BR112019014191A2

BR112019014191A2 - Composto, composição farmacêutica, e, método para prevenir, tratar ou melhorar doenças do sistema imunológico.

Info

Publication number: BR112019014191A2
Application number: BR112019014191-0A
Authority: BR
Inventors: Larsen Jens; Larsen Mogens; Kyhn Rasmussen Lars; Ritzen Andreas; Marianne Duus Tine
Original assignee: Leo Pharma A/S
Priority date: 2017-01-11
Filing date: 2018-01-10
Publication date: 2020-02-11
Also published as: WO2018130563A1; RS61317B1; HRP20210095T1; PT3568396T; ZA201904190B; AU2018208516B2; US10703751B2; CA3045567A1; EP3568396B1; DK3568396T3; CY1123864T1; JP2020504186A; HUE052720T2; PL3568396T3; MY195576A; TW201829407A; TWI760419B; JP7009504B2; SI3568396T1; AU2018208516A1

Abstract

a presente invenção se refere a um composto de acordo com a fórmula (i), ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo; em que r1 é c1-alquila, r2 é c1-alquila, r3 é c2-alquila, r4 é hidrogênio, r5 é hidrogênio. a invenção se refere adicionalmente aos referidos compostos para uso em terapia, a composições farmacêuticas que compreendem os referidos compostos, aos referidos compostos para uso no tratamento de doenças autoimunes e a intermediários para a preparação dos referidos compostos.

Description

COMPOSTO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, E, MÉTODO PARA PREVENIR, TRATAR OU MELHORAR DOENÇAS DO SISTEMA IMUNOLÓGICO

CAMPO DA INVENÇÃO [001] Esta invenção se refere a compostos que são inibidores de

Janus quinases e derivados dos mesmos, a intermediários para a preparação dos ditos compostos, aos ditos compostos para uso em terapia e a composições farmacêuticas que compreendem os ditos compostos.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO [002] Esta invenção se refere a compostos inovadores que são inibidores de proteínas tirosina quinases, como as Janus quinases (JAK1, JAK2, JAK3 e TYK2) e, em particular, a Janus quinase 1 (JAK1).

[003] As proteínas tirosina quinases são uma família de enzimas que catalisam a transferência do fosfato terminal de trifosfato de adenosina para resíduos de tirosina em substratos proteicos. A fosforilação de resíduos de tirosina em substratos proteicos conduz à transdução de sinais intracelulares que regulam uma grande variedade de processos, como a diferenciação e a ativação do crescimento celular, o metabolismo, a hematopoiese, a defesa do hospedeiro e a imunorregulação. Como a elucidação dos mecanismos moleculares em várias afecções inflamatórias e outros distúrbios do sistema imune (por exemplo, doenças autoimunes), destacando-se o papel crucial destas vias de sinal intracelular, a modulação da atividade de proteínas tirosina quinases parece ser um caminho atrativo para a gestão de doenças inflamatórias. Foi identificado um grande número de proteínas tirosina quinases que podem ser proteínas tirosina quinases receptoras, por exemplo, o receptor da insulina, ou proteínas tirosina quinases não receptoras.

[004] As proteínas tirosina quinases JAK1, JAK2, JAK3 e TYK2 se associam seletivamente aos domínios citoplasmáticos de várias cadeias receptoras de citocinas e desempenham papéis essenciais na regulação

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2/79 dependente de citocinas da homeostase tecidual, iniciação da imunidade inata, formação de respostas imunitárias adaptativas e processos inflamatórios. Elas são essenciais na transdução de sinal em resposta à sua ativação via fosforilação da tirosina por estimulação dos receptores de citocinas. (1) Schindler C. et al. JAK-STAT signaling: from interferons to cytokines. J. Biol. Chem 2007; 282(28): 20059; (2) O’Shea J. J. Targeting the Jak/STAT pathway for immunosuppression; Ann. Rheum. Dis. 2004; 63 Suppl 2:ii67; (3) Schindler C. Series introduction. JAK-STAT signaling in human disease; J. Clin. Invest. 2002; 109(9): 1133); (4) O’Shea et. Al. Cell, Vol. 109, S121S131, 2002; (5) Schwartz D. M. et al. Nat. Rev. Rheumatol., 2016; 12(1): 2536; (6) O’Shea et al. New. Eng. J. Med. 2013; 368(2): 161-170.

[005] Embora JAK1, JAK2 e TYK2 sejam ubiquamente expressas,

JAK3 é predominantemente expressa em células hematopoiéticas.

[006] A JAK1 desempenha um papel essencial na mediação de respostas biológicas e a JAK1 é amplamente expressa e associada a várias famílias principais de receptores de citocinas. Ela está envolvida na sinalização por membros da família de subunidades γ do receptor IL-2 (IL-2, IL-4, IL-7R, IL-9R, IL-15R e IL-21R), a família de receptores IL-4 (IL -4R, IL-13R), a família de receptores gpl30 e receptores de citocina de classe II compreendendo a família de receptores IL-10 e ambas as famílias de receptores IFN do tipo I e tipo II.

[007] A JAK2 está implicada na sinalização por vários receptores de cadeia simples (incluindo Epo-R, GHR, PRL-R), a família de receptores IL-3, a família de receptores gpl30, a família de receptores IL-12 (IL-12 e IL-23) e uma parte da família de citocinas receptoras de Classe II. Assim, a JAK2 desempenha um papel essencial na transdução de sinais para Epo, IL-3, GMCSF, IL-5 e IFNy. Camundongos submetidos a knockout de JAK2 exibem um fenótipo letal embrionário.

[008] A JAK3 está envolvida na transdução de sinal por receptores

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3/79 que empregam a cadeia gama comum da família de receptores de citocinas tipo I, também conhecida como família de receptores de IL-2 (por exemplo, IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 e IL-21). Populações de pacientes XSCID foram identificadas com níveis reduzidos de proteína JAK3 ou com defeitos genéticos para a cadeia gama comum, sugerindo que a supressão imunológica deve resultar do bloqueio da sinalização através da via JAK3. Estudos em animais sugeriram que a JAK3 não apenas desempenha um papel crítico na maturação dos linfócitos B e T, mas que a JAK3 é constitutivamente necessária para manter a função das células T. A modulação da atividade imunológica através deste mecanismo inovador pode se revelar útil no tratamento de distúrbios proliferativos das células T, como doenças do sistema imunológico, em particular, doenças autoimunes.

[009] A TYK2 está implicada em interferons do tipo I, sinalização de IL-6, IL-10, IL-12 e IL-23. Um paciente humano com uma deficiência de TYK2 foi descrito e este paciente apresentava um distúrbio primário de imunodeficiência caracterizado como uma síndrome semelhante à hiper-IgE, com muitas infecções oportunistas por vírus, bactérias e fungos. Como se descobriu que a IL-23 desempenha um papel importante em muitas afecções inflamatórias crônicas, um inibidor de TYK2 pode ser muito eficaz no tratamento de pacientes influenciados pela IL-23.

[0010] A anemia e a neutropenia podem estar relacionadas à inibição da EPO e GM-CSF, respectivamente, uma vez que o efeito biológico destas duas citocinas depende, aparentemente, exclusivamente da ativação da JAK2. De modo semelhante, IL-12 e IL-23 estão envolvidas no engajamento da defesa imunológica inata e adaptativa a vírus, bactérias e fungos. Visto que estas citocinas se ligam a receptores que recrutam JAK2 e TYK2 na sua cascata de sinalização, é concebível que um inibidor seletivo de JAK1 não afete a sua atividade biológica e tenha assim um perfil mais seguro em comparação com compostos que inibem JAK1, JAK2, JAK3 e TYK2.

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4/79 [0011] A ativação de JAK leva à ativação de moléculas STAT e, portanto, à elicitação da via de sinalização JAK/STAT, que é altamente regulada por eventos de fosforilação. A ativação de moléculas de STAT é considerada um marcador farmacodinâmico válido para a atividade de JAK e a atividade de moléculas de JAK específicas pode ser avaliada pelo nível de molécula de STAT ativa recrutada preferencialmente.

[0012] Em particular, o receptor de IL-4 expresso por células imunes é constituído por duas cadeias diferentes, o ligante de alta afinidade e transdutor de sinal IL-4Ra e cadeia γ comum, ativando JAK1 e JAK3 respectivamente na ligação do ligante, o que leva a recrutamento e ativação do STAT6. De modo semelhante, o receptor de IL-6 é um receptor heterodimérico formado pela cadeia de receptor de alta afinidade de IL-6 (IL6Ra) e a cadeia de glicoproteína de sinal 130 (gpl30) à qual JAK1 preferencialmente se associa. A cadeia gpl30 ativa a via de sinalização JAK1 e STAT3 após a ligação do ligante. Portanto, para investigar a atividade da JAK1, o nível de STAT6 ou STAT3 ativo pode ser avaliado em células imunes após estimulação com IL-4 ou IL-6, respectivamente.

[0013] Além disto, o receptor para eritropoietina (EPOR) é um receptor homodimérico constituído por duas cadeias receptoras idênticas. Por conseguinte, a cadeia de EPOR é tanto uma cadeia de ligação de ligante de alta afinidade como uma cadeia transdutora de sinal e ativa apenas a molécula JAK2 associada após ligação ao ligante, conduzindo ao recrutamento e ativação de STAT5. O receptor para GM-CSF é um receptor heterodimérico constituído pela cadeia de receptor de alta afinidade de GM-CSF (GMCSFRa) e a cadeia de transdutor de sinal (GM-CSFRP), à qual JAK2 se associa especificamente. Mediante ligação do ligante, a associação das cadeias receptoras α e β resulta na ativação da via de sinalização JAK2 e STAT5. Portanto, para investigar a atividade de JAK2, o nível de STAT5 ativo pode ser avaliado em células imunes após estimulação com GM-CSF ou

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5/79 eritropoietina (EPO).

[0014] Espera-se que os inibidores das Janus quinases mostrem utilidade no tratamento de doenças autoimunes inflamatórias e não infecciosas em que estas quinases estão envolvidas. Recentemente os inibidores pan-JAK tofacitinib e ruxolitinib foram lançados para o tratamento de artrite reumatoide e mielofibrose, respectivamente. O inibidor de JAK1 PF-04965842 está atualmente em ensaios clínicos de fase III para o tratamento da dermatite atópica, o baricitinib inibidor da JAK1 foi lançado para o tratamento da artrite reumatoide e está em ensaios de fase III para o tratamento da dermatite atópica e o inibidor da JAK1 upadacitinib está presentemente em ensaios clínicos de fase III para o tratamento da artrite reumatoide e artrite psoriática e em ensaios de fase II para o tratamento da dermatite atópica, doença de Crohn e oolite ulcerosa.

[0015] Portanto, inibidores de JAK Além disto podem ser útil no tratamento de doenças relacionadas com a atividade de Janus quinases, incluindo, por exemplo, doenças de pele como psoríase, dermatite atópica, esclerodermia, rosácea, cânceres de pele, dermatite, dermatite herpetiforme, dermatomiosite, vitiligo, alopécia areata, dermatite de contato, eczema, xerose, Ictiose, urticária, prurido idiopático crônico, pioderma gangrenoso, lúpus eritematoso cutâneo e líquen plano; doenças respiratórias como a asma, doença pulmonar obstrutiva crônica, fibrose pulmonar, fibrose cística, rinite, bronquiolite, bissinose, pneumoconiose, bronquiectasias, pneumonite de hipersensibilidade, cânceres de pulmão, mesotelioma e sarcoidose; doenças gastrointestinais, como doença inflamatória intestinal, colite ulcerativa, doença de Crohn, fibrose retroperitoneal, doença celíaca e cânceres; doenças oculares como miastenia gravis, síndrome de Sjõgren, conjuntivite, esclerite, uveíte, síndrome do olho seco, queratite, irite; indicações sistêmicas como lúpus, esclerose múltipla, artrite reumatoide, tipo I, diabetes e complicações da diabetes, cânceres, espondilite anquilosante e artrite psoriática; câncer

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6/79 como osso e tumores de tecidos moles, câncer de cabeça e pescoço câncer, bem como outras doenças autoimunes e indicações em que imunossupressão seria desejável, por exemplo, no transplante de órgãos.

[0016] O documento WO2013007768 divulga compostos heterocíclicos tricíclicos e composições e métodos de uso destes como Inibidores de JAK.

[0017] O documento n° W02013007765 divulga compostos tricíclicos fundidos para uso como inibidores de Janus quinases.

[0018] O documento n° WO2011086053 divulga compostos heterocíclicos tricíclicos e composições e métodos de utilização dos mesmos.

[0019] Zak, M. et. Al, J. Med. Chem., (2013), 56, 4764-85, divulga imidazopirrolopiridinas como inibidores de JAK1.

[0020] Permanece a necessidade de novos compostos que inibam de forma eficaz e seletiva as enzimas JAK específicas, em particular inibidores que inibem seletivamente JAK1 versus JAK2 para reduzir os efeitos adversos sem afetar a eficácia anti-inflamatória global.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO [0021] Os compostos da presente invenção exibem atividade inibidora nas Janus quinases; e em particular os compostos da invenção exibem atividade inibidora em JAK1. Assim, os compostos da presente invenção mostram seletividade inibitória da JAK quinase; particularmente, os compostos mostram seletividade inibitória de JAK1 versus JAK2. Segue-se que os compostos da presente invenção também podem mostrar seletividade inibitória de STAT6 ou STAT3 versus STAT5. Alguns compostos da presente invenção têm propriedades farmacocinéticas particularmente favoráveis para utilização sistêmica, como elevada estabilidade metabólica e elevada solubilidade aquosa. Alguns compostos da presente invenção têm propriedades toxicológicas particularmente favoráveis, como elevado teor de quinase, bem como seletividade geral fora do alvo, nenhuma inibição de CYP,

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7/79 baixa ou nenhuma indução de CYP, baixa citotoxicidade; além de serem bem tolerados em estudos toxicológicos de dose repetida.

[0022] Consequentemente, a presente invenção se refere a um composto de acordo com a fórmula geral (I)

(I) em que

A representa C6-cicloalquila, em que a referida C6cicloalquila é opcionalmente substituída por um ou mais deutérios;

RI representa Cl-alquila, em que a referida Cl-alquila é opcionalmente substituída por um ou mais deutérios;

R2 representa Cl-alquila, em que a referida Cl-alquila é substituída com um substituinte selecionado de R6; e em que a referida Clalquila é opcionalmente substituída por um ou mais deutérios;

R3 representa C2-alquila, em que a referida C2-alquila é substituída por um substituinte selecionado de R7 e em que a referida C2alquila é opcionalmente substituída por um ou mais deutérios;

R4 representa hidrogênio ou deutério;

R5 representa hidrogênio ou deutério;

R6 representa ciano;

R7 representa hidroxila;

ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0023] Em outro aspecto, a invenção se refere a uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula geral (I), como aqui definido em conjunto com um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável ou transportador farmaceuticamente aceitável (ou transportadores

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8/79 farmaceuticamente aceitáveis), opcionalmente em conjunto com um ou mais outros compostos terapeuticamente ativos.

[0024] Em ainda outro aspecto, a invenção se refere a um composto de acordo com a fórmula geral (I) como aqui definido para utilização como um medicamento.

[0025] Em ainda outro aspecto, a invenção se refere a um composto de acordo com a fórmula geral (I) como aqui definido para utilização na profilaxia e/ou no tratamento de doenças do sistema imunológico, como doenças autoimunes ou de doenças relacionadas com a desregulação do sistema imunológico.

[0026] Em ainda outro aspecto, a invenção se refere a intermediários úteis na preparação de compostos de fórmula geral (I).

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO DEFINIÇÕES [0027] O termo Ca-alquila indica um radical obtido quando um átomo de hidrogênio é removido de um hidrocarboneto ramificado ou linear. A referida alquila compreende 1 a 2 átomos de carbono, tal como metila e etila. O número de átomos de carbono em alquila é indicado pelo prefixo Ca, em que a é o número de carbonos no radical hidrocarboneto. Portanto, Cl-alquila indica um radical alquila que compreende 1 átomo de carbono, isto é, metila. C2-alquila indica um radical alquila que compreende 2 átomos de carbono, isto é, etila.

[0028] O termo ciano indica um grupo -CN ligado à fração molecular parental através do átomo de carbono.

[0029] O termo C6 -cicloalquila indica um radical hidrocarboneto de cicloalcano saturado que compreende 6 átomos de carbono, isto é, ciclohexila.

[0030] O termo radical de hidrocarboneto indica um radical contendo somente átomos de hidrogênio e carbono, pode conter uma ou mais

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9/79 ligações duplas ou triplas de carbono-carbono, e pode compreender frações cíclicas em combinação com frações lineares ou ramificados. O referido hidrocarboneto compreende 1 a 10 átomos de carbono e, de preferência, 1 a 6, por exemplo, 1 a 4, por exemplo, 1 a 3, por exemplo, 1 a 2 átomos de carbono, por exemplo, 6 átomos de carbono. O termo inclui alquila e cicloalquila, como aqui indicado.

[0031] Os termos “hidróxi” ou “hidroxila” indicam um grupo -OH. [0032] BrettPhos indica 2-(diciclo-hexilfosfino)3,6-dimetoxi-2',4',6'tris-isopropil-1,1 '-bifenila.

[0033] tBuBrettPhos indica 2-(di-terc-butilfosfino)-2',4',6'-trisisopropil-3,6-dimetoxi-l, 1 '-bifenila.

[0034] tBuXPhos indica 2-di-terc-butilfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenila.

[0035] BrettPhos Pd G1 indica cloro[2-(diciclo-hexilfosfino)-3,6dimetoxi-2',4',6'-tri-isopropil-1,1 ’-bifenil] [2-(2-aminoetil)fenil]paládio(II).

[0036] BrettPhos Pd G3 indica metanossulfonato de [(2-di-ciclohexilfosfino-3,6-dimetoxi-2',4',6'-tri-isopropil-1,1 '-bifenil)-2-(2'-amino-1,1'bifenil)]paládio(II).

[0037] tBuBrettPhos Pd G3 indica metanossulfonato de [(2-di-tercbutilfosfino-3,6-dimetoxi-2',4',6'-tri-isopropil-1,1 '-bifenil)-2-(2'-amino-1,1’bifenil)]paládio(II).

[0038] tBuXPhos Pd G1 indica cloreto de [2-(di-terc-butilfosfino)2',4',6'-tri-isopropil-1,1 ’-bifenil] [2-(2-aminoetil)fenil)]paládio(II).

[0039] tBuXPhos Pd G3 indica metanossulfonato de [(2-ci-tercbutilfosfino-2',4',6'-tri-isopropil-1,1 '-bifenil)-2-(2'-amino-1,1'bifenilo)]paládio(II).

[0040] Se os substituintes são descritos como selecionados independentemente a partir de um grupo, cada substituinte é selecionado independentemente do outro. Cada substituinte pode, portanto, ser idêntico ou

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10/79 diferente do outro substituinte (ou dos outros substituintes).

[0041] O termo “opcionalmente substituído” significa “não substituído ou substituído” e, portanto, as fórmulas gerais aqui descritas englobam compostos contendo o substituinte opcional especificado (ou substituintes opcionais especificados) assim como compostos que não contêm o substituinte opcional (ou substituintes opcionais).

[0042] O termo sal farmaceuticamente aceitável indica sais preparados pela reação de um composto da fórmula (I) que compreendem uma porção química básica, com um ácido inorgânico ou orgânico adequado, como ácido clorídrico, bromídrico, iodídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico, fórmico, acético, 2,2-dicloroacético, adípico, ascórbico, L-aspártico, Lglutâmico, galactárico, acético, maleico, L-málico, ftálico, cítrico, propiônico, benzoico, glutárico, glucônico, D-glucurônico, metanossulfônico, salicílico, succínico, malônico, tartárico, benzenossulfônico, etano-l,2-dissulfônico, ácido 2-hidroxietanos sulfônico, toluenossulfônico, sulfâmico, fumárico, acetúrico, L-lático, glicólico, oxálico, sacárico, DL-mandélico ou L-tartárico. Outros exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis são listados em Berge,

S. M. ; J. Pharm. J. Pharm. Sei. ;; (1977), 66(1), 1-19, que é incorporado neste documento a título de referência.

[0043] O termo solvato indica uma espécie formada pela interação entre um composto, por exemplo, um composto da fórmula (I) e um solvente, por exemplo, álcool, glicerol ou água, em que as referidas espécies estão numa forma amorfa ou cristalina. Quando a água é o solvente, as referidas espécies são chamadas de hidrato.

[0044] O termo tratamento, como usado neste documento, significa a administração e cuidados de um paciente com a finalidade de combater uma doença, distúrbio ou afecção. O termo inclui o retardo da progressão da doença, do distúrbio ou da afecção, a redução, melhora ou alívio dos sintomas e complicações e/ou a cura ou a eliminação da doença, distúrbio ou afecção.

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O termo pode incluir também a prevenção da afecção, em que a prevenção deve ser entendida como a administração e tratamento de um paciente com a finalidade de combater a doença, afecção ou distúrbio e inclui a administração dos compostos ativos para prevenir o aparecimento dos sintomas ou complicações. Não obstante, tratamentos profiláticos (preventivos) e terapêuticos (curativos) são dois aspectos distintos.

[0045] Todas as referências, incluindo publicações, pedidos de patentes e patentes citados neste documento são incorporados a título de referência na sua totalidade e na mesma medida em que cada referência é individual e especificamente indicada para ser incorporada a título de referência, independentemente de qualquer incorporação fornecida separadamente de documentos específicos feita em outro lugar que não neste documento.

MODALIDADES DA INVENÇÃO [0046] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I), em que a fórmula (I) é a fórmula geral (Ia).

(Ia) em que RI a R2, R4 a R7 são conforme definido acima, e em que Ra, Rb, Re e Rd são, cada um, independentemente selecionados dentre hidrogênio e deutério;

ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0047] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que a fórmula (I) é a fórmula geral (Ib)

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em que RI a R2, R4 a R7 são conforme definido acima, e em que Ra, Rb, Re e Rd são, cada um, independentemente selecionados dentre hidrogênio e deutério;

ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0048] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I), em que a fórmula (I) é a fórmula geral (Ic).

(Ic) em que RI a R2, R4 a R7 são conforme definido acima, e em que Ra, Rb, Re e Rd são, cada um, independentemente selecionados dentre hidrogênio e deutério;

ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0049] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que a fórmula (I) é a fórmula geral (Id)

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Cid) em que R1 a R2, R4 a R7 são conforme definido acima, e em que Ra, Rb, Re e Rd são, cada um, independentemente selecionados dentre hidrogênio e deutério;

ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0050] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I) como aqui definido; em que

A representa C6-cicloalquila; RI representa Cl-alquila; R2 representa Cl-alquila, em que a referida Cl-alquila é substituída por um substituinte selecionado de R6; R3 representa C2-alquila, em que a referida C2-alquila é substituída por um substituinte selecionado de R7; R4 representa hidrogênio; R5 representa hidrogênio; R6 representa ciano; R7 representa hidroxila;

ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0051] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I) como aqui definido; em que

A representa C6-cicloalquila; RI representa Cl-alquila opcionalmente substituída por um ou mais deutérios; R2 representa Clalquila, em que a referida Cl-alquila é substituída por um substituinte selecionado de R6; R3 representa C2-alquila, em que a referida C2-alquila é substituída por um substituinte selecionado de R7; R4 representa hidrogênio; R5 representa hidrogênio; R6 representa ciano; R7 representa hidroxila;

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14/79 ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0052] Qualquer combinação de duas ou mais modalidades descritas neste documento é considerada dentro do escopo da presente invenção.

[0053] A presente invenção inclui todas as modalidades em que Rl, R2, R3, R4, R5, R6 e R7 são combinados em qualquer combinação, como descrito em qualquer lugar neste documento.

[0054] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I), como aqui definido; sendo que o composto é selecionado dentre trans-2- [4- [2- [ 1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5 c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila, trans-2- [4-[2-[(lS)-l -hidroxietil] -6(metilamino)imidazo [4,5 -c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila, trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-1 -il] ciclohexil] acetonitrila, trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6(trideuteriometilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila, trans-2- [4- [2- [ 1,2,2,2-tetradeuterio-1 -hidroxi-etil] -6(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila, cis-2- [4- [2- [ 1 -hidroxietil] -6- (metilamino)imidazo [4,5 c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila e cis-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6- (metilamino)imidazo [4,5 c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila, ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0055] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I), como aqui definido; em que trans-2- [4- [2- [ 1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5 Petição 870190067745, de 17/07/2019, pág. 20/90

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c] piridin -1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila, trans-2- [4- [2- [(1S)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo[4,5 c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila, trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c] piridin-1 -il] ciclohexil] acetonitrila, ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0056] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I), como aqui definido, selecionado dentre uma forma deuterada de trans-2- [4- [2- [ 1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5 c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila, trans-2- [4- [2- [(1S)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo[4,5 c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila, trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c] piridin-1 -il] ciclohexil] acetonitrila, ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0057] Uma modalidade da invenção fornece um composto de fórmula (I), sendo que o referido composto é trans-2-[4-[2-[l-hidroxi-etil]-6(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila, ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0058] Uma modalidade da invenção fornece um composto de fórmula (I), sendo que o referido composto é trans-2-[4-[2-[(lS)-lhidroxietil]-6-(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila ou sais, hidratos ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

[0059] Uma modalidade da invenção fornece um composto de fórmula (I), sendo que o referido composto é trans-2-[4-[2-[(lR)-l

Petição 870190067745, de 17/07/2019, pág. 21/90

16/79 hidroxietil]-6-(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila ou sais, hidratos ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

[0060] Uma modalidade da invenção fornece um composto de fórmula (I), sendo que o referido composto é trans-2-[4-[2-[(lR)-lhidroxietil]-6-(trideuteriometilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclohexil]acetonitrila ou sais, hidratos ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

[0061] Uma modalidade da invenção fornece um composto de fórmula (I), sendo que o referido composto é trans-2-[4-[2-[l,2,2,2tetradeuterio-l-hidroxietil]-6-(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclohexil]acetonitrila ou sais, hidratos ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

[0062] Uma modalidade da invenção fornece um composto de fórmula (I), sendo que o referido composto é cis-2-[4-[2-[1-hidroxietil]-6(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila ou sais, hidratos ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

[0063] Uma modalidade da invenção fornece um composto de fórmula (I), sendo que o referido composto é cis-2-[4-[2-[(1R)-1-hidroxietil] 6-(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin- l-il]ciclo-hexil]acetonitrila ou sais, hidratos ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

[0064] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-1 -il] ciclohexil] acetonitrila, ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-1 -il] ciclohexil] acetonitrila,

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17/79 ou hidratos do mesmo.

[0065] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c] piridin-1 -il] ciclohexil] acetonitrila, ou solvatos do mesmo.

[0066] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é uma forma deuterada de trans-2-[4-[2-[(lR)-l-hidroxietil]-6-(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-lil] ciclo-hexil] acetonitrila.

[0067] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-1 -il] ciclo-hexila] acetonitrila.

[0068] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é

Sal de ácido malônico trans-2-[4-[2-[(1R)-1-hidroxietil]-6(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila.

[0069] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é

Sal de ácido glicólico trans-2-[4-[2-[(1R)-1-hidroxietil]-6(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexila]acetonitrila.

[0070] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é

Sal de ácido L-tartárico trans-2-[4-[2-[(1R)-1-hidroxietil]-6(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexila]acetonitrila.

[0071] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é

Sal de ácido L-málico trans-2-[4-[2-[(1R)-1-hidroxietil]-6Petição 870190067745, de 17/07/2019, pág. 23/90

18/79 (metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila.

[0072] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é

Sal de ácido sulfúrico trans-2-[4-[2-[(lR)-l-hidroxietil]-6(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila.

[0073] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é

Sal de ácido clorídrico trans-2-[4-[2-[(lR)-l-hidroxietil]-6(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila.

[0074] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é

Sal de ácido succínico trans-2-[4-[2-[(lR)-l-hidroxietil]-6(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexila]acetonitrila.

[0075] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é

Sal de ácido oxálico trans-2-[4-[2-[(lR)-l-hidroxietil]-6(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila.

[0076] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é

Sal de ácido fumárico trans-2-[4-[2-[(lR)-l-hidroxietil]-6(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila.

[0077] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é

Sal de ácido 1,5-naftalenodissulfônico trans-2-[4-[2-[(lR)-lhidroxietil]-6-(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila. [0078] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de fórmula geral (I); em que o referido composto é

Sal de ácido DL-mandélico trans-2-[4-[2-[(lR)-l-hidroxietil]6- (metilamino)imidazo [4,5 -c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila.

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19/79 [0079] Numa ou mais modalidades, a invenção fornece intermediários de fórmula geral (II)

em que

A representa C6-cicloalquila;

R4 representa hidrogênio ou deutério;

R5 representa hidrogênio ou deutério;

R6 representa ciano;

R8 representa halogênio;

ou sais dos mesmos;

útil para a preparação de compostos de fórmula geral (I).

Numa modalidade, a invenção fornece intermediários selecionados dentre

2-[trans-4-[(5-amino-2-cloropiridin-4-il)amino]ciclohexil] acetonitrila e sais dos mesmos.

[0080] Numa ou mais modalidades, a invenção fornece intermediários da fórmula geral (III)

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(III) em que

R4 representa hidrogênio ou deutério;

R5 representa hidrogênio ou deutério;

R6 representa ciano;

R7 representa hidroxila;

Ra, Rb, Re e Rd, cada um independentemente, são selecionados dentre hidrogênio e deutério;

R8 representa halogênio;

ou sais dos mesmos;

útil para a preparação de compostos da fórmula geral (Ia).

Numa modalidade, a invenção fornece intermediários selecionados dentre

2- [trans-4- [6-cloro-2-( 1 -hidroxietil)-1 H-imidazo[4,5-c]piridin1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila,

2- [trans-4- [6-cloro-2- [(1R)-1 -hidroxietil] -1 H-imidazo [4,5c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila e trans-2- [4- [6-cloro-2-( 1,2,2,2-tetradeuterio-1 -hidroxietil)imidazo [4,5 -c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila ou sais dos mesmos.

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21/79 [0081] Numa modalidade, a invenção se refere a um processo para o preparo do composto (Ia) a partir do composto (III) compreendendo a aminação do composto (III) na presença de um catalisador de paládio, em que

R4 representa hidrogênio ou deutério;

R5 representa hidrogênio ou deutério;

R6 representa ciano;

R7 representa hidroxila;

R8 representa halogênio;

ou sais dos mesmos.

[0082] Numa modalidade, a invenção se refere a um processo para o preparo do composto (Ia) a partir do composto (III) compreendendo a aminação do composto (III) na presença de um catalisador de paládio, em que o catalisador de paládio compreende os ligantes BrettPhos, tBuBrettPhos ou tBuXPhos.

[0083] Numa modalidade, a invenção se refere a um processo para o preparo do composto (Ia) a partir do composto (III) compreendendo a aminação do composto (III) na presença de um catalisador de paládio, em que o catalisador de paládio é selecionado dentre BrettPhos Pd Gl, BrettPhos Pd. G3, tBuBrettPhos Pd G3, tBuXPhos Pd Gl ou tBuXPhos Pd G3.

[0084] Numa modalidade, a invenção se refere a um processo para o preparo do composto (Ia) a partir do composto (III) compreendendo a

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22/79 aminação do composto (III) na presença de um catalisador de paládio, em que o catalisador de paládio é preparado a partir de uma fonte de paládio, como PdC12, Pd2(dba)3 ou Pd(OAc)2 em combinação com os ligantes BrettPhos, tBuBrettPhos ou tBuXPhos.

[0085] Os compostos de fórmula I podem ser obtidos na forma cristalina diretamente por concentração a partir de um solvente orgânico ou por cristalização ou recristalização a partir de um solvente orgânico ou mistura do referido solvente e um cossolvente que pode ser orgânico ou inorgânico, como água. Os cristais podem ser isolados sob uma forma essencialmente isenta de solvente ou como um solvato, como um hidrato. A invenção abrange todas as formas cristalinas, como polimorfos e pseudopolimorfos e também as misturas das mesmas.

[0086] Os compostos da fórmula I compreendem átomos de carbono substituídos (quirais) as simetricamente, o que gera a existência de formas isoméricas, por exemplo, enantiômeros e, possivelmente, diastereômeros. A presente invenção se refere a todos estes isômeros, quer sob a forma opticamente pura quer como misturas dos mesmos (por exemplo, misturas racêmicas ou misturas ópticas parcialmente purificadas). As formas estereoisoméricas puras dos compostos e os intermediários desta invenção podem ser obtidos pela aplicação de procedimentos conhecidos na técnica. As várias formas isoméricas podem ser separadas por métodos de separação física, como cristalização seletiva e técnicas cromatográficas, por exemplo, cromatografia líquida de alta pressão usando fases estacionárias quirais. Os enantiômeros podem ser separados uns dos outros por cristalização seletiva dos seus sais diastereoméricos que podem ser formados com ácidos opticamente ativos. Os compostos purificados opticamente podem subsequentemente ser liberados dos referidos sais diastereoméricos purificados. Os enantiômeros também podem ser resolvidos pela formação de derivados diastereoméricos. Altemativamente, os enantiômeros podem ser

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23/79 separados por técnicas cromatográficas utilizando fases estacionárias quirais. As formas estereoisoméricas puras também podem ser derivadas das formas estereoisoméricas puras correspondentes dos materiais de partida apropriados, desde que a reação ocorra de forma estereos seletiva ou estereoespecífica. De preferência, se for desejado um estereoisômero específico, o referido composto será sintetizado por métodos de preparação estereosseletivos ou estereoespecíficos. Estes métodos empregarão vantajosamente materiais de partida quirais puros.

[0087] Além disto, quando uma ligação dupla ou um sistema de anel total ou parcialmente saturado está presente na molécula, podem ser formados isômeros geométricos. Pretende-se que qualquer isômero geométrico, como isômeros geométricos separados ou puros, puros ou parcialmente purificados, ou misturas dos mesmos, estejam incluídos no escopo da invenção.

[0088] Cicloalcanos dissubstituídos, como ciclo-hexano dissubstituído, podem formar isômeros geométricos; isto é, eis- e transisômeros. Os cis-isômeros têm ambos os substituintes no mesmo lado do anel, enquanto ostrans-isômeros têm os substituintes nos lados opostos do anel. Pretende-se que qualquer isômero geométrico, como isômeros geométricos separados ou puros, puros ou parcialmente purificados, ou misturas dos mesmos, estejam incluídos no escopo da invenção.

[0089] Nos compostos da fórmula geral (I), os átomos podem exibir suas abundâncias isotópicas naturais, ou um ou mais dos átomos podem ser enriquecidos artificialmente num isótopo particular com o mesmo número atômico, mas uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa encontrado na natureza. A presente invenção pretende incluir todas as variações isotópicas adequadas dos compostos da fórmula geral (I). Por exemplo, as formas isotópicas diferentes de hidrogênio incluem 1H, 2H e 3H, as formas isotópicas diferentes de carbono incluem 12C, 13C e 14C e as formas isotópicas diferentes de nitrogênio incluem 14N e

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15N. O enriquecimento para deutério (2H) pode, por exemplo, aumentar a semivida in vivo ou reduzir os regimes de dosagem, ou pode fornecer um composto útil como padrão para caracterização de amostras biológicas. Os compostos isotopicamente enriquecidos na fórmula geral (I) podem ser preparados por técnicas convencionais bem conhecidas por um versado na técnica ou por processos análogos aos descritos nos processos gerais e exemplos aqui descritos, utilizando reagentes e/ou intermediários enriquecidos isotopicamente adequados.

[0090] Numa ou mais modalidades da presente invenção, os compostos da fórmula I, conforme definido acima, são úteis na terapia e, em particular, úteis para o tratamento, por exemplo, de doenças de pele como distúrbios da pele proliferativos e inflamatórios, psoríase, dermatite atópica, esclerodermia, rosácea, cânceres de pele, dermatite, dermatite herpetiforme, dermatomiosite, vitiligo, alopécia areata, dermatite de contato, eczema, xerose, Ictiose, urticária, prurido idiopático crônico, pioderma gangrenoso, lúpus eritematoso cutâneo e líquen plano; doenças respiratórias como a asma, doença pulmonar obstrutiva crônica, fibrose pulmonar, fibrose cística, rinite, bronquiolite, bissinose, pneumoconiose, bronquiectasias, pneumonite de hipersensibilidade, cânceres de pulmão, mesotelioma e sarcoidose; doenças gastrointestinais, como doença inflamatória intestinal, colite ulcerativa, doença de Crohn, fibrose retroperitoneal, doença celíaca e cânceres; doenças oculares como miastenia gravis, síndrome de Sjõgren, conjuntivite, esclerite, uveíte, síndrome do olho seco, queratite, irite; indicações sistêmicas como lúpus, esclerose múltipla, artrite reumatoide, tipo I, diabetes e complicações da diabetes, cânceres, espondilite anquilosante e artrite psoriática; câncer como osso e tumores de tecidos moles, câncer de cabeça e pescoço, bem como outras doenças autoimunes e indicações em que imunossupressão seria desejável, por exemplo, no transplante de órgãos.

[0091] Numa modalidade, a invenção fornece compostos da fórmula

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I, como definidos acima, para utilização na profilaxia e/ou no tratamento de psoríase ou dermatite atópica.

[0092] Numa modalidade, a invenção fornece compostos da fórmula I, como definidos acima, para utilização na profilaxia e/ou no tratamento de dermatite atópica.

[0093] Numa modalidade, a invenção fornece um método para prevenir, tratar ou melhorar doenças do sistema imunológico, como doenças autoimunes, sendo que o método compreende administrar a uma pessoa que sofre de pelo menos uma das referidas doenças uma quantidade eficaz de um ou mais compostos, de acordo com a fórmula geral I acima, opcionalmente em conjunto com um carreador farmaceuticamente aceitável ou um ou mais excipientes, opcionalmente em combinação com outros compostos terapeuticamente ativos.

[0094] Numa modalidade, a invenção fornece um método para prevenir, tratar ou melhorar psoríase ou dermatite atópica, sendo que o método compreende administrar, a uma pessoa que sofre de pelo menos uma das referidas doenças, uma quantidade eficaz de um ou mais compostos de acordo com a fórmula geral I acima, opcionalmente em conjunto com um transportador farmaceuticamente aceitável ou um ou mais excipientes, opcionalmente em combinação com outros compostos terapeuticamente ativos.

[0095] Numa modalidade, a invenção fornece um método para prevenir, tratar ou melhorar dermatite atópica, sendo que o método compreende administrar, a uma pessoa que sofre de pelo menos uma das referidas doenças, uma quantidade eficaz de um ou mais compostos, de acordo com a fórmula geral I acima, opcionalmente em conjunto com um carreador farmaceuticamente aceitável ou um ou mais excipientes, opcionalmente em combinação com outros compostos terapeuticamente ativos.

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26/79 [0096] Numa modalidade, a invenção fornece um composto, de acordo com a fórmula I, para utilização na fabricação de um medicamento para a profilaxia e/ou o tratamento de doenças do sistema imunológico, como doenças autoimunes, como psoríase ou dermatite atópica.

[0097] Numa modalidade, a invenção fornece um composto de acordo com a fórmula I para utilização na fabricação de um medicamento para a profilaxia e/ou o tratamento de doenças do sistema imunológico, como doença autoimune, como dermatite atópica.

[0098] Numa ou mais modalidades da presente invenção, os compostos de fórmula I, como definidos acima, são úteis como um agente anti-inflamatório capaz de modular a atividade de uma proteína tirosina quinase da família JAK de proteínas tirosina quinases, como as proteínas tirosina quinases JAK1, JAK2, JAK3 ou TYK2.

[0099] Numa ou mais modalidades, a invenção fornece um composto de acordo com a fórmula geral (I) para utilização no tratamento de uma doença, doença esta que responde à inibição da atividade de quinase da JAK1. [00100] Além de serem úteis para o tratamento humano, os compostos da presente invenção também podem ser úteis para o tratamento veterinário de animais, incluindo mamíferos, como cavalos, bovinos, ovelhas, porcos, cães e gatos.

COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS DA INVENÇÃO [00101] Para utilização em terapia, os compostos da presente invenção estão tipicamente na forma de uma composição farmacêutica. A invenção se refere, portanto, a uma composição farmacêutica que compreende um composto de fórmula (I), opcionalmente em conjunto com um ou mais outros compostos terapeuticamente ativos, em conjunto com um excipiente, veículo ou carreador (ou carreadores) farmaceuticamente aceitáveis. O excipiente precisa ser aceitável no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da composição e não deletério para o receptor do mesmo.

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27/79 [00102] Convenientemente, o ingrediente ativo compreende de 0,0001 a 99,9% em peso da formulação.

[00103] Na forma de uma unidade de dosagem, o composto pode ser administrado uma ou mais vezes ao dia em intervalos adequados, dependendo sempre, no entanto, da condição do paciente e de acordo com a prescrição feita pelo médico. Convenientemente, uma unidade de dosagem de uma formulação contém entre 0,001 mg e 1000 mg, de preferência, entre 0,1 mg e 300 mg, com mais preferência, 1 a 150 mg, como 3 a 100 mg de um composto de fórmula (I).

[00104] Uma dosagem adequada do composto da invenção dependerá, inter alia, da idade e condição do paciente, da gravidade da doença a ser tratada e de outros fatores bem conhecidos pelo médico praticante. O composto pode ser administrado por via oral, parentérica, tópica, transdérmica ou interdérmica e por outras vias, de acordo com diferentes horários de dosagem, por exemplo, diariamente, semanalmente ou mensalmente. Em geral, uma dose única está na faixa de 0,001 a 400 mg/kg em peso corporal, como 0,1 g a 4 mg/kg. O composto pode ser administrado como um bolus (isto é, toda a dose diária é administrada de uma só vez) ou em doses divididas duas ou mais vezes por dia.

[00105] No contexto do tratamento tópico, pode ser mais apropriado se referir a uma unidade de uso, que denota que uma dose única que é capaz de ser administrada a um paciente e que pode ser prontamente manipulada e embalada, permanecendo uma dose unitária fisicamente e quimicamente estável que compreende o material ativo, tal como ou uma mistura dele com diluentes ou veículos farmacêuticos sólidos, semissólidos ou líquidos.

[00106] O termo unidade de uso, juntamente com uso tópico, significa uma dose unitária, ou seja, única, capaz de ser administrada topicamente a um paciente numa aplicação por centímetro quadrado da área de tratamento de 0,001 gg para 1 mg e de preferência de 0,05 microgramas a

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0,5 mg do ingrediente ativo em questão.

[00107] Também está previsto que, em certos regimes de tratamento, a administração com intervalos mais longos, por exemplo, todos os dias, todas as semanas, ou mesmo com intervalos mais longos, pode ser benéfica.

[00108] Se o tratamento envolve a administração de outro composto terapeuticamente ativo, recomenda-se consultar Goodman & Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics,9^a Ed., JGHardman and L. E. Limbird (Eds.),McGraw-Hill 1995, para dosagens úteis dos referidos compostos.

[00109] A administração de um composto da presente invenção com um ou mais outros compostos ativos pode ser concomitante ou sequencialmente.

[00110] As formulações incluem, por exemplo, aquelas sob uma forma adequada para administração oral, retal, parenteral (incluindo subcutânea, intraperitoneal, intramuscular, intra-articular e intravenosa), transdérmica, intradérmica, oftálmica, tópica, nasal, sublingual ou bucal.

[00111] As formulações podem ser convenientemente apresentadas na forma de unidade de dosagem e podem ser preparadas, porém sem limitação, por qualquer um dos métodos bem conhecidos na técnica de farmácia, por exemplo, como descrito em Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 21a ed. , 2005. Todos os métodos incluem a etapa de associar ο ingrediente ativo com o carreador que constitui um ou mais ingredientes acessórios. Em geral, as formulações são preparadas por meio de uma ligação uniforme e íntima do ingrediente ativo em associação com um carreador líquido, carreador semissólido ou um carreador sólido finamente dividido ou combinações destes e depois, se necessário, moldando-se o produto na formulação desejada.

[00112] As formulações da presente invenção adequadas para administração oral e bucal podem estar sob a forma de unidades distintas como cápsulas, sachês, comprimidos, gomas de mascar ou pastilhas,

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29/79 contendo, cada uma, uma quantidade predeterminada do ingrediente ativo; sob a forma de um pó, grânulos ou pastilhas; sob a forma de uma solução ou uma suspensão num líquido aquoso ou não aquoso, tal como etanol ou glicerol; ou sob a forma de um gel, uma nano ou uma microemulsão, uma emulsão óleo-em-água, uma emulsão água-em-óleo ou outros sistemas dispensadores. Agentes dispersantes ou de suspensão adequados para suspensões aquosas incluem tensoativos sintéticos ou naturais e agentes viscosificantes. Os ingredientes ativos podem também ser administrados na forma de um bolus, eletuário ou pasta.

[00113] Um comprimido pode ser feito por compressão, moldagem ou liofilização do ingrediente ativo opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Os comprimidos prensados podem ser preparados por compressão, numa máquina adequada, sendo que o ingrediente ativo (ou os ingredientes ativos) está numa forma fluida, tal como um pó ou grânulos, opcionalmente misturados por um ligante e/ou enchimento; um lubrificante; um agente desintegrante ou um agente dispersante. Os comprimidos moldados podem ser feitos por moldagem, numa máquina adequada, uma mistura do ingrediente ativo em pó e um veículo adequado umedecido com um diluente líquido inerte. Os comprimidos liofilizados podem ser formados num secador por congelamento a partir da solução da substância fármaco. Um preenchimento adequado pode ser incluído.

[00114] As formulações para administração retal podem estar sob a forma de supositórios em que o composto da presente invenção é misturado por adição com sólidos de baixo ponto de fusão, solúveis ou insolúveis em água.

[00115] As formulações adequadas para administração parentérica compreendem convenientemente uma preparação oleosa ou aquosa estéril dos ingredientes ativos, que é de preferência isotônica com o sangue do receptor, por exemplo solução salina isotônica, solução de glicose isotônica ou solução

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30/79 tampão. Além disto, a formulação pode conter cossolvente, agente solubilizante e/ou agentes de complexação. A formulação pode ser convenientemente esterilizada por exemplo por filtração através de um filtro de retenção de bactérias, adição de agente esterilizante à formulação, irradiação da formulação ou aquecimento da formulação. As formulações lipossômicas, como divulgadas em por exemplo Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, vol. 9, 1994, também são adequadas para administração parenteral.

[00116] Altemativamente, os compostos da fórmula (I) podem ser apresentados como uma preparação sólida estéril, por exemplo, um pó liofilizado, que é prontamente dissolvido num solvente estéril imediatamente antes da utilização.

[00117] As formulações transdérmicas podem estar sob a forma de um gesso, emplastro, microagulhas, sistemas de administração de lipossomas ou nanoparticulados ou outras formulações cutâneas aplicadas à pele.

[00118] As formulações de administração oftálmica adequadas podem estar sob a forma de uma preparação aquosa estéril dos ingredientes ativos, que podem estar sob a forma microcristalina, por exemplo, sob a forma de uma suspensão aquosa microcristalina. As formulações lipossômicas ou os sistemas de polímeros biodegradáveis, como, por exemplo, descrito na Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, vol. 2, 1989, também podem ser utilizados para apresentar o ingrediente ativo para a administração oftálmica.

[00119] As formulações adequadas para administração tópica, como a administração dérmica, intradérmica ou oftálmica, incluem preparações líquidas ou semissólidas, como linimentos, loções, géis, requerentes, pulverizações, espumas, sistemas de formação de película, microagulhas, micro ou nanoemulsões, emulsões em água em óleo ou óleo em água, como cremes, unguentos ou pastas; ou soluções ou suspensões como gotas.

[00120] Para administração tópica, o composto de fórmula (I) pode

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31/79 tipicamente estar presente numa quantidade de 0,001 a 20% em peso da composição, como 0,01% a cerca de 10%, mas também pode estar presente numa quantidade de até cerca de 100% da composição.

[00121] As formulações adequadas para administração nasal ou bucal incluem formulações em pó, autopropulsoras e spray, como aerossóis e atomizadores. Tais formulações são divulgadas em maior detalhe, por exemplo, em Modem Pharmaceutics, 2a ed. , G. S. Banker e C. T. Rhodes (Eds.), páginas 427-432, Marcel Dekker, Nova York; Modem Pharmaceutics, 3a ed. , G. S. Banker e C. T. Rhodes (Eds. ), páginas 618-619 e 718-721, Marcel Dekker, Nova York e Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, vol. 10, J. Swarbrick and J. C. Boylan (Eds), páginas 191-221, Marcel Dekker, Nova York.

[00122] Além dos ingredientes acima mencionados, as formulações de um composto de fórmula I podem incluir um ou mais ingredientes adicionais tais como diluentes, tampões, agentes aromatizantes, corantes, agentes tensoativos, espessantes, agentes intensificadores de penetração, conservantes de agentes de aumento de solubilidade, por exemplo metilo hidroxibenzoato (incluindo antioxidantes), agentes emulsionantes e semelhantes.

MÉTODOS DE PREPARO [00123] Os compostos da presente invenção podem ser preparados numa variedade de formas conhecidas para um versado na técnica da síntese. Os compostos da fórmula (I) podem, por exemplo, ser preparados com o uso das reações e técnicas descritas abaixo em conjunto com métodos conhecidos na técnica de química orgânica sintética, ou variações dos mesmos, como observado pelos versados na técnica. Os métodos preferenciais incluem, porém sem limitação, aqueles descritos abaixo. As reações são realizadas em solventes adequados aos reagentes e materiais empregados e adequados para as transformações a serem efetuadas. Além disto, nos métodos sintéticos descritos abaixo, deve ser entendido que todas as condições de reação

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32/79 propostas, incluindo a escolha do solvente, atmosfera de reação, temperatura de reação, duração do experimento e procedimentos de processamento, são escolhidas como condições padrão para aquela reação, o que deve ser facilmente reconhecido por um versado na técnica. Nem todos os compostos alocados numa determinada classe podem ser compatíveis com algumas das condições de reação requeridas em alguns dos métodos descritos. Tais restrições aos substituintes que são compatíveis com as condições reacionais serão prontamente evidentes a um versado na técnica e métodos alternativos podem ser usados. Os compostos da presente invenção ou qualquer intermediário podem ser purificados, se necessário, utilizando métodos convencionais bem conhecidos de um químico organista sintético, por exemplo, métodos descritos em “Purification of Laboratory Chemicals”, 6a ed. 2009, W. Amarego e C. Chai, Butterworth-Heinemann. Os materiais de partida são compostos conhecidos, disponíveis comercialmente, ou podem ser preparados por métodos sintéticos de rotina bem conhecidos por aqueles versados na técnica.

PROCEDIMENTOS GERAIS, PREPARAÇÕES E EXEMPLOS [00124] Os materiais de partida estavam comercialmente disponíveis ou eram conhecidos na literatura. Os reagentes e solventes estavam comercialmente disponíveis e foram utilizados sem purificação, salvo indicação em contrário. A purificação cromatográfica foi realizada com uso de um sistema Grace REVELERIS® com cartuchos de silica REVELERIS® pré-embalados, ou um sistema Teledyne Isco CombiFlash® Rf, ou manualmente com uso de gel de silica 60. Os espectros de RMN de 1H foram registrados em instrumentos Broker a 300, 400 ou 600 MHz com tetrametilsilano (δ = 0,00 ppm) como padrão interno. Os valores de deslocamento químico (δ, em ppm) são citados em relação a padrões internos de tetrametilsilano (δ = 0,00). O valor de um multipleto, seja o dupleto (d), o tripleto (t), o quarteto (q) definidos ou não (m) no ponto médio aproximado, é

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33/79 dado a menos que um intervalo seja citado, (br) indica um pico amplo, enquanto (s) indica um singleto.

[00125] As seguintes abreviaturas foram utilizadas:

AcOH ácido acético

Bocterc-butoxicarbonila

Cbzbenziloxicarbonila

DCM diclorometano dba dibenzilidenoacetona

DIPEA N,N-di-isopropiletilamina

DMF N,N-dimetilformamida

DMP Dess-Martin periodinano

DMSO dimetilsulfóxido

DSC Calorimetria de varredura diferencial ee excesso enantiomérico

Et etila

EtOAc acetato de etila

EtOH etanol h horas

H ATU 1 - [bis (dimetilamino)metileno] -1 Η-1,2,3 triazolo[4,5-b]piridínio3-óxido hexafluorofosfato

HPLC cromatografia líquida de alta eficiência

HRMS espectro de massa de alta resolução litros m mili

MeCN acetonitrila

MeOH metanol min minutos

m. p. ponto de fusão

Ms metanos sulfonila

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MS espectrometria de massa ou espectro de massa

NMR espectroscopia por ressonância magnética nuclear rt temperatura ambiente, isto é 18-30°C e tipicamente 20°C RuPhos 2-diciclo-hexilfosfino-2',6'-di-isopropoxibifenila SFC cromatografia de fluido supercrítico

TBS terc-butildimetilsilila

TFA ácido trifluoroacético

THF tetra-hidrofurano

Tj temperatura da camisa de calor

TLC cromatografia em camada fina tr tempo de retenção

Tr temperatura da mistura de reação

UHPLC cromatografia líquida de ultra-alta eficiência

UPLC cromatografia líquida de ultra-alta eficiência Xantphos 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxantana

HPLC PREPARATIVA

MÉTODO ÁCIDO

Aparelhos: Sistema de HPLC Gilson com detector Gilson UV/VIS-155

Coluna: Waters SunFire ™ Prep C18 5 pm OBD 19 x 250 mm Reagentes: (A) solução de ácido fórmico a 0,1%; (B) MeCN Bomba:

- fluxo: 30 ml/min

Tempo [min]	[%] B
0,0	10
2,0	10
9,0	100
13,0	100

MÉTODO BÁSICO

Aparelhos: Sistema de HPLC Gilson com detector Gilson

UV/VIS-155

Coluna: Waters XBridge® Prep C18 5 pm OBD 19 x 250

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35/79 mm

Reagentes: (A) Solução de NH4HCO3 a 50 mM; (B)

MeCN

Bomba:

- fluxo: 30 ml/min

Tempo [min]	[%] B
0,0	0
2,0	0
9,0	60
10,0	100
13,0	100

LC-MS ANALÍTICO

MÉTODO A

Aparelho: Shimadzu UHPLC 2020

Coluna: Acquity UPLC HSS Cl8, 1,8 pm, 2,1 x 50 mm Reagentes: - Ácido fórmico > 98%, Sigma-Aldrich

- acetonitrila para HPLC grau UV/gradiente, Baker

- Dimetilsulfóxido puro (DMSO), Chempur

- Agua purificada para HPLC

Condições de HPLC: - Comprimento de onda: 214 nm ± 4 nm, 254 nm ± 4 nm

Eluxo: 0,5 ml/min

Temperatura da coluna: 25 °C

Temperatura do amostrador automático: 20°C

Volume de injeção: 3,0 μί

Tempo de Análise: 6 min

Eluição: gradiente

Tempo [min]	Fase móvel A [%]	Fase Móvel B [%]	Fluxo [ml/min]
0,0	95	5	0,5
4,0	5	95	0,5
5,0	5	95	0,5
5,2	95	5	0,5
6,0	95	5	0,5

Fase móvel A: 0,1% em v/v de solução aquosa de ácido fórmico

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Fase Móvel B: 0,1% em v/v de solução de acetonitrila de ácido fórmico

Solução para lavagem de seringas: MeOH a 20% CONDIÇÕES DE MS

- Faixa de massa: 100 a 1000 m/z

- lonização: alternativa

- Tempo de varredura: 0,5 s

MÉTODO B [00126] As análises de UPLC-MS foram realizadas utilizando um sistema Waters Acquity UPLC com uma coluna de 2,1 x 50 mm Acquity UPLC® HSS T3 1,8 pm e um detector Acquity SQ operado em modo de eletropulverização por ionização positiva. As fases móveis consistiram em 0,1% de ácido fórmico numa solução aquosa de acetato de amônio a 10 mM para o tampão A e 0,1% de ácido fórmico em acetonitrila para o tampão B. Utilizou-se um gradiente binário (A: B 95: 5—» 5: 95) ao longo de 1,4 min com uma taxa de fluxo de 1,2 ml/min e a temperatura da coluna era de 60° C.

MÉTODO C [00127] As análises de UPLC-MS com espectros de massa de alta resolução foram realizadas utilizando um sistema Waters Acquity UPLC com detecção por UV a 254 nm e um espectrômetro de massa TOF de alta resolução Waters LCT Premier XE operado em modo de eletropulverização por ionização positiva. Utilizou-se a mesma coluna e as fases móveis A e B como no método B, mas com um gradiente mais lento (A: B 99: 1—> 1: 99 ao longo de 4,8 min; 0,7 ml/min; temperatura da coluna 40°C).

MÉTODO D:

[00128] LC-MS: Os espectros de massa foram obtidos num espectrômetro Shimadzu LCMS-2010EV utilizando ionização por eletropulverização e ionização química à pressão atmosférica; Coluna: Acquity BEH C18 (50 mm x 2,1 mm, 1,7 □pm); Fase Móvel: A: 0,1% de

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Ácido Fórmico em Água; B: 0,1% de ácido fórmico em acetonitrila; Gradiente: Tempo (min) /% B: 0/2, 0,2 / 2, 2,3 / 98, 3,4 / 98, 3,41 / 2, 3,5 / 2; Taxa de fluxo da coluna: 0,8 ml/min.

MÉTODO E:

[00129] LC-MS: Os espectros de massa foram obtidos num espectrômetro Shimadzu LCMS-2010EV utilizando ionização por eletropulverização e ionização química à pressão atmosférica; Coluna: Acquity BEH C18 (50 mm x 2,1 mm, 1,7 □pm); Fase Móvel: A: 0,1% de Ácido Fórmico em Água; B: 0,1% Ácido Fórmico em acetonitrila; Tempo de gradiente min) / % B: 0/3, 0,4 / 3, 2,5 / 98, 3,4 / 98, 3,5 / 3, 4/3; Temperatura da coluna: 35°C, Taxa de Fluxo: 0,6 ml/min.

SFC DE FASE ESTACIONÁRIA QUIRAL ANALÍTICA [00130] As análises de SFC de fase estacionária quiral foram realizadas utilizando um instrumento Waters UPC2 SFC com uma coluna Phenomenex Lux® 3 pm Cellulose-4 (150 x 4,6 mm). Condições isocráticas com uma fase móvel consistindo em ^A#CO2: MeOH 80: 20 e uma taxa de fluxo de 3ml/min foram usadas. As razões enantioméricas dos analitos foram determinadas pela integração das áreas dos picos UV.

INTERMEDIÁRIOS

INTERMEDIÁRIO 1

2-[trans-4-[(2-cloro-5-nitropiridin-4-il)amino]ciclohexil] acetonitrila

[00131] Uma solução de trifluoroacetato de trans-4-(cianometil)ciclohexil]amônio (Li, Y. -L. et al. US2014/0121198) (26,7 g, 105,8 mmol) e 2,4dicloro-5-nitropiridina (22,4 g, 116,3 mmol) em acetonitrila seca foi resfriada

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38/79 num banho de gelo e N,N-di-isopropiletilamina (55,3 ml, 317 mmol) foi adicionado por gotejamento. A mistura resultante foi agitada à rt por 20 h. A mistura de reação foi diluída com NaHCO3 aquoso saturado e extraída com DCM (3 x 500 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 filtradas e evaporadas a vácuo. O produto em bruto foi triturado com hexano, dietiléter e água para proporcionar o composto título (29,8 g, 95%) como um sólido amarelo.

[00132] UPLC-MS (Método A): tR = 3,41 min, m/z = 294,9 (M+H+). [00133] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,87 (s, 1H), 8,03 (d, J =

8,3 Hz, 1H), 7,30 (s, 1H), 3,73 (dtd, J = 11,5, 7,7, 4,2 Hz, 1H), 2,50 (d, J = 4,2 Hz, 2H) 2,04 - 1,91 (m, 2H), 1,86 - 1,75 (m, 2H), 1,64 (ddd, J = 11,6, 5,7, 3,0 Hz, 1H), 1,53 - 1,39 (m, 2H), 1,31 (ddd, J = 25,4, 12,9, 4,2 Hz, 2H).

INTERMEDIÁRIO 2

2-[trans-4-[(5-amino-2-cloropiridin-4-il)amino]ciclohexil] acetonitrila

[00134] A uma solução do Intermediário 1 (3,5 g, 11,9 mmol) em MeOH: água 9: 1 (99 ml) foram adicionados ferro (1,86 g, 33,2 mmol) e cloreto de amônio (1,91 g, 35,6 mmol). A mistura resultante foi agitada a refluxo durante 5 horas. Depois do resfriamento até a rt, os sólidos foram removidos por filtração através de um tampão de celite. O bolo foi lavado com MeOH e o filtrado foi concentrado para remover os voláteis. O resíduo foi diluído com NaHCO3 (50 ml) aquoso saturado e extraído com EtOAc (3 x 30 ml). A fase orgânica foi seca com Na2SO4 e concentrada a vácuo, gerando o composto título como um sólido marrom (3,0 g, 95%).

[00135] UPLC-MS (Método A): tR = 1,85 min, m/z = 265 (M+H+).

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39/79 [00136] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,37 (s, 1H), 6,37 (s, 1H), 5,38 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 4,74 (s, 2H), 2,48 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,06 1,92 (m, 2H), 1,87 - 1,74 (m, 2H), 1,71 - 1,57 (m, 1H), 1,33 - 1,16 (m, 5H).

[00137] INTERMEDIÁRIO 3 [00138] 2- [trans-4- [6-cloro-2-( 1 -hidroxietil)-1 H-imidazo[4,5-c]piridin1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila

[00139] Uma mistura de tetrafluoroborato de trietiloxônio (9,3 g, 49,1 mmol) e lactamida (4,4 g, 49,1 mmol) em THF (40 ml) foi agitada à rt durante 2 h (solução límpida). Esta solução foi adicionada a uma solução do Intermediário 2 (2,6 g, 9,8 mmol) em EtOH (70 ml). A mistura obtida foi aquecida até o refluxo durante 18 h. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi particionado entre água (40 ml) e EtOAc (25 ml). A fase aquosa foi extraída com EtOAc (3 x 20 ml). A fase orgânica foi seca com Na2SO4 e concentrada in vacuo. A cromatografia em coluna (20% de EtOAc em DCM e 10% de MeOH em DCM como eluente) produziu um semissólido que foi triturado com éter dietílico, gerando o composto título como um sólido avermelhado (2,3 g, 73%).

[00140] UPLC-MS (Método A): tR = 2,52 min, m/z = 319 (M+H+).

[00141] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,70 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 5,81 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 5,10 (p, J = 6,5 Hz, 1H), 4,74 - 4,60 (m, 1H),

2,55 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 2,39 - 2,17 (m, 2H), 2,16 - 2,03 (m, 1H), 1,98 - 1,84 (m, 4H), 1,60 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,38 - 1,22 (m, 2H).

EXEMPLOS

EXEMPLO 1

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40/79

TRANS-2-[4-[2-[l-HIDROXIETIL]-6(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 1)

[00142] ETAPA 1:

2-[TRANS-4-[6-AMINO-2-(l-HIDROXIETIL)-lHIMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA

N ___ \ / \_-oh 1. Pdidbaj, Xantphos. \ / λ—OH

BoOMHs, ifePCU y 1,4-Disxanü /

2.. TFA. DCM ' [00143] Intermediário 3 (0,20 g, 0,63 mmol), carbamato de terc-butila (0,15 g, 1,25 mmol), tris(dibenzilideneaoetona)dipaládio(0) (0,06 g, 0,06 mmol), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxantana (0,11 g, 0,19 mmol) e fosfato de potássio tribásico (0,31 g, 1,44 mmol) foram misturados em 1,4dioxano (15 ml). A mistura obtida foi desgaseificada com argônio durante 20 min e depois aquecida até 130°C sob irradiação de micro-ondas durante 45 min. A mistura foi filtrada através de um tampão de celite, o bolo foi lavado com MeOH/DCM (1: 9) e o filtrado foi concentrado. Esta reação foi repetida adicionalmente quatro vezes utilizando as mesmas quantidades e condições devido às limitações de volume do reator de micro-ondas. Os resíduos obtidos foram combinados. Cromatografia em coluna curta (2% de MeOH em DCM como eluente) produziu uma mistura bruta (0,7 g) que foi dissolvida em DCM (15 ml). A solução foi adicionado, gota a gota, TFA (1,3 ml, 17,5 mmol). A

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41/79 mistura obtida foi agitada à rt durante 24 h. A mistura foi concentrada in vacuo. O resíduo foi dissolvido em DCM (15 ml) e lavado com NaHC03 aquoso (5 ml). A fase aquosa foi extraída com DCM (5 x 15 ml). A fase orgânica foi seca com Na2SO4 e concentrada in vacuo. Cromatografia em coluna (gradiente de MeOH: DCM 4: 96 a 7,5 Μ NH3 em MeOH: DCM 5: 95) produziu o composto título como uma espuma amarelada (0,195 g, 21%).

[00144] UPLC-MS (Método A): tR = 1,72 min, m/z = 300 (M+H+).

[00145] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,26 (d, J = 0,9 Hz, 1H),

6,66 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 5,59 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 5,39 (s, 2H), 4,96 (p, J = 6,6 Hz, 1H), 4,62 - 4,47 (m, 1H), 2,57 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,23 - 2,06 (m, 2H), 2,01 - 1,72 (m, 5H), 1,54 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,40 - 1,22 (m, 2H).

[00146] ETAPA 2:

TRANS-2-[4-[2-[l-HIDROXIETIL]-6(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA / ) \ -v, / )X \ / j— Ο π \ í )— O h / 1. Paraformaldeído.

! A NaOMe, MlOHΓ \ , · 2. NsBHí MeOH..AW lí ,i ----------------------’( J 'H [00147] A uma solução do produto da Etapa 1 (0,195 g, 0,65 mmol) em metanol (5 ml) foi adicionado paraformaldeído (0,078 g, 2,61 mmol) e metóxido de sódio (0,176 g, 3,26 mmol). A mistura obtida foi aquecida até o refluxo durante. Após 2 h, a mistura foi resfriada até 0°C e foi adicionado boro-hidreto de sódio (0,099 g, 2,61 mmol). A mistura resultante foi aquecida até o refluxo durante 1 h. Após o resfriamento até a rt, a reação foi arrefecida bruscamente por adição cuidadosa de NaHCO3 aquoso (10 ml). A fase aquosa foi extraída com EtOAc (3 x 10 ml). A fase orgânica foi seca com Na2SO4 e concentrada in vacuo. A cromatografia em coluna (4% a 10% de MeOH em

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DCM como eluente) produziu o composto título como uma espuma branca (0,152 g, 76%).

[00148] HPLC-MS (Método C): tR = 1,67 min, m/z = 314,1939 (M+H+).

[00149] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,34 (d, J = 0,9 Hz, 1H),

6,48 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 5,90 (q, J = 4,9 Hz, 1H), 5,59 (d, J = 6,6 Hz, 1H),

4,96 (p, J = 6,6 Hz, 1H), 4,61 - 4,50 (m, 1H), 2,80 (d, J = 4,9 Hz, 3H), 2,56 (d, J = 6,2 Hz, 2H), 2,30 - 2,11 (m, 2H), 1,98 - 1,82 (m, 5H), 1,55 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,39- 1,23 (m, 2H).

EXEMPLOS 2 E 3

TRANS-2-[4-[2-[(lS)-l-HIDROXIETIL]-6(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 2) E TRANS-2-[4-[2-[(lR)-lHIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lIL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 3)

[00150] Os enantiômeros do Exemplo 1 (166 mg) foram separados por

SFC de fase estacionária quiral, utilizando as seguintes condições:

Coluna	Amy-C (20 x 250 mm, 5 pm)
Temperatura da coluna	40°C
Taxa de Fluxo	50 ml/min
Regulador de contrapressão	125 bar
Detector de comprimento de onda	228 nm
Volume de injeção/massa de amostra	300 pL/ 12 mg
Eluente (isocrático)	30: 70 MeOH: CO2 + 0,1% em v/v NH3

[00151] As configurações absolutas foram estabelecidas por comparação com uma amostra do enantiômero (R) preparado a partir de (R)lactamida, ver Exemplo 3 (preparações alternativas) abaixo.

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EXEMPLO 2 (COMPOSTO 2)

Rendimento: 73 mg, >98% ee [00152] UPLC-MS (Método C): tR = 1,67 min, m/z = 314,1908 (M+H+).

[00153] RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,33 (d, J = 0,8 Hz, 1H),

6,47 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 5,89 (q, J = 5,0 Hz, 1H), 5,58 (d, J = 6,7 Hz, 1H),

4,96 (p, J = 6,5 Hz, 1H), 4,63 - 4,47 (m, 1H), 2,79 (d, J = 5,0 Hz, 3H), 2,55 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 2,30 - 2,10 (m, 2H), 2,01 - 1,76 (m, 5H), 1,54 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,40- 1,20 (m, 2H).

EXEMPLO 3 (COMPOSTO 3)

Rendimento: 67 mg, >98% ee [00154] UPLC-MS (Método C): tR = 1,67 min, m/z = 314,1975 (M+H+).

[00155] RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,33 (d, J = 0,9 Hz, 1H),

6.47 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 5,89 (q, J = 4,9 Hz, 1H), 5,58 (d, J = 6,5 Hz, 1H),

4,96 (p, J = 6,4 Hz, 1H), 4,63 - 4,46 (m, 1H), 2,79 (d, J = 5,0 Hz, 3H), 2,55 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 2,29 - 2,11 (m, 2H), 2,00 - 1,77 (m, 5H), 1,54 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,39-1,19 (m, 2H).

[00156] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,33 (d, J = 0,9 Hz, 1H),

6.48 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 5,90 (q, J = 5,0 Hz, 1H), 5,59 (d, J = 6,7 Hz, 1H),

4,96 (p, J = 6,6 Hz, 1H), 4,55 (tt, J = 12,3, 4,0 Hz 1H), 2,79 (d, J = 5,0 Hz, 3H), 2,55 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,20 (qdd, J = 12,8, 10,4, 3,7 Hz, 2H), 1,93 (ddd, J = 13,1, 6,3, 3,2 Hz, 2H), 1,89 - 1,86 (m, 2H), 1,86 - 1,84 (m, 1H), 1,54 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,30 (qdt, J = 12,3, 7,6, 3,6 Hz, 2H).

[00157] RMN de 13C (151 MHz, DMSO-d6) δ 155,5, 155,4, 141,3, 139,2, 133,3, 119,5, 86,4, 61,9, 54,0, 32,9, 30,7, 30,7, 29,1, 28,8, 28,8, 22,9, 21,5.

EXEMPLO 3 (PREPARAÇÃO ALTERNATIVA N° 1)

TRANS-2-[4-[2-[(lR)-l-HIDROXIETIL]-6Petição 870190067745, de 17/07/2019, pág. 49/90

44/79 (METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 3)

OH

ETAPA 1

2- [trans-4- [6-cloro-2- [(1R)-1 -hidroxietil] -1 H-imidazo [4,5c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila [00158]

Um frasco de 100 ml de tampa roscada foi carregado com tetrafluoroborato de trietiloxônio (8,00 g, 42,1 mmol) e THF seco (30 ml) com argônio. A suspensão branca foi adicionada (R) -lactamida (3,87 g, 42,1 mmol) numa porção. A solução resultante foi agitada à rt. Após ~ 6 min, ocorreu uma reação fracamente exotérmica e o vaso de reação foi resfriado em banho-maria. Após 2 h à rt, esta solução foi adicionada a uma suspensão de Intermediário 2 (2,23 g, 8,42 mmol) em etanol anidro (45 ml) e a solução resultante foi agitada a 80°C de um dia para o outro. Os voláteis foram evaporados e o resíduo foi tratado com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (50 ml). A mistura foi extraída com EtOAc (3 x 80 ml) e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 ml), secas com sulfato de sódio e filtradas. A evaporação dos voláteis forneceu um resíduo (13,5 g) que foi purificado utilizando cromatografia flash (DCM: MeOH 98: 2 a 95: 5) para fornecer uma espuma marrom (1,92 g). Esta foi

Petição 870190067745, de 17/07/2019, pág. 50/90

45/79 triturada com éter (20 ml) para gerar o composto título como um sólido (1,62 g, 57%).

[00159] UPLC-MS (Método B): tR = 0,52 min, m/z = 319,2 (M+H+).

[00160] RMN de 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,69 (d, J = 0,8 Hz, 1H),

8,00 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 5,80 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 5,10 (p, J = 6,5 Hz, 1H), 4,74 - 4,59 (m, 1H), 2,54 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,38 - 2,16 (m, 2H), 2,17 - 2,00 (m, 1H), 1,99 - 1,81 (m, 4H), 1,59 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,41 - 1,18 (m, 2H).

[00161] A configuração absoluta do composto título foi confirmada por difração de raios X de cristal único.

ETAPA 2

2- [4- [2- [(1R)-1 - [TERT-BUTIL(DIMETIL)SILIL] OXIETIL] 6-CLORO-IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-l-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA

[00162] Uma solução do produto da Etapa 1 (2,47 g, 7,75 mmol) em THF (35 ml) foi resfriada num banho de gelo e imidazol foi adicionado (791 mg, 11,6 mmol). Após 5 min, uma solução de TBSC1 (1,28 g, 8,52 mmol) em THF (11 ml) foi adicionada e o banho de gelo foi removido. Após 5 h à rt, a mistura foi aquecida até 45 °C e agitada a esta temperatura de um dia para o outro. Para efetuar a conversão completa, adicionou-se outra porção de imidazol (791 mg, 11,6 mmol) e uma solução de TBSC1 (1,28 g, 8,52 mmol) em THF (5 ml). A mistura foi agitada até 45°C durante mais 24 h e foi vertida numa mistura de salmoura (35 ml) e água (35 ml). Ela foi extraída com EtOAc (2 x 80 ml), as camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secas com Na2SO4, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por

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46/79 cromatografia flash (DCM: EtOAc 90: 10 a 80: 20) para gerar o composto título (2,95 g, 83%) como um sólido.

[00163] UPLC-MS (Método B): tR = 0,92 min, m/z = 433,3 (M+H+).

[00164] RMN de 1H (600 MHz, CDC13) δ 8,75 (d, J = 0,8 Hz, 1H),

7,42 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 5,34 (q, J = 6,8 Hz, 1H), 5,00 (tt, J = 12,5, 4,1 Hz, 1H), 2,41 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,31 - 2,19 (m, 2H), 2,17 - 2,09 (m, 2H), 2,09 - 2,03 (m, 2H), 2,00 - 1,91 (m, 1H), 1,62 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,48 - 1,33 (m, 2H), 0,91 (s, 9H), 0,14 (s, 3H), 0,03 (s, 3H).

ETAPA 3

2-[4-[2-[(lR)-l-[TERC-BUTIL(DIMETIL)SILIL]OXIETIL]6-[(4-METOXIFENIL)METIL-METIL-AMINO]IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-

1-IL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA

[00165] Carregou-se um frasco de 2 ml de tampa roscada com o produto da Etapa 2 (46,2 mg, 0,107 mmol) e 4-metoxi-N-metilbenzilamina (32,3 mg, 0,213 mmol). O frasco foi lavado com argônio, e adicionou-se uma mistura de terc-butóxido de sódio (12,3 mg, 0,128 mmol), RuPhos (3,0 mg, 0,0064 mmol) e acetato de paládio (II) (0,72 mg, 0,0032 mmol). A mistura foi agitada com argônio durante 17 h a 110°C. Ela foi resfriada até a rt e foi adicionado diclorometano (0,45 ml). A mistura foi lavada com salmoura: água 2: 1 (0,45 ml) e a camada aquosa foi extraída com diclorometano (2 x 0,45 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e evaporadas para gerar um produto em bruto contendo o composto título e o correspondente des-TBS análogo (75,3 mg). Este material foi usado na etapa

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47/79 seguinte sem purificação.

[00166] UPLC-MS (Método B): tR = 0,95 min, m/z = 548,4 (M+H+). ETAPA 4

TRANS-2-[4-[2-[(lR)-l-HIDROXIETIL]-6(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA \ 7 \-*OTBS Ã / \-QH

X. 1.TFA (| 2. HCI a 2 M em dtóxana ij ] H

[00167] O produto em bruto da Etapa 3 foi dissolvido em TFA (0,25 ml) a 0°C e a mistura foi agitada à rt durante 1,5 h. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em cloreto de hidrogênio a 4 M em dioxano (0,25 ml). A mistura foi agitada à rt durante 18 h, os voláteis foram evaporados e o resíduo foi dissolvido em diclorometano (0,25 ml). A isto adicionou-se amônia a 2 M em metanol (0,60 ml) para ajustar o pH a ~10. Os voláteis foram removidos com vácuo, o resíduo foi dissolvido em DCM: MeOH 95: 5 (2 ml) e a mistura foi filtrada. O filtrado foi evaporado e o resíduo foi purificado por cromatografia (4 g de coluna de gel de silica préempacotada eluída com DCM: MeOH 96: 4 a 94: 6) para gerar o composto título (37,7 mg) como um semissólido contendo ca. 30% de 4-metoxi-Nmetilbenzilamina.

[00168] UPLC-MS (Método B): tR = 0,38 min, m/z = 314,3 (M+H+).

[00169] SFC de fase estacionária quiral analítica: (S) enantiômero (menor) tR = 5,37 min; (R) enantiômero (maior) tR = 5,78 min.

EXEMPLO 3 (PREPARAÇÃO ALTERNATIVA N° 2)

TRANS-2-[4-[2-[(lR)-l-HIDROXIETIL]-6Petição 870190067745, de 17/07/2019, pág. 53/90

48/79

(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 3)

ETAPA 1

2-[TRANS-4-[(2-CLORO-5-NITROPIRIDIN-4-IL)AMINO]C

ICLO-HEXIL]ACETONITRILA

[00170] Um reator de vidro de 20 1, equipado com agitador mecânico, condensador de refluxo e entrada de argônio, foi evacuado e lavado com argônio duas vezes. O reator foi carregado com 700 g de 2,4-dicloro-5nitropiridina (3,63 mol, 1,0 equiv. ),665 g de cloridrato de trans-4(cianometil)ciclo-hexil]amônio (3,81 mol, 1,05 equiv. ) E 7,00 L de 2propanol. A pasta fluida resultante foi agitada a 25°C e 1,90 1 de diisopropiletilamina 1,41 kg, 10,9 mol, 3,0 equiv. ) foi adicionado. O tubo de adição foi lavado com 0,100 1 de 2-propanol e a pasta fluida foi aquecida até ao refluxo (ponto de ajuste Tj = 95°C). A mistura foi agitada até o refluxo durante 15 horas e depois resfriada até 25°C. No controle de processo (LCMS), apresentou 99% de conversão.

[00171] O produto foi isolado por filtração e lavado no filtro com 1,75 1 de 2-propanol e depois 3,80 1 de 2-propanol. O bolo de filtração foi transferido para tigelas de vidro e seco in vácuo a 50°C até o peso constante; produzindo 1,00 kg (94%) do composto título como um sólido amarelo;

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49/79

Pureza HPLC: 98,8% em área.

ETAPA 2

2-[TRANS-4-[(5-AMINO-2-CLOROPIRIDIN-4IL)AMINO]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA

NH

Cl IN

N0₂

H₂, Pt/C

EtOH

Cl IN

NH₂ [00172]

Um frasco de reação de 2,0 1 Parr-shaker foi lavado com argônio e carregado com 5,00 g de 5% Pt/C (pasta com 50% de água, 0,05 g/g, 1,3 mmol), 100 g de 2-[trans-4-[(2-cloro-5-nitropiridin-4-yl)amino]ciclohexil]acetonitrila (339 mmol) e 1,00 1 de etanol. O frasco de reação Parrshaker foi colocado no agitador no Parr-shaker e esvaziado reenchido com argônio duas vezes. Em seguida, o frasco foi esvaziado e reenchido com hidrogênio. A pressão foi ajustada para 1,5 bar e o agitador foi iniciado. Hidrogênio adicional foi adicionado várias vezes, mas após 2 horas o consumo de hidrogênio cessou. No controle do processo (HPLC), mostrou conversão >99% e adicionaram-se 600 ml de diclorometano de modo a impedir a precipitação do composto título. A mistura resultante foi agitada durante 10 minutos e filtrada com celite. O bolo de filtração foi lavado com 250 ml de diclorometano e os solventes dos filtrados combinados foram removidos por evaporação sob pressão reduzida a 50°C. O resíduo foi transferido para um recipiente de vidro e seco in vacuo a 50°C até o peso constante, dando origem a 85,1 g (95%) do composto título como um sólido marrom; pureza HPLC: 94% de área.

ETAPA 3

2-[TRANS-4-[6-CLORO-2-[(lR)-l-HIDROXIETIL]-lHIMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLO-HEXIL] ACETONITRILA

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[00173] Um reator de vidro de 20 1, equipado com agitador mecânico, condensador de refluxo e entrada de argônio, foi esvaziado e lavado com argônio duas vezes. O reator foi carregado com 409 g de (R)-lactamida (4,59 mol, 2,5 equiv. ) e 4,90 1 de tetra-hidrofurano. A temperatura foi ajustada a 23°C e 872 g de tetrafluoroborato de trietiloxônio (4,59 mol, 2,5 equiv. ) foram adicionados numa porção. A reação é exotérmica e a temperatura atinge 43°C após a adição. A mistura de reação foi resfriada e agitada a 23°C durante 90 minutos. A mistura foi transferida para um frasco de 10 1 de tampa azul e armazenada com argônio. O reator foi enxaguado com 2,7 1 de etanol e o reator limpo foi carregado com 486 g de 2-[trans-4-[(5-amino-2cloropiridin-4-il)amino]ciclo-hexil]acetonitrila (1,84 mol, 1,0 equiv. ) e 7,3 1 de etanol. A temperatura foi ajustada a 23°C e a solução de tetra-hidrofurano contendo (R)-lactamida e tetrafluoroborato de trietiloxônio foi adicionada durante um período de aproximadamente 2 a 4 minutos. A mistura de reação foi aquecida até o refluxo (Tr = 70°C, ponto de ajuste Tj = 85°C). A precipitação de um sal branco foi observada. A mistura de reação era pouco clara e laranja. Após 6 horas, no controle do processo (HPLC), mostrou > 95% de conversão e a mistura de reação foi resfriada até 23 °C e agitada durante mais 16 horas. A mistura foi filtrada e o bolo de filtração foi lavado com 2,0 1 de tetra-hidrofurano. O filtrado foi transferido de volta para o reator e os solventes foram removidos por destilação sob pressão reduzida a 50°C. A destilação foi interrompida após 7 horas quando a condensação cessou em Tr = 31°C/17 mbar. A pasta fluida residual foi diluída com 7,3 1 de terc-butiléter de metila e 7,3 1 de carbonato de sódio aquoso a 10%. A pasta fluida foi agitada a 23°C durante 14 horas, após o que o composto título foi isolado por

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51/79 filtração. O bolo de filtração foi lavado com 5,0 1 de água, seco por sucção e transferido de volta para o reator. Em seguida, 5,0 1 de água foram adicionados ao reator e a pasta fluida resultante foi agitada a 23°C durante 60 minutos e filtrada. O bolo de filtração foi lavado com 5,0 1 de água e seco por sucção. O sólido branco resultante foi transferido para tigelas de vidro e seco in vácuo a 50°C até o peso constante; rendimento típico 70 a 90% do composto do título como sólido branco; pureza HPLC do bolo de filtração úmido 95% de área.

ETAPA 4

TRANS-2-[4-[2-[(lR)-l-HIDROXIETIL]-6(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA

[00174] Um reator de vidro EasyMax de 400 ml, equipado com agitador mecânico, condensador de refluxo e entrada de argônio foi lavado com argônio. O reator foi carregado com 5,43 g de terc-butóxido de sódio (56,5 mmol, 1,2 equiv. ),5,54 g de fenol (58,8 mmol, 1,25 equiv.) e 195 ml de tetra-hidrofurano. A mistura foi agitada a 25°C durante 20 minutes, após o que 15,0 g de 2-[trans-4-[6-cloro-2-[(lR)-l-hidroxietil]-lH-imidazo[4,5c]piridin-l-il]ciclohexil]acetonitrila (47,1 mmol, 1,0 equiv. ) foram adicionados. O funil de adição foi lavado com 30 ml de tetra-hidrofurano e foram adicionados 94,1 ml de metilamina a 2 M em tetra-hidrofurano (188 mmol, 4,0 equiv. ). A mistura resultante foi aquecida até 55°C (ponto de ajuste Tj = 55°C). Num frasco de reação separado, 0,210 g de tBuBrettPhosPdG3 (0,235 mmol, 0,005 equiv. ) foi dissolvido em 4,0 ml de

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52/79 tetra-hidrofurano. A solução de tBuBrettPhos Pd G3 foi adicionada à mistura de reação a 55°C. Após 23 horas a solução homogênea escura foi resfriada até 23°C e transferida para um funil de separação. A mistura de reação foi lavada com 2 x 225 ml de hidróxido de sódio aquoso a 2 Μ. A fase orgânica foi concentrada até aproximadamente 50% em volume por evaporação sob pressão reduzida a 50°C e diluída com 125 ml de heptano.

[00175] Filtragem de tampão de silica; 105 g de gel de silica (7,0 g/g) foram ativados com 250 ml de heptano/acetato de etila (1: 1) e vertidos num filtro de vidro (8 cm de diâmetro). A fase orgânica contendo o composto título em bruto foi lentamente carregada no tampão de silica. As impurezas foram eluídas com 2 x 250 ml de heptano/acetato de etila (1: 1) e depois 250 ml de acetato de etila. Em seguida, o composto título foi eluído com 5 x 200 ml de tetra-hidrofurano. As frações contendo o composto título foram reunidas e o solvente foi removido por evaporação sob pressão reduzida, fornecendo 12,3 g (83%) do composto título em bruto como um sólido marrom; Pureza HPLC 95% de área.

[00176] Sequestro de Pd; um frasco de 100 ml foi carregado com 3,00 g do composto título em bruto (9,57 mmol) e 45 ml de metanol. A mistura foi agitada até todos os sólidos se dissolverem e depois foram adicionados 0,30 g de SiliaMetS® DMT (dimercaptotriazina a 10% em p/p, 40 a 63 pm, 60 A). A pasta fluida foi aquecida até 50°C e agitada durante 4 horas, após o que a mistura foi resfriada até 23°C e filtrada com celite. O bolo de filtração foi lavado com 6,0 ml de metanol e o solvente foi removido dos filtrados combinados por evaporação sob pressão reduzida, produzindo 2,75 g (92% de recuperação) do composto título.

[00177] Recristalização; um frasco de 100 ml foi carregado com 3,00 g (9,57 mmol; pureza HPLC 96% da área) do composto título e 20 ml de acetato de etila. A mistura foi aquecida até o refluxo e agitada até todos os sólidos se dissolverem. A mistura foi resfriada adicionando-se,

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53/79 posteriormente, 10 ml de terc-butiléter de metila à solução quente. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e agitada por 17 horas. O precipitado foi isolado por filtração e lavado no filtro com 2 x 1,0 ml de terc-butiléter de metila e seco in vacuo a 50°C até o peso constante, produzindo 1,81 g (60%) do composto título as como um sólido esbranquiçado (Crystalline, m. p. (temperatura de início de DSC) 143 ± 2oC); pureza HPLC 98% de área.

EXEMPLO 4

TRANS-2-[4-[2-[(lR)-l-HIDROXIETIL]-6(TRIDEUTERIOMETILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 4)

ETAPA 1

1,1,1 -TRIDEUTERIO-N-[(4METOXIFENIL)METIL]METAN AMINA

HCI

O

1. TEA, Ti(O'Pr)₄, EtOH

2. NaBH₄

[00178] Cloridrato de trideuteriometanamina (282 mg, 4,00 mmol) e TEA (0,558 ml 4,00 mmol) foram adicionados à rt a uma mistura de 4metoxibenzaldeído (0,243 ml, 2,00 mmol) em etanol anidro (3,0 ml) com argônio. O tetra-isopropoxititânio (IV) durou mais de 2 minutos sob ligeiro arrefecimento adicionado à suspensão. A mistura de reação foi agitada à rt de um dia para o outro. A rt - após 17 horas - NaBH4 foi adicionado (113 mg, 3,00 mmol). A suspensão foi, então, agitada à rt durante mais 6,5 horas antes que a amônia aquosa a 2 M (6 ml) fosse cuidadosamente adicionada sob

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54/79 resfriamento. As partes sólidas foram removidas por filtração e o bolo de filtração foi lavado com diclorometano (10 ml). A fase orgânica foi isolada. O bolo de filtração foi novamente lavado com diclorometano (10 ml). Os filtrados combinados foram lavados com água e depois tratados com HC1 aquoso a 1 M (5 ml). A fase aquosa ácida foi lavada com diclorometano (10 ml) antes de o pH ser ajustado para ~11 pela adição de NaOH a 2 Μ. A fase aquosa foi extraída com diclorometano (3 x 10 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas com sulfato de sódio e filtradas. A evaporação sob pressão reduzida (60 mbar/35°C) originou o composto título (268 mg, 83%) como um líquido incolor.

[00179] RMN de 1H (600 MHz, CDC13) δ 7,25 - 7,21 (m, 2H), 6,89 6,84 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,68 (s, 2H).

ETAPA 2 [00180] TRANS-2-[4-[2-[(lR)-l-[TERCBUTIL(DIMETIL)SILIL]OXIETIL]-6-[(4-METOXIFENIL)METILTRIDEUTERIOMETIL-AMINO]IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1 -IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA

OTBS

OTBS [00181] Carregou-se um frasco de 4 ml de tampa roscada com trans-2[4-[2-[(lR)-l-[terc-butil(dimetil)silil]oxietil]-6-cloro-imidazo[4,5-c]piridin-lil]ciclo-hexil]acetonitrila (150 mg, 0,346 mmol) e l,l,l-trideuterio-N-[(4metoxifenil)metil]metanamina (107 mg, 0,693 mmol). O frasco foi lavado com argônio e uma mistura de terc-butóxido de sódio (40 mg, 0,416 mmol), RuPhos (9,7 mg, 0,021 mmol) e acetato de paládio (II) (2,3 mg, 0,010 mmol)

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55/79 foi adicionada. A mistura foi agitada com argônio durante 18 horas a 110°C. Ela foi resfriada até a rt e uma solução de diclorometano/EtOH a 95: 5 (1,5 ml) foi adicionada. A mistura foi lavada com salmoura: água a 2: 1 (1,2 ml) e a camada aquosa foi extraída com uma solução de diclorometano/EtOH a 95: 5 (2 x 1,5 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 filtradas e evaporadas. A cromatografia em coluna (1% a 5% de MeOH em DCM como eluente) produziu o composto título e o correspondente análogo de des-TBS (0,109 g) como uma espuma amarela. Este material foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional.

[00182] ETAPA 3 [00183] TRANS-2-[4-[2-[(lR)-l-HIDROXIETIL]-6(TRIDEUTERIOMETILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA

[00184] O produto em bruto da Etapa 2 foi dissolvido em TFA (0,75 ml) a 0°C e a mistura foi agitada à rt durante 1,5 h. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi dissolvido a 0 °C em cloreto de hidrogênio a 4 M em dioxano (0,75 ml). A mistura foi agitada à rt durante 17 horas antes de os voláteis serem removidos por evaporação. Agua (0,5 ml) foi adicionada ao resíduo e a fase aquosa foi lavada com EtOAc (2 x 0,5 ml). As fases orgânicas foram lavadas com água (0,5 ml). O pH das fases aquosas combinadas foi ajustado para ~11 com carbonato de sódio aquoso saturado. A fase aquosa foi então extraída com DCM: MeOH 95: 5 (3 x 0,5 ml) e as fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e evaporadas. A

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56/79 cromatografia em coluna (3% a 5% de MeOH em DCM como eluente) produziu o composto título (48 mg, 42%) como uma espuma esbranquiçada. [00185] UPLC-MS (Método B): tR = 0,38 min, m/z = 317,3 (M+H+). [00186] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,33 (br s, 1H), 6,47 (br s, 1H), 5,87 (s, 1H), 5,59 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 4,96 (p, J = 6,5 Hz, 1H), 4,59 -

4,49 (m, 1H), 2,55 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 2,25 - 2,14 (m, 2H), 1,96 - 1,80 (m, 5H), 1,54 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,35 - 1,24 (m, 2H).

EXEMPLO 5

TRANS-2-[4-[2-[l,2,2,2-TETRADEUTERIO-lHIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lIL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 5)

ETAPA 1

TRANS-2-[4-(2-ACETIL-6-CLORO-IMIDAZO[4,5C]PIRIDIN-1-IL)CICLO-HEXIL]ACETONITRILA

[00187] A uma solução de 2-[trans-4-[6-cloro-2-[(lR)-l-hidroxietil]lH-imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclohexil]acetonitrila (5,0 g, 15,6 mmol) em DCM (50 ml) foi adicionado DMP (10 g, 23,5 mmol) em porções a 0°C a 5°C à rt. A mistura de reação foi agitada à RT por 16 horas. Na conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de leito de celite e lavada com DCM. O filtrado foi lavado com NaHCO3 saturado (300 ml) e solução de salmoura,

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57/79 seco com Na2SO4 anidro, concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna de gel de silica (100 a 200 mesh) (EtOAc a 10 a 20% em éter de petróleo como eluente) para gerar o composto título (3,5 g, 71%) como um sólido esbranquiçado.

[00188] LC-MS (Método D): tR = 1,84 min, m/z = 316,11 (M+H+). [00189] RMN de 1H (400 MHz, CDC13) δ 8,98 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 5,23-5,18 (m, 1H), 2,75 (s, 3H), 2,54 (d, J = 6,5, 2H), 2,31-2,23 (m, 2H), 2,08-2,05 (m, 1H), 1,94-1,89 (m, 4H), 1,30-1,27 (m, 2H).

ETAPA 2

TRANS-2-[4-[6-CLORO-2-(2,2,2TRIDEUTERIOACETYL)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA

[00190] Uma suspensão de trans-2-[4-(2-acetil-6-cloro-imidazo[4,5c]piridin-l-il)ciclo-hexil]acetonitrila (3,5 g, 11,1 mmol) em DMF (35 ml) foi adicionada K2CO3 (4. 5 g, 33. 2 mmol) à RT e foi subsequentemente agitada àquela temperatura por 16 horas. A mistura de reação foi resfriada bruscamente com D2 O (10 ml) e agitada à TA durante 4 horas antes de ser adicionada água gelada. Acetato de etila (70 ml) foi adicionado. As fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 35 ml) e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas com Na2SO4 anidro, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por cromatografia em coluna utilizando gel de silica (100 a 200 mesh) (10 a 20% de EtOAc em éter de petróleo como eluente) para proporcionar 2,5 g do produto bruto como sólido esbranquiçado. O material obtido foi uma mistura

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58/79 de isotopômeros. Com base em RMN de 1H a distribuição de isotopômeros foi CH3) não deuterado: 7,6%, (CH2D) monodeuterado: 26,33%, (CHD2) dideuterado: 32,34% e (CD3) trideuterado: 33,72% [00191] Repetiu-se o procedimento acima com o produto em bruto obtido para proporcionar 1,8 g de um novo produto bruto como um sólido esbranquiçado. Com base em RMN de 1H, a distribuição de isotopômeros foi; (CH3) não deuterado: 0,66%, (CH2D) monodeuterado: 4,47%, (CHD2) dideuterado: 23,84% e (CD3) trideuterado: 71,02% [00192] Repetiu-se novamente o procedimento acima com o produto em bruto obtido para proporcionar 1,2 g (35% de rendimento global) do “composto título” como um sólido esbranquiçado. Pureza isotópica: 99,3%. Com base em RMN de 1H, a distribuição de isotopômeros foi; (CH3) não deuterado: 0,66%, (CH2D) monodeuterado: 3,47%, (CHD2) dideuterado: 21,85% e (CD3) trideuterado: 74,02%.

[00193] LC-MS (Método E): tR = 1,79 min, m/z = 320,19 (M+H+).

[00194] RMN de 1H (400 MHz, CDC13) δ 8,98 (s, 1H), 7,54 (s, 1H),

5,40-5,45 (m, 1H), 2,39 (d, J = 6,5, 2H), 2,27-2,219 (m, 2H), 2,13-2,04 (m, 4H), 1,96-1,90 (m, 1H), 1,45-1,39 (m, 2H).

ETAPA 3

TRANS-2-[4-[6-CLORO-2-(l,2,2,2-TETRADEUTERIO-lHIDROXI-ETIL)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA [00195]

Uma suspensão de trans-2-[4-[6-cloro-2-(2,2,2trideuterioacetil)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila (1,5 g, 4,69

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59/79 mmol) em CD3OD (15 ml) foi adicionada a NaBD4 (0,29 g, 7,04 mmol) a OoC a 5oC. A mistura foi agitada à RT por 1 hora. Na conclusão, a reação foi arrefecida bruscamente com D2O e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O composto bruto foi dissolvido em H2O e extraído com MeOH a 10% em DCM (2 x 15 ml). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida e purificada por cromatografia em coluna de gel de silica (100 a 200 mesh) (MeOH a 1 a 3% em DCM como eluente) para proporcionar o composto título (1,2 g, 80%) como um sólido esbranquiçado. O composto obtido foi uma mistura de isotopômeros. Com base em RMN de 1H, a distribuição de isotopômeros foi; (CDOHCH3) monodeuterado: 0,66%, (CDOHCH2D) dideuterado: 3,47%, (CDOHCHD2) trideuterado: 21,85% e (CDOHCD3) tetradeuterado: 74,02%.

[00196] LC-MS (Método E): tR = 1,48 min, m/z = 323,23 (M+H+).

[00197] RMN de 1H (400 MHz, CDC13) δ 8,69 (s, 1H), 8,01 (s, 1H),

5,77 (s, 1H), 4,68-4,63 (m, 1H), 2,54 (d, J = 6, 2H), 2,27-2,21 (m, 2H), 2,102,08 (m, 1H), 1,93-1,86 (m, 4H), 1,32-1,26 (m, 2H).

ETAPA 4

TRANS-2-[4-[2-[l,2,2,2-TETRADEUTERIO-lHIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lIL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA

Cí N UiUXdHU '·[,;· -qj·'

H [00198] Num tubo vedado, a uma solução de trans-2-[4-[6-cloro-2(l,2,2,2-tetradeuterio-l-hidroxi-etil)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclohexil]acetonitrila (0,10 g, 0,309 mmol) em 1,4-dioxano desgaseificado (5,0

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60/79 ml) foi adicionado Cs2CO3 (0,302 g, 0,927 mmol), Brettphos Pd G1 (0,037 g, 0,046 mmol) e foram purgados com argônio por 10 minutos, antes de CH3NH2 a 2 M em THF (0,60 ml, 1. 24 mmol) ser adicionado. A mistura de reação foi agitada a 80oC por 16 horas. Na conclusão, a mistura de reação foi resfriada até à RT e filtrada através de uma almofada de celite e lavada com EtOAc. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi recolhido em água e extraído duas vezes com DCM (2 x 10 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas com Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de gel de silica (100 a 200 mesh) (3% de MeOH em DCM como eluente) para proporcionar o composto título (0,04 g, 41%) como um sólido marrom claro.

[00199] LC-MS (Método E): tR = 1,14 min, m/z = 318 (M+H+). [00200] Distribuição isotópica estimada de deutério em % molar: D0, Dl, D2, D3, D4 = 0, 0, 3, 21, 76.

[00201] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ (ppm) 8,32 (s, 1H),

6,47 (s, 1H), 5,93-5,89 (m, 1H), 5,58 (s, 1H), 4,57-4,51 (m, 1H), 2,78 (d, J = 5,2 Hz, 3H), 2,55 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,24-2,17 (m, 2H), 1,94-1,86 (m, 5H), 1,31-1,23 (m, 2H).

EXEMPLO 6

CIS-2-[4-[2-[l-HIDROXIETIL]-6(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 6)

[00202] cis-2- [4- [2- [ 1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5

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c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila foi obtida após um procedimento em pequena escala semelhante àquele delineado na “Preparação Alternativa n° 2” do Exemplo 3, sendo que as únicas grandes diferenças são que, na Etapa 1, cloridrato de trans-4-(cianometil)ciclo-hexil]amônio foi substituído por cloridrato de cis-4-(cianometil)ciclo-hexil]amônio (CAS Número de Registro 1461718-40-0) e que (R)-lactamida foi substituída por lactamida na Etapa 3. [00203] UPLC-MS (Método C): tR = 1,62 min, m/z = 314,4 (M+H+). [00204] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,34 (s, 1H), 6,51 (s, 1H), 5,97 - 5,88 (m, 1H), 5,56 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 4,95 (p, J = 6,5 Hz, 1H), 4,60 - 4,46 (m, 1H), 2,85 - 2,77 (m, 5H), 2,27 - 2,08 (m, 3H), 1,89 - 1,62 (m, 6H), 1,54 (d, .1 = 6.5 Hz, 3H).

EXEMPLO 7

CIS-2-[4-[2-[(lR)-l-HIDROXIETIL]-6(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-1-IL]CICLOHEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 7)

N ll J

H [00205] cis-2-[4-[2-[(lR)-l-hidroxietil]-6-(metilamino)imidazo[4,5c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila foi obtida após um procedimento em pequena escala semelhante àquele delineado na “Preparação alternativa n° 2” do Exemplo 3, sendo que a única grande diferença é que cloridrato de trans-4(cianometil)ciclo-hexil]amônio foi substituído por cloridrato de cis-4(cianometil)ciclo-hexil]amônio (CAS Número de Registro 1461718-40-0) na primeira etapa da sequência de reação.

[00206] UPLC-MS (Método C): tR = 1,62 min, m/z = 314,4 (M+H+).

[00207] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,35 (s, 1H), 6,53 (s,

Petição 870190067745, de 17/07/2019, pág. 67/90

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1H), 5,98 (br s, 1H), 5,58 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 4,95 (p, J = 6,5 Hz, 1H), 4,60 4,46 (m, 1H), 2,86 - 2,76 (m, 5H), 2,27 - 2,07 (m, 3H), 1,89 - 1,62 (m, 6H), 1,54 (d, .1 = 6.5 Hz, 3H).

EXEMPLO 8

SAL DE ÁCIDO MALÔNICO DE TRANS-2-[4-[2-[(lR)-lHIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lIL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 8)

[00208] trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila (1,40 g, 4,46 mmol) foi dissolvido em isopropanol (50 ml) a 45°C. Adicionou-se ácido malônico (232 mg, 2,23 mmol) em isopropanol (5,0 ml). O volume da mistura de reação foi reduzido por evaporação sob pressão reduzida a 45°C (~30 ml de isopropanol foram removidos por destilação). A adição de alguns cristais de referência do composto título iniciou a cristalização. O volume da mistura de reação foi adicionalmente reduzido por evaporação sob pressão reduzida (-15 ml de isopropanol foram removidos por destilação). A suspensão obtida foi resfriada num banho de gelo e, depois de algum tempo, o sólido foi removido por filtração e lavado com isopropanol gelado (3x2 ml). A secagem sob pressão reduzida produziu o composto título (932 mg, -100%) como cristais esbranquiçados.

[00209] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,37 (s, 1H), 6,54 (s, 1H), 6,10 (br s, 1H), 5,66 (br s, 1H), 4,98 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 4,62 - 4,51 (m, 1H), 3,17 (s, 2H), 2,81 (s, 3H), 2,55 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 2,25 - 2,14 (m, 2H), 1,97-1,81 (m, 5H), 1,55 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,36 - 1,24 (m, 2H).

Petição 870190067745, de 17/07/2019, pág. 68/90

63/79 [00210] Μ. ρ. (temperatura de início de DSC) 109 ± 2°C.

EXEMPLO 9

SAL DE ÁCIDO GLICÓLICO DE TRANS-2-[4-[2-[(lR)-lHIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lIL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 9)

H [00211] trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila (1,80 g, 5,74 mmol) foi dissolvido em isopropanol (65 ml) a 45°C. Adicionou-se ácido glicólico (437 mg, 5,74 mmol) em isopropanol (8,0 ml). O volume da mistura de reação foi reduzido por evaporação sob pressão reduzida a 45°C (~65 ml de isopropanol foram removidos por destilação). A adição de alguns cristais de referência do composto título iniciou lentamente a cristalização. EtOAc (15 ml) foi adicionado. A suspensão obtida foi resfriada num banho de gelo e, depois de algum tempo, o sólido foi removido por filtração e lavado com uma mistura 9: 1 gelada de EtOAc: isopropanol (2x2 ml). A secagem sob pressão reduzida gerou o composto título (1,57 g, 70%) como cristais esbranquiçados.

[00212] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,33 (s, 1H), 6,47 (s, 1H), 5,90 (br s, 1H), 5,58 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 4,96 (p, J = 5,3 Hz, 1H), 4,59 4,51 (m, 1H), 3,90 (s, 2H), 2,79 (s, 3H), 2,55 (d, J = 6,2 Hz, 2H), 2,25 - 2,14 (m, 2H), 1,97 - 1,80 (m, 5H), 1,54 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,36 - 1,25 (m, 2H). [00213] M. p. (temperatura de início de DSC) 100 ± 2°C.

EXEMPLO 10

SAL DE ÁCIDO L-TARTÁRICO DE TRANS-2-[4-[2-[(1R)l-HIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lPetição 870190067745, de 17/07/2019, pág. 69/90

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IL] CICLO-HEXIL] ACETONITRILA (COMPOSTO 10)

[00214] trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila (1,50 g, 4,79 mmol) foi dissolvido em metanol (25 ml) a 45°C. Adicionou-se ácido L-tartárico (360 mg, 2,40 mmol) em metanol (10 ml). O volume da mistura de reação foi reduzido por evaporação sob pressão reduzida a 45°C (~10 ml de metanol foram removidos por destilação). A adição de alguns cristais de referência do composto título iniciou a cristalização. Adicionou-se isopropanol (30 ml) e o volume da mistura de reação foi reduzido por evaporação sob pressão reduzida a 45°C (~20 ml foram removidos por destilação). A suspensão obtida foi resfriada num banho de gelo e, depois de algum tempo, o sólido foi removido por filtração e lavado com isopropanol gelado (4x4 ml). A secagem sob pressão reduzida gerou o composto título (1,55 g, 83%) como cristais esbranquiçados. [00215] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,34 (s, 1H), 6,49 (s, 1H), 5,98 (br s, 1H), 5,60 (br s, 1H), 4,96 (q, J = 6,4 Hz, 1H), 4,60 - 4,49 (m, 1H), 4,28 (s, 1H), 2,80 (s, 3H), 2,55 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 2,26 - 2,13 (m, 2H),

1,97 - 1,80 (m, 5H), 1,54 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,36 - 1,25 (m, 2H).

[00216] M. p. (temperatura de início de DSC) 98 ± 2°C.

EXEMPLO 11

SAL DE ÁCIDO L-MÁLICO DE TRANS-2-[4-[2-[(lR)-lHIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lIL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 11)

Petição 870190067745, de 17/07/2019, pág. 70/90

65/79

Η [00217] trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila (1,50 g, 4,79 mmol) foi dissolvido em metanol (25 ml) a 45°C. Adicionou-se ácido L-málico (332 mg, 2,40 mmol) em metanol (10 ml). O volume da mistura de reação foi reduzido por evaporação sob pressão reduzida a 45°C (~20 ml de metanol foram removidos por destilação). A adição de alguns cristais de referência do composto título iniciou a cristalização. Adicionou-se isopropanol (30 ml) e o volume da mistura de reação foi reduzido por evaporação sob pressão reduzida a 45°C (~10 ml foram removidos por destilação). A suspensão obtida foi resfriada num banho de gelo e, depois de algum tempo, o sólido foi removido por filtração e lavado com isopropanol gelado (4x4 ml). A secagem sob pressão reduzida gerou o composto título (1,51 g, 79%) como cristais esbranquiçados. [00218] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,34 (s, 1H), 6,49 (s, 1H), 5,95 (br s, 1H), 5,59 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 4,96 (p, J = 6,5 Hz, 1H), 4,59 4,51 (m, 1H), 4,23 (dd, J = 7,5, 5,3 Hz, 0,5H), 2,79 (s, 3H), 2,60 (dd, J = 15,6,

5,3 Hz, 0,5H), 2,55 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,43 (dd, J = 15,6, 7,5 Hz, 0,5H), 2,25 - 2,14 (m, 2H), 1,96-1,81 (m, 5H), 1,54 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,36 - 1,25 (m, 2H).

[00219] M. p. (temperatura de início de DSC) 94 ± 2°C.

EXEMPLO 12

SAL DE ÁCIDO SULFÚRICO DE TRANS-2-[4-[2-[(lR)-lHIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lIL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 12)

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Estequiometria de sconhedda [00220] trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila (1,50 g, 4,79 mmol) foi dissolvido em metanol (10 ml) a 45°C. Adicionou-se ácido sulfúrico (1,0 Μ, 4,79 ml, 4,79 mmol) em isopropanol (5,0 ml). O volume da mistura de reação foi reduzido por evaporação sob pressão reduzida a 45°C (~7 ml foram removidos por destilação). A adição de alguns cristais de referência do composto título iniciou a cristalização. A suspensão obtida foi resfriada num banho de gelo e, depois de algum tempo, o sólido foi removido por filtração e lavado com isopropanol gelado (2x2 ml). A secagem sob pressão reduzida gerou o composto título (1,57 g) como cristais esbranquiçados.

[00221] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6) δ 13,32 (br s, 1H), 8,61 (s, 1H), 7,49 (br s, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,91 (br s, 1H), 5,07 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 4,67 - 4,58 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 2,56 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 2,26 - 2,14 (m, 2H), 1,99 - 1,87 (m, 5H), 1,57 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,38 - 1,27 (m, 2H).

[00222] M. p. (temperatura de início de DSC) 169 ± 2°C.

EXEMPLO 13

SAL DE ÁCIDO CLORÍDRICO DETRANS-2-[4-[2-[(lR)-lHIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lIL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 13)

Estequi-ometria desconhecida:

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67/79 [00223] trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila (2,00 g, 6,38 mmol) foi dissolvido em isopropanol (70 ml) a 45°C. Adicionou-se ácido clorídrico metanólico (3,0 Μ, 6,38 ml, 19,1 mmol) à rt. O volume da mistura de reação foi reduzido por evaporação sob pressão reduzida a 45°C (~45 ml foram removidos por destilação). A adição de alguns cristais de referência do composto título iniciou a cristalização. O volume da mistura de reação foi adicionalmente reduzido por evaporação sob pressão reduzida (~5 ml foram removidos por destilação). A suspensão obtida foi resfriada num banho de gelo e, depois de algum tempo, o sólido foi removido por filtração e lavado com isopropanol gelado (4x4 ml). A secagem sob pressão reduzida gerou o composto título (1,30 g) como cristais esbranquiçados.

[00224] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6) δ 14,06 (br s, 1H), 8,60 (s, 1H), 7,84 (br s, 1H), 7,02 (s, 1H), 6,16 (br s, 1H), 5,07 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 4,69 - 4,60 (m, 1H), 2,98 (s, 3H), 2,56 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 2,27 - 2,16 (m, 2H), 2,01 - 1,86 (m, 5H), 1,57 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,39 - 1,28 (m, 2H).

[00225] M. p. (temperatura de início de DSC) 148 ± 2°C.

EXEMPLO 14

SAL DE ÁCIDO SUCCÍNICO DE TRANS-2-[4-[2-[(lR)-lHIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lIL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 14)

H [00226] trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila (31,3 mg, 0,100 mmol) foi dissolvida em etanol (0,20 ml) a ~50 C. Adicionou-se ácido succínico (11,8 mg, 0,100

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68/79 mmol) em etanol (0,25 ml). O volume da mistura de reação foi reduzido por evaporação sob pressão reduzida a 45°C (-0,14 ml de etanol foram removidos por destilação). Após a cristalização ter ocorrido, adicionou-se etanol (0,10 ml). A suspensão obtida foi resfriada num banho de gelo e, após algum tempo, a filtração proporcionou o composto título (16 mg, 33%) sob a forma de cristais esbranquiçados.

[00227] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6) δ 12,16 (br s, 3H), 8,33 (s, 1H), 6,48 (s, 1H), 5,91 (br s, 1H), 5,59 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 4,96 (p, J = 6,5 Hz, 1H), 4,59 - 4,50 (m, 1H), 2,79 (s, 3H), 2,55 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 2,42 (s, 6H), 2,25 - 2,14 (m, 2H), 1,97 - 1,80 (m, 5H), 1,54 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,35 - 1,24 (m, 2H).

[00228] M. p. (temperatura de início de DSC) 162 ± 2°C.

EXEMPLO 15

SAL DE ÁCIDO OXÁLICO DE TRANS-2-[4-[2-[(lR)-lHIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lIL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 15)

Est&quiometria desconhecida [00229] trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila (31,3 mg, 0,100 mmol) foi dissolvida em etanol (0,20 ml) a ~50°C. Adicionou-se ácido oxálico (4,5 mg, 0,050 mmol) em etanol (0,25 ml). A mistura de reação foi resfriada num banho de gelo e, após algum tempo, a filtração proporcionou o composto título (27 mg) como cristais esbranquiçados.

[00230] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,39 (s, 1H), 6,57 (s, 1H), 4,98 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 4,60 - 4,52 (m, 1H), 2,83 (s, 3H), 2,55 (d, J =

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6,3 Hz, 2H), 2,25 - 2,14 (m, 2H), 1,97 - 1,82 (m, 5H), 1,55 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,36- 1,25 (m, 2H).

[00231] M. p. (temperatura de início de DSC) 134 ± 2°C.

EXEMPLO 16

SAL DE ÁCIDO FUMÁRICO DE TRANS-2-[4-[2-[(lR)-lHIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lIL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 16)

H [00232] trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila (3,00 g, 9,57 mmol) foi dissolvida em etanol (6,0 ml). Ácido fumárico (1,11 g, 9,57 mmol) dissolvido a ~50°C em etanol (12 ml) foi lentamente adicionado. Uma cristalização ocorreu. A suspensão obtida atingiu a rt e, depois de um tempo, o sólido foi removido por filtração e lavado com etanol (2 x 0,5 ml). A secagem sob pressão reduzida gerou o composto título (3,26 g, 79%) como cristais esbranquiçados.

[00233] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,34 (s, 1H), 6,63 (s, 2H), 6,49 (s, 1H), 4,97 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 4,60 - 4,51 (m, 1H), 2,80 (s, 3H),

2,55 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 2,26 - 2,14 (m, 2H), 1,97 - 1,80 (m, 5H), 1,54 (d, J =

6,5 Hz, 3H), 1,35 - 1,24 (m, 2H).

[00234] M. p. (temperatura de início de DSC) 111 ± 2°C.

EXEMPLO 17

SAL DE ÁCIDO 1,5-NAFTALENODISSULFÔNICO DE TRANS-2-[4-[2-[(lR)-l-HIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5C]PIRIDIN-1-IL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 17)

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OH [00235] trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila acetonitrila (11,8 mg, 0,037 mmol) foi dissolvida em acetato de etila (1 ml) a ~50°C. Adicionou-se ácido 1,5naftalenossulfônico (tetra-hidrato) (15,0 mg, 0,042 mmol) em H2O (150 μΐ). A solução foi agitada muito lentamente numa unidade de agitação magnética durante aproximadamente 3 dias, após o que cristais esbranquiçados foram isolados por filtração.

[00236] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,88 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 8,60 (s, 1H), 7,95 (dd, J = 7,1, 1,2 Hz, 2H), 7,54 (br s, 1H), 7,42 (dd, J = 8,5, 7,1 Hz, 2H), 6,97 (s, 1H), 5,06 (q, J = 6,5 Hz, 1H), 4,63 - 4,56 (m, 3H), 2,95 (s, 3H), 2,51 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 2,28 - 2,06 (m, 2H), 1,95 - 1,72 (m, 5H),

1,56 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,38 - 1,18 (m, 2H).

[00237] M. p. (temperatura de início de DSC) 110 ± 2°C.

EXEMPLO 18

SAL DE ÁCIDO DL-MADÉLICO DE TRANS-2-[4-[2-[( 1R)l-HIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lIL]CICLO-HEXIL]ACETONITRILA (COMPOSTO 18)

[0023 8] trans-2- [4- [2- [(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5

c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila acetonitrila (9,92 mg, 0,032 mmol) e

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71/79 ácido DL-mandélico (5,3 mg, 0,035 mmol) foram dissolvidos em acetato de etila (1 ml) a ~50°C. A solução foi agitada muito lentamente numa unidade de agitação magnética por aproximadamente 3 dias, após o que cristais esbranquiçados foram isolados por filtração.

[00239] RMN de 1H (600 MHz, DMSO-d6) δ 8,33 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,45 - 7,37 (m, 2H), 7,37 - 7,31 (m, 2H), 7,31 - 7,25 (m, 1H), 6,48 (d, J = 1. 0 Hz, 1H), 5,92 (br s, 1H), 5,59 (br s, 1H), 5,00 (s, 1H), 4,96 (q, J = 6,8 Hz, 1H), 4,63 - 4,47 (m, 1H), 2,79 (s, 3H), 2,55 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,27 - 2,11 (m, 2H), 1,97 - 1,75 (m, 5H), 1,54 (d, J = 6,5 Hz, 3H), 1,38 - 1,21 (m, 2H).

[00240] M. p. (temperatura de início de DSC) 153 ± 2°C.

EXEMPLO 19

SOLVATO DE DIOXANO DE TRANS-2-[4-[2-[(lR)-lHIDROXIETIL]-6-(METILAMINO)IMIDAZO[4,5-C]PIRIDIN-lIL] CICLO-HEXIL] ACETONITRILA (COMPOSTO 19) [00241] Uma suspensão de aproximadamente 15 mg de trans-2-[4-[2[(1R)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo [4,5-c]piridin-1 -il] ciclohexil] acetonitrila em 0,4 ml de uma mistura de 1,4-dioxano: heptano (1: 1) foi produzida num frasco de 2,5 ml fechado com tampa equipado com uma pequena barra magnética. O frasco foi colocado numa unidade de agitação magnética e agitado a aproximadamente 600 rpm por duas semanas à rt. O material sólido foi isolado por filtração e seco antes da determinação do ponto de fusão.

[00242] M. p. (temperatura de início de DSC) 77 ± 2°C.

ENSAIOS DE QUINASE JAK [00243] A Janus quinase (JAK) 1, 2, 3 e a tirosina quinase (TYK) 2 expressas em baculovírus humanos foram adquiridas junto à Cama Biosciences, Inc (# 08-144, -045, -046, -147 resp. ). Todas as quatro enzimas purificadas contêm apenas o domínio catalítico. JAK1 (aa 850-1154) e TYK2 (aa 871-1187) são expressas com uma etiqueta GST fundida no terminal N e

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JAK2 e JAK3 com uma etiqueta His fundida no terminal-N. A inibição da fosforilação de um peptídeo sintético foi medida num ensaio baseado em HTRF (CisBio # 62TK0PEC). Primeiro, foram adicionados 75 nl da solução do composto de teste (DMSO a 100%) a uma placa branca de 384 poços rasos (NUNC # 264706) utilizando um manipulador de líquidos Labcyte ECHO 550. Em seguida, adicionou-se 1 pl de tampão de diluição de composto (HEPES 50 mM, albumina de soro bovino a 0,05%) e 2 pL de solução TK (substrato TK-biotina TK em tampão de quinase [Ix tampão enzimático de kit HTRFKinEASE TK, DTT 1 mM). Em seguida, adicionaram-se 5 pl de mistura quinase-ATP (preparada em tampão de quinase) aos poços e as placas foram incubadas à RT durante 20 (JAK2, 3 e TYK2) a 40 (JAK1) minutos. Para todas as quatro quinases foi utilizada uma concentração de ATP que correspondeu ao Km para o ATP. As concentrações finais de tampões, substrato, quinase e ATP foram: JAK1: Tampão Hepes a 50 mM pH 7,0, BSA a 0,01%, MgC12 a 10 mM, DTT a 1 mM, ATP a 7 μΜ, SEB a 50 nM, Substrato-Biotina TK a 1 μΜ e 5 ng/poço de JAK1; JAK2: Tampão Hepes a 50 mM pH 7,0, BSA a 0,01%, MgC12 a 5mM, DTT a 1 mM, ATP a 4 μΜ, Substrato-Biotina TK a 1 μΜ e 0,1 ng/poço JAK2; JAK3: Tampão Hepes a 50 mM pH 7. 0, BSA a 0. 01%, MgC12 a 5 mM, DTT a 1 mM, ATP a 2 μΜ, TK a 1 μΜ Substrato-Biotina e 0,3 ng/poço JAK3; TYK2: Tampão Hepes a 50 mM, pH 7,0, BSA a 0,01%, MgC12 a 5 mM, DTT a 1 mM, ATP a 13 uM, SEB a 50 nM, Substrato-Biotina TK a 1 uM e TYK2 0,8 ng/poço. Posteriormente, a reação de quinase foi interrompida pela adição de 4 μΐ de mistura de detecção (concentrações finais: Tampão Hepes a 50 mM, pH 7,0, BSA a 0,01%, KF a 0,8 M, EDTA a 20 mM, estreptavidina-XL665 a 42 nM e criptato de STK a 1: 400 e as placas foram incubadas de um dia para o outro no escuro. Um leitor PerkinElmer Envision foi usado para quantificar o sinal HTRF usando os seguintes filtros; filtro de excitação de 320 nm, filtro de emissão de 665 nm e um 2° filtro de emissão de 615 nm. Uma razão

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73/79 ((665/615)xl04) foi calculada para cada poço.

ENSAIO STAT6 [00244] Vinte e cinco μί de uma suspensão de células STAT6 bla-RAl (Invitrogen # K1243) foram semeados com uma densidade de 30 a 40000 células/poço em placas Black View de 384 poços (PerkinElmer # 6007460) com fundo transparente em meio de ensaio (Opti -MEM (Invitrogen # 11058021) + 0,5% de soro bovino fetal inativado pelo calor (Invitrogen # 10082147) + 1% de aminoácidos não essenciais (Invitrogen # 11140-050) + 1% de piruvato de sódio (Invitrogen # 11360-070 ) + Penicilina a + 1%/estreptomicina (Invitrogen # 15140-122)); contendo 550 ng/ml de ligante de CD40 (Invitrogen # PHP0025). As placas celulares foram incubadas de um dia para o outro numa incubadora umidificada a 37°C ar/CO2 (95%/5%). No dia seguinte, 125 nl de soluções de compostos de teste e compostos de referência foram transferidos para placas de células utilizando o manipulador de líquidos Labcyte Echo 550. As placas foram então incubadas durante 1 h numa incubadora umidificada a 37°C ar/CO2 (95%/5%). A seguir, q interleucina 4 recombinante humana (Invitrogen # PHC0045) foi adicionada às placas também usando o Labcyte Echo 550 para uma concentração final de 10 ng/ml. As células foram então incubadas durante 4½ a 5 h numa incubadora umidificada a 37°C ar/CO2 (95%/5%). 8 μί de mistura de substrato LiveBLAzer a μΐ (Invitrogen # K1095) foram então adicionados a placas de ensaio, que foram incubadas de um dia para o outro à RT. A fluorescência foi então medida: Excitação: 405 nm; Emissão: 460 nm (canal verde), Emissão: 535 nm (canal azul). O fundo foi subtraído em ambos os canais de emissão e a razão 460/535 nm foi calculada para cada poço.

ENSAIO STAT5 [00245] Vinte e cinco μί de uma suspensão de células STAT5 irfl-bla TF1 (Invitrogen # Kl219) foram semeadas com uma densidade de cerca de 10000 células/poço em placas Black View de 384 poços (PerkinElmer #

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6007460) com fundo transparente em meio de ensaio (Opti -MEM (Invitrogen # 11058-021) + 0,5% de soro bovino fetal inativado pelo calor (Invitrogen # 10082-147) + 1% de aminoácidos não essenciais (Invitrogen # 11140-050) + 1% de piruvato de sódio (Invitrogen # 11360-070 ) + Penicilina a + 1%/estreptomicina (Invitrogen # 15140-122)). As placas celulares foram incubadas de uma dia para o outro numa incubadora umidificada a 37°C ar/CO2 (95%/5%). No dia seguinte, 125 nl de soluções de compostos de teste e compostos de referência foram transferidos para placas de células utilizando o manipulador de líquidos Labcyte Echo 550. As placas foram então incubadas durante 1 h numa incubadora umidificada a 37°C ar/CO2 (95%/5%). A seguir, adicionou-se eritropoietina humana recombinante (EPO) (Invitrogen # PHC9634) às placas utilizando também o Labcyte Echo 550 para uma concentração final de 10 ng/ml. As células foram então incubadas durante 4½ a 5 h numa incubadora umidificada a 37°C ar/CO2 (95%/5%). A mistura de substrato LiveBLAzer a 8 pl (Invitrogen # K1095) foi então adicionada a placas de ensaio, que foram incubadas de um dia para o outro à RT. A fluorescência foi então medida: Excitação: 405 nm; Emissão: 460 nm (canal verde), Emissão: 535 nm (canal azul). O fundo foi subtraído em ambos os canais de emissão e a razão 460/535 nm foi calculada para cada poço.

[00246] Os compostos da invenção foram testados nos ensaios de quinase JAK1, JAK2, JAK3 e TYK2, bem como nos ensaios STAT6 e STAT5. Os resultados são divulgados na Tabela 1.

TABELA 1

Composto	JAK1 EC50 (nM)	JAK2 EC50 (nM)	JAK3 EC50 (nM)	TYK2 EC50 (nM)	STAT6 EC50 (nM)	STAT5 EC50 (nM)	Ração JAK2/JA Kl	Razão JAK3/JA Kl	Razão STAT 6/STA T5
Exemplo 1	10,8	530	5260	111	237	14600	49	487	62
Exemplo 2	44,4	1130	9820	466	1160	>42600	25	221	>37
Exemplo 3	3,48	171	1700	32,0	94,5	6420	51	489	68
Exemplo 4	3,46	153	2310	43,0	141	7080	44	668	50
Exemplo 5	8,41	301	3200	102	270	9240	36	380	34
Exemplo 6	508	2640	2870	1110	8570	>49800	5,2	5,6	>5,8
Exemplo 7	129	981	1010	443	3460	>49800	7,6	7,8	>14

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Exemplo 644* do documento n° WO2011086053	0,34	3,34	13,1	3,32	10,5	123	9,8	39	12
Exemplo 641* do documento n° WO2011086053	6,81	228	739	115	178	5740	33	109	32

*Exemplo 641 e Exempio 644 do documento n° WO2011086053 foram preparados de acordo com o documento n° WO2011086053 [00247] A seletividade para JAK1 sobre JAK2 ou JAK3 é calculada como a razão JAK2: JAK1 ou JAK3: JAK1 do respectivo EC50. Cálculo semelhante é feito para a seletividade para STAT6 sobre STAT5. Como pode ser visto a partir da Tabela 1, os compostos da presente invenção mostram uma elevada seletividade para a inibição de JAK1 sobre JAK2 e JAK3; e uma alta seletividade para a inibição de STAT6 (refletindo a inibição de JAK1) sobre STAT5 (refletindo a inibição de JAK2).

SELETIVIDADE DE QUINASE [00248] Os perfis de seletividade da quinase do Exemplo 3 da presente invenção, bem como dos Exemplos 644 e 641 do documento n° WO2011086053 foram avaliados no CARNA Biosciences Inc. , com um painel composto por 23 tirosina quinases, incluindo JAK1 (ABL CSK, EGFR, EPHA2, EPHB1, EPHB4, FGFR1, FLT3, IGF1R, ITK, JAK1, JAK3, KDR, LCK, MET, PDGFRa, PDGFRp, PYK2, SRC, TIE2, TRKA e TYRO3) bem como 68 serina e treonina quinases (LCK, MET, AKT1, ΑΜΡΚα1/β1/γ1, AurA, AurB, AurC, BRSK2 ([ATP] = valor de Km), CaMKla ([ATP] = valor de Km), CaMK2a ([ATP] = valor de Km), CaMK4 CDC2/CycBl, CDC7/ASK, CDK2/CycA2, CDK2/CyEl, CDK3/CyEl ([ATP] = valor Km) CyD3 de CDK4/CDK6/CyD3, CDK7/CycH/MATl, CDK9/CycTl, CHK1, CKle, CK2al/p, CK2a2/p, CLK1, CLK2, DAPK1, DYRK1B, Erk2, GSK3a, GSK33, HGK, ΙΚΚβ, IRAK4 ([ATP] = valor de Km), JNK2, LOK ([ ATP] = valor de Km), MAPKAP2, MLK1, MLK2, MNK2 ([ATP] = valor de Km), MST1, MST2 ([ATP] = valor de Km), NEK1, NEK2, NEK6, NEK7, NEK9, p38a, p70S6K, ΡΑΚΙ ([ATP] = valor de Km), PAK2, PAK5 ([ATP] = valor de Km), PBK PDK1, PIM1, PIM2, PKACa, PKCa, OKD2, PKN1 ([ATP] =

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76/79 valor de Km), PLK1, PLK2 ([ ATP] = valor de Km), ROCK1, RSK1, SGK, skMLCK ([ATP] = valor Km) e TSSK1). A avaliação foi geralmente conduzida a uma concentração de ATP de 1 mM, no entanto, para certas quinases, foram utilizadas concentrações de ATP próximas dos valores Km correspondentes (isto é indicado entre parêntesis em cada uma das quinases relevantes). A porcentagem de inibição foi medida a uma concentração de inibidor de aproximadamente 1000 vezes JAK1 EC50 . Os resultados estão resumidos na Tabela 2:

TABELA 2

	Exemplo 3 (4 μΜ) N^— ^H0< N^bt H	Exemplo 644 do documento n° WO2011086053 (0,4 μΜ) Νξ— O J H	Exemplo 641 do documento n° WO2011086053 (9 μΜ) NC 7 N H ^N>
Tirosina quinases inibidas em 50% ou mais a uma concentração de ATP de 1 mM (n>2)	JAK1	JAK1 FGFR1 FLT3 KDR PDGFRa PDGFR3	JAKl FGFR1 FLT3 KDR PDGFRa
Serina e treonina quinases inibidas em 50% ou mais (n>2)		BRSK2, [ATP] = 50 μΜ LOK, [ATP] = 100 ΠμΜ MST2, [ATP] = 75 ΠμΜ PKN1, [ATP] =25 ΠμΜ	BRSK2, [ATP] = 50 μΜ LOK, [ATP] = 100 ΠμΜ MST1, [ATP] = 1 mM MST2, [ATP] = 75 ΠμΜ PKN1, [ATP] =25 ΠμΜ

[00249] Como mostrado na Tabela 2, o Exemplo 3 da presente invenção exibiu um nível muito elevado de seletividade para um grande painel de quinases; isto é, nenhuma das quinases testadas, exceto JAK1, foi inibida em mais de 50%.

[00250] Os Exemplos 644 e 641 do documento n° WO2011086053 inibiram nove outras quinases além de JAK1 em 50% ou mais.

[00251] A inibição de quinases fora do alvo aumenta o risco de efeitos adversos, isto é, uma alta seletividade da quinase pode reduzir o risco de efeitos adversos.

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INIBIÇÃO DO CYP E INDUÇÃO DO CYP [00252] A inibição reversível do CYP, a inibição CYP dependente do tempo (TDI) e a indução do CYP foram testadas no Cyprotex PLC, de acordo com a orientação de autoridade.

[00253] Para a inibição reversível do CYP, o IC50 foi medido até uma concentração de substrato de 50 μΜ para ο Exemplo 3 e até 25 μΜ para os Exemplos 644 e 641 do documento n° WO2011086053.

[00254] Os resultados da inibição reversível de CYP estão resumidos na Tabela 3.

TABELA 3

	1A2 IC50 (μΜ)	2B6 IC50 (μΜ)	2C8 IC50 (μΜ)	2C9IC50 (μΜ)	2C19 IC50 (μΜ)	2D6 IC50 (μΜ)	3Α4IC50 (μΜ)
Exemplo 3	>50	>50	>50	>50	>50	>50	>50
Exemplo 644 do documento n° WO2011086053	>25	ND	ND	>25	>25	>25	10,8
Exemplo 641 do documento n° WO2011086053	>25	ND	ND	>25	>25	>25	10,9

ND = Não Determinado.

[00255] Como pode ser visto na Tabela 3, o Exemplo 3 não apresenta inibição de CYP quando medida em concentrações de substrato até 50 μΜ.

[00256] Os Exemplos 644 e 641 do documento n° WO2011086053 indicam uma inibição fraca da CYP3A4.

[00257] Nenhuma inibição CYP dependente do tempo foi indicada para o Exemplo 3.

[00258] A inibição do CYP3A4 pode indicar interações medicamentosas indesejáveis. A inibição do CYP pode afetar os níveis plasmáticos e aumentar a exposição de medicamentos coadministrados e potencialmente levar a reações adversas a medicamentos ou toxicidade.

[00259] A indução da expressão gênica de CYP1A2, CYP2B6 e CYP3A4 pode servir como pontos de extremidade representativos sensíveis para ativação do receptor de hidrocarboneto de arila (AhR), receptor X do pregnano (PXR) e receptor constitutivo de androstano (CAR),

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78/79 respectivamente. A indução destes receptores nucleares foi avaliada medindose o aumento da codificação de ARNm para AhR, CAR e PXR, respectivamente, em concentrações relevantes.

[00260] Um deslocamento >2 vezes indica a indução de CYP.

[00261] Os resultados das três maiores concentrações de incubação estão resumidos na Tabela 4.

TABELA 4: DIMENSÃO DE DESLOCAMENTO MÉDIA COMPARADA

AO VEÍCULO NA INDUÇÃO DE CYP

	Dimensão de deslocamento em expressão de mRNA(CYP 1A2)	Dimensão de deslocamento em expressão de mRNA(CYP 2B6)	Dimensão de deslocamento em expressão de mRNA(CYP 3A4)
Exemplo 3	0,8 (a 0,1 μΜ) 0,7 (a 1,0 μΜ) 0,8 (a 10 μΜ)	1,1 (a 0,1 μΜ) 1,5 (a 1,0 μΜ) 1,7 (a 10 μΜ)	1,2 (a 5,0 μΜ) 1,5 (a 20 μΜ) 2,0 (a 50 μΜ)
Exemplo 644 do	0,8 (a 0,1 μΜ)	1,3 (a 0,1 μΜ)	1,3 (a 0,1 μΜ)
documento n°	0,8 (a 1,0 μΜ)	2,0 (a 1,0 μΜ)	1,4 (a 1,0 μΜ)
WO2011086053	1,6 (a 10 μΜ)	7,3 (a 10 μΜ)	5,4 (a 10 μΜ)
Exemplo 641 do	0,9 (a 0,1 μΜ)	1,0 (a 0,1 μΜ)	1,8 (a 5,0 μΜ)
documento n°	0,8 (a 1,0 μΜ)	1,3 (a 1,0 μΜ)	2,5 (a 20 μΜ)
WO2011086053	0,9 (a 10 μΜ)	1,4 (a 10 μΜ)	4,0 (a 50 μΜ)

[00262] Como pode ser visto na Tabela 4, o Exemplo 3 não causa indução de CYP3A4 até pelo menos uma concentração de 50 μΜ ou indução de CYP1A2 e CYP2B6 até pelo menos uma concentração de 10 μΜ [00263] O Exemplo 644 do documento n° WO2011086053 causa a indução do CYP3A4 a uma concentração de 10 μΜ e indução do CYP2B6 a uma concentração de 10 μΜ, e o Exemplo 641 do documento n° WO2011086053 causa a indução do CYP3A4 a uma concentração de 20 μΜ e superior.

[00264] A inibição do CYP3A4 pode indicar interações medicamentosas indesejáveis. A indução do CYP pode reduzir a exposição de medicamentos coadministrados, resultando numa diminuição da eficácia. Além disto, a indução do CYP também pode levar à toxicidade, aumentando a formação de metabólitos reativos.

SOLUBILIDADE AQUOSA DE MATERIAL CRISTALINO [00265] A solubilidade aquosa do Exemplo cristalino 3, Exemplo 644 e

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641 do documento n° WO2011086053 cristalino em diferentes pHs foi avaliada. A solubilidade em mg/ml está resumida na Tabela 5:

TABELA 5

	Exemplo 3 [forma cristalina, m. p. (temperatura inicial de DSC) 143 ± 2oC] Solubilidade (mg/ml)	Exemplo 644 do documento n° WO2011086053 [forma cristalina, m. p. (temperatura inicial de DSC) 244 ± 2oC] Solubilidade (mg/ml)	Exemplo 641 do documento n° WO2011086053 [mistura de duas formas cristalinas, m. p. (temperatura inicial de DSC) 188 ± 2 e 195 ± 2oC] Solubilidade (mg/ml)
pH 2,0	>346	2,47	90,0
pH 7,4	12,3	0,136	2,26
pH 9,0	11,1	0,0099	2,28

[00266] Em geral, a solubilidade aquosa é um dos aspectos-chave que afetam o desenvolvimento de formulações orais e a biodisponibilidade oral é altamente dependente da solubilidade de um fármaco. Uma alta solubilidade conduzirá a uma rápida dissolução do composto no trato gastrointestinal e as altas concentrações alcançadas dirigirão a absorção através do epitélio intestinal. Assim, uma alta solubilidade pode aumentar significativamente a probabilidade de alcançar uma elevada biodisponibilidade oral e as exposições sistêmicas desejadas em doses relevantes.

Claims

1. Composto, caracterizado pelo fato de ser de acordo com a fórmula geral (I),

m em que

A representa Cô-cicloalquila, em que a referida Cô-cicloalquila é opcionalmente substituída por um ou mais deutérios;

Ri representa Ci-alquila, em que a referida Ci-alquila é opcionalmente substituída por um ou mais deutérios;

R2 representa Ci-alquila, em que a referida Ci-alquila é substituída por um substituinte selecionado de Re; e em que a referida Cialquila é opcionalmente substituída por um ou mais deutérios;

R3 representa Cz-alquila, em que a referida Cz-alquila é substituída por um substituinte selecionado de R7 e em que a referida C2alquila é opcionalmente substituída por um ou mais deutérios;

R4 representa hidrogênio ou deutério;

Rs representa hidrogênio ou deutério;

Rô representa ciano;

R7 representa hidroxila;

ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a fórmula (I) é a fórmula geral (Ia)

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(Ia) em que R1-R2, R4-R7 são como definidos na reivindicação 1, e em que Ra, Rb, Re e Rd são, cada um, independentemente selecionados dentre hidrogênio e deutério.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que a fórmula (I) é fórmula geral (Ib)

(Ib) em que R1-R2, R4-R7, Ra, Rb, Re e Rd são como definidos na reivindicação 1 ou 2.

4. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações

1 a 3, caracterizado pelo fato de ser selecionado dentre trans-2- [4- [2- [ 1 -Hidroxietil] -6- (metilamino)imidazo [4,5 c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila, trans-2- [4- [2- [(1S)-1 -hidroxietil] -6-(metilamino)imidazo[4,5c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila, írans-2-[4-[2-[(lR)-l-hidroxietil]-6-(metilamino)imidazo[4,5c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila, trans-2- [4-[2-[(lR)-l-hidroxietil]-6Petição 870190067745, de 17/07/2019, pág. 87/90 (trideuteriometilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila, írans-2-[4-[2-[l,2,2,2-Tetradeuterio-l-hidroxietil]-6(metilamino)imidazo[4,5-c]piridin-l-il]ciclo-hexil]acetonitrila, cis-2- [4- [2- [ 1 -hidroxietil] -6- (metilamino)imidazo [4,5 c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila e cz.s-2- [4- [2- [(I /?)-1 -hidroxietil] -6- (metilamino)imidazo [4,5c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila, ou solvatos, hidratos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que o referido composto é írans-2-[4-[2-[(lR)-l-hidroxietil]-6-(metilamino)imidazo[4,5c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila, ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações

1 a 5, caracterizado pelo fato de ser para uso como um medicamento.

7. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações

1 a 5, caracterizado pelo fato de ser para uso na profilaxia e/ou tratamento de doenças do sistema imunológico como doenças autoimunes, ou de doenças relacionadas à desregulação do sistema imunológico.

8. Composto, caracterizado pelo fato de ser para uso como definido na reivindicação 7 na profilaxia e/ou tratamento de dermatite atópica.

9. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5 em conjunto com um excipiente ou veículo farmaceuticamente aceitável ou carreador (ou carreadores) farmaceuticamente aceitável.

10. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação

9, caracterizada pelo fato de ser em conjunto com um ou mais outros

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4/4 compostos terapeuticamente ativos.

11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de ser para uso no tratamento de uma doença, tal doença é responsiva à inibição da atividade de JAK1 quinase.

12. Método para prevenir, tratar ou melhorar doenças do sistema imunológico, como doenças autoimunes, o método caracterizado pelo fato de que compreende administrar a uma pessoa que sofre de pelo menos uma das referidas doenças uma quantidade eficaz de um ou mais compostos como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 5 opcionalmente em conjunto com um carreador farmaceuticamente aceitável ou um ou mais excipientes, opcionalmente em combinação com outros compostos terapeuticamente ativos.

13. Composto, caracterizado pelo fato de ser selecionado dentre

2-[írans-4-[(5-Amino-2-cloropiridin-4-il)amino]ciclohexil] acetonitrila ou sais do mesmo.

14. Composto, caracterizado pelo fato de ser selecionado dentre

2-[írans-4-[6-cloro-2-( 1 -hidroxietil)- l/7-imidazo[4,5-c]piridin1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila,

2- [trans-4- [6-cloro-2- [(17?) -1 -hidroxietil] -1 H-imidazo [4,5c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila e írans-2-[4-[6-cloro-2-(l ,2,2,2-tetradeuterio- 1-hidroxietil)imidazo [4,5 -c]piridin-1 -il] ciclo-hexil] acetonitrila, ou sais do mesmo.