TWI750393B

TWI750393B - N-(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺之新穎鹽類，其製備及含其之調配物

Info

Publication number: TWI750393B
Application number: TW107122235A
Authority: TW
Inventors: 馬西摩札派利; 瑪麗娜卡爾達瑞利; 艾拉利亞凱蒂安妮; 馬提歐德安妮羅; 格曼諾德阿拉斯摩
Original assignee: 義大利商那維諾醫療科學ＳＲＬ公司
Priority date: 2017-06-29
Filing date: 2018-06-28
Publication date: 2021-12-21
Also published as: US11160806B2; CL2019003848A1; KR20200020905A; CN110896636B; EA039764B1; IL271628B1; BR112019027924A2; IL271628A; AR112040A1; UY37778A; CN110896636A; KR102609333B1; ES2900048T3; US20220016122A1; AU2018293729A1; JP2020525477A; AU2018293729B2; AU2018293729B9; EP3645535B1; CA3068357A1

Abstract

本發明係關於具有式(II)之新穎N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽：

Description

N-(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺之新穎鹽類，其製備及含其之調配物

本發明係關於具有式(I)之N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺之新穎鹽類：

，其製備方法以及含其之醫藥組合物。

N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺在腫瘤學領域中具有極其寶貴的藥理學特性。事實上，已顯示N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺能夠抑制單極紡錘體1 (Monopolar Spindle 1，MPS1)激酶，亦稱為酪胺酸及絲胺酸/蘇胺酸激酶(TTK)。此能力使該分子在治療數種不同的癌症、細胞增殖性病症、病毒感染、自體免疫病症及神經退化病症方面具有治療益處。在預計進行治療之癌症中，可能會提及(但不意味任何限制)癌瘤，諸如膀胱癌、乳癌、結腸癌、腎癌、肝癌、包括小細胞肺癌在內之肺癌、食道癌、膽囊癌、卵巢癌、胰臟癌、胃癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、前列腺癌，及皮膚癌，包括鱗狀細胞癌；淋巴譜系之造血腫瘤，包括白血病、急性淋巴細胞白血病、急性淋巴母細胞白血病、B細胞淋巴瘤、T細胞淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤、毛狀細胞淋巴瘤及伯克特氏淋巴瘤(Burkett's lymphoma)；骨髓譜系之造血腫瘤，包括急性及慢性骨髓性白血病、骨髓發育不良症候群及前髓細胞性白血病；間葉細胞起源之腫瘤，包括纖維肉瘤及橫紋肌肉瘤；中樞及周邊神經系統之腫瘤，包括星形細胞瘤、神經母細胞瘤、神經膠質瘤及神經鞘瘤；其他腫瘤，包括黑色素瘤、精細胞瘤、畸胎上皮癌、骨肉瘤、著色性乾皮病、角質黃色瘤(keratoxanthoma)、甲狀腺濾泡性癌及卡堡氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)、間皮瘤、高度非整倍體腫瘤(highly aneuploid tumor)及過度表現如MPS1、MAD2、MAD1、BUB1、BUBR1、BUB3及其他之有絲分裂檢查點組分之腫瘤。

在預計進行治療之細胞增殖性病症中，可能會提及(但不意味任何限制)良性前列腺增生、家族性腺瘤病息肉病、神經纖維瘤、牛皮癬、與動脈粥樣硬化相關之血管平滑細胞增生、肺纖維化、關節炎、絲球體腎炎以及手術後狹窄及再狹窄。

N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺之製備及治療用途已描述於例如歐洲專利說明書EP2303891中，該說明書之內容以引用的方式併入。

鑒於此化合物具有藥用價值，故能夠以極佳產率、高純度及極佳可再現性獲得該活性化合物極為重要。此外，考慮到靜脈內投與方式，具有極佳的溶解度特性亦至關緊要。很快地發現，先前技術中所描述之鹼展示純化問題，產生非理想純度，且亦展示較差溶解度。在諸多調查研究之後，有可能鑑別出合併各種優點之新穎鹽類，尤其是與純化、與用於獲得該鹽之方法的可再現性及與產率相關之優點，而且亦意外地具有極其顯著地改善活性化合物之溶解度的優點。此外，儘管水溶性變大，但此新穎鹽類展現的吸濕性並不比游離鹼高。因此，自物理化學及藥物動力學觀點看，此新穎鹽類具有所有使其用作藥物必不可少之品質。

因此，本發明係關於N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺之新穎鹽類，更尤其是具有式(II)之N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽：

。

此新穎鹽類具有以下優點： -以極佳產率獲得該鹽之簡單且可再現之方法； -高化學純度及低吸濕性； -增加的於水及生理血清中之溶解度，使其在靜脈內投與方面受到廣泛關注。

本發明亦關於用於獲得N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽之方法。

舉例而言，其可始自如在EP 2303891中所獲得之起始材料8-[(4-溴-2-甲氧基苯基)胺基]-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-羧酸乙鹽，其在存在強鹼情況下與2,6-二乙基苯胺反應，得到8-[(4-溴-2-甲氧苯基)胺基]-N -(2,6-二乙基苯基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺，隨後與N , N -二甲基六氫吡啶-4-胺反應，得到式(I)化合物，隨後將該式(I)化合物與1至2當量H₃ PO₄ 溶液混合，得到具有式(II)之N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽。

本發明之式(II)化合物在變性條件(40℃/75%相對濕度(RH))下隨時間推移具有良好的穩定性：

已確立，本發明之新穎鹽類亦具有經改良的溶解度特性： -在初步測試中，室溫下，從非晶形鹼以原位方式所形成之鹽類顯示，磷酸鹽具有經改良溶解度大於氫氯酸鹽至少25倍且比游離鹼至少大24000倍之能力：

-進一步研究式(II)之磷酸鹽晶形I顯示，室溫下，於水中及於NaCl 0.9%中以游離鹼表示之兩者溶解度係至少130 mg/ml：

在鹽類篩選期間，磷酸鹽係經以下鑑別：顯著地改進原料藥之溶解度，同時具有如藉由以下動態蒸汽吸附分析所證實之低吸濕性傾向：

在一有利替代方案中，用於獲得式(II)化合物之方法之最後一個步驟可在有機溶劑且更特定言之極性溶劑中執行，諸如THF (四氫呋喃)、EtOH、MeOH、(1-或2-)丙醇、(1-或2-)丁醇、第三丁醇、2-甲氧基乙醇、二噁烷、乙酸乙酯、乙酸異丙酯、乙腈、丙酮、MTBE (甲基第三丁基醚)、MIBK (甲基異丁基酮)、DMSO (二甲基亞碸)及其混合物。

在彼情況下，所獲得之式(II)化合物之特徵在於名為形態I之多晶形態。

此新穎形態I之特徵在於以下獲自X射線粉末繞射圖之布拉格角(Bragg's angle) 2θ (以°±0.2表示)：2.76、8.10、10.79、13.49、16.13、17.37、17.62、19.77、21.94、24.18、24.66。

在另一有利替代方案中，用於獲得式(II)化合物之方法之最後一個步驟係在水中執行，產生名為形態II之新穎水合多晶形態。

此新穎形態II之特徵在於以下獲自X射線粉末繞射圖之布拉格角2θ (以°±0.2表示)：9.43、9.86、12.23、13.70、14.81、18.01、19.78、20.73、24.55、24.82、26.81。

本發明亦係關於醫藥組合物，該醫藥組合物包含作為活性成分之本發明式(II)化合物及一或多種惰性、無毒、適當的賦形劑。在本發明之醫藥組合物之中，可能會提及且更尤其提及彼等適合於經口、非經腸(靜脈內或皮下)或經鼻投與之錠劑或糖衣丸劑、粒劑、舌下錠劑、膠囊、口含錠、栓劑、乳膏、軟膏、真皮凝膠、可注射製劑、可飲用懸浮液及口香糖。

包含本發明之式(II)化合物之藥物形式將用於治療癌症、細胞增殖性病症、病毒感染、自體免疫病症及神經退化病症。在預計進行治療之癌症之中，可能會提及(但不意味任何限制)癌瘤，諸如膀胱癌、乳癌、結腸癌、腎癌、肝癌、包括小細胞肺癌在內之肺癌、食道癌、膽囊癌、卵巢癌、胰臟癌、胃癌、子宮頸癌、甲狀腺癌、前列腺癌，及皮膚癌，包括鱗狀細胞癌；淋巴譜系之造血腫瘤，包括白血病、急性淋巴細胞白血病、急性淋巴母細胞白血病、B細胞淋巴瘤、T細胞淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、毛狀細胞淋巴瘤及伯克特氏淋巴瘤；骨髓譜系之造血腫瘤，包括急性及慢性骨髓性白血病、骨髓發育不良症候群及前髓細胞性白血病；間葉細胞起源之腫瘤，包括纖維肉瘤及橫紋肌肉瘤；中樞及周邊神經系統之腫瘤，包括星形細胞瘤神經母細胞瘤、神經膠質瘤及神經鞘瘤；其他腫瘤，包括黑色素瘤、精細胞瘤、畸胎上皮癌、骨肉瘤、著色性乾皮病、角質黃色瘤、甲狀腺濾泡性癌及卡堡氏肉瘤、間皮瘤、高度非整倍體腫瘤及過度表現如MPS1、MAD2、MAD1、BUB1、BUBR1、BUB3及其他之有絲分裂檢查點組分之腫瘤。

在預計進行治療之細胞增殖性病症之中，可能會提以下病症且不意味著任何限制：良性前列腺增生、家族性腺瘤病息肉病、神經纖維瘤、牛皮癬、與動脈粥樣硬化相關之血管平滑細胞增生、肺纖維化、關節炎、絲球體腎炎及手術後狹窄及再狹窄。

適用劑量可根據病症之性質及嚴重性、投與途徑及患者年齡及體重而改變。在一或多種投與中，就游離鹼當量而言，劑量在每天1 mg至每天1 g範圍內變化。

以下實例說明本發明但不以任何方式限制本發明。

實例1：N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽，形態I步驟 A ： 8 -([ 4 - 溴 - 2 - 甲氧基苯基 } 胺基 )- N -( 2 , 6 - 二乙基苯基 )- 1 - 甲基 - 4 , 5 - 二氫 - 1H - 吡唑并 [ 4 , 3 - h ] 喹唑啉 - 3 - 甲醯胺 向含有34.8 L THF中之2.32 kg 8-[(4-溴-2-甲氧基苯基)胺基]-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺之溶液中添加0.877 L 2,6-二乙基苯胺。隨後在-10℃下逐滴添加15.2 L LiHMDS。攪拌反應1.5小時，且添加LiHMDS直至完成。隨後，添加30.17 L NaCl溶液且用NaCl溶液洗滌有機相兩次，且進行蒸發。接著，將水/丙酮溶液添加至殘餘物中，且回流溶液，隨後在5℃下冷卻。隨後過濾沈澱物，得到呈淡黃色粉末狀之標題產物。

熔點：218-220℃

MS計算值：561.1608；MS實驗值：561.1591

步驟 B ： N -( 2 , 6 - 二乙基苯基 )- 8 -({ 4 -[ 4 -( 二甲基胺基 ) 六氫吡啶 - 1 - 基 ]- 2 - 甲氧基 苯基 } 胺基 )- 1 - 甲基 - 4 , 5 - 二氫 - 1H - 吡唑并 [ 4 , 3 - h ] 喹唑啉 - 3 - 甲醯胺磷酸鹽 ，形態 I 將步驟A中所獲得之0.55 kg 8-[(4-溴-2-甲氧基苯基)胺基]-N -(2,6-二乙基苯基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺裝入到含有6 L THF之反應器中。在氮氣下，在室溫下，向攪拌混合物中添加在3.9 L THF中之3.3 g乙酸鈀及13.7 g RuPhos。

將0.15 kg 4-二甲基胺基-六氫吡啶添加至含有0.55 L THF之反應混合物中，將內部溫度升高至50℃且滴加溶於3.9 L THF中之1M LiHMDS。

在50℃下攪拌反應混合物4.5小時且接著冷卻至室溫。添加12 L水；分離相，且用7 L MTBE萃取水相一次。

用鹽水洗滌有機相，且接著用10%檸檬酸水溶液萃取兩次。合併檸檬酸相，且添加有MTBE/THF比例為2/1之混合物。將雙相混合物冷卻至10℃且添加35% NaOH水溶液直至pH為9。分離有機相，且在回流下用SPM32樹脂處理。用MTBE/THF比例為2/1之混合物洗滌濾除樹脂且部分蒸發溶劑。添加純乙醇且蒸發；重複該程序且接著添加12 L純乙醇。在60℃下加熱所獲得之溶液，且逐滴添加與0.6 L純EtOH混合之67 mL 85% H₃ PO₄ 溶液。保持溶液直至添加約一半，且接著形成沈澱物。將懸浮液加熱至回流(78.0℃) 18分鐘且接著在1小時25分鐘內冷卻至23℃。在1小時內將懸浮液進一步冷卻至5℃且保持在5℃ 22.5小時。藉由過濾來分離標題化合物；用2.5 L純EtOH洗滌濕濾餅，且在真空下在50℃下乾燥直至達到恆重。獲得呈黃色粉末狀之標題化合物。

熔點220-223℃，發生分解。

實例2：N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽，形態I步驟 A ： N -( 2 , 6 - 二乙基苯基 )- 8 -({ 4 -[ 4 -( 二甲基胺基 ) 六氫吡啶 - 1 - 基 ]- 2 - 甲氧基 苯基 } 胺基 )- 1 - 甲基 - 4 , 5 - 二氫 - 1H - 吡唑并 [ 4 , 3 - h ] 喹唑啉 - 3 - 甲醯胺 ( 游離鹼 ) 在氮氣下，在室溫下將在177 mL THF中含有213 mg Pd(OAc)₂ 及897 mg RuPhos之溶液添加至在250 mL THF中的21.53 g實例1之步驟A所獲得的8-[(4-溴-2-甲氧基苯基)胺基]-N -(2,6-二乙基苯基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺I中。在40℃下加熱混合物，隨後依序添加152 mL之1M LiHMDS之THF溶液及10.7 mLN , N -二甲基六氫吡啶-4-胺。在40℃下保持反應2.5小時且接著冷卻至室溫。隨後添加300 mL鹽水且用200 mL鹽水洗滌分離的有機相。

用2.8 g活性炭處理有機相；在矽藻土墊上過濾混合物，蒸發至乾且藉由用DCM/EtOH/NH₃ 95:5:0.5溶離之矽膠層析法來純化。蒸發彙集之溶離份得到殘餘物，將其溶解於EtOAc中，用飽和碳酸氫鈉溶液且用水洗滌五次，且接著蒸發至乾。在烘箱中在50℃下乾燥產物7小時，且在40℃下乾燥64小時。獲得呈非晶形黃色粉末狀之游離鹼且以其X射線繞射圖表徵(參見圖1)。

步驟 B ： N -( 2 , 6 - 二乙基苯基 )- 8 -({ 4 -[ 4 -( 二甲基胺基 ) 六氫吡啶 - 1 - 基 ]- 2 - 甲氧基 苯基 } 胺基 )- 1 - 甲基 - 4 , 5 - 二氫 - 1H - 吡唑并 [ 4 , 3 - h ] 喹唑啉 - 3 - 甲醯胺磷酸鹽 ，形態 I 在氮氣下，將在105 mL純乙醇中之3.50 g步驟A中所獲得的N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺非晶形游離鹼加熱至60℃。在有效攪拌下，經20分鐘時段向此混合物中逐滴添加新製備的0.682 g 85%磷酸於17.5 mL乙醇中之溶液。將所得懸浮液加熱至回流(浴溫82-84℃)，保持5分鐘，隨後經2小時時段使其自發地冷卻至室溫且最後在+4℃下老化16小時。藉由過濾來分離固體，在過濾器上用17.5 mL乙醇洗滌且在真空下，在+50℃下乾燥10小時，得到呈黃色粉末形式之標題化合物。

熔點220-223℃，發生分解。

實例1及2之標題產物N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態I係以其使用Thermo/ARL XTRA裝置得到之X射線粉末繞射圖表徵，且顯示於圖2中。

此儀器係基於布拉格-布倫塔諾幾何(Bragg-Brentano geometry)且配備有在45 KV/40 mA (1.8 kW功率)下操作之Cu Kα發生器及帕耳帖冷卻(Peltier-cooled)之固態偵測器。在1.20°2θ/min速率下，藉由連續性掃描採集自2至40°2θ之光譜範圍。將樣品裝載在低背景矽板(Silicon low background plate)上。藉由用顯微鏡玻璃載片或其他合適的工具輕柔地按壓來使粉末在容器(holder)內部變平。

結果表現在晶面距離d、布拉格角2θ (以°±0.2表示)及相對強度(以相對於最強譜線之百分比表示)方面：

X射線粉末繞射圖之布拉格角2θ (以°±0.2表示)特徵如下：2.76、8.10、10.79、13.49、16.13、17.37、17.62、19.77、21.94、24.18、24.66。

實例1及2之標題化合物之特徵亦在於其使用50 μL裝載有約2至4 mg樣品之通風鋁DSC盤用Perkin-Elmer DSC-7實現之DSC圖。將鋁盤置放在粉末上方，獲得薄層且改進熱交換。參考物為具有相同種類之空盤。銦、錫及鉛(LGC認證之參考材料)用於評估關於溫度標度及焓反應之裝置之校準。在10℃/min加熱速率下在氮氣流下分析樣品。起始溫度及峰值溫度(℃)通常視為所關注之參數。

所獲得之圖顯示於圖3中且熔融起始為229℃。

實例 3 ： N -( 2 , 6 - 二乙基苯基 )- 8 -({ 4 -[ 4 -( 二甲基胺基 ) 六氫吡啶 - 1 - 基 ]- 2 - 甲氧基苯基 } 胺基 )- 1 - 甲基 - 4 , 5 - 二氫 - 1H - 吡唑并 [ 4 , 3 - h ] 喹唑啉 - 3 - 甲醯胺磷酸鹽 ， 四水合物 ，形態 II 將304 mg實例2之步驟A中所獲得之化合物裝載入25 mL三頸圓底燒瓶中且在室溫下添加12 mL水。攪拌所獲得之懸浮液同時在61-62℃下加熱；pH為約5.3。在1小時攪拌之後，添加35.9 µL H₃ PO₄ 加5 mL水且幾乎瞬時所有物質變成溶液且pH降至3.1。將溶液加熱至70℃持續1小時以便確保完全溶解，pH=3.2。移除加熱浴且靜置容器以冷卻至室溫，隨後攪拌2小時。藉由將其靜置在冷凍機中隔夜來將容器冷卻至5℃，引起在溶液中析出黃色沈澱物。在室溫下靜置固體以在混合物內沈降且移除上澄液溶液。在真空下在50℃下在烘箱中乾燥剩餘固體18小時。獲得呈黃色固體狀之標題化合物。

寬脫水吸熱曲線：35-125℃

結晶之放熱曲線(T_起始 )：190℃

標題產物係以其使用Thermo/ARL XTRA裝置得到之粉末繞射圖表徵。此儀器係基於布拉格-布倫塔諾幾何且配備有在45 KV/40 mA (1.8 kW功率)下操作之Cu Kα發生器及帕耳帖冷卻之固態偵測器。在1.20°2θ/min速率下，藉由連續掃描採集自2至40°2θ之光譜範圍，使得有可能鑑別出以下晶體參數： -單位晶胞參數： a = 13.866(2) Å；b = 18.824(2) Å；c = 7.2575(7) Å；α = 92.014(8)°；β = 91.813(7)°；γ = 107.294(8)° -晶格群：P-1 (2) (三斜晶系)

標題產物亦藉由圖4中顯示的其使用Thermo/ARL XTRA裝置得到之X射線粉末繞射圖表徵。此儀器係基於布拉格-布倫塔諾幾何且配備有在45 KV/40 mA (1.8 kW功率)下操作之Cu Kα發生器及帕耳帖冷卻之固態偵測器。在1.20°2θ/min速率下，藉由連續掃描採集自2至40°2θ之光譜範圍。將樣品裝在Silicon低背景板上。藉由用顯微鏡玻璃載片或其他合適的工具輕柔地按壓來使粉末在容器內部變平。

X射線粉末繞射圖之布拉格角2θ (以°±0.2表示)特徵：9.43、9.86、12.23、13.70、14.81、18.01、19.78、20.73、24.55、24.82、26.81。

實例3之化合物特徵亦在於其使用50 μL裝載有約2至4 mg樣品之通風鋁DSC盤用Perkin-Elmer DSC-7得到之DSC圖。將鋁盤置放在粉末上方，獲得薄層且改進熱交換。參考物為具有相同種類之空盤。銦、錫及鉛(LGC認證之參考材料)用於評估關於溫度標度及焓反應之裝置之校準。在10℃/min加熱速率下在氮氣流下分析樣品。起始溫度及峰值溫度(℃)通常視為所關注之參數。

所獲得之圖顯示於圖5中。

實例4：在長期條件下之N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態I之純度及穩定性已在如下之長期條件下測試N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態I之純度及穩定性：

結果顯示，N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態I穩定至少多達24個月。

實例5：N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態I之溶解度測試條件：將約730 mg測試化合物懸浮於4 ml WFI (注射用水)或生理鹽水(0.9% NaCl)以測試呈游離鹼形式之150 mg/ml目標溶解度。在室溫下磁力攪拌懸浮液24小時且在琥珀色玻璃瓶中避光。在1及24小時之後測定測試化合物濃度。

離心所有抽取懸浮液/溶液量且在過濾及稀釋之後藉由HPLC分析優良溶液。

所獲得之結果概括於以下表中：

實例 6 ： N -( 2 , 6 - 二乙基苯基 )- 8 -({ 4 -[ 4 -( 二甲基胺基 ) 六氫吡啶 - 1 - 基 ]- 2 - 甲氧基 苯基 } 胺基 )- 1 - 甲基 - 4 , 5 - 二氫 - 1H - 吡唑并 [ 4 , 3 - h ] 喹唑啉 - 3 - 甲醯胺磷酸鹽 ，形態 I 之 吸濕性量測 藉助於動態蒸汽吸附裝置(DVS 1000-表面量測系統)使待測試之化合物進行吸濕性測試。

該裝置簡單定義為「受控大氣壓微量天平」，其中稱重樣品曝露於在恆定及受控溫度下之相對濕度(RH)之變化。分析精確稱重量之產物(通常5-10 mg)。

結果報導於以下表中：

實例 7 ： 醫藥組合物 A . 錠劑各含有35 mg實例1劑量之1000顆錠劑…………………100 g 小麥澱粉………………………………………………………20 g 玉米澱粉………………………………………………………20 g 乳糖……………………………………………………………30 g 硬脂酸鎂………………………………………………………2 g 二氧化矽………………………………………………………1 g 羥丙基纖維素…………………………………………………2 g

B . 小瓶凍乾物 製備含有實例1之化合物、甘露醇及Tween 80之本體溶液，隨後凍乾，得到各含有35 mg 實例1之化合物、300 mg甘露醇及5 mg Tween 80之小瓶。將凍乾物再懸浮於10 ml注射用水中。

圖 1 描述游離鹼N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺之非晶形態之X射線繞射圖。圖 2 描述N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態I之X射線繞射圖。圖 3 描述N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態I之DSC圖。圖 4 描述N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態II之X射線繞射圖。圖 5 描述N -(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H -吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態II之DSC圖。

Claims

一種化合物，其為具有式(II)之N-(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽：
一種用於獲得如請求項1之式(II)化合物之方法，該方法包含使起始材料N-(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺與1至2當量的H₃PO₄溶液反應。
如請求項1之化合物，其係呈結晶形態I形式獲得，其中其具有如下之布拉格角(Bragg's angle)2θ(以°±0.2表示)之X射線粉末繞射圖：2.76、8.10、10.79、13.49、16.13、17.37、17.62、19.77、21.94、24.18、24.66。
一種用於獲得如請求項3之式(II)化合物之方法，該方法包含使起始材料N-(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺與溶於有機溶劑中之1至2當量的H₃PO₄溶液反應。
如請求項4之方法，其中該有機溶劑為EtOH。
如請求項1之化合物，其係呈結晶形態II形式獲得，其中其具有如下之布拉格角2θ(以°±0.2表示)之X射線粉末繞射圖：9.43、9.86、12.23、13.70、14.81、18.01、19.78、20.73、24.55、24.82、26.81。
一種用於獲得如請求項6之式(II)化合物之方法，該方法包含使起始材料N-(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺與溶於水中之1至2當量的H₃PO₄溶液反應。
一種醫藥組合物，其包含如請求項1、3或6之式(II)化合物併與一或多種醫藥學上可接受之賦形劑之組合。
如請求項8之醫藥組合物，其中式(II)化合物為如請求項3所載之N-(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態I。
如請求項8之醫藥組合物，其中式(II)化合物為如請求項6所載之N-(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態II。
如請求項8至10中任一項之醫藥組合物，其係用於治療細胞增殖性病症、病毒感染、自體免疫病症及神經退化病症。
如請求項8至10中任一項之醫藥組合物，其係用於治療癌瘤；淋巴譜系之造血腫瘤；間葉細胞起源之腫瘤；中樞及周邊神經系統之腫瘤；其他腫瘤；良性前列腺增生；家族性腺瘤病息肉病；神經纖維瘤；牛皮癬；與動脈粥樣硬化相關之血管平滑細胞增生；肺纖維化；關節炎；絲球體腎炎以及手術後狹窄及再狹窄。
一種如請求項8至10中任一項之醫藥組合物的用途，其係用於製造供治療細胞增殖性病症、病毒感染、自體免疫病症及神經退化病症用之藥物。
一種如請求項8至10中任一項之醫藥組合物的用途，其係用於製造供治療以下用之藥物：癌瘤；淋巴譜系之造血腫瘤；間葉細胞起源之腫瘤；中樞及周邊神經系統之腫瘤；其他腫瘤；良性前列腺增生；家族性腺瘤病息肉病；神經纖維瘤；牛皮癬；與動脈粥樣硬化相關之血管平滑細胞增生；肺纖維化；關節炎；絲球體腎炎以及手術後狹窄及再狹窄。
一種如請求項1之式(II)化合物與抗癌症劑的組合，其中該抗癌症劑係選自遺傳毒性劑、有絲分裂毒劑、抗代謝物、蛋白酶體抑制劑及激酶抑制劑。
如請求項15之組合，其中式(II)化合物為如請求項3所載之N-(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態I。
如請求項15之組合，其中式(II)化合物為如請求項6所載之N-(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態II。
如請求項15至17中任一項之組合，其係用於治療癌症。
如請求項15至17中任一項之組合，其係用於治療癌瘤；淋巴譜系之造血腫瘤；間葉細胞起源之腫瘤；中樞及周邊神經系統之腫瘤；其他腫瘤；良性前列腺增生；家族性腺瘤病息肉病；神經纖維瘤；牛皮癬；與動脈粥樣硬化相關之血管平滑細胞增生；肺纖維化；關節炎；絲球體腎炎以及手術後狹窄及再狹窄。
一種如請求項15至17中任一項之組合的用途，其係用於製造供治療癌症用之藥物。
一種如請求項15至17中任一項之組合的用途，其係用於製造供治療以下用之藥物：癌瘤；淋巴譜系之造血腫瘤；間葉細胞起源之腫瘤；中樞及周邊神經系統之腫瘤；其他腫瘤；良性前列腺增生；家族性腺瘤病息肉病；神經纖維瘤；牛皮癬；與動脈粥樣硬化相關之血管平滑細胞增生；肺纖維化；關節炎；絲球體腎炎以及手術後狹窄及再狹窄。
一種如請求項1之式(II)化合物在製造用於治療癌症之藥物中的用途，其中該藥物係與放射線療法組合使用。
如請求項22之用途，其中式(II)化合物為如請求項3所載之N-(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態I。
如請求項22之用途，其中式(II)化合物為如請求項6所載之N-(2,6-二乙基苯基)-8-({4-[4-(二甲基胺基)六氫吡啶-1-基]-2-甲氧基苯基}胺基)-1-甲基-4,5-二氫-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲醯胺磷酸鹽形態II。