BR112020002953A2 - derivados de 6-amino-7,9-di-hidro-8h-purin-8-ona como agonistas do receptor imunoestimulante do tipo toll 7 (tlr7) - Google Patents

derivados de 6-amino-7,9-di-hidro-8h-purin-8-ona como agonistas do receptor imunoestimulante do tipo toll 7 (tlr7) Download PDF

Info

Publication number
BR112020002953A2
BR112020002953A2 BR112020002953-0A BR112020002953A BR112020002953A2 BR 112020002953 A2 BR112020002953 A2 BR 112020002953A2 BR 112020002953 A BR112020002953 A BR 112020002953A BR 112020002953 A2 BR112020002953 A2 BR 112020002953A2
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
alkyl
antibody
fact
formula
compound
Prior art date
Application number
BR112020002953-0A
Other languages
English (en)
Inventor
Liqi He
Sanjeev Gangwar
Shoshana L. Posy
Yam B. POUDEL
Prasanna Sivaprakasam
Original Assignee
Bristol-Myers Squibb Company
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=63528884&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=BR112020002953(A2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bristol-Myers Squibb Company filed Critical Bristol-Myers Squibb Company
Publication of BR112020002953A2 publication Critical patent/BR112020002953A2/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/02—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6
    • C07D473/18—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 one oxygen and one nitrogen atom, e.g. guanine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A61K31/522—Purines, e.g. adenine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. hypoxanthine, guanine, acyclovir
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

A presente invenção refere-se a compostos tendo uma estrutura de acordo com a fórmula (I) ou (II) onde R1, R2, e Ar são como aqui definidos, são agonistas para o receptor do tipo Toll 7 (TLR7) e podem ser usados como adjuvantes para estimular o sistema imune. Alguns tais compostos podem ser utilizados em conjugados para liberação direcionada ao órgão ou tecido da ação pretendida.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "DERI- VADOS DE 6-AMINO-7,9-DI-HIDRO-8H-PURIN-8-ONA COMO AGO- NISTAS DO RECEPTOR IMUNOESTIMULANTE DO TIPO TOLL 7 (TLR7)".
REFERÊNCIA CRUZADA AOS PEDIDOS RELACIONADOS
[001] Este pedido reivindica o benefício sob 35 U.S.C. §119(e) do Pedido Provisório US No. Ser. 62/546.211, depositado em 16 de Agosto de 2017; cuja descrição está aqui incorporada por referência.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
[002] A presente invenção refere-se a agonistas do Receptor do tipo Toll 7 ("TLR7") e seus conjugados, e métodos para a preparação e uso de tais agonistas e seus conjugados.
[003] Os receptores do tipo Toll ("TLRs") são receptores da superfície celular que reconhecem padrões moleculares associados a patógeno ("PAMPs"). A ativação de um TLR pela ligação de um PAMP correspondente sinaliza infecção potencial por um patógeno e estimula o sistema imune a combater a infecção. Humanos têm 11 TLRs, chamados TLR1 a TLR11.
[004] A ativação de um TLR - com TLR7 sendo o mais estudado - por um agonista pode ter um efeito adjuvante sobre a ação de vacinas e agentes de imunoterapia no tratamento de uma variedade de condições além da infecção por patógeno real, estimulando a resposta imune.
[005] TLR7 reconhece PAMPs associados a vírus de RNA de fita simples. Sua ativação induz a secreção de interferons do Tipo I, tais como IFNα e IFNβ (Lund et al. 2004). Tem dois sítios de ligação, um para ligantes de RNA de fita simples, tal como ssRNA40 (Berghöfer et al. 2007) e um para guanosina (Zhang et al. 2016).
[006] O TLR7 pode se ligar e ser ativado por agonistas sintéticos do tipo guanosina, tais como imiquimode, resiquimode e gardiquimode,
que são baseados em uma estrutura de 1H-imidazo[4,5-c]quinolina.
Imiquimode Resiquimode Resiquimode Gardiquimode
[007] Os agonistas de TLR7 sintéticos baseados em uma estrutura molecular de pteridinona também são conhecidos, como exemplificado por vesatolimode (Desai et al. 2015), que esteve em ensaios clínicos de Fase 2. A potência do vesatolimode é relatada como 100X menor que a do composto purina-8-ona correspondente, medido pela indução de IFN-α (Roethle et al. 2013).
Vesatolimode
[008] Outros agonistas de TLR7 sintéticos são baseados em uma estrutura semelhante à purina, frequentemente de acordo com a fórmula A: ondeR, R’, e R" são variáveis estruturais, com R" tipicamente contendo um anel aromático ou heteroaromático não substituído ou substituído.
[009] Descrições de moléculas bioativas tendo um tipo de purina e seus usos no tratamento de condições tal como fibrose, distúrbios inflamatórios, câncer ou infecções patogênicas incluem: Akinbobuyi et al. 2015b e 2016; Barberis et al. 2012; Carson et al. 2014; Ding et al. 2016, 2017a, e 2017b; Graupe et al. 2015; Hashimoto et al. 2009;
Holldack et al. 2012; Isobe et al. 2009a e 2012; Jin et al. 2017a e 2017b; Peterson 2014; Pryde 2010; e Seifert 2015.
[0010] O grupo R" pode ser piridila: Bonfanti et al. 2015a e 2015b; Halcomb et al. 2015; Hirota et al. 2000; Isobe et al. 2000, 2002, 2004, 2006, 2009a, 2011, e 2012; Kasibhatla et al. 2007; Koga-Yamakawa et al. 2013; Musmuca et al. 2009; Nakamura 2012; Ogita et al. 2007; e Yu et al. 2013.
[0011] Bonfanti et al. 2015b descreve moduladores de TLR7 nos quais os dois anéis de uma porção de purina são abrangidos por um macrociclo: NH2
N N OH
X N N n
Z Y
[0012] Um agonista de TLR7 pode ser conjugado com uma molécula parceira, que pode ser, por exemplo, um fosfolípido, um poli (etileno glicol) ("PEG") ou outro TLR (geralmente TLR2). Descrições exemplares incluem: Carson et al. 2013, 2015, and 2016, Chan et al. 2009 and 2011, Lioux et al. 2016, Maj et al. 2015, Ban et al. 2017; Vernejoul et al. 2014, e Zurawski et al. 2012. A conjugação com um anticorpo também foi descrita: Akinbobuyi et al. 2013 e 2015a, e Gadd et al. 2015. Um sítio de conjugação frequente está no grupo R" da fórmula A.
[0013] Agonistas de TLR7 baseados em uma estrutura de 5H- pirrolo [3,2-d]pirimidina também foram descritos. Veja, Cortez et al. 2017a e 2017b, McGowan et al. 2017, e Li et al. 2018.
[0014] Jensen et al. 2015 descreve o uso de veículos lipídicos catiônicos para a liberação de agonistas de TLR7.
[0015] Alguns agonistas de TLR7, incluindo o resiquimode, são agonistas duplos de TLR7/TLR8. Veja, por exemplo, Beesu et al. 2017; Lioux et al. 2016; e Vernejoul et al. 2014.
[0016] Também foram descritos agonistas de TLR7 baseados em uma estrutura de 5H-pirrolo[3,2-d] pirimidina. Veja, Cortez et al. 2017a e 2017b, McGowan et al. 2017, e Li et al. 2018.
[0017] Citações completas para os documentos citados aqui pelo primeiro autor ou inventor e ano estão listadas no final desta espe- cificação.
BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[0018] Em um aspecto, esta especificação fornece um composto tendo uma estrutura de acordo com a fórmula I ou II em que R1 é (C1-C5 alquil)O, (C1-C2 alquil)O(CH2)2-3O, (C1-C5 al- quil)C(=O)O, (C1-C5 alquil)NH, (C1-C2 alquil)O(CH2)2-3NH, ou (C1-C5 alquil)C(=O)NH; R2 é, independentemente para cada ocorrência do mesmo, H, C1-C3 alquila, halo, O(C1-C3 alquil), CN, ou NO2; X é, independentemente para cada ocorrência do mesmo, CR2 ou N; e Ar é uma porção heteroaromática de 5 membros seleciona- da a partir de pirrolila, furanila, tiofenila, pirazolila, imidazolila, oxazoli- la, isoxazolila, 1,2,3-triazolila, 1,2,4-triazolila, tetrazolila, 1,2,4-oxa- diazolila, 1,2,4-tiadiazolila, 1,3,4-oxadiazolila, 1,3,4-tiadiazolila, 1,2,5- oxadiazolila, 1,2,5-tiadiazolila, 1,2,3,4-oxatiazolila, e 1,2,3,4-tiatriazo- lila.
[0019] Os compostos de acordo com a fórmula I e II têm atividade como agonistas de TLR7 e alguns deles podem ser conjugados para liberação direcionada a um tecido ou órgão alvo da ação pretendida.
BREVE DESCRIÇÃO DO(S) DESENHO(S)
[0020] FIG. 1, FIG. 2, FIG. 3 e FIG. 7 mostram esquemas para a preparação de compostos desta descrição.
[0021] FIG. 4 e FIG. 5 mostram esquemas para a preparação de compostos agonista-ligante.
[0022] FIG. 6 é um gráfico representativo mostrando a atividade de agonismo de TLR7 de um composto desta invenção.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO DEFINIÇÕES
[0023] "Anticorpo" significa anticorpos inteiros e qualquer frag- mento de ligação ao antígeno (isto é, "porção de ligação ao antígeno") ou suas variantes de cadeia única. Um anticorpo completo é uma proteína que compreende pelo menos duas cadeias pesadas (H) e duas leves (L) interconectadas por ligações de dissulfeto. Cada cadeia pesada compreende uma região variável de cadeia pesada (VH) e uma região constante de cadeia pesada compreendendo três domínios, CH1, CH2 e CH3. Cada cadeia leve compreende uma região variável da cadeia leve (VL ou Vk) e uma região constante da cadeia leve compreendendo um único domínio, CL. As regiões VH e VL podem ainda ser subdivididas em regiões de hipervariabilidade, denominadas regiões determinantes de complementaridade (CDRs), intercaladas com regiões de estrutura mais conservadas (FRs). Cada VH e VL compreende três CDRs e quatro FRs, dispostas do terminal amino ao carbóxi na seguinte ordem: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 e FR4. As regiões variáveis contêm um domínio de ligação que interage com um antígeno. As regiões constantes podem mediar a ligação do anticorpo a tecidos ou fatores hospedeiros, incluindo várias células do sistema imune (por exemplo, células efetoras) e o primeiro compo- nente (Clq) do sistema de complemento clássico. Diz-se que um anticorpo "se liga especificamente" a um antígeno X se o anticorpo se liga ao antígeno X com uma KD de 5 x 10-8 M ou menos, mais preferivelmente 1 x 10-8 M ou menos, mais preferivelmente 6 x 10-9 M ou menos, mais preferivelmente 3 x 10-9 M ou menos, ainda mais preferivelmente 2 x 10-9 M ou menos. O anticorpo pode ser quimérico, humanizado ou, preferivelmente, humano. A região constante da cadeia pesada pode ser projetada para afetar o tipo ou extensão da glicosilação, para estender a meia-vida do anticorpo, para realçar ou reduzir as interações com células efetoras ou o sistema de complemento, ou para modular alguma outra propriedade. A engenha- ria pode ser realizada pela substituição, adição ou deleção de um ou mais aminoácidos ou pela substituição de um domínio por um domínio de outro tipo de imunoglobulina ou por uma combinação dos anteriores.
[0024] "Fragmento de ligação ao antígeno" e "porção de ligação ao antígeno" de um anticorpo (ou simplesmente "porção de anticorpo" ou "fragmento de anticorpo") significam um ou mais fragmentos de um anticorpo que mantêm a capacidade de se ligar especificamente a um antígeno. Foi demonstrado que a função de ligação ao antígeno de um anticorpo pode ser realizada por fragmentos de um anticorpo de tamanho natural, tal como (i) um fragmento Fab, um fragmento monovalente que consiste nos domínios VL, VH, CL e CH1; (ii) um fragmento F(ab')2, um fragmento bivalente compreendendo dois fragmentos Fab ligados por uma ponte dissulfeto na região de articulação; (iii) um fragmento Fab', que é essencialmente um Fab com parte da região de articulação (veja, por exemplo, Abbas et al., Cellular and Molecular Immunology, 6th Ed., Saunders Elsevier 2007); (iv) um fragmento Fd que consiste nos domínios VH e CH1; (v) um fragmento Fv consistindo nos domínios VL e VH de um único subdivisão de um anticorpo, (vi) um fragmento dAb (Ward et al., (1989) Nature 341:544- 546)), que consiste em um domínio VH ; (vii) uma região determinante de complementaridade isolada (CDR); e (viii) um nanocorpo, uma região variável da cadeia pesada contendo um único domínio variável e dois domínios constantes. Os fragmentos de ligação ao antígeno preferidos são os fragmentos Fab, F(ab')2, Fab', Fv e Fd. Além disso, embora os dois domínios do fragmento Fv, VL e VH, sejam codificados por genes separados, eles podem ser unidos, usando métodos recombinantes, por um ligante sintético que permite que sejam produzidos como uma única cadeia proteica na qual as regiões VL e VH emparelham para formar moléculas monovalentes (conhecidas como Fv de cadeia única, ou scFv); veja, por exemplo, Bird et al. (1988) Sci- ence 242:423-426; e Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883). Tais anticorpos de cadeia única também estão incluídos no termo "porção de ligação ao antígeno" de um anticorpo.
[0025] A menos que de outra maneira indicado - por exemplo, por referência à numeração linear em uma listagem SEQ ID NO: - as referências à numeração das posições de aminoácido em uma região variável de cadeia pesada ou leve de um anticorpo (VH ou VL) estão de acordo com o sistema Kabat (Kabat et al., "Sequences of proteins of immunological interest, 5th ed., Pub. No. 91-3242, U.S. Dept. Health & Human Services, NIH, Bethesda, Md., 1991, a seguir "Kabat") e as referências à numeração das posições de aminoácido em uma região constante da cadeia pesada ou leve de um anticorpo (CH1, CH2, CH3 ou CL) estão de acordo com o índice da EU, conforme estabelecido em Kabat. Veja, Lazar et al., US 2008/0248028 A1, cuja descrição é incorporada aqui por referência, para exemplos de tal uso. Além disso, o Sistema de Informação ImMunoGeneTics (IMGT) fornece em seu site uma tabela intitulada "IMGT Scientific Chart: Correspondence between C Numberings" mostrando a correspondência entre seu sistema de numeração, numeração EU e numeração Kabat para a região constante da cadeia pesada.
[0026] Um "anticorpo isolado" significa um anticorpo que está substancialmente livre de outros anticorpos com diferentes especifici- dades antigênicas (por exemplo, um anticorpo isolado que se liga especificamente ao antígeno X está substancialmente livre de anticor- pos que se ligam especificamente a outros antígenos que não o antígeno X). Um anticorpo isolado que se liga especificamente ao antígeno X pode, no entanto, ter reatividade cruzada com outros antígenos, tais como moléculas do antígeno X de outras espécies. Em certas formas de realização, um anticorpo isolado se liga especifi- camente ao antígeno X humano e não reage de maneira cruzada com outros antígenos X (não humanos). Além disso, um anticorpo isolado pode estar substancialmente livre de outro material celular e/ou produtos químicos.
[0027] "Anticorpo monoclonal" ou "composição de anticorpo monoclonal" significa uma preparação de moléculas de anticorpo de composição molecular única, que exibe uma especificidade e afinidade de ligação única para um epítopo específico.
[0028] "Anticorpo humano" significa um anticorpo tendo regiões variáveis nas quais tanto a estrutura como as regiões CDR (e a região constante, se presente) são derivadas de sequências de imunoglo- bulina da linha germinativa humana. Os anticorpos humanos podem incluir modificações posteriores, incluindo modificações naturais ou sintéticas. Os anticorpos humanos podem incluir resíduos de amino- ácidos não codificados por sequências de imunoglobulina da linha germinativa humana (por exemplo, mutações introduzidas por mutagê- nese randomizada ou específica do sítio in vitro ou por mutação somática in vivo). No entanto, "anticorpo humano" não inclui anticorpos nos quais sequências de CDR derivadas da linha germinativa de outras espécies de mamíferos, como um camundongo, foram enxertadas nas sequências de estrutura humanas.
[0029] "Anticorpo monoclonal humano" significa um anticorpo que exibe uma especificidade de ligação única, que tem regiões variáveis nas quais a estrutura e as regiões CDR são derivadas de sequências de imunoglobulina da linha germinativa humana. Em uma modalidade, os anticorpos monoclonais humanos são produzidos por um hibridoma que inclui uma célula B obtida de um animal não humano transgênico, por exemplo, um camundongo transgênico, tendo um genoma compre- endendo um transgene de cadeia pesada humano e um transgene de cadeia leve fundido a uma célula imortalizada.
[0030] "Alifático" significa uma porção hidrocarboneto não aromáti- ca, de cadeia linear ou ramificada, saturada ou insaturada, tendo o número especificado de átomos de carbono (por exemplo, como em "C3 alifático", "C1-5 alifático", "C1-C5 alifático" ou "C1 a C5 alifático", as três últimas frases sendo sinônimas de uma porção alifática tendo 1 a 5 átomos de carbono) ou, onde o número de átomos de carbono não for especificado explicitamente, de 1 a 4 átomos de carbono (2 a 4 carbonos no caso de porções alifáticas insaturadas). Um entendimento semelhante é aplicado ao número de carbonos em outros tipos, como em C2-4 alceno, C4-C7 cicloalifático, etc. Em uma veia semelhante, um termo como "(CH2)1-3" deve ser entendido como atalho para o subscrito sendo 1, 2 ou 3, de modo que esse termo represente CH2, CH2CH2 e CH2CH2CH2.
[0031] "Alquila" significa uma porção alifática saturada, com a mesma convenção para designar o número de átomos de carbono aplicável. A título ilustrativo, as porções C1-C4 alquila incluem, porém, não estão limitadas a, metila, etila, propila, isopropila, isobutila, t-butila, 1-butila, 2-butila e semelhantes. "Alquileno" significa uma contraparte divalente de um grupo alquila, tal como CH2CH2, CH2CH2CH2 e CH2CH2CH2CH2.
[0032] "Alquenila" significa uma porção alifática tendo pelo menos uma ligação dupla carbono-carbono, com a mesma convenção para designar o número de átomos de carbono aplicável. A título ilustrativo, as porções C2-C4 alquenila incluem, porém, não estão limitadas a, etenila (vinila), 2-propenila (alila ou prop-2-enila), cis-1-propenila, trans-1-propenila, E- (ou Z-) 2-butenila, 3-butenila, 1,3-butadienila (but- 1,3-dienila) e similares.
[0033] "Alquinila" significa uma porção alifática tendo pelo menos uma ligação tripla carbono-carbono, com a mesma convenção para designar o número de átomos de carbono aplicável. A título ilustrativo, os grupos C2-C4 alquinila incluem etinila (acetilenila), propargila (prop- 2-inila), 1-propinila, but-2-inila e similares.
[0034] "Cicloalifático" significa uma porção hidrocarboneto não aromática, saturada ou insaturada, tendo de 1 a 3 anéis, cada anel tendo 3 a 8 (preferivelmente de 3 a 6) átomos de carbono. "Cicloal- quila" significa uma porção cicloalifática na qual cada anel é saturado. "Cicloalquenila" significa uma porção cicloalifática na qual pelo menos um anel tem pelo menos uma ligação dupla carbono-carbono. "Ciclo- alquinila" significa uma porção cicloalifática na qual pelo menos um anel tem pelo menos uma ligação tripla carbono-carbono. A título ilustrativo, as porções cicloalifáticas incluem, porém, não estão limita- das a, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclopentenila, ciclo-hexila, ciclo-hexenila, ciclo-heptila, ciclooctila e adamantila. As porções cicloalifáticas preferidas são as cicloalquila, especialmente ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila e ciclo-hexila. "Cicloalquileno" significa uma contraparte divalente de um grupo cicloalquila.
[0035] "Heterocicloalifático" significa uma porção cicloalifática em que, em pelo menos um anel da mesma, até três (preferivelmente 1 a 2) carbonos foram substituídos por um heteroátomo independen- temente selecionado de N, O ou S, em que N e S opcionalmente pode ser oxidado e o N opcionalmente pode ser quaternizado. As porções cicloalifáticas preferidas consistem em um anel, de tamanho de 5 a 6 membros. Similarmente, "heterocicloalquila", "heterocicloalquenila", e "heterocicloalquinila" significa uma porção cicloalquila, cicloalquenila, ou cicloalquinila, respectivamente, em que pelo menos um anel da mesma foi modificado. Porções heterocicloalifáticas exemplificativas incluem aziridinila, azetidinila, 1,3-dioxanila, oxetanila, tetra-hidrofurila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, tetra-hidropiranila, tetra-hidrotio- piranila, tetra-hidrotiopiranil sulfona, morfolinila, tiomorfolinila, tiomorfolinil sulfóxido, tiomorfolinil sulfona, 1,3-dioxolanila, tetra-hidro- 1,1-dioxotienila, 1,4-dioxanila, tietanila, e similares. "Heterocicloalqui- leno" significa uma contraparte divalente de um grupo heterociclo- alquila.
[0036] "Alcóxi", "arilóxi", "alquiltio", e "ariltio" significa -O(alquil), -O(aril), -S(alquil), e -S(aril), respectivamente. Exemplos são metóxi, fenóxi, metiltio, e feniltio, respectivamente.
[0037] "Halogênio" ou "halo" significa flúor, cloro, bromo ou iodo, a menos que um significado mais restrito seja indicado.+
[0038] "Arila" significa uma porção hidrocarboneto tendo um sistema de anel mono-, bi- ou tricíclico (preferivelmente monocíclico) em que cada anel tem de 3 a 7 átomos de carbono e pelo menos um anel é aromático. Os anéis no sistema de anéis podem ser fundidos um ao outro (como na naftila) ou ligados um ao outro (como na bifenila) e podem ser fundidos ou ligados a anéis não aromáticos (como em indanila ou ciclo-hexilfenila). A título de outra ilustração, as porções arila incluem, porém, não estão limitadas a, fenila, naftila, tetra-hidronaftila, indanila, bifenila, fenantrila, antracenila, e acenaftila. "Arileno" significa uma contraparte divalente de um grupo arila, por exemplo, 1,2-fenileno, 1,3-fenileno, ou 1,4-fenileno.
[0039] "Heteroarila" significa uma porção tendo um sistema de anel mono-, bi- ou tricíclico (preferivelmente monocíclico de 5 a 7 membros) em que cada anel tem de 3 a 7 átomos de carbono e pelo menos um anel é um anel aromático contendo de 1 a 4 heteroátomos selecionados independentemente a partir de N, O ou S, onde N e S opcionalmente podem ser oxidados e o N opcionalmente pode ser quaternizado. Tais pelo menos um heteroátomo contendo anel aromá- tico pode ser fundido a outros tipos de anéis (como em benzofuranila ou tetra-hidroisoquinolila) ou diretamente ligado a outros tipos de anéis (como em fenilpiridila ou 2-ciclopentilpiridila). A título de outra ilustração, as porções heteroarila incluem pirrolila, furanila, tiofenila (tienila), imidazolila, pirazolila, oxazolila, isoxazolila, tiazolila, isotia- zolila, triazolila, tetrazolila, piridila, N-oxopiridila, piridazinila, pirimi- dinila, pirazinila, quinolinila, isoquinolinila, quinazolinila, cinolinila, quinozalinila, naftiridinila, benzofuranila, indolila, benzotiofenila, oxa- diazolila, tiadiazolila, fenotiazolila, benzimidazolila, benzotriazolila, dibenzofuranila, carbazolila, dibenzotiofenila, acridinila, e similares. "Heteroarileno" significa uma contraparte divalente de um grupo hete- roarila.
[0040] Onde é indicado que uma porção pode ser substituída, tal como pelo uso de frases "não substituídas ou substituídas" ou "opcionalmente substituídas" como em "C1-C5 alquila não substituída ou substituída" ou "heteroarila opcionalmente substituída", tal porção pode ter um ou mais substituintes selecionados independentemente, preferivelmente um a cinco em número, mais preferivelmente um ou dois em número. Substituintes e padrões de substituição podem ser selecionados por alguém de experiência ordinária na técnica, levando em consideração a porção à qual o substituinte está ligado, para fornecer compostos que são quimicamente estáveis e que podem ser sintetizados por técnicas conhecidas na arte, bem como a métodos aqui mencionados. Onde uma porção é identificada como sendo "não substituída ou substituída" ou "opcionalmente substituída", em uma modalidade preferida, tal porção é não substituída.
[0041] "Arilalquila", "(heterocicloalifático)alquila", "arilalquenila", "arilalquinila", "biarilalquila", e similares significam uma porção alquila, alquenila, ou alquinila, conforme o caso, substituída por uma porção arila, heterocicloalifática, biarila, etc., conforme o caso, com a valência aberta (insatisfeita) na porção alquila, alquenila, ou alquinila, por exemplo, como em benzila, fenetila, N-imidazoiletila, N-morfolinoetila, e similares. Inversamente, "alquilarila", "alquenilcicloalquila", e simi- lares significam uma porção arila, cicloalquila, etc., conforme o caso, substituída por uma porção alquila, alquenila, etc., conforme o caso, por exemplo, como em metilfenila (tolila) ou alilciclo-hexila. "Hidroxialquila", "haloalquila", "alquilarila", "cianoarila", e similares significam uma porção alquila, arila, etc., conforme o caso, substituída por um ou mais substituintes identificados (hidroxila, halo, etc., conforme o caso).
[0042] Por exemplo, substituintes permitidos incluem, porém, não estão limitados a, alquila (especialmente, metila ou etila), alquenila (especialmente, alila), alquinila, arila, heteroarila, cicloalifático, hetero- cicloalifático, halo (especialmente, flúor), haloalquila (especialmente, trifluorometila), hidroxila, hidroxialquila (especialmente, hidroxietila), ciano, nitro, alcóxi, -O(hidroxialquil), -O(haloalquil) (especialmente, -OCF3), -O(cicloalquil), -O(heterocicloalquil), -O(aril), alquiltio, ariltio, =O, =NH, =N(alquil), =NOH, =NO(alquil), -C(=O)(alquil), -C(=O)H, -CO2H, -C(=O)NHOH, -C(=O)O(alquil), -C(=O)O(hidroxialquil), -C(=O)NH2, -C(=O)NH(alquil), -C(=O)N(alquil)2, -OC(=O)(alquil), -OC(=O)(hidroxialquil), -OC(=O)O(alquil), -OC(=O)O(hidroxialquil), -OC(=O)NH2, -OC(=O)NH(alquil), -OC(=O)N(alquil)2, azido, -NH2, -NH(alquil), -N(alquil)2, -NH(aril), -NH(hidroxialquil), -NHC(=O)(alquil), -NHC(=O)H, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(alquil), -NHC(=O)N(alquil)2, -NHC(=NH)NH2, -OSO2(alquil), -SH, -S(alquil), -S(aril), -S(cicloalquil),
-S(=O)alquila, -SO2(alquil), -SO2NH2, -SO2NH(alquil), -SO2N(alquil)2, e similares. Onde a porção que está sendo substituída é uma porção alifática, substituintes preferidos são arila, heteroarila, cicloalifático, heterocicloalifático, halo, hidroxila, ciano, nitro, alcóxi, -O(hidroxialquil), -O(haloalquil), -O(cicloalquil), -O(heterocicloalquil), -O(aril), alquiltio, ariltio, =O, =NH, =N(alquil), =NOH, =NO(alquil), -CO2H, -C(=O)NHOH, -C(=O)O(alquil), -C(=O)O(hidroxialquil), -C(=O)NH2, -C(=O)NH(alquil), -C(=O)N(alquil)2, -OC(=O)(alquil), -OC(=O)(hidroxialquil), -OC(=O)O(alquil), -OC(=O)O(hidroxialquil), -OC(=O)NH2, -OC(=O)NH(alquil), -OC(=O)N(alquil)2, azido, -NH2, -NH(alquil), -N(alquil)2, -NH(aril), -NH(hidroxialquil), -NHC(=O)(alquil), -NHC(=O)H, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(alquil), -NHC(=O)N(alquil)2, -NHC(=NH)NH2, -OSO2(alquil), -SH, -S(alquil), -S(aril), -S(=O)alquila, -S(cicloalquil), -SO2(alquil), -SO2NH2, -SO2NH(alquil), e -SO2N(alquil)2. Substituintes mais preferidos são halo, hidroxila, ciano, nitro, alcóxi, -O(aril), =O, =NOH, =NO(alquil), -OC(=O)(alquil), -OC(=O)O(alquil), -OC(=O)NH2, -OC(=O)NH(alquil), -OC(=O)N(alquil)2, azido, -NH2, -NH(alquil), -N(alquil)2, -NH(aril), -NHC(=O)(alquil), -NHC(=O)H, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(alquil), -NHC(=O)N(alquil)2, e -NHC(=NH)NH2. Especialmente preferidos são fenila, ciano, halo, hidroxila, nitro, C1-C4alquióxi, O(C2-C4 alquileno)OH, e O(C2-C4 alquileno)halo.
[0043] Onde a porção que está sendo substituída é uma porção cicloalifática, heterocicloalifática, arila ou heteroarila, substituintes preferidos são alquila, alquenila, alquinila, halo, haloalquila, hidroxila, hidroxialquila, ciano, nitro, alcóxi, -O(hidroxialquil), -O(haloalquil), -O(aril), -O(cicloalquil), -O(heterocicloalquil), alquiltio, ariltio, -C(=O)(alquil), -C(=O)H, -CO2H, -C(=O)NHOH, -C(=O)O(alquil), -C(=O)O(hidroxialquil), -C(=O)NH2, -C(=O)NH(alquil), -C(=O)N(alquil)2,
-OC(=O)(alquil), -OC(=O)(hidroxialquil), -OC(=O)O(alquil), -OC(=O)O(hidroxialquil), -OC(=O)NH2, -OC(=O)NH(alquil), -OC(=O)N(alquil)2, azido, -NH2, -NH(alquil), -N(alquil)2, -NH(aril), -NH(hidroxialquil), -NHC(=O)(alquil), -NHC(=O)H, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(alquil), -NHC(=O)N(alquil)2, -NHC(=NH)NH2, -OSO2(alquil), -SH, -S(alquil), -S(aril), -S(cicloalquil), -S(=O)alquila, -SO2(alquil), -SO2NH2, -SO2NH(alquil), e -SO2N(alquil)2. Substituintes mais preferidos são alquila, alquenila, halo, haloalquila, hidroxila, hidroxialquila, ciano, nitro, alcóxi, -O(hidroxialquil), -C(=O)(alquil), -C(=O)H, -CO2H, -C(=O)NHOH, -C(=O)O(alquil), -C(=O)O(hidroxial- quil), -C(=O)NH2, -C(=O)NH(alquil), -C(=O)N(alquil)2, -OC(=O)(alquil), -OC(=O)(hidroxialquil), -OC(=O)O(alquil), -OC(=O)O(hidroxialquil), -OC(=O)NH2, -OC(=O)NH(alquil), -OC(=O)N(alquil)2, -NH2, -NH(alquil), -N(alquil)2, -NH(aril), -NHC(=O)(alquil), -NHC(=O)H, -NHC(=O)NH2, -NHC(=O)NH(alquil), -NHC(=O)N(alquil)2, e -NHC(=NH)NH2. Espe- cialmente preferidos são C1-C4 alquila, ciano, nitro, halo, e C1-C4alcóxi.
[0044] Onde uma faixa é declarada, como em "C1-C5 alquila" ou "5 a 10%", tal faixa inclui os pontos finais da faixa, como em C1 e C5 na primeira instância e 5% e 10% na segunda instância.
[0045] A menos que estereoisômeros determinados sejam espe- cificamente indicados (por exemplo, por uma ligação em negrito ou tracejada em um estereocentro relevante em uma fórmula estrutural, pela representação de uma ligação dupla como tendo configuração E ou Z em uma fórmula estrutural ou por uso de nomenclatura de designação estereoquímica), todos os estereoisômeros estão incluídos no escopo da invenção, como compostos puros, bem como suas misturas. A menos que de outra maneira indicado, enantiômeros individuais, diastereômeros, isômeros geométricos e combinações e misturas dos mesmos são todos abrangidos por esta invenção.
[0046] Aqueles versados na técnica apreciarão que os compostos podem ter formas tautoméricas (por exemplo, formas ceto e enol), formas de ressonância e formas zwitteriônicas que são equivalentes às representadas nas fórmulas estruturais usadas neste documento e que as fórmulas estruturais abrangem tais formas tautoméricas, de ressonância ou zwitteriônicas.
[0047] "Éster farmaceuticamente aceitável" significa um éster que hidrolisa in vivo (por exemplo, no corpo humano) para produzir o composto origem ou um sal do mesmo ou que tem uma atividade per se semelhante à do composto origem. Ésteres adequados incluem C1- C5 alquila, C2-C5 alquenila ou C2-C5 alcinila, especialmente metila, etila ou n-propila.
[0048] "Sal farmaceuticamente aceitável" significa um sal de um composto adequado para formulação farmacêutica. Onde um composto tem um ou mais grupos básicos, o sal pode ser um sal de adição de ácido, tais como um sulfato, bromidrato, tartrato, mesilato, maleato, citrato, fosfato, acetato, pamoato (embonato), hidroiodeto, nitrato, cloridrato, lactato, metilsulfato, fumarato, benzoato, succinato, mesilato, lactobionato, suberato, tosilato, e similar. Onde um composto tem um ou mais grupos ácidos, o sal pode ser um sal, tal como um sal de cálcio, sal de potássio, sal de magnésio, sal de meglumina, sal de amônio, sal de zinco, sal de piperazina, sal de trometamina, sal de lítio, sal de colina, sal de dietilamina, sal de 4-fenilciclo-hexilamina, sal de benzatina, sal sódico, sal de tetrametilamônio, e similares. As formas e solvatos cristalinos polimórficos também estão incluídos no escopo desta invenção.
[0049] Nas fórmulas desta especificação, uma linha ondulada ( ) transversal a uma ligação ou a um asterisco (*) no final da ligação indica um sítio de ligação covalente. Por exemplo, uma declaração de que R é ou que R é na fórmula significa .
[0050] Nas fórmulas desta especificação, uma ligação que atra- vessa um anel aromático entre dois carbonos da mesma significa que o grupo ligado à ligação pode estar localizado em qualquer uma das posições do anel aromático disponibilizadas pela remoção do hidrogênio que está implicitamente lá. A título de ilustração, a fórmula representa , , ou .
em outra ilustração, representa
A R R R R A R R
R N R N A N R N R , R , R , ou A .
[0051] Geralmente, estruturas tautoméricas foram convertidas aqui na forma de enol, como uma questão de consistência e conveniência.
Tautômero de Enol Tautômero de Ceto
[0052] Aqueles versados na técnica compreenderão que eles também poderiam ter sido processados na forma ceto equivalente e os dois tautômeros equivalentes. AGONISTAS DE TLR7
[0053] Nas fórmulas I / II, uma porção Ar pode opcionalmente ser substituída. Substituintes podem ser, por exemplo, C1-C3 alquila, C3-C3 cicloalquil (CH2)1-3R3, (CH2)1-3C(=O)(CH2)0-3R3, onde R3 é halo, OH, CN, NH2, NH(C1-C5 alquil), N(C1-C5 alquil)2, NH(C3-C6 cicloalquil), NH(C4-C8 bicicloalquil), NH(C6-C10 espirocicloalquil), N(C3-C6 cicloalquil)2, NH(CH2)1-3(aril), N((CH2)1-3(aril))2, uma porção amina cíclica tendo a estrutura , uma porção aromática ou heteroaromática de 6 membros ou uma porção heteroaromática de 5 membros; em que uma alquila, cicloalquila, bicicloalquila, espiro- cicloalquila, amina cíclica, porção aromática ou heteroaromática de 6 membros ou heteroaromática de 5 membros é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados dentre OH, halo, CN, (C1-C3 alquil), O(C1-C3 alquil), C(=O)(Me), SO2(C1-C3 alquil), C(=O)(Et), NH2, NH(Me), N(Me)2, NH(Et), N(Et)2, e N(C1-C3 alquil)2; e uma porção cicloalquila, bicicloalquila, espirocicloalquila, ou amina cíclica pode ter um grupo CH2 substituído por O, S, NH, N(C1-C3 alquil), ou N(Boc). Aqueles versados na técnica apreciarão que, dependendo de o substituinte estar ligado a um carbono ou a um nitrogênio de Ar, R1 na fórmula Ipreferivelmente é n-BuO, n-BuNH, EtO, MeO, ou MeOCH2CH2O; mais preferivelmente n-BuO ou MeOCH2CH2O; e ainda mais preferivelmente n-BuO.
[0054] Na fórmula I, preferivelmente cada R2 é H.
[0055] Em uma modalidade, um composto de acordo com a fórmula I é representado pela fórmula I', em que cada X' é independentemente CH ou N e R1 e Ar são como definidos acima em relação à fórmula I:
[0056] Em uma modalidade, um composto de acordo com a fórmula II é representado pela fórmula II', em que cada X' é indepen- dentemente CH ou N e R1 e Ar são como definidos acima em relação à fórmula II
[0057] Em uma modalidade, um composto de acordo com a fórmula I é representado pela fórmula Ia onde R1 é como definido acima em relação à fórmula I, cada X 'é independentemente CH ou N e R4 é como definido abaixo.
[0058] Em uma modalidade, um composto de acordo com a fór- mula I é representado pela fórmula Ib onde R1 é como definido acima em relação à fórmula I, cada X' é independentemente CH ou N e R4 é como definido abaixo
[0059] Em uma modalidade, um composto de acordo com a fór- mula I é representado pela fórmula Ic onde R1 é como definido acima em relação à fórmula I, cada X’ é inde- pendentemente CH ou N, e R4 é como definido aqui abaixo.
[0060] Nas fórmulas Ia, Ib, e Ic, R4 é H, C1-C3 alquila, C3-C3 cicloalquil (CH2)1-3R3, (CH2)1-3C(=O)(CH2)0-3R3, onde R3 é halo, OH, CN, NH2, NH(C1-C5 alquil), N(C1-C5 alquil)2, NH(C3-C6 cicloalquil), NH(C4-C8 bicicloalquil), NH(C6-C10 espirocicloalquil), N(C3-C6 cicloalquil)2, NH(CH2)1-3(aril), N((CH2)1-3(aril))2, uma porção amina cíclica tendo a estrutura , uma porção aromática ou heteroaromática de 6 membros ou uma porção heteroaromática de 5 membros; em que uma alquila, cicloalquila, bicicloalquila, espirocicloalquila, amina cíclica, porção aromática ou heteroaromática de 6 membros, ou heteroaromática de 5 membros é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados dentre OH, halo, CN, (C1-C3 alquil), O(C1-C3 alquil), C(=O)(Me), SO2(C1-C3 alquil), C(=O)(Et), NH2, NH(Me), N(Me)2, NH(Et), N(Et)2, e N(C1-C3 alquil)2; e uma porção cicloalquila, bicicloalquila, espirocicloalquila, ou amina cíclica pode ter um grupo CH2 substituído por O, S, NH, N(C1-C3 alquil), ou N(Boc).
[0061] Nas fórmulas Ia, Ib, e Ic, preferivelmente R1 é n-BuO.
[0062] Nas fórmulas Ia, Ib, e Ic R4 preferivelmente é
HN H2 N
O N O , , , , , H N O
NH , , ou .
[0063] Exemplos de compostos de acordo com a fórmula Ia incluem: , , , , , ,e .
[0064] Exemplos de compostos de acordo com a fórmula Ib incluem: NH2 (Ib-01) NH2 (Ib-02)
N N N N
OH OH n-BuO N N n-BuO N N
N NH2 NH2 S e S .
[0065] Um exemplo de um composto de acordo com a fórmula Ic é: .
[0066] A Tabela A apresenta dados de atividade biológica para compostos aqui descritos. Um conjunto de dados refere-se à atividade de agonismo do TLR7 usando o ensaio repórter de TLR7 HEK-Blue™, como descrito abaixo. Outro conjunto de dados refere-se à indução da interleucina 6 (IL-6), uma citocina que desempenha um papel importante na via de TLR7. Para comparação, também são apresen- tadas as atividades de resiquimode, vesatolimode, gardiquimode e composto B (Reg. CAS 226906-84-9).
Tabela A - Atividade Biológica Composto Agonismo de TLR7 (EC50, nM) Indução de IL-6 (EC50, μM) Resiquimode 420 — Vesatolimode 1.200 — Gardiquimode 3.340 — Composto B 474 — Ia-01 16 0,108 Ia-02 5,9 0,0126 Ia-03 26 0,0150 Ia-04 7,5 0,00690
Tabela A - Atividade Biológica Composto Agonismo de TLR7 (EC50, nM) Indução de IL-6 (EC50, μM) Ia-05 8 0,0397 Ia-06 24 0,0887 Ib-01 59 0,106 Ib-02 52 0,00755 Ic-01 99 0,365
CONJUGADOS Geral
[0067] Os agonistas de TLR7 aqui descritos podem ser liberados ao sítio da ação pretendida por administração localizada ou por liberação direcionada em um conjugado com uma porção de direcionamento. Preferivelmente, a porção alvo é uma porção de anticorpo ou ligação ao antígeno e seu antígeno é encontrado na localidade da ação pretendida, por exemplo, um antígeno associado a um tumor se o sítio de ação pretendido for um tumor (câncer). Preferivelmente, o antígeno associado ao tumor é expresso ou supe- rexpresso exclusivamente pela célula cancerígena, em comparação com uma célula normal. O antígeno associado ao tumor pode estar localizado sobre a superfície da célula cancerígena ou secretado pela célula cancerígena em seus arredores.
[0068] Em um aspecto, é fornecido um conjugado compreendendo o composto desta invenção e um ligante, representado pela fórmula IV [D(XD)a(C)c(XZ)b]mZ (IV) onde Z é uma porção de direcionamento, D é um agonista desta invenção e (XD)aC(XZ)b- são coletivamente referidos como uma "porção de ligação" ou "ligante" porque eles ligam Z e D. Dentro do ligante, C é um grupo clivável projetado para ser clivado em ou próximo ao sítio da ação biológica pretendida de D; XD e XZ são porções espaçadoras (ou "espaçadoras") que espaçam D e C e C e Z, respectivamente; os subscritos a, b e c são independentemente 0 ou 1 (ou seja, a presença de XD, XZ e C é opcional). O subscrito m é 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 (preferivelmente 1, 2, 3 ou 4). D, XD, C, XZ e Z são descritos mais detalhadamente abaixo.
[0069] Ao se ligar a um tecido ou célula alvo onde seu antígeno ou receptor está localizado, Z direciona o conjugado. A clivagem do grupo C no tecido ou célula alvo libera D para exercer seu efeito localmente. Desta maneira, a liberação precisa de D é alcançada no sítio da ação pretendida, reduzindo a dosagem necessária. Além disso, D é normal- mente biologicamente inativo (ou significativamente menos ativo) em seu estado conjugado, reduzindo assim os efeitos fora do alvo.
[0070] Como refletido pelo subscrito m, cada Z pode se conjugar com mais de um D, dependendo do número de sítios que Z tem disponível para conjugação e das condições experimentais usadas. Aqueles versados na técnica compreenderão que, enquanto cada Z individual é conjugado com um número inteiro de Ds, uma preparação do conjugado pode analisar uma relação não inteira de D para Z, refletindo uma média estatística. Esta relação é referida como a relação de substituição ("SR") ou a relação fármaco-anticorpo ("DAR"). Porção de direcionamento Z
[0071] Preferivelmente, a porção de direcionamento Z é um anticorpo. Por conveniência e brevidade e não a título limitativo, a discussão detalhada nesta especificação sobre Z e seus conjugados é escrita no contexto de ser um anticorpo, porém, aqueles versados na técnica entenderão que outros tipos de Z podem ser conjugados, mutatis mutandis. Por exemplo, conjugados com ácido fólico como a porção de direcionamento podem direcionar as células tendo o receptor de folato sobre suas superfícies (Leamon et al., Cancer Res. 2008, 68 (23), 9839). Pelas mesmas razões, a discussão detalhada nesta especificação é escrita principalmente em termos de uma relação de 1: 1 de Z para D (m = 1).
[0072] Os anticorpos que podem ser utilizados nos conjugados desta invenção incluem aqueles que reconhecem os seguintes antígenos: mesotelina, antígeno de membrana específico da próstata (PSMA), CD19, CD22, CD30, CD70, B7H3, B7H4 (também conhecido como O8E), proteína tirosina cinase 7 (PTK7), glipican-3, RG1, fucosil- GM1, CTLA 4 e CD44. O anticorpo pode ser animal (por exemplo, murino), quimérico, humanizado ou, preferivelmente, humano. O anticorpo é preferivelmente monoclonal, especialmente um anticorpo humano monoclonal. A preparação de anticorpos monoclonais humanos contra alguns dos antígenos mencionados acima é descrita em Korman et al., US 8.609.816 B2 (2013; B7H4, da mesma forma conhecido como 08E; em particular anticorpos 2A7, 1G11, e 2F9); Rao-Naik et al., 8.097.703 B2 (2012; CD19; em particular anticorpos 5G7, 13F1, 46E8, 21D4, 21D4a, 47G4, 27F3, e 3C10); King et al., US
8.481.683 B2 (2013; CD22; em particular anticorpos 12C5, 19A3, 16F7, e 23C6); Keler et al., US 7.387.776 B2 (2008; CD30; em particular anticorpos 5F11, 2H9, e 17G1); Terrett et al., US 8.124.738 B2 (2012; CD70; em particular anticorpos 2H5, 10B4, 8B5, 18E7, e 69A7); Korman et al., US 6.984.720 B1 (2006; CTLA-4; em particular anticorpos 10D1, 4B6, e 1E2); Korman et al., US 8.008.449 B2 (2011; PD-1; em particular anticorpos 17D8, 2D3, 4H1, 5C4, 4A11, 7D3, e 5F4); Huang et al., US 2009/0297438 A1 (2009; PSMA. em particular anticorpos 1C3, 2A10, 2F5, 2C6); Cardarelli et al., US 7.875.278 B2 (2011; PSMA; em particular anticorpos 4A3, 7F12, 8C12, 8A11, 16F9, 2A10, 2C6, 2F5, e 1C3); Terrett et al., US 8.222.375 B2 (2012; PTK7; em particular anticorpos 3G8, 4D5, 12C6, 12C6a, e 7C8); Harkins et al., US 7.335.748 B2 (2008; RG1; em particular anticorpos A, B, C, e D); Terrett et al., US 8.268.970 B2 (2012; mesotelina; em particular anticorpos 3C10, 6A4, e 7B1); Xu et al., US 2010/0092484 A1 (2010; CD44; em particular anticorpos 14G9.B8.B4, 2D1.A3.D12, e 1A9.A6. B9); Deshpande et al., US 8.258.266 B2 (2012; IP10; em particular anticorpos 1D4, 1E1, 2G1, 3C4, 6A5, 6A8, 7C10, 8F6, 10A12,
10A12S, e 13C4); Kuhne et al., US 8.450.464 B2 (2013; CXCR4; em particular anticorpos F7, F9, D1, e E2); e Korman et al., US 7.943.743 B2 (2011; PD-L1; em particular anticorpos 3G10, 12A4, 10A5, 5F8, 10H10, 1B12, 7H1, 11E6, 12B7, e 13G4); cujas descrições estão aqui incorporadas por referência. Preferivelmente, o anticorpo é um anticorpo antimesotelina.
[0073] Além de ser um anticorpo, Z também pode ser um frag- mento de anticorpo (tal como Fab, Fab', F(ab')2, Fd ou Fv) ou mimético de anticorpo, tal como um afficorpo, um anticorpo de domínio (dAb), um nanocorpo, um unicorpo, um DARPin, uma anticalina, um versa- corpo, uma duocalina, uma lipocalina ou um avímero.
[0074] Qualquer um dos vários grupos reativos diferentes em Z pode ser um sítio de conjugação, incluindo grupos ε-amino em resíduos de lisina, porções pendentes de carboidratos, grupos ácido carboxílico em cadeias laterais de ácido aspártico ou glutâmico, grupos dissulfeto de cisteína-cisteína e grupos cisteína tiol. Para revi- sões sobre grupos reativos de anticorpo adequados para conjugação, veja, por exemplo, Garnett, Adv. Drug Delivery Rev. 2001, 53, 171-216 e Dubowchik e Walker, Pharmacology & Therapeutics 1999, 83, 67- 123, cujas descrições estão aqui incorporadas por referência.
[0075] A maioria dos anticorpos tem vários resíduos de lisina, que podem ser conjugados por meio de seus grupos -amino por meio de ligações amida, ureia, tioureia ou carbamato.
[0076] Um grupo tiol (-SH) na cadeia lateral de uma cisteína pode ser usado para formar um conjugado por vários métodos. Pode ser usado para formar uma ligação dissulfeto entre ele e um grupo tiol no ligante. Outro método é através da adição de Michael a um grupo maleimida no ligante.
[0077] Tipicamente, embora os anticorpos tenham resíduos de cisteína, eles não possuem grupos tiol livres porque todas as suas cisteínas estão envolvidas em ligações dissulfeto intra ou inter-cadeia. Para gerar um grupo tiol livre, um grupo dissulfeto nativo pode ser reduzido. Veja, por exemplo, Packard et al., Biochemistry 1986, 25, 3548; King et al., Cancer Res. 1994, 54, 6176; e Doronina et al., Nature Biotechnol. 2003, 21, 778. Como alternativa, uma cisteína tendo um grupo -SH livre pode ser introduzida através da mutação do anticorpo, substituindo uma cisteína por outro aminoácido ou inserindo um na cadeia polipeptídica. Veja, por exemplo, Eigenbrot et al., US
7.521.541 B2 (2009); Chilkoti et al., Bioconjugate Chem. 1994, 5, 504; Urnovitz et al., US 4.698.420 (1987); Stimmel et al., J. Biol. Chem. 2000, 275, 30445; Bam et al., US 7.311.902 B2 (2007); Kuan et al., J. Biol. Chem. 1994, 269, 7610; Poon et al., J. Biol. Chem. 1995, 270, 8571; Junutula et al., Nature Biotechnology 2008, 26, 925 e Rajpal et al., Pedido Provisório US No. 62/270245, depositado em Dec. 21,
2015. Em ainda outro método, uma cisteína é adicionada ao C- terminal da pesada da cadeia leve. Veja, por exemplo, Liu et al., US
8.865.875 B2 (2014); Cumber et al., J. Immunol. 1992, 149, 120; King et al, Cancer Res. 1994, 54, 6176; Li et al., Bioconjugate Chem. 2002, 13, 985; Yang et al., Protein Engineering 2003, 16, 761; e Olafson et al., Protein Engineering Design & Selection 2004, 17, 21. As descrições dos documentos citados neste parágrafo são aqui incorporadas por referência. Ligantes e seus componentes
[0078] Como observado acima, o ligante compreende até três elementos: um grupo clivável C e espaçadores opcionais XZ e XD.
[0079] O grupo C é clivável em condições fisiológicas. Preferivel- mente, é relativamente estável enquanto o conjugado está em circulação no sangue, porém, é rapidamente clivado quando o conju- gado atinge o seu sítio de ação pretendida.
[0080] Um grupo C preferido é um peptídeo que é clivado seletiva-
mente por uma protease dentro da célula alvo, em oposição a uma protease no soro. Tipicamente, o peptídeo compreende de 1 a 20 aminoácidos, preferivelmente de 1 a 6 aminoácidos, mais preferivel- mente de 2 a 3 aminoácidos. O(s) aminoácido(s) pode(m) ser α- aminoácidos naturais e/ou não naturais. Os aminoácidos naturais são aqueles codificados pelo código genético, bem como os aminoácidos derivados dos mesmos, por exemplo, hidroxiprolina, -carboxigluta- mato, citrulina e O-fosfosserina. Nesta especificação, o termo "ami- noácido" também inclui análogos e miméticos de aminoácido. Análogos são compostos que têm a mesma estrutura geral de H2N(R)CHCO2H de um aminoácido natural, exceto que o grupo R não é encontrado entre os aminoácidos naturais. Exemplos de análogos incluem homosserina, norleucina, metionina-sulfóxido e metionina metil sulfônio. Um mimético de aminoácido é um composto que tem uma estrutura diferente da estrutura química geral de um α-amino- ácido, porém, funciona de maneira semelhante àquela. O aminoácido pode ser da estereoquímica "L" dos aminoácidos codificados gene- ticamente, bem como da estereoquímica enantiomérica "D".
[0081] Preferivelmente, C contém uma sequência de aminoácido que é uma sequência de reconhecimento de clivagem para uma protease. Muitas sequências de reconhecimento de clivagem são conhecidas na técnica. Veja, por exemplo, Matayoshi et al. Science 247: 954 (1990); Dunn et al. Meth. Enzymol. 241: 254 (1994); Seidah et al. Meth. Enzymol. 244: 175 (1994); Thornberry, Meth. Enzymol. 244: 615 (1994); Weber et al. Meth. Enzymol. 244: 595 (1994); Smith et al. Meth. Enzymol. 244: 412 (1994); e Bouvier et al. Meth. Enzymol. 248: 614 (1995); cujas descrições estão aqui incorporadas por referência.
[0082] Um grupo C pode ser escolhido de modo que seja clivado por uma protease presente na matriz extracelular na vizinhança de um câncer, por exemplo, uma protease liberada por células cancerígenas moribundas próximas ou uma protease associada a um tumor secre- tada por células cancerígenas. Proteases extracelulares associadas a tumores exemplares são plasmina, metaloproteases matriz (MMP), thimet oligopeptidase (TOP) e CD10. Veja, por exemplo, Trouet et al., US 7.402.556 B2 (2008); Dubois et al., US 7.425.541 B2 (2008); e Bebbington et al., US 6.897.034 B2 (2005). A catepsina D, normalmente enzima lisossômica encontrada dentro das células, às vezes é encontrada nos arredores de um tumor, possivelmente libe- rada pelas células cancerígenas moribundas.
[0083] Para conjugados projetados para serem por uma enzima, C compreende preferivelmente uma sequência de aminoácido selecio- nada para clivagem por proteases, tais como catepsinas B, C, D, H, L e S, especialmente catepsina B. Peptídeos cliváveis de catepsina B exemplares incluem Val-Ala, Val-Cit, Val-Lys, Lys-Val-Ala, Asp-Val- Ala, Val-Ala, Lys-Val-Cit, Ala-Val-Cit, Val-Gly, Val-Gln, and Asp-Val-Cit. (Aqui, as sequências de aminoácidos são escritas na direção N-para- C, como em H2N-AA2-AA1-CO2H, a menos que o contexto indique claramente o contrário). Veja, Dubowchik et al., Biorg. Med. Chem. Lett. 1998, 8, 3341; Dubowchik et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 1998, 8, 3347; e Dubowchik et al., Bioconjugate Chem. 2002, 13, 855; cujas descrições estão incorporadas por referência.
[0084] Outra enzima que pode ser utilizada para a clivagem de ligantes peptidílicos é a legumaína, uma protease de cisteína lisossô- mica que cliva preferivelmente em Ala-Ala-Asn.
[0085] Em uma modalidade, o Grupo C é um peptídeo que compreende uma sequência de dois aminoácidos -AA2-AA1- em que AA1 é lisina, arginina ou citrulina e AA2 é fenilalanina, valina, alanina, leucina ou isoleucina. Em outra modalidade, C consiste em uma sequência de um a três aminoácidos, selecionados a partir do grupo que consiste em Val-Cit, Ala-Val, Val-Ala-Val, Lys-Lys, Ala-Asn-Val, Val-Leu-Lys, Cit-Cit, Val-Lys, Ala-Ala-Asn, Lys, Cit, Ser, e Glu. Mais preferivelmente, é um peptídeo de dois a três aminoácidos do grupo anterior.
[0086] A preparação e o projeto de grupos cliváveis C consistindo em um único aminoácido é descrita em Chen et al., US 8.664.407 B2 (2014), cuja descrição é aqui incorporada por referência.
[0087] O grupo C pode ser ligado diretamente a Z ou D; isto é, os espaçadores XZ ou XD, conforme o caso, podem estar ausentes.
[0088] Quando presente, o espaçador XZ fornece separação espacial entre C e Z, a fim de que o primeiro não interfira estereoti- picamente com a ligação ao antígeno por este último ou o último interfira estericamente com a clivagem do primeiro. Além disso, o espaçador XZ pode ser utilizado para conferir maior solubilidade ou propriedades de agregação diminuídas aos conjugados. Um espaçador XZ pode compreender um ou mais segmentos modulares, que podem ser montados em qualquer número de combinações. Exemplos de segmentos adequados para um espaçador XZ são: , , , , , , e combinações dos mesmos, onde o subscrito g é 0 ou 1 e o subscrito h é 1 a 24, preferivelmente 2 a 4. Estes segmentos podem ser combinados, tal como ilustrado abai- xo: , , ou .
[0089] O espaçador XD, se presente, fornece separação espacial entre C e D, para que o último não interfira estericamente ou eletronicamente na clivagem do primeiro. O espaçador XD também pode servir para introduzir massa molecular e funcionalidade química adicionais em um conjugado. Geralmente, a massa e a funcionalidade adicionais afetarão a meia-vida sérica e outras propriedades do conjugado. Assim, através da seleção criteriosa de grupos espa- çadores, a meia-vida sérica de um conjugado pode ser modulada. O espaçador XD também pode ser montado a partir de segmentos modulares, analogamente à descrição acima para o espaçador XZ.
[0090] Os espaçadores XZ e/ou XD, quando presentes, fornecem preferivelmente uma separação linear de 4 a 25 átomos, mais preferivelmente de 4 a 20 átomos, entre Z e C ou D e C, respec- tivamente.
[0091] O ligante pode executar outras funções, além de ligar covalentemente o anticorpo e o fármaco. Por exemplo, o ligante pode conter um grupo poli(etileno glicol) ("PEG"). Uma vez que a etapa de conjugação envolve tipicamente o acoplamento de um fármaco-ligante a um anticorpo em um meio aquoso, um grupo PEG realça a solubilidade aquosa do fármaco-ligante. Além disso, um grupo PEG pode realçar a solubilidade ou reduzir a agregação no ADC resultante. Onde um grupo PEG está presente, ele pode ser incorporado no espaçador XZ de XD ou em ambos. O número de unidades de repetição em um grupo PEG pode ser de 2 a 20, preferivelmente entre 4 e 10.
[0092] O espaçador XZ ou XD, ou ambos, pode compreender uma porção autoimoladora. Uma porção autoimoladora é uma porção que (1) está ligada a C e Z ou D e (2) tem uma estrutura tal que a clivagem do grupo C inicia uma sequência de reação resultando na porção autoimoladora que se desprende de Z ou D, conforme o caso. Em outras palavras, a reação em um sítio distal de Z ou D (clivagem do grupo C) faz com que a ligação XZ-Z ou XD-D também se rompa. A presença de uma porção autoimoladora é desejável no caso do espaçador XD porque, se, após a clivagem do conjugado, o espaçador XD ou uma porção dele permanecer ligado a D, a atividade biológica de D pode ser prejudicada. O uso de uma porção autoimoladora é especialmente desejável quando o grupo clivável C é um polipeptídeo, caso em que a porção autoimoladora está tipicamente localizada adjacente a ele, a fim de impedir D de interferir estericamente ou eletronicamente com a clivagem de peptídeos.
[0093] Porções autoimoladoras exemplares i - v ligadas a um grupo hidroxila ou amino de D são mostradas abaixo: (vii) a b c Me O
O N
D N O O O Me
N H
[0094] A porção autoimoladora é a estrutura entre as linhas pontilhadas a e b (ou linhas pontilhadas b e c), com características estruturais adjacentes mostradas para fornecer o contexto. As porções autoimoladoras i e v são ligadas a um D-NH2 (isto é, a conjugação é por meio de um grupo amino), enquanto as porções autoimoladoras ii, iii e iv são ligadas a um D-OH (isto é, a conjugação é por meio de um grupo hidroxila ou carboxila). A clivagem da ligação na linha pontilhada b por uma enzima - uma peptidase no caso das estruturas i - v e uma β-glicuronidase no caso da estrutura vi - inicia uma sequência de reação autoimoladora que resulta na clivagem da ligação na linha pontilhada a e a conseqüente liberação de D-OH ou D-NH2, conforme o caso. A título de ilustração, os mecanismos de autoimoladores para as estruturas i e iv são mostrados abaixo:
[0095] Em outras palavras, a clivagem de uma primeira ligação química em uma parte de um grupo autoimolador inicia uma sequência de etapas que resultam na clivagem de uma segunda ligação química - aquela que conecta o grupo autoimolador ao fármaco - em uma parte diferente do grupo autoimolador, liberando assim o fármaco.
[0096] Em alguns casos, grupos autoimoladores podem ser usa- dos em conjunto, como mostra a estrutura vii. Em tal caso, a clivagem na linha pontilhada c desencadeia a autoimolação da porção entre as linhas pontilhadas b e c por uma reação 1,6-eliminação, seguida pela autoimolação da porção entre as linhas pontilhadas a e b por uma reação de ciclização-eliminação. Para descrições adicionais sobre porções autoimoladoras, veja Carl et al., J. Med. Chem. 1981, 24, 479; Carl et al., WO 81/01145 (1981); Dubowchik et al., Pharmacology &
Therapeutics 1999, 83, 67; Firestone et al., US 6.214.345 B1 (2001); Toki et al., J. Org. Chem. 2002, 67, 1866; Doronina et al., Nature Bio- technology 2003, 21, 778 (erratum, p. 941); Boyd et al., US 7,691,962 B2; Boyd et al., US 2008/0279868 A1; Sufi et al., WO 2008/083312 A2; Feng, US 7,375,078 B2; Jeffrey et al., US 8.039.273; e Senter et al., US 2003/0096743 A1; cujas descrições são incorporadas por referên- cia.
[0097] Em outra modalidade, Z e D estão ligados por um ligante não clivável, isto é, C está ausente. O metabolismo de D eventual- mente reduz o ligante a uma pequena porção anexada que não interfere com a atividade biológica de D. Técnicas de Conjugação
[0098] Os conjugados de agonistas de TLR7 aqui descritos, preferivelmente, são feitos através da preparação de um composto que compreende D e ligante (XD)a(C)c(XZ)b (onde XD, C, XZ, a, b, e c são como definidos para a fórmula II) para formar o composto fármaco-ligante representado pela fórmula V: D-(XD)a(C)c(XZ)b-R31 (V) onde R31 é um grupo funcional adequado para reagir com um grupo funcional complementar em Z para formar o conjugado. Exemplos de grupos adequados R31 incluem amino, azida, tiol, ciclooctina, , , , , , , ,e ; onde R32 é Cl, Br, F, mesilato, ou tosilato e R33 é Cl, Br, I, F, OH, -O-N- succinimidila, -O-(4-nitrofenil), -O-pentafluorofenila, ou -O-tetrafluo- rofenila. Química geralmente utilizável para a preparação de porções adequadas D-(XD)aC(XZ)b-R31 é divulgado em Ng et al., US 7.087.600
B2 (2006); Ng et al., US 6.989.452 B2 (2006); Ng et al., US 7.129.261 B2 (2006); Ng et al., WO 02/096910 A1; Boyd et al., US 7.691.962 B2; Chen et al., US 7.517.903 B2 (2009); Gangwar et al., US 7.714.016 B2 (2010); Boyd et al., US 2008/0279868 A1; Gangwar et al., US
7.847.105 B2 (2010); Gangwar et al., US 7.968.586 B2 (2011); Sufi et al., US 8.461.117 B2 (2013); e Chen et al., US 8.664.407 B2 (2014); cujas descrições estão aqui incorporadas por referência.
[0099] Grupo funcional preferivelmente reativo -R31 é -NH2, -OH, -CO2H, -SH, maleimido, ciclooctina, azido (-N3), hidroxilamino (-ONH2) ou N-hidroxissuccinimido. Grupos funcionais especialmente preferidos -R31 são: Legenda das figuras: - or = ou
[00100] Um grupo -OH pode ser esterificado com um grupo carbóxi no anticorpo, por exemplo, em uma cadeia lateral do ácido aspártico ou glutâmico.
[00101] Um grupo -CO2H pode ser esterificado com um grupo -OH ou amidado com um grupo amino (por exemplo, em uma cadeia lateral de lisina) no anticorpo.
[00102] Um grupo N-hidroxissuccinimida é funcionalmente um grupo carboxila ativado e pode ser convenientemente amidado por reação com um grupo amino (por exemplo, da lisina).
[00103] Um grupo maleimida pode ser conjugado com um grupo -SH no anticorpo (por exemplo, da cisteína ou da modificação química do anticorpo para introduzir uma funcionalidade sulfidrila), em uma reação de adição de Michael.
[00104] Quando um anticorpo não possui uma cisteína -SH disponível para conjugação, um grupo ε-amino na cadeia lateral de um resíduo de lisina pode reagir com 2-iminotiolano ou N-succinimidil-3-(2- piridilditio)propionato ("SPDP") para introduzir um grupo tiol livre (-SH) - criando um substituto de cisteína, por assim dizer. O grupo tiol pode reagir com uma maleimida ou outro grupo aceptor de nucleófilos para efetuar a conjugação. O mecanismo se ilustrado abaixo com 2- iminotiolano.
2-Imino- tiolano Anticorpo Conjugado Legenda das figuras: - [Ligante] - [Fármaco]
[00105] Normalmente, um nível de tiolação de dois a três tióis por anticorpo é atingido. Para um procedimento representativo, veja, Cong et al., US 8.980.824 B2 (2015), cuja descrição é aqui incorporada por referência.
[00106] Em um arranjo reverso, um anticorpo Z pode ser modificado com N-succinimidil 4-(maleimidometil)-ciclo-hexanocarboxilato ("SMCC") ou sua variante sulfonada sulfo-SMCC, ambos disponíveis de Sigma-Aldrich, para introduzir um grupo maleimida. Então, a con- jugação pode ser efetuada com um composto fármaco-ligante tendo um grupo -SH no ligante.
[00107] Um método alternativo de conjugação usa a "química click" sem cobre, no qual um grupo azida adiciona através de um ciclo-octino tensionado para formar um anel 1,2,3-triazol. Veja, por exemplo, Agard et al., J. Amer. Chem. Soc. 2004, 126, 15046; Best, Biochemistry 2009, 48, 6571, cujas descrições estão aqui incorporadas por referência. A azida pode estar localizada no anticorpo e a ciclooctina na porção fármaco-ligante, ou vice-versa. Um grupo ciclooctina preferido é o dibenzociclo-octina (DIBO). Vários reagentes com um grupo DIBO estão disponíveis de Invitrogen/Molecular Probes, Eugeno, Oregon. A reação abaixo ilustra a conjugação da química click no caso em que o grupo DIBO está ligado ao anticorpo Ab: Conjugado Legenda das figuras: - [Fármaco] - [Ligante]
[00108] Ainda outra técnica de conjugação envolve a introdução de um aminoácido não natural em um anticorpo, com o aminoácido não natural fornecendo uma funcionalidade para a conjugação com um grupo funcional reativo na porção de fármaco. Por exemplo, o aminoácido não natural p-acetilfenilalanina pode ser incorporado em um anticorpo ou outro polipeptídeo, como ensinado em Tian et al., WO 2008/030612 A2 (2008). O grupo cetona na p-acetilfenialanina pode ser um sítio de conjugação através da formação de uma oxima com um grupo hidroxilamino na porção ligante-fármaco. Alternativamente, o aminoácido não natural p-azidofenilalanina pode ser incorporado em um anticorpo para fornecer um grupo funcional azida para conjugação via química click, como discutido acima. Os aminoácidos não naturais também podem ser incorporados a um anticorpo ou outro polipeptídeo usando métodos sem células, conforme ensinado em Goerke et al.,
US 2010/0093024 A1 (2010) e Goerke et al., Biotechnol. Bioeng. 2009, 102 (2), 400-416. As descrições anteriores são incorporadas aqui por referência. Assim, em uma modalidade, um anticorpo que é usado para fazer um conjugado tem um ou mais aminoácidos substituídos por um aminoácido não natural, que preferivelmente é p-acetilfeni- lalanina ou p-azidofenilalanina, mais preferivelmente p-acetilfenila- lanina.
[00109] Ainda outra técnica de conjugação utiliza a enzima trans- glutaminase (preferivelmente transglutaminase bacteriana de Strepto- myces mobaraensis ou BTG), por Jeger et al., Angew. Chem. Int. Ed. 2010, 49, 9995. BTG forma uma ligação de amida entre a carboxamida da cadeia lateral de uma glutamina (o aceptor de amina) e um grupo alquilenamino (o doador de amina), que pode ser, por exemplo, o grupo ε-amino de uma lisina ou grupo 5-amino-n-pentila. Em uma reação de conjugação típica, o resíduo de glutamina está localizado no anticorpo, enquanto o grupo alquilenoamino está localizado na porção ligante-fármaco, como mostrado abaixo: Anticorpo Conjugado Legenda das figuras: - [Ligante] - [Fármaco]
[00110] O posicionamento de um resíduo de glutamina em uma cadeia polipeptídica tem um grande efeito em sua suscetibilidade à transamidação mediada por BTG. Nenhum dos resíduos de glutamina em um anticorpo são normalmente substratos de BTG. No entanto, se o anticorpo for desglicosilado - o sítio de glicosilação é a asparagina 297 (N297; numeração por índice da EU, conforme estabelecido em Kabat et al., "Sequences of proteins of immunological interest", 5th ed., Pub. No. 91-3242, U.S. Dept. Health & Human Services, NIH, Bethesda, Md., 1991; a seguir "Kabat") da cadeia pesada - a glutamina próxima 295 (Q295) torna suscetível a BTG. Um anticorpo pode ser desglicosilado enzimaticamente por tratamento com PNGase F (peptídeo-N-glicosidase F). Alternativamente, um anticorpo pode ser sintetizado livre de glicosídeo introduzindo uma mutação N297A na região constante, para eliminar o sítio de glicosilação N297. Além disso, foi demonstrado que uma substituição N297Q não apenas elimina a glicosilação, porém, também introduz um segundo resíduo de glutamina (na posição 297) que também é um aceptor de amina. Assim, em uma modalidade, o anticorpo é desglicosilado. Em outra modalidade, o anticorpo tem uma substituição N297Q. Aqueles versados na técnica apreciarão que a desglicosilação por modificação pós-síntese ou pela introdução de uma mutação N297A gera dois resíduos de glutamina reativos a BTG por anticorpo (um por cadeia pesada, na posição 295), enquanto um anticorpo com uma substituição N297Q terá quatro resíduos de glutamina reativos a BTG (dois por cadeia pesada, nas posições 295 e 297).
[00111] Um anticorpo também pode ser tornado suscetível à conjugação mediada por BTG, introduzindo nele um peptídeo conten- do glutamina, ou "marcador", conforme ensinado, por exemplo, em Pons et al., US 2013/0230543 A1 (2013) e Rao-Naik et al., WO 2016/144608 A1.
[00112] Em um método complementar, a especificidade do substrato de BTG pode ser alterada variando sua sequência de aminoácidos, de modo que se torne capaz de reagir com a glutamina 295 em um anticorpo não modificado, conforme ensinado em Rao-
Naik et al., WO 2017 / 059158 A1 (2017).
[00113] Embora a transglutaminase bacteriana mais comumente disponível seja a de S. mobaraensis, transglutaminase de outras bactérias, tendo especificidades de substrato um pouco diferentes, pode ser considerada, como a transglutaminase de Streptoverticillium ladakanum (Hu et al., US 2009/0318349 A1 (2009), US 2010/0099610 A1 (2010), e US 2010/0087371 A1 (2010)).
[00114] Os agonistas de TLR7 desta descrição tendo uma alquil amina primária ou secundária são particularmente adequados para uso em conjugados, pois a amina secundária fornece um grupo funcional para ligação do ligante. Um exemplo de um tal composto agonista-ligador de TLR7 é o composto 11, que contém um ligante clivável enzimaticamente. FIG. 4 mostra um esquema de acordo com o qual o composto 11 pode ser preparado. O NH2 NH2
N NH N
OH n-BuO N N O
H H
N N O N NH2 H 4
N N O O O N
O 11
[00115] Um exemplo de um composto agonista-ligante de TLR7 que contém um ligante não enzimaticamente clivável é o composto 13. A FIG. 5 mostra um esquema para sintetizar o composto 13.
[00116] Ambos os compostos 11 e 13 contêm um grupo alquilamino primário, tornando-os passíveis de conjugação com transglutaminase.
Um procedimento de conjugação adequado é descrito nos exemplos aqui abaixo.
[00117] A conjugação também pode ser efetuada usando a enzima Sortase A, como ensinado em Levary et al., PLoS One 2011, 6(4), e18342; Proft, Biotechnol. Lett. 2010, 32, 1-10; Ploegh et al., WO 2010/087994 A2 (2010); e Mao et al., WO 2005/051976 A2 (2005). O motivo de reconhecimento da Sortase A (tipicamente LPXTG, onde X é qualquer aminoácido natural) pode estar localizado no ligante Z e o motivo aceptor nucleofílico (normalmente GGG) pode ser o grupo R31 na fórmula III ou vice-versa. Conjugados de Agonista de TLR7
[00118] Aplicando as técnicas descritas anteriormente, os conju- gados de agonista de TLR7 como os mostrados abaixo podem ser preparados: O NH2 NH2
N NH N
OH n-BuO N N O O
H H
N N O N N Ab H 4 H
N N O O O N m
O onde m é 1, 2, 3, ou 4 e Ab é um anticorpo.
PEGILAÇÃO
[00119] A ligação de uma cadeia de poli(etileno glicol) (PEG) a um fármaco ("PEGilação") pode melhorar as propriedades farmacoci- néticas deste último. A meia-vida de circulação do fármaco é aumentada, algumas vezes acima de uma ordem de grandeza, reduzindo concomitantemente a dosagem necessária para alcançar o efeito terapêutico desejado. A PEGilação também pode diminuir a degradação metabólica de um fármaco e reduzir sua imunogenicidade. Para uma revisão, veja Kolate et al., J. Controlled Release 2014, 192,
167.
[00120] Inicialmente, a PEGilação foi aplicada a fármacos bioló- gicos. Até 2016, mais de dez produtos biológicos PEGuilados haviam sido aprovados. Turecek et al., J. Pharmaceutical Sci. 2016, 105, 460. Mais recentemente, estimulada pela aplicação bem-sucedida do conceito em produtos biológicos, a atenção voltou-se para sua aplicação em fármacos de pequenas moléculas. Além dos benefícios acima mencionados, os fármacos de moléculas pequenas PEGuilados podem ter maior solubilidade e causar menos efeitos tóxicos. Li et al. Prog. Polymer Sci. 2013, 38, 421.
[00121] Os compostos aqui descritos podem ser PEGuilados. Onde um composto tem uma hidroxila alifática ou uma amina primária ou secundária alifática, como no caso do composto Ia-01 ou Ia-02 (setas), ele pode ser PEGuilado por um grupo éster, amida, carbonato ou carbamato com uma molécula de PEG contendo carbóxi utilizando técnicas convencionais como diciclo-hexilcarbodi-imida (DCC), HATU, ésteres de N-hidroxissuccinimida, e similares. Vários outros métodos para a PEGilação de moléculas farmacêuticas são descritos em Alconcel et al., Polymer Chem. 2011, 2, 1442, cuja descrição é aqui incorporada por referência.
[00122] Se desejado, um agonista de TLR7 aqui descrito pode ser
PEGuilado por meio de um ligante clivável enzimaticamente compre- endendo uma porção autoimoladora, para permitir a liberação do agonista não PEGuilado de uma maneira projetada. Além disso, a PEGilação pode ser combinada com a conjugação com uma proteína como um anticorpo, se a molécula contendo PEG tiver um grupo funcional adequado, como uma amina, para ligação à proteína. A proteína pode fornecer uma função terapêutica adicional ou, se um anticorpo, pode fornecer uma função de direcionamento. Estes conceitos são ilustrados na seguinte sequência de reação, em que TLR7-NH-R representa genericamente um agonista de TLR7:
3. Piperidina Proteína Transglutaminase
O NH2
NH O H H O
N N O R N N C (CH2)2 Gln H x H
N O O O TLR7
O PEGylated Conjugate Conjugado PEGuilado
[00123] Na sequência de reação acima, o dipeptídeo valina-citrulina (Val-Cit) é clivável pela enzima catepsina B, com um grupo p-amino- benzil oxicarbonila (PABC) servindo como espaçador autoimolador. O grupo funcional para a conjugação é um grupo amina, que é tempora- riamente protegido por um grupo Fmoc. A conjugação é efetuada pela enzima transglutaminase, com uma cadeia lateral de glutamina (Gln) atuando como aceptor de acila. O subscrito x, denotando o número de unidades de repetição de PEG, pode variar amplamente, dependendo do objetivo da PEGilação, conforme discutido abaixo. Para alguns propósitos, x pode ser relativamente pequeno, tal como 2, 4, 8, 12 ou
24. Para outros fins, x é grande, por exemplo, entre cerca de 45 e cer- ca de 910.
[00124] Aqueles versados na técnica entenderão que a sequência é ilustrativa e que outros elementos - peptídeo, grupo autoimolador, método de conjugação, comprimento de PEG, etc. - podem ser usados, como é bem conhecido na técnica. Eles também entenderão que, enquanto a sequência acima combina PEGilação e conjugação, a PEGilação não requer conjugação e vice-versa.
[00125] Onde o composto não possui hidroxila alifática ou amina primária ou secundária alifática, como no caso do composto 3 (FIG. 1), ainda pode ser PEGuilado na amina aromática (seta). Um método para PEGilaçaõ nesta posição é descrito por Zarraga, US 2017/0166384 A1 (2007), cuja descrição é incorporada por referência.
[00126] Em algumas modalidades, pode ser desejável ter vários agonistas PEGuilados ligados em uma única molécula. Por exemplo, quatro subdivisões PEGuiladas podem ser construídas em pentaeri- tritol (C(CH2OH)4) e um agonista de TLR7 pode ser ligado a cada subdivisão PEGuilada. Veja Gao et al., US 2013/0028857 A1 (2013), cuja descrição é incorporada por referência.
[00127] Para modular a farmacocinética, é geralmente preferido que a porção de PEG tenha um peso de fórmula entre cerca de 2 kDa (correspondente a cerca de 45 unidades de repetição de -(CH2CH2O)- e entre cerca de 40 kDa (correspondente a cerca de 910 unidades de repetição de -(CH2CH2O)-, mais preferivelmente entre cerca de 5 kDa e cerca de 20 kDa. Ou seja, a faixa do subscrito x nas fórmulas acima é de cerca de 45 a cerca de 910. Deve ser entendido que as compo- sições de PEG não são 100% homogêneas, porém, ao contrário, exibem uma distribuição de pesos moleculares. Assim, uma referência a, por exemplo, "20kDa de PEG" significa PEG tendo um peso molecular médio de 20 kDa.
[00128] A PEGilação também pode ser usada para melhorar a solubilidade de um agonista. Em tais casos, uma cadeia de PEG mais curta pode ser usada, por exemplo, compreendendo 2, 4, 8, 12 ou 24 unidades de repetição.
EXEMPLOS
[00129] A prática desta invenção pode ser ainda melhor entendida por referência aos seguintes exemplos, que são fornecidos a título de ilustração e não de limitação.
Exemplo 1 - Síntese de compostos de fórmula Ia
[00130] Este exemplo e as FIGs. 1 e 7 referem-se à síntese de compostos de acordo com a fórmula Ia.
[00131] Referindo-nos primeiro à FIG. 1: o nitrogênio foi borbulhado através de um tubo selável contendo 9-(4-bromobenzil)-2-butóxi-8-me- tóxi-9H-purin-6-amina 1 (preparado de acordo com WO 2011/049815 A1, 400mg, 0,985 mmol), etil 2-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxabo- rolan-2-il)-1H-pirazol-1-il)acetato 2 (359 mg, 1,280 mmol) e K2CO3 (476 mg, 3,45 mmol) em dioxano (12 ml) e água (3 ml) por 2 minutos. Foi adicionado tetracis(trifenilfosfina)paládio (0) (114 mg, 0,098 mmol) e N2 foi borbulhado por mais 1 min. O tubo foi, então, selado e agitado a 80 °C durante 2,5 horas, após o que a reação estava completa. No resfriamento, EtOAc (20 m) foi adicionado e o sólido foi filtrado através de uma almofada CELITE™. As duas camadas de filtrado foram separadas. A camada aquosa foi extraída de novo com EtOAc duas vezes. Os extratos orgânicos combinados foram secos em Na2SO4, filtrados e concentrados. O produto cru foi purificado em uma coluna de 12 g de sílica, eluído com 20% de MeOH em diclorometano (DCM, gradiente de 0-30%). As frações desejadas foram concentradas para produzir o éster 3 (168 mg, 0,350 mmol, 35,6% de rendimento). LCMS ESI: calculado para C24H29N7O4 = 480,2 (M+H+), encontrado 480,1 (M+H+).
[00132] A camada aquosa do filtrado foi acidificada com HCl 1,0 N até pH 4 e extraída com 20% de MeOH em DCM (3x15 mL). Os extratos orgânicos combinados foram secos em Na2SO4, filtrados e concentrados para produzir o ácido 4 (97 mg, 0,215 mmol, 21,82% de rendimento). LCMS ESI: calculado para C22H25N7O4 = 452,2 (M + H +), encontrado 452,1 (M+H+).
[00133] Uma solução agitada de ácido 4 (50 mg, 0,111 mmol) em N,N-dimetilformamida (1,5 mL) foi tratada com terc-butil (2-aminoetil)
carbamato (26,6 mg, 0,166 mmol), trimetilamina (TEA, 0,046 mL, 0,332 mmol) e hexafluorofosfato de -(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3- il)-1,1,3,3-tetrametilisourônio (V) (HATU, 54,7 mg, 0,144 mmol). Após 2 horas, a mistura de reação foi extinta com água e agitada à temperatura ambiente (RT) durante a noite. O sólido resultante foi recolhido por filtração e seco ao ar. O sólido cru foi dissolvido em 0,5 mL de THF e tratado com HCl 1,0 N (0,5 mL). Após agitação a 60°C durante 6 horas, a reação foi completada. O produto cru foi purificado em 15,5 g da coluna C18 Aq e eluído com 0,05% de TFA em ACN:0,05% de TFA em H2O (gradiente de 0-50%) para produzir o composto (Ia-02) (sal de trifluoroacetato, 10,1 mg, 0,017 mmol, 15,06 % de rendimento). LCMS ESI: calculado para C23H29N9O3 = 480,2 (M+H+), encontrado 480,1 (M+H+). 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,93 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,43 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,32 (s, 2H), 4,89 (s, 2H), 4,81 (s, 2H), 4,29 - 4,10 (m, 2H), 3,41 (t, J=5,7 Hz, 2H), 2,98 (t, J=5,7 Hz, 2H), 1,72 - 1,54 (m, 2H), 1,38 (d, J=7,7 Hz, 2H), 0,87 (t, J=7,4 Hz, 3H).
[00134] Referindo-se agora a FIG. 7: a uma suspensão de 2-butóxi- 8-metóxi-9H-purin-6-amina 14 (CAS Reg. No. 866268-31-7, sal de TFA, 500 mg, 1,423 mmol) e carbonato de césio (1,484 mg, 4,55 mmol) em DMF (10 mL) foi adicionado 2-(4-(bromometil)fenil)-4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolano 15 (CAS Reg. No. 138500-85-3, 507 mg, 1,708 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 h, após o que a reação foi completada com dois produtos principais. A reação foi extinta com NH4Cl saturado. O sólido resultante foi coletado por filtração e seco para produzir uma mistura do composto 17 (600 mg, 0,242 mmol, 17,03% de rendimento) e composto 16 (600 mg, 0,926 mmol, 65,1% de rendimento). LCMS ESI (composto 17): calculado para C17H23BN5O4 = 372,2 (M+H+), encontrado 372,2 (M+H+). LCMS ESI (composto 16): calculado para
C23H33BN5O4 = 454,3 (M+H+), encontrado 454,2 (M+H+).
[00135] A uma mistura do composto 17 (600 mg, 0,242 mmol,) e composto 16 (600 mg, 0,926 mmol,) foi adicionado 2-(4-bromo-1H- pirazol-1-il)etan-1-ol 18 (CAS Reg. No. 214614-81-0, 336 mg, 1,757 mmol) e K2CO3 (607 mg, 4,39 mmol) em dioxano (8 mL) e água (2,000 mL). Gás nitrogênio foi borbulhado através da mistura de reação por 2 min. Em seguida, o aduzido de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (154 mg, 0,188 mmol) foi adicionado. Nitrogênio foi borbulhado por mais 1 min. O vaso de reação foi selado e seu conteúdo foi agitado a 80 °C por 5 h. A mistura de reação foi resfriada, diluída com acetato de etila e filtrada. O filtrado foi seco em Na2SO4 e concentrado. O produto cru foi purificado por coluna de sílica ISCO (40 g), eluído com 20% de MeOH em DCM, gradiente de DCM de 0 a 40%. As frações desejadas foram concentradas para produzir o composto 19 (247 mg, 0,565 mmol, 45,0% de rendimento). LCMS ESI: calculado para C23H27N7O3 = 438,2 (M+H+), encontrado 438,1(M+H+). 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ 8,00 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,53 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,32 (d, J=8,1 Hz, 2H), 5,13 (s, 2H), 4,34 (t, J=6,6 Hz, 2H), 4,26 (s, 2H), 4,14 (s, 3H), 3,92 (t, J=5,4 Hz, 2H), 1,84 - 1,65 (m, 2H), 1,59 - 1,37 (m, 2H), 1,00 (t, J=7,5 Hz, 3H).
[00136] A uma suspensão agitada do composto 19 (57 mg, 0,130 mmol) em THF (0,5 mL) adicionou-se HCl (1,0 N em água, 1 mL, 0,130 mmol). A mistura de reação foi agitada a 60 °C por 3 h, após o que a reação estava completa. No resfriamento, o precipitado sólido branco foi recolhido por filtração e enxaguado com água e seco ao ar para produzir o composto Ia-01 (37 mg, 0,086 mmol, 65,7% de rendimento). C22H25N7O3 = 424,2 (M+H+), encontrado 423,9 (M+H+). 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ 8,20 - 7,94 (m, 1H), 7,89 (br s, 1H), 7,55 (br d, J=7,7 Hz, 2H), 7,43 (br d, J=7,9 Hz, 2H), 5,05 (s, 2H), 4,55 (t, J=6,3 Hz, 2H), 4,25 (br d, J=1,8 Hz, 2H), 4,08 - 3,59 (m, 2H), 1,87 - 1,69 (m,
2H), 1,57 - 1,41 (m, 2H), 1,00 (t, J=7,4 Hz, 3H).
[00137] Uma suspensão agitada do composto Ia-01 (341 mg, 0,805 mmol) em THF (10 mL) foi tratada com cloreto de tionila (1,175 mL, 16,10 mmol) e, em seguida, agitada à temperatura ambiente por 4 h. O cloreto de tionila foi removido azeotropicamente com DCM (3X). O resíduo foi, então, purificado em uma coluna de sílica ISCO (24 g), eluído com 20% de MeOH em DCM, gradiente de DCM de 0 a 45%. As frações desejadas foram concentradas para produzir o composto Ia-07 (200 mg, 0,453 mmol, 56,2% de rendimento). LCMS ESI: calculado para C22H24ClN7O2 = 442,2 (M+H+), encontrado 442,2 (M+H+). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9,99 (br s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,53 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,30 (br d, J=8,1 Hz, 2H), 6,46 (br s, 2H), 4,85 (s, 2H), 4,51 - 4,39 (m, 2H), 4,20 - 4,10 (m, 2H), 4,02 (br t, J=5,8 Hz, 2H), 1,68 - 1,58 (m, 2H), 1,44 - 1,31 (m, 2H), 0,92 (t, J=7,4 Hz, 3H).
[00138] A uma suspensão do composto Ia-07 (87 mg, 0,1969 mmol) em DMF (5 mL) foi adicionada ciclobutanamina (0,5 mL, 5,9 mmol). A mistura de reação foi agitada a 60 °C por 18 h. Após o resfriamento, o excesso de amina foi removido com um evaporador rotativo. A mistura de reação foi diluída com DMSO (15 mL). O material insolúvel foi filtrado. Purificação por cromatografia em C18 (Accu Prep), eluindo com TFA a 0,05% em acetonitrila:TFA a 0,05% em água com gradiente de 0-40%. As frações desejadas foram concentradas em 1/3 de volume, congeladas e liofilizadas para produzir o composto Ia-04 (47 mg, 0,079 mmol, 40,1% de rendimento). LCMS ESI: calculado para C26H32N8O2 = 477,3 (M+H+), encontrado 477,2 (M+H+). 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,87 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,41 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7,28 (d, J=8,1 Hz, 2H), 4,88 (s, 2H), 4,19 (t, J=6,6 Hz, 2H), 4,13 (t, J=6,5 Hz, 2H), 3,14 (br t, J=7,7 Hz, 1H), 2,87 (t, J=6,4 Hz, 2H), 2,18 - 2,06 (m, 2H), 1,71 - 1,56 (m, 6H), 1,46 - 1,30 (m, 2H), 0,86 (t, J=7,4
Hz, 3H).
[00139] Outros compostos de acordo com a fórmula Ia foram preparados analogamente. Seus dados analíticos são fornecidos na Tabela B. Tabela B - Compostos Adicionais Ia Espectro de massa Composto Calculado (M+H+) Encontrado (M+H+) Ia-01 422,2 (M-H) 422,2 (M-H) Ia-03 435,2 435,2 Ia-05 438,2 438,2 Ia-06 492,2 492,3
[00140] Em uma ilustração de PEGilação, a esterificação mediada por DCC do composto Ia-01 com HO2C(CH2CH2O)37CH3 produz PEGuilado Exemplo 2 - Síntese de compostos de fórmula Ib
[00141] Este exemplo e a FIG. 2 referem-se à síntese de compos- tos de acordo com a fórmula Ib.
[00142] O composto 6 foi preparado a partir do composto 1 e do composto 5 (Reg. CAS 1266480-56-1) utilizando um procedimento semelhante ao descrito para o composto 3. LCMS ESI: calculado para C27H34N6O4S = 539,2 (M+H+), encontrado 539,1 (M+H+). 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,59 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,47 (s, 1H), 7,34 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,28 (s, 1H), 5,14 (s, 2H), 4,41 (s, 2H), 4,34 (t, J=6,6 Hz, 2H), 4,14 (s, 3H), 1,84 - 1,65 (m, 2H), 1,56 - 1,40 (m, 11H), 1,00 (t, J=7,4 Hz, 3H).
[00143] Uma solução agitada do composto 6 (45 mg, 0,084 mmol) em THF (1 mL) foi tratada com HCl (1,0 N em água, 1,0 mL). Após agitação a 70 °C por 5 h, a reação estava completa. A mistura de reação foi concentrada. O produto cru foi purificado em 15,5 g da coluna C18 Aq e eluído com TFA a 0,05% em acetonitrila:TFA a 0,05% em H2O (gradiente de 0-50%) para produzir o composto (Ib-01) como o sal de trifluoroacetato (31,1 mg, 0,057 mmol, 67,7% de rendimento). LCMS ESI: calculado para C27H34N6O4S = 425,2 (M+H+), encontrado 425,1 (M+H+). 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,58 (d, J=1,3 Hz, 1H), 7,49 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,45 (s, 1H), 7,32 (d, J=8,1 Hz, 2H), 4,89 (s, 2H), 4,23 (s, 2H), 4,18 (t, J=6,6 Hz, 2H), 1,71 - 1,47 (m, 2H), 1,43 - 1,16 (m, 2H), 0,85 (t, J=7,4 Hz, 3H).
[00144] O composto Ib-02 foi preparado analogamente. LCMS ESI: calculado = 426,2 (M+H+), encontrado 426,2 (M+H+). Exemplo 3 - Síntese de compostos de fórmula Ic
[00145] Este exemplo e a FIG. 3 referem-se à síntese de compos- tos de acordo com a fórmula Ic.
[00146] O composto 9 foi preparado a partir do composto 7 (preparado de acordo com WO 2011/049815 A1) e do composto 8 (Reg. CAS 1092351-92-2) utilizando um procedimento semelhante ao descrito para o composto 3. LCMS ESI: calculado para C23H32BN5O4 = 452,3 (M-H+), encontrado 452,1 (M-H+).
[00147] O composto (Ic-01) foi preparado a partir do composto 9, utilizando um procedimento semelhante ao descrito para o composto (Ib-01). LCMS ESI: calculado para C20H22N6O4 = 411,2 (M+H+), encontrado 411,2 (M+H+). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,98 - 7,79 (m, 3H), 7,43 (br d, J=8,2 Hz, 2H), 6,35 (s, 2H), 4,93 (s, 2H), 4,43 (br s, 2H), 4,15 (t, J=6,6 Hz, 2H), 1,67 - 1,49 (m, 2H), 1,42 - 1,28 (m, 2H), 0,87 (t, J=7,4 Hz, 3H). Exemplo 4 - Ensaio de Atividade Agonista de TLR7
[00148] Este exemplo descreve um método para avaliar a atividade agonista de TLR7 dos compostos descritos nesta especificação.
[00149] As células azuis dos rins embrionárias humanas projetadas
(células TLR HEK-Blue™; Invivogen) possuindo um transgene repórter de fosfatase alcalina embrionária humana secretada por TLR7 (SEAP) foram suspensas em um meio de cultura, não seletivo (DMEM com alto teor de glicose (Invitrogen), suplementado com soro fetal bovino a 10% (Sigma)). As células de TLR7 HEK-Blue™ foram adicionadas a cada cavidade de uma placa de cultura de tecido de 384 cavidades (15.000 células por cavidade) e incubadas 16-18 horas a 37 °C, CO2 a 5%. Os compostos (100 nl) foram distribuídos em cavidades contendo as células de TLR HEK-Blue™ e as células tratadas foram incubadas a 37 °C, CO2 a 5%. Após 18 h de tratamento, dez microlitros de reagente Quanti-Blue™ recém-preparado (Invivogen) foram adiciona- dos a cada cavidade, incubados por 30 min (37 °C, 5% de CO2) e os níveis de SEAP medidos usando uma leitora de placas Envision (OD = 620 nm). Os valores da concentração efetiva quase máxima (EC50; concentração do composto que induziu uma resposta a meio caminho entre a linha de base e a máxima do ensaio) foram calculados.
[00150] A FIG. 6 é um gráfico representativo mostrando os dados assim obtidos para o composto Ib-02. Exemplo 5 - Conjugação Mediada por Transglutaminase
[00151] O procedimento a seguir pode ser usado para a conjugação mediada por transglutaminase de compostos agonistas-ligantes, em que o ligante tem um grupo amina que pode atuar como um doador de amina. O anticorpo pode ser aquele que tem uma glutamina reativa à transglutaminase, por exemplo, uma com uma substituição N297A ou N297Q. A conjugação é realizada pela transglutaminase bacteriana recombinante com uma relação molar de anticorpo:enzima de 5:1. A conjugação é realizada utilizando protocolos padrão em tampão Tris 50 mM, pH 8,0, incubada durante a noite a 37 °C. O conjugado resultante é purificado em uma coluna de proteína A, pré-equilibrado com Tris 50 mM, pH 8,0. O conjugado é eluído com tampão de citrato de sódio 0,1 M, pH 3,5. As frações eluídas são neutralizadas com 1M Tris pH 9,0. O conjugado pode ser formulado em 20 mg/mL de Sorbitol, 10 mg/mL de Glicina, pH 5,0. Exemplo 6 - Ensaio de Indução de Interleucina 6
[00152] Este exemplo descreve um método para testar a indução de interleucina 6 por compostos descritos nesta especificação.
[00153] Os compostos diluídos em DMSO foram transferidos para cavidades individuais de uma placa de 384 cavidades com fundo em V transparente de Matrix Technologies utilizando a tecnologia de manipulação de líquidos acústica ECHO (25 nL por cavidade). Amostras de sangue total humanas (25 uL) foram adicionadas a cada cavidade usando um instrumento de manipulação de líquidos CyBio FeliX. A placa foi agitada em um agitador de placas por três minutos antes de incubar as misturas de reação a 37 °C por 20 h. O meio RPMI 1640 de Basel (suplementado com L-glutamina) foi, então, adicionado a cada cavidade (25 uL por cavidade) antes da liberação do plasma de cada amostra por centrifugação (450 x g, 5 min, temperatura ambiente). As amostras de plasma tratadas (3 uL) foram subsequentemente transferidas para cavidades individuais de um ProxiPlate branco, raso de 384 cavidades (Perkin Elmer) usando o instrumento de manipulação de líquidos FeliX e seus níveis de interleucina 6 foram medidos usando a tecnologia AlphaLISA, conforme descrito pelo fabricante, PerkinElmer. O software de análise de dados foi utilizado para determinar os valores de EC50 do composto em que a linha de base foi estabelecida usando valores de DMSO médios e 100% de indução estabelecida usando valores de composto de referência na concentração mais alta testada. As EC50 podem ser determinadas com software tal como Graphpad Prism™.
[00154] Aqueles versados na técnica entenderão que as condições e metodologias neste exemplo são ilustrativas e não limitativas e que suas variações ou outros métodos para conjugação são conhecidos na técnica e utilizáveis na presente invenção.
[00155] A descrição detalhada anterior da invenção inclui passa- gens que estão principalmente ou exclusivamente relacionadas a partes ou aspectos particulares da invenção. Deve ser entendido que isto é para maior clareza e conveniência, que um aspecto particular pode ser relevante em mais do que apenas a passagem na qual é divulgado e que a descrição aqui inclui todas as combinações apro- priadas de informações encontradas nas diferentes passagens. Da mesma forma, embora as várias figuras e descrições aqui contidas estejam relacionadas a formas de realização específicas da invenção, deve ser entendido que onde um aspecto específico é descrito no contexto de uma figura ou modalidade particular, tal aspecto também pode ser usado, na medida apropriada, no contexto de outra figura ou modalidade, em combinação com outro aspecto, ou na invenção em geral.
[00156] Além disso, embora a presente invenção tenha sido particularmente descrita em termos de certas modalidades preferidas, a invenção não está limitada a tais modalidades preferidas. Pelo contrário, o escopo da invenção é definido pelas reivindicações anexas.
REFERÊNCIAS
[00157] Citações completas para as seguintes referências citadas de forma abreviada pelo primeiro autor (ou inventor) e a data anterior nesta especificação são fornecidas abaixo. Cada uma destas referências é incorporada aqui por referência para todos os fins. Akinbobuyi et al., ACS 2013 69th Southwest Regional Meet- ing, Abstract SWRM-70, "Synthesis and evaluation of purine-based toll- like receptor 7 agonists and their anticorpo conjugates". Akinbobuyi et al., ACS 2015 Joint Southeastern/Southwest
Regional Meeting, Abstract 392, "Synthesis of functionalized purine analogs for antibody conjugation" [2015a]. Akinbobuyi et al., Tetrahedron Lett. 2015, 56, 458, "Facile syntheses of functionalized toll-like receptor 7 agonists" [2015b]. Akinbobuyi et al., Bioorg.
Med.
Chem.
Lett. 2016, 26, 4246, "Synthesis and immunostimulatory activity of substituted TLR7 ago- nists". Barberis et al., US 2012/0003298 A1 (2012). Beesu et al., J.
Med.
Chem. 2017, 60, 2084, "Identification of High-Potency Human TLR8 and Dual TLR7/TLR8 Agonists in Pyrim- idine-2,4-diaminas". Berghöfer et al., J.
Immunol. 2007, 178, 4072, "Natural and Synthetic TLR7 Ligands Inhibit CpG-A- and CpG-C-Oligodeoxynu- cleotide-Induced IFN-α Production". Bonfanti et al., US 2014/0323441 A1 (2015) [2015a]. Bonfanti et al., US 2015/0299221 A1 (2015) [2015b]. Carson et al., US 2013/0202629 A1 (2013). Carson et al., US 8,729,088 B2 (2014). Carson et al., US 9,050,376 B2 (2015). Carson et al., US 2016/0199499 A1 (2016). Chan et al., Bioconjugate Chem. 2009, 20, 1194, "Synthesis and Immunological Characterization of Toll-Like Receptor 7 Agonistic Conjugates". Chan et al., Bioconjugate Chem. 2011, 22, 445, "Synthesis and Characterization of PEGylated Toll Like Receptor 7 Ligands". Cortez et al., US 2017/0044168 A1 (2017). [2017a]. Cortez et al., US 2017/0121421 A1 (2017). [2017b]. Desai et al., US 9,127,006 B2 (2015). Ding et al., WO 2016/107536 A1 (2016). Ding et al., US 2017/0273983 A1 (2017) [2017a].
Ding et al., WO 2017/076346 A1 (2017) [2017b]. Gadd et al., Bioconjugate Chem. 2015, 26, 1743, "Targeted Activation of Toll-Like Receptors: Conjugation of a Toll-Like Receptor 7 Agonist to a Monoclonal Antibody Maintains Antigen Binding and Spec- ificity". Graupe et al., US 8.993.755 B2 (2015). Halcomb et al., US 9.161.934 B2 (2015). Hashimoto et al., US 2009/0118263 A1 (2009). Hirota et al., US 6.028.076 (2000). Holldack et al., US 2012/0083473 A1 (2012). Isobe et al., US 6.376.501 B1 (2002). Isobe et al., JP 2004137157 (2004). Isobe et al., J.
Med.
Chem. 2006, 49 (6), 2088, "Synthesis and Biological Evaluation of Novel 9-Substituted-8-Hidroxiadenine De- rivatives as Potent Interferon Inducers". Isobe et al., US 7.521.454 B2 (2009) [2009a]. Isobe et al., US 2009/0105212 A1 (2009) [2009b]. Isobe et al., US 2011/0028715 A1 (2011). Isobe et al., US 8.148.371 B2 (2012). Jensen et al., WO 2015/036044 A1 (2015). Kasibhatla et al., US 7.241.890 B2 (2007). Koga-Yamakawa et al., Int.
J.
Cancer 2013, 132 (3), 580, "Intratracheal and oral administration of SM-276001: A selective TLR7 agonist, leads to antitumor efficacy in primary and metastatic models of cancer". Li et al., US 9.902.730 B2 (2018). Lioux et al., US 9.295.732 B2 (2016). Lund et al., Proc.
Nat’l Acad.
Sci (USA) 2004, 101 (15), 5598, "Recognition of single-stranded RNA viruses by Toll-like receptor 7".
Maj et al., US 9.173.935 B2 (2015). McGowan et al., J.
Med.
Chem. 2017, 60, 6137, "Identifica- tion and Optimization of Pyrrolo[3,2-d]pirimidine Toll-like Receptor 7 (TLR7) Selective Agonists for the Treatment of Hepatitis B". Musmuca et al., J.
Chem.
Information & Modeling 2009, 49 (7), 1777, "Small-Molecule Interferon Inducers.
Toward the Compre- hension of the MolecularDeterminants through Ligand-Based Ap- proaches". Ogita et al., US 2007/0225303 A1 (2007). Peterson, Rachel; Honor Program Thesis, "Synthesis of Sul- fur and Amino-8-Substituted Adenine Derivatives as TLR7 Agonists", Baylor University (2014). Pryde, US 7,642,350 B2 (2010). Roethle et al., J.
Med.
Chem 2013, 56, 7324, "Identification and Optimization of Pteridinone Toll-like Receptor 7 (TLR7) Agonists for the Oral Treatment of Viral Hepatitis". Seifert, Zacharie; Master of Science Thesis, "Synthesis and Evaluation of 8-Substituted Adenine Derivatives as Toll-like Receptor 7 Agonists", Baylor University (2015). Vernejoul et al., US 2014/0141033 A1 (2014). Yu et al., PLoS One 2013, 8 (3), e56514, "Toll-Like Recep- tor 7 Agonists: Chemical Feature Based Pharmacophore Identification and Molecular Docking Studies". Zhang et al., Immunity 2016, 45, 737, "Structural Analysis Reveals that Toll-like Receptor 7 Is a Dual Receptor for Guanosine and Single-Stranded RNA". Zurawski et al., US 2012/0231023 A1 (2012).

Claims (14)

REIVINDICAÇÕES
1. Composto tendo uma estrutura de acordo com a fórmula (I) ou (II) caracterizado pelo fato de que R1 é (C1-C5 alquil)O, (C1-C2 alquil)O(CH2)2-3O, (C1-C5 al- quil)C(=O)O, (C1-C5 alquil)NH, (C1-C2 alquil)O(CH2)2-3NH, ou (C1-C5 alquil)C(=O)NH; R2 é, independentemente para cada ocorrência do mesmo, H, C1-C3 alquila, halo, O(C1-C3 alquil), CN, ou NO2; X é, independentemente para cada ocorrência do mesmo, CR2 ou N; e Ar é uma porção heteroaromática de 5 membros seleciona- da a partir de pirrolila, furanila, tiofenila, pirazolila, imidazolila, oxazoli- la, isoxazolila, 1,2,3-triazolila, 1,2,4-triazolila, tetrazolila, 1,2,4-oxadia- zolila, 1,2,4-tiadiazolila, 1,3,4-oxadiazolila, 1,3,4-tiadiazolila, 1,2,5-oxa- diazolila, 1,2,5-tiadiazolila, 1,2,3,4-oxatiazolila, e 1,2,3,4-tiatriazolila.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, tendo uma estrutura representada pela fórmula (I’) caracterizado pelo fato de que cada X’ é independentemente CH ou N e Ar e R1 são como definidos na reivindicação 1.
3. Composto de acordo com a reivindicação 1, tendo uma estrutura representada pela fórmula (II’) caracterizado pelo fato de que cada X’ é independentemente CH ou N e Ar e R1 são como definidos na reivindicação 1.
4. Composto de acordo com a reivindicação 1, tendo uma estrutura representada pela fórmula (Ia), (Ib), ou (Ic) caracterizado pelo fato de que R1 é como definido na reivindicação 1, cada X’ é independentemente CH ou N, e R4 é H, C1-C3 alquila, C3-C3 cicloalquil (CH2)1-3R3, (CH2)1-3C(=O)(CH2)0-3R3, onde R3 é halo, OH, CN, NH2, NH(C1-C5 alquil), N(C1-C5 alquil)2, NH(C3-C6 cicloalquil), NH(C4-C8 bicicloalquil), NH(C6-C10 espirocicloalquil), N(C3-C6 cicloal- quil)2, NH(CH2)1-3(aril), N((CH2)1-3(aril))2, uma porção amina cíclica ten- do a estrutura , uma porção aromática ou heteroaromática de 6 membros ou uma porção heteroaromática de 5 membros; em que uma alquila, cicloalquila, bicicloalquila, espirocicloalquila, ami- na cíclica, porção aromática ou heteroaromática de 6 membros, ou he- teroaromática de 5 membros é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir de OH, halo, CN, (C1-C3 al- quil), O(C1-C3 alquil), C(=O)(Me), SO2(C1-C3 alquil), C(=O)(Et), NH2, NH(Me), N(Me)2, NH(Et), N(Et)2, e N(C1-C3 alquil)2; e uma cicloalquila, bicicloalquila, espirocicloalquila, ou uma porção amina cíclica pode ter um grupo CH2 substituído por O, S, NH, N(C1-C3 alquil), ou N(Boc).
5. Composto de acordo com a reivindicação 4, caracteriza- do pelo fato de que possui uma estrutura representada pela fórmula (Ia): NH2 (Ia)
N N
OH R1 N N X' X'
N N R4 .
6. Composto de acordo com a reivindicação 4, caracteriza- do pelo fato de que possui uma estrutura representada pela fórmula (Ib): .
7. Composto de acordo com a reivindicação 4, caracteriza- do pelo fato de que possui uma estrutura representada pela fórmula (Ic): .
8. Composto de acordo com a reivindicação 4, caracteriza- do pelo fato de que R4 é H2 N
O , , , ,
HN H
N
N O
O NH , , ,o .
9. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de que é conjugado para um anticorpo.
10. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri- zado pelo fato de que é covalentemente ligado a uma porção po- li(etileno glicol) entre 2 kDa e 40 kDa no tamanho.
11. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri- zado pelo fato de que é para tratar uma condição passível de trata- mento pela ativação do Receptor do tipo Toll 7.
12. Composto de acordo com a reivindicação 4, caracteri- zado pelo fato de que é conjugado para um anticorpo.
13. Composto de acordo com a reivindicação 4, caracteri- zado pelo fato de que é covalentemente ligado a uma porção po- li(etileno glicol) entre 2 kDa e 40 kDa no tamanho.
14. Composto de acordo com a reivindicação 4, caracteri- zado pelo fato de que é para tratar uma condição passível de trata- mento pela ativação do Receptor do tipo Toll 7.
BR112020002953-0A 2017-08-16 2018-08-16 derivados de 6-amino-7,9-di-hidro-8h-purin-8-ona como agonistas do receptor imunoestimulante do tipo toll 7 (tlr7) BR112020002953A2 (pt)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762546211P 2017-08-16 2017-08-16
US62/546,211 2017-08-16
PCT/US2018/000245 WO2019035970A1 (en) 2017-08-16 2018-08-16 6-AMINO-7,9-DIHYDRO-8H-PURIN-8-ONE DERIVATIVES FOR USE AS TOLL 7 RECEPTOR IMMUNOSTIMULATING AGONISTS (TLR7)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BR112020002953A2 true BR112020002953A2 (pt) 2020-08-11

Family

ID=63528884

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112020002953-0A BR112020002953A2 (pt) 2017-08-16 2018-08-16 derivados de 6-amino-7,9-di-hidro-8h-purin-8-ona como agonistas do receptor imunoestimulante do tipo toll 7 (tlr7)

Country Status (17)

Country Link
US (3) US10487084B2 (pt)
EP (1) EP3668870B1 (pt)
JP (1) JP7228571B2 (pt)
KR (2) KR102628855B1 (pt)
CN (1) CN111295385A (pt)
AR (1) AR112593A1 (pt)
AU (1) AU2018317859A1 (pt)
BR (1) BR112020002953A2 (pt)
CA (1) CA3072754A1 (pt)
CO (1) CO2020001502A2 (pt)
ES (1) ES2904684T3 (pt)
IL (1) IL272632A (pt)
MX (1) MX2020001475A (pt)
PE (1) PE20200701A1 (pt)
SG (1) SG11202001252PA (pt)
TW (1) TW201920177A (pt)
WO (1) WO2019035970A1 (pt)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109843327B (zh) 2016-07-07 2022-05-13 小利兰·斯坦福大学托管委员会 抗体佐剂缀合物
US10487084B2 (en) * 2017-08-16 2019-11-26 Bristol-Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having a heterobiaryl moiety, conjugates thereof, and methods and uses therefor
WO2019209811A1 (en) 2018-04-24 2019-10-31 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic toll-like receptor 7 (tlr7) agonists
US11554120B2 (en) 2018-08-03 2023-01-17 Bristol-Myers Squibb Company 1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine compounds as toll-like receptor 7 (TLR7) agonists and methods and uses therefor
ES2943474T3 (es) 2018-11-30 2023-06-13 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpo que comprende una extensión carboxiterminal de una cadena ligera que contiene glutamina, conjugados del mismo, y métodos y usos
WO2020123425A2 (en) 2018-12-12 2020-06-18 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies modified for transglutaminase conjugation, conjugates thereof, and methods and uses
MX2021009496A (es) 2019-02-08 2021-09-08 Progeneer Inc Complejo de colesterol-agonista del receptor 7 u 8 tipo larga distancia, y uso del mismo.
KR20220004634A (ko) 2019-03-15 2022-01-11 볼트 바이오테라퓨틱스 인코퍼레이티드 Her2를 표적으로 하는 면역접합체
MX2021012305A (es) 2019-04-12 2021-11-12 Riboscience Llc Derivados de heteroarilos biciclicos como inhibidores de ectonucleotido pirofosfatasa fosfodiesterasa 1.
US20230127326A1 (en) * 2020-01-27 2023-04-27 Bristol-Myers Squibb Company C3-SUBSTITUTED 1H-PYRAZOLO[4,3-d]PYRIMIDINE COMPOUNDS AS TOLL-LIKE RECEPTOR 7 (TLR7) AGONISTS
JP2023512207A (ja) * 2020-01-27 2023-03-24 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー トール様受容体７（ＴＬＲ７）アゴニストとしての１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｄ］ピリミジン化合物
EP4097101A1 (en) * 2020-01-27 2022-12-07 Bristol-Myers Squibb Company 1h-pyrazolo[4,3-d]pyrimidine compounds as toll-like receptor 7 (tlr7) agonists
EP4097108A1 (en) 2020-01-27 2022-12-07 Bristol-Myers Squibb Company 1H-PYRAZOLO[4,3-d]PYRIMIDINE COMPOUNDS AS TOLL-LIKE RECEPTOR 7 (TLR7) AGONISTS
CN115210236A (zh) * 2020-01-27 2022-10-18 百时美施贵宝公司 作为Toll样受体7(TLR7)激动剂的1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶化合物
KR20220132593A (ko) * 2020-01-27 2022-09-30 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 톨-유사 수용체 7 (TLR7) 효능제로서의 1H-피라졸로[4,3-d]피리미딘 화합물
WO2021154664A1 (en) 2020-01-27 2021-08-05 Bristol-Myers Squibb Company 1H-PYRAZOLO[4,3-d]PYRIMIDINE COMPOUNDS AS TOLL-LIKE RECEPTOR 7 (TLR7) AGONISTS
CN115210235A (zh) * 2020-01-27 2022-10-18 百时美施贵宝公司 作为Toll样受体7(TLR7)激动剂的1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶化合物
CN115643805A (zh) 2020-01-27 2023-01-24 百时美施贵宝公司 作为Toll样受体7(TLR7)激动剂的1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶化合物
JP2023516372A (ja) 2020-03-02 2023-04-19 プロジェニア インコーポレイテッド 病原菌外壁成分基盤の生病原体模倣ナノ粒子及びその製造方法
EP4194010A1 (en) 2020-08-04 2023-06-14 Progeneer Inc. Conjugate of functional drug and toll-like receptor 7 or 8 agonist of which active site is temporarily inactivated and use thereof
EP4194008A1 (en) 2020-08-04 2023-06-14 Progeneer Inc. Kinetically acting adjuvant ensemble
CN116322751A (zh) 2020-08-04 2023-06-23 蛋白科技先锋 包含能够动力学控制的佐剂的mRNA疫苗
WO2024095964A1 (ja) * 2022-10-31 2024-05-10 アステラス製薬株式会社 Ｔｏｌｌ様受容体７／８デュアルアゴニスト化合物を含む抗体薬物複合体

Family Cites Families (86)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1981001145A1 (en) 1979-10-18 1981-04-30 Univ Illinois Hydrolytic enzyme-activatible pro-drugs
US4698420A (en) 1985-02-25 1987-10-06 Xoma Corporation Antibody hybrid molecules and process for their preparation
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
JP4667543B2 (ja) 1996-07-03 2011-04-13 大日本住友製薬株式会社 新規プリン誘導体
TW572758B (en) 1997-12-22 2004-01-21 Sumitomo Pharma Type 2 helper T cell-selective immune response inhibitors comprising purine derivatives
US7425541B2 (en) 1998-12-11 2008-09-16 Medarex, Inc. Enzyme-cleavable prodrug compounds
KR100942863B1 (ko) 1999-08-24 2010-02-17 메다렉스, 인코포레이티드 인간 씨티엘에이-4 항체 및 그의 용도
US7402556B2 (en) 2000-08-24 2008-07-22 Medarex, Inc. Prodrugs activated by plasmin and their use in cancer chemotherapy
ATE404561T1 (de) 2001-04-17 2008-08-15 Dainippon Sumitomo Pharma Co Neue adeninderivate
US6989452B2 (en) 2001-05-31 2006-01-24 Medarex, Inc. Disulfide prodrugs and linkers and stabilizers useful therefor
ATE504315T1 (de) 2001-06-11 2011-04-15 Medarex Inc Methode für die ausarbeitung von cd10-aktivierten prodrug-verbindungen
US7091186B2 (en) 2001-09-24 2006-08-15 Seattle Genetics, Inc. p-Amidobenzylethers in drug delivery agents
JP4397691B2 (ja) 2001-10-30 2010-01-13 コンフォーマ・セラピューティクス・コーポレイション Ｈｓｐ９０阻害活性を有するプリン類似体
EP1471938A4 (en) 2002-01-09 2008-03-05 Medarex Inc HUMAN MONOCLONAL ANTIBODIES AGAINST CD30
NZ539064A (en) 2002-09-27 2007-09-28 Dainippon Sumitomo Pharma Co Novel adenine compound and use thereof
JP2004137157A (ja) 2002-10-16 2004-05-13 Sumitomo Pharmaceut Co Ltd 新規アデニン誘導体を有効成分として含有する医薬
ES2340494T3 (es) 2003-04-15 2010-06-04 Glaxosmithkline Llc Mutantes de sustitucion de il-18 humana y sus conjugados.
RU2377252C2 (ru) 2003-07-22 2009-12-27 Шеринг Акциенгезельшафт Rg1 антитела и их применение
WO2005051976A2 (en) 2003-11-20 2005-06-09 Ansata Therapeutics, Inc. Protein and peptide ligation processes and one-step purification processes
PL1691837T3 (pl) 2003-12-10 2012-11-30 Squibb & Sons Llc IP-10 przeciwciała i ich zastosowanie
US7375078B2 (en) 2004-02-23 2008-05-20 Genentech, Inc. Heterocyclic self-immolative linkers and conjugates
WO2005092925A2 (en) 2004-03-24 2005-10-06 Xencor, Inc. Immunoglobulin variants outside the fc region
WO2005092892A1 (ja) 2004-03-26 2005-10-06 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. ８−オキソアデニン化合物
NZ550934A (en) 2004-05-19 2010-05-28 Medarex Inc Chemical linkers and conjugates thereof
US7691962B2 (en) 2004-05-19 2010-04-06 Medarex, Inc. Chemical linkers and conjugates thereof
AU2005286607B2 (en) 2004-09-23 2011-01-27 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
BRPI0607796A2 (pt) 2005-02-18 2009-06-13 Medarex Inc composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, processo para preparação e uso do mesmo, e, composição farmacêutica
NZ556661A (en) 2005-02-18 2010-10-29 Medarex Inc Human monoclonal antibodies to prostate specific membrance antigen (PSMA)
US7714016B2 (en) 2005-04-08 2010-05-11 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates
EA200702235A1 (ru) 2005-05-04 2008-04-28 Пфайзер Лимитед Производные 2-амидо-6-амино-8-оксопурина в качестве модуляторов toll-подобных рецепторов для лечения рака и вирусных инфекций, таких как гепатит с
NZ563193A (en) 2005-05-09 2010-05-28 Ono Pharmaceutical Co Human monoclonal antibodies to programmed death 1(PD-1) and methods for treating cancer using anti-PD-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
US8302735B2 (en) 2005-06-29 2012-11-06 Sky Climber, Llc Self-erecting suspension platform system
SI1907424T1 (sl) 2005-07-01 2015-12-31 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Humana monoklonska protitelesa proti programiranem smrtnem ligandu 1 (PD-L1)
HUE035853T2 (en) 2005-07-18 2018-05-28 Seattle Genetics Inc Beta-glucuronide-linker-drug conjugates
WO2007034917A1 (ja) 2005-09-22 2007-03-29 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. 新規なアデニン化合物
JPWO2007034817A1 (ja) 2005-09-22 2009-03-26 大日本住友製薬株式会社 新規アデニン化合物
AU2006294663B2 (en) 2005-09-26 2012-03-22 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to CD70
US20080279868A1 (en) 2005-09-26 2008-11-13 Medarex, Inc. Antibody-Drug Conjugates and Methods of Use
ES2375843T3 (es) 2005-10-26 2012-03-06 Medarex, Inc. Procedimientos y compuestos para la preparación de an�?logos de cc-1065.
WO2007059404A2 (en) 2005-11-10 2007-05-24 Medarex, Inc. Duocarmycin derivatives as novel cytotoxic compounds and conjugates
NZ568015A (en) 2005-12-08 2012-03-30 Medarex Inc Human monoclonal antibodies to O8E
NZ594466A (en) 2005-12-08 2012-08-31 Medarex Inc Human monoclonal antibodies to protein tyrosine kinase 7 (PTK7) and methods for using anti-PTK7 antibodies
EP1987030B1 (en) * 2006-02-17 2011-11-09 Pfizer Limited 3 -deazapurine derivatives as tlr7 modulators
US8715958B2 (en) 2006-06-29 2014-05-06 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Cell-free synthesis of proteins containing unnatural amino acids
WO2008020075A1 (en) 2006-08-18 2008-02-21 Novo Nordisk Health Care Ag Transglutaminase variants with improved specificity
JP2010502221A (ja) 2006-09-08 2010-01-28 アンブルックス，インコーポレイテッド 脊椎動物細胞による非天然アミノ酸の部位特異的組み込み
EP2486941B1 (en) 2006-10-02 2017-03-15 E. R. Squibb & Sons, L.L.C. Human antibodies that bind CXCR4 and uses thereof
JP5398538B2 (ja) 2006-12-01 2014-01-29 メダレックス・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー Ｃｄ２２に結合するヒト抗体およびその使用
UY30776A1 (es) 2006-12-21 2008-07-03 Medarex Inc Anticuerpos cd44
TWI412367B (zh) 2006-12-28 2013-10-21 Medarex Llc 化學鏈接劑與可裂解基質以及其之綴合物
DK2510946T3 (en) 2007-02-07 2015-11-02 Univ California Conjugates of synthetic fluorescent agonists and their applications
US8664407B2 (en) 2007-02-21 2014-03-04 Medarex, LLC Chemical linkers with single amino acids and conjugates thereof
MX2009008877A (es) 2007-02-22 2009-08-28 Novo Nordisk Healthcare Ag Variantes de transglutaminasa con especificidad mejorada.
PE20081887A1 (es) * 2007-03-20 2009-01-16 Dainippon Sumitomo Pharma Co Nuevo compuesto de adenina
US7968544B2 (en) 2007-06-29 2011-06-28 Gilead Sciences, Inc. Modulators of toll-like receptor 7
EP2185188B1 (en) 2007-08-22 2014-08-06 Medarex, L.L.C. Site-specific attachment of drugs or other agents to engineered antibodies with c-terminal extensions
PL2195017T3 (pl) 2007-10-01 2015-03-31 Bristol Myers Squibb Co Ludzkie antyciała, które wiążą mezotelinę i ich zastosowania
TW201639852A (zh) 2008-12-09 2016-11-16 吉李德科學股份有限公司 用於製備可用作類鐸受體調節劑之化合物的中間體化合物
WO2010087994A2 (en) 2009-01-30 2010-08-05 Whitehead Institute For Biomedical Research Methods for ligation and uses thereof
CN102439011B (zh) 2009-02-11 2016-05-04 加利福尼亚大学校务委员会 Toll样受体调节剂和疾病的治疗
US8962652B2 (en) * 2009-10-22 2015-02-24 Gilead Sciences, Inc. Derivatives of purine or deazapurine useful for the treatment of (inter alia) viral infections
NZ603155A (en) 2010-04-30 2014-06-27 Telormedix Sa Phospholipid drug analogs
EP2563366A4 (en) 2010-04-30 2013-11-20 Univ California USE OF PHOSPHOLIPID CONJUGATES FROM SYNTHETIC TLR7 AGONISTS
US20120003298A1 (en) 2010-04-30 2012-01-05 Alcide Barberis Methods for inducing an immune response
US20120083473A1 (en) 2010-09-21 2012-04-05 Johanna Holldack Treatment of conditions by toll-like receptor modulators
CA2813411C (en) 2010-11-05 2016-08-02 Rinat Neuroscience Corporation Engineered polypeptide conjugates and methods for making thereof using transglutaminase
AR085633A1 (es) 2011-03-08 2013-10-16 Baylor Res Inst Coadyuvantes basados en anticuerpos que son dirigidos directamente a las celulas presentadoras en antigenos
CN103702687A (zh) 2011-07-29 2014-04-02 西莱克塔生物科技公司 产生体液和细胞毒性t淋巴细胞（ctl）免疫应答的合成纳米载体
JP6132289B2 (ja) * 2011-09-08 2017-05-24 エルジー・ケム・リミテッド バッテリーパックの火災鎭圧装置
SG11201401244TA (en) 2011-11-09 2014-09-26 Janssen R & D Ireland Purine derivatives for the treatment of viral infections
PL2872515T3 (pl) 2012-07-13 2017-05-31 Janssen Sciences Ireland Uc Puryny makrocykliczne do leczenia infekcji wirusowych
EP2732825B1 (en) 2012-11-19 2015-07-01 Invivogen Conjugates of a TLR7 and/or TLR8 agonist and a TLR2 agonist
SG11201506243XA (en) 2013-02-14 2015-09-29 Bristol Myers Squibb Co Tubulysin compounds, methods of making and use
US9295732B2 (en) 2013-02-22 2016-03-29 Invivogen Conjugated TLR7 and/or TLR8 and TLR2 polycationic agonists
EP3033089A2 (en) 2013-08-16 2016-06-22 The Regents of The University of California Uses of phospholipid conjugates of synthetic tlr7 agonists
WO2015036044A1 (en) 2013-09-13 2015-03-19 Telormedix Sa Cationic lipid vehicles for delivery of tlr7 agonists for specific targeting of human cd14+ monocytes in whole blood
CR20160512A (es) 2014-05-01 2016-12-21 Novartis Ag Compuestos y composiciones como agonistas del receptor tipo toll 7
CN106459058B (zh) 2014-05-01 2019-07-05 诺华股份有限公司 作为toll-样受体7激动剂的化合物和组合物
EP3190113B1 (en) 2014-08-15 2021-05-19 Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co., Ltd. Pyrrolopyrimidine compounds used as tlr7 agonist
CN105732635A (zh) 2014-12-29 2016-07-06 南京明德新药研发股份有限公司 一类Toll样受体7激动剂
JP2018510864A (ja) 2015-03-10 2018-04-19 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ トランスグルタミナーゼによって結合可能な抗体およびそれによって製造される結合体
CN108472386A (zh) 2015-10-02 2018-08-31 百时美施贵宝公司 用于缀合抗体的转谷氨酰胺酶变体
MA44334A (fr) 2015-10-29 2018-09-05 Novartis Ag Conjugués d'anticorps comprenant un agoniste du récepteur de type toll
EP3381918B1 (en) 2015-11-05 2020-09-16 Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co., Ltd. 7-(thiazol-5-yl) pyrrolopyrimidine compound as tlr7 agonist
WO2017100557A1 (en) 2015-12-11 2017-06-15 Graphic Packaging International, Inc. Container with absorption features
US10487084B2 (en) * 2017-08-16 2019-11-26 Bristol-Myers Squibb Company Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists having a heterobiaryl moiety, conjugates thereof, and methods and uses therefor

Also Published As

Publication number Publication date
EP3668870A1 (en) 2020-06-24
PE20200701A1 (es) 2020-06-23
SG11202001252PA (en) 2020-03-30
US10711003B2 (en) 2020-07-14
KR20200041914A (ko) 2020-04-22
TW201920177A (zh) 2019-06-01
JP7228571B2 (ja) 2023-02-24
EP3668870B1 (en) 2021-12-08
JP2020531468A (ja) 2020-11-05
CA3072754A1 (en) 2019-02-21
US10487084B2 (en) 2019-11-26
IL272632A (en) 2020-03-31
ES2904684T3 (es) 2022-04-05
WO2019035970A1 (en) 2019-02-21
CN111295385A (zh) 2020-06-16
US20190055246A1 (en) 2019-02-21
CO2020001502A2 (es) 2020-02-28
AR112593A1 (es) 2019-11-13
KR102628855B1 (ko) 2024-01-25
US20200048254A1 (en) 2020-02-13
US10927114B2 (en) 2021-02-23
KR20240015726A (ko) 2024-02-05
US20200317672A1 (en) 2020-10-08
MX2020001475A (es) 2020-03-20
AU2018317859A1 (en) 2020-04-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2904684T3 (es) Derivados de 6-amino-7,9-dihidro-8H-purin-8-ona como agonistas del receptor tipo toll 7 (TLR7) inmunoestimulantes
JP7474820B2 (ja) 免疫刺激因子トル様受容体７（ｔｌｒ７）アゴニストとしての、６－アミノ－７，９－ジヒドロ－８ｈ－プリン－８－オン誘導体
ES2887253T3 (es) Derivados de 6-amino-7,9-dihidro-8h-purin-8-ona como agonistas inmunoestimulantes del receptor 7 tipo toll (tlr7)
ES2905842T3 (es) Derivados de 6-amino-7,9-dihidro-8h-purin-8-ona como agonistas del receptor tipo Toll 7 (TLR7) como inmunoestimulantes
ES2895369T3 (es) Agonistas del receptor tipo toll 7 (TLR7) que tienen un resto tricíclico, conjugados de estos y métodos y usos de estos

Legal Events

Date Code Title Description
B08F Application dismissed because of non-payment of annual fees [chapter 8.6 patent gazette]

Free format text: REFERENTE A 3A ANUIDADE.

B350 Update of information on the portal [chapter 15.35 patent gazette]
B08K Patent lapsed as no evidence of payment of the annual fee has been furnished to inpi [chapter 8.11 patent gazette]

Free format text: EM VIRTUDE DO ARQUIVAMENTO PUBLICADO NA RPI 2650 DE 19-10-2021 E CONSIDERANDO AUSENCIA DE MANIFESTACAO DENTRO DOS PRAZOS LEGAIS, INFORMO QUE CABE SER MANTIDO O ARQUIVAMENTO DO PEDIDO DE PATENTE, CONFORME O DISPOSTO NO ARTIGO 12, DA RESOLUCAO 113/2013.