BR112019027924A2 - sal de n-(2,6-dietilfenil)-8-({4-[4-(dimetilamino) piperidin-1-il]-2-metóxi fenil}amino)-1-metil-4,5-di-hidro-1h-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida, sua preparação, e formulações contendo o mesmo - Google Patents

Abstract

A presente invenção refere-se a um fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-({4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-il]-2-metóxi fenil} amino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida de fórmula (II): Medicamentos

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "SAL DE N-(2,6-DIETILFENIL)-8-((4-[4-(DIMETILAMINO) — PIPERIDIN-1-1IL]-2- METÓXI FENILYAMINO)-1-METIL-4,5-DI-HIDRO-1H-PIRAZOLO[4,3- hIQUINAZOLINA-3-CARBOXAMIDA, SUA PREPARAÇÃO, E FOR- MULAÇÕES CONTENDO O MESMO".

[0001] A presente invenção refere-se a um sal de N-(2,6-dietilfe- nil)-8-(f4-[4-(dimetil amino)piperidin-1-il]-2-metóxi fenilkamino)-1-metil- 4,5-di-hidro-1 H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida de fórmula (1): CH; Ni | o > O v “CO dl H OD He CH;

O H e Den ; ; a seu processo de preparação e também a composições farmacêuticas contendo o mesmo.

[0002] A N-(26-dietilfenil)-8-(f4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-i1]-2- metóxi fenilkamino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina- 3-carboxamida tem propriedades farmacológicas muito valiosas no campo da oncologia. De fato, foi demonstrado que a N-(2,6-dietilfenil)- 8-((4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-il]-2-metóxi fenilkamino)-1-metil-4,5- di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida tem a capacida- de de inibir a quinase do MPS1 (Fuso Monopolar 1), também conheci-

da como TTK (Tirosina e Serina / Treonina quinase). Esta capacidade confere à molécula benefício terapêutico no tratamento de vários e di- versos cânceres, distúrbios proliferativos celulares, infecções virais, distúrbios autoimunes e neurodegenerativos. Entre os cânceres previs- tos para tratamento podem ser mencionados, sem implicar qualquer limitação, carcinoma tal como carcinoma de bexiga, de mama, de có- lon, renal, de fígado, de pulmão, incluindo câncer de pulmão de células pequenas, de esôfago, de vesícula biliar, de ovário, de pâncreas, de estômago, de colo uterino, de tiroide, de próstata, e de pele, incluindo carcinoma de células escamosas; tumores hematopoiéticos da linha- gem linfoide incluindo leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfoblástica aguda, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, linfoma de células pilosas e linfoma de Burkett; tumores hematopoiéticos da linhagem mieloide, incluindo leucemias mieloides aguda e crônica, síndrome mielodisplásica e leu- cemia promielocítica; tumores de origem mesenquimal, incluindo fi- brossarcoma e rabdomiossarcoma; tumores do sistema nervoso cen- tral e periférico, incluindo astrocitoma neuroblastoma, glioma e schwannomas; outros tumores, incluindo melanoma, seminoma, tera- tocarcinoma, osteossarcoma, xeroderma pigmentoso, ceratoxantoma, câncer folicular da tireoide e sarcoma de Kaposi mesotelioma, tumores altamente aneuploides e tumores os quais superexpressam compo- nentes do ponto de controle mitótico como MPS1, MAD2, MAD1, BUB1, BUBR1, BUB3 e outros.

[0003] Entre o distúrbio proliferativo previsto para tratamento pode ser mencionado, sem implicar qualquer limitação, hiperplasia benigna de próstata, polipose adenomatosa familiar, neurofibromatose, psoría- se, proliferação de células lisas vasculares associada com ateroscle- rose, fibrose pulmonar, artrite, glomerulonefrite e estenose pós-cirúr- gica e restenose.

[0004] A preparação e o uso terapêutico de N-(2,6-dietilfenil)-8-((4- [4-(dimetil amino)piperidin-1-il)--2-metóxi — fenilamino)-1-metil-4,5-di- hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida foram descritos, por exemplo, na especificação de patente europeia No. EP2303891, cujo conteúdo é incorporado por meio de referência.

[0005] Em vista do valor farmacêutico deste composto, é importan- te ser capaz de obter o composto ativo em excelentes rendimentos, com alta pureza e com excelente reprodutibilidade. Além disso, levan- do em conta o modo de administração intravenosa, também é crucial ter propriedades de solubilidade muito boas. Rapidamente se desco- briu que a base descrita na arte anterior apresentou problemas de pu- rificação, resultando em pureza não ótima, e, além disso, apresentou baixa solubilidade. Depois de numerosos estudos de pesquisa, foi possível identificar um novo sal combinando várias vantagens, especi- almente com relação à purificação, à reprodutibilidade do processo para obtenção do mesmo e ao rendimento, mas também inesperada- mente tendo a vantagem de muito significativamente melhorar a solu- bilidade do composto ativo. Além do mais, embora seja muito mais hi- drossolúvel, este novo sal não apresenta maior higroscopicidade do que a base livre. Por conseguinte, este novo sal tem todas as qualida- des essenciais para seu uso como um medicamento, tanto do ponto de vista físico-químico quanto farmacocinético.

[0006] Por conseguinte, a presente invenção se refere a um novo sal de N-(2,6-dietilfenil)-8-(f4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-il]-2-metóxi fe- nily amino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carbo- xamida, mais especialmente o fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-((4-[4-(di- metilamino)piperidin-1-i]-2-metóxi fenillamino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H- pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida de fórmula (11):

CH; NA | o

AS O o Vo / N () He mel a

T O no on o He en,

[0007] Este sal tem as seguintes vantagens: - um processo simples e reprodutível para obtenção do mesmo com excelente rendimento; - uma alta pureza química, e uma baixa higroscopicidade; - uma solubilidade aumentada tanto em água quanto em soro fisiológico, tornando o mesmo de grande interesse para adminis- tração intravenosa.

[0008] A invenção também se refere a um processo para obtenção de fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-((4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-il]-2- metóxi fenilkamino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina- 3-carboxamida.

[0009] Por exemplo, pode ser iniciado a partir do material de parti- da 8-[(4-bromo-2-metoxi fenil)>amino]-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo [4,3-h]quinazolina-3-carboxilato de etila, conforme obtido na patente europeia No. EP 2303891, o qual é reagido com 2,6-dietilanilina em presença de uma base forte de modo a proporcionar 8-[(4-bromo-2- metóxi * fenil)amino]-N-(2,6-dietilfenil)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo [4,3-h]quinazolina-3-carboxamida, a qual é em seguida reagida com N, N-dimetilpiperidin-4-amina para produzir o composto de fórmula (1)

que é em seguida misturado com 1 a 2 equivalentes de uma solução de H3PO, para dar o fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-((4-[4-(dimetilami- no) piperidin-1-il]-2-metóxi fenilamino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pira- zolo[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida de fórmula (Il).

[00010] O composto de fórmula (Il) de acordo com a invenção tem uma boa estabilidade ao longo do tempo sob condições desnaturantes (40ºC / 75% de Umidade Relativa (RH)): t 1 mês 40ºC / 75%

O RH Garrafa aberta Sal de fosfato de fórmula (11) , 99,5 99,4 Pureza química em %

[00011] Foi estabelecido que o novo sal da invenção também tinha propriedades de solubilidade aprimoradas: - em um teste preliminar, formação de sal in situ a partir da base amor- fa em temperatura ambiente indicou que o sal de fosfato tinha a capa- cidade de melhorar a solubilidade no mínimo 25 vezes mais do que o sal de cloridreto e no mínimo 24.000 vezes mais do que a base livre: concentração da solução alvo em água (mg/ml co- Composto . (mg/ml como | (mg/ml como mo base livre) base livre) base livre) - investigações adicionais com a forma cristalina | do sal de fosfato de fórmula (II) indicaram uma solubilidade em temperatura am- biente de no mínimo 130 mg/ml expressa como base livre, tanto em água quanto em NaCl a 0,9%: Composto Meio o ao fossem jose base livre) base livre) base livre) 0,9%

[00012] O sal de fosfato foi identificado durante a triagem do sal como melhorando significativamente a solubilidade da substância do fármaco, ao mesmo tempo que tendo uma baixa propensão para hi- groscopicidade, conforme demonstrado por análise por Sorção Dinâ- mica de Vapor abaixo: o EEE água a 30% de | a 60% de umidade | a 90% de umidade umidade relativa | relativa relativa

[00013] Em uma alternativa vantajosa, a última etapa do processo usado para obter o composto de fórmula (II) pode ser realizada em um solvente orgânico, e mais especificamente solvente polar, tal como, por exemplo, THF (tetra-hidrofurano), EtOH, MeOH, (1- ou 2-) propa- nol, (1- ou 2-) butanol, terc-butanol, 2-metoxietanol, dioxana, acetato de etila, acetato de isopropila, acetonitrilo, acetona, MTBE (éter terc- butílico de metila), MIBK (metil isobutil cetona), DMSO (dimetil sulfóxi- do) e misturas dos mesmos.

[00014] Neste caso, o composto de fórmula (II) obtido é caracteri- zado pela forma polimórfica denominada forma |.

[00015] Esta nova forma | é caracterizada pelos seguintes ângulos de Bragg 2 teta (expressos em º+0,2) obtidos a partir do difractograma do pó por raios X: 2,76, 8,10, 10,79, 13,49, 16,13, 17,37, 17,62, 19,77, 21,94, 24,18, 24,66.

[00016] Em outra alternativa vantajosa, a última etapa do processo usado para obter o composto de fórmula (II) é realizada em água le- vando a uma nova forma polimórfica hidratada denominada forma |l.

[00017] Esta nova forma |l é caracterizada pelos seguintes ângulos de Bragg 2 teta (expressos em *+0,2) obtidos a partir do difractograma do pó por raios X: 9,43, 9,86, 12,23, 13,70, 14,81, 18,01, 19,78, 20,73, 24,55, 24,82, 26,81.

[00018] A invenção também se refere a composições farmacêuticas compreendendo como ingrediente ativo o composto de fórmula (II) de acordo com a invenção, junto com um ou mais excipientes inertes e não tóxicos, apropriados. Entre as composições farmacêuticas de acordo com a invenção, podem ser mencionadas mais especialmente as composições farmacêuticas que são adequadas para administração oral, parenteral (intravenosa ou subcutânea) ou nasal, comprimidos ou drágeas, grânulos, comprimidos sublinguais, cápsulas, pastilhas, su- positórios, cremes, pomadas, géis dérmicos, preparações injetáveis, suspensões potáveis e gomas de mascar.

[00019] As formas farmacêuticas compreendendo o composto de fórmula (Il) de acordo com a invenção vão ser usadas no tratamento de cânceres, distúrbios proliferativos celulares, infecções virais, distúr- bios autoimunes e neurodegenerativos. Entre os cânceres previstos para tratamento podem ser mencionados, sem implicar qualquer limi- tação, carcinoma tal como carcinoma de bexiga, de mama, de cólon, renal, de fígado, de pulmão, incluindo câncer de pulmão de células pequenas, de esôfago, de vesícula biliar, de ovário, de pâncreas, de estômago, de colo uterino, de tiroide, de próstata, e de pele, incluindo carcinoma de células escamosas; tumores hematopoiéticos da linha- gem linfoide incluindo leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfoblástica aguda, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, linfoma de células pilosas e linfoma de Burkett; tumores hematopoiéticos da linhagem mieloide, incluindo leucemias mieloides aguda e crônica, síndrome mielodisplásica e leu- cemia promielocítica; tumores de origem mesenquimal, incluindo fi- brossarcoma e rabdomiossarcoma; tumores do sistema nervoso cen- tral e periférico, incluindo astrocitoma neuroblastoma, glioma e schwannomas; outros tumores, incluindo melanoma, seminoma, tera- tocarcinoma, osteossarcoma, xeroderma pigmentoso, ceratoxantoma, câncer folicular da tireoide e sarcoma de Kaposi, mesotelioma, tumo- res altamente aneuploides e tumores os quais superexpressam com- ponentes do ponto de controle mitótico como MPS1, MAD2, MAD1, BUB1, BUBR1, BUB3 e outros.

[00020] Entre o distúrbio proliferativo previsto para tratamento pode ser mencionado, sem implicar qualquer limitação, hiperplasia benigna de próstata, polipose adenomatosa familiar, neurofibromatose, psoría- se, proliferação de células lisas vasculares associada com ateroscle- rose, fibrose pulmonar, artrite, glomerulonefrite e estenose pós- cirúrgica e restenose.

[00021] A dosagem útil pode ser variada de acordo com a natureza e a gravidade do distúrbio, a via de administração e a idade e o peso do paciente. A dosagem varia a partir de 1 mg até 1 g por dia, em ter- mos do equivalente de base livre, em uma ou mais administrações. Breve Descrição das Figuras:

[00022] A Figura 1 descreve o diagrama de difração de pó por raios X da forma amorfa da base livre de N-(2,6-dietilfenil)-8-(f4-[4- (dimetilamino)piperidin-1-il]-2-metóxi feniliamino)-1-metil-4,5-di-hidro- 1H-pirazolo[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida.

[00023] A Figura 2 descreve o diagrama de difração de pó por raios X da forma | do fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-(f4-[4-(dimetilamino) pi- peridin-1-il]-2-metóxi fenillamino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3- h] quinazolina-3-carboxamida.

[00024] A Figura 3 descreve o diagrama DSC da forma | do fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-((4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-il]-2-metóxi fe- niljamino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h] quinazolina-3-carbo- xamida.

[00025] A Figura4 descreve o diagrama de difração de pó por raios X da forma Il do fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-((4-[4-(dimetilamino) pi- peridin-1-il--2-metóxi fenilamino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3- h] quinazolina-3-carboxamida.

[00026] A Figura5 descreve o diagrama DSC da forma II do fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-(f4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-iI]-2-metóxi fe- nilkamino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h] quinazolina-3-carbo- xamida.

[00027] Os Exemplos abaixo ilustram a invenção mas não a limitam de modo algum. Exemplo 1: Fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-(f(4-[4-(dimetilamino) pi- peridin-1-i1]-2-metóxi fenilkamino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo [4,3-h]quinazolina-3-carboxamida, Forma | Etapa A: 8-([4-Bromo-2-metóxi fenil)amino)-N-(2,6-dietilfenil)-1- metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida

[00028] A uma solução contendo 2,32 kg de 8-[(4-bromo-2-metóxi fenil)>amino]-1-metil-4,5-di-hidro-1 H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carbo- xamida em 34,8 L de THF é adicionado 0,877 L de 2,6-dietilanilina. 15,2 L de LIHMDS são em seguida adicionados gota a gota a -10ºC. À reação é agitada 1,5 hora, e LIHMDS é adicionado até a conclusão. Em seguida 30,17 L de uma solução de NaCl são adicionados e a fase orgânica é lavada duas vezes com solução de NaCl, e evaporada. Uma solução de água / acetona é em seguida adicionada ao resíduo, e a solução é refluxada, em seguida arrefecida a 5ºC. O precipitado é em seguida filtrado para proporcionar o produto do título como um pó amarelo claro. Ponto de fusão: 218 a 220ºC

MS calc.: 561,1608; MS encontrado: 561,1591 Etapa B: Fosfato de N-(2,6-Dietilfeni!)-8-((4-[4-(dimetilamino) pipe- ridin-1-i1]-2-metóxi fenil)amino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo [4,3-h]quinazolina-3-carboxamida, Forma |

[00029] 0,55 kg de 8-[(4-bromo-2-metóxi fenil)amino]-N-(2,6-dietil- fenil)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida obtida etapa A são carregados em um reator com 6 L de THF. À mistu- ra agitada, 3,3 g de acetato de paládio e 13,7 g de RuPhos em 3,9 L de THF são adicionados em temperatura ambiente sob nitrogênio.

[00030] 0,15kKkg de 4-dimetilamino-piperidina são adicionados à mis- tura da reação com 0,55 L de THF, a temperatura interna é aumentada até 50ºC e 3,9 L de LIHMDS a 1 Mem THF são vertidos.

[00031] A mistura da reação é agitada a 50ºC por 4,5 horas e em seguida arrefecida até a temperatura ambiente. 12 L de água são adi- cionados; as fases são separadas e a fase aquosa é extraída uma vez com 7 L de MTBE.

[00032] As fases orgânicas são lavadas com salmoura e em segui- da extraídas duas vezes com solução aquosa de ácido cítrico a 10%. As fases de ácido cítrico são reunidas e adicionadas com uma mistura a 2/1 de MTBE/THF. A mistura bifásica é arrefecida até 10ºC e é adi- cionada solução aquosa de NaOH a 35% até um pH 9. A fase orgânica é separada e tratada com resina SPM32 em refluxo. A resina é filtrada lavando com uma mistura a 2/1 de MTBE/THF e o solvente é parcial- mente evaporado. Etanol absoluto é adicionado e evaporado; o proce- dimenot é repetido e em seguida são adicionados 12 L de etanol abso- luto. A solução obtida é aquecida a 60ºC e uma solução de 67 mL de H3PO, a 85% misturada com 0,6 L de EtOH absoluto é adicionada go- ta a gota. Uma solução é mantida até cerca de metade da adição, e em seguida se forma um precipitado. A suspensão é aquecida até o refluxo (78,0ºC) por 18 minutos e em seguida arrefecida até 23ºC em 1 hora e 25 minutos. A suspensão é adicionalmente arrefecida até 5ºC em 1 hora e mantida a 5ºC por 22,5 horas. O composto do título é iso- lado por filtração; a torta úmida é lavada com 2,5 L de EtOH absoluto e seca sob vácuo a 50ºC até peso constante. O composto do título é ob- tido sob a forma de um pó amarelo. Ponto de fusão 220 a 223ºC com decomposição. Exemplo 2: Fosfato de N-(2,6-Dietilfenil)-8-((4-[4-(dimetilamino) piperidin-1-il]-2-metóxi fenilamino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazo- lo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida, Forma | Etapa A: N-(2,6-Dietilfenil)-8-(f4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-i1]-2- metóxi fenil«)amino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazo- lina-3-carboxamida (base livre)

[00033] Uma solução, contendo 213 mg de Pd(OAc), e 897 mg de RuPhos em 177 mL de THF, é adicionada a 21,53 g de 8-[(4-bromo-2- metóxi * fenil)>amino]-N-(2,6-dietilfenil)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo [4,3-h]quinazolina-3-carboxamida obtida na Etapa A do Exemplo 1 em 250 mL de THF, em temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura é aquecida a 40ºC antes de adição sequencial de 152 mL de LIHMDS a 1 M em THF e 10,7 mL de N,N-dimetilpiperidin-4-amina. A reação é mantida a 40ºC por 2,5 horas e em seguida arrefecida até a tempera- tura ambiente. 300 mL de salmoura são em seguida adicionados e a fase orgânica separada é lavada com 200 mL de salmoura.

[00034] A fase orgânica é tratada com 2,8 g de carvão ativado; a mistura é filtrada sobre um bloco de dicalite, evaporada até a secagem e purificada por cromatografia de sílica gel elutriando com DCM / EtoH / NH3 a 95:5:0.5. As frações reunidas são evaporadas até resíduo, dis- solvidas em EtOAc, lavadas cinco vezes com uma solução saturada de bicarbonato de sódio e com água, e em seguida evaporadas até a secagem. O produto é seco em forno a 50ºC por 7 horas, e a 40ºC por 64 horas. A base livre é obtida como um pó amarelo amorfo e caracte-

rizada por seu diagrama de difração do pó por raios X (vide a Figura 1). Etapa B: Fosfato de N-(2,6-Dietilfenil)-8-((4-[4-(dimetilamino) pipe- ridin-1-i1]-2-metóxi fenil<)amino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo [4,3-h]quinazolina-3-carboxamida, Forma |

[00035] 3,50g de N-(2,6-dietilfenil)-8-((4-[4-(dimetilamino)piperidin- 1-il]-2-metóxi fenilkamino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quina- zolina-3-carboxamida, base livre amorfa obtida na Etapa A, em 105 mL de etanol absoluto é aquecido até 60ºC sob nitrogênio. A esta mistura uma solução recém preparada de 0,682 g de ácido fosfórico a 85% em 17,5 mL de etanol foi adicionda gota a gota durante um período de 20 minutos sob eficiente agitação. A suspensão resultante foi aquecida até o refluxo (temperatura do banho de 82 a 84ºC) por 5 minutos, em seguida foi deixada para esfriar espontaneamente até a temperatura ambiente durante um período de 2 horas e finalmente envelhecida a +4ºC por 16 horas. O sólido foi isolado por filtração, lavado com 17,5 mL de etanol ssobre o filtro e seco a +50ºC sob vácuo por 10 horas produzindo o composto do título sob a forma de um pó amarelo. Ponto de fusão 220 a 223ºC com decomposição.

[00036] O produto do título fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-((4-[4- (dimetilamino)piperidin-1-il]-2-metóxi fenillamino)-1-metil-4,5-di-hidro- 1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida, Forma | dos Exemplos 1 e 2 é caracterizado por seu diagrama de difração de pó por raios X re- alizado usando um aparelho Thermo/ARL XTRA, e mostrado na Figu- ra2.

[00037] Este instrumento é baseado em geometria de Bragg- Brentano e equipado com um gerador de Cu Ka operando a 45KV/ 40mA (1,8 kW de potência) e um detector de estado sólido resfriado por Peltier. O intervalo espectral foi de 2 a 40º 28 com uma aquisição de varredura contínua em uma taxa de 1,20º 28 /min. As amostras fo-

ram carregadas sobre placas de baixo fundo Silicon. O pó foi achatado no interior do detentor pressionando delicadamente com uma lâmina de vidro de microscópio ou outras ferramentas adequadas.

[00038] Os resultados são expressos em termos de distância inter- planar d, ângulo de Bragg 2 teta (expresso em º*+0,2) e intensidade relativa (expressa como uma percentagem em relação à linha mais intensa):

[00039] Os ângulos de Bragg 2 teta (expressos em *+0,2) caracte- rísticos do diagrama de difração de pó por raios X são como se segue: 2,76, 8,10, 10,79, 13,49, 16,13, 17,37, 17,62, 19,77, 21,94, 24,18, 24,66.

[00040] — O composto do título dos Exemplos 1 e 2 também foi carac- terizado por seu diagrama DSC, realizado com um Perkin-Elmer DSC- 7, usando panelas DSC de alumínio ventiladas de 50 ul carregadas com cerca de 2 a 4 mg de amostra. Um disco de alumínio foi colocado sobre o pó obtendo uma camada delgada e melhorando a troca térmi- ca. A referência foi uma panela vazia do mesmo tipo. Índio, Estanho e Chumbo (materiais de referência certificados LGC) foram usados para avaliar a calibração do aparelho com respeito à escala de temperatura e à resposta de entalpia. As amostras foram analisadas sob fluxo de nitrogênio em uma taxa de aquecimento de 10º C/min. As temperaturas de início e de pico (ºC) foram geralmente consideradas parâmetros de interesse.

[00041] O diagrama obtido é mostrado na Figura 3 com um início de fusão de 229ºC. Exemplo 3: Fosfato de N-(2,6-Dietilfenil)-8-(f4-[4-(dimetilamino) pi- peridin-1-il]-2-metóxi fenil<)amino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo [4,3-h]quinazolina-3-carboxamida, tetra-hidrato, Forma Il

[00042] “304 mg do composto obtido na Etapa A do Exemplo 2 são carregados em um frasco de fundo redondo de três gargalos de 25 mL e 12 mL de água são adicionados em temperatura ambiente. A sus- pensão que é obtida é agitada enquanto aquecendo a 61 a 62ºC; o pH é de cerca de 5,3. Depois de 1 hora de agitação, são adicionados 35,9 ul de H3PO, mais 5 mL de água e quase instantaneamente tudo entra em solução e o pH é reduzido para 3,1. A solução é aquecida até 70ºC por 1 hora de modo a assegurar a completa dissolução, pH = 3,2. O banho de aquecimento é removido e o recipiente é deixado para esfri- ar até a temperatura ambiente e em seguida agitado por 2 horas. O recipiente é arrefecido até 5ºC deixando o mesmo no refrigerador de um dia para o outro levando a cair um precipitado amarelo da solução. O sólido foi deixado para assentar dentro da mistura em temperatura ambiente e a solução do sobrenadante foi removida. O sólido rema- nescente foi seco em forno a 50ºC sob vácuo por 18 horas. O compos- to do título foi obtido como um sólido amarelo.

Ampla endotérmica de desidratação: 35 a 125ºC Exotérmica de cristalização (Tinício): 190ºC

[00043] O produto do título é caracterizado por seu diagrama de difração do pó, realizado usando um aparelho Thermo/ARL XTRA. Es- te instrumento é baseado em geometria de Bragg-Brentano e equipa- do com um gerador de Cu Ka operando a 45KV/ 40mA (1,8 kW de po- tência) e um detector de estado sólido resfriado por Peltier. O intervalo espectral foi de 2 a 40º 28 com uma aquisição de varredura contínua em uma taxa de 1,20º 26/min a qual torna possível identificar os se- guintes parâmetros do cristal: - parâmetros de célula unitária: a = 13,866(2) À; b = 18,824(2) À; c = 7,2575(7) À; alfa = 92,014(8)º; beta = 91,813(7)º; ga- ma = 107,294(8)* - grupo espacial: P-1 (2) (triclínico)

[00044] O produto do título também foi caracterizado por seu dia- grama de difração de pó por raios X mostrado na Figura 4 realizado usando um aparelho Thermo/ARL XTRA. Este instrumento é baseado em geometria de Bragg-Brentano e equipado com um gerador de Cu Ka operando a 45KV/ 40mA (1,8 kW de potência) e um detector de estado sólido resfriado por Peltier. O intervalo espectral foi de 2 a 40º 28 com uma aquisição de varredura contínua em uma taxa de 1,20º 20 Imin. As amostras foram carregadas sobre placas de baixo fundo Sili- con. O pó foi achatado no interior do detentor pressionando delicada- mente com uma lâmina de vidro de microscópio ou outras ferramentas adequadas.

[00045] Os resultados são expressos em termos de distância inter- planar d, ângulo de Bragg 2 teta (expresso em º+0,2) e intensidade relativa (expressa como uma percentagem em relação à linha mais intensa):

[00046] Ângulos de Bragg 2-teta (expressos em *+0,2) característi- cos do diagrama de difração de pó por raios X: 9,43, 9,86, 12,23, 13,70, 14,81, 18,01, 19,78, 20,73, 24,55, 24,82, 26,81.

[00047] O composto do Exemplo 3 também foi caracterizado por seu diagrama DSC, realizado com um Perkin-Elmer DSC-7, usando panelas de DSC de alumínio ventiladas de 50 yL carregadas com cer- ca de 2 a 4 mg de amostra. Um disco de alumínio foi colocado sobre o pó obtendo uma camada delgada e melhorando a troca térmica. A re- ferência foi uma panela vazia do mesmo tipo. Índio, Estanho e Chum- bo (materiais de referência certificados LGC) foram usados para avali- ar a calibração do aparelho com respeito à escala de temperatura e à resposta de entalpia. As amostras foram analisadas sob fluxo de nitro- gênio em uma taxa de aquecimento de 10º C/min. As temperaturas de início e de pico (ºC) foram geralmente consideradas parâmetros de interesse.

[00048] O diagrama obtido é mostrado na Figura 5. Exemplo 4: Pureza e estabilidade do fosfato de N-(2,6-dietilfenil)- 8-((4-[4-(dimetilamino) piperidin-1-11]-2-metóxi fenilyamino)-1-metil- 4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida Forma | sob condições de longo termo

[00049] A pureza ea estabilidade do fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8- (f4-[4-(dimetilamino) piperidin-1-i1]-2-metóxi fenilkamino)-1-metil-4,5-di- hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida Forma | foram tes- tadas sob condições de longo termo como se segue:

total de im- | Fármaco (%) (avaliação — por purezas (%) XRD) E rearaeo fo essa romer [ese panaeo Jos essa nsotesda | [dimasaemata emana Jo fones Ínmntenens | Pó amarelo 0,07 99,93 Não testada umidade relativa [doumence mina | OSmaeo Jo fones Ínmtemens | Pó amarelo 0,07 99,93 Não testada de umidade relativa [mess — rsamaeo [os est romer

[00050] — Os resultados mostram que o fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8- (14-[4-(dimetilamino)piperidin-1-il]-2-metóxi fenilkamino)-1-metil-4,5-di- hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida Forma | é estável no mínimo até 24 meses. Exemplo 5: Solubilidade do fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-((4-[4- (dimetilamino) piperidin-1-il]-2-metóxi fenil)amino)-1-metil-4,5-di- hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida Forma |

[00051] Condições de teste: cerca de 730 mg do composto de teste foram suspensos em 4 ml de WFI (água para injeção) ou Salina (NaCl a 0,9%) para testar uma solubilidade alvo de 150 mg/ml como base livre. As suspensões foram agitadas magneticamente por 24 horas em temperatura ambiente e protegidas contra a luz em um frasquinho de vidro âmbar. As concentrações do composto de teste foram determi- nadas depois de 1 e 24 horas.

[00052] “Todas as quantidades retiradas da suspensão / solução fo- ram centrifugadas e as soluções superiores foram analisadas por HPLC depois de filtração e diluição.

[00053] Os resultados obtidos estão resumidos na tabela que se segue: Composto Meio .

(mg/ml como base livre) (mg/ml como (mg/ml como base livre) base livre) menta dee e Sal de Fosfato 150,0 81,0 133,6 0,9% Exemplo 6: Medição da higroscopicidade do fosfato de N-(2,6- dietilfenil)-8-((4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-i]]-2-metóxi feniljami- no)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxa- mida, Forma |

[00054] O composto a ser testado é submetido a teste de higrosco- picidade por meio de um aparelho de Sorção Dinâmica de Vapor (DVS 1000 — Surface Measurement Systems).

[00055] O aparelho é brevemente definido como um "microbalanço de atmosfera controlada" onde a amostra pesada é exposta a varia- ções da umidade relativa (RH) em uma temperatura constante e con- trolada. Foi analisada uma quantidade do produto pesada exatamente (geralmente 5 a 10 mg).

[00056] Os resultados são reportados na Tabela que se segue: . Absorção de água a 90% água a 30% de | a 60% de umidade de umidade relativa umidade relativa | relativa Exemplo 7: Composições farmacêuticas A. Comprimidos 1000 comprimidos cada um contendo uma dose de 35 mg do Exemplo Amido de trigo .....ili e. 20 q Amido de milho .....llii a... 20 g LACtoSse .... is 30 q Estearato de Magnésio ......llllii 29

SÍTICA cui 1 Hidroxipropilcelulose ......ii o 2 9 B. Frascos de liofilizados

[00057] Uma solução em volume contendo o composto do Exemplo 1, manitol e Tween 80 é preparada, em seguida liofilizada de modo a obter frascos cada um contendo 35 mg do composto do Exemplo 1, 300 mg de manitol e 5 mg de Tween 80.

[00058] O |liofilizado é ressuspenso em 10 ml de água para injeção.

Claims (23)

U7 REIVINDICAÇÕES

1. Fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-(f4-[4-(dimetilamino)piperi- din-1-i1)-2-metóxi fenilh amino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]qui- nazolina-3-carboxamida caracterizado pelo fato de ser de fórmula (Il): CH; NA | o ÀS O | “O jo | ” nao CH;3 oH i | SD no Í/>on o ne” eu,

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de ser obtido como a forma cristalina | caracterizada por seu difractograma do pó por raios X pelos ângulos de Bragg 2 teta (expressos em termos de º+0,2) 2,76, 8,10, 10,79, 13,49, 16,13, 17,37, 17,62, 19,77, 21,94, 24,18, 24,66.

3. Processo para obtenção do composto de fórmula (Il) co- mo definido na reivindicação 1 ou 2, cujo processo é caracterizado pe- lo fato de compreender a reação do material de partida N-(2,6- dietilfenil)-8-(f4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-il]-2-metóxi fenilkamino)-1- metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida, com 1 a 2 equivalentes de uma solução de H3PO, em um solvente orgânico.

4, Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que o solvente orgânico é EtoOH.

5. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de ser obtido como a forma cristalina Il caracterizada por seu difractograma do pó por raios X pelos ângulos de Bragg 2 teta (expressos em termos de º+0,2) 9,43, 9,86, 12,23, 13,70, 14,81, 18,01, 19,78, 20,73, 24,55, 24,82, 26,81.

6. Processo para obtenção do composto de fórmula (II) co- mo definido na reivindicação 1 ou 5, cujo processo é caracterizado pe- lo fato de compreender a reação do material de partida N-(2,6- dietilfenil)-8-((4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-il]-2-metóxi fenillamino)-1- metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida, com 1 a 2 equivalentes de uma solução de H3PO, em água.

7. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende o composto de fórmula (Il) como definido na reivindicação 1, 2 ou 5 em combinação com um ou mais excipientes farmaceutica- mente aceitáveis.

8. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o composto de fórmula (II) é fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-((4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-i1]-2-metóxi fenil) amino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida Forma |.

9. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o composto de fórmula (II) é fosfato de N-(2,6-dietilfenil)-8-((4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-i1]-2-metóxi fenil) amino)-1-metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida Forma |l.

10. Composições farmacêuticas de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 9 caracterizadas pelo fato de serem para uso no tratamento de distúrbios proliferativos celulares, infecções vi- rais, distúrbios autoimunes e neurodegenerativos.

11. Composições farmacêuticas de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 9 caracterizadas pelo fato de serem para uso no tratamento de carcinoma tal como carcinoma de bexiga, de mama, de cólon, renal, de fígado, de pulmão, incluindo câncer de pul- mão de células pequenas, de esôfago, de vesícula biliar, de ovário, de pâncreas, de estômago, de colo uterino, de tiroide, de próstata, e de pele, incluindo carcinoma de células escamosas; tumores hematopoié- ticos da linhagem linfoide incluindo leucemia, leucemia linfocítica agu- da, leucemia linfoblástica aguda, linfoma de células B, linfoma de célu- las T, linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, linfoma de células pi- losas e linfoma de Burkett; tumores hematopoiéticos da linhagem mie- loide, incluindo leucemias mieloides aguda e crônica, síndrome mielo- displásica e leucemia promielocítica; tumores de origem mesenquimal, incluindo fibrossarcoma e rabdomiossarcoma; tumores do sistema nervoso central e periférico, incluindo astrocitoma neuroblastoma, gli- oma e schwannomas; outros tumores, incluindo melanoma, seminoma, teratocarcinoma, osteossarcoma, xeroderma pigmentoso, ceratoxan- toma, câncer folicular da tireoide e sarcoma de Kaposi, mesotelioma, tumores altamente aneuploides e tumores os quais superexpressam componentes do ponto de controle mitótico como MPS1, MAD?, MAD1, BUB1, BUBR1, BUB3 e outros; hiperplasia benigna de prósta- ta; polipose adenomatosa familiar; neurofibromatose; psoríase; prolife- ração de células lisas vasculares associada com aterosclerose; fibro- se pulmonar; artrite; glomerulonefrite e estenose pós-cirúrgica e reste- nose.

12. Uso de uma composição farmacêutica como definida em qualquer uma das reivindicações 7 a 9 caracterizado pelo fato de ser na fabricação de medicamentos para uso no tratamento de distúr- bios proliferativos celulares, infecções virais, distúrbios autoimunes e neurodegenerativos.

13. Uso de uma composição farmacêutica como definida em qualquer uma das reivindicações 7 a 9 caracterizado pelo fato de ser na fabricação de medicamentos para uso no tratamento de carci-

noma tal como carcinoma de bexiga, de mama, de cólon, renal, de fi- gado, de pulmão, incluindo câncer de pulmão de células pequenas, de esôfago, de vesícula biliar, de ovário, de pâncreas, de estômago, de colo uterino, de tiroide, de próstata, e de pele, incluindo carcinoma de células escamosas; tumores hematopoiéticos da linhagem linfoide in- cluindo leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfoblástica aguda, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, linfoma de células pilosas e linfoma de Burkett; tumores hematopoiéticos da linhagem mieloide, incluindo leucemias mieloides aguda e crônica, síndrome mielodisplásica e leucemia pro- mielocítica; tumores de origem mesenquimal, incluindo fibrossarcoma e rabdomiossarcoma; tumores do sistema nervoso central e periférico, incluindo astrocitoma neuroblastoma, glioma e schwannomas; outros tumores, incluindo melanoma, seminoma, teratocarcinoma, osteossar- coma, xeroderma pigmentoso, ceratoxantoma, câncer folicular da tire- oide e sarcoma de Kaposi, mesotelioma, tumores altamente aneuploi- des e tumores os quais superexpressam componentes do ponto de controle mitótico como MPS1, MAD2, MAD1, BUB1, BUBR1, BUB3 e outros; hiperplasia benigna de próstata; polipose adenomatosa famili- ar; neurofibromatose; psoríase; proliferação de células lisas vasculares associada com aterosclerose; fibrose pulmonar; artrite; glomerulonefri- te e estenose pós-cirúrgica e restenose.

14. Combinação de um composto de fórmula (Il) como defi- nido na reivindicação 1, caracterizada pelo fato de ser com um agente anticancerígeno selecionado entre agentes genotóxicos, venenos mitó- ticos, antimetabólitos, inibidores do proteassoma e inibidores da qui- Nnase.

15. Combinação de acordo com a reivindicação 14, caracte- rizada pelo fato de que o composto de fórmula (II) é fosfato de N-(2,6- dietilfenil)-8-((4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-il]-2-metóxi feniliamino)-1-

metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida Forma l.

16. Combinação de acordo com a reivindicação 14, caracte- rizada pelo fato de que o composto de fórmula (II) é fosfato de N-(2,6- dietilfenil)-8-(f4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-il]-2-metóxi feniliamino)-1- metil-4,5-di-hidro-1H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida Forma Il.

17. Combinação de acordo com qualquer uma das reivindi- cações 14 a 16, caracterizada pelo fato de ser para uso no tratamento de cânceres.

18. Combinação de acordo com qualquer uma das reivindi- cações 14 a 16, caracterizada pelo fato de ser para uso no tratamento de carcinoma tal como carcinoma de bexiga, de mama, de cólon, re- nal, de fígado, de pulmão, incluindo câncer de pulmão de células pe- quenas, de esôfago, de vesícula biliar, de ovário, de pâncreas, de es- tômago, de colo uterino, de tiroide, de próstata, e de pele, incluindo carcinoma de células escamosas; tumores hematopoiéticos da linha- gem linfoide incluindo leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfoblástica aguda, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, linfoma de células pilosas e linfoma de Burkett; tumores hematopoiéticos da linhagem mieloide, incluindo leuce- mias mieloides aguda e crônica, síndrome mielodisplásica e leucemia promielocítica; tumores de origem mesenquimal, incluindo fibrossarcoma e rabdomiossarcoma; tumores do sistema nervoso central e periférico, incluindo astrocitoma neuroblastoma, glioma e schwannomas; outros tumores, incluindo melanoma, seminoma, teratocarcinoma, osteossar- coma, xeroderma pigmentoso, ceratoxantoma, câncer folicular da tire- oide e sarcoma de Kaposi, mesotelioma, tumores altamente aneuploi- des e tumores os quais superexpressam componentes do ponto de controle mitótico como MPS1, MAD2, MAD1, BUB1, BUBR1, BUB3 e outros; hiperplasia benigna de próstata; polipose adenomatosa famili- ar; neurofibromatose; psoríase; proliferação de células lisas vasculares associada com aterosclerose; fibrose pulmonar; artrite; glomerulonefri- te e estenose pós-cirúrgica e restenose.

19. Uso de uma combinação como definida em qualquer uma das reivindicações 14 a 16, caracterizado pelo fato de ser na fa- bricação de medicamentos para uso no tratamento de cânceres.

20. Uso de uma combinação como definida em qualquer uma das reivindicações 14 a 16, caracterizado pelo fato de ser na fa- bricação de medicamentos para uso no tratamento de carcinoma tal como carcinoma de bexiga, de mama, de cólon, renal, de fígado, de pulmão, incluindo câncer de pulmão de células pequenas, de esôfago, de vesícula biliar, de ovário, de pâncreas, de estômago, de colo uteri- no, de tiroide, de próstata, e de pele, incluindo carcinoma de células escamosas; tumores hematopoiéticos da linhagem linfoide incluindo leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfoblástica aguda, lin- foma de células B, linfoma de células T, linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, linfoma de células pilosas e linfoma de Burkett; tumores hematopoiéticos da linhagem mieloide, incluindo leucemias mieloides aguda e crônica, síndrome mielodisplásica e leucemia promielocítica; tumores de origem mesenquimal, incluindo fibrossarcoma e rabdomi- ossarcoma; tumores do sistema nervoso central e periférico, incluindo astrocitoma neuroblastoma, glioma e schwannomas; outros tumores, incluindo melanoma, seminoma, teratocarcinoma, osteossarcoma, xe- roderma pigmentoso, ceratoxantoma, câncer folicular da tireoide e sar- coma de Kaposi, mesotelioma, tumores altamente aneuploides e tumo- res os quais superexpressam componentes do ponto de controle mitó- tico como MPS1, MAD2, MAD1, BUB1, BUBR1, BUB3 e outros; hiper- plasia benigna de próstata; polipose adenomatosa familiar; neurofi- bromatose; psoríase; proliferação de células lisas vasculares associa-

7I7 da com aterosclerose; fibrose pulmonar; artrite; glomerulonefrite e es- tenose pós-cirúrgica e restenose.

21. Uso de um composto de fórmula (Il) como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser em combinação com radioterapia no tratamento de cânceres.

22. Uso de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que o composto de fórmula (II) é fosfato de N-(2,6-die- tilfenil)-8-(f4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-il]-2-metóxi fenilamino)-1-me- til-4,5-di-hidro-1 H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida Forma |.

23. Uso de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que o composto de fórmula (11) é fosfato de N-(2,6-dietilfe- nil)-8-(f4-[4-(dimetilamino)piperidin-1-il]-2-metóxi * fenillamino)-1-metil- 4,5-di-hidro-1 H-pirazolo[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida Forma |l.

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