BR112016022455B1 - uso de um sobrenadante de culturas de uma cepa de espécies de bacillus pumilus, composição cosmética ou dermofarmacêutica não natural, e, método não terapêutico para aumentar os níveis de adiponectina, aumentar a atividade mitocondrial no músculo, aumentar a resistência muscular e/ou repitelização da pele, estimular a síntese de colágeno e/ou a síntese de ácido hialurônico, tratamento de endurecimento da pele e/ou prevenção da perda de firmeza da pele - Google Patents

Abstract

EXTRATO DE FERMENTO DE UMA CEPA DE ESPÉCIES DE BACILLUS PUMILUS, USO DE UM EXTRATO DE FERMENTO DE UMA CEPA DE ESPÉCIES DE BACILLUS PUMILUS, COMPOSIÇÃO COSMÉTICA OU DERMOFARMACÊUTICA, E, MÉTODO NÃO TERAPÊUTICO PARA AUMENTAR OS NÍVEIS DE ADIPONECTINA, AUMENTAR A ATIVIDADE MITOCONDRIAL NO MÚSCULO, AUMENTAR A RESISTÊNCIA MUSCULAR E/OU REPITELIZAÇÃO DA PELE, ESTIMULAR A SÍNTESE DE COLÁGENO E/OU A SÍNTESE DE ÁCIDO HIALURÔNICO, TRATAMENTO DE ENDURECIMENTO DA PELE E/OU PREVENÇÃO DA PERDA DE FIRMEZA DA PELE Extrato de fermento de uma cepa bacteriana para seu uso no tratamento e/ou cuidados da pele e/ou músculos, bem como as suas composições cosméticas e/ou dermofarmacêuticas. Em particular, seu uso para resistência muscular, cicatrização de feridas e firmeza da pele.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A tecnologia descrita refere-se a um extrato de fermento de origem bacteriana, que aumenta os níveis de adiponectina. O dito extrato de fermento é secretado por uma cepa da espécie Bacillus pumilus. Esta invenção refere-se, também, às composições cosméticas ou dermofarmacêuticas que contêm o dito extrato de fermento.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[002] A pele, as membranas mucosas, o cabelo e/ou as unhas constituem uma barreira física entre o organismo e seu ambiente. A pele é composta de dois tecidos: a epiderme e a derme. Os adipócitos são encontrados na camada mais profunda da derme, e são organizados em lóbulos, separados por septos de tecido conjuntivo que contém os vasos, nervos e linfonodos. A função principal dos adipócitos é o armazenamento de gordura como triglicerídeos em vacúolos.

[003] O tecido adiposo desempenha uma função crucial na regulação da homeostasia de ácidos graxos de todo o corpo. Em períodos de abundância calórica ele armazena ácidos graxos livres (FFAs, Free Fatty Acids) sob a forma de triglicerídeos mediante a esterificação deles com glicerol e libera-os de volta para a circulação em períodos de escassez de energia. O tecido adiposo atua também como um órgão endócrino capaz de secretar citocinas, chamadas de adipocinas ou proteínas derivadas de tecido adiposo.

[004] Uma deposição de tecido adiposo em partes diferentes do corpo e um decréscimo na massa muscular ocorrem com envelhecimento e a falta de atividade física adequada. O exercício regular produz um decréscimo em acúmulo de gordura e um aumento em resistência muscular, que por sua vez resulta em um aspecto mais firme de algumas áreas corporais e uma melhor aparência física. Os efeitos benéficos do exercício são considerados como sendo parcialmente mediados pelas alterações no perfil de adipocinas, isto é, pelo aumento dos teores de citocinas anti-inflamatórias, como adiponectina [Golbidi S. e Laher I. “Exercise Induced Adipokine Changes and the Metabolic Syndrome”, J. Diabetes Res., 2014; DOI 2014:726861; Petersen A. M. e Pedersen B. K., “The anti-inflammatory effect of exercise”, J. Appl. Physiol., 2005, 98(4), 1154-1162; LaMonte M. J. et al., “Physical activity and diabetes prevention”, J. Appl. Physiol., 2005, 99, 1205-1213; Bruunsgaard H., “Physical activity and modulation of systemic low-level inflammation”, J. Leukoc. Biol., 2005, 78(4), 819-835]. O efeito do exercício tem sido descrito em níveis de expressão de gene, ligantes de proteínas, e ligações de receptores [Moldoveanu A. I. et al., “The cytokine response to physical activity and training”, Sports Med., 2001, 31(2), 115-144].

[005] A adiponectina (também conhecida como AdipoQ, ACDC, Acrp30, apM-1, APM1, GBP28, ADPN e ADIPQTL1) é uma citocina secretada pelo tecido adiposo durante a diferenciação de adipóticos. A adiponectina humana consiste em 244 aminoácidos e tem uma estrutura característica com um domínio globular semelhante a C1q, e circula no sangue em pelo menos três complexos homoméricos, isto é, trímero, hexâmero e multímeros de ordem superior. O teor plasmático de adiponectina está inversamente correlacionado com o índice de massa corporal (BMI, Body Mass Index) e a gordura intra-abdominal e adicionalmente, o teor plasmático de adiponectina aumenta por meio de treinamento de exercício aeróbico [Golbidi S. e Laher I. “Exercise Induced Adipokine Changes and the Metabolic Syndrome”, J. Diabetes Res., 2014; DOI 2014:726861].

[006] A adiponectina realiza sua função mediante a ativação de dois tipos de receptores, receptor 1 de adiponectina (AdipoR1, Adiponectina Receptor 1) e receptor 2 de adiponectina (AdipoR2, Adiponectin Receptor 2). A adiponectina liga-se ao AdipoR1 em células de músculo esquelético, e ativa as vias de proteína quinase ativada por 5’-AMP (AMPK, 5’-AMP-activated Protein Kinase) por fosforilação, iniciando uma série de respostas moleculares que finalmente resulta na estimulação da captação de glicose, na oxidação de ácidos graxos, na produção de ATP e na biogênese mitocondrial [Kadowaki T. e Yamauchi T. “Adiponectin and adiponectin receptors”, Endocr. Rev. 2005, 26:439-451; Golbidi S. e Laher I. “Exercise Induced Adipokine Changes and the Metabolic Syndrome”, J. Diabetes Res., 2014, 2014:726861]. Adicionalmente, tem sido descrito que o tratamento de miotubos humanos com adiponectina induz a biogênese mitocondrial, a oxidação de palmitato e a atividade de citrato-sintase [Civitarese A.E. et al., ”Role of adiponectin in human skeletal muscle bioenergetics.” Cell Metab., 2006, 4(1):75-87], induzindo, portanto, um aumento da resistência e do tônus das fibras musculares, similar ao alcançado pelo exercício físico.

[007] Os músculos esqueléticos são compostos de miócitos que formam as fibras musculares (miofibras). As miofibras são formadas a partir da fusão de mioblastos em desenvolvimento (um tipo de célula progenitora embrionária) em um processo conhecido como miogênese. Há dois tipos principais de fibras musculares que diferem em suas isoformas de cadeia pesada da Miosina (MyHC, Myosin Heavy Chain) e em sua capacidade enzimática. Os músculos são compostos por uma mistura de tipos diferentes de fibras musculares. As fibras de Tipo I (de lenta contração espasmódica momentânea) têm atividade aeróbica, alta capacidade oxidativa devido ao alto teor de mitocôndrias (expressam enzimas que oxidam os ácidos graxos), são ricas em mioglobina com aparência vermelha e expressam a proteína marcadora cadeia pesada 7 da Miosina (MyH7, Myosin Heavy Chain 7), que é específica para as fibras de Tipo I [Couturier A. et al. “Carnitine supplementation to obese Zucker rats prevents obesity-induced type II to type I muscle fiber transition and favors an oxidative phenotype of skeletal muscle” Nutrition & Metabolism, 2013, 10:48]. As fibras de Tipo II (de rápida contração espasmódica momentânea) têm atividade anaeróbica, baixa capacidade oxidativa devido ao baixo teor de mitocôndrias e dependem do metabolismo glicolítico para gerar ATP (Adenosine-TriPhosphate, trifosfato de adenosina). A preparação de fibras de Tipo I e de Tipo II depende da ação do músculo: as fibras de Tipo I estão principalmente envolvidas em exercício aeróbico, em comparação com as fibras de Tipo II, que estão principalmente envolvidas em exercício anaeróbico, isto é, quanto mais alto o número de fibras de Tipo I, mais alta será a resistência muscular. Os indivíduos com alta densidade capilar muscular esquelética e os indivíduos com alta proporção de fibras de Tipo I mostram altas concentrações de adiponectina circulante [Ingelsson E. et al., “Associations of Serum Adiponectin with Skeletal Muscle Morphology and Insulin Sensitivity”, J. Clin. Endocrinol. Metab., 2009, 94(3):953-957]. Portanto, é suposto que um aumento no teor de adiponectina circulante aumenta a proporção de fibras de Tipo I e a resistência muscular.

[008] Adicionalmente, tem sido relatado que a adiponectina induz ou acelera o processo de cicatrização de feridas de pele [EP1651161 B1] pelo favorecimento das proliferação e migração de queratinócitos [Shibata S. et al. “Adiponectin regulates cutaneous wound healing by promoting keratinocyte proliferation and migration via the ERK signaling pathway”, J. Immunol., 2012, 189(6):3231-41]. Tem sido também relatado que a adiponectina aumenta a síntese de colágeno e suprarregula a expressão de gene Ácido Hialurônico-Sintase-2, que aumenta a síntese de ácido hialurônico [Ezure T. et al. “Adiponectin and leptin up-regulate extracellular matrix production by dermal fibroblasts”, Biofactors. 2007, 31(3-4):229-36; Yamane T. et al. “Adiponectin promotes hyaluronan synthesis along with increases in hyaluronan synthase 2 transcripts through an AMP-activated protein kinase/peroxisome proliferator-activated receptor-α-dependent pathway in human dermal fibroblasts”, Biochem. and Biophys. Res. Comm. 2011, 415, 235-238].

[009] Os inventores da presente invenção têm surpreendentemente descoberto que o extrato de fermento de uma cepa da espécie Bacillus pumilus aumenta os teores de adiponectina, a atividade mitocondrial em músculo, os teores de ATP em músculo e a resistência muscular.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0010] A tecnologia descrita fornece uma solução para o aumento do teor de adiponectina em adipócitos, e da atividade mitocondrial em músculo por um extrato de fermento de uma cepa da espécie Bacillus pumilus.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

[0011] Esta invenção refere-se ao extrato de fermento de uma cepa da espécie Bacillus pumilus, ao extrato de fermento para o seu uso para aumentar os teores de adiponectina e às composições cosméticas ou dermofarmacêuticas que compreendem o extrato de fermento. Os inventores desta invenção têm surpreendentemente descoberto que o extrato de fermento anteriormente mencionado aumenta a atividade mitocondrial em músculo, a resistência muscular.

Definições

[0012] A fim de facilitar a compreensão desta invenção, são incluídos os significados de alguns termos e de algumas expressões como usados no contexto da invenção.

[0013] Como aqui usado, o termo transicional “compreendendo”, que é sinônimo de “incluindo”, “contendo”, ou “caracterizado por”, é inclusivo ou ilimitado e não exclui etapas de método adicionais não citadas ou elementos adicionais não citados. Entretanto, em cada recitação aqui de “compreendendo”, é pretendida que o termo também inclua, como modalidades alternativas, as frases “consistindo essencialmente em” e “consistindo em”, sendo que “consistindo em” exclui qualquer elemento não especificado ou etapa não especificada e “consistindo essencialmente em” permite a inclusão de elementos adicionais não recitados ou de etapas adicionais não recitadas que não afetam materialmente as características novas e básicas ou essenciais da composição ou do método sob consideração.

[0014] No contexto desta invenção “pele” é entendida como sendo as camadas que a compreendem, desde a camada mais externa ou o estrato córneo até a camada mais interna ou hipoderme, ambas inclusivas. Estas camadas são compostas de tipos diferentes de células como queratinócitos, fibroblastos, melanócitos e/ou adipócitos dentre outro. No contexto desta invenção, o termo “pele” inclui o escalpo.

[0015] O termo “tratamento”, como usado no contexto deste relatório descritivo quando não estiver acompanhado pelas qualificações “cosmético, não terapêutico”, significa a administração de um composto de acordo com a invenção para aliviar ou eliminar uma doença ou um distúrbio ou reduzir ou eliminar um ou mais sintomas associados com esta doença ou este distúrbio. O termo “tratamento” também abarca a capacidade para aliviar ou eliminar as consequências fisiológicas da doença ou do distúrbio.

[0016] Quando o termo “tratamento” estiver acompanhado pelas qualificações “cosmético, não terapêutico” elas referem-se à aplicação do composto na pele com o objetivo de aprimorar as qualidades cosméticas da pele como e não restritas a, seu nível de hidratação, elasticidade, firmeza, brilho, tônus ou textura, dentre outras. O termo “cuidado” nesta invenção refere-se à manutenção das qualidades da pele e inclui a higiene do cabelo e/ou do corpo. Estas qualidades são submetidas ao aprimoramento e mantidas mediante um cuidado e/ou tratamento cosmético da pele tanto em indivíduos saudáveis quanto naqueles que apresentam doenças e/ou distúrbios da pele, como e não restritas (restritos) a, úlceras e lesões sobre a pele, psoríase, dermatite, acne ou rosácea, dentre outras.

[0017] O termo “prevenção”, como usado nesta invenção, refere-se à capacidade de um composto da invenção para prevenir, atrasar ou impedir o surgimento ou desenvolvimento de uma doença ou um distúrbio antes de seu surgimento.

[0018] No contexto desta invenção, o termo “envelhecimento” refere- se às alterações experimentadas pela pele com o avanço da idade (cronoenvelhecimento) ou mediante a exposição ao sol (fotoenvelhecimento) ou aos agentes ambientais como fumaça de tabaco, condições climáticas extremas de frio, calor, ou vento, poluentes ou contaminantes químicos, e inclui todas as alterações externas visíveis e/ou perceptíveis mediante o toque, como e não restritas a, o desenvolvimento de descontinuidades sobre a pele como rugas, linhas finas, estrias, irregularidades ou aspereza, aumento no tamanho de poros, perda de elasticidade, perda de firmeza, perda de lisura, perda da capacidade para se recuperar da deformação, flacidez da pele como bochechas flácidas, dentre outras.

[0019] Portanto, um primeiro aspecto da presente invenção refere-se ao extrato de fermento de uma cepa da espécie Bacillus pumilus para seu uso no aumento do teor de adiponectina, aumento de atividade mitocondrial em músculo, aumento de resistência muscular, estimulação de cicatrização de ferida e/ou de repitelização da pele. Em uma modalidade, o aumento de atividade mitocondrial em músculo é um aumento do teor de ATP e/ou da atividade de citrato-sintase em músculo. Em uma outra modalidade, o teor de adiponectina é o teor de adiponectina circulante. Em outras modalidades, o aumento de resistência muscular é um aumento da resistência aeróbica. Em uma outra modalidade, o aumento da resistência aeróbica é um aumento na proporção de fibras de Tipo I em músculo.

[0020] Em um outro aspecto, a presente invenção refere-se ao uso do extrato de fermento de uma cepa da espécie Bacillus pumilus para o aumento cosmético, não terapêutico do teor de adiponectina em adipócitos, a estimulação cosmética, não terapêutica de síntese de colágeno e/ou de síntese de ácido hialurônico na pele, tratamento cosmético, não terapêutico e/ou prevenção cosmética, não terapêutica de envelhecimento da pele, tratamento cosmético, não terapêutico e/ou prevenção cosmética, não terapêutica de rugas da pele, tratamento cosmético, não terapêutico de firmeza da pele e/ou para a prevenção cosmética, não terapêutica de perda da firmeza da pele.

[0021] Em uma modalidade, o tratamento da pele é realizado por aplicação tópica ou transdérmica.

[0022] Em uma outra modalidade, o aumento de atividade mitocondrial em músculo, o aumento de resistência muscular, a estimulação de cicatrização de ferida e/ou repitelização da pele são consequências do aumento do teor de adiponectina.

[0023] Em uma outra modalidade, a cepa da espécie Bacillus pumilus é uma cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P28202. A dita cepa tem estado depositada desde 11 de março de 2014 na “Belgian Coordinated Collection of Microorganisms (BCCM)” / “Laboratorium voor Microbiologie-Bacterieverzameling (LMG) (BCCM/LMG)” (University Ghent, K.L. Ledeganckstraat 35, B-9000 Ghent, Bélgica) como instituição legalmente reconhecida para o dito propósito de acordo com o Tratado de Budapeste sobre o “International Recognition of the Deposit of Microorganisms” em 28 de abril de 1977.

[0024] Em uma outra modalidade, o extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus contém material peptídico e glicídico tendo um peso molecular menor que 7.000 Da, ou menor que 5.000 Da. Em uma outra modalidade, o extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus não contém aminas secundárias. Em uma outra modalidade, o extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus não contém compostos fenólicos.

[0025] Em uma outra modalidade, o extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus tem um tempo de residência entre 9 e 20 minutes, entre 10 e 15 minutos em uma análise cromatográfica por Cromatografia Líquida De Alta Eficiência (HPLC, High Performance Liquid Chromatography), com uma coluna cromatográfica TSKGel G2000SWXL, 5m, 125Â 7,8mm x 30mm (TOSOH Bioscience) e água com 0,1M [sic] pH=6,70 + agente tamponante fosfato 0,1M + sulfato de sódio 0,1M como eluente.

[0026] Em uma outra modalidade, o extrato é obtido mediante fermentação da cepa da espécie Bacillus pumilus em um meio de cultura adequado, convencionalmente agitado e aerado para sintetizar e secretar o dito produto para o meio de cultura seguida por purificação subsequente. A fermentação para produzir o extrato desta invenção pode ser realizada em um meio agitado e aerado a uma temperatura entre 10°C e 40°C, ou entre 20°C e 35°C, o meio tendo um pH entre 6,5 e 9, ou de cerca de 7,0, ajustando-o se necessário durante a fermentação. A duração da fermentação está entre 12 horas e 120 horas, ou entre 24 horas e 72 horas.

[0027] O meio de cultura na fermentação da cepa da espécie Bacillus pumilus compreende fontes de nitrogênio e/ou de carbono como extratos de leveduras, extratos de malte e/ou peptonas, com as concentrações de cada um destes e componentes de 0,1 g/L a 20 g/L, ou de 0,5 g/L a 10 g/L. O meio de cultura na fermentação da cepa da espécie Bacillus pumilus pode conter também sais marinhos em uma concentração entre 5 g/L e 40 g/L, ou entre 25 g/L e 35 g/L.

[0028] Em uma outra modalidade, o meio de cultura na fermentação da cepa da espécie Bacillus pumilus compreende açúcares exógenos, como e não restritos a, galactose, glicose, manose, amigdalina, celobiose, maltose, amido, glicogênio, lactose, suas misturas e/ou extratos contendo misturas destes açúcares podem ser usados como fonte de carbono adicional no meio de cultura de fermentação. Em uma modalidade, um suprimento exógeno de glicose de 0,5 g/L a 40 g/L, ou de 5 g/L a 25 g/L é fornecido ao meio de cultura de fermentação. Em uma outra modalidade, o meio de cultura de fermentação está isento de fontes de nitrogênio ou de carbono adicionais.

[0029] Em uma outra modalidade, adicionalmente aos sais marinhos, sais minerais adicionais são também fornecidos ao meio de cultura de fermentação da cepa da espécie Bacillus pumilus. Estes sais são escolhidos dentre os sais que fornecem os íons Na+, K+, NH4+, Ca2+, Mg2+, PO43-, SO42-, Cl- F- I- CO 2- NO - citratos ou elementos traço como Cu Mn Mo Fe Sr , , , 3 , 3, , ç , , , , , B, Br, Si, Al, Li, e Zn.

[0030] Em uma outra modalidade, o método de isolamento e de purificação do extrato de fermento é realizado por métodos bem conhecidos pela pessoa versada na técnica como, centrifugação e filtração. Em uma modalidade, as etapas de centrifugação e de filtração são realizadas para separar a cepa da espécie Bacillus pumilus do sobrenadante onde o extrato de fermento é encontrado. Em uma modalidade, a cepa da espécie Bacillus pumilus é uma cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202.

[0031] Um outro aspecto desta invenção refere-se a uma composição cosmética ou dermofarmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade cosmética ou dermofarmaceuticamente efetiva do extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus e pelo menos um excipiente e/ou ingrediente cosmética ou dermofarmaceuticamente aceitável. Em uma modalidade, a cepa da espécie Bacillus pumilus é uma cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202. As ditas composições são preparadas por métodos convencionais conhecidos pelas pessoas versadas na técnica [“Harry’s Cosmeticology”, Seventh edition, (1982), Wilkinson J.B., Moore R.J., ed. Longman House, Essex, GB (Grã- Bretanha)].

[0032] A quantidade cosmética ou dermofarmaceuticamente efetiva do extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus na composição da invenção a ser administrada, e também sua dosagem, dependerão de numerosos fatores, incluindo a idade, a condição do paciente, a natureza ou a severidade da condição ou do distúrbio a ser tratada (tratado) e/ou cuidada (cuidado), a rota de administração e a frequência de administração e a natureza do extrato de fermento a ser usado.

[0033] “Quantidade cosmética ou dermofarmaceuticamente efetiva” é entendida como sendo uma quantidade não tóxica, mas suficiente de um ingrediente para fornecer o efeito desejado. Por exemplo, o extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus é usado em concentrações cosméticas ou dermofarmacêuticas para alcançar o efeito desejado; isto é, com relação ao peso total da composição, entre 0,0000000001% (em peso) e 20% (em peso); entre 0,00000001% (em peso) e 10% (em peso), entre 0,000001% (em peso) e 5% (em peso) ou entre 0,0001% (em peso) e 5% (em peso).

[0034] Em uma modalidade, o extrato de fermento da invenção pode também ser incorporado em sistemas de liberação prolongada e/ou sistemas de liberação cosmética ou dermofarmacêutica.

[0035] O termo “sistemas de liberação” refere-se a um diluente, adjuvante, excipiente, veículo ou aditivo com o qual o extrato de fermento da invenção é administrado. Estes veículos cosméticos ou dermofarmacêuticos podem ser líquidos, como água, óleos ou tensoativos, incluindo aqueles de origem de petróleo, animal, vegetal ou sintética, como mas não restritos a, óleo de amendoim, óleo de feijão-soja, óleo mineral, óleo de gergelim, óleo de rícino, polissorbatos, ésteres de sorbitano, éter-sulfatos, sulfatos, betaínas, glicosídeos, maltosídeos, álcoois graxos, monoxinóis, poloxâmeros, polioxietilenos, poli(glicóis etilênicos), dextrose, glicerol, digitonina e similar. Uma pessoa versada na técnica conhece os diluentes, adjuvantes ou excipientes que podem ser usados nos diferentes sistemas de liberação nos quais o composto da invenção pode ser administrado.

[0036] O termo “liberação prolongada” é usado em um sentido convencional referindo-se a um sistema de liberação de um composto que fornece a liberação gradual deste composto durante um período de tempo. Em uma modalidade, a liberação gradual fornece um teor de liberação de composto relativamente constante durante um período de tempo.

[0037] Exemplos de sistemas de liberação ou de sistemas de liberação prolongada incluem, sem sentido limitado, lipossomas, lipossomas mistos, oleossomas, niossomas, etossomas, milipartículas, micropartículas, nanopartículas, nanopartículas lipídicas sólidas, suportes lipídicos nanoestruturados, esponjas, ciclodextrinas, vesículas, micelas, micelas mistas de tensoativos, micelas mistas de tensoativo-fosfolipídeo, miliesferas, microesferas e nanoesferas, lipoesferas, milicápsulas, microcápsulas e nanocápsulas, e também microemulsões e nanoemulsões, que podem ser adicionados (adicionadas) para alcançar uma penetração maior do extrato de fermento da invenção.

[0038] Os sistemas de liberação prolongada podem ser preparados por métodos bem conhecidos na técnica, e as composições que os contêm podem ser administradas, por exemplo, por administração tópica ou transdérmica, incluindo emplastros adesivos, emplastros não adesivos, emplastros oclusivos e emplastros microelétricos, ou por administração sistêmica, por exemplo e não restringida a, rota oral ou parenteral, incluindo injeção ou implantação nasal, retal ou subcutânea, ou injeção ou implantação direta em uma parte específica do corpo. Em uma modalidade, a liberação fornece um teor de liberação de composto relativamente constante durante um período de tempo. A quantidade de extrato de fermento contida no sistema de liberação prolongada dependerá, por exemplo, de onde a composição é para ser administrada, da cinética e da duração da liberação do extrato de fermento da invenção, e também da natureza da condição e/ou do distúrbio a ser tratada (tratado) e/ou cuidada (cuidado).

[0039] Em uma modalidade, a composição contendo o extrato de fermento desta invenção está adsorvida sobre polímeros orgânicos sólidos ou suportes minerais sólidos, como e não restritos a, talco, bentonita, sílica, amido ou maltodextrina dentre outros.

[0040] Em uma modalidade, a composição contendo o extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus está incorporada em tecidos, não tecidos ou dispositivos médicos que estão em contato direto com a pele, liberando, dessa forma, o extrato de fermento da invenção quer por biodegradação do sistema de ligação para o tecido, não tecido ou dispositivo médico, quer devido à fricção entre eles e o corpo, devido à umidade do corpo, ao pH da pele ou à temperatura do corpo. Em uma outra modalidade, o extrato de fermento da invenção está incorporado em tecidos e não tecidos usados na fabricação de peças de roupa que estão em contato direto com o corpo. Em uma modalidade, os tecidos não tecidos e dispositivos médicos contendo o extrato de fermento da invenção são usados para o tratamento e/ou o cuidado de condições e/ou de distúrbios que melhoram ou são evitados pelo aumento de teores de adiponectina, aumento da atividade mitocondrial, estimulação de cicatrização de ferida e/ou repitelização da pele, ou pela estimulação de síntese de colágeno.

[0041] Exemplos de tecidos, não tecidos, peças de roupa, dispositivos médicos e meios para imobilizar os compostos nos mesmos, dentre os quais estão os sistemas de liberação e/ou os sistemas de liberação prolongada descritos acima, podem ser encontrados na literatura e são conhecidos na técnica anterior [Schaab C.K. (1986) HAPPI May 1986; Nelson G., “Application of microencapsulation in textiles”, (2002), Int. J. Pharm., 242(1-2), 55-62; “Biofunctional Textiles and the Skin” (2006) Curr. Probl. Dermatol. v.33, Hipler U.C. e Elsner P., eds. S. Karger AG, Basel, Switzerland (Basileia, Suíça); Malcolm R.K. et al., “Controlled release of a model antibacterial drug from a novel self-lubricating silicone biomaterial”, (2004), J. Cont. Release, 97(2), 313-320]. Em uma modalidade, os tecidos, não tecidos, peças de roupa e dispositivos médicos são bandagens, gazes, camisetas, meias curtas, malhas de ginástica, roupas de baixo, cintas, luvas, fraldas, absorventes higiênicos femininos, curativos, colchas, lenços/toalhas/panos de limpeza, emplastros adesivos, emplastros não adesivos, emplastros oclusivos, emplastros microelétricos e/ou máscaras faciais.

[0042] As composições cosméticas ou dermofarmacêuticas contendo o extrato de fermento desta invenção podem ser usadas em tipos diferentes de composições de aplicação tópica ou transdérmica, opcionalmente incluindo excipientes cosmética e/ou dermatofarmaceuticamente aceitáveis para formular a forma de administração desejada.

[0043] Em uma modalidade, as composições de aplicação tópica ou transdérmica são produzias em qualquer formulação sólida, líquida ou semissólida, como e não restrita a, cremes, emulsões múltiplas como e não restritas a, emulsões de óleo e/ou silicone em água, emulsões de água-em-óleo e/ou silicone, emulsões do tipo água/óleo/água ou água/silicone/água, e emulsões do tipo óleo/água/óleo ou silicone/água/silicone, cristais líquidos, composições anidras, dispersões aquosas, óleos, leites, bálsamos, espumas, loções, géis, géis cremosos, soluções hidroalcoólicas, soluções hidroglicólicas, hidrogéis, linimentos, soros, sabões, xampus, condicionadores, séruns, filmes de polissacarídeo, unguentos, mousses, pomadas, pós, barras, lápis e sprays ou aerossóis (sprays), incluindo formulações sem enxágue (leave-on) e com enxágue posterior (rinse-off). Em uma outra modalidade, estas formulações de aplicação tópica ou transdérmica são incorporadas usando técnicas conhecidas pela pessoa versada na técnica em tipos diferentes de acessórios sólidos como e não restritos a, bandagens, gazes, camisetas, meias curtas, malhas de ginástica, roupas de baixo, cintas, luvas, fraldas, absorventes higiênicos femininos, curativos, colchas, lenços/toalhas/panos de limpeza, emplastros adesivos, emplastros não adesivos, emplastros oclusivos, emplastros microelétricos e/ou máscaras faciais, ou elas são incorporadas em produtos de maquiagem diferentes como base de maquiagem, como bases fluidas e bases em pó compacto, loções para remoção de maquiagem, leites para remoção de maquiagem, corretivos para olheiras, sombras para os olhos, batons, protetores para os lábios, pós e brilhos para os lábios, dentre outros.

[0044] Em uma outra modalidade, a composição cosmética ou dermofarmacêutica da invenção inclui agentes que aumentam a absorção percutânea do extrato de fermento desta invenção, por exemplo e não restritos a, sulfóxido dimetílico, dimetilacetamida, dimetilformamida, tensoativos, azona (1-dodecilazaciclo-heptano-2-ona), álcool, ureia, etoxidiglicol, acetona, glicol propilênico ou poli(glicol etilênico), dentre outros. Em uma outra modalidade, a composição cosmética ou dermofarmacêutica desta invenção é aplicada nas áreas locais a serem tratadas por meio de iontoforese, sonoforese, eletroporação, emplastros microelétricos, pressão mecânica, gradiente de pressão osmótica, cura oclusiva, microinjeções ou injeções isentas de agulha por meio de pressão, como injeções por pressão de oxigênio, ou qualquer sua combinação, para alcançar uma maior penetração do extrato de fermento da invenção. A área de aplicação será determinada pela natureza da condição e/ou do distúrbio a ser tratada (tratado) e/ou cuidada (cuidado).

[0045] Dentre os ingredientes e/ou excipientes cosmética ou dermofarmaceuticamente aceitáveis contidos nas composições cosméticas ou dermofarmacêuticas descritas nesta invenção estão os ingredientes adicionais comumente usados em composições cosméticas ou dermofarmacêuticas como mas não restritos a, outros agentes que aumentam o teor de adiponectina em  adipócitos, outros agentes que aumentam a atividade mitocondrial, outros agentes que aumentam o teor de ATP em músculo, outros agentes estimulantes de cicatrização, outros agentes coadjuvantes de cicatrização, outros agentes estimulantes de repitelização, outros agentes coadjuvantes de repitelização, agentes que reduzem o teor de triglicerídeos dos adipócitos, agentes retardadores da diferenciação de adipócitos, agentes que reduzem a quantidade de noturnina, agentes inibidores da expressão de noturnina, agentes lipolíticos ou agentes estimulantes de lipólise, agentes venotônicos, agentes moduladores da expressão de PGC-1α, agentes inibidores da atividade de PPARY, agentes anticelulite, agentes que diminuem a produção de sebo, agentes estimulantes da síntese de macromoléculas dérmicas e epidérmicas e/ou capazes de inibir ou prevenir a degradação delas, agentes estimulantes da síntese de colágeno, agentes estimulantes da síntese de elastina, agentes estimulantes da síntese de decorina, agentes estimulantes da síntese de laminina, agentes estimulantes da síntese de defensina, agentes estimulantes da síntese de chaperona, agentes estimulantes da síntese de cAMP, agentes que modulam AQP-3, agentes que modulam a síntese de aquaporinas, proteínas da família de aquaporinas, agentes estimulantes da síntese de ácido hialurônico, agentes estimulantes da síntese de glicosaminoglicana, agentes estimulantes da síntese de fibronectina, agentes estimulantes da síntese de sirtuína, proteínas de choque térmico, agentes estimulantes da síntese de proteínas de choque térmico, agentes que inibem a exocitose neuronal, agentes anticolinérgicos, agentes que inibem a contração muscular, agentes antienvelhecimento, agentes antirrugas, agentes antiperspirantes, agentes anti-inflamatórios e/ou analgésicos, agentes antiprurido, agentes calmantes, agentes anestésicos, inibidores de agrupamento de receptores de acetilcolina, agentes que inibem acetilcolinesterase, agentes relaxantes para pele, agentes estimulantes ou inibidores da síntese de melanina, agentes branqueadores/clareadores ou  despigmentadores, agentes pró-pigmentadores, agentes inibidores de NO- sintase, agentes inibidores de 5α-redutase, agentes inibidores de lisil- hidroxilase e/ou de prolil-hidroxilase, antioxidantes, sequestradores de radicais livres e/ou agentes contra poluição atmosférica, sequestradores de espécies com carbonila reativa, agentes antiglicação, agentes anti- histamínicos, agentes antivirais, agentes antiparasíticos, emulsificadores, emolientes, solventes orgânicos, propelentes líquidos, condicionares para pele, umectantes, substâncias que retêm umidade, alfa-hidroxi-ácidos, beta- hidroxi-ácidos, hidratantes, enzimas hidrolíticas epidérmicas, vitaminas, aminoácidos, proteínas, pigmentos ou colorantes, corantes, biopolímeros, polímeros gelificantes, espessantes, tensoativos, agentes amaciantes, agentes aglutinantes, conservantes, agentes capazes de reduzir ou tratar as bolsas sob os olhos, agentes esfoliantes, agentes queratolíticos, agentes descamantes, agentes antimicrobianos, agentes antifúngicos, agentes fungistáticos, agentes bactericidas, agentes bacteriostáticos, agentes estimulantes da síntese de componentes do estrato córneo, ceramidas, ácidos graxos, agentes que inibem a degradação de colágeno, agentes que inibem as metaloproteinases da matriz, agentes que inibem a degradação de elastina, agentes que inibem as serina- proteases como calicreínas, catepsina G ou elastase de leucócito, agentes estimulantes da proliferação de fibroblastos, agentes estimulantes da proliferação de queratinócitos, agentes estimulantes da proliferação de melanócitos, agentes estimulantes da diferenciação de queratinócitos, agentes anti-hiperceratose, agentes comedolíticos, agentes antipsoriáticos, agentes de reparo de DNA, agentes protetores de DNA, agentes protetores de células- tronco, estabilizadores, agentes para o tratamento e/ou o cuidado de pele sensível, agentes firmadores, agentes antiestrias, agentes adstringentes, agentes que inibem a atividade de PAR-2, citocinas, fatores de crescimento, agentes que atuam sobre a microcirculação e/ou circulação capilar, agentes estimulantes de angiogênese, agentes que inibem a permeabilidade vascular, agentes que atuam sobre o metabolismo celular, agentes para aprimorar a junção dérmica-epidérmica, agentes indutores de crescimento de cabelo, agentes retardantes ou inibidores de crescimento de cabelo, agentes retardantes de queda de cabelo, conservantes, perfumes, desodorantes mascaradores de odor corporal e/ou absorventes e/ou cosméticos, agentes quelantes, extratos de plantas, óleos essenciais, extratos marinhos, agentes obtidos de um processo biotecnológico, sais minerais, extratos celulares, filtros solares e agentes orgânicos ou minerais fotoprotetores ativos contra raios ultravioletas A e/ou B e/ou raios infravermelhos, ou misturas dos mesmos, desde que sejam física e quimicamente compatíveis com o restante dos componentes na composição e com o extrato de fermento produzido pela cepa da espécie Bacillus pumilus. Igualmente, a natureza destes ingredientes adicionais não deve inaceitavelmente alterar os benefícios do extrato de fermento desta invenção. A natureza destes ingredientes adicionais pode ser sintética ou natural, como extratos de plantas, ou ser proveniente de um procedimento biotecnológico, ou de uma combinação de um procedimento sintético e um procedimento biotecnológico. Exemplos adicionais podem ser encontrados no CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary & Handbook, 12th Edition (2008). No contexto desta invenção, o procedimento biotecnológico é entendido com sendo qualquer procedimento para produzir o ingrediente ativo, ou parte dele, em um organismo, ou em parte dele.

[0046] Em uma modalidade, o agente que reduz o teor de triglicerídeos de adipócitos, o agente que retarda a diferenciação de adipócitos, o agente anticelulite, o agente lipolítico, o agente venotônico, o agente inibidor da expressão de PGC-1α ou o agente inibidor da atividade de PPARY é escolhido, por exemplo e não é restrito aos extratos ou extratos hidrolisados de Alchemilla vulgaris, Angelica sinensis, Armeniacea sp., Arnica montana L, Atractylodis platicodon, bamboo, Betula alba, Bupleurum chinensis, Calendula officinalis, cangzhu, Cecropia obtusifolia, Celosia cristata, Centella asiatica, Chenopodium quinoa, Chrysanthellum indicum, Cimifuga racemosa, Citrus aurantium amara, Cnicus benedictus, Coffea arabica, Cola nipida, Coleus barbatus, Coleus blumei, Coleus esquirolii, Coleus forskohlii, Coleus scutellaroides, Coleus sp., Coleus xanthantus, Commiphora myrrha, Crithmum maritimum, Cuminum cyminum, Dioscorea colettii, Dioscorea villosa, Eugenia caryophyllus, Filipendula ulmaria L, Foeniculum vulgare, Fucus vesiculosus, Gelidium Cartilagineum, Ginkgo biloba, ginkgo biloba, Glycine max, Glycyrrhiza glabra, Hedera helix (extrato de hera), Hibiscus sabdariffa, Hordeum vulgare, Humulus lupulus, Hyperycum perforatum, Ilex paraguariensis, Kigelia africana, Laminaria digitata, Lupinus perennis, Nelumbium speciosum, Orthosiphon stamincus benth, Panax ginseng, Paullinia cupana, Peumus boldus, Phyllacantha fibrosa, Piper methysticum, Piper nigrum, Prunella vulgaris, Prunus amygdalus dulcis, Rosmarinus officinalis, Rubus idaeus, Ruscus aculeatus (extrato de gilbardeira), Salvia officinalis L, Sambucus nigra, Serenoa repens, Smilax aristolochiaefolia, Spirulina platensis algae, Taraxacum erythrospermum, Taraxacum officinale, chá verde, Ulmus rubra, Uncaria tomentosa, Verbena officinalis, Vitex agnus-castus, Dysmorphococcus globosus, dentre outros, alverina, citrato de alverina, di-hidromiricetina, coenzima A, lipase, cerulenina, rutina, glaucina, esculina, visnadina, cafeína, teofilina, teobromina, aminofilina, xantina, carnitina, forscolina, escina, ruscogenina, hederina, iodeto de trietanolamina, agentes indutores da síntese de AMPc, Lanachrys® [INCI: Extrato de Chrysanthellum Indicum] comercializado por Atrium/Unipex, Slim-Excess™ [INCI: Água, Glicol Butilênico, Cloreto de Sódio, Carragenana Hidrolisada, Goma Xantana], Sveltine™ [INCI: Água, Glicol Butilênico, Carnitina, Lecitina, Cafeína, Carbômero, Ácido Salicílico, Atelocolágeno, Extrato de Centella Asiatica, Esculina, Condroitinassulfato de Sódio], Peru Liana [INCI: Extrato de Uncaria Tomentosa] ou Flavenger™ [INCI: Triglicerídeo Caprílico/Cáprico, Dimetilsililato de Sílica, Oleato de Glicerila, Caprilato de Quercetina] comercializado por BASF, Scopariane® [INCI: Sphacelaria Scoparia], Phyco R75® [INCI: Laminaria Digitata], Pheoslim® [INCI: Extrato de Phyllacantha Fibrosa, Cera de Trigo Mourisco [INCI: Polygonum fagopyrum] ou Areaumat Samphira [INCI: Extrato de Crithmum Maritimum], Actiporine 8.G [Glicerina, Aqua, extrato de Jania rubens] comercializado por Codif, Slimming Factor Karkade™ [INCI: Hibiscus Sabdariffa] comercializado por Cosmetochem, Liposuctionine [nome proposto por INCI: Acetil- Hexapeptídeo] comercializado por Infinitec Activos, Xantalgosil C® [INCI: Acefilina-Metilsilanol-Manuronato], Theophyllisilane C® [INCI: Metilsilanol-Carboximetil-Teofilina-Alginato], Glutrapeptide® [INCI: Piroglutamilamidoetil-Indol] ou Cafeisilane C® [INCI: Alginato de Siloxanotriol, Cafeína, Glicol Butilênico] comercializado por Exsymol, Timiline® [INCI: Poli(ácido glicurônico)] comercializado por Greentech, Visnadina [INCI: Visnadina] ou Fitossoma de Flavonoides Diméricos de Ginkgo Biloba [INCI: Fosfolipídeos, Extrato de Folha de Ginkgo Biloba] comercializado por Indena, Slimfit® LS 9509 [INCI: Extrato de Casca de Cecropia Obtusifolia] comercializado por Laboratoires Serobiologiques/Cognis/BASF, Silusyne™ [INCI: Óleo de Feijão-Soja (Glycine Soja), Sesquioleato de Sorbitano, Iso-hexadecano, Hialuronato de Sódio, Laurildimônio-Hidroxipropil-Proteína-de-Soja-Hidrolisada, Acetil- Hexapeptídeo-39] ou Liporeductyl® [INCI: Água, Glicerina, Lecitina, Cafeína, Extrato de Raiz de Gillbardeira (Ruscus Aculeatus), Maltodextrina, Sílica, Iodidrato de TEA (Trietanolamina), Glicol Propilênico, Extrato de Hera (Hedera Helix), Carnitina, Escina, Tripeptídeo-1, Goma Xantana, Carragenana (Chondrus Crispus), EDTA Dissódico] comercializado por Lipotec/Lubrizol, Iso-Slim Complex® [INCI: Isoflavonoides de Soja, Cafeína, Carnitina, Extrato de Spirulina Platensis, Polissorbato 80, Álcool, Fenoxietanol, Aqua], Happybelle-PE [INCI: Lecitina, Extrato de Vitex Agnus Castus, Glicerina, Tetraisopalmitato de Ascorbila, Tocoferol, Triglicerídeo Caprílico/Cáprico, Ciclodextrina, Álcool, Água] ou AmaraShape [INCI: Lecitina, Cafeína, Extrato de Citrus Aurantium Amara, Glicol Pentilênico, Álcool, Água] comercializado por Mibelle Biochemistry, Regu®-Slim [INCI: Maltodextrina, Cafeína, Extrato de Semente de Paullinia Cupana, Carnitina, Celulose Microcristalina, Ácido Cisteico, Sulfato de Panteína] ou Regu®- Shape [INCI: Ácido Linoleico Isomerizado, Lecitina, Glicerina, Polissorbato 80] comercializado por Pentapharm/DSM, Provislim™ [INCI: Propanodiol, Água (Aqua), Fisetina, Cetona de Framboeseira], Myriceline™ [INCI: Di- hidromiricetina] ou Drenalip™ [INCI: Extrato de Raiz de Ruscus Aculeatus, Extrato de Casca de Citrus Medica Limonum, Extrato de Solidago Virgaurea, Extrato de Raiz de Astragalus Membranaceus] comercializado por Provital, Actisculpt® [INCI: Extrato de Commiphora Myrrha, Extrato de Raiz de Coleus Forskohlii] comercializado por Givaudan, Perfeline® [INCI: Água, Carnitina, Cafeína, Extrato de Ruscus Aculeatus] ou CellActive® Shape [INCI: Fermento de Proteína de Chlorella Vulgaris/Lupinus Albus, Coleus Forskohlii, Cafeína] comercializado por Rahn, ProContour™ [INCI: Água, Álcool, Lecitina, Cafeína, Carnitina, Extrato de Folha de Centella Asiatica, Fosfato de Potássio, Extrato de Raiz de Coleus Forskohlii] comercializado por Rovi Cosmetics, Unislim™ [INCI: Extrato (de Folha) de Ilex Paraguariensis, Água, Glicol Butilênico, Extrato de Semente (Grão) de Coffea Arabica (Café), PEG-60-Glicerideos-de-Amendoeira, Glicerina, Cetil- Hidroxietilcelulose], Redulite™ [INCI: Glicerina, Aqua, Etoxidiglicol, Sambucus Nigra, Poli(acrilato de sódio)], Pleurimincyl™ [INCI: Cafeína, Extrato de Bupleurum Chinensis], Phytotal™ SL [INCI: Glicerina, Extrato de Verbena Officinalis, Glicol Butilênico, Extrato de Flor de Sambucus Nigra, Extrato de Flor de Eugenia Caryophyllus (Cravo Botão), Lecitina], Phytosonic™ [INCI: Aqua, Extrato de Euglena Gracilis, Cafeína, Extrato de Folha de Glaucium Flavum], Ovaliss™ [INCI: Glicerina, Aqua, Coco- glicosídeo, Glicol Caprilílico, Álcool, Glaucina], Lipocare™ [INCI: Cafeína, Coenzima A, Extrato de Bupleurum Chinensis], Cyclolipase™ [INCI: Poli(metacrilato de glicerila), Água, Cafeína, Lipase, Fosfato de Adenosina], Coaxel™ [INCI: Cafeína, Coenzima A, Carnitina, Água, Glicerina], Bodyfit™ [INCI: Glicerina, Aqua (Água), Coco-Glicosídeo, Glicol Caprilílico, Álcool, Glaucina] ou Vexel [INCI: Aqua, Glicol Propilênico, Lecitina, Cafeína, Palmitoil-Carnitina] comercializado por Sederma/Croda, Voluform™ [INCI: Palmitoil-Isoleucina], Adipoless™ [INCI: Glicol Butilênico, Extrato de Semente de Chenopodium Quinoa] comercializado por Seppic, Slimactive® [INCI: Extrato de Folha de Peumus Boldus], Remoduline® [INCI: Extrato de Folha de Citrus Aurantium Amara], Pro- Sveltyl® [INCI: Extrato de Nelumbium Speciosum], Biosculptine® [INCI: Extrato de Semente/Flor de Celosia Cristata Hidrolisado, Extrato de Prunella Vulgaris Hidrolisado], Affiness® [INCI: Extrato de Fruta de Coriandrum Sativum Hidrolisado, Extrato de Fruta de Citrus Aurantium Dulcis (Laranjeira)] ou Stemsvelt [INCI: Água, Glicol Butilênico, Silybum marinum extract] comercializado por Silab, Delipidol® [INCI: Punicato de Tirosila], Guaraslim® [INCI: Glicol Butilênico, Água, Cafeína, Extrato de Semente de Paullinia Cupana, Extrato de Casca de Ptychopetalum Olacoides] ou Caobromine® [INCI: Extrato de Casca de Theobroma Cocoa] comercializado por Solabia, Abdoliance [INCI: Palmitato de Sacarose, Polissorbato 20, Linolenato de Glicerila, Extrato de Semente de Paullinia Cupana, Maltodextrina, Óleo de Prunus Amygdalus Dulcis (Amêndoa Doce), Lecitina, Água, Extrato de Casca de Citrus Aurantium Amara (Laranja Amarga), Fenoxietanol, Tocoferol], Betafrolina [INCI: Extrato de Semente de Tephrosia Purpurea] ou PRO-DG [INCI: Água, Extrato de Plâncton] comercializado por Soliance, UCPeptídeo™ V [INCI: Água, Glicol Butilênico, Pentapeptídeo] ou ATPeptide™ IS [INCI: Tripeptídeo-3] comercializado por Vincience/ISP dentre outros, ou misturas dos mesmos.

[0047] Em uma modalidade, o agente firmador ou redensificador e/ou reestruturante é escolhido, por exemplo e não restrito aos, do grupo formado pelos extratos de Malpighia punicitolia, Cynara scolymus, Gossypium herbaceum, Aloe Barbadensis, Panicum miliaceum, Morus nigra, Sesamum indicum, Glycine soja, Triticum vulgare, Pronalen® Refirming HSC [INCI: Triticum Vulgare, Silybum Marianum, Glycine Soy, Equisetum Arvense, Alchemilla Vulgaris, Medicago Sativa, Raphanus Sativus] ou Polyplant® Refirming [INCI: Coneflower (planta norte-americana, de flores cônicas, dos gêneros Rudbeckia, Echinacea, Ratibida), Asiatic Centella, Fuco, Feno Grego] comercializado por Provital, Lanablue® [INCI: Sorbitol, Extrato de Algas] comercializado por Atrium Biotechnologies/Unipex Innovations, Pepha®-Nutrix [INCI: Fator de Nutrição Natural] comercializado por Pentapharm/DSM, extratos de plantas contendo isoflavonas, Biopeptide ELTM [INCI: Palmitoil-Oligopeptídeo], Biopeptide CLTM [INCI: Palmitoil- Oligopeptídeo], Vexel® [INCI: Água (Aqua), Glicol Propilênico, Lecitina, Cafeína, Palmitoil-Carnitina], Matrixyl® [INCI: Palmitoil-Pentapeptídeo-3], Matrixyl® 3000 [INCI: Palmitoil-Tetrapeptídeo-3, Palmitoil-Oligopeptídeo] ou Bio-BustylTM [INCI: Poli(metacrilato de glicerila), Fermento de Proteína de Soja pelo Micro-organismo Rahnella, Água (Aqua), Glicol Propilênico, Glicerina, PEG-8, Palmitoil-Oligopeptídeo] comercializado por Sederma/Croda, Dermosaccharides® HC [INCI: Glicerina, Água (Aqua), Glicosaminoglicanas, Glicogênio], Aglycal® [INCI: Manitol, Ciclodextrina, Glicogênio, Extrato de Folha de Aratostaphylos Uva Ursi], Cytokinol® LS [INCI: Caseína Hidrolisada, Proteína de Levedura Hidrolisada, Lisina-HCl] ou Firmiderm® LS9120 [INCI: Extrato de Folha de Terminalia Catappa, Extrato de Flor de Sambucus Negra, PVP, Ácido Tânico] comercializado por Laboratoires Serobiologiques/Cognis/BASF, Liftline® [INCI: Proteína de Trigo Hidrolisada], Raffermine® [INCI: Farinha de Soja Hidrolisada] ou Ridulisse C® [Proteína de Soja Hidrolisada] comercializado por Silab, Serilesine® [INCI: Hexapeptídeo-10], DecorinylTM [INCI: Tripeptídeo-10 Citrulina], Trylagen® [INCI: Extrato de Fermento de Pseudoalteromonas, Proteína de Trigo Hidrolisada, Proteína de Soja Hidrolisada, Tripeptídeo-10 Citrulina, Tripeptídeo-1], Silusyne™ [INCI: Óleo de Feijão-Soja (Glycine Soja), Sesquioleato de Sorbitano, Iso-hexadecano, Hialuronato de Sódio, Laurildimônio-Hidroxipropil-Proteína-de-Soja-Hidrolisada, Acetil- Hexapeptídeo-39], UplevityTM [INCI: Acetil-Tetrapeptídeo-2] ou Adifyline™[INCI: Acetil-Hexapeptídeo-38] comercializado por Lipotec/Lubrizol, Ursolisome® [INCI: Lecitina, Ácido Ursólico, Atelocolágeno, Goma Xantana, Condroitinassulfato de Sódio] ou Collalift® [INCI: Extrato de Malte Hidrolisado] comercializado por Coletica/Engelhard/BASF, Syn®-Coll [INCI: Palmitoil-Tripeptídeo-5] comercializado por Pentapharm/DSM, Hydriame® [INCI: Água (Aqua), Glicosaminoglicanas, Goma de Esclerócio] comercializado por Atrium Biotechnologies/Unipex Innovations ou IP2000 [INCI: Dextrana, Trifluoroacetil-Tripeptídeo-2] comercializado pelo “Institut Europeen de Biologie Cellulaire/Unipex Innovations”, dentre outros.

[0048] Em uma modalidade, o agente estimulante da síntese de macromoléculas dérmicas ou epidérmicas é escolhido, por exemplo e não restrito a, do grupo formado por agentes estimulantes da síntese de colágeno, agentes estimulantes da síntese de elastina, agentes estimulantes da síntese de decorina, agentes estimulantes da síntese de laminina, agentes estimulantes da síntese de chaperona, agentes estimulantes da síntese de sirtuína, agentes ativadores de sirtuína, agentes moduladores da síntese de aquaporina, agentes estimulantes da síntese de fibronectina, agentes que inibem a degradação de colágeno, agentes que inibem a degradação de elastina, agentes que inibem serina-proteases como calicreínas, catepsina G ou elastase de leucócito, agentes estimulantes da proliferação de fibroblastos, e agentes reparadores de DNA e/ou agentes protetores de DNA, como e não restritos aos extratos de Centella asiatica, Saccharomyces cerivisiae, Solanum tuberosum, Rosmarinus officinalis, Vaccinium angustifolium, extrato das algas Macrocystis pyrifera, Padina pavonica, extrato de soja, malte, linheiro, salva, trevo vermelho, kakkon, plantas tremoceiro branco, extrato de aveleira, extrato de milho, extrato de levedo, extratos de broto de faia, extrato de semente leguminosa, extrato de hormônios de plantas como giberelinas, auxinas ou citocininas, dentre outros, ou extrato de Zooplankton Salina, o produto de fermentação de leite com Lactobacillus Bulgaricus, asiaticosídeos e seus derivados, vitamina C e seus derivados, ácido cinâmico e seus derivados, Matrixyl® [INCI: Palmitoil-Pentapeptídeo-3], Matrixyl® 3000 [INCI: Palmitoil-Tetrapeptídeo-3, Palmitoil-Oligopeptídeo] ou Biopeptide CLTM [INCI: Poli(metacrilato de glicerila), Glicol Propilênico, Palmitoil- Oligopeptídeo] comercializado por Sederma/Croda, Antarcticine® [INCI: Extrato de Fermento de Pseudoalteromonas], Decorinyl® [INCI: Tripeptídeo-10 Citrulina], Serilesine® [INCI: Hexapeptídeo-10], Lipeptide [INCI: Proteína Vegetal Hidrolisada], Aldenine® [INCI: Proteína de Trigo Hidrolisada, Proteína de Soja Hidrolisada, Tripeptídeo-1], Relistase™ [INCI: Acetilarginiltriptofil-Difenilglicina], ThermostressineTM [INCI: Acetil- Tetrapeptídeo-22], Peptide AC29 [INCI: Acetil-Tripeptídeo-30 Citrulina], DiffuporineTM [INCI: Acetil-Hexapeptídeo-37], Silusyne™ [INCI: Óleo de Feijão-Soja (Glycine Soja), Sesquioleato de Sorbitano, Iso-hexadecano, Hialuronato de Sódio, Laurildimônio-Hidroxipropil-Proteína-de-Soja- Hidrolisada, Acetil-Hexapeptídeo-39], UplevityTM [INCI: Acetil- Tetrapeptídeo-2] ou Adifyline™[INCI: Acetil-Hexapeptídeo-38] comercializado por Lipotec/Lubrizol, Drieline® PF [INCI:Yeast Betaglucan] comercializado por Alban Muller, Phytovityl C® [INCI: Aqua, Extrato de Zea Mays] comercializado por Solabia, Collalift® [INCI: Extrato de Malte Hidrolisado] comercializado por Coletica/Engelhard/BASF, Phytocohesine PSPTM [INCI: Beta-Sitosterol-Sulfato de Sódio] comercializado por Vincience/ISP/Ashland, minerais como cálcio, dentre outros, retinoides e seus derivados, isoflavonoides, carotenoides, em particular licopeno, pseudodipeptídeos, retinoides e seus derivados como retinol ou palmitato de retinila, dentre outros, ou heparinoides, dentre outros.

[0049] Em uma modalidade, a agente antirruga e/ou antienvelhecimento é escolhido, por exemplo e não restrito aos, do grupo formado pelos extratos ou extratos hidrolisados de Vitis vinifera, Rosa canina, Curcuma longa, Theobroma cacao, Ginkgo biloba, Leontopodium alpinum ou Dunaliella salina dentre outros, Matrixyl® [INCI: Palmitoil-Pentapeptídeo- 4], Matrixyl® 3000® [INCI: Palmitoil-Tetrapeptídeo-7, Palmitoil- Oligopeptídeo], Matrixyl® Synthe’6™ [INCI: Glicerina, Água, Hidroxipropil-Ciclodextrina, Palmitoil-Tripeptídeo-38], Essenskin™ [INCI: hidroximetionina cálcica], Renovage [INCI: teprenona], Resistem™ [INCI: Fermento de Globularia Cordifolia] ou Dermaxyl® [INCI: Palmitoil- Oligopeptídeo] comercializado por Sederma/Croda, Vialox® [INCI: Pentapeptídeo-3], Syn® Ake® [INCI: Dipeptídeo-Diaminobutiroil- Benzilamida-Diacetato], Syn®-Coll [INCI: Palmitoil-Tripeptídeo-5], Fitaluronato [INCI: Goma de Alfarrobeira (Ceratonia siliqua)] ou Preregen® [INCI: Proteína de Glycine soja (Feijão-Soja), Óxido-Redutases] comercializado por Pentapharm/DSM, Myoxinol™ [INCI: Extrato de Hibiscus esculentus Hidrolisado], Syniorage™ [INCI: Acetil-Tetrapeptídeo- 11], Dermican™ [INCI: Acetil-Tetrapeptídeo-9] ou DN AGE™ LS [INCI: Extrato de Folha de Cassia alata] comercializado por Laboratoires Sérobiologiques/Cognis/BASF, Algisum C® [INCI: Manuronato de Metilsilanol] ou Hydroxyprolisilane CN® [INCI: Aspartato de Metilsilanol- Hidroxiprolina] comercializado por Exsymol, Argireline® [INCI: Acetil- Hexapeptídeo-8], SNAP-7 [INCI: Acetil-Heptapeptídeo-4], SNAP-8 [INCI: Acetil-Octapeptídeo-3], Leuphasyl® [INCI: Pentapeptídeo-18], Inyline™ [INCI: Acetil-Hexapeptídeo-30], Aldenine® [INCI: Proteína de Trigo Hidrolisada, Proteína de Soja Hidrolisada, Tripeptídeo-1], Preventhelia™ [INCI: Diaminopropionoil-Tripeptídeo-33], Decorinyl® [INCI: Tripeptídeo- 10 Citrulina], Decorinol® [INCI: Tripeptídeo-9 Citrulina], Trylagen® [INCI: Extrato de Fermento de Pseudoalteromonas, Proteína de Trigo Hidrolisada, Proteína de Soja Hidrolisada, Tripeptídeo-10 Citrulina, Tripeptídeo-1], Eyeseryl® [INCI: Acetil-Tetrapeptídeo-5], Peptide AC29 [INCI: Acetil- Tripeptídeo-30 Citrulina], Relistase™ [INCI: Acetilarginiltriptofil- Difenilglicina], Thermostressine® [INCI: Acetil-Tetrapeptídeo-22], Lipochroman™ [INCI: Dimetilmetoxi-Cromanol], Chromabright™ [INCI: Palmitato de Dimetilmetoxi-Cromanila], Antarcticine® [INCI: Extrato de Fermento de Pseudoalteromonas], dGlyage™ [INCI: Lisina-HCl, Lecitina, Tripeptídeo-9 Citrulina], Vilastene™ [INCI: Lisina-HCl, Lecitina, Tripeptídeo-10 Citrulina], Hyadisine™ [INCI: Extrato de Fermento de Pseudoalteromonas], Hyanify™ [INCI: Isomerato de Sacarídeos], Diffuporine™[INCI: Acetil-Hexapeptídeo-37], Silusyne™ [INCI: Óleo de Feijão-Soja (Glycine Soja), Sesquioleato de Sorbitano, Iso-hexadecano, Hialuronato de Sódio, Laurildimônio-Hidroxipropil-Proteína-de-Soja- Hidrolisada, Acetil-Hexapeptídeo-39], Adifyline™[INCI: Acetil- Hexapeptídeo-38], UplevityTM [INCI: Acetil-Tetrapeptídeo-2] ou JuvefoxoTM [INCI: Acetil-Hexapeptídeo-51-amida] comercializado por Lipotec/Lubrizol, Kollaren® [INCI: Tripeptídeo-1, Dextrana] comercializado por “Institut Europeen de Biologie Cellulaire”, Collaxyl® IS [INCI: Hexapeptídeo-9], Laminixyl IS™ [INCI: Heptapeptídeo], Orsirtine™ GL [INCI: Extrato de Oryza sativa (Arroz)], D’Orientine™ IS [INCI: Extrato de Semente de Phoenix dactylifera (Tamareira)], Phytoquintescine™ [INCI: Extrato de Trigo Selvagem (Triticum monococcum)] ou Quintescine™ IS [INCI: Dipeptídeo-4] comercializado por Vincience/ISP/Ashland, BONT-L-Peptídeo [INCI: Palmitoil-Hexapeptídeo-19] comercializado por Infinitec Activos, Deepaline™ PVB [INCI: Palmitoil-Proteína de Trigo Hidrolisada] ou Sepilift® DPHP [INCI: Dipalmitoil-Hidroxiprolina] comercializado por Seppic, Gatuline® Expression [INCI: Extrato de Acmella oleracea], Gatuline® In-Tense [INCI: Extrato de Flor de Spilanthes acmella] ou Gatuline® Age Defense 2 [INCI: Extrato de Semente de Juglans regia (Nogueira ou Nogueira Inglesa ou Nogueira-da-Pérsia)] comercializado por Gattefossé, Thalassine™ [INCI: Extrato de Algas] comercializado por Biotechmarine, ChroNOline™ [INCI: Caprooil-Tetrapeptídeo-3] ou Thymulen-4 [INCI: Acetil-Tetrapeptídeo-2] comercializado por Atrium/Unipex Innovations, EquiStat [INCI: Extrato de Fruta de Pyrus malus, Extrato de Semente de Glycine soja] ou Juvenesce [INCI: Etoxidiglicol e Triglicerídeo Caprílico, Retinol, Ácido Ursólico, Fitonadiona, Ilomastat] comercializado por Coletica/Engelhard/BASF, Ameliox [INCI: Carnosina, Tocoferol, Extrato de Fruta de Silybum marianum] ou PhytoCellTec Malus Domestica [INCI: Cultura de Células de Fruta de Malus domestica] comercializado por Mibelle Biochemistry, Bioxilift [INCI: Extrato de Pimpinella anisum] ou SMS Anti-Wrinkle® [INCI: Extrato de Semente de Annona squamosa] comercializado por Silab, antagonistas do canal de Ca2+ como e não restritos a, alverina, sais de manganês ou magnésio, determinadas aminas secundárias ou terciárias, retinol e seus derivados, idebenona e seus derivados, Coenzima Q10 e seus derivados, ácido bosvélico e seus derivados, GHK e seus derivados e/ou sais, carnosina e seus derivados, enzimas reparadoras de DNA como e não restritas às, fotoliase ou T4-endonuclease V, ou agonistas de canal de cloreto dentre outros, e/ou misturas dos mesmos.

[0050] Em uma modalidade, o agente estimulante de cicatrização, agente coadjuvante de cicatrização, agente estimulante de repitelização, agente coadjuvante de repitelização, é escolhido, por exemplo e não restrito aos, do grupo formado pelos extratos ou extratos hidrolisados de Aristoloquia clematis, Centella asiatica, Rosa moschata, Echinacea angustifolia, Symphytum officinal, Equisetum arvense, Hypericum perforatum, Mimosa tenuiflora, Persea gratísima, Prunus africanum, Tormentilla erecta, Aloe vera, Polyplant® Epithelizing [INCI: Calendula officinalis, Hypericum perforatum, Chamomilla recutita, Rosmarinus officinalis] comercializado por Provital, Cytokinol® LS 9028 [INCI: Caseína Hidrolisada, Proteína de Levedura Hidrolisada, Lisina-HCl] comercializado por Laboratories Sérobiologiques/Cognis o Deliner® [INCI: Extrato de grão de Zea mays (Milho)] comercializado por Coletica/Engelhard, alantoína, caderinas, integrinas, selectinas, receptores de ácido hialurônico, imunoglobulinas, fatores de crescimento de fibroblastos, fatores de crescimento de tecido conjuntivo, fatores de crescimento derivados de plaquetas, fatores de crescimento de endotélio vascular, fatores de crescimento epidérmico, fatores de crescimento semelhantes à insulina, fator de crescimento de queratinócitos, fator estimulante de colônia, fator-beta de crescimento transformante, fator- alfa de necrose tumoral, interferons, interleucinas, metaloproteinases da matriz, receptores de proteína tirosina-fosfatas, Antarcticine® [INCI: Extrato de Fermento de Pseudoalteromonas], Bodyfensine® [INCI: Amino-hexanoato de Acetil-Dipeptídeo-3] ou Decorinyl™ [INCI: Tripeptídeo-10 Citrulina], Trylagen® [INCI: Extrato de Fermento de Pseudoalteromonas, Proteína de Trigo Hidrolisada, Proteína de Soja Hidrolisada, Tripeptídeo 10 Citrulina, Tripeptídeo-1], XpertmoistTM [INCI: Glicerina, Extrato de Fermento de Pseudoalteromonas, Goma Xantana, Prolina, Alanina, Serina, Etil-hexil- Glicerina, Glicol Caprilílico], Serilesine® [INCI: Hexapeptídeo-10], DelisensTM [INCI: Acetil-Hexapeptídeo-49] ou ThermostressineTM [INCI: Acetil-Tetrapeptídeo-22], comercializado por Lipotec/Lubrizol, dentre outros, e/ou misturas dos mesmos.

Aplicações

[0051] Outros aspectos desta invenção referem-se ao uso do extrato de fermento de uma cepa da espécie Bacillus pumilus na preparação de composições cosméticas ou dermofarmacêuticas para aumentar os teores de adiponectina, aumentar a atividade mitocondrial em músculo, aumentar a resistência muscular, estimular a cicatrização de ferida e/ou a repitelização da pele, estimular a síntese de colágeno e/ou a síntese de ácido hialurônico, tratamento e/ou prevenção de envelhecimento da pele, tratamento e/ou prevenção de rugas da pele, tratamento para firmeza da pele e/ou prevenção de perda da firmeza da pele. Em uma modalidade, o teor adiponectina é o teor de adiponectina circulante. Em uma outra modalidade, o teor de adiponectina é o teor de adiponectina em adipócitos. Em uma modalidade, o aumento de atividade mitocondrial em músculo é um aumento do teor de ATP e/ou da atividade de citrato-sintase em músculo. Em outras modalidades, o aumento de resistência muscular é um aumento de resistência aeróbica. Em uma outra modalidade, o aumento de resistência aeróbica é um aumento na proporção de fibras de Tipo I em músculo. Em uma modalidade, a cepa da espécie Bacillus pumilus é uma cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202.

[0052] Um aspecto adicional desta invenção refere-se a um método de aumentar os teores de adiponectina, aumentar a atividade mitocondrial em músculo, aumentar a resistência muscular, estimular a cicatrização de ferida e/ou a repitelização da pele, estimular a síntese de colágeno e/ou síntese de ácido hialurônico, tratamento e/ou prevenção de envelhecimento da pele, tratamento e/ou prevenção de rugas da pele, tratamento de firmeza da pele e/ou prevenção de perda da firmeza da pele que compreende a administração de uma quantidade cosmética ou dermofarmaceuticamente efetiva do extrato de fermento de uma cepa da espécie Bacillus pumilus. Em uma modalidade, o teor de adiponectina é o teor de adiponectina circulante. Em uma outra modalidade, o teor de adiponectina é o teor de adiponectina em adipócitos. Em uma modalidade, o aumento de atividade mitocondrial em músculo é um aumento do teor de ATP e/ou da atividade de citrato-sintase em músculo. Em uma outra modalidade, o aumento de resistência muscular é um aumento de resistência aeróbica. Em uma outra modalidade, o aumento de resistência aeróbica é um aumento na proporção de fibras de Tipo I em músculo. Em uma modalidade, a cepa da espécie Bacillus pumilus é uma cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202. Em uma outra modalidade, o aumento de atividade mitocondrial em músculo, o aumento de resistência muscular, a estimulação de cicatrização de ferida e/ou de repitelização da pele são uma consequência do aumento do teor de adiponectina. Em uma outra modalidade, o tratamento e/ou prevenção de envelhecimento da pele, o tratamento e/ou prevenção de rugas da pele, tratamento de firmeza da pele e/ou a prevenção de perda da firmeza da pele são uma consequência da estimulação da síntese de colágeno.

[0053] Em uma modalidade, o aumento de teores de adiponectina causa um aumento na atividade mitocondrial em músculo, aumento de resistência muscular, estimulação de cicatrização de ferida e/ou repitelização da pele, estimulação de síntese de colágeno e/ou de síntese de ácido hialurônico, tratamento e/ou prevenção de envelhecimento da pele, tratamento e/ou prevenção de rugas da pele, tratamento de firmeza da pele e/ou prevenção de perda da firmeza da pele.

[0054] Em um outro aspecto, o extrato de fermento produzido por uma cepa da espécie Bacillus pumilus é administrado por qualquer meio que causa o contato do mesmo com o local de ação no ser humano, e com frequência, sob a forma de uma composição que o contém. A administração do extrato de fermento produzido por uma cepa da espécie Bacillus pumilus é realizado típica ou transdermicamente. Em uma modalidade, a aplicação tópica ou transdérmica é realizada por iontoforese, sonoforese, eletroporação, pressão mecânica, gradiente de pressão osmótica, cura oclusiva, microinjeções, por injeções sem agulha por meio de pressão, por emplastros microelétricos, máscaras faciais ou qualquer sua combinação.

[0055] A frequência da aplicação ou administração pode variar amplamente, dependendo das necessidades de cada indivíduo, sugerindo uma frequência de aplicação ou administração de uma vez por mês a 10 vezes por dia, de uma vez por semana a 4 vezes por dia, de três vezes por dia, de três vezes por semana a três vezes por dia, ou uma vez por dia.

DEPÓSITO DE MATERIAL BIOLÓGICO

[0056] A cepa da espécie Bacillus pumilus foi depositada na “Belgian Coordinated Collection of Microorganisms (BCCM)” / “Laboratorium voor Microbiologie-Bacterieverzameling (LMG)” (University Ghent, K.L. Ledeganckstraat 35, 9000 Ghent, Bélgica) sob as condições do Tratado de Budapeste. O depósito foi realizado em 11 de março de 2014 e o número de depósito foi LMG P-28202.

EXEMPLOS

[0057] Cada um dos documentos referidos acima é aqui incorporado como referência, incluindo quaisquer pedidos anteriores, sejam ou não especificamente listados acima, cuja prioridade é reivindicada. A menção de qualquer documento não é uma admissão de que tal documento qualifica-se como a técnica anterior ou constitui o conhecimento geral da pessoa versada em qualquer jurisdição. Exceto nos Exemplos, ou onde explicitamente indicado de outra maneira, todas as quantidades numéricas nesta descrição que especifica quantidades de materiais, condições de reação, pesos moleculares, números de átomos de carbono, e semelhantes, são para serem entendidas como aproximadas, isto é, sujeitas a uma variabilidade de ± 5%, ± 3%, ± 1%, ± 0,1%, ou ± 0,01% sobre o valor indicado. É para ser entendido que os limites de razão, a faixa, a quantidade superior(es) e inferior(es) aqui apresentados (apresentadas) podem ser independentemente combinados (combinadas). Similarmente, as faixas e quantidades de cada elemento da terminologia aqui descrita podem ser usadas juntas com faixas ou quantidades de qualquer um dentre os outros elementos. Exemplo 1: Obtenção do extrato de fermento de uma cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202. A) Processo de cultura da cepa de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202.

[0058] A cepa de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P28202 é cultivada em um biorreator, a 25°C e um pH de 8,0, em um meio de cultura contendo água, 1 g/L de extrato de levedo e 4 g/L de peptona como fontes de carbono e de nitrogênio, 20 g/L de glicose como fonte de carbono adicional, e sais marinhos em uma concentração de 31 g/L. É inoculado a partir de uma pré-cultura de crescimento exponencial em uma densidade óptica de 0,2 UA em comprimento de onda de 600 nm. A fermentação é prolongada até 72 horas de cultura. A concentração de oxigênio dissolvido é controlada a 30% de ar saturado e a agitação é mantida em valores de cerca de 200 rpm. B) Purificação do extrato de fermento obtido da cepa de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202.

[0059] As bactérias são separadas do caldo de fermentação resultante descrito no exemplo 1a) contendo o extrato de fermento por centrifugação contínua com uma centrífuga Westfalia CSA-1, funcionando a 10.000rpm. A remoção de bactérias é completada por filtração em um tamanho de poro final de0,2 μm. Subsequentemente o sobrenadante resultante contendo o extrato de fermento é secado por congelamento. Exemplo 2: Caracterização físico-química do extrato de fermento da cepa de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202.

[0060] Para a caracterização físico-química do extrato de fermento de uma cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P28202, obtida de acordo com o exemplo 1, são realizados ensaios via Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC, High Performance Liquid Chromatography), de aminas primárias (teste com Ninhidrina), aminas secundárias (ensaio com Cloranil), carboidrato (Fehling), e fenol (Folin- Ciocalteau). Análise cromatográfica via SE-HPLC-UV

[0061] Uma solução do extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1 em água:glicerina (9:95) a 7 mg/mL é preparada e analisada por HPLC-UV. Uma diluição 1:5 com água é realizada previamente e filtrada através de um filtro de acetato de celulose de 0,22 μm. 100 μL são injetados em um Cromatógrafo Líquido de Alta Eficiência (HPLC) LC20A SHIMADZU. A coluna cromatográfica usada é TSKGel G2000SWXL, 5m, 125Â, 7,8mm x 30mm (TOSOH Bioscience) e água com 0,1M [sic] pH=6,70 + agente tamponante fosfato 0,1M + sulfato de sódio 0,1M como eluente.

[0062] Sob estas condições, o cromatograma do produto mostra picos entre 10 minutos e 15 minutos, com um pico médio a 11 minutos, entre os tempos de retenção dos padrões ácido aminobenzoico (PM=137 Da) e Ribonuclease A de pâncreas bovino (PM=13.700 Da). Aminas primárias (ensaio com Ninhidrina)

[0063] Reagentes: Reagente Ninhidrina A: 40 g de fenol são dissolvidos em 10 mL de etanol absoluto. Em paralelo, 56 mg de KCN são dissolvidos 100 mL de água. 2 mL desta solução são dissolvidos em 100 mL de piridina destilada através de ninhidrina. Ambas as soluções são misturadas com 4g de Amberlite MB-3 durante 45 minutos. Finalmente, a solução é filtrada através de papel e então misturada. Reagente Ninhidrina B: 2,5 mg de ninhidrina são dissolvidos em 50 mL de etanol absoluto.

[0064] Método: 0,5 mL de uma solução aquosa 1 mg/mL do extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1 é adicionado a um tubo de 2 mL. Então 3 gotas de Reagente Ninhidrina A e 1 gota de Reagente Ninhidrina B são adicionados ao tubo. Então, ele é mantido a 110°C durante 2 minutos. O produto analisado mostra cor amarela, indicando, portanto, que aminas primárias não são detectadas. Após hidrólise ácida durante 4 horas com solução de TFA 4M, o teste com Ninhidrina é repetido, obtendo-se um resultado positivo, que o extrato de fermento contém aminoácidos sob forma peptídica. Aminas secundárias (ensaio com Cloranil)

[0065] Reagentes: Acetona, e Reagente de Reação Cloranil: 0,75 g de cloranil (2,3,5,6-tetracloro-1,4-benzoquinona) é dissolvido em 25 mL de tolueno com o propósito de obter uma solução saturada.

[0066] Método: 4 gotas de acetona são adicionadas a 20 mg de um extrato de fermento, seco por congelamento, obtido de acordo com o exemplo 1. Então, 1 gota de Reagente de Reação Cloranil é adicionada. Esta mistura é agitada e mantida à temperatura ambiente durante 5 minutos. O produto analisado não descreveu coloração verde-azul, indicando, portanto, que não são detectadas aminas secundárias no extrato de fermento. Análise de carboidrato (ensaio de Fehling)

[0067] Reagentes: Fehling A: 48,3g de sulfato de cobre (II) em 1 L de água com 1 mL de ácido sulfúrico 96%. Fehling B: 90 g de hidróxido de sódio com 300 g de tartarato de potássio e sódio em 1 L de água.

[0068] Método: 1 mL de reagente Fehling A e 1 mL de reagente Fehling B são adicionados a 10 mg do extrato de fermento obtido de acordo com the exemplo 1, e a amostra é aquecida a 60°C durante 45-60 min. Um precipitado sólido vermelho indica a presença de carboidratos redutores no extrato de fermento. Ensaio de fenol (Ensaio de Folin-Ciocalteau)

[0069] Reagentes: Reagente de Folin-Ciocalteau (da Sigma-Aldrich; Ref. 47641); Na2CO3 (da Panreac) e Metanol (da Scharlab).

[0070] Método: A um tubo de 10 mL são adicionados os seguintes reagentes: 0,5 mL de uma solução aquosa a 1 mg/mL do extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1, 0,5 mL de reagente de Folin-Ciocalteau, 1,5 mL de Na2CO3 20% e 7 mL de Metanol:Água (1:1). Esta solução é mantida no escuro durante 1 hora. Uma solução igual é preparada como um branco sem o extrato de fermento (substituído por água). Resultado negativo, solução incolor indica que fenóis não são detectados no extrato de fermento. Exemplo 3: Preparação de um creme cosmético compreendendo o extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202.

[0071] Em um recipiente apropriado, água [INCI: ÁGUA (AQUA)], sorbato de potássio [INCI: SORBATO DE POTÁSSIO], e EDTA Dissódico [INCI: EDTA DISSÓDICO] são misturados e agitados até solubilização ser alcançada. A seguir, Carbopol Ultrez 20 [INCI: CARBÔMERO] é adicionado e agitado para dispersão total. Depois, Goma Xantana [INCI: GOMA XANTANA], é adicionada e também agitada até dispersão total. Esta mistura de ingredientes constitui a fase A.

[0072] Os ingredientes de fase B Hydrolite-5 2/016020 [INCI: GLICOL PENTILÊNICO], Zemea [INCI: PROPANODIOL], e Fenoxietanol [INCI: FENOXIETANOL], são adicionados, um de cada vez, à mistura da fase A, sob agitação.

[0073] A fase C, que compreendeu Cyclohexasiloxane BRB CM60 [INCI: CICLO-HEXASILOXANO] é adicionada à mistura de fase A e fase B, agitando até homogeneização.

[0074] O ingrediente da fase D Schercemol 1818 [INCI: ESTEARATO DE ISOESTARILA] é adicionado à mistura prévia sob agitação, até que seja totalmente incorporado à mistura

[0075] A fase E compreende o extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1 da cepa de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202, Glicerina [INCI: GLICERINA], água [INCI: ÁGUA (AQUA)]. Esta fase é adicionada à mistura das fases A, B, C e D sob agitação até solubilização.

[0076] Igualmente, o ingrediente da fase F Diffuporine [INCI: ACETIL-HEXAPEPTÍDEO-37, GLICOL BUTILÊNICO, ÁGUA (AQUA)] é adicionado à mistura prévia até solubilização.

[0077] A fase G ingrediente álcool etílico [INCI: ÁLCOOL DESNATURADO] é adicionada sob agitação.

[0078] Subsequentemente, o perfume Coquetel de Vitaminas [sic] [INCI: FRAGRÂNCIA (PERFUME)] (fase H) é adicionado sob agitação.

[0079] O pH é ajustado para 6,0-6,5 pela adição de hidróxido de sódio [INCI: HIDRÓXIDO DE SÓDIO] (q.s. quantidade suficiente para ajustar para este pH) sob agitação (fase I), obtendo uma composição cosmética com as proporções mostradas na tabela 1.

Exemplo 4: Preparação de uma composição de creme cosmético compreendendo o extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202.

[0080] Em um recipiente apropriado, água [INCI: ÁGUA (AQUA)], Hydrolite-5 [INCI: GLICOL PENTILÊNICO], Glicerina [INCI: GLICERINA], Betain BP [INCI: BETAÍNA], e Microcare BNA [INCI: ÁLCOOIL BENZÍLICO] são misturados e agitados até solubilização. Subsequentemente, Carbopol Ultrez 10 [INCI: CARBÔMERO] é adicionado e agitado até dispersão. Então, Arlatone MAP 160K [INCI: FOSFATO DE CETILA E POTÁSSIO] é adicionado até sua dispersão total. Esta mistura de ingredientes constitui a fase A.

[0081] A seguir, os ingredientes da fase B álcool cetílico [INCI: ÁLCOOL CETÍLICO], Finsolv TN [INCI: BENZOATO DE ALQUILA C12C15], Massocare HD [INCI: ISO-HEXADECANO], Polissorbato 20 [INCI: POLISSORBATO 20], ácido esteárico [INCI: ÁCIDO ESTEÁRICO] e Fenoxietanol [INCI: FENOXIETANOL] são misturados e aquecidos para 70°C.

[0082] As fases A e B são misturadas a 70°C sob agitação.

[0083] Então, a mistura de A e B é esfriada para 40°C, o ingrediente da fase C Silicone DC 345 fluid® [INCI: CICLOMETICONA] é adicionado nesta temperatura e agitado até a homogeneização total da mistura.

[0084] O ingrediente da Fase D, compreendendo o extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202 obtido de acordo com o exemplo 1, Glicerina [INCI: GLICERINA] e água [INCI: ÁGUA (AQUA)], são adicionados sob agitação até homogeneização.

[0085] Subsequentemente, o perfume [INCI: FRAGRÂNCIA (PERFUME)] (fase E) é adicionado sob agitação. O pH é ajustado para 6,06,5 pela adição de hidróxido de sódio [INCI: HIDRÓXIDO DE SÓDIO] (q.s. quantidade suficiente para ajustar para este pH) sob agitação (fase F), obtendo uma composição cosmética com as proporções mostradas na tabela 2.

Exemplo 5: Preparação de uma microemulsão compreendendo o extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202.

[0086] Em um recipiente apropriado, Docusato de Sódio USP [INCI: DI(ETIL-HEXIL)-SULFOSSUCINATO DE SÓDIO] e ácido isoesteárico [INCI: ÁCIDO ISOESTEÁRICO] são misturados (fase A).

[0087] Em outro recipiente, uma mistura compreendendo o extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202 obtido de acordo com o exemplo 1, Glicerina [INCI: GLICERINA], e água [INCI: ÁGUA (AQUA)], é dissolvida em etanol [INCI: ÁLCOOL] (fase B). Lentamente, a fase B é adicionada à fase A sob agitação. Consulte a tabela 3.

Exemplo 6: Preparação de uma composição de nanopartícula lipídica compreendendo a microemulsão do exemplo 5

[0088] Água [INCI: ÁGUA (AQUA)], Amigel® [INCI: Goma de Esclerócio], ZemeaTM [INCI: PROPANODIOL], ZEMEA [INCI: PROPANODIOL], e Fenoxietanol [INCI: FENOXIETANOL] (ingredientes da fase A) são adicionados naquela ordem a um recipiente apropriado e agitados até ser alcançada homogeneidade.

[0089] A mistura compreendendo a microemulsão do exemplo 5, óleo de feijão-soja refinado IP Ph. Eur. (Farmacopeia Europeia) [INCI: ÓLEO DE GLYCINE SOJA (FEIJÃO-SOJA)], Arlacel 83 [INCI: SESQUIOLEATO DE SORBITANO], e Arlamol HD [INCI: ISO-HEXADECANO] (ingredientes da fase B) é adicionada a outro recipiente.

[0090] Então, a mistura dos ingredientes da fase B é adicionada à mistura dos ingredientes da fase A sob agitação com turbina até que uma emulsão seja formada. Subsequentemente, a mistura é homogeneizada com uma sonda de titânio durante um minuto.

[0091] Então, em gotas e sob agitação, uma suspensão aquosa [INCI: ÁGUA (AQUA)] de SENSOMER™ CT-400 [INCI: POLÍMERO MULTIFUNCIONAL DE GALACTOMANANA COM GRUPOS CLORETO DE HIDROXIPROPILTRIMÔNIO NATURALMENTE DERIVADO DE PLANTA CÁSSIA] é adicionada (INGREDIENTES da fase C). Consulte a tabela 4.

Exemplo 7: Preparação de lipossomas compreendendo o extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202

[0092] Em um recipiente apropriado, água [INCI: ÁGUA (AQUA)], ZemeaTM [INCI: PROPANODIOL] e Fenoxietanol [INCI: FENOXIETANOL] (fases B a D) são adicionados a uma mistura de fases, que compreendia o extrato de fermento da cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202 obtido de acordo com o exemplo 1, Glicerina [INCI: GLICERINA], e água [INCI: ÁGUA (AQUA)].

[0093] Quando todos os componentes prévios estão dissolvidos, Leciflor 100 IP [INCI: LECITINA] (fase E) é adicionado, pouco a pouco e sob agitação intensa, até solubilização completa. Então, Labrasol [INCI: PEG- 8-GLICERÍDEOS CAPRÍLICO/ CÁPRICO] (fase F) é adicionado e agitado durante 10-15 minutos para formar uma emulsão. A composição finalmente obtida é mostrada na tabela 5.

[0094] A amostra é homogeneizada com uma sonda de titânio durante 30 segundos. Exemplo 8: Preparação de lipossomas de exemplo 7 ligados a polímeros catiônicos

[0095] Os lipossomas obtidos no exemplo 7 são adicionados ao SENSOMER™ CT-50 [INCI: ÁGUA (AQUA), CLORETO DE AMIDO- HIDROXIPROPILTRIMÔNIO, UREIA, LACTATO DE SÓDIO, CLORETO DE SÓDIO, BENZOATO DE SÓDIO] em um razão de lipossomas:polímero catiônico de 95:5 sob agitação lenta. Exemplo 9: Estudo do aumento relativo no teor de adiponectina dos pré- adipócitos primários subcutâneos humanos por um ensaio ELISA (“Enzyme-Linked Immunosorbent Assay”, Ensaio Imunoabsorvente Ligado à Enzima) colorimétrico

[0096] O aumento relativo no teor de proteína adiponectina é determinado em adipócitos primários humanos após tratamento com o extrato de fermento de uma cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202 obtido de acordo com o exemplo 1 em Meio de Diferenciação de Adipócitos. Células apenas tratadas com Meio de Diferenciação de Adipócitos são usadas como controle basal.

[0097] Adipócitos humanos são inoculados (10.000 células/poço, 3 poços per condição) em placas transparentes de 96 poços em Meio de Crescimento de Pré-Adipócitos e as células são incubadas durante 24 horas a 37°C em uma atmosfera saturada com água de 95% de ar e 5% de CO2. Após incubação, o meio é removido e as células são incubadas com o extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1 a 5 μg/mL em Meio de Diferenciação de Adipócitos com o propósito de induzir a diferenciação de pré-adipócitos em adipócitos (8 dias a 37°C e 5% de CO2). Então, os sobrenadantes da cultura são colhidos, a quantidade de adiponectina liberada é determinada por ELISA, o número de células total por poço é quantificado pelo ensaio de coloração com Cristal Violeta. Os resultados de ELISA são normalizados com o número total de células para a condição de tratamento e o aumento relativo no teor de proteína adiponectina é calculado com respeito ao controle basal. Quantificação de teores de adiponectina por ELISA

[0098] Um kit de Ensaio ELISA para Adiponectina é usado seguindo as instruções do fabricante (R&D Systems). Resumidamente, os sobrenadantes de cultura são incubados em uma placa de microtitulação pré-revestida com um anticorpo de captura de adiponectina. Depois, os poços são incubados com outro anticorpo específico para detecção de adiponectina conjugado com biotina. Então, Estreptavidina-HRP (enzima HorseRadish Peroxidase (HRP), Peroxidase de Rábano conjugada com Estreptavidina) é adicionada à placa. Finalmente, o substrato TMB (Tetrametilbenzidina) é adicionado e uma alteração de cor é desenvolvida, diretamente proporcional à quantidade de adiponectina presente na dose testada. A reação é interrompida com uma solução de ácido sulfúrico e a absorbância é lida em um Leitor de Absorbância em Placa de Microtitulação (Microplate Absorbance Reader, Multiskan-Thermo Electro Corporation) a 450 nm com correção de comprimento de onda a 570 nm. Determinação do número total de células pelo ensaio de coloração com Cristal Violeta

[0099] Placas contendo células (após os sobrenadantes serem colhidos para o ensaio ELISA) são incubadas com solução de Cristal Violeta. DNA das células é corado pela solução de corante Cristal Violeta. Depois, a solução de Cristal Violeta é removida e os poços são lavados com água Milli-Q. A quantidade de corante Cristal Violeta absorvida pelas células é diretamente proporcional ao número de células em cada poço. Finalmente, quando as células estão secas, uma solução de HCl é adicionada e a absorbância é lida a 630 nm em um Leitor de Absorbância em Placa de Microtitulação (Microplate Absorbance Reader, Multiskan-Thermo Electro Corporation). Os resultados de ELISA são normalizados com o número total de células para a dose testada, e o aumento relativo no teor de proteína adiponectina é calculado com respeito ao controle basal, tabela 6.

[00100] O resultado mostra que o extrato de fermento de uma cepa da espécie Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202 obtido de acordo com o exemplo 1 aumenta o teor relativo de adiponectina em culturas de células de adipócitos humanos na dose testada. Exemplo 10: Estudo do aumento relativo da expressão de proteína miosina em células de músculo esquelético humanas por imunofluorescência

[00101] A expressão da Cadeia Pesada 7 da Miosina de Fibras Musculares Esqueléticas de Tipo I de Lenta Contração Espasmódica Momentânea (MYH7, Slow Skeletal Myosin Heavy Chain 7) é estudada em células de músculo esquelético humanas tratadas com sobrenadante de uma cultura de adipócitos após o tratamento com o extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1 em Meio de Diferenciação de Adipócitos. As células de músculo esquelético humanas tratadas com sobrenadantes de uma cultura de adipócitos não tratada com extrato de fermento são usadas como controle basal.

[00102] As células de músculo esquelético humanas são inoculadas (10.000 células/poço, 2 poços por cada dose testada) em placa transparente de 12 poços com cobertura de vidro pré-revestidas com revestimento de Matriz em “Muscle Cellutions Growth Medium” [meio para crescimento e expansão ótimos de células progenitoras de músculo esquelético humanas (mioblastos) em qualquer estágio de desenvolvimento] e as células são incubadas durante 48h. Após 24h, o processo de diferenciação é iniciado pela adição de Muscle Cellutions Differentiation Medium.

[00103] Após 10 dias de diferenciação, o meio é removido e as células são tratadas durante 48h a 37°C em uma atmosfera com 5% de CO2 com os sobrenadantes de uma cultura de adipócitos que tem sido tratada durante 8 dias com o extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1 (5 μg/mL em Meio de Diferenciação de Adipócitos). A quantidade de adiponectina em sobrenadantes de cultura de adipócitos é determinada por um teste via ELISA usando anticorpos específicos. Determinação da expressão de proteína miosina

[00104] Após o tratamento, as células são lavadas com solução salina tamponada com fosfato (PBS, Phosphate Buffer Saline) e fixadas com Paraformaldeído (PFA) 4%. Após esta etapa, as células são incubadas com um anticorpo monoclonal primário de camundongo para anticorpo Anti- Cadeia Pesada 7 da Miosina de Fibras Musculares Esqueléticas de Tipo I de Lenta Contração Espasmódica Momentânea (MYH7, Slow Skeletal Myosin Heavy Chain 7) de um dia para outro a 4°C. No dia seguinte, as células são lavadas com PBS, e anticorpo secundário de cabra Alexa Fluor® 594 anti-IgG (H+L) de camundongo (corante de emissão de fluorescência vermelha) é incubado com seus anticorpos primários durante 1 h no escuro. Então, as células são coradas com DAPI (4’,6-DiAmino-2-PhenylIndole, 4’,6-diamino- 2-fenilindol) e montadas no escuro.

[00105] As células são observadas usando um microscópio de fluorescência Zeiss e as imagens são capturadas utilizando o programa de computador Zen. Para verificar se o número de células em todas as doses testadas é sobreponível, os núcleos são revelados com coloração por DAPI e 10 imagens representativas de cada dose testada são coletadas. A partir de cada imagem de fluorescência de miosina, os valores de DI (Densidade Integrada) são quantificados. É usado o programa de computador ImageJ. Dois ensaios independentes em duplicata são realizados. O aumento relativo em teor de miosina é normalizado com respeito ao controle basal, tabela 7.

[00106] Os resultados obtidos mostram que os sobrenadantes de culturas de adipócitos contendo teores altos de adiponectina após o tratamento com o extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1 a 5 μg/mL são capazes de aumentar os teores de proteína Miosina em até 69,78% com respeito ao controle basal. Exemplo 11: Estudo do aumento relativo na atividade de citrato-sintase em células de músculo esquelético humanas primárias tratadas com uma cultura de adipócitos contendo adiponectina

[00107] O aumento relativo na atividade de citrato-sintase é determinado em células de músculo esquelético humanas tratadas com sobrenadante de uma cultura de adipócitos após o tratamento com o extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1 em Meio de Diferenciação de Adipócitos. Células de músculo esquelético humanas tratadas com um sobrenadante de uma cultura de adipócitos não tratada com o extrato de fermento são usadas como controle basal.

[00108] As células de músculo esquelético humanas são inoculadas (200.000 células/poço, 2 poços por dose testada) em placas transparentes de 6 poços em Muscle Cellutions Differentiation Medium e as células são incubadas durante 48 horas a 37°C em uma atmosfera saturada com água de 95% de ar e 5% de CO2. Então, o processo de diferenciação é iniciado pela adição de Muscle Cellutions Differentiation Medium. Após 72 horas de diferenciação, o meio é removido e as células são incubadas com sobrenadantes de uma cultura de adipócitos contendo um teor alto de adiponectina, previamente determinado por ELISA, após 8 dias de tratamento com extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1 (5 μg/mL em Meio de Diferenciação de Adipócitos). Após 48 horas de tratamento a 37°C em uma incubadora com CO2, as células de músculo esquelético humanas são lisadas e o teor total de proteína delas é determinado pelo ensaio com BCA (BiCinchoninic Acid, Ácido Bicincônico). Todos os lisados são diluídos para a mesma concentração total de proteína determinada pelo ensaio com BCA, e o aumento relativo na atividade de citrato-sintase é quantificado com respeito ao controle basal. Determinação de proteína total pelo ensaio com BCA

[00109] Um kit de ensaio com BCA é usado seguindo as instruções do fabricante (Thermo Scientific). A concentração total de proteína dos lisados de célula de músculo esquelético humana é determinada por uma reação colorimétrica utilizando um padrão de Albumina de Soro Bovino (BSA, Bovine Serum Albumin). Resumidamente, padrões e amostras são dispensados em uma placa transparente de 96 poços. Após a incubação com o reagente de trabalho, a absorbância é medida a 570 nm em um Leitor de Absorbância em Placa de Microtitulação (Microplate Absorbance Reader, Multiskan-Thermo Electro Corporation). Medição da atividade de citrato-sintase

[00110] Um kit de ensaio de citrato-sintase é usado seguindo as instruções do fabricante (Sigma). Resumidamente, lisados de célula são incubados em uma placa transparente de 96 poços com uma mistura de reação contendo acetil-Coenzima A e DTNB (5,5'-DiThiobis-(2-NitroBenzoic acid), ácido 5,5’-ditiobis(2-nitrobenzoico)). Então, oxaloacetato, que é um substrato de citrato-sintase, é adicionado e uma cor é desenvolvida, diretamente proporcional à atividade de citrato-sintase na dose testada. A absorbância é lida em um Leitor de Absorbância em Placa de Microtitulação (Microplate Absorbance Reader, Multiskan-Thermo Electro Corporation) a 405 nm. O aumento relativo de atividade de citrato-sintase é normalizado com respeito ao controle basal, Tabela 8.

[00111] Os resultados mostram que a substância extracelular bacteriana obtida da cepa Bacillus sp. com número de depósito LMG P-28202 obtida de acordo com o exemplo 1 é capaz de aumentar a atividade relativa de citrato- sintase em células de músculo esquelético humanas na dose testada. Exemplo 12: Estudo do aumento relativo na produção de ATP em células de músculo esquelético primárias humanas tratadas com sobrenadantes de uma cultura de adipócitos contendo adiponectina

[00112] O aumento relativo na produção de ATP é determinado em células de músculo esquelético humanas tratadas com o sobrenadante de uma cultura de adipócito após tratamento com o extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1 em Meio de Diferenciação de Adipócitos. Células de músculo esquelético humanas tratadas com um sobrenadante de uma cultura de adipócitos não tratada com o extrato de fermento são usadas como controle basal.

[00113] Células de músculo esquelético humanas são inoculadas (200.000 células/poço, 2 poços por dose testada) em placas transparentes de 6 poços em Muscle Cellutions Growth Medium e as células são incubadas durante 48 horas a 37°C em uma atmosfera saturada com água de 95% de ar e 5% de CO2. Então, o processo de diferenciação é iniciado pela adição de Muscle Cellutions Differentiation Medium. Após 72 horas de diferenciação, o meio é removido e as células são incubadas com sobrenadantes de uma cultura de adipócitos contendo um teor alto de adiponectina, previamente determinado por ELISA, após 8 dias de tratamento com extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1 (5 μg/ml em Meio de Diferenciação de Adipócitos). Após 48 horas de tratamento a 37°C em uma incubadora com CO2, as células de músculo esquelético humanas são lisadas e o ATP produzido é quantificado por um kit de ensaio específico e o teor total de proteína é determinado por BCA. Os resultados de ATP são normalizados com a concentração total de proteína para a dose testada, e o aumento relativo em ATP produzido é quantificado com respeito ao controle basal. Medição de produção de ATP

[00114] Um kit para ensaio de ATP é usado seguindo as instruções do fabricante (Abcam). Resumidamente, os lisados celulares são incubados em uma placa transparente de 96 poços com uma mistura de reação contendo ATP Probe, ATP Converter, Developer Mix e ATP Assay Buffer para gerar um produto que é quantificado por fluorescência com um Leitor de Fluorescência em Placa Automatizado (Automated Plate Fluorescence Reader, Clariostar- BMG) ajustado para excitação a 530 nm e detecção a 590 nm. Determinação de proteína total pelo ensaio com BCA

[00115] Um kit para ensaio com BCA é usado seguindo as instruções do fabricante (Thermo Scientific). A concentração total de proteína dos lisados de célula de músculo esquelético humana é determinada por uma reação colorimétrica utilizando um padrão de Albumina de Soro Bovino (BSA). Resumidamente, padrões e amostras são dispensados em uma placa transparente de 96 poços. Após a incubação com o reagente de trabalho, a absorbância é medida a 570 nm em um Leitor de Absorbância em Placa de Microtitulação (Microplate Absorbance Reader, Clariostar-BMG). Os resultados de ATP são normalizados com a concentração total de proteína para a dose testada, e o aumento relativo em ATP produzido é quantificado com respeito ao controle basal, Tabela 9.

[00116] Os resultados mostram que a substância extracelular bacteriana obtida da cepa Bacillus sp. com número de depósito LMG P-28202 obtida de acordo com o exemplo 1 é capaz de aumentar a produção de ATP em células de músculo esquelético humanas na dose testada. Exemplo 13: Estudo do perfil da expressão genética de pré-adipócitos subcutâneos primários humanos

[00117] Pré-adipócitos subcutâneos humanos são inoculados em uma densidade de 130.000 células/poço em placas de 12 poços em PGM-2 (Meio Basal PBM-2 suplementado com 10% de FBS, 2 mM de L-Glutamina e 100 unidades/mL de gentamicina/anfotericina) e as células são incubadas durante 24 horas a 37°C em uma atmosfera saturada com água de 95% de ar e 5% de CO2.

[00118] Após 24h, o meio é removido e as células são incubadas durante 8 dias a 37°C em uma incubadora com CO2 com o extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1 a 14 μg/mL em meio de diferenciação PDM-2 (PGM-2 suplementado com insulina, dexametasona, indometacina e IBMX) ou apenas com PDM-2 (controle basal). O extrato de fermento obtido de acordo com o exemplo 1 e o controle basal são testados em 4 réplicas biológicas 4 (poços).

[00119] Então, as células são lisadas e o RNA é extraído e purificado de cada réplica e cada dose testada por meio do RNeasyPlus Mini kit da Qiagen. Os lisados celulares são homogeneizados e as RNases são inativadas. O DNA genômico é removido das amostras pelo uso de colunas gDNA Eliminator spin do RNeasyPlus Mini kit. Então, as amostras são passadas através das colunas de ligação de RNA especiais do RNeasyPlus Mini kit e após várias lavagens por microcentrifugação, o RNA purificado é eluído com 50 μL de água ultrapura.

[00120] A pureza, a integridade e a concentração do RNA obtido são avaliadas por meio de espectrofotometria (Nanodrop) e com um bioanalisador (Agilent Bioanalyzer). Mais tarde, as amostras são marcadas e hibridizadas em um microarranjo de expressão de gene de humano (ASurePrint G3, Agilent).

[00121] Os valores normalizados obtidos para a dose testada são comparados com os valores normalizados obtidos para o controle basal para determinar os genes com expressão diferencial. A seguir, uma análise paramétrica dos dados é realizada por meio do programa de computador Bioconductor.

[00122] Os valores obtidos são então avaliados por meio de GSEA (Gene Set Analysis Enrichment) para agrupar juntos os genes com expressão diferencial em termos de Vias Biológicas e Ontologia de Gene. Os resultados obtidos são mostrados na tabela 10.

[00123] Embora determinadas modalidades representativas e detalhes tenham sido mostrados para os propósitos de ilustração da presente invenção, será evidente para aquelas pessoas versadas nesta técnica que várias alterações e modificações podem ser feitas na mesma sem se desviarem do escopo da presente invenção. Sob esse aspecto, o escopo da invenção é apenas limitado pelas reivindicações em anexo.

Claims (17)

1. Uso de um sobrenadante de culturas de uma cepa de espécies de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202, caracterizado pelo fato de que é para preparar um medicamento para estimulação de cicatrização de ferida, em que o dito sobrenadante de culturas contém material peptídico e glicídico tendo um peso molecular menor que 7.000 Da.

2. Uso de um sobrenadante de culturas de uma cepa de espécies de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202, caracterizado pelo fato de que é para preparar um agente anti-inflamatório para tratamento da pele, em que o dito sobrenadante de culturas contém material peptídico e glicídico tendo um peso molecular menor que 7.000 Da.

3. Uso de um sobrenadante de culturas de uma cepa de espécies de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202, caracterizado pelo fato de que é para o aumento cosmético, não terapêutico do nível adiponectina em adipócitos, estimulação cosmética, não terapêutica da síntese de colágeno na pele, tratamento cosmético, não terapêutico e/ou prevenção de envelhecimento da pele, tratamento cosmético, não terapêutico e/ou prevenção de rugas da pele, tratamento cosmético, não terapêutico de endurecimento da pele e/ou para a prevenção cosmética, não terapêutica de perda de firmeza da pele, em que o dito sobrenadante de culturas contém material peptídico e glicídico tendo um peso molecular menor que 7.000 Da.

4. Uso de um sobrenadante de culturas de uma cepa de espécies de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202, caracterizado pelo fato de que é para o aumento cosmético, não terapêutico da atividade mitocondrial no músculo, em que o dito sobrenadante de culturas contém material peptídico e glicídico tendo um peso molecular menor que 7.000 Da.

5. Uso de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que o aumento da atividade mitocondrial no músculo é um aumento do nível de ATP e/ou atividade de sintase de citrato no músculo.

6. Uso de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que o aumento da resistência muscular é um aumento de resistência aeróbica.

7. Uso de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que o aumento de resistência aeróbica é um aumento na proporção de fibras de Tipo I em músculo.

8. Uso do sobrenadante de culturas de uma cepa de espécies de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202, caracterizado pelo fato de que é para a estimulação de repitelização cosmética, não terapêutica da pele, em que o dito sobrenadante de culturas contém material peptídico e glicídico tendo um peso molecular menor que 7.000 Da.

9. Uso do sobrenadante de culturas de uma cepa de espécies de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202, caracterizado pelo fato de que é para a redução cosmética, não terapêutica na acumulação de gordura, em que o dito sobrenadante de culturas contém material peptídico e glicídico tendo um peso molecular menor que 7.000 Da.

10. Uso do sobrenadante de culturas de uma cepa de espécies de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202, caracterizado pelo fato de que é para a redução cosmética, não terapêutica no índice de massa corporal (BMI), em que o dito sobrenadante de culturas contém material peptídico e glicídico tendo um peso molecular menor que 7.000 Da.

11. Uso do sobrenadante de culturas de uma cepa de espécies de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202, caracterizado pelo fato de que é para o aumento cosmético, não terapêutico na resistência e no tônus de fibras musculares, em que o dito sobrenadante de culturas contém material peptídico e glicídico tendo um peso molecular menor que 7.000 Da.

12. Composição cosmética ou dermofarmacêutica não natural, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade cosmeticamente ou farmaceuticamente eficaz do sobrenadante de culturas de uma cepa de espécies de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202 e pelo menos um cosmeticamente e/ou dermofarmaceuticamente excipiente e/ou ingrediente aceitável, em que o dito sobrenadante de culturas contém material peptídico e glicídico tendo um peso molecular menor que 7.000 Da.

13. Composição cosmética ou dermofarmacêutica não natural de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que o sobrenadante de culturas é incorporado em um sistema de liberação cosmética ou dermofarmacêutica e/ou sistema de libertação sustentado ou é adsorvido sobre um polímero orgânico sólido ou em suporte mineral sólido.

14. Composição cosmética ou dermofarmacêutica não natural de acordo com a reivindicação 12 ou reivindicação 13, caracterizada pelo fato de que a composição é apresentada em uma formulação escolhida dentre o grupo formado por vários cremes, emulsões, soluções, cristais líquidos, as composições anidras, dispersões aquosas, óleos, leites, bálsamos, espumas, loções, géis, géis cremosos, soluções hidroalcoólicas, soluções hidroglicólicas, hidrogéis, linimentos, soros, sabões, xampus, condicionadores, séruns, filmes de polissacarídeo, unguentos, mousses, pomadas, pós, barras, lápis e sprays ou aerossóis.

15. Composição cosmética ou dermofarmacêutica não natural de acordo com a reivindicação 12 ou reivindicação 13, caracterizada pelo fato de ser incorporada em um tecido tecido, tecido não tecido ou dispositivo médico.

16. Composição cosmética ou dermofarmacêutica não natural de acordo com a reivindicação 12 ou reivindicação 13, caracterizada pelo fato de que o excipiente cosmeticamente e/ou dermofarmaceuticamente aceitável e/ou ingrediente é escolhido dentre o grupo formado por agentes que aumentam o nível de adiponectina em adipócitos, agentes que aumentam a atividade mitocondrial, agentes que aumentam o nível de ATP no músculo, outros agentes estimuladores de cicatrização, agentes de cicatrização coadjuvantes, agentes estimuladores da repitelização, agentes de repitelização coadjuvantes, agentes que reduzem o teor de triglicerídeos de adipócitos, agentes de retardamento da diferenciação dos adipócitos, os agentes que reduzem a quantidade de noturnina, agentes que inibem a expressão noturnina, agentes lipolíticos ou agentes estimulantes da lipólise, agentes venotônicos, agentes que modulam a expressão de PGC-1α, agentes que inibem a atividade de PPARy, agentes anticelulite, agentes que diminuem a produção de sebo, agentes estimulantes da síntese de macromoléculas dérmicas ou epidérmicas e ou capaz de/inibir ou prevenir seus agentes de degradação, o colágeno síntese e estimulação, agentes estimuladores da síntese de elastina, agentes estimulantes da síntese decorina, agentes estimulantes da síntese de laminina, agentes estimulantes da síntese de defensinas, acompanhante síntese-estimulante agentes, agentes estimulantes da síntese de cAMP, os agentes que modulam AQP-3, agentes que modulam a síntese aquaporina, proteínas da família aquaporina, agentes estimuladores da síntese de ácido hialurônico, agentes estimuladores da síntese de glicosaminoglicano, agentes estimulante de síntese de fibronectina, agentes estimulantes de síntese de sirtuína, proteínas de choque térmico, agentes estimulantes da síntese de proteína de choque térmico, agentes que inibem a exocitose neuronal, agentes anticolinérgicos, agentes que inibem a contração muscular, agentes antienvelhecimento, agentes antirrugas, agentes antitranspirantes, agentes anti-inflamatórios e/ou analgésicos, agentes anticoceira, agentes calmantes, agentes anestésicos, inibidores de agrupamento-receptor de acetilcolina, agentes que inibem a acetilcolinesterase, agentes relaxantes pele, agentes inibidores que estimulam a síntese de melanina, branqueamento ou agentes despigmentantes, agentes de pró-pigmentação de agentes autobronzeadores, agentes de inibição da sintase, agentes de inibição da 5α-redutase, lysyl- e/ou prolil hidroxilase agentes sequestrantes, antioxidantes, e/ou agentes contra a poluição atmosférica de radicais livres, espécies reativas de carbonilo sequestrantes, agentes antiglicação, anti-histamínicos, agentes antivirais, agentes antiparasitas, agentes emulsionantes, emolientes, solventes orgânicos, agentes propulsores líquidos, condicionadores da pele, umectantes, substâncias que conservam a umidade, ácidos alfa-hidroxi, ácidos hidroxi-beta, hidratantes, epidérmicas enzimas hidrolíticas, vitaminas, aminoácidos, proteínas, pigmentos ou corantes, corantes, biopolímeros, gelificantes de polímeros, espessantes, agentes tensoativos, agentes de amaciamento, agentes de ligação, conservantes, agentes capazes de reduzir ou tratar as bolsas sob os olhos, os agentes, agentes queratolíticos, agentes descamativos, agentes antimicrobianos, agentes antifúngicos, agentes fungistáticos, agentes bactericida, agentes bacteriostáticos, agentes estimulantes da síntese de componentes do estrato córneo, ceramidas, ácidos graxos, agentes que inibem a degradação de colágeno, agentes que inibem as metaloproteinases de matriz, agentes que inibem a degradação de elastina, agentes que inibem as proteases de serina, agentes que estimulam a proliferação de fibroblastos, agentes estimulantes da proliferação de queratinócitos, agentes que estimulam a proliferação de melanócitos, agentes estimuladores da diferenciação dos queratinócitos, agentes antihiperqueratose, agentes comedolíticos, agentes antipsóricos, agentes de reparação do DNA, agentes de proteção de DNA, célula estaminal proteger agentes, estabilizadores, agentes para o tratamento e/ou cuidados da pele sensível, agentes de endurecimento, agentes marca antiestiramento, agentes adstringentes, agentes que inibem a atividade de PAR-2, citocinas, fatores de crescimento, agentes que atuam sobre a circulação capilar e/ou a microcirculação, agentes estimuladores da angiogênese, agentes que inibem a permeabilidade vascular, agentes que atuam sobre o metabolismo celular, agentes para melhorar a junção dermo- epidérmica, agentes que induzem o crescimento do cabelo, inibindo o crescimento do cabelo ou agentes retardantes, agentes de perda de cabelo retardadores, conservantes, perfumes, cosméticos e/ou absorvente, e/ou desodorante que mascaram odores do corpo, agentes quelantes, extratos de plantas, óleos essenciais, extratos marinhos, agentes obtidos a partir de um processo biotecnológico, sais minerais, extratos celulares, protetores solares e agentes fotoprotetores orgânicos ou minerais ativos contra a radiação ultravioleta e/ou raios B e/ou raios infravermelhos A, ou misturas dos mesmos.

17. Método não terapêutico para aumentar os níveis de adiponectina, aumentar a atividade mitocondrial no músculo, aumentar a resistência muscular e/ou repitelização da pele, estimular a síntese de colágeno e/ou a síntese de ácido hialurônico, tratamento de endurecimento da pele e/ou prevenção da perda de firmeza da pele, caracterizado pelo fato de que compreende administrar uma quantidade cosmeticamente eficaz do sobrenadante de culturas de uma cepa de espécies de Bacillus pumilus com número de depósito LMG P-28202, em que o dito sobrenadante de culturas contém material peptídico e glicídico tendo um peso molecular menor que 7.000 Da.