BR112020024261A2 - composto da fórmula (i), composições farmacêuticas e método de prevenção - Google Patents

Abstract

A invenção se refere a compostos da fórmula (I), composições contendo os mesmos e métodos para tratar e/ou diminuir a dor em um sujeito com necessidade dos mesmos. Os compostos da fórmula (I) são eficazes para o tratamento de taquifilaxia induzida por opioides e hiperalgesia induzida por opioides.

Description

“COMPOSTO DA FÓRMULA (I), COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS E MÉTODO DE PREVENÇÃO” REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDO RELACIONADO

[0001] Este pedido reivindica a prioridade do Pedido Provisório de Patente dos EUA com o n.º de série 62/677,496 intitulado “COMPOUNDS FOR PAIN TREATMENT, COMPOSITIONS COMPRISING SAME, AND METHODS OF USING SAME” (COMPOSTOS PARA TRATAMENTO DA DOR,

COMPOSIÇÕES COMPREENDENDO OS MESMOS E MÉTODOS DE USO DOS MESMOS), depositado em 29 de maio de 2018, cuja divulgação é aqui incorporada por referência na sua totalidade.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0002] A dor é definida como uma experiência sensorial e emocional desagradável. A dor, entretanto, pode ser informativa e útil. Por exemplo, a dor nociceptiva é frequentemente indicativa de lesão (por exemplo, dano no tecido), e essa dor normalmente evoca comportamentos de fuga ou proteção em animais ou em um ser humano, a fim de se remover, ou se proteger, de uma exposição posterior à injúria. No entanto, a inflamação, o dano celular e neuronal e outros processos resultantes de lesões ou doenças podem levar a estados de dor patológica crônica. A hiperalgesia é uma afeção em que está presente a sensibilidade aumentada a estímulos nocivos e, portanto, a percepção da dor é exagerada. Alodinia é uma afeção na qual estímulos normalmente não nocivos se tornam dolorosos. Dor persistente ou crônica, manifestada como hiperalgesia e/ou alodinia, continua sendo um desafio para o tratamento. Muitos pacientes não respondem à terapêutica existente, ou têm sua dor mal controlada (isto é, alívio inadequado) ou experimentam alívio por uma duração inadequada.

[0003] A dor crônica contribui com mais de 600 bilhões US $ em gastos com saúde anualmente, mais do que o custo anual do câncer, doenças cardíacas e diabetes combinados. A dor neuropática afeta entre 6 e 10% da população e está associada à diminuição da qualidade de vida e aos encargos socioeconômicos que excedem todos os outros distúrbios de dor crônica. Uma meta-análise recente de mais de 200 ensaios clínicos de dor neuropática indica que o "número necessário para tratar" (o número médio de pacientes que precisam ser tratados para prevenir um resultado negativo adicional; por exemplo, o número de pacientes que precisam ser tratados para um deles beneficiar em comparação com um controle em um ensaio clínico) para atingir até 50% de alívio da dor nesta população está entre 4 e 10. Essa surpreendente falta de eficácia tem uma profunda influência na qualidade de vida do paciente e é uma fonte de frustração para os cuidadores. Muitas terapêuticas existentes para a dor neuropática têm mecanismos desconhecidos ou parecem reduzir a dor ao reduzir a excitabilidade neuronal. Para desenvolver a próxima geração de terapêuticas para a dor neuropática, devem ser desenvolvidos novos agentes baseados em mecanismo que visam vias específicas que levam à sinalização neuronal aberrante.

[0004] A administração de opioides para tratar a dor é uma terapia bem reconhecida e comumente aplicada na medicina. Infelizmente, a tolerância aos opioides (taquifilaxia) e a hiperalgesia induzida por opioides podem frequentemente ocorrer durante o decurso da terapia. Em tais pacientes, são necessárias doses cada vez maiores de opioides para fornecer um nível aceitável de alívio da dor e, ao fazer isso, o paciente é, portanto, sujeito a efeitos colaterais adversos e preocupações de segurança que são características dos opioides. Isso inclui depressão respiratória, obstipação, náuseas e vômitos.

Esses pacientes também têm maior probabilidade de desenvolver dependência de opioides, sofrer abstinência de opioides com a descontinuação do tratamento e podem ser mais suscetíveis ao abuso desses medicamentos. A taquifilaxia é um fenômeno no qual a administração repetida de um medicamento, tal como um analgésico narcótico, resulta em um aparecimento rápido e uma diminuição acentuada da eficácia desse medicamento. Na hiperalgesia induzida por opioides, a administração prolongada de opioides também resulta em um aumento paradoxal da dor ou uma hipersensibilidade a um estímulo que não está relacionado à lesão ou injúria original. A taquifilaxia induzida por opioides e a hiperalgesia induzida por opioides foram bem documentadas em modelos animais de nocicepção, bem como em ensaios clínicos em humanos. Esses fenômenos apresentam desafios clínicos significativos para o tratamento da dor e, portanto, novos compostos, que não atuam por meio de mecanismos opioides, são necessários para tratar a dor e/ou aliviar a hiperalgesia e a tolerância.

[0005] Espécies endógenas reativas produzidas por lesão, irritação e doença são os principais causadores da dor, como pode ser demonstrado em modelos animais de hiperalgesia e alodinia. As espécies reativas de oxigênio (ROS) e as espécies reativas de nitrogênio (RNS) incluem radicais livres, tal como superóxido e radical hidroxila, bem como os poderosos oxidantes peroxinitrito (OONO-) e peróxido (hidrogênio) (H2O2). Tanto o peroxinitrito (PN) quanto o peróxido de hidrogênio, gerados na periferia após a lesão, contribuem para mudanças na excitabilidade nos aferentes sensoriais.

[0006] O peroxinitrito tem sido implicado no desenvolvimento da tolerância antinociceptiva (dor) induzida por opiáceos (taquifilaxia). O peroxinitrito resulta da reação de difusão controlada de superóxido (O 2-) e óxido nítrico (.NO). Ao contrário de outras espécies reativas/oxidantes produzidos endogenamente, o peroxinitrito não é gerenciado por controle enzimático. A formação de peroxinitrito é fácil, liberando suas poderosas propriedades oxidativas essencialmente sem controle, causando efeitos a jusante que podem causar dor.

[0007] Em contraste, o superóxido é formado pela ação de oxidases NADPH e oxidase xantina, e o óxido nítrico é produzido por sintases de óxido nítrico (NOS). O peróxido de hidrogênio é formado a partir do superóxido e da ação da dismutase superóxido. Durante o estresse celular (tal como, por exemplo, inflamação, lesão nervosa, isquemia), a ação desses sistemas enzimáticos pode fazer com que os níveis de óxido nítrico, superóxido e peróxido aumentem significativamente, o que pode levar a danos neuronais, hiperalgesia e alodinia. Aumentos concomitantes em óxido nítrico e superóxido podem levar a aumentos localizados muito aumentados em peroxinitrito, que é capaz de nitrar resíduos de tirosina e reticular resíduos de cisteína dentro de proteínas, causando hiperexcitabilidade do canal iônico (tal como o de TRPA1 e NaV1.8) e interromper a homeostasia de glutationa-dissulfeto. Coletivamente, esses efeitos levam à sensibilização neuronal e à dor. Assim, existe uma necessidade de novos compostos, novos métodos e novas invenções que diminuam o nível ou atividade de espécies reativas de nitrogênio (RNS) e espécies reativas de oxigênio (ROS), tal como peroxinitrito e peróxido.

[0008] Existe, portanto, a necessidade de novos compostos e métodos que possam ser usados para tratar a dor. Esta invenção aborda essa necessidade não atendida.

BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0009] São aqui fornecidos os compostos da fórmula (I), ou um sal, solvato, enantiômero, diastereoisômero ou tautômero do mesmo: (I).

[0010] A administração de compostos da fórmula (I), em várias modalidades, diminui o nível ou atividade de espécies reativas de nitrogênio (RNS) e espécies reativas de oxigênio (ROS), tal como peroxinitrito e peróxido no corpo de um sujeito. Os compostos da fórmula (I), em algumas modalidades,

são eficazes para o tratamento de taquifilaxia induzida por opioides e hiperalgesia induzida por opioides.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0011] A presente invenção fornece compostos que podem ser usados para tratar a dor. Em certas modalidades, os compostos da invenção reduzem a hiperalgesia e/ou alodinia.

COMPOSTOS E COMPOSIÇÕES

[0012] A invenção inclui um composto da fórmula (I), ou um sal, solvato, enantiômero, diastereoisômero ou tautômero do mesmo: (I), em que em (I): Y é selecionado a partir do grupo que consiste em S, O, NH, NR e CH2; R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-C6 alquila, C3-C8 cicloalquila, C1-C6 alquenila, C1-C6 alquinila, arila, arilalquila, heteroarilalquila e heteroarila, em que o grupo alquila, cicloalquila, alquenila, alquinila, arila (tal como fenila), arilalquila (tal como fenilalquila), heteroarilalquila ou heteroarila é, independentemente, opcionalmente substituído; R2 é selecionado do grupo consistindo em H, -C(=O)H, -C(=O)R e -CH2-OR; R3 e R4 são, independentemente, selecionados do grupo que consiste em H e C1-C6 alquila opcionalmente substituída, ou R3 e R4 podem se combinar para formar um C1-C6 alquileno; W é selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-C6 alquila, C3-C8 cicloalquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 hidroxialquila, -CHO, -C(=O)OR, -

C(=O)NRR, ciano, hidroxi, arila e heteroarila, em que o grupo alquila, alcóxi, cicloalquila, arila ou heteroarila é, independentemente, opcionalmente substituído, e em que cada ocorrência de R é, independentemente, H, C 1-C6 alquila e C3-C8 cicloalquila; e cada ocorrência de R é, independentemente, selecionada a partir do grupo que consiste em C1-C6 alquila e C3-C8 cicloalquila.

[0013] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto da fórmula (Ia), ou um sal, solvato, enantiômero, diastereoisômero ou tautômero do mesmo: (Ia).

[0014] Em certas modalidades, Y é S. Em outras modalidades, Y é O. Em ainda outras modalidades, Y é NH. Em ainda outras modalidades, Y é NR. Em ainda outras modalidades, Y é CH2.

[0015] Em certas modalidades, R2 é H.

[0016] Em certas modalidades, Y é S; e R2 é H.

[0017] Em certas modalidades, W é selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-C6 hidroxialquila, -CHO, -C(=O)OR e -C(=O)NRR, em que o grupo alquila, alcóxi, cicloalquila, arila ou heteroarila é, independentemente, opcionalmente substituído e em que cada ocorrência de R é, independentemente, H, C1-C6 alquila e C3-C8 cicloalquila.

[0018] Em certas modalidades, Y é S; R2 é H; e W é selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-C6 hidroxialquila, -CHO, -C(=O)OR e - C(=O)NRR, em que o grupo alquila, alcóxi, cicloalquila, arila ou heteroarila é, independentemente, opcionalmente substituído e em que cada ocorrência de R é, independentemente, H, C1-C6 alquila e C3-C8 cicloalquila.

[0019] Em certas modalidades, R3 e R4 são, independentemente, selecionados do grupo consistido em H e C1-C6alquila.

[0020] Em certas modalidades, Y é S; R2 é H; e W é selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-C6 hidroxialquila, -CHO, -C(=O)OR e - C(=O)NRR, em que o grupo alquila, alcóxi, cicloalquila, arila ou heteroarila é, independentemente, opcionalmente substituído e em que cada ocorrência de R é, independentemente, H, C1-C6 alquila e C3-C8 cicloalquila; e R3 e R4 são, independentemente, selecionados do grupo que consiste em H e C 1-C6 alquila.

[0021] Em certas modalidades, o composto da invenção é pelo menos um selecionado do grupo que consiste em: Ácido (R)-2-(3-hidroxi-piridin- 2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidro-tiazol-4-carboxílico; Ácido (S)-2-(3-hidroxi- piridin-2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidro-tiazol-4-carboxílico; Ácido (R)-2-((3-hidroxipiridin-2-il)amino)-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico; e Ácido (S)-2-((3-hidroxipiridin-2-il)amino)-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico; ou um seu sal, solvato, enantiômero, diastereoisômero ou tautômero.

[0022] A invenção se refere a compostos, composições e métodos para diminuir a dor em um sujeito que deles necessite.

[0023] Em certas modalidades, os compostos aqui descritos causam a destruição de espécies reativas de nitrogênio (RNS), tal como peroxinitrito, e/ou espécies reativas de oxigênio (ROS), tal como peróxido (hidrogênio).

[0024] Em certas modalidades, os compostos aqui descritos decompõem espécies reativas de nitrogênio (RNS), tal como peroxinitrito, e/ou espécies reativas de oxigênio (ROS), tal como peróxido de (hidrogênio).

[0025] Em certas modalidades, os compostos aqui descritos reagem com espécies reativas de nitrogênio (RNS), tal como peroxinitrito, e/ou espécies reativas de oxigênio (ROS), tal como peróxido (hidrogênio).

[0026] Em certas modalidades, os compostos aqui descritos reduzem os níveis e/ou inibem a atividade de espécies reativas de nitrogênio (RNS), tal como peroxinitrito, e/ou reduzem os níveis e/ou inibem a atividade de espécies reativas de oxigênio (ROS), tal como peróxido de (hidrogênio).

[0027] Em certas modalidades, os compostos aqui descritos causam a destruição de espécies reativas de nitrogênio, tal como peroxinitrito.

[0028] Em certas modalidades, os compostos aqui descritos causam a destruição de espécies reativas de oxigênio, tal como peróxido (hidrogênio).

[0029] Em certas modalidades, os compostos aqui descritos decompõem espécies reativas de nitrogênio, tal como peroxinitrito.

[0030] Em certas modalidades, os compostos aqui descritos decompõem espécies reativas de oxigênio, tal como peróxido (hidrogênio).

[0031] Em certas modalidades, os compostos aqui descritos reagem com espécies reativas de nitrogênio, tal como peroxinitrito.

[0032] Em certas modalidades, os compostos aqui descritos reagem com espécies reativas de oxigênio, tal como peróxido (hidrogênio).

[0033] Em certas modalidades, os compostos aqui descritos reduzem os níveis, ou inibem a atividade, de espécies reativas de nitrogênio, tal como peroxinitrito.

[0034] Em certas modalidades, os compostos aqui descritos reduzem os níveis, ou inibem a atividade, de espécies reativas de oxigênio, tal como peróxido (hidrogênio).

[0035] Em certas modalidades, a presente invenção fornece um método de administração de um composto da invenção para fornecer alívio da dor.

[0036] Em certas modalidades, a presente invenção fornece compostos, composições e métodos para reduzir ou abolir a dor crônica em um sujeito em necessidade.

[0037] Em certas modalidades, a presente invenção fornece compostos, composições e métodos para reduzir ou abolir a hiperalgesia em um sujeito em necessidade.

[0038] Em certas modalidades, a presente invenção fornece compostos, composições e métodos para reduzir ou abolir a alodinia em um sujeito em necessidade.

[0039] Em certas modalidades, a presente invenção fornece compostos, composições e métodos para reduzir ou abolir a dor espontânea em um sujeito em necessidade.

[0040] Em certas modalidades, a presente invenção fornece compostos, composições e métodos para reduzir ou abolir a dor decorrente de procedimentos cirúrgicos, em um sujeito em necessidade.

[0041] Em certas modalidades, a presente invenção fornece compostos, composições e métodos para reduzir ou abolir a dor neuropática, tal como a que surge de diabetes, em um sujeito em necessidade.

[0042] Em outras modalidades, a invenção se refere a compostos, composições e métodos para reduzir ou abolir a dor neuropática, tal como aquela decorrente de câncer, quimioterapia ou terapia de radiação do câncer, em um sujeito em necessidade.

[0043] Certos compostos fenólicos com propriedades analgésicas foram anteriormente divulgados na Patente dos EUA n.º 9,102,636 B2, Publicações do Pedido de Patente dos EUA n.º US20110224269 A1 e n.º US20120202860 A1, e Publicação do Pedido PCT n.º WO2011112602A1, cada um dos quais é aqui incorporado por referência por inteiro.

DEFINIÇÕES

[0044] Como aqui usado, cada um dos termos a seguir tem o significado associado a ele nesta seção.

[0045] A não ser que definidos de outro modo, todos os termos técnicos e científicos usados aqui geralmente têm o mesmo significado como comumente entendido por um perito na técnica à qual esta invenção pertence.

Geralmente, a nomenclatura aqui usada e os procedimentos laboratoriais em farmacologia animal, ciência farmacêutica, ciência da separação e química orgânica são aqueles bem conhecidos e comumente aplicados na técnica.

[0046] Conforme usado neste documento, os artigos "um" e "uma" se referem a um ou mais de um (ou seja, a pelo menos um) do objeto gramatical do artigo. A título de exemplo, "um elemento" significa um elemento ou mais de um elemento.

[0047] Tal como aqui utilizado, o termo "cerca de" é compreendido por pessoas ordinariamente versadas na técnica e varia até certo ponto no contexto em que é usado. Tal como aqui utilizado quando se refere a um valor mensurável, tal como uma quantidade, uma duração temporal e semelhantes, o termo "cerca de" pretende abranger variações de ±20% ou ±10%, mais preferencialmente ±5%, ainda mais preferencialmente ±1%, e ainda mais preferencialmente ±0,1 % do valor especificado, uma vez que tais variações são adequadas para executar os métodos divulgados.

[0048] Em um aspecto, os termos "coadministrado" e "coadministração" no que se refere a um sujeito se referem à administração ao sujeito de um composto da invenção ou sal do mesmo junto com um composto que também pode tratar doenças e/ou distúrbios contemplados aqui. Em certas modalidades, os compostos coadministrados são administrados separadamente ou em qualquer tipo de combinação como parte de uma única abordagem terapêutica. O composto coadministrado pode ser formulado em qualquer tipo de combinação como misturas de sólidos e líquidos sob uma variedade de formulações sólidas, em gel e líquidas e como uma solução.

[0049] Tal como aqui utilizado, o termo "CYP450" aplicado a enzimas se refere à família de enzimas do citocromo P450.

[0050] Tal como aqui utilizado, uma "doença" é um estado de saúde de um indivíduo, em que o sujeito não pode manter a homeostase, e em que, se a doença não é melhorada, em seguida, a saúde do sujeito continua a se deteriorar.

[0051] Tal como aqui utilizado, um "distúrbio" em um sujeito é um estado de saúde em que o sujeito é capaz de manter a homeostase, mas no qual o estado de saúde do sujeito é menos favorável do que seria na ausência do distúrbio. Se não for tratado, um distúrbio não causa necessariamente uma redução ainda maior no estado de saúde do sujeito.

[0052] Tal como aqui utilizado, o termo "ED50" se refere a dose eficaz de uma formulação que produz 50% do efeito máximo, em sujeitos que são administrados essa formulação.

[0053] Tal como aqui utilizado, uma "quantidade eficaz", "quantidade terapeuticamente eficaz" ou "quantidade farmaceuticamente eficaz" de um composto é a quantidade de composto que é suficiente para proporcionar um efeito benéfico ao sujeito ao qual é administrado o composto.

[0054] "Material de instrução", tal como o termo é aqui utilizado, inclui uma publicação, uma gravação, um diagrama, ou qualquer outro meio de expressão que pode ser usado para comunicar a utilidade da composição e/ou do composto da invenção em um kit. O material de instrução do kit pode, por exemplo, ser afixado a um recipiente que contém o composto e/ou composição da invenção ou ser enviado junto com um recipiente que contém o composto e/ou composição. Alternativamente, o material de instrução pode ser enviado separadamente do recipiente com a intenção de que o destinatário use o material de instrução e o composto cooperativamente. A entrega do material de instrução pode ser, por exemplo, pela entrega física da publicação ou outro meio de expressão comunicando a utilidade do kit, ou pode, alternativamente, ser conseguida por transmissão eletrônica, por exemplo, por meio de um computador, tal como por e-mail eletrônico ou baixar de um site.

[0055] Tal como aqui utilizado, o termo "composição farmacêutica" ou "composição" se refere a uma mistura de pelo menos um composto útil na invenção com um transportador farmaceuticamente aceitável A composição farmacêutica facilita a administração do composto a um sujeito.

[0056] Tal como aqui utilizado, o termo "farmaceuticamente aceitável" se refere a um material, tal como um transportador ou diluente, que não anula a atividade biológica ou propriedades do composto útil dentro da invenção e é relativamente não tóxico, ou seja, o material pode ser administrado a um sujeito sem causar efeitos biológicos indesejáveis ou interagir de forma deletéria com qualquer um dos componentes da composição na qual está contido.

[0057] Tal como aqui utilizado, o termo "transportador farmaceuticamente aceitável" significa um material, composição ou transportador farmaceuticamente aceitável, tal como um enchimento líquido ou sólido, estabilizador, agente dispersante, agente de suspensão, diluente, excipiente, agente espessante, solvente ou material encapsulante, envolvido em carregar ou no transporte de um composto útil da invenção para o sujeito de modo que ele possa desempenhar a função pretendida. Normalmente, tais construtos são carregados ou transportados de um órgão, ou parte do corpo, para outro órgão ou parte do corpo. Cada transportador deve ser "aceitável" no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da formulação, incluindo o composto útil na invenção, e não prejudicial ao sujeito. Alguns exemplos de materiais que podem servir como transportadores farmaceuticamente aceitáveis incluem: açúcares, tal como lactose, glicose e sacarose; amidos, tal como amido de milho e amido de batata; celulose e seus derivados, tais como carboximetilcelulose de sódio, etilcelulose e acetato de celulose; tragacanto em pó; malte; gelatina; talco; excipientes, tais como manteiga de cacau e ceras para supositórios; óleos, tais como óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de açafrão, óleo de gergelim, azeite, óleo de milho e óleo de soja; glicóis, tais como propilenoglicol; polióis, tais como glicerina, sorbitol, manitol e polietilenoglicol; ésteres, tal como oleato de etila e laurato de etila; ágar; agentes tamponantes, tais como hidróxido de magnésio e hidróxido de alumínio; agentes tensoativos; ácido algínico; água sem pirogênio; solução salina isotônica; solução de Ringer; álcool etílico; soluções tampão de fosfato; e outras substâncias compatíveis não tóxicas aplicadas em formulações farmacêuticas.

Tal como aqui utilizado, "transportador farmaceuticamente aceitável" também inclui todos e quaisquer revestimentos, agentes antibacterianos e antifúngicos e agentes de retardamento da absorção e semelhantes que são compatíveis com a atividade do composto útil da invenção e são fisiologicamente aceitáveis para o sujeito. Compostos ativos suplementares também podem ser incorporados nas composições. O "transportador farmaceuticamente aceitável" pode ainda incluir um sal farmaceuticamente aceitável do composto útil na invenção. Outros ingredientes adicionais que podem ser incluídos nas composições farmacêuticas utilizadas na prática da invenção são conhecidas na técnica e descritos, por exemplo em Remington's Pharmaceutical Sciences (Genaro, Ed., Mack Publishing Co., 1985, Easton, PA), que é aqui incorporado por referência.

[0058] Tal como aqui utilizado, a linguagem "sal farmaceuticamente aceitável" se refere a um sal do composto administrado preparado a partir de ácidos e bases não tóxicos farmaceuticamente aceitáveis, incluindo ácidos inorgânicos, bases inorgânicas, ácidos orgânicos, bases inorgânicas, solvatos, hidratos e clatratos dos mesmos.

[0059] O termo "prevenir", "prevenção" ou "prevenção", tal como aqui utilizado, significa evitar ou retardar o aparecimento de sintomas associados com uma doença ou estado num sujeito, que não desenvolveu estes sintomas no momento em que a administração de um agente ou composto começa.

Doença, afeção e distúrbio são usados aqui indistintamente.

[0060] Pelo termo "ligar especificamente" ou "se liga especificamente", como aqui utilizado, se entende que uma primeira molécula que se liga preferencialmente a uma segunda molécula (por exemplo, um receptor ou enzima particular), mas não se ligam necessariamente apenas a essa segunda molécula.

[0061] Tal como aqui utilizado, um "sujeito" pode ser um mamífero humano ou não humano ou uma ave. Os mamíferos não humanos incluem, por exemplo, gado e animais de estimação, tais como mamíferos ovinos, bovinos, porcinos, caninos, felinos e murinos. De preferência, o sujeito é humano.

[0062] O termo "tratar", "tratando" ou "tratamento", tal como aqui utilizado, significa reduzir a frequência ou a severidade que os sintomas de uma doença ou afeção são experimentadas por um sujeito em virtude da administração de um agente ou composto ao sujeito.

[0063] Tal como aqui utilizado, o termo "alquila", por si ou como parte de outro substituinte significa, a menos que indicado de outra forma, um hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificada tendo o número de átomos de carbono designado (isto é, C1-C10 significa um a dez átomos de carbonos) e inclui grupos substituintes lineares, de cadeia ramificada ou cíclicos. Os exemplos incluem metila, etila, propila, isopropila, butila, isobutila, terc-butila, pentila, neopentila, hexila e ciclopropilmetila. O mais preferido é (C1-C6)alquila, tais como, mas não limitados a, acetato, metila, isopropila, isobutila, n-pentila, n- hexila e ciclopropilmetila.

[0064] Tal como aqui utilizado, o termo "alquileno", por si ou como parte de outro substituinte significa, a menos que indicado de outra forma, um grupo de hidrocarboneto linear ou ramificado tendo o número de átomos de carbono designado (isto é, C1-C10 significa um a dez átomos de carbonos) e inclui grupos substituintes lineares, de cadeia ramificada ou cíclicos, em que o grupo tem duas valências abertas. Os exemplos incluem metileno, 1,2-etileno, 1,1- etileno, 1,1-propileno, 1,2-propileno e 1,3-propileno.

[0065] Tal como aqui utilizado, o termo "cicloalquilo", por si só ou como parte de outro substituinte significa, a menos que indicado de outra forma, uma cadeia de hidrocarboneto cíclica possuindo o número de átomos de carbono designado, isto é, C3-C6 significa um grupo cíclico que compreende um grupo anel que consiste em três a seis átomos de carbono) e inclui grupos substituintes de cadeia linear, ramificada ou cíclica. Os exemplos incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila e ciclooctila. O mais preferido é (C3-C6)cicloalquila, tais como, mas não se limitando a, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila e ciclo-hexila.

[0066] Tal como aqui utilizado, o termo "alquenila", aplicado só ou em combinação com outros termos, significa, a menos que indicado de outra forma, um grupo hidrocarboneto estável monoinsaturado ou di-insaturado de cadeia linear ou de cadeia ramificada tendo o número declarado de átomos de carbono. Os exemplos incluem vinila, propenila (ou alila), crotila, isopentenila, butadienila, 1,3-pentadienila, 1,4-pentadienila e os homólogos e isômeros superiores. Um grupo funcional que representa um alqueno é exemplificado por -CH2-CH=CH2.

[0067] Tal como aqui utilizado, o termo "alquinila" aplicado só ou em combinação com outros termos, significa, a menos que indicado de outra forma, uma cadeia estável linear ou um grupo hidrocarboneto de cadeia ramificada com uma ligação carbono-carbono tripla, tendo o número declarado de átomos de carbono. Os exemplos não limitativos incluem etinila e propinila e os homólogos e isômeros superiores. O termo "propargílico" se refere a um grupo exemplificado por -CH2-C≡CH. O termo "homopropargílico" se refere a um grupo exemplificado por -CH2CH2-C≡CH. O termo "propargílico substituído" se refere a um grupo exemplificado por -CR2-C≡CR, em que cada ocorrência de R é, independentemente, H, alquila, alquila substituída, alquenila ou alquenila substituída, com a condição de que pelo menos um grupo R não seja hidrogênio.

O termo "homopropargílico substituído" se refere a um grupo exemplificado por -CR2CR2-C≡CR, em que cada ocorrência de R é, independentemente, H, alquila, alquila substituída, alquenila ou alquenila substituída, com a condição de que pelo menos um grupo R não seja hidrogênio.

[0068] Tal como aqui utilizado, o termo "alquilo substituído", "cicloalquila substituída", "alquenila substituída" ou "alquinila substituída" significa alquila, cicloalquila, alquenila ou alquinila, como definido acima, substituída por um, dois ou três substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, alcóxi, tetra-hidro-2-H-piranila, -NH2, -N(CH3)2, (1- metil-imidazol-2-il), piridin-2-ila, piridin-3-ila, piridin-4-ila, -C(=O)OH, trifluorometila, -C≡N, -C(=O)O(C1-C4)alquila, -C(=O)NH2, -C(=O)NH(C1- C4)alquila, -C(=O)N((C1-C4)alquila)2, -SO2NH2, -C(=NH)NH2 e -NO2, de preferência contendo um ou dois substituintes selecionados de halogênio, -OH, alcóxi, -NH2, trifluorometila, -N(CH3)2 e -C(=O)OH, mais preferencialmente selecionado de halogênio, alcóxi e -OH. Exemplos de alquilas substituídas incluem, mas não estão limitados a, 2,2-difluoropropila, 2-carboxiciclopentila e 3- cloropropila. Em certas modalidades, o alquila substituída não é substituída por um grupo hidroxi.

[0069] Tal como aqui utilizado, o termo "alcóxi" aplicado sozinho ou em combinação com outros termos significa, a menos que indicado de outra forma, um grupo alquila tendo o número designado de átomos de carbono, conforme definido acima, conectado ao resto da molécula por meio de um átomo de oxigênio, tal como, por exemplo, metóxi, etóxi, 1-propóxi, 2-propóxi (isopropóxi) e os homólogos e isômeros superiores. Os preferidos são (C 1-C3)

alcóxi, tal como, mas não limitados a, etóxi e metóxi.

[0070] Tal como aqui utilizado, o termo " halo" ou " halogênio" sozinho ou como parte de outro substituinte significa, salvo indicação em contrário, um átomo de flúor, cloro, bromo ou iodo, de preferência, flúor, cloro ou bromo, mais preferencialmente, flúor ou cloro.

[0071] Tal como aqui utilizado, o termo "heteroalquila" por si só ou em combinação com outro termo significa, salvo indicação em contrário, um grupo alquila de cadeia linear ou ramificada estável consistindo no número declarado de átomos de carbono e um ou dois heteroátomos selecionados do grupo consistindo em O, N e S, e em que os átomos de nitrogênio e enxofre podem ser opcionalmente oxidados e o heteroátomo de nitrogênio pode ser opcionalmente quaternizado. O(s) heteroátomo(s) podem ser colocados em qualquer posição do grupo heteroalquila, incluindo entre o resto do grupo heteroalquila e o fragmento ao qual ele está ligado, bem como ligado ao átomo de carbono mais distal no grupo heteroalquila. Os exemplos incluem: -O-CH2- CH2-CH3, -CH2-CH2-CH2-OH, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-S-CH2-CH3 e -CH2CH2- S(=O)-CH3. Até dois heteroátomos podem ser consecutivos, tais como, por exemplo, -CH2-NH-OCH3, ou -CH2-CH2-S-S-CH3.

[0072] Tal como aqui utilizado, o termo "heteroalquenila" por si só ou em combinação com outro termo significa, salvo indicação em contrário, um grupo hidrocarboneto monoinsaturado ou di-insaturado de cadeia linear ou ramificada estável consistindo no número declarado de átomos de carbono e um ou dois heteroátomos selecionados do grupo consistindo em O, N e S, e em que os átomos de nitrogênio e enxofre podem ser opcionalmente oxidados e o heteroátomo de nitrogênio pode ser opcionalmente quaternizado. Até dois heteroátomos podem ser colocados consecutivamente. Os exemplos incluem - CH=CH-O-CH3, -CH=CH-CH2-OH, -CH2-CH=N-OCH3, -CH=CH-N(CH3)-CH3 e - CH2-CH=CH-CH2-SH.

[0073] Tal como aqui utilizado, o termo "aromático" se refere a um carbociclo ou heterociclo com um ou mais anéis poli-insaturados e tendo caráter aromático, isto é, tendo (4n+2) elétrons π (pi) deslocalizados, onde n é um número inteiro.

[0074] Tal como aqui utilizado, o termo "arila" aplicado só ou em combinação com outros termos, significa, a menos que indicado de outra forma, um sistema aromático carbocíclico contendo um ou mais anéis (tipicamente um, dois ou três anéis) em que tais anéis podem estar ligados em conjunto de forma pendente, tal como uma bifenila, ou pode ser fundido, tal como naftaleno. Os exemplos incluem fenila, antracila e naftila. Os preferidos são fenila e naftila, sendo o mais preferido fenila.

[0075] Tal como aqui utilizado, o termo "aril-(C1-C3)alquila” significa um grupo funcional em que uma cadeia de alquileno com um a três carbonos está ligada a um grupo arila, por exemplo, -CH2CH2-fenila ou -CH2-fenila (benzila). Preferidos são aril-CH2- e aril-CH(CH3)-. O termo "aril-(C1-C3)alquiloa significa um grupos aril-(C1-C3)alquila funcional em que o grupo arila é substituído. Preferido é uma aril(CH2)- substituída. Da mesma forma, o termo "heteroaril-(C1-C3)alquila" significa um grupo funcional, em que um a três átomos de carbono da cadeia de alquileno está ligada a um grupo heteroarila, por exemplo, -CH2CH2-piridila. O preferido é heteroaril-(CH2)-. O termo “heteroaril- (C1-C3)alquila substituída" significa um heteroaril-(C1-C3)alquila funcional, em que o grupo heteroarila é substituído. Preferido é uma heteroaril(CH 2)- substituída.

[0076] Tal como aqui utilizado, o termo "heterociclo" ou "heterociclila" ou "heterocíclica" por si só ou como parte de outro substituinte significa, a menos que indicado de outra forma, um sistema de anel heterocíclico não substituído ou substituído, estável, mono ou multicíclico que consiste em átomos de carbono e pelo menos um heteroátomo selecionado a partir do grupo que consiste em N, O e S, e em que os heteroátomos de nitrogênio e enxofre podem ser opcionalmente oxidados e o átomo de nitrogênio pode ser opcionalmente quaternizado. O sistema heterocíclico pode ser ligado, a menos que indicado de outra forma, a qualquer heteroátomo ou átomo de carbono que forneça uma estrutura estável. Um heterociclo pode ser de natureza aromática ou não aromática. Em certas modalidades, o heterociclo é uma heteroarila.

[0077] Tal como aqui utilizado, o termo "heteroarila" ou "heteroaromático" se refere a um heterociclo com caráter aromático. Uma heteroarila policíclica pode incluir um ou mais anéis que estão parcialmente saturados. Os exemplos incluem tetra-hidroquinolina e 2,3-di-hidrobenzofurila.

[0078] Exemplos de heterociclos não aromáticos incluem grupos monocíclicos, tais como aziridina, oxirano, tiirano, azetidina, oxetano, tietano, pirrolidina, pirrolina, imidazolina, pirazolidina, dioxolano, sulfolano, 2,3-di- hidrofurano, 2,5-di-hidrofurano, tetra-hidrofurano, tiofano, piperidina, 1,2,3,6- tetra-hidropiridina, 1,4-di-hidropiridina, piperazina, morfolina, tiomorfolina, pirano, 2,3-di-hidropirano, tetra-hidropirano, 1,4-dioxano, 1,3-dioxano, homopiperazina, homopiperidina, 1,3-dioxepano, 4,7-di-hidro-1,3-dioxepina e hexametilenoóxido.

[0079] Exemplos de grupos heteroarila incluem piridila, pirazinila, pirimidinila (tal como, mas não limitado a, 2- e 4-pirimidinila), piridazinila, tienila, furila, pirrolila, imidazolila, tiazolila, oxazolila, pirazolila, isotiazolila, 1,2,3- triazolila, 1,2,4-triazolila, 1,3,4-triazolila, tetrazolila, 1,2,3-tiadiazolila, 1,2,3- oxadiazolila, 1,3,4-tiadiazolila e 1,3,4 -oxadiazolila.

[0080] Exemplos de heterociclos policíclicos incluem indolila (tal como, mas não se limitando a, 3-, 4-, 5-, 6- e 7-indolila), indolinila, quinolila, tetra- hidroquinolinila, isoquinolinila (tal como, mas não limitado a, 1- e 5-isoquinolila), 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolila, cinnolinila, quinoxalinila (tal como, mas não limitado a, 2- e 5-quinoxalinila), quinazolinila, ftalazinila, 1,8-naftiridinila, 1,4-

benzodioxanila, cumarina, di-hidrocumarina, 1,5-naftiridinila, benzofurila (tal como, mas não limitado a, 3-, 4-, 5-, 6- e 7-benzofurila), 2,3-di-hidrobenzofurila, 1,2-benzisoxazolila, benzotienila (tal como, mas não limitado a, 3-, 4-, 5-, 6- e 7- benzotienila), benzoxazolila, benzotiazolila (tal como, mas não limitado a, 2- benzotiazolila e 5-benzotiazolila), purinila, benzimidazolila, benztriazolila, tioxantinila, carbazolila, carbolinila, acridinila, pirrolizidinila e quinolizidinila.

[0081] A listagem acima mencionada de porções heterociclila e heteroarila pretende ser representativa e não limitativa.

[0082] Como usado aqui, o termo "substituído” significa que um átomo ou grupo de átomos substituiu hidrogênio como o substituinte ligado a outro grupo.

[0083] Para grupos arila, aril-(C1-C3) alquila e heterociclila, o termo "substituído” conforme aplicado aos anéis desses grupos se refere a qualquer nível de substituição, nomeadamente mono, di, tri, tetra ou pentassubstituição, onde tal substituição é permitida. Os substituintes são selecionados, independentemente, e a substituição pode ser em qualquer posição quimicamente acessível. Em certas modalidades, os substituintes variam em número entre um e quatro. Em outras modalidades, os substituintes variam em número entre um e três. Em ainda outras modalidades, os substituintes variam em número entre um e dois. Em ainda outras modalidades, os substituintes são, independentemente, selecionados a partir do grupo que consiste em C1-6 alquila, -OH, C1-6 alcóxi, halo, amino, acetamida e nitro. Tal como aqui utilizado, onde um substituinte é um grupo alquila ou alcóxi, a cadeia de carbono pode ser ramificada, linear ou cíclica, sendo preferida a linear.

[0084] São aqui usadas as seguintes abreviaturas: AcOH, ácido acético; Ar, argôn; Boc, butiloxicarbonila; C, carbono; CHCl3, clorofórmio; DCM (ou CH2Cl2), cloreto de metileno (diclorometano); d, dia; DIPEA, N,N-diisopropiletilamina; DMF, N,N-dimetilformamida; DMSO, dimetilsulfóxido; EDTA, ácido etilenodiaminotetra-acético; ESI, ionização por eletropulverização; EtOAc, acetato de etila; GCMS, cromatograma gasoso - espectrometria de massa; h, hora; H2, gás de hidrogênio; iPrOH, isopropanol; K2CO3, carbonato de potássio; KOH, hidróxido de potássio; LCMS, cromatografia líquida - espectrometria de massa; MeCN ou CH3CN, acetonitrila; MEM, metoxietoximetila; MeOH, metanol; MgSO4, sulfato de magnésio; MHz, megahertz; min, minuto (unidade de tempo); MOM, metoximetila; MS, espectrometria de massa; NaHCO3, bicarbonato de sódio; Na2SO4, sulfato de sódio; RMN, ressonância magnética nuclear; Pd, paládio (metal); Ph, fenila; PBS, solução tampão de fosfato; PE, éter de petróleo; PN, peroxinitrito; seg, segundo (unidade de tempo); SEM, trimetilsililetoximetila; SIN1, 3-morfolino-sidonimina; TEA, trimetilamina; THF, tetra-hidrofurano; Tr, tritila (-CPh3); TsCl, cloreto de tosila.

[0085] Ao longo desta divulgação, vários aspectos da invenção podem ser apresentados num formato de intervalo. Deve ser entendido que a descrição em formato de intervalo é meramente por conveniência e brevidade e não deve ser interpretada como uma limitação inflexível no escopo da invenção. Por conseguinte, a descrição de um intervalo deve ser considerada como tendo divulgado especificamente todos os subintervalos possíveis, bem como valores numéricos individuais dentro desse intervalo e, quando apropriado, números inteiros parciais dos valores numéricos dentro dos intervalos. Por exemplo, a descrição de um intervalo de 1 a 6 deve ser considerada como tendo subintervalos especificamente divulgados, como de 1 a 3, de 1 a 4, de 1 a 5, de 2 a 4, de 2 a 6, a de 3 para 6 etc., bem como números individuais dentro desse intervalo, por exemplo, 1, 2, 2,7, 3, 4, 5, 5,3 e 6.

Isso se aplica independentemente da amplitude do intervalo.

TAUTOMERISMO

[0086] "Tautômeros” são isômeros estruturalmente distintos que se interconvertem por tautomerização. A "tautomerização” é uma forma de isomerização que envolve a migração de um próton acompanhada por mudanças na ordem das ligações, frequentemente a troca de uma ligação simples com uma ligação dupla adjacente. Onde a tautomerização é possível (por exemplo, em solução), um equilíbrio químico dos tautômeros pode ser alcançado. Um exemplo bem conhecido de tautomerização é entre uma cetona e seu enol correspondente. Os compostos contemplados na invenção também podem sofrer tautomerização (entre si) e podem existir em formas de anti- ou sin-imino -tiazolina ou como uma mistura das mesmas.

[0087] Em certas modalidades em que R2 = H, os compostos da fórmula (I) podem existir como compostos tautoméricos amino-tiazolidina e imino-tiazolina das fórmulas (IIa), incluindo um ou ambos os anti- e sin- regiômeros (em relação a Y) no caso da imino-tiazolina; ou um sal, solvato, enantiômero, diastereoisômero ou tautômero do mesmo: (IIa)

[0088] Deve ser entendido que ambas as formas tautoméricas de um determinado composto estão contempladas e dentro do escopo da presente invenção. Assim, qualquer discussão de qualquer composto divulgado neste documento deve ser entendida como incluindo ambas as formas tautoméricas desse composto, a menos que especificado de outra forma.

SAIS DE ADIÇÃO DE ÁCIDO

[0089] Os compostos contemplados na invenção podem conter um nitrogênio básico que pode ser protonado por um ácido prótico suficientemente forte. Embora qualquer ácido prótico suficientemente forte possa ser usado, ácidos farmaceuticamente aceitáveis são preferidos de modo que sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis sejam formados. "Ácido farmaceuticamente aceitável” se refere aos ácidos que não são tóxicos ou de outra forma biologicamente indesejáveis. Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados com ácidos inorgânicos farmaceuticamente aceitáveis incluindo, mas não se limitando a, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido sulfâmico, ácido nítrico, ácido fosfórico e semelhantes.

[0090] Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis também podem ser formados com ácidos orgânicos farmaceuticamente aceitáveis. Exemplos de ácidos orgânicos farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido adípico, ácido ascórbico, ácido aspártico, ácido benzenossulfônico, ácido benzoico, ácido butírico, ácido canfórico, ácido canforsulfônico, ácido cinâmico, ácido cítrico, ácido diglucônico, ácido etanossulfônico, ácido glutâmico, ácido glicólico, ácido glicerofosfórico, ácido hemisúlfico, ácido hexanoico, ácido fórmico, ácido fumárico, ácido 2-hidroxietanossulfônico (ácido isetionico), ácido lático, ácido hidroximaleico, ácido málico, ácido malônico, ácido mandélico, ácido mesitilenosulfônico, ácido metanossulfônico, ácido naftalenossulfônico, ácido nicotínico, ácido 2-naftalenossulfônico, ácido oxálico, ácido pamoico, ácido pectínico, ácido fenilacético, ácido 3-fenilpropiônico, ácido piválico, ácido propiônico, ácido pirúvico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido succínico, ácido sulfanílico, ácido tartárico, ácido p-toluenossulfônico, ácido undecanoico e semelhantes.

MÉTODOS DE PREPARAÇÃO

[0091] Os compostos da invenção podem ser preparados de acordo com os seguintes esquemas gerais. Nos casos em que o substituinte hidroxi é orto em relação ao carbono - ligação N exo-cíclica, um composto da fórmula (Ia) pode ser preparado como ilustrado no Esquema 1. Uma 3-hidroxi- 2-amino-piridina (A) é reagida com um xantato alquila (tal como, mas não limitado a, xantato de etila de potássio) para dar o produto oxazolo[4,5-b]piridina- 2-tiol ciclizado (B). A reação com um agente de cloração (tal como, mas não limitado a, cloreto de tionila) produz uma 2-clorooxazolo[4,5-b]piridina (C). A reação subsequente com uma penicilamina (W = COOH, R 3, R4 = CH3), uma cisteína (W = COOH, R3, R4 = H), ou um 2-amino-etanotiol fornece compostos de tiazolidina (I) desta invenção, que podem ser convertidos em um sal de adição de ácido, tal como, mas não se limitando a monocloridrato (sal I), por tratamento com um ácido.

Esquema 1

[0092] Alternativamente, os compostos da fórmula (I) podem ser preparados conforme ilustrado no Esquema 2. Um 2-amino-etanotiol S- protegido (tal como, mas não limitado a, S-tritil-cisteína) é reagido com um 2- clorooxazolo[4,5-b]piridina (C) para produzir um 2-aminobenzoxazol S-protegido (D). A desproteção (tal como, mas não se limitando a, destritilação) proporciona os compostos de tiazolidina (I) desta invenção.

Esquema 2

[0093] Alternativamente, os compostos da fórmula (I) podem ser preparados conforme ilustrado no Esquema 3. Uma 3-hidroxi-2-amino-piridina (A) sofre proteção do OH fenólico usando metodologia conhecida por um perito na técnica (por exemplo, acilação, alquilação (PG = metila, MOM, MEM, SEM), benzilação e semelhantes) para originar o congênere O-protegido (E), que é subsequentemente feito reagir com um reagente de cianogênio, tal como brometo de cianogênio, para dar cianamida (F). A reação de (F) com uma penicilamina (W = COOH, R3, R4 = CH3), uma cisteína (W = COOH, R3, R4 = H), ou um 2-amino-etanotiol fornece compostos de tiazolidina (I) desta invenção, que podem ser convertidos em um sal de adição de ácido, tal como, mas não se limitando a monocloridrato (sal I), por tratamento com um ácido.

Esquema 3

COMPOSIÇÕES E FORMULAÇÕES FARMACÊUTICAS

[0094] A invenção fornece composições farmacêuticas compreendendo pelo menos um composto da invenção ou um sal ou solvato do mesmo, que são úteis para a prática dos métodos da invenção. Tal composição farmacêutica pode consistir em pelo menos um composto da invenção ou um sal ou solvato do mesmo, em uma forma adequada para administração a um sujeito, ou a composição farmacêutica pode compreender pelo menos um composto da invenção ou um sal ou solvato do mesmo, e um ou mais transportadores farmaceuticamente aceitáveis, um ou mais ingredientes adicionais, ou alguma combinação destes. Pelo menos um composto da invenção pode estar presente na composição farmacêutica na forma de um sal fisiologicamente aceitável, tal como em combinação com um cátion ou ânion fisiologicamente aceitável, como é bem conhecido na técnica.

[0095] Em certas modalidades, as composições farmacêuticas úteis para a prática do método da invenção podem ser administradas para entregar uma dose entre 1 ng/kg/dia e 100 mg/kg/dia. Em outras modalidades, as composições farmacêuticas úteis para a prática da invenção podem ser administradas para entregar uma dose entre 1 ng/kg/dia e 1.000 mg/kg/dia.

[0096] As quantidades relativas do ingrediente ativo, o transportador farmaceuticamente aceitável e quaisquer ingredientes adicionais em uma composição farmacêutica da invenção irão variar, dependendo da identidade, tamanho e condição do sujeito tratado e ainda dependendo da via pela qual a composição deve ser administrada. A título de exemplo, a composição pode compreender entre 0,1% e 100% (p/p) de ingrediente ativo.

[0097] As composições farmacêuticas que são úteis nos métodos da invenção podem ser adequadamente desenvolvidas para aplicação nasal, inalatória, oral, retal, vaginal, pleural, peritoneal, parenteral, tópica, transdérmica, pulmonar, intranasal, bucal, oftálmica, epidural, intratecal, intravenosa ou outra via de administração. Uma composição útil dentro dos métodos da invenção pode ser administrada diretamente ao cérebro, tronco cerebral ou qualquer outra parte do sistema nervoso central de um mamífero ou ave. Outras formulações contempladas incluem nanopartículas projetadas, microesferas, preparações lipossomais, partículas revestidas, conjugados de polímero, eritrócitos selados novamente contendo o ingrediente ativo e formulações de base imunológica.

[0098] Em certas modalidades, as composições da invenção fazem parte de uma matriz farmacêutica, que permite a manipulação de materiais insolúveis e a melhoria da biodisponibilidade dos mesmos, o desenvolvimento de produtos de liberação controlada ou sustentada e a geração de composições homogêneas. A título de exemplo, uma matriz farmacêutica pode ser preparada usando extrusão de fusão a quente, soluções sólidas, dispersões sólidas, tecnologias de redução de tamanho, complexos moleculares (por exemplo, ciclodextrinas e outros), micropartículas e processos de revestimento de formulação e partículas. Fases amorfas ou cristalinas podem ser usadas em tais processos.

[0099] A(s) via(s) de administração serão prontamente aparentes para o perito na técnica e dependerão de qualquer número de fatores, incluindo o tipo e gravidade da doença a ser tratada, o tipo e a idade do paciente veterinário ou humano a ser tratado e semelhantes.

[0100] As formulações das composições farmacêuticas aqui descritas podem ser preparadas por qualquer método conhecido ou a seguir desenvolvido na área da farmacologia e da farmácia. Em geral, tais métodos preparatórios incluem a etapa de trazer o ingrediente ativo em associação com um transportador ou um ou mais outros ingredientes acessórios e, então, se necessário ou desejável, moldar ou embalar o produto em uma unidade de dose única ou multidose desejada.

[0101] Tal como aqui utilizado, uma "dose unitária” é uma quantidade discreta da composição farmacêutica compreendendo uma quantidade predeterminada do ingrediente ativo. A quantidade do ingrediente ativo é geralmente igual à dosagem do ingrediente ativo que seria administrado a um sujeito ou uma fração conveniente de tal dosagem tal como, por exemplo, metade ou um terço de tal dosagem. A forma de dosagem unitária pode ser para uma única dose diária ou uma múltiplas doses diárias (por exemplo, cerca de 1 a 4 ou mais vezes por dia). Quando múltiplas doses diárias são usadas, a forma de dosagem unitária pode ser a mesma ou diferente para cada dose.

[0102] Embora as descrições de composições farmacêuticas fornecidas neste documento sejam principalmente direcionadas a composições farmacêuticas adequadas para administração ética a humanos, será entendido pelo perito na técnica que tais composições são geralmente adequadas para administração a animais de todos os tipos. A modificação de composições farmacêuticas adequadas para administração a humanos, a fim de tornar as composições adequadas para administração a vários animais, é bem compreendida, e o farmacologista veterinário normalmente habilitado pode projetar e realizar tal modificação com experimentação meramente comum, se houver. Os sujeitos para os quais a administração das composições farmacêuticas da invenção é contemplada incluem, mas não estão limitados a, humanos e outros primatas, mamíferos incluindo mamíferos comercialmente relevantes, como gado, porcos, cavalos, ovelhas, gatos e cães.

[0103] Em certas modalidades, as composições da invenção são formuladas usando um ou mais excipientes ou transportadores farmaceuticamente aceitáveis. Em certas modalidades, as composições farmacêuticas da invenção compreendem uma quantidade terapeuticamente eficaz de pelo menos um composto da invenção e um transportador farmaceuticamente aceitável. Os transportadores farmaceuticamente aceitáveis, que são úteis, incluem, mas não estão limitados a, glicerol, água, solução salina, etanol, albumina humana recombinante (por exemplo, RECOMBUMIN®), gelatinas solubilizadas (por exemplo, GELOFUSINE®), e outras soluções de sal farmaceuticamente aceitáveis, tais como como fosfatos e sais de ácidos orgânicos. Exemplos destes e de outros transportadores farmaceuticamente aceitáveis são descritos em Remington's Pharmaceutical Sciences (1991, Mack Publication Co., New Jersey).

[0104] O transportador pode ser um solvente ou meio de dispersão contendo, por exemplo, água, etanol, poliol (por exemplo, glicerol, propilenoglicol e polietilenoglicol líquido e semelhantes), albumina humana recombinante,

gelatinas solubilizadas, misturas adequadas dos mesmos e óleos vegetais. A fluidez apropriada pode ser mantida, por exemplo, pelo uso de um revestimento, tal como lecitina, pela manutenção do tamanho de partículas exigido no caso de dispersão e pelo uso de tensoativos. A prevenção da ação de microrganismos pode ser alcançada por vários agentes antibacterianos e antifúngicos, por exemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido ascórbico, timerosal e similares.

Em muitos casos, agentes isotônicos, por exemplo, açúcares, cloreto de sódio ou poliálcoois, tal como manitol e sorbitol, estão incluídos na composição. A absorção prolongada das composições injetáveis pode ser conseguida incluindo na composição um agente que retarde a absorção, por exemplo, monoestearato de alumínio ou gelatina.

[0105] As formulações podem ser aplicadas em misturas com excipientes convencionais, isto é, substâncias transportadoras orgânicas ou inorgânicas farmaceuticamente aceitáveis adequadas para oral, parenteral, nasal, inalatória, intravenosa, subcutânea, transdérmica, enteral ou qualquer outro modo de administração adequado, conhecido na técnica. As preparações farmacêuticas podem ser esterilizadas e, se desejado, misturadas com agentes auxiliares, por exemplo, lubrificantes, conservantes, estabilizantes, agentes umectantes, emulsificantes, sais para influenciar os tampões de pressão osmótica, corantes, aromatizantes e/ou substâncias conferindo fragrâncias e semelhantes. Eles também podem ser combinados quando desejado com outros agentes ativos, por exemplo, outros analgésicos, ansiolíticos ou agentes hipnóticos. Como usado aqui, "ingredientes adicionais” inclui, mas não está limitado a, um ou mais ingredientes que podem ser usados como um transportador farmacêutico.

[0106] A composição da invenção pode compreender um conservante de cerca de 0,005% a 2,0% em peso total da composição. O conservante é usado para prevenir a deterioração em caso de exposição a contaminantes do meio ambiente. Exemplos de conservantes úteis de acordo com a invenção incluem, mas não estão limitados àqueles selecionados do grupo que consiste em álcool benzílico, ácido sórbico, parabenos, imidureia e suas combinações. Um desses conservantes é uma combinação de cerca de 0,5% a 2,0% de álcool benzílico e 0,05% a 0,5% de ácido sórbico.

[0107] A composição pode incluir um antioxidante e um agente quelante que inibe a degradação do composto. Antioxidantes para alguns compostos são BHT, BHA, alfa-tocoferol e ácido ascórbico no intervalo exemplificativo de cerca de 0,01% a 0,3%, ou BHT no intervalo de 0,03% a 0,1% em peso por peso total da composição. O agente quelante pode estar presente em uma quantidade de 0,01% a 0,5% em peso por peso total da composição.

Os agentes quelantes exemplares incluem sais de edetato (por exemplo, edetato dissódico) e ácido cítrico no intervalo de peso de cerca de 0,01% a 0,20%, ou no intervalo de 0,02% a 0,10% em peso, por peso total da composição. O agente quelante é útil para quelar íons metálicos na composição que podem ser prejudiciais à vida útil da formulação. Embora BHT e edetato dissódico sejam antioxidantes e agentes quelantes exemplificativos, respectivamente, para alguns compostos, outros antioxidantes e agentes quelantes adequados e equivalentes podem ser substituídos, portanto, como seria conhecido dos peritos na técnica.

[0108] As suspensões líquidas podem ser preparadas usando métodos convencionais para conseguir a suspensão do ingrediente ativo em um veículo aquoso ou oleoso. Os veículos aquosos incluem, por exemplo, água e solução salina isotônica. Os veículos oleosos incluem, por exemplo, óleo de amêndoa, ésteres oleosos, álcool etílico, óleos vegetais, tal como amendoim, oliva, gergelim ou óleo de coco, óleos vegetais fracionados e óleos minerais, tal como parafina líquida. As suspensões líquidas podem compreender ainda um ou mais ingredientes adicionais, incluindo, mas não se limitando a, agentes de suspensão, agentes dispersantes ou umectantes, agentes emulsificantes, demulcentes, conservantes, tampões, sais, aromatizantes, agentes corantes e agentes adoçantes. As suspensões oleosas podem compreender ainda um agente espessante. Os agentes de suspensão conhecidos incluem, mas não estão limitados a, xarope de sorbitol, gorduras comestíveis hidrogenadas, alginato de sódio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto, goma acácia e derivados de celulose, tais como carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose. Os agentes dispersantes ou umectantes conhecidos incluem, mas não estão limitados a, fosfatídeos de ocorrência natural, tais como lecitina, produtos de condensação de um óxido de alquileno com um ácido graxo, com um álcool alifático de cadeia longa, com um éster parcial derivado de um ácido graxo e um hexitol, ou com um éster parcial derivado de um ácido graxo e um anidrido de hexitol (por exemplo, estearato de polioxietileno, heptadecaetilenoxicetanol, monooleato de polioxietileno sorbitol e monooleato de polioxietileno sorbitano, respectivamente). Os agentes emulsionantes conhecidos incluem, mas não estão limitados a, lecitina, acácia e tensoativos iônicos ou não iônicos. Conservantes conhecidos incluem, mas não estão limitados a, para-hidroxibenzoatos de metila, etila ou n- propila, ácido ascórbico e ácido sórbico. Os agentes adoçantes conhecidos incluem, por exemplo, glicerol, propilenoglicol, sorbitol, sacarose e sacarina.

[0109] As soluções líquidas do ingrediente ativo em solventes aquosos ou oleosos podem ser preparadas substancialmente da mesma maneira que as suspensões líquidas, sendo a principal diferença que o ingrediente ativo é dissolvido, em vez de suspenso no solvente. Tal como aqui utilizado, um líquido "oleoso” é um que compreende uma molécula de líquido que contém carbono e que apresenta um caráter menos polar do que a água. As soluções líquidas da composição farmacêutica da invenção podem compreender cada um dos componentes descritos em relação às suspensões líquidas, sendo entendido que os agentes de suspensão não ajudarão necessariamente na dissolução do ingrediente ativo no solvente. Os solventes aquosos incluem, por exemplo, água e solução salina isotônica. Os solventes oleosos incluem, por exemplo, óleo de amêndoa, ésteres oleosos, álcool etílico, óleos vegetais, tal como amendoim, oliva, gergelim ou óleo de coco, óleos vegetais fracionados e óleos minerais, tal como parafina líquida.

[0110] As formulações em pó e granulares de uma preparação farmacêutica da invenção podem ser preparadas usando métodos conhecidos.

Tais formulações podem ser administradas diretamente a um sujeito, usadas, por exemplo, para formar comprimidos, para encher cápsulas ou para preparar uma suspensão aquosa ou oleosa ou solução por adição de um veículo aquoso ou oleoso. Cada uma dessas formulações pode compreender ainda um ou mais dentre agente dispersante ou umectante, um agente de suspensão, tensoativos iônicos e não iônicos e um conservante. Excipientes adicionais, tais como enchimentos e agentes edulcorantes, aromatizantes ou corantes, também podem ser incluídos nestas formulações.

[0111] Uma composição farmacêutica da invenção também pode ser preparada, embalada ou vendida na forma de emulsão de óleo em água ou uma emulsão de água em óleo. A fase oleosa pode ser um óleo vegetal, tal como azeite ou óleo de amendoim, um óleo mineral, tal como parafina líquida, ou uma combinação destes. Tais composições podem compreender ainda um ou mais agentes emulsionantes, tal como gomas de ocorrência natural, tal como goma acácia ou goma tragacanta, fosfatídeos de ocorrência natural, tal como fosfatídeo de lecitina ou de soja, ésteres ou ésteres parciais derivados de combinações de ácidos graxos e anidridos hexitol, tal como sorbitano monooleato e produtos de condensação de tais ésteres parciais com óxido de etileno tal como monooleato de polioxietileno sorbitano. Estas emulsões também podem conter ingredientes adicionais incluindo, por exemplo, agentes adoçantes ou aromatizantes.

[0112] Métodos para impregnar ou revestir um material com uma composição química são conhecidos na técnica e incluem, mas não estão limitados a métodos de depósito ou ligação de uma composição química em uma superfície, métodos de incorporação de uma composição química na estrutura de um material durante a síntese do material (isto é, tal como com um material fisiologicamente degradável) e métodos de absorção de uma solução aquosa ou oleosa ou suspensão em um material absorvente, com ou sem secagem subsequente. Os métodos para misturar componentes incluem moagem física, o uso de péletes em formulações sólidas e de suspensão e mistura em um adesivo transdérmico, como conhecido pelos peritos na técnica.

ADMINISTRAÇÃO/DOSAGEM

[0113] O regime de administração pode afetar o que constitui uma quantidade eficaz. As formulações terapêuticas podem ser administradas ao paciente antes ou após o início de uma doença ou distúrbio. Além disso, várias dosagens divididas, bem como dosagens escalonadas, podem ser administradas diariamente ou sequencialmente, ou a dose pode ser infundida continuamente ou pode ser uma injeção em bólus. Além disso, as dosagens das formulações terapêuticas podem ser aumentadas ou diminuídas proporcionalmente, conforme indicado pelas exigências da situação terapêutica ou profilática.

[0114] A administração das composições da presente invenção a um paciente, tal como um mamífero, tal como um humano, pode ser realizada usando procedimentos conhecidos, em dosagens e por períodos de tempo eficazes para tratar uma doença ou distúrbio aqui contemplado. Uma quantidade eficaz do composto terapêutico necessária para atingir um efeito terapêutico pode variar de acordo com fatores tais como a atividade do composto particular aplicado; o tempo de administração; a taxa de excreção do composto; a duração do tratamento; outros fármacos, compostos ou materiais usados em combinação com o composto; o estado da doença ou distúrbio, idade, sexo, peso, condição, saúde geral e histórico médico anterior do paciente a ser tratado e fatores semelhantes bem conhecidos nas técnicas médicas. Os regimes de dosagem podem ser ajustados para fornecer a resposta terapêutica ideal. Por exemplo, várias doses divididas podem ser administradas diariamente ou a dose pode ser reduzida proporcionalmente conforme indicado pelas exigências da situação terapêutica. Um exemplo não limitativo de um intervalo de dose eficaz para um composto terapêutico da invenção é de cerca de 0,01 mg/kg a 100 mg/kg de peso corporal/por dia. Um perito na técnica seria capaz de estudar os fatores relevantes e fazer a determinação em relação à quantidade eficaz do composto terapêutico sem experimentação indevida.

[0115] O composto pode ser administrado a um animal tão frequentemente quanto várias vezes ao dia, ou pode ser administrado com menos frequência, tal como uma vez por dia, uma vez por semana, uma vez a cada duas semanas, uma vez por mês, ou ainda menos frequentemente, tal como uma vez a cada vários meses ou mesmo uma vez por ano ou menos. Se entende que a quantidade de composto doseada por dia pode ser administrada, em exemplos não limitativos, todos os dias, em dias alternados, a cada 2 dias, a cada 3 dias, a cada 4 dias ou a cada 5 dias. Por exemplo, com a administração em dias alternados, uma dose de 5 mg por dia pode ser iniciada na segunda- feira com uma primeira dose subsequente de 5 mg por dia administrada na quarta-feira, uma segunda dose subsequente de 5 mg por dia administrada na sexta-feira e assim por diante. A frequência da dose é prontamente aparente para o perito na técnica e depende de uma série de fatores, tais como, mas não se limitando a, tipo e gravidade da doença a ser tratada, e tipo e idade do animal.

[0116] Os níveis de dosagem reais dos ingredientes ativos nas composições farmacêuticas desta invenção podem ser variados com a finalidade de obter uma quantidade do ingrediente ativo que é eficaz para alcançar a resposta terapêutica desejada para um paciente, composição e modo de administração particular, sem que seja tóxico para o paciente.

[0117] Um médico, por exemplo, um médico ou veterinário com conhecimentos correntes na técnica pode prontamente determinar e prescrever a quantidade eficaz da composição farmacêutica necessária. Por exemplo, o médico ou veterinário poderia começar com doses dos compostos da invenção empregados na composição farmacêutica a níveis mais baixos do que o requerido, a fim de alcançar o efeito terapêutico desejado e aumentar gradualmente a dosagem até que o efeito desejado seja alcançado.

[0118] Em modalidades particulares, é especialmente vantajoso formular o composto na forma de dosagem unitária para facilidade de administração e uniformidade de dosagem. A “forma de dosagem unitária” conforme usada neste documento, se refere a unidades fisicamente discretas, adequadas como dosagens unitárias para o paciente a ser tratado; em que cada unidade contendo uma quantidade predeterminada de composto terapêutico calculada de forma a produzir o efeito terapêutico desejado em associação com o veículo farmacêutico requerido. As formas de dosagem unitária da invenção são ditadas por e diretamente dependentes de (a) as características únicas do composto terapêutico e o efeito terapêutico particular a ser alcançado, e (b) as limitações inerentes à técnica de composição/formulação de tal composto terapêutico para o tratamento de uma doença ou distúrbio em um paciente.

[0119] Em certas modalidades, as composições da invenção são administradas ao paciente em dosagens que variam de uma a cinco vezes por dia ou mais. Em outras modalidades, as composições da invenção são administradas ao paciente em um intervalo de dosagens que incluem, mas não estão limitadas a, uma vez por dia, a cada dois dias, a cada três dias a uma vez por semana e uma vez a cada duas semanas. Será prontamente aparente para um perito na técnica que a frequência de administração das várias composições de combinação da invenção irá variar de sujeito para sujeito, dependendo de muitos fatores, incluindo, mas não se limitando a, idade, doença ou distúrbio a ser tratado, gênero, saúde geral e outros fatores. Assim, a invenção não deve ser interpretada como limitada a qualquer regime de dosagem particular e a dosagem e composição precisas a serem administradas a qualquer paciente serão determinadas pelo médico assistente, levando em consideração todos os outros fatores sobre o paciente.

[0120] Os compostos da invenção para administração podem estar no intervalo de cerca de 1 µg a cerca de 7.500 mg, cerca de 20 µg a cerca de

7.000 mg, cerca de 40 µg a cerca de 6.500 mg, cerca de 80 µg a cerca de 6.000 mg, cerca de 100 µg a cerca de 5.500 mg, cerca de 200 µg a cerca de 5.000 mg, cerca de 400 µg a cerca de 4.000 mg, cerca de 800 µg a cerca de 3.000 mg, cerca de 1 mg a cerca de 2.500 mg, cerca de 2 mg a cerca de 2.000 mg, cerca de 5 mg a cerca de 1.000 mg, cerca de 10 mg a cerca de 750 mg, cerca de 20 mg a cerca de 600 mg, cerca de 30 mg a cerca de 500 mg, cerca de 40 mg a cerca de 400 mg, cerca de 50 mg a cerca de 300 mg, cerca de 60 mg a cerca de 250 mg, cerca de 70 mg a cerca de 200 mg, cerca de 80 mg a cerca de 150 mg e todo e qualquer incremento total ou parcial entre eles.

[0121] Em algumas modalidades, a dose de um composto da invenção é de cerca de 0,5 µg e cerca de 5.000 mg. Em algumas modalidades, uma dose de um composto da invenção usado nas composições aqui descritas é inferior a cerca de 5.000 mg, ou inferior a cerca de 4.000 mg, ou inferior a cerca de 3.000 mg, ou inferior a cerca de 2.000 mg, ou inferior a cerca de 1.000 mg, ou menos que cerca de 800 mg, ou menos que cerca de 600 mg, ou menos que cerca de 500 mg, ou menos que cerca de 200 mg, ou menos que cerca de 50 mg. Da mesma forma, em algumas modalidades, uma dose de um segundo composto como aqui descrito é inferior a cerca de 1.000 mg, ou inferior a cerca de 800 mg, ou inferior a cerca de 600 mg, ou inferior a cerca de 500 mg, ou inferior a cerca de 400 mg, ou inferior a cerca de 300 mg, ou inferior a cerca de 200 mg, ou inferior a cerca de 100 mg, ou inferior a cerca de 50 mg, ou inferior a cerca de 40 mg, ou inferior a cerca de 30 mg, ou inferior a cerca de 25 mg, ou inferior a cerca de 20 mg, ou inferior a cerca de 15 mg, ou inferior a cerca de 10 mg, ou inferior a cerca de 5 mg, ou inferior a cerca de 2 mg, ou inferior a cerca de 1 mg, ou inferior a cerca de 0,5 mg e qualquer e todos os seus incrementos totais ou parciais.

[0122] Em certas modalidades, a presente invenção é direcionada a uma composição farmacêutica embalada que compreende um recipiente contendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, sozinho ou em combinação com um segundo agente farmacêutico; e instruções para usar o composto para tratar, prevenir ou reduzir um ou mais sintomas de uma doença ou distúrbio em um paciente.

[0123] O termo "recipiente” inclui qualquer receptáculo para conter a composição farmacêutica ou para controlar a estabilidade ou absorção de água. Por exemplo, em certas modalidades, o recipiente é a embalagem que contém a composição farmacêutica, tal como líquido (solução e suspensão), semissólido, sólido liofilizado, solução e pó ou formulação liofilizada presente em câmaras duplas. Em outras modalidades, o recipiente não é a embalagem que contém a composição farmacêutica, ou seja, o recipiente é um receptáculo, tal como uma caixa ou frasco que contém a composição farmacêutica embalada ou a composição farmacêutica não embalada e as instruções de uso da composição farmacêutica. Além disso, as técnicas de embalagem são bem conhecidas na técnica. Deve ser entendido que as instruções de uso da composição farmacêutica podem estar contidas na embalagem que contém a composição farmacêutica e, como tal, as instruções formam uma relação funcional aumentada com o produto embalado. No entanto, deve se entender que as instruções pode conter informações referentes à capacidade do composto para desempenhar a sua função pretendida, por exemplo, o tratamento, prevenção, ou redução de uma doença ou distúrbio num paciente.

ADMINISTRAÇÃO

[0124] As vias de administração de qualquer uma das composições da invenção incluem administração inalatória, oral, nasal, retal, parenteral, sublingual, transdérmica, transmucosa (por exemplo, sublingual, lingual, (trans)bucal, (trans)uretral, vaginal (por exemplo, trans- e perivaginalmente), (intra)nasal e (trans)retal), intravesical, intrapulmonar, intraduodenal, intragástrica, intratecal, epidural, intrapleural, intraperitoneal, subcutânea, intramuscular, intradérmica, intra-arterial, intravenosa, intrabrônquica, inalatória e tópica.

[0125] As composições e formas de dosagem adequadas incluem, por exemplo, comprimidos, cápsulas, comprimidos ovais, pílulas, cápsulas de gel, pastilhas, emulsões, dispersões, suspensões, soluções, xaropes, grânulos, esferas, adesivos transdérmicos, géis, pós, péletes, magmas, drágeas, cremes, pastas, emplastros, loções, discos, supositórios, aerossóis líquidos para administração nasal ou oral, pó seco ou formulações em aerossol para inalação, composições e formulações para administração intravesical e semelhantes.

Deve ser entendido que as formulações e composições que seriam úteis na presente invenção não estão limitadas às formulações e composições particulares que são aqui descritas.

ADMINISTRAÇÃO ORAL

[0126] Para aplicação oral, são particularmente adequados os comprimidos, drágeas, líquidos, gotas, cápsulas, comprimidos ovais e cápsulas de gel. Outras formulações adequadas para administração oral incluem, mas não estão limitadas a, uma formulação em pó ou granular, uma suspensão aquosa ou oleosa, uma solução aquosa ou oleosa, uma pasta, um gel, pasta de dentes,

um enxaguante bucal, um revestimento, um elixir bucal ou uma emulsão. As composições destinadas ao uso oral podem ser preparadas de acordo com qualquer método conhecido na técnica e tais composições podem conter um ou mais agentes selecionados do grupo que consiste em excipientes farmaceuticamente inertes, não tóxicos, geralmente reconhecidos como seguros (GRAS) que são adequados para a fabricação de comprimidos. Esses excipientes incluem, por exemplo, um diluente inerte tal como a lactose; agentes de granulação e desintegração tais como amido de milho; agentes de ligação, tais como amido; e agentes lubrificantes, tais como estearato de magnésio.

[0127] Os comprimidos podem ser não revestidos ou podem ser revestidos usando métodos conhecidos para alcançar a desintegração retardada no trato gastrointestinal de um sujeito, proporcionando assim a liberação sustentada e a absorção do ingrediente ativo. A título de exemplo, um material tal como monoestearato de glicerila ou diestearato de glicerila pode ser usado para revestir comprimidos. Além disso, a título de exemplo, os comprimidos podem ser revestidos usando métodos descritos nas Patentes dos EUA n.os 4,256,108; 4,160,452; e 4,265,874 para formar comprimidos de liberação osmoticamente controlada. Os comprimidos podem ainda compreender um agente edulcorante, um agente aromatizante, um agente corante, um conservante ou alguma combinação destes a fim de proporcionar uma preparação farmaceuticamente elegante e saborosa. As cápsulas duras compreendendo o ingrediente ativo podem ser feitas usando uma composição fisiologicamente degradável, tal como a gelatina. As cápsulas compreendem o ingrediente ativo e podem compreender ainda ingredientes adicionais incluindo, por exemplo, um diluente sólido inerte, tal como carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou caulina.

ADMINISTRAÇÃO PARENTERAL

[0128] Tal como aqui utilizado, "administração parentérica” de uma composição farmacêutica inclui qualquer via de administração caracterizada por rompimento físico de um tecido de um sujeito e administração da composição farmacêutica através do rompimento no tecido. A administração parenteral, portanto, inclui, mas não está limitada a, administração de uma composição farmacêutica por injeção da composição, pela aplicação da composição através de uma incisão cirúrgica, pela aplicação da composição através de uma ferida não cirúrgica que penetra no tecido e semelhantes. Em particular, a administração parenteral é contemplada para incluir, mas não está limitada a técnicas de infusão dialítica subcutânea, intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, intraesternal e renal.

[0129] As formulações de uma composição farmacêutica adequada para administração parentérica compreendem o ingrediente ativo combinado com um transportador farmaceuticamente aceitável, tal como água esterilizada ou solução salina isotônica esterilizada. Tais formulações podem ser preparadas, embaladas ou vendidas em uma forma adequada para administração em bólus ou para administração contínua. As formulações injetáveis podem ser preparadas, embaladas ou vendidas na forma de dosagem unitária, tal como em ampolas ou em recipientes multidose contendo um conservante. As formulações injetáveis também podem ser preparadas, embaladas ou vendidas em dispositivos, tais como dispositivos de analgesia controlada pelo paciente (PCA). As formulações para administração parenteral incluem, mas não estão limitadas a, suspensões, soluções, emulsões em veículos oleosos ou aquosos, pastas e formulações implantáveis de liberação sustentada ou biodegradáveis. Essas formulações podem compreender ainda um ou mais ingredientes adicionais, incluindo, mas não se limitando a, agentes de suspensão, estabilização ou dispersão. Em uma modalidade de uma formulação para administração parentérica, o ingrediente ativo é proporcionado na forma seca (isto é, em pó ou granular) para reconstituição com um veículo adequado (por exemplo. pirogênio isento de água esterilizado) antes da administração parentérica da composição reconstituída.

[0130] As composições farmacêuticas podem ser preparadas, embaladas ou vendidas na forma de uma suspensão ou solução aquosa ou oleosa injetável esterilizada. Esta suspensão ou solução pode ser formulada de acordo com a técnica conhecida e pode compreender, além do ingrediente ativo, ingredientes adicionais, tais como os agentes dispersantes, agentes umectantes ou agentes de suspensão aqui descritos. Tais formulações injetáveis estéreis podem ser preparadas usando um diluente ou solvente não tóxico parentericamente aceitável, tal como água ou 1,3-butanodiol, por exemplo.

Outros diluentes e solventes aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, solução de Ringer, solução isotônica de cloreto de sódio e óleos fixos, tais como mono ou diglicerídeos sintéticos. Outras formulações administráveis por via parenteral que são úteis incluem aquelas que compreendem o ingrediente ativo na forma microcristalina em uma albumina humana recombinante, uma gelatina fluidizada, em uma preparação lipossomal ou como um componente de um sistema de polímero biodegradável. As composições para liberação sustentada ou implantação podem compreender materiais poliméricos ou hidrofóbicos farmaceuticamente aceitáveis, tal como uma emulsão, uma resina de troca iônica, um polímero moderadamente solúvel ou um sal moderadamente solúvel.

ADMINISTRAÇÃO TÓPICA

[0131] Um obstáculo para a administração tópica de fármacos é a camada do estrato córneo da epiderme. O estrato córneo é uma camada altamente resistente composta por proteínas, colesterol, esfingolipídeos, ácidos graxos livres e vários outros lipídeos e inclui células cornificadas e vivas. Um dos fatores que limitam a taxa de penetração (fluxo) de um composto através do estrato córneo é a quantidade da substância ativa que pode ser carregada ou aplicada na superfície da pele. Quanto maior a quantidade de substância ativa aplicada por unidade de área da pele, maior será o gradiente de concentração entre a superfície da pele e as camadas inferiores da pele e, por sua vez, maior será a força de difusão da substância ativa através da pele. Portanto, uma formulação contendo uma concentração maior da substância ativa tem mais probabilidade de resultar na penetração da substância ativa através da pele, e mais dela, e em uma taxa mais consistente, do que uma formulação com uma concentração menor, todas as outras coisas sendo igual.

[0132] As formulações adequadas para administração tópica incluem, mas não estão limitados a, preparações líquidas ou semilíquidas, tais como linimentos, loções, emulsões óleo-em-água ou emulsões água-em-óleo, tais como cremes, pomadas ou pastas, e as soluções ou suspensões. As formulações administráveis topicamente podem, por exemplo, compreender de cerca de 1% a cerca de 10% (p/p) de ingrediente ativo, embora a concentração do ingrediente ativo possa ser tão alta quanto o limite de solubilidade do ingrediente ativo no solvente. As formulações para administração tópica podem compreender ainda um ou mais dos ingredientes adicionais aqui descritos.

[0133] Podem ser usados potencializadores de permeação. Estes materiais aumentam a taxa de penetração dos fármacos na pele.

Potencializadores típicos na técnica incluem etanol, monolaurato de glicerol, PGML (monolaurato de polietilenoglicol), dimetilsulfóxido e semelhantes. Outros potencializadores incluem ácido oleico, álcool oleílico, etoxidiglicol, laurocapram, ácidos alcanocarboxílicos, dimetilsulfóxido, lipídeos polares ou N-metil-2- pirrolidona.

[0134] Um veículo aceitável para entrega tópica de algumas das composições da invenção pode conter lipossomos. A composição dos lipossomos e a sua utilização são conhecidas na técnica (ou seja, Patente US Nº 6,323,219). Em modalidades alternativas, a composição farmacêutica topicamente ativa pode ser opcionalmente combinada com outros ingredientes, tais como adjuvantes, antioxidantes, agentes quelantes, tensoativos, agentes espumantes, agentes umectantes, agentes emulsificantes, viscosificantes, agentes tamponantes, conservantes e semelhantes. Em outras modalidades, um potencializador de permeação ou penetração é incluído na composição e é eficaz para melhorar a penetração percutânea do ingrediente ativo no e através do estrato córneo em relação a uma composição sem o potencializador de permeação. Vários potencializadores de permeação, incluindo ácido oleico, álcool oleílico, etoxidiglicol, laurocapram, ácidos alcanocarboxílicos, dimetilsulfóxido, lipídeos polares ou N-metil-2-pirrolidona, são conhecidos pelos peritos na técnica. Em outro aspecto, a composição pode compreender ainda um agente hidrotrópico, que funciona para aumentar a desordem na estrutura do estrato córneo e, assim, permite um transporte aumentado através do estrato córneo. Vários agentes hidrotrópicos, tais como álcool isopropílico, propilenoglicol ou xilenossulfonato de sódio, são conhecidos pelos peritos na técnica.

[0135] A composição farmacêutica topicamente ativa deve ser aplicada em uma quantidade eficaz para afetar as alterações desejadas. Como usado aqui, "quantidade eficaz” deve significar uma quantidade suficiente para cobrir a região da superfície da pele onde uma mudança é desejada. Um composto ativo deve estar presente na quantidade de cerca de 0,0001% a cerca de 15% em peso do volume da composição. Por exemplo, deve estar presente em uma quantidade de cerca de 0,0005% a cerca de 5% da composição; por exemplo, deve estar presente em uma quantidade de cerca de 0,001% a cerca de 1% da composição. Esses compostos podem ser derivados sinteticamente ou naturalmente.

ADMINISTRAÇÃO BUCAL

[0136] Uma composição farmacêutica da invenção pode ser preparada, embalada ou vendida em uma formulação adequada para administração bucal. Tais formulações podem, por exemplo, estar na forma de comprimidos ou drágeas feitas usando métodos convencionais e podem conter, por exemplo, 0,1 a 20% (p/p) do ingrediente ativo, o equilíbrio compreendendo uma composição oralmente dissolvível ou degradável e, opcionalmente, um ou mais dos ingredientes adicionais aqui descritos. Alternativamente, as formulações adequadas para administração bucal podem compreender um pó ou uma solução ou suspensão em aerossol ou atomizada compreendendo o ingrediente ativo. Essas formulações em pó, ou aerossol, quando dispersas, podem ter um tamanho médio de partícula ou gota no intervalo de cerca de 0,1 a cerca de 200 nanômetros e podem compreender ainda um ou mais dos ingredientes adicionais aqui descritos. Os exemplos de formulações aqui descritos não são exaustivos e se entende que a invenção inclui modificações adicionais destas e de outras formulações não descritas aqui, mas que são conhecidas dos peritos na técnica.

ADMINISTRAÇÃO RETAL

[0137] Uma composição farmacêutica da invenção pode ser preparada, embalada ou vendida em uma formulação adequada para administração retal. Tal composição pode estar na forma de, por exemplo, um supositório, uma preparação de enema de retenção e uma solução para irrigação retal ou colônica.

[0138] As formulações em supositório podem ser feitas combinando o ingrediente ativo com um excipiente não-irritante farmaceuticamente aceitável, que é sólido à temperatura ambiente normal (ou seja. cerca de 20 °C) e que é líquido à temperatura retal do sujeito (isto é, cerca de 37 °C em um ser humano saudável). Excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem, mas não estão lim itados a, manteiga de cacau, polietilenoglicóis e vários glicerídeos. As formulações de supositórios podem compreender ainda vários ingredientes adicionais, incluindo, mas não se limitando a, antioxidantes e conservantes.

[0139] As preparações de enema de retenção ou soluções para irrigação retal ou do cólon podem ser feitas combinando o ingrediente ativo com um transportador líquido farmaceuticamente aceitável. Como é bem conhecido na técnica, as preparações de enema podem ser administradas usando, e podem ser embaladas dentro, um dispositivo de distribuição adaptado à anatomia retal do sujeito. As preparações de enema podem compreender ainda vários ingredientes adicionais, incluindo, mas não se limitando a, antioxidantes e conservantes.

FORMAS ADICIONAIS DE ADMINISTRAÇÃO

[0140] As formas de dosagem adicionais desta invenção incluem as formas de dosagem como descritas nas Patentes dos EUA n. os 6,340,475, 6,488,962, 6,451,808, 5,972,389, 5,582,837 e 5,007,790. As formas de dosagem adicionais desta invenção também incluem as formas de dosagem como descritas nos Pedidos de Patente dos EUA n. os 20,030,147,952, 20,030,104,062, 20,030,104,053, 20,030,044,466, 20,030,039,688 e 20,020,051,820. As formas de dosagem adicionais desta invenção também incluem as formas de dosagem descritas nos Pedidos PCT n. os WO 03/35041, WO 03/35040, WO 03/35029, WO 03/35177, WO 03/35039, WO 02/96404, WO 02/32416, WO 01/97783, WO 01/56544, WO 01/32217, WO 98/55107, WO 98/11879, WO 97/47285, WO 93/18755 e WO 90/11757.

FORMULAÇÕES DE LIBERAÇÃO CONTROLADA E SISTEMAS DE ENTREGA DE FÁRMACOS

[0141] Em certas modalidades, as composições e/ou formulações da presente invenção podem ser, mas não estão limitadas a, curto prazo, rápido deslocamento, bem como controladas, por exemplo, formulações de liberação sustentada, liberação retardada e liberação pulsátil.

[0142] O termo "liberação sustentada” é usado em seu sentido convencional para se referir a uma formulação de fármaco que proporciona a liberação gradual de um medicamento ao longo de um período de tempo prolongado, e que pode, embora não necessariamente, resultar em níveis substancialmente constantes de um fármaco no sangue durante um longo período de tempo. O período de tempo pode ser tão longo quanto um mês ou mais e deve ser uma liberação que seja mais longa do que a mesma quantidade de agente administrado em bólus.

[0143] Para liberação sustentada, os compostos podem ser formulados com um polímero adequado ou material hidrofóbico que proporcione propriedades de liberação sustentada aos compostos. Como tal, os compostos para usar o método da invenção podem ser administrados na forma de micropartículas, por exemplo, por injeção ou na forma de bolachas ou discos por implantação.

[0144] Em certas modalidades da invenção, os compostos úteis na invenção são administrados a um sujeito, sozinhos ou em combinação com outro agente farmacêutico, utilizando uma formulação de liberação sustentada.

[0145] O termo "liberação retardada” é usado neste documento no seu sentido convencional para se referir a uma formulação de fármaco que proporciona uma liberação inicial do medicamento após algum atraso após a administração do medicamento e que pode, embora não necessariamente, incluir um atraso de cerca de 10 minutos até cerca de 12 horas.

[0146] O termo "liberação pulsátil” é aqui utilizado no seu sentido convencional para referir uma formulação de medicamento que proporciona a liberação do fármaco de forma a produzir perfis de plasma pulsado do fármaco após a administração do fármaco.

[0147] O termo "liberação imediata” é usado em seu sentido convencional para se referir a uma formulação de fármaco que proporciona a liberação do fármaco imediatamente após a administração do fármaco.

[0148] Tal como aqui utilizado, "curto prazo” se refere a qualquer período de tempo até e incluindo cerca de 8 horas, cerca de 7 horas, cerca de 6 horas, cerca de 5 horas, cerca de 4 horas, cerca de 3 horas, cerca de 2 horas, cerca de 1 hora. cerca de 40 minutos, cerca de 20 minutos ou cerca de 10 minutos e qualquer ou todos os seus incrementos totais ou parciais após a administração do fármaco após a administração do fármaco.

[0149] Tal como aqui utilizado, "deslocamento rápido” se refere a qualquer período de tempo até e incluindo cerca de 8 horas, cerca de 7 horas, cerca de 6 horas, cerca de 5 horas, cerca de 4 horas, cerca de 3 horas, cerca de 2 horas, cerca de 1 hora. cerca de 40 minutos, cerca de 20 minutos ou cerca de 10 minutos, e todos e quaisquer incrementos totais ou parciais dos mesmos após a administração do fármaco.

[0150] Os peritos na técnica reconhecerão, ou serão capazes de determinar usando não mais do que experimentação de rotina, numerosos equivalentes aos procedimentos, modalidades, reivindicações e exemplos específicos descritos neste documento. Esses equivalentes foram considerados como estando dentro do escopo desta invenção e abrangidos pelas reivindicações anexas. Por exemplo, deve ser entendido que modificações nas condições de reação, incluindo, mas não se limitando a, tempos de reação, tamanho/volume da reação e reagentes experimentais, tais como solventes, catalisadores, pressões, condições atmosféricas, por exemplo, atmosfera de nitrogênio e agentes de redução/oxidantes, com alternativas reconhecidas na técnica e usando não mais do que experimentação de rotina, estão dentro do escopo do presente pedido.

[0151] Deve ser entendido que, sempre que valores e intervalos são fornecidos neste documento, a descrição em formato de intervalo é meramente por conveniência e brevidade e não deve ser interpretada como uma limitação inflexível no escopo da invenção. Consequentemente, todos os valores e intervalos abrangidos por estes valores e intervalos devem ser abrangidos pelo escopo da presente invenção. Além disso, todos os valores que caem dentro desses intervalos, bem como os limites superior ou inferior de um intervalo de valores, também são contemplados pelo presente pedido.

A descrição de um intervalo deve ser considerada como tendo divulgado especificamente todos os subintervalos possíveis, bem como valores numéricos individuais dentro desse intervalo e, quando apropriado, números inteiros parciais dos valores numéricos dentro dos intervalos. Por exemplo, a descrição de um intervalo de 1 a 6 deve ser considerada como tendo subintervalos especificamente divulgados, como de 1 a 3, de 1 a 4, de 1 a 5, de 2 a 4, de 2 a 6, a de 3 para 6 etc., bem como números individuais dentro desse intervalo, por exemplo, 1, 2, 2,7, 3, 4, 5, 5,3 e 6. Isso se aplica independentemente da amplitude do intervalo.

[0152] Os seguintes exemplos ilustram ainda aspectos da presente invenção. No entanto, eles não são de forma alguma uma limitação dos ensinamentos ou divulgação da presente invenção conforme estabelecido neste documento.

E XEMPLOS

[0153] A invenção é agora descrita com referência aos seguintes Exemplos. Estes Exemplos são fornecidos apenas com o propósito de ilustração, e a invenção não está limitada a estes Exemplos, mas sim abrange todas as variações que são evidentes como resultado dos ensinamentos fornecidos neste documento.

Esquema 4 Exemplo 1: Ácido (R)-2-(3-hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5- dimetil-4,5-di-hidro-tiazol-4-carboxílico (4) e sal cloridrato correspondente (4a) (a) Oxazolo[4,5-b]piridina-2-tiol (2)

[0154] Uma mistura de 2-amino-piridin-3-ol (1) (2,00 g, 18,16 mmol) e etila xantato de potássio (2,91 g, 18,16 mmol) em etanol (40 mL) foi aquecida sob refluxo durante 24 h. O solvente foi removido em vácuo e foi adicionada água (30 mL). A mistura foi acidificada com AcOH até pH 5. O precipitado resultante foi filtrado, lavado com água (20 mL) e seco para dar oxazolo[4,5-b]piridina-2-tiol (2) (2,05 g, rendimento de 74%). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 8,21 (dd, J=5,2, 1,3 Hz, 1H) 7,85 (dd, J=8,1, 1,3 Hz, 1H) 7,25 (dd, J=8,1, 5,2 Hz, 1H).

(b) Cloridrato de 2-cloro-oxazolo[4,5-b]piridina (3)

[0155] Uma mistura de oxazolo[4,5-b]piridina-2-tiol (2) (500 mg, 3,29 mmol), cloreto de tionila (7 mL) e uma quantidade catalítica de DMF (25 μL) foi agitada à temperatura ambiente por 4h. Os voláteis foram então removidos em vácuo. O resíduo foi coevaporado com tolueno (3 x 20 mL) para dar o cloridrato de 2-cloro-oxazolo[4,5-b]piridina em bruto (3) (620 mg, rendimento quantitativo), que foi usado na próxima etapa sem purificação. 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 9,8-8,8 (s l, 1H) 8,02 (dd, J=5,3, 1,3 Hz, 1H) 7,63 (dd, J=7,9, 1,3 Hz, 1H) 7,10 (dd, J=7,9, 5,3 Hz, 1H).

(c) Ácido (R)-2-(3-hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidro-tiazol-4- carboxílico (4)

[0156] Uma solução de cloridrato de 2-cloro-oxazolo[4,5-b]piridina (3) (346 mg, 1,81 mmol), L-penicilamina (300 mg, 2,01 mmol) e DIPEA (1,74 mL, 10,05 mmol) em THF/MeOH (4/12 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. O solvente foi removido em vácuo. O resíduo foi suspenso em água (100 mL) e acidificado a pH 3 com solução de KHSO4 a 5%. O precipitado resultante foi filtrado, lavado com água (100 mL) e éter dietílico (150 mL) para dar ácido (R)-2-(3-hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidro-tiazol-4- carboxílico (4) (300 mg, rendimento de 62%) como um sólido esbranquiçado.

300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 11,0–8,5 (s l, 1H) 7,70 (dd, J=4,8, 1,4 Hz, 1H) 7,06 (dd, J=7,8, 1,4 Hz, 1H) 6,83 (dd, J=7,8, 4,8 Hz, 1H) 4,22 (1H, s) 1,60 (3H, s) 1,37 (3H, s). ESI-MS (m/z): 268 [M+H]+. [𝛼𝐷20 ]: -129,3 (0,26, metanol).

(d) Cloridrato do ácido (R)-2-(3-hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidro-tiazol-4-carboxílico (4a)

[0157] Ácido (R)-2- (3-hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5- dihidro-tiazol-4-carboxílico (4) (300 mg, 1,12 mmol) foi dissolvido em metanol (3 mL) e HCl 4N em 1,4-dioxano (280 µL, 1,12 mmol, 1 eq) foi adicionado a 0 ºC. A mistura foi agitada durante 30 min, após o qual os voláteis foram removidos em vácuo para dar cloridrato de ácido (R)-2-(3- hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidro-tiazol-4-carboxílico (4a) (320 mg, 94% de rendimento) como um sólido branco. 400 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 12,8-11,2 (m, 2H) 10,5-9,5 (s l, 1H) 7,86 (d, J=4,1 Hz, 1H)

7,53-7,41 (m, 1H) 7,24-7,14 (m, 1H) 4,72 (s, 1H) 1,71 (s, 3H) 1,50 (s, 3H).

ESI-MS (m/z): 268 [M+H] +.

Exemplo 2: Ácido (S)-2-(3-hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5- dimetil-4,5-di-hidro-tiazol-4-carboxílico (5) e sal cloridrato correspondente (5a) (a) ácido (S)-2-(3-hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidro-tiazol- 4-carboxílico (5)

[0158] D-Penicilamina (80 mg, 0,54 mmol) foi reagida com cloridrato de 2-cloro-oxazolo[4,5-b]piridina (3) usando o procedimento descrito para o composto (4). O produto foi purificado por cromatografia flash de fase inversa utilizando uma eluição gradiente de H 2O para H 2O/MeCN (40:60) para dar ácido (R)-2-(3-hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidro-tiazol-4-carboxílico (5) (75 mg, 52% de rendimento) como um sólido esbranquiçado. 300 MHz 1H-RMN (CD 3OD, ppm): 7,96-7,82 (m, 1H) 7,38- 7,25 (m, 1H) 7,21-7,08 (m, 1H) 4,66 (s, 1H) 1,83 (s, 3H) 1,62 (s, 3H). ESI- MS (m/z): 268 [M+H] +. [𝛼𝐷20 ]: +137,1 (0,28, metanol).

(b) Cloridrato do ácido (S)-2-(3-hidroxi-piridin-2-ilamino)- 5,5-dimetil-4,5-di-hidro-tiazol-4-carboxílico (5a)

[0159] Ácido (S)-2-(3-hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5- di-hidro-tiazol-4-carboxílico (5) (70 mg, 0,26 mmol) foi tratado com 4N HCl em 1,4-dioxano em metanol dietílico usando o procedimento descrito para o composto (4a) para produzir cloridrato de ácido (S)-2-(3-hidroxi-piridin-2- ilamino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidro-tiazol-4-carboxílico (5a) (60 mg, 75% de rendimento) como um sólido esbranquiçado. 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 10,8-8,6 (s l, 1H) 7,77-7,64 (m, 1H) 7,11-7,01 (m, 1H) 6,83 (dd, J=7,8, 4,6 Hz, 1H) 4,22 (s, 1H) 1,61 (s, 3H) 1,38 (s, 3H). ESI-MS (m/z): 268 [M+H] +.

Esquema 5 Exemplo 3: Cloridrato de ácido (R)-2-((3-hidroxipiridin-2-il)amino)-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (7) e sal cloridrato correspondente (7a) (a) N-(oxazolo[4,5-b]piridin-2-il)-S-tritil-L-cisteína (L-6)

[0160] Uma solução de cloridrato de 2-cloro-oxazolo[4,5-b]piridina (3) (309 mg, 1,62 mmol), S-tritil-L-cisteína (590 mg, 1,62 mmol) e DIPEA (786 µL, 4,55 mmol) em THF/MeOH (4/10 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 20 h. Após este tempo, o solvente foi removido em vácuo. O resíduo restante foi suspenso em água (30 mL), acidificado a pH 3 com solução de KHSO4 a 5% e extraído com CH2Cl2 (3 x 15 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (50 mL) e secados sobre sólido anidro de Na2SO4. Após filtração e concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash (sílica gel) usando eluente de CH2Cl2 para CH2Cl2/MeOH (30:70) para dar N-(benzo[d]oxazol-2-il)-S-tritil-L-cisteína (L-6) (120 mg, rendimento de 15%). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 8,2-8,0 (s l, 1H) 8,09

(dd, J=5,2, 1,4 Hz) 7,64 (dd, J=7,8, 1,4 Hz, 1H) 7,37-7,08 (m, 15H) 6,95 (dd, J=7,8, 5,2 Hz, 1H) 4,15-4,02 (m, 1H) 2,69-2,62 (m, 2H). ESI-MS (m/z): 482 [M+H]+.

(b) Ácido (R)-2-((3-hidroxipiridin-2-il)amino)-4,5-di-hidrotiazol-4-carboxílico e sal cloridrato correspondente (7)

[0161] A uma solução de N-(oxazolo[4,5-b]piridin-2-il)-S-tritil-L- cisteína (L-6) (75 mg, 0,16 mmol) em CH2Cl2 (15 mL) a 0 ºC, foi adicionado Et3SiH (82 µL, 0,51 mmol), seguido por TFA (120 µL, 1,56 mmol). A reação foi agitada durante 30 min e, em seguida, os voláteis foram removidos. O resíduo foi triturado com éter dietílico e ácido (R)-2-((3-hidroxipiridin-2-il) amino)-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico sólido (7) foi coletado por filtração e, em seguida, dissolvido em metanol e tratado com solução 2N HCl/Et 2O (70 µL 0,14 mmol).

Após remoção do volátil, o resíduo resultante foi purificado por cromatografia flash de fase inversa utilizando uma eluição gradiente de H2O para H2O/MeCN (40:60) para dar cloridrato do ácido (R)-2-((3-hidroxipiridin-2-il)amino)-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (7a) (22 mg, rendimento de 52%). 300 MHz 1H-RMN (CD3OD, ppm): 7,91 (dd, J=4,9, 1,4 Hz, 1H) 7,32 (dd, J=8,0, 1,4 Hz, 1H) 7,15 (dd, J=8,0, 4,9 Hz, 1H) 4,96 (dd, J=9,0, 5,6 Hz, 1H) 3,86 (dd, J=11,4, 9,0 Hz, 1H) 3,75 (dd, J=11,4, 5,6 Hz, 1H). ESI-MS (m/z): 240 [M+H]+.

Exemplo 4: Cloridrato de ácido (S)-2-((3-hidroxipiridin-2-il)amino)-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (8) e sal cloridrato correspondente (8a) (a) N-(oxazolo[4,5-b]piridin-2-yl)-S-tritil-D-cisteína (D-6)

[0162] S-tritil-D-cisteína (716 mg, 1,97 mmol) foi reagida com cloridrato de 2-cloro-oxazolo[4,5-b]piridina (3) e DIPEA usando o procedimento descrito para o composto L-6 para produzir N-(oxazolo[4,5-b]piridin-2-il)-S-tritil- D-cisteína (D-6) (370 mg, rendimento de 39%). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 8,09 (dd, J=5,2, 1,4 Hz) 8,05 (s l, 1H) 7,65 (dd, J=7,8, 1,4 Hz, 1H) 7,34- 7,12 (m, 15H) 6,95 (dd, J=7,8, 5,2 Hz, 1H) 4,17-4,02 (m, 1H) 2,70-2,61 (m, 2H).

ESI-MS (m/z): 482 [M+H]+.

(b) Ácido (S)-2-((3-hidroxipiridin-2-il)amino)-4,5-di-hidrotiazol-4-carboxílico (8) e sal cloridrato correspondente (8a)

[0163] N-(oxazolo[4,5-b]piridin-2-il)-S-tritil-D-cisteína (D-6) (360 mg, 0,75 mmol) foi reagido com TFA/Et3SiH para obter ácido (S)-2-((3- hidroxipiridin-2-il)amino)-4,5-di-hidrotiazol-4-carboxílico (8), depois tratado com solução de HCl/Et2O para produzir cloridrato do ácido (S)-2-((3-hidroxipiridin-2- il)amino)-4,5-di-hidrotiazol-4-carboxílico (8a) (60 mg, rendimento de 29%). 300 MHz 1H-RMN (CD3OD, ppm): 7,96-7,90 (m, 1H) 7,40-7,32 (m, 1H) 7,19 (dd, J = 8,1, 4,8 Hz, 1H) 5,25-5,11 (m, 1H) 4,00-3,89 (m, 1H), 3,79 (dd, J = 11,6, 4,8 Hz, 1H). ESI-MS (m/z): 240 [M+H]+.

Esquema 6 Exemplo 5: Cloridrato de ácido (R)-2-((4-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5- dimetil-4,5-di-hidrotiazol-4-carboxílico (12) e sal cloridrato correspondente (12a) (a) Oxazolo[4,5-c]piridina-2-tiol (10)

[0164] Uma mistura de 3-amino-4-hidroxipiridina (9) (780 mg, 7,08 mmol) e etila xantato de potássio (2,27 g, 14,17 mmol) em etanol (40 mL) foi aquecida em refluxo durante 24 h. O solvente foi removido em vácuo e foi adicionada água (30 mL). A mistura foi acidificada com AcOH até pH 5. O precipitado resultante foi filtrado, lavado com água (20 mL) e seco para fornecer oxazolo[4,5-c]piridina-2-tiol (10) (770 mg, rendimento de 71%). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 8,46 (s, 1H) 8,30 (d, J=6,0 Hz, 1H) 7,43 (d, J=6,0, 1H).

(b) Cloridrato de 2-cloro-oxazolo[4,5-c]piridina (11)

[0165] Uma mistura de oxazolo[4,5-c]piridina-2-tiol (10) (650 mg, 4,27 mmol), cloreto de sulfurila (8 mL), e uma quantidade catalítica de DMF (25 mL) foi agitada a 60 ºC durante 20 h. A mistura foi resfriada e os cristais resultantes foram filtrados, lavados com éter de petróleo (20 mL), éter dietílico (20 mL) e secos para dar cloridrato de 2-clorooxazolo[4,5-c]piridina (11) (660 mg, 99% rendimento), que foi usado na etapa seguinte sem purificação. 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 8,78 (s, 1H) 8,71 (d, J=6,4 Hz, 1H) 8,01 (d, J=6,4, 1H).

(c) Ácido (R)-2-((4-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico (12)

[0166] Um mistura de L-penicilamina (130 mg, 0,87 mmol), cloridrato de 2-clorooxazolo[4,5-c]piridina (11) (198 mg, 1,04 mmol), e Na2CO3 (554 mg, 5,23 mmol) em THF/MeOH (2/10 mL) foi agitado à temperatura ambiente durante 2 h. Os solventes foram então removidos em vácuo. O resíduo foi suspenso em água (100 mL) e acidificado a pH 3 com solução de KHSO 4 a 5%. A mistura foi purificada por cromatografia flash de fase inversa utilizando uma eluição gradiente de H2O para H2O/MeCN (40:60) para dar ácido (R)-2-((4- hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidrotiazol-4-carboxílico (12) (80 mg, rendimento de 34 %). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 11,41 (s l, 1H) 8,82- 8,69 (m, 1H) 7,61 (dd, J=7,0, 1,3 Hz, 1H) 6,19 (d, J=7,0, 1H) 4,49 (s, 1H) 1,62 (s, 1H) 1,38 (s, 1H). ESI-MS (m/z): 268 [M+H]+.

(d) Cloridrato de ácido (R)-2-((4-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (12a)

[0167] Ácido (R)-2-((4-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5- dihidrotiazol-4-carboxílico (12) (77 mg, 0,29 mmol) foi dissolvido em metanol (3 mL) e HCl 4N em 1,4-dioxano (79 mL, 0,32 mmol) foi adicionado a 0 ºC. A mistura foi agitada durante 30 min e, em seguida, os voláteis foram removidos em vácuo.

O resíduo foi tratado com CH2Cl2 e o precipitado resultante foi filtrado para dar cloridrato de ácido (R)-2-((4-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (12a) (82 mg, 94% de rendimento). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 8,35-8,20 (m, 1H) 8,03-7,96 (m, 1H) 6,80-6,72 (m, 1H) 4,60 (s, 1H) 1,70 (s, 3H) 1,48 (s, 3H). ESI-MS (m/z): 268 [M+H]+.

Esquema 7 Exemplo 6: Cloridrato de ácido (R)-2-((3-hidroxipiridin-4-il)amino)-5,5- dimetil-4,5-di-hidrotiazol-4-carboxílico (17) e sal cloridrato correspondente (17a) (a) Oxazolo[5,4-c]piridina-2-tiol (15)

[0168] 4-Aminopiridin-3-ol (14) (1,00 g, 9,08 mmol) foi reagido com etila xantato de potássio usando o procedimento descrito para o composto (10) para se obter oxazolo[5,4-c]piridina-2-tiol (15) (650 mg, rendimento de 47%). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 8,64-8,61 (m, 1H) 8,30 (d, J=6,1 Hz, 1H) 7,40 (dd, J=6,1, 0,5 Hz, 1H).

(b) Cloridrato de 2-cloro-oxazolo[5,4-c]piridina (16)

[0169] Uma mistura de oxazolo[5,4-c]piridina-2-tiol (15) (560 mg, 3,68 mmol), cloreto de tionila (12 mL) e uma quantidade catalítica de DMF (40 μL) foi agitada à temperatura ambiente por 2h. Os voláteis foram removidos em vácuo. O resíduo foi coevaporado com tolueno (3 x 20 mL), depois triturado com outra porção de tolueno (15 mL). O precipitado resultante foi filtrado para dar cloridrato de 2-clorooxazolo[5,4-c]piridina (16) (450 mg, rendimento de 64%).

400 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 9,00-8,99 (m, 1H) 8,61 (dd, J=6,3, 0,7 Hz, 1H) 7,68 (dd, J=6,3, 0,5 Hz, 1H).

(c) Ácido (R)-2-((3-hidroxipiridin-4-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico (17)

[0170] L-Penicilamina (240 mg, 1,61 mmol) foi reagida com cloridrato de 2-cloro-oxazolo[5,4-c]piridina (16) usando o procedimento descrito para o composto (12). O produto foi purificado por cromatografia flash de fase inversa utilizando uma eluição gradiente de H2O para H2O/MeCN (40:60) para dar ácido (R)-2-((3-hidroxipiridin-4-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico (17) (90 mg, rendimento de 26 %). ESI-MS (m/z): 268 [M+H]+.

(d) Cloridrato de ácido (R)-2-((3-hidroxipiridin-4-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (17a)

[0171] Ácido (R)-2-((3-hidroxipiridin-4-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (17) (85 mg, 0,32 mmol) foi tratado com HCl 4N/1,4- dioxano em metanol usando o procedimento descrito para o composto (12a) para produzir cloridrato de ácido (R)-2-((3-hidroxipiridin-4-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (17a) (88 mg, 91% de rendimento). 300 MHz 1H-RMN (D2O, ppm): 8,18 (d, J=1,0 Hz, 1H) 8,15 (dd, J=6,4, 1,0 Hz, 1H) 7,75 (d, J=6,4 Hz, 1H) 4,59 (s, 1H) 1,78 (s, 3H) 1,57 (s, 3H). ESI-MS (m/z): 268 [M+H]+.

Exemplo 7: Ácido (S)-2-((3-hidroxipiridin-4-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (18) e sal cloridrato correspondente (18a) (a) Ácido (S)-2-((3-hidroxipiridin-4-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico (18)

[0172] D-Penicilamina (280 mg, 1,88 mmol) foi reagida com cloridrato de 2-cloro-oxazolo[5,4-c]piridina (16) usando o procedimento descrito para o composto (17). O produto foi purificado por cromatografia flash de fase inversa utilizando uma eluição gradiente de H2O para H2O/MeCN (40:60) para dar ácido (S)-2-((3-hidroxipiridin-4-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico (18) (90 mg, rendimento de 25 %). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 8,03-8,01 (m, 1H) 7,87 (d, J=5,3 Hz, 1H) 7,41-7,20 (m, 1H) 4,44 (s, 1H) 1,64 (s, 3H) 1,41 (s, 1H). ESI-MS (m/z): 268 [M+H]+.

(b) Cloridrato de ácido (S)-2-((3-hidroxipiridin-4-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (18a)

[0173] Ácido (S)-2-((3-hidroxipiridin-4-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (18) (88 mg, 0,33 mmol) foi tratado com HCl 4N/1,4- dioxano em metanol usando o procedimento descrito para o composto (17) para produzir cloridrato de ácido (S)-2-((3-hidroxipiridin-4-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (18a) (92 mg, 92% de rendimento). 300 MHz 1H-RMN (D2O, ppm): 8,21-8,12 (m, 2H) 7,84 (d, J=6,4 Hz, 1H) 4,60 (s, 1H) 1,78 (s, 3H) 1,57 (s, 3H). ESI-MS (m/z): 268 [M+H]+.

Esquema 8

Exemplo 8: Ácido (R)-2-((2-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (22) e sal cloridrato correspondente (22a) (a) Cloridrato de 2-cloro-oxazolo[5,4-b]piridina (21)

[0174] Oxazolo[5,4-b]piridina-2-tiol (20) (1,60 g, 10,51 mmol) foi reagido com cloreto de tionila usando o procedimento descrito para o composto (16) para proporcionar cloridrato de 2-clorooxazolo[5,4-b]piridina (21) (1,60 g, rendimento de 80%). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 8,40 (dd, J=5,0, 1,6 Hz, 1H) 8,25 (dd, J=7,9, 1,6 Hz, 1H) 7,54 (dd, J=7,9, 5,0 Hz, 1H).

(b) Ácido (R)-2-((2-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico (22)

[0175] Uma solução de cloridrato de 2-cloro-oxazolo[5,4-b]piridina (21) (300 mg, 1,30 mmol), L-penicilamina (300 mg, 2,01 mmol) e DIPEA (1,74 mL, 10,05 mmol) em THF/MeOH (4/12 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Os solventes foram depois removidos em vácuo. O resíduo resultante foi suspenso em água (100 mL) e acidificado a pH 3 com solução de KHSO4 a 5%. O precipitado resultante foi filtrado e purificado por cromatografia flash de fase inversa utilizando uma eluição gradiente de H2O para H2O/MeCN (20:80) para dar ácido (R)-2-((2-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (22) (240 mg, rendimento de 69 %). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 11,77 (s l, 1H) 8,22-8,10 (m, 1H) 6,98 (dd, J=6,6, 1,7 Hz, 1H) 6,17 (dd, J=7,0, 6,7 Hz, 1H) 4,44 (s, 1H) 1,61 (s, 3H) 1,37 (s, 1H). ESI-MS (m/z): 268 [M+H]+.

(c) Cloridrato de ácido (R)-2-((2-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (22a)

[0176] Ácido (R)-2-((2-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (22) (145 mg, 0,54 mmol) foi tratado com HCl 4N/1,4- dioxano em metanol usando o procedimento descrito para o composto (12a) para produzir cloridrato de ácido (R)-2-((2-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di-

hidrotiazol-4-carboxílico (22a) (155 mg, 94% de rendimento). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 12,6-12,2 (s l, 1H) 7,72-7,60 (m, 1H) 7,52-7,40 (m, 1H) 6,36- 6,27 (m, 1H) 4,70 (s, 1H) 1,72 (s, 3H) 1,50 (s, 3H). ESI-MS (m/z): 268 [M+H]+; ponto de fusão: 211-213 ºC.

Exemplo 9: Ácido (S)-2-((2-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (23) e sal cloridrato correspondente (23a) (a) Ácido (S)-2-((2-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico (23)

[0177] D-Penicilamina (450 mg, 3,02 mmol) foi reagida com cloridrato de 2-cloro-oxazolo[5,4-b]piridina (21) usando o procedimento descrito para o composto (22). O produto foi purificado por cromatografia flash de fase inversa utilizando uma eluição gradiente de H2O para H2O/MeCN (20:80) para dar ácido (S)-2-((2-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico (23) (420 mg, rendimento de 94 %). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 12,07 (s l, 1H) 8,00-7,87 (m, 1H) 7,27-7,15 (m, 1H) 6,28-6,20 (m, 1H) 4,58 (s, 1H) 1,66 (s, 3H) 1,43 (s, 1H). ESI-MS (m/z): 268 [M+H]+.

(b) Cloridrato de ácido (S)-2-((2-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (23a)

[0178] Ácido (S)-2-((2-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil-4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (23) (350 mg, 1,31 mmol) foi tratado com HCl 4N/1,4- dioxano em metanol usando o procedimento descrito para o composto (12a) para produzir cloridrato de ácido (S)-2-((2-hidroxipiridin-3-il)amino)-5,5-dimetil4,5-di- hidrotiazol-4-carboxílico (23a) (300 mg, 75% de rendimento). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d6, ppm): 12,3-11,9 (s l, 1H) 8,02-7,80 (m, 1H) 7,31-7,15 (m, 1H) 6,31- 6,18 (m, 1H) 4,59 (s, 1H) 1,66 (s, 3H) 1,44 (s, 3H). ESI-MS (m/z): 268 [M+H]+.

Esquema 9 Exemplo 10: Cloridrato de ácido (R)-2-((4-hidroxipiridin-3- il)amino)-4,5-di-hidrotiazol-4-carboxílico (25a) (a) N-(terc-Butoxicarbonil)-S-(oxazolo[4,5-c]piridin-2-il)-L-cisteína (24)

[0179] Um mistura de (terc-butoxicarbonil)-L-cisteína (358 mg, 1,62 mmol), cloridrato de 2-clorooxazolo[4,5-c]piridina (11) (358 mg, 1,87 mmol) e Na2CO3 (857 mg, 8,09 mmol) em THF (15 mL) foi agitado à temperatura ambiente durante 2 h. Os solventes foram então removidos em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash usando gradiente de eluição de CH2Cl2/MeOH (99:1) para CH2Cl2/MeOH (1:1) para dar N-(terc-butoxicarbonil)- S-(oxazolo[4,5-c]piridin-2-il)-L-cisteína (24) (148 mg, rendimento de 27%). 300 MHz 1H-RMN (CD3OD, ppm): 8,82-8,77 (m, 1H) 8,43 (dd, J=5,6, 1,2 Hz, 1H) 7,64 (dd, J=5,6, 1,1 Hz, 1H) 4,43 (dd, J=7,2, 4,4 Hz, 1H) 4,04 (dd, J=13,4, 4,4 Hz, 1H) 3,65 (dd, J=13,4, 7,2 Hz, 1H) 1,37 (s, 9H). ESI-MS (m/z): 340 [M+H]+.

(b) Cloridrato de ácido (R)-2-((4-hidroxipiridin-3-il)amino)-4,5-di-hidrotiazol- 4-carboxílico (25a)

[0180] N-(terc-butoxicarbonil)-S-(oxazolo[4,5-c]piridin-2-il)-L- cisteína (24) (120 mg, 0,35 mmol) foi suspenso em HCl 4N/1,4-dioxano (10 mL) e agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. Os voláteis foram então removidos e o resíduo foi tratado com éter dietílico (10 mL). O precipitado resultante foi filtrado e purificado por cromatografia flash de fase inversa utilizando uma eluição gradiente de H2O para H2O/MeCN (75:25) para dar cloridrato de ácido (R)-2-((4-hidroxipiridin-3-il)amino)-4,5-di-hidrotiazol-4-

carboxílico (25a) (45 mg, rendimento de 46%). 300 MHz 1H-RMN (D2O, ppm): 8,25 (d, J=1,6 Hz, 1H) 7,98 (dd, J=7,3, 1,6 Hz, 1H) 6,77 (d, J=7,3 Hz, 1H) 4,99- 4,89 (m, 1H) 4,01 (dd, J=11,6, 9,1 Hz, 1H) 3,80 (dd, J=11,6, 4,5 Hz, 1H). ESI-MS (m/z): 240 [M+H]+.

Esquema 10 Exemplo 11: Cloridrato do ácido (R)-2-(3-hidroxi-piridin-4-ilamino)-4,5- di-hidro-tiazol-4-carboxílico (27a) (a) N-(terc-Butoxicarbonil)-S-(oxazolo[5,4-c]piridin-2-il)-L-cisteína (11c)

[0181] (terc-Butoxicarbonil)-L-cisteína (143 mg, 0,52 mmol) e cloridrato de 2-cloro-oxazolo[5,4-c]piridina (16) (100 mg, 0,65 mmol) foram suspensos em THF (10 mL) e resfriados até -20 ºC. Após resfriamento, foi adicionado DIPEA (280 µL, 1,62 mmol) e a mistura foi deixada atingir a temperatura ambiente (2 horas). Após este tempo, foi adicionada uma solução de KHSO 4 a 5% (7 mL) e a suspensão resultante foi extraída com EtOAc (3 x 20 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (30 mL), depois com salmoura (20 mL) e secados sobre Na 2SO 4 sólido anidro. O produto foi purificado por cromatografia flash usando eluente de CH2Cl2 para CH 2Cl2/MeOH (70:30) para dar N-(terc-butoxicarbonil)-S- (oxazolo[5,4-c]piridin-2-il)-L-cisteína (26) (120 mg, rendimento de 68%). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d 6, ppm): 8,91 (d, J=0,9 Hz, 1H) 8,47 (d, J=5,3 Hz, 1H) 7,66 (dd, J=5,3, 0,9 Hz, 1H) 6,35-6,24 (m, 1H) 3,98-3,90 (m, 1H) 3,84 (dd, J=12,3, 5,0 Hz, 1H) 3,63 (dd, J=12,3, 6,2 Hz, 1H) 1,32 (s, 9H). ESI-MS (m/z):

340 [M+H]+.

(b) Cloridrato do ácido (R)-2-(3-hidroxi-piridin-4-ilamino)-4,5-di-hidro- tiazol-4-carboxílico (27a)

[0182] N-(terc-butoxicarbonil)-S-(oxazolo[5,4-c]piridin-2-il)-L- cisteína (26) (220 mg, 0,65 mmol) foi tratada com HCl 4N/1,4-dioxano usando o procedimento descrito para o composto (12a) para produzir cloridrato de ácido (R)-2-(3-hidroxi-piridin-4-ilamino)-4,5-di-hidro-tiazol-4- carboxílico (27a) (83 mg, 46% rendimento). 300 MHz 1H-RMN (DMSO-d 6, ppm): 11,5-9,3 (s l, 2H) 8,03 (s, 1H) 7,90 (d, J=5,3 Hz, 1H) 7,62-7,42 (m, 1H) 4,94-4,76 (m, 1H) 3,62 (dd, J=11,1, 8,6 Hz, 1H) 3,50 (dd, J=11,1, 5,9 Hz, 1H). ESI-MS (m/z): 240 [M+H] +; ponto de fusão: 191 ºC (dec.).

Exemplo 12: Inibição de Oxidação de Peroxinitrito mediada por SIN1 de Luminol

[0183] Compostos semelhantes ao luminol, tal como L-012, são sondas quimiolumescentes que são oxidadas pela presença de ROS e RNS, tal como peroxinitrito. Neste ensaio, L-012 é oxidado pela adição de 3- morfolino-sidnonimina (SIN-1), um conhecido gerador de peroxinitrito. A luminescência emitida é diretamente proporcional à concentração de SIN-1.

Os compostos foram avaliados quanto à sua capacidade de neutralizar/eliminar/decompor o peroxinitrito, bloqueando o aumento da quimiolumescência induzida pelo peroxinitrito. As concentrações de composto que produz 50% de inibição do sinal de luminescência (valores IC50) foram calculados pelo teste dos compostos a várias concentrações de duas medições paralelas. No modo de rastreio da curva de concentração - resposta com determinação do valor de IC 50 foi repetido, se a concentração mais baixa de composto não atingiu cerca de 70 a 100% do valor de controle. P ROTOCOLO DE E NSAIO L-012

[0184] A solução estoque (10 mM) de compostos foi preparada em DMSO 100%. A partir do estoque, soluções de teste de compostos em concentrações de 100, 30, 10, 3 e 1 µM foram preparadas em solução tamponada com fosfato (PBS, pH = 8,5) (concentração final dos compostos 10, 3, 1, 0,3, 0,1 µM). Após a medição inicial dos compostos a uma concentração de 10 pM, uma curva de concentração-resposta com IC 50 de determinação de compostos ativos foi realizada (quando a inibição da taxa de geração de peroxinitrito de compostos a 10 pM foi mais do que 50% de controle).

[0185] As seguintes soluções foram adicionadas a poliestireno branco, placa de 96 poços não esterilizada (Placas de Poliestireno Branco Thermo Scientifi NUNC™ 96 MICROWELL™ # 447796): • 10 µL SIN-1 2 mM em solução de DMSO a 100% (concentração final SIN-1 100 µM, volume final DMSO - 5%); • 190 µL L012 +/- composto de teste em solução tamponada com fosfato (PBS, pH = 8,5) (concentração final L012 100 µM).

[0186] O sinal de luminescência foi registrado por leitor de microplaca multimodal Hidex Sense (Hidex) a 30 °C por 30 min, com medição a cada 60 segundos e tempo de integração de 1 segundo.

ANÁLISE E RECOLHA DE DADOS L-012

[0187] Os valores de IC 50 foram calculados usando dois métodos diferentes; primeiro medindo as inclinações da porção linear mais íngreme do perfil cinético durante os primeiros 5 min (como % do controle) e, em segundo lugar, medindo a luminescência máxima no ponto de tempo de 30 min (como % do controle). Os valores de IC 50 dos compostos testados foram calculados utilizando o pacote de software GraphPad Prism 5.0.

[0188] Os compostos com IC 50 >10 µM (em% PN gen, ou em % luminol absorb. @ 30 min) são considerados como inativos nos presentes ensaios.

Tabela 1: Inibição da geração de Peroxinitrito de SIN1 e Inibição do sinal SIN1-luminol por compostos da invenção Composto # Peroxinitrito gen IC50 (µM) IC50 (µM) (% de controle, 10 (% PN gen) (% absorb. luminol µ M) @ 30 min) resveratrol 1 0,41 0,2 4a 0 0,26 1,8 5a 0 0,17 1,6 7a 0 0,17 1,8 8a 0 0,23 2,1 12a 82 >10 >10 17a 75 >10 >10 18a 77 >10 >10 22a 96 >10 >10 23a 67 >10 >10 25a 111 >10 >10 27a 61 >10 >10 Exemplo 13: Inibição de Citotoxicidade Mediada por Peroxinitrito

[0189] ATPlite é um sistema de monitoramento de TriFosfato de Adenosina baseado na luciferase do pirilampo. O monitoramento de ATP foi usado como uma medida da viabilidade das células PC12, uma vez que está presente em todas as células metabolicamente ativas e sua concentração diminui muito rapidamente à medida que as células sofrem necrose e apoptose.

O ATPlite é baseado na produção de luz emitida durante a reação de ATP e D- Luciferina na presença de Luciferase. A luz emitida é proporcional à concentração de ATP. Os compostos da invenção foram avaliados quanto à sua capacidade de inibir a toxicidade celular induzida por SIN-1. As concentrações inibitórias, valores IC50 foram calculados por meio de testes dos compostos da invenção, a várias concentrações e IC50 médio de duas placas.

PREPARAÇÃO DE CÉLULAS

[0190] Todo o trabalho celular foi realizado em uma câmara de cultura de células em um ambiente esterilizado. No Dia 1, células de feocromocitoma de rato (PC12) foram dissociadas de frascos T75 com 0,25% de tripsina/EDTA por aproximadamente 2 minutos. As células foram recolhidas adicionando 10 mL de meio F12K a cada frasco e coletando as células em um tubo cônico esterilizado de 15 mL. A partir disto, 10 μL de células foram colocados em 90 μL de azul de tripano em um tubo de microcentrífuga de 1,5 mL. Isso era igual a um fator de diluição de 10. O tubo de microcentrífuga foi misturado via vórtice brevemente e 10 μL foram adicionados em um lado de um hemacitômetro. As células foram contadas nos 4 grandes quadrantes angulares do hemacitômetro sob o microscópio invertido a 10X e a média dos 4 quadrantes foi calculada. As células azuis não foram contadas porque essas células representavam células não viáveis. O número de células presente em 1 mL de meio foi determinado utilizando a seguinte equação: células/mL = (# células contadas / # quadrados contados) x 104 x fator de diluição. (Por exemplo: 2,5 x 106 células/mL = (100 células/ 4 quadrados) x 10000 x 10). As células recolhidas foram diluídas em meio F12K contendo soro elevado (10% de soro de cavalo, 5% de soro fetal de bovino, 1% de penicilina e estreptomicina) de modo que houvesse 300.000 células em 1 mL. A partir disso, 100 μL de células/meio foram adicionados a uma placa de 96 poços revestida com colágeno de fundo transparente esterilizada (30.000 células/poço). As células foram deixadas a ligar durante a noite a 37 °C, 5% de CO2.

INIBIÇÃO DE CITOTOXICIDADE MEDIADA POR PEROXINITRITO - PROTOCOLO

[0191] Todo o trabalho celular é realizado em uma câmara de cultura de células em um ambiente esterilizado. No Dia 2, o meio foi removido de cada placa e substituído por 100 µL de F12K contendo soro baixo (1% de soro de cavalo, 1% de penicilina estreptomicina). Para testar a concentração- resposta de compostos da invenção, diluições em série destes compostos de 5 mM até 0,02 mM foram preparadas em PBS. Cada diluição (volume de 2 µL) foi adicionada aos poços apropriados em quadruplicado. Os compostos de teste foram incubados nas células a 37 ºC antes da adição de 2 µL de SIN-1 50 mM.

As células foram então incubadas durante a noite a 37 ºC.

[0192] No Dia 3, 10,25 mL de tampão ATPlite foram adicionados a 1 frasco de solução de substrato liofilizado (sistema de ensaio de detecção de ATP por luminescência ATPlite etapa 1 (Perkin Elmer, #6016731)). A cada placa, 100 µL/poço de solução liofilizada foram adicionados e misturados em um agitador de placa orbital por 2 min a 250 rpm. A placa foi lida em 5 min no FlexStation3 no modo de luminescência.

Análise de dados baseados em células:

[0193] O sinal de luminescência foi registrado pelo FlexStation3 e a percentagem de controle foi calculada. Os poços contendo apenas células foram usados para calcular 100% do controle, os poços contendo apenas SIN-1 foram usados para calcular 0%. Os dados restantes foram plotados como % de controle subtraindo a média dos controles SIN-1 e dividindo pelo valor de controle 100%.

Exemplo 14: Fator de crescimento nervoso (NGF) ou modelo de hipersensibilidade à dor induzida por interleucina 6 (IL6)

[0194] Todos os estudos comportamentais foram conduzidos usando camundongos machos C57Bl6 (Taconic Laboratories) pesando entre 20 e 25 gramas. Os camundongos foram usados em experiências comportamentais começando uma semana após a chegada. Os animais foram alojados com um ciclo claro/escuro de 12 horas e tinham comida e água disponíveis ad libitum.

[0195] Os camundongos foram colocados em caixas de acrílico com piso de malha de arame e deixados em repouso por 1 hora. Depois que os limiares mecânicos de pré-tratamento foram registrados, os animais receberam injeções intraplantares de NGF (50 ng, Millipore, Billerica, MA) ou IL6 (0,1ng, R&D Systems) em um volume de 25 μL de solução salina 0,9% esterilizada.

Filamentos de Von Frey calibrados (Stoelting) foram usados para estimulação mecânica da superfície plantar da pata traseira esquerda e os limiares de retirada foram calculados usando o método up-down (Chaplan, et al. 1994, J. Neurosci.

Methods 53: 55-63). Limiares de retirada da pata foram medidos em 1 hora, 3 horas, 24 horas, 48 horas e 72 horas após a injeção. As medições da escala de careta de camundongo foram feitas a partir de vídeos capturados 1 h, 3 h e 24 h após a injeção de compostos, conforme descrito anteriormente (Langford, et al..

2010, Nature Methods 7:447-449). Um modelo de camundongo para 'iniciação hiperalgésica' originalmente desenvolvido por Levine e colegas (para revisão, ver Reichling, et al.. 2009, Trends Neurosci. 32:611-618) e adaptado para camundongos (Asiedu, et al.. 2011, J. Neurosci. 31:6646-6653) foi usado para o estudo. Para avaliação da iniciação hiperalgésica, os animais foram avaliados quanto aos limiares mecânicos após a recuperação da hipersensibilidade mecânica de NGF ou IL6 e subsequentemente injetados na pata traseira esquerda com 100 ng de prostaglandina E2 (PGE2, Cayman Chemical, Ann Arbor, MI, EUA) em 25 μL a 0,9% de NaCl. Após a injeção de PGE 2 os limiares de retirada da pata foram medidos novamente em 1 h, 3 h e 24 h após a injeção de PGE2. As medições da escala de careta de camundongo foram feitas a partir de vídeos capturados 1 h, 3 h e 24 h após a injeção de compostos. A dosagem de ativador AMPK foi realizada num volume de 25 μL de 0,9% de solução salina esterilizada para injeções intraplantar ou em 0,5% de metilcelulose de hidroxipropila com 0,1% de polissorbato-80 (ambos da Sigma, St. Louis, MO, EUA) em H2O ultrapura em um volume total de 200 μL por gavagem oral.

[0196] Os experimentadores medindo limiares de retirada mecânica ou marcando expressões faciais de camundongos estavam sempre desconhecedores das condições experimentais. Os camundongos foram randomizados em grupos por um experimentador desconhecedor e os camundongos de grupos individuais nunca foram alojados juntos (por exemplo, gaiolas domésticas sempre foram misturadas entre os grupos experimentais).

[0197] Incisão plantar e teste comportamental: Antes da cirurgia, todos os animais foram avaliados quanto aos limiares de retirada da pata. Um modelo de camundongo de dor incisional foi usado para este estudo (Banik, et al., 2006, Anesthesiology 105:1246-1253). Uma incisão longitudinal de 5 mm foi feita com lâmina número 11 através da pele, fáscia e músculo da face plantar da pata traseira em ratos anestesiados com isoflurano. Os controles simulados foram submetidos ao mesmo procedimento, mas sem a incisão. A pele foi aposta com 2 pontos de seda de 5 mm. Os animais receberam injeção intraplantar de resveratrol ou veículo ao redor da incisão nos momentos indicados após a incisão. Os animais foram autorizados a recuperar por 24 horas e, em seguida, os limiares de retirada da pata foram medidos em 24 horas, 48 horas, 72 horas e 5 dias, 7 dias, 9 dias, 11 dias e 13 dias após a cirurgia. As medições da escala de careta foram feitas 24 h e 48 h após a incisão de vídeos capturados nesses momentos por um observador desconhecedor. Para experiências de iniciação hiperalgésica, os animais receberam uma injeção intraplantar de PGE2 (100 ng/25 µL) 28 dias após a incisão ou procedimentos simulados. Os limiares de retirada da pata foram medidos novamente em 1 h, 3 h e 24 h após a injeção de PGE2. As medições em escala de careta também foram feitas nesses pontos de tempo a partir de vídeos capturados e marcados por observadores desconhecedores.

Exemplo 15: Modelo de lesão de nervo poupado de camundongo (SNI) do modelo de dor neuropática

[0198] Cirurgia de dor neuropática e teste comportamental: Foram usados camundongos machos (20-25 g) ou ratos Sprague Dawley machos (250-

300 g). Todos os procedimentos com animais foram aprovados pelo Comitê Institucional de Uso e Cuidado de Animais da Universidade do Texas em Dallas e estavam de acordo com as diretrizes da Associação Internacional para o Estudo da Dor. Antes da cirurgia, todos os animais foram avaliados quanto aos limiares de retirada mecânica (Chaplan, et al., 1994, J. Neurosci. Methods 53:55- 63). Durante a cirurgia, os animais são anestesiados com anestesia com gás isoflurano e mantidos em uma almofada de aquecimento durante a cirurgia. Os camundongos e ratos podem recuperar em uma gaiola aquecida por uma hora após a cirurgia. Os antibióticos são administrados a todos os animais após a cirurgia para evitar infecções. A lesão do nervo poupado (SNI) foi realizada nos camundongos conforme descrito anteriormente (Bourquin, et al..,2006, Pain 122:14e11-14). O nervo ciático desses camundongos é exposto no meio da coxa e os ramos fibulares comuns e tibiais do nervo são isolados, ligados e cortados.

O nervo sural é deixado intacto. O músculo subjacente é então fechado e a pele é fechada com sutura. A ligadura do nervo espinhal (SNL) foi feita em ratos por ligadura apertada dos nervos espinhais L5 e L6, conforme descrito por Kim & Chung, 1992, Pain 50:355-363.

[0199] Aqui, a pele acima da coluna vertebral é incisada e os DRG L5 e L6 são expostos para revelar os nervos espinhais. Os nervos espinhais são ligados e cortados e a pele é então fechada. Os animais de controle simulado foram submetidos à mesma cirurgia e manipulação que os animais experimentais, mas sem o SNL ou SNI. Todos os animais foram deixados a recuperar durante 14 dias e todos os testes começaram no dia 14 após a cirurgia.

Após lesão do nervo, apenas os animais que desenvolveram limiares de retirada da pata inferiores a 1 g para SNI e menos de 4,7 g para SNL no dia 14 pós- cirurgia foram usados. Os animais foram colocados em caixas de acrílico com piso de malha de arame e deixados em repouso por 1 hora. Os limiares mecânicos pré-fármaco foram registrados e os animais receberam administração intraperitoneal ou por gavagem oral de compostos de teste de ativação de AMPK ou veículo. Filamentos de von Frey calibrados (Stoelting, Wood Dale, IL) foram usados para estimulação mecânica da superfície plantar da pata traseira esquerda e os limiares de retirada foram calculados usando o método up-down (Chaplan, et al. 1994, J. Neurosci. Methods 53: 55-63).

Exemplo 16: Efeito dos compostos da invenção na hiperalgesia induzida por capsaicina

[0200] Os compostos da invenção foram administrados a ratos antes de uma administração intraplantar de capsaicina e as latências de retirada foram medidas. Os compostos da invenção podem prevenir o desenvolvimento de estados de dor hiperalgésica produzidos pela capsaicina, um modelo de hiperalgesia bem conhecido dos peritos na técnica.

Exemplo 17: Efeito dos compostos da invenção na hiperalgesia incisional (profilaxia)

[0201] Os compostos da invenção foram administrados a ratos antes de uma incisão intraplantar. O veículo, um composto de referência (por exemplo, indometacina, celecoxib, naproxeno) ou compostos desta invenção foram administrados na conclusão de uma incisão cirúrgica e os valores de latência foram medidos 24 h depois (ponto de tempo 0) e 30 min e 60 min depois disso. A determinação das latências foi subsequentemente conduzida 48 h e 72 h da mesma maneira. Os compostos da invenção podem prevenir a hiperalgesia devido a uma incisão (cirúrgica).

Exemplo 18: Efeito dos compostos da invenção na hiperalgesia incisional (reversão)

[0202] Os compostos da invenção foram administrados a ratos após uma incisão intraplantar (2 h, 4 h, 6 h, 8 h, 12 h, 24 h). O veículo, um composto de referência (por exemplo, indometacina, celecoxib, naproxeno) ou compostos desta invenção foram administrados nestas ocasiões. A determinação das latências foi conduzida 30 min, 60 min, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h e 12 h após a administração. Os compostos da invenção podem reverter a hiperalgesia devido a uma incisão (cirúrgica).

Exemplo 19: Efeito dos compostos da invenção na hiperalgesia induzida por SIN1

[0203] SIN1 libera peroxinitrito. O veículo ou compostos da invenção foram administrados antes de uma dose intraplantar intravenosa de SIN1 (por exemplo, 1 mg/kg). A latência foi medida 2 h depois. Uma segunda dose de SIN1 (1 mg/kg) foi administrada 30 minutos após o primeiro período de teste e a latência foi medida novamente 2 horas depois. SIN1 foi novamente administrado 30 min e a latência foi medida novamente 2 h mais tarde. Os compostos da invenção podem bloquear o desenvolvimento de hiperalgesia causada por (dosagem repetida de) SIN-1, um gerador conhecido de peroxinitrito.

Exemplo 20: Efeito dos compostos da invenção sobre o modelo adjuvante completo de Freund de hiperalgesia

[0204] O modelo intraplantar de adjuvante completo (FCA) de Freund de dor inflamatória produz comportamentos semelhantes aos observados em pacientes e tem sido amplamente utilizado para avaliar novos tratamentos farmacológicos (Lam, et al.. 2008, J. Ethnopharmacol. 120:44-50).

[0205] Neste ensaio, a injeção intraplantar de CFA foi realizada sob anestesia de 2,5-4,0% de isoflurano/O2, administrada via cone nasal. Após a indução da anestesia, o local da injeção foi preparado de forma esterilizada e foi injetado 100 µL de uma suspensão a 50% de FCA. Após a injeção, os animais foram pesados e recuperados antes de serem devolvidos às suas gaiolas.

[0206] A latência de retirada da pata a um estímulo térmico foi avaliada usando uma fonte de calor radiante (Ugo Basile, Itália) voltada para a superfície plantar da pata traseira esquerda (teste de Hargreaves; Hargreaves,

et al., 1988, Pain 32:77-88). Uma latência de corte de 40 segundos foi definida para evitar danos ao tecido. Os limiares de retirada da pata a um estímulo tátil não nocivo foram avaliados usando um aparelho eletrônico de von Frey que apresentou uma força mecânica crescente na superfície plantar da pata traseira.

O volume da pata foi medido pelo deslocamento de água e assumindo uma densidade de tecido igual à da água. As latências, limiares e volume da linha de base foram medidos antes da injeção de FCA e reavaliados 24-72 h mais tarde.

O controle positivo foi o celecoxib (TRC, Montreal) e o controle negativo o veículo (0,5% metilcelulose, em solução salina tamponada com fosfato). Os compostos da invenção foram administrados (25 mg/kg, i.v.; ou 3-100 mg/kg, p.o.) uma vez imediatamente antes de FCA (preventivo) ou 24-72 horas pós-FCA (curativo).

[0207] O volume da pata foi avaliado 24-72 h após a dosagem. Os compostos da invenção foram administrados curativamente, com comportamento ou volume da pata foi avaliado 30-180 min após a dosagem. O celecoxib (30 mg/kg p.o.) serviu como controle positivo. A injeção intraplantar de 100 µL de FCA na pata traseira resultou no desenvolvimento de hiperalgesia térmica, alodinia tátil (conforme avaliado por von Frey eletrônico) e edema, conforme indicado por uma latência diminuída para um estímulo térmico nocivo, limiar diminuído para um estímulo tátil não nocivo e aumento do volume da pata.

Os compostos da invenção administrados preventivamente impediram o desenvolvimento de hiperalgesia térmica e alodinia tátil.

[0208] A injeção intraplantar de 100 µL de FCA na pata traseira resultou no desenvolvimento de hiperalgesia térmica, alodinia tátil (conforme avaliado por estimulo von Frey) e edema, conforme indicado por uma latência diminuída para um estímulo térmico nocivo, limiar diminuído para um estímulo tátil não nocivo e aumento do volume da pata. Os compostos da invenção administrados preventivamente impediram o desenvolvimento de hiperalgesia térmica e alodinia tátil.

Exemplo 21: Efeito dos compostos da invenção na hiperalgesia e edema induzido por carragenina intraplanar

[0209] O modelo de carragenina intraplantar de dor inflamatória aguda em ratos resulta em comportamentos semelhantes aos observados em pacientes e tem sido amplamente utilizado para avaliar novos tratamentos farmacológicos (Whiteside, et al., 2005, J. Pharmacol. Exp. Ther. 314:1234- 1240).

[0210] Para este ensaio, a latência de retirada da pata a um estímulo térmico foi avaliada usando uma fonte de calor radiante (Ugo Basile, Itália) voltada para a superfície plantar da pata traseira esquerda (teste de Hargreaves). Uma latência de corte de 40 segundos é definida para evitar danos ao tecido. O volume da pata foi medido pelo deslocamento de água e assumindo uma densidade de tecido igual à da água. As latências de linha de base foram obtidas antes da administração de carragenina e reavaliadas 4 h depois. Os compostos da invenção ou veículo foram administrados (10 e 30 mg/kg, p.o.) 3 h após a carragenina (curativo) e o comportamento avaliado 1 h mais tarde.

Além disso, os compostos da invenção foram administrados 15 minutos antes da carragenina (preventiva) e o comportamento avaliado 4 h após a carragenina. A indometacina (controle positivo, 30 mg/kg p.o.) foi administrada antes da carragenina e o comportamento avaliado 4 h após a carragenina.

[0211] A injeção intraplantar de carragenina foi realizada sob anestesia de 2,5-4,0% de isoflurano/O2, administrada via cone nasal. Após a indução da anestesia, o local da injeção foi preparado de forma esterilizada e foi injetado 50 µL de λ-carragenina a 2%. Após a injeção, os animais foram pesados e recuperados antes de serem devolvidos às suas gaiolas.

[0212] O controle positivo foi indometacina (Sigma, St. Louis), e o controle negativo foi o veículo (0,5% de metilcelulose). Ratos Sprague-Dawley machos (Harlan, II) tinham 250-300 g no momento da dosagem. O aparelho

Hargreaves foi obtido de Ugo Basile, Itália, e λ-carragenina foi obtida da Sigma, St. Louis.

[0213] A injeção intraplantar de 50 µL de carragenina na pata traseira resultou no desenvolvimento de hiperalgesia térmica e edema, conforme indicado por uma latência diminuída para um estímulo térmico nocivo e aumento no volume da pata.

[0214] Os compostos da invenção podem prevenir significativamente o edema induzido por carragenina ou a hiperalgesia térmica.

Quando administrado indometacina preventivamente (30 mg/kg p.o.), o controle positivo, produziu uma prevenção estatisticamente significativa de hiperalgesia térmica e edema.

Exemplo 22: Efeito dos compostos da invenção sobre a alodinia no modelo de ligadura do nervo espinhal (SNL) de rato

[0215] O modelo de ligadura do nervo espinhal (SNL) de dor neuropática em ratos resulta em comportamentos semelhantes aos observados em pacientes (Kim & Chung, 1992, Pain 50 (3):355-63) e tem sido amplamente utilizado para avaliar novos tratamentos farmacológicos (Sindrup & Jensen, 1999, Pain 83 (3): 389-400). Os compostos da invenção foram avaliados quanto à sua capacidade de reverter ou prevenir o desenvolvimento de alodinia tátil em um modelo de rato de dor neuropática.

[0216] O controle positivo foi gabapentina (Toronto Research Chemicals, Canadá). O controle negativo foi o veículo (0,5% de metilcelulose; 2-hidroxipropil-beta-ciclodextrina). Ratos Sprague-Dawley machos (Harlan, 11) tinham 250-300 g no momento da dosagem. Os filamentos de Von Frey foram obtidos de Stoelting, Ill, e os fios de seda 7-0, as suturas de vicril 4-0 foram obtidas de Ethicon, NJ.

[0217] O procedimento cirúrgico foi realizado sob anestesia de isoflurano/O2 a 2,5-4,0%, administrada por cone nasal, e a anestesia foi mantida durante toda a cirurgia. Após a indução da anestesia, o local da incisão foi raspado e preparado de forma esterilizada. Uma incisão mediana foi realizada, o processo transversal LS removido e os nervos espinhais LS fortemente ligados com material de sutura de seda 7-0. A ferida foi fechada em camadas com vicril 4-0. Ratos de controle operados de forma simulada foram submetidos ao procedimento idêntico, entretanto, o nervo espinhal não foi manipulado ou ligado.

Após a cirurgia, os animais foram pesados e recuperados antes de serem devolvidos às suas gaiolas.

[0218] O efeito dos compostos da invenção na alodinia tátil induzida por lesão do nervo foi investigado usando filamentos de von Frey 1-3 semanas após a ligadura apertada do nervo espinal LS. Os limiares táteis foram avaliados usando uma série de monofilamentos de von Frey calibrados (Stoelting, Wood Dale, IL). A avaliação da alodinia tátil foi medida como o limite de retirada da pata traseira que produziu uma probabilidade de 50% de retirada usando o método up-down. Os limiares foram avaliados antes da cirurgia e foram reavaliados 1-3 semanas após a cirurgia SNL. Os ratos foram administrados com uma dose única aguda do artigo de teste (30 mg/kg) no dia da cirurgia, QD (10 e 50 mg/kg) nos dias 1-5 pós-cirurgia ou QD (30 mg/kg) nos dias 1-5 pós-cirurgia. Os limiares táteis foram novamente avaliados 1 e 3 h, 3 e 5 h ou uma vez por semana após a administração. Animais tratados com veículo foram incluídos e gabapentina (100 mg/kg, i.p.) foi usada como controle positivo.

O número de animais por grupo foi 8.

[0219] A ligadura do nervo espinhal resultou no desenvolvimento de alodinia tátil, conforme indicado por um limiar de retirada da pata diminuído para um estímulo mecânico tátil não nocivo, 3 a 4 semanas após a cirurgia.

Usando animais que não jejuaram, os compostos da invenção podem produzir uma diferença estatisticamente significativa em relação aos animais tratados com veículo. Em experiências separadas, gabapentina (100 mg/kg i.p.), o controle positivo, produziu consistentemente uma reversão estatisticamente significativa da alodinia.

Exemplo 23: Efeito dos compostos da invenção na latência para cair de um ensaio de ataxia em rotarod acelerado

[0220] A ataxia é um problema clínico comum com compostos ativos no SNC e pode frequentemente confundir a interpretação da eficácia em modelos de dor pré-clínica. O ensaio rotarod de ataxia tem sido amplamente utilizado para avaliar a responsabilidade de efeitos colaterais de novos tratamentos farmacológicos (Jones & Roberts, 1968, J. Pharm. Pharmacol.

20:302- 04).

[0221] Foi avaliado o efeito dos compostos da invenção para impactar a latência para cair em um ensaio rotarod acelerado de ataxia em ratos.

O controle positivo foi haloperidol (Sigma, St. Louis), e o controle negativo foi veículo (que era hidroxipropilmetilcelulose e 15% DMA, 65% PEG300 e 20% D5W para haloperidol).

[0222] Ratos Sprague-Dawley machos (Harlan, Ill) tinham 250-300 g no momento da dosagem. O rotarod foi obtido a partir de IITC, CA. Para examinar os potenciais efeitos dos compostos da invenção no desempenho motor, os ratos foram testados em um rotarod de aceleração (IITC, Ca). Neste ensaio, os ratos foram colocados no rotarod com a velocidade definida para acelerar de 4 a 40 rpm ao longo de 300 seg. O tempo máximo gasto no rotarod foi definido em 300 segundos. Os ratos receberam dois ensaios de treinamento cronometrado (média para dar a linha de base reportada) no primeiro dia, em seguida, 24 h mais tarde, os ratos receberam o composto da invenção (30, 100 e 300 mg/kg, p.o.), haloperidol (3 mg/kg, p.o.) ou veículo. A latência para queda foi avaliada 1 h após a administração do fármaco correspondendo aproximadamente ao Tmax para os compostos da invenção quando administrados por via oral a ratos.

[0223] A latência para queda aumentou em todos os grupos entre os efeitos basais e pós-fármacos; o desempenho melhora com execuções repetidas no rotarod. Um composto da invenção (30, 100 e 300 mg/kg, p.o.) não diminuiu significativamente a latência para cair no ensaio do rotarod 1 h após a dosagem em comparação com os animais tratados com veículo. Em contraste, haloperidol (3 mg/kg, p.o.), o controle positivo, resultou em déficits motores significativos 1 h após a administração.

MODALIDADES ENUMERADAS

[0224] As seguintes modalidades exemplificativas são fornecidas, a numeração das quais não deve ser interpretada como designando níveis de importância: - A modalidade 1 fornece um composto da fórmula (I), ou um sal, solvato, enantiômero, diastereoisômero ou tautômero do mesmo: (I), em que: Y é selecionado a partir do grupo que consiste em S, O, NH, NR e CH2; R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-C6 alquila, C3-C8 cicloalquila, C1-C6 alquenila, C1-C6 alquinila, arila, arilalquila, heteroarilalquila e heteroarila, em que o grupo alquila, cicloalquila, alquenila, alquinila, arila, arilalquila, heteroarilalquila ou heteroarila é, independentemente, opcionalmente substituído; R2 é selecionado do grupo consistindo em H, -C(=O)H, -C(=O)-R e -CH2-OR; R3 e R4 são, independentemente, selecionados do grupo que consiste em H e C1-C6 alquila opcionalmente substituída, ou R3 e R4 podem se combinar para formar um C1-C6 alquileno; W é selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-C6 alquila, C3-C8 cicloalquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 hidroxialquila, -CHO, -C(=O)OR, - C(=O)NRR, ciano, hidroxi, arila e heteroarila, em que o grupo alquila, alcóxi, cicloalquila, arila ou heteroarila é, independentemente, opcionalmente substituído, e em que cada ocorrência de R é, independentemente, H, C 1-C6 alquila e C3-C8 cicloalquila; e cada ocorrência de R é, independentemente, selecionada a partir do grupo que consiste em C1-C6 alquila e C3-C8 cicloalquila.

[0225] A modalidade 2 fornece um composto da modalidade 1, que é um composto da fórmula (Ia): (Ia).

[0226] A modalidade 3 fornece o composto de qualquer uma das modalidades 1 a 2, em que R2 é H.

[0227] A modalidade 4 fornece o composto de qualquer uma das modalidades 1-3, em que Y é S.

[0228] A modalidade 5 fornece o composto de qualquer uma das modalidades 1-4, em que W é selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-C6 hidroxialquila, -CHO, -C(=O)OR e -C(=O)NRR, em que o grupo alquila, alcóxi, cicloalquila, arila ou heteroarila é, independentemente, opcionalmente substituído e em que cada ocorrência de R é, independentemente, H, C 1-C6 alquila e C3-C8 cicloalquila.

[0229] A modalidade 6 fornece o composto de qualquer uma das modalidades 1-5, em que R3 e R4 são, independentemente, selecionados do grupo consistido em H e C1-C6alquila.

[0230] A modalidade 7 fornece o composto de qualquer uma das modalidades 1-6, que é selecionado a partir do grupo que consiste em: Ácido (R)-2-(3-hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidro-tiazol-4-carboxílico; Ácido (S)-2-(3-hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidro-tiazol-4- carboxílico; Ácido (R)-2-((3-hidroxipiridin-2-il)amino)-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico; e Ácido (S)-2-((3-hidroxipiridin-2-il)amino)-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico; e um seu sal, solvato, enantiômero, diastereoisômero ou tautômero.

[0231] A modalidade 8 fornece uma composição farmacêutica compreendendo o composto de qualquer uma das modalidades 1-6.

[0232] A modalidade 9 fornece uma composição farmacêutica que compreende o composto das modalidades 1-8.

[0233] A modalidade 10 fornece um método para prevenir, reduzir ou aliviar a dor em um mamífero, o método compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto de qualquer uma das modalidades 1-7 ao mamífero.

[0234] A modalidade 11 fornece o método da modalidade 10, em que a administração é oral, parenteral, nasal, inalatória, intravenosa, subcutânea, transdérmica ou enteral.

[0235] A modalidade 12 fornece o composto de qualquer uma das modalidades 10-11, em que o mamífero é um ser humano.

[0236] A modalidade 13 fornece o método de qualquer uma das modalidades 10-12, em que a dor é uma dor espontânea.

[0237] A modalidade 14 fornece o método de qualquer uma das modalidades 10-12, em que a dor é hiperalgesia.

[0238] A modalidade 15 fornece o método de qualquer uma das modalidades 10-12, em que a dor é alodinia.

[0239] A modalidade 16 fornece o método de qualquer uma das modalidades 10-12, em que a dor surge de um procedimento cirúrgico.

[0240] A modalidade 17 fornece o método da modalidade 16, em que o procedimento cirúrgico compreende extração do terceiro molar, implantes dentários, correção de hérnia lingual, colecistectomia, aumento mamário, abdominoplastia, vasectomia, histerectomia, implantação de pacemaker e/ou técnicas laparoscópicas.

[0241] A modalidade 18 fornece o método de qualquer uma das modalidades 10-15. em que a dor resulta de trauma, entorses, contusões, ossos quebrados, cortes e/ou queimaduras.

[0242] A modalidade 19 fornece o método de qualquer uma das modalidades 10-15 ou 18, em que a dor é dor neuropática.

[0243] A modalidade 20 fornece o método de qualquer uma das modalidades 10-15 ou 18, em que a dor é a neuropatia diabética dolorosa.

[0244] A modalidade 21 fornece o método de qualquer uma das modalidades 10-15 ou 18, em que a dor é uma dor crônica.

[0245] A modalidade 22 fornece o método de qualquer uma das modalidades 10-15, em que a dor surge de câncer, diabetes, Doença de Parkinson, Doença de Alzheimer, Esclerose Lateral Amiotrófica, Esclerose Múltipla e/ou neuropatias periféricas e/ou centrais.

[0246] A modalidade 23 fornece o método de qualquer uma das modalidades 10-15, em que a dor é causada por uma doença inflamatória.

[0247] A modalidade 24 fornece o método da modalidade 23, em que a doença inflamatória compreende a artrite reumatoide, osteoartrite, lúpus, síndroma do intestino inflamatório, vulvodinia e/ou doença de Sjorgen.

[0248] A modalidade 25 fornece o método de qualquer uma das modalidades 10-15, em que a dor é causada por quimioterapia do câncer, tratamento por radiação do câncer, acidente vascular cerebral e/ou infarto do miocárdio.

[0249] As divulgações de cada patente, pedido de patente e publicação citada neste documento são incorporados neste documento por referência na sua totalidade. Embora esta invenção tenha sido divulgada com referência a modalidades específicas, é evidente que outras modalidades e variações desta invenção podem ser concebidas por outros peritos na técnica sem se afastar do verdadeiro espírito e escopo da invenção. As reivindicações anexas se destinam a ser interpretadas de modo a incluir todas tais modalidades e variações equivalentes.

Claims (25)

REIVINDICAÇÕES

1. COMPOSTO DA FÓRMULA (I) ou um sal, solvato, enantiômero, diastereoisômero ou tautômero do mesmo: (I), caracterizado por: Y ser selecionado a partir do grupo que consiste em S, O, NH, NR e CH2; R1 ser selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-C6 alquila, C3-C8 cicloalquila, C1-C6 alquenila, C1-C6 alquinila, arila, arilalquila, heteroarilalquila e heteroarila, em que o grupo alquila, cicloalquila, alquenila, alquinila, arila, arilalquila, heteroarilalquila ou heteroarila é, independentemente, opcionalmente substituído; R2 ser selecionado do grupo que consiste em H, -C(=O)H, -C(=O)- R e -CH2-OR; R3 e R4 serem, independentemente, selecionados do grupo que consiste em H e C1-C6 alquila opcionalmente substituída, ou R3 e R4 poderem se combinar para formar um C1-C6 alquileno; W ser selecionado a partir do grupo que consiste em H, C1-C6 alquila, C3-C8 cicloalquila, C1-C6 alcóxi, C1-C6 hidroxialquila, -CHO, -C(=O)OR, - C(=O)NRR, ciano, hidroxi, arila e heteroarila, em que o grupo alquila, alcóxi, cicloalquila, arila ou heteroarila é, independentemente, opcionalmente substituído, e em que cada ocorrência de R é, independentemente, H, C1-C6 alquila e C3-C8 cicloalquila; e cada ocorrência de R ser, independentemente, selecionada a partir do grupo que consiste em C1-C6 alquila e C3-C8 cicloalquila.

2. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser um composto da fórmula (Ia): (Ia).

3. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por R2 ser H.

4. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por Y ser S.

5. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por W ser selecionado a partir do grupo que consiste em H, C 1-C6 hidroxialquila, -CHO, -C(=O)OR e -C(=O)NRR, em que o grupo alquila, alcóxi, cicloalquila, arila ou heteroarila é, independentemente, opcionalmente substituído e em que cada ocorrência de R é, independentemente, H, C1-C6 alquila e C3-C8 cicloalquila.

6. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por R3 e R4 serem, independentemente, selecionados do grupo que consiste em H e C1-C6alquila.

7. COMPOSTO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por ser selecionado a partir do grupo que consiste em: Ácido (R)-2-(3-hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidro- tiazol-4-carboxílico; Ácido (S)-2-(3-hidroxi-piridin-2-ilamino)-5,5-dimetil-4,5-di-hidro- tiazol-4-carboxílico; Ácido (R)-2-((3-hidroxipiridin-2-il)amino)-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico; e

Ácido (S)-2-((3-hidroxipiridin-2-il)amino)-4,5-di-hidrotiazol-4- carboxílico.

8. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA caracterizada por compreender o composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6.

9. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA caracterizada por compreender o composto, conforme definido na reivindicação 7.

10. MÉTODO DE PREVENÇÃO, redução ou alívio da dor em um mamífero, o método caracterizado por compreender a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, ao mamífero.

11. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por a administração ser oral, parenteral, nasal, inalatória, intravenosa, subcutânea, transdérmica ou enteral.

12. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por o mamífero ser um ser humano.

13. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, caracterizado por a dor ser dor espontânea.

14. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, caracterizado por a dor ser hiperalgesia.

15. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, caracterizado por a dor ser alodinia.

16. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, caracterizado por a dor surgir de um procedimento cirúrgico.

17. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 16, caracterizado por o procedimento cirúrgico compreender a extração do terceiro molar, implantes dentários, correção de hérnia lingual, colecistectomia, aumento mamário, abdominoplastia, vasectomia, histerectomia, implantação de pacemaker e/ou técnicas laparoscópicas.

18. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, caracterizado por a dor surgir de trauma, entorses, ossos quebrados, contusões, cortes e/ou queimaduras.

19. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, caracterizado por a dor ser dor neuropática.

20. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, caracterizado por a dor ser neuropatia diabética dolorosa.

21. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, caracterizado por a dor ser dor crônica.

22. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, caracterizado por a dor surgir de câncer, diabetes, Doença de Parkinson, Doença de Alzheimer, Esclerose Lateral Amiotrófica, Esclerose Múltipla e/ou neuropatias periféricas e/ou centrais.

23. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, caracterizado por a dor ser causada por uma doença inflamatória.

24. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 23, caracterizado por a doença inflamatória compreender artrite reumatoide, osteoartrite, lúpus, síndrome do intestino inflamatório, vulvodinia e/ou doença de Sjorgen.

25. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, caracterizado por a dor ser causada por quimioterapia do câncer, tratamento por radiação do câncer, acidente vascular cerebral e/ou infarto do miocárdio.