BR112020006796A2 - Composições de sal de sulfassalazina e métodos de uso das mesmas - Google Patents

Abstract

a presente invenção fornece composições de sal de sulfassalazina. em alguns casos, os sais de sulfassalazina têm uma forma cristalina. os presentes sais cristalinos de sulfassalazina podem fornecer uma forma solúvel em água do composto ativo que encontra uso em composições farmacêuticas e aplicações terapêuticas. os presentes sais cristalinos de sulfassalazina podem fornecer solubilidade aumentada em comparação com a forma zwiteriônica ou ácida livre da sulfassalazina. também são fornecidas composições farmacêuticas incluindo as presentes composições de sal de sulfassalazina. também são fornecidos métodos de tratamento de uma doença neurologicamente relacionada como epilepsia refratária utilizando os presentes sais de sulfassalazina e composições farmacêuticas.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOSIÇÕES DE SAL DE SULFASSALAZINA E MÉTODOS DE USO DAS MESMAS"

REFERÊNCIA REMISSIVA

[0001] Este pedido reivindica o benefício do pedido de patente provisório U.S. n° 62/570.258, depositado em 10 de Outubro de 2017, cujo pedido é incorporado na presente invenção em sua totalidade a título de referência.

INTRODUÇÃO

[0002] A sulfassalazina foi sintetizada para combinar um antibiótico, a sulfapiridina, e um agente anti-inflamatório, o ácido 5-aminossalicílico (5-ASA). A sulfassalazina encontra uso no tratamento de artrite reumatoide e doenças inflamatórias intestinais incluindo doença de Crohn e colite ulcerativa. A sulfassalazina pode ser metabolizada in vivo em sulfapiridina e 5-ASA. Efeitos colaterais significativos ocorrem em cerca de 25% das pessoas. Estes incluem perda de apetite, náusea, cefaleia, e erupção cutânea. Os efeitos colaterais graves incluem supressão da medula óssea, problemas hepáticos, e problemas renais.

[0003] A sulfassalazina é um fármaco insuficientemente solúvel quando em uma forma de ácido livre. A presença de ligações azo e sulfonamida na estrutura química do fármaco também torna a sulfassalazina propensa à degradação durante os vários estágios de fabricação da formulação, resultando no provável surgimento de impurezas relacionadas à degradação no produto final. Embora a ligação sulfonamida seja suscetível à hidrólise em meio ácido para formar os correspondentes derivado do ácido sulfônico e amina, o grupo azo pode experimentar alterações químicas sob condições hidrolíticas, fotolíticas, e oxidantes para formar diferentes produtos de degradação. Com base nestas susceptibilidades químicas, há vários possíveis produtos de degradação da sulfassalazina (Saini et al. "Degradation Study on Sulfasalazine and a Validated HPLC-UV Method for its Stability Testing", Sci Pharm. 2014; 82: 295–306).

[0004] Sólidos farmacêuticos podem existir em diferentes formas de cristal, como cristalina, amorfa, ou vítrea e também em estados solvatados ou hidratados. O polimorfismo é a capacidade de qualquer elemento ou composto de cristalizar como mais do que uma espécie de cristal diferente. As diferentes formas polimórficas do mesmo fármaco podem ter diferenças substanciais em determinadas propriedades físico-químicas farmaceuticamente importantes, como estabilidade, solubilidade, taxa de dissolução, hábito do cristal, comportamento na formação de comprimidos. Alterações em determinadas destas propriedades físico-químicas podem afetar a biodisponibilidade do fármaco. São de interesse as formas de sulfassalazina adequadas para uso no desenvolvimento de composições farmacêuticas para uso no tratamento de doenças.

SUMÁRIO

[0005] A presente invenção fornece composições de sal de sulfassalazina. Em alguns casos, os sais de sulfassalazina têm uma forma cristalina. Os sais cristalinos de sulfassalazina da presente invenção podem fornecer uma forma solúvel em água do composto ativo que encontra uso em composições farmacêuticas e aplicações terapêuticas. Os sais cristalinos de sulfassalazina da presente invenção podem fornecer solubilidade aumentada em comparação com a forma zwiteriônica ou de ácido livre da sulfassalazina. Os sais cristalinos de sulfassalazina da presente invenção podem, também, em alguns casos, fornecer estabilidade aumentada do composto ativo em uma composição que encontra uso em uma variedade de aplicações terapêuticas. Desta forma, também são fornecidas composições farmacêuticas incluindo as composições de sal de sulfassalazina da presente invenção. Também são fornecidos métodos de tratamento de uma doença neurologicamente relacionada como epilepsia refratária utilizando os sais de sulfassalazina da presente invenção e as composições farmacêuticas da presente invenção.

[0006] Estes e outros objetivos, vantagens, e características da presente invenção se tornarão evidentes para aquelas pessoas versadas na técnica mediante a leitura dos detalhes das composições de sal de sulfassalazina e dos métodos de uso das mesmas conforme descritos mais completamente abaixo.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0007] A presente revelação é mais bem compreendida a partir da seguinte descrição detalhada quando lida juntamente com os desenhos em anexo. É enfatizado que, de acordo com a prática comum, as várias características dos desenhos não estão em escala. Ao contrário, as dimensões das várias características são arbitrariamente expandidas ou reduzidas para fornecer maior clareza. As seguintes figuras estão incluídas nos desenhos.

[0008] A FIGURA 1 mostra os difratogramas de Difração de raios X pelo método do pó (XRPD, "X-Ray Powder Diffraction") de preparações de pequena escala (painel superior) e em maior escala (painel inferior) de um sal de ácido benzenossulfônico de sulfassalazina.

[0009] A FIGURA 2 mostra gráficos de isotermas de Sorção Dinâmica de Vapor (DVS, "Dynamic Vapor Sorption") de ciclos de sorção/dessorção de uma preparação em maior escala de sal de ácido benzenossulfônico de sulfassalazina.

[0010] A FIGURA 3 mostra uma comparação de difratogramas de XRPD da preparação em maior escala de sal de ácido benzenossulfônico de sulfassalazina antes e depois de estudos de estabilidade, conforme descritos na seção experimental abaixo.

[0011] A FIGURA 4 mostra uma comparação de difratogramas de XRPD da preparação em maior escala de sal de dietilamina de sulfassalazina antes e depois de estudos de estabilidade, conforme descritos na seção experimental abaixo.

[0012] A FIGURA 5 mostra uma comparação de difratogramas de XRPD da preparação em maior escala de sal de L-lisina de sulfassalazina antes e depois de estudos de estabilidade, conforme descritos na seção experimental abaixo.

[0013] A FIGURA 6 mostra uma comparação de difratogramas de XRPD da preparação em maior escala de sal de trietanolamina de sulfassalazina antes e depois de estudos de estabilidade, conforme descritos na seção experimental abaixo.

[0014] A FIGURA 7 mostra uma comparação de difratogramas de XRPD da preparação em maior escala de sal de trometamina de sulfassalazina antes e depois de estudos de estabilidade, conforme descritos na seção experimental abaixo.

DEFINIÇÕES

[0015] O termo pKa refere-se ao logaritmo negativo (p) da constante de dissociação de ácido (Ka) de um ácido, e é igual ao valor de pH no qual concentrações iguais do ácido e de sua forma de base conjugada estão presentes na solução.

[0016] O termo "sal" refere-se a um composto iônico que resulta da reação de neutralização de um ácido e uma base, e é composto de pelo menos um cátion (íon carregado positivamente) e pelo menos um ânion (íon negativo). Em algumas modalidades, um sal é eletricamente neutro (sem uma carga líquida). Em alguns casos, um sal tem uma forma sólida até ser dissolvido em um solvente, por exemplo, uma solução aquosa. Um líquido iônico é um sal que tem um estado líquido. Quando aplicável, o sal é um sal farmaceuticamente aceitável, embora isso não seja necessário para sais de compostos intermediários que não se destinam à administração a um paciente. As formas de sal sólidas de sulfassalazina são desejáveis para uso como um Ingrediente Farmacêutico Ativo (IFA) em uma composição farmacêutica. A título de exemplo, os sais dos presentes compostos incluem aqueles em que o composto básico é protonado por um ácido inorgânico ou orgânico para formar um cátion de ácido conjugado, com a base conjugada do ácido inorgânico ou orgânico como o componente aniônico do sal. Os sais de interesse incluem, mas não se limitam a, sais cristalinos sólidos. Entende-se que para qualquer uma das estruturas representadas na presente invenção, estas estruturas podem também incluir quaisquer formas de sal convenientes.

[0017] Em algumas modalidades, um sal "solúvel em água" é um sal que tem uma solubilidade em uma solução aquosa (por exemplo, um tampão aquoso a cerca de pH 7 e a cerca de 25 °C; ou água a cerca de 25 °C) que é 0,1 mg/ml ou mais, como uma solubilidade de 0,2 mg/ml ou mais, 0,3 mg/ml ou mais, 0,4 mg/ml ou mais, 0,5 mg/ml ou mais, 1 mg/ml ou mais, 2 mg/ml ou mais, 3 mg/ml ou mais, 4 mg/ml ou mais, 5 mg/ml ou mais, 6 mg/ml ou mais, 7 mg/ml ou mais, 8 mg/ml ou mais, 9 mg/ml ou mais, 10 mg/ml ou mais, 15 mg/ml ou mais, 20 mg/ml ou mais, ou ainda mais.

[0018] O termo "farmaceuticamente aceitável" significa aprovado por uma agência fiscalizadora do governo federal ou estadual ou listado na Farmacopeia dos Estados Unidos ou em outra farmacopeia geralmente reconhecida para uso em mamíferos, como os seres humanos.

[0019] O termo "sal farmaceuticamente aceitável" significa um sal que é aceitável para a administração a um paciente, como um mamífero (sais com contraíons tendo segurança aceitável para mamíferos para um determinado regime de dosagem). Tais sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser derivados de bases inorgânicas ou orgânicas farmaceuticamente aceitáveis e de ácidos inorgânicos ou orgânicos farmaceuticamente aceitáveis. "Sal farmaceuticamente aceitável" refere-se aos sais farmaceuticamente aceitáveis de um composto, cujos sais são derivados de uma variedade de contraíons orgânicos e inorgânicos bem conhecidos na técnica e incluem, a título de exemplo apenas, de sódio, e similares; e quando a molécula contém uma funcionalidade básica, sais de ácidos orgânicos ou inorgânicos, como cloridrato, e similares.

[0020] O termo "ingrediente farmacêutico ativo" (IFA) refere-se a uma substância ou mistura de substâncias destinada a ser utilizada na fabricação de um produto farmacêutico e que, quando usada na produção de um medicamento, torna-se um ingrediente ativo no produto farmacêutico. Tais substâncias são pretendidas para fornecer atividade farmacológica ou outro efeito direto no diagnóstico, cura, mitigação, tratamento ou prevenção de doença ou para afetar a estrutura e a função do corpo.

[0021] "Intervalo de dosagem" neste pedido significa o período de tempo entre as administrações de uma composição a um paciente. Por exemplo, se um fármaco é administrado a um paciente a cada 8 horas, então o intervalo de dosagem é o período de 8 horas após a administração do fármaco. A condição "durante o intervalo de dosagem inteiro" será considerada como atendida se o teor de sulfassalazina for igual a ou maior que o teor designado no final do intervalo de dosagem (mas antes de qualquer administração seguinte da sulfassalazina).

[0022] "Biodisponibilidade" refere-se à porcentagem de uma dose de um fármaco que entra na circulação quando aquela dose do fármaco é administrada oralmente a um ser humano, roedor ou outro animal.

[0023] "Excipiente" é um material usado nas composições do presente pedido, e pode ser materiais sólidos, semissólidos ou líquidos que servem como veículos, carreadores ou meio para o composto ativo, como a sulfassalazina. Os excipientes típicos podem ser encontrados em "Remington: The Science and Practice of Pharmacy", A. Gennaro, ed., 20ª Edição, Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, Pa., EUA; "Handbook of Pharmaceutical Excipients" de autoria de Raymond C. Rowe et al. 7ª Edição, Pharmaceutical Press, Londres, Reino Unido e

"The United States Pharmacopeia and National Formulary" (USP-NF), Rockville, MD, EUA. Os excipientes podem incluir polímeros farmaceuticamente aceitáveis.

[0024] "Esclerose múltipla progressiva" ou "P-MS" refere-se a todos os subtipos de esclerose múltipla progressiva caracterizados pela acumulação crônica de incapacidade, que são esclerose múltipla progressiva primária (PP- MS), esclerose múltipla progressiva secundária (PS-MS) e esclerose múltipla reincidente progressiva (RP-MS).

[0025] "Solvato" refere-se a um complexo formado pela combinação de moléculas de solvente com moléculas ou íons do soluto. O solvente pode ser um composto orgânico, um composto inorgânico, ou uma mistura de ambos. Alguns exemplos de solventes incluem, mas não se limitam a, metanol, N,N- dimetilformamida, tetra-hidrofurano, sulfóxido dimetílico e água. Quando o solvente é água, o solvato formado é um hidrato.

[0026] "Estereoisômero" e "estereoisômeros" referem-se aos compostos que têm a mesma conectividade atômica mas diferentes disposições atômicas no espaço. Os estereoisômeros incluem isômeros cis-trans, isômeros E e Z, e enantiômeros, e diastereômeros.

[0027] "Tautômero" refere-se às formas alternativas de uma molécula que diferem apenas na ligação eletrônica dos átomos e/ou na posição de um próton, como tautômeros enol-ceto e imina-enamina, ou as formas tautoméricas de grupos heteroarila contendo uma disposição atômica -N=C(H)-NH- no anel, como pirazóis, imidazóis, benzimidazóis, triazóis, e tetrazóis. Uma pessoa comumente versada na técnica reconhecerá que são possíveis outras disposições tautoméricas dos grupos descritos na presente invenção.

[0028] Será entendido que o termo "ou um sal ou solvato ou estereoisômero do mesmo" se destina a incluir todas as permutações de sais, solvatos e estereoisômeros, como um solvato de um sal farmaceuticamente aceitável de um estereoisômero do presente composto. Entende-se que o termo "ou um sal do mesmo" se destina a incluir todas as permutações de sais. Entende-se que o termo "ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo" se destina a incluir todas as permutações de sais. Entende-se que o termo "ou um solvato do mesmo" se destina a incluir todas as permutações dos solvatos. Entende-se que o termo "ou um seu estereoisômero do mesmo" se destina a incluir todas as permutações de estereoisômeros. Entende-se que o termo "ou um tautômero do mesmo" se destina a incluir todas as permutações de tautômeros. Dessa forma, por exemplo, segue-se que é pretendido incluir um solvato de um sal farmaceuticamente aceitável de um tautômero de um estereoisômero do presente composto.

[0029] "Quantidade farmaceuticamente eficaz" e "quantidade terapeuticamente eficaz" referem-se a uma quantidade de um composto suficiente para tratar um distúrbio específico ou uma doença específica ou um ou mais de seus sintomas e/ou para prevenir a ocorrência da doença ou do distúrbio. Com referência aos distúrbios proliferativos tumorigênicos, uma quantidade farmacêutica ou terapeuticamente eficaz compreende uma quantidade suficiente para, dentre outras coisas, fazer com que o tumor se encolha ou decrescer a taxa de crescimento do tumor.

[0030] O termo "veículo" refere-se a um diluente, adjuvante, excipiente, ou carreador com o qual o composto da invenção é formulado para administração a um mamífero.

[0031] Para uso na presente invenção, o termo "cerca de" quando se refere a um valor mensurável como uma quantidade, uma duração temporal, e similares, significa que inclui variações de entre ± 20% e ± 0,1%, de preferência ± 20% ou ± 10%, com mais preferência ± 5%, com ainda mais preferência ± 1%, e com ainda muito mais preferência ± 0,1% do valor especificado, porque tais variações são adequadas para realizar os métodos revelados.

[0032] Quando uma faixa de valores é fornecida, entende-se que cada valor interveniente, até o décimo da unidade do limite inferior, a menos que o contexto determine claramente de outro modo, entre os limites superior e inferior daquela faixa também é especificamente revelado. Cada faixa menor entre qualquer valor declarado ou valor interveniente em uma faixa declarada e qualquer outro valor declarado ou interveniente naquela faixa declarada é incluída(o) dentro da invenção. Os limites superior e inferior destas faixas menores podem ser independentemente incluídos ou excluídos na faixa, e cada faixa onde qualquer um, nenhum ou ambos os limites estão incluídos nas faixas menores também é incluída na invenção, sujeitos a qualquer limite especificamente excluído na faixa declarada. Quando a faixa declarada inclui um ou ambos os limites, as faixas excluindo qualquer um ou ambos daqueles limites incluídos também são incluídas na invenção.

[0033] Exceto se definidos de outro modo, todos os termos técnicos e científicos usados na presente invenção têm o mesmo significado como comumente entendido por uma pessoa versada na técnica à qual pertence esta invenção. Embora quaisquer métodos e materiais similares ou equivalentes àqueles descritos na presente invenção possam ser usados na prática ou no teste da presente invenção, alguns métodos e materiais potenciais e preferenciais são agora descritos. Todas as publicações mencionadas na presente invenção são aqui incorporadas a título de referência para revelar e descrever os métodos e/ou materiais em relação aos quais as publicações são citadas. Entende-se que a presente revelação substitui qualquer revelação de uma publicação incorporada na medida em que haja uma contradição.

[0034] Deve ser notado que conforme usado na presente invenção e nas reivindicações em anexo, as formas no singular "um", "uma", "o" e "a" incluem as referências no plural a menos que o contexto claramente determine de outro modo. Dessa forma, por exemplo, referência a "um composto" inclui uma pluralidade de tais compostos e referência a "o método" inclui referência a um ou mais métodos e equivalentes dos mesmos conhecidos pelas pessoas versadas na técnica, e assim por diante.

[0035] As publicações discutidas na presente invenção são fornecidas apenas devido para sua revelação antes da data de depósito do presente pedido. Nada na presente invenção deve ser interpretado como uma admissão de que a presente invenção não tem o direito de anteceder tal publicação em virtude da invenção anterior. Adicionalmente, as datas da publicação fornecidas podem ser diferentes das datas de publicação reais que podem precisar ser independentemente confirmadas.

[0036] Antes de os presentes compostos e métodos serem descritos, deve ser entendido que esta invenção não se limita aos compostos e métodos específicos descritos, pois estes podem, obviamente, variar. Deve-se também entender que a terminologia usada na presente invenção tem o propósito apenas de descrever modalidades específicas, e não se destina a ser limitadora, pois o escopo da presente invenção será limitado apenas pelas reivindicações em anexo.

DESCRIÇÃO DETALHADA Composições de sal de sulfassalazina

[0037] Conforme resumido acima, a presente revelação refere-se a vários sais de sulfassalazina e às composições que incluem os mesmos. A sulfassalazina pode ser descrita pela seguinte estrutura que inclui um grupo piridila básico e um grupo salicílico ácido: .

[0038] A sulfassalazina (SSZ) pode existir em uma forma de ácida livre (por exemplo, como representado acima) como um sólido cristalino, mas tem solubilidade insuficiente na maioria dos solventes. Visto que a sulfassalazina inclui tanto um grupo básico quanto um grupo ácido, o composto pode ser zwiteriônico. Devido à natureza anfotérica da sulfassalazina, há uma possibilidade de a sulfassalazina formar sais com ácidos e também com bases. A presente revelação descreve os resultados de triagem para sais básicos (isto é, sal de SSZ incluindo um contra-ânion) e sais ácidos (isto é, sal de SSZ incluindo um contracátion) de sulfassalazina que fornecem uma ou mais propriedades desejáveis que são vantajosas no desenvolvimento e na preparação de composições farmacêuticas e métodos de uso das mesmas.

[0039] Aspectos da presente revelação incluem sais de sulfassalazina. Em alguns casos, os sais de sulfassalazina têm uma forma cristalina. Os sais cristalinos de sulfassalazina da presente invenção podem apresentar solubilidade em água aprimorada, por exemplo, em comparação com uma forma zwiteriônica ou de ácido livre de sulfassalazina. O termo "cristalino" e termos relacionados usados na presente invenção, quando usado(s) para descrever uma substância, componente ou produto, significa que a substância, componente ou produto é substancialmente cristalino(a) conforme determinado por difração de raios X, microscopia, microscopia polarizada, ou outros procedimentos analíticos conhecidos por aquelas pessoas versadas na técnica. Consulte, por exemplo, "Remington's Pharmaceutical Sciences", 18ª ed., Mack Publishing, Easton Pa., EUA, 173 (1990); "The United States Pharmacopeia", 23ª ed., 1843-1844 (1995). Em determinados casos, os sais cristalinos de sulfassalazina da presente invenção podem apresentar estabilidade no armazenamento, por exemplo, em comparação com uma forma zwiteriônica ou de ácido livre de sulfassalazina. Entende-se que formas cristalinas equivalentes às formas cristalinas descritas na presente invenção podem demonstrar características analíticas similares, porém não idênticas, dentro de uma faixa de erro razoável, dependendo das condições de teste, pureza, equipamento e outras variáveis comuns conhecidas por aquelas pessoas versadas na técnica ou relatados na literatura.

[0040] Em algumas modalidades, o sal da presente invenção é um sal básico farmaceuticamente aceitável de sulfassalazina e um ácido. Um sal básico de sulfassalazina é um no qual um grupo básico de sulfassalazina (por exemplo, o grupo piridil-N) é neutralizado com o ácido para formar um sal. Quaisquer ácidos convenientes podem ser úteis na preparação dos sais da presente invenção (por exemplo, conforme descritos na presente invenção). Em alguns casos, o ácido usado na preparação do sal da presente invenção é um ácido sulfônico orgânico. Um ácido sulfônico orgânico é um composto organossulfurado com a fórmula R- S(=O)2-OH onde R é um grupo contendo carbono orgânico, como um grupo alquila, um grupo alquila substituída, uma arila, uma arila substituída, uma heteroarila ou uma heteroarila substituída. Ácidos sulfônicos orgânicos que podem ser usados na preparação dos sais da presente invenção incluem, mas não se limitam a, ácido benzenossulfônico, ácido etanodissulfônico, ácido etanossulfônico, ácido metanossulfônico, ácido naftaleno-1,5-dissulfônico, e ácido p-toluenossulfônico. Em determinados casos, o ácido é ácido benzenossulfônico. Em determinados casos, o ácido é ácido etanodissulfônico. Em determinados casos, o ácido é ácido etanossulfônico. Em determinados casos, o ácido é ácido metanossulfônico. Em determinados casos, o ácido é ácido naftaleno-1,5-dissulfônico. Em determinados casos, o ácido é ácido p-toluenossulfônico. Entende-se que um sal básico de sulfassalazina e um ácido sulfônico orgânico pode também ser referido como um sal de sulfonato de sulfassalazina ou um sal de ácido sulfônico de sulfassalazina, e cujos termos são usados na presente invenção de modo intercambiável. Como tal,

em alguns casos, o sal é benzenossulfonato de sulfassalazina. Em determinadas modalidades, o sal básico de sulfassalazina é cristalino.

[0041] Em algumas modalidades, o sal cristalino é sal de sulfassalazina-ácido benzenossulfônico (1:1). O sal cristalino de sulfassalazina-ácido benzenossulfônico pode ter formas polimórficas específicas que são caracterizadas por um padrão de difração de raios X pelo método do pó. Em determinados casos, o sal cristalino de sulfassalazina-ácido benzenossulfônico é caracterizado por um padrão de difração de raios X conforme mostrado na Figura 1. Em determinados casos, o sal cristalino de sulfassalazina-ácido benzenossulfônico é caracterizado por ter um gráfico de calorimetria de varredura diferencial que compreende dois eventos endotérmicos com uma temperatura inicial de cerca de 196 °C e cerca de 204 °C quando aquecido de cerca de 25 °C a cerca de 300 °C.

[0042] As formas cristalinas dos sais da presente invenção podem ser caracterizadas com o uso de dados de cristal único, difração de raios X pelo método do pó (XRPD), calorimetria de varredura diferencial (DSC, "Differential Scanning Calorimetry"), e/ou análise termogravimétrica (TGA, "Thermogravimetric Analysis"). Deve ser entendido que os valores numéricos descritos e reivindicados na presente invenção são aproximados. A variação dentro dos valores pode ser atribuída à calibração do equipamento, aos erros do equipamento, à pureza dos materiais, ao tamanho dos cristais e ao tamanho da amostra, dentre outros fatores. Além disso, pode ser possível variação enquanto ainda se obtém o mesmo resultado. Por exemplo, os valores da difração de raios X são geralmente precisos dentro de +/- 0,2 grau e as intensidades (incluindo intensidades relativas) em um padrão de difração de raios X pode variar dependendo das condições de medição utilizadas. Similarmente, os resultados de DSC são tipicamente precisos dentro de 2 graus C. Consequentemente, deve ser entendido que as formas cristalinas da presente revelação não são limitadas às formas cristalinas que fornecem padrões de caracterização (isto é, um ou mais dentre XRPD, DSC, e TGA) completamente idênticos aos padrões de caracterização representados nas Figuras em anexo reveladas na presente invenção. Quaisquer formas cristalinas que forneçam padrões de caracterização substancialmente iguais àqueles descritos nas Figuras em anexo se enquadram no escopo da presente revelação. A capacidade de determinar substancialmente os mesmos padrões de caracterização está dentro da competência de um versado na técnica.

[0043] Em determinadas modalidades, o sal cristalino é um sal de ácido farmaceuticamente aceitável de sulfassalazina e uma base de amina orgânica, por exemplo, uma base orgânica de amina primário, secundária ou terciária. Quaisquer bases de amina orgânica convenientes podem encontrar uso nos sais cristalinos da presente invenção (por exemplo, conforme descritos na presente invenção). As bases de amina orgânica que encontram uso na preparação dos sais cristalinos da presente invenção incluem, mas não se limitam a, dietilamina, L-lisina, trietanolamina, trometamina, piperazina, benzatina, dietanolamina e L- arginina. Em determinadas modalidades, a base é selecionada dentre dietilamina, L-lisina, trietanolamina e trometamina. Em determinadas modalidades, a base é dietilamina. Em determinadas modalidades, a base é L-lisina. Em determinadas modalidades, a base é trietanolamina. Em determinadas modalidades, a base é trometamina. Em determinadas modalidades, a base é piperazina. Em determinadas modalidades, a base é benzatina. Em determinadas modalidades, a base é dietanolamina. Em determinadas modalidades, a base é L-arginina.

[0044] Em algumas modalidades, o sal cristalino é sal de sulfassalazina- dietilamina (1:1). Em determinados casos, o sal cristalino de sulfassalazina- dietilamina é caracterizado por um padrão de difração de raios X pelo método do pó conforme mostrado na Figura 4. Em determinados casos, o sal cristalino de sulfassalazina-dietilamina é caracterizado por ter um gráfico de calorimetria de varredura diferencial que compreende um evento endotérmico com uma temperatura inicial de cerca de 191 °C quando aquecido de cerca de 25 °C a cerca de 300 °C.

[0045] Em algumas modalidades, o sal cristalino é sal de sulfassalazina-L- lisina (1:1). Em determinados casos, o sal cristalino de sulfassalazina- L-lisina é caracterizado por um padrão de difração de raios X pelo método do pó conforme mostrado na Figura 5. Em determinados casos, o sal cristalino de sulfassalazina-L-lisina é caracterizado por ter um gráfico de calorimetria de varredura diferencial que não compreende eventos endotérmicos quando aquecido de cerca de 25 °C a cerca de 300 °C.

[0046] Em algumas modalidades, o sal cristalino é sal de sulfassalazina- trietanolamina (1:1). Em determinados casos, o sal cristalino de sulfassalazina- trietanolamina é caracterizado por um padrão de difração de raios X pelo método do pó conforme mostrado na Figura 6. Em determinados casos, o sal cristalino de sulfassalazina-trietanolamina é caracterizado por ter um gráfico de calorimetria de varredura diferencial que compreende um evento endotérmico com uma temperatura inicial de cerca de 154 °C quando aquecido de cerca de 25 °C a cerca de 300 °C.

[0047] Em algumas modalidades, o sal cristalino é sal de sulfassalazina- trometamina (1:1). Em determinados casos, o sal cristalino de sulfassalazina- trometamina é caracterizado por um padrão de difração de raios X pelo método do pó conforme mostrado na Figura 7. Em determinados casos, o sal cristalino de sulfassalazina-trometamina é caracterizado por ter um gráfico de calorimetria de varredura diferencial que compreende eventos endotérmicos com uma temperatura inicial de cerca de 67 °C e cerca de 123 °C, quando aquecido de cerca de 25 °C a cerca de 300 °C.

[0048] Aspectos da presente revelação incluem ingredientes farmacêuticos ativos que incluem um sal cristalino de sulfassalazina da presente invenção (por exemplo, conforme descrito na presente invenção). Um ingrediente farmacêutico ativo refere-se a uma composição adequada para a formulação de uma composição farmacêutica que inclui um sal cristalino de sulfassalazina (por exemplo, conforme descrito na presente invenção), por exemplo, produzido com o uso dos presentes métodos de preparação e opcionalmente submetido a uma ou mais etapas de purificação adicionais.

[0049] Em alguns casos, o sal de sulfassalazina da presente invenção fornece uma composição substancialmente não higroscópica. Uma forma sólida não higroscópica é desejável devido a uma variedade de razões incluindo, por exemplo, devido às preocupações de processamento e armazenamento. Em alguns casos, por "substancialmente não higroscópico" entende-se uma composição que absorve 1,0% em peso ou menos de água, 0,9% em peso ou menos de água, 0,8% em peso ou menos de água, 0,7% em peso ou menos de água, 0,6% em peso ou menos de água, 0,5% em peso ou menos de água, 0,4% em peso ou menos de água, 0,3% em peso ou menos de água, 0,2% em peso ou menos de água, 0,1% em peso ou menos de água, em umidade relativa (UR) de 90% após um ciclo de Sorção Dinâmica de Vapor (DVS), por exemplo, conforme descrito na presente invenção. Em determinados casos, um sal cristalino substancialmente não higroscópico pode apresentar um padrão de XRPD que não mostra alteração significativa na forma cristalina após um ciclo de Sorção Dinâmica de Vapor (DVS).

[0050] O sal de sulfassalazina da presente invenção pode fornecer solubilidade em água otimizada em relação a uma forma de controle conveniente de sulfassalazina, por exemplo, sulfassalazina em uma forma de ácido livre ou zwiteriônica. Por "solubilidade em água aprimorada" entende-se uma forma de sulfassalazina que apresenta uma solubilidade em uma solução aquosa de interesse, em uma quantidade estatisticamente significativa, e em alguns casos em 10% ou mais, como 20% ou mais, 30% ou mais, 40% ou mais, 50% ou mais, 60% ou mais, 70% ou mais, 80% ou mais, 90% ou mais, 100% ou mais, 200% ou mais, 500% ou mais, 600% ou mais, 700% ou mais, 800% ou mais, 900% ou mais, 1.000% ou mais, ou ainda mais, em relação à solubilidade de uma forma de controle (por exemplo, forma de ácido livre) de sulfassalazina. Quaisquer métodos convenientes podem ser utilizados para avaliar a solubilidade de sulfassalazina, incluindo mas não se limitando, àqueles métodos descritos na seção Experimental abaixo. Em algumas modalidades, o sal cristalino da presente invenção tem uma solubilidade de 0,1 mg/ml ou mais em um tampão aquoso a cerca de pH 7 e a cerca de 25°C, como uma solubilidade de 0,2 mg/ml ou mais, 0,3 mg/ml ou mais, 0,4 mg/ml ou mais, 0,5 mg/ml ou mais, 1 mg/ml ou mais, 2 mg/ml ou mais, 3 mg/ml ou mais, 4 mg/ml ou mais, 5 mg/ml ou mais, 6 mg/ml ou mais, 7 mg/ml ou mais, 8 mg/ml ou mais, 9 mg/ml ou mais, 10 mg/ml ou mais, 15 mg/ml ou mais, 20 mg/ml ou mais, ou ainda mais. Em algumas modalidades, o sal cristalino da presente invenção tem uma solubilidade de 0,1 mg/ml ou mais em uma solução aquosa (por exemplo, água) a cerca de 25°C, como uma solubilidade de 0,2 mg/ml ou mais, 0,3 mg/ml ou mais, 0,4 mg/ml ou mais, 0,5 mg/ml ou mais, 1 mg/ml ou mais, 2 mg/ml ou mais, 3 mg/ml ou mais, 4 mg/ml ou mais, 5 mg/ml ou mais, 6 mg/ml ou mais, 7 mg/ml ou mais, 8 mg/ml ou mais, 9 mg/ml ou mais, 10 mg/ml ou mais, 15 mg/ml ou mais, 20 mg/ml ou mais, ou ainda mais.

[0051] Em alguns casos, o de sal de sulfassalazina da presente invenção fornece uma composição que é estável. Por "estável" ou "estabilidade" entende-se uma composição que é quimicamente estável e/ou fisicamente estável sob condições de armazenamento de temperatura e umidade convencionais (por exemplo, conforme descrito na presente invenção, por exemplo, quando mantida a 25°C) durante um período prolongado de tempo. Por "período prolongado de tempo" entende-se 1 mês ou mais longo, como 2 meses ou mais longo, 3 meses ou mais longo, 4 meses ou mais longo, incluindo 6 meses ou mais longo, por exemplo, em 1 ano ou mais longo, 1,5 anos ou mais longo, etc. A estabilidade química refere-se à degradação pela qual é alterada a natureza química do agente ativo sulfassalazina ou do sal do mesmo, por exemplo, via degradação em para fragmentos e derivados estruturais inativos ou menos ativos do composto. O conteúdo e os teores de impurezas das composições quimicamente estáveis permaneceram inalterados sob armazenamento. A estabilidade física refere-se à degradação de uma característica física do sal, por exemplo, a forma cristalina (por exemplo, de um polimorfo) do sal altera-se de uma forma para outra forma, que em alguns casos pode ser menos quimicamente estável ou mais higroscópica.

[0052] Em alguns casos, o sal cristalino da presente invenção é polimorficamente estável. Em determinados casos, a estabilidade do sal polimórfico é tal que pelo menos 90% em peso do sal, como pelo menos 91% em peso, pelo menos 92% em peso, pelo menos 93% em peso, pelo menos 94% em peso, pelo menos 95% em peso, pelo menos 96% em peso, pelo menos 97% em peso, pelo menos 98% em peso, pelo menos 99% em peso, mantém sua forma cristalina após exposição a aproximadamente 40 °C e cerca de 75% durante 1 semana ou mais, como 2 semanas ou mais, 3 semanas ou mais, 4 semanas ou mais, 6 semanas ou mais, 2 meses ou mais, 3 meses ou mais, 4 meses ou mais, 5 meses ou mais, ou mesmo 6 meses ou mais.

[0053] Aspectos da presente revelação incluem as composições farmacêuticas que incluem um sal cristalino de sulfassalazina da presente invenção (por exemplo, conforme descrito na presente invenção) e um veículo farmaceuticamente aceitável. Em determinados casos, a composição farmacêutica da presente invenção é estável no armazenamento. Por "estável no armazenamento" entende- se que os sais e as composições podem ser armazenados durante períodos prolongados de tempo sem separação de fases e/ou redução significativa na atividade do agente ativo sulfassalazina. Em determinadas modalidades, os sais e as composições da presente invenção são estáveis durante 2 meses ou mais, como 3 meses ou mais, 4 meses ou mais, incluindo 6 meses ou mais, por exemplo, durante 1 ano ou mais, 1,5 anos ou mais, etc., quando mantidos a 25°C. Pela frase "sem redução significativa na atividade do agente ativo sulfassalazina" entende-se que no fim do período de armazenamento, há menos que cerca de 10% de redução na atividade do agente ativo sulfassalazina em comparação com o início do período de armazenamento, como uma redução de 9% ou menos, 8% ou menos, 7% ou menos, 6% ou menos, 5% ou menos, 4% ou menos, 3% ou menos, 2% ou menos, ou 1% ou menos na atividade. Em determinadas modalidades, as composições apresentam substancialmente nenhuma alteração na forma cristalina durante um período prolongado de tempo quando mantidas a 25°C, onde por "período prolongado de tempo" entende-se 1 mês ou mais longo, como 2 meses ou mais longo, 3 meses ou mais longo, 4 meses ou mais longo, incluindo 6 meses ou mais longo, por exemplo, em 1 ano ou mais longo, 1,5 anos ou mais longo, etc.

[0054] Em alguns casos, uma "composição estável no armazenamento" é uma composição que mantém um teor de sulfassalazina na composição de 95% ou mais em relação ao teor de sulfassalazina que está presente antes do armazenamento, após 1 semana ou mais de armazenamento a 40°C/umidade relativa (UR) de 75%, como um teor de sulfassalazina de 96% ou mais, 97% ou mais, 98% ou mais, ou 99% ou mais, em relação ao teor de sulfassalazina que está presente antes do armazenamento. Quaisquer métodos convenientes podem ser utilizados para determinar o teor de sulfassalazina, incluindo mas não se limitando aos métodos de análise de pureza por HPLC conforme descritos na seção Experimental abaixo.

[0055] Em algumas modalidades a composição da presente invenção é estável no armazenamento durante 2 semanas ou mais após o armazenamento a cerca de 40°C e umidade relativa (UR) a cerca de 75%, como 3 semanas ou mais, 4 semanas ou mais, 6 semanas ou mais, 2 meses ou mais, 3 meses ou mais, 4 meses ou mais, 5 meses ou mais, ou mesmo 6 meses ou mais, por exemplo, mantém um teor de sulfassalazina de 95% ou mais, 96% ou mais, 97% ou mais, 98% ou mais, ou 99% ou mais, em relação ao teor de sulfassalazina que está presente antes do armazenamento. Em alguns casos, a estabilidade no armazenamento refere-se à estabilidade química de sulfassalazina na composição. Em determinados casos, a estabilidade no armazenamento pode também se referir à estabilidade física da forma de sal cristalino de sulfassalazina, por exemplo, uma forma de sal cristalino de sulfassalazina que não retorna para a sulfassalazina ácida livre ou zwiteriônica.

[0056] Por "estabilidade aprimorada" entende-se uma composição que inclui uma forma de sulfassalazina que apresenta um aumento na estabilidade química do agente ativo sulfassalazina, em uma quantidade estatisticamente significativa, e em alguns casos em 10% ou mais, 20% ou mais como, 30% ou mais, 40% ou mais, 50% ou mais, 60% ou mais, 70% ou mais, 80% ou mais, 90% ou mais, 100% ou mais, ou ainda mais, em relação à meia-vida de uma forma de controle (por exemplo, forma de ácido livre) de sulfassalazina. Quaisquer métodos convenientes podem ser utilizados para avaliar a degradação de sulfassalazina, incluindo mas não se limitando aos métodos de análise de pureza por HPLC conforme descritos na seção Experimental abaixo.

[0057] Por "solubilidade em água aprimorada" entende-se uma forma de sulfassalazina que apresenta uma solubilidade em uma solução aquosa de interesse, em uma quantidade estatisticamente significativa, e em alguns casos em 10% ou mais, como 20% ou mais, 30% ou mais, 40% ou mais, 50% ou mais, 60% ou mais, 70% ou mais, 80% ou mais, 90% ou mais, 100% ou mais, 200% ou mais, 500% ou mais, 600% ou mais, 700% ou mais, 800% ou mais, 900% ou mais, 1.000% ou mais, ou ainda mais, em relação à solubilidade de uma forma de controle (por exemplo, forma de ácido livre) de sulfassalazina. Quaisquer métodos convenientes podem ser utilizados para avaliar a solubilidade de sulfassalazina, incluindo mas não se limitando, àqueles métodos descritos na seção Experimental abaixo.

[0058] Outros aspectos das composições farmacêuticas e dos métodos de uso das mesmas, da presente invenção, são descritos nas seções a seguir. Métodos de uso

[0059] As composições sulfassalazina descritas na presente invenção podem ser utilizadas em uma variedade de métodos. Aspectos da presente revelação incluem um método que inclui administrar a um indivíduo que necessita da mesma uma quantidade terapeuticamente eficaz de um sal de sulfassalazina ou de uma composição farmacêutica (por exemplo, conforme descrita na presente invenção) para tratar ou evitar uma doença ou condição de interesse. Por "quantidade terapeuticamente eficaz" entende-se a concentração de um composto que é suficiente para obter o efeito biológico desejado (por exemplo, tratamento ou prevenção de epilepsia). Quaisquer doenças e indicações convenientes de interesse nas quais a sulfassalazina encontra uso em tratamento podem ser selecionadas de acordo com os métodos da presente invenção. As doenças e condições exemplificadoras de interesse que podem ser selecionadas para o tratamento de acordo com os métodos da presente invenção incluem, mas não se limitam a, doenças neurologicamente relacionadas (por exemplo, epilepsia), doenças neurodegenerativas, condições inflamatórias e cânceres.

[0060] Os termos "tratamento", "tratando (tratar)" e similares, referem-se à obtenção de um efeito farmacológico e/ou fisiológico. O efeito pode ser profilático em termos de prevenção completa ou parcial de uma doença ou de um sintoma da mesma e/ou pode ser terapêutico em termos de uma cura parcial ou completa para uma doença e/ou um efeito adverso atribuível à doença.

Para uso na presente invenção, os termos "tratando (tratar)", "tratamento", "terapêutico", ou "terapia" não significam necessariamente cura ou supressão total da doença ou condição.

Qualquer alívio de quaisquer sinais ou sintomas indesejados de uma doença ou condição, em qualquer extensão, pode ser considerado tratamento e/ou terapia.

Além disso, o tratamento pode incluir ações que podem piorar a sensação geral de bem-estar ou aparência do paciente. "Tratamento", como usado na presente invenção, abrange qualquer tratamento de uma doença em um mamífero, em alguns casos em um ser humano, e inclui: (a) prevenir a ocorrência da doença ou condição médica, como, tratamento profilático de um indivíduo; (b) atenuar a doença ou condição médica, como, eliminar ou causar a regressão da doença ou condição médica em um paciente; (c) suprimir a doença ou condição médica, por exemplo, por retardação ou parada do desenvolvimento da doença ou condição médica em um paciente; ou (d) aliviar um sintoma da doença ou condição médica em um paciente.

Em alguns casos, o método retarda a ocorrência de um sintoma associado à doença.

Em determinados casos, o método reduz a magnitude de um sintoma associado à doença.

Em alguns casos, tratar ou tratamento inclui um ou mais dentre (1) limitar, inibir ou reduzir a taxa de acumulação de incapacidade e/ou a perda de função neuronal motora; (2) retardar a progressão da doença, como dor neuropática, dor neuropática que resulta de neuropatia diabética dolorosa, ou dor neuropática que se manifesta como distesia, ou dor neuropática que se manifesta como alodinia; artrite reumatoide ou espondilite anquilosante; epilepsias e distúrbios convulsivos, P-MS ou ALS; (3) limitar, inibir ou reduzir a disfunção neuronal e/ou atrofia muscular, (4) limitar ou parar o seu desenvolvimento, (5) aliviar a doença, isto é., causar a regressão de epilepsias e distúrbios convulsivos,

P-MS ou ALS; (6) reduzir ou prevenir a recorrência da acumulação de incapacidade e/ou a perda de função neuronal motora; (7) reduzir ou prevenir a recorrência de disfunção neuronal e/ou atrofia muscular; (8) mitigar os sintomas da doença, (9) aumentar a sobrevida após o início de epilepsias e distúrbios convulsivos, P-MS ou ALS; e/ou, (10) atenuar neuroinflamação.

[0061] Doenças neurologicamente relacionadas de interesse que podem ser selecionadas para tratamento de acordo com os métodos da presente invenção incluem, mas não se limitam a, epilepsia, como subtipos graves de epilepsia e/ou epilepsia refratária, por exemplo síndrome de Dravet, síndroma de Lennox- Gastaut, síndrome de Doose, síndrome de West, e/ou outros formas de epilepsia refratária. Há um vasto número de subtipos de epilepsia. Embora todas as formas de epilepsia sejam angustiantes, alguns subtipos de epilepsia são mais graves do que outros. Por "grave" ou "refratária", é feita referência, por exemplo, a subtipos de epilepsia que são intratáveis e/ou que são caracterizados por episódios de status epilepticus. Em algumas modalidades, o indivíduo é diagnosticado como tendo convulsões intratáveis. As convulsões intratáveis são aquelas que falham em estar sob controle com o tratamento. Estas convulsões são algumas vezes também chamadas de "descontroladas" ou "refratárias". Subtipos de epilepsia que podem ser selecionados para tratamento de acordo com os métodos da presente invenção incluem, mas não se limitam a, síndrome de Dravet, síndroma de Lennox-Gastaut, síndrome de Doose, síndrome de West, e/ou outros tipos de epilepsia refratária. Em determinados casos, o indivíduo sofre de uma epilepsia refratária, como síndrome de Angelman, epilepsia rolândica benigna, distúrbio de CDKL5, epilepsia de ausência infantil e juvenil, síndrome de Doose, síndrome de Dravet, epilepsia com ausências mioclônicas, síndrome de deficiência de Glut1, espasmos infantis e síndrome de West, epilepsia mioclônica juvenil, epilepsia mioclônica progressiva de Lafora,

síndrome de Landau-Kleffner, síndrome de Lennox-Gastaut, síndrome de Ohtahara, síndrome de Panayiotopoulos, epilepsia PCDH19, síndrome de Rasmussen, síndrome do cromossomo 20 em anel, epilepsias reflexas, síndrome de deficiência intelectual relacionada à mutação no gene TBCK ("TBCK-related ID Syndrome"), hamartoma hipotalâmico, epilepsia do lobo frontal, epilepsia com convulsões tônico-clônicas generalizadas isoladas, epilepsias mioclônicas progressivas, epilepsia do lobo temporal, complexo de esclerose tuberosa, displasia cortical focal e encefalopatias epilépticas. Em um outro aspecto do método, a doença convulsiva ou o distúrbio convulsivo é selecionada(o) do grupo que consiste em epilepsia de ausência infantil e juvenil, espasmos infantis e síndrome de West, epilepsia mioclônica juvenil, epilepsia do lobo frontal, epilepsia com convulsões tônico-clônicas generalizadas isoladas, epilepsias mioclônicas progressivas, epilepsia do lobo temporal, complexo de esclerose tuberosa, síndrome de Rasmussen, hamartoma hipotalâmico, displasia cortical focal, encefalopatias epilépticas, e tumores associados à epilepsia de longa duração (LEATs), por exemplo, ganglioglioma, oligodendroglioma, e tumores neuroepiteliais desimbrioplásicos (DNETs).

[0062] Em determinadas modalidades, os métodos de tratamento da presente invenção que usam uma composição de sal de sulfassalazina podem significativamente: (1) reduzir os níveis de células neuroinflamatórias na medula espinhal de um indivíduo, incluindo tanto micróglia ativada quanto astrócitos ativados, (2) aumentar a sobrevida absoluta e a sobrevida após o início da doença neurológica definitiva; e/ou (3) prevenir a desmielinização em neurite óptica. Em determinados casos, o método é realizado em um modelo de neurodegeneração em camundongo.

[0063] As doenças neurodegenerativas que podem ser selecionadas para tratamento de acordo com os métodos da presente invenção incluem, mas não se limitam a, doença de Alexander, doença de Alzheimer (AD), demência frontotemporal, demência associada como HIV, e outras demências, esclerose lateral amiotrófica, epilepsia, doença de Huntington (HD), acidente vascular cerebral, doenças neuronais motoras (MND), dor neuropática, doença de Parkinson (PD) e distúrbios relacionados com PD, doença de príons, síndrome de Rett, atrofia muscular espinhal (SMA), ataxia espinocerebelar (SCA), lesão cerebral traumática, e esclerose tuberosa. Em alguns casos, a doença neurodegenerativa ou o distúrbio neurodegenerativo é esclerose múltipla progressiva (P-EM), esclerose lateral amiotrófica (ALS), ou é dor neuropática

[0064] as doenças e condições inflamatórias que podem ser selecionadas para o tratamento de acordo com os métodos da presente invenção incluem, mas não se limitam a, doenças inflamatórias intestinais, como colite ulcerativa e doença de Crohn, doenças de artrite inflamatória como espondilite anquilosante, artrite reumatoide e artrite psoriática. Em determinados casos, o sal e as composições da presente invenção encontram uso no tratamento de uma doença ou condição inflamatória como artrite reumatoide.

[0065] Cânceres de interesse que podem ser selecionados para o tratamento de acordo com os métodos da presente invenção incluem, mas não se limitam a, tumores gliais, glioblastoma, linfoma, câncer pancreático, etc.

[0066] Em algumas modalidades, a composição é administrada em uma dosagem e/ou frequência eficaz para reduzir a ocorrência de efeitos colaterais da sulfassalazina. Tais efeitos colaterais podem incluir perda de apetite, náusea, cefaleia, erupção cutânea, supressão da medula óssea, problemas hepáticos, e problemas renais.

[0067] Um desafio no tratamento de várias doenças de interesse (por exemplo, conforme descritas na presente invenção) com composições farmacêuticas que compreendem sulfassalazina é a biodisponibilidade oral insuficiente das formulações convencionais de sulfassalazina. Por exemplo, apenas 15% da sulfassalazina em uma dose oralmente administrada de "Azulfidina" é absorvida pela corrente sanguínea (consultar Rótulo dos Comprimidos de Sulfassalazina "Azulfidina", LAB 0241-3.0, revisado em Outubro 2009). Em geral, devido ao fato de o teor de sulfassalazina no local de ação relevante para a doença de interesse (por exemplo, conforme descrita na presente invenção) ser proporcional à quantidade de sulfassalazina no plasma, a biodisponibilidade insuficiente da formulação convencional de sulfassalazina limita a quantidade de sulfassalazina que alcança algumas locais de ação. Por exemplo, em doenças neurodegenerativas de interesse, o local de ação pode ser a medula espinhal. Dessa forma, o uso de uma formulação convencional de sulfassalazina para tratar uma doença de interesse (por exemplo, uma doença neurológica ou neurodegenerativa) exigiria que fossem administradas doses orais grandes de sulfassalazina. Isto poderia expor os pacientes a altos teores de sulfassalazina no trato gastrointestinal e geraria altos teores de sulfapiridina no plasma, aumentando, assim, a toxicidade potencial e os efeitos colaterais potenciais. A sulfapiridina foi usada na década de 1940 na década de 1950 como um agente antibacteriano em seres humanos e é um membro da classe de fármacos de sulfa. Ela causa reações alérgicas em 3 a 8% dos pacientes recipientes conforme relatado em análises médicas, que se manifestam sob a forma de prurido, erupções cutâneas vermelhas, urticárias ou vergões, inchaço na garganta, vômito, cãibra estomacal, diarreia e, em alguns casos, síndrome de Stevens-Johnson. Agranulocitose é um efeito colateral raro, mas grave, da sulfapiridina, que aumenta o risco de infecções sistêmicas.

[0068] A presente revelação aborda estes problemas, dentre outros, para oferecer uma biodisponibilidade oral aprimorada de sulfassalazina usando as composições da presente invenção para o tratamento de qualquer uma das doenças de interesse (por exemplo, conforme descritas na presente invenção). O aumento de tal biodisponibilidade permitiria que os níveis de dosagem de sulfassalazina fossem mais baixos, com o benefício adicional de limitar a exposição gastrointestinal à sulfassalazina e a exposição sistêmica à sulfapiridina. Em um aspecto, é fornecido um método para limitar a exposição gastrointestinal à sulfassalazina e a exposição sistêmica à sulfapiridina pela administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição farmacêutica conforme revelada na presente invenção. As formulações reveladas na presente invenção podem aumentar o índice terapêutico da sulfassalazina no tratamento de qualquer doença conveniente. O pedido fornece métodos de tratamento de várias doenças e de vários distúrbios usando as composições nas quais a solubilidade e/ou a biodisponibilidade de sulfassalazina foi aumentada.

[0069] Aspectos dos métodos da presente invenção incluem a coadministração do sal de sulfassalazina da presente invenção com um inibidor de ABCG2 que pode fornecer propriedades farmacocinéticas in vivo desejáveis do agente ativo sulfassalazina. A coadministração se destina a incluir a administração simultânea ou sequencial do sal de sulfassalazina da presente invenção com um inibidor de ABCG2. Desta forma, o inibidor de ABCG2 pode ser administrado como parte da mesma composição que o sal de sulfassalazina ou administrado separadamente. Em determinadas modalidades, são fornecidos métodos para tratar uma doença ou distúrbio (por exemplo, conforme descrito na presente invenção) em um paciente que compreende administrar oralmente ao paciente uma ou mais composição(ões) farmacêutica(s) que compreende(m) uma quantidade terapeuticamente eficaz de sal de sulfassalazina (por exemplo, conforme descrito na presente invenção) e, quer separadamente ou quer juntamente, um inibidor de ABCG2. Em algumas modalidades, o método compreende administrar oralmente ao paciente que necessita da mesma uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de sal de sulfassalazina, um inibidor de ABCG2, opcionalmente um polímero, e um excipiente farmaceuticamente aceitável, sendo que a doença ou o distúrbio é uma doença neurologicamente relacionada, uma doença neurodegenerativa, uma condição inflamatória e câncer (por exemplo, conforme descrito na presente invenção).

[0070] O termo inibidor de ABCG2 é um acrônimo para o membro 2 da subfamília G de transportadores de cassetes de ligação de ATP ("ATP-Binding Cassette sub-family G member 2"). O membro 2 da subfamília G de transportadores de cassetes de ligação de ATP é uma proteína que em seres humanos é codificada pelo geneABCG2, consulte Allikmets R, et al. Hum Mol Genet.5: 1649–55 (1997) e Doyle L. et al. Proc Natl Acad Sci U S A. 95: 15665– 70 (1999). ABCG2 também tem sido designado como CDw338 (agrupamento de diferenciação w338). A proteína associada à membrana codificada por este gene está incluída na superfamília de transportadores de cassetes de ligação de ATP (ABC, "ATP-Binding Cassette"). As proteínas ABC transportam várias moléculas através das membranas extracelular e intracelular. Os genes ABC são divididos em sete subfamílias diferentes (ABC1, MDR/TAP, MRP, ALD, OABP, GCN20, White). A proteína ABCG2 é um membro da subfamília White. Alternativamente chamada de Proteína de Resistência do Câncer de Mama, esta proteína funciona como um transportador de xenobióticos que pode desempenhar uma função de resistência a multifármacos como agentes quimioterápicos incluindo análogos de camptotecina e mitoxantrona.

[0071] Exemplos de inibidores de ABCG2 que podem encontrar uso nos métodos e nas composições da presente invenção incluem, mas não se limitam a, N-[4-[2-(3,4-Di-hidro-6,7-dimetoxi-2(1H)-isoquinolinil)etil]fenil]-9,10- di-hidro-5-metoxi-9-oxo-4-acridinacarboxamida (elecridar); 2-cloro-N-(4-cloro-3- (piridin-2-il)fenil)-4-(metilsulfonil)benzamida (HhAntag691); éster 1,1-

dimetiletílico de ácido (3S,6S,12aS)-1,2,3,4,6,7,12,12a-octa-hidro-9-metoxi-6- (2-metilpropil)-1,4-dioxopirazino[1',2':1,6]pirido[3,4-b]indol-3-propanoico (raltegravir); N-(4-cetil-3-((4-(piridin-3-il)pirimidin-2-il)amino)fenil)-4-((4- metilpiperazin-1-il)metil)benzamida (imatinibe); Fumitremorgin C; 4-[4-[[4-cloro- 3-(trifluorometil)fenil]carbamoilamino]fenoxi]-N-metilpiridina-2-carboxamida; ácido 4-metilbenzenossulfônico (sorafenibe); (1E,6E)-1,7-bis (4-hidroxi-3- metoxifenil)-1,6-heptadieno-3,5-diona (curcumina) e Catomicina sódica. Em alguns casos, a composição farmacêutica da presente invenção pode incluir um polímero. O polímero usado pode ser biocompatível, farmaceuticamente aceitável e solúvel em água. O polímero pode ser um copolímero de vinilpirrolidona com acetato de vinila e como tal pode ser qualquer polímero de PVP VA que é solúvel em água incluindo PVP VA64.

[0072] Em alguns casos, o inibidor de ABCG2 é selecionado do grupo que consiste em succinato de poli(glicol etilênico)-e-tocoferila (TPGS), polissorbato (Tween) e Pluronic. Em determinados aspectos, o inibidor de ABCG2 é TPGS. Em alguns casos, o inibidor de ABCG2 é um composto não iônico. Em determinados casos, o inibidor de ABCG2 é um composto GRAS. Em alguns casos, o inibidor de ABCG2 é selecionado do grupo que consiste em TPGS, Tocophersolan (por exemplo, TPGS), e polissorbato, polissorbato-20 (Tween-20), Brij30, Cremphor EL, e compostos Pluronic, Pluronic P85 e Pluronic L21. Em alguns aspectos, a formulação farmacêutica é uma formulação de dose sólida, sendo que a formulação compreende um polímero selecionado dentre PVP VA64 ou HPMCAS. Em um outro aspecto, a formulação farmacêutica é uma formulação líquida que não compreende um polímero como PVP VA64 ou HPMCAS. Em alguns aspectos, a formulação compreende entre 1 mg e 500 mg do inibidor de ABCG2, como TPGS por dose, como 10 mg, 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg ou 500 mg. Em alguns aspectos, a razão entre sulfassalazina e PVP VA64 ou HPMCAS na composição farmacêutica é de cerca de 20:80 peso/peso a 50:50 peso/peso, ou cerca de 25:75 peso/peso. Em um outro aspecto, a solubilidade in vitro do sal de sulfassalazina é pelo menos 500 µg/ml. Em ainda um outro aspecto, a solubilidade in vitro do sal de sulfassalazina está entre cerca de 500 µg/ml e 11.500 µg/ml.

[0073] Em determinadas modalidades, as composições farmacêuticas da presente invenção compreendem sal de sulfassalazina (por exemplo, conforme descrito na presente invenção) e um inibidor do transportador de efluxo de ABCG2 (isto é, inibidores de efluxo de ABCG2 ou inibidores de ABCG2). Em alguns casos, as composições podem ser usadas para tratar doenças neurodegenerativas e distúrbios neurodegenerativos. Em um aspecto, o inibidor de efluxo de ABCG2 é selecionado do grupo que consiste em Pluronic P85, Tween 20, E-TPGS (TPGS), Pluronic 85, Brij 30, Pluronic L81, Tween 80 e PEO- PPO, ou misturas dos mesmos. Em um outro aspecto, o inibidor de ABCG2 é TPGS ou de Tween 20, ou uma mistura dos mesmos. Em um outro aspecto, o inibidor de ABCG2 de é TPGS. Em uma variação, a composição compreende um inibidor de ABCG2, ou uma mistura de dois ou mais inibidores de ABCG2.

[0074] As composições e os métodos da presente invenção podem fornecer propriedades farmacocinéticas e parâmetros farmacocinéticos do ativo sulfassalazina. Dependendo da aplicação, as formulações farmacêuticas com Cmáx, Tmáx, T1/2, e/ou biodisponibilidade aprimorados ou equivalentes podem ser utilizadas nos métodos da presente invenção. Os perfis farmacocinéticos da formulação da presente invenção podem ter perfis farmacocinéticos onde um ou mais parâmetros farmacocinéticos são aprimorados em comparação com os parâmetros farmacocinéticos vistos com uma formulação idêntica preparada com uma quantidade molar igual de forma zwiteriônica ou de base livre de sulfassalazina. Os parâmetros farmacocinéticos que são úteis para comparar formulações incluem a concentração terapêutica sanguínea máxima (Cmáx), o tempo para alcançar a Cmáx (Tmáx), o tempo para alcançar uma concentração sanguínea de 1/2 da Cmáx (T1/2) e a biodisponibilidade (BD). A BD pode ser medida pela determinação de uma área sob a curva (ASC) de um gráfico de concentração terapêutica sanguínea em função do tempo. Para análise comparativa entre composições farmacêuticas, os parâmetros farmacocinéticos podem ser comparados individualmente, ou em várias combinações.

[0075] Em determinadas modalidades, a presença de um inibidor de ABCG2 aumenta a biodisponibilidade oral de sulfassalazina em pelo menos 25%, pelo menos 50%, pelo menos 100%, pelo menos 150%, pelo menos 200%, pelo menos 250%, ou pelo menos 300% mais alta do que nível plasmático de sulfassalazina após a administração do mesmo nível de dose de uma amostra de controle de sulfassalazina, conforme medido no plasma sanguíneo. Em uma modalidade, as composições compreendendo sulfassalazina e o inibidor de ABCG2 são uma dose oral sólida. Em outras modalidades, a sulfassalazina e o inibidor de ABCG2 compreende uma suspensão ou solução líquida. Em determinadas modalidades, o inibidor de ABCG2 compreende 0,01% a 90%, como 0,01% ou mais em peso, como 0,05% ou mais, 0,1% ou mais, 0,5% ou mais, 1% ou mais, 5% ou mais, 10% ou mais, 20% ou mais, 30% ou mais, 40% ou mais ou 50% ou mais em peso da composição farmacêutica total. Em determinadas modalidades, o inibidor de ABCG2 compreende 0,01% a 200% em peso relativo ao sal de sulfassalazina, como 0,01%, 0,05%, 0,1%, 0,5%, 1%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40% e 50% em peso relativo ao sal de sulfassalazina (isto é, inibidor de ABCG2:sal de sulfassalazina) na composição terapêutica.

[0076] As doenças neurológicas relacionadas de interesse que podem ser alvo do tratamento de acordo com os presentes métodos que envolvem a coadministração do sal de sulfassalazina da presente invenção com um inibidor de ABCG2 incluem, mas não se limitam a, epilepsia, como subtipos graves de epilepsia e/ou epilepsia refratária, por exemplo, síndrome de Dravet, síndrome de Lennox-Gastaut, síndrome de Doose, síndrome de West, e/ou outras formas de epilepsia refratária, como síndrome de Angelman, epilepsia rolândica benigna, distúrbio de CDKL5, epilepsia de ausência infantil e juvenil, síndrome de Doose, síndrome de Dravet, epilepsia com ausências mioclônicas, síndrome de deficiência de Glut1, espasmos infantis e síndrome de West, epilepsia mioclônica juvenil, epilepsia mioclônica progressiva de Lafora, síndrome de Landau-Kleffner, síndrome de Lennox-Gastaut, síndrome de Ohtahara, síndrome de Panayiotopoulos, epilepsia PCDH19, síndrome de Rasmussen, síndrome do cromossomo 20 em anel, epilepsias reflexas, síndrome de deficiência intelectual relacionada à mutação no gene TBCK ("TBCK-related ID Syndrome"), hamartoma hipotalâmico, epilepsia do lobo frontal, epilepsia com convulsões tônico-clônicas generalizadas isoladas, epilepsias mioclônicas progressivas, epilepsia do lobo temporal, complexo de esclerose tuberosa, displasia cortical focal e encefalopatias epilépticas. Em um outro aspecto do método, a doença convulsiva ou o distúrbio convulsivo é selecionada(o) do grupo que consiste em epilepsia de ausência infantil e juvenil, espasmos infantis e síndrome de West, epilepsia mioclônica juvenil, epilepsia do lobo frontal, epilepsia com convulsões tônico- clônicas generalizadas isoladas, epilepsias mioclônicas progressivas, epilepsia do lobo temporal, complexo de esclerose tuberosa, síndrome de Rasmussen, hamartoma hipotalâmico, displasia cortical focal e encefalopatias epilépticas.

[0077] As doenças neurodegenerativas que podem ser alvo do tratamento de acordo com os métodos da presente invenção que envolvem a coadministração do sal de sulfassalazina da presente invenção com um inibidor de ABCG2 incluem, mas não se limitam a, doença de Alexander, doença de Alzheimer (AD), demência frontotemporal, demência associada ao HIV, e outras demências, esclerose lateral amiotrófica, epilepsia, doença de Huntington (HD),

acidente vascular cerebral, doenças neuronais motoras (MND), dor neuropática, doença de Parkinson (PD) e distúrbios relacionados com PD, doença de príons, síndrome de Rett, atrofia muscular espinhal (SMA), ataxia espinocerebelar (SCA), lesão cerebral traumática, esclerose tuberosa, esclerose múltipla progressiva (P-MS), esclerose lateral amiotrófica (ALS); e dor neuropática.

[0078] As doenças e condições inflamatórias que podem ser alvo do tratamento de acordo com os métodos da presente invenção que envolve a coadministração do sal de sulfassalazina da presente invenção com um inibidor de ABCG2 incluem, mas não se limitam a, doenças inflamatórias intestinais, como colite ulcerativa e doença de Crohn, doenças de artrite inflamatória como espondilite anquilosante, artrite reumatoide e artrite psoriática.

[0079] Cânceres de interesse que podem ser alvo do tratamento de acordo com os métodos da presente invenção que envolve a coadministração do sal de sulfassalazina da presente invenção com um inibidor de ABCG2 incluem, mas não se limitam a, tumores gliais, glioblastoma, linfoma, câncer pancreático, etc.

[0080] Em algumas modalidades do método da presente invenção que envolve a coadministração do sal de sulfassalazina da presente com um inibidor de ABCG2, a doença convulsiva ou o distúrbio convulsivo é selecionado(a) do grupo que consiste em síndrome de Angelman, epilepsia rolândica benigna, distúrbio CDKL5, epilepsia de ausência infantil e juvenil, síndrome de Doose, síndrome de Dravet, epilepsia com ausências mioclônicas, síndrome de deficiência de Glut1, espasmos infantis e síndrome de West, epilepsia mioclônica juvenil, epilepsia mioclônica progressiva de Lafora, síndrome de Landau-Kleffner, síndrome de Lennox-Gastaut, síndrome de Ohtahara, síndrome de Panayiotopoulos, epilepsia PCDH19, síndrome de Rasmussen, síndrome do cromossomo 20 em anel, epilepsias reflexas, síndrome de deficiência intelectual relacionada à mutação no gene TBCK ("TBCK-related ID Syndrome"), hamartoma hipotalâmico, epilepsia do lobo frontal, epilepsia com convulsões tônico-clônicas generalizadas isoladas, epilepsias mioclônicas progressivas, epilepsia do lobo temporal, complexo de esclerose tuberosa, displasia cortical focal e encefalopatias epilépticas. Em um outro aspecto do método, a doença convulsiva ou o distúrbio convulsivo é selecionada(o) do grupo que consiste em epilepsia de ausência infantil e juvenil, espasmos infantis e síndrome de West, epilepsia mioclônica juvenil, epilepsia do lobo frontal, epilepsia com convulsões tônico-clônicas generalizadas isoladas, epilepsias mioclônicas progressivas, epilepsia do lobo temporal, complexo de esclerose tuberosa, síndrome de Rasmussen, hamartoma hipotalâmico, displasia cortical focal, encefalopatias epilépticas, e tumores associados à epilepsia de longa duração (LEATs), por exemplo, ganglioglioma, oligodendroglioma, e tumores neuroepiteliais desimbrioplásicos (DNETs).

[0081] Em alguns aspectos dos métodos da presente invenção que envolvem a coadministração do sal de sulfassalazina com um inibidor de ABCG2, a doença neurodegenerativa é selecionada dentre esclerose múltipla progressiva e outras doenças desmielinizantes, que incluem, mas não se limitam a, encefalomielite disseminada aguda, adrenoleucodistrofia, adrenomieloneuropatia, neuropatia axonal crônica, polineuropatia desmielinizante inflamatória crônica ou CIDP ("Chronic Inflammatory Demyelinating Polyneuropathy"), polineuropatia recidivante crônica, doença de Devic, síndrome de Guillian-Barré, CIPD induzida por HIV, neuropatia óptica hereditária de Leber, variante de CIDP (síndrome de Lewis-Summer), neuropatia desmielinizante sensitivo-motora multifocal adquirida, neuropatia motora multifocal, neuromielite óptica, neurite óptica, neuropatia desmielinizante paraproteinêmica, paraparesia espástica tropical, esclerose lateral amiotrófica, doença de Alzheimer, doença de Parkinson, epilepsia e outros distúrbios convulsivos, que incluem, mas não se limitam a, síndrome de Angelman,

epilepsia rolândica benigna, distúrbio de CDKL5, epilepsia de ausência mioclônica infantil e juvenil, síndrome de Doose, síndrome de Dravet, epilepsia com ausências mioclônicas, síndrome de deficiência de Glut1, espasmos infantis e síndrome de West, epilepsia mioclônica juvenil, epilepsia mioclônica progressiva de Lafora, síndrome de Landau-Kleffner, síndrome de Lennox- Gastaut, síndrome de Ohtahara, síndrome de Panayiotopoulos, epilepsia PCDH19, síndrome de Rasmussen, síndrome do cromossomo 20 em anel, epilepsias reflexas, síndrome de deficiência intelectual relacionada à mutação no gene TBCK ("TBCK-related ID Syndrome"), hamartoma hipotalâmico, epilepsia do lobo frontal, epilepsia com convulsões tônico-clônicas generalizadas isoladas, epilepsias mioclônicas progressivas, epilepsia do lobo temporal, encefalopatias epilépticas, displasia cortical focal, e complexo de esclerose tuberosa, dor neuropática, doença de Huntington, acidente vascular cerebral, lesão cerebral traumática, concussão, síndrome de Rett, demência frontotemporal, demência associada ao HIV e doença de Alexander.

[0082] Em determinadas modalidades, o presente pedido revela composições farmacêuticas que compreendem sulfassalazina em uma formulação adequada para dosagem intravenosa (IV). Em um aspecto, a formulação IV contém um inibidor de ABCG2. Estas formulações são adequadas para tratamento de cuidado agudo, especialmente para o tratamento de acidente vascular cerebral isquêmico, lesão cerebral traumática, epilepsia e doenças desmielinizantes.

[0083] Em algumas modalidades, é administrada uma dose única do composto da presente invenção. Em outras modalidades, são administradas múltiplas doses do composto da presente invenção. Se múltiplas doses são administradas ao longo de um período de tempo, o composto da presente invenção é administrado duas vezes por dia (qid), diariamente (qd), a cada dois dias (qod), a cada três dias, três vezes por semana (tiw), ou duas vezes por semana (biw) ao longo de um período de tempo. Por exemplo, um composto é administrado qid, qd, qod, tiw, ou biw ao longo de um período de um dia a cerca de 2 anos ou mais. Por exemplo, um composto é administrado em qualquer uma das frequências supracitadas durante uma semana, duas semanas, um mês, dois meses, seis meses, um ano, ou dois anos, ou mais, dependendo de vários fatores.

[0084] Em determinadas modalidades, são fornecidos métodos para o tratamento de um paciente que compreende administrar oralmente ao paciente uma composição farmacêutica compreendendo sal de sulfassalazina, sendo que a dose da composição farmacêutica é suficiente para manter um nível plasmático de sulfassalazina de pelo menos 8 µg/ml durante pelo menos 14 horas totais por dia. Em determinadas modalidades, um nível plasmático de sulfassalazina de pelo menos 8 µg/ml é mantido entre 21 e 24, horas totais, inclusivas, por dia. Em determinadas modalidades, um nível plasmático de sulfassalazina de pelo menos 8 µg/ml é mantido durante 24 horas por dia. Em determinadas modalidades, a dose da composição farmacêutica é suficiente para manter um nível plasmático de sulfassalazina de entre cerca de 8 µg/ml e 30 µg/ml, inclusivo, ou entre cerca de 8 µg/ml e 16 µg/ml, inclusivo, ou entre cerca de 10 µg/ml e 16 µg/ml, inclusivo, durante um dado período de tempo; ou durante o intervalo de dosagem inteiro. Para os propósitos deste pedido, a condição "durante o intervalo de dosagem inteiro" será considerada como sendo atendida se o nível da sulfassalazina for igual a ou maior que o nível designado no final do intervalo de dosagem (mas antes de qualquer administração seguinte da sulfassalazina). Em determinadas modalidades, a dose da composição farmacêutica é suficiente para produzir um nível plasmático de sulfassalazina no paciente de entre cerca de 8 µg/ml e 30 µg/ml, entre cerca de 10 µg/ml e 30 µg/ml, entre cerca de 8 µg/ml e 16 µg/ml ou entre cerca de 8 µg/ml e 12 µg/ml, inclusivo; pelo menos 10 µg/ml, ou 16 µg/ml durante o intervalo de dosagem inteiro.

[0085] Uma maneira de aumentar os níveis plasmáticos de sulfassalazina é administrar aos pacientes doses diárias mais altas de uma formulação convencional de sulfassalazina. Em seres humanos, os níveis plasmáticos de sulfassalazina são proporcionais à dose oral, por exemplo, Khan et al, Gut 21:232-240 (1980). Em determinadas modalidades, a presente revelação fornece métodos para o tratamento de um paciente que compreendem administrar oralmente ao paciente uma composição farmacêutica que compreende sulfassalazina, um inibidor de ABCG2 e um excipiente farmaceuticamente aceitável, sendo que a dose diária total de sal de sulfassalazina está entre cerca de 2,5 gramas e 8 gramas, ou entre cerca 3 gramas e 5 gramas, inclusivas, ou cerca de 3, cerca de 4 gramas, ou cerca de 5 gramas.

[0086] Em determinadas modalidades, o indivíduo é um ser humano. Como usados na presente invenção, os termos "hospedeiro", "sujeito", "indivíduo" e "paciente" são usados intercambiavelmente e referem-se a qualquer mamífero que necessita de tal tratamento de acordo com os métodos revelados. Mamíferos exemplificadores incluem, mas não se limitam a, seres humanos, animais domésticos (por exemplo, um cão, gato, ou similares), animais de fazenda (por exemplo, uma vaca, uma ovelha, um porco, um cavalo, ou similares) ou animais de laboratório (por exemplo, um macaco, um rato, um camundongo, um coelho, um porquinho-da-índia, ou similares). Em determinadas modalidades, o indivíduo é um ser humano. "Paciente" refere-se a seres humanos e não humanos, especialmente indivíduos mamíferos.

[0087] A administração das composições farmacêuticas da presente invenção pode ser sistêmica ou local. Em determinadas modalidades, a administração a um mamífero resultará na liberação sistêmica de sulfassalazina (por exemplo, para dentro da corrente sanguínea). Os métodos de administração podem incluir rotas enterais, como administração oral, bucal,

sublingual e retal; administração tópica, como administração transdérmica e intradérmica; e parenteral. As rotas parenterais adequadas incluem injeção através de uma agulha hipodérmica ou um cateter, por exemplo, por injeção intravenosa, intramuscular, subcutânea, intradérmica, intraperitoneal, intra- arterial, intraventricular, intratecal, e intracameral e rotas não injetáveis, como administração retal, intravaginal, ou nasal. Em determinadas modalidades, as composições da presente revelação são administradas oralmente. Em determinadas modalidades, pode ser desejável administrar um ou mais compostos da invenção localmente na área que necessita de tratamento. Isto pode ser realizado, por exemplo, por infusão local durante, aplicação tópica, por injeção, por meio de um cateter, por meio de um supositório, ou por meio de um implante, o dito implante sendo um material poroso, não poroso, ou gelatinoso, incluindo membranas, como membranas sialásticas, ou fibras.

[0088] A dose de sulfassalazina administrada de acordo com os métodos da presente invenção podem ser formuladas em qualquer forma de dosagem farmaceuticamente aceitável incluindo, mas não se limitando a, formas de dosagem orais como comprimidos incluindo comprimidos oralmente desintegráveis, cápsulas, pastilhas, xaropes ou soluções orais, emulsões orais, géis orais, filmes orais, líquidos bucais, pó, por exemplo, para suspensão, e similares; formas de dosagem injetáveis; formas de dosagem transdérmicas como emplastros transdérmicos, pomadas, cremes; formas de dosagem inaladas; e/ou formas de dosagem administradas por via nasal, retal e vaginal. Tais formas de dosagem podem ser formuladas para administração uma vez por dia, ou para múltiplas administrações diárias (por exemplo administrações 2, 3 ou 4 vezes por dia).

[0089] A quantidade de composto administrada pode ser determinada com o uso de quaisquer métodos convenientes para ser uma quantidade suficiente para produzir o efeito desejado em associação com um diluente, carreador ou veículo farmaceuticamente aceitável. As especificações para formas de dosagem unitárias da presente revelação dependerão do composto específico utilizado e do efeito a ser alcançado, e da farmacodinâmica associada com cada composto no hospedeiro. A dose administrada a um animal, particularmente um ser humano, no contexto da presente revelação deve ser suficiente para efetuar uma resposta terapêutica ou profilática no animal durante um período de tempo razoável, por exemplo, conforme descrito com mais detalhes na presente invenção. Níveis de dosagem da ordem de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 140 mg/kg de peso corporal por dia são úteis em modalidades representativas, ou alternativamente de cerca de 0,5 mg a cerca de 7 g por paciente por dia. A dosagem dependerá de uma variedade de fatores incluindo o sal específico utilizado, a condição do animal, e o peso corporal do animal, e também a gravidade da doença e o estádio da doença. O tamanho da dose também será determinado pela existência, natureza, e extensão de quaisquer efeitos colaterais adversos que possam acompanhar a administração de um sal específico.

[0090] Em determinadas modalidades, o composto é administrado como uma preparação farmacêutica. Em modalidades da invenção, pode ser utilizada qualquer dose eficaz do sal de sulfassalazina da presente invenção ou da composição da presente invenção. A quantidade de ingrediente ativo que pode ser combinada com os materiais carreadores para produzir uma forma de dosagem única variará dependendo do hospedeiro tratado e do modo específico de administração. Por exemplo, uma formulação pretendida para a administração oral de seres humanos pode conter de 0,5 mg a 5 g de composto agente ativo com uma quantidade adequada e conveniente de material carreador que pode variar de cerca de 5 a cerca de 95 por cento da composição total. As formas de dosagem unitárias geralmente contêm entre cerca de 1 mg a cerca de 500 mg de um ingrediente ativo, como 25 mg, 50 mg, 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 800 mg ou 1.000 mg.

[0091] Em algumas modalidades, é fornecida uma composição farmacêutica (por exemplo, conforme descrita na presente invenção) sendo que composição farmacêutica tem sido formulada de modo que a solubilidade in vitro do sal de sulfassalazina esteja entre cerca de 500 µg/ml e cerca de 11.500 µg/ml; ou esteja entre cerca de 500 µg/ml e cerca de 7.500 µg/ml, cerca de 500 µg/ml e cerca de

5.500 µg/ml, cerca de 500 µg/ml e cerca de 2.500 µg/ml, entre cerca de 2.300 µg/ml e 11.500 µg/ml; ou pelo menos 500 µg/ml, 1.200 µg/ml ou 2.300 µg/ml. Em um aspecto, a solubilidade é determinada em um pH de 5,5 com o uso de qualquer método conveniente. Em alguns aspectos, a "solubilidade in vitro" da sulfassalazina é considerada como sendo a Cmáx IB em 90 minutos. Em determinados casos, a composição farmacêutica compreende sulfassalazina, um inibidor de ABCG2 e um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0092] Terapia de combinação inclui a administração de uma única formulação de dosagem farmacêutica que contém a composição da presente invenção e um ou mais agentes adicionais; e também administração da composição da presente invenção e um ou mais agente(s) adicional(ais) na sua própria formulação de dosagem farmacêutica separada. Por exemplo, uma composição da presente invenção e um agente ativo adicional com atividade epiléptica pode ser administrada ao paciente juntos em uma composição de dosagem única como uma formulação combinada, ou cada agente pode ser administrado em uma formulação de dosagem separada. Se formulações de dosagem separadas forem usadas, a composição da presente invenção e um ou mais agentes adicionais podem ser administrados simultaneamente, ou em tempos separadamente escalonados, por exemplo, sequencialmente. O agente antiepiléptico de interesse que pode ser usado nas terapias de combinação da presente revelação incluem, mas não se limitam a, Acetazolamida, Carbamazepina, Acetato de Eslicarbazepina, Etossuximida, Gabapentina, Lacosamida, Lamotrigina, Levetiracetam, Nitrazepam, Oxcarbazepina, Perampanel, Piracetam, Fenobarbital, Fenitoína, Pregabalina, Primidona, Retigabina, Rufinamida, Valproato de Sódio, Estiripentol, Tiagabina, Topiramato, Vigabatrina e Zonisamida.

[0093] Em determinados aspectos das terapias de combinação, um paciente com P-MS é administrado (ou coadministrado com) Mitoxantrona, Gilenya, Masitinibe, Siponimode, Tcelna, Tecfidera, Lemtrada, Laquinimode, Daclizumabe, Ocrelizumabe, Cladribina, Daclizumabe, Tysabri, Campath, Rituximabe, Fingolimod, Azatioprina ou Ibudilaste.

[0094] Em algumas modalidades, são fornecidos métodos para tratamento de um paciente com uma doença neurodegenerativa ou um distúrbio neurodegenerativo que compreendem administrar ao paciente uma quantidade eficaz de um inibidor de sistema xc- diferente de sulfassalazina. Em determinadas modalidades, o inibidor de sistema xc- é selecionado dentre (S)-4-carboxifenilglicina, ácido 2-hidroxi-5-((4-(N-piridin-2-ilsulfamoil)fenil)etinil)benzoico, aminoadipato (AAA), ácido 4-(1-(2-(3,5-bis(trifluorometil)fenil)hidrazono)etil)-5-(4- (trifluorometil)benzil)isoxazol-3-carboxílico, ácido 5-benzil-4-(1-(2-(3,5-bis(trifluoro- metil)fenil)hidrazono)etil)isoxazol-3-carboxílico e ácido 2-hidroxi-5-[2-[4-[(3- metilpiridin-2-il)sulfamoil]fenil]etinil]benzoico.

[0095] Em algumas modalidades, o método da presente invenção é um método in vitro que inclui colocar uma amostra em contato com uma composição da presente invenção. Os protocolos que podem ser utilizados nestes métodos são numerosos, e incluem mas não se limitam a, ensaios isentos de células, ensaios de ligação (por exemplo, ensaios de ligação de receptor); ensaios celulares nos quais um fenótipo celular é medido, por exemplo, ensaios de expressão gênica; e ensaios que envolvem um modelo animal específico para uma condição de interesse (por exemplo., complexo de esclerose tuberosa). Composições farmacêuticas

[0096] Também são fornecidas composições farmacêuticas ou preparações que incluem composições farmacêuticas com ingrediente ativo sulfassalazina, por exemplo, preparadas de acordo com os métodos da presente invenção. As composições farmacêuticas podem incluir uma composição de sal cristalino de sulfassalazina (quer sozinha quer na presença de um ou mais agentes ativos adicionais) presente em um veículo farmaceuticamente aceitável. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica inclui composição de sal cristalino de sulfassalazina composição (por exemplo, conforme descrito na presente invenção) como o único agente ativo formulado em um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0097] A escolha do excipiente será determinada em parte pelo sal específico, e também pelo método específico usado para administrar a composição. Consequentemente, há uma ampla variedade de formulações adequadas da composição farmacêutica da presente invenção.

[0098] A forma de dosagem de sulfassalazina utilizada nos métodos da presente revelação pode ser preparada pela combinação da composição de sal cristalino de sulfassalazina com um ou mais diluentes, carreadores, adjuvantes, e similares farmaceuticamente aceitáveis em uma maneira conhecida por aquelas pessoas versadas na técnica de formulação farmacêutica.

[0099] Conforme descrito acima, as composições da presente invenção podem incluir um intensificador de absorção e/ou um inibidor de efluxo. Em alguns casos, a composição da presente invenção inclui um inibidor do transportador de efluxo de ABCG2 (isto é, inibidores de efluxo de ABCG2 ou inibidores de ABCG2), por exemplo, em uma quantidade eficaz para obter uma biodisponibilidade desejável de sulfassalazina em um indivíduo (por exemplo, conforme descrito na presente invenção). Exemplos de inibidores de ABCG2 que podem ser incluídos nas composições da presente invenção são descritos na presente invenção.

[0100] Conforme descrito acima, as composições da presente invenção podem incluir um polímero, por exemplo, um polímero biocompatível e farmaceuticamente aceitável. Em alguns casos, o polímero é solúvel em água. O polímero pode ser um copolímero de vinilpirrolidona com acetato de vinila e como tal pode ser qualquer polímero de PVP VA que é solúvel em água incluindo PVP VA64. Em determinadas modalidades, o polímero farmaceuticamente aceitável pode ser selecionado dentre polivinilpirrolidona (PVP, incluindo PVP VA64. homopolímeros e copolímeros de polivinilpirrolidona e homopolímeros ou copolímeros de N-vinilpirrolidona); crospovidona; copolímeros de polioxietileno-polioxipropileno (também conhecidos como poloxâmeros); derivados de celulose (incluindo acetato succinato de hidroxipropilmetilcelulose (HPMCAS), ftalato de hidroxipropilmetilcelulose (HPMCP), hidroxipropilmetilcelulose (HPMC), acetato ftalato de celulose (CAP), acetato trimelitato de celulose (CAT), acetato ftalato de hidroxipropilmetilcelulose, acetato trimetilato de hidroxipropilmetilcelulose, acetato succinato de celulose, acetato succinato de hidroxipropilmetilcelulose, carboximetiletilcelulose (CMEC), hidroxipropilmetilcelulose, acetato de hidroxipropilmetilcelulose, hidroxietilcelulose); dextrana; ciclodextrinas; ácidos policarboxílicos homopolímeros e copolímeros de vinil-lactama, e misturas dos mesmos; gelatinas; ftalato de hipromelose; açúcares; álcoois poli-hídricos; poli(glicol etilênico) (PEG); poli(óxidos de etileno); derivados de polioxietileno; poli(álcool vinílico); derivados de glicol propilênico e similares; SLS; Tween; EUDRAGIT (um copolímero de ácido metacrílico e metacrilato de metila); e combinações dos mesmos. O polímero pode ser solúvel em água ou insolúvel em água. Em determinadas modalidades, a razão entre a sulfassalazina e o polímero na composição é de cerca de 5:95 peso/peso a 50:50 peso/peso. Em determinadas modalidades, a razão entre o peso de inibidor de ABCG2 e o peso de sulfassalazina (ABCG2: sulfassalazina) na composição pode ser de cerca de 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:10, 1:20, 1:50, 1:100 ou cerca de 1:200; ou pode ser cerca de 1:20 peso/peso.

[0101] As composições da presente invenção podem ser formuladas em preparações para injeção por dissolução, suspensão ou emulsificação delas em um solvente aquoso ou não aquoso, como óleo vegetal ou outros óleos similares, glicerídeos de ácidos alifáticos sintéticos, ésteres de ácidos alifáticos superiores ou glicol propilênico; e se desejado, com aditivos convencionais como solubilizantes, agentes isotônicos, agentes suspensores, agentes emulsificantes, estabilizantes e conservantes.

[0102] Em algumas modalidades, formulações adequadas para administração oral podem incluir (a) soluções líquidas, como uma quantidade eficaz do composto dissolvida em diluentes, como água, ou solução salina; (b) cápsulas, sachês ou comprimidos, cada um contendo uma quantidade predeterminada do ingrediente ativo (sulfassalazina), como sólidos, péletes ou grânulos; (c) suspensões em um líquido adequado; e (d) emulsões adequadas. Comprimidos e cápsulas de interesse incluem aqueles que fornecem liberação imediata do agente ativo da formulação, e comprimidos e cápsulas que fornecem liberação controlada, por exemplo, durante um período prolongado de tempo (por exemplo, conforme descrito na presente invenção). Formas de comprimido podem incluir um ou mais dentre lactose, manitol, amido de milho, amido de batata, celulose microcristalina, acácia, gelatina, dióxido de silício coloidal, croscarmelose sódica, talco, estearato de magnésio, ácido esteárico, e outros excipientes, corantes, diluentes, agentes tamponantes, agentes umectantes, conservantes, agentes flavorizantes, e excipientes farmacologicamente compatíveis. Formas de pastilha podem incluir o ingrediente ativo em um flavorizante, geralmente sacarose e acácia ou tragacanto, e também pastilhas incluindo o ingrediente ativo em uma base inerte, como gelatina e glicerina, ou sacarose e acácia, emulsões, géis, e similares que contém, além do ingrediente ativo, tais excipientes como são descritos na presente invenção. Formas sólidas como péletes ou grânulos podem ser revestidas ou não revestidas. Formas sólidas como péletes ou grânulos podem em alguns casos fornecer para liberação imediata do agente ativo da formulação, e em outros casos fornecer liberação controlada, por exemplo, durante um período prolongado de tempo (por exemplo, conforme descrito na presente invenção).

[0103] A composição farmacêutica da presente invenção pode ser transformada em formulações de aerossol para ser administrada via inalação. Estas formulações de aerossol podem ser colocadas em propelentes aceitáveis pressurizados, como diclorodifluorometano, propano, nitrogênio, e similares. Elas podem também ser formuladas como produtos farmacêuticos para preparações não pressurizadas como para uso em um nebulizador ou atomizador.

[0104] Em algumas modalidades, as formulações adequadas para administração parenteral incluem soluções para injeção estéreis, isotônicas, aquosas e não aquosas, que podem conter antioxidantes, agentes tamponantes, bacteriostáticos e solutos que tornam a formulação isotônica com o sangue do paciente recipiente pretendido, e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes suspensores, solubilizantes, agentes espessantes, estabilizantes e conservantes. As formulações podem ser apresentadas em recipientes vedados de dose unitária ou de múltiplas doses, como ampolas e frascos, e podem ser armazenadas em uma condição seca por congelamento (liofilizada) que exige apenas a adição do excipiente líquido estéril, por exemplo, água, para injeções, imediatamente antes do uso.

Soluções e suspensões para injeção extemporâneas podem ser preparadas a partir de pós, grânulos, e comprimidos estéreis do tipo previamente descrito.

[0105] Formulações adequadas para administração tópica podem ser apresentadas como cremes, géis, pastas, ou espumas contendo, além do ingrediente ativo, tais veículos conforme sejam apropriados. Em algumas modalidades a formulação tópica contém um ou mais componentes selecionados dentre um agente estruturante, um agente espessante ou gelificante, e um emoliente ou lubrificante. Os agentes estruturantes frequentemente utilizados incluem álcoois de cadeia longa, como álcool estearílico, e éteres ou ésteres glicerílicos e oligo(óxido de etileno)-éteres ou - ésteres dos mesmos. Espessantes e agentes gelificantes incluem, por exemplo, polímeros de ácido acrílico ou ácido metacrílico e ésteres dos mesmos, poliacrilamidas, e espessantes de ocorrência natural como ágar, carragena, gelatina e goma guar. Exemplos de emolientes incluem ésteres de triglicerídeos, amidas e ésteres de ácido graxos, como cera de abelha, espermacete, ou cera de carnaúba, fosfolipídeos como lecitina, e esteróis e ésteres de ácido graxos dos mesmos. As formulações para uso tópico podem incluir adicionalmente outros componentes, por exemplo, adstringentes, fragrâncias, pigmentos, agentes intensificadores de penetração dérmica, protetores solares (por exemplo, agentes bloqueadores solares), etc.

[0106] Para uma formulação farmacêutica oral, excipientes adequados incluem graus farmacêuticos de carreadores como manitol, lactose, glicose, sacarose, amido, celulose, gelatina, estearato de magnésio, sacarina sódica, e/ou carbonato de magnésio. Para uso em formulações líquidas orais, a composição pode ser preparada como uma solução, suspensão, emulsão, ou xarope, sendo fornecidos quer na forma sólida quer na forma líquida adequada para hidratação em um carreador aquoso, como, por exemplo, solução salina aquosa, dextrose aquosa, glicerol, ou etanol, de preferência, água ou solução salina normal. Se desejado, a composição pode também conter quantidades pequenas de substâncias auxiliares não tóxicas como agentes umectantes, agentes emulsificantes, ou agentes tamponantes.

[0107] A título de ilustração, a composição farmacêutica de sulfassalazina pode ser misturada com excipientes e carreadores farmaceuticamente aceitáveis (isto é, veículos) e usada sob a forma de soluções aquosas, comprimidos, cápsulas, elixires, suspensões, xaropes, "wafers", e similares. Tais composições farmacêuticas contêm, em determinadas modalidades, de cerca de 0,1% a cerca de 90% em peso do composto ativo, e mais geralmente de cerca de 1% a cerca de 30% em peso do composto ativo. As composições farmacêuticas podem conter carreadores e excipientes comuns, como amido de milho ou gelatina, lactose, dextrose, sacarose, celulose microcristalina, caulim, manitol, fosfato dicálcico, cloreto de sódio, e ácido algínico. Os desintegradores comumente usados nas formulações desta invenção incluem croscarmelose, celulose microcristalina, amido de milho, amidoglicolato de sódio e ácido algínico.

[0108] Formulações específicas da presente revelação são sob uma forma líquida. O líquido pode ser uma solução ou suspensão e pode ser uma solução oral ou um xarope oral que é incluído(a) em uma garrafa com uma pipeta que é graduada em termos de quantidades de miligramas que serão obtidas em um dado volume de solução. A solução líquida torna possível ajustar a solução para crianças pequenas que podem ser administradas em qualquer lugar de 0,5 mg a 15 mg e qualquer quantidade entre as mesmas em incrementos de meio-miligrama e dessa forma administrada em 0,5, 1,0, 1,5, 2,0 mg, etc.

[0109] A composição líquida geralmente consistirá em uma suspensão ou solução do composto ou sal farmaceuticamente aceitável em um carreador(es) líquido(s) adequado(s), por exemplo, etanol, glicerina, sorbitol, solvente não aquoso como poli(glicol etilênico), óleos ou água, com um agente suspensor, conservante, tensoativo, agente umectante, agente flavorizante ou agente corante. Alternativamente, uma formulação líquida pode ser preparada a partir de um pó dispersível ou reconstituível ou de grânulos dispersíveis ou reconstituíveis. Métodos de preparação

[0110] Também são fornecidos métodos de preparação dos sais cristalinos de sulfassalazina da presente invenção. Em algumas modalidades, o método compreendendo: a) combinar sulfassalazina e um ácido sulfônico orgânico (por exemplo, conforme descrito na presente invenção) ou uma base de amina orgânica (por exemplo, conforme descrita na presente invenção) em um solvente orgânico (por exemplo, conforme descrito na presente invenção) sob condições suficientes para cristalizar um determinado sal de sulfassalazina (por exemplo, conforme descrito na presente invenção); e b) isolar o sal de sulfassalazina.

[0111] Em determinados casos, a etapa a) inclui neutralizar sulfassalazina com um ácido sulfônico orgânico. Em alguns casos, o ácido sulfônico orgânico é selecionado dentre ácido benzenossulfônico, ácido etanodissulfônico, etano sulfônico, ácido metanossulfônico, ácido naftaleno-1,5-dissulfônico e ácido p- toluenossulfônico. Em determinados casos do método, o solvente é selecionado dentre acetona, acetonitrila, dioxano, etanol, álcool isopropílico (IPA) e tetra-hidrofurano (THF). Em determinadas modalidades do método, o ácido é ácido benzenossulfônico e o solvente é acetonitrila.

[0112] Em determinados casos, a etapa a) inclui neutralizar sulfassalazina com uma base de amina orgânica. Em alguns casos, a base de amina orgânica é selecionada dentre dietilamina, L-lisina, trietanolamina, trometamina, piperazina, benzatina, dietanolamina e L-arginina. Em determinadas modalidades do método, o solvente é selecionado dentre acetona, acetonitrila, dioxano, etanol, álcool isopropílico (IPA) e tetra-hidrofurano (THF). Em determinadas modalidades do método, a base de amina orgânica é dietilamina e o solvente é etanol. Em determinadas modalidades do método, a base de amina orgânica é L-lisina e o solvente é acetona. Em determinadas modalidades do método, a base de amina orgânica é trietanolamina e o solvente é acetona. Em determinadas modalidades do método, a base de amina orgânica é trometamina e o solvente é etanol.

[0113] Em alguns casos, o método compreende adicionalmente secar o sal de sulfassalazina. Em determinados casos, o método compreende adicionalmente formular o sal de sulfassalazina com um excipiente farmaceuticamente aceitável para obter uma composição farmacêutica. Modalidades adicionais

[0114] As modalidades adicionais são apresentadas nas cláusulas a seguir.

[0115] Cláusula 1. Um sal cristalino de sulfassalazina solúvel em água.

[0116] Cláusula 2. O sal cristalino da cláusula 1, sendo que o sal cristalino é substancialmente não higroscópico.

[0117] Cláusula 3. O sal cristalino da cláusula 1, sendo que o sal cristalino tem uma solubilidade de 1 mg/ml ou mais em um tampão aquoso a cerca de pH 7 e 25 C.

[0118] Cláusula 4. Sal cristalino da cláusula 1, sendo que o sal cristalino é polimorficamente estável.

[0119] Cláusula 5. O sal cristalino da cláusula 1, sendo que a sulfassalazina do sal cristalino é estável no armazenamento.

[0120] Cláusula 6. O sal cristalino da cláusula 4 ou 5, sendo que pelo menos 90% em peso do sal cristalino mantém sua forma cristalina após exposição a aproximadamente 40°C e aproximadamente 75% durante aproximadamente 1 semana.

[0121] Cláusula 7. Sal cristalino, das cláusulas 1 a 6, sendo que o sal cristalino é um sal básico farmaceuticamente aceitável de sulfassalazina e um ácido.

[0122] Cláusula 8. O sal cristalino da cláusula 7, sendo que o ácido é um ácido sulfônico orgânico.

[0123] Cláusula 9. O sal cristalino da cláusula 7 ou 8, sendo que o ácido é selecionado dentre ácido benzenossulfônico, ácido etanodissulfônico, ácido etanossulfônico, ácido metanossulfônico, ácido naftaleno-1,5-dissulfônico, ácido-p-toluenossulfônico e ácido sulfúrico.

[0124] Cláusula 10. O sal cristalino da cláusula 9, sendo que o ácido é um ácido benzenossulfônico.

[0125] Cláusula 11. O sal cristalino das cláusulas 1 a 6, sendo que o sal cristalino é um sal ácido farmaceuticamente aceitável de sulfassalazina e uma base de amina orgânica.

[0126] Cláusula 12. O sal cristalino da cláusula 11, sendo que a base de amina orgânica é selecionada dentre dietilamina, L-lisina, trietanolamina, trometamina, piperazina, benzatina, dietanolamina e L-arginina.

[0127] Cláusula 13. O sal cristalino da cláusula 12, sendo que base é selecionada dentre dietilamina, L-lisina, trietanolamina e trometamina.

[0128] Cláusula 14. Um sal cristalino de sulfassalazina-ácido benzenossulfônico (1:1).

[0129] Cláusula 15. O sal cristalino da cláusula 14, caracterizado por um padrão de difração de raios X pelo método do pó conforme mostrado na Figura 1.

[0130] Cláusula 16. O sal cristalino da cláusula 14, caracterizado por ter um gráfico de calorimetria de varredura diferencial que compreende dois eventos endotérmicos com uma temperatura inicial de cerca de 196°C a cerca de 204°C quando aquecido de cerca de 25°C a cerca de 300°C.

[0131] Cláusula 17. Um sal cristalino de sulfassalazina-dietilamina (1:1).

[0132] Cláusula 18. O sal cristalino da cláusula 17, caracterizado por um padrão de difração de raios X pelo método do pó conforme mostrado na Figura 4.

[0133] Cláusula 19. O sal cristalino da cláusula 17, caracterizado por ter um gráfico de calorimetria de varredura diferencial compreendendo um evento endotérmico com uma temperatura inicial de cerca de 191°C quando aquecido de cerca de 25°C a cerca de 300°C.

[0134] Cláusula 20. Um sal cristalino de sulfassalazina-L-lisina (1:1).

[0135] Cláusula 21. O sal cristalino da cláusula 20, caracterizado por um padrão de difração de raios X pelo método do pó conforme mostrado na Figura 5.

[0136] Cláusula 22. O sal cristalino da cláusula 20, caracterizado por ter um gráfico de calorimetria de varredura diferencial que não compreende eventos endotérmicos quando aquecido de cerca de 25°C a cerca de 300°C.

[0137] Cláusula 23. Um sal cristalino de sulfassalazina-trietanolamina (1:1).

[0138] Cláusula 24. O sal cristalino da cláusula 23, caracterizado por um padrão de difração de raios X pelo método do pó conforme mostrado na Figura 6.

[0139] Cláusula 25. O sal cristalino da cláusula 23, caracterizado por ter um gráfico de calorimetria de varredura diferencial compreendendo um evento endotérmico com uma temperatura inicial de cerca de 154°C quando aquecido de cerca de 25°C a cerca de 300°C.

[0140] Cláusula 26. Um sal cristalino de sulfassalazina-trometamina (1:1).

[0141] Cláusula 27. O sal cristalino da cláusula 26, caracterizado por um padrão de difração de raios X pelo método do pó conforme mostrado na Figura 7.

[0142] Cláusula 28. O sal cristalino da cláusula 26, caracterizado por ter um gráfico de calorimetria de varredura diferencial compreendendo eventos endotérmicas com uma temperatura inicial de cerca de 67°C e cerca de 123°C, quando aquecido de cerca de 25°C a 300°C.

[0143] Cláusula 29. Composição farmacêutica que compreende o sal cristalino de qualquer uma das cláusulas 1 a 28 e um carreador, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0144] Cláusula 30. A composição farmacêutica da cláusula 29, sendo que a composição é estável no armazenamento.

[0145] Cláusula 31. A composição da cláusula 30, sendo que o sal cristalino é estável no armazenamento durante uma semana ou mais a 40°C e UR (umidade relativa) de 75%.

[0146] Cláusula 32. A composição da cláusula 31, sendo que o sal cristalino compreende cerca de 95% ou mais em peso do sal cristalino após armazenamento a 40°C e umidade relativa de 75% durante 1 semana.

[0147] Cláusula 33. A composição da cláusula 29, sendo que a composição é formulada para administração oral.

[0148] Cláusula 34. A composição da cláusula 29, sendo que a composição é formulada para administração parenteral.

[0149] Cláusula 35. A composição da cláusula 29, sendo que a composição é formulada para administração intravenosa.

[0150] Cláusula 36. A composição da cláusula 29, sendo que a composição é formulada como uma forma de dosagem unitária única.

[0151] Cláusula 37. A composição da cláusula 29, sendo que a forma de dosagem é um comprimido ou uma cápsula.

[0152] Cláusula 38. A composição da cláusula 29, sendo que a forma de dosagem é um pélete ou grânulo.

[0153] Cláusula 39. Um método de tratamento de doença ou condição que é uma doença neurologicamente relacionada, uma doença neurodegenerativa, uma doença ou condição inflamatória ou um câncer, o método compreendendo administrar a um indivíduo que necessita da mesma uma quantidade terapeuticamente eficaz de um sal cristalino de qualquer uma das cláusulas 1 a 28, ou de uma composição farmacêutica de qualquer uma das cláusulas 29 a 37.

[0154] Cláusula 40. O método da cláusula 39, sendo que a doença ou condição é doença neurológica relacionada.

[0155] Cláusula 41. O método da cláusula 40, sendo que a doença neurológica relacionada é epilepsia.

[0156] Cláusula 42. O método da cláusula 41, sendo que a epilepsia é epilepsia refratária.

[0157] Cláusula 43. O método da cláusula 42, sendo que o indivíduo é diagnosticado como tendo convulsões intratáveis.

[0158] Cláusula 44. O método da cláusula 41 ou 42, sendo que a epilepsia é selecionada dentre síndrome de Dravet, síndrome de Lennox-Gastaut, síndrome de Doose, síndrome de West, síndrome de Angelman, epilepsia rolândica benigna, distúrbio de CDKL5, epilepsia de ausência infantil e juvenil, síndrome de Doose, síndrome de Dravet, epilepsia com ausências mioclônicas, síndrome de deficiência de Glut1, espasmos infantis e síndrome de West, epilepsia mioclônica juvenil, epilepsia mioclônica progressiva de Lafora, síndrome de Landau-Kleffner, síndrome de Lennox-Gastaut, síndrome de Ohtahara, síndrome de Panayiotopoulos, epilepsia PCDH19, síndrome de Rasmussen, síndrome do cromossomo 20 em anel, epilepsias reflexas, síndrome de deficiência intelectual relacionada à mutação no gene TBCK ("TBCK-related ID Syndrome"), hamartoma hipotalâmico, epilepsia do lobo frontal, epilepsia com convulsões tônico-clônicas generalizadas isoladas, epilepsias mioclônicas progressivas, epilepsia do lobo temporal, complexo de esclerose tuberosa, displasia cortical focal e encefalopatias epilépticas. Em um outro aspecto do método, a doença convulsiva ou o distúrbio convulsivo é selecionada(o) do grupo que consiste em epilepsia de ausência infantil e juvenil, espasmos infantis e síndrome de West, epilepsia mioclônica juvenil, epilepsia do lobo frontal, epilepsia com convulsões tônico-clônicas generalizadas isoladas, epilepsias mioclônicas progressivas, epilepsia do lobo temporal, complexo de esclerose tuberosa, síndrome de Rasmussen, hamartoma hipotalâmico, displasia cortical focal, encefalopatias epilépticas, e tumores associados à epilepsia de longa duração (LEATs), por exemplo, ganglioglioma, oligodendroglioma, e tumores neuroepiteliais desimbrioplásicos (DNETs).

[0159] Cláusula 45. O método da cláusula 39, sendo que a doença ou condição é uma doença neurodegenerativa.

[0160] Cláusula 46. O método da cláusula 45, sendo que a doença neurodegenerativa é selecionada dentre doença de Alexander, doença de Alzheimer (AD), demência frontotemporal, demência associada ao HIV e outras demências, esclerose lateral amiotrófica, epilepsia, doença de Huntington (HD), acidente vascular cerebral isquêmico, doenças neuronais motoras (MND), dor neuropática, doença de Parkinson (PD) e distúrbios relacionados à PD, doença de príons, síndrome de Rett, atrofia muscular espinhal (SMA), ataxia espinocerebelar (SCA), lesão cerebral traumática, esclerose tuberosa, esclerose múltipla progressiva (P-MS), esclerose lateral amiotrófica (ALS) e dor neuropática.

[0161] Cláusula 47. O método da cláusula 39, sendo que a doença ou condição é uma doença ou condição inflamatória.

[0162] Cláusula 48. O método da cláusula 47, sendo que a doença ou condição é uma doença ou condição inflamatória selecionada dentre doenças inflamatórias intestinais, colite ulcerativa, doença de Crohn, doenças de artrite inflamatória, espondilite anquilosante, artrite reumatoide e artrite psoriática.

[0163] Cláusula 49. O método da cláusula 39, sendo que a doença ou condição é câncer.

[0164] Cláusula 50. O método da cláusula 49, sendo que o câncer é selecionado dentre tumores gliais, glioblastoma, linfoma e câncer pancreático.

[0165] Cláusula 51. O método da cláusula 40, sendo que a composição é administrada em uma dosagem e/ou frequência eficaz para reduzir a ocorrência de efeitos colaterais da sulfassalazina.

[0166] Cláusula 52. O método da cláusula 41, compreendendo, adicionalmente, coadministrar ao indivíduo um agente antiepiléptico.

[0167] Cláusula 53. O método de qualquer uma das cláusulas de 39 a 51, compreendendo, adicionalmente, coadministrar ao indivíduo um inibidor de ABCG2.

[0168] Cláusula 54. O método da cláusula 53, sendo que o inibidor de ABCG2 e o sal cristalino de sulfassalazina são coformulados em uma única composição farmacêutica.

[0169] Cláusula 55. O método de preparação de um sal cristalino de sulfassalazina, o método compreendendo: a) combinar a sulfassalazina e um ácido sulfônico orgânico em um solvente orgânico sob condições suficientes para cristalizar um sal de sulfassalazina; e b) isolar o sal de sulfassalazina; sendo que o ácido sulfônico orgânico é selecionado dentre ácido benzenossulfônico, ácido etanodissulfônico, ácido etanossulfônico, ácido metanossulfônico, ácido naftaleno-1,5-dissulfônico, ácido-p-toluenossulfônico e ácido sulfúrico.

[0170] Cláusula 56. O método da cláusula 55, sendo que o solvente é selecionado dentre acetona, acetonitrila, dioxano, etanol, álcool isopropílico (IPA) e tetra-hidrofurano (THF).

[0171] Cláusula 57. O método da cláusula 55, sendo que o ácido é ácido benzenossulfônico e o solvente é acetonitrila.

[0172] Cláusula 58. O método de qualquer uma das cláusulas 55 a 57, compreendendo, adicionalmente, secar o sal de sulfassalazina.

[0173] Cláusula 59. O método de qualquer uma das cláusulas 55 a 57, compreendendo, adicionalmente, formular o sal de sulfassalazina com um excipiente farmaceuticamente aceitável para obter uma composição farmacêutica.

[0174] Cláusula 60. Um método de preparação de um sal cristalino de sulfassalazina, o método compreendendo: a) combinar a sulfassalazina e uma base de amina orgânica em um solvente orgânico sob condições suficientes para cristalizar um sal de sulfassalazina; e b) isolar o sal de sulfassalazina; sendo que a base de amina orgânica é selecionada dentre dietilamina, L-lisina, trietanolamina, trometamina, piperazina, benzatina, dietanolamina e L-arginina.

[0175] Cláusula 61. O método da cláusula 60, sendo que o solvente é selecionado dentre acetona, acetonitrila, dioxano, etanol, álcool isopropílico (IPA) e tetra-hidrofurano (THF).

[0176] Cláusula 62. O Método da cláusula 61, sendo que: a) a base de amina orgânica é dietilamina e o solvente é etanol; b) a base de amina orgânica é L-lisina e o solvente é acetona; c) a base de amina orgânica é trietanolamina e o solvente é acetona; ou d) a base de amina orgânica é trometamina e o solvente é etanol.

[0177] Cláusula 63. O método de qualquer uma das cláusulas 60 a 62, compreendendo, adicionalmente, secar o sal de sulfassalazina.

[0178] Cláusula 64. O método de qualquer uma das cláusulas 60 a 63, compreendendo, adicionalmente, formular o sal de sulfassalazina com um excipiente farmaceuticamente aceitável para obter uma composição farmacêutica.

Exemplos

[0179] Os seguintes exemplos são apresentados de modo a fornecer àquelas pessoas versadas na técnica uma revelação e descrição completa de como realizar e usar a presente invenção, e não se destinam a limitar o escopo do que os inventores consideram como a invenção nem se destinam a representar que os experimentos abaixo são todos ou os únicos experimentos realizados. Esforços foram feitos para assegurar a precisão com respeito aos números usados (por exemplo quantidades, temperatura, etc.) mas alguns erros e desvios experimentais devem ser levados em consideração. Exceto onde indicado em contrário, partes são partes em peso, o peso molecular é o peso molecular ponderal médio, a temperatura é em graus Centígrados, e a pressão é igual à ou próxima da pressão atmosférica. Por "média" entende-se a média aritmética. Abreviações padrão podem ser usadas, por exemplo, s, segundo(s); min, minuto(s); h, hora(s); e similares. Métodos gerais de análise Difração de raios X pelo método do pó (XRPD)

[0180] A difração de raios X pelo método do pó (XRPD) é uma técnica analítica usada para a identificação das fases de um material cristalino e pode fornecer informações sobre as dimensões da célula unitária. A análise por XRPD é realizada em um PANalytical X’pert pro, com varredura das amostras entre 3 e 35° 2θ. O material é suavemente moído para liberar quaisquer aglomerados e carregado em uma placa de multipoços com filme de polímero Mylar para suportar a amostra. A placa de multipoços é então colocada no difratômetro e analisada com o uso de radiação de Cu K (α1 λ = 1,54060 Å; α2 = 1,54443 Å; β = 1,39225 Å; razão α1: α2 = 0,5) funcionando no modo de transmissão (tamanho de passo 0,0130° 2θ) com o uso de configurações do gerador de 40 kV/40 mA.

Microscopia de luz polarizada (MLP)

[0181] A presença de cristalinidade (birrefringência) é determinada com o uso de um microscópio de polarização Olympus BX50, equipado com uma câmera Motic e um software de captura de imagem (Motic Imagens Plus 2.0). Todas as imagens são registradas o uso da lente objetiva 20 ×, exceto onde declarado em contrário. Análise termogravimétrica (TGA)

[0182] Aproximadamente, 5 mg de material são pesados em uma bandeja de alumínio aberta e carregados em um analisador termogravimétrico/térmico diferencial (TG/DTA, "Thermogravimetric/Differential Thermal Analyser") simultâneo e mantidos à temperatura ambiente. A amostra é então aquecida a uma velocidade de 10 °C.min-1 a partir de 20 °C para 350 °C durante cujo tempo a alteração no peso da amostra foi registrada juntamente com quaisquer eventos térmicos diferenciais (DTA). Nitrogênio é usado como o gás de purga a uma taxa de fluxo de 300 cm3.min-1. Calorimetria de varredura diferencial (DSC)

[0183] Aproximadamente 5 mg de material são pesados em uma bandeja de alumínio para DSC e vedados não hermeticamente com uma tampa de alumínio perfurada. A bandeja de amostra é então carregada em um equipamento Seiko DSC6200 (equipado com um resfriador), resfriada e mantida a 20 °C. Quando uma resposta de fluxo de calor estável é obtida, a amostra e a referência são aquecidas até 220 °C a uma taxa de varredura de 10 °C.min-1 e a resposta de fluxo de calor resultante é monitorada. Nitrogênio é usado como o gás de purga a uma taxa de fluxo de 50 cm3.min-1. Sorção dinâmica de vapor (DVS)

[0184] Aproximadamente, 10 a 20 mg de amostra foram colocados em uma bandeja de malha de balança de sorção de vapor e a bandeja foi carregada em uma balança de sorção dinâmica intrínseca de vapor DVS conforme Surface Measurement Systems. A amostra foi submetida a um perfil de elevação de umidade relativa (UR) de 40 para 90% em incrementos de 10%, mantendo a amostra em cada etapa até que um peso estável tenha sido alcançado (dm/dt 0,004%, duração mínima da etapa 30 minutos, duração máxima da etapa 500 minutos) a 25 °C. Após a completitude do ciclo de sorção, a amostra foi secada com o uso do mesmo procedimento para UR de 0% e então um segundo ciclo de sorção de volta para UR de 40%. Dois ciclos foram realizados. As alterações de peso durante os ciclos de sorção/dessorção foram representadas em gráfico, permitindo que a natureza higroscópica da amostra fosse determinada. Análise por XRPD foi então realizada em cada sólido retido. Determinação da solubilidade em pH entérico

[0185] A liberação de sulfassalazina a partir de uma composição farmacêutica pode ser determinada com o uso do seguinte procedimento. Uma massa de amostra de 4,5 mg do material de teste é colocada em um tubo de microcentrífuga. A este é adicionado 0,9 mL de solução tampão gástrica (GB, "Gastric Buffer") (HCl 0,01 N, pH 2). Os tubos são submetidos a vórtice durante um minuto, então são centrifugados durante um minuto antes de coletar cada amostra. As amostras (a fase líquida) são coletadas em 5, 15 e 25 minutos. Em 30 minutos após o início do teste, 0,9 mL de solução tampão intestinal (IB, "Intestinal Buffer") (uma solução tampão de fosfato/citrato em pH 5,5) é adicionado aos tubos (em uma concentração dupla dos sais tamponantes para resultar no nível de pH desejado e na concentração de tampão desejada). Os tubos são submetidos a vórtice durante um minuto, então são centrifugados durante um minuto antes de coletar cada amostra. As amostras são coletadas em 4, 10, 20, 40, 90 e 1.200 minutos após a adição da solução tampão intestinal. A concentração de sulfassalazina é determinada por HPLC.

Exemplo 1 Triagem de ácidos para a formação de sais básicos de sulfassalazina

[0186] A triagem de sais foi realizada para identificar formas de sais cristalinos e desenvolvíveis de sulfassalazina. A triagem produziu numerosos sais farmaceuticamente aceitáveis de sulfassalazina com propriedades físicas desejáveis para desenvolvimento adicional, em alguns casos com solubilidade aquosa significativamente maior em comparação com a base livre. Este trabalho se concentra no uso da funcionalidade piridina da sulfassalazina que tem um pKa medido de ~8,05. Devido à ampla variedade de agentes formadores de sais ácidos disponíveis com este pKa básico, foi realizada uma triagem de sais extensiva de 24 ácidos em seis sistemas de solvente. Solubilidade em solvente

[0187] Alíquotas de 100 µL de solvente foram adicionadas a aproximadamente 10 mg de sulfassalazina. Entre cada adição, a mistura foi verificada para dissolução e se dissolução não foi evidente, a mistura foi aquecida para ca. 40°C e verificado de novo. Este procedimento foi continuado até que dissolução fosse observada ou até que 2 mL de solvente tivessem sido adicionados. A Tabela 1 abaixo contém uma lista de solventes usados na triagem de solubilidade em solventes.

Tabela 1: Classe ICH Classe ICH (""International (""International Conference on Conference on Harmonisation" Harmonisation" of Technical of Technical Solvente Solvente Requirements Requirements for Registration for Registration of of Pharmaceuticals Pharmaceuticals for Human Use") for Human Use") 1 Acetona 3 13 Acetato de isobutila 3 2 Acetona/água (50:50) 3 14 Acetato de isopropila 3 3 Acetonitrila 2 15 Metanol 2

4 Acetonitrila/água (50:50) 2 16 Metanol/água (50:50) 2 5 1-Butanol 3 17 Cetona etílica e metílica 3 6 Diclorometano 2 18 Nitrometano 2 7 Dimetilformamida 2 19 1-Propanol 3 8 1,4-Dioxano 2 20 2-Propanol 3 9 Etanol 3 21 2-Propanol/água (50:50) 3 10 Acetato de etila 3 22 Tetra-hidrofurano 2 11 Formiato de etila 3 23 Tolueno 2 12 Heptano 3 24 Água n/a Triagem primária de sais

[0188] A triagem primária de sais foi realizada com o uso de soluções de estoque de 24 ácidos (1M), que foram preparadas em vários solventes. Estas foram adicionadas à sulfassalazina ácida livre suspensa em uma seleção de seis solventes. O procedimento é descrito abaixo. Os ácidos e solventes usados no estudo podem ser encontrados nas Tabela 2 e Tabela 3, respectivamente. • Aproximadamente 50 mg de sulfassalazina foram pesados dentro de cada um de 144 frascos; • 1 mL do solvente adequado foi adicionado para formar uma suspensão do sólido; • 131,8 µL da solução de estoque de ácido adequada (1,05 equivalentes) foram adicionados a cada frasco; • As amostras resultantes foram então submetidas a um ciclo de temperaturas entre a temperatura ambiente e 40 °C em ciclos de 4 horas durante ca. de 72 horas. Se ocorresse dissolução, o solvente era deixado evaporar de modo que os sólidos pudessem ser recuperados; • Quaisquer sólidos produzidos foram analisados por XRPD, TG/DTA e 1H-NMR se quantidades de material permitiram. Além disso, estudos de estabilidade a 40 °C e UR de 75% foram realizados nos sólidos durante ca de 48 horas.

Tabela 2 – Lista de triagem de ácidos para sais primários Ácido Ácido 1 Ácido acético 13 Ácido L-láctico 2 Ácido adípico 14 Ácido L-málico 3 Ácido benzenossulfônico 15 Ácido L-tartárico 4 Ácido benzoico 16 Ácido malônico 5 Ácido cítrico 17 Ácido metanossulfônico 6 Ácido etanodissulfônico 18 Ácido naftaleno-1,5-dissulfônico 7 Ácido etanossulfônico 19 Ácido pamoico 8 Ácido fumárico 20 Ácido fosfórico 9 Ácido glicólico 21 Ácido p-toluenossulfônico 10 Ácido hipúrico 22 Ácido succínico 11 Ácido clorídrico 23 Ácido sulfúrico 12 Ácido L-ascórbico 24 Ácido tiociânico Tabela 3 – Lista de triagem de solventes para sais primários Classe ICH (""International Conference on Harmonisation" of Technical Solvente Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use") 1 Acetona 3 2 Acetonitrila 2 3 Dioxano 2 4 Etanol 3 5 I PA 3 6 THF 2 Triagem secundária de sais e avaliação de capacidade de desenvolvimento

[0189] Após a triagem primária dos sais, um sal de interesse foi teve sua escala aumentada. O sal foi produzido em uma escala de 500 mg com o uso do seguinte procedimento: • Aproximadamente 500 mg de sulfassalazina foram precisamente pesados dentro de um frasco de cintilação de 20 mL;

• 10 mL do solvente adequado foram adicionados ao sólido para criar uma suspensão; • Uma solução de estoque do ácido foi preparada na concentração de 1 M em água; • Um volume da solução de estoque adequada (1,318 µL, 1,05 equivalentes) foi adicionado à suspensão; • O frasco foi então agitado durante ca. de 72 horas enquanto se ciclava a temperatura entre a temperatura ambiente e 40 °C em ciclos de 4 horas; • O sólido foi separado por filtração e secado sob vácuo à temperatura ambiente durante ca. de 3 horas; • O rendimento de cada experimento foi calculado e os sólidos foram analisados usando as seguintes técnicas: XRPD; TG/DTA; DSC; DVS (com análise por XRPD pós-DVS); IR ("Infrared", infravermelho); 1H-NMR; UPLC; avaliações de estabilidade de 1 semana a: 40 °C/UR de 75%, 80 °C; ou sob luz ambiente; estudos de desproporcionamento de sal com análise por XRPD e medição de pH; estudos de hidratação com análise pós-XRPD, estudos de solubilidade termodinâmica com análise pós-XRPD.

[0190] Os procedimentos para as últimas quatro técnicas são detalhados nas seções abaixo. Avaliações de estabilidade

[0191] Aproximadamente 20 mg do sal foram pesados dentro de um frasco de vidro. Uma amostra separada foi preparada para cada conjunto de condições: • 40 °C/UR de 70% – a amostra foi colocada em um forno a 40 °C. Dentro do forno, a amostra foi colocada em um dessecador contendo solução saturada de cloreto de sódio para manter a umidade UR de 75%; • 80 °C – a amostra foi colocada em um forno a 80 °C;

• Luz ambiente – a amostra foi colocada sobre um peitoril de janela iluminado à temperatura ambiente.

[0192] Após 1 semana, análise por XRPD e análise de pureza por HPLC foram realizadas nos sólidos. Estudos de desproporcionamento de sal

[0193] Aproximadamente 50 mg do sal foram pesados dentro de um frasco de vidro. 1,0 mL de água desionizada foi adicionado e a amostra foi transformada em uma pasta fluida à temperatura ambiente durante ca de 24 h. As leituras de pH pré- e pós-agitação foram realizadas e a amostra foi analisada por XRPD após agitação. Estudos de hidratação

[0194] Aproximadamente 50 mg de cada sal foram pesados dentro de um frasco de vidro. Três misturas diferentes de H2O e acetona, que correspondem a três diferentes atividades de água, foram preparadas para um volume total de 10 mL. A preparação é detalhada na Tabela 4. Um volume da mistura de solventes correspondente foi adicionado até que uma pasta fluida fosse formada, e então as amostras foram agitadas à temperatura ambiente durante ca. de 12 h. Leituras de pH pré-agitação e pós-agitação foram realizadas, e também foi realizada análise por XRPD pós-agitação em qualquer sólido restante.

Tabela 4: Preparações de soluções de estoque em solvente para estudos de hidratação Atividade Volume de H2O Volume de Volume de Solução Aproximada de (µL) Acetona (µL) de Estoque Água Adicionado (µL) 0,281 60 9940 1000 0,572 260 9740 1000 0,790 2680 7320 1000

Estudos de solubilidade termodinâmica

[0195] Foram preparadas soluções tampão em valores de pH de 1, 4,5 e 6,8. Primeiro, componentes a 0,2 M para as soluções tampão foram preparados em água (Tabela 5). Então, as soluções tampão foram preparadas pela combinação dos componentes diferentes e pelo ajuste do pH para o valor requerido (Tabela 6). Aproximadamente 20 mg do sal foram pesados dentro de um frasco de vidro, ao qual foi adicionado 0,5 mL da solução tampão correspondente para criar uma pasta fluida. As amostras foram então agitadas à temperatura ambiente durante ca. 24 h. As leituras de pH pré- e pós-agitação foram realizadas e qualquer sólido restante foi analisado por XRPD. Além disso, a concentração das soluções foi determinada por análise por HPLC.

Tabela 5 - Preparação de componentes tampão Componente Massa/Volume (g/mL) Volume completado com H2O para até Ácido Clorídrico (37%) 1,8 100 Cloreto de Potássio 1,49 100 Hidrogenoftalato de Potássio 4,09 100 Fosfato de Potássio 2,72 100 Monobásico Hidróxido de Sódio 0,8 100 Tabela 6: Preparação de tampões de pH pH do Tampão 1,0 4,5 6,8 Solução de fosfato de Componente Solução de ácido Solução de hidróxido de potássio monobásico Aquoso 1 clorídrico (0,2M) sódio (0,2M) (0,2M) Volume (mL) 67 4,35 25 Solução de Componente Solução de cloreto de Solução de hidróxido de hidrogenoftalato de Aquoso 2 potássio (0,2M) sódio (0,2M) potássio (0,2M) Volume (mL) 25 25 11,2 Volume 100 100 100 completado com

H2O para até (mL) Resultados Triagem de solubilidade em solventes

[0196] A triagem de solubilidade em solventes foi realizada em 24 sistemas de solvente. A solubilidade de sulfassalazina foi geralmente muito baixa com valores de solubilidade de < 5 mg·mL-1 em todos os solventes exceto DMF e THF (Tabela 7). A análise por XRPD dos sólidos restantes encontrou: • Sólido com padrões de XRPD consistentes com o material de entrada foi retornado a partir de todos os solventes, exceto 1,4-dioxano, DMF e THF; • Nenhum sólido foi retornado a partir de DMF; • Um padrão diferente da entrada foi retornado a partir de 1,4- dioxano e THF.

Tabela 7: Resultados da triagem de solubilidade Solubilidade Solubilidade Solvente Aproximada Solvente Aproximada (mg·mL-1) (mg·mL-1) 1 Acetona <5 13 Acetato de isobutila <5 2 Acetona/água (50:50) <5 14 Acetato de isopropila <5 3 Acetonitrila <5 15 Metanol <5 4 Acetonitrila/água (50:50) <5 16 Metanol/água (50:50) <5 5 1-Butanol <5 17 Cetona etílica e metílica <5 6 Diclorometano <5 13 Nitrometano <5 7 Dimetilformamida >100 19 1-Propanol <5 8 1,4-Dioxano <5 20 2-Propanol <5 9 Etanol <5 21 2-Propanol/água (50:50) <5 10 Acetato de etila <5 22 Tetra-hidrofurano 10 11 Formiato de etila <5 23 Tolueno <5 12 Heptano <5 24 Água <5

Triagem primária de sais

[0197] A triagem de sais primários foi realizada com 24 ácidos em 6 solventes. Os sólidos com um padrão de XRPD exclusivo foram adicionalmente analisados por TG/DTA e 1H NMR. Se dois sólidos tiveram o mesmo padrão, o sólido mais cristalino por XRPD foi analisado.

1. Ácido acético

[0198] A triagem primária de sal com ácido acético após ciclagem de temperatura retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente (Figura 5); • Padrões foram consistentes com o material de entrada para acetona, acetonitrila, etanol e álcool isopropílico (IPA); • Um padrão diferente a partir de 1,4-dioxano e THF.

[0199] O sólido a partir de 1,4-dioxano foi analisado por TG/DTA e 1H NMR.

2. Ácido adípico

[0200] A triagem primária de sal com ácido adípico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente (Figura 8); • Padrões foram consistentes com o material de entrada para acetona, acetonitrila, etanol e álcool isopropílico (IPA); • Um padrão diferente a partir de 1,4-dioxano e THF. Estes são iguais aos padrões a partir de 1,4-dioxano e THF a partir de ácido acético – estes solvatos são vistos em toda a triagem.

3. Ácido benzenossulfônico

[0201] A triagem primária de sal com ácido benzenossulfônico retornou: • Material cristalino a partir de todos os solventes, exceto acetona e THF • Padrões foram consistentes com o material de entrada para etanol e IPA; • Material parcialmente cristalino a partir de acetona;

• Material insuficiente a partir de THF – sólido foi obtido após evaporação (Figura 14); • Um padrão diferente do material de entrada com acetonitrila e 1,4- dioxano.

[0202] Dois dos sólidos foram analisados por TG/DTA e/ou 1H NMR.

4. Ácido benzoico

[0203] A triagem primária de sal com ácido benzoico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente; • Padrões foram consistentes com o material de entrada para acetona, acetonitrila, etanol e IPA e THF; • Um padrão diferente a partir de 1,4-dioxano – um solvato de dioxano.

5. Ácido cítrico

[0204] A triagem primária de sal com ácido cítrico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente; • Padrões foram consistentes com o material de entrada para acetona, acetonitrila, etanol e álcool isopropílico (IPA); • Um padrão diferente a partir de 1,4-dioxano e THF – solvatos.

6. Ácido etanodissulfônico

[0205] A triagem primária de sal com ácido etanodissulfônico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente; • Diferentes padrões de XRPD de todos os solventes.

[0206] Todos os sólidos foram analisados por TG/DTA e 1H NMR.

7. Ácido etanossulfônico

[0207] A triagem primária de sal com ácido etanossulfônico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente;

• Três padrões de XRPD diferentes, um a partir de acetona, 2- propanol e THF, um segundo a partir de 1,4-dioxano e o terceiro a partir de acetonitrila e etanol.

[0208] Todos os sólidos foram analisados por TG/DTA e 1H NMR.

8. Ácido fumárico

[0209] A triagem primária de sal com ácido fumárico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente; • Padrões consistentes com o material de entrada a partir de acetona, acetonitrila, etanol, IPA e THF; • Um padrão diferente a partir de 1,4-dioxano – solvato.

9. Ácido glicólico

[0210] A triagem primária de sal com ácido glicólico retornou: • Material cristalino consistente com o material de entrada de todos os solventes.

10. Ácido hipúrico

[0211] A triagem primária de sal com ácido hipúrico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente; • Padrões foram consistentes com o material de entrada para acetona, acetonitrila, etanol, IPA e THF; • Um padrão diferente a partir de 1,4-dioxano – solvato.

11. Ácido clorídrico

[0212] A triagem primária de sal com ácido clorídrico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente; • Padrões foram consistentes com o material de entrada para acetonitrila, etanol e IPA; • Um padrão diferente a partir de acetona, 1,4-dioxano e THF.

[0213] O sólido a partir de THF foi analisado por TG/DTA e 1H NMR.

12. Ácido L-ascórbico

[0214] A triagem primária de sal com ácido L-ascórbico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente exceto THF, para o qual houve material insuficiente - material cristalino foi retornado após evaporação e foi consistente com o material de entrada; • Padrões de todos os solventes exceto 1,4-dioxano que foram consistentes com o material de entrada; • O sólido a partir de 1,4-dioxano foi o solvato de 1,4-dioxano.

13. Ácido L-láctico

[0215] A triagem primária de sal com ácido L-láctico retornou: • Material cristalino consistente com o material de entrada de todos os solventes.

14. Ácido L-málico

[0216] A triagem primária de sal com ácido L-málico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente, exceto 1,4-dioxano; • Material predominantemente amorfo a partir de 1,4-dioxano; • Padrões consistentes com a entrada de todos os solventes exceto 1,4- dioxano e THF, para os quais um padrão consistente com seus respectivos solvatos foi observado.

15. Ácido L-tartárico

[0217] A triagem primária de sal com ácido L-tartárico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente; • Padrões foram consistentes com o material de entrada para acetona, acetonitrila, etanol e álcool isopropílico (IPA); • Um padrão diferente a partir de 1,4-dioxano e THF – solvatos.

[0218] O sólido a partir de THF foi analisado por TG/DTA.

16. Ácido malônico

[0219] A triagem primária de sal com ácido malônico retornou: • Material cristalino de todos os solventes, exceto 1,4-dioxano; • Material predominantemente amorfo a partir de 1,4-dioxano; • Padrões consistentes com a entrada para todos os solventes exceto 1,4-dioxano, para os quais picos adicionais foram observados.

17. Ácido metanossulfônico

[0220] A triagem primária de sal com ácido metanossulfônico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente; • Dois padrões diferentes, um a partir de acetona, acetonitrila, etanol e 2-propanol e um a partir de 1,4-dioxano e THF.

[0221] Um sólido de cada padrão foi analisado por TG/DTA e 1H NMR.

18. Ácido naftaleno-1,5-dissulfônico

[0222] A triagem primária de sal com ácido naftaleno-1,5-dissulfônico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente; • Seis padrões diferentes, todos os quais foram diferentes do material de entrada.

[0223] Os sólidos a partir de acetona, acetonitrila, 2-propanol e THF foram analisados por TG/DTA.

19. Ácido pamoico

[0224] A triagem primária de sal com ácido pamoico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente; • Padrões consistentes com uma mistura do material de entrada e ácido pamoico livre de todos os sistemas de solvente.

20. Ácido fosfórico

[0225] A triagem primária de sal com ácido fosfórico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente;

• Padrões consistentes com o material de entrada a partir de acetona, acetonitrila, etanol e IPA; • Um padrão diferente a partir de 1,4-dioxano e THF – solvatos.

21. Ácido p-toluenossulfônico

[0226] A triagem primária de sal com ácido p-toluenossulfônico retornou: • Material cristalino de todos os solventes, exceto THF, para o qual não houve material suficiente; • Padrões foram consistentes com o material de entrada para acetona, acetonitrila, etanol e álcool isopropílico (IPA); • Um padrão diferente a partir de 1,4-dioxano. • Material insuficiente a partir de THF – sólido foi obtido após evaporação; • O sólido a partir de THF após evaporação forneceu um padrão de XRPD diferente do sólido a partir de 1,4-dioxano após ciclagem de temperatura.

[0227] Os sólidos a partir de 1,4-dioxano e THF foram analisados por TG/DTA.

22. Ácido succínico

[0228] A triagem primária de sal com ácido succínico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente; • Os padrões foram consistentes com o material de entrada para acetona, acetonitrila, etanol, IPA e THF; • Um padrão diferente a partir de 1,4-dioxano – formação de solvato.

23. Ácido sulfúrico

[0229] A triagem primária de sal com ácido sulfúrico retornou: • Material cristalino a partir de todos os sistemas de solvente; • Padrões foram consistentes com o material de entrada para etanol e IPA;

• Um padrão diferente a partir de acetona, acetonitrila, 1,4-dioxano e THF.

[0230] Os sólidos a partir de acetona e THF foram analisados por TG/DTA. Triagem secundária de sais e avaliação completa de desenvolvimentabilidade

[0231] Após a triagem primária de sal, o sal de ácido benzenossulfônico foi progredido para a triagem secundária com o uso de acetonitrila como o solvente. Os resultados do aumento em escala do sal de ácido benzenossulfônico são detalhados abaixo: Ácido benzenossulfônico a partir de acetonitrila • Análise por XRPD verificou que o sólido em maior escala teve o mesmo padrão de XRPD que o sólido da triagem primária (Figura 1); • Por TGA, o sólido teve uma perda de massa de cerca de 0,3% até a decomposição. Um evento de fusão foi observado na DTA com dois picos com temperaturas iniciais a cerca de 193 °C e 204 °C antes da decomposição exotérmica a 264 °C; • Houve dois eventos endotérmicos na DSC para o primeiro ciclo de aquecimento, com a temperatura inicial de cerca de 196 °C e 204 °C, concordando com a DTA. Não houve eventos no ciclo de esfriamento ou no segundo ciclo de aquecimento; • O gráfico de isotermas de DVS (Figura 2) mostrou que o sólido é minimamente higroscópico, com uma absorção de massa de cerca de 0,7% em UR de 90%. No gráfico de DVS cinética, não ocorreu alteração óbvia na forma sólida. Após análise por DVS, o padrão de XRPD do sólido permaneceu inalterado; • Um espectro de IR (Infravermelho) do sólido em maior escala foi obtido como referência. Um pico largo que corresponde à presença de um grupo -OH pôde ser visto a cerca de 2800 cm-1.;

• Análise por 1 H NMR mostrou que o sal é uma razão de 1:1 de ácido para base. Apenas quantidades-traço do solvente, acetonitrila, estavam presentes; • O sal teve uma pureza de 98,1% por HPLC; • Após estudos de estabilidade de 1 semana no sólido, os seguintes resultados foram encontrados (Figura 3): Tabela 8: Valores de pureza do sal de ácido benzenossulfônico em maior escala após estudos de estabilidade Condição Pureza Média 40 °C/UR de 75% 97,3 80 °C 98,1 Luz ambiente 98,1 Resumo dos resultados Triagem primária de sais

[0232] As tabelas abaixo (Tabela 9 e Tabela 10) resumem os resultados da triagem primária de sais para sulfassalazina: Tabela 9: Resumo dos resultados da triagem primária de sais para os primeiros doze ácidos. 1,4-Dioxano Acetonitrila 2-Propanol Acetona Etanol

THF Ácido acético In In Di In In In/Th Ácido adípico In In Di In In In/Th Ácido benzenossulfônico In 1¥ 1‡ In In 1‡* Ácido benzoico In In Di In In In Ácido cítrico In In Di In In In/Th Ácido etanodissulfônico 1‡ 2‡ 3‡ 4‡ 5‡ 6‡ Ácido etanossulfônico 1‡ 2‡ 3‡ 2‡ 1‡ 1‡

Ácido fumárico In In Di In In In Ácido glicólico In In In In In In Ácido hipúrico In In Di In In In Ácido clorídrico 1‡ In 1‡ In In 1‡ Ácido L-ascórbico In In Di In In In * ¥ Em maior escala ‡ Cristalino In Material de entrada Di Solvato de dioxano Th Solvato de THF • Um asterisco (*) indica que o sólido foi obtido da evaporação.

Tabela 10: Resumo dos resultados da triagem primária para os segundos doze ácidos. 1,4-Dioxano Acetonitrila 2-Propanol Acetona Etanol

THF Ácido L-láctico In In In In In In Ácido L-málico In In In/Di In In In/Th Ácido L-tartárico In In Di In In Th Ácido malônico In In 1Ω In In In Ácido metanossulfônico 1‡ 1‡ 2‡ 1‡ 1‡ 2‡ Ácido naftaleno-1,5-dissulfônico 1‡ 2‡ 3‡ 4‡ 5‡ 6‡ Ácido pamoico In/Ac In/Ac In/Ac In/Ac In/Ac In/Ac Ácido fosfórico In In In/Di In In In/Th Ácido p-toluenossulfônico In In 1‡ In In 2*‡ Ácido succínico In In In/Di In In In Ácido sulfúrico 1‡ 1‡ 2Ω In IN 2‡ Ácido tiociânico In In Po In In 1‡ ‡ Cristalino Ω Insuficientemente Cristalino In Material de entrada Di Solvato de dioxano

Th Solvato de THF Ac Ácido Livre • Os números representam os diferentes padrões de XRPD para cada ácido; • Um asterisco (*) indica que o sólido foi obtido da evaporação.

[0233] A triagem de sais ácidos produziu menos novos padrões cristalinos de XRPD do que a triagem de sais básicos. Ácidos com um pKa mais baixo tenderam a formar sais mais que aqueles com um pKa mais alto. Foi observada a formação de ambos os solvatos de THF e de 1,4-dioxano de sulfassalazina, enquanto que não foi observada na triagem de sais básicos. A triagem de solubilidade demonstra que sem a presença de um contraíon, os solvatos de THF e de 1,4-dioxano formariam.

[0234] O sal de ácido benzenossulfônico foi escolhido para aumento de escala porque ele tem propriedades térmicas desejáveis. A mínima perda de massa devido à decomposição (0,0%) mostrou que o sal de ácido benzenossulfônico de sulfassalazina foi facilmente secado e não foi uma forma solvatada. Além disso, o ponto de fusão elevado (193 °C) demonstrou que este sal foi estável no estado sólido. Avaliação secundária de sal de ácido benzenossulfônico

[0235] A tabela abaixo (Tabela 11) resume os resultados da avaliação secundária do sal de ácido benzenossulfônico de sulfassalazina: Tabela 11: Resumo dos resultados da avaliação secundária Técnica Ácido benzenossulfônico analítica XRPD Cristalino TG/DTA perda de 0,3% até degradação DSC Endotermas a 196 e 204 °C Caracterização básica 1 H NMR sal 1:1, solvente mínimo HPLC 98,1% DVS Aumento de 0,7% em UR de 90%

XRPD Inalterado 40 °C, UR de 75% HPLC 97,3% Teste de XRPD Inalterado estresses de 1 80 °C semana HPLC 98,1% XRPD Inalterado Luz ambiente HPLC 98,1% Desproporcionamento de sal XRPD Sulfassalazina Baixa XRPD Parcialmente sulfassalazina Estudos de Média XRPD Parcialmente sulfassalazina hidratação Alta XRPD Sulfassalazina XRPD Sulfassalazina pH 1 Concentração <LOD Solubilidade XRPD Sulfasalazine pH 4,5 termodinâmica Concentração <LOD XRPD Sulfasalazine pH 6,8 Concentração <LOD Discussão

[0236] A sulfassalazina é uma base livre que existe em uma forma cristalina mas tem solubilidade insuficiente na maioria dos solventes. Uma triagem de sais foi realizada no composto com o uso de 24 contraíons ácidos em 6 sistemas de solvente. Cada experimento foi com ciclagem da temperatura para incentivar a formação de sal, e se nenhuns sólidos estiveram presentes, o solvente foi evaporado. Os sólidos com padrões de XRPD exclusivos foram analisados por TG/DTA para avaliar suas propriedades térmicas, e avaliações por 1H NMR e de estabilidade também foram realizadas e alguns sais.

[0237] O sal de ácido benzenossulfônico foi selecionado para uma triagem secundária de sais onde ele foi preparado em uma escala de 500 mg para ser adicionalmente analisado. O sal de ácido benzenossulfônico teve sua escala aumentada de forma bem sucedida para produzir um sólido com um padrão de XRPD que foi consistente com a forma sólida da triagem primária. O sal teve excelentes propriedades térmicas (perda de massa de 0,3%, 1919 [sic], se funde a 204 °C) e DVS (absorção de massa de 0,7%) e não se alterou sob condições de estresse de estabilidade. Em geral, o sal de ácido benzenossulfônico teve propriedades de estado sólido desejáveis. Exemplo 2 Triagem de bases para sais ácidos de sulfassalazina

[0238] As formas de sal de sulfassalazina da presente invenção podem fornecer solubilidade aparente mais alta que a sulfassalazina. Outras propriedades que podem ser melhoradas são cristalinidade e estabilidade da forma física. Tais formas de sais podem encontrar uso como IFA em composições.

[0239] A triagem de sais foi realizada para identificar formas de sais cristalinas e desenvolvíveis de sulfassalazina. A triagem produziu numerosos sais farmaceuticamente aceitáveis com propriedades físicas adequadas para o desenvolvimento adicional, incluindo algumas formas com solubilidade aquosa significativamente mais alta em comparação com a forma de ácido livre da sulfassalazina. Caracterização inicial

[0240] Ao receber a sulfassalazina, a caracterização inicial foi realizada com o uso de XRPD, PLM, TG/DTA, DSC, DVS, 1H NMR, UPLC e LC-MS. Triagem primária de sais

[0241] A triagem primária dos sais foi realizada com o uso de soluções de estoque de 16 bases (1 M), que foram preparadas em água. Estas foram adicionadas à sulfassalazina ácida livre suspensa em uma seleção de seis solventes. O procedimento é descrito abaixo. As bases e os solventes utilizados no estudo podem ser encontrados nas Tabela 12 e Tabela 13 respectivamente. • Aproximadamente 50 mg de sulfassalazina foram pesados dentro de cada um de 96 frascos;

• 1 mL do solvente adequado foi adicionado para formar uma suspensão do sólido; • 131,8 µL da solução de estoque de base adequada (1,05 equivalentes) foram adicionados a cada frasco; • As amostras resultantes foram então submetidas a ciclos de temperatura entre a temperatura ambiente e 40 °C em ciclos de 4 horas durante cerca de 72 horas. Se as quantidades de material foram insuficientes, o solvente foi permitido evaporar para tentar recuperar sólidos; • Sólidos produzidos foram analisados por XRPD, TG/DTA e 1H NMR se as quantidades de material permitiram. Além disso, estudos de estabilidade a 40 °C/UR de 75% foram realizados em sólidos durante cerca de 48 horas.

Tabela 12 - Lista de triagem primária de bases para sais Base Base 1 1-(2-Hidroxietil)-pirrolidina 9 L-Arginina 2 Hidróxido de amônio 10 L-Lisina 3 Benzatina 11 Meglumina 4 Colina 12 Piperazina 5 Dietanolamina 13 Hidróxido de potássio 6 Dietilamina 14 Hidróxido de sódio 7 Deanol 15 Trietanolamina 8 Hidroxietilmorfolina 16 Trometamina Tabela 13 - Lista de triagem primária de solventes para sais Classe ICH (""International Conference on Solvente Harmonisation" of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use") 1 Acetona 3 2 Acetonitrila 2 3 Dioxano 2 4 Etanol 3 5 IPA 3 6 THF 2

Triagem secundária de sais e avaliação de capacidade de desenvolvimento

[0242] Após a triagem primária de sais, quatro sais foram postos para aumento de escala. Os sais foram produzidos em uma escala de 500 mg usando o seguinte procedimento: • Aproximadamente 500 mg de sulfassalazina foram precisamente pesados dentro de um frasco de cintilação de 20 mL; • 10 mL do solvente adequado foram adicionados ao sólido para criar uma suspensão; • Soluções de estoque de cada base foram preparadas na concentração de 1M em água; • Um volume da solução de estoque adequada (1.318 µL, 1,05 equivalentes) foi adicionado a cada suspensão; • Os frascos foram então agitados durante ca. de 72 horas enquanto a temperatura era ciclada entre a temperatura ambiente e 40°C em ciclos de 4 horas; • Para os frascos nos quais havia um sólido restante, este foi separado por filtração e seca sob vácuo à temperatura ambiente durante ca. de 3 horas; • Para os frascos nos quais não houve sólido, os frascos foram destampados e deixados até que o solvente tivesse evaporado. Quando o solvente evaporou, o sólido resultante foi secado sob vácuo à temperatura ambiente durante ca. de 3 horas;

[0243] Um rendimento de cada experimento foi calculado e os sólidos foram analisados de acordo com os mesmos métodos conforme detalhados acima no Exemplo 1. Resultados Caracterização inicial

[0244] A caracterização inicial da sulfassalazina indicou o seguinte:

• Por XRPD, a amostra foi cristalina com um pequeno teor de amorfo; • Imagens por MLP mostraram que sulfassalazina é feita de partículas pequenas, birrefringentes; • A TGA mostrou mínima perda de peso até a degradação a cerca de 260 °C. Um único evento endotérmico foi observado na DTA, com uma temperatura inicial de cerca de 259 °C; • No primeiro ciclo de aquecimento, a DSC mostrou um evento endotérmico com dois picos (temperaturas iniciais de cerca de. 236 °C e 246 °C). O ciclo de esfriamento mostrou um pequeno evento com início a cerca de 45 °C. É provável que isto seja uma transição vítrea porque o sólido amorfo esfria a partir da massa fundida. Não foram observados eventos no segundo ciclo de aquecimento; • Por DVS, a sulfassalazina foi minimamente higroscópica com uma absorção de massa de cerca de 1,0% em UR de 90%. Não há evidência de uma alteração da forma durante a experimentação e o padrão de XRPD foi mantido após ser exposta à umidade por DVS; • O espectro de 1H NMR da sulfassalazina teve 11 prótons na região aromática, consistente com a estrutura; • A pureza da amostra encontrada por UPLC foi de 96,4%; • O pico de íon molecular no espectro de massa foi em m/z de 399,05, consistente com o valor de M+H do composto. Determinação de pKa

[0245] Os valores pKa (Tabela 14) e logP (Tabela 15) da sulfassalazina são detalhados abaixo. A molécula tem dois grupos ácidos, com valores de pKa de 2,29 e 10,96, e um grupo básico, com um valor de pKa de 8,05. O fato de que a sulfassalazina pode existir quer na forma catiônica quer na forma zwiteriônica significa que ela tem dois valores de logP, um para cada forma.

Tabela 14: Valores de pKa da sulfassalazina pKa Tipo* T / °C Ambiente Iônico Método 2,29 ± 0,01 Ácido 25,0 KCl 0,15 M UV-métrico 8,05 ± 10,01 Base 25,0 - 25,1 KCl 0,15 M UV-métrico 10,96 ± 0,02 Ácido 25,0 - 25,1 KCl 0,15 M UV-métrico Tabela 15: Valores de logP da sulfassalazina LogP Espécie T/°C Ambiente Iônico Método 3,73 ± 0,01 Catiônica 24,9 - 25,0 KCl 0,15 M pH-métrico 0,02 + 0,03 Zwiteriônica 24,9 - 25,0 KCl 0,15 M pH-métrico Triagem primária de sais

[0246] A triagem primária de sais foi realizada com 16 bases em 6 solventes conforme descrito acima. Os sólidos com padrões de XRPD cristalinos 1 exclusivos foram analisados por TG/DTA e também por NMR H se as quantidades de material permitiram. Se múltiplos sólidos tiveram o mesmo padrão, o sólido mais cristalino por XRPD foi analisado.

1. 1-(2-Hidroxietil)-pirrolidina

[0247] A triagem primária de sais com 1-(2 hidroxietil)-pirrolidina retornou: • Sem sólidos após ciclagem de temperatura; • Seis sólidos após evaporação; ○ Quatro sólidos cristalinos a partir de acetona, acetonitrila, 1,4- dioxano e THF; ○ Dois sólidos amorfos a partir de etanol e 2-propanol.

[0248] No total, dois padrões de XRPD cristalinos diferentes foram observados, um a partir de acetona e acetonitrila e um segundo a partir de 1,4-dioxano e THF.

2. Hidróxido de amônio

[0249] A triagem primária de sais com hidróxido de amônio retornou: • Um sólido após ciclagem de temperatura;

○ Sólido cristalino a partir de acetonitrila; ○ Material insuficiente a partir de todos os outros sistemas de solvente; • Quatro sólidos após evaporação; ○ Três sólidos cristalinos a partir de 1,4-dioxano, etanol e 2-propanol; ○ Um sólido amorfo a partir de acetona; ○ Material insuficiente a partir de THF

[0250] No total, foram observados quatro padrões de XRPD cristalinos diferentes. Três dos sólidos foram analisadas por TG/DTA.

3. Benzatina (N,N’-dibenziletilenodiamina)

[0251] A triagem primária de sais com benzatina retornou: • Quatro sólidos após ciclagem de temperatura; ○ Sólido cristalino a partir de acetonitrila, 1,4-dioxano, etanol e 2- propanol; ○ Material insuficiente a partir de todos os outros sistemas de solvente; • Dois sólidos após evaporação; ○ Um sólido cristalino a partir de acetona; ○ Um sólido predominantemente amorfo a partir de THF;

[0252] No total, foram observados quatro padrões de XRPD cristalinos diferentes. Três dos sólidos foram analisadas por TG/DTA.

4. Hidróxido de colina

[0253] A triagem primária de sais com hidróxido de colina retornou: • Sem sólidos após ciclagem de temperatura; • Sem sólidos após evaporação.

5. Dietanolamina

[0254] A triagem primária de sais com dietanolamina retornou:

• Sem sólidos após ciclagem de temperatura; • Quatro sólidos após evaporação; ○ Quatro sólidos cristalinos a partir de acetona, acetonitrila, etanol e THF; ○ Material insuficiente a partir de 1,4-dioxano e 2-propanol.

[0255] No total, foram observados dois padrões de XRPD diferentes.

6. Dietilamina

[0256] A triagem primária de sais com dietilamina retornou: • Sem sólidos após ciclagem de temperatura; • Seis sólidos após evaporação; ○ Seis sólidos cristalinos de todos os sistemas de solvente foram analisados.

[0257] No total, três padrões de XRPD diferentes foram observados - um a partir de acetona, acetonitrila, etanol e 2-propanol, um a partir de 1,4-dioxano e um a partir de THF. Embora seja provável que, devido à similaridade dos difratogramas, todos os sólidos contêm um pouco da mesma forma sólida, os picos adicionais no padrão a partir de 1,4-dioxano THF sugerem a presença de uma forma adicional. Um dos sólidos foi analisado por TG/DTA. Um sólido foi submetido às condições de teste de estresse de estabilidade de 40 °C/UR de 75% durante aproximadamente 48 horas.

7. Deanol (dimetilaminoetanol)

[0258] A triagem primária de sais com deanol retornou: • Sem sólidos após ciclagem de temperatura; • Três sólidos após evaporação; ○ Dois sólidos cristalinos a partir de etanol e THF; ○ Um sólido amorfo a partir de 2-propanol.

[0259] No total, foram observados dois padrões de XRPD diferentes. Embora haja algumas similaridades entre os dois difratogramas, a presença de picos adicionais na forma sólida a partir de THF sugere a presença de uma forma adicional. Um dos sólidos foi analisado por TG/DTA.

8. Hidroxietilmorfolina

[0260] A triagem primária de sais com hidroxietilmorfolina retornou: • Um sólido após ciclagem de temperatura; ○ Um sólido amorfo a partir de 2-propanol. • Sem sólidos após evaporação.

9. L-Arginina

[0261] A triagem primária de sais com L-arginina retornou: • Cinco sólidos após ciclagem de temperatura (Figura 33); ○ Três sólidos cristalinos a partir de acetona, acetonitrila e 1,4-dioxano; ○ Um sólido predominantemente amorfo a partir de etanol; ○ Um sólido amorfo a partir de 2-propanol; • Um sólido após evaporação; • Um sólido predominantemente amorfo a partir de THF.

[0262] No total, foram observados três padrões de XRPD cristalinos diferentes. Dois dos sólidos foram analisados por TG/DTA. Dois sólidos foram submetidos às condições de teste de estresse de estabilidade de 40 °C/UR de 75% durante ca. de 48 horas: • O sólido a partir de acetonitrila teve o mesmo padrão de XRPD após o teste; • O sólido a partir de 1,4-dioxano tornou-se amorfo após o teste.

10. L-Lisina

[0263] A triagem primária de sais com L-Lisina retornou:

• Cinco sólidos após ciclagem de temperatura. Os mesmos padrões foram observados e confirmados com o uso de uma escala logarítmica de contagens para mostrar que os picos ocorrem na mesma posição; ○ Sólido cristalino a partir de acetona, acetonitrila, 1,4-dioxano, etanol e 2-propanol; ○ Material insuficiente a partir de THF; • Um sólido após evaporação; ○ Um sólido cristalino a partir de THF.

[0264] No total, um padrão de XRPD cristalino diferente foi observado, embora o padrão a partir de THF tenha um pico extra em 2θ baixo. Um dos sólidos foi analisado por TG/DTA: • O sólido a partir de 1,4-dioxano teve uma perda de massa de ca. de 2,2% até a decomposição. A ca. de 217 °C uma pequena massa fundida foi imediatamente seguida por uma decomposição exotérmica.

[0265] Um sólido foi submetido às condições de teste de estresse de estabilidade de 40 °C/UR de 75% durante.ca de 48 horas: o sólido a partir de 1,4-dioxano teve o mesmo padrão de XRPD após o teste. Um sólido foi analisado por NMR 1H.

11. Meglumina

[0266] A triagem primária de sais com meglumina retornou: • Dois sólidos após ciclagem de temperatura; ○ Material amorfo a partir de acetonitrila e 2-propanol; ○ Material insuficiente a partir de todos os outros sistemas de solvente; • Três sólidos após evaporação; ○ Três sólidos parcialmente cristalinos a partir de acetona, etanol e THF;

○ Material insuficiente a partir de 1,4-dioxano.

[0267] No total, foi observado um Padrão de XRPD cristalino diferente.

12. Piperazina

[0268] A triagem primária de sais com piperazina retornou: • Seis sólidos após ciclagem de temperatura; ○ Sólido cristalino a partir de acetona, acetonitrila, 1,4-dioxano, etanol e 2-propanol; ○ Material predominantemente amorfo a partir de THF;

[0269] No total, foi observado um Padrão de XRPD cristalino diferente. Um dos sólidos foi analisado por TG/DTA e um sólido foi submetido às condições de teste de estresse de estabilidade de 40 °C/UR de 75% durante ca. de 48 horas: o sólido a partir de acetonitrila teve o mesmo padrão de XRPD após o teste.

13. Hidróxido de potássio

[0270] A triagem primária de sais com hidróxido de potássio retornou: • Três sólidos após ciclagem de temperatura; ○ Sólido cristalino a partir de acetonitrila, etanol e 2-propanol; ○ Material insuficiente a partir de todos os outros sistemas de solvente; • Três sólidos após evaporação; ○ Sólido cristalino a partir de acetona, 1,4-dioxano e THF.

[0271] No total, seis formas cristalinas diferentes a partir de cada sistema de solvente produziram um padrão de XRPD diferente. Três dos sólidos foram analisadas por TG/DTA. Três sólidos foram submetidos às condições de teste de estresse de estabilidade de 40 °C/UR de 75% durante ca de 48 horas: • O sólido a partir acetonitrila teve um padrão de XRPD diferente após o teste;

• O sólido a partir de etanol teve o mesmo padrão de XRPD após o teste; • O sólido a partir de 2-propanol teve o mesmo padrão de XRPD após o teste.

14. Hidróxido de sódio

[0272] A triagem primária de sais com hidróxido de sódio retornou: • Dois sólidos após ciclagem de temperatura; ○ Sólido cristalino a partir de acetonitrila e 2-propanol; ○ Material insuficiente a partir de todos os outros sistemas de solvente; • Três sólidos após evaporação; ○ Sólido cristalino a partir de acetona, etanol e THF; ○ Material insuficiente a partir de 1,4-dioxano.

[0273] No total, quatro padrões de XRPD cristalinos diferentes foram observados - um a partir de acetona, um a partir de acetonitrila, um a partir de etanol e 2-propanol e um a partir de THF. Dois dos sólidos foram analisadas por TG/DTA e dois sólidos foram submetidas às condições de teste de estresse de estabilidade de 40 °C/UR de 75% durante ca de 48 horas: • O sólido a partir acetonitrila teve um padrão de XRPD diferente após o teste; • O sólido a partir de 2-propanol teve um padrão de XRPD diferente após o teste.

15. Trietanolamina

[0274] A triagem primária de sais com trietanolamina retornou: • Dois sólidos após ciclagem de temperatura; ○ Um sólido cristalino a partir de etanol; ○ Um sólido amorfo a partir de 2-propanol;

○ Material insuficiente a partir de todos os outros sistemas de solvente; • Quatro sólidos após evaporação; ○ Quatro sólidos cristalinos a partir de acetona, acetonitrila, 1,4- dioxano e THF;

[0275] No total, dois padrões de XRPD cristalinos diferentes foram observados que foram diferentes do material de entrada - um a partir de acetona, 1,4-dioxano e THF e um segundo a partir de acetonitrila. Um dos sólidos foi analisado por TG/DTA e um sólido foi submetido às condições de teste de estresse de estabilidade de 40 °C/UR de 75% durante ca de 48 horas: • O sólido a partir de acetona teve o mesmo padrão de XRPD após o teste;

16. Trometamina

[0276] A triagem primária de sais com trometamina retornou: • Um sólido após ciclagem de temperatura; ○ Sólido amorfo a partir de acetonitrila; ○ Material insuficiente a partir de todos os outros sistemas de solvente; • Quatro sólidos após evaporação; ○ Três sólidos cristalinos a partir de acetona, etanol e THF; ○ Um sólido parcialmente cristalino a partir de 2-propanol; ○ Material insuficiente a partir de 1,4-dioxano.

[0277] No total, um padrão de XRPD cristalino diferente foi observado. Um dos sólidos foi analisado por TG/DTA e três sólidos foram submetidos às condições de teste de estresse de estabilidade de 40 °C/UR de 75% durante ca de 48 horas: • O sólido a partir de etanol teve um padrão de XRPD que teve cristalinidade reduzida após o teste.

Triagem secundária de sais e avaliação de capacidade de desenvolvimento

[0278] Após a triagem primária de sais, os seguintes quatro sais foram selecionados para a triagem secundária (Tabela 16): Tabela 16: Lista dos sais selecionados para o aumento em escala Contraíon Solvente 1 Dietilamina Etanol 2 L-Lisina Acetona 3 Trietanolamina Acetona 4 Trometamina Etanol

[0279] Os resultados do aumento em escala dos sais de dietilamina, L- lisina, trietanolamina e trometamina são detalhados abaixo:

1. Dietilamina a partir de etanol • Análise por XRPD verificou que o sólido em maior escala tem um padrão de XRPD similar ao sólido da triagem primária mas com um pico adicional em ca. de 6° 2θ. Houve cristalinidade reduzida do sólido com escala aumentada; • Por TGA, o sólido teve uma perda de massa de cerca de 1,1% antes de uma grande perda de massa de dois estágios, que poderiam ser ambas a decomposição ou a perda inicial poderia ser por dessolvatação. Análise do espectro de 1H NMR sugere que poderia ser a perda de água. Um evento de fusão foi observado na DTA antes da decomposição a cerca de 182 °C; • Houve um único evento endotérmico no termograma de DSC para o primeiro ciclo de aquecimento, com temperatura inicial de cerca de 191 °C, concordando com a DTA. Não houve eventos no ciclo de esfriamento ou no segundo ciclo de aquecimento; • O gráfico de isotermas de DVS mostrou que o sólido é minimamente higroscópico, com uma absorção de massa de cerca de 1,0% em

UR de 90%. No gráfico de cinética, não ocorreu alteração óbvia na forma sólida.

Após análise por DVS, o padrão de XRPD do sólido permaneceu inalterado; • Um espectro de IR (Infravermelho) do sólido em maior escala foi obtido como referência.

Um pico largo que corresponde à presença de um grupo -OH pôde ser visto a cerca de 2750 cm-1.; • Análise por 1H NMR mostrou que o sal é uma razão de 1:1 de ácido para base.

Apenas 0,05 equivalente do solvente, etanol, estava presente; • Após estudos de estabilidade de 1 semana no sólido, os seguintes resultados foram encontrados (Figura 4): ○ 40 °C/UR de 75% – o padrão de XRPD permaneceu inalterado e a pureza (Tabela 17) também foi inalterada (97,6%); ○ 80 °C – o padrão de XRPD foi muito pouco diferente após estudos de estabilidade, com o pico a ca. de 6° 2θ sendo perdido.

A pureza da amostra havia aumentado para 98,3%; ○ Luz ambiente – o padrão de XRPD foi muito pouco diferente após estudos de estabilidade, com o pico a aproximadamente 6° 2θ sendo perdido.

A pureza foi a mesma que a entrada em 97,6%; • O sal teve uma pureza de 97,6% por HPLC; • Após estudos de hidratação, os seguintes resultados foram encontrados, e valores de pH são mostrados na Tabela 18: ○ Baixa atividade de água – houve pequenas alterações no padrão de XRPD, por exemplo a perda do pico pequeno a 6° 2θ; ○ Média atividade de água – houve pequenas alterações no padrão de XRPD, por exemplo, a perda do pico pequeno a 6° 2θ; ○ Alta atividade de água – nenhum sólido pôde ser obtido devido à dissolução completa;

• Após estudos de solubilidade termodinâmica, os seguintes resultados foram encontrados, e valores de pH são mostrados na Tabela 19: ○ tampão de pH 1 – por XRPD, o sólido havia revertido para a sulfassalazina. A quantidade de sólido na solução foi menor que o limite de detecção; ○ tampão de pH 4,5 – houve pequenas alterações no padrão de XRPD, por exemplo a perda do pico pequeno a 6° 2θ e houve uma concentração de 1,7 mg·mL-1 (Tabela 20); ○ tampão de pH 6,8 – houve pequenas alterações no padrão de XRPD, por exemplo, a perda do pico pequeno a 6° 2θ. A concentração da solução foi de 7,7 mg·mL-1.

Tabela 17 – Valores de pureza por UPLC do sal de dietilamina em maior escala após estudos de estabilidade Condição Pureza Média 40 °C/UR de 75% 97,6 80 °C 98,3 Luz ambiente 97,6 Tabela 18: Valores de pH do sal de dietilamina em maior escala pré - e pós- estudos de hidratação Atividade de pH pré- pH pós- água agitação agitação 0,281 5,52 5,11 0,572 5,71 5,35 0,790 5,40 5,29

Tabela 19: Valores de pH do sal de dietilamina em maior escala pré - e pós- estudos de solubilidade termodinâmica pH do pH pré- pH pós- Tampão agitação agitação 1 0,57 1,52 4,5 5,22 6,66 6,8 6,72 6,98 Tabela 20: Valores da concentração termodinâmica do sal de dietilamina em maior escala Concentração pH do Tampão (mg·mL-1) menor que o limite 1 de detecção 4,5 1,7 6,8 7,7

2. L-Lisina a partir de acetona • Análise por XRPD verificou que o sólido em maior escala tem o mesmo padrão de XRPD que o sólido da triagem primária. As diferenças na intensidade de pico podem ser atribuídas à presença de orientação preferencial no sólido da triagem primária; • Por TGA, o sólido teve uma perda de massa de aproximadamente 3,0% até a decomposição exotérmica a aproximadamente 222 °C. Não foram observados eventos na DTA antes da decomposição; • Não houve eventos no termograma de DSC para o primeiro ciclo de aquecimento, concordando com a DTA. No ciclo de esfriamento, foi observado um pequeno evento endotérmico com temperatura inicial de aproximadamente 86 °C, que poderia ser devido a uma transição vítrea. Não foram observados eventos no segundo ciclo de aquecimento;

• O gráfico de isotermas de DVS mostrou que o sólido é moderadamente higroscópico, com uma absorção de massa de aproximadamente 4,9% em UR de 90%. No gráfico de cinética, não ocorreu alteração óbvia na forma sólida.

Após análise por DVS, o padrão de XRPD do sólido permaneceu inalterado; • Um espectro de IR (Infravermelho) do sólido em maior escala foi obtido como referência.

Um pico largo que corresponde à presença de um grupo -OH pôde ser visto em aproximadamente 2950 cm-1; 1 • Análise por H NMR mostrou que o sal é uma razão de 1:1 de ácido para base; • O sal teve uma pureza de 98,2% por HPLC; • Após estudos de estabilidade de 1 semana no sólido, os seguintes resultados foram encontrados (Figura 5): ○ 40 °C/UR de 75% – o padrão de XRPD foi muito pouco diferente após estudos de estabilidade, com uma formação de pico extra a ca de 6,5° 2θ.

A pureza foi aproximadamente a mesma (Tabela 21, 98,3%); ○ 80 °C – o padrão de XRPD foi muito pouco diferente após estudos de estabilidade, com uma formação de pico extra a ca de 6,5° 2θ.

A pureza foi aproximadamente inalterada a 98,4%; ○ Luz ambiente – o padrão de XRPD foi mantido e a pureza permaneceu inalterada (98,1%); • Após estudos de hidratação os seguintes resultados foram encontrados, e valores de pH são mostrados na Tabela 22: ○ Baixa atividade de água – o padrão de XRPD permaneceu inalterado; ○ Média atividade de água – houve pequenas alterações no padrão de XRPD;

○ Alta atividade de água – houve pequenas alterações no padrão de XRPD; • Após estudos de solubilidade termodinâmica, os seguintes resultados foram encontrados, e valores de pH são mostrados na Tabela 23: ○ tampão de pH 1 – por XRPD, o sólido havia revertido para a sulfassalazina. A quantidade de sólido na solução foi menor que o limite de detecção; ○ tampão de pH 4,5 – houve algumas alterações no padrão de XRPD, por exemplo picos adicionais a cerca de 8° 2θ. A concentração da solução foi de 1,7 mg·mL-1 (Tabela 24); ○ tampão de pH 6,8 – houve algumas alterações no padrão de XRPD, por exemplo, o pico largo a 18° 2θ. A concentração da solução foi de 6,7 mg·mL-1.

Tabela 21: Valores de pureza por UPLC do sal de L-Lisina em maior escala após estudos de estabilidade Condição Pureza Média 40 °C/UR de 75% 98,3 80 °C 98,4 Luz ambiente 98,1 Tabela 22: Valores de pH do sal de L-Lisina em maior escala pré- e pós- estudos de hidratação Atividade de pH pré- pH pós- água agitação agitação 0,281 6,53 6,52 0,572 6,77 7,55 0,790 8,28 7,90

Tabela 23: Valores de pH do sal de L-Lisina em maior escala pré- e pós- estudos de solubilidade termodinâmica pH do pH pré- pH pós-agitação Tampão agitação 1 0,76 1,91 4,5 4,70 5,63 6,8 6,99 7,17 Tabela 24: Valores de solubilidade termodinâmica do sólido de L-Lisina em maior escala Concentração pH do Tampão (mg·mL-1) menor que o limite de 1 detecção 4,5 1,7 6,8 6,7

3. Trietanolamina a partir de acetona • Análise por XRPD verificou que o sólido em maior escala tem o mesmo padrão de XRPD que o sólido da triagem primária. Houve cristalinidade aprimorada do sólido com escala aumentada; • Por TGA, o sólido teve uma perda de massa de aproximadamente 1,7% até a decomposição exotérmica a aproximadamente 205 °C. Um evento de fusão foi observado na DTA antes da decomposição a ca. de 156 °C; • Houve um único evento endotérmico no termograma de DSC para o primeiro ciclo de aquecimento, com temperatura inicial a aproximadamente 154 °C, concordando com a DTA. No ciclo de resfriamento, foi observado um grande evento endotérmico com temperatura inicial a cerca de 206 °C, que poderia ser devido à cristalização do sólido a partir da massa fundida. Não foram observados eventos no segundo ciclo de aquecimento, possivelmente devido à alguma decomposição do sólido;

• O gráfico de isotermas de DVS mostrou que o sólido é moderadamente higroscópico, com uma absorção de massa de aproximadamente 3,9% em UR de 90%. No gráfico de cinética, não ocorreu alteração óbvia na forma sólida.

Após análise por DVS, o padrão de XRPD do sólido permaneceu inalterado; • Um espectro de IR (Infravermelho) do sólido em maior escala foi obtido como referência.

Um pico largo que corresponde à presença de um grupo -OH pôde ser visto a aproximadamente 3000 cm-1; • Análise por 1H NMR mostrou que o sal é uma razão de 1:1 de ácido para base.

Apenas quantidades-traço do solvente, acetona, estavam presentes; • O sal teve uma pureza de 97,3% por HPLC; • Após estudos de estabilidade de 1 semana no sólido, os seguintes resultados foram encontrados (Figura 6): ○ 40 °C/UR de 75%, o padrão de XRPD foi mantido e a pureza foi aproximadamente a mesma (Tabela 25, 97,5%); ○ 80 °C – houve diferença na intensidade de pico em comparação com padrão antes do estudo.

A pureza do sólido foi inalterada (97,3%); ○ Luz ambiente – o padrão de XRPD foi mantido, do mesmo modo a pureza (97,4%); • Após estudos de solubilidade termodinâmica, os seguintes resultados foram encontrados, e valores de pH são mostrados na Tabela 26: o tampão de pH 1 – - por XRPD, o sólido havia revertido para a sulfassalazina.

Houve material insuficiente para a solubilidade ser determinada; ○ tampão de pH 4,5 – o sólido foi amorfo por XRPD, embora os picos que permaneceram foram consistentes com o material de entrada.

Isto pôde ser devido ao material limitado disponível para análise.

A concentração da solução foi de 0,1 mg·mL-1 (Tabela 27);

○ tampão de pH 6,8 – sólido foi amorfo por XRPD, embora os picos que permaneceram foram consistentes com o material de entrada. Isto pôde ser devido ao material limitado disponível para análise. A concentração da solução foi de 0,9 mg·mL-1.

Tabela 25: Valores de pureza por UPLC do sal de trietanolamina em maior escala após estudos de estabilidade Condição Pureza Média 40 °C/UR de 75% 97,5 80 °C 97,3 Luz ambiente 97,4 Tabela 26: Valores de pH do sal de trietanolamina em maior escala pré- e pós- estudos de solubilidade termodinâmica pH do pH pré- pH pós- Tampão agitação agitação 1 1,25 1,54 4,5 5,97 6,15 6,8 6,78 7,38 Tabela 27: Valores de solubilidade termodinâmica de sal de trietanolamina em maior escala Concentração pH do Tampão (mg·mL-1) 1 Material insuficiente 4,5 0,1 6,8 0,9

4. Trometamina a partir de etanol • Análise por XRPD verificou que o sólido em maior escala tem o mesmo padrão de XRPD que o sólido da triagem primária;

• Por TGA, o sólido teve uma perda de massa de cerca de 3,0% até a decomposição exotérmica a cerca de 252 °C.

Um evento de fusão foi observado na DTA antes da decomposição com uma temperatura inicial de cerca de 129 °C; • Houve dois eventos endotérmica no termograma de DSC para o primeiro ciclo de aquecimento, com temperaturas iniciais a cerca de 67 °C e 123 °C.

O último destes dois eventos concorda com o evento na DTA, no entanto o evento menos não foi observado na DTA.

Não houve eventos no ciclo de esfriamento ou no segundo ciclo de aquecimento; • o gráfico de isotermas de DVS mostrou que sólido é moderadamente higroscópico, com uma absorção de massa de aproximadamente 8,9% em UR de 90%. No gráfico de cinética, não ocorreu alteração óbvia na forma sólida.

Após análise por DVS, o padrão de XRPD do sólido permaneceu inalterado; • Um espectro de IR (Infravermelho) do sólido em maior escala foi obtido como referência.

Um pico largo que corresponde à presença de um grupo -OH pôde ser visto a aproximadamente 3000 cm-1; • Análise por 1H NMR mostrou que o sal é uma razão de 1:1 de ácido para base.

Apenas 0,04 equivalente do solvente, etanol, estava presente; • O sal teve uma pureza de 97,5% por HPLC; • Após estudos de estabilidade de 1 semana no sólido, os seguintes resultados foram encontrados (Figura 7): ○ 40 °C/UR de 75% – o padrão de XRPD foi o mesmo que aquele do material de entrada, embora houvesse alguma redução na cristalinidade.

A pureza do sólido foi inalterada (97,4%, Tabela 28); ○ 80 °C – o padrão de XRPD foi consistente com aquele do material de entrada e a pureza foi muito pouco aumentada (97,8%); ○ Luz ambiente – o padrão de XRPD foi consistente com aquele do material de entrada e houve uma pequena diminuição da pureza (97,2%);

• Após estudos de solubilidade termodinâmica, os seguintes resultados foram encontrados, e valores de pH são mostrados na Tabela 29: ○ tampão de pH 1 – o sólido teve um padrão diferente em comparação com o material de entrada e teve mais conteúdo amorfo. A quantidade de sólido na solução foi menor que o limite de detecção; ○ tampão de pH 4,5 – o sólido teve um padrão diferente em comparação com o material de entrada. A concentração da solução foi de 0,3 mg·mL-1 (Tabela 30); ○ tampão de pH 6,8 – sólido teve um padrão diferente em comparação com o material de entrada, mas o padrão foi o mesmo que aquele do tampão de pH 4,5. Houve material insuficiente deixado para determinação de solubilidade.

Tabela 28 – Valores de pureza por UPLC do Sal de trometamina em maior escala após estudos de estabilidade Condição Pureza Média 40 °C/UR de 75% 97,4 80 °C 97,8 Luz ambiente 97,2 Tabela 29: Valores de pH do sal de trometamina em maior escala após estudos de solubilidade termodinâmica pH do pH pré- pH pós-agitação Tampão agitação 1 1,36 1,61 4,5 5,80 6,98 6,8 6,89 6,95

Tabela 30: Valores de solubilidade de termodinâmica do sal de trometamina em maior escala Concentração pH do Tampão (mg·mL-1) Menor que o limite de 1 detecção 4,5 0,3 6,8 Material insuficiente

5. Sulfassalazina

[0280] O material original também foi submetido aos mesmos experimentos de solubilidade que os sais com o propósito de fornecer uma referência. Os resultados podem ser encontrados na Tabela 31.

Tabela 31: Valores de solubilidade termodinâmica para sulfassalazina Concentração pH do Tampão (mg·mL-1) Menor que o limite de 1 detecção Menor que o limite de 4,5 detecção Menor que o limite de 6,8 detecção Resumo dos resultados Triagem primária de sais

[0281] A tabela abaixo (Tabela 32) resume os resultados da triagem primária de sais de base para sulfassalazina:

Tabela 32 - Resumo dos resultados da triagem primária de sais 1,4-Dioxano Acetonitrila 2-Propanol Acetona Etanol

THF 1-(2-Hidroxietil)-pirrolidina *1 ‡ *1 ‡ *2 ‡ *Ω *Ω *2 ‡ Hidróxido de amônio Ω 1‡ *2 ‡ *3 ‡ *4 ‡ Benzatina *1 ‡ 2‡ 3‡ 1‡ 2‡ *4 ‡ Colina Dietanolamina *1 ‡ *2 ‡ *2 ‡ *1 ‡ Dietilamina *1 ‡ *1 ‡ *2 ‡ *1 € *1 ‡ *3 ‡ Deanol *1 ‡ *Ω *2 ‡ Hidroxietilmorfolina Ω L-Arginina 1‡ 2‡ 3‡ PD ‡ Ω *PD 4 ‡ L-Lisina PO 1 € PO 1 ‡ 1‡ 1‡ 1‡ *2‡ Meglumina *PD 1 ‡ Ω *PD 1 ‡ Ω *PD 1 ‡ Piperazina 1‡ 1‡ 1‡ 1‡ 1‡ PD 1 ‡ Hidróxido de potássio *1 ‡ 2‡ *3 ‡ 4‡ 5‡ *6 ‡ Hidróxido de sódio *1 ‡ 2‡ *PD 3 ‡ 3‡ *4 ‡ Trietanolamina *1 € *2 ‡ *1 ‡ FA ‡ Ω *1 ‡ Trometamina *1 ‡ Ω *1 € *PD ‡ *1 ‡ € Em maior escala PO Orientação preferencial ‡ Cristalino PD Difração insuficiente Ω Amorfo Material Insuficiente • Os números representam os diferentes padrões de XRPD para cada ácido; • Um asterisco (*) indica que o sólido foi obtido da evaporação.

Avaliação secundária de sais de interesse

[0282] A tabela abaixo (Tabela 33) resume os resultados da triagem secundária de sais de base sobre sulfassalazina: Tabela 33 - Resumo dos resultados da triagem secundária Técnica Dietilamina L-Lisina Trietanolamina Trometamina analítica Caracterização XRPD Cristalino Cristalino Cristalino Cristalino básica perda de 1,1% perda de 3,0% perda de 3,0% perda de 1,7% TG/DTA até até até até degradação degradação degradação degradação Endoterma a Endoterma a Endoterma a DSC Sem eventos 191 °C 154 °C 67 °C e 123 °C sal 1:1, sal 1:1, sal 1:1, sal 1:1, 1 H NMR solvente solvente solvente solvente mínimo mínimo mínimo mínimo HPLC 97,6% 98,2% 97,3% 97,5% Aumento de Aumento de Aumento de Aumento de DVS 1,0% em UR 5,0% em UR 3,9% em UR de 8,9% em UR de 90% de 90% 90% de 90% Alteração Alteração Cristalinidade 40 °C/UR Inalterado XRPD pequena pequena reduzida de 75% HPLC 97,6% 98,3 97,5 97,4 Teste de Alteração Alteração estresses de 1 80 °C XRPD Inalterado pequena pequena Inalterado semana HPLC 98,3 98,4 97,3 97,8 Alteração Luz Inalterado Inalterado Inalterado XRPD pequena ambiente HPLC 97,6 98,1 97,4 97,2 Desproporcionamento Alteração XRPD Pico novo Amorfo Amorfo de sal pequena Alteração Alteração Baixa XRPD Inalterado Sem sólido pequena pequena Estudos de Alteração Alteração Alteração Média XRPD Sem sólido hidratação pequena pequena pequena Alteração Alta No solid Sem sólido Sem sólido XRPD pequena XRPD Sulfassalazina Sulfassalazina Sulfassalazina Inalterado pH 1 Material Concentração <OD <LOD =LOD insuficiente Alteração Alteração Parcialmente XRPD Alterado Solubilidade pH 4,5 pequena pequena cristalino termodinâmica Concentração 1,7 mg mL-1 1,7 mg mL-1 0,1 mg mL-1 0,3 mg mL-1 Alteração Alteração Amorfo Alterado XRPD pequena pequena pH 6,8 Material Concentração 7,7 mg mL-1 6,7 mg mL-1 0,9 mg mL-1 insuficiente Discussão

[0283] A sulfassalazina é um ácido livre que pode existir em uma forma cristalina mas tem solubilidade insuficiente na maioria dos solventes. Uma triagem de sais foi realizada no composto com o uso de 16 contraíons básicos em 6 sistemas de solvente. Cada experimento foi com ciclagem de temperatura para incentivar a formação de sal, e se nenhuns sólidos estivessem presentes, o solvente foi permitido para evaporar. Os sólidos com padrões de XRPD exclusivos foram analisados por TG/DTA para avaliar as propriedades térmicas deles, e, foram realizadas avaliações por 1H NMR e de estabilidade.

[0284] Quatro sólidos de interesse foram selecionados para a triagem secundária de sais sendo que eles foram preparados em uma escala de 500 mg de modo que pusessem ser completamente analisados. Sais de dietilamina, L- lisina, trietanolamina e trometamina foram aumentados em escala.

[0285] O sal de dietilamina aumentou bem em escala para fornecer um sólido com um padrão de XRPD que foi consistente com a triagem primária, mas com um pico extra. O sal ofereceu propriedades térmicas (perda de massa de 1,1%, fusão a 191 °C) e de DVS (absorção de massa de 1,0%) desejáveis, e não se alterou sob condições de estresse de estabilidade. O sal também demonstra um aprimoramento na solubilidade em comparação com a sulfassalazina, especialmente em pH 6,8 (7,7 mg·mL-1).

[0286] O sal de L lisina também teve aumento em escala bem sucedido, mantendo o padrão de XRPD visto na triagem primária. O sólido foi moderadamente higroscópico (massa absorção de 5,0%), mas teve boas propriedades térmicas e foi observado que se forma em múltiplos sistemas de solvente. O sal também demonstra um aprimoramento na solubilidade em comparação com a sulfassalazina, especialmente em pH 6,8 (6,7 mg·mL-1).

[0287] O sal de trietanolamina teve um padrão de XRPD que foi consistente com o sólido da triagem primária. Ele foi moderadamente higroscópico (absorção de massa de 3,9%) e teve boas propriedades térmicas.

Este sal mostrou algumas alterações sob estudos de estabilidade, desproporcionamento, hidratação e solubilidade.

[0288] O sal de trometamina aumentou bem em escala. Este sal teve as seguintes propriedades térmicas (perda de massa de 3,0%, eventos a 67 °C e 123 °C) e propriedades de DVS (absorção de massa de 8,9%).

[0289] Destes quatro sais de sulfassalazina que foram aumentados em escala, todos seriam desenvolvíveis. Exemplo 3 Solubilidades dos sais de sulfassalazina

[0290] Dados de solubilidade de sal de sulfassalazina-dietilamina e de sal de sulfassalazina-trometamina foram obtidos para uso em estudos de cristalização e triagem para um polimorfo estável. Os sais são insolúveis em muitos solventes o que prevê uma ampla escolha de antissolventes. O sal de dietilamina tem alta solubilidade em solventes apróticos polares que poderiam ser usados para obter uma solução homogênea antes da cristalização do sal de sulfassalazina.

Tabela 34: Solubilidades estimadas de sal de sulfassalazina-dietilamina Sal de Dietilamina Ácido Livre Solvente Estimativa de Solubilidade (mg/mL) Solubilidade (mg/mL) acetona 2 1,1 acetonitrila (ACN) <1 0,3 2-butanol <1 clorofórmio <1 EtOH 3 0,5 EtOAc <1 0,4 heptano <1 álcool isopropílico (IPA) <1 0,5 éter metílico e terc-butílico 0,3 <1 (MTBE) MeOH 6 0,9 cetona etílica e metílica (MEK) 1 0,9 THF 6 água 3 0,4 Tabela 35: Solubilidades estimadas de sal de sulfassalazina-trometamina Sal de Trometamina Solvente Estimativa de Solubilidade (mg/mL) acetona 2 acetonitrila (ACN) <1 2-butanol <1 clorofórmio <1 DMSO >82 EtOH 5 EtOAc <1 heptano <1 álcool isopropílico (IPA) <1 MeOH 27 THF 2 água 13 Exemplo 4 Caracterização dos sais de sulfassalazina Sal de sulfassalazina-dietilamina

[0291] A Forma A do sal de sulfassalazina-dietilamina é cristalina com tamanhos de partícula individuais de ~1 a 5 µm e aglomerados de ~10 a 40 µm. O material cristalino tem sido designado como Forma A.

[0292] Outras formas polimórficas de sal de sulfassalazina-dietilamina (Formas B a E) também foram identificadas e caracterizadas como parte destes estudos. A Forma A e a Forma B de sal de dietilamina são anidras. A Forma C de sal de dietilamina é provavelmente um solvato de THF. A Forma E de sal de dietilamina é provavelmente uma forma hidratada.

[0293] Por TGA, a Forma sólida A teve um evento endotérmico principal a ~207 °C e um pequeno ombro a ~200 °C. A decomposição ocorre provavelmente na massa fundida ou imediatamente após. A Forma A de sal de dietilamina é muito pouco higroscópica, absorvendo mais que 1% em peso de umidade em UR de 95%. Esta forma cristalina do sal de dietilamina é significativamente menos higroscópica do que o sal de trometamina.

[0294] Os estudos de estabilidade foram realizados pela adaptação dos métodos descritos na presente invenção. Em um estudo de estabilidade, foi observado que a Forma A de sal de dietilamina é mais estável que os outros polimorfos de sal dietilamina a 50 °C/UR de 75% e não mostrou evidência de degradação em t=5 dias. Sal de sulfassalazina-trometamina

[0295] Uma forma de sal cristalino de sulfassalazina-trometamina (1:1) (Forma A) foi preparada pela adaptação do método descrito acima, caracterizada e avaliada para estabilidade. A Forma A é anidra e não solvatada. Outras formas polimórficas de sal de sulfassalazina-trometamina (Formas B a G) também foram identificadas e caracterizadas como parte destes estudos. As Formas Polimórficas B a G incluíram solvatos.

[0296] Por TGA, a Forma sólida A teve uma endoterma a ~193 °C que provavelmente está associada com a fusão do sal com decomposição imediatamente após. Além disso, um pequeno evento endotérmico a ~141 °C pode ser devido à pequena presença de fusão da Forma Polimórfica G. A Forma A de sal de trometamina é higroscópica, absorvendo mais que 8% em peso de umidade até UR de 95%.

[0297] Os estudos de estabilidade foram realizados pela adaptação dos métodos descritos na presente invenção. A Forma A de sal de sulfassalazina- trometamina (1:1) parece ser tão igualmente estável quanto a Forma A de sal de dietilamina a 50°C/UR de 75% em t=5 dias.

Exemplo 5 Cristalização de sais de sulfassalazina

[0298] Um processo foi desenvolvido para a fabricação de 1 a 5 kg de um polimorfo estável de sal de sulfassalazina-dietilamina (1:1). O sistema de solvente usado neste processo para cristalização do sal foi 2-butanol / DMSO.

[0299] Processo exemplificador para a preparação de sal cristalino de sulfassalazina-dietilamina:

1. Carregar 1,0 kg de sulfassalazina em um reator menor (R1).

2. Carregar 1,50 L de DMSO em R1.

3. Carregar 0,285 L de dietilamina em R1. a. Observada uma exoterma neste momento no qual a temperatura interna foi a de 36 a 37 °C (escala de 700 g)

4. Agitar até dissolução completa. a. Observação: a solução é vermelha escura e será difícil ver quando todo o material estiver dissolvido. b. Agitação recomendada durante 30 a 60 minutos para garantir a dissolução completa.

5. Carregar 0,50 L de 2-BuOH em R1. a. O volume total neste momento é de aproximadamente 3 a 3,5 V (3 a 3,5 L)

6. Continuar aditar durante 5 a 10 minutos.

7. Filtrar no modo de polimento esta solução viscosa através de um filtro de polimento para dentro de um reator maior (R2). a. Recomenda-se um filtro de 10 µm.

8. Enxaguar o reator menor (R1) com 1,00 L de 2-BuOH/DMSO a 50%. a. Carregar 0,5 V de DMSO (0,5 L) seguido por 0,5 V de 2-BuOH (0,5 L) em R1.

9. Filtrar no modo de polimento os conteúdos de R1 para dentro de R2. a. Volume total neste momento é de aproximadamente 4 V (4 L).

10. Carregar 1,50 L de 2-BuOH em R2 (via um filtro de polimento, se GMP).

11. Carregar semente de Forma A de sulfassalazina-DEA (3,50 g) a <25 °C (isto é, à temperatura ambiente).

12. Agitar durante 1 a 18 h. a. Observação: será difícil ver que os sólidos estão presentes. Transferir uma alíquota de 20 mL para um frasco de cintilação e procurar sólidos com o uso de uma lanterna.

13. Carregar 15,50 L de 2-BuOH durante > 5 horas. a. Tempo de adição típico de 2-BuOH é de 5 a 6 horas. b. Na escala de 700 g, a adição foi realizada durante 2 dias sendo que 5,7 V foram adicionados durante 3 h durante um dia e os restantes 9,8 V foram adicionados durante 7 h no dia seguinte.

14. Agitar a pasta fluida de um dia para o outro. (>12 h) a. Isto é necessário para garantir que a concentração de sobrenadante seja a mais baixa possível.

15. Medir a concentração de sobrenadante: geralmente de 7 a 8 mg/mL de sulfassalazina na forma de ácido livre.

16. Filtrar a pasta fluida.

17. Recircular os líquidos-mãe se necessário.

18. Lavar com 4,00 L de 2-BuOH para deslocar a torta.

19. Secar os sólidos até peso constante. a. Secagem em forno a 45 °C durante 4 dias é ótima. b. Rendimento típico é de 85% de rendimento não ajustado.

[0300] Análises por HPLC (comprimento de onda de 358 nm para sulfassalazina), NMR, XRPD e DVS são realizadas para avaliar a pureza e caracterizar a forma do produto.

[0301] Foi observado que outras amostras de sal de sulfassalazina- dietilamina (por exemplo, Forma A) foram de cor amarela enquanto que o material preparado pelo processo desenvolvido com 2-butanol/DMSO foi laranja. Foi proposto que o tamanho de partícula pode influenciar a cor do IFA (Ingrediente Farmacêutico Ativo), especialmente quando o IFA é altamente conjugado. Uma imagem por microscópio de luz polarizada foi obtida para ambos o material SFS e o material gerado a partir do processo com 2- butanol/DMSO. Foi concluído que a causa provável das diferenças em cores do sal de sulfassalazina-dietilamina é o tamanho de partícula. Exemplo 6 Avaliação de estabilidade de sal de sulfassalazina-dietilamina

[0302] A Forma A de sal de sulfassalazina-dietilamina foi avaliada para estabilidade a 40 °C/UR de 70%, pela adaptação dos métodos descritos na presente invenção. Embalagem / Sistema de Fechamento de Recipiente: Saco de LDPE, ensacado duplo com fecho de abraçadeira de cinta "zip tie", saco único para cada condição. Consultar as Tabelas 36 e 37. As composições foram avaliadas conforme indicado na Tabela 36. As impurezas na composição foram analisadas com o uso de HPLC (Tabela 37).

Tabela 36: Sumário de estabilidade para sal de sulfassalazina-dietilamina a 40 °C/UR de 75% Atributo Especificação Intervalo de teste (Meses) (Método de Teste) T=0 1 3 Data de Recolhimento Real (Prazo de Dia 0 Dia 35 Dia 96 Validade Real) Aparência Relatório de resultados Pó laranja Pó laranja Pó laranja escuro escuro escuro Ensaio (Anidro, Relatório de resultados 99,6% (p/p %) 97,9% (p/p %) 96,5% (p/p %) Isento de Solvente) Impurezas totais Relatório de resultados 0,73% 0,87% 0,77% Teor de Água Relatório de resultados 0,4% (p/p %) 1,1% (p/p %) 1,1% (p/p %) XRPD Relatório de resultados Corresponde à Corresponde à Corresponde à Forma A Forma A Forma A Tabela 37: Resumo das impurezas individuais em sal de sulfassalazina- dietilamina a 40 °C/UR de 75% durante a avaliação de estabilidade Tempo de Intervalo de teste (Meses) retenção relativo Identidade em HPLC (min) T=0 1 3 0,10 ND 0,03% 0,17% 0,06% 0,57 ND 0,30% 0,31% 0,30% 0,93 ND 0,08% 0,08% 0,10% 1,14 ND 0,06% 0,06% 0,06% 1,18 ND 0,16% 0,17% 0,17% 1,32 ND 0,03% ND ND 1,36 ND 0,07% 0,08% 0,08% ND = Não Detectado ou Não Determinado

[0303] Para comparação, a forma de sal de dietilamina de sulfassalazina também foi avaliada para estabilidade a 25 °C/UR de 60%, pela adaptação dos métodos descritos na presente invenção. Embalagem / Sistema de Fechamento de Recipiente: Saco de LDPE, ensacado duplo com fecho de abraçadeira de cinta "zip tie", saco único para cada condição. Consultar as Tabelas 36 e 37. As composições foram avaliadas conforme indicado na Tabela 38. As impurezas na composição foram analisadas com o uso de HPLC (Tabela 39).

Tabela 38: Sumário de estabilidade para sal de sulfassalazina-dietilamina a 25 °C/UR de 60% Atributo Especificação Intervalo de teste (Meses) (Método de Teste) T=0 1 3 Data de Recolhimento Real (Prazo de Dia 0 Dia 35 Dia 96 Validade Real) Aparência Relatório de resultados Pó laranja Pó laranja Pó laranja escuro escuro escuro Ensaio (Anidro, Relatório de resultados 99,6% (p/p %) 97,2% (p/p %) 95,9% (p/p %) Isento de Solvente) Impurezas totais Relatório de resultados 0,73% 0,87% 0,76% Teor de Água Relatório de resultados 0,4% (p/p %) 0,8% (p/p %) 0,7% (p/p %) XRPD Relatório de resultados Corresponde à Corresponde à Corresponde à Forma A Forma A Forma A Tabela 39: Resumo das Impurezas Individuais em sal de sulfassalazina- dietilamina a 25 °C/UR de 60% durante a avaliação de estabilidade Tempo de Intervalo de teste (Meses) retenção relativo Identidade em HPLC (min) T=0 1 3 0,10 ND 0,03% 0,17% 0,06% 0,57 ND 0,30% 0,31% 0,29% 0,93 ND 0,08% 0,08% 0,10% 1,14 ND 0,06% 0,06% 0,06% 1,18 ND 0,16% 0,17% 0,17% 1,32 ND 0,03% ND ND 1,36 ND 0,07% 0,08% 0,08% Exemplo 7 Estudos de degradação forçada de sal de sulfassalazina-dietilamina exemplificador

[0304] O sal de sulfassalazina-dietilamina foi submetido às condições de degradação forçada, incluindo estresses termolítico, fotolítico, oxidante e hidrolítico. A degradação alvo para cada condição foi de 5 a 20% de impurezas. Após 14 dias, se uma degradação mínima ocorreu para uma dada condição, a substância farmacêutica foi considerada estável para aquela condição. A Tabela 40 lista os detalhes experimentais de cada condição de estresse.

Tabela 40: Condições de degradação forçada Condição de Estresse Duração Condições Controle Comentários Termolítico 8 dias 85 °C, umidade não estressado Estado sólido 14 dias ambiente Hidrolítico (umidade) 8 dias 55 °C/UR de 75% não estressado Estado sólido 14 dias Fotolítico 2X ICH Fotocâmara, 25 °C Controle escuro na Estado sólido ICH 3X fotocâmara Hidrolítico, ácido 8 dias HCl 1N, 55 °C água, 55 °C Pasta fluida 14 dias Hidrolítico, base 8 dias NaOH 1N, 55 °C água, 55 °C Pasta fluida 14 dias Oxidante 8 dias H2O2 3%, Água, temperatura Pasta fluida 14 dias temperatura ambiente ambiente

[0305] Os seguintes métodos de degradação forçada geral foram utilizados para avaliar o sal de sulfassalazina-dietilamina.

[0306] Termolítico. A substância farmacêutica foi exposta a uma temperatura de 80 °C durante 14 dias. A substância farmacêutica sólida deixada à temperatura ambiente foi usada como uma amostra de controle. Em intervalos adequados, soluções de amostra foram preparadas na concentração nominal em diluente e analisadas. Uma degradação mínima foi observada após 14 dias.

[0307] Hidrolítico (umidade). A substância farmacêutica foi exposta a uma atmosfera de UR de 75% e a uma temperatura de 55 °C. A substância farmacêutica sólida deixado à temperatura ambiente e à umidade ambiente foi usada como uma amostra de controle. Em intervalos adequados, soluções de amostra foram preparadas na concentração nominal em diluente e analisadas. Uma degradação mínima foi observada após 14 dias.

[0308] Fotolítico. De acordo com "ICH Q1B option 2" (ICH Q1B opção 2, ICH, ""International Conference on Harmonisation" of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use") ("Stability Testing: Photostability Testing of new Drug Substance and Products"; Teste de Estabilidade: Teste de Fotoestabilidade de Novas Substâncias Farmacêuticas e de Novos Produtos Farmacêuticos), a substância farmacêutica foi exposta a níveis 2X e 3X ICH de luz UV e de luz fluorescente branca fria. Uma amostra de controle foi preparada embrulhando-se uma amostra de substância farmacêutica sólida com folha de alumínio para bloquear toda luz, e então colocando-se a amostra na câmara de fotoestabilidade junto com a amostra exposta. Em intervalos adequados, soluções de amostra foram preparadas na concentração nominal em diluente e analisadas. Degradação mínima foi observada após exposição 3X.

[0309] Hidrolítico, Ácido. A substância farmacêutica foi preparada em aproximadamente 4X a concentração nominal da amostra em HCl 1N, então foi exposta a uma temperatura de 55 °C. A amostra permaneceu como uma pasta fluida durante a condições de estresse. Em intervalos adequados, uma alíquota da solução de amostra foi neutralizada 1:1, então diluída 1:1 com diluente e analisada. Uma amostra de substância farmacêutica de controle foi preparada em água e exposta a uma temperatura de 55 °C junta com a mostra estressada. Uma solução de amostra de controle foi analisada cada dia que uma solução de amostra estressada foi analisada. Uma degradação mínima foi observada após 14 dias.

[0310] Hidrolítico, Base. A substância farmacêutica foi preparada em aproximadamente 2X a concentração nominal da amostra em NaOH 1N, então foi exposta a uma temperatura de 55 °C. A amostra permaneceu em solução durante as condições de estresse. Em intervalos adequados, uma alíquota da solução de amostra foi neutralizada 1:1, então diluída 1:1 com diluente e analisada. Uma amostra de substância farmacêutica de controle foi preparada em água e exposto a uma temperatura de 55 °C junta com a amostra estressada. Uma solução de amostra de controle foi analisada cada dia que uma solução de amostra estressada foi analisada. Uma degradação mínima foi observada após 14 dias.

[0311] Oxidante. A substância farmacêutica foi preparada em aproximadamente 4X a concentração nominal da amostra em H2O2 3%. Em intervalos adequados, uma alíquota da solução de Amostra foi diluída 1:4 com diluente e analisada. Uma amostra de controle de substância farmacêutica foi preparada em água e mantida no escuro, sob condições ambientes. Uma solução de amostra de controle foi analisada cada dia que uma amostra estressada foi analisada. Degradação de aproximadamente 1,6% foi observada após 14 dias.

[0312] Sólido de controle. Um "sólido de controle" representa substância farmacêutica completamente não estressada. O sólido de controle foi preparado em diluente e analisado imediatamente. O sólido de controle foi usado para estabelecer um valor de pureza inicial. Este valor foi usado para calcular os valores de alteração percentual para os estudos termolítico e hidrolítico (umidade), e também a alteração percentual para as amostras de controle de solução e de controle fotolítica.

[0313] Os resultados do estudo de degradação forçada são relatados na Tabela 41.

Tabela 41: Resultados da degradação forçada Área % Pureza de Condição Duração (banda Alteração % Pico principal) Sólido de Controle 0 dia 99,08 N/A N/A 8 dias 98,96 0,12 N/A Termolítico 14 dias 99,03 0,05 Aprovado Hidrolítico (umidade) 8 dias 98,97 0,11 N/A

14 dias 99,10 -0,02 Aprovado 8 dias 98,88 0,20 N/A Solução de Controle (água, ambiente) 14 dias 98,88 0,20 N/A 8 dias 97,52 1,36 N/A Oxidante 14 dias 97,30 1,58 Aprovado 8 dias 98,84 0,24 N/A Solução de Controle (água, 55 °C) 14 dias 98,69 0,39 N/A 8 dias 99,03 -0,19 N/A Hidrolítico, Ácido 14 dias 98,94 -0,25 Aprovado 8 dias 99,03 -0,19 N/A Hidrolítico, Base 14 dias 98,93 -0,24 Aprovado 2X ICH 99,13 -0,05 N/A Fotolítico de Controle 3X ICH 99,13 -0,05 N/A 2X ICH 98,71 0,42 N/A Fotolítico 3X ICH 99,03 0,10 Aprovado

[0314] Na forma de estado sólido, a substância de sal de sulfassalazina- dietilamina demonstra estabilidade razoável para estresses termolítico, hidrolítico (umidade) e fotolítico. A substância farmacêutica é estável sob condições ácidas e básicas fortes. Há degradação mensurável para o estresse oxidante após exposição durante 8 dias. Os valores de pureza de pico para a substância de sal de sulfassalazina-dietilamina fornecem resultados de aprovação para todas as condições de estresse finais.

[0315] O texto precedente meramente ilustra os princípios da invenção. Será entendido que aquelas pessoas versadas na técnica serão capazes de conceber várias disposições que, embora não explicitamente descritas ou mostradas na presente invenção, incorporam os princípios da invenção e são incluídas em seus espírito e escopo. Além disso, todos os exemplos e a linguagem condicional citados na presente invenção são principalmente pretendidos para ajudar o leitor a entender os princípios da invenção e os conceitos apresentados pelos inventores para aprofundar a técnica, e devem ser interpretados como sendo sem limitação a tais exemplos e condições especificamente mencionados. Além disso, todas as declarações mencionadas na presente invenção que relatam princípios, aspectos e modalidades da invenção, e também exemplos específicos das mesmas, são pretendidas para abranger equivalentes tanto estruturais quanto funcionais das mesmas.

Adicionalmente, pretende-se que tais equivalentes incluam ambos os equivalentes atualmente conhecidos e os equivalentes desenvolvidos no futuro, isto é, quaisquer elementos desenvolvidos que desempenham a mesma função, independentemente da estrutura.

O escopo da presente invenção, portanto, não se destina a ser limitado às modalidades exemplificadoras mostradas e descritas na presente invenção.

Mais exatamente, o escopo e o espírito da presente invenção são representados como modalidades pelas reivindicações em anexo.

Claims (20)

REIVINDICAÇÕES

1. Sal cristalino solúvel em água, caracterizado por ser de sulfassalazina.

2. Sal cristalino, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por: ser substancialmente não higroscópico; ter uma solubilidade de 1 mg/mL ou mais em um tampão aquoso a cerca de pH 7 e 25°C; ser polimorficamente estável; e/ou ser estável no armazenamento.

3. Sal cristalino, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser um sal básico farmaceuticamente aceitável de sulfassalazina e um ácido.

4. Sal cristalino, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por o ácido ser um ácido sulfônico orgânico.

5. Sal cristalino, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por o ácido ser selecionado dentre ácido benzenossulfônico, ácido etanodissulfônico, ácido etanossulfônico, ácido metanossulfônico, ácido naftaleno-1,5-dissulfônico, ácido-p-toluenossulfônico e ácido sulfúrico.

6. Sal cristalino, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser um sal ácido farmaceuticamente aceitável de sulfassalazina e uma base de amina orgânica.

7. Sal cristalino, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado por a base ser selecionada dentre dietilamina, L-lisina, trietanolamina, trometamina, piperazina, benzatina, dietanolamina e L-arginina.

8. Sal cristalino, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado por ser sal cristalino de sulfassalazina-dietilamina (1:1).

9. Sal cristalino, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por ter o padrão de difração de raios-X pelo método do pó conforme mostrado na

Figura 4, ou por ter um gráfico de calorimetria de varredura diferencial compreendendo um evento endotérmico com uma temperatura inicial de cerca de 191°C quando aquecido de cerca de 25°C a cerca de 300°C.

10. Sal cristalino, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado por ser sal cristalino de sulfassalazina-trometamina (1:1).

11. Sal cristalino, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por ter o padrão de difração de raios-X pelo método do pó conforme mostrado na Figura 7, ou por ter um gráfico de calorimetria de varredura diferencial compreendendo eventos endotérmicos com uma temperatura inicial de cerca de 67°C e cerca de 123°C, quando aquecido de cerca de 25°C a cerca de 300°C.

12. Composição farmacêutica, caracterizada por compreender o sal cristalino conforme definido na reivindicação 1 e um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

13. Método de tratamento de doença ou condição que é uma doença neurologicamente relacionada, uma doença neurodegenerativa, uma doença ou condição inflamatória ou um câncer, sendo o método caracterizado por compreender administrar a um indivíduo que necessita da mesma uma quantidade terapeuticamente eficaz de um sal cristalino conforme definido na reivindicação 1.

14. Método de acordo com a reivindicação 13, caracterizado por a doença ou condição ser: a) uma doença neurologicamente relacionada que é epilepsia; b) uma epilepsia selecionada dentre síndrome de Dravet, síndrome de Lennox-Gastaut, síndrome de Doose, síndrome de West, síndrome de Angelman, epilepsia rolândica benigna, distúrbio de CDKL5, epilepsia de ausência infantil e juvenil, síndrome de Doose, síndrome de Dravet, epilepsia com ausências mioclônicas, síndrome de deficiência de Glut1, espasmos infantis e síndrome de West, epilepsia mioclônica juvenil, epilepsia moclônica progressiva de Lafora, síndrome de Landau-Kleffner, síndrome de Lennox-

Gastaut, síndrome de Ohtahara, síndrome de Panayiotopoulos, epilepsia PCDH19, síndrome de Rasmussen, síndrome do Cromossomo 20 em anel, epilepsias reflexas, síndrome de deficiência intelectual relacionada à mutação no gene TBCK ("TBCK-related ID Syndrome"), hamartoma hipotalâmico, epilepsia do lobo frontal, epilepsia com convulsões tônico-clônicas generalizadas isoladas, epilepsias mioclônicas progressivas, epilepsia do lobo temporal, complexo de esclerose tuberosa, displasia cortical focal e encefalopatias epilépticas.

Em um outro aspecto do método, a doença convulsiva ou o distúrbio convulsivo é selecionada(o) do grupo que consiste em epilepsia de ausência infantil e juvenil, espasmos infantis e síndrome de West, epilepsia mioclônica juvenil, epilepsia do lobo frontal, epilepsia com convulsões tônico-clônicas generalizadas isoladas, epilepsias mioclônicas progressivas, epilepsia do lobo temporal, complexo de esclerose tuberosa, síndrome de Rasmussen, hamartoma hipotalâmico, displasia cortical focal, encefalopatias epilépticas, e tumores associados à epilepsia de longa duração (LEATs) por exemplo ganglioglioma, oligodendroglioma, e tumores neuroepiteliais desimbrioplásicos (DNETs); c) uma doença neurodegenerativa selecionada dentre doença de Alexander, doença de Alzheimer (AD), demência frontotemporal, demência associada ao HIV e outras demências, esclerose lateral amiotrófica, epilepsia, doença de Huntington (HD), acidente vascular cerebral isquêmico, doenças neuronais motoras (MND), dor neuropática, doença de Parkinson (PD) e distúrbios relacionados à PD, doença de Príons, síndrome de Rett, atrofia muscular espinhal (SMA), ataxia espinocerebelar (SCA), lesão cerebral traumática, esclerose tuberosa, esclerose múltipla progressiva (P-MS), esclerose lateral amiotrófica (ALS) e dor neuropática; d) uma doença ou condição inflamatória selecionada dentre doenças inflamatórias intestinais, colite ulcerativa, doença de Crohn, doenças de artrite inflamatória, espondilite anquilosante, artrite reumatoide e artrite psoriática; ou e) um câncer selecionado dentre tumores gliais, glioblastoma, linfoma e câncer pancreático.

15. Método, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado por a doença ou condição ser epilepsia refratária.

16. Método, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado por o indivíduo ser diagnosticado como tendo convulsões intratáveis.

17. Método, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado por o sal cristalino ser administrado em uma dosagem e/ou frequência eficaz para reduzir a ocorrência de efeitos colaterais da sulfassalazina.

18. Método, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado por compreender, adicionalmente, coadministrar ao indivíduo um agente antiepiléptico ou um inibidor de ABCG2.

19. Método de preparação de um sal cristalino de sulfassalazina, sendo o método caracterizado por compreender: a) combinar a sulfassalazina e uma base de amina orgânica em um solvente orgânico sob condições suficientes para cristalizar um sal de sulfassalazina; e b) isolar o sal de sulfassalazina; sendo que a base de amina orgânica é selecionada dentre dietilamina, L-lisina, trietanolamina, trometamina, piperazina, benzatina, dietanolamina e L-arginina.

20. Método, de acordo com a reivindicação 19, caracterizado por: a) a base de amina orgânica ser dietilamina e o solvente ser etanol; b) a base de amina orgânica ser L-lisina e o solvente ser acetona; c) a base de amina orgânica ser trietanolamina e o solvente ser acetona; ou d) a base de amina orgânica ser trometamina e o solvente ser etanol.