BR112016006684B1

BR112016006684B1 - Método para a obtenção de um hidrogel injetável com base no ácido hialurônico reticulado ou em um de seus sais, e lidocaína

Info

Publication number: BR112016006684B1
Application number: BR112016006684-7A
Authority: BR
Inventors: Samuel Gavard
Original assignee: Anteis S.A
Priority date: 2013-09-27
Filing date: 2014-09-26
Publication date: 2022-11-29
Also published as: RU2671837C2; RU2016110605A; PL3049055T3; CA2923742C; EP3049055A1; CN105705137B; CN105705137A; KR20160075535A; CA2923742A1; BR112016006684A2; US10272181B2; EP3049055B1; LT3049055T; RU2016110605A3; WO2015043757A1; ES2668981T3; US20160228613A1; KR102277655B1

Abstract

MÉTODO PARA A OBTENÇÃO DE UM HIDROGEL INJETÁVEL, HIDROGEL INJETÁVEL ESTÉRIL, USO DO HIDROGEL INJETÁVEL. O objeto da presente invenção é um método para a obtenção de um hidrogel injetável com base no ácido hialurônico contendo hidrocloreto de lidocaína e um agente alcalino, esterilizado com calor, possuindo concentração de ácido hialurônico e propriedade s de fluidez equivalentes às do hidrogel com base em ácido hialurônico correspondente que não contém hidrocloreto de lidocaína. A presente invenção também se refere a diversos usos do hidrogel supracitado.

Description

[0001] A presente invenção refere-se a um método para produzir um hidrogel injetável com base no ácido hialurônico contendo lidocaína ou um agente alcalino, esterilizado a calor, ao gel assim obtido, bem como aos seus usos nos campos terapêutico e estético.

[0002] A utilização de hidrogéis injetáveis com bases no ácido hialurônico é comum na separação, substituição ou preenchimento de um tecido biológico ou no aumento de volume do referido tecido, e também para a complementação ou substituição de fluidos biológicos.

[0003] Desta maneira, os produtos viscoelásticos com bases no ácido hialurônico são utilizados em várias aplicações terapêuticas e no campo da dermatologia cosmética.

[0004] Por exemplo, estes produtos com bases no ácido hialurônico reticulado ou não reticulado são utilizados: • Na reumatologia, como um agente de substituição, um complemento temporário para o líquido sinovial, • Na urologia/ginecologia, como um agente que permita um aumento no volume do esfíncter ou da uretra, • Na oftalmologia, como um adjuvante para a cirurgia de catarata ou para o tratamento de glaucoma, • Em produtos farmacêuticos, como um gel para a liberação de substâncias ativas, ou • Na cirurgia, para a reconstrução de ossos, aumento do volume de cordas vocais ou para a criação de tecidos cirúrgicos, • Na dermatologia cosmética, para o preenchimento de rugas, esconder cicatrizes ou aumentar o volume dos lábios.

[0005] A concentração de ácido hialurônico e as propriedades de fluidez de um hidrogel são propriedades essenciais para um produto injetável com base no ácido hialurônico. Estas propriedades na maioria condicionam a estrutura deste produto e, portanto, sua aplicação e desempenho. Assim, o módulo de elasticidade (G’) e o módulo de viscosidade (G”) são características importantes para um hidrogel injetável com base no ácido hialurônico conforme indicado na seguinte publicação: Sundaram H. et al., Comparison of the rheological properties of viscosity and elasticity in two categories of soft tissue fillers: calcium hydroxyapatite and hyaluronic acid, Dermatologic surgery, 2010, 36 (S3), 1859-1865.

[0006] A lidocaína é um anestésico local atualmente utilizado nos campos da medicina e da estética. Esta molécula tem sido notoriamente utilizada por muitos anos em produtos com um propósito estético tal como produtos para o preenchimento de rugas, a fim de limitar a dor durante ou após a injeção. Por exemplo, os produtos Zyderm®/Zyplast® com base no colágeno e em 0,3% de lidocaína têm sido comercializados por mais de 20 anos.

[0007] Recentemente, a lidocaína foi introduzida em novas formulações com base no ácido hialurônico utilizadas na dermatologia cosmética para o preenchimento de rugas e a restauração de volumes (nos casos dos produtos Juvéderm® Ultra 2/3/4, Prevelle® Silk / 15 Shape, Elevess®, ...). Em todos estes produtos, a presença de lidocaína não disputa com as funções conhecidas destes dispositivos médicos, que são o preenchimento de depressões. A lidocaína, por sua atividade anestésica, permite uma melhoria no conforto do paciente pela limitação da dor durante a após a injeção do produto.

[0008] É interessante especificar que vários profissionais ou não utilizam géis com base no ácido hialurônico contendo lidocaína (por exemplo, quando a presença de lidocaína é uma contraindicação em pacientes que possuam sensibilidade conhecida a este composto), ou consideram que eles não necessitam desta ação anestésica, uma vez que eles utilizam outros meios para gerenciar a dor, como a anestesia do nervo troncular, a utilização de uma técnica ou dispositivo de injeção menos traumática, ou, de fato, a utilização de um produto anestésico para aplicação tópica.

[0009] Não obstante, atualmente, os produtos para preenchimento de rugas e restauração de volumes com base no ácido hialurônico disponibilizados aos profissionais não proporciona a possibilidade de considerar a lidocaína como uma opção, uma vez que eles não proporcionam a possibilidade aos médicos de selecionar determinado produto com ou sem lidocaína. Por determinado produto, faz-se referência aos géis com ou sem lidocaína possuindo uma concentração de ácido hialurônico igual e propriedades de fluidez (equivalentes) e, assim, permitindo aos profissionais possuir as mesmas aplicações clínicas e desempenho durante a injeção e no pós- injeção para as versões com e sem lidocaína (exceto pelos efeitos benéficos sobre a dor induzidos pela presença da lidocaína). De fato, no mercado, um grande número destes produtos existe apenas na versão com lidocaína (como nos casos dos produtos Juvéderm® Ultra 2/3/4, Prevelle® e Elevess®).

[0010] Esta situação notoriamente faz com que muitos profissionais incluam a lidocaína eles mesmos nos produtos comercias que não a contenham, a fim de poder tratar seus pacientes com os produtos injetáveis que eles desejam ao mesmo tempo em que mantém os efeitos benéficos do anestésico. Para o profissional, isto envolve misturar o gel com base no ácido hialurônico injetável a uma solução de lidocaína (por exemplo, Xilocaína® injetável) logo antes de sua injeção no paciente, o que notoriamente induz a diluição do hidrogel (redução na concentração do ácido hialurônico) e uma modificação substancial das propriedades de fluidez do produto comercial.

[0011] Para produtos comerciais com base no ácido hialurônico contendo lidocaína (um anestésico incluído durante a fabricação do produto), a arte anterior ensina métodos permitindo a introdução de lidocaína na forma de uma solução aquosa em um gel com base no ácido hialurônico.

[0012] Estes métodos, contudo, não são totalmente satisfatórios, uma vez que eles, na verdade, também levam à diluição do hidrogel injetável e a propriedades de fluidez significativamente modificadas. Observa-se, em particular, um aumento na elasticidade (aumento no valor do módulo de elasticidade G’) e um aumento na natureza elástica (redução na proporção G”/G’) do hidrogel, o que pode ser indesejável dependendo das condições sendo tratadas (por exemplo, um produto injetável muito elástico, isto é, possuindo um módulo G’ muito alto e/ou uma proporção G”/G’ muito baixa, pode dar aumento a regiões sentidas pelo paciente como rígidas e/ou desconfortáveis, ou mesmo doloridas.

[0013] O objetivo da presente invenção é, assim, proporcionar um método para a preparação de um hidrogel injetável com base no ácido hialurônico, ou em um de seus sais, e na lidocaína, pela inclusão da lidocaína e de um agente alcalino em um gel de ácido hialurônico sem modificações significativas das propriedades essenciais do produto, que são a concentração de ácido hialurônico e as propriedades de fluidez da viscoelasticidade, isto é, os valores dos módulos G’ e G” do hidrogel relevante.

[0014] Para este fim, o método para a preparação de um hidrogel injetável (e, consequentemente, esterilizado) com base no ácido hialurônico reticulado, ou em um de seus sais, e na lidocaína, de acordo com a presente invenção compreende as seguintes etapas sucessivas: i) Fazer um gel com base no ácido hialurônico reticulado ou em um de seus sais, ii) Adicionar cloridrato de lidocaína em pó ou em solução no referido gel e então misturá-los, iii) Ajustar o pH para um valor entre 6.5 e 7.6 por meio da adição de um agente alcalino na mistura de gel + cloridrato de lidocaína, e homogeneizando toda a mistura, proporcionando a possibilidade da obtenção de um hidrogel que não contenha quaisquer partículas de lidocaína sólidas suspensas. iv) Esterilizar o hidrogel com calor.

[0015] Este método de acordo com a invenção difere, em particular, no momento e na forma (sólida/líquida) da adição da lidocaína.

[0016] Tal método para adicionar o cloridrato de lidocaína, particularmente na forma sólida (em pó), associado à adição de um agente alcalino, surpreendentemente oferece a possibilidade, começando-se por determinado gel de ácido hialurônico reticulado, de obter-se uma concentração de ácido hialurônico e propriedades de fluidez G’ e G” deste gel incluindo cloridrato de lidocaína, equivalente aos de um mesmo gel sem cloridrato de lidocaína. Com este método é então possível não modificar as propriedades fundamentais que condicionam o desempenho do referido gel.

[0017] O método de fabricação de acordo com a invenção envolve um gel com base no ácido hialurônico ou um de seus sais, preferencialmente preparado e reticulado de acordo com as técnicas descritas na arte anterior. Pode-se citar, por exemplo, os géis reticulados de acordo com WO 2005/085329 e os géis reticulados e enxertados de acordo com WO 2005/012364.

[0018] De acordo com uma forma de realização em particular da invenção, a reticulação é alcançada por molécula bi- ou polifuncionais, por exemplo, selecionadas dentre epóxidos, epihalohidrina e divinilsulfona, agindo sobre o ácido hialurônico ou em um de seus sais, já reticulado ou não, com ou sem um ou mais outros polissacarídeos de origem natural. Vantajosamente, a reticulação é alcançada com butanodiol diglicidil éter.

[0019] O grau de reticulação de um hidrogel com base no ácido hialurônico ou em um de seus sais é definido como sendo a proporção de massa, expressa como uma percentagem, da massa do agente de reticulação sobre a massa do ácido hialurônico ou em um de seus sais, introduzido na reação de mistura durante o preparo do produto.

[0020] De acordo com uma forma de realização em particular da invenção, o grau de reticulação do hidrogel de acordo com a invenção está entre 0,1% e 25%, preferivelmente entre 0,5% e 15% e vantajosamente entre 1,5% e 14%.

[0021] De acordo com uma forma de realização em particular da invenção, o gel pode também conter outros polímeros biocompatíveis (como polissacarídeos de origem natural) e/ou outras substâncias ativas ou inativas possuindo um efeito positivo no corpo ou no gel.

[0022] Entre os sais de ácido hialurônico preferidos de acordo com a invenção, citar-se-ão os sais de ácido hialurônico com um cátion, notoriamente um cátion mono- ou divalente, selecionado dentre sódio, potássio, magnésio, cálcio, manganês e/ou zinco. Os sais de sódio são mais particularmente preferidos.

[0023] No método de acordo com a invenção, a concentração de ácido hialurônico ou em um de seus sais obtidos na etapa i) pode estar entre 1 mg/ml e 50 mg/ml, preferencialmente entre 4 e 14 mg/ml, ainda mais preferencialmente entre 14 e 35 mg/ml.

[0024] A massa molecular do ácido hialurônico ou em um de seus sais utilizado para a criação do hidrogel está entre 1.000 Da e 10x106 Da, preferencialmente entre 2.105 Da e 5.106 Da, ainda mais preferencialmente entre 5.105 Da e 4.106 Da.

[0025] A ordem de adição dos ingredientes do gel com base no ácido hialurônico é importante: é necessário introduzir o cloridrato de lidocaína no gel e dar continuidade com a mistura antes de adicionar o agente alcalino a fim de ajustar o pH aos valores supracitados (etapa iii). Caso contrário, parte do cloridrato de lidocaína adicionada (adicionada como um pó ou como uma solução com algumas partículas de cloridrato de lidocaína não dissolvidas) continuará na forma de partículas sólidas, as quais não se dissolvem. Torna-se então impossível a obtenção de um gel translúcido, isto é, sem quaisquer partículas de lidocaína visíveis ao olho nu (partículas suspensas no gel), como geralmente é requerido para um grande número de aplicações tais como, por exemplo, aplicações no campo da dermatologia cosmética.

[0026] A concentração de cloridrato de lidocaína no gel está vantajosamente entre 0,1 e 50 mg/ml, preferencialmente entre 1 e 30 mg/ml, ainda mais preferencialmente entre 2 e 20 mg/ml.

[0027] O agente alcalino pode ser introduzido no gel na forma sólida ou na forma de um líquido puro ou diluído. No caso de um líquido diluído, o agente alcalino é vantajosamente adicionado na forma de uma solução aquosa, suficientemente concentrada de modo a não induzir uma diluição do gel de ácido hialurônico.

[0028] A quantidade de agente alcalino introduzido no gel notoriamente depende do tipo de agente alcalino selecionado, da concentração de cloridrato de lidocaína no gel, do pH do gel antes da adição do cloridrato de lidocaína, das características do gel tais como a concentração de ácido hialurônico, e das propriedades de fluidez G’ e G” desejadas para os produtos finais esterilizados com calor. Os peritos na arte poderão selecionar uma quantidade adequada de agente alcalino para atender às necessidades da formulação que está sendo desenvolvida.

[0029] O agente alcalino é preferivelmente selecionado dentre hidróxido de sódio, hidróxido de potássio ou bicarbonato de sódio; vantajosamente, o agente alcalino selecionado é hidróxido de sódio.

[0030] O gel com lidocaína de acordo com a invenção possui uma concentração de ácido hialurônico ou de um de seus sais equivalente à de um gel que não contenha lidocaína. Assim, a fim de ser considerado um equivalente em termos de concentração de ácido hialurônico, o gel de acordo com a invenção, o qual foi potencialmente um pouco diluído por causa da adição do agente alcalino (se este foi adicionado como uma solução) não deve possuir um percentual de diluição maior que 2,5%, a fim de poder ser considerado um equivalente do gel que não contém lidocaína correspondente.

[0031] O percentual de diluição do gel é definido da seguinte maneira: Seja V1 = Volume da solução alcalina adicionada, Seja V2 = Volume do gel após a adição do cloridrato de lidocaína e antes da adição da solução alcalina Percentual de diluição = V1*100(V1+V2).

[0032] Este percentual de diluição do gel seguido da adição do agente alcalino é vantajosamente menor ou igual a 2,5%, preferencialmente menor ou igual a 1,5%, ainda mais preferencialmente menor ou igual a 1%.

[0033] Vantajosamente, o pH do hidrogel, antes e depois da esterilização, foca entre 6.5 e 7.6, preferencialmente entre 6.9 e 7.5, ainda mais preferencialmente entre 7.0 e 7.4, e ainda mais preferencialmente entre 7.1 e 7.3.

[0034] A esterilização do gel é realizada com calor, preferencialmente com calor húmido. Os peritos na arte saberão como selecionar um ciclo de esterilização a calor (temperatura e duração do ciclo de esterilização) adequado para esterilizar seu produto. Por exemplo, a esterilização com calor húmido pode ser realizada a 131°C por 1 a 2 minutos, a 130°C por 3 minutos, a 125°C por 7 minutos, a 121°C por 20 minutos, a 121°C por 10 minutos ou a 100°C por 2 horas.

[0035] A presente invenção também se refere ao hidrogel injetável estéril com base no ácido hialurônico ou em um de seus sais, no cloridrato de lidocaína e em um agente alcalino, preparado pelo método acima descrito, possuindo propriedades de fluidez (notoriamente os módulos G’ e G”) as quais correspondem substancialmente às do mesmo hidrogel não contendo cloridrato de lidocaína. De fato, surpreendentemente, um gel com base no ácido hialurônico, no cloridrato de lidocaína e em um agente alcalino obtido de acordo com a invenção possui uma concentração de ácido hialurônico e uma reologia (e, consequentemente, uma estrutura de gel) equivalentes ao gel sem cloridrato de lidocaína. Mais praticamente, o hidrogel de acordo com a presente invenção, preparado de acordo com o método acima descrito, possui um percentual de diluição não excedendo 2,5%, preferencialmente menor ou igual a 1,5%, ainda preferivelmente menor ou igual a 1% em relação ao mesmo hidrogel sem cloridrato de lidocaína.

[0036] O hidrogel injetável de acordo com a invenção pode ser utilizado com base no campo estético (dermatologia cosmética) ou no campo terapêutico, mais particularmente para o preenchimento ou substituição de tecidos biológicos ou ainda para a separação, substituição ou preenchimento de um tecido biológico ou para separação do volume do referido tecido ou ainda para complementar ou substituir um fluido biológico. Portanto, ele pode ser utilizado, por exemplo, para preencher rugas, remodelar o rosto ou o corpo ou aumentar o volume dos lábios.

[0037] De acordo com outra alternativa, o hidrogel injetável de acordo com a invenção pode ser utilizado no tratamento para reidratação da pele por mesoterapia.

[0038] O hidrogel da presente invenção pode também ser utilizado em muitas aplicações terapêuticas, tais como, por exemplo: • Na reumatologia, como um agente de substituição, um complemento temporário para o líquido sinovial, • Na urologia/ginecologia, como um agente que permita um aumento no volume do esfíncter ou da uretra, • Na oftalmologia, como um adjuvante para a cirurgia de catarata ou para o tratamento de glaucoma, • Em produtos farmacêuticos, como um gel para a liberação de substâncias ativas, ou • Na cirurgia, para a reconstrução de ossos, aumento do volume de cordas vocais ou para a criação de tecidos cirúrgicos, • Na dermatologia cosmética, para o preenchimento de rugas, esconder cicatrizes ou aumentar o volume dos lábios.

[0039] Para todas as indicações supracitadas, a presença de lidocaína no hidrogel permite uma melhoria a ser alcançada no conforto do paciente durante a injeção e após a injeção.

[0040] A invenção é de maior interesse para produtos injetáveis com base no ácido hialurônico esterilizado com calor, em conformidade com os que já são comercializados e que requerem a inclusão de lidocaína em suas composições para a redução da dor durante a após a injeção. O método de acordo com a invenção proporciona assim a possibilidade de poder propor produtos comerciais com lidocaína, equivalentes àqueles que não contém lidocaína, em termos de concentração de ácido hialurônico e propriedades de fluidez (notoriamente os módulos G’ e G”), e isto sem modificar a estrutura dos géis e consequentemente o desempenho destes produtos.

[0041] O método de acordo com a invenção com adição da lidocaína, preferencialmente em pó, oferece a possibilidade de concentrações variadas do anestésico sem modificar a concentração de ácido hialurônico, podendo o agente alcalino ser introduzido em uma forma mais concentrada, sem modificar as propriedades de fluidez do referido hidrogel.

[0042] O profissional pode assim ter uma paleta de géis com base em uma mesma concentração de ácido hialurônico: sem anestésico de um lado, e com diferentes concentrações de anestésicos, tais como lidocaína, para o uso desejado no outro.

EXEMPLOS

[0043] A invenção é ilustrada pelos exemplos não limitativos a seguir.

[0044] As formulações preparadas são géis com base no hialuronato de sódio reticulado (NaHA) em uma solução aquosa tamponada (composição: NaCl: 8,0g/Na2HPO4, 12H2O: 2,4 g/NaH2PO4, 2H2O: 0,5 g/1 litro de água para uma preparação injetável), contendo ou não cloridrato de lidocaína, e um agente alcalino.

[0045] O hialuronato de sódio utilizado para fazer estes géis possui uma massa molecular igual a 2,5x106 Da ou 3,1x106 Da. O agente reticulador utilizado é o éter diglicidílico de butanodiol (BDDE) e a definição do grau de reticulagem utilizado é: massa (BDDE)/massa (NaHA seco).

[0046] A inclusão do cloridrato de lidocaína em pó no gel é realizada pela adição da quantidade requerida do composto (% expresso em massa) no gel e pela mistura com uma espátula por 5 minutos (para 50 g de gel).

[0047] A inclusão do agente alcalino no gel é realizada pela adição da quantidade requerida do composto relativo(% expresso em massa) na forma de uma solução aquosa alcalina no gel e pela mistura com uma espátula por 5 minutos para 50 g de gel).

[0048] Os géis preparados são introduzidos em seringas de vidro e então esterilizados em calor úmido por 20 minutos a uma temperatura de 121°C ou por 2 minutos a uma temperatura de 131°C.

[0049] O reômetro utilizado para realizar as caracterizações reológicas (em modo dinâmico) é um AR2000 (TA Instruments) com uma geometria plana de 40mm, uma folga (air gap) de 1.000 μm e uma temperatura de análise de 25°C.

Exemplo 1: Demonstração por reologia da diferença estrutural após a esterilização em calor úmido entre géis com base no ácido hialurônico com e sem cloridrato de lidocaína e com cloridrato de lidocaína e hidróxido de sódio

[0050] Seja A um gel com base no NaHA reticulado.

[0051] Este gel é obtido pela hidratação de hialuronato de sódio com uma massa molecular de 2,5x106 Da em uma solução aquosa de sódio a 1% em massa de hidróxido de sódio, pela adição do agente reticulador BDDE a fim se se obter um grau de reticulagem de 9%, pela reticulação por 2 horas a 50°C e pela diálise do gel por 24 horas (celulose regenerada, limite de separação: massa Molar = 60 kDa). O gel assim obtido possui uma concentração de hialuronato de sódio de 22,5 mg/ml e um pH de 7,07.

[0052] Após misturar por 10 minutos com uma espátula, o gel assim obtido é dividido em três frações de mesma massa (50g).

[0053] Seja B a fração n° 1. Nesta fração, 0,3% de cloridrato de lidocaína em pó é adicionada. O gel é misturado com uma espátula por 5 minutos. O pH é então 6,81.

[0054] Seja C a fração n° 2. Nesta fração, 0,3% de cloridrato de lidocaína em pó é adicionado e a mistura é realizada com uma espátula por 5 minutos. Em seguida, 267 μl de uma solução aquosa de sódio a 1% em massa de hidróxido de sódio são adicionados e a mistura é realizada com uma espátula por 5 minutos. O pH é então igual a 7,27.

[0055] Seja D a fração n° 3. O gel é misturado com a espátula por 10 minutos. Um pH igual a 7,07 é medido.

[0056] Os géis preparados são colocados e uma seringa e então esterilizados com calor (121°C, 20 minutos).

[0057] Sejam B, C e D os géis decorrentes das frações B, C e D, respectivamente.

[0058] Uma medição de reologia (frequência de varredura - de 0,001 a 100 Hz) é realizada para cada um dos géis B, C e D.

[0059] Uma comparação dos valores G’ (= módulo de elasticidade), G” (= módulo de viscosidade) e da tangente δ=G”/G’ é realizada a 1Hz, e os resultados são exibidos na Tabela 1. Tabela 1

[0060] Os géis C (de acordo com a invenção) e D (gel de referência sem lidocaína) possuem propriedades reológicas (fluidez) equivalentes, diferente dos géis do estado da arte com lidocaína.

[0061] Somente o gel B com lidocaína possui propriedades de fluidez diferentes (G’ é maior, tan δ é menor) em relação aos géis C e D. Seu comportamento em tecidos durante e após a injeção é, consequentemente, diferente em relação ao gel de referência sem lidocaína D.

[0062] Os géis C e D possuem concentrações de hialuronato de sódio equivalentes (o gel C foi submetido apenas a uma diluição desprezível (da ordem de 0,5%) por causa da adição da solução de hidróxido de sódio).

Exemplo 2: Demonstração por reologia da diferença estrutural após a esterilização em calor húmido entre géis com base no ácido hialurônico com e sem cloridrato de lidocaína e com cloridrato de lidocaína e hidróxido de sódio.

[0063] Seja E um gel com base no NaHA reticulado.

[0064] Este gel é obtido pela hidratação do hialuronato de sódio de massa molecular 2,5x106 Da em uma solução a 1% em massa de hidróxido de sódio, pela adição do agente reticulador BDDE a fim de se obter um grau de reticulagem de 11%, pela reticulação por 2 horas a 50°C e pela diálise do gel por 24 horas (celulose regenerada, limite de separação: massa molar = 60 kDa). O gel assim obtido possui uma concentração de hialuronato de sódio de 22,7 mg/ml e um pH de 7,12.

[0065] Após misturar por 10 minutos com uma espátula, o gel E assim obtido é divido em três frações de mesma massa (50g).

[0066] Seja F a fração n° 1. Nesta fração, 0,3% de cloridrato de lidocaína em pó é adicionado. O gel é misturado com uma espátula por 5 minutos. O pH é então igual a 6,79.

[0067] Seja g a fração n° 2. Nesta fração, 0,3% de cloridrato de lidocaína em pó é adicionado e então a mistura é realizada com uma espátula por 5 minutos. Em seguida, 138 μl de uma solução aquosa a 2% em massa de hidróxido de sódio é adicionado e então misturado com uma espátula por 5 minutos. O pH é 7,25.

[0068] Seja H a fração n° 3. O gel é misturado com uma espátula por 10 minutos. Um pH igual a 7,12 é medido.

[0069] Os géis preparados são introduzidos em seringas de vidro e então esterilizados com calor (121°C, 20 minutos). Sejam F, g e H os géis decorrentes das frações F, g e H, respectivamente.

[0070] Uma medição de reologia (frequência de varredura - de 0,001 a 100 Hz) é realizada para cada um dos géis F, g e H.

[0071] Uma comparação entre os valores de G’ (= módulo de elasticidade), G” (módulo de viscosidade) e tan δ = G”/G’ é realizada a 1Hz, e os resultados estão agrupados na Tabela 2 a seguir. Tabela 2

[0072] Deve-se observar que os géis g (de acordo com a invenção) e H (gel de referência sem lidocaína) possuem propriedades de fluidez equivalentes.

[0073] O gel F com lidocaína, por si só, possui diferentes propriedades de fluidez (G’ é maior, tan δ é menor) em relação aos géis g e H. Seu comportamento nos tecidos durante e após a injeção é, consequentemente, diferente do comportamento do gel de referência H sem lidocaína.

[0074] Os géis g e H possuem concentrações de hialuronato de sódio equivalentes (o gel g foi submetido a uma diluição desprezível (da ordem de 0,3%) por causa da adição da solução do hidróxido de sódio).

Exemplo comparativo 3: Diluição do gel preparado de acordo com a arte anterior.

[0075] Um gel é preparado de acordo com o método de fabricação descrito no pedido de patente WO 2010/015901, segundo o qual a lidocaína é adicionada como uma solução aquosa.

[0076] Adicionou-se a 50 ml do gel E do Exemplo 2, possuindo pH igual a 7,12, 32 μl de uma solução aquosa a 1% em massa de hidróxido de sódio, em seguida misturados com uma espátula por 5 minutos. Um pH igual a 7,22 foi medido.

[0077] Uma solução aquosa de cloridrato de lidocaína também foi preparada. Para isto, 1 g de cloridrato de lidocaína é introduzido em 10 ml de água para um preparado injetável, e esta solução é filtrada em um filtro de 0,2 μm. Observa-se que esta concentração de cloridrato de lidocaína na solução está próxima da saturação, dado que se mais cloridrato de lidocaína for adicionado à solução, prova-se ser impossível dissolver este suplemente adicional de cloridrato de lidocaína.

[0078] Em seguida, 1,72 ml da solução de cloridrato de lidocaína preparada anteriormente é introduzida em 50 ml de gel e é então mexida com uma espátula por 5 minutos (o que envolve um aumento no volume do gel na ordem de 3,4%).

[0079] O gel obtido é introduzido em seringas de vidro e então esterilizadas por calor úmido (121°C, 20 minutos). Observa-se que o gel é transparente, sem quaisquer partículas visíveis a olho nu.

[0080] Portanto, o método de preparação descrito no pedido de patente WO 2010/015901 proporciona, de fato, a possibilidade da obtenção de um gel com base no ácido hialurônico reticulado e na lidocaína. Contudo, este método envolve a adição de uma solução de cloridrato de lidocaína que gera um aumento no volume do gel significativamente maior que o induzido pela presente invenção, o que, em si, não requer a adição de cloridrato de lidocaína como uma solução, mas sim em pó.

Exemplo comparativo 4: Presença de partículas brancas no gel.

[0081] Adicionou-se a 50 ml do gel E do Exemplo 2, possuindo pH igual a 7,12, 32 μl de uma solução aquosa a 1% em massa de hidróxido de sódio, em seguida misturados com uma espátula por 5 minutos. Um pH igual a 7,22 foi medido.

[0082] Em seguida, 0,3% de cloridrato de lidocaína foi então adicionado e mexido com a espátula por 5 minutos. Observa-se que, diferentemente do método de preparação de acordo com a presente invenção, o fato de adicionar-se o cloridrato de lidocaína em pó após ter ajustado o pH para cerca de 7,2 leva à presença de partículas brancas de lidocaína na mistura, partículas que já não podem ser dissolvidas no gel. Isto também mostra a importância da ordem de introdução dos ingredientes no gel de ácido hialurônico.

Exemplo 5: Estabilidade do gel de acordo com a invenção - comparação com um gel estável da arte anterior

[0083] Um gel com base no NaHA reticulado é preparado pela hidratação do hialuronato de sódio, com uma massa molecular de 3,1x106 Da, em uma solução de 1% em massa de hidróxido de sódio, pela adição do agente reticulador BDDE a fim de se obter um grau de reticulagem de 9,2%, pela reticulação por 2 horas a 50°C e pela realização de diálise por 24 horas (celulose regenerada, limite de separação: massa molar = 60 kDa). O gel assim obtido possui uma concentração de hialuronato de sódio de 24,9 mg/ml e um pH de 7,08.

[0084] Em seguida, 0,3% de cloridrato de lidocaína é adicionado e o gel é mexido com uma espátula por 5 minutos. O pH medido foi 6,77.

[0085] Por fim, 144 μl de uma solução aquosa a 2% em massa de hidróxido de sódio foram adicionados, e mexidos com uma espátula por 5 minutos. O pH final é 7,26.

[0086] O gel assim obtido é introduzido em seringas de vidro e então esterilizado com calor (131 °C, 2 minutos).

[0087] Seja X o gel obtido. O gel X possui um aspecto homogêneo e é transparente, e não contém quaisquer partículas visíveis a olho nu.

[0088] O pH e a osmolaridade do gel X são medidas. Obtém-se: • pH = 7,23 à temperatura de 23°C • osmolaridade = 316 mOsm/kg

[0089] A concentração de cloridrato de lidocaína do gel X é doseada por HPLC em três diferentes seringas a fim de confirmar a homogeneidade do ingrediente ativo dentro do gel. O valor médio de 0,29±0,01 mg/ml é medido para as três seringas testadas.

[0090] As propriedades reológicas do gel X são medidas (frequência de varredura - de 0,01 a 100 Hz) e estão agrupadas na Tabela 3 a seguir. Tabela 3

[0091] A estabilidade do gel X ao longo do tempo foi então comparada a um produto com lidocaína da arte anterior considerado estável.

[0092] O produto comparativo foi Juvéderm® Ultra 3, um produto comercial com base no NaHA reticulado (25 mg/ml) e na lidocaína (3 mg/ml, isto é, 0,3% em massa), obtido com um método de fabricação (WO 2010/015901) diferente do da presente invenção.

[0093] A estabilidade de ambos os produtos ao longo do tempo foi avaliada por reologia de t=0, em t=3 meses e em 6=6 meses, pela manutenção dos produtos a uma temperatura de armazenamento de 40°C. Os seguintes valores de G’ (= módulo de elasticidade) a 1Hz foram obtidos, agrupados na Tabela 4 a seguir: Tabela 4

[0094] Ambos os produtos, Gel X e Juvéderm® Ultra 3, possuem alterações dependentes de tempo equivalentes em suas reologias.

[0095] O método de acordo com a invenção, portanto, leva a um hidrogel de ácido hialurônico que possui uma degradação equivalente, do ponto de vista reológico, às dos géis da arte anterior, considerados estáveis ao longo do tempo.

Claims

1. Método para a obtenção de um hidrogel injetável com base no ácido hialurônico reticulado ou em um de seus sais, e lidocaína, caracterizado por compreender as seguintes etapas sucessivas: i) fazer um gel com base no ácido hialurônico reticulado ou em um de seus sais, ii) adicionar cloridrato de lidocaína em pó no referido gel e então misturá-los, iii) ajustar o pH para um valor entre 6,5 e 7,6 por meio da adição de um agente alcalino na referida mistura de gel mais hidrocloreto de lidocaína, e homogeneizar toda a mistura para obter um hidrogel que não contenha quaisquer partículas de lidocaína sólidas suspensas, e iv) esterilizar o hidrogel com calor.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de a concentração de ácido hialurônico ou de um de seus sais obtida na etapa i) estar entre 1 mg/ml e 50 mg/ml.

3. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 2, caracterizado pelo fato de a massa molecular do ácido hialurônico ou de um de seus sais utilizado para fazer o hidrogel encontrar-se entre 1.000 Da e 10x103 4 * 6 Da.

4. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 3, caracterizado pelo fato de o ácido hialurônico ou um de seus sais ser reticulado por moléculas bi- ou polifuncionais, selecionadas dentre epóxidos, epihalohidrinas e divinilsulfona.

5. Método, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de o ácido hialurônico ou um de seus sais ser reticulado de acordo com um grau de reticulagem entre 0,1% e 25%.

6. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 5, caracterizado pelo fato de a concentração de cloridrato de lidocaína no gel encontrar-se entre 0,1 e 50 mg/ml..

7. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 6, caracterizado pelo fato de o agente alcalino ser selecionado dentre bicarbonato de sódio, hidróxido de sódio ou hidróxido de potássio.

8. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 7, caracterizado pelo fato de a percentagem de diluição do gel seguida da adição do agente alcalino ser menor ou igual a 2,5%.

9. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 8, caracterizado pelo fato de o pH do hidrogel antes e depois da esterilização encontrar-se entre 6,5 e 7,6.

10. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 9, caracterizado pelo fato de a esterilização do hidrogel ser realizada em calor úmido.