下：
−飲料の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗ、好ましくは飲料の重量に対して２〜１５％ｗ／ｗ、又は好ましくは飲料の重量に対して２〜１０％ｗ／ｗ、最も好ましくは飲料の重量に対して２〜６％ｗ／ｗの範囲の総量のタンパク質、
−飲料の総エネルギー含量（Ｅ）の最大７５Ｅ％、好ましくは最大４０Ｅ％、好ましくは最大１０Ｅ％、又は好ましくは最大５Ｅ％の炭水化物の総量、及び
−最大１０Ｅ％、好ましくは最大１Ｅ％の脂質の総量、を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、栄養的に不完全な栄養補助食品として特に有用であり、例えば、以下：
−飲料の重量に対して２〜２０％ｗ／ｗ、又は好ましくは飲料の重量に対して３〜１０％ｗ／ｗの範囲の総量のタンパク質、
−飲料の総エネルギー含量（Ｅ）の７０〜９５％、好ましくは８０〜９０Ｅ％の範囲の炭水化物の総量、及び
−飲料の総エネルギー含量の最大１０％、好ましくは最大１Ｅ％の脂質の総量、を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、栄養的に完全な栄養補助食品として特に有用であり、例えば、以下：
−飲料の重量に対して４〜２０％ｗ／ｗ、又は好ましくは飲料の重量に対して５〜１８％ｗ／ｗの範囲の総量のタンパク質、
−飲料の総エネルギー含量の３０〜６０％の範囲、好ましくは３５〜５０Ｅ％の範囲の炭水化物の総量、及び
−飲料の総エネルギー含量の２０〜５０％の範囲、好ましくは３０〜４０Ｅ％の範囲、又は好ましくは２５〜４５Ｅ％の脂質の総量、を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、腎疾患を患っている、又はそうでなければ腎機能が低下している患者にとって特に有利である。飲料調製物は、リンやカリウム等の他のミネラルの含有量が非常に少ない。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、例えば、以下：
−飲料の重量に対して２〜２０％ｗ／ｗ、好ましくは飲料の重量に対して３〜１２％ｗ／ｗ、又は好ましくは飲料の重量に対して３〜１０％ｗ／ｗの範囲の総量のタンパク質、
−飲料の総エネルギー含量の３０〜６０％の範囲、好ましくは３５〜５０Ｅ％の範囲の炭水化物の総量、及び
−総エネルギー含量の２０〜６０％の範囲、好ましくは３０〜５０Ｅ％の範囲の脂質の総量、を含む。
本発明者らは、総タンパク質に比べてタンパク質ナノゲルの含有量が高い飲料は、かなりの量の可溶性ホエイタンパク質凝集物を含む飲料よりも、胃に到着した際に粘度が低くなるという徴候を見た（例９を参照されたい）。可溶性ホエイタンパク質凝集物は、従来のホエイタンパク質単離物を含む飲料を滅菌すると形成されることがよくある。胃における粘度の発生及び／又は構造に対する食品の能力は以前（Ｈａｌｆｏｒｄ ｅｔ ａｌ；Ｓａｔｉｅｔｙ−ｅｎｈａｎｃｉｎｇ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｆｏｒ ａｐｐｅｔｉｔｅ ｃｏｎｔｒｏｌ：ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｆｏｏｄｓ ｆｏｒ ｗｅｉｇｈｔ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ；Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ（２０１２），７１，３５０−３６２）は満腹感に関連づけられており、本発明者らは、タンパク質ナノゲルの含有量が高い飲料は、可溶性ホエイタンパク質凝集物を含む同等の飲料よりも摂取時に満腹感が少ないという徴候を見た。これは、食欲がない又は食欲不振であるが、筋肉量又は他の身体機能の回復及び／又は維持のために高エネルギー栄養を必要とする人にとって非常に有利である。
本発明の文脈において、「タンパク質のタンパク質ナノゲル」又は「タンパク質ナノゲル」という用語は、典型的には球形又はほぼ球形の、変性ホエイタンパク質のサブミクロンサイズの粒子に関する。タンパク質ナノゲルはまた、ホエイタンパク質ミセルとも称され、例えば、国際公開第２００７／１１０４２１号Ａ２で議論されているが、それらのミセルの性質は疑わしい。可溶性ホエイタンパク質凝集物の量は、例１．３２に従って定量される。タンパク質ナノゲルは、懸濁すると不透明で乳白色の外観を示すため、不透明な飲料に非常に適している。
本発明の文脈において、「可溶性ホエイタンパク質凝集物」という用語は、変性ホエイタンパク質の小さな凝集物に関し、その凝集物は、ｐＨ４．６への酸性化中に強いゲル（ネイティブホエイタンパク質よりもはるかに強い）を形成することができ、その凝集物は典型的には、線形、ワーム状（ｗｏｒｍ−ｌｉｋｅ）、分岐鎖状又は鎖状の形状であり、典型的にはサブミクロンサイズである。可溶性ホエイタンパク質凝集物は当業者によく知られており、例えば、線形凝集物と称され、国際公開第２００７／１１０４２１号公報Ａ２に記載されている。可溶性ホエイタンパク質凝集物の量は、例１．３２に従って定量される。可溶性ホエイタンパク質凝集物は、典型的には、水に溶解すると透明な溶液を形成するため、透明な飲料に非常に適している。
ｐＨ、ミネラル含量（特にＣａ２＋の含有量）、及びタンパク質溶液のタンパク質濃度を制御することにより、ゲル、大きなゲルフラグメント、タンパク質ナノゲル、又は可溶性ホエイタンパク質凝集物が形成されるかどうかを制御することができる。これは当業者にはよく知られている。タンパク質ナノゲルは、通常、約５．５〜約６．５、好ましくは約５．８〜６．２の範囲のｐＨを有するホエイタンパク質溶液を加熱することによって形成され、従来のホエイタンパク質濃縮物と比較してミネラル含量が少ないホエイタンパク質溶液によって支持される。可溶性ホエイタンパク質凝集物は、典型的には、約６．５〜８．５、好ましくは約６．６〜７．５の範囲のｐＨを有するホエイタンパク質溶液を加熱することによって形成され、より高い含有量のナトリウム等の一価カチオンによって支持される。かかる一価の陽イオンは、ｐＨを上げるときにしばしば添加される。
そのため、本発明の幾つかの特に好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、総タンパク質に対して少なくとも５０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも６０％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも７０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも８０％ｗ／ｗのタンパク質ナノゲル、最も好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９０％ｗ／ｗのタンパク質ナノゲルを含む。
例えば、包装された熱処理飲料調製物は、以下：
−飲料の重量に対して５〜２０％ｗ／ｗ、好ましくは８〜１９％ｗ／ｗ、より好ましくは９〜１８％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは１０〜１７％ｗ／ｗ、最も好ましくは１１〜１６％の総量のタンパク質、
−総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも８８％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、及び最も好ましくは少なくとも９２％ｗ／ｗのＢＬＧの総量、
−総タンパク質に対して少なくとも５０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも６０％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも７０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは総タンパク質に対して少なくとも８０％ｗ／ｗのタンパク質ナノゲルの総量、を含むことが好ましい。
包装された熱処理飲料調製物は、以下：
−飲料の重量に対して１０〜２０％ｗ／ｗ、好ましくは１１〜１９％ｗ／ｗ、より好ましくは１２〜１８％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは１３〜１７％ｗ／ｗ、最も好ましくは１４〜１６％の総量のタンパク質、
−総タンパク質に対して少なくとも９０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９２％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも９４％ｗ／ｗ、最も好ましくは少なくとも９６％ｗ／ｗのＢＬＧの総量、
−総タンパク質に対して少なくとも５０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも６０％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも７０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは総量総タンパク質に対して少なくとも８０％ｗ／ｗのタンパク質ナノゲルの総量、を含むことが特に好ましい。
本発明者らはさらに、タンパク質ナノゲルは、ネイティブホエイタンパク質よりも粘度を発生しにくいため、タンパク質含量は高いが、飲みやすいようにするため十分に低い粘度を有する無菌のｐＨ中性飲料を製造が可能なることを見出した。
少なくとも８５％ｗ／ｗのＢＬＧを含むホエイタンパク質の熱変性によって作られたタンパク質ナノゲルは、高タンパク質飲料に使用するのに特に有利なようであり、理論に拘束されることなく、高ＢＬＧタンパク質ナノゲルは通常のＷＰＩに基づくタンパク質ナノゲルよりもコンパクトなタンパク質ナノゲル構造を提供し、この違いにより、飲用性に影響を与えることなく、より多くのタンパク質を飲料に含めることができると考えられる。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、以下：
−総タンパク質に対して少なくとも５０％ｗ／ｗのタンパク質ナノゲル、
−総タンパク質に対して最大３０％ｗ／ｗの可溶性ホエイタンパク質凝集物、
−最大５％ｗ／ｗの不溶性タンパク質物質、を含む。
本発明の幾つかのより好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、以下：
−総タンパク質に対して少なくとも６０％ｗ／ｗのタンパク質ナノゲル、
−総タンパク質に対して最大２０％ｗ／ｗの可溶性ホエイタンパク質凝集物、
−最大５％ｗ／ｗの不溶性タンパク質物質、を含む。
本発明の幾つかのさらにより好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、以下：
−総タンパク質に対して少なくとも７０％ｗ／ｗのタンパク質ナノゲル、
−総タンパク質に対して最大１５％ｗ／ｗの可溶性ホエイタンパク質凝集物、
−最大５％ｗ／ｗの不溶性タンパク質物質、を含む。
本発明者らは、総タンパク質に対して可溶性ホエイタンパク質凝集物の含有量が増加した飲料は、溶解性の低いホエイタンパク質凝集物を含む飲料よりも、胃のような環境に到達したときに粘度が高くなることを観察した（例９を参照されたい）。胃における粘度の発生及び／又は構造に対する食品製品の能力は、以前から満腹感に関連しているとされており、したがって、可溶性ホエイタンパク質凝集物の含有量が高い飲料は、摂取時に満腹感の増加を引き起こす。これは、体重を減らしたい人、特に肥満に苦しんでいる患者にとって非常に有利である。
そのため、本発明の他の特に好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、総タンパク質に対して少なくとも６０％ｗ／ｗの可溶性ホエイタンパク質凝集物、好ましくは少なくとも７０％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも８０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９０％ｗ／ｗの可溶性ホエイタンパク質凝集物を含む。
或いは、しかしまた好ましいことに、包装された熱処理飲料調製物は、以下：
−飲料の重量に対して５〜１２％ｗ／ｗ、好ましくは６〜１１％ｗ／ｗ、より好ましくは７〜１０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは８〜１０％ｗ／ｗ、最も好ましくは１１〜１６％の総量のタンパク質、
−総タンパク質に対して少なくとも９４％ｗ／ｗ、好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９６％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９８％ｗ／ｗのＢＬＧの総量、及び
−総タンパク質に対して少なくとも６０％ｗ／ｗの可溶性ホエイタンパク質凝集物、好ましくは少なくとも７０％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも８０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９０％ｗ／ｗの可溶性ホエイタンパク質凝集物、を含み、
当該包装された熱処理飲料調製物は、好ましくは以下：
−最大１００ＮＴＵ、好ましくは最大４０ＮＴＵ、さらにより好ましくは最大１０ＮＴＵの濁度、及び
−最大１００ｃＰ、好ましくは最大５０ｃＰ、より好ましくは最大２０ｃＰ、より好ましくは最大１０ｃＰの２２℃で１００ｓ−１の剪断速度での粘度、を有する。
例えば、包装された熱処理飲料調製物は、以下：
−飲料の重量に対して５〜２０％ｗ／ｗ、好ましくは８〜１９％ｗ／ｗ、より好ましくは９〜１８％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは１０〜１７％ｗ／ｗ、最も好ましくは１１〜１６％の総量のタンパク質、
−総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗ、好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９４％ｗ／ｗ、最も好ましくは総タンパク質に対して少なくとも６％ｗ／ｗのＢＬＧの総量、及び
−総タンパク質に対して少なくとも６０％ｗ／ｗの可溶性ホエイタンパク質凝集物、好ましくは少なくとも７０％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも８０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９０％ｗ／ｗの可溶性ホエイタンパク質凝集物、を含むことが好ましい。
少なくとも８５％ｗ／ｗのＢＬＧを含むホエイタンパク質の熱変性から作られた可溶性ホエイタンパク質凝集物は、タンパク質飲料に使用するのに特に有利なようであり、理論に拘束されることなく、高ＢＬＧ可溶性凝集物は、酸性化すると通常のＷＰＩに基づく可溶性凝集物よりも強いゲルを提供すると考えられる。この違いにより、消化時に胃内でより多くのゲル／より高い粘度を形成し、それによって満腹感を促進する飲料を製造することが可能になる。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、以下：
−総タンパク質に対して少なくとも最大６０％ｗ／ｗの可溶性ホエイタンパク質凝集物、
−総タンパク質に対して最大２０％ｗ／ｗのタンパク質ナノゲル、
−最大２％ｗ／ｗの不溶性タンパク質物質を含む。
本発明の幾つかのより好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、以下：
−総タンパク質に対して少なくとも８０％ｗ／ｗの可溶性ホエイタンパク質凝集物、
−総タンパク質に対して最大５％ｗ／ｗのタンパク質ナノゲル、
−最大２％ｗ／ｗの不溶性タンパク質物質、を含む。
本発明の一態様は、５．５〜８．０の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物を製造する方法であって、以下の工程：
ａ）
−１〜２０重量％の総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％がβラクトグロブリン（ＢＬＧ）であるタンパク質、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、
を含む液体溶液を提供する工程、
ｂ）液体溶液を包装する工程、
を含み、
工程ａ）の液体溶液及び／又は工程ｂ）の包装された液体溶液が、少なくとも低温殺菌を含む熱処理に供される、方法に関する。
好ましくは、、５．５〜８．０の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物を製造する方法は、
ａ）以下：
−１〜２０重量％の総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％がβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、総量のタンパク質、
−任意に、甘味料、糖ポリマー及び／又は香料、を含む液体溶液を提供する工程、
ｂ）液体溶液を包装する工程であって、工程ａ）の液体溶液及び／又は工程ｂ）の包装された液体溶液が、少なくとも低温殺菌を含む熱処理に供される工程、を含む。
工程ａ）の液体溶液は、好ましくは、熱処理が引き起こした変化を除いて、熱処理された飲料調製物と同じ組成を有する。したがって、熱処理飲料調製物の文脈で言及された特徴は、液体溶液が典型的には、主に熱処理飲料調製物よりも低いタンパク質変性度を有することを除いて、液体溶液に等しく適用される。
本発明の液体溶液の幾つかの好ましい実施形態では、タンパク質の少なくとも８５％ｗ／ｗがＢＬＧである。好ましくは、タンパク質の少なくとも８８％ｗ／ｗがＢＬＧであり、より好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも９１％ｗ／ｗ、最も好ましくは少なくとも９２％ｗ／ｗのタンパク質がＢＬＧである。
さらに高い相対量のＢＬＧが実現可能かつ望ましいため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液のタンパク質の少なくとも９４％ｗ／ｗがＢＬＧであり、より好ましくはタンパク質の少なくとも９６％ｗ／ｗがＢＬＧであり、さらにより好ましくはタンパク質の少なくとも９８％ｗ／ｗがＢＬＧであり、最も好ましくはおよそ１００％ｗ／ｗである。
例えば、液体溶液は、好ましくは、総タンパク質に対して少なくとも９７．５％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９８．０％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも９８．５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも９９．０％の量のＢＬＧ、最も好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９９．５％ｗ／ｗ、およそ１００．０％等の量のＢＬＧを含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、アルファ−ラクトアルブミン（ＡＬＡ）及びカゼイノマクロペプチド（ＣＭＰ）の合計は、液体溶液の非ＢＬＧタンパク質の少なくとも４０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも６０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは７０％ｗ／ｗ、最も好ましくは液体溶液の非ＢＬＧタンパク質の少なくとも９０％ｗ／ｗを構成する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＡＬＡは、液体溶液の非ＢＬＧタンパク質の最大８０％ｗ／ｗ、好ましくは最大６０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは最大４０％ｗ／ｗ、最も好ましくは液体溶液の非ＢＬＧタンパク質の最大３０％ｗ／ｗを構成する。
さらに低いＡＬＡの含有量が好ましい場合があるため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＡＬＡは、液体溶液の非ＢＬＧタンパク質の最大２０％ｗ／ｗ、好ましくは最大１５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは最大１０％ｗ／ｗ、最も好ましくは液体溶液の非ＢＬＧタンパク質の最大５％ｗ／ｗを構成する。
本発明の他の好ましい実施形態では、各主要な非ＢＬＧホエイタンパク質は、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージで最大２５％、好ましくは最大２０％、より好ましくは最大１５％、さらにより好ましくは最大１０％、最も好ましくは最大６％である。
さらに低い濃度の主要な非ＢＬＧホエイタンパク質が望ましい場合がある。そのため、本発明の追加の好ましい実施形態では、各主要な非ＢＬＧホエイタンパク質は、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージで最大４％、好ましくは最大３％、より好ましくは最大２％、さらにより好ましくは最大１％である。
本発明者らは、ラクトフェリン及び／又はラクトペルオキシダーゼの減少が、無彩色のホエイタンパク質生成物を得るのに特に有利であるという徴候を見た。
そのため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ラクトフェリンは、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージの最大２５％、好ましくは最大２０％、より好ましくは最大１５％、さらにより好ましくは最大１０％、最も好ましくは最大６％である。さらに低濃度のラクトフェリンが望ましい場合がある。そのため、本発明の追加の好ましい実施形態では、ラクトフェリンは、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージの最大４％、好ましくは最大３％、より好ましくは最大２％、さらにより好ましくは最大１％である。
同様に、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ラクトペルオキシダーゼは、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージの最大２５％、好ましくは最大２０％、より好ましくは最大１５％、さらにより好ましくは最大１０％、最も好ましくは最大６％である。さらに低濃度のラクトペルオキシダーゼが望ましい場合がある。そのため、本発明の追加の好ましい実施形態では、ラクトペルオキシダーゼは、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージの最大４％、好ましくは最大３％、より好ましくは最大２％、さらにより好ましくは最大１％である。
液体溶液のタンパク質は、好ましくは哺乳動物の乳から、好ましくは反芻動物の乳、例えばウシ、ヒツジ、ヤギ、スイギュウ、ラクダ、ラマ、ウマ及び／又はシカ由来の乳から調製される。ウシの乳由来のタンパク質が特に好ましい。したがって、液体溶液のタンパク質は、好ましくは牛乳タンパク質である。
液体溶液のタンパク質は、好ましくはホエイタンパク質及び／又は乳清タンパク質であり、さらにより好ましくはウシのホエイタンパク質及び／又は乳清タンパク質である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液は、少なくとも１．１１、より好ましくは少なくとも１．１３、さらにより好ましくは少なくとも１．１５、最も好ましくは少なくとも１．１７の固有のトリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０／Ｉ３５０）を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液は、最大２０％、より好ましくは最大１０％、さらにより好ましくは最大５％、最も好ましくは最大１％のタンパク質変性度を有する。
タンパク質の変性度及び蛍光発光比が低いことはいずれも、タンパク質が主にネイティブ立体構造にある液体溶液に特徴的である。ネイティブタンパク質の立体構造は、透明な飲料を製造するために特に好ましい。
工程ｂ）の包装は、任意の適切な包装技術であり得て、任意の適切な容器が液体溶液を包装するために使用され得る。
しかしながら、本発明の好ましい実施形態では、工程ｂ）の包装は無菌包装であり、すなわち、液体溶液は無菌条件下で包装される。例えば、無菌包装は、無菌充填システムを使用することによって実施することができ、好ましくは、液体溶液を１つ以上の無菌容器に充填することを含む。
液体溶液が既に無菌であるか、又は充填前に微生物が非常に少ない場合、無菌充填及び密封が特に好ましい。
有用な容器の例は、例えば、ボトル、カートン、ブリックパック（ｂｒｉｃｋｓ）、及び／又はバッグである。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、容器壁は、２５０〜５００ｎｍの範囲の任意の波長で、最大１０％、好ましくは最大１％、より好ましくは最大０．１％、さらにより好ましくは最大０．０１％、最も好ましくは最大０．００１％の光透過を有する。
本発明の他の好ましい実施形態では、容器壁は、２５０〜５００ｎｍの範囲で、最大１０％、好ましくは最大１％、より好ましくは最大０．１％、さらにより好ましくは最大０．０１％、最も好ましくは最大０．００１％の光透過を有する。
容器壁の光透過は、容器の壁の平面の一部を提供し、任意の関連する波長で容器壁を通る光透過を測定することによって測定される。測定は、標準的な分光光度計を使用し、容器壁の一部の平面が光路に対して垂直に配置されるようにして、容器壁の一部を光路に挿入することによって（例えば、キュベット又は同様の配置を使用して）行われる。波長ｉでの透過は、Ｔｉ＝Ｉｉ，後／Ｉｉ，前 ＊１００％として計算され、式中、Ｉｉ，前は、容器壁に到達する前の波長ｉでの光強度であり、Ｉｉ，後は、光路の光ビームが容器壁の一部を通過した後の波長ｉの強度である。
平均光透過は、所与の波長範囲内で行われた全ての透過測定値Ｔｉの合計を計算し、その合計を所与の波長範囲内の透過測定の回数で割ることによって計算される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、容器壁は、２５０〜８００ｎｍの範囲の任意の波長で、最大１０％、好ましくは最大１％、より好ましくは最大０．１％、さらにより好ましくは最大０．０１％、最も好ましくは最大０．００１％の光透過を有する。
本発明の他の好ましい実施形態では、容器壁は、２５０〜８００ｎｍの範囲で、最大１０％、好ましくは最大１％、より好ましくは最大０．１％、さらにより好ましくは最大０．０１％、最も好ましくは最大０．００１％の光透過を有する。
無光又は低光の透過容器は、例えば、着色された、吸収剤を含む若しくはコーティングされたポリマー、又は着色された若しくはコーティングされたガラスを使用して、又は代替的には、例えばアルミホイルの形態で容器の壁に金属層を組み込むことによって製造され得る。かかる無光又は低光の透過容器は、食品及び製薬業界で知られている。
適切なポリマー材料の非限定的な例は、例えば、ポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）又はＰＥＴ様ポリマーである。
本発明の他の好ましい実施形態では、容器壁の少なくとも一部は透明であり、好ましくは、容器全体が透明である。本発明の幾つかの好ましい実施形態では、容器壁の少なくとも一部、好ましくは容器壁全体が、４００〜７００ｎｍの範囲で少なくとも１１％、好ましくは少なくとも２０％、より好ましくは少なくとも５０％、さらにより好ましくは少なくとも６０％、最も好ましくは少なくとも８０％の平均光透過率を有する。
本発明の方法の幾つかの好ましい実施形態では、工程ａ）の液体溶液は、少なくとも低温殺菌を含む熱処理に供され、次いで、工程ｂ）で包装される。
本発明の方法の別の実施形態では、工程ｂ）の包装された液体溶液は、少なくとも低温殺菌を含む熱処理に供される。
特定の実施形態では、熱処理は、飲料調製物を７０〜８０℃の範囲の温度に加熱することを含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、熱処理の温度は、７０〜８０℃の範囲、好ましくは７０〜７９℃の範囲、より好ましくは７１〜７８℃の範囲、さらにより好ましくは７２〜７７℃の範囲、最も好ましくは７３〜７６℃の範囲、およそ７５℃等である。
好ましくは、熱処理の持続は、７０〜８０の温度範囲で行われる場合、１秒〜６０分である。最長曝露時間は、温度範囲の最低温度に最適であり、その逆も同様である。
他の好ましい実施形態では、熱処理の温度は、７０℃で少なくとも６０分間、又は好ましくは７５℃で少なくとも４５分間、又は好ましくは８０℃で少なくとも３０分間、又は好ましくは８５℃で少なくとも２２分、又は好ましくは９０℃で少なくとも１０分間である。
本発明の特に好ましい実施形態では、熱処理は、７０〜７８℃で１秒〜３０分、より好ましくは７１〜７７℃で１分〜２５分を提供し、さらにより好ましいことには７２〜７６℃で２分〜２０分である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、方法は、熱処理が、８５℃〜９５℃の温度に１〜３分間加熱することを含む。
幾つかの実施形態では、特にアンフォールディングする場合、より高い温度も好ましい場合があり、任意に、ＢＬＧの凝集も必要とされる。例えば、熱処理の温度は、少なくとも８１℃、好ましくは少なくとも９１℃、好ましくは少なくとも９５℃、より好ましくは少なくとも１００℃、さらにより好ましくは少なくとも１２０℃、最も好ましくは少なくとも１４０℃であり得る。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、滅菌は、１２０〜１５０℃の範囲の温度で４〜３０秒間を含む。
熱処理は、例えば、９０〜１３０℃の範囲の温度及び５秒〜１０分の範囲の持続時間を含み得る。熱処理は、例えば、９０〜９５℃の範囲の温度で１〜１０分間、例えばおよそ１２０℃でおよそ２０秒加熱することを含む。或いは熱処理は、１１５〜１２５℃の範囲の温度で５〜３０秒間、例えば、およそ１２０℃でおよそ２０秒加熱することを含み得る。
熱処理は、例えば、ＵＨＴタイプの処理であってもよく、これは、典型的には、１３５〜１４４℃の範囲の温度及び２〜１０秒の範囲の持続時間を含む。
或いは、しかしまた好ましいことに、熱処理は、１４５〜１８０℃の範囲の温度及び０．０１〜２秒の範囲の持続時間を含み得て、より好ましくは、１５０〜１８０℃の範囲の温度及び０．０１〜０．３秒の範囲の持続時間を含み得る。
熱処理の実施は、プレート式若しくは管状熱交換器、かき取り表面熱交換器又はレトルトシステム等の機器の使用を含み得る。或いは、特に好ましくは、９５℃を超える熱処理の場合、例えば、直接蒸気注入、直接蒸気インフュージョン、又はスプレークッキング（ｓｐｒａｙ−ｃｏｏｋｉｎｇ）を使用する、直接蒸気ベースの加熱を使用することができる。さらに、かかる直接蒸気ベースの加熱は、好ましくは、フラッシュ冷却と組み合わせて使用される。スプレークッキングの実施の適切な例は、国際公開第２００９１１３８５８号公報Ａ１に見られ、これらはあらゆる目的で本明細書に組み込まれる。直接蒸気注入及び直接蒸気インフュージョンの実施の適切な例は、国際公開第２００９１１３８５８号公報Ａ１及び国際公開第２０１０／０８５９５７公報Ａ３に見られ、これらはあらゆる目的で本明細書に組み込まれる。高温処理の一般的な態様は、例えば、「Ｔｈｅｒｍａｌ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ｉｎ ｆｏｏｄ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ」 ＩＳＢＮ １８５５７３５５８ Ｘに記載されており、あらゆる目的で参照により本明細書に組み込まれる。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、低温殺菌は、物理的微生物減少と組み合わされる。
物理的微生物減少の有用な例は、加熱、細菌濾過、ＵＶ照射、高圧処理、パルス電界処理、及び超音波の１つ以上を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、熱処理は、無菌の液体飲料調製物をもたらす滅菌である。かかる滅菌は、好ましくは、細菌濾過と低温殺菌を組み合わせることによって得ることができる。
本発明の文脈において、「細菌濾過」という用語は、細菌及び胞子等の微生物を保持するのに十分な孔径であるが、ネイティブＢＬＧを保持しない孔径で行われる濾過に関する。細菌濾過は、滅菌濾過と称されることもあり、問題の液体の精密濾過を含む。細菌濾過は、典型的には、最大１ミクロン、好ましくは最大０．８ミクロン、より好ましくは最大０．６ミクロン、さらにより好ましくは最大０．４ミクロン、最も好ましくは最大０．２ミクロンの孔径を有する膜を用いて行われる。
細菌濾過は、例えば、０．０２〜１ミクロン、好ましくは０．０３〜０．８ミクロン、より好ましくは０．０４〜０．６ミクロン、さらにより好ましくは０．０５〜０．４ミクロン、最も好ましくは０．１〜０．２ミクロンの孔径を有する膜を含み得る。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液は、細菌濾過に供され、続いて、最大８０℃、好ましくは最大７５℃の温度を使用する熱処理に供される。この熱処理の温度及び持続時間の組み合わせは、好ましくは、無菌飲料調製物を提供するために選択される。
本発明の他の好ましい実施形態では、液体溶液は、細菌濾過に供され、続いて、最大０．２秒、好ましくは最大０．１秒の持続時間にわたって少なくとも１５０℃の温度を使用する熱処理に供される。この熱処理の温度と持続時間の組み合わせは、好ましくは、無菌飲料調製物を提供するために選択される。
使用される熱処理温度に応じて、飲料調製物を冷却に供することが有益である。本発明のプロセスの好ましい態様によれば、熱処理に続いて、熱処理された飲料調製物は、好ましくは０〜５０℃、好ましくは０〜２５℃、又は好ましくは０〜２０°、又は好ましくは０〜１５℃、好ましくは０〜１０℃、又は好ましくは４〜８℃、又は好ましくは２〜５℃、又は好ましくは１〜５℃に冷却される任意の工程にある。
飲料調製物が低温殺菌されている場合、それは、好ましくは、熱処理後に０〜１５℃、より好ましくは１〜５℃に冷却される。
この方法の一実施形態によれば、一般に、任意の酸又は塩基が、液体溶液のｐＨを調整するために使用される。当業者は、ｐＨを調整するための適切な手段を認識するであろう。炭酸ナトリウム若しくは炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸水素カリウム、又は水酸化アンモニウム等。好ましくは、ＫＯＨ又はＮａＯＨ等の塩基を使用してｐＨを調整するが、ＮａＯＨを含む他の塩基を使用してｐＨを調整することもできる。
当業者は、ｐＨを調整するのに適した他の手段を認識するであろう。適切な酸としては、例えば、クエン酸、塩酸、リンゴ酸、又は酒石酸、又はリン酸が挙げられ、最も好ましくはクエン酸及び／又はリン酸が挙げられる。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液は、６．５〜７．５の範囲のｐＨを有する。最も好ましくは、採用されるｐＨは、６．５〜７．０のｐＨ又は６．８〜７．２のｐＨである。
液体溶液は、好ましくは５．５〜６．２の範囲のｐＨを有し、或いは液体溶液は６．２〜８．０の範囲のｐＨを有する。
或いは、液体溶液は、６．８〜８．０の範囲のｐＨを有し得て、より好ましくは、液体溶液は、６．２〜８．０の範囲のｐＨを有する。
本発明の液体溶液は、好ましくは、６．２〜８．０のｐＨ、好ましくはｐＨ６．３〜７．６、より好ましくは６．５〜７．２のｐＨの範囲で粘度が低く、清澄で透明であることがわかった。
本発明の液体溶液は、好ましくは、ｐＨ５．５〜８．０ｐＨ、好ましくは５．７〜６．８、より好ましくは５．８〜６．０の範囲のｐＨで粘度が低く、乳白色の外観を有することがわかった。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、本発明の液体溶液は、ｐＨ５．６〜６．２の範囲のｐＨ、好ましくは５．６〜８．０のｐＨで熱処理され、任意に炭水化物、脂肪、ミネラル及びビタミンの供給源と混合され、６．２〜８．０の好ましいｐＨに調整され、第２の熱処理（ＵＨＴ）に供されることが好ましいとわかった。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液は、飲料の重量に対して４．０〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。
本発明の幾つかの実施形態では、液体溶液が、溶液の重量に対して２．０〜１０．０％ｗ／ｗのタンパク質含量を有することが有利である。
したがって、本発明の幾つかの実施形態では、液体溶液は、好ましくは、液体溶液の重量に対して２．０〜１０％ｗ／ｗの総量のタンパク質、好ましくは液体溶液の重量に対して３．０〜１０％ｗ／ｗの総量のタンパク質、好ましくは液体溶液の重量に対して５．０〜９．０％ｗ／ｗの総量のタンパク質、好ましくは液体溶液の重量に対して６．０〜８．０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。
本発明の幾つかの実施形態では、液体溶液のタンパク質含量が、液体溶液の重量に対して１０．０〜２０％ｗ／ｗのように高いことが有利である。
したがって、本発明の幾つかの実施形態では、液体溶液は、好ましくは、液体溶液の重量に対して１０．０〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質、好ましくは液体溶液の重量に対して１２〜１９％ｗ／ｗの総量のタンパク質、さらにより好ましくは液体溶液の重量に対して１５〜１８％ｗ／ｗの総量のタンパク質、最も好ましくは液体溶液の重量に対して１６〜１７％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。
液体溶液は、例えば、好ましくは主要なタンパク質源として、そしてさらにはおそらく唯一のタンパク質源として、他のタンパク質源と組み合わせてＢＬＧ単離物を含むことが特に好ましい。
ＢＬＧ単離物は、好ましくは、ＢＬＧ単離粉末であるか、又は液体ＢＬＧ単離物は、水及びＢＬＧ単離粉末の固体を１〜５０％ｗ／ｗの範囲の量で含む。
βラクトグロブリン（ＢＬＧ）単離粉末は、好ましくは噴霧乾燥によって調製され、ｉ）２〜４．９、ｉｉ）６．１〜８．５、又はｉｉｉ）５．０〜６．０の範囲のｐＨを有し、以下：
−少なくとも３０％ｗ／ｗの量の総タンパク質、
−総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗの量のＢＬＧ、及び
−最大１０％ｗ／ｗの量の水、を含む。
ＢＬＧ単離粉末は、好ましくは、以下：
−少なくとも０．２ｇ／ｃｍ３のかさ密度、
−少なくとも１．１１の固有のトリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０／Ｉ３５０）
−最大１０％のタンパク質変性度、
−ｐＨ３．９で最大２００ＮＴＵの熱安定性、及び
−最大１０００コロニー形成単位／ｇ、の１つ以上を有する。
ＢＬＧ単離粉末は、好ましくは食用組成物である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、２〜４．９の範囲のｐＨを有する。かかる粉末は、酸性食品、特に酸性飲料に特に有用である。
本発明の他の好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、６．１〜８．５の範囲のｐＨを有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、少なくとも４０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも５０％ｗ／ｗ、少なくとも６０％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも７０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも８０％ｗ／ｗの量の総タンパク質を含む。
さらに高いタンパク質含量を必要とする場合があり、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、少なくとも８５％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、少なくとも９２％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも９４％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも９５％ｗ／ｗの量の総タンパク質を含む。
総タンパク質は、例１．５に従って測定される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、総タンパク質に対して少なくとも９２％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９５％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも９７％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも９８％の量のＢＬＧ、最も好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９９．５％ｗ／ｗの量のＢＬＧを含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、アルファ−ラクトアルブミン（ＡＬＡ）及びカゼイノマクロペプチド（ＣＭＰ）の合計は、粉末の非ＢＬＧタンパク質の少なくとも４０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも６０％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも７０％ｗ／ｗ、最も好ましくは粉末の非ＢＬＧタンパク質の少なくとも９０％ｗ／ｗを構成する。
本発明の他の好ましい実施形態では、各主要な非ＢＬＧホエイタンパク質は、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージで最大２５％、好ましくは最大２０％、より好ましくは最大１５％、さらにより好ましくは最大１０％、最も好ましくは最大６％である。
さらに低い濃度の主要な非ＢＬＧホエイタンパク質が望ましい場合がある。そのため、本発明の追加の好ましい実施形態では、各主要な非ＢＬＧホエイタンパク質は、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージで最大４％、好ましくは最大３％、より好ましくは最大２％、さらにより好ましくは最大１％である。
本発明者らは、ラクトフェリン及び／又はラクトペルオキシダーゼの減少が、無彩色のホエイタンパク質生成物を得るのに特に有利であるという徴候を見た。
そのため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ラクトフェリンは、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージの最大２５％、好ましくは最大２０％、より好ましくは最大１５％、さらにより好ましくは最大１０％、最も好ましくは最大６％である。さらに低濃度のラクトフェリンが望ましい場合がある。そのため、本発明の追加の好ましい実施形態では、ラクトフェリンは、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージの最大４％、好ましくは最大３％、より好ましくは最大２％、さらにより好ましくは最大１％である。
同様に、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ラクトペルオキシダーゼは、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージの最大２５％、好ましくは最大２０％、より好ましくは最大１５％、さらにより好ましくは最大１０％、最も好ましくは最大６％である。さらに低濃度のラクトペルオキシダーゼが望ましい場合がある。そのため、本発明の追加の好ましい実施形態では、ラクトペルオキシダーゼは、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これは、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージの最大４％、好ましくは最大３％、より好ましくは最大２％、さらにより好ましくは最大１％である。
ラクトフェリン及びラクトペルオキシダーゼは、例１．２９に従って定量される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、最大１０％ｗ／ｗ、好ましくは最大７％ｗ／ｗ、より好ましくは最大６％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは最大４％ｗ／ｗの量の含水量を有し、最も好ましいのは最大２％ｗ／ｗである。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、最大６０％ｗ／ｗ、好ましくは最大５０％ｗ／ｗ、より好ましくは最大２０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは最大１０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは最大１％ｗ／ｗ、最も好ましくは最大０．１％の量の炭水化物を含む。例えば、ＢＬＧ単離粉末は、例えば、ラクトース、オリゴ糖、及び／又はラクトースの加水分解生成物（すなわち、グルコース及びガラクトース）、スクロース、及び／又はマルトデキストリン等の炭水化物を含み得る。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、最大１０％ｗ／ｗ、好ましくは最大５％ｗ／ｗ、より好ましくは最大２％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは最大０．１％ｗ／ｗの量の脂質を含む。
本発明者らは、ＢＬＧ単離粉末の所望の特性の幾つかに達するようにミネラル含量を制御することが有利となり得ることを見出した。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末のＮａ、Ｋ、Ｍｇ、及びＣａの量の合計は、最大１０ｍｍｏｌ／ｇタンパク質である。好ましくは、ＢＬＧ単離粉末のＮａ、Ｋ、Ｍｇ、及びＣａの量の合計は、最大６ｍｍｏｌ／ｇタンパク質、より好ましくは最大４ｍｍｏｌ／ｇタンパク質、さらにより好ましくは最大２ｍｍｏｌ／ｇタンパク質である。
本発明の他の好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末のＮａ、Ｋ、Ｍｇ、及びＣａの量の合計は、最大１ｍｍｏｌ／ｇタンパク質である。好ましくは、ＢＬＧ単離粉末のＮａ、Ｋ、Ｍｇ、及びＣａの量の合計は、最大０．６ｍｍｏｌ／ｇタンパク質、より好ましくは最大０．４ｍｍｏｌ／ｇタンパク質、さらにより好ましくは最大０．２ｍｍｏｌ／ｇタンパク質、最も好ましくは最大０．１ｍｍｏｌ／ｇタンパク質である。
本発明の他の好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末のＭｇ及びＣａの量の合計は、最大５ｍｍｏｌ／ｇタンパク質である。好ましくは、ＢＬＧ単離粉末のＭｇ及びＣａの量の合計は、最大３ｍｍｏｌ／ｇタンパク質、より好ましくは最大１．０ｍｍｏｌ／ｇタンパク質、さらにより好ましくは最大０．５ｍｍｏｌ／ｇタンパク質である。
本発明の他の好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末Ｍｇ及びＣａの量の合計は、最大０．３ｍｍｏｌ／ｇタンパク質である。好ましくは、ＢＬＧ単離粉末のＭｇ及びＣａの量の合計は、最大０．２ｍｍｏｌ／ｇタンパク質、より好ましくは最大０．１ｍｍｏｌ／ｇタンパク質、さらにより好ましくは最大０．０３ｍｍｏｌ／ｇタンパク質、最も好ましくは最大０．０１ｍｍｏｌ／ｇタンパク質である。
本発明者らは、腎疾患の患者に特に有用な低リン／低カリウム変種のＢＬＧ単離粉末を作製することが可能であることを見出した。かかる製品を製造するには、ＢＬＧ単離粉末のリン及びカリウムの含有量が等しく低くなければならない。
そのため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、タンパク質１００ｇあたり最大１００ｍｇのリンの総リン含有量を有する。好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、タンパク質１００ｇあたり最大８０ｍｇのリンの総含有量を有する。より好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、タンパク質１００ｇあたり最大５０ｍｇのリンの総含有量を有する。さらにより好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、タンパク質１００ｇあたり最大２０ｍｇのリンの総リン含有量を有する。ＢＬＧ単離粉末のリンの総含有量は、タンパク質１００ｇあたり最大５ｍｇのリンである。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、タンパク質１００ｇあたり最大６００ｍｇのカリウムを含む。より好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、タンパク質１００ｇあたり最大５００ｍｇのカリウムを含む。より好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、タンパク質１００ｇあたり最大４００ｍｇのカリウムを含む。より好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、タンパク質１００ｇあたり最大３００ｍｇのカリウムを含む。さらにより好ましくは、ＢＬＧ単離粉末、タンパク質１００ｇあたり最大２００ｍｇのカリウム。さらにより好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、タンパク質１００ｇあたり最大１００ｍｇのカリウムを含む。さらにより好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、タンパク質１００ｇあたり最大５０ｍｇのカリウムを含み、さらにより好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、タンパク質１００ｇあたり最大１０ｍｇのカリウムを含む。
リンの含有量は、問題の組成物の元素リンの総量に関連し、例１．１９に従って決定される。同様に、カリウムの含有量は、問題の組成物の元素カリウムの総量に関連し、例１．１９に従って決定される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、リン最大１００ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大７００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、好ましくはリン最大８０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大６００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、より好ましくはリン最大６０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大５００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、より好ましくはリン最大５０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及び最大４００ｍｇカリウム／タンパク質１００ｇ、又はより好ましくはリン最大２０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大２００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、又はさらにより好ましくはリン最大１０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大５０ｍｇ／タンパク質１００ｇを含む。本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、リン最大１００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、及びカリウム最大３４０ｍｇ／タンパク質１００ｇを含む。
本発明による低リン及び／又は低カリウム組成物を、腎機能が低下している患者群に対する食品を製造するための食品原料として使用することができる。
本発明の文脈では、透明な液体は、例１．７に従って測定され場合、最大２００ＮＴＵの濁度を有する。
そのため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、２〜４．９の範囲のｐＨを有する。好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、２．５〜４．７、より好ましくは２．８〜４．３、さらにより好ましくは３．２〜４．０、最も好ましくは３．４〜３．９の範囲のｐＨを有する。或いは、しかしまた好ましいことに、ＢＬＧ単離粉末は、３．６〜４．３の範囲のｐＨを有し得る。
本発明者らは、幾つかの用途について、例えば、ｐＨ中性の食品、特にｐＨ中性の飲料では、ｐＨ中性のＢＬＧ単離粉末を使用することが特に有利であることを見出した。これは、高タンパク質で、透明又は不透明のｐＨ中性飲料に特に当てはまる。
そのため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、６．１〜８．５の範囲のｐＨを有する。好ましくは、粉末は、６．１〜８．５、より好ましくは６．２〜８．０、さらにより好ましくは６．３〜７．７、最も好ましくは６．５〜７．５の範囲のｐＨを有する。
本発明の他の好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、５．０〜６．０の範囲のｐＨを有する。好ましくは、粉末は、５．１〜５．９、より好ましくは５．２〜５．８、さらにより好ましくは５．３〜５．７、最も好ましくは５．４〜５．６の範囲のｐＨを有する。
有利には、本発明のＢＬＧ単離粉末は、少なくとも０．２０ｇ／ｃｍ３、好ましくは少なくとも０．３０ｇ／ｃｍ３、より好ましくは少なくとも０．４０ｇ／ｃｍ３、さらにより好ましくは少なくとも０．４５ｇ／ｃｍ３、さらにより好ましくは少なくとも０．５０ｇ／ｃｍ３、最も好ましくは少なくとも０．６ｇ／ｃｍ３のかさ密度を有し得る。
凍結乾燥したＢＬＧ単離物等の低密度粉末はふわふわしており、使用中に製造現場の空気中に容易に引き込まれる。これは、凍結乾燥粉末が他の食品に対する相互汚染のリスクを高め、ほこりの多い環境が衛生上の問題の原因であることが知られていることから、問題がある。極端な場合、ほこりの多い環境では粉塵爆発のリスクも高まる。
本発明の高密度変種は、取り扱いがより容易であり、周囲の空気に流れ込みにくい。
本発明の高密度変種の追加の利点は、それらが輸送中に占めるスペースが少なく、それにより、１つの体積単位で輸送することができるＢＬＧ単離粉末の重量を増加させることである。
本発明の高密度変種の更なる利点は、それらが他の粉末食品の原料、例えば、粉砂糖（かさ密度およそ０．５６ｇ／ｃｍ３）、グラニュー糖（かさ密度およそ０．７１ｇ／ｃｍ３）、粉末クエン酸（かさ密度およそ０．７７ｇ／ｃｍ３）等との粉末混合物で使用される場合、分離しにくいことである。
本発明のＢＬＧ単離粉末は、例えば、０．２〜１．０ｇ／ｃｍ３の範囲、好ましくは０．３０〜０．９ｇ／ｃｍ３の範囲、より好ましくは０．４０〜０．８ｇ／ｃｍ３の範囲、さらにより好ましくは０．４５〜０．７５ｇ／ｃｍ３、さらにより好ましくは０．５０〜０．７５ｇ／ｃｍ３の範囲、最も好ましくは０．６〜０．７５ｇ／ｃｍ３の範囲のかさ密度を有し得る。
粉末のかさ密度は、例１．１７に従って測定される。
本発明者らは、ＢＬＧのネイティブ立体構造を維持することが有利であることを見出し、ＢＬＧが酸性飲料に使用される場合、ＢＬＧのアンフォールディングの増加が乾いた口当たりのレベルの増加をもたらすという徴候を見た。
固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０／Ｉ３５０）は、ＢＬＧのアンフォールディングの程度の尺度であり、本発明者らは、ＢＬＧのアンフォールディングが低いか全くないことと相関する高い固有トリプトファン蛍光発光比では、乾いた口当たりが少ないと観察されたことを見出した。固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０／Ｉ３５０）は、例１．１に従って測定される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、少なくとも１．１１の固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０／Ｉ３５０）を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、少なくとも１．１２、好ましくは少なくとも１．１３、より好ましくは少なくとも１．１５、さらにより好ましくは少なくとも１．１７、最も好ましくは少なくとも１．１９の固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０／Ｉ３５０）を有する。
ＢＬＧ単離粉末にかなりの量の非タンパク質物質が含まれている場合は、固有トリプトファン蛍光発光比を測定する前にタンパク質画分を単離することが好ましい。そのため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末のタンパク質画分は、少なくとも１．１１の固有トリプトファン蛍光発光比を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末のタンパク質画分は、少なくとも１．１２、好ましくは少なくとも１．１３、より好ましくは少なくとも１．１５、さらにより好ましくは少なくとも１．１７、最も好ましくは少なくとも１．１９の固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０／Ｉ３５０）を有する。
例えば、ＢＬＧ単離粉末を脱塩水に溶解し、タンパク質を保持するフィルターを使用して溶液を透析又は限外濾過に基づくダイアフィルトレーションに供することにより、ＢＬＧ単離粉末からタンパク質画分を分離することができる。ＢＬＧ単離粉末が干渉レベルの脂質を含む場合、かかる脂質は、例えば、精密濾過によって除去される。精密濾過と限外濾過／ダイアフィルトレーションの工程を組み合わせて、タンパク質画分から脂質及び小分子の両方を除去することができる。
ＢＬＧ単離粉末のかなりの量のＢＬＧが非凝集性ＢＬＧであることがしばしば好ましい。好ましくはＢＬＧの少なくとも５０％は、非凝集性ＢＬＧである。より好ましくは、ＢＬＧの少なくとも８０％は、非凝集性ＢＬＧである。ＢＬＧの少なくとも９０％が非凝集性ＢＬＧであることがさらに好ましい。ＢＬＧの少なくとも９５％が非集約ＢＬＧであことが最も好ましい。ＢＬＧ単離粉末のＢＬＧのおよそ１００％が非凝集性ＢＬＧであることがさらにより好ましい。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、最大１０％、好ましくは最大８％、より好ましくは最大６％、さらにより好ましくは最大３％、さらにより好ましくは最大１％、最も好ましくは最大０．２％のタンパク質変性度を有する。
しかしながら、例えば、不透明な飲料が必要な場合、ＢＬＧ単離粉末がかなりのレベルのタンパク質変性を有することもまた好ましい場合もある。したがって、本発明の他の好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、少なくとも１１％、好ましくは少なくとも２０％、より好ましくは少なくとも４０％、さらにより好ましくは少なくとも５０％、さらにより好ましくは少なくとも７５％、最も好ましくは少なくとも９０％のタンパク質変性度を有する。
ＢＬＧ単離粉末がかなりのレベルのタンパク質変性を有する場合、低レベルの不溶性タンパク質物質、すなわち、貯蔵中に飲料に沈殿し得る沈殿タンパク質物質を維持することがしばしば好ましい。不溶性物質のレベルは、例１．１０に従って測定される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、最大２０％ｗ／ｗの不溶性タンパク質物質、好ましくは最大１０％ｗ／ｗの不溶性タンパク質物質、より好ましくは最大５％ｗ／ｗの不溶性タンパク質物質、さらに好ましくは最大３％ｗ／ｗの不溶性タンパク質物質、最も好ましくは最大１％ｗ／ｗの不溶性タンパク質物質を含む。ＢＬＧ単離粉末が不溶性タンパク質物質を全く含まないことがさらに好ましい場合がある。
本発明者らは、ＢＬＧ単離粉末のｐＨ３．９での熱安定性が、透明な高タンパク質飲料に対するその有用性の良好な指標であることを見出した。ｐＨ３．９での熱安定性は、例１．２に従って測定される。
ＢＬＧ単離粉末が、ｐＨ３．９で最大２００ＮＴＵ、好ましくは最大１００ＮＴＵ、より好ましくは最大６０ＮＴＵ、さらにより好ましい最大４０ＮＴＵの熱安定性を有し、最も好ましいのは最大２０ＮＴＵである。さらにより良好な熱安定性が可能であり、ＢＬＧ単離粉末は、好ましくは、ｐＨ３．９で最大１０ＮＴＵ、好ましくは最大８ＮＴＵ、より好ましくは最大４ＮＴＵの熱安定性を有し、さらにより好ましいのは最大２ＮＴＵである。
ＢＬＧ単離粉末の微生物の含有量は、好ましくは最小限に保たれる。しかしながら、微生物減少プロセスはタンパク質のアンフォールディング及び変性につながる傾向があるため、高度なタンパク質のネイティブ性及び低含有量の微生物の両方を得ることは困難である。本発明は、非常に低い微生物の含有量を得ると同時に、ＢＬＧの高レベルのネイティブ性を維持することを可能にする。
そのため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、最大１５０００コロニー形成単位（ＣＦＵ）／ｇを含む。好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、最大１００００ＣＦＵ／ｇを含む。より好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、最大５０００ＣＦＵ／ｇを含む。さらにより好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、最大１０００ＣＦＵ／ｇを含む。さらにより好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、最大３００ＣＦＵ／ｇを含む。最も好ましくは、ＢＬＧ単離粉末は、最大１００ＣＦＵ／ｇ、例えば、最大１０ＣＦＵ／ｇ等を含む。特に好ましい実施形態では、粉末は無菌である。無菌のＢＬＧ単離粉末は、例えば、精密濾過及び酸性ｐＨでの熱処理等、ＢＬＧ単離粉末の製造中に幾つかの物理的微生物減少プロセスを組み合わせることによって調製される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、ｉ）２〜４．９、ｉｉ）６．１〜８．５、又はｉｉｉ）５．０〜６．０の範囲のｐＨを有し、以下：
−少なくとも３０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも８０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗの量の総タンパク質、
−総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗの量のβラクトグロブリン（ＢＬＧ）、
−最大６％ｗ／ｗの量の水、
−最大２％ｗ／ｗ、好ましくは最大０．５％ｗ／ｗの量の脂質、を含み、
当該ＢＬＧ単離粉末は、以下：
−少なくとも１．１１の固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０／Ｉ３５０）、
−最大１０％のタンパク質変性度、及び
−ｐＨ３．９で最大２００ＮＴＵの熱安定性、を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、ｉ）２〜４．９、又はｉｉ）６．１〜８．５の範囲のｐＨを有し、以下：
−少なくとも３０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも８０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗの量の総タンパク質
−総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、より好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９４％ｗ／ｗの量のβラクトグロブリン（ＢＬＧ）、
−最大６％ｗ／ｗの量の水、
−最大２％ｗ／ｗ、好ましくは最大０．５％ｗ／ｗの量の脂質、を含み、
当該ＢＬＧ単離粉末は、以下：
−少なくとも１．１１の固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０／Ｉ３５０）、
−最大１０％、好ましくは最大５％のタンパク質変性度、及び
−ｐＨ３．９で最大７０ＮＴＵ、好ましくは最大５０ＮＴＵ、さらにより好ましくは最大４０ＮＴＵの熱安定性、を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、ｉ）２〜４．９、又はｉｉ）６．１〜８．５の範囲のｐＨを有し、以下：
−少なくとも３０％ｗ／ｗの量の総タンパク質
−総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗの量のβラクトグロブリン（ＢＬＧ）、
−最大６％ｗ／ｗの量の水、
を含み、
当該ＢＬＧ単離粉末は、以下：
−少なくとも０．２ｇ／ｃｍ３のかさ密度、
−少なくとも１．１１の固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０／Ｉ３５０）、
−最大１０％のタンパク質変性度、及び
−ｐＨ３．９で最大２００ＮＴＵの熱安定性、を有する。
本発明の他の好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、２〜４．９の範囲のｐＨを有し、以下：
−少なくとも８０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも９４％ｗ／ｗの量の総タンパク質
−総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９４％ｗ／ｗの量のβラクトグロブリン（ＢＬＧ）、
−最大６％ｗ／ｗの量の水、
−最大２％ｗ／ｗ、好ましくは最大０．５％ｗ／ｗの量の脂質、を含み、
当該ＢＬＧ単離粉末は、以下：
−少なくとも０．２ｇ／ｃｍ３、好ましくは少なくとも０．３ｇ／ｃｍ３、より好ましくは少なくとも０．４ｇ／ｃｍ３のかさ密度、
−少なくとも１．１１の固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０／Ｉ３５０）、
−最大１０％、好ましくは最大５％、より好ましくは最大２％のタンパク質変性度、及び
−ｐＨ３．９で最大５０ＮＴＵ、好ましくは最大３０ＮＴＵ、さらにより好ましくは最大１０ＮＴＵの熱安定性、を有する。
本発明のさらに他の好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、６．１〜８．５の範囲のｐＨを有し、以下：
−少なくとも８０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも９４％ｗ／ｗの量の総タンパク質、
−総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９４％ｗ／ｗの量のβラクトグロブリン（ＢＬＧ）、
−最大６％ｗ／ｗの量の水、
−最大２％ｗ／ｗ、好ましくは最大０．５％ｗ／ｗの量の脂質、を含み、
当該ＢＬＧ単離粉末は、以下：
−少なくとも０．２ｇ／ｃｍ３、好ましくは少なくとも０．３ｇ／ｃｍ３、より好ましくは少なくとも０．４ｇ／ｃｍ３のかさ密度、
−最大１０％、好ましくは最大５％、より好ましくは最大２％のタンパク質変性度、及び
−ｐＨ３．９で最大５０ＮＴＵ、好ましくは最大３０ＮＴＵ、さらにより好ましくは最大１０ＮＴＵの熱安定性、を有する。
本発明の更なる他の好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、６．１〜８．５の範囲のｐＨを有し、以下：
−少なくとも８０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも９４％ｗ／ｗの量の総タンパク質、
−総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９４％ｗ／ｗの量のβラクトグロブリン（ＢＬＧ）、
−最大６％ｗ／ｗの量の水、
−最大２％ｗ／ｗ、好ましくは最大０．５％ｗ／ｗの量の脂質、を含み、
当該ＢＬＧ単離粉末は、以下：
−少なくとも０．２ｇ／ｃｍ３、好ましくは少なくとも０．３ｇ／ｃｍ３、より好ましくは少なくとも０．４ｇ／ｃｍ３のかさ密度、
−最大１０％、好ましくは最大５％、より好ましくは最大２％のタンパク質変性度、及び
−ｐＨ３．９で最大５０ＮＴＵ、好ましくは最大３０ＮＴＵ、さらにより好ましくは最大１０ＮＴＵの熱安定性、を有する。
本発明の更なる他の好ましい実施形態では、ＢＬＧ単離粉末は、５．０〜６．０の範囲のｐＨを有し、以下：
−少なくとも８０％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは少なくとも９４％ｗ／ｗの量の総タンパク質
−総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９４％ｗ／ｗの量のβラクトグロブリン（ＢＬＧ）、
−最大６％ｗ／ｗの量の水、
−最大２％ｗ／ｗ、好ましくは最大０．５％ｗ／ｗの量の脂質、を含み、
当該ＢＬＧ単離粉末は、以下：
−少なくとも０．２ｇ／ｃｍ３、好ましくは少なくとも０．３ｇ／ｃｍ３、より好ましくは少なくとも０．４ｇ／ｃｍ３のかさ密度、
−最大１０％、好ましくは最大５％、より好ましくは最大２％のタンパク質変性度、
−ｐＨ３．９で最大５０ＮＴＵ、好ましくは最大３０ＮＴＵ、さらにより好ましくは最大１０ＮＴＵの熱安定性、及び
−好ましくは１０％未満のＢＬＧ結晶化度、を有する。
総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗの量のＢＬＧを含むＢＬＧ単離粉末は、典型的には、以下：
ａ）ｉ）２〜４．９の範囲のｐＨ、
ｉｉ）６．１〜８．５の範囲のｐＨ、又は
ｉｉｉ）５．０〜６．０の範囲のｐＨ、
を有する液体ＢＬＧ単離物を提供する工程であって、
当該液体ＢＬＧ分離物が総タンパク質に対して少なくとも８５ｗ／ｗの量のＢＬＧを含む工程
ｂ）任意に、液体ＢＬＧ単離物を物理的微生物減少に供する工程、
ｃ）液体ＢＬＧ分離物を、好ましくは噴霧乾燥によって乾燥する工程、を含む方法によって提供される。
液体ＢＬＧ単離物は、好ましくは哺乳動物の乳から、好ましくは反芻動物の乳、例えばウシ、ヒツジ、ヤギ、スイギュウ、ラクダ、ラマ、ウマ及び／又はシカ由来の乳から調製される。ウシの乳由来のタンパク質が特に好ましい。したがって、ＢＬＧは好ましくはウシＢＬＧである。
液体ＢＬＧ単離物は、幾つかの異なる方法で提供され得る。
典型的には、液体ＢＬＧ単離物の提供は、以下の方法のうちの１つ以上によってＢＬＧに富む組成物を提供するために、ホエイタンパク質フィードからＢＬＧを分離することを含むか、さらにはそれからなる：
−塩溶によるＢＬＧの結晶化又は沈殿、
−塩析によるＢＬＧのＢＬＧの結晶化又は沈殿、
−イオン交換クロマトグラフィー、及び
−限外濾過によるホエイタンパク質の分画。
ＢＬＧに富む組成物を提供するための特に好ましい方法は、ＢＬＧの結晶化によるものであり、好ましくは塩溶によるか、或いは塩析によるものである。
ホエイタンパク質フィードは、好ましくは、ＷＰＣ、ＷＰＩ、ＳＰＣ、ＳＰＩ、又はそれらの組み合わせである。
「ホエイタンパク質フィード」という用語は、ＢＬＧに富む組成物及びその後の液体ＢＬＧ単離物が由来する組成物に関する。
本発明の幾つかの実施形態では、ＢＬＧに富む組成物の調製は、米国特許第２，７９０，７９０号公報Ａ１によるｐＨ範囲３．６〜４．０での高塩ＢＬＧ結晶化を含むか、さらにはそれからなる。
本発明の他の実施形態では、ＢＬＧに富む組成物の調製は、ｄｅ Ｊｏｎｇｈ ｅｔ ａｌ（Ｍｉｌｄ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ Ｄｉｓｃｌｏｓｅｓ Ｎｅｗ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ β−Ｌａｃｔｏｇｌｏｂｕｌｉｎ，Ｊ Ｄａｉｒｙ Ｓｃｉ．，ｖｏｌ．８４（３），２００１，ｐａｇｅｓ ５６２−５７１）、又はＶｙａｓ ｅｔ ａｌ（Ｓｃａｌｅ−Ｕｐ ｏｆ Ｎａｔｉｖｅ β−Ｌａｃｔｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓ，Ｊ．Ｄａｉｒｙ Ｓｃｉ．８５：１６３９−１６４５，２００２）によって記載される方法を含むか、さらにはそれからなる。
しかしながら、本発明の特に好ましい実施形態では、ＢＬＧに富む組成物は、全ての目的で参照により本明細書に組み込まれるＰＣＴ出願ＰＣＴ／ＥＰ２０１７／０８４５５３号明細書に記載されている塩溶条件下でｐＨ５〜６での結晶化によって調製される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、ＢＬＧに富む組成物は、総タンパク質に対して少なくとも９０％のＢＬＧを含み、好ましくはＢＬＧ結晶を含む、ＰＣＴ／ＥＰ２０１７／０８４５５３による食用ＢＬＧ組成物である。
液体ＢＬＧ単離物として使用するために必要な特性をまだ持っていない場合、ホエイタンパク質フィードから分離されたＢＬＧに富む組成物を、液体ＢＬＧ単離物を提供する一環として、以下：
−脱塩、
−ミネラルの添加、
−希釈、
−濃縮、
−物理的微生物減少、及び
−ｐＨ調整、
の群から選択される１つ以上の工程に供することができる。
脱塩の非限定的な例としては、例えば、透析、ゲル濾過、ＵＦ／ダイアフィルトレーション、ＮＦ／ダイアフィルトレーション、及びイオン交換クロマトグラフィーが挙げられる。
ミネラル添加の非限定的な例としては、例えば、Ｎａ、Ｋ、Ｃａ、及び／又はＭｇの塩等の可溶性の食品に許容可能な塩の添加が含まれる。かかる塩は、例えば、リン酸塩、塩化物塩、又は例えば、クエン酸塩若しくは乳酸塩等の食用酸の塩であり得る。ミネラルを、固体、懸濁、又は溶解した形態で添加することができる。
希釈の非限定的な例としては、例えば、水、脱塩水、又はミネラル、酸若しくは塩基の水溶液等の液体希釈剤の添加が挙げられる。
濃度の非限定的な例としては、例えば、蒸発、逆浸透、ナノ濾過、限外濾過及びそれらの組み合わせが挙げられる。
濃縮が全固形分に対するタンパク質の濃度を増加させる必要がある場合は、限外濾過又は代わりに透析等の濃縮工程を使用することが好ましい。濃縮が全固形分に対するタンパク質の濃度を増加させる必要がない場合、例えば、蒸発、ナノ濾過及び／又は逆浸透等の方法が有用となる場合がある。
物理的微生物減少の非限定的な例としては、例えば、熱処理、細菌濾過、ＵＶ照射、高圧処理、パルス電界処理、及び超音波が挙げられる。これらの方法は、当業者によく知られている。
ｐＨ調整の非限定的な例としては、例えば、塩基及び／又は酸、好ましくは食品に許容可能な塩基及び／又は酸の添加が挙げられる。二価金属カチオンをキレート化することができる酸及び／又は塩基を用いることが特に好ましい。かかる酸及び／又は塩基の例は、クエン酸、クエン酸塩、ＥＤＴＡ、乳酸、乳酸塩、リン酸、リン酸塩、及びそれらの組み合わせである。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、特に調製物が最大２００ＮＴＵ、より好ましくは最大４０ＮＴＵの濁度を有する場合、液体溶液は、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで−０．１０〜＋０．５１の範囲の色値デルタｂ＊を有する。
本発明の他の好ましい実施形態では、液体溶液は、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで０．０〜０．４０の範囲、好ましくは＋０．１０〜＋０．２５の範囲の色値デルタｂ＊を有する。
本発明の液体溶液は、タンパク質以外の多量栄養素を含み得る。
本発明の幾つかの実施形態では、液体溶液はさらに炭水化物を含む。本発明の液体溶液中の総炭水化物含量は、最終の熱処理飲料調製物の使用目的に依存する。
本発明の幾つかの実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、少なくとも１つの炭水化物源をさらに含む。１つの例示的な実施形態では、少なくとも１つの炭水化物源は、スクロース、サッカロース、マルトース、デキストロース、ガラクトース、マルトデキストリン、コーンシロップ固形物、スクロマルト、グルコースポリマー、コーンシロップ、加工デンプン、難消化性デンプン、米由来の炭水化物、イソマルツロース、白糖、グルコース、フルクトース、ラクトース、高フルクトースコム（ｃｏｍ）シロップ、ハチミツ、糖アルコール、フルクトオリゴ糖、ダイズ繊維、トウモロコシ繊維、グアーガム、コンニャク粉、ポリデキストロース、ファイバーソル（Ｆｉｂｅｒｓｏｌ）、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。本発明の幾つかの実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、フルクタンのような非消化性糖を含み、フルクタンは、イヌリン又はフラクトオリゴ糖を含む。
幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液はさらに、液体溶液の総エネルギー含量の０〜９５％の範囲、好ましくは液体溶液の総エネルギー含量の１０〜８５％の範囲、好ましくは液体溶液の総エネルギー含量の２０〜７５％の範囲、又は好ましくは液体溶液の総エネルギー含量の３０〜６０％の範囲の炭水化物を含む。
さらに低い炭水化物含量がしばしば好ましいため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、好ましくは調製物の総エネルギー含量の０〜３０％の範囲、より好ましくは調製物の総エネルギー含量の０〜２０％の範囲、さらにより好ましくは調製物の総エネルギー含量の０〜１０％の範囲である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液の炭水化物含量は、液体溶液の総エネルギー含量の最大３％、より好ましくは液体溶液の総エネルギー含量の最大１％、さらにより好ましくは液体溶液の総エネルギー含量の最大０．１％である。
本発明の一実施形態では、液体溶液はさらに、ビタミン、調味料、ミネラル、甘味料、抗酸化剤、食用酸、脂質、炭水化物、プレバイオティクス、プロバイオティクス、及び非ホエイタンパク質からなる群から選択される少なくとも１つの追加の原料を含む。
更なる原料は、最終的に包装された熱処理飲料調製物が、所望の栄養素、すなわち、タンパク質欠乏症に苦しむ患者又は筋肉を増強したい運動選手に特に適合した栄養素を含むことを確実にする。
本発明の一実施形態では、液体溶液は、少なくとも１つの高甘味度甘味料をさらに含む。一実施形態では、少なくとも１つの高甘味度甘味料は、アスパルテーム、シクラメート、スクラロース、アセスルファム塩、ネオテーム、サッカリン、ステビア抽出物、例えばレバウジオシドＡ等のステビア配糖体、又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。本発明の幾つかの実施形態では、甘味料は、１つ以上の高甘味度甘味料（ＨＩＳ）を含むか、さらにはそれからなることが特に好ましい。
ＨＩＳは、天然甘味料及び人工甘味料の両方に含まれており、典型的には、スクロースの少なくとも１０倍の甘味強度を持っている。
使用する場合、ＨＩＳの総量は典型的には０．０１〜２％ｗ／ｗの範囲である。例えば、ＨＩＳの総量は、０．０５〜１．５％ｗ／ｗの範囲であり得る。或いは、ＨＩＳの総量は、０．１〜１．０％ｗ／ｗの範囲であり得る。
甘味料の選択は、製造される飲料に依存し得て、例えば、高甘味度甘味料（例えば、アスパルテーム、アセスルファムＫ、スクラロース等）は、甘味料からのエネルギー寄与が望まれない飲料に使用され得るが、天然プロファイルを有する飲料には、天然甘味料（例えば、ステビオールグリコシド、ソルビトール、又はスクロース）が使用され得る。
代替的又は追加的に、炭水化物甘味料を使用することができる。
さらに、甘味料は、１つ以上のポリオール甘味料（複数の場合がある）を含むか、さらにはそれからなることが好ましい場合がある。有用なポリオール甘味料の非限定的な例は、マルチトール、マンニトール、ラクチトール、ソルビトール、イノシトール、キシリトール、トレイトール、ガラクチトール、又はそれらの組み合わせである。使用する場合、ポリオール甘味料の総量は、典型的には、１〜２０％ｗ／ｗの範囲である。例えば、ポリオール甘味料の総量は、２〜１５％ｗ／ｗの範囲であり得る。或いは、ポリオール甘味料の総量は、４〜１０％ｗ／ｗの範囲であり得る。
本発明の液体溶液は、タンパク質以外の多量栄養素を含み得る。本発明の幾つかの実施形態では、液体溶液はさらに脂質を含む。本発明の最終的な熱処理飲料調製物中の総脂質含量は、熱処理飲料調製物の使用目的に依存する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液は、液体溶液の総エネルギー含量の０〜５０％の範囲、又は好ましくは液体溶液の総エネルギー含量の０〜４５％の範囲、又は好ましくは液体溶液の総エネルギー含量の０〜３０％の範囲、又は好ましくは液体溶液の総エネルギー含量の０〜２０％の範囲、又は好ましくは液体溶液の総エネルギー含量の０〜１０％の範囲、又は好ましくは液体溶液の総エネルギー含量の０〜５％の範囲の脂質含量を有する。
脂質の量は、ＩＳＯ １２１１：２０１０（脂肪含量の決定−Ｒｏｅｓｅ−Ｇｏｔｔｌｉｅｂ重量分析法）に従って決定される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液の脂質含量は、液体溶液の総エネルギー含量の最大３％、より好ましくは液体溶液の総エネルギー含量の最大１％、さらにより好ましくは液体溶液の総エネルギー含量の最大０．１％である。
液体溶液は、典型的には、５０〜９９％ｗ／ｗの範囲、好ましくは４５〜９７％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは４０〜９５％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは３５〜９０％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは３０〜８５％ｗ／ｗの範囲の水の総量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液は、５５〜９０％ｗ／ｗの範囲、好ましくは５７〜８５％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは６０〜８０％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは６２〜７５％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは６５〜７０％ｗ／ｗの範囲の水の総量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液は、９０〜９９％ｗ／ｗの範囲、好ましくは９２〜９８．５％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは９４〜９８％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは９５〜９８％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは９６〜９８％ｗ／ｗの範囲の水の総量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液は、最大１．０％ｗ／ｗのエタノール、より好ましくは最大０．５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは最大０．１％ｗ／ｗを含み、最も好ましくは、検出可能なエタノールがないことを意味するノンアルコールである。
液体溶液は、典型的には、１〜４５％ｗ／ｗの範囲、好ましくは５〜４０％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは１０〜３５％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは１２〜３０％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは１６〜２５％ｗ／ｗの範囲の全固形分量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液は、１０〜４５％ｗ／ｗの範囲、好ましくは１５〜４３％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは２０〜４０％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは２５〜３８％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは３０〜３５％ｗ／ｗの範囲の全固形分量を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液は、１〜１０％ｗ／ｗの範囲、好ましくは１．５〜８％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは２〜６％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは２〜５％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは２〜４％ｗ／ｗの範囲の全固形分量を含む。
固体ではない液体溶液の部分は、好ましくは水である。
本発明者らは、包装された熱処理飲料調製物の所望の特性の幾つかに達するようにミネラル含量を制御することが有利となり得ることを見出した。
本発明者らは、驚くべきことに、本明細書、並びに例２及び３で定義されるようにＢＬＧ単離物を使用すると、、粘度を損なうことなく、ゲル化を回避して、熱処理飲料調製物を製造できることを見出した。これにより、高いミネラル含量を有する包装された熱処理飲料調製物を製造できる可能性があり、栄養的に完全な栄養補助食品又は栄養的に不完全な栄養補助食品である飲料を製造できる可能性がある。
本発明の幾つかの実施形態では、液体溶液は、複数のミネラルを含む。例示的な一実施形態では、液体溶液は、少なくとも４種類のミネラルを含む。一実施形態では、４種類のミネラルは、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、及びカルシウムである。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、Ｎａ、Ｋ、ｍｇ及びＣａの量の合計は、液体溶液中に０〜４００ｍＭの範囲内、好ましくは１０〜２００ｍＭの範囲内、又は好ましくは２０〜１００ｍＭの範囲内である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、Ｎａ、Ｋ、Ｍｇ及びＣａの量の合計は、液体溶液中で最大４００ｍＭである。
本発明の他の好ましい実施形態では、Ｎａ、Ｋ、Ｍｇ及びＣａの量の合計は、液体溶液中で最大３００ｍＭ、好ましくは最大２００ｍＭ、好ましくは最大１００ｍＭ、又は好ましくは最大８０ｍＭ、又は好ましくは最大６０ｍＭ、又は好ましくは最大４０ｍＭ、又は好ましくは最大３０ｍＭ、又は好ましくは最大２０ｍＭ、又は好ましくは最大２０ｍＭ、又は好ましくは最大１０ｍＭ、又は好ましくは最大５ｍＭ又は好ましくは最大１ｍＭである。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、Ｍｇ及びＣａの量の合計は、液体溶液中で最大７５ｍＭ、より好ましくは液体溶液中で最大４０ｍＭ、より好ましくは液体溶液中で最大２０ｍＭである。
本発明の他の好ましい実施形態では、Ｍｇ及びＣａの量の合計は、液体溶液中で最大１０ｍＭ、より好ましくは液体溶液中で最大８．０ｍＭ、より好ましくは液体溶液中で最大６．０ｍＭ、さらにより好ましくは液体溶液中で最大４．０ｍＭであり、最も好ましくは液体溶液中で最大２．０ｍＭである。
本発明の別の例示的な実施形態では、液体溶液は、カルシウム、ヨウ素、亜鉛、銅、クロム、鉄、リン、マグネシウム、セレン、マンガン、モリブデン、ナトリウム、カリウム、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される複数のミネラルを含む。
本発明の他の好ましい実施形態では、液体溶液は低ミネラル溶液である。
本発明の文脈において、「低ミネラル」という用語は、以下：
−全固形分に対して最大１．２％ｗ／ｗ透明の灰分、
−全固形分に対して最大０．３％ｗ／ｗのカルシウム及びマグネシウムの総含有量、
−全固形分に対して最大０．１０％ｗ／ｗのナトリウム及びカリウムの総含有量、
−タンパク質１００ｇあたり最大１００ｍｇのリンの総含有量、の少なくとも１つ、好ましくは２つ、さらにより好ましくは全てを有する組成物、例えば、液体、飲料、粉末又は別の食品に関する。
好ましくは、低ミネラル組成物は、以下：
−全固形分に対して最大０．７％ｗ／ｗの灰分、
−全固形分に対して最大０．２％ｗ／ｗのカルシウム及びマグネシウムの総含有量、
−全固形分に対して最大０．０８％ｗ／ｗのナトリウム及びカリウムの総含有量、
−タンパク質１００ｇあたり最大８０ｍｇのリンの総含有量、の少なくとも１つ、好ましくは２つ以上、さらにより好ましくは全てを有する。
さらにより好ましくは、低ミネラル組成物は、以下：
−全固形分に対して最大０．５％ｗ／ｗの灰分、
−全固形分に対して最大０．１５％ｗ／ｗのカルシウム及びマグネシウムの総含有量、
−全固形分に対して最大０．０６％ｗ／ｗのナトリウム及びカリウムの総含有量、
−タンパク質１００ｇあたり最大５０ｍｇのリンの総含有量、の少なくとも１つ、好ましくは２つ以上、さらにより好ましくは全てを有する。
低ミネラル組成物は、以下：
−全固形分に対して最大０．５％ｗ／ｗの灰分、
−全固形分に対して最大０．１５％ｗ／ｗのカルシウム及びマグネシウムの総含有量、
−全固形分に対して最大０．０６％ｗ／ｗのナトリウム及びカリウムの総含有量、
−タンパク質１００ｇあたり最大５０ｍｇのリンの総含有量、を有することが特に好ましい。
本発明の別の例示的な実施形態では、液体溶液は、カルシウム、ヨウ素、亜鉛、銅、クロム、鉄、リン、マグネシウム、セレン、マンガン、モリブデン、ナトリウム、カリウム、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される複数のミネラルを含む。
本発明者らは、本発明により、腎疾患を患っているか、そうでなければ腎機能が低下している患者に有利である、リン、及びカリウム等の他のミネラルの含有量が非常に少ない包装された熱処理飲料調製物を調製できることを見出した。
液体溶液は、好ましくは低リン飲料調製物である。
液体溶液は、好ましくは低カリウム飲料調製物である。
液体溶液は、好ましくは、低リン及び低カリウム飲料調製物である。
本発明の文脈において、「低リン」という用語は、タンパク質１００ｇあたり最大１００ｍｇのリンの総含有量を有する組成物、例えば、液体、粉末、又はその他の食品に関する。好ましくは、低リン組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大８０ｍｇのリンの総含有量を有する。より好ましくは、低リン組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大５０ｍｇのリンの総含有量を有し得る。さらにより好ましくは、低リン組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大２０ｍｇのリンのリン総含有量を有し得る。さらにより好ましくは、低リン組成物は、タンパク質１００ｇあたり最大５ｍｇのリンのリン総含有量を有し得る。本発明による低リン組成物を、腎機能が低下している患者群に対する食品を製造するための食品原料として使用することができる。
リンの含有量は、問題の組成物の元素リンの総量に関連し、例１．１９に従って決定される。
カリウムの含有量は、問題の組成物の元素カリウムの総量に関連し、例１．１９に従って決定される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液は、リン最大１００ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大７００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、好ましくはリン最大８０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大６００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、より好ましくはリン最大６０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大５００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、より好ましくはリン最大５０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及び最大４００ｍｇカリウム／タンパク質１００ｇ、又はより好ましくはリン最大２０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大２００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、又はさらにより好ましくはリン最大１０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大５０ｍｇ／タンパク質１００ｇを含む。本発明の幾つかの好ましい実施形態では、包装された熱処理飲料調製物は、リン最大１００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、及びカリウム最大３４０ｍｇ／タンパク質１００ｇを含む。
少量のリン及びカリウムを含む液体溶液は、有利には炭水化物及び脂質で補充することができ、熱処理飲料調製物は、好ましくは液体溶液の総エネルギー含量の３０〜６０％の範囲、好ましくは３５〜５０Ｅ％の範囲の炭水化物の総量、及び総エネルギー含量の２０〜６０％の範囲、好ましくは、３０〜５０Ｅ％の範囲の脂質の総量をさらに含む。
本発明の一実施形態では、液体溶液は、複数のビタミンを含む。一例示的な実施形態では、液体溶液は、少なくとも１０種類のビタミンを含む。例示的な一実施形態では、液体溶液は、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ３、ビタミンＢ５、ビタミンＢ６、ビタミンＢ７、ビタミンＢ９、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＫ、リボフラビン、パントテン酸、ビタミンＥ、チアミン、ナイアシン、葉酸、ビオチン、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される複数のビタミンを含む。
本発明の一実施形態では、液体溶液は、複数のビタミン及び複数のミネラルを含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液は、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、酢酸、安息香酸、酪酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、アスコルビン酸、アジピン酸、リン酸、及びそれらの混合物からなる群から選択される１つ以上の食用酸を含む。
本発明の一実施形態では、液体溶液は、塩、調味料、うまみ調味料及び／又は香辛料からなる群から選択される香料をさらに含む。本発明の好ましい実施形態では、香料は、チョコレート、ココア、レモン、オレンジ、ライム、ストロベリー、バナナ、フォレストフルーツフレーバー又はそれらの組み合わせを含む。香料の選択は、製造する飲料によって異なる。
本発明者らは、本発明、特に総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗのＢＬＧを含むタンパク質画分の使用が、以前は制御不能なゲル形成につながると考えられていた驚くほど高いタンパク質濃度で、タンパク質ナノゲルを形成することを可能にすることを発見した。これは、タンパク質ナノゲルを変性及び濃縮した後にタンパク質含量を濃縮する必要なしに、高タンパク質飲料を直接製造することを可能にするため有利である。
そのため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液、又は液体溶液を調製するために使用される先の溶液は、以下：
−５〜２０％ｗ／ｗの範囲、好ましくは８〜１９％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは１０〜１８％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは１２〜１６％ｗ／ｗの総量のタンパク質、
−総タンパク質に対して少なくとも８５％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗ、より好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９２％ｗ／ｗ、最も好ましくは総タンパク質に対して少なくとも９６％ｗ／ｗの量のＢＬＧ、を含み、
以下：
−最大３０％、好ましくは最大２０％、さらにより好ましくは最大１０％、最も好ましくは最大５％のタンパク質変性度、及び
−５．６〜６．５、好ましくは５．８〜６．２、より好ましくは５．９〜６．１の範囲のｐＨを有する。
本発明の文脈において、「先の溶液」又は「液体溶液を調製するために使用される先の溶液」という用語は、液体溶液の調製に使用される水溶液に関し、典型的には、液体溶液と同じタンパク質含量を有するか、又はわずかに高いタンパク質含量を有する。タンパク質、特にネイティブＢＬＧを、例えば、液体溶液を形成する前の熱変性によって修飾しなければならない場合、先の溶液の使用が好ましい。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液、又は液体溶液を調製するために使用される先の溶液は、１０〜２０％ｗ／ｗの範囲、好ましくは１０〜１９％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは１０〜１８％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは１０〜１６％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。
本発明の他の好ましい実施形態では、液体溶液、又は液体溶液を調製するために使用される先の溶液は、５〜２０％ｗ／ｗの範囲、好ましくは８〜１９％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは１０〜１８％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは１２〜１６％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む。
−５．６〜６．５、好ましくは５．８〜６．２、より好ましくは５．９〜６．１の範囲のｐＨ。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液、又は液体溶液を調製するために使用される先の溶液は、最大３０％、好ましくは最大２０％、さらにより好ましくは最大１０％、最も好ましくは最大５％のタンパク質変性度を有する。
さらに低いタンパク質変性度が好ましい場合があるため、本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液、又は液体溶液を調製するために使用される先の溶液は、最大４％、好ましくは最大２％、さらにより好ましくは最大１％、最も好ましくは最大０．２％のタンパク質変性度を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液、又は液体溶液を調製するために使用される先の溶液は、最大５％ｗ／ｗ、より好ましくは最大２％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは最大０．５％ｗ／ｗ、最も好ましくは最大０．１％ｗ／ｗの脂質含量を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液、又は液体溶液を調製するために使用される先の溶液は、最大１２％ｗ／ｗ、より好ましくは最大６％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは最大２％ｗ／ｗ、最も好ましくは最大０．１％ｗ／ｗの炭水化物含量を有する。
しかしながら、本発明の他の好ましい実施形態では、液体溶液、又は液体溶液を調製するために使用される先の溶液は、２〜２５％ｗ／ｗ、より好ましくは４〜２０％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは５〜１８％ｗ／ｗ、最も好ましくは６〜１５％ｗ／ｗの炭水化物含量を有する。これらの実施形態は、例えば、最終的な飲料にかなりの含有量の炭水化物が含まれている必要がある場合に有用である。或いは、タンパク質ナノゲルが形成された後、炭水化物を熱処理された先の溶液に加えることができる。
例えば、タンパク質ナノゲルの形成に有用である本発明の幾つかの好ましい実施形態では、液体溶液、又は液体溶液を調製するために使用される先の溶液は、５．６〜６．５、好ましくは５．８〜６．２、より好ましくは５．９〜６．１の範囲のｐＨを有する。
液体溶液、又は液体溶液を調製するために使用される先の溶液は、好ましくは、７０〜１４５℃、好ましくは７５〜１２０℃、より好ましくは８０〜９８℃、さらにより好ましくは８２〜９６℃、最も好ましくは８５〜９５℃の範囲の温度を使用する第１の熱処理に供される。
タンパク質のナノゲル化を起こす第１の熱処理は、例えば、かき取り表面熱交換器又は同様の高剪断装置を使用して、高剪断条件下で行うことができ、驚くべきことに、例えば、包装された液体溶液を油浴に浸漬するか、又はプレート式熱交換器を使用することにより、低剪断又はさらには非剪断条件下で加熱することでタンパク質ナノゲルを形成することも可能である。
第１の熱処理は、好ましくは、少なくとも４０％、好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、最も好ましくは少なくとも８０％のタンパク質変性度を提供するのに十分な期間を有する。好ましくは少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％のさらに高いタンパク質変性度を、第１の熱処理によって得ることができる。
第１の熱処理は、例えば、０．１秒〜２時間、好ましくは０．５分〜１時間、より好ましくは２分〜３０分、最も好ましくは５〜２０分の範囲の持続時間を有し得る。
幾つかの好ましい実施形態では、第１の熱処理は、包装された熱処理飲料調製物を製造する方法の唯一の熱処理である。この場合、第１の熱処理は、包装前又は包装後に液体溶液に適用される。
他の好ましい実施形態では、第１の熱処理は、タンパク質ナノゲルを形成するために使用され、その後、好ましくは、液体溶液の最終的な低温殺菌又は滅菌の目的を果たす第２の熱処理が続く。この場合、第１の熱処理は、好ましくは、液体溶液を調製するために使用される先の溶液に適用される。次いで、本明細書で言及されている他の原料、例えば、炭水化物、脂肪、ミネラル、及び／又はビタミン等と混合して液体溶液を形成することにより、この先の溶液を処理することができる。かかる処理には、例えばｐＨ調整、均質化、及び／又は乳化等の他の工程も含まれる場合がある。好ましくは、液体溶液は、先の溶液、及び任意に先の溶液と混合される追加の原料を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では：
−第１の熱処理は、液体溶液を調製するために使用される先の溶液に適用され、それによってタンパク質ナノゲルを形成する、
−任意に、加熱された先の溶液を、例えば混合することにより、他の原料と合わせる、
−液体溶液は、それ自体が加熱されている先の溶液の形態で、又は加熱された先の溶液と他の原料の組み合わせの形態で、適切な容器に包装される、及び
−包装された液体溶液は、少なくとも低温殺菌を含み、好ましくは無菌の飲料調製物を提供するのに十分である第２の熱処理に供される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、例えば、Ｃａ、Ｍｇ、Ｋ及び／又はＫ等のミネラルを、ナノゲルを含み、熱処理された先の溶液に添加する。本発明者らは、ホエイタンパク質が先にナノゲルに変換された場合、高ミネラル含量の存在下での低温殺菌又はさらには滅菌熱処理に対して、ホエイタンパク質がより耐性であることを観察した。
「飲料調製物」という用語は、少なくとも低温殺菌を含む熱処理に供された液体溶液を表す。
液体溶液、又は液体溶液を調製するために使用される先の溶液のＣａ及びＭｇの総量は、好ましくは０．００１〜０．１％ｗ／ｗ、より好ましくは０．００５〜０．０６％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは０．０２〜０．０４％ｗ／ｗの範囲である。
液体溶液、又は液体溶液を調製するために使用される先の溶液のＮａ及びＫの総量は、好ましくは０．００１〜０．２％ｗ／ｗ、より好ましくは０．０１〜０．１％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは０．０４〜０．０６％ｗ／ｗの範囲である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、例えば、Ｃａ、Ｍｇ、Ｋ及び／又はＫ等のミネラルを、ナノゲルを含み、熱処理された先の溶液に添加する。本発明者らは、ホエイタンパク質が先にナノゲルに変換された場合、高ミネラル含量の存在下での低温殺菌又はさらには滅菌熱処理に対して、ホエイタンパク質がより耐性であることを観察した。
そのため、ナノゲルを含み、熱処理された先の溶液は、少なくとも０．１％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも０．３％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも０．５％ｗ／ｗのＣａ及びＭｇの総量を含む液体溶液を提供するのに十分な量のミネラルを含む他の原料と混合されることがしばしば好ましい。
ナノゲルを含む熱処理された先の溶液は、好ましくは、０．１〜１．５％ｗ／ｗ、より好ましくは０．３〜１．２％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは０．５〜１．０％ｗ／ｗのＣａ及びＭｇの総量を含む液体溶液を提供するのに十分な量のミネラルを含む他の原料と混合される。
加えて、ナノゲルを含み、熱処理された先の溶液は、少なくとも０．２％ｗ／ｗ、好ましくは少なくとも０．５％ｗ／ｗ、より好ましくは少なくとも０．７％ｗ／ｗのＮａ及びＫの総量を含む液体溶液を提供するのに十分な量のミネラルを含む他の原料と混合されることがしばしば好ましい。
ナノゲルを含む熱処理された先の溶液は、好ましくは、０．２〜１．５％ｗ／ｗ、より好ましくは０．５〜１．２％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは０．７〜１．０％ｗ／ｗのＮａ及びＫの総量を含む液体溶液を提供するのに十分な量のミネラルを含む他の原料と混合される。
液体溶液、又は液体溶液を調製するために使用される先の溶液は、好ましくは国際公開第２０１８／１１５５２０号公報Ａ１に従って得られる本明細書に記載のＢＬＧ単離物を、好ましくは脱塩又はｐＨ調整された水と混合することによって調製され、任意に所望のタンパク質含量及び５．６〜６．４の範囲のｐＨを得るためにｐＨを調整することが特に好ましい。液体が透明になったらすぐにｐＨ調整を停止することが好ましい。
可溶性ホエイタンパク質凝集物は、好ましくは、６．６〜８．０の範囲、より好ましくは６．７〜７．５の範囲、さらにより好ましくは６．９〜７．３の範囲のｐＨでの熱処理によって形成される。タンパク質ナノゲルの文脈で説明されている熱処理は、可溶性ホエイタンパク質凝集物の形成にも同様に有用である。しかしながら、液体溶液のタンパク質含量は、好ましくは１〜１２％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは３〜１１％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは５〜１０％ｗ／ｗの範囲、最も好ましくは６〜９％ｗ／ｗの範囲である。
高タンパク質濃度を有する液体溶液を使用して可溶性ホエイタンパク質凝集物を調製するために、液体溶液のＣａ及びＭｇの総量は、好ましくは最大０．０１％ｗ／ｗ、より好ましくは最大０．００５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは最大０．００１％ｗ／ｗである。
高タンパク質濃度を有する液体溶液を使用して可溶性ホエイタンパク質凝集物を調製するために、液体溶液のＮａ及びＫの総量は、好ましくは最大０．０５％ｗ／ｗ、より好ましくは最大０．０１％ｗ／ｗ、最も好ましくは最大０．００５％ｗ／ｗである。
本発明の一態様は、溶液の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含むタンパク質溶液の使用に関し、５．５〜８．０の範囲のｐＨを有する滅菌飲料調製物の白色度を制御するためタンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％がβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である。
本発明の別の態様は、タンパク質欠乏症に関連する疾患の治療方法で使用するための、本明細書で定義される包装された熱処理飲料調製物に関する。
本発明の別の態様は、本明細書で栄養補助食品として定義される、包装された熱処理飲料調製物の使用に関する。
本発明の好ましい実施形態では、本明細書で定義される包装された熱処理飲料調製物は、栄養補助食品として使用され、運動前、運動中、又は運動後に摂取される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、５．８〜８．０の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料は、
−飲料調製物の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）であるタンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み該飲料調製物のタンパク質画分は、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで −０．１０〜＋０．５１の範囲の色値デルタｂ＊を有し、
デルタｂ＊＝ｂ６．０ｗ／ｗ％タンパク質に標準化したサンプル ＊ −ｂ脱塩水 ＊であり、室温で測定される。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、５．８〜８．０の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料は、
−飲料調製物の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、タンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み
該飲料調製物のタンパク質画分は、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで−０．１０〜＋０．５１の範囲の色値デルタｂ＊を有し、
デルタｂ＊＝ｂ６．０ｗ／ｗ％タンパク質に標準化したサンプル ＊−ｂ脱塩水 ＊であり、室温で測定され、
調製物の総エネルギー含量の最大５％の脂質含量を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、５．８〜８．０の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料は、
−飲料調製物の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）であるタンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み該飲料調製物のタンパク質画分は、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで−０．１０〜＋０．５１の範囲の色値デルタｂ＊を有し、
デルタｂ＊＝ｂ６．０ｗ／ｗ％タンパク質に標準化したサンプル ＊−ｂ脱塩水 ＊であり、室温で測定される。
また、調製物の総エネルギー含量の５％を超える、好ましくは２０Ｅ％を超える脂質含量を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、５．８〜８．００の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料は、
−飲料調製物の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）であるタンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み、
２００ＮＴＵ超、好ましくは４０ＮＴＵ超の濁度を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、５．８〜８．０の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料は、
−飲料調製物の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、タンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み、
最大２００ＮＴＵ、好ましくは最大４０ＮＴＵの濁度を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、５．８〜８．０の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料は、
−飲料調製物の重量に対して３〜２０％ｗ／ｗ、より好ましくは３〜１８％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは３〜１５％ｗ／ｗ、最も好ましくは３〜１０％ｗ／ｗの総量のタンパク質であっで、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、タンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み、
２００ＮＴＵ超、好ましくは４０ＮＴＵ超の濁度を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、５．８〜８．０の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料は、
−飲料調製物の重量に対して３〜２０％ｗ／ｗ、より好ましくは３〜１８％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは３〜１５％ｗ／ｗ、最も好ましくは３〜１０％ｗ／ｗの総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、タンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み、
最大２００ＮＴＵ、好ましくは最大４０ＮＴＵの濁度を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、６．２〜８．０、好ましくは６．３〜７．６、好ましくは６．５〜７．２の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料は、
−飲料調製物の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、タンパク質と
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み、
最大２００ＮＴＵ、好ましくは最大４０ＮＴＵの濁度を有する。
より好ましくは、６．５〜８．０、好ましくは６．７〜７．６、好ましくは６．９〜７．２の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料調製物は、
−飲料調製物の重量に対して５〜１２％ｗ／ｗの総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも９０ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９４％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、タンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み、
該飲料調製物は、最大４０ＮＴＵ、好ましくは最大２０ＮＴＵの濁度を有し、該飲料調製物は好ましくは無菌である。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、６．２〜８．０、好ましくは６．３〜７．６、好ましくは６．５〜７．２の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料は、
−飲料調製物の重量に対して３〜２０％ｗ／ｗ、より好ましくは３〜１８％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは３〜１５％ｗ／ｗ、最も好ましくは３〜１０％ｗ／ｗの総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、タンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み、
最大２００ＮＴＵ、好ましくは最大４０ＮＴＵの濁度を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、６．５〜８．０、好ましくは６．７〜７．６、好ましくは６．９〜７．２の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料調製物は、
−飲料調製物の重量に対して３〜２０％ｗ／ｗ、より好ましくは３〜１８％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは３〜１５％ｗ／ｗ、最も好ましくは３〜１０％ｗ／ｗの総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも９０ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９４％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、タンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み、
該飲料調製物は、２００ＮＴＵ超、好ましくは４００ＮＴＵ超の濁度を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、５．５〜６．２、好ましくは５．７〜６．１、好ましくは５．８〜６．０の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料は、
−飲料調製物の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、タンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み、
２００ＮＴＵ超、好ましくは４００ＮＴＵ超の濁度を有する。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、５．８〜８．０、好ましくは６．３〜７．６、好ましくは６．５〜７．２の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料は、
−飲料調製物の重量に対して２〜１０．０％ｗ／ｗの総量のタンパク質、好ましくは飲料調製物に対して３．０〜８．０％ｗ／ｗの総量のタンパク質、好ましくは飲料調製物に対して５．０〜７．５％ｗ／ｗ、より好ましくは４．０〜６．０の総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、タンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含む。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、５．８〜８．０、好ましくは６．３〜７．６、好ましくは６．５〜７．２の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料は、
−飲料調製物の重量に対して２〜１０．０％ｗ／ｗ、好ましくは３．０〜８．０、好ましくは５．０〜７．５、より好ましくは４．０〜６．０の総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、タンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み、
マグネシウム及びカルシウムの量の合計は最大１０ｍＭである。
本発明の幾つかの好ましい実施形態では、５．８〜８．０、好ましくは６．３〜７．６、好ましくは６．５〜７．２の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物であって、該飲料は、
−飲料調製物の重量に対して２〜１０．０％ｗ／ｗ、好ましくは３．０〜８．０、好ましくは５．０〜７．５、より好ましくは４．０〜６．０の総量のタンパク質であって、タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％、好ましくは少なくとも９０％ｗ／ｗはβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、タンパク質と、
−任意に、甘味料及び／又は香料と、を含み、
リン最大１００ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大７００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、好ましくはリン最大５０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大４００ｍｇ／タンパク質１００ｇ、又は好ましくはリン最大１０ｍｇ／タンパク質１００ｇ及びカリウム最大５０ｍｇ／タンパク質１００ｇを含む。
本発明の好ましい実施形態は、本明細書に記載の１つ以上の方法によって得られる熱処理飲料調製物に関する。
本発明の態様の１つの文脈で説明された実施形態及び特徴は、本発明の他の態様にも適用されることに留意されたい。
本出願で引用された全ての特許及び非特許の言及は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
次に、本発明を以下の非限定的な例でさらに詳細に説明する。
例１：分析の方法
例１．１：内因性トリプトファン蛍光によるタンパク質のネイティブ性の決定
トリプトファン（Ｔｒｐ）蛍光分光法は、タンパク質のフォールディング及びアンフォールディングを監視するためのよく知られたツールである。ネイティブタンパク質内に埋め込まれたＴｒｐ残基は、典型的には、折りたたまれていないタンパク質等の溶媒に曝露される位置に存在する場合よりも、３３０ｎｍ付近で最も高い蛍光発光を示す。折りたたまれていないタンパク質では、Ｔｒｐ蛍光発光の波長は典型的には、より高い波長へとシフトし、３５０ｎｍ付近で測定されることがよくある。本発明者らは、ここで、この遷移を利用して、３３０ｎｍ及び３５０ｎｍでの蛍光発光の比率を計算し、加熱温度の影響を調査することにより、熱的に誘発されたアンフォールディングを監視する。
分析は以下の工程を含む：
・飲料組成物をＭＱ水で０．６ｍｇ／ｍＬに希釈した。
・３００μｌのサンプルを、気泡を避けて白色９６ウェルプレートに移すか、又は３ｍＬを１０ｍｍの石英キュベットに移した。
・３１０〜４００ｎｍのトリプトファン蛍光発光強度を、５ｎｍスリットを使用して２９５で励起することにより上部から記録した。
・サンプルを、プレートリーダーアクセサリ（Ｇ９８１０Ａ）又はシングルキュベットホルダーを備えたＣａｒｙ Ｅｃｌｉｐｓｅ蛍光分光光度計を使用して２２℃で測定した
・３３０ｎｍで測定された蛍光発光強度を３５０ｎｍでの発光強度で割ること、すなわちＲ＝Ｉ３３０／Ｉ３５０によって発光強度比を計算し、タンパク質のネイティブ率（ｎａｔｉｖｉｔｙ）の尺度として使用した。
ｏ少なくとも１．１１のＲは、優勢なネイティブＢＬＧ立体構造を表し、
ｏ１．１１未満のＲは、少なくとも部分的なアンフォールディング及び凝集を報告する。
例１．２：ＰＨ ３．９での熱安定性
ｐＨ ３．９での熱安定性：
ｐＨ３．９での熱安定性は、ｐＨ３．９での長時間の低温殺菌時にタンパク質組成物が清澄な状態を維持する能力の尺度である。
ｐＨ３．９での熱安定性は、ｐＨ３．９の水溶液を形成し、試験する粉末又は液体のサンプルを水と混合することにより６．０％ｗ／ｗタンパク質を含め（又は、希薄な液体の場合、代替的には、低温蒸発によって濃縮する）、最小限の０．１Ｍ ＮａＯＨ又は０．１Ｍ ＨＣｌでｐＨを３．９に調整することによって決定される。
ｐＨを調整した混合物を３０分間静置した後、２５ｍＬの混合物を３０ｍＬの薄壁ガラス試験管に移す。７５．０℃の水浴に浸漬することで３００秒間、７５．０℃に加熱する。加熱後直ちにガラス試験管を氷浴に移して１〜５℃に冷却し、熱処理されたサンプルの濁度を、例１．７に従って測定する。
例１．３：ホエイタンパク質組成物のタンパク質変性度の決定
変性ホエイタンパク質は、ｐＨ４．６未満又はｐＨ４．６超のｐＨ値よりもｐＨ４．６での溶解度が低いことが知られているため、ホエイタンパク質組成物の変性度は、溶液中のタンパク質が安定しているｐＨでの総量のタンパク質に対するｐＨ４．６での可溶性タンパク質の量を測定することによって決定される。
より具体的には、ホエイタンパク質の場合、分析されるホエイタンパク質組成物（例えば、粉末又は水溶液）は、以下に変換される：
−総タンパク質５．０％（ｗ／ｗ）を含み、ｐＨが７．０又は３．０の第１の水溶液、及び
−総タンパク質５．０％（ｗ／ｗ）を含み、ｐＨが４．６の第２の水溶液。
ｐＨ調整を、３％（ｗ／ｗ）ＮａＯＨ（水溶液）又は５％（ｗ／ｗ）ＨＣｌ（水溶液）を使用して行う。
第１の水溶液の総タンパク質含有量（ＰｐＨ７．０又は３．０）を、例１．５に従って決定する。
第２の水溶液を室温で２時間保管し、続いて３０００ｇで５分間遠心分離する。上清のサンプルを回収し、例１．５に従って分析して、上清中のタンパク質濃度（ＳｐＨ４．６）を得る。
ホエイタンパク質組成物のタンパク質変性度、Ｄを次のとおり計算する：
Ｄ＝（（ＰｐＨ７．０又は３．０−ＳｐＨ４．６）／ＰｐＨ７．０又は３．０）＊１００％
例１．４逆相ＵＰＬＣ分析を使用したタンパク質変性の決定（ＰＨ ４．６酸沈殿を伴う）。
ＢＬＧサンプル（非加熱参照及び加熱ＢＬＧ飲料組成物等）をＭＱ水で２％に希釈した。５ｍＬのタンパク質溶液、１０ｍＬのＭｉｌｌｉ−Ｑ、４ｍＬの１０％酢酸、及び６ｍＬの１．０Ｍ ＮａＯＡｃを混合し、２０分間撹拌して、ｐＨ４．６付近で変性タンパク質を沈殿凝集させる。溶液を０．２２μｍフィルターで濾過し、凝集物及び非ネイティブタンパク質を除去する。
全てのサンプルを、研磨水（ｐｏｌｉｓｈｅｄ ｗａｔｅｒ）を加えることによって同じ程度の希釈に供した。
各サンプルについて、ＵＰＬＣカラム（Ｐｒｏｔｅｉｎ ＢＥＨ Ｃ４；３００Å；１．７μｍ；１５０×２．１ｍｍ）を備えたＵＰＬＣシステムに同じ容量を充填し、２１４ｎｍで検出した。
サンプルを、次の条件を使用して流した：
バッファーＡ：Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水、０．１％ｗ／ｗＴＦＡ
バッファーＢ：ＨＰＬＣグレードのアセトニトリル、０．１％ｗ／ｗＴＦＡ
流量：０．４ｍｌ／分
勾配：０〜６．００分 ２４〜４５％Ｂ；６．００〜６．５０分 ４５〜９０％Ｂ；６．５０〜７．００分 ９０％Ｂ；７．００〜７．５０分 ９０〜２４％Ｂ、及び７．５０〜１０．００分 ２４％Ｂ。
タンパク質標準（Ｓｉｇｍａ Ｌ０１３０）に対するＢＬＧピークの面積を使用して、サンプル中のネイティブＢＬＧの濃度を決定した（５レベルの検量線）
サンプルをさらに希釈し、線形範囲外の場合は再注入した。
例１．５：総タンパク質の決定
サンプルの総タンパク質含量（真のタンパク質）を、以下によって決定する：
１）ＩＳＯ ８９６８−１／２｜ＩＤＦ ０２０−１／２−牛乳−窒素含量の決定−第１／２部：ケルダール法を使用した窒素含量の決定に準拠したサンプルの全窒素の決定。
２）ＩＳＯ ８９６８−４｜ＩＤＦ ０２０−４−乳−窒素含量の決定−第４部：非タンパク質窒素含量の決定に準拠したサンプルの非タンパク質窒素の決定。
３）総量のタンパク質を（ｍ総窒素−ｍ非タンパク質−窒素）＊６．３８として計算する。
例１．６：非凝集性ＢＬＧ、ＡＬＡ、及びＣＭＰの決定
非凝集性アルファ−ラクトアルブミン（ＡＬＡ）、βラクトグロブリン（ＢＬＧ）、及びカゼイノマクロペプチド（ＣＭＰ）の含有量を、それぞれ０．４ｍＬ／分のＨＰＬＣ分析で分析した。２５マイクロＬの濾過サンプルを、溶離液（Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水４６５ｇ、アセトニトリル４１７．３ｇ及びトリフルオロ酢酸１ｍＬからなる）で平衡化したプレカラムＰＷｘｌ（６ｍｍ×４ｃｍ、Ｔｏｓｏｈａｓｓ、日本）を取り付けて、連続して接続された２つのＴＳＫｇｅｌ３０００ＰＷｘｌ（７．８ｍｍ ３０ｃｍ、Ｔｏｓｏｈａｓｓ、日本）カラムに注入し、２１０ｎｍのＵＶ検出器を使用した。
ネイティブアルファ−ラクトアルブミン（Ｃアルファ）、βラクトグロブリン（Ｃβ）、及びカゼイノマクロペプチド（ＣＣＭＰ）の含有量の定量的決定を、対応する標準タンパク質で得られたピーク面積をサンプルのピーク面積と比較することによって行った。
追加のタンパク質（非ＢＬＧタンパク質）の総量を、総タンパク質の量（例１．５に従って決定）からＢＬＧの量を差し引くことによって決定した。
例１．７：濁度の決定
濁度は、空気中の煙と同様に、一般に肉眼では見えない多数の粒子によって引き起こされる流体の曇り又はもやである。
濁度は比濁濁度単位（ＮＴＵ）で測定される。
２０ｍＬの飲料／サンプルをＮＴＵガラスに添加し、Ｔｕｒｂｉｑｕａｎｔ（登録商標）３０００ ＩＲ濁度計に入れた。安定化後にＮＴＵ値を測定し、２回繰り返した。
例１．８：粘度の決定
飲料調製物の粘度を、レオメーター（Ａｎｔｏｎ Ｐａａｒ，Ｐｈｙｓｉｃａ ＭＣＲ３０１）を使用して測定した。
３．８ｍＬのサンプルをカップＤＧ２６．７に添加した。サンプルを２２℃に平衡化した後、５０ｓ−１で３０秒間事前に剪断し、その後３０秒間の平衡時間、そして１ｓ−１〜２００ｓ−１及び１ｓ−１の剪断速度スイープを実行した。
特に明記しない限り、粘度は１００ｓ−１剪断速度における単位センチポアズ（ｃＰ）で表される。測定されたｃＰ値が高いほど、粘度が高くなる。
或いは、ＧｉｌｓｏｎによるＶｉｓｃｏｍａｎを使用して粘度を推定し、約３００ｓ−１の剪断速度で報告した。
例１．９：色の決定
色彩色差計（Ｋｏｎｉｃａ Ｍｉｎｏｌｔａ、ＣＲ−４００）を用いて色を測定した。気泡の形成を回避しながら、１５ｇのサンプルを小さなペトリ皿（５５×１４．２ｍｍ、ＶＷＲカタログ番号３９１−０８９５）に加えた。サンプルのタンパク質含量を、６．０ｗ／ｗ％タンパク質以下に標準化した。
色彩色差計を白色の較正プレート（Ｎｏ．１９０３３１７７）に較正した。光源をＤ６５に設定し、オブザーバーを２度に設定した。色（ＣＩＥＬＡＢ色空間、ａ＊値、ｂ＊値、Ｌ＊値）を、ペトリ皿の様々な場所での３つの個別の読み取り値の平均として、懸濁液を覆う蓋をして測定した。
脱塩水基準の値は次のとおりである。
Ｌ＊３９．９７±０．３
ａ＊０．００±０．０６
ｂ＊−０．２２±０．０９
測定値を、脱塩水測定値に基づいてデルタ／差の値に変換した。
デルタＬ＊＝Ｌ６．０ｗ／ｗ％タンパク質に標準化したサンプル ＊−Ｌ脱塩水 ＊、室温で測定。
デルタａ＊＝ａ６．０ｗ／ｗ％タンパク質に標準化したサンプル ＊−ａ脱塩水 ＊、室温で測定。
デルタｂ＊＝ｂ６．０ｗ／ｗ％タンパク質に標準化したサンプル ＊−ｂ脱塩水 ＊、室温で測定。
サンプルは６．０ｗ／ｗ％タンパク質以下に標準化されている。
Ｌ＊ａ＊ｂ＊色空間（ＣＩＥＬＡＢ空間とも称される）は、１９７６年に国際照明委員会（ＣＩＥ）によって定義された均一色空間の１つであり、明度及び色相を定量的に報告するために使用された（ＩＳＯ １１６６４−４：２００８（Ｅ）／ＣＩＥ Ｓ ０１４−４／Ｅ：２００７）。
この空間では、Ｌ＊は明度（０〜１００の値）を示し、Ｌ＊＝０で最も暗い黒、Ｌ＊＝１００で最も明るい白を示す。
カラーチャネルａ＊及びｂ＊は、ａ＊＝０及びｂ＊＝０での真のニュートラルグレー値を表す。ａ＊軸は緑及び赤の成分を表し、緑は負の方向、赤は正の方向である。ｂ＊軸は青及び黄色の成分を表し、負の方向が青、正の方向が黄色である。
例１．１０飲料安定性試験／不溶性タンパク質物質
３０００ｇで５分間遠心分離した際に、加熱されたサンプル中の総タンパク質の１５％未満が沈殿した場合、ホエイタンパク質飲料の組成は安定していると見なされた：
・およそ２０ｇのサンプルを遠心管に加え、３０００ｇで５分間遠心分離した。
・遠心分離前のタンパク質及び遠心分離後の上清のケルダール分析を使用して、タンパク質の回収率を定量した。例１．５を参照されたい。
タンパク質の損失を計算する：
Figure 2021529528
このパラメーターは、不溶性タンパク質物質のレベルと称されることもあり、液体サンプルと粉末サンプルの両方の分析に使用できる。サンプルが粉末の場合、１０ｇの粉末を９０ｇの脱塩水に懸濁し、２２℃で１時間穏やかに攪拌しながら水和させる。遠心管に対しておよそ２０ｇのサンプル（例えば、液体サンプル又は懸濁粉末サンプル）を３０００ｇで５分間遠心分離する。遠心分離前のタンパク質（Ｐｔｏｔａｌ）及び遠心分離後の上清（Ｐ３０００×ｇ）のケルダール分析を使用して、例１．５に従ってタンパク質の回収率を定量した。
不溶性タンパク質物質の量を計算する：
Figure 2021529528
例１．１１：酸性化の際のゲル強度の測定
酸性化の間の胃内の飲料の構造展開をシミュレートするため、レオメーター（Ａｎｔｏｎ Ｐａａｒ，Ｐｈｙｓｉｃａ ＭＣＲ３０１）を使用した。飲料を２ｗ／ｗ％タンパク質に希釈し、４２℃に３０分間温めた。その後、１ｗ／ｗ％ＧＤＬ（Ｄ−グルコン酸、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、重量４９〜５３％）を溶液に加え、５分間撹拌した。溶液（１９．６ｍＬ）をレオメーターのカップＣＣ２７−ＳＳに添加した。レオメーターを４２℃に平衡化し、Ｇ’（貯蔵弾性率、Ｐａ）を０．１Ｈｚ及び０．５％歪みで６０分間測定した。酸性化中のｐＨを、ｐＨロガー（ＷＴＷ、Ｍｕｌｔｉ ３４１０）を使用して追跡した。
例１．１２：イメージングによる透明度の決定
飲料調製物の写真を、「ｌｏｒｅｍ ｉｐｓｕｍ」の文が書かれた紙片に触れている濁度ＮＴＵ測定バイアルにサンプルを入れることによって行った。スマートフォンを使用してバイアルを撮影し、本発明者らは、バイアルを通して文がはっきりと観察できるかどうかを評価した。
例１．１３：灰分含量の決定
食品の灰分を、ＮＭＫＬ １７３：２００５「食品中の灰分重量計測式測定」に従って決定する。
例１．１４：導電率の決定
水溶液の「導電率」（「比導電率」と称されることもある）は、溶液が電気を伝導する能力の尺度である。導電率は、例えば、２つの電極間の溶液のＡＣ抵抗を測定することによって決定され、結果は典型的には、１ｃｍあたりのミリジーメンス（ｍＳ／ｃｍ）の単位で示される。導電率は、例えば、ＥＰＡ（米国環境保護庁）の方法番号１２０．１に従って測定することができる。
本明細書に記載されている導電率の値は、別段の指定がない限り、２５℃に正規化されている。
導電率は、導電率計（テトラコン３２５電極を備えたＷＴＷ Ｃｏｎｄ ３２１０）で測定される。
システムは、使用前にマニュアルに記載されているように較正されている。電極は、局所的な希釈を避けるために、測定が行われるのと同じタイプの媒質でよくすすいでおく。測定が行われる領域が完全に水没するように、電極を媒質に下げる。次いで、電極を攪拌して、電極に閉じ込められた空気を全て除去する。次いで、電極を、安定した値が表示から取得され、記録されるまで静止状態に保つ。
例１．１５：溶液の全固形分の決定
溶液の全固形分は、ＮＭＫＬ １１０第２版、２００５（全固形分（水）−乳及び乳製品の重量分析）に従って決定することができる。ＮＭＫＬは、「ヨーロッパ標準分析法と食品分析に関する北欧委員会（Ｎｏｒｄｉｓｋ Ｍｅｔｏｄｉｋｋｏｍｉｔｅ ｆｏｒ Ｎａｅｒｉｎｇｓｍｉｄｌｅｒ）」の略語である。
溶液の含水量は、１００％から相対的全固形分量（％ｗ／ｗ）を引いたものとして計算できる。
例１．１６：ＰＨの決定
全てのｐＨ値は、ｐＨガラス電極を使用して測定され、２５℃に正規化されている。
ｐＨガラス電極（温度補償付き）は、使用前に注意深くすすぎ、使用前に較正する。
サンプルが液体溶液の場合、ｐＨは２５℃の溶液中で直接測定される。
サンプルが粉末の場合、１０グラムの粉末を９０ｍｌの脱塩水に室温で激しく攪拌しながら溶解する。次いで、溶液のｐＨを２５℃で測定する。
例１．１７：緩み密度及びかさ密度の決定
乾燥粉末の密度は、特定の条件下で特別なＳｔａｍｐｆ体積計（メスシリンダー）を使用して分析される粉末の重量と体積の関係として定義される。密度は典型的には、ｇ／ｍｌ又はｋｇ／Ｌで表される。
この方法では、乾燥粉末のサンプルをメスシリンダーに詰め込む。指定された回数のタッピングの後、製品の体積を読み取り、密度を計算する。
この方法により、以下の３種類の密度を定義ですることができる：
・充填密度、これは、指定されたメスシリンダーに移された後の粉末の体積で割った質量である。
・緩み密度、この規格で指定された条件に従って、１００回のタッピング後の粉末の体積で割った質量である。
・かさ密度、この規格で指定された条件に従って、６２５回のタッピング後の粉末の体積で割った質量である。
この方法では、２５０ｍｌで、０〜２５０ｍｌに目盛りを付けた、重量１９０±１５ｇ（Ｊ．Ｅｎｇｅｌｓｍａｎｎ Ａ．Ｇ．６７０５９ Ｌｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎ／Ｒｈ）の特殊なメスシリンダー、及び例えば、Ｊ．Ｅｎｇｅｌｓｍａｎｎ Ａ．Ｇ．のＳｔａｍｐｆ体積計を使用する。
乾燥製品の緩み密度及びかさ密度を、以下の手順で決定する。
前処理：
測定するサンプルを室温で保管する。
次いで、容器を繰り返し回転及び転倒させてサンプルを完全に混合する（粒子の粉砕を避ける）。容器は２／３を超えて満たされていない。
手順：
１００．０±０．１グラムの粉末を量り、メスシリンダーに移す。容量Ｖ０をｍｌで読み取る。
１００ｇの粉末がシリンダーに収まらない場合は、量を５０又は２５グラムに減らす必要がある。
メスシリンダーをＳｔａｍｐｆ体積計に固定し、これを１００回をタップする。スパチュラで表面を平らにし、容量Ｖ１００をｍｌで読み取る。
タブの数を６２５（１００タップを含む）に変更する。軽くたたいた後、表面を水平にし、容量Ｖ６２５をｍｌで読み取る。
密度の計算：
次の式に従って、ｇ／ｍｌで表される緩み密度及びかさ密度を計算する：
かさ密度＝Ｍ／Ｖ
式中、Ｍは計量されたサンプルをグラムで示し、Ｖは６２５回のタッピング後の容量をｍｌで示す。
例１．１８：粉末の含水量の決定
食品の含水量は、ＩＳＯ ５５３７：２００４（粉乳−含水量の測定（基準法））に従って測定される。ＮＭＫＬは、「ヨーロッパ標準分析法と食品分析に関する北欧委員会（Ｎｏｒｄｉｓｋ Ｍｅｔｏｄｉｋｋｏｍｉｔｅ ｆｏｒ Ｎａｅｒｉｎｇｓｍｉｄｌｅｒ）」の略語である。
例１．１９：カルシウム、マグネシウム、ナトリウム、カリウム、リンの量の決定（ＩＣＰ−ＭＳ法）
カルシウム、マグネシウム、ナトリウム、カリウム、及びリンの総量は、サンプルを最初にマイクロ波分解を使用して分解し、次いでミネラル（複数の場合がある）の総量がＩＣＰ装置を使用して決定される手順を使用して決定される。
装置：
マイクロ波はＡｎｔｏｎ Ｐａａｒ製であり、ＩＣＰはＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｉｎｃ製のＯｐｔｉｍａ ２０００ＤＶである。
材料：
１Ｍ ＨＮＯ３
２％ＨＮＯ３中のイットリウム
５％ＨＮＯ３中のカルシウム、マグネシウム、ナトリウム、カリウム、及びリンの適切な標準
前処理：
一定量の粉末を量り取り、その粉末をマイクロ波分解チューブに移す。５ｍＬの１Ｍ ＨＮＯ３を添加する。電子レンジの指示に従って、電子レンジでサンプルを分解する。分解されたチューブをドラフトチャンバーに入れ、蓋を外して揮発性のヒュームを蒸発させる。
測定手順：
既知量のＭｉｌｌｉ−Ｑ水を使用して、前処理したサンプルをＤｉｇｉＴＵＢＥに移す。２％ＨＮＯ３中のイットリウムの溶液を分解チューブに添加し（５０ｍＬの希釈サンプルあたり約０．２５ｍＬ）、Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水を使用して既知の容量に希釈する。製造元が説明する手順を使用して、ＩＣＰでサンプルを分析する。
ブラインドサンプルは、Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水を使用して、１０ｍＬの１Ｍ ＨＮＯ３及び０．５ｍＬのイットリウム２％ＨＮＯ３溶液の混合物を最終容量１００ｍＬに希釈することによって調製される。
予想されるサンプル濃度を挟む濃度を持つ少なくとも３つの標準サンプルを調製する。
液体サンプルの検出限界は、Ｃａ、Ｎａ、Ｋ及びリン（Ｐｈｏｓｐｈｏｒ）の場合は０．００５ｇ／１００ｇサンプルであり、Ｍｇの場合は０．０００５ｇ／１００ｇサンプルである。粉末サンプルの検出限界は、Ｃａ、Ｎａ、Ｋ及びＰｈｏでは０．０２５ｇ／１００ｇサンプルであり、Ｍｇでは０．０００５ｇ／１００ｇサンプルである。
リン（Ｐｈｏｓｐｈｏｒ）の検出限界以下の場合、検出限界の値を例で使用して、最悪のシナリオとして存在するＰｈｏの最大量を示す。
例１．２０：フロシン値の決定：
フロシン値は、「Ｍａｉｌｌａｒｄ Ｒｅａｃｔｉｏｎ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｂｙ Ｆｕｒｏｓｉｎｅ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ Ｄｕｒｉｎｇ Ｉｎｆａｎｔ Ｃｅｒｅａｌ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ」，Ｇｕｅｒｒａ−Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ ｅｔ ａｌ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｒｅａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２９（１９９９）１７１−１７６に記載されるとおりに決定され、総量のタンパク質は例１．５に従って決定される。フロシン値は、タンパク質１００ｇあたりｍｇ単位のフロシンで報告される。
例１．２１：液体中のＢＬＧの結晶化度の決定
以下の方法を使用して、ｐＨが５〜６の範囲の液体中のＢＬＧの結晶化度を決定する。
ａ）問題の液体のサンプル１０ｍＬを、孔径０．４５ミクロンのＣＡメンブレンを備えたＭａｘｉ−Ｓｐｉｎフィルターに移す。
ｂ）遠心分離機を２℃に保って、直ちにフィルターを１５００ｇで５分間回転させる。
ｃ）スピンフィルターの被保持物側に２ｍＬの冷Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水（２℃）を加え、直ちに、遠心分離機を２°Ｃに冷却したまま、フィルターを１５００ｇで５分間スピンし、透過液（透過液Ａ）を収集して、容量を測定し、例１．３１に概説されている方法を使用してＨＰＬＣを介してＢＬＧ濃度を決定する。
ｄ）フィルターの被保持物側に４ｍＬの２Ｍ ＮａＣｌを加え、すばやく攪拌し、混合物を２５℃で１５分間放置する。
ｅ）直ちにフィルターを１５００ｇで５分間回転させ、透過液を収集する（透過液Ｂ）
ｆ）例１．３１に概説されている方法を使用して、透過液Ａ及び透過液ＢのＢＬＧの総重量を決定し、その結果を重量パーセントではなくＢＬＧの総重量に変換する。透過液Ａ中のＢＬＧの重量はｍ透過液Ａと称され、透過液ＢのＢＬＧの重量はｍ透過液Ｂと称される。
ｇ）ＢＬＧに関する液体の結晶化度は、次のように決定される：
結晶化度＝ｍ透過液Ｂ／（ｍ透過液Ａ＋ｍ透過液Ｂ）＊１００％
例１．２２：乾燥粉末中のＢＬＧの結晶化度の決定
この方法は、乾燥粉末中のＢＬＧの結晶化度を決定するために使用される。
ａ）５．０グラムの粉末サンプルを２０．０グラムの冷Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水（２℃）と混合し、２℃で５分間放置する。
ｂ）問題の液体のサンプルを０．４５ミクロンのＣＡメンブレンを備えたＭａｘｉ−Ｓｐｉｎフィルターに移す。
ｃ）遠心分離機を２℃に保って、直ちに、フィルターを１５００ｇで５分間回転させる。
ｄ）スピンフィルターの被保持物側に２ｍＬの冷Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水（２℃）を添加し、直ちにフィルターを１５００ｇで５分間回転させ、透過液（透過液Ａ）を収集し、容量を測定し、例１．３１に概説されている方法を使用してＨＰＬＣを介してＢＬＧを決定し、結果を重量パーセントではなくＢＬＧの総重量に変換する。透過液ＡのＢＬＧの重量は、ｍ透過液Ａと称される。
ｅ）次いで、粉末中のＢＬＧの結晶化度を、次の式を使用して計算する：
Figure 2021529528
式中、ｍＢＬＧ合計は、工程ａ）の粉末サンプル中のＢＬＧの総量である。
粉末サンプルのＢＬＧの総量が不明な場合は、別の５ｇの粉末サンプル（同じ粉末供給源に由来する）を２０．０グラムのＭｉｌｌｉ−Ｑ水に懸濁し、ＮａＯＨ水溶液を添加してｐＨを７．０に調整し、混合物を撹拌しながら２５℃で１時間放置し、最後に例１．３１を使用して粉末サンプルのＢＬＧの総量を決定することにより、これを決定してもよい。
例１．２３：ＵＦ透過導電率の決定
１５ｍＬのサンプルを３ｋＤａカットオフ（３０００ ＮＭＷＬ）のＡｍｉｃｏｎ Ｕｌｔｒａ−１５遠心フィルターユニットに移し、４０００ｇで２０〜３０分間、又は導電率を測定するのに十分な容量のＵＦ透過液がフィルターユニットの下部に蓄積するまで遠心分離する。遠心分離直後に導電率を測定する。サンプルの取り扱い及び遠心分離は、サンプルの供給源の温度で行われる。
例１．２４：粉末中の乾燥ＢＬＧ結晶の検出
粉末中の乾燥ＢＬＧ結晶の存在は、次の方法で識別され得る：
分析する粉末のサンプルを再懸濁し、４℃の温度の脱塩水に１部の粉末に対して２部の水の重量比で穏やかに混合し、４℃で１時間再水和させる。
再水和されたサンプルを、結晶の存在を識別するために顕微鏡検査によって調べ、好ましくは複屈折を検出するために平面偏光を使用する。
結晶様物質を分離し、結晶構造の存在を確認するためＸ線結晶構造解析に供し、また、好ましくは結晶格子（空間群及び単位格子の寸法）がＢＬＧ結晶の結晶格子に対応していることも確認する。
単離された結晶様物質の化学組成を分析して、その固体が主にＢＬＧで構成されていることを確認する。
例１．２５：乳糖の総量の決定
乳糖の総量は、ＩＳＯ ５７６５−２：２００２（ＩＤＦ ７９−２：２００２）「粉乳、乾燥アイスミックス、及びプロセスチーズ−乳糖含量の測定−第２部：乳糖のガラクトース部分を利用した酵素法」に従って測定される。
例１．２６：炭水化物の総量の決定：
炭水化物の量は、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ Ｔｏｔａｌ Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（Ｃａｔ ＭＡＫ１０４−１ＫＴ）を使用して決定され、このキットでは、炭水化物が加水分解され、フルフラール及びヒドロキシフルフラールに変換されて、これらが４９０ｎｍで分光光度的にモニターされるクロマゲンに変換される。
例１．２７：脂質の総量の決定
脂質の量は、ＩＳＯ １２１１：２０１０（脂肪含量の決定−Ｒｏｅｓｅ−Ｇｏｔｔｌｉｅｂ重量分析法）に従って決定される。
例１．２８：ブリックスの決定
ブリックス測定を、研磨水（逆浸透によって濾過された水で最大０．０５ｍＳ／ｃｍの導電率が得られる）に対して較正されたＰＡＬ−αデジタル手持ち屈折計（Ａｔａｇｏ）を使用して行った。
およそ５００μｌのサンプルを装置のプリズム面に移し、測定を開始した。測定値を読み取り、記録した。
ホエイタンパク質溶液のブリックスは、全固形分（ＴＳ）の含有量に比例し、ＴＳ（％ｗ／ｗ）はおよそのブリックス＊０．８５である。
例１．２９ラクトフェリン及びラクトペルオキシダーゼの決定
ラクトフェリンの濃度は、Ｓｏｙｅｕｒｔ ２０１２（Ｓｏｙｅｕｒｔ ｅｔ ａｌ；Ｍｉｄ−ｉｎｆｒａｒｅｄ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｂｏｖｉｎｅ ｍｉｌｋ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｉｎｄｉｃａｔｏｒ ｏｆ ｍａｓｔｉｔｉｓ；Ａｎｉｍａｌ（２０１２），６：１１，ｐｐ １８３０−１８３８）で概説されているＥＬＩＳＡイムノアッセイによって決定される。
ラクトペルオキシダーゼの濃度は、市販のウシラクトペルオキシダーゼキットを使用して決定される。
例１．３０：コロニー形成単位の数の決定
サンプル１グラムあたりのコロニー形成単位の数の決定は、ＩＳＯ ４８３３−１：２０１３（Ｅ）：食品及び動物の飼料原料の微生物学−微生物の列挙のための水平法−３０℃でのコロニーカウント手法に従って行われる。
例１．３１：ＢＬＧ、ＡＬＡ、及びＣＭＰの総量の決定
この手順は、組成物中のＡＬＡ、ＢＬＧ、及びＣＭＰ等のタンパク質、並びに任意に他のタンパク質種を定量分析するための液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）法である。例１．６の方法とは反対に、本方法はまた、凝集物中に存在するタンパク質を測定し、したがって、問題の組成物中のタンパク質種の総量の測定値を提供する。
単離様式はサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）であり、この方法ではサンプル溶媒及びＨＰＬＣ移動相の両方として６ＭグアニジンＨＣｌバッファーを使用する。メルカプトエタノールは、タンパク質又はタンパク質凝集物のジスルフィド（Ｓ−Ｓ）を還元して、折りたたまれていない単量体構造を作り出す還元剤として使用される。
サンプル調製は、移動相に１０ｍｇ相当のタンパク質を溶解することで容易に達成される。
２つのＴＳＫ−ＧＥＬ Ｇ３０００ＳＷＸＬ（７．７ｍｍ×３０．０ｃｍ）カラム（ＧＰＣカラム）及びガードカラムを直列に配置して、原材料中の主要なタンパク質の適切な単離を達成する。
溶出された分析対象物を、ＵＶ検出（２８０ｎｍ）によって検出及び定量する。
機器／材料：
１．手動シールワッシャー付きＨＰＬＣポンプ５１５（Ｗａｔｅｒｓ）
２．ＨＰＬＣポンプコントローラーモジュールＩＩ（Ｗａｔｅｒｓ）
３．オートサンプラー７１７（Ｗａｔｅｒｓ）
４．デュアル吸光度検出器２４８７（Ｗａｔｅｒｓ）
５．定量的レポートを生成できるコンピュータソフトウェア（Ｅｍｐｏｗｅｒ ３、Ｗａｔｅｒｓ）
６．分析カラム：２つのＴＳＫ−ＧＥＬ Ｇ３０００ＳＷＸＬ（７．８×３００ｍｍ、Ｐ／Ｎ：０８５４１）。
ガードカラム：ＴＳＫ−Ｇｕａｒｄ Ｃｏｌｕｍｎ ＳＷｘＬ（６．０×４０ｍｍ、Ｐ／Ｎ：０８５４３）。
７．超音波浴（Ｂｒａｎｓｏｎ ５２００）
０．２μｍ酢酸セルロースメンブレンを備えた８．２５ｍｍシリンジフィルター（５１４−００６０、ＶＷＲ）
手順：
移動相：
Ａ．ストック緩衝液。
１．１０００ｍＬのビーカーに５６．６ｇのＮａ２ＨＰＯ４、３．５ｇのＮａＨ２ＰＯ４、及び２．９ｇのＥＤＴＡを量り入れる。
８００ｍＬの水に溶かす。
２．ｐＨを測定し、必要に応じてＨＣｌ（ｐＨを下げる）又はＮａＯＨ（ｐＨを上げる）で７．５±０．１に調整する。
３．１０００ｍＬのメスフラスコに移し、水で希釈して容量を調整する。
Ｂ．６ＭグアニジンＨＣｌ移動相。
１．２０００ｍＬのビーカーに１１４６ｇのグアニジンＨＣｌを量り取り、２００ｍＬのストック緩衝液（Ａ）を加える。
２．マグネチックスターラー（５０℃）で混合しながら、この溶液を水で約１６００ｍＬに希釈する。
３．ＮａＯＨでｐＨを７．５±０．１に調整する。
４．２０００ｍＬのメスフラスコに移し、水で希釈して容量を調整する。
５．０．２２μｍメンブレンフィルターを備えた溶媒濾過装置を使用して濾過する。
較正標準。
定量する各タンパク質の較正標準を、以下の方法で調製する：
１．約２５ｍｇのタンパク質参照標準を正確に（０．０１ｍｇまで）計量し、
１０ｍＬのメスフラスコに入れ、１０ｍＬの水に溶かす。
これは、タンパク質のタンパク質ストック標準溶液（Ｓ１）である。
２．２００μｌのＳ１を２０ｍｌメスフラスコにピペットで入れ、移動相で希釈して容量を調整する。
これは、低希釈標準溶液ＷＳ１である。
３．５００μＬのＳ１を１０ｍＬメスフラスコにピペットで入れ、移動相で希釈して容量を調整する。
これは標準溶液ＷＳ２である。
４．５００μＬのＳ１を５ｍＬメスフラスコにピペットで入れ、移動相で希釈して容量を調整する。
これは標準溶液ＷＳ３である。
５．７５０μＬのＳ１を５ｍＬメスフラスコにピペットで入れ、移動相で希釈して容量を調整する。
これは標準溶液ＷＳ４である。
６．１．０ｍＬのＳ１を５ｍＬメスフラスコにピペットで入れ、移動相で希釈して容量を調整する。
これは、高希釈標準溶液ＷＳ５である。
７．目盛り付き使い捨てピペットを使用して、１．５ｍＬのＷＳ１〜５を別々のバイアルに移す。
各バイアルに１０μＬの２−メルカプトエタノールを加えてキャップを取り付ける。溶液を１０秒間ボルテックスする。
標準液を周囲温度で約１時間置く。
８．０．２２μｍの酢酸セルロースシリンジフィルターを使用して標準液を濾過する。
タンパク質の純度は、ケルダール（Ｎ×６．３８）を使用して測定し、ＨＰＬＣを使用して標準溶液ＷＳ５からの面積％を測定する。
タンパク質（ｍｇ）＝「タンパク質標準重量」（ｍｇ）×Ｐ１×Ｐ２
Ｐ１＝Ｐ％（ケルダール）
Ｐ２＝タンパク質面積％（ＨＰＬＣ）
サンプルの調製
１．元のサンプルのタンパク質２５ｍｇに相当する量を２５ｍＬメスフラスコに量り取る。
２．およそ２０ｍＬの移動相を加え、サンプルを約３０分間溶解させる。
３．移動相を加えて容量を調整し、１６７μＬの２−メルカプトエタノールを２５ｍｌのサンプル溶液に加える。
４．約３０分間超音波処理し、その後、サンプルを周囲温度で約１時間半放置する。
５．溶液を混合し、０．２２μｌの酢酸セルロースシリンジフィルターを使用して濾過する。
ＨＰＬＣシステム／カラム
カラムの平衡化
１．ＧＰＣガードカラムと２つのＧＰＣ分析カラムとを直列に接続する。
新しいカラムは通常、リン酸塩緩衝液中で出荷される。
２．新しいカラムに３０〜６０分間０．１〜０．５ｍＬ／分で徐々に水を流す。
約１時間フラッシュを続ける。
３．流量を０．５ｍＬ／分から０．１ｍＬ／分に徐々に下げ、
リザーバーにおいて移動相で交換する。
４．圧力ショックを回避するために、ポンプの流量を３０〜６０分間で０．１から０．５ｍＬ／分まで徐々に増やし、０．５ｍＬ／分のままにする。
５．１０種類のサンプルを注入してカラムを飽和させ、ピークが溶出するのを待つ。
これは、カラムのコンディショニングに役立つ。
この工程は、次の注入の前に各注入が完了するのを待つ必要なく行われる。
６．移動相で少なくとも１時間平衡化する。
結果の計算
定量されるタンパク質、例えばアルファ−ラクトアルブミン、βラクトグロブリン、及びカゼイノマクロペプチドの含有量の定量的決定を、対応する標準タンパク質で得られたピーク面積をサンプルのピーク面積と比較することによって行った。結果は、特定のタンパク質／１００ｇの元のサンプル、又は元のサンプルの重量に対する特定のタンパク質の重量パーセントとして報告される。
例１．３２：マイクロゲル、タンパク質ナノゲル、可溶性ホエイタンパク質凝集物及び天然タンパク質の量の定量
飲料又は粉末サンプル中の不溶性タンパク質物質、タンパク質ナノゲル、可溶性ホエイタンパク質凝集物、及びネイティブタンパク質の量の定量を、以下の工程を使用して行う：
ａ）試験するサンプルを（脱塩水と混合すること又は濃縮により）２０ｇの総タンパク質／Ｌを含む溶液に変換し（例えば、脱塩水で希釈すること又は濃縮により）、総タンパク質の濃度を、例１．５を使用して溶液のアリコート中の総タンパク質の測定によって確認し、ｃａとして報告する。
ｂ）ａ）の溶液の第１のアリコートを３．０００×ｇで５分間遠心分離して不溶性タンパク質物質を沈殿させ、続いて工程ａ）で説明したように上清中のタンパク質濃度を測定し、上清の総量のタンパク質をｃｂとして報告する。不溶性タンパク質凝集物の含有量（総タンパク質に対するパーセント）は、（ｃａ−ｃｂ）／ｃａ ＊１００として計算される。
ｃ）ａ）の溶液の第２のアリコートを５０．０００×ｇで１時間遠心分離して、不溶性タンパク質物質とタンパク質ナノゲルの両方を沈殿させ、上清中のタンパク質の濃度を工程ａ）で説明したように測定し、ｃｃとして報告する。タンパク質ナノゲル画分は、（ｃａ−ｃｃ）／ｃａ ＊１００−（ｃａ−ｃｂ）／ｃａ ＊１００として計算される。
ｄ）第３のアリコートをｐＨ４．６に調整して、サンプル中の全ての変性及び／又は凝集タンパク質を沈殿させる。サンプルを室温で１５分間放置した後、５０．０００×ｇで１時間遠心分離して、沈殿物を分離する。得られた上清の総タンパク質（主にネイティブタンパク質）の濃度を工程ａ）で説明したように測定し、ｃｄとして報告する。
溶液中の可溶性ホエイタンパク質凝集物の画分を、次のように計算する。
（ｃａ−ｃｄ）／ｃａ ＊１００−（ｃａ−ｃｃ）／ｃａ ＊１００。
溶液中の天然タンパク質の割合は、ｃｄ／ｃａ ＊１００として計算する。
元のサンプルの不溶性タンパク質物質、タンパク質ナノゲル、可溶性ホエイタンパク質凝集物、及び／又はネイティブタンパク質の絶対濃度が必要な場合、これらは、工程ａ）の溶液を製造するために使用される元のサンプルの量に関する情報を使用して簡単に計算される。
全ての遠心分離工程は、ＪＡ−３０．５０ローターを装備したＢｅｃｋｍａｎｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ Ａｖａｎｔｉ ＪＸＮ−３０遠心分離機を使用し、５０ｍＬ Ｂｅｃｋｍａｎｎ遠心管（２９×１０３ｍｍ）で５０ｍＬサンプルを使用して２５℃で行われる。
例１．３３：流体力学的径
タンパク質粒子の流体力学的直径（平均強度サイズ（ｄ．ｎｍ））を、Ｎａｎｏｓｉｚｅｒ（Ｍａｌｖｅｒｎ）を使用する動的光散乱によって決定した。８００μＬの脱塩水及び５μＬの熱処理タンパク質飲料を混合してＵＶキュベットに加えた。サイズ測定を室温（２２℃）で行った。
例２．噴霧乾燥された酸性ＢＬＧ単離粉末の製造
ホエイタンパク質フィード
標準的なチーズ製造プロセスからのスイートホエイに由来するラクトース枯渇ＵＦ保持液は１．２ミクロンのフィルターで濾過されており、ＢＬＧ結晶化プロセスのフィードとして使用される前にＳｙｎｄｅｒ ＦＲメンブレンにより脂肪が減少されていた。フィードの化学組成を表１に示す。本発明者らは、この例で言及されているＢＬＧ、ＡＬＡ等の特定のタンパク質の全ての重量パーセントが、総タンパク質に対する非凝集性タンパク質の重量パーセントに関するものであることを認識している。
コンディショニング
スイートホエイフィードを、全固形分２１％（ＴＳ）±５のフィード濃度まで、４６ミルのスペーサー、フィード圧力１．５〜３．０バールで、Ｋｏｃｈ ＨＦＫ−３２８タイプのメンブレン（７０ｍ２メンブレン）を使用し、またダイアフィルトレーション媒質として研磨水（逆浸透によって濾過された水で、最大０．０５ｍＳ／ｃｍの導電率が得られる）を使用して、２０℃の限外濾過セットアップ上でコンディショニングした。次いで、ｐＨが約５．５になるようにＨＣｌを加えることによってｐＨを調整した。保持液の導電率の低下が２０分間にわたって０．１ｍＳ／ｃｍを下回るまで、ダイアフィルトレーションを続けた。次に、透過液フローが１．４３Ｌ／時／ｍ２を下回るまで、保持液を濃縮した。濃縮保持液の第１のサンプルを採取し、３０００ｇで５分間遠心分離した。第１のサンプルの上清をＢＬＧ収量の測定に使用した。
結晶化
濃縮された保持液を３００Ｌの結晶化タンクに移し、そこで再水和され噴霧乾燥されたＢＬＧ結晶から作られた純粋なＢＬＧ結晶材料を用いてシードした。続いて、シードされたホエイタンパク質溶液を、２０℃からおよそ６℃まで、およそ１０時間かけて冷却し、ＢＬＧ結晶を形成して成長させた。
冷却後、結晶を含むホエイタンパク質溶液のサンプル（第２のサンプル）を採取し、３０００ｇで５分間の遠心分離によってＢＬＧ結晶を単離した。第２のサンプルに由来する上清及び結晶ペレットを以下に説明するようにＨＰＬＣ分析に供した。結晶化の収率を、以下に概説するように計算し、５７％と決定した。
Figure 2021529528
ＨＰＬＣを使用したＢＬＧ収率の決定：
第１及び第２のサンプルの上清を研磨水を加えることによって同程度に希釈し、希釈した上清を０．２２μｍのフィルターで濾過した。濾過及び希釈した上清ごとに、同じ容量をＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｊｕｐｉｔｅｒ（登録商標）５μｍ Ｃ４ ３００Å、ＬＣカラム２５０×４．６ｍｍ、Ｅａ．を備えたＨＰＬＣシステムに充填し、２１４ｎｍで検出した。
サンプルを、次の条件を使用して流した：
バッファーＡ：ＭｉｌｌｉＱ水、０．１％ｗ／ｗＴＦＡ
バッファーＢ：ＨＰＬＣグレードのアセトニトリル、０．０８５％ｗ／ｗＴＦＡ
流量：１ｍＬ／分
カラム温度：４０℃
勾配：０〜３０分 ８２〜５５％Ａ及び１８〜４５％Ｂ；３０〜３２分 ５５〜１０％Ａ及び４５〜９０％Ｂ；３２．５〜３７．５分 １０％Ａ及び９０％Ｂ；３８〜４８分 １０〜８２％Ａ及び９０〜１８％Ｂ。
データ処理：
両方の上清を同じ方法で処理したため、ＢＬＧピークの面積を直接比較して、相対収量を計算することができる。結晶にはＢＬＧのみが含まれており、サンプルは全て同じ方法で処理されているため、アルファ−ラクトアルブミン（ＡＬＡ）の濃度、したがってＡＬＡの面積は全てのサンプルで同じはずである。したがって、結晶化前後のＡＬＡの面積は、相対収率を計算する際の補正係数（ｃｆ）として使用される。
Figure 2021529528
相対収率を、次の式で計算する：
Figure 2021529528
ＢＬＣ結晶の酸溶解
結晶化タンクからの残りの材料を、デカンターを使用して、３５０ｇ、２７５０ＲＰＭ、６４スペーサーにより１５０ＲＰＭ差、及び７５Ｌ／時のフィードフローで分離した後、フィードを研磨水と１：２で混合した。次いで、より薄いスラリーにするため、デカンターからのＢＬＧ結晶／固相を研磨水と混合した後、結晶を迅速に溶解させるためリン酸を加えてｐＨをおよそ３．０に下げた。
ＢＬＧ結晶を溶解した後、純粋なＢＬＧタンパク質液を、結晶化のためのフィードを調製するのに使用したのと同じＵＦセットアップで１５ブリックスに濃縮し、ｐＨをおよそ３．８の最終ｐＨに調整した。次いで、液体ＢＬＧ単離物を７５度に５分間加熱し、続いて１０℃に冷却した。熱処理により、熱処理前の１３７．０００ＣＦＵ／ｇから熱処理後の１０００ＣＦＵ／ｇ未満に微生物負荷が減少することがわかった。熱処理はいかなるタンパク質変性も引き起こさず、固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０ｎｍ／Ｉ３５０ｎｍ）は１．２０と決定され、ＢＬＧ分子のネイティブ立体構造を示した。
ＢＬＧを、１８０℃の入口温度及び７５℃の出口温度を有するパイロットプラント噴霧乾燥機で乾燥した。出口でサンプリングして得られた粉末は、約４％ｗ／ｗの含水量を有しており、粉末の化学組成は表２に示される。乾燥粉末のサンプルを溶解して、タンパク質変性度を１．５％と決定し、固有トリプトファン蛍光発光比（Ｉ３３０／Ｉ３５０）を１．２０と測定した。
Figure 2021529528
例３：噴霧乾燥したＰＨ中性ＢＬＧ単離粉末の製造
例２と同じプロトコル及び実験セットアップを使用する場合、表３に示されるラクトース減少ホエイタンパク質単離物をコンディションし、結晶化のためのフィードに使用した。結晶化の収率を６８％と計算した。
本発明者らは、この例で言及されているＢＬＧ及びＡＬＡ等の特定のタンパク質の全ての重量パーセントが、総タンパク質に対する非凝集性タンパク質の重量パーセントに関係していることを認識している。
Figure 2021529528
結晶化タンクからの残りの材料を、デカンター上で、
３５０ｇ、２７５０ＲＰＭ、６４スペーサーによる１５０ＲＰＭ差、及び７５Ｌ／時のフィードフローで分離した後、フィードを研磨水と１：２で混合した。次いで、より薄いスラリーにするため、デカンターからのＢＬＧ結晶／固相を研磨水と混合した後、結晶を迅速に溶解させるため０．１Ｍ水酸化カリウムを加えてｐＨをおよそ７に調整した。
結晶を溶解した後、純粋なＢＬＧタンパク質液を、結晶化のためのホエイタンパク質溶液を調製するのに使用したのと同じＵＦセットアップで１５ブリックスに濃縮し、ｐＨをおよそ７．０の最終ｐＨに調整した。ＢＬＧを、１８０℃の入口温度及び７５℃の出口温度を有するパイロットプラント噴霧乾燥機で乾燥した。出口でサンプリングして得られた粉末は、約４％ｗ／ｗの含水量を有していた。粉末の組成を表４に示す。乾燥後、粉末の一部を脱塩水に溶解し、タンパク質変性度を９．０％と決定し、固有トリプトファン蛍光発光比（３３０ｎｍ／３５０ｎｍ）は１．１６であった。
Figure 2021529528
噴霧乾燥粉末のかさ密度（６２５タップ）は０．２〜０．３ｇ／ｃｍ３と推定された。
例４：一般的なホエイタンパク質飲料の調製
タンパク質ベースで８５％以上のＢＬＧを含む乾燥ＢＬＧ単離タンパク質粉末は、所望の最終タンパク質濃度に到達するのに必要な脱塩水の最大約９５％で分散される。
ｐＨ中性のＢＬＧ単離粉末を、例３に概説されるように製造し、一方、ｐＨ５．５のＢＬＧ単離粉末を、ＰＣＴ／ＥＰ ２０１７／０８４５５３明細書の例７に概説されるように製造する。
任意に、ミネラル、甘味料、香料、安定剤、乳化剤、又は脂肪及び炭水化物の供給源を含む他の成分を加えることができる。
ｐＨを、１０％ＮａＯＨ又は１０％リン酸（又は他の食品グレードの酸）を使用して最終ｐＨに調整する。
残りの水を加えて所望のタンパク質濃度に到達させ、組成物を任意に均質化する。
比較のため、残りの工程を維持しながら、参照サンプルの作製において８５％以上のＢＬＧ生成物をホエイタンパク質単離物で置き換える。
サンプルを２０℃の暗所で保管した。
例５：ホエイタンパク質組成物の熱処理
熱処理を、プレート式熱交換器又は管状熱交換器（製造元：ＯＭＶＥ ＨＴＳＴ／ＵＨＴパイロットプラントＨＴ３２０−２０）を使用して、１４３℃で２〜６秒間加熱（高温、短時間（ＨＴＳＴ））することにより行った。
熱処理された飲料組成物を、１０℃で１００ｍＬの滅菌ボトルに入れ、すぐに密封した。
他の実験では、ホエイタンパク質源を１５〜３０ｍＬのサンプルを含む薄壁のガラスバイアルに移すことによって熱処理を行った。バイアルを、８６℃〜９５℃の範囲の目標温度で事前に平衡化した水浴に１〜１８分間浸漬した後、氷上で冷却する。
例６：熱処理飲料調製物の製造
本例では、６％のタンパク質を含み、ｐＨ７．０を有するＢＬＧ飲料及びＷＰＩ飲料を調製した。
ＢＬＧ飲料を、ダイアフィルトレーションされたｐＨ７．０のＢＬＧ単離粉末を１０℃の脱塩水に溶解することによって調製した。
比較のため、ＷＰＩサンプルをＷＰＩ−Ａを使用して調製した。ＷＰＩ−Ａを１０℃の脱塩水に溶解した。１０％ＮａＯＨをゆっくりと溶液に加えた。最終ｐＨをｐＨ７．０に調整した。
例５に記載のプレート式熱交換器を使用して、溶液を１４３℃／４秒間熱処理し、タップして、熱滅菌したホエイタンパク質飲料組成物を提供した。
以下の表５に、飲料調製物の調製に使用されるＢＬＧ粉末の組成を示し、比較のため、ＷＰＩの組成も示す。
Figure 2021529528
例７：８５％超のＢＬＧを含む無色透明のホエイタンパク質飲料
タンパク質の約９２％ｗ／ｗがＢＬＧである飲料調製物を調製した。例４を参照されたい。
比較のため、約６１％ｗ／ｗＢＬＧを含むＷＰＩ粉末に基づくホエイタンパク質サンプルを調製した。
サンプルのタンパク質含量は６％ｗ／ｗであった。ＮａＯＨを使用してｐＨをｐＨ７．０に調整した。
調製物を１４３℃で４秒間、熱で処理した。
濁度、粘度、色及び透明度を、例１．７、１．８、１．９に記載されている手順に従って測定した。
結果を下記表６に示す。
Figure 2021529528
デルタｂ＊の計算には、下記式を使用する：
デルタｂ＊＝ｂ６．０ｗ／ｗ％タンパク質に標準化したサンプル ＊−ｂ脱塩水 ＊、室温で測定。
デルタａ＊の計算には、下記式を使用する：
デルタａ＊＝ａ６．０ｗ／ｗ％タンパク質に標準化したサンプル ＊−ａ脱塩水 ＊、室温で測定。
デルタＬ＊の計算には、下記式を使用する：
デルタＬ＊＝Ｌ６．０ｗ／ｗ％タンパク質に標準化したサンプル ＊−Ｌ脱塩水 ＊、室温で測定。
脱塩水の色値は次のとおりである：
Ｌ＊＝３９．９７、ａ＊＝０及びｂ＊＝−０．２２。
結果：
表６に示す結果は、少なくとも８５ｗ／ｗ％のＢＬＧを含むタンパク質画分を使用した場合、ｐＨ７．０で清澄で無色透明な飲料が製造されたことを示す。ＢＬＧ飲料も低粘度であった。
これとは対照的に、タンパク質の約６１重量％がＢＬＧであるＷＰＩを含むサンプルは黄色がかっており、より高いｂ＊値を有していた。
例８：乳白色ホエイタンパク質飲料、高温熱処理
ＢＬＧを含む不透明で乳白色の飲料を製造した。ＢＬＧ粉末（ｐＨ ５．５）を水道水に溶解し、３％ＮａＯＨを使用してｐＨ６．０に調整し、９４℃で１４分間熱処理する。ＢＬＧ飲料は、タンパク質の約９６％ｗ／ｗをＢＬＧとして含む。
ｐＨ６．０を有する１０ｗ／ｗ％ＢＬＧ飲料を調製した。
以下のＢＬＧ及びＷＰＩサンプルの組成を参照されたい：
Figure 2021529528
濁度、粘度、色及び透明度を、例１．７、１．８、１．９に記載されている手順に従って測定し、また飲料の安定性を例１．１２に記載されているように測定した。
結果を下記表７及び図１に示す。
Figure 2021529528
結果：
表７及び図１に提示する結果は、少なくとも８５ｗ／ｗ％のＢＬＧを含む１０ｗ／ｗ％のタンパク質を使用し、滅菌に対応する熱処理に供した場合に、乳白色／不透明の無色の飲料がｐＨ６．０で製造されたことを示す。
これとは対照的に、ＷＰＩを含むサンプル（ＷＰＩ−Ａ及びＷＰＩ−Ｂ）はゲル化したため、飲料を製造することはできなかった（図２を参照されたい）。
例９：主にタンパク質ナノゲル又は可溶性ホエイタンパク質凝集物を含む例示的なＢＬＧ飲料の消化。
この例の目的は、胃消化のｉｎ ｖｉｔｒｏシミュレーションによって、様々なホエイタンパク質飲料の胃消化中の構造物の形成を調べることである。
３種類の熱処理された栄養組成物を調製した。組成物のうち２つは、８５％以上のＢＬＧ（飲料Ａ及びＢ）及び従来のＷＰＩ飲料（飲料Ｃ）を含む。
飲料を例４に従って製造し、例５に従って熱処理した。
例示的な飲料の調製に使用されるタンパク質粉末の組成は表８からわかる。
Figure 2021529528
飲料Ａ：９８．２％のＢＬＧを含むタンパク質粉末を溶解することにより、６ｗ／ｗ％のＢＬＧ溶液を調製した（表８）。１０％ＮａＯＨを使用してｐＨをｐＨ７．０に調整し、１４３℃で６秒間ＵＨＴ処理して滅菌し、ＢＬＧ飲料溶液Ａを製造した。
飲料Ｂ：９５．９％ＢＬＧを含む粉末を溶解することにより、６ｗ／ｗ％ＢＬＧ溶液を調製した（表８）。１０％ＮａＯＨを使用してｐＨをｐＨ６．０に調整し、８６℃で１８分間熱処理して、ＢＬＧ飲料溶液Ｂを製造した。
飲料Ｃ：６１％ＢＬＧを含むタンパク質粉末「ＷＰＩ」を溶解することにより、６ｗ／ｗ％ＷＰＩ飲料を調製した（表８）。１０％ＮａＯＨを使用してｐＨをｐＨ７．０に調整し、１４３℃で６秒間熱処理した。飲料Ｃを参照として使用する。
飲料Ａ及びＣは清澄であるが、飲料Ｂは不透明で乳白色である。
飲料中に存在する不溶性タンパク質物質、可溶性凝集物、タンパク質ナノゲル、及びネイティブホエイタンパク質の種類及び量を、例１．３２に記載されているように決定し、結果を図３に示す。
結果−可溶性凝集物、タンパク質ナノゲル、不溶性タンパク質物質、及びネイティブホエイタンパク質：
ＢＬＧ飲料（Ｂ）の乳白色の外観とは対照的に、ＢＬＧ飲料（Ａ）及びＷＰＩ飲料（Ｃ）は清澄な飲料をもたらすことがわかった。凝集物の組成を、例１．３２に記載されている方法で評価し、図３に示す。図３は、飲料Ａ（ＢＬＧ ｐＨ７．０）及びＣ（ＷＰＩ参照、ｐＨ７．０）は主に可溶性ホエイタンパク質凝集物（それぞれ６７％及び４４％）を含み、飲料Ｂ（ＢＬＧ ｐＨ ６．０）は主にタンパク質ナノゲル（７４％）を含むことを示す。不溶性タンパク質物質の含有量は、３つの飲料でいずれも１％未満であった。
ＢＬＧ（Ａ）飲料とＷＰＩ（Ｃ）飲料の両方で、約２８〜３３％の残留ネイティブタンパク質が認められ、これは、不完全な凝集プロセスが原因である可能性があるが、一方で１３％のネイティブタンパク質がＢＬＧに残っていた（Ｂ）。そのため、飲料組成物は、それらの消化の違いにつながる可能性がある異なるタンパク質構造を含む。
第４の飲料（飲料Ｄ）を、１容量の熱処理溶液Ａと１容量の熱処理溶液Ｂとを混合することによって調製した。飲料Ｄには、４５％のタンパク質ナノゲル、１９％の可溶性ホエイタンパク質凝集物、及び３７％のネイティブタンパク質が含まれることがわかった。
シミュレートされた胃消化方法：
種々のホエイタンパク質飲料の胃消化中の構造物の形成を調査するため、本発明者らは、以下の胃消化のｉｎ ｖｉｔｒｏシミュレーションを行った。
サンプルを、Ｍｕｌｅｔ−Ｃａｂｅｒｏ，Ａ．−Ｉ．，Ｍａｃｋｉｅ，Ａ．Ｒ．，Ｗｉｌｄｅ，Ｐ．Ｊ．，Ｆｅｎｅｌｏｎ，Ｍ．Ａ．，＆Ｂｒｏｄｋｏｒｂ，Ａ．（２０１９）に以前に記載されたプロトコルに従って、シミュレートされた経口及び胃消化に供した。ｉｎ ｖｉｔｒｏ胃消化の構造メカニズム及び動態は、牛乳のプロセス誘発性変化の影響を受ける。Ｆｏｏｄ Ｈｙｄｒｏｃｏｌｌｏｉｄｓ，８６，１７２−１８３に以下に記載される少しの修正を加えた。
消化を行う前に、実際の模擬分解中に後で使用する量及び濃度と同じ量及び濃度で、サンプル（３０ｇ）を３７℃のバッファー塩からなる溶液と混合した。この混合物を、ｐＨスタット（Ｍｅｔｒｏｈｍ ６０２ ｐＨスタット）を使用して０．１Ｍ ＨＣｌでｐＨ２．０に滴定し、これは、食品の実際の緩衝能力を決定するために必要であり、実際の消化のために滴定装置をプログラムするために必要である。
実際の消化場合、サンプル（３０）ｇを３７℃のモデルヒト唾液（飲料にデンプンが存在しなかったため唾液アミラーゼを除く）と２分間混合し、サンプルの固形分（６％）によりモデル唾液（１．６５ｇ）の量を決定した。
サンプルを、胃消化プロセスのためサーモスタット付きの反応容器に移し、容器には、最初、合計１０％の酸及び胃液の塩が含まれており、胃の絶食状態を模倣している。緩衝塩の残りの９０％、０．１Ｍ ＨＣｌ及び水を、計算された胃消化プロセスの期間である１０５分後に添加が完了するような速度で添加した。１０５分の消化が終わるまでに全てのペプシン溶液が添加されるように、ペプシンの溶液（０．５ｍｌ、２５４４００Ｕ／ｍｌ）をシリンジポンプを使用して４．７６２μｌ／分で添加した。胃粘膜表面による分泌を模倣するため、溶液を容器の壁に接して加えた。混合物のｐＨを、サンプルの混合の穏やかな混合を可能にする、回転振動ミキサー（１５ｒｐｍ、水平から±５°）の中央に置いた消化容器内の垂直方向と中央に取り付けられた、ＰＴ１００温度計一体型のＭｅｔｒｏｈｍ Ｕｎｉｔｒｏｄｅ（６．０２５８．０１０）を使用して監視した。直径４ｍｍの開口部を備えたサンプリングピペットを使用して、消化の過程（１７．５、３５、５２．５、７０、８７．５、及び１０５分）を通して消化容器の底から６種類のサンプルを採取した。
携帯電話（Ｓａｍｓｕｎｇ Ｇａｌａｘｙ Ｓ８＋）を使用して、周囲光で４０３２×３０２４ピクセルの解像度、高さおよそ１５ｃｍで、黒い背景に対してガラスのペトリ皿でサンプルを撮影した。
ＳＤＳ ＰＡＧＥのサンプルは、製造業者のプロトコル（定電圧、２００Ｖ、２２分）を使用して、４〜１２％の勾配ゲル（Ｂｏｌｔ Ｇｅｌ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で還元条件下で分析した。サンプルレーンは標準（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｍａｒｋ １２）で囲まれている。ゲルを流した後、ゲルを酸性溶液（５０％水、４０％メタノール、１０％酢酸）で２時間固定し、水で洗浄（５分を３回、１回の洗浄あたり１００ｍｌの水）してから一晩染色した（５０ｍｌ Ｓｉｍｐｌｙ Ｂｌｕｅ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）。
ゲルを、Ｃｈｅｍｉ Ｄｏｃ ＸＲＳシステム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）を使用して撮像した。
結果を図４及び図５に示す。図４は飲料Ａ、Ｂ、Ｃ（ＷＰＩ）のセミダイナミックｉｎ ｖｉｔｒｏ消化を示し、一方、図５の上部は、サンプルのセミダイナミックｉｎ ｖｉｔｒｏ消化中に、選択した時点（１７．５〜１０５分）で回収されたタンパク質アリコートのＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を示す。消化研究の様々な時点でのｐＨを下に示す。
結果−シミュレーションされた胃消化：
驚いたことに、ＷＰＩ飲料中のＡＬＡ及びＣＭＰの含有量が高いにもかかわらず、飲料Ａ（ｐＨ７．０のＢＬＧ）及びＣ（ｐＨ７．０のＷＰＩ）の消化全体で非常に類似した視覚的タンパク質凝固挙動が観察された。いずれの飲料（Ａ及びＣ）でも、タンパク質凝固物は１７．５分で既に観察され、酸及び胃液の塩との最初の混合が原因である可能性が高く、凝固物の量が増加して３５〜５２．５分で不透明な液体を形成した（図４を参照されたい）。後者の時点は約５．６〜４．２のｐＨ範囲に対応し、最大７０分で目に見えるタンパク質の凝固物／凝集物が認められる（図５を参照されたい）。さらに、凝固／凝集は粘度の増加を伴うことがわかった。さらにペプシンと胃液の塩を加えてｐＨを効果的に下げると、消化物が透明になり、粘度が下がって、タンパク質凝固物が徐々になくなった。
しかしながら、驚くべきことに、飲料Ｂ（ｐＨ６．０のＢＬＧ）は消化中ずっと不透明なままであり、３５〜５２．５分では目に見えるタンパク質の凝固物が含まれていなかったことがわかり、また、消化のこの段階ではわずかに粘性が高いと評価された（図４）。
図５は、消化の初期段階（１７．５分）では、１４〜２１ｋＤａマーカー（ＢＬＧに対応）のタンパク質バンドが飲料Ａで実際に優勢であるのに対し、ＷＰＩ（飲料Ｃ）では複数のバンドが存在することを示す。
主要なＢＬＧバンドを超えて、飲料Ｂには、ＢＬＧ二量体に対応する可能性がある３７ｋＤａマーカーバンドの周りのバンドがさらに含まれている。消化時間が長くなると（胃液の塩及びペプシンの継続的な添加を伴う）、飲料Ａ及びＣ（ＷＰＩ）の両方にＢＬＧよりも低分子量のタンパク質バンドが現れる。
驚いたことに、飲料Ａ及びＣ（ＷＰＩ）飲料のこれらの低分子量タンパク質／ペプチドバンドの強度は、飲料Ｂでは大幅に低いことがわかった。これは、可溶性凝集物と比較して、タンパク質ナノゲル形態に主に存在するＢＬＧの胃タンパク質分解に対する耐性の増加が原因である可能性がある。この知見により、飲料の製造元は、主に可溶性のホエイタンパク質凝集物又はタンパク質ナノゲルを含む飲料を使用するか、又は混合物を使用することにより、飲料中のどのタンパク質が胃腸管から腸に送達されるかを調整できる可能性がある。
酸性化時のゲル強度：
飲料Ａ、Ｂ及びＣのゲル強度を、例１．１１に記載されているように酸性化中に測定した。結果を図６に示す。
結果−酸性化時のゲル強度の測定：
図６は、胃における酸性化のシミュレーションを示す。ゲル強度を、主に可溶性凝集物（飲料Ａ及びＣ）又はタンパク質ナノゲル（飲料Ｂ）を含む３種類の飲料の酸性化の間に測定した。ＷＰＩ中の可溶性ホエイタンパク質凝集物の濃度は、ＢＬＧの含有量が少なく、ＣＭＰ等の他のタンパク質の含有量が多いため、低くなると予想される（表８）。
飲料Ａ及びＣの消化パターンは類似しているが（図４及び５を参照されたい）、驚くべきことに、ＢＬＧ飲料Ａの粘度は、酸性化された場合にＷＰＩサンプルと比較して劇的に増加することがわかった。これは、凝集物に組み込まれ、ＣＭＰ及びＡＬＡが凝集しにくいＷＰＩと比較してＢＬＧにかなり多く存在する高純度のＢＬＧが原因である可能性がある（表８を参照されたい）。
例１０：ＢＬＧ（タンパク質ナノゲル）を含む高タンパク質飲料
ＢＬＧ粉末Ａ（表９に示される）から１０ｗ／ｗ％、１１ｗ／ｗ％、１２ｗ／ｗ％、１３ｗ／ｗ％、１４ｗ／ｗ％、１５ｗ／ｗ％、及び１６ｗ／ｗ％のホエイタンパク質を含み、９５．９％ｗ／ｗ以上がＢＬＧである、栄養学的高タンパク質飲料を調製した。ｐＨを、３％ｗ／ｗＮａＯＨでｐＨ６．０に調整した。溶液を、例５に記載されるように、９０℃の水浴中で５分間熱処理した。その後、例５に従って、サンプルを氷水中で冷却し、室温に温めた。
Figure 2021529528
様々な飲料の粘度（例１．８）、画像による外観（例１．９）、サイズ（流体力学的径）、及び流体力学的径（例１．３３）を分析した。
結果：
結果を図７、８、９に示す。下記表１０は、９０℃で５分間熱処理した１６ｗ／ｗ％ＢＬＧ飲料の化学組成を示す。
本発明者らは、ＢＬＧサンプルの粘度が、１０％ｗ／ｗタンパク質から、さらに驚くべきことに少なくとも１６ｗ／ｗ％タンパク質までの濃度で９０℃で５分間の熱処理後でも驚くほど著しく低いままであることを見出した（図７及び８を参照されたい）。これはまったく予想外であり、同等のＷＰＩサンプルは１０ｗ／ｗ％ＷＰＩ ｐＨ６．０でゲル化する（例８及び図２を参照されたい）。
熱凝集の間のかかる高タンパク質濃度にもかかわらず、飲料中に沈降又は粒子は観察されなかったため、栄養組成物は高タンパク質飲料用途に特に適している。
タンパク質粒子の流体力学的径を測定し（例１．３３）、図９に示した。タンパク質粒子の流体力学的径は１８５〜３２３ｎｍと測定され、これは、高タンパク質飲料には、Ｐｈａｎ−Ｘｕａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４（Ｐｈａｎ−Ｘｕａｎ，Ｔ．，Ｄｕｒａｎｄ，Ｄ．，Ｎｉｃｏｌａｉ，Ｔ．，Ｄｏｎａｔｏ，Ｌ．，Ｓｃｈｍｉｔｔ，Ｃ．，＆Ｂｏｖｅｔｔｏ，Ｌ．（２０１４）．Ｈｅａｔ ｉｎｄｕｃｅｄ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｅｔａ−ｌａｃｔｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ｍｉｃｒｏｇｅｌｓ ｄｒｉｖｅｎ ｂｙ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｌｃｉｕｍ ｉｏｎｓ．Ｆｏｏｄ Ｈｙｄｒｏｃｏｌｌｏｉｄｓ，２０１２，３４，２２７−２３５によって１００〜３００ｎｍの流体力学的径を有する粒子として記載されているタンパク質ナノゲル粒子が含まれていることを示している。
Figure 2021529528
例１１：中性ＰＨの高タンパク質飲料
ＢＬＧ粉末Ａ（表９に示す）から６ｗ／ｗ％、１０ｗ／ｗ％、及び１２ｗ／ｗ％のホエイタンパク質を含み、９５．９％ｗ／ｗがＢＬＧである栄養学的高タンパク質飲料を調製し、飲料の安定性及び濁度を評価した。３％ｗ／ｗのＮａＯＨ又はＨＣＬでｐＨをｐＨ６．０及び７．０に調整した。溶液を、例５に記載されるように、９０℃の水浴中で５分間熱処理した。その後、例５に従って、サンプルを氷水中で冷却し、室温に温めた。
様々なサンプルの粘度（例１．８）、濁度（例１．７）、色（例１．９）、及び不溶性タンパク質物質の量（例１．１０）を分析した。
結果を下記表１０及び図１０に示す。
Figure 2021529528
結果：
清澄な飲料：
驚くべきことに、０．１４５５ｗ／ｗ％のカルシウムを含む粉末Ａ（表９）を使用すると、１０ｗ／ｗ％のタンパク質の高タンパク質濃度でもｐＨ７．０で安定した無色透明の飲料を製造できることがわかった。本発明者らは、ＷＰＩベースの飲料が同様の条件下でゲルを形成し得ることを経験している。
乳白色の飲料：
著しく低粘度（４．５ｃＰ）の乳白色飲料は、９０℃で５分間の熱処理後、ｐＨ６．０で１２ｗ／ｗ％タンパク質のタンパク質濃度でも、目に見える粒又は沈降の兆候なしに製造できることがわかった。
これとは対照的に、本発明者らは、例８に示すように、１０ｗ／ｗ％タンパク質において、総タンパク質ゲルのうち５７〜６１ｗ／ｗ％のみのＢＬＧを含む対応するＷＰＩサンプルを見出した。
例１２：総エネルギー含量の２５％及び５０％の脂質含量を有する中性ＰＨの高タンパク質飲料
ＢＬＧ粉末Ａ（表９を参照されたい）から３ｗ／ｗ％、６ｗ／ｗ％、１０ｗ／ｗ％、及び１２ｗ／ｗ％のホエイタンパク質を含み、９５．９％ｗ／ｗがＢＬＧである栄養学的高タンパク質飲料を調製した。脂肪の存在下でも栄養飲料を調製する機会を評価するために、総エネルギー含量の２５％及び５０％の脂質含量まで脂質を添加した。
水及び脂質を水浴中７０℃で平衡化した。０．２％Ｇｒｉｎｄｓｔｅｄ Ｃｉｔｒｅｍ ＬＲ１０を加熱したオイルに溶解し、次いで予熱した水とゆっくりと混合した溶液を６０℃に冷却し、粉末を加え、３０〜４５分間撹拌して、飲料組成物を得た。
ｐＨを、３％ＮａＯＨ又はＨＣｌでｐＨ６．０又はｐＨ７．０に調整した。溶液を９０℃の水浴中で５分間熱処理した。その後、例５に従って、サンプルを氷水中で冷却し、室温に温めた。
均質なサンプルを得るために必要な場合、均質化工程を上記の工程にさらに含めてもよい。
様々なサンプルの粘度（例１．８）、濁度（例１．７）、色（例１．９）、及び不溶性タンパク質物質の量（例１．１０）を分析した。
結果を下記表１１に示す。
Figure 2021529528
結果：
総エネルギー含量の２５％及び５０％の脂質含量を有し、なおも著しく低い粘度を有していても、安定した高タンパク質ＢＬＧ飲料を製造することが可能であることがわかった。
ｐＨ７．０では、総エネルギー含量の５０％が脂質である場合、非常に低い粘度（５．５ｃＰ）で１０ｗ／ｗ％タンパク質の乳白色飲料（少なくとも８５ｗ／ｗ％のＢＬＧを含む）を製造することができた。
また、脂質含量が２５％で総エネルギー含量の５０％であるｐＨ６．０の１２ｗ／ｗ％飲料を製造できることもわかった。それらは白い乳白色の外観及び非常に低い粘度（７．８ｃＰ）を有していた。濁度は少なくとも１１０００ＮＴＵであった。飲料は安定しており、３０００ｇで５分後に不溶性タンパク質物質は観察されなかった。
例１３：高ＰＨ飲料
ＢＬＧを含む栄養飲料を、高ｐＨでの安定性及び外観を実証するために、ｐＨ８．０で製造した。
ＢＬＧ粉末Ａ及びＢ（表１２に示す）から、３ｗ／ｗ％のホエイタンパク質を含み、少なくとも８５重量％がＢＬＧである、栄養学的高タンパク質飲料を調製した。
Figure 2021529528
ｐＨを、３％ＮａＯＨでｐＨ８．０に調整した。溶液を９０℃の水浴中で５分間熱処理した。その後、例５に従って、サンプルを氷水中で冷却し、室温に温めた。
結果を表１３に示す。
Figure 2021529528
結果：
結果は、ｐＨ８．０において清澄で安定した飲料が製造され得ることを示す。飲料は驚くほど無色透明であり、粉末Ａ又は粉末Ｂのいずれを使用しても、ｐＨ８．０で粘度及び濁度が非常に低かった。

Claims (27)

  1. ５．５〜８．０の範囲のｐＨを有する、包装された、以下を含む熱処理飲料調製物：
    −前記飲料の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質、該タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％はβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、
    −任意に、甘味料及び／又は香料。
  2. 調製物が少なくとも低温殺菌されている、請求項１に記載の包装された熱処理飲料調製物。
  3. 調製物が少なくとも無菌である、請求項１に記載の包装された熱処理飲料調製物。
  4. 飲料調製物のタンパク質画分が、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで−０．１０〜＋０．５１の範囲の色値デルタｂ＊を有し、
    室温で測定した場合、デルタｂ＊＝ｂ６．０ｗ／ｗ％タンパク質に標準化したサンプル ＊−ｂ脱塩水 ＊である、請求項１〜３のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  5. 飲料調製物が、ＣＩＥＬＡＢカラースケールで−０．１０〜＋０．５１の範囲の色値デルタｂ＊を有し、
    室温で測定した場合、デルタｂ＊＝ｂ６．０ｗ／ｗ％タンパク質に標準化したサンプル ＊−ｂ脱塩水 ＊である、請求項１〜４のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  6. Ｎａ、Ｋ、Ｍｇ及びＣａの量の合計が最大４００ｍＭである、請求項１〜５のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  7. 飲料調製物が、最大１００ｍｇのリン（ｐｈｏｓｐｈｏｒ）／タンパク質１００ｇ及び最大７００ｍｇのカリウム／タンパク質１００ｇを含む、請求項１〜６のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  8. ６．５〜７．５、好ましくは６．５〜７．０の範囲のｐＨを有する、請求項１〜７のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  9. 最大２００ＮＴＵの濁度を有する、請求項１〜８のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  10. ２００ＮＴＵを超える濁度を有する、請求項１〜９のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  11. １００／秒の剪断速度で２２℃で測定した場合、最大２００ｃＰセンチポアズの粘度を有する、請求項１〜１０のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  12. 飲料調製物の重量に対して１〜１０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む、請求項１〜１１のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  13. 飲料調製物の重量に対して１０〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含む、請求項１〜１２のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  14. 調製物の総エネルギー含量の０〜９５％の炭水化物をさらに含む、請求項１〜１３のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  15. 調製物の総エネルギー含量の０〜５０％の脂質含量をさらに含む、請求項１〜１４のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  16. ＢＬＧ単離物を含む、請求項１〜１５のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  17. 各主要な非ＢＬＧホエイタンパク質が、総タンパク質に対する重量パーセンテージで存在し、これが、スイートホエイに由来する標準的なホエイタンパク質濃縮物中の総タンパク質に対するその重量パーセンテージで最大２０％、好ましくは最大１５％、より好ましくは最大１０％、さらにより好ましくは最大６％、最も好ましくは最大４％である、請求項１〜１６のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  18. 総タンパク質に対して少なくとも５０％ｗ／ｗのタンパク質ナノゲルを含む、請求項１〜１７のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  19. 総タンパク質に対して少なくとも６０％ｗ／ｗの可溶性ホエイタンパク質凝集物を含む、請求項１〜１７のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  20. 以下の工程を含む、５．５〜８．０の範囲のｐＨを有する包装された熱処理飲料調製物を製造する方法：
    ａ）
    −１〜２０重量％の総量のタンパク質、該タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％はβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である、
    −任意に、甘味料及び／又は香料、
    を含む液体溶液を提供する工程、
    ｂ）前記液体溶液を包装する工程、
    工程ａ）の前記液体溶液及び／又は工程ｂ）の前記包装された液体溶液が、少なくとも低温殺菌を含む熱処理に供される。
  21. 熱処理が滅菌を含む、請求項２０に記載の方法。
  22. 滅菌が、１２０〜１５０℃の範囲の温度で４〜３０秒間を含む、請求項２０〜２１のいずれかに記載の方法。
  23. 低温殺菌が、８５℃〜９５℃の温度に１〜３分間加熱することを含む、請求項２０に記載の方法。
  24. 溶液の重量に対して１〜２０％ｗ／ｗの総量のタンパク質を含むタンパク質溶液の使用、５．５〜８．０の範囲のｐＨを有する滅菌飲料調製物の白色度を制御するため前記タンパク質の少なくとも８５ｗ／ｗ％はβラクトグロブリン（ＢＬＧ）である。
  25. タンパク質吸収不良に関連する疾患の治療方法で使用するための、請求項１〜１９のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物。
  26. 栄養補助食品としての請求項１〜１９のいずれかに記載の包装された熱処理飲料調製物の使用。
  27. 飲料調製物が運動前、運動中、又は運動後に摂取される、請求項２４に記載の包装された熱処理飲料調製物の使用。
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