BR112019020781A2 - composições e usos de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) aplicado(s) de forma local com maior desempenho e segurança - Google Patents

composições e usos de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) aplicado(s) de forma local com maior desempenho e segurança Download PDF

Info

Publication number
BR112019020781A2
BR112019020781A2 BR112019020781A BR112019020781A BR112019020781A2 BR 112019020781 A2 BR112019020781 A2 BR 112019020781A2 BR 112019020781 A BR112019020781 A BR 112019020781A BR 112019020781 A BR112019020781 A BR 112019020781A BR 112019020781 A2 BR112019020781 A2 BR 112019020781A2
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
antimicrobial
pharmaceutical composition
synthetic cationic
antimicrobial pharmaceutical
polypeptide
Prior art date
Application number
BR112019020781A
Other languages
English (en)
Inventor
J Huang Daniel
Looker Doug
P Bevilacqua Michael
Original Assignee
Amicrobe Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Amicrobe Inc filed Critical Amicrobe Inc
Publication of BR112019020781A2 publication Critical patent/BR112019020781A2/pt

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/02—Peptides of undefined number of amino acids; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L26/00—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form
    • A61L26/0009—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form containing macromolecular materials
    • A61L26/0028—Polypeptides; Proteins; Degradation products thereof
    • A61L26/0047—Specific proteins or polypeptides not covered by groups A61L26/0033 - A61L26/0042
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P41/00—Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
    • A61L2300/25—Peptides having up to 20 amino acids in a defined sequence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
    • A61L2300/252—Polypeptides, proteins, e.g. glycoproteins, lipoproteins, cytokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/404—Biocides, antimicrobial agents, antiseptic agents
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

as composições farmacêuticas antimicrobianas são formuladas para permitir a aplicação local in vivo de doses que fornecem eficácia antimicrobiana com baixo risco de toxicidades locais no tecido e/ou baixo risco de toxicidades sistêmica / em órgãos distantes. em várias modalidades as composições farmacêuticas antimicrobianas compreendem polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) que é(são) disperso(s) em um carreador aquoso e são formuladas para a obtenção de um grau desejado de automontagem do polímero e/ou viscosidade da composição.

Description

“COMPOSIÇÕES E USOS DE POLIPEPTÍDEO(S) CATIÔNICO(S)
SINTÉTICO(S) ANTIMICROBIANO(S) APLICADO(S) DE FORMA
LOCAL COM MAIOR DESEMPENHO E SEGURANÇA”
RELATÓRIO DESCRITIVO
INFORMAÇÕES DE PEDIDO DE PATENTE RELACIONADO [001] Este pedido de patente reivindica prioridade ao pedido de patente U.S. provisório no. de série 62/482.630, depositado em 6 de abril de 2017, que é incorporado aqui como referência em sua totalidade.
ANTECEDENTE
Campo [002] Esta divulgação refere-se a composições farmacêuticas antimicrobianas que contêm agentes antimicrobianos catiônicos e métodos de utilização dos mesmos para prevenir e/ou tratar infecções.
Descrição da Técnica Relacionada [003] Agentes antimicrobianos aplicados localmente, incluindo antissépticos e antibióticos, frequentemente falham em atingir a eficácia na prevenção e no tratamento de infecções, resultando em morbidez e mortalidade substancial do paciente. Usos específicos (incluindo a aplicação em certos tecidos) e doses (concentração, volume, número de aplicações) podem ser limitados pelo risco de uma ou mais toxicidades. Preocupações em relação a tais toxicidades podem resultar na aplicação clínica de doses inadequadas ou na evitação completa do uso em certos cenários patofisiológicos.
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 63/137
2/75 [004] Uma ampla variedade de agentes antimicrobianos catiônicos é conhecida por sua capacidade de se ligar e de romper as membranas bacterianas, incluindo certos antibióticos, bisbiguanidas, biguanidas poliméricas, compostos de amônio quaternário, peptídeos antimicrobianos naturais e polipeptideos catiônicos sintéticos. Entretanto, toxicidade em mamíferos continua sendo um problema consistente.
[005] A Patente U.S. No. 9.017.730 descreve copolipeptídeos catiônicos sintéticos que contêm proporções variáveis de unidades recorrentes de aminoácidos catiônicos (tal como lisina (K)) e unidades de aminoácidos hidrofóbicos (tal como leucina (L), isoleucina (1), valina (V), fenilalanina (F) ou alanina (A)). A Patente U.S. No. 9.017.730 indica que uma arquitetura segmentada, ou em blocos, que envolve extensões de aminoácidos catiônicos e extensões de aminoácidos hidrofóbicos pode aumentar a compatibilidade com células de mamíferos, que é medida por ensaios de toxicidade in vitro. Em adição, a Patente U.S. No. 9.017.730 indica que a incorporação de copolipeptídeos catiônicos em blocos selecionados em uma emulsão pode aprimorar a compatibilidade com células de mamíferos in vitro, que é medida por ensaios de citotoxicidade. Embora a Patente U.S. No. 9.017.730 descreva a aplicação local de um número de preparações de copolipeptídeos catiônicos sintéticos, esta não fornece evidência de toxicidades que podem ser resultantes do uso destas preparações in vivo.
[006] A Patente U.S. No. 9.446.090 descreve polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) junto com misturas mutuamente miscíveis em água que contêm tal polipeptideo e um segundo polímero farmaceuticamente aceitável. Exemplos específicos descrevem atividade antimicrobiana contra certas bactérias utilizando misturas particulares
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 64/137
3/75 do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) com segundos polímeros tais como polietileno glicol (PEG), hidroxietilcelulose (HEC) e Poloxamer 407. Muito embora os segundos polímeros individualmente não fossem conhecidos por terem atividade antimicrobiana significativa, os dados indicaram que nas misturas, a adição do segundo polímero mantinha a atividade antimicrobiana do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) in vitro e em alguns casos, melhorava o desempenho antimicrobiano geral in vivo. Entretanto, a Patente U.S. No. 9.446.090 não fornece evidência de toxicidades que possam resultar do uso destas misturas de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) com outros polímeros farmaceuticamente aceitáveis in vivo. Ainda, isto deixa em aberto a possibilidade de que o segundo polímero pode aumentar a toxicidade das misturas, quando comparada com a do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) individualmente.
[007] Embora as Patentes U.S. Nos. 9.017.730 e 9.446.090 descrevam avanços significativos na técnica, permanece um número de desafios, particularmente em relação ao desenvolvimento de preparações farmaceuticamente aceitáveis de agentes antimicrobianos catiônicos aplicados localmente que possuem tanto alta eficácia quanto alta segurança in vivo.
SUMÁRIO [008] Os presentes inventores desenvolveram composições farmacêuticas antimicrobianas catiônicas e métodos de uso que permitem aplicações locais in vivo de doses que fornecem eficácia antimicrobiana com baixo risco de toxicidades locais no tecido e/ou baixo risco de toxicidades sistêmica / em órgãos distantes.
[009] No desenvolvimento da presente invenção, os presentes
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 65/137 inventores descobriram que o risco de toxicidades após a aplicação local de agentes antimicrobianos catiônicos in vivo é particularmente relevante quando estes são aplicados em abundância aos locais dos tecidos ou em cenários patofisiológicos, que não são a pele saudável intacta. Tais locais e cenários patofisiológicos podem incluir ferimentos abertos, cavidades do corpo, orifícios do corpo, pele doente e outros. Estes locais dos tecidos e cenários patofisiológicos podem demonstrar sensibilidades locais maiores e / ou absorção e distribuição sistêmicas maiores dos agentes antimicrobianos aplicados localmente ou excipientes, quando comparados com a pele intacta saudável. Toxicidades locais no tecido maiores e toxicidades sistêmica / em órgãos distantes maiores podem ocorrer.
[010] Adicionalmente, os presentes inventores fizeram uma série de descobertas que ajudaram a guiar o desenvolvimento da invenção. Em primeiro lugar, os presentes inventores descobriram que alterações no planejamento molecular do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) podem ter efeitos diferentes sobre a eficácia antimicrobiana e as toxicidades in vivo-, em segundo lugar, os presentes inventores descobriram que alterações na formulação do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) podem ter efeitos diferentes sobre a eficácia antimicrobiana e as toxicidades in vivo·, e em terceiro lugar, os presentes inventores descobriram que a esterilização das preparações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) pode afetar de forma adversa a integridade molecular e as propriedades biofísicas e dessa maneira afetar a eficácia antimicrobiana, as toxicidades ou as duas coisas. Assim, os presentes inventores descobriram uma combinação de problemas para os quais foram desenvolvidas agora soluções.
[011] Em várias modalidades, são fornecidas composições
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 66/137
5/75 farmacêuticas e métodos de uso que permitem aplicações locais de doses eficientes do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) em vários locais dos tecidos e/ou em vários cenários patofisiológicos com baixo risco de toxicidades local e/ou sistêmica. Sem limitar o âmbito da invenção, em várias modalidades isto é conseguido através de um ou mais de (A), (B) e (C), como a seguir:
[012] (A) Planejamento do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s), especialmente conteúdo hidrofóbico e arranjo de sequência, para promover maior viscosidade em água. Inesperadamente, foi descoberto que esta característica de planejamento aumenta a segurança in vivo.
[013] (B) Formulação de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) em composições farmacêuticas de uma maneira que os permite exibir propriedades que aumentam a viscosidade. Sem limitar o âmbito da invenção, acredita-se que esta abordagem tenha o efeito de aprimorar a cobertura do tecido e/ou de aumentar o tempo de retenção, fornecendo maior eficácia para uma dose aplicada. Em adição, foi observado inesperadamente que tais aprimoramentos na formulação aumentam a segurança. Sem limitar o âmbito da invenção, os excipientes podem incluir sais tais como cloreto de sódio e cloreto de potássio, açúcares e álcoois de açúcar tais como dextrose, manitol, glicerol, xilitol e sorbitol, tensoativos e combinações dos mesmos.
[014] (C) Esterilização das composições farmacêuticas de uma maneira que permita que a composição farmacêutica esterilizada exiba uma viscosidade comparável à viscosidade da composição farmacêutica não esterilizada. Sem limitar o âmbito da invenção, acredita-se que esta
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 67/137
6/75 abordagem tenha o efeito de proteger a estrutura molecular e a função do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s), bem como de reduzir o risco de contaminação do produto por certos organismos microbianos (por exemplo, dermatófitos fúngicos) que podem exibir resistência aos efeitos do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s).
[015] Uma modalidade fornece uma composição farmacêutica antimicrobiana, que compreende: um carreador aquoso; e polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) disperso(s) no carreador aquoso a uma concentração na faixa de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 5%, em peso com base no peso total da composição farmacêutica antimicrobiana. Em uma modalidade, o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) compreende(m) um grande número de unidades de aminoácidos carregados positivamente em pH neutro. Em uma modalidade, o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) a uma concentração de 2 % em peso em água deionizada tem(têm) uma viscosidade a 37°C de 2 centistokes (cSt) ou superior. Em uma modalidade, o carreador aquoso, que contém o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) a 2 % em peso, tem uma viscosidade a 37°C que é maior que aquela do carreador aquoso que contém albumina a 2 % em peso no lugar do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s). Em uma modalidade, o carreador aquoso, que contém o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) a 2 % em peso, tem uma viscosidade a 37°C que é pelo menos aproximadamente 20% maior que aquela do carreador aquoso que contém albumina a 2 % em peso no lugar do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s). Em uma modalidade, o carreador aquoso,
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 68/137
7/75 que contém o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) a 2 % em peso, tem uma viscosidade a 37°C que é pelo menos aproximadamente 50% maior que aquela do carreador aquoso que contém albumina a 2 % em peso no lugar do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s). Em uma modalidade, o carreador aquoso, que contém o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) a 2 % em peso, tem uma viscosidade a 37°C que é pelo menos aproximadamente 100% maior que aquela do carreador aquoso que contém albumina a 2 % em peso no lugar do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s). Em uma modalidade, a composição farmacêutica antimicrobiana tem uma toxicidade baixa após ser infundida na cavidade peritoneal de um grande número de camundongos adultos jovens saudáveis a uma dose de 10 mL/kg, que é medida por uma taxa de sobrevivência dos camundongos de 50% ou superior em 72 horas.
[016] Outra modalidade fornece um método de prevenção de contaminação microbiana de tecidos, que não são a pele saudável intacta, que compreende: a identificação de um indivíduo mamífero que tem um local do tecido que não é a pele saudável intacta que está em risco de contaminação microbiana; e a administração de uma composição farmacêutica antimicrobiana que é descrita aqui no local em uma quantidade eficiente para proteger pelo menos parcialmente o local do tecido de se ser contaminado com micro-organismos.
[017] Outra modalidade fornece um método de redução de carga microbiana dentro ou sobre os tecidos, que não são a pele saudável intacta, que compreende: a identificação de um indivíduo mamífero que tem um local do tecido que não é a pele saudável intacta que tem uma carga microbiana; e a administração de uma composição farmacêutica
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 69/137
8/75 antimicrobiana que é descrita aqui no local do tecido em uma quantidade eficiente para reduzir pelo menos parcialmente a carga microbiana.
[018] Estas e outras modalidades são descritas em maiores detalhes a seguir.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS [019] A Figura 1. Ilustração esquemática do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) com vários arranjos de sequências de aminoácidos. Certos arranjos podem ser referidos como blocos ou segmentos.
[020] A Figura 2. Polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) categorizado(s) em três grupos com base nos comprimentos dos segmentos catiônicos (número de unidades de aminoácidos).
[021] A Figura 3. Exemplos do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) categorizado(s) nos grupos (I) Polipeptídeo(s) de Segmentos Catiônicos Longos (> 200 unidades), (II) Polipeptídeo(s) de Segmentos Catiônicos Médios (100 a 199 unidades) e (III) Polipeptídeo(s) de Segmentos Catiônicos Curtos (10-99 unidades). O segmento catiônico contém um grande número de unidades de aminoácidos catiônicos, mas não precisa ser composto inteiramente de unidades de aminoácidos catiônicos. O segmento hidrofóbico contém um grande número de unidades de aminoácidos hidrofóbicos, mas não precisa ser composto inteiramente de unidades de aminoácidos hidrofóbicos.
[022] A Figura 4. Exemplo de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) com arranjo de sequências em blocos catiônicos-hidrofóbicos com base em lisina e em unidades de aminoácidos L-leucina enanciopuras. O comprimento de cadeia total médio da preparação
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 70/137
9/75 polipeptídica é de aproximadamente 160 unidades de aminoácidos. Foi descoberto que a proporção de lisina para leucina ou a proporção de K:L, é de 3,2. O polipeptídeo catiônico sintético é denominado KL-160/3.2. A análise com cromatografia por exclusão de tamanho exibe duas curvas sobrepostas com base em duas injeções. Capacidade de dispersão (D) = massa molar ponderai média (Mw) / massa molar numérica média (Mn).
[023] A Figura 5. Ensaio antimicrobiano do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) do grupo de exemplo 2 (Segmento Catiônico Médio) com uma arquitetura em blocos de lisina-leucina enanciopura e comprimento de cadeia total de aproximadamente 160 com uma proporção de K:L de 3,2. O polipeptídeo catiônico sintético é denominado KL160/3.2. Ensaios de morte com tempo de sessenta minutos in vitro foram utilizados para determinar a atividade microbicida (redução log de UFC) contra S. aureus (ATCC 6538), P. aeruginosa (ATCC 27853) e C. albicans (ATCC 24433) em concentrações de amostra diferentes de 1,6 qg/mL a 100 qg/mL (Lote BAC003).
[024] A Figura 6. Sumário de vários ensaios de morte com o tempo antimicrobianos com polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL160/3.2 contra uma variedade de micro-organismos. Testes de morte com tempo de 60 minutos realizados com concentração de polipeptídeo catiônico sintético de 100 qg/mL (Lote BAC003). O termo redução de UFC de “100%” indica que nenhum micro-organismo foi detectado. MDR=resistente a várias drogas; ESBL=3-lactamase de espectro prolongado; KPC=K pneumoniae carbapenemase. Negrito = Center for Disease Control (CDC) “Biggest Threats”; *Isolados clínicos, R.M. Alden Research Laboratory.
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 71/137
10/75 [025] A Figura 7. Exemplo de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) com arranjo de sequências em blocos catiônicos-hidrofóbicos com base em lisina e unidades de aminoácidos D,L-leucina racêmicas. O comprimento de cadeia total médio da preparação polipeptídica é de aproximadamente 100 unidades de aminoácidos. A proporção de lisina para leucina ou a proporção de K:L, foi descoberta como sendo de 5.7. O polipeptideo catiônico sintético é denominado KrL-100/5.7. A análise com cromatografia por exclusão de tamanho exibe duas curvas sobrepostas com base em duas injeções. Capacidade de dispersão (D) = massa molar ponderai média (Mw) / massa molar numérica média (Mn).
[026] A Figura 8. Ensaio antimicrobiano do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) do grupo de exemplo 3 (Segmento Catiônico Curto) com uma arquitetura em blocos de lisina-leucina racêmica e comprimento de cadeia total de aproximadamente 100 com uma proporção de K:(rac-L) de 5,7. A molécula é denominada KrL-100/5.7. Ensaios de morte com tempo de sessenta minutos in vitro foram utilizados para determinar a atividade microbicida (redução log de UFC) contra agentes patogênicos importantes em concentrações de amostra diferentes de 1,6 qg/mL a 100 qg/mL (Lote BAC002).
[027] A Figura 9. Sumário dos vários ensaios de morte com tempo antimicrobianos com polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL100/5.7 contra uma variedade de micro-organismos. Testes de morte com tempo de 60 minutos realizados com concentração de polipeptideo catiônico sintético de 100 qg/mL (Lote BAC002). O termo redução de UFC de “100%” indica que nenhum micro-organismo foi detectado. MDR=resistente a várias drogas; ESBL=3-lactamase de espectro prolongado; KPC=K pneumoniae carbapenemase. Negrito = Center for
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 72/137
11/75
Disease Control (CDC) “Biggest Threats”; *Isolados clínicos, R.M. Alden Research Laboratory.
[028] A Figura 10. Polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) com um arranjo de sequências em blocos pode(m) ser planejado(s) e formulado(s) para automontagem em estruturas multiméricas. Dois exemplos são representados aqui: KL-160/3.2 foi planejado para automontagem em estruturas fibrilares e formar hidrogéis em barreira e KrL-100/5.7 foi planejado para automontagem em estruturas micelares e ter propriedades tensoativas.
[029] A Figura 11. Concentração de Agregação Crítica (CAC) de (vários) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) que é medida pelo método de fluorescência do pireno.
[030] A Figura 12. Concentração de Agregaçao Crítica (CAC) do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL-100/5.7 (Lote BAC002), que é medida pelo método de tensão superficial. Cinza representa tensão superficial em relação à concentração; preto representa a linha de melhor ajuste para dois conjuntos de valores. A CAC é determinada neste ensaio pela interseção das duas linhas de melhor ajuste, mostrada aqui em -100 qg/mL.
[031] As Figuras 13Λ-Β. (a) Viscosidade cinemática de (vários) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) em água a 1 % em peso e medida utilizando viscosímetros capilares de vidro (viscosímetros Ubbelohde) a uma temperatura de 37°C. (b) Viscosidade cinemática de KrL-100/5.7 (lote BAC002) vs. albumina do soro bovino; a água é fornecida para referência. Os dados indicam que a estas concentrações a albumina tem pouco impacto sobre a viscosidade de preparações aquosas.
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 73/137
12/75 [032] A Figura 14. Viscosidade cinemática do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) com um arranjo de sequências em blocos de lisina-L-leucina (KL) em água a 0,5 % em peso e medida utilizando viscosímetros capilares de vidro (viscosímetros Ubbelohde) a uma temperatura de 37°C.
[033] A Figura 15. Viscosidade cinemática de vários polipeptídeos catiônicos sintéticos com um arranjo de sequências em blocos de lisina-L-leucina (KL) e lisina-D,L-leucina (KrL) em água a 1 % em peso e 2 % em peso e medida utilizando viscosímetros capilares de vidro (viscosímetros Ubbelohde) a uma temperatura de 40°C.
[034] A Figura 16. Viscosidade dinâmica do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-120/2.5 a 1,5 % em peso, 2,0 % em peso e 3,0 % em peso em água avaliada contra força de cisalhamento crescente. Medida ao longo de 2 min utilizando um viscosímetro giratório Brookfield RVDV (EQ-AL-2014-16) com eixo de tamanho 14 e câmara de tamanho 6R à temperatura ambiente.
[035] As Figuras 17A-D. O exemplo de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-120/2.5 forma soluções viscosas e hidrogéis em água. KL-120/2.5 preparado em água Dl a concentrações de 0,5 % em peso, 1,0 % em peso, 1,5 % em peso, 2,0 % em peso e 3,0 % em peso e avaliado em relação à formação de gel através do teste de inclinação do tubo, à firmeza através da análise da textura e à viscosidade, (a) Estudo de gelatinização visual através do teste de inclinação do tubo, (b) A firmeza dependente da concentração em água que é medida pela análise da textura. Os valores de firmeza foram obtidos em uma profundidade da sonda de 8 mm. A figura de suplemento representa 2 % em peso de KL
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 74/137
13/75
120/2.5 em água aplicados em um substrato de pele artificial (VITROSKIN; IMS Inc.). (c) Representação gráfica que mostra a alteração nas propriedades físicas com concentração crescente de KL-120/2.5 (branco = fluido; preto = gel firme); com base nos dados provenientes da viscosimetria para 0,5 % em peso e 1,0 % em peso e dados provenientes da análise da textura e do teste de inclinação do tubo para as concentrações maiores, (d) KL-120/2.5 a 1,5 % em peso em água resiste à penetração por duas esferas de aço inoxidável diferentes (BBs).
[036] A Figura 18. Lista parcial de excipientes (aditivos) não iônicos farmaceuticamente aceitáveis que podem ser utilizados nas preparações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) e composições farmacêuticas antimicrobianas contendo as mesmas.
[037] A Figura 19. Viscosidade dinâmica do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-120/2.5 (BAC004) a 2,0 % em peso em água, 4,5% de manitol aquoso, 2,33% de glicerol aquoso ou 2,8% de histidina aquosa, avaliada contra a força de cisalhamento crescente. Medida ao longo de 2 minutos utilizando um viscosímetro giratório Brookfield RVDV (EQ-AL-2014-16) com eixo de tamanho 14 e câmara de tamanho 6R à temperatura ambiente.
[038] A Figura 20. Viscosidade cinemática de dois exemplos de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) com um arranjo de sequências em blocos de lisina-L-leucina (KL) e lisina-D,L-leucina (KrL) preparados em água a 1 % em peso em água apenas, 0,9% de solução salina ou 4,4% de xilitol aquoso. Medida utilizando viscosímetros capilares de vidro (viscosímetros Ubbelohde) a uma temperatura de 40°C.
[039] A Figura 21. Viscosidade dinâmica de preparações do(s)
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 75/137
14/75 polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-120/2.5 (BAC004) a 2,0 % em peso em 4,5% de manitol e água, avaliada contra a força de cisalhamento crescente. Medida ao longo de 2 minutos utilizando um viscosímetro giratório Brookfield RVDV (EQ-AL-2014-16) com eixo de tamanho 14 e câmara de tamanho 6R à temperatura ambiente.
[040] A Figura 22. Ê mostrado que um exemplo de preparação de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL-120/5.0 reduz a tensão superficial através da comparação com dois outros agentes antimicrobianos catiônicos, gluconato de clorhexidina (CHG) e polihexametileno biguanida (PHMB). As amostras foram preparadas a 0,1 mM e avaliadas utilizando ο TA.XT2 Texture Analyzer com uma célula de carga de 500 g, anel Du Noury de 5 cm de diâmetro e velocidade da sonda de 0,2 mm/s à temperatura ambiente.
[041] A Figura 23. Tensão superficial de várias preparações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) em água. As amostras foram preparadas em 0,1 mM e avaliadas utilizando TA.XT2 Texture Analyzer com uma célula de carga de 500 g, anel Du Noury de 5 cm de diâmetro e velocidade da sonda de 0,2 mm/s à temperatura ambiente.
[042] As Figuras 24Λ-Β. Propriedades tensoativas de KrL100/5.7. (a) Tensão superficial de KrL-100/5.7 aquoso (Lote BAC002) 10 mg/mL (1 % em peso) através de um tensiômetro equipado com um anel Du Nouy quando comparado com a água, (b) Tensão interfacial de KrL100/5.7 a 1 % em peso em água com n-hexano ao longo de 10 minutos.
[043] A Figura 25. Tensão superficial: efeito do ácido acético como um aditivo. Exemplo de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL130/3.3 (Lote 77) e KL-130/3.3 (Lote 72) com tensão superficial menor
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 76/137
15/75 quando preparado em água ou água com 0,25% ou 1,0% de ácido acético. A adição de ácido acético tem um efeito aditivo.
[044] A Figura 26. Tensão interfacial: efeito do ácido acético como um aditivo. Exemplo de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL130/3.3 (Lote 77) e KL-130/3.3 (Lote 72) com tensão interfacial menor quando preparado em água ou água com 0,25% ou 1,0% de ácido acético. A adição de ácido acético tem um efeito aditivo.
[045] As Figuras 27A-B. Propriedades de emulsificação. O exemplo de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL-100/5.0 e KrL160/3.2 em água forma emulsões estáveis quando misturado com óleo de soja, (a) Fotografia do ensaio que demonstra interfaces de emulsão/líquido (setas brancas); b) índice de emulsão (E24; % de emulsão em 24 horas).
[046] A Figura 28. Propriedades de emulsificação em água, solução salina e xilitol. O exemplo de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL-110/4.0 (Lote D-301-37-05) e KL-100/5.7 (Lote D-301-6703) preparado em água, solução salina (0,9%) ou xilitol (4,4%) forma emulsões estáveis quando misturado com óleo de soja.
[047] A Figura 29. Avaliação dos resultados do modelo de irritação dérmica de coelho. Foram observadas respostas insignificantes na pele intacta e esfolada após a aplicação de várias formulações e concentrações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-140/2.5 ou KrL-120/5.0. Cada coelho (New Zealand White, N=3 por artigo de teste) tinha um total de 8 locais: 2 de controle intacto, 2 de artigo de teste intacto, 2 locais de controle esfolado e 2 locais de artigo de teste esfolado. Cada local tinha aproximadamente 2,5x2,5cm e recebeu 0,5 mL de artigo de teste durante 24 h. Os locais foram classificados em 1 h, 24 h, 48 h e
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 77/137
16/75 h em relação a eritema, edema e formação de escara.
[048] A Figura 30. Avaliação dos resultados de sensibilização dérmica de porquinhos da índia. Nenhuma alteração visível foi observada após a aplicação de KL-140/2.5 (lote 73) ou KrL-120/5.0 (lote 93) a 1 % em peso em água. Hartley Albino Guinea Pigs (n= 11 para grupos de teste, n=6 para controle positivo, n=6 para controle negativo) foram expostos a 0,3 mL de artigo de teste 6 h/dia durante 3 dias consecutivos por semana durante 3 semanas. As exposições ao desafio foram realizadas em 14 +/- 1 dias após a última exposição de indução. Os locais das doses foram classificados em 24 e 48 h após a remoção da atadura com o desafio.
[049] A Figura 31. Avaliação dos resultados de toxicidade oral em ratos. Nenhuma anormalidade observada após a administração de KL140/2.5 em água ou KrL-120/5.0 em água aos ratos em doses variando de 0,625 mg/kg a 160 mg/kg através de ingestão oral forçada. 2 mL foram administrados por rato Sprague Dawley macho (N=5 por grupo). As observações clínicas foram realizadas durante três dias.
[050] A Figura 32. Avaliação da toxicidade sistêmica em camundongos após a administração intraperitoneal. Os camundongos CD1 receberam injeção intraperitoneal de 40 mL/kg de água ou artigos de teste K-100, KL-140/2.5-RAN ou KrL-120/5.0 diluídos em água a 2 % em peso. A dose final por animal era 800 mg/kg. N=5 camundongos CD-I por grupo. As observações clínicas foram realizadas durante três dias.
[051] A Figura 33. Avaliação da toxicidade sistêmica em camundongos após a administração intraperitoneal. Os camundongos CD1 receberam injeção intraperitoneal de 40 mL/kg de solução salina ou KrL130/3.3 diluído em água em várias concentrações. As doses finais por
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 78/137
17/75 animal variavam de 12,5 mg/kg a 800 mg/kg. N=5 camundongos CD-I por grupo. As observações clínicas foram realizadas durante três dias.
[052] A Figura 34. Avaliação da toxicidade sistêmica em camundongos após a administração intraperitoneal. Os camundongos CD1 receberam injeção intraperitoneal de 40 mL/kg de água ou KrL-120/5.0 Lote 93 ou Lote 94 diluído em água em várias concentrações. As doses finais por animal variavam de 50 mg/kg a 800 mg/kg. N=5 camundongos CD-I por grupo. As observações clínicas foram realizadas durante três dias.
[053] A Figura 35. Avaliação da toxicidade sistêmica em camundongos após a administração intraperitoneal. Os camundongos CD1 receberam injeção intraperitoneal de 40 mL/kg de água ou KL-170/3.3 ou KL-140/2.5 diluído em água em várias concentrações. As doses finais por animal variavam de 6,25 mg/kg a 400 mg/kg. N=5 camundongos CD1 por grupo. As observações clínicas foram realizadas durante três dias.
[054] A Figura 36. Avaliação da toxicidade sistêmica em camundongos após a administração intraperitoneal. Os camundongos CD1 receberam injeção intraperitoneal de 40 mL/kg de água ou KL-140/2.5 em várias formulações e concentrações. As doses finais por animal variavam de 1,25 mg/kg a 400 mg/kg. N=5 camundongos CD-I por grupo. As observações clínicas foram realizadas durante três dias.
[055] A Figura 37. Avaliação da toxicidade sistêmica em camundongos após a administração intraperitoneal. Os camundongos CD1 receberam injeção intraperitoneal de 40 mL/kg de água ou KrL-120/5.0 em várias formulações e em inúmeras concentrações. As doses finais por animal variavam de 50 mg/kg a 800 mg/kg. N=5 camundongos CD-I por
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 79/137
18/75 grupo. As observações clínicas foram realizadas durante três dias.
[056] A Figura 38. Cromatogramas de SEC de KL-140/2.5 (lote 73) pré-esterilização gama e pós-esterilização gama com uma dose de 25-40 kGy. Os dados indicam ruptura na estrutura molecular após a irradiação gama.
[057] A Figura 39. Cromatogramas de SEC de KL-120/5.0 (lote 94) pré-esterilização gama e pós-esterilização gama com uma dose de 25-40 kGy. Os dados indicam ruptura na estrutura molecular após a irradiação gama.
[058] A Figura 40. Cromatogramas de SEC de KL-160/3.2 (lote BAC003) pré-esterilização com feixes de E e pós-esterilização com feixes de E com uma dose de 25 kGy. Os dados indicam ruptura na estrutura molecular após a esterilização com feixes de E.
[059] A Figura 41. Análise da textura de dois lotes de KL140/2.5 (73 e 95) pré-esterilização gama e pós-esterilização gama com uma dose de 25-40 kGy. Medida utilizando um analisador de textura TA.XT2 com uma velocidade da sonda de 0,5 mm/s. Os dados indicam uma redução na firmeza da maioria destas composições após a irradiação gama.
[060] A Figura 42. Cromatogramas de SEC de KL-140/2.5 (lote 73) preparado em água pré-esterilização na autoclave e pósesterilização na autoclave. Os dados indicam a manutenção da estrutura molecular após a esterilização na autoclave.
[061] A Figura 43. Cromatogramas de SEC de KL-120/5.0 (lote 94) preparado em água pré-esterilização na autoclave e pós
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 80/137
19/75 esterilização na autoclave. Os dados indicam a manutenção da estrutura molecular após a esterilização na autoclave.
[062] A Figura 44. Cromatogramas de SEC de KL-160/3.2 (lote BAC003) preparado a 2% em peso em água pré-esterilização na autoclave e pós-esterilização na autoclave. Os dados indicam a manutenção da estrutura molecular após a esterilização na autoclave.
[063] A Figura 45. Cromatogramas de SEC de KL-160/3.2 (lote BAC003) preparado a 2% em peso em água com 2% de propileno glicol pré-esterilização, pós-esterilização na autoclave e pós-esterilização por filtração. Os dados indicam a manutenção da estrutura molecular após a esterilização na autoclave e após a esterilização com filtro.
[064] A Figura 46. Cromatogramas de SEC de KL-160/3.2 (lote BAC003) preparado a 2% em peso em água com 2,33% de glicerol pré-esterilização, pós-esterilização na autoclave e pós-esterilização por filtração. Os dados indicam a manutenção da estrutura molecular após a esterilização na autoclave e após a esterilização com filtro.
[065] A Figura 47. Viscosidade dinâmica do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-120/2.5 (lote BAC004) a 2,0 % em peso em água com 2,1% de propileno glicol pré- é pós-esterilização com filtro. Medida ao longo de 2 minutos utilizando um viscosímetro giratório Brookfield RVDV (EQ-AL-2014-16) com eixo de tamanho 21 e câmara de tamanho 13R à temperatura ambiente.
[066] A Figura 48. Viscosidade dinâmica do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-160/3.2 (lote BAC003) a 2,0 % em peso em água pré- e pós-esterilização na autoclave. Medida ao longo de 2 minutos utilizando um viscosímetro giratório Brookfield RVDV (EQ-AL-2014-16).
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 81/137
20/75 [067] A Figura 49. Viscosidade dinâmica do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-160/3.2 (lote BAC003) a 2,0 % em peso em água com 2,33% de glicerol pré- e pós-esterilização na autoclave. Medida ao longo de 2 minutos utilizando um viscosímetro giratório Brookfield RVDV (EQ-AL-2014-16).
[068] A Figura 50. Análise da textura de dois lotes do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-140/2.5 (98 e 99) a 1 e 2 % em peso em água com e sem 1% de hidroxietil celulose (HEC) pré-esterilização na autoclave e pós-esterilização na autoclave. Medida utilizando um analisador de textura TA.XT2 com uma velocidade da sonda de 2 mm/s. Os dados indicam uma manutenção da propriedade benéfica de firmeza após a autoclavagem. Alguma redução total na firmeza é observada nas preparações com concentrações mais altas e nas preparações formuladas com HEC.
[069] A Figura 51. Análise da textura do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-140/2.5 (lote 99) a 1 % em peso em água com 1 % em peso de hidroxipropil celulose (HPC), hidroxipropil metilcelulose (HPMC) ou metilcelulose (MC) pré-esterilização na autoclave e pósesterilização na autoclave. Medida utilizando um analisador de textura TA.XT2 com uma velocidade da sonda de 2 mm/s.
[070] A Figura 52. Redução da tensão superficial por preparações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL-120/5.0 (lote 94) em água pré- e pós-esterilização na autoclave. As amostras foram preparadas a 0,1 mM e avaliadas utilizando ο TA.XT2 Texture Analyzer com uma célula de carga de 500 g, anel Du Nouy de 5 cm de diâmetro e velocidade da sonda de 0,2 mm/s à temperatura ambiente.
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 82/137
21/75 [071] A Figura 53. Representação gráfica da classificação de feridas.
[072] As Figuras 54Λ-Β. Resultados do tratamento préinoculação microbiana no modelo de pele de suínos ex vivo. Propriedades de barreira antimicrobiana de preparações de KL-120/2.5 (lote BAC003) e KL-160/3.2 (lote BAC004) demonstradas sobre a pele de suínos ex vivo. Os dados mostram UFC log de P. aeruginosa sobrevivente 3 horas após a inoculação de explantes de pele que foram pré-tratados durante 30 minutos com água (controle; N=8) ou pré-tratados com (a) 0,5-2,0 % em peso de KL-120/2.5 (N=8) ou (b) 0,5-2,0 % em peso de KL-160/3.2 (N=8). No grupo “não inclinado”, os explantes permaneceram horizontais ao longo de todo o pré-tratamento com polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) preparações; no grupo “inclinado”, os explantes foram inclinados 90° para uma posição vertical durante 15 minutos para promover o escoamento do revestimento da preparação do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antes da inoculação. *nenhum micro-organismo detectado. As barras de erro representam SEM.
[073] As Figuras 55Λ-Β. Resultados de tratamento préinoculação microbiana no modelo de ferida aberta de suínos. As preparações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-160/3.2 (lote BAC003) previnem a contaminação microbiana em um modelo de suínos (N=5 feridas; 4 para “N.I.”). a) S. epidermidis b) P. aeruginosa. N.I. = Sem inoculação. As feridas em sua espessura total foram pré-tratadas com 1,0 mL de KL-160/3.2 nas concentrações mostradas ou água 15 min antes da inoculação com uma cultura mista de S. epidermidis e P. aeruginosa. As contagens microbianas totais, bem como as contagens seletivas de S. epidermidis e P. aeruginosa, foram avaliadas depois de 4 horas. Em todos
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 83/137
22/75 os casos, a diferença entre o controle e KL-160/3.2 era significativa em p<0,01. *Nenhum micro-organismo detectado.
[074] As Figuras 56Λ-Β. Resultados de tratamento préinoculação microbiana no modelo de ferida aberta de suínos. KL-160/3.2 (lote BAC003) previne a contaminação microbiana em um modelo de suínos (N=4 feridas por grupo), a) S. epidermidis b) P. aeruginosa. As feridas em sua espessura total foram pré-tratadas com 1,0 mL de KL160/3.2 nas concentrações mostradas ou com água 24 h, 4 h ou 1 h antes da inoculação com uma cultura mista de S. epidermidis e P. aeruginosa. As contagens microbianas totais, bem como as contagens seletivas de S. epidermidis e P. aeruginosa, foram avaliadas 4 horas após a inoculação.
[075] As Figuras 57A-B. Resultados de tratamento préinoculação microbiana no modelo de ferida fechada de roedores com tela cirúrgica. KL-160/3.2 (lote BAC003) (1 % em peso em água) exibe atividade contra (a) MRSA (ATCC 33593) e (b) P. aeruginosa (ATCC 27317) em um modelo de ferida fechada de roedores com corpo estranho (KL160/3.2 N=6; Controle N=8; ratos Sprague-Dawley). UFC log mostrada por grama de tecido para amostras para biópsia e por tela de polipropileno implantada. As preparações de KL-160/3.2 foram aplicadas 15 min antes da inoculação microbiana; a carga microbiana foi avaliada após 48 h. As diferenças entre os grupos de controle e de KL-160/3.2 para ambos os micro-organismos era significativa em p<0,0001. *Nenhum microorganismo detectado.
[076] A Figura 58. Atividade antibiofilme. Ensaio da concentração mínima de erradicação do biofilme (MBEC) do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL-100/5.7 (lote BAC002).
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 84/137
23/75
Atividade contra P. aeruginosa (ATCC BAA-47) nos biofilmes. Os biofilmes de P. aeruginosa foram expostos a concentrações diferentes do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) (0,001%, 0,01%, 0,1% e 1,0% em água) durante 20 min ou 3 h e as amostras foram processadas para a medida das unidades formadoras de colônia (UFC). * = nenhum microorganismo detectado.
[077] A Figura 59. Atividade antibiofilme. Ensaio da concentração mínima de erradicação do biofilme (MBEC) de preparações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL-100/5.7 (Lote BAC002) e KL-100/5.7 (Lote D-301-67-03). Atividade contra P. aeruginosa (ATCC BAA-47) nos biofilmes. Os biofilmes de P. aeruginosa foram expostos a concentrações diferentes das preparações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) em água (0,01%, 0,1% e 1,0%) durante 3 h e as amostras foram processadas para a medida das unidades formadoras de colônia (UFC).
[078] A Figura 60. Resultados do tratamento pós-inoculação microbiana no modelo de ferida fechada de roedores com tela cirúrgica. As preparações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL-100/5.7 (lote BAC002) exibem atividade contra MRSA (ATCC 33593) em um modelo de ferida fechada de roedores com corpo estranho (KrL-100/5.7 N=6; Controle N=8; ratos Sprague-Dawley). Sobrevivência com UFC log mostrada por grama de tecido para amostras para biópsia e por tela de polipropileno implantada. As preparações de KrL-100/5.7 (0,01%, 0,1% e 1,0%) foram aplicadas 15 minutos após a inoculação microbiana; a carga microbiana foi avaliada após 48 horas. Os dados são apresentados como a média + SEM. *Nenhum micro-organismo detectado.
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 85/137
24/75 [079] As Figuras 61Λ-Β. Resultados do tratamento pósinoculação microbiana no modelo de ferida fechada de roedores com tela cirúrgica, (a) Histopatologia de biópsias de tecido e tela com inoculação de MRSA. As amostras foram processadas para histologia e foram coradas com H&E. (b) Os escores de inflamação foram determinados por análise microscópica por um patologista veterinário experiente.
[080] A Figura 62. Resultados do tratamento pós-inoculação microbiana no modelo de ferida fechada de roedores com tela cirúrgica. As preparações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL-100/5.7 (lote BAC002) exibem atividade contra P. aeruginosa (ATCC 27317) em um modelo de ferida fechada de roedores com corpo estranho (KrL-100/5.7 N=6; Controle N=8; ratos Sprague-Dawley). Sobrevivência com UFC log mostrada por grama de tecido para amostras para biópsia e por tela de polipropileno implantada. As preparações de KrL-100/5.7 (0,01%, 0,1% e 1,0%) foram aplicadas 15 minutos após a inoculação microbiana; a carga microbiana foi avaliada após 48 horas. Os dados são apresentados como a média + SEM. *Nenhum micro-organismo detectado.
[081] As Figuras 63Λ-Β. Resultados do tratamento pósinoculação microbiana no modelo de ferida fechada de roedores com tela cirúrgica, (a) Histopatologia de biópsias de tecido e tela com inoculação de P. aeruginosa. As amostras foram processadas for histologia e foram coradas com H&E. (b) Os escores de inflamação foram determinados por análise microscópica por um patologista veterinário experiente.
DESCRIÇÃO DETALHADA
Definições [082] Como utilizado aqui no contexto da descrição de
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 86/137
25/75 polipeptídeos catiônicos sintéticos antimicrobianos, o termo “antimicrobiano” tem seu significado usual que é entendido pelos peritos na técnica e inclui assim um polipeptídeo que exibe atividade microbiocida que é determinada por um teste de morte com tempo de 60 minutos contra pelo menos uma bactéria selecionada do grupo que consiste de S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa e E. coli.
[083] Como utilizado aqui no contexto da descrição de polipeptídeos catiônicos sintéticos antimicrobianos, o termo “polipeptídeo” tem seu significado usual que é entendido pelos peritos na técnica e inclui assim um polímero que compreende duas ou mais unidades de aminoácidos repetidos (também referidas como resíduos de aminoácidos ou mais simplesmente unidades ou resíduos) ligadas entre si por ligações peptídicas. Um copolipeptídeo é um tipo de polipeptídeo que compreende duas ou mais unidades diferentes de aminoácidos repetidos. Os pesos moleculares de polímeros são o peso médio que é determinado por cromatografia por exclusão de tamanho (SEC) com padrões de peso molecular ou utilizando detecção de espalhamento de luz.
[084] O termo copolipeptídeo em “blocos” ou “maciço” tem seu significado usual que é entendido pelos peritos na técnica e inclui assim um arranjo de sequências de unidades de aminoácidos que inclui um segmento (“bloco”) ou segmentos que tem pelo menos 10 unidades de aminoácidos de comprimento no qual o copolipeptídeo é relativamente enriquecido em uma ou mais das unidades de aminoácidos quando comparado com a composição total do copolipeptídeo. Em geral, copolipeptídeos em blocos sintéticos têm um arranjo de sequências que reflete o controle deliberado em relação ao processo de copolimerização. Similarmente, o termo copolipeptídeo “aleatório” tem seu significado usual
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 87/137
26/75 que é entendido pelos peritos na técnica e inclui assim um arranjo de sequências de unidades de aminoácidos que é uma distribuição estatística que reflete a concentração dos monômeros de aminoácidos correspondentes na mistura de polimerização.
[085] Como utilizado aqui no contexto da descrição de copolipeptídeos catiônicos em blocos sintéticos antimicrobianos, o termo bloco “hidrofóbico” tem seu significado usual que é entendido pelos peritos na técnica e inclui assim um arranjo de sequências no qual um bloco ou um segmento contém um grande número de unidades de aminoácidos hidrofóbicos. Exemplos de unidades de aminoácidos hidrofóbicos são conhecidos pelos peritos na técnica e incluem glicina (G), leucina (L), isoleucina (I), valina (V), prolina (P), triptofano (W), cisteína (C), metionina (M), fenilalanina (F) e alanina (A). Similarmente, o termo bloco “hidrofílico” tem seu significado usual que é entendido pelos peritos na técnica e inclui assim um arranjo de sequências no qual um bloco ou um segmento contém um grande número de unidades de aminoácidos hidrofílicos. Exemplos de unidades de aminoácidos hidrofílicos são conhecidas pelos peritos na técnica e incluem serina (S), treonina (T), ácido aspártico (D) e ácido glutâmico (E), bem como os aminoácidos carregados positivamente lisina (K), arginina (R), histidina (H) e ornitina (O).
[086] Como utilizado aqui no contexto da descrição de polipeptideos catiônicos sintéticos antimicrobianos, os termos “carregados positivamente” e “catiônicos” têm seus significados usuais que são entendidos pelos peritos na técnica e incluem assim uma unidade de aminoácido ou um polipeptideo que é positivamente carregado em pH neutro. Exemplos de unidades de aminoácidos que são positivamente carregadas em pH neutro incluem lisina, arginina, histidina e ornitina e
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 88/137
27/75 assim a presença de uma ou mais destas unidades positivamente carregadas no polipeptídeo (em uma quantidade em excesso de quaisquer unidades catiônicas) pode tornar o polipeptídeo catiônico.
[087] Como utilizado aqui no contexto da descrição de uma composição farmacêutica antimicrobiana esterilizada, o termo “esterilizada” tem seu significado usual que é entendido pelos peritos na técnica e inclui assim uma composição que foi submetida a um processo de esterilização ou processos que têm o efeito de garantir a ausência ou a redução de agentes patogênicos conhecidos na composição até um grau que torna a composição esterilizada clinicamente aceitável para a administração local em um orifício do corpo (tal como a administração intranasal) ou na pele aberta tal como a administração em um ferimento aberto tal como um local cirúrgico. Exemplos não limitantes destes processos de esterilização incluem esterilização com calor (por exemplo, autoclavagem), esterilização por filtração, irradiação e/ou tratamento com agentes químicos tal como óxido de etileno.
[088] Como utilizado aqui no contexto da descrição de um polipeptídeo de automontagem, o termo “automontagem” tem seu significado usual que é entendido pelos peritos na técnica e inclui assim configurações dos polipeptídeos quando dispersos em um meio (tal como os outros ingredientes de uma composição farmacêutica) no qual forças de atração intermoleculares entre certos segmentos ou blocos do polipeptídeo fazem com que tais segmentos ou blocos se liguem frouxamente um com os outros. Por exemplo, como observado na Patente U.S. No. 9.017.730, a automontagem de copolipeptídeos catiônicos em blocos foi observada em solução aquosa, resultando em várias estruturas hierárquicas que dependiam da configuração dos domínios hidrofóbicos e seu efeito sobre as
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 89/137
28/75 interações de atração intermolecular entre as cadeias poliméricas. Em contraste, a Patente U.S. No. 9.017.730 indica que os copolipeptídeos aleatórios não exibiam automontagem. Os peritos na técnica estão a par de várias técnicas para determinar se um polipeptideo catiônico sintético sofre automontagem (ver, por exemplo, a Patente U.S. No. 9.017.730). Quando comparado com um polipeptideo catiônico sintético de outra maneira comparável que exibe arranjos aleatórios em solução diluída e não exibe automontagem, um polipeptideo catiônico sintético de automontagem exibe geralmente uma viscosidade maior.
[089] Como utilizado aqui no contexto da descrição de uma característica ou um parâmetro molecular que promove a automontagem de polipeptídeos, termos tais como “promove” e “promovendo” têm seu significado usual que é entendido pelos peritos na técnica e incluem assim permitir ou aumentar tal automontagem. Por exemplo, as Patentes U.S. Nos. 9.017.730 e 9.446.090 descrevem vários arranjos de sequências de unidades de aminoácidos hidrofóbicos e unidades de aminoácidos hidrofílicos que são configuradas para promover a automontagem de um copolipeptídeo em água. Similarmente, uma técnica de esterilização que é configurada para produzir um estado de esterilização que promove a automontagem de um polipeptideo é uma que permite a automontagem ou aumenta a automontagem quando aplicada em tal polipeptideo ou em uma composição de um polipeptideo que é disperso dentro de um carreador aquoso. Similarmente, uma composição de um carreador aquoso que é selecionada para promover a automontagem de um polipeptideo é uma que permite a automontagem ou aumenta a automontagem quando tal polipeptideo estiver disperso dentro do carreador aquoso.
[090] Como utilizado aqui no contexto da descrição de um
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 90/137
29/75 copolipeptídeo em blocos catiônicos sintéticos de automontagem em comparação a um copolipeptídeo catiônico sintético aleatório de outra maneira comparável, o termo “copolipeptídeo catiônico sintético aleatório de outra maneira comparável” tem seu significado usual que é entendido pelos peritos na técnica e inclui assim copolipeptídeos que têm aproximadamente o mesmo peso molecular e números relativos das mesmas unidades de aminoácidos hidrofóbico e hidrofílicos repetidos que o copolipeptídeo em blocos catiônico sintético de automontagem, exceto pelo fato de que o arranjo de sequências destas unidades de aminoácidos repetidos no copolipeptídeo comparável é aleatório ao invés de em blocos. Por exemplo, em relação a um copolipeptídeo em blocos de automontagem que tem um bloco de lisina (carregada positivamente) hidrofílica com um comprimento médio de aproximadamente 120 unidades e um bloco de leucina hidrofóbica com um comprimento médio de aproximadamente 30 unidades, um copolipeptídeo catiônico sintético aleatório de outra maneira comparável é um que contém uma média de aproximadamente 120 unidades de lisina e aproximadamente 30 unidades de leucina por cadeia do copolipeptídeo exceto pelo fato de que o arranjo de sequências destas unidades ao longo da cadeia do copolipeptídeo aleatório é uma distribuição estatística que reflete a concentração dos monômeros de lisina e leucina na mistura de polimerização.
[091] Como utilizada aqui no contexto da descrição a administração de uma composição farmacêutica antimicrobiana esterilizada em um local no corpo de um mamífero em uma quantidade abundante eficiente para prevenir e/ou tratar pelo menos parcialmente uma infecção, os termos “abundante” e “abundância” têm seu significado usual que é entendido pelos peritos na técnica e incluem assim a
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 91/137
30/75 administração de quantidades do copolipeptídeo que são pelo menos 10 vezes maiores que a dosagem necessária para conseguir o efeito de prevenção e/ou tratamento desejado. Tipicamente, uma dose de tratamento total da composição farmacêutica antimicrobiana que inclui a administração de 1 g do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) ou mais para uma pessoa de 70 kg, que representa 14,3 mg/kg, é considerada como sendo uma administração abundante. Os peritos na técnica reconhecem que os compostos biologicamente ativos são geralmente administrados em uma “janela terapêutica” que inclui uma faixa de doses ao longo da qual é conseguida uma resposta terapêutica desejada sem causar efeitos adversos significativos nos indivíduos aos quais são administrados. Esta faixa de dosagem fica geralmente entre a concentração eficiente mínima (MEC) e a concentração tóxica mínima (MTC) e é tipicamente determinada previamente para cada composto biologicamente ativo e comunicada ao indivíduo e/ou ao profissional da saúde na forma de uma recomendação de dosagem. Entretanto, em algumas situações, tal como a aplicação tópica de uma composição antimicrobiana nos orifícios corporais e/ou nas feridas abertas de indivíduos mamíferos, pode ser impraticável determinar a MEC e assim altamente vantajoso ter flexibilidade para administrar o agente antimicrobiano em abundância. Por exemplo, quando uma ferida aberta é tratada em uma unidade de emergência na qual o tempo pode ser essencial, é altamente vantajoso que um profissional da saúde tenha a flexibilidade de aplicar o agente antimicrobiano na ferida aberta em abundância (por exemplo, em uma quantidade pelo menos dez vezes maior que a MEC) sem ter preocupação em relação à administração de uma quantidade que exceda a MTC. A MEC para uma composição farmacêutica antimicrobiana esterilizada particular pode ser determinada através dos
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 92/137
31/75 métodos conhecidos pelos peritos na técnica, tais como aqueles descritos nos exemplos a seguir (por exemplo, quantidade eficiente para atingir morte com UFC de 3 log em um ensaio de morte com o tempo in vitro).
[092] Como utilizado aqui no contexto da descrição de composições farmacêuticas antimicrobianas que compreendem ou consistem de um carreador aquoso e polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) que é(são) disperso(s) no carreador aquoso, o termo “carreador aquoso” tem seu significado usual que é entendido pelos peritos na técnica e inclui assim vários sistemas carreadores à base de água que podem conter opcionalmente uma substância dispersa tal como um aditivo iônico (por exemplo, um sal) ou um aditivo não iônico (por exemplo, polímero, álcool, açúcar e/ou tensoativo). As substâncias que estão dispersas no carreador aquoso podem ser dissolvidas no mesmo e/ou dispersas na forma de partículas pequenas.
Composições farmacêuticas antimicrobianas [093] Várias modalidades fornecem composições farmacêuticas antimicrobianas que compreendem ou consistem de um carreador aquoso e polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) disperso(s) no carreador aquoso. A quantidade de polipeptídeo(s) catiônico(s) dispersos no carreador aquoso pode variar ao longo de uma faixa ampla que depende primariamente da viscosidade desejada da composição farmacêutica antimicrobiana. Por exemplo, em várias modalidades a quantidade do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) na composição farmacêutica antimicrobiana está na faixa de aproximadamente 0,001% a aproximadamente 10%, em peso com base no peso total da composição farmacêutica antimicrobiana. Em algumas
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 93/137
32/75 modalidades a quantidade do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) disperso(s) no carreador aquoso está na faixa de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 5%, em peso com base no peso total da composição farmacêutica antimicrobiana.
[094] Em várias modalidades o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) que é(são) disperso(s) no carreador aquoso compreende(m) um grande número de unidades de aminoácidos carregados positivamente (em pH neutro). Em uma modalidade, o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) compreende(m) pelo menos 40 unidades de aminoácidos, das quais pelo menos uma parte é carregada positivamente. Em uma modalidade, o número de unidades de aminoácidos carregados positivamente no(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) é pelo menos 10, pelo menos 15 ou pelo menos 20. Lisina, arginina, histidina e combinações das mesmas são exemplos de unidades de aminoácidos adequadas que são carregadas positivamente em pH neutro. Em uma modalidade, o grande número de unidades de aminoácidos carregados positivamente no(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) compreende(m) unidades de lisina carregadas positivamente.
[095] Em várias modalidades, o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) tem(têm) uma viscosidade de 2 centistokes (cSt) ou superior, que é medida a uma concentração de 2 % em peso em água deionizada e a uma temperatura de 37°C. O(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) adequado(s) que tem(têm) uma faixa de viscosidades maiores e menores (por exemplo, de aproximadamente 1,5 cSt a aproximadamente 16.000 cSt ou aproximadamente 2,0 cSt a aproximadamente 16.000 cSt) pode(m) ser produzido(s) através do ajuste do peso molecular do polipeptideo, do nível de unidades de aminoácidos
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 94/137
33/75 carregados positivamente e/ou do grau até o qual o polipeptídeo se monta. Em uma modalidade, o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) tem(têm) uma viscosidade que é maior que aquela da albumina do soro bovino, que é medida a uma concentração de 2 % em peso em água deionizada e a uma temperatura de 37°C.
[096] O(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) pode(m) ser copolipeptídeos que compreendem outras unidades monoméricas em adição às unidades de aminoácidos carregados positivamente. Por exemplo, em várias modalidades o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) pode(m) compreender ainda um grande número de unidades de aminoácidos hidrofóbicos. Em várias modalidades, o número de unidades de aminoácidos hidrofóbicos no copolipeptídeo catiônico é pelo menos 5, pelo menos 10 ou pelo menos 15. Exemplos de unidades de aminoácidos hidrofóbicos adequadas incluem leucina (L), isoleucina (1), valina (V), fenilalanina (F), alanina (A) e combinações das mesmas. Em uma modalidade, o grande número de unidades de aminoácidos hidrofóbicos no(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) compreende unidades de leucina.
[097] O arranjo de sequências de unidades de aminoácidos no(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) pode ser aleatório, maciço ou uma combinação dos mesmos. Por exemplo, em uma modalidade, o arranjo de sequências de unidades de aminoácidos hidrofóbicos e unidades de aminoácidos carregados positivamente no(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) é maciço. Em um número de modalidades, tal copolipeptídeo em blocos pode compreender várias unidades de aminoácidos hidrofóbicos e hidrofílicos. Por exemplo, em uma modalidade, o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) é(são) um copolipeptídeo em
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 95/137
34/75 blocos que compreende unidades hidrofóbicas de leucina e unidades de lisina carregadas positivamente.
[098] Em várias modalidades, o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) se monta(m) em estruturas multiméricas em água e outros carreadores aquosos. Exemplos de estruturas multiméricas incluem micelas, folhas, vesículas e fibrilas (ver a Patente U.S. No. 9.017.730). Em uma modalidade, o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s), em água deionizada a 37°C a uma concentração de 3 % em peso, forma(m) um hidrogel de autossustentação. Em uma modalidade, o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) exibe(m) atividade tensoativa em água deionizada a 37°C, que é medida por uma redução na tensão superficial de pelo menos 10% ou pelo menos 20% quando comparada à da água deionizada sozinha. Em uma modalidade, a automontagem de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) é(são) evidenciada por uma concentração de agregação crítica para polipeptídeo que é menor que 1000 pg/mL a 37°C em água deionizada. Em uma modalidade, a automontagem de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) é(são) evidenciada por uma concentração de agregação crítica para polipeptídeo que é menor que 100 pg/mL a 37°C em água deionizada.
[099] A automontagem do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) pode ser controlada de várias maneiras. Por exemplo, em uma modalidade, o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) compreende(m) um arranjo de sequências de unidades de aminoácidos hidrofóbicos e unidades de aminoácidos carregados positivamente que é configurado para promover a automontagem do(s) polipeptídeo(s) catiónico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) em estruturas
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 96/137
35/75 multiméricas. Por exemplo, a automontagem do polipeptídeo é intensificada por um arranjo de sequências maciço de unidades de aminoácidos hidrofóbicos e unidades de aminoácidos carregados positivamente. Um teor maior de unidades de aminoácidos hidrofóbicos e/ou blocos mais longos de unidades de aminoácidos hidrofóbicos no polipeptídeo tendem a intensificar a automontagem em carreadores aquosos.
[O1OO] 0(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) descrito(s) aqui pode(m) ser disperso(s) em um carreador aquoso para formar composições farmacêuticas antimicrobianas. Em várias modalidades o carreador aquoso é água. Em outras modalidades o carreador aquoso é uma solução aquosa que compreende um sal farmaceuticamente aceitável, aditivo(s) não iônico(s) ou uma combinação dos mesmos. O sal tende a inibir a automontagem do polipeptídeo e assim deve ser evitado o excesso de sal. Solução salina normal, solução salina metade da normal, solução salina um quarto da normal e solução salina tamponada com fosfato são exemplos de carreadores aquosos adequados que contêm um sal farmaceuticamente aceitável. Em uma modalidade, o carreador aquoso compreende cloreto de sódio. Em várias modalidades, o carreador aquoso é uma solução aquosa que compreende um aditivo não iônico. Exemplos de aditivos não iônicos adequados incluem dextrose, manitol, glicerol, xilitol, sorbitol, tensoativo(s) e combinações dos mesmos.
[0101] O carreador aquoso pode compreender várias quantidades de um aditivo, tal como um sal farmaceuticamente aceitável, aditivo(s) não iônico(s) ou uma combinação dos mesmos. Em várias modalidades, o carreador aquoso compreende uma quantidade de um sal farmaceuticamente aceitável que é 9,0 g/L ou menor; ou 8,0 g/L ou
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 97/137
36/75 menor; ou 7,0 g/L ou menor; ou 6,0 g/L ou menor; ou 5,0 g/L ou menor; ou 4,5 g/L ou menor; ou 4,0 g/L ou menor; ou 3,0 g/L ou menor. Em uma modalidade, a quantidade de aditivo(s) no carreador aquoso é selecionada para controlar a viscosidade da composição farmacêutica antimicrobiana. Em uma modalidade, o carreador aquoso compreende um aditivo em uma quantidade que aumenta a viscosidade da composição farmacêutica antimicrobiana. Em uma modalidade, o carreador aquoso compreende um aditivo em uma quantidade que reduz a viscosidade da composição farmacêutica antimicrobiana. Em uma modalidade, o(s) aditivo(s) não iônico(s) é(estão) presente(s) em uma quantidade eficiente para aumentar a concentração osmótica da composição farmacêutica antimicrobiana até um valor que é pelo menos 10% maior que aquele da composição farmacêutica antimicrobiana sem o(s) dito(s) aditivo(s). Em várias modalidades a concentração do aditivo na composição farmacêutica antimicrobiana está na faixa de aproximadamente 0,1 % em peso a aproximadamente 10 % em peso, com base no peso total. Em várias modalidades a concentração do aditivo não iônico na composição farmacêutica antimicrobiana está na faixa de aproximadamente 0,01 % em peso a aproximadamente 2 % em peso ou na faixa de aproximadamente 0,05 % em peso a aproximadamente 5 % em peso, com base no peso total.
[0102] Em várias modalidades, uma composição farmacêutica antimicrobiana que é descrita aqui é esterilizada através de técnica(s) de esterilização configurada(s) para a obtenção de uma composição farmacêutica antimicrobiana esterilizada. Em uma modalidade, a(s) técnica(s) de esterilização é(são) configurada(s) para ter(em) um impacto mínimo sobre a estrutura química do polipeptideo catiônico sintético e/ou a tendência de que o polipeptideo catiônico sintético se monte. Exemplos
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 98/137
37/75 de tais técnicas de esterilização são ilustrados nas FIGS. 42-52. Em uma modalidade, uma composição farmacêutica antimicrobiana que é descrita aqui é esterilizada através de técnica(s) de esterilização configurada(s) para a obtenção de uma composição farmacêutica antimicrobiana esterilizada com o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) que tem(têm) um peso molecular ponderai médio e/ou uma capacidade de dispersão comparável (por exemplo, dentro de aproximadamente 10%) àquela do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) da composição farmacêutica antimicrobiana sem esterilização através da(s) dita(s) técnica(s) de esterilização. Em uma modalidade, a composição farmacêutica antimicrobiana é esterilizada através de técnica(s) de esterilização configurada(s) para a obtenção de uma composição farmacêutica antimicrobiana esterilizada que tem um nível de viscosidade a 37°C que é comparável àquele da composição farmacêutica antimicrobiana sem esterilização através desta(s) técnica(s) de esterilização. Em uma modalidade, a viscosidade da composição farmacêutica antimicrobiana esterilizada a 37°C está na faixa de 20% a 200% da viscosidade de uma composição farmacêutica antimicrobiana não esterilizada de outra maneira comparável.
[0103] Em uma modalidade, a composição farmacêutica antimicrobiana tem uma toxicidade baixa após ser infundida na cavidade peritoneal de um grande número de camundongos a uma dose de 10 mL/kg, que é medida por uma taxa de sobrevivência dos camundongos de 50% ou superior em 72 horas após ser infundida. Em uma modalidade, a composição farmacêutica antimicrobiana tem uma toxicidade baixa após ser infundida na cavidade peritoneal de um grande número de camundongos a uma dose de 20 mL/kg, que é medida por uma taxa de
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 99/137
38/75 sobrevivência dos camundongos de 50% ou superior em 72 horas após ser infundida. Em uma modalidade, a composição farmacêutica antimicrobiana tem uma toxicidade baixa após ser infundida na cavidade peritoneal de um grande número de camundongos a uma dose de 40 mL/kg, que é medida por uma taxa de sobrevivência dos camundongos de 50% ou superior em 72 horas após ser infundida. Em uma modalidade, a composição farmacêutica antimicrobiana tem uma atividade microbiocida que é comparável àquela da composição farmacêutica antimicrobiana não esterilizada de outra maneira comparável, em que a atividade microbiocida é determinada por um teste de morte com tempo de 60 minutos contra pelo menos uma bactéria selecionada do grupo que consiste de S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa e E. coli.
[0104] A inclusão de outros ingredientes farmacêuticos ativos nas composições farmacêuticas antimicrobianas descritas aqui pode intensificar o desempenho antimicrobiano e/ou reduzir o risco de toxicidades, tanto locais quanto sistêmica. Em particular, a inclusão de outros agentes antimicrobianos, que incluem antibióticos, antissépticos, compostos de iodo e/ou compostos de prata, pode agir de forma cooperativa com o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) para ajudar a prevenir e/ou a tratar infecção. Ainda, a inclusão de um ou mais agentes anti-inflamatórios pode melhorar o desempenho e/ou reduzir o risco de toxicidades, tanto locais quanto sistêmica. A inflamação local pode contribuir para a patogênese de vários cenários de doença que também envolvem contaminação ou infecção microbiana. Os exemplos incluem otite externa, sinusite crônica, condições pulmonares e certas condições de feridas. Tais condições poderíam ser tratadas por uma combinação do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) e agentes anti-inflamatórios, tais
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 100/137
39/75 como corticosteroides, antihistaminas e/ou anticitocinas. Dessa maneira, a inclusão de agentes anti-inflamatórios em uma composição antimicrobiana que contém polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) pode [0105] Em uma modalidade, a composição farmacêutica antimicrobiana compreende um composto anti-inflamatório. Por exemplo, em uma modalidade, o composto anti-inflamatório é selecionado do grupo que consiste de um corticosteroide, um inibidor de histamina e um inibidor de citocina. Exemplos de corticosteroides incluem betametasona dipropionato, propionato de clobetasol, diacetato de diflorasona, fluocinonida e propionato de halobetasol. Exemplos de inibidores de histamina incluem aqueles que inibem os receptores de histamina Hl, H2, H3 e H4. Exemplos de inibidores de citocina incluem glucocorticoides e pentoxifilina.
[0106] As composições farmacêuticas antimicrobianas descritas aqui podem ser produzidas de várias maneiras. Em uma modalidade, o polipeptideo catiônico sintético antimicrobiano é produzido das maneiras ensinadas nas Patentes U.S. Nos. 9.017.730 e/ou US 9.446.090, que são expressamente incorporadas aqui como referência para todas as finalidades incluindo o ensinamento de tais métodos para a produção de polipeptídeos catiônicos. A composição farmacêutica antimicrobiana pode ser produzida combinando o polipeptideo catiônico sintético antimicrobiano com o carreador aquoso para, dessa maneira, dispersar (por exemplo, dissolver) o polipeptideo no carreador aquoso. Por exemplo, tal combinação pode ser realizada através da mistura dos ingredientes (polipeptídeo(s) catiônico(s), carreador aquoso e ingredientes opcionais tal como o composto anti-inflamatório) com agitação a uma temperatura na faixa de aproximadamente 20° C a 90° C, ao longo de um
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 101/137
40/75 período de tempo que é eficiente para dispersar (por exemplo, dissolver) o polipeptídeo. Os ingredientes podem ser misturados um com os outros em qualquer ordem, embora os peritos na técnica possam preferir uma ordem particular em casos individuais.
Métodos de prevenção de contaminação microbiana [0107] Várias modalidades fornecem métodos de prevenção de contaminação microbiana de tecidos que são particularmente adequados para tecido que é outro sem ser a pele saudável intacta. Por exemplo, em uma modalidade tal método compreende a identificação de um indivíduo mamífero que tem um local do tecido que não é a pele saudável intacta que está em risco de contaminação microbiana. Exemplos destes locais dos tecidos incluem pele doente, um local cirúrgico, um ferimento traumático, tecidos que sofreram desbridamento, cavidade peritoneal, uma via aérea pulmonar, um seio da face e trato urinário. Em uma modalidade, o método compreende a administração de uma composição farmacêutica antimicrobiana que é descrita aqui no local do tecido em uma quantidade eficiente para proteger pelo menos parcialmente o local do tecido de se ser contaminado com micro-organismos. Por exemplo, em algumas modalidades o método protege pelo menos parcialmente o local do tecido de ser infectado com, pelo menos, uma bactéria selecionada do grupo que consiste de S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa e E. coli. O método pode compreender ainda a obtenção de amostras do local do tecido para avaliar a carga microbiana, por exemplo, a carga de pelo menos uma bactéria selecionada do grupo que consiste de S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa e E. coli. Em uma modalidade, a composição farmacêutica antimicrobiana é administrada durante a cirurgia em um local cirúrgico. A administração da composição farmacêutica antimicrobiana no local do
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 102/137
41/75 tecido pode ser realizada através da aplicação tópica direta.
[0108] As quantidades da composição farmacêutica antimicrobiana que são eficientes para proteger pelo menos parcialmente o local do tecido de se ser contaminado com micro-organismos podem ser determinadas pelos peritos na técnica utilizando experimento rotineiro informado pela orientação fornecida aqui. Em várias modalidades a composição farmacêutica antimicrobiana tem uma janela terapêutica ampla e assim é fornecida uma faixa relativamente extensa de doses ao longo da qual é conseguida a proteção desejada da infecção. Em algumas modalidades, esta janela terapêutica ampla facilita a administração da composição farmacêutica antimicrobiana no local do tecido em abundância.
Métodos de redução da carga microbiana [0109] Várias modalidades fornecem métodos de redução da carga microbiana dentro ou sobre os tecidos que são particularmente adequados para tecido que é outro sem ser a pele saudável intacta. Por exemplo, em uma modalidade tal método compreende a identificação de um indivíduo mamífero que tem um local do tecido que não é a pele saudável intacta que tem uma carga microbiana. Exemplos destes locais dos tecidos incluem pele doente, um local cirúrgico, um ferimento traumático, tecidos que sofreram desbridamento, cavidade peritoneal, uma via aérea pulmonar, um seio da face e trato urinário. Em uma modalidade, o local do tecido está contaminado, infectado com micro-organismos ou as duas coisas. Em uma modalidade, o método compreende a administração de uma composição farmacêutica antimicrobiana que é descrita aqui no local do tecido em uma quantidade eficiente para reduzir pelo menos
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 103/137
42/75 parcialmente a carga microbiana. Por exemplo, em algumas modalidades o método reduz pelo menos parcialmente a carga microbiana no local do tecido de pelo menos uma bactéria selecionada do grupo que consiste de S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa e E. coli. O método pode compreender ainda a obtenção de amostras do local do tecido para avaliar a carga microbiana, por exemplo, a carga de pelo menos uma bactéria selecionada do grupo que consiste de S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa e E. coli. Em uma modalidade, a composição farmacêutica antimicrobiana é administrada durante a cirurgia em um local do tecido que está contaminado, infectado com micro-organismos ou as duas coisas.
[0110] As quantidades da composição farmacêutica antimicrobiana que são eficientes para reduzir pelo menos parcialmente a carga microbiana podem ser determinadas pelos peritos na técnica utilizando experimento rotineiro informado pela orientação fornecida aqui. Em várias modalidades a composição farmacêutica antimicrobiana tem uma janela terapêutica ampla e assim é fornecida uma faixa relativamente extensa de doses ao longo da qual é conseguida a redução desejada na carga microbiana. Em algumas modalidades, esta janela terapêutica ampla facilita a administração da composição farmacêutica antimicrobiana no local do tecido em abundância. A administração da composição farmacêutica antimicrobiana no local do tecido pode ser realizada através da aplicação tópica direta.
EXEMPLOS [0111] 0(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) pode(m) ser preparado(s) com vários arranjos de sequências de aminoácidos, dos quais, alguns são ilustrados esquematicamente na FIG. 1. Certos arranjos podem
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 104/137
43/75 ser referidos como blocos ou segmentos. Tipicamente, estes seriam extensões de unidades de aminoácidos que contêm um grande número de um tipo de aminoácido (por exemplo, catiônico, aniônico, hidrofóbico). O(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) descrito(s) aqui foi(foram) produzido(s) de acordo com os métodos de síntese descritos na Patente U.S. No. 9.017.730 e na 9.446.090, que são incorporadas aqui como referência em suas totalidades e para todas as finalidades, incluindo a finalidade de descrever o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) e os métodos de produção do(s) mesmo(s).
[0112] Os blocos catiônicos têm um grande número de cargas positivas em pH neutro e podem variar substancialmente em relação ao comprimento de aproximadamente 10 unidades de aminoácidos a bem mais de 300 unidades de aminoácidos. As unidades de aminoácidos carregados positivamente podem ser selecionadas de lisina (K), arginina (R), histidina (H) e ornitina (O). Os blocos catiônicos não precisam ser compostos totalmente de aminoácidos catiônicos. Em adição ao grande número de aminoácidos catiônicos, o segmento do bloco também pode incluir outros aminoácidos, incluindo aminoácidos polares, tais como serina (S) e treonina (T), que ajudariam a manter a hidrofilicidade. Uma pequena porcentagem de aminoácidos carregados negativamente e/ou aminoácidos hidrofóbicos também pode ser incluída no bloco catiônico, contanto que haja mais unidades catiônicas do que unidades aniônicas no bloco.
[0113] Os blocos hidrofóbicos têm um grande número de aminoácidos hidrofóbicos e podem variar substancialmente em relação ao comprimento, tipicamente de aproximadamente 5 unidades de aminoácidos a aproximadamente 60 unidades de aminoácidos. Os blocos
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 105/137
44/75 hidrofóbicos também podem exibir estrutura secundária (por exemplo, alfa hélice vs. desordenada). Os aminoácidos hidrofóbicos não são carregados em pH 7.0. Em adição, estes têm cadeias laterais principalmente compostas de carbono e hidrogênio, têm momentos dipolo muito pequenos e tendem a ser repelidos da água. A unidades de aminoácidos hidrofóbicos podem ser selecionadas de uma lista que inclui glicina (G), alanina (A), valina (V), leucina (L), isoleucina (I), prolina (P), fenilalanina (F) e metionina (M). Os blocos hidrofóbicos não precisam ser totalmente compostos de unidades de aminoácidos hidrofóbicos. Em adição ao grande número de aminoácidos hidrofóbicos, o segmento do bloco também pode incluir incluem outros aminoácidos, incluindo aminoácidos polares, tais como serina (S) e treonina (T). Uma pequena porcentagem de aminoácidos carregados também pode ser incluída no bloco hidrofóbico.
[0114] O(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) que tem(têm) uma arquitetura em blocos catiônicos-hidrofóbicos pode(m) ser preparado(s) com uma ampla faixa de comprimentos de cadeia totais, tipicamente na faixa de aproximadamente 20 unidades de aminoácidos ou menores do lado baixo e aproximadamente 400 unidades de aminoácidos ou mais do lado alto. Como representado na FIG. 2, na descrição dos polipeptídeos catiônicos com uma arquitetura em blocos, estes podem ser categorizados em três grupos: (I) Segmento Catiônico Longo (>200 unidades de aminoácidos); (II) Segmento Catiônico Médio (100-199 unidades de aminoácidos); e (II) Segmento Catiônico Curto (10-99 unidades de aminoácidos). A proporção do comprimento dos blocos catiônicos para o comprimento dos blocos hidrofóbicos pode ser variada ao longo de uma faixa ampla, tipicamente de aproximadamente 1,5 do lado baixo a aproximadamente 15 ou mais do lado alto. Os pesos moleculares
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 106/137 médios deste(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) podem ser variados ao longo de uma faixa ampla, tipicamente de aproximadamente 3.000 Da do lado baixo a aproximadamente 70.000 Da ou mais do lado alto. A FIG. 3 mostra em maiores detalhes a composição deste(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) com arquitetura segmentada.
[0115] Como descrito em maiores detalhes a seguir, os presentes inventores sintetizaram e testaram inúmero(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) diferente(s) com um arranjo de sequências em blocos. Para comparação, os presentes inventores também sintetizaram polipeptideos catiônicos com uma composição de aminoácidos comparável, mas sem a presença de um arranjo de sequências em blocos ou segmentado. Foi descoberto que este(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) variam em inúmeras propriedades funcionais, incluindo a atividade antimicrobiana, as propriedades hemostáticas, propriedades de barreira e atividades tensoativas. Ainda, foi demonstrado que tanto o planejamento molecular quanto a formulação podem afetar estas propriedades funcionais. Considerando as características do planejamento molecular, os presentes inventores observaram que o comprimento de cadeia total e a proporção do comprimento dos blocos catiônicos / hidrofílicos para o comprimento dos blocos hidrofóbicos são características que têm grande impacto sobre a funcionalidade. As características específicas dentro de cada bloco, incluindo a seleção e enanciopureza dos aminoácidos, também contribuem.
[0116] No presente pedido de patente, os presentes inventores utilizam uma nomenclatura com base em duas características chaves do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s): o comprimento de cadeia total e a proporção do comprimento dos blocos catiônicos para o comprimento dos
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 107/137
46/75 blocos hidrofóbicos. Com a finalidade de exemplo, KL-140/2.5 tem um comprimento médio de cadeia aproximado de 140 unidades de aminoácidos e uma proporção aproximada de segmento catiônico para segmento hidrofóbico de 2,5. Neste polímero, as unidades de aminoácidos catiônicos são lisinas (K) e as unidades de aminoácidos hidrofóbicos são Lleucinas enanciopuras (L). Como outro exemplo, KrL-100/5.7 tem um comprimento médio de cadeia aproximado de 100 unidades de aminoácidos e uma proporção aproximada de segmento catiônico para segmento hidrofóbico de 5,7. Neste polímero, as unidades de aminoácidos catiônicos são lisinas (K) e as unidades de aminoácidos hidrofóbicos são D,L-leucinas racêmicas (rL). Como outro exemplo RrL-75/2.8 tem um comprimento médio de cadeia aproximado de 75 unidades de aminoácidos. Neste polímero, as unidades de aminoácidos catiônicos são arginina (R) e as unidades de aminoácidos hidrofóbicos são D,L-leucinas racêmicas (rL).
[0117] O(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) que foi(foram) descrito(s) (utilizando um sistema de nomenclatura diferente) nas Patentes U.S. Nos. 9.017.730 e 9.446.090 incluem K55, K55L5, K55L10, K55L15, K55L20, K55L20-RAN, K55L25, K55L30, K55(rczc-L)s, K55(rczc-L)s-RAN, K5s(rczc-L)io, Ks5(rac-L)io-RAN, Kss(rac-L)2o, RHss(rac-L)2o, Kss(rac-L)2o-RAN, Kss(rac-L)3o, Ks5(rac-I)2o, Ks5(rac-L/F)2o, Kss(rac-V)2o, Kss(rac-A)2o, [Kõs(rac-L)i5-RAN](racL)2o, Keo, Kso(rac-L)2o, Kgo(rnc-L)3o, Kgo(rnc-L)3o-RAN, KggL.36, Kgg(rac-L)36, Kgg(rac-L)36-RAN, K100, K100L20, K100L30, K100L40, K100L40-RAN, K100L50, KiooLõo, Kioo(rac-L)2o, Kioo(rac-L)2o-RAN, Kioo(rac-L)3o, Kioo(rnc-L)4o, Kioo(racL)õo, Ki2o(rac-L)io, Ki2o(rnc-L)4o, Ki2o(rnc-L)4o-RAN, Ki2o(rac-L)so, Ki2o(rncL)so-RAN, K130L20, K130L30, K130L40, K130L40-RAN, K130L60, Ki3o(rac-L)2o, Ki3o(rac-L)3o, Ki3o(rac-L)4o, Ki3o(rac-L)eo, K150L30, Ki6o(rac-L)2o, Kiso, KisoLis, K180L20, K180L36, K180L54, Ki8o(rac-L)i8, Ki8o(rac-L)2o, Ki8o(rac-L).36, Ki8o(rnc
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 108/137 /75
L)s4, K190L10, K200L50, PEG2os(rac-L)2o, K256, K324L36, K360 K360L36, KbõoLsõRAN, K360L54, K360L72, K36o(rac-L)36, K36o(rnc-L)54 e K36o(rnc-L)72·
Exemplo 1 [0118] 0(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) pode(m) ser planejado(s) para produzir preparações com atividade microbicida robusta e com efeitos de barreira como ilustrado nas FIGS. 4-6. A FIG. 4 descreve um exemplo de polipeptídeo catiônico sintético com arranjo de sequências em blocos catiônicos-hidrofóbicos com base em lisina e unidades do aminoácido L-leucina enanciopuras. O comprimento de cadeia total médio da preparação polipeptídica é de aproximadamente 160 unidades de aminoácidos; foi observado que a proporção de lisina para leucina ou de K:L era de 3,2. Este polipeptídeo catiônico sintético é denominado KL160/3.2 e um cromatograma de SEC do polímero mostra um único pico com uma capacidade de dispersão (D) relativamente baixa de 1,1.
[0119] A FIG 5 representa a atividade antimicrobiana dependente da concentração de KL-160/3.2 em água. Há um efeito dependente da concentração evidente com atividade contra S. aureus, P. aeruginosa e C. albicans em concentrações tão baixas quanto 1,6 pg/mL. Um resumo da atividade antimicrobiana de KL-160/3.2 observada durante vários experimentos é fornecido na FIG. 6. Como observado a seguir, KL160/3.2 quando preparado em água em concentrações mais altas (isto é, >2 % em peso), forma hidrogéis de autossuporte. Estas propriedades do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) resultam em uma combinação desejável de atividade antimicrobiana e função de barreira. Ê importante reconhecer que as propriedades funcionais destas preparações antimicrobianas são dependentes da formulação (por exemplo, presença e
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 109/137
48/75 concentração de aditivos), bem como da presença, da ausência ou da extensão de certos procedimentos de processamento e/ou manipulação, incluindo métodos de esterilização.
Exemplo 2 [0120] 0(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) pode(m) ser planejado(s) para produzir preparações com atividade microbicida robusta e com atividade tensoativa como ilustrado nas FIGS. 7-9. A FIG. 7 descreve um exemplo de polipeptídeo catiônico sintético com arranjo de sequências em blocos catiônicos-hidrofóbicos com base em lisina e unidades do aminoácido D,L-leucina racêmicas. 0 comprimento de cadeia total médio da preparação polipeptídica é de aproximadamente 100 unidades de aminoácidos; foi observado que a proporção de lisina para leucina racêmica ou de K:rL era de 5,7. Este polipeptídeo catiônico sintético é denominado KrL-100/5.7 e um cromatograma de SEC do polímero mostra um único pico com uma capacidade de dispersão (D) relativamente baixa de 1,1.
[0121] A FIG. 8 representa a atividade antimicrobiana dependente da concentração de KrL-100/5.7 em água. Há um efeito dependente da concentração evidente com atividade contra S. aureus, S. epidermidis, E. coli, P. aeruginosa e C. albicans em concentrações tão baixas quanto 1,6 pg/mL. Um resumo da atividade antimicrobiana de KrL100/5.7 observada durante vários experimentos é fornecido na FIG. 9. Como observado a seguir, KrL-100/5.7 quando preparado em água demonstra atividades tensoativas. Estas propriedades do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) resultam em uma combinação desejável de atividade antimicrobiana e função tensoativa, que pode melhorar o
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 110/137
49/75 desempenho contra biofilmes e/ou desbridamento de tecido. Ê importante reconhecer que as propriedades funcionais destas preparações antimicrobianas são dependentes da formulação (por exemplo, presença e concentração de aditivos), bem como da presença, da ausência ou da extensão de certos procedimentos de processamento e/ou manipulação, incluindo métodos de esterilização.
Exemplo 3 [0122] A automontagem de peptídeos antimicrobianos catiônicos em complexos multiméricos pode ser benéfica. Os polipeptídeos catiônicos sintéticos com um arranjo de sequências em blocos podem ser planejados e formulados para se montarem em estruturas multiméricas. Dois exemplos são representados na FIG. 10: KL-160/3.2 foi planejado para automontagem em estruturas fibrilares e formar hidrogéis em barreira e KrL-100/5.7 foi planejado para automontagem em estruturas micelares e ter propriedades tensoativas. Observar que estes dois polipeptídeos catiônicos sintéticos também são descritos nas FIGS. 4-6 e nas FIGS. 7-9, como citado anteriormente.
[0123] Várias modalidades da invenção incluem composições antimicrobianas que compreendem pelo menos um agente antimicrobiano que forma complexos multimoleculares com ele mesmo e/ou com um ou mais outros componentes da composição. Com a finalidade de explicação, o desenvolvimento de tais complexos multimoleculares é aprimorado pela ligação intermolecular. Tal ligação pode ser reversível. Tal ligação pode ser causada, totalmente ou em parte, pelos efeitos de atração hidrofóbica. Tal ligação pode ser covalente ou não covalente. Tal ligação pode reduzir ou retardar a absorção sistêmica. Tal ligação pode reduzir o risco de
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 111/137
50/75 toxicidades locais e/ou sistêmicas.
[0124] A Concentração de Agregação Crítica (CAC) é uma medida da automontagem de moléculas em ambientes aquosos. A CAC pode ser medida através de várias técnicas, incluindo a técnica de fluorescência do pireno e uma técnica de tensão superficial. A FIG. 11 mostra os valores de CAC de (vários) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) que são medidos pelo método de fluorescência do pireno. Ê digno de nota que tanto uma cadeia de polilisina (K-100) quanto um polipeptideo catiônico sintético de lisina-leucina que não tem um arranjo de sequências em blocos (KL-130/3.3-RAN) demonstraram CACs muito altas, 1.600 e 2.700 pg/mL, respectivamente. Através de comparação, inúmeros polipeptídeos catiônicos sintéticos de lisina-leucina possuindo um arranjo de sequências em blocos demonstraram CACs muito menores, variando de 1 pg/mL a 160 pg/mL através deste método que é ilustrado pelo restante dos registros na FIG. 11. A FIG. 12 representa a medida da CAC através do método de tensão superficial utilizando o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL-100/5.7.
[0125] Várias modalidades da invenção podem incluir composições antimicrobianas que compreendem pelo menos um agente antimicrobiano, que quando dissolvido em água tem uma concentração de agregação crítica (CAC) menor ou igual a 500 pg/mL. Esta CAC pode ser medida através de métodos conhecidos na técnica, tais como aqueles que utilizam fluorescência do pireno. Outros agentes antimicrobianos podem ter CACs menores. Por exemplo, os agentes antimicrobianos podem ter CACs menores ou iguais a 200 pg/mL, 100 pg/mL, 50 pg/mL e/ou 20 pg/mL.
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 112/137
51/75
Exemplo 4 [0126] A viscosidade é uma medida relevante das propriedades moleculares, bem como das propriedades da composição farmacêutica. Inesperadamente, os presentes inventores descobriram que uma viscosidade maior pode ser um marcador de melhor desempenho antimicrobiano intraferida, bem como um marcador de maior segurança. Inúmeras características do planejamento molecular influenciam a viscosidade do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s). Estas incluem o comprimento de cadeia total, a composição de aminoácidos, a relação de unidades catiônicas para unidades hidrofóbicas e o arranjo de sequências de resíduos de aminoácidos (por exemplo, maciço vs. aleatório). Também deve ser observado que outros constituintes que podem estar nas preparações de polipeptídeos catiônicos sintéticos (por exemplo, ions indicadores, outros sais e solventes residuais) podem ter influência sobre a viscosidade de preparações aquosas. Ainda, vários aditivos que podem ser utilizados na preparação de composições farmacêuticas (por exemplo, sais, excipientes não iônicos que modificam a tonicidade, tensoativos) ek quantidade eficiente para influenciar a viscosidade. Como descrito a seguir, métodos de esterilização também podem ter impactos substanciais sobre a viscosidade.
[0127] A FIG. 13A representa os valores de viscosidade cinemática de (vários) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) em água a 1 % em peso que são medidos utilizando viscosímetros capilares de vidro (viscosímetros Ubbelohde). Como demonstrado por estes dados, a presença de cadeias de polilisina de aproximadamente 100 unidades de aminoácidos (K-100) ou aproximadamente 200 unidades de aminoácidos (K-200) tem apenas um impacto modesto sobre a viscosidade a esta concentração.
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 113/137
52/75
Similarmente, a presença de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) de lisina-leucina com arranjo de sequências aleatório / estatístico (isto é, sem ser em blocos), KL-170/3.3-RAN, também tinha um efeito modesto sobre a viscosidade (valor de 1,1 cSt). Em contraste, um(vários) polipeptídeo(s) catiônico(s)-hidrofóbico(s) sintético(s) com arranjo de sequências segmentado ou em blocos demonstrou (demonstraram) maior viscosidade variando de uma alta neste conjunto de dados de 290 cSt a 1,4 cSt. Foi mostrado que o comprimento de cadeia total aumenta a viscosidade; foi mostrado que maior comprimento do bloco hidrofóbico aumenta a viscosidade; e foi mostrado que os aminoácidos leucina hidrofóbicos aumentam a viscosidade. Para comparação, a FIG. 13B mostra que a albumina do soro bovino tem pouco, se algum, efeito sobre a viscosidade de preparações aquosas a concentrações de 1 e 2 % em peso sob estas condições. A albumina é uma proteína abundante do sangue e tem um peso molecular de aproximadamente 66,5kDa e comprimento total de cadeia de aproximadamente 583 unidades de aminoácidos. Estes dados indicam que o tamanho molecular sozinho é inadequado para explicar os feitos sobre a viscosidade.
[0128] A FIG. 14 mostra os dados de viscosidade para dois polipeptídeos catiônicos-hidrofóbicos sintéticos a 0,5 % em peso em água a 37°C. Neste case, ambos os polipeptídeos catiônicos sintéticos, KL-160/3.3 e KL-120/2.5, tinham um comprimento e o planejamento do segmento hidrofóbico similares (-35-40 unidades de L-leucina enanciopura). A viscosidade mais alta foi observada com KL-160/3.3, que tinha uma estrutura de blocos catiônicos mais longa e, consequentemente, uma estrutura total mais longa. Isto dito, também é importante observar que KL-120/2.5 tinha uma viscosidade maior a 0,5 % em peso (FIG. 14) que a
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 114/137
53/75 do KrL-160/3.3 (FIG. 13) a 1,0 % em peso. O último tem um comprimento de cadeia total maior, um bloco hidrofóbico de tamanho similar, mas uma composição diferente de unidades de aminoácidos hidrofóbicos (D,Lleucina racêmica vs. L-leucina enanciopura). A FIG. 15 demonstra ainda que tanto o planejamento molecular quanto a concentração têm impacto sobre a viscosidade. Estes dados foram obtidos a 40°C com viscosímetros capilares de vidro e incluíam quatro polipeptideos catiônicos sintéticos de lotes de fabricação diferentes daqueles descritos anteriormente.
[0129] A viscosidade do polipeptideo catiônico sintético também pode ser medida sob a influência da força de cisalhamento (viscosidade dinâmica). Esta abordagem permite a avaliação das propriedades de adelgaçamento por cisalhamento ou espessamento por cisalhamento. Estas propriedades de adelgaçamento por cisalhamento ou espessamento por cisalhamento podem ser importantes tanto para facilitar a aplicação nos tecidos, quanto para o desempenho geral in vivo. Notavelmente, os presentes inventores descobriram que as propriedades de adelgaçamento por cisalhamento podem permitir o espalhamento mais fácil sobre os tecidos por aplicação manual, como podería ocorrer em uma variedade de unidades médicas e cirúrgicas. Como representado na FIG. 16, a viscosidade dinâmica do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL120/2.5 a 1,5 % em peso, 2,0 % em peso e 3,0 % em peso em água foi avaliada contra a força de cisalhamento crescente utilizando um viscosímetro giratório. Foram observadas reduções dependentes do cisalhamento (aumentado a velocidade do eixo) na viscosidade (medida em centipoise (cP)). Este efeito de “adelgaçamento por cisalhamento” foi observado nas três concentrações testadas. Aumentos dependentes da concentração na viscosidade também foram observados como indicado na
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 115/137
54/75
FIG. 16.
[0130] Várias modalidades da invenção incluem composições antimicrobianas que compreendem pelo menos um polipeptídeo catiônico sintético antimicrobiano, que quando dissolvido em água, causa um aumento significativo na viscosidade. Por exemplo, em uma modalidade na qual o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) é(são) um copolímero em blocos, o aumento observado na viscosidade é maior que o aumento observado para um polipeptídeo catiônico sintético aleatório de outra maneira comparável. Um aumento na viscosidade pode ser medido através de métodos conhecidos na técnica utilizando um ou mais tipos de viscosímetros.
[0131] Por exemplo, uma preparação de pelo menos um polipeptídeo catiônico sintético antimicrobiano a uma concentração de 10 mg/mL ou 1 % em peso em água pode ter uma viscosidade cinemática na faixa de 1,25 centistokes a 500 centistokes (cSt; mm2/s) a 37°C, medida utilizando um viscosímetro de capilar de vidro, tal(is) como viscosímetro(s) Ubbelohde, em um ensaio no qual o valor da viscosidade da água sozinha é menor que 0,9 cSt. Em várias modalidades, as viscosidades destas preparações de pelo menos um agente antimicrobiano são maiores que 500 cSt.
[0132] O(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) pode(m) ser planejado(s) e manufaturado(s) de maneira que forme(m) hidrogéis de autossuporte quando disperso(s) em água. Como representado nas FIGS. 17A-D, um exemplo de copolipeptídeo sintético (KL-120/2.5) forma soluções viscosas e hidrogéis em água dependendo da concentração. KL120/2.5 foi preparado em água Dl a concentrações de 0,5, 1,0, 1,5, 2,0 e
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 116/137
55/75
3,0 % em peso e avaliado em relação à formação de gel através de um teste de inclinação do tubo, à firmeza através da análise da textura e à viscosidade. Os efeitos dependentes da concentração sobre as propriedades físicas são evidentes. Por exemplo, quando aumentada até uma concentração de 2 % em peso em água, esta preparação de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) formou um hidrogel de autossuporte. A 1,5 % em peso, a preparação agiu como uma barreira e resistiu à penetração por duas esferas de aço inoxidável diferentes ou BBs. As medidas quantitativas da firmeza utilizando a análise da textura também exibiram claramente aumentos dependentes da concentração. Este último método também demonstra as propriedades de barreira e resistência à penetração.
Exemplo 5 [0133] Vários aditivos podem modificar a viscosidade de preparações aquosas do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s). Os presentes inventores descobriram que uma variedade de aditivos pode ser utilizada para alterar certas propriedades das composições farmacêuticas descritas aqui, incluindo o pH e a tonicidade. Durante a avaliação, os presentes inventores descobriram que certos aditivos tinham um impacto inesperadamente alto sobre a viscosidade. Estes impactos foram adicionalmente descobertos como sendo dependentes do planejamento molecular do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s). Por exemplo, em vários estudos foi demonstrado que a adição de NaCl (-0,9%) em preparações aquosas de polipeptídeo(s) de lisina-L-leucina (KL) Médio(s) do Grupo II com arranjos de sequências de aminoácidos em blocos reduzia profundamente a viscosidade. Um efeito similar, mas menos profundo, foi observado com polipeptídeo(s) de lisina-D,L-leucina (KrL). Estes dados
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 117/137
56/75 mostraram que tanto o planejamento molecular quanto a natureza dos aditivos devem ser considerados em conjunto na preparação de composições farmacêuticas com parâmetros de viscosidade alvos. Estas observações também fornecem um lembrete de que certas substâncias, incluindo sais, que podem ser encontradas em preparações manufaturadas de polipeptídeos catiônicos sintéticos podem ter influência profunda sobre a funcionalidade e o desempenho.
[0134] A FIG. 18 mostra uma lista parcial de excipientes não iônicos farmaceuticamente aceitáveis (aditivos) que podem ser utilizados para preparar composições farmacêuticas que contêm polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s). A FIG. 19 mostra a viscosidade dinâmica do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-120/2.5 (BAC004) a 2,0 % em peso em água, 4,5% de manitol aquoso, 2,33% de glicerol aquoso ou 2,8% de histidina aquosa, avaliada contra maior força de cisalhamento. A preparação com histidina exibiu uma viscosidade muito baixa em todas as velocidades do eixo. As preparações em manitol e glicerol exibiram perfis de viscosidade relativamente altos e dependentes do cisalhamento, embora em níveis de alguma maneira menores que os observados na preparação com apenas água.
[0135] A FIG. 20 representa a viscosidade cinemática de dois exemplos de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) com um arranjo de sequências em blocos de lisina-L-leucina (KL) e lisina-D,L-leucina (KrL) dissolvidos em água a 1 % em peso em água apenas, 0,9% de solução salina aquosa ou 4,4% de xilitol aquoso. Notavelmente, a preparação de KL-100/5.7 em 0,9% de solução salina demonstrou uma redução de aproximadamente 70% na viscosidade em comparação com a preparação em água. Por comparação, a preparação de KrL-110/4.0 em 0,9% de
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 118/137
57/75 solução salina demonstrou uma redução de aproximadamente 40% na viscosidade em comparação com a preparação em água. Ainda, estes estudos demonstraram que ambos os polipeptídeos catiônicos sintéticos em soluções aquosas de xilitol, um aditivo não iônico, resultaram em viscosidades inesperadamente aumentadas em comparação com água apenas. Assim, o xilitol adiciona um benefício potencial como um aditivo para composições farmacêuticas nas quais é desejável manter uma viscosidade mais alta enquanto se aumenta a tonicidade e/ou a osmolaridade. Ainda, em algumas modalidades, o xilitol é um aditivo farmaceuticamente aceitável inesperadamente preferido nas composições antimicrobianas porque, em combinação com seu efeito sobre a viscosidade, não sustenta o metabolismo microbiano e o crescimento de maioria dos micro-organismos.
[0136] A FIG. 21 representa a viscosidade dinâmica do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-120/2.5 (BAC004) a 2,0 % em peso em 4,5% de manitol aquoso, avaliada contra uma força de cisalhamento aumentada. Também mostra que estas preparações são estáveis ao tratamento com calor, inclusive 50°C e 94°C. A estabilidade ao tratamento com calor pode ser útil para certas etapas de manufatura, dissolução e anelamento do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) em carreadores aquosos e para a redução ou a eliminação de quaisquer microorganismos contaminantes por esterilização.
[0137] Várias modalidades da invenção incluem composições farmacêuticas que compreendem pelo menos um polipeptídeo catiônico sintético antimicrobiano em um carreador aquoso e pelo menos um aditivo ou excipiente, em combinações e quantidades que são eficientes para resultarem em uma viscosidade para a composição farmacêutica na faixa
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 119/137
58/75 de aproximadamente 1,25 centistokes a 500 centistokes (cSt; mm2/s) a 37°C, medida utilizando um viscosímetro de capilar de vidro, tal como viscosímetro(s) Ubbelohde, em um ensaio no qual o valor de água apenas é menor que 0,9 cSt. Em várias modalidades, as viscosidades destas composições farmacêuticas são maiores que 500 cSt.
[0138] Várias modalidades da invenção incluem composições farmacêuticas que compreendem pelo menos um polipeptideo catiônico sintético antimicrobiano em um carreador aquoso e uma quantidade de pelo menos um aditivo ou excipiente que é eficiente para conferir um efeito de adelgaçamento por cisalhamento à composição a 37°C, que é medido utilizando viscosímetro(s) giratório(s).
[0139] Várias modalidades da invenção incluem composições farmacêuticas que compreendem pelo menos um polipeptideo catiônico sintético antimicrobiano em um carreador aquoso e uma quantidade de pelo menos um aditivo ou excipiente que é eficiente para conferir uma viscosidade à composição maior que aquela de uma preparação comparável no carreador aquoso sem o aditivo ou o excipiente. Por exemplo, em uma modalidade a adição de quantidades eficientes de xilitol ou glicerol a uma composição farmacêutica, incluindo composições que também podem conter vários sais como NaCl, aumenta a viscosidade da preparação em comparação à composição farmacêutica comparável sem xilitol ou glicerol.
[0140] De acordo com a presente invenção, a obtenção de um nível eficiente de atividade antimicrobiana pode requerer doses substanciais das composições farmacêuticas descritas aqui em certos pacientes (por exemplo, aqueles com feridas grandes e/ou altos níveis
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 120/137
59/75 microbianos). Os presentes inventores descobriram que um agente antimicrobiano, se planejado de acordo com os ensinamentos fornecidos aqui, pode aumentar tanto a eficácia quanto a segurança de composições antimicrobianas aplicadas localmente. Um agente antimicrobiano que forma complexos multimoleculares com ele mesmo ou com um ou mais outros componentes da composição pode aumentar a concentração local e o revestimento dos tecidos do agente antimicrobiano para dessa maneira obter maior eficácia em dose menor. Em adição, esta característica pode diminuir ou retardar a absorção e a distribuição sistêmicas potenciais e pode reduzir as toxicidades sistêmicas. Também pode reduzir as toxicidades locais. O planejamento do agente antimicrobiano por si só, bem como a formulação da composição antimicrobiana, terão influência sobre as interações intermoleculares que possibilitam a formação de complexos multimoleculares.
[0141] Os presentes inventores descobriram que a eficácia e a segurança dos agentes antimicrobianos aplicados de forma local são influenciadas pelas propriedades físicas, inclusive a viscosidade. Por exemplo, uma maior viscosidade pode levar a um tempo de retenção no tecido maior de um agente antimicrobiano aplicado de forma local e dessa maneira aumentar a eficácia. Este efeito também pode reduzir a quantidade total de composição antimicrobiana necessária e dessa maneira reduzir o risco de toxicidades que limitam a dose. As interações intermoleculares do agente antimicrobiano com ele mesmo ou com outros componentes da composição contribuem para a maior viscosidade da composição antimicrobiana.
Exemplo 6.
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 121/137
60/75 [0142] O(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) pode(m) ser planejado(s) para demonstrar(em) atividade tensoativa. Certas características do planejamento conferem maior atividade tensoativa; outras conferem menos. A atividade tensoativa pode ser demonstrada em vários ensaios. Por exemplo, pode ser mostrado que os tensoativos reduzem a tensão superficial em uma interface fluido-ar. Como representado na FIG. 22, foi mostrado que um polipeptídeo catiônico sintético KrL-120/5.0 reduz substancialmente a tensão superficial da água em comparação a outros agentes antimicrobianos catiônicos que não são polipeptídeos catiônicos sintéticos; clorhexidina e PHMB pareciam ter pouco ou nenhum efeito.
[0143] A capacidade das várias preparações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) de reduzir a tensão superficial foi avaliada (FIG. 23). Foram feitas várias observações. Inesperadamente, copolipeptídeos de lisina-leucina em blocos duplos preparados com Lleucina enanciopura demonstraram pouca atividade tensoativa quando o bloco hidrofóbico tinha 30 unidades de aminoácidos ou mais. A atividade tensoativa foi observada com blocos de L-leucina enanciopura mais curtos (por exemplo, aproximadamente de 20 unidades de leucina ou menos). Em adição, os copolipeptídeos de lisina-leucina em blocos duplos preparados com D, L-leucina racêmica demonstraram atividade tensoativa relativamente alta, quando comparados com aqueles preparados com Lleucina enanciopura em comprimentos de blocos de leucina de aproximadamente 20 unidades ou mais. De forma global, os dados mostram que a atividade tensoativa é influenciada profundamente tanto pela composição de aminoácidos (incluindo enanciopuros vs racêmicos) quanto pelo comprimento do bloco hidrofóbico). Assim, os elementos do
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 122/137
61/75 planejamento podem ser utilizados para a obtenção de propriedades tensoativas desejáveis do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s).
[0144] A atividade tensoativa também pode ser demonstrada através de outros ensaios. Um exemplo é a redução da tensão interfacial em um sistema de água / óleo. Como representado nas FIGS. 24A e 24B, foi mostrado que um(vários) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL100/5.7 reduzem a tensão interfacial.
[0145] Certos aditivos também podem ter um impacto sobre a tensão superficial e interfacial. Por exemplo, os dados na FIG. 25 mostram que preparações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL-130/3.3 (Lote 77) e KL-130/3.3 (Lote 72) têm tensão superficial menor quando formuladas apenas em água ou em água com 0,25% ou 1,0% de ácido acético. A presença de ácido acético tem um efeito aditivo. Um efeito similar foi observado sobre a tensão interfacial (FIG. 26).
[0146] O(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) pode(m) ser agentes emulsificantes eficientes. Como mostrado na FIG. 27, os presentes inventores demonstram que as preparações aquosas de dois exemplos de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) com um segmento hidrofóbico de D,L-leucina racêmica, KrL-100/5.0 e KrL-160/3.2, são eficientes na emulsificação do óleo de soja. Este efeito de emulsificação também foi observado com um(mais) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) que tem(têm) um bloco hidrofóbico de leucina enanciopura (FIG. 28). Os dados na FIG. 28 também demonstram que a atividade de emulsificação pode ser demonstrada pelo(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) formulado(s) em solução salina ou xilitol aquoso, bem como apenas água.
[0147] O(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) pode(m) ser
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 123/137
62/75 planejado(s) e formulado(s) para demonstrar(em) atividades tensoativas. Os presentes inventores também descobriram que as preparações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) que combinam atividade microbicida direta e propriedades tensoativas são agentes antibiofilme altamente eficientes. Ainda, os presentes inventores demonstraram que tais preparações são altamente eficientes in vivo sobre os tecidos que são altamente contaminados com bactérias tanto gram-positivas quanto gramnegativas.
Exemplo 7 [0148] 0 entendimento do potencial tanto para as toxicidades locais quanto sistêmicas é importante. Tanto a compatibilidade com tecido quanto a segurança locais são altamente desejáveis para o uso eficiente de uma composição antimicrobiana aplicada de forma local. De forma geral, os presentes inventores descobriram que preparações de polipeptídeos catiônicos sintéticos com um arranjo de sequências em blocos ou segmentado demonstram compatibilidade com tecido e segurança no local relativamente altas. Em adição, formulações, doses e métodos de aplicação apropriados que são descritos aqui podem ser utilizados para minimizar os danos nos tecidos e promover a cicatrização.
[0149] Inesperadamente, os presentes inventores descobriram uma variabilidade substancial de preparações diferentes de polipeptídeos catiônicos sintéticos quando se considera a segurança sistêmica. Os presentes inventores descobriram que tanto o planejamento molecular quanto a formulação influenciam profundamente o risco de toxicidades sistêmicas quando preparações de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) são aplicadas de forma intraperitoneal. A administração intraperitoneal,
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 124/137
63/75 apesar de ser um tipo de aplicação local, facilita a captação sistêmica substancial e a distribuição de agentes terapêuticos e excipientes. Assim, a administração intraperitoneal apresente um risco maior de toxicidades sistêmicas do que a maioria das aplicações locais de composições farmacêuticas antimicrobianas. Ê importante observar várias coisas sobre este assunto. Em primeiro lugar, aplicações locais em uma variedade de tecidos sem ser a pele saudável intacta podem aumentar a captação sistêmica. Em segundo lugar, infecções intraperitoneais são muito graves e há uma necessidade de agentes antimicrobianos mais seguros melhores que possam ser aplicados de forma intraperitoneal. Em terceiro lugar, pode ocorrer a aplicação inadvertida de composições farmacêuticas, de forma intraperitoneal, intravenosa ou em outros locais que poderíam aumentar drasticamente a captação sistêmica. Os presentes inventores desenvolveram agora composições farmacêuticas antimicrobianas aplicadas de forma local que são altamente eficientes e que têm um baixo risco de toxicidades tanto locais quanto sistêmicas, mesmo quando aplicadas em locais sem ser a pele intacta saudável.
[0150] A FIG. 29 representa os resultados de um modelo de irritação dérmica de coelhos no qual composições do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) foram aplicadas tanto na pele intacta quanto esfolada. Foram observadas respostas insignificantes após a aplicação do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-140/2.5 ou KrL-120/5.0 em várias concentrações e várias formulações. A FIG 30 representa os resultados de um estudo de sensibilização dérmica de porquinhos da índia. Nenhuma alteração visível foi observada após a aplicação de KL140/2.5 (lote 73) ou KrL-120/5.0 (lote 93) a 1 % em peso em água, indicado para os peritos na técnica que o(s) polipeptídeo(s) catiónico(s)
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 125/137 sintético(s) não exibira(m) potencial de sensibilização. A FIG. 31 representa os resultados de um estudo de toxicidade oral em ratos. Nenhuma anormalidade foi observada ao longo dos três dias após a administração de KL-140/2.5 em água ou KrL-120/5.0 em água aos ratos em doses variando de 0,625 mg/kg a 160 mg/kg através de ingestão oral forçada.
[0151] Os estudos de toxicidade sistêmica após a administração intraperitoneal forneceram resultados inesperados. Como mostrado na FIG. 32, foi observado que a administração intraperitoneal de uma polilisina de aproximadamente 100 unidades de aminoácidos (K-100) a uma concentração de 20 mg/mL e uma dose total de 800/mg/kg era bastante tóxica, com a sobrevivência de 0 de 5 animais. Similarmente, foi observado que uma preparação do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-140/2.5-RAN, que não tem um arranjo de sequências em blocos de unidades de aminoácidos, era tóxica com a sobrevivência de 0 de 5 animais. Em contraste, todos os animais (5/5) sobreviveram após a administração de uma concentração e uma dose comparáveis de KrL120/5.0 em água. Como mostrado na FIG. 33, preparações aquosas de outro polipeptídeo catiônico com um arranjo de sequências segmentado ou em blocos de lisina e D,L-leucina, KrL-130/3.3 também exibiram um alto nível de segurança com sobrevivência total (5/ 5) em concentrações de até 20 mg/mL (dose de 800 mg/kg).
[0152] Estudos adicionais revelaram uma variabilidade inesperada quando foram verificados dois lotes diferentes (93 e 94) de polímeros que têm a mesma estrutura molecular alvo, KrL-120/5.0. Como representado nas FIG. 34, foi observado que o lote 93 causava toxicidade e letalidade sistêmica substanciais, após a administração intraperitoneal em
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 126/137
65/75 comparação com o lote 94. Isto foi particularmente surpreendente, porque tinha sido mostrado que o 93 era seguro para aplicação local no estudo de sensibilização de porquinhos da índia descrito anteriormente na FIG. 30. Também foi mostrado que o lote 93 era um agente microbicida eficiente in vitro contra bactérias gram-positivas e gram-negativas. Ainda, foi observado que era seguro e eficiente quando utilizado in vivo tanto em modelos de feridas abertas de suínos quanto em modelos de feridas fechadas de roedores com contaminação microbiana.
[0153] Em uma análise adicional dos lotes 93 e 94, foi observada uma diferença notável na automontagem em estruturas multiméricas que foi avaliada pela concentração de agregação crítica (CAC). Foi descoberto que o lote 93, o lote mais tóxico, tinha uma concentração de agregação crítica maior (130 pg/mL), indicando uma atividade mais fraca de automontagem em estruturas multiméricas que a do lote 94 (CAC: 51 pg/mL).
[0154] Os presentes inventores também descobriram que polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) que demonstrava(m) CACs baixas e/ou viscosidades altas quando preparado(s) em água era(m) relativamente seguro(s) quando administrado(s) na cavidade peritoneal. Como representado pelos dados na FIG. 35, foi mostrado que duas preparações de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) de lisina-L-leucina (KL) com um arranjo de sequências em blocos de unidades de aminoácidos, KL-170/3.3 e KL-140/2.5, eram muito seguras após a administração intraperitoneal. Este(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) e aqueles possuindo estruturas intimamente relacionadas demonstram um alto nível de automontagem, que é medido por CACs baixas (tipicamente de um único dígito pg/mL; ver também a FIG. 11 acima). Os presentes inventores
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 127/137
66/75 também descobriram que o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) que demonstrava(m) perfis de segurança mais alta após a aplicação intraperitoneal também demonstrava(m) viscosidade e/ou firmeza relativamente alta na análise de textura em preparações aquosas (ver a FIG. 13 até a FIG. 17). Assim, os presentes inventores desenvolveram princípios gerais que são descritos aqui para guiar os peritos na técnica no planejamento do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) que tem(têm) menor risco de toxicidades sistêmicas.
[0155] Também foi observado que aditivos de formulação afetam o perfil de segurança das composições de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) que são administradas de forma intraperitoneal. Como mostrado na FIG. 36, preparações de KL-140/2.5 em água ou água e hidroxietil celulose (HEC) demonstraram algumas diferenças na segurança. Notavelmente, foi observado que preparações com teor de HEC maior eram mais tóxicas, apesar do fato de que este aditivo é amplamente considerado seguro. A FIG. 37 mostra exemplos adicionais de alteração na formulação que podem aumentar a toxicidade após a administração intraperitoneal.
[0156] Consideradas juntas, estas descobertas indicam que a compatibilidade com tecido local e a segurança sistêmica não são as mesmas e que é importante se dirigir às duas coisas. Notavelmente, tanto as características de planejamento do polímero quanto os parâmetros de formulação podem aumentar ou reduzir o risco de toxicidades sistêmicas. Considerando as características de planejamento do polímero, os dados dos presentes inventores indicam que pode(m) ser gerado(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) mais seguro(s) através das características de planejamento que promovem a automontagem com menores concentrações
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 128/137
67/75 de agregação críticas e/ou que promovem viscosidades mais altas. Ainda, os presentes inventores descobriram que os aditivos de formulação devem ser selecionados de maneira a manter ou a intensificar a automontagem do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) em estruturas multiméricas e/ou a manter ou a aumentar a viscosidade do polímero.
[0157] A proporção de toxicidade sistêmica que limita a dose para dose local eficiente pode depender de locais dos tecidos e/ou cenários patofisiológicos. Tanto a dose eficiente quanto a dose tóxica podem ser determinadas após a aplicação em um local específico ou um cenário patofisiológico. Alternativamente, um tipo de “barreira maior” pode ser estabelecido através da determinação da dose de toxicidade sistêmica após a aplicação em um local com absorção sistêmica previsivelmente alta (tal como a cavidade peritoneal). A dose local eficiente pode ainda ser determinada após a aplicação no local específico ou no cenário patofisiológico (por exemplo, lesão nos membros, infecção em tecidos moles, infecção nos seios da face).
[0158] Em uma modalidade, os agentes antimicrobianos ou as composições antimicrobianas podem ser selecionadas com base em parte nas medidas de toxicidade local ou sistêmica in vivo.
[0159] Em uma modalidade, os agentes antimicrobianos ou as composições antimicrobianas podem ser selecionadas com base em parte nas medidas de toxicidade in vivo após a administração intraperitoneal.
[0160] Modalidades particulares da invenção podem incluir agentes antimicrobianos ou composições antimicrobianas que podem ser infundidas de forma segura na cavidade peritoneal de camundongos em doses maiores que a dose que se espera ser eficiente para a redução das
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 129/137
68/75 cargas microbianas após a aplicação local nos tecidos sem ser na cavidade peritoneal.
Exemplo 8 [0161] O método de esterilização é importante. Os presentes inventores descobriram que a segurança das composições farmacêuticas antimicrobianas com base em polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) depende do planejamento molecular (especialmente do arranjo de sequências em blocos catiônicos-hidrofóbicos), da automontagem do polímero em estruturas multiméricas e da viscosidade. Em uma modalidade, a esterilização das composições farmacêuticas antimicrobianas é realizada através de métodos que mantêm a integridade molecular, as estruturas multiméricas e a viscosidade.
[0162] As FIGS. 38-41 demonstram que as técnicas de esterilização com radiação tradicionais podem causar a ruptura da estrutura molecular do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) e a perda da firmeza da composição, que são avaliadas através da análise da textura. Também foi mostrado que a esterilização com feixes de E de preparações aquosas de polipeptídeos catiônicos sintéticos causam uma perda importante na viscosidade. Foi observado que as amostras ficaram tão fluidas quanto a água. Dessa maneira, as técnicas de esterilização com radiação precisam ser cuidadosamente controladas e/ou modificadas para uso na esterilização de composições farmacêuticas antimicrobianas com polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s).
[0163] Em contraste com as técnicas de radiação, tanto a esterilização por filtração quanto a esterilização com calor (autoclavagem) fornecem esterilização eficiente de composições farmacêuticas
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 130/137
69/75 antimicrobianas enquanto mantêm a estrutura molecular do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) e mantêm as propriedades físicas desejáveis das composições aquosas que contém o(s) mesmo(s). As FIGS 42-46 mostram cromatogramas de SEC que demonstram a manutenção da integridade molecular após a esterilização por filtração e autoclavagem.
[0164] A esterilização por filtração e por autoclavagem também mantêm propriedades físicas benéficas importantes das preparações aquosas e das composições que incluem o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s). A FIG. 47 demonstra que uma preparação aquosa do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-120/2.5 (lote BAC004) a 1,25 % em peso em água com 4,5 % em peso de manitol exibiu propriedades de viscosidade dinâmica quase idênticas pré- e pós-esterilização por filtração. A FIG. 48 e a FIG. 49 demonstram que preparações aquosas do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-160/3.2 (lote BAC003) mantém níveis substanciais de viscosidades de adelgaçamento por cisalhamento após a autoclavagem, embora o nível geral seja de alguma maneira reduzido quando comparado com o das amostras pré-autoclavagem. Ainda, a esterilização na autoclave de várias preparações e composições aquosas resultou na manutenção da propriedade benéfica de firmeza, que é avaliada através da análise de textura, embora alguma redução na firmeza fosse observada (FIGs. 50 e 51). Os dados indicaram ainda que a redução na firmeza foi observada em concentrações mais altas do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) e na presença de certos aditivos, tal como HEC. Com a finalidade de explicação, as reduções observadas na viscosidade e na firmeza podem ser causadas por um processo de dissolução e reanelamento adicionais das estruturas multiméricas que pode ocorrer durante o processo de autoclavagem. Dito isso, é considerado
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 131/137
70/75 que estas preparações mantêm os benefícios de viscosidade e firmeza. A FIG. 52 indica que a atividade tensoativa do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KrL-120/5.0 foi mantida pós-esterilização na autoclave.
Exemplo 9 [0165] Para serem tanto eficientes na inibição ou na morte de micro-organismos quanto carregarem um baixo risco de toxicidades locais e sistêmicas, as modalidades de uma composição farmacêutica antimicrobiana que é descrita aqui proporcionam tanto atividade antimicrobiana quanto propriedades fisicoquímicas benéficas. As últimas estão associadas com melhor automontagem do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) em estruturas multiméricas, viscosidade maior do que a observada em preparações aquosas de muitas proteínas, como exemplificado pela albumina ou as duas coisas. Em várias modalidades uma redução adicional no risco das toxicidades tanto locais quanto sistêmicas é atingida através da esterilização da composição farmacêutica antimicrobiana, contanto que o processo de esterilização seja realizado de uma maneira que não tenha impacto adverso significativo sobre a integridade molecular do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) ou as propriedades fisicoquímicas benéficas da composição farmacêutica antimicrobiana. Finalmente, para atingir tanto eficácia quanto baixo risco de toxicidades locais e sistêmicas em um cenário in vivo, o método de aplicação (que inclui quanto e com que frequência), é importante considerar, especialmente quando a composição farmacêutica antimicrobiana é aplicada nos tecidos sem ser a pele intacta saudável.
[0166] Sem limitar o âmbito da invenção, em alguns cenários clínicos, tais como aqueles que envolvem feridas cirúrgicas ou traumáticas
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 132/137 grandes, pode ser importante aplicar a composição farmacêutica antimicrobiana que é descrita aqui “em abundância” para atingir eficácia antimicrobiana. Como discutido anteriormente, “em abundância” refere-se a uma dose de tratamento total da composição farmacêutica antimicrobiana que inclui 1 g do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) ou mais para uma pessoa de 70 kg, que representa 14,3 mg/kg. Quando se aplica a composição farmacêutica antimicrobiana em abundância, a eficácia antimicrobiana, as propriedades fisicoquímicas e o método de uso devem ser todos considerados em combinação com a finalidade de minimizar o risco de toxicidade local e sistêmica no paciente (humano ou animal). As composições farmacêuticas antimicrobianas descritas aqui podem ser utilizadas em vários e diversos cenários clínicos. Em algumas modalidades, a aplicação direta nos tecidos expostos de cirurgia e trauma está entre os usos de valores mais altos. A FIG. 53 fornece uma representação gráfica da classificação de feridas comumente utilizada em cenários cirúrgicos. As feridas são classificadas como Classe I (Limpas), Classe II (Limpas/Contaminadas), Classe III (Contaminadas) e Classe IV (Sujas/Infectadas). Na consideração dos métodos de uso, nos cenários de feridas tanto de Classe I quanto de Classe II, as composições farmacêuticas antimicrobianas descritas aqui podem ser aplicadas nos tecidos antes da contaminação microbiana substancial. Em algumas modalidades, uma combinação de atividade microbicida direta e propriedades de barreira microbiana é benéfica em tais cenários. Ainda, nos cenários de feridas de Classe III e de Classe IV, as composições farmacêuticas antimicrobianas descritas aqui podem ser aplicadas nos tecidos antes da contaminação microbiana significativa ou da formação de biofilme ou infecção visível. Em algumas modalidades, uma combinação de atividade microbicida direta e propriedades tensoativas é benéfica em tais
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 133/137
72/75 cenários.
[0167] 0 benefício de uma combinação de atividade microbicida direta e propriedades de barreira microbiana pode ser ilustrado em vários cenários de teste. A FIG. 54 representa os resultados de um modelo de pele de suínos ex vivo de contaminação microbiana. Neste modelo, os explantes de pele podem ser colocados horizontalmente e ser pré-tratados com preparações do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) ou podem ser inclinados verticalmente durante um período com a finalidade de promover o escoamento da preparação antimicrobiana. Este método é projetado para imitar melhor a aplicação nos tecidos in vivo. Como os dados indicam, preparações tanto de KL-120/2.5 quanto de KL-160/3.2 são bastante eficientes em 1 % em peso e em 2 % em peso sobre as amostras de tecido horizontais. Entretanto, quando as amostras são inclinadas verticalmente durante um período, é mostrado que as preparações com concentrações mais altas, que têm uma viscosidade maior, são mais eficientes. Ambas as preparações tém substancialmente mais atividade antimicrobiana que a requerida para tratar uma carga microbiana deste tamanho.
[0168] A FIG. 55 representa os resultados de um modelo de ferida aberta de suínos in vivo no qual preparações de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-160/3.2 foram aplicadas em feridas de espessura total 15 minutos antes da contaminação bacteriana. Quando avaliadas 4 horas após a inoculação com uma cultura mista em alta densidade de S. epidermidis e P. aeruginosa, as feridas tratadas exibiram pouca, se alguma, contaminação microbiana do tecido, comparadas com os controles. A FIG. 56 demonstra que o efeito do pré-tratamento de tecidos antes da contaminação microbiana é dependente tanto da concentração quanto do tempo. Assim, em cenários clínicos, as
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 134/137
73/75 modalidades preferidas incluem a administração de quantidades eficientes de composições de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) e aplicações repetidas nos tecidos que são expostos ao longo de períodos prolongados (por exemplo, cirurgias prolongadas ou feridas que envolvem fechamento retardado). A FIG. 57 mostra os resultados do pré-tratamento de uma ferida de roedor com uma tela cirúrgica implantada (agindo como um corpo estranho) antes da inoculação microbiana. Neste modelo, a ferida é fechada logo após a inoculação. Como os dados mostram a única aplicação da composição farmacêutica antimicrobiana com polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) KL-160/3.2 resultou em reduções muito substanciais nas UFC (multi-log) que foram avaliadas em 48 horas.
[0169] Considerados juntos, estes dados demonstram: (1) os benefícios da atividade microbicida direta e das propriedades de barreira microbiana; (2) o valor do tratamento precoce antes da contaminação microbiana substancial; e (3) a importância de regimes de tratamento que levam em consideração tanto a duração da exposição do tecido quanto o tempo potencial de contaminação microbiana.
[0170] O benefício de uma combinação de atividade microbicida direta e propriedades tensoativas, também pode ser ilustrado em vários cenários de teste. Como mostrado na FIG. 53, as composições antimicrobianas descritas aqui podem ser aplicadas em muitos e diversos cenários clínicos nos quais já há uma contaminação microbiana substancial dos tecidos, biofilmes existentes ou infecção visível ou uma combinação de dois ou mais. Tais cenários podem incluir procedimentos cirúrgicos com feridas de Classe III e de Classe IV. Estes incluem tratamentos de infecções no local da cirurgia, incluindo aquelas que envolve corpos estranhos (por exemplo, infecções em articulação
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 135/137 periprostética, infecções na tela de hérnia, infecções no implante de mama etc.). Estes cenários também incluem a maioria das feridas traumáticas, bem como o tratamento cirúrgico ou não cirúrgico de áreas frequentemente contaminadas, tais como os seios da face (especialmente em pacientes com sinusite crônica). O reparo dos locais cirúrgicos com corpos estranhos, mesmo aqueles sem infecção visível, também deve ser considerado em alto risco para formação de biofilme. Como citado anteriormente, nestes cenários é provável que as composições farmacêuticas antimicrobianas descritas aqui sejam aplicadas nos locais contaminação microbiana existente. A combinação de atividade microbicida direta e propriedades tensoativas pode ter benefício especial.
[0171] A FIG. 58 e a FIG. 59 demonstram atividade potente contra P. aeruginosa crescida nos biofilmes utilizando preparações de polipeptídeo(s) antimicrobiano(s) sintético(s) tanto com atividades microbicidas diretas quanto com atividade tensoativa. As FIGS. 60-63 representam os resultados de estudos que demonstram estes mesmos princípios in vivo. As composições antimicrobianas descritas aqui que demonstram atividade microbicida direta e propriedades tensoativas são altamente eficientes quando aplicadas nos locais dos tecidos que estão altamente contaminados com micro-organismos, tanto gram-positivos (tal como S. aureus resistente à meticilina) quanto gram-negativos (tal como P. aeruginosa).
[0172] Em adição à redução substancial das contagens microbianas, em várias modalidades estes tratamentos parecem ser protetores do tecido, o que pode ser devido em parte a uma redução na inflamação do tecido, uma fonte reconhecida de dano do tecido. Em várias modalidades as reduções na inflamação podem ser obtidas ou aumentadas
Petição 870190104167, de 15/10/2019, pág. 136/137
75/75 através da combinação das composições antimicrobianas descritas aqui com um agente anti-inflamatório.
[0173] Este exemplo ilustra os benefícios de combinar a atividade microbicida direta com as propriedades de barreira e os benefícios de combinar a atividade microbicida direta com a atividade tensoativa. Notavelmente, os peritos na técnica podem utilizar a orientação fornecida aqui para o planejamento de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) que tem(têm) todas as três funcionalidades: atividade microbicida direta, propriedades de barreira e atividade tensoativa. Na manufatura de uma composição farmacêutica com este(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) multifuncional(is), é importante que a formulação e a esterilização sejam realizadas de uma maneira que mantenha estas funcionalidades.
[0174] Em várias modalidades, são preferidas as composições antimicrobianas que contêm polipeptídeos catiônicos sintéticos que são descritas aqui nas quais o(s) polipeptídeo(s) e a composição geral sejam planejados para o fornecimento de um alto nível de atividade antimicrobiana, acoplado a um baixo risco de toxicidades locais e sistêmicas. São desejáveis as propriedades fisicoquímicas que incluem automontagem em estruturas multiméricas e/ou viscosidade.

Claims (37)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, compreendendo:
    um carreador aquoso; e polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) disperso(s) no carreador aquoso a uma concentração na faixa de aproximadamente 0,01% a aproximadamente 5%, em peso com base no peso total da composição farmacêutica antimicrobiana;
    caracterizada por que:
    o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) compreende(m) um grande número de unidades de aminoácidos carregados positivamente em pH neutro;
    o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) a uma concentração de 2 % em peso em água deionizada tem(têm) uma viscosidade a 37°C de 2 centistokes (cSt) ou superior;
    o carreador aquoso, que contém o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) a 2% em peso, tem uma viscosidade a 37°C que é maior que aquela do carreador aquoso que contém albumina a 2% em peso no lugar do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s); e a composição farmacêutica antimicrobiana tem uma toxicidade baixa após ser infundida na cavidade peritoneal de um grande número de camundongos adultos jovens saudáveis a uma dose de 10 mL/kg, que é medida por uma taxa de sobrevivência dos camundongos de 50% ou superior em 72 horas.
  2. 2. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com a
    Petição 870190098833, de 02/10/2019, pág. 132/140
    2/8
    Reivindicação 1, caracterizada por que o grande número de unidades de aminoácidos carregados positivamente em pH neutro é pelo menos
    10.
  3. 3. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com a Reivindicação 1 ou 2, caracterizada por que o carreador aquoso é água ou uma solução aquosa de um sal farmaceuticamente aceitável.
  4. 4. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 3, caracterizada por que o carreador aquoso compreende ainda aditivo(s) não iônico(s).
  5. 5. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com a Reivindicação 4, caracterizada por que o(s) aditivo(s) não iônico(s) é(estão) presente(s) em uma quantidade eficiente para aumentar a concentração osmótica da composição farmacêutica antimicrobiana até um valor que é pelo menos 10% maior que aquele da composição farmacêutica antimicrobiana sem o(s) dito(s) aditivo(s).
  6. 6. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com a Reivindicação 4 ou 5, caracterizada por que o aditivo não iônico é selecionado do grupo que consiste de dextrose, manitol, glicerol, xilitol, sorbitol, tensoativo(s) e combinações dos mesmos.
  7. 7. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 6, caracterizada por que o carreador aquoso compreende ainda um aditivo em uma quantidade que aumenta a viscosidade da composição farmacêutica antimicrobiana.
  8. 8. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 7, caracterizada por que o carreador aquoso compreende ainda um aditivo em uma quantidade que reduz a viscosidade da composição farmacêutica antimicrobiana.
  9. 9. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 8, caracterizada por que a composição farmacêutica antimicrobiana é esterilizada através de técnica(s) de esterilização configurada(s) para a obtenção de uma
    Petição 870190098833, de 02/10/2019, pág. 133/140
    3/8 composição farmacêutica antimicrobiana esterilizada com o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) que tem(têm) um peso molecular ponderai médio comparável àquele do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) da composição farmacêutica antimicrobiana sem esterilização através da(s) dita(s) técnica(s) de esterilização.
  10. 10. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 9, caracterizada por que a composição farmacêutica antimicrobiana é esterilizada através de técnica(s) de esterilização configurada(s) para a obtenção de uma composição farmacêutica antimicrobiana esterilizada com o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) que tem(têm) um peso molecular ponderai médio e capacidade de dispersão comparável àqueles do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) da composição farmacêutica antimicrobiana sem esterilização através da(s) dita(s) técnica(s) de esterilização.
  11. 11. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 10, caracterizada por que a composição farmacêutica antimicrobiana é esterilizada através de técnica(s) de esterilização configurada(s) para a obtenção de uma composição farmacêutica antimicrobiana esterilizada que tem um nível de viscosidade a 37°C que é comparável àquele da composição farmacêutica antimicrobiana sem esterilização através da(s) dita(s) técnica(s) de esterilização.
  12. 12. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com a Reivindicação 11, caracterizada por que a viscosidade da composição farmacêutica antimicrobiana esterilizada a 37°C está na faixa de 20% a 200% da viscosidade de uma composição farmacêutica antimicrobiana não esterilizada comparável de outra maneira.
  13. 13. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 12, caracterizada por que a composição farmacêutica antimicrobiana tem uma atividade
    Petição 870190098833, de 02/10/2019, pág. 134/140
    4/&
    microbiocida que é comparável àquela da composição farmacêutica antimicrobiana não esterilizada comparável de outra maneira, em que a atividade microbiocida é determinada por um teste de morte com tempo de 60 minutos contra pelo menos uma bactéria selecionada do grupo que consiste de S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa e E. coli.
  14. 14. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 13, caracterizada por que o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) compreende(m) ainda um grande número de unidades de aminoácidos hidrofóbicos.
  15. 15. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com a Reivindicação 14, caracterizada por que o grande número de unidades de aminoácidos hidrofóbicos compreende pelo menos 5 unidades de aminoácidos hidrofóbicos selecionados de leucina (L), isoleucina (1), valina (V), fenilalanina (F) ou alanina (A).
  16. 16. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com a Reivindicação 14, caracterizada por que o grande número de unidades de aminoácidos hidrofóbicos compreende pelo menos 10 unidades de aminoácidos hidrofóbicos selecionados de leucina (L), isoleucina (1), valina (V), fenilalanina (F) ou alanina (A).
  17. 17. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com a Reivindicação 14, caracterizada por que o grande número de unidades de aminoácidos hidrofóbicos compreende pelo menos 15 unidades de aminoácidos hidrofóbicos selecionados de leucina (L), isoleucina (1), valina (V), fenilalanina (F) ou alanina (A).
  18. 18. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 14 a 17, caracterizada por que as unidades de aminoácidos hidrofóbicos compreendem unidades de leucina.
  19. 19. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 18, caracterizada por que o grande número de unidades de aminoácidos carregados positivamente compreende unidades de lisina.
    Petição 870190098833, de 02/10/2019, pág. 135/140
    5/8
  20. 20. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 19, caracterizada por que o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) é(são) um copolipeptídeo em blocos que compreende unidades hidrofóbicas de leucina e unidades de lisina carregadas positivamente.
  21. 21. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 20, caracterizada por que o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) compreende(m) pelo menos 40 unidades de aminoácidos.
  22. 22. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 21, caracterizada por que o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) compreende(m) um arranjo de sequência de unidades de aminoácidos hidrofóbicos e unidades de aminoácidos carregados positivamente que é configurado para promover automontagem do(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) em estruturas multiméricas.
  23. 23. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com a Reivindicação 22, caracterizada por que o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) se monta(m) em estruturas multiméricas, que são medidas por uma concentração de agregação crítica que é menor que 1000 pg/mL a 37°C em água deionizada.
  24. 24. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 23, caracterizada por que o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s), em água deionizada a 37°C a uma concentração de 3 % em peso, forma um hidrogel de autossustentação.
  25. 25. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 24, caracterizada por que o(s) polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) exibe(m) atividade tensoativa em água deionizada a 37°C a uma concentração de 1 % em peso, que é medida por uma redução na tensão superficial de pelo menos 10% quando comparada à da água deionizada sozinha.
    Petição 870190098833, de 02/10/2019, pág. 136/140
    6/8
  26. 26. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 25, caracterizada por que compreende ainda um composto anti-inflamatório.
  27. 27. Composição Farmacêutica Antimicrobiana, de acordo com a Reivindicação 26, caracterizada por que o composto anti-inflamatório é selecionado do grupo que consiste de um corticosteroide, um inibidor de histamina e um inibidor de citocina.
  28. 28. Método de Prevenção de Contaminação Microbiana de Tecidos Exceto Pele Saudável Intacta, caracterizado por que compreende:
    a identificação de um indivíduo mamífero que tem um local do tecido que não é pele saudável intacta que está em risco de contaminação microbiana; e a administração da composição farmacêutica antimicrobiana, conforme definida em qualquer uma das Reivindicações de 1 a 27, no local em uma quantidade eficiente para proteger pelo menos parcialmente o local do tecido de se tornar contaminado com micro-organismos.
  29. 29. Método de Prevenção de Contaminação Microbiana de Tecidos Exceto Pele Saudável Intacta, de acordo com a Reivindicação 28, caracterizado por que o local do tecido é selecionado de pele doente, um local cirúrgico, um ferimento traumático, tecidos que sofreram desbridamento, cavidade peritoneal, uma via aérea pulmonar, um seio da face e trato urinário.
  30. 30. Método de Prevenção de Contaminação Microbiana de Tecidos Exceto Pele Saudável Intacta, de acordo com a Reivindicação 28 ou 29, caracterizado por que compreende ainda a obtenção de amostras do local do tecido para avaliar a carga microbiana.
  31. 31. Método de Prevenção de Contaminação Microbiana de Tecidos Exceto Pele Saudável Intacta, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 28 a 30, caracterizado por que a composição
    Petição 870190098833, de 02/10/2019, pág. 137/140
    7/8 farmacêutica antimicrobiana é administrada durante a cirurgia em um local cirúrgico.
  32. 32. Método de Prevenção de Contaminação Microbiana de Tecidos Exceto Pele Saudável Intacta, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 28 a 31, caracterizado por que a composição farmacêutica antimicrobiana é administrada no local do tecido em abundância.
  33. 33. Método de Redução da Carga Microbiana Dentro ou Sobre Tecidos Exceto Pele Saudável Intacta, caracterizado por que compreende:
    a identificação de um indivíduo mamífero que tem um local do tecido que não é a pele saudável intacta que tem uma carga microbiana; e a administração da composição farmacêutica antimicrobiana, conforme definida em qualquer uma das Reivindicações de 1 a 27, no local do tecido em uma quantidade eficiente para reduzir pelo menos parcialmente a carga microbiana.
  34. 34. Método de Redução da Carga Microbiana Dentro ou Sobre Tecidos Exceto Pele Saudável Intacta, de acordo com a Reivindicação 33, caracterizado por que o local do tecido é selecionado de pele doente, um local cirúrgico, um ferimento traumático, tecido que sofreu desbridamento, abscesso, cavidade peritoneal, uma via aérea pulmonar, um seio da face e trato urinário.
  35. 35. Método de Redução da Carga Microbiana Dentro ou Sobre Tecidos Exceto Pele Saudável Intacta, de acordo com a Reivindicação 33 ou 34, caracterizado por que compreende ainda a obtenção de amostras do local do tecido para avaliar a carga microbiana.
  36. 36. Método de Redução da Carga Microbiana Dentro ou Sobre Tecidos Exceto Pele Saudável Intacta, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 33 a 35, caracterizado por que a composição
    Petição 870190098833, de 02/10/2019, pág. 138/140
    8/8 farmacêutica antimicrobiana é administrada durante a cirurgia em um local do tecido que está contaminado, infectado com micro-organismos ou as duas coisas.
  37. 37. Método de Redução da Carga Microbiana Dentro ou Sobre Tecidos Exceto Pele Saudável Intacta, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 33 a 36, caracterizado por que a composição farmacêutica antimicrobiana é administrada no local do tecido em abundância.
BR112019020781A 2017-04-06 2018-04-05 composições e usos de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) aplicado(s) de forma local com maior desempenho e segurança BR112019020781A2 (pt)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762482630P 2017-04-06 2017-04-06
PCT/US2018/026322 WO2018187617A1 (en) 2017-04-06 2018-04-05 Compositions and uses of locally applied antimicrobials with enhanced performance and safety

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BR112019020781A2 true BR112019020781A2 (pt) 2020-04-28

Family

ID=63712780

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112019020781A BR112019020781A2 (pt) 2017-04-06 2018-04-05 composições e usos de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) aplicado(s) de forma local com maior desempenho e segurança

Country Status (12)

Country Link
US (2) US11285189B2 (pt)
EP (1) EP3606543A4 (pt)
JP (2) JP2020513016A (pt)
KR (1) KR20200018400A (pt)
CN (1) CN110740744A (pt)
AU (2) AU2018249552A1 (pt)
BR (1) BR112019020781A2 (pt)
CA (1) CA3058901A1 (pt)
MX (1) MX2022007904A (pt)
RU (1) RU2019133628A (pt)
SG (1) SG11201909016TA (pt)
WO (1) WO2018187617A1 (pt)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2867903C (en) 2012-03-23 2023-02-14 Amicrobe, Inc. Compositions and uses of antimicrobial materials with tissue-compatible properties
BR112019020781A2 (pt) 2017-04-06 2020-04-28 Amicrobe Inc composições e usos de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) aplicado(s) de forma local com maior desempenho e segurança
CN114616240A (zh) 2019-11-08 2022-06-10 高等教育联邦系统-匹兹堡大学 包含抗微生物肽的组合物
JP7335025B2 (ja) 2020-03-31 2023-08-29 株式会社スリー・ディー・マトリックス 照射による自己組織化ペプチドの滅菌
CA3179706A1 (en) * 2020-04-08 2021-10-14 Amicrobe, Inc. Compositions and uses of locally applied synthetic amino acid polymers for prevention and treatment of viral infections

Family Cites Families (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5636643A (en) 1991-11-14 1997-06-10 Wake Forest University Wound treatment employing reduced pressure
US6632922B1 (en) 1998-03-19 2003-10-14 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for controlled polypeptide synthesis
US6680365B1 (en) 1998-03-19 2004-01-20 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for controlled polypeptide synthesis
US6686446B2 (en) 1998-03-19 2004-02-03 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for controlled polypeptide synthesis
TW570805B (en) 1998-09-01 2004-01-11 Hoffmann La Roche Water-soluble pharmaceutical composition in an ionic complex
AU2875700A (en) 1999-02-26 2000-09-14 Chiron Corporation Microemulsions with adsorbed macromoelecules and microparticles
DE60118228T2 (de) 2000-09-28 2006-12-14 Chiron Corp. (N.D.Ges.D. Staates Delaware), Emeryville Mikropartikel zur verabreichung von heterologen nukleinsäure
US6835536B2 (en) 2001-08-21 2004-12-28 Micrologix Biotech Inc. Antimicrobial cationic peptides and formulations thereof
US6818732B2 (en) 2001-08-30 2004-11-16 The Regents Of The University Of California Transition metal initiators for controlled poly (beta-peptide) synthesis from beta-lactam monomers
JP2003171463A (ja) 2001-12-06 2003-06-20 Chisso Corp ポリリジン及びその製造法
WO2003067311A1 (fr) 2002-02-07 2003-08-14 Ophtecs Corporation Solution pour lentilles de contact
TR200502189T1 (tr) 2002-12-09 2007-01-22 American Bioscience, Inc. Kompozisyonlar ve farmakolojik etken maddelerin aktarımı için yöntemler.
ES2302034T3 (es) 2003-07-11 2008-07-01 Theravance, Inc. Antibioticos de cefalosporina-glicopeptido reticulados.
WO2005018701A1 (en) 2003-08-25 2005-03-03 Kane Biotech Inc. Synergistic antimicrobial compositions and methods of inhibiting biofilm formation
ES2305897T3 (es) 2003-12-30 2008-11-01 Bioactive Polymers Ab Proteccion de superficie de tejidos biologicos expuestos.
EP1987843A3 (en) 2004-03-12 2011-10-26 Intercell AG Method for solubilising peptide mixtures
ATE479704T1 (de) 2004-08-18 2010-09-15 Novabiotics Ltd Antimikrobielle peptide mit einem arginin- und /oder lysin-haltigen motiv
MX2007015036A (es) 2005-06-06 2008-02-07 Novozymes As Polipeptidos con actividad antimicrobiana y polinucleotidos que los codifican.
US20080139450A1 (en) 2005-07-01 2008-06-12 Srinivasa Madhyastha Antimicrobial Compositions and Uses Thereof
US20070190110A1 (en) 2006-02-10 2007-08-16 Pameijer Cornelis H Agents and devices for providing blood clotting functions to wounds
JP2010511630A (ja) 2006-12-01 2010-04-15 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティー オブ カリフォルニア 自己組織化ブロックコポリマーのベシクル、ならびにその生成および使用法
EP2173389A2 (en) 2007-06-25 2010-04-14 Lipopeptide AB New medical products
WO2009032605A2 (en) 2007-08-27 2009-03-12 Massachusetts Institute Of Technology Bi-functional polymer-attached inhibitors of influenza virus
CA2727428A1 (en) 2008-06-19 2009-12-23 Nippon Shinyaku Co., Ltd. Drug carrier
KR20170001756A (ko) 2008-10-20 2017-01-04 모레 매트릭스 인코포레이티드 유착 치료 또는 예방용 폴리펩티드
CA2750340C (en) 2009-01-23 2017-09-19 Kane Biotech Inc. Biofilm-removing antimicrobial compositions and uses thereof
GB0905451D0 (en) 2009-03-31 2009-05-13 Novabiotics Ltd Biofilms
AU2011247584B2 (en) 2010-04-27 2016-01-14 Lysando Ag Method of reducing biofilms
CA2912577C (en) * 2010-08-23 2019-02-19 Michael P. Bevilacqua Compositions and uses of materials with hemostatic activity
WO2012098653A1 (ja) 2011-01-19 2012-07-26 株式会社メニコン コンタクトレンズ用液剤
US9781949B2 (en) 2011-03-31 2017-10-10 The University Of Massachusetts Antimicrobial delivery systems, methods of manufacture, and methods of use thereof
CA2867903C (en) 2012-03-23 2023-02-14 Amicrobe, Inc. Compositions and uses of antimicrobial materials with tissue-compatible properties
DE102014101663A1 (de) 2014-02-11 2015-08-13 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. Synthetische artifizielle Peptide mit antimikrobieller Wirkung
WO2016044683A1 (en) 2014-09-19 2016-03-24 Tensive Controls, Inc. Anti-microbial peptides
US20160120936A1 (en) * 2014-10-30 2016-05-05 Karen Troxel Methods of preventing surgical site infections
JP2016113373A (ja) * 2014-12-11 2016-06-23 エスポ化学株式会社 抗菌性、抗ウイルス性を有する水溶性組成物
BR112019020781A2 (pt) 2017-04-06 2020-04-28 Amicrobe Inc composições e usos de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) aplicado(s) de forma local com maior desempenho e segurança
JP2021514985A (ja) 2018-03-02 2021-06-17 ジャニュアリー セラピューティクス，インク． ナノ粒子組成物

Also Published As

Publication number Publication date
SG11201909016TA (en) 2019-10-30
RU2019133628A (ru) 2021-05-06
WO2018187617A1 (en) 2018-10-11
RU2019133628A3 (pt) 2021-07-14
AU2018249552A1 (en) 2019-10-31
JP2023054375A (ja) 2023-04-13
CA3058901A1 (en) 2018-10-11
US20210100867A1 (en) 2021-04-08
US20230017994A1 (en) 2023-01-19
CN110740744A (zh) 2020-01-31
JP2020513016A (ja) 2020-04-30
EP3606543A4 (en) 2020-12-16
MX2022007904A (es) 2022-07-21
AU2023202283A1 (en) 2023-05-11
US11285189B2 (en) 2022-03-29
EP3606543A1 (en) 2020-02-12
KR20200018400A (ko) 2020-02-19
WO2018187617A8 (en) 2019-10-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BR112019020781A2 (pt) composições e usos de polipeptídeo(s) catiônico(s) sintético(s) antimicrobiano(s) aplicado(s) de forma local com maior desempenho e segurança
Veyries et al. Controlled release of vancomycin from poloxamer 407 gels
ES2820369T3 (es) Composiciones biodegradables adecuadas para liberación controlada
Sheshala et al. Investigation on solution-to-gel characteristic of thermosensitive and mucoadhesive biopolymers for the development of moxifloxacin-loaded sustained release periodontal in situ gels
ES2524994T3 (es) Composiciones farmacéuticas para el tratamiento de trastornos del oído interno.
ES2392964T3 (es) Biomateriales novedosos, su preparación y uso
ES2221127T3 (es) Uso de acitromicina en el tratamiento topico de infecciones oculares.
BR112014023068B1 (pt) Composição aquosa para prevenir, inibir ou tratar infecção e respectivo uso
CA3137417A1 (en) Dissolvable polymeric eye inserts and method of using same
US20220072134A1 (en) Temperature-responsive degradable hydrogels
AU2022327162A1 (en) Films formed from self-assembling peptide hydrogels
ES2404156T3 (es) Una crema medicinal con ácido fusídico hecha utilizando fusidato de sodio e incorporando un biopolímero y el proceso para hacerla
EA008088B1 (ru) Фармацевтическая композиция в форме глазных капель на основе азитромицина, способ ее приготовления и применение азитромицина для получения глазных капель
CN109568645B (zh) 一种复合生长因子促修复凝胶及其制备方法与应用
P Venkatesh et al. In situ gels based drug delivery systems
ES2770498T3 (es) Hidrogeles híbridos
CN103179972A (zh) 储存稳定的粘性磷脂贮库制剂在治疗伤口中的用途
WO2019084197A1 (en) DEGRADABLE HYDROGELS SENSITIVE TO TEMPERATURE
KR20100129263A (ko) 다당류 미립자상 겔 함유 수분산체 및 그 제조 방법
JP6813357B2 (ja) 薬物送達システム
EP3389734B1 (en) Self-assembling peptides comprising non-ionic polar amino acids for anti-adhesion
BR112016014578B1 (pt) Formulação líquida adequada para injeção intra-articular, método para produção de um hidrogel compreendendo fgf-18, hidrogel e artigo manufaturado
Lall Design, characterization and evaluation of hydrogel based Timolol formulation for effective treatment of Glaucoma
Srinivasan et al. Formulation and evaluation of cefixime trihydrate topical gel for wound infections
ES2387440B2 (es) Formulaciones topicas de anfotericina b y metodo de obtencion

Legal Events

Date Code Title Description
B350 Update of information on the portal [chapter 15.35 patent gazette]