BR112015023568B1 - Composto à base de metal como composto fotodinâmico antecedentes da invenção - Google Patents

Composto à base de metal como composto fotodinâmico antecedentes da invenção Download PDF

Info

Publication number
BR112015023568B1
BR112015023568B1 BR112015023568-9A BR112015023568A BR112015023568B1 BR 112015023568 B1 BR112015023568 B1 BR 112015023568B1 BR 112015023568 A BR112015023568 A BR 112015023568A BR 112015023568 B1 BR112015023568 B1 BR 112015023568B1
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
optionally substituted
representations
alkyl
compounds
compound
Prior art date
Application number
BR112015023568-9A
Other languages
English (en)
Other versions
BR112015023568A2 (pt
BR112015023568B8 (pt
Inventor
Sherri Ann Mcfarland
Original Assignee
Sherri Ann Mcfarland
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sherri Ann Mcfarland filed Critical Sherri Ann Mcfarland
Publication of BR112015023568A2 publication Critical patent/BR112015023568A2/pt
Publication of BR112015023568B1 publication Critical patent/BR112015023568B1/pt
Publication of BR112015023568B8 publication Critical patent/BR112015023568B8/pt

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/473—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. acridines, phenanthridines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F15/00—Compounds containing elements of Groups 8, 9, 10 or 18 of the Periodic Table
    • C07F15/0006—Compounds containing elements of Groups 8, 9, 10 or 18 of the Periodic Table compounds of the platinum group
    • C07F15/002—Osmium compounds
    • C07F15/0026—Osmium compounds without a metal-carbon linkage
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F15/00—Compounds containing elements of Groups 8, 9, 10 or 18 of the Periodic Table
    • C07F15/0006—Compounds containing elements of Groups 8, 9, 10 or 18 of the Periodic Table compounds of the platinum group
    • C07F15/0046—Ruthenium compounds
    • C07F15/0053—Ruthenium compounds without a metal-carbon linkage

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

COMPLEXOS DE COORDENAÇÃO À BASE DE METAL COMO COMPOSTOS FOTODINÂMICOS E SEUS USOS. A presente invenção se refere a composições que incluem complexos de coordenação à base de metal, que são preferivelmente compostos fotodinâmicos sintonizáveis. As composições e complexos são uteis como agentes terapêuticos e como agentes de diagnóstico in vivo para tratar ou prevenir doenças incluindo aquelas que envolvem células hiperproliferativas em sua etiologia, tais como o câncer. Composições e complexos da invenção são ainda capazes de destruir células microbianas, tais como bactérias, fungos e protozoários, e destruir vírus. As composições e complexos também são capazes de modular a função celular de outras maneiras

Description

1. CAMPO DA INVENÇÃO
[0001] Essa invenção se refere a complexos de coordenação à base de metal que são uteis como agentes terapêuticos e de diagnóstico. A invenção se refere ainda a compostos fotodinâmicos que podem ser ativados com luz ultravioleta a infravermelha (UV-IR), particularmente próximo à luz infravermelha, que são úteis como agentes terapêuticos e de diagnóstico. Em particular, a invenção fornece compostos fotodinâmicos baseados em metal sintonizáveis que são complexos de coordenação derivados de ligantes orgânicos. Os compostos fotodinâmicos podem ser ativados pela luz para destruir células indesejáveis, por exemplo, células hiperproliferativas e células microbianas. Os compostos fotodinâmicos também podem ser ativados pela luz para destruir vírus.
2. DESCRIÇÃO DA ARTE RELACIONADA
[0002] A terapia fotodinâmica (PDT) é atualmente uma área ativa de pesquisa para o tratamento de doenças associadas a células hiperproliferativas como as lesões cancerígenas e não-malignas. O desenvolvimento de novos compostos fotodinâmicos (PDCs) para terapia fotodinâmica (PDT) tem cada vez mais se concentrado em complexos metalosupramoleculares derivados de metais como o rutênio e o ródio. A contínua investigação de novos fotosensibilizadores para PDT se origina nas limitações associadas a porfirinas de base orgânica tradicionais como Photofrin®, que devem ser ativadas com ondas de luz relativamente curtas e não funcionam em ambientes hipóxicos. Avanços significativos tem sido feitos na direção de superar essas limitações com a introdução de complexos mistos de metal que possuem estados excitados de baixa 3MMCT (transferência de carga metal-a-metal). Até hoje, entretanto, existem registros limitados de compostos fotodinâmicos à base de metal que são capazes de fornecer terapia fotodinâmica para o tratamento de doenças associadas a células hiperproliferativas como as lesões cancerígenas e não malignas.
[0003] Existe uma antiga necessidade de novos compostos fotodinâmicos (PDCs) que seja úteis como fotosensibilizadores para PDT que sejam tanto modificadores da doença quanto eficazes no tratamento de indivíduos com doenças causadas por células hiperproliferativas, por exemplo, o câncer. Existe ainda uma antiga necessidade de novos PDCs que sejam úteis como agentes de diagnóstico in vivo. A presente invenção trata da necessidade de se desenvolver novos PDCs que sejam uteis como fotosensibilizadores para PDT e que sejam tanto modificadores da doença quanto eficazes no tratamento de indivíduos com doenças causadas por células hiperproliferativas, por exemplo, o câncer. A presente invenção também trata da antiga necessidade de novos PDCs que sejam úteis como agentes de diagnóstico in vivo.
[0004] Todas as referências aqui citadas estão incorporadas a título de referência em sua totalidade.
BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[0005] A presente invenção é direcionada a novos compostos de fórmula (I),
Figure img0001
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos, onde: M em cada ocorrência é independentemente selecionado do grupo consistindo de ósmio, manganês, molibdênio, rênio, rutênio, ferro, cobalto, ródio, irídio, níquel, platina, paládio, vanádio, cromo, tungsténio, tecnécio e cobre; X é selecionado do grupo consistindo de Cr, PF6’, Br', BF4, CIO4; CF3SO3', e SO42; n = 0, 1, 2, 3, 4, or 5; q é independentemente de cada ocorrência 0, 1, ou2; y é independentemente de cada ocorrência 0, 1, ou 2; z é independentemente de cada ocorrência 1,2, ou 3; Lig1é um ligante bidentado que em cada ocorrência é cada um selecionado independentemente do grupo consistindo de
Figure img0002
Figure img0003
Lig2 é um ligante bidentado que em cada ocorrência é cada um selecionado independentemente do grupo consistindo de
Figure img0004
Figure img0005
lig3é um ligante bidentado que em cada ocorrência é cada um selecionado independentemente do grupo consistindo de
Figure img0006
[0006] R1é selecionado do grupo consistindo de hidrogênio, fenil opcionalmente substituído, aril opcionalmente substituído, heteroaril opcionalmente substituído, 4-piridil, 3-piridil, 2-tiazol, 2-pirolil, 2-furanil,
Figure img0007
Figure img0008
U é um número inteiro; R2a, R2b, R2C, R2d, R2e, R2f, R29, R2h, R2', R2’, R2k, e R21 em cada ocorrência são cada um selecionados independentemente do grupo consistindo de hidrogênio, alquil C1-6 opcionalmente substituído, alquil ramificado C1-6 opcionalmente substituído, cicloalquil C3-7 opcionalmente substituído, haloalquil C1-6 opcionalmente substituído, alcóxi C1.6 opcionalmente substituído, CO2R5,CONR62, NR72, SO3H, sulfato, sulfonato, aril opcionalmente substituído,ariloxi opcionalmente substituído, heteroaril opcionalmente substituído, e heterociclo opcionalmente substituído; R3a R3b, R3c R3d) R3ej R3f R3g R3h R3i R3j R3k θ R3I θm cada ocorrθncia sâo cada um selecionados independentemente do grupo consistindo de hidrogênio, alquil Ci^ opcionalmente substituído, alquil ramificado C1-6 opcionalmente substituído, haloalquil Cμβ opcionalmente substituído, alcóxi C1-6 opcionalmente substituído, fenil opcionalmente substituído, e CO2R3; R4a, R4b, e R40 em cada ocorrência são cada um selecionados independentemente do grupo consistindo de hidrogênio, alquil C1-6 opcionalmente substituído, alquil ramificado Cr^opcionalmente substituído, cicloalquil Ci.6opcionalmente substituído, haloalquil Cve opcionalmente substituído, alcóxi Ci^ opcionalmente substituído, CO2R5,CONR62, NR72, sulfato, sulfonato, aril opcionalmente substituído, arilóxi opcionalmente substituído, heteroalquil opcionalmente substituído, e heterociclo opcionalmente substituído; R4a e R4b em cada ocorrência em um anel de tiofeno são tomados juntos com o átomo ao qual eles são ligados para formar um anel opcionalmente substituído possuindo a partir de 6 átomos no anel contendo 2 átomos de oxigênio; R5 em cada ocorrência são independentemente selecionados do grupo consistindo de hidrogênio e alquil opcionalmente substituído; R6 em cada ocorrência são independentemente selecionados do grupo consistindo de hidrogênio e alquil opcionalmente substituído; R7 em cada ocorrência são independentemente selecionados do grupo consistindo de hidrogênio e alquil opcionalmente substituído; R8 em cada ocorrência são independentemente selecionados do grupo consistindo de hidrogênio e alquil opcionalmente substituído;
[0007] Compostos da estrutura
Figure img0009
são excluídos dos novos compostos de fórmula (I).
[0008] Os compostos da presente invenção incluem compostos possuindo a fórmula (II)
Figure img0010
Incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[0009] Os compostos da presente possuindo a fórmula (III)
Figure img0011
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[0010] Os compostos da presente invenção incluem compostos possuindo a fórmula (IV)
Figure img0012
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[0011] A presente invenção também é direcionada a novos compostos de fórmula (V)
Figure img0013
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[0012] A presente invenção também é direcionada a novos compostos de fórmula (VI)
Figure img0014
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos, onde:
[0013] h/Pe M2em cada ocorrência é independentemente selecionado do grupo consistindo de ósmio, manganês, molibdênio, rênio, rutênio, ferro, cobalto, ródio, irídio, níquel, platina, paládio, vanádio, cromo, tungsténio, tecnécio e cobre;
[0014] p é em cada ocorrência independentemente 0, 1, ou 2, e uma ocorrência de p deve ser não-zero.
[0015] A2é selecionado do grupo consistindo de
Figure img0015
t é um número inteiro.
[0016] A presente invenção também é direcionada a novos compostos de fórmula (VII)
Figure img0016
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[0017] A presente invenção também é direcionada a novos compostos de fórmula (Vila)
Figure img0017
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos, onde:
[0018] A3é selecionado do grupo consistindo de
Figure img0018
[0019] Onde A3 é um ligante ponte ligado a M1 como um ligante bidentado e A3 é ligado a M2 como um ligante bidentado.
[0020] A presente invenção também é direcionada a novos compostos de fórmula (Vllb)
Figure img0019
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[0021] A presente invenção também é direcionada a novos compostos de fórmula (Vllc)
Figure img0020
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[0022] A presente invenção também é direcionada a novos compostos de fórmula (Vlld)
Figure img0021
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[0023] A presente invenção também é direcionada a novos compostos de fórmula (Vlle)
Figure img0022
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[0024] A presente invenção também é direcionada a novos compostos de fórmula (Vllf)
Figure img0023
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[0025] A presente invenção se refere ainda a composições compreendendo:
[0026] uma quantidade eficaz de um ou mais compostos de acordo com a presente invenção e um excipiente.
[0027] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção como um agente de ligação de DNA.
[0028] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da presente invenção e um excipiente como um agente de ligação de DNA.
[0029] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção como um agente de ligação de ácido nucleico.
[0030] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos de acordo com a presente invenção e um excipiente como um agente de ligação de ácido nucleico.
[0031] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção como um agente de ligação de proteína.
[0032] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos de acordo com a presente invenção e um excipiente como um agente de ligação de proteína.
[0033] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção como um agente de foto-clivagem de DNA.
[0034] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos de acordo com a presente invenção e um excipiente como um agente de foto-clivagem de DNA.
[0035] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção como um agente de condensação de DNA.
[0036] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos de acordo com a presente invenção e um excipiente como um agente de condensação de DNA.
[0037] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção como um agente que produz efeito de interruptor de luz de DNA.
[0038] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos de acordo com a presente invenção e um excipiente como um agente que produz efeito de interruptor de luz de DNA.
[0039] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção e um excipiente como um fotosensibilizador que pode funcionar em fotoprocessos do Tipo I
[0040] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção como um fotosensibilizador que pode funcionar em fotoprocessos do Tipo I.
[0041] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção e um excipiente como um fotosensibilizador que pode funcionar em fotoprocessos do Tipo II.
[0042] A presente invenção também se refere a um método usanao os compostos da invenção como um fotosensibilizador que pode funcionar em fotoprocessos do Tipo II.
[0043] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção como um fotosensibilizador que pode funcionar em fotoprocessos do Tipo I e do Tipo II.
[0044] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção e um excipiente como um fotosensibilizador que pode funcionar em fotoprocessos do Tipo I e do Tipo II.
[0045] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção para destruir células indesejáveis, incluindo células hiperproliferativas e células microbianas.
[0046] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção para destruir vírus.
[0047] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção para destruir células indesejáveis, incluindo células hiperproliferativas e células microbianas, usando luz como um ativador.
[0048] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção para destruir vírus usando luz como um ativador.
[0049] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos de acordo com a presente invenção e um excipiente para destruir células indesejáveis, incluindo células hiperproliferativas e células microbianas.
[0050] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos de acordo com a presente invenção e um excipiente para destruir vírus.
[0051] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção para destruir células, incluindo bactérias, fungos e protozoários.
[0052] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção para destruir células, incluindo bactérias, fungos e protozoários, usando luz como um ativador.
[0053] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos de acordo com a presente invenção e um excipiente para destruir células, incluindo bactérias, fungos e protozoários.
[0054] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção para induzir a apoptose em células, incluindo células hiperproliferativas.
[0055] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos de acordo com a presente invenção e um excipiente para induzir a apoptose em células, incluindo células hiperproliferativas.
[0056] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção para conferir reticulação de DNA em células, incluindo células hiperproliferativas.
[0057] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos de acordo com a presente invenção e um excipiente para conferir reticulação de DNA em células, incluindo células hiperproliferativas.
[0058] A presente invenção também se refere a um método para tratar ou prevenir doenças que envolvem a etiologia de células proliferativas, incluindo, por exemplo, o câncer, o dito método compreendendo administrar a um indivíduo uma quantidade efetiva de um composto ou composição de acordo com a presente invenção.
[0059] A presente invenção se refere ainda a um método para tratar ou prevenir doenças que envolvem a etiologia de células proliferativas, incluindo, por exemplo, o câncer, onde o dito método compreende administrar a um indivíduo uma composição compreendendo uma quantidade efetiva de um ou mais compostos de acordo com a presente invenção e um excipiente.
[0060] A presente invenção se refere ainda a um método para tratar ou prevenir doenças que envolvem a etiologia de células proliferativas, incluindo, por exemplo, o câncer, o dito método compreendendo administrar a um indivíduo uma quantidade efetiva de um composto ou composição de acordo com a presente invenção e um agente redutor intracelular como a glutationa.
[0061] A presente invenção se refere ainda a um método para tratar ou prevenir doenças que envolvem a etiologia de células proliferativas, incluindo, por exemplo, o câncer, o dito método compreendendo administrar a um indivíduo uma quantidade efetiva de um composto ou composição de acordo com a presente invenção e um excipiente e um agente redutor intracelular como a glutationa.
[0062] A presente invenção se refere ainda a um método para tratar ou prevenir doenças que envolvem a etiologia de células proliferativas, incluindo, por exemplo, o câncer, o dito método compreendendo administrar a um indivíduo uma quantidade efetiva de um composto ou composição de acordo com a presente invenção e um agente oxidante intracelular como o oxigênio.
[0063] A presente invenção se refere ainda a um método para tratar ou prevenir doenças que envolvem a etiologia de células proliferativas, incluindo, por exemplo, o câncer, o dito método compreendendo administrar a um indivíduo uma quantidade efetiva de um composto ou composição de acordo com a presente invenção e um excipiente e um agente oxidante intracelular como o oxigênio.
[0064] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção como um agente de diagnóstico in vivo através de luminescência intracelular ou métodos colorimétricos.
[0065] A presente invenção também se refere a um método usando os compostos da invenção como agentes imuno-moduladores para mediar a rejeição de tumores secundários.
[0066] A presente invenção se refere ainda a um método para preparar os compostos da presente invenção.
[0067] Esses e outros objetos, aspectos, e vantagens ficarão claros para os especialistas no assunto a partir da leitura da seguinte descrição detalhada e das reivindicações anexadas. Todas as percentagens, índices e proporções estão aqui por peso, salvo especificação em contrário. Todas as temperaturas são em graus Celsius (°C) salvo especificação em contrário. Todos os documentos citados estão aqui incorporados a título de referência, e a citação de qualquer documento não deve ser interpretada como uma admissão de que é estado da arte em relação à presente invenção.
BREVE DESCRIÇÃO DE VÁRIAS VISÕES OS DESENHOS
[0068] A invenção será agora descrita em conjunção com os desenhos seguintes nos quais numerais de referência semelhantes designam elementos semelhantes e nos quais:
[0069] Figura 1: Exemplos representativos dos compostos da divulgação.
[0070] Figura 2: absorção de UV-NIR por compostos exemplares da divulgação usando um espectrómetro V530 UV-Vis e um software Spectra Manager.
[0071] Figura 3: Efeito de fluência da luz no efeito PDT com 40 pM TLDOs14H Ch (células U87, normóxia). As células foram irradiadas com excitação 808-nm por tempos crescentes para produzir 90, 400 e 600 J cm'2. Dados são expressados como uma percentagem de controle (sem PS, sem luz). O efeito PDT foi calculado subtraindo-se a morte celular por toxicidade escura e a morte celular somente por luz do total de morte de PDT.
[0072] Figura 4: Evidência experimental para alta estabilidade de novos PDCs derivados de complexos de coordenação à base de metal: Fotoestabilidade conforme quantificada por foto-branqueamento comparado com o agente de PDT ácido aminolevulínico (ALA). Os ODs (normalizados para tempo zero), de 13.9 μM TLDOsMHCh dissolvidos em DMSO-água são mostrados para 808 nm (triângulos) e 670 nm (círculos). O foto-branqueamento de 1.3 μM PPIX (metabólito fotodinamicamente ativo do fotosensibilizador estabelecido ALA) foi usado como referência (diamantes). O foto- branqueamento foi registrado por 60 minutos de irradiação (525 nm, 78 mWcm'2).
[0073] Figura 5: Evidência experimental para alta estabilidade de TLDOs14H Ch: PDT efetiva antes e após o foto-branqueamento ilustrado por 40 pM TLDOs14H CI2 em duas doses diferentes de luz (células U87, normóxia). Os testes “IR Normóxico” se referem a células TLDOs14H CI2- tratadas que foram irradiadas com luz 808-nm a 400 ou 600 J cm'2 usando fotosensibilizador previamente branqueado (irradiação 300 J cm'2 808 nm) ou não-branqueado. Dados são expressados como uma percentagem de morte celular normalizada para controle (sem PS, sem irradiação de luz). O efeito PDT (barras escuras) foi calculado subtraindo-se a morte celular por toxicidade escura e a morte celular somente por luz do total de morte de PDT. Testes de “Toxicidade Escura” mostram quase nenhuma morte celular e são pouco visíveis no traçado.
[0074] Figura 6: Evidência experimental para PDT in vitro em normóxia (TLDOsH2B CI2, TLDOsH2IP CI2, e TLDOs14H Ch) e em hipóxia (TLDOsh2b Cl2>TLDOs14h Cl2>TLDOsh2IP CI2 ) Condições hipóxicas se referem a um ambiente com aproximadamente 0,1-0,5% de oxigênio. Os efeitos de TLDOs14H Cl2 (40 μM), TLDOsH2B Cl2 (160 e 320 μM), TLDOshH2IP Cl2 (100 μM) e 12.5 mM ALA (usado como um controle positivo oxigénio-sensitivo) sem luz (barras cinza) e com luz (barras escuras) na morte celular são expressados como uma percentagem de controle (sem PS, sem luz). Dose de luz: 635 nm, 90 J cm'2
[0075] Figura 7: Evidência experimental para a produção de ROS por TLDOsh2IP Cl2 in vitro: morte celular diminuída na linha U87 na presença de NaN3 (removedores de oxigênio simples) e DMTU (removedores de radical de hidroxila). Eficácias de TLDOsh2IP Cl2 (40 μM) e ALA (10 mM) na morte celular de U87 sem luz (barras cinza) e com luz (barras escuras) na presença de removedores de radical de hidroxila (DMTU, 40 mM) e de oxigênio simples (NaN3, 2 mM) após a irradiação a 635 nm, 90 J cm'2. Efeitos são expressados como uma percentagem de controle (sem PS, sem luz) subtraindo-se a morte celular por toxicidade escura e a morte celular somente por luz do total de morte de PDT.
[0076] Figura 8: Tumores colorretais CT26.WT subcutâneos tratados com PDT (TLDOs2IP Cl2, 808nm, 600 J cm2) em um Camundongo BALB/c. Tamanho do tumor: 5.0 0.5 mm; dose. 3 mg kg'1; volume: 100 μL; e tempo: 10 μL/min. Em 52 dias pós tratamento com PDT, os camundongos estavam livres de tumores e saudáveis.
[0077] Figura 9: Evidência experimental para um aumento da sobrevivência animal usando tratamento anti-câncer PDT: animais sobreviventes tratados com PS + luz ainda estão sob observação. Concentração TLDOsH2IP, 3 mg kg'1; dose de luz (808 nm, 600 J cm'2).
[0078] Figura 10. Retenção de tumor de um composto profundamente pigmentado da divulgação que pode ser usado como um indicador colorimétrico para sinalizar a presença de células tumorais em um modelo animal.
[0079] Figura 11: Perfis de absorção NIR-visíveis para fotosensibilizadores da estrutura geral [Os(biq)2(LL)]Cl2, foram biq=2,2’- biquinolina e LL=1,10-fenantrolina (TLDOsH2B Cl2), imidazo[4,5- f][1,10]fenantrolina (TLDOsH2IP Cl2), ou 2-(2”-tienil)-imidazo[4,5- f][1,10]fenantrolina (TLDOsIH CI2) usando um espectrómetro Jasco V530 UV- Vis e software Spectra Manager.
[0080] Figura 12: Evidência experimental para o efeito PDT oxigénio- independente por TLDOsH2B CI2 in vitro: morte celular não afetada na linha U87 na presença de NaN3 (removedor de oxigênio simples) e morte celular fortemente diminuída na presença de DMTU (removedor de radical de hidroxila). Eficácias de TLDOsh2B CI2 (90μM) e ALA (10 mM) para morte celular U87 sem luz (barras cinza) e com luz (barras escuras) na presença de removedores de radical de hidroxila (DMTU, 20-40 mM) e de oxigênio simples (NaNs, 2 mM), após a irradiação a 635 nm, 90 J cm’2. Efeitos são expressados como uma percentagem de controle (sem PS, sem luz) subtraindo-se a morte celular por toxicidade escura e a morte celular somente por luz do total de morte de PDT.
[0081] Figura 13: Fórmula para determinar as constantes ligações de DNA para compostos da divulgação.
[0082] Figura 14: Efeito dependente de concentração no efeito PDT in vitro de compostos da divulgação (TLDOsH2B CI2, TLDOsH2IP Cl2, TLDOslH CI2, TLDOslOH Ch, TLDOs14H Cl2) em células HL-60 sem luz (linhas partidas) e com luz (linhas inteiras), A viabilidade celular relativa foi avaliada através do teste Alamar Blue de acordo com as instruções do fabricante. Efeitos são expressados como uma percentagem em relação a controles não-tratados. Does de luz: luz branca (400-700 nm), 100 J cm'2
[0083] Figura 15: Inativação fotodinâmica (PDI) de S. aureus meticilina- resistente (MRSA) mediada pelos fotosensibilizadores TLDOsH2IP CI2 (a) e TLDOsH2B Ch (b). Os registros máximos de morte alcançados com uma fonte de luz vermelha foram de 5.2 e 4.6 para TLDOsH2IP Ch e TLDOsH2B Cl2, respectivamente.
[0084] Figura 16: Curvas de sobrevivência Kaplan Meier para PDT TLDOsH2IP Ch-mediado com luz vermelha (635 nm, 100 mW/cm2) em um modelo camundongo com adenocarcinoma subcutâneo de câncer de cólon. Os animais foram dosados com 3 mg/kg (1/6 MTD50) antes de PDT a 190 J/cm2 ou 266 J/cm2. O tratamento de camundongos controle recebendo apenas luz ou apenas fotosensibilizador são incluídos para comparação.
[0085] Figura 17: Experimento realizado com pneumonia Klebsiella (Kp) com fotosensibilizadores (PS) TLDOsH2IP Ch e TLDOsH2B Ch- Registro máximo de morte alcançado: Kp(2IP, 530nm): 4.8, Kp(H2B,530nm): 8.
DESCRIÇÃO DETALHADA DE REPRESENTAÇÕES PREFERIDAS DA INVENÇÃO
[0086] Através da descrição, onde composições são descritas como tendo, incluindo, ou compreendendo componentes específicos, ou onde processos são descritos como tendo, incluindo, ou compreendendo etapas processuais específicas, é previsto que composições dos presentes ensinamentos também consistam essencialmente de, ou consistam de, os componentes definidos, e que os processos dos presentes ensinamentos também consistam essencialmente de, ou consistam de, as etapas processuais definidas.
[0087] No pedido, onde se diz que um elemento ou componente deve ser incluído e/ou selecionado de uma lista de elementos ou componentes definidos, deve ser entendido que o elemento ou componente pode ser qualquer um dos elementos ou componentes definidos e pode ser selecionado de um grupo consistindo de dois ou mais dos elementos ou componentes definidos.
[0088] O uso do singular aqui inclui o plural (e vice-versa) salvo explicitamente especificado em contrário. Além disso, onde o uso do termo “aproximadamente” estiver antes de um valor quantitativo, os presentes ensinamentos também incluem o próprio valor quantitativo específico, salvo explicitamente especificado em contrário.
[0089] Deve ser entendido que a ordem de etapas ou ordem de realização de determinadas ações é imaterial contanto que os presentes ensinamentos permaneçam operáveis. Além disso, duas ou mais etapas ou ações podem ser conduzidas simultaneamente.
[0090] Conforme é usado aqui, o termo “halogenio” deve significar cloro, bromo, flúor e iodo.
[0091] Conforme é usado aqui, salvo observação em contrário, “alquil” e “alifático” seja usados sozinhos ou como parte de um grupo substituinte se referem a cadeias de carbono lineares e ramificadas tendo de 1 a 20 átomos de carbono ou qualquer número dentro desse limite, por exemplo, 1 a 6 átomos de carbono ou 1 a 4 átomos de carbono. Números designados de átomos de carbono (ex. C^) devem se referir independentemente ao número de átomos de carbono em uma fração de alquil ou à porção de alquil de um substituinte maior contendo alquil. Exemplos não limitadores de grupos alquil incluem metilo, etilo, n-propilo, íso-propilo, n-butilo, sec-butilo, /so-butilo, tert-butilo, e outros. Exemplos não limitadores de grupos alquil substituídos incluem hidroximetilo, clorometilo, trifluorometilo, aminometilo, 1-cloroetilo, 2- hidroxietilo, 1,2-difluoroetilo, 3-carboxipropilo, e outros. Em grupos substituintes com múltiplos grupos alquil como (Ci.βalkyl)2 amino, os grupos alquil podem ser os mesmos ou diferentes.
[0092] Conforme são usados aqui, os termos grupos “alquenil” e “alquinil", seja usados sozinhos ou como parte de um grupo substituinte, se referem a cadeias de carbono lineares e ramificadas tendo 2 ou mais átomos de carbono, preferivelmente 2 a 20, onde uma cadeia alquenil possui pelo menos uma ligação dupla na cadeia e uma cadeia alquinil possui pelo menos uma ligação tripla na cadeia. Grupos alquenil e alquinil podem ser opcionalmente substituídos. Exemplos não limitadores de grupos alquenil incluem etenil, 3-propenil, 1-propenil (também 2-metiletenil), isopropenil (também 2-metileten-2-il), buten-4-il, e outros. Exemplos não limitadores de grupos alquenil substituídos incluem 2-cloroetenil (também 2-clorovinil), 4- hidroxibuten-1-il, 7-hidroxi-7-metiloct-4-en-2-il, 7-hidroxi-7-metiloct-3,5-dien-2-il, e outros. Exemplos não limitadores de grupos alquinil incluem etinil, prop-2-inil (também propargil), propin-1-il, e 2-metil-hex-4-in-1-il. Exemplos não limitadores de grupos alquinil substituídos incluem 5-hidroxi-5-metilhex-3-inil, 6-hidroxi-6-metilhept-3-in-2-il, 5-hidroxi-5-etilhept-3-inil, e outros.
[0093] Conforme é usado aqui, “cicloalquil” seja usado sozinho ou como parte de outro grupo, se refere a um anel contendo carbono não-aromático incluindo grupos alquil ciclizado, alquenil, e alquinil, ex., tendo de 3 a 14 átomos de carbono anular, preferivelmente de 3 a 7 ou 3 a 6 átomos de carbono anular, ou mesmo 3 a 4 átomos de carbono anular, e opcionalmente contendo uma ou mais (ex., 1, 2, ou 3) ligações duplas ou triplas. Grupos cicloalquil podem ser monocíclicos (ex., ciclohexil) ou policíclicos (ex., contendo sistemas de anel fundido, de ponte, e /ou spiro), onde os átomos de carbono estão localizados dentro ou fora do sistema de anel. Qualquer posição de anel apropriada do grupo cicloalquil pode ser ligada covalentemente à estrutura química definida. Anéis de cicloalquil podem ser opcionalmente substituídos. Exemplos não limitadores de grupos cicloalquil incluem: ciclopropil, 2-metil- ciclopropil, ciclopropenil, ciclobutil, 2,3-dihidroxiciclobutil, ciclobutenil, ciclopentil, ciclopentenil, ciclopentadienil, ciclohexil, ciclohexenil, cicloheptil, ciclooctanil, decalinil, 2,5-dimetilciclopentil, 3,5-diclorociclohexil, 4- hidroxiciclohexil, 3,3,5-trimetilciclohex-1-il, octahidropentalenil, octahidro-1 H- indenil, 3a,4,5,6,7,7a-hexahidro-3/-/-inden-4-il, decahidroazulenil; biciclo[6.2.0]decanil, decahidronaftalenil, e dodecahidro-1H-fluorenil. O termo “cicloalquil'’ também inclui anéis carbocíclicos que são anéis de hidrocarboneto bicíclico, cujos exemplos não limitadores incluem, biciclo-[2.1.1]hexanil, biciclo[2.2.1]heptanil, biciclo[3.1.1 ]heptanil, 1,3-dimetil[2.2.1 ]heptan-2-il, biciclo[2.2.2]octanil, e biciclo[3.3.3]undecanil.
[0094] “Haloalquil” deve incluir grupos de hidrocarboneto alifático saturado tanto de cadeia ramificada quanto linear tendo o número específico de átomos de carbono, substituído por 1 ou mais halogenios. Grupos haloalquil incluem grupos perhaloalquil, onde todos os hidrogénios de um grupo alquil forma substituídos por halogenios (ex., -CF3, -CF2CF3). Grupos haloalquil podem opcionalmente ser substituídos por um ou mais substituintes em adição ao halogenio. Exemplos de grupos haloalquil incluem, mas não estão limitados a, grupos fluorometilo, dicloroetilo, trifluorometilo, triclorometilo, pentafluoroetilo, e pentacloroetilo.
[0095] O termo “alcóxi” se refere ao grupo -O-alquil, onde o grupo alquil é conforme definido acima. Grupos alcóxi opcionalmente podem ser substituídos. O termo alcóxi cíclico C3-C6 se refere a um anel contendo 3 a 6 átomos de carbono e pelo menos um átomo de oxigênio (ex., tetrahidrofurano, tetrahidro-2H-piran). Grupos alcóxi cíclicos C3-C6 opcionalmente podem ser substituídos.
[0096] O termo “aril”, seja usado sozinho ou como parte de outro grupo, é definido aqui como um anel monocíclico aromático não saturado de 6 membros de carbono ou a um anel policíclico aromático não saturado de 10 a 14 membros de carbono Anéis aril podem ser, por exemplo, anel fenil ou naftil cada um opcionalmente substituído por uma ou mais frações capazes de substituir um ou mais átomos de hidrogênio. Exemplos não limitadores de grupos aril incluem: fenil, naftilen-1 -il, naftilen-2-il, 4-fluorofenil, 2-hidroxifenil, 3- metilfenil, 2-amino-4-fluorofenil, 2-(A/,/V-dietilamino)fenil, 2-cianofenil, 2,6-di-fert- butilfenil, 3-metoxifenil, 8-hidroxinaftilen-2-il 4,5-dimetoxinaftilen-1-il, e 6-ciano- naftilen-1 -il. Grupos aril também incluem, por exemplo, anéis fenil ou naftil fundidos com um ou mais anéis de carbono saturados ou parcialmente saturados (ex., biciclo[4.2.0]octa-1,3,5-trienil, indanil), que podem ser substituídos em um ou mais átomos de carbono dos anéis aromáticos e/ou saturados ou parcialmente saturados.
[0097] O termo “arilalquil” ou “aralquiT se refere ao grupo -alquil-aril, onde os grupos alquil e aril são aqui definidos. Grupos aralquil da presente invenção são opcionalmente substituídos. Exemplos de grupos arilalquil incluem, por exemplo, benzil, 1-feniletil, 2-fenyletil, 3-fenilpropil, 2-fenilpropil, fluorenilmetil e outros.
[0098] Os termos “heterocíclico” e/ou “heterociclo” e/ou “heterocilil”, seja usados sozinhos ou como parte de outro grupo, são definidos aqui como um ou mais anéis tendo de 3 a 20 átomos no qual pelo menos um átomo em pelo menos um anel é um heteroátomo selecionado de nitrogênio (N), oxigênio (O), ou enxofre (S), e ainda onde o anel que inclui o heteroátomo é não-aromático. Em grupos heterocíclicos que incluem 2 ou mais anéis fundidos, o anel tendo o não-heteroátomo pode ser aril (ex., indolinil, tetrahidroquinolinil, cromanil). Grupos heterocíclicos exemplares tem de 3 a 14 átomos de anel dos quais de 1 a 5 são heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio (N), oxigênio (O), ou enxofre (S). Um ou mais átomos N ou S em um grupo heterocíclico podem ser oxidados. Grupos heterocíclicos podem ser opcionalmente substituídos.
[0099] Exemplos não limitadores de unidades heterocíclicas tendo um único anel incluem diazirinil, aziridinil, urazolil, azetidinil, pirazolidinil, imidazolidinil, oxazolidinil, isoxazolinil, isoxazolil, tiazolidinil, isotiazolil, isotiazolinil oxatiazolidinonil, oxazolidinonil, hidantoinil, tetrahidrofuranil, pirrolidinil, morfolinil, piperazinil, piperidinil, dihidropiranil, tetrahidropiranil, piperidin-2-onil (valerolactam), 2,3,4,5-tetrahidro-1H-azepinil, 2,3-dihidro-1H- indole, e 1,2,3,4-tetrahidro-quinoline. Exemplos não limitadores de unidades heterocíclicas tendo 2 ou mais anéis incluem hexahidro-1 H-pirrolizinil, 3a,4,5,6,7,7a-hexahidro-1 H-benzo[d]imidazolil, 3a,4,5,6,7,7a-hexahidro-1 H- indolil, 1,2,3,4-tetrahidroquinolinil, cromanil, isocromanil, indolinil, isoindolinil, e decahidro-1H-cicloocta[b]pirrolil.
[00100] O termo “heteroaril”, seja usado sozinho ou como parte de outro grupo, é definido aqui como um ou mais anéis tendo de 5 a 20 átomos onde pelo menos um átomo em pelo menos um anel é um heteroátomo escolhido entre nitrogênio (N), oxigênio (O), ou enxofre (S), e onde ainda pelo menos um dos anéis que inclui um heteroátomo é aromático. Em grupos heteroaril que incluem 2 ou mais anéis fundidos, o anel tendo não-heteroátomo pode ser um carbociclo (ex., 6,7-Dihidro-5H-ciclopentapirimidina) ou aril (ex., benzofuranil, benzotiofenil, indolil). Grupos heteroaril exemplares tem de 5 a 14 átomos de anel e contem de 1 a 5 heteroátomos de anel independentemente selecionados entre nitrogênio (N), oxigênio (O), ou enxofre (S). Um ou mais átomos N ou S em um grupo heteroaril podem ser oxidados. Grupos heteroaril podem ser substituídos. Exemplos não limitadores de anéis heteroaril contendo um único anel incluem: 1,2,3,4-tetrazolil, [1,2,3]triazolil, [1,2,4]triazolil, triazinil, tiazolil, 1H- imidazolil, oxazolil, furanil, tiofeneil, pirimidinil, 2-fenilpirimÍdinil, piridinil, 3- metilpiridinil, e 4-dimetilaminopiridinil. Exemplos não limitadores de anéis heteroaril contendo 2 ou mai anéis fundidos incluem: benzofuranil, benzotiofenil, benzoxazolil, benztiazolil, benztriazolil, cinnolinil, naftiridinil, fenantridinil, 7H-purinil, 9H-purinil, 6-amino-9/-/-purinil, 5H-pirrolo[3,2- d]pirimidinil, 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidinil, pirido[2,3-d]pirimidinil, 2- fenilbenzo[d]tiazolil, 1/-/-indolil, 4,5,6,7-tetrahidro-1 -/-/-indolil, quinoxalinil, 5- metilquinoxalinil, quinazolinil, quinolinil, 8-hidroxi-quinolinil, e isoquinolinil.
[00101] Um exemplo não limitador de um grupo heteroaril conforme descrito acima é heteroaril C1-C5, que tem 1 a 5 átomos de anel de carbono e pelo menos um átomo adicional no anel que é um heteroátomo (preferivelmente 1 a 4 átomos adicionais no anel que são heteroátomos) independentemente selecionados entre nitrogênio (N), oxigênio (O), ou enxofre (S). Exemplos de heteroaril C1-C5 incluem, mas não estão limitados a, triazinil, tiazol-2-il, tiazol-4-il, imidazol-1 -il, 1H-imidazol-2-il, 1H-imidazol-4-il, isoxazolin- 5-il, furan-2-il, furan-3-il, tiofen-2-il, tiofen-4-il, pirimidin-2-il, pirimidin-4-il, pirimidin-5-il, piridin-2-il, piridin-3-il, e piridin-4-il.
[00102] Salvo observação em contrário, quando dois substituintes são tomados juntos para formar um anel tendo um número especificado de átomos de anel (ex., R2 e R3 são tomados junto com o nitrogênio (N) ao qual eles são ligados para formar um anel tendo de 3 a 7 membros de anel), o anel pode ter átomos de carbono e opcionalmente um ou mais (ex., 1 a 3) heteroátomos adicionais independentemente selecionados entre nitrogênio (N), oxigênio (O), ou enxofre (S). O anel pode ser saturado ou parcialmente saturado e pode ser opcionalmente substituído.
[00103] Para o propósito da presente invenção unidades de anel fundidos, bem como anéis espirocíclicos, anéis bicíclicos e outros, que compreendem um único serão considerados como pertencendo à família cíclica correspondente ao anel contendo heteroátomo. Por exemplo, 1,2,3,4- tetrahidroquinolina tendo a fórmula:
Figure img0024
é, para os propósitos da presente invenção, considerado uma unidade heterocíclica. 6,7-Dihidro-5/-/-ciclopentapirimidina tendo a fórmula:
Figure img0025
é , para os propósitos da presente invenção, considerado uma unidade heteroaril. Quando uma unidade de anel fundido contem heteroátomos em um anel saturado e aril, o anel aril predominará e determinará o tipo de categoria ao qual o anel é designado. Por exemplo, 1,2,3,4-tetrahidro-[1,8]naftiridina tendo a fórmula:
Figure img0026
é, para os propósitos da presente invenção, considerado uma unidade heteroaril.
[00104] Sempre que um termo ou as suas raízes prefixais aparecerem em um nome de um substituinte, o nome deve ser interpretado como incluindo aquelas limitações aqui fornecidas. Por exemplo, sempre que o termo “alquil” ou “aril” ou as suas raízes prefixais aparecerem em um nome de um substituinte (ex., arilalquil, alquilamina) o nome deve ser interpretado como incluindo aquelas limitações acima apresentadas para “alquil” e “aril”.
[00105] O termo “substituído” é usado por todo o relatório. O termo “substituído" é aqui definido como uma fração, seja ela acíclica ou cíclica, que tem um ou mais átomos de hidrogênio substituído por um substituinte ou vários (ex., 1 a 10) substituintes conforme definido abaixo. Os substituintes são capazes de substituir um ou mais átomos de hidrogênio de uma única fração de uma vez. Em adição, esses substituintes podem substituir dois átomos de hidrogênio em dois carbonos adjacentes para formar o dito substituinte, nova fração ou unidade. Por exemplo, uma unidade substituída que requer uma única substituição de átomo de hidrogênio inclui halogenio, hidroxila, e outros. Uma substituição de átomo de dois hidrogénios inclui carbonil, oximino, e outros. Uma substituição de átomo de dois hidrogénios de átomos de carbono adjacentes inclui epóxi, e outros. O termo “substituído" é usado por todo o presente relatório para indicar que uma fração pode ter um ou mais dos átomos de hidrogênio substituídos por um substituinte. Quando uma fração é descrita como “substituída” qualquer número dos átomos de hidrogênio pode ser substituído Por exemplo, difluorometil é um Ci alquil substituído; trifluorometil é um Ci alquil substituído; 4-hidroxifenil é um anel aromático substituído; (N,N- dimetil-5-amino)octanil é um C8 alquil substituído; 3-guanidinopropil é um C3 alquil substituído; e 2-carboxipiridinil é um heteroaril substituído.
[00106] Os grupos variáveis definidos aqui, ex., grupos alquil, alquenil, alquinil, cicloalquil, alcóxi, arilóxi, aril, heterociclo e heteroaril aqui definidos, seja usados sozinhos ou como parte de outro grupo, podem ser opcionalmente substituídos. Grupos opcionalmente substituídos serão dessa forma indicados.
[00107] Os seguintes são exemplos não limitadores de substituintes que podem substituir átomos de hidrogênio em uma fração: halogenio (cloro (Cl), bromo (Br), flúor (F) e iodo (I)), -CN, -NO2, oxo (=0), -OR9, -SR9, -N(R9)2, - NR9C(O)R9, -SO2R9, -SO2OR9, -SO2N(R9)2, -C(O)R9, -C(0)0R9, - C(O)N(R9)2, C1-6 alquil, Ci-6 haloalquil, Ci^ alcóxi, C2-s alquenil, C2-8 alquinil, C3-14 cicloalquil, aril, heterociclo, ou heteroaril, onde cada um dos grupos alquil, haloalquil, alquenil, alquinil, alcóxi, cicloalquil, aril, heterociclo, e heteroaril é opcionalmente substituído por grupos 1-10 (ex., 1-6 ou 1-4) selecionados independentemente entre halogenio -CN, -NO2, oxo, e Rx; onde R*, a cada ocorrência, é independentemente halogenio -OR10, -SR10, -C(O)R10, - C(O)OR10, -C(O)N(R10)2, -SO2R10, -S(O)2OR1Q, —N(R1O)2, -NR10C(O)R10, CI-6 alquil, Ci-6 haloalquil, C2-8 alquenil, C2-8 alquinil, cicloalquil (ex., C3-6 cicloalquil), aril, heterocicle, ou heteroaril, ou duas unidades Rx tomadas juntas com o(s) átomo(s) aos quais são ligados formam um carbociclo ou heterociclo opcionalmente substituído onde o dito carbociclo ou heterociclo tem 3 a 7 átomos de anel; onde R10, a cada ocorrência,é independentemente hidrogênio, Ci-6 alquil, Ci-6 haloalquil, C2-s alquenil, C2-e alquinil, cicloalquil (ex., C3-6 cicloalquil), aril, heterociclo, ou heteroaril, ou duas unidades R10 tomadas juntas com o(s) átomo(s) aos quais são ligados formam um carbociclo ou heterociclo opcionalmente substituído onde o dito carbociclo ou heterociclo preferivelmente tem 3 a 7 átomos de anel.
[00108] Em algumas representações, os substituintes são selecionados de i) -OR11; por exemplo, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH2CH2CH3; ii) -C(O)R11; por exemplo, -COCH3, -COCH2CH3, -COCH2CH2CH3; iii) -C(O)OR11; por exemplo, -CO2CH3, -CO2CH2CH3, - CO2CH2CH2CH3; iv) -C(O)N(R11)2; por exemplo, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2; v) -N(R11)2; por exemplo, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2> -NH(CH2CH3); vi) halogenio: -F, -Cl, -Br, and -I; vii) -CHeXg; onde X é halogenio, m é de 0 a 2, e+g =3; por exemplo, -CH2F, -CHF2, -CFS, -CCI3, or-CBr3; viii) -SO2R11; por exemplo, -SO2H; -SO2CH3; -SO2CeH5; ix) Alquil C1-C6 linear, ramificado, ou cíclico; x) Ciano xi) Nitro; xii) N(R11)C(O)R11; xiii) Oxo (=0); xiv) Heterociclo; e xv) Heteroaril. onde cada R11 é independentemente hidrogênio, alquil Ci-Ce linear ou ramificado opcionalmente substituído (ex., alquil CÍ-C4 linear ou ramificado opcionalmente substituído) ou cicloalquil C3-Ce opcionalmente substituído (ex., cicloalquil C3-C4 opcionalmente substituído); ou duas unidades R11 podem ser tomadas juntas para formar um anel compreendendo 3-7 átomos de anel. Em certos aspectos, cada R11 é independentemente hidrogênio, alquil Ci-Cβ linear ou ramificado opcionalmente substituído por halogenio ou cicloalquil C3-C6 ou cicloalquil C3-C6
[00109] Em vários lugares no presente relatório, substituintes de compostos são divulgados em grupos ou em faixas. É especificamente intencional que a descrição inclua cada uma e toda subcombinação individual dos membros desses grupos e limites. Por exemplo, o termo “C1.6 alquil” tem a intenção específica de divulgar Ci, C2, C3, C4, C5, Cβ, Ci-Cβ, C1-C5, C1-C4, Ci- C3, C1-C2, C2-C6, C2-C5, C2-C4, C2-C3, C3-C6, C3-C5, C3-C4, C4-C6, C4-C5, e C5-Ce, alquil.
[00110] Para os efeitos da presente invenção os termos “composto”, “análogo”, e “composição de matéria” significam igualmente bem os compostos inventivos descritos aqui, sejam eles fotodinâmicos ou não, incluindo todas as formas enantioméricas, formas diastereoméricas, sais, e outros, e os termos “composto”, “análogo”, e “composição de matéria” são usados de modo intercambiável por todo o presente relatório.
[00111] Para os efeitos da presente invenção o termo “bpy” significará igualmente bem 2,2'-bipiridina e [2,2']bipiridina.
[00112] Para os efeitos da presente invenção o termo “fen” significará igualmente bem [1,10]fenantrolina e 1,10-fenantrolina.
[00113] Para os efeitos da presente invenção o termo “dmb” significará igualmente bem 4,4'-dimetil-2,2'-bipiridina.
[00114] Para os efeitos da presente invenção o termo “biq” significará igualmente bem 2,2’-biquinolina.
[00115] Para os efeitos da presente invenção o termo “dpq” significará igualmente
Figure img0027
[00116] Para os efeitos da presente invenção o termo “dppz” significará igualmente
Figure img0028
[00117] Para os efeitos da presente invenção o termo “dppn” significará igualmente
Figure img0029
[00118] Para os efeitos da presente invenção o termo "dpqC” significará igualmente
Figure img0030
[00119] Para os efeitos da presente invenção o termo “dppza” significará igualmente
Figure img0031
[00120] Para os efeitos da presente invenção o termo “dppzc” significará igualmente
Figure img0032
[00121] Para os efeitos da presente invenção o termo “dppzs” significará igualmente
Figure img0033
[00122] Para os efeitos da presente invenção o termo “HAT” significará igualmente
Figure img0034
[00123] Para os efeitos da presente invenção o termo “TAP” significará igualmente
Figure img0035
[00124] Para os efeitos da presente invenção o termo “PHEHAT” significará igualmente
Figure img0036
[00125] Para os efeitos da presente invenção o termo “tpac” significará igualmente
Figure img0037
[00126] Os compostos descritos aqui podem conter um átomo assimétrico (também chamado de centro quiral), e alguns dos compostos podem conter um ou mais átomos assimétricos ou centros, que podem assim fazer surgir isômeros óticos (enantiômeros) e diastereômeros. Os presentes ensinamentos e compostos aqui divulgados incluem esses enantiômeros e disatreômeros, bem como os estereoisômeros R e S enantiomericamente puros racêmicos e resolvidos, bem como outras misturas dos estereoisômeros R e S e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Isômeros óticos podem ser obtidos em forma pura através de procedimentos padrão conhecidos dos especialistas, que incluem, mas não estão limitados a, formação de sal diastereomérico, resolução cinética, e síntese assimétrica. Os presentes ensinamentos também abrangem cis e trans isômeros de compostos contendo frações de alquenil (ex., alquenes e imines). Também fica entendido que os presentes ensinamentos abrangem todos os possíveis regioisômeros, e misturas dos mesmos, que podem ser obtidos em forma pura através de procedimentos padrão conhecidos dos especialistas, que incluem, mas não estão limitados a, cromatografia de coluna, cromatografia de camada fina, e cromatografia líquida de alto desempenho.
[00127] Sais farmaceuticamente aceitáveis de compostos dos presentes ensinamentos, que podem ter uma fração ácida, podem ser formados usando bases orgânicas e inorgânicas. Tanto sais mono quanto polianiônicos são contemplados, dependendo do número de hidrogénios ácidos disponíveis para deprotonação. Sais apropriados formados com bases incluem sais de metal, tais como metal álcali ou sais de metal terroso alcalino, por exemplo sais de sódio, potássio ou magnésio; sais de amónio e sais amino orgânicos, tais como aqueles formados com morfolina, tiomorfolina, piperidina, pirrolidina, uma mono-, di- ou tri-baixa alquilamina (ex., etil-tert-butil-, dietil-, diisopropil-, trietil-, tributil- ou dimetilpropilamina), ou uma mono-, di-, ou trihidroxi baixa alquilamina (ex., mono-, di- ou trietanolamina). Exemplos específicos não limitadores de bases inorgânicas incluem NaHCO3, Na2CO3, KHCO3, K2CO3, Cs2CO3, LiOH, NaOH, KOH, NaH2PO4, Na2HPO41 e Na3PO4. Sais internos também podem ser formados. Similarmente, quando um composto divulgado aqui contem uma fração básica, sais podem ser formados usando ácidos orgânicos e inorgânicos. Por exemplo, sais podem ser formados a partir dos seguintes ácidos: acético, propiônico, lático, benzenesulfônico, benzóico, canforsulfônico, cítrico, tartárico, sucínico, dicloroacético, etenesulfònico, fórmico, fumárico, glucônico, glutâmico, hipúrico, hidrobrómico, hidroclorídrico, isetiônico, lático, maléico, málico, malônico, mandélico, metanesulfônico, múcico, naptalenesulfônico, nítrico, oxálico, pamóico, pantotênico, fosfórico, ftálico, propiônico, sucínico, sulfúrico, tartárico, toluenesulfônico, e canforsulfônico bem como outros ácidos farmaceuticamente aceitáveis conhecidos.
[00128] Quando ocorre qualquer variável mais de uma vez em qualquer constituinte ou em qualquer fórmula, a sua definição em cada ocorrência é independente da sua definição em toda outra ocorrência (ex., em N(R6)2, cada R6 pode ser o mesmo ou diferente do outro). Combinações de substituintes e/ou variáveis são permitidas apenas se essas combinações resultam em compostos estáveis.
[00129] Os termos “tratar” e “tratando" e “tratamento” conforme são usados aqui, se referem a aliviar, inibir, melhorar e/ou mitigar parcial ou completamente um problema do qual o paciente seja suspeito de estar sofrendo.
[00130] Conforme são usados aqui, “terapeuticamente efetivo” e “dose efetiva” se referem a uma substância ou uma quantidade que produz uma atividade biológica ou efeito desejável.
[00131] Conforme é usado aqui, o termo “terapia fotodinâmica” significa um tratamento para destruir células ou modular função imune, incluindo resposta imune, de células e tecido através do uso de uma droga que pode ser ativada por luz de um determinado comprimento de onda e dose.
[00132] Conforme é usado aqui, o termo “composto fotodinâmico” significa um composto que fornece terapia fotodinâmica.
[00133] Salvo quando observado, os termos “indivíduo” ou “paciente” são usados de modo intercambiável e se referem a mamíferos como os pacientes humanos e primatas não humanos, bem como animais experimentais como coelhos, ratos, camundongos e outros animais. Consequentemente, o termo “indivíduo” ou “paciente” conforme é usado aqui significa qualquer paciente ou indivíduo mamífero ao qual os compostos da invenção podem ser administrados. Em uma representação exemplar da presente invenção, para identificar pacientes sujeitos para tratamento de acordo com os métodos da invenção, métodos de triagem aceitos são empregados para determinar fatores de risco associados à doença ou problema direcionado ou suspeitado ou para determinar a situação de uma doença ou problema existente em um indivíduo. Esses métodos de triagem incluem, por exemplo, manipulações convencionais para determinar fatores de risco que possam estar associados à doença ou problema direcionado ou suspeitado. Esses e outros métodos de rotina permitem ao médico selecionar pacientes com necessidade de terapia usando os métodos e compostos da presente invenção.
COMPOSTOS
[00134] os compostos da presente invenção são compostos de coordenação à base de metal derivados de ligantes orgânicos quelados a um metal, são preferivelmente compostos fotodinâmicos sintonizáveis, e incluem todas as formas enantioméricas e diastereoméricas e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos tendo a fórmula (I),
Figure img0038
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos, onde: M a cada ocorrência é independentemente selecionado do grupo consistindo de ósmio, manganês, molibdénio, rênio, ferro, cobalto, ródio, irídio, níquel, platina, paládio, vanádio, cromo, tungsténio, tecnécio, e cobre; X é selecionado do grupo consistindo de Cl’, PF6‘, Br’, BF4’, CIOT, CFsSCh', e SOT2; n = 0, 1, 2, 3, 4, or 5; q é independentemente a cada ocorrência 0, 1, ou 2; y é independentemente a cada ocorrência 0, 1, ou 2; z é independentemente a cada ocorrência 1,2, ou 3; Lig1 é um ligante bidentado que a cada ocorrência é cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de
Figure img0039
Figure img0040
Lig2 é um ligante bidentado que a cada ocorrência é cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de
Figure img0041
Liga é um ligante bidentado que a cada ocorrência é cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de
Figure img0042
R1 é selecionado do grupo consistindo de hidrogênio, fenil opcionalmente substituído, aril opcionalmente substituído, heteroaril opcionalmente substituído, 4-piridil, 3-piridil, 2-tiazole, 2-pirrolil, 2-furanil,
Figure img0043
u é um inteiro; R2a, R2b, R2C, R2d R2e, R2f, R2g, R2h, R2i, R2i, R2k, e R21 a cada ocorrência são cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de hidrogênio, alquil C1-6 opcionalmente substituído, alquil ramificado Ci-6 opcionalmente substituído, cicloalquil C3.7 opcionalmente substituído, haloalquil C1-6 opcionalmente substituído, alcóxi Ci.6 opcionalmente substituído, CO2R5,CONR62, NR72 , sulfato, sulfonato, aril opcionalmente substituído, arilóxi opcionalmente substituído, heteroaril opcionalmente substituído, e heterociclo opcionalmente substituído; R3a, R3b, R30, R3d, R3e, R3f, R39, R3h R3i, R3j, R3k, e R31 a cada ocorrência são cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de hidrogênio, alquil C1-6 opcionalmente substituído, alquil ramificado C1-6 opcionalmente substituído, haloalquil C1-6 opcionalmente substituído, alcóxi C1-6 opcionalmente substituído, fenil opcionalmente substituído, e CO2R8; R4a, R4b, e R4' a cada ocorrência são cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de hidrogênio, alquil Ci^ opcionalmente substituído, alquil ramificado C1-6 opcionalmente substituído, cicloalquil C1.6 opcionalmente substituído, haloalquil C1-6 opcionalmente substituído, alcóxi Ci.6 opcionalmente substituído, CO2R5,CONR62, NR72 , sulfato, sulfonato, aril opcionalmente substituído, arilóxi opcionalmente substituído, heteroaril opcionalmente substituído, e heterociclo opcionalmente substituído; R4a e R4b a cada ocorrência em um anel de tiofeno são tomados junto com o átomo ao qual eles são ligados para formar um anel opcionalmente substituído tendo a partir de 6 átomos de anel contendo 2 átomos de oxigênio; R5 a cada ocorrência são cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de hidrogênio e alquil opcionalmente substituído; R6 a cada ocorrência são cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de hidrogênio e alquil opcionalmente substituído; R7 a cada ocorrência são cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de hidrogênio e alquil opcionalmente substituído; R8 a cada ocorrência são cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de hidrogênio e alquil opcionalmente substituído;
[00135] Os compostos da presente invenção incluem compostos tendo a fórmula (II),
Figure img0044
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[00136] Os compostos da presente invenção incluem compostos tendo a fórmula (III):
Figure img0045
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[00137] Os compostos da presente invenção incluem compostos tendo a fórmula (IV):
Figure img0046
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[00138] A presente invenção é também direcionada a novos compostos de fórmula (V):
Figure img0047
(V) incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[00139] A presente invenção é também direcionada a novos compostos de fórmula (VI):
Figure img0048
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos onde: A2 é selecionado do grupo consistindo de
Figure img0049
t é um inteiro.
[00140] A presente invenção é também direcionada a novos compostos de fórmula (Vila):
Figure img0050
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos onde: A3 é selecionado do grupo consistindo de
Figure img0051
[00141] Onde A3 é um ligante de transposição ligado a M1 como um ligante bidentado e A3 é ligado a M2 como um ligante bidentado.
[00142] A presente invenção é também direcionada a novos compostos de fórmula (Vllb):
Figure img0052
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[00143] A presente invenção é também direcionada a novos compostos de fórmula (Vllc):
Figure img0053
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[00144] A presente invenção é também direcionada a novos compostos de fórmula (Vlld):
Figure img0054
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[00145] A presente invenção é também direcionada a novos compostos de fórmula (Vile):
Figure img0055
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[00146] A presente invenção é também direcionada a novos compostos de fórmula (Vllf):
Figure img0056
incluindo hidratos, solvatos, sais farmaceuticamente aceitáveis, pró-drogas e complexos dos mesmos.
[00147] Em algumas representações M é ósmio, manganês, molibdênio, rênio, rutênio, ferro, cobalto, ródio, irídio, níquel, platina, paládio, vanádio, cromo, tungsténio, tecnécio, ou cobre.
[00148] Em algumas representações M1 é ósmio, manganês, molibdênio, rênio, rutênio, ferro, cobalto, ródio, irídio, níquel, platina, paládio, vanádio, cromo, tungsténio, tecnécio, ou cobre.
[00149] Em algumas representações M2 é ósmio, manganês, molibdênio, rênio, rutênio, ferro, cobalto, ródio, irídio, níquel, platina, paládio, vanádio, cromo, tungsténio, tecnécio, ou cobre.
[00150] Em algumas representações X is Cl’, PF6', Br‘, BF4; CIO4’, CF3SO3, or SO42.
[00151] Em algumas representações n é 0.
[00152] Em algumas representações n é 1.
[00153] Em algumas representações n é 2.
[00154] Em algumas representações n é 3.
[00155] Em algumas representações n é 4.
[00156] Em algumas representações n é 5.
[00157] Em algumas representações y é 0.
[00158] Em algumas representações y é 1.
[00159] Em algumas representações y é 2.
[00160] Em algumas representações z é 1.
[00161] Em algumas representações z é 2.
[00162] Em algumas representações z é 3.
[00163] Em algumas representações q é 0.
[00164] Em algumas representações q é 1.
[00165] Em algumas representações q é 2.
[00166] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0057
[00167] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0058
[00168] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0059
[00169] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0060
[00170] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0061
[00171] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0062
[00172] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0063
[00173].
[00174] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0064
[00175] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0065
[00176] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0066
[00177] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0067
[00178] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0068
[00179] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0069
[00180] Em algumas representações Lig1 é
Figure img0070
[00181] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0071
[00182] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0072
[00183] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0073
[00184] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0074
[00185] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0075
[00186] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0076
[00187] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0077
[00188]
[00189] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0078
[00190] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0079
[00191] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0080
[00192] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0081
[00193] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0082
[00194] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0083
[00195] Em algumas representações Lig2 é
Figure img0084
[00196] Em algumas representações Lig3 é
Figure img0085
[00197] Em algumas representações Lig3 é
Figure img0086
[00198] Em algumas representações Lig3 é
Figure img0087
[00199] Em algumas representações Lig3 é
[00200] Em algumas representações R1 é hidrogênio.
[00201] Em algumas representações R1 é fenil opcionalmente substituído.
[00202] Em algumas representações R1 é aril opcionalmente substituído.
[00203] Em algumas representações R1 é heteroaril opcionalmente substituído.
[00204] Em algumas representações R1 é 2-furanil.
[00205] Em algumas representações R1 é 3-piridil.
[00206] Em algumas representações R1 é 4-piridil.
[00207] Em algumas representações R1 é 2-tiazole.
[00208] Em algumas representações R1 é 2-pirolil.
[00209] Em algumas representações R1 e
Figure img0088
[00210] Em algumas representações R1 e
Figure img0089
[00211] Em algumas representações R1 e
Figure img0090
[00212] Em algumas representações R1 e
Figure img0091
[00213] Em algumas representações R1 e
Figure img0092
[00214] Em algumas representações R1 é
Figure img0093
[00215] Em algumas representações R1 é
Figure img0094
[00216] Em algumas representações R' é
Figure img0095
[00217] Em algumas representações R' é
Figure img0096
[00218] Em algumas representações R1 é
Figure img0097
[00219] Em algumas representações R1 é
Figure img0098
[00220] Em algumas representações R1 é
Figure img0099
[00221] Em algumas representações R1 é
Figure img0100
[00222] Em algumas representações R1 é
Figure img0101
[00223] Em algumas representações R1 é
Figure img0102
[00224] Em algumas representações R' é
Figure img0103
[00225] Em algumas representações u é um inteiro.
[00226] Em algumas representações, R' é
Figure img0104
[00227] Em algumas representações, R' é
Figure img0105
[00228] Em algumas representações, R' é
Figure img0106
[00229] Em algumas representações, R' é
Figure img0107
[00230] Em algumas representações, R' é
Figure img0108
[00231] Em algumas representações, R' é
Figure img0109
[00232] Em algumas representações R' é
Figure img0110
[00233] Em algumas representações R' é
Figure img0111
[00234] Em algumas representações R' é
Figure img0112
[00235] Em algumas representações R é
Figure img0113
[00236] Em algumas representações R' é
Figure img0114
[00237] Em algumas representações R1 é
Figure img0115
[00238] Em algumas representações R' é
Figure img0116
[00239] Em algumas representações R' é
Figure img0117
[00240] Em algumas representações R' é
Figure img0118
[00241]Em algumas representações R1 é
Figure img0119
[00242] Em algumas representações R' é
Figure img0120
[00243] Em algumas representações R1 é
Figure img0121
[00244] Em algumas representações R2a é hidrogênio.
[00245] Em algumas representações R2a é alquil Ci-6 opcionalmente substituído.
[00246] Em algumas representações R2a é alquil ramificado Ci-6 opcionalmente substituído.
[00247] Em algumas representações R2a é cicloalquil C3.7 opcionalmente substituído.
[00248] Em algumas representações R2a é haloalquil C16 opcionalmente substituído.
[00249] Em algumas representações R2a é alcóxi C1.6 opcionalmente substituído.
[00250] Em algumas representações R2a é CO2R5.
[00251] Em algumas representações R2aé CONR62.
[00252] Em algumas representações R2aé NR'2.
[00253] Em algumas representações R2aé SO3H.
[00254] Em algumas representações R2a é sulfato.
[00255] Em algumas representações R2aé sulfonato.
[00256] Em algumas representações R2a é aril opcionalmente substituído.
[00257] Em algumas representações R2a é ariloxi opcionalmente substituído.
[00258] Em algumas representações R2a é heteroaril opcionalmente substituído.
[00259] Em algumas representações R2a é heterociclo opcionalmente substituído.
[00260] Em algumas representações R2D é hidrogénio.
[00261] Em algumas representações R2b é alquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00262] Em algumas representações R2b é alquil ramificado Ci_6 opcionalmente substituído.
[00263] Em algumas representações R2b é cicloalquil C3-7 opcionalmente substituído.
[00264] Em algumas representações R2b é haloalquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00265] Em algumas representações R2b é alcóxi Ci^ opcionalmente substituído.
[00266] Em algumas representações R2b é CO2R5
[00267] Em algumas representações R2b é CONR62.
[00268] Em algumas representações R2b é NR72.
[00269] Em algumas representações R2b é SO3H.
[00270] Em algumas representações R2b é sulfato.
[00271] Em algumas representações R2b é sulfonato.
[00272] Em algumas representações R2b é aril opcionalmente substituído.
[00273] Em algumas representações R2b é arilóxi opcionalmente
[00274] Em algumas representações R2b é heteroaril opcionalmente substituído.
[00275] Em algumas representações R2b é heterociclo opcionalmente substituído.
[00276] Em algumas representações R2c é hidrogênio.
[00277] Em algumas representações R2c é alquil Ci-6 opcionalmente substituído.
[00278] Em algumas representações R2c é alquil ramificado Ci-6 opcionalmente substituído.
[00279] Em algumas representações R2c é cicloalquil C3-7 opcionalmente substituído.
[00280] Em algumas representações R2c é haloalquil Ci_6 opcionalmente substituído,
[00281] Em algumas representações R2c é alcóxi Ci.6 opcionalmente substituído.
[00282] Em algumas representações R2c é CO2R5
[00283] Em algumas representações R2c é CONR62.
[00284] Em algumas representações R2c é NR72.
[00285] Em algumas representações R2c é SO3H.
[00286] Em algumas representações R2c é sulfato.
[00287] Em algumas representações R2c é sulfonato.
[00288] Em algumas representações R2c é aril opcionalmente substituído.
[00289] Em algumas representações R2c é arilóxi opcionalmente substituído.
[00290] Em algumas representações R2c é heteroaril opcionalmente substituído.
[00291] Em algumas representações R2c é heterociclo opcionalmente substituído.
[00292] Em algumas representações R2d é hidrogênio.
[00293] Em algumas representações R2d é alquil C1.6 opcionalmente substituído.
[00294] Em algumas representações R2Q é alquil ramificado C1-6
[00295] Em algumas representações R2d é cicloalquil C3-7 opcionalmente substituído.
[00296] Em algumas representações R2d é haloalquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00297] Em algumas representações R2d é alcóxi C1-6 opcionalmente substituído.
[00298] Em algumas representações R2d é CO2R5
[00299] Em algumas representações R2d é CONR62.
[00300] Em algumas representações R2d é NR'2.
[00301] Em algumas representações R2d é SO3H.
[00302] Em algumas representações R2d é sulfato.
[00303] Em algumas representações R2d é sulfonato.
[00304] Em algumas representações R2d é aril opcionalmente substituído.
[00305] Em algumas representações R2d é arilóxi opcionalmente substituído.
[00306] Em algumas representações R2d é heteroaril opcionalmente substituído.
[00307] Em algumas representações R2d é heterociclo opcionalmente substituído.
[00308] Em algumas representações R2e é hidrogênio.
[00309] Em algumas representações R2e é alquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00310] Em algumas representações R2e é alquil ramificado C1-6 opcionalmente substituído.
[00311] Em algumas representações R2e é cicloalquil C3-7 opcionalmente substituído.
[00312] Em algumas representações R2e é haloalquil 0-6 opcionalmente substituído.
[00313] Em algumas representações R2e é alcóxi Ci_6 opcionalmente substituído.
[00314] Em algumas representações R2e é CO2R5
[00315] Em algumas representações R2e é CONR62.
[00316] Em algumas representações R2e é NR72.
[00317] Em algumas representações R2e é SO3H.
[00318] Em algumas representações R2e é sulfato.
[00319] Em algumas representações R2e é sulfonato.
[00320] Em algumas representações R2e é aril opcionalmente substituído.
[00321] Em algumas representações R2e é arilóxi opcionalmente substituído.
[00322] Em algumas representações R2e é heteroaril opcionalmente substituído.
[00323] Em algumas representações R2e é heterociclo opcionalmente substituído.
[00324] Em algumas representações R2f é hidrogênio.
[00325] Em algumas representações R2f é alquil O-e opcionalmente substituído.
[00326] Em algumas representações R2f é alquil ramificado Cve opcionalmente substituído.
[00327] Em algumas representações R2f é cicloalquil C3.7 opcionalmente substituído.
[00328] Em algumas representações R2f é haloalquil Ci_6 opcionalmente substituído.
[00329] Em algumas representações R2’ é alcóxi Ci_6 opcionalmente substituído.
[00330] Em algumas representações R2f é CO2R5
[00331] Em algumas representações R21 é CONR62.
[00332] Em algumas representações R2’ é NRZ2.
[00333] Em algumas representações R2f é SO3H
[00334] Em algumas representações R2f é sulfato.
[00335] Em algumas representações R2f é sulfonato.
[00336] Em algumas representações R2f é aril opcionalmente substituído.
[00337] Em algumas representações R2f é arilóxi opcionalmente substituído.
[00338] Em algumas representações R2f é heteroaril opcionalmente
[00339] Em algumas representações R21 é heterociclo opcionalmente substituído.
[00340] Em algumas representações R29 é hidrogênio.
[00341] Em algumas representações R2g é alquil Ci-6 opcionalmente substituído.
[00342] Em algumas representações R2g é alquil ramificado Ci^ opcionalmente substituído.
[00343] Em algumas representações R2g é cicloalquil C3-7 opcionalmente substituído.
[00344] Em algumas representações R2g é haloalquil Ci^ opcionalmente substituído .
[00345] Em algumas representações R2g é alcóxi C1-6 opcionalmente substituído.
[00346] Em algumas representações R2g é CO2R5
[00347] Em algumas representações R2g é CONR62.
[00348] Em algumas representações R2g é NR72.
[00349] Em algumas representações R29 é SO3H
[00350] Em algumas representações R2g é sulfato.
[00351] Em algumas representações R2g é sulfonato.
[00352] Em algumas representações R2g é aril opcionalmente substituído.
[00353] Em algumas representações R2g é arilóxi opcionalmente substituído.
[00354] Em algumas representações R2g é heteroaril opcionalmente substituído.
[00355] Em algumas representações R2g é heterociclo opcionalmente substituído.
[00356] Em algumas representações R2h é hidrogênio.
[00357] Em algumas representações R2h é alquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00358] Em algumas representações R2h é alquil ramificado C1-6 opcionalmente substituído.
[00359] Em algumas representações R2h é cicloalquil C3-7 opcionalmente substituído.
[00360] Em algumas representações R2h é haloalquil Ci_6opcionalmente substituído.
[00361] Em algumas representações R2h é alcóxi Ci^ opcionalmente substituído.
[00362] Em algumas representações R2h é CO2R5.
[00363] Em algumas representações R2h é CONR62.
[00364] Em algumas representações R2h é NR72.
[00365] Em algumas representações R2h é SO3H
[00366] Em algumas representações R2h é sulfato.
[00367] Em algumas representações R2h é sulfonato.
[00368] Em algumas representações R2h é aril opcionalmente substituído.
[00369] Em algumas representações R2h é arilóxi opcionalmente substituído.
[00370] Em algumas representações R2h é heteroaril opcionalmente substituído
[00371] Em algumas representações R2n é heterociclo opcionalmente substituído.
[00372] Em algumas reivindicações R2f é hidrogênio.
[00373] Em algumas representações R2' é alquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00374] Em algumas representações R2' é alquil ramificado Cv6 opcionalmente substituído.
[00375] Em algumas representações R2' é cicloalquil C3-7 opcionalmente substituído.
[00376] Em algumas representações R2' é haloalquil Ci_6 opcionalmente substituído.
[00377] Em algumas representações R21 é alcóxi Ci-e opcionalmente substituído.
[00378] Em algumas representações R2' é CO2R5.
[00379] Em algumas representações R2' é CONR62.
[00380] Em algumas representações R2' é NR72.
[00381] Em algumas representações R2' é SO3H.
[00382] Em algumas representações R2' é sulfato.
[00383] Em algumas representações R2' é sulfonato.
[00384] Em algumas representações R2' é aril opcionalmente substituído.
[00385] Em algumas representações R21 é arilóxi opcionalmente substituído.
[00386] Em algumas representações R2' é heteroaril opcionalmente substituído.
[00387] Em algumas representações R2' é heterociclo opcionalmente substituído
[00388] Em algumas representações R2* é hidrogênio.
[00389] Em algumas representações R2' é alquil Ove opcionalmente substituído.
[00390] Em algumas representações R2J é alquil ramificado Cre opcionalmente substituído.
[00391] Em algumas representações R?l é cicloalquil C3.7 opcionalmente substituído.
[00392] Em algumas representações R2' é haloalquil Ci_6 opcionalmente substituído.
[00393] Em algumas representações R2j é alcóxi Ci-e opcionalmente substituído.
[00394] Em algumas representações R2j é CO2R5
[00395] Em algumas representações R2i é CONR62.
[00396] Em algumas representações R2j é NR72.
[00397] Em algumas representações R2) é SO3H.
[00398] Em algumas representações R2) é sulfato.
[00399] Em algumas representações R2J é sulfonato.
[00400] Em algumas representações R2i é aril opcionalmente substituído.
[00401] Em algumas representações R4 é arilóxi opcional mente substituído.
[00402] Em algumas representações R2J é heteroaril opcionalmente substituído.
[00403] Em algumas representações RZ1 é heterociclo opcionalmente
[00404] Em algumas representações R2k é hidrogênio.
[00405] Em algumas representações R2k é alquil C-i-e opcionalmente substituído.
[00406] Em algumas representações R2k é alquil ramificado Ci-β opcionalmente substituído.
[00407] Em algumas representações R2k é cicloalquil C3-7 opcionalmente substituído.
[00408] Em algumas representações R2k é haloalquil Ci-6 opcionalmente substituído.
[00409] Em algumas representações R2k é alcóxi Ci-6 opcionalmente substituído.
[00410] Em algumas representações R2k é CO2R5
[00411] Em algumas representações R2k é CONR62.
[00412] Em algumas representações R2k é NR72.
[00413] Em algumas representações R2k é SO3H.
[00414] Em algumas representações R2k é sulfato.
[00415] Em algumas representações R2k é sulfonato.
[00416] Em algumas representações R2k é aril opcionalmente substituído.
[00417] Em algumas representações R2k é arilóxi opcionalmente substituído.
[00418] Em algumas representações R2k é heteroaril opcionalmente substituído.
[00419] Em algumas representações R2k é heterociclo opcionalmente substituído
[00420] Em algumas representações R21 é hidrogênio.
[00421] Em algumas representações R21 é alquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00422] Em algumas representações R21 é alquil ramificado C1-6 opcionalmente substituído.
[00423] Em algumas representações R21 é cicloalquil C3-7 opcionalmente substituído.
[00424] Em algumas representações R21 é haloalquil C1-6 opcionalmente
[00425] Em algumas representações R21 é alcóxi Ci^ opcionalmente substituído.
[00426] Em algumas representações R2' é CO2R5
[00427] Em algumas representações R21 é CONR62.
[00428] Em algumas representações R21 é NR'2
[00429] Em algumas representações R21 é SO3H.
[00430] Em algumas representações R21 é sulfato.
[00431] Em algumas representações R21 é sulfonato.
[00432] Em algumas representações R2 é aril opcionalmente substituído.
[00433] Em algumas representações R21 é arilóxi opcionalmente substituído.
[00434] Em algumas representações R21 é heteroaril opcionalmente substituído.
[00435] Em algumas representações R21 é heterociclo opcionalmente substituído.
[00436] Em algumas representações R3a é hidrogênio.
[00437] Em algumas representações R3a é alquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00438] Em algumas representações R3a é alquil ramificado Cve opcional mente substituído.
[00439] Em algumas representações R33 é haloalquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00440] Em algumas representações R3a é alcóxi Cie opcionalmente substituído.
[00441] Em algumas representações R3a é fenil opcionalmente substituído.
[00442] Em algumas representações R3a é CO2R8
[00443] Em algumas representações R3b é hidrogênio.
[00444] Em algumas representações R3b é alquil Ci.e opcionalmente substituído.
[00445] Em algumas representações R3b é alquil ramificado Ci-e
[00446] Em algumas representações RJD é haloalquil Cve opcionalmente substituído.
[00447] Em algumas representações R3b é alcóxi Ci-6 opcionalmente substituído.
[00448] Em algumas representações R3b é fenil opcionalmente substituído.
[00449] Em algumas representações R3b é CO2R8
[00450] Em algumas representações R3c é hidrogênio.
[00451] Em algumas representações R3c é alquil C1.6 opcionalmente substituído.
[00452] Em algumas representações R3c é alquil ramificado Ci^ opcionalmente substituído.
[00453] Em algumas representações R3c é haloalquil Ci-6 opcionalmente substituído.
[00454] Em algumas representações R3c é alcóxi Ci-6 opcionalmente substituído.
[00455] Em algumas representações RÓC é fenil opcionalmente substituído phenyl.
[00456] Em algumas representações R30 é CO2R8
[00457] Em algumas representações R3d é hidrogênio.
[00458] Em algumas representações R30 é alquil Ci-6 opcionalmente substituído.
[00459] Em algumas representações R3d é alquil ramificado Ci-e opcionalmente substituído.
[00460] Em algumas representações R3d é haloalquil opcionalmente substituído.
[00461] Em algumas representações RM é alcóxi Ci-6 opcionalmente substituído.
[00462] Em algumas representações R30 é fenil opcionalmente substituído.
[00463] Em algumas representações R3d é CO2R8
[00464] Em algumas representações R3*5 é hidrogênio
[00465] Em algumas representações Rie é alquil C1-6 opcionalmente
[00466] Em algumas representações R3e é alquil ramificado Ci-e opcionalmente substituído.
[00467] Em algumas representações R3® é haloalquil Ci-6 opcionalmente substituído.
[00468] Em algumas representações R3e é alcóxi opcionalmente substituído.
[00469] Em algumas representações R3® é fenil opcionalmente substituído.
[00470] Em algumas representações R3e é CO2R8
[00471] Em algumas representações R3f é hidrogênio.
[00472] Em algumas representações R3f é alquil Ci-6 opcionalmente substituído.
[00473] Em algumas representações R3f é alquil ramificado C1-6 opcionalmente substituído.
[00474] Em algumas representações R3f é haloalquil Ci_6 opcionalmente substituído.
[00475] Em algumas representações R3' é alcóxi Ci-β opcionalmente substituído.
[00476] Em algumas representações R3f é fenil opcionalmente substituído.
[00477] Em algumas representações R3f é CO2R8
[00478] Em algumas representações R39 é hidrogênio.
[00479] Em algumas representações R39 é alquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00480] Em algumas representações R39 é alquil ramificado C1.6 opcionalmente substituído.
[00481] Em algumas representações R39 é haloalquil C1.6 opcionalmente substituído.
[00482] Em algumas representações R39 é alcóxi C1-6 opcionalmente substituído.
[00483] Em algumas representações R39 é fenil opcionalmente substituído.
[00484] Em algumas representações R39 é CO2R8.
[00485] Em algumas representações R3h é hidrogênio.
[00486] Em algumas representações R3h é alquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00487] Em algumas representações R3h é alquil ramificado Ci-6 opcionalmente substituído.
[00488] Em algumas representações R3h é haloalquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00489] Em algumas representações R3h é alcóxi opcionalmente substituído.
[00490] Em algumas representações R3h é fenil opcionalmente substituído.
[00491] Em algumas representações R3h é CO2R8.
[00492] Em algumas representações R31 é hidrogênio.
[00493] Em algumas representações RJI é alquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00494] Em algumas representações R3' é alquil ramificado C1-6 opcionaimente substituído.
[00495] Em algumas representações R3' é haloalquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00496] Em algumas representações R3' é alcóxi C1-6 opcionalmente substituído,
[00497] Em algumas representações R3' é fenil opcionalmente substituído.
[00498] Em algumas representações R3' é CO2R8.
[00499] Em algumas representações R3Í é hidrogênio.
[00500] Em algumas representações R3j é alquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00501] Em algumas representações R3j é alquil ramificado Ci.e opcionalmente substituído.
[00502] Em algumas representações R3J é haloalquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00503] Em algumas representações R3j é alcóxi C1-6 opcionalmente substituído
[00504] Em algumas representações RJ) é fenil opcionalmente substituído.
[00505] Em algumas representações R3j é CO2Re
[00506] Em algumas representações R3k é hidrogênio.
[00507] Em algumas representações R3k é alquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00508] Em algumas representações R3K é alquil ramificado Ci-s opcionalmente substituído.
[00509] Em algumas representações R3k é haloalquil Ci_6 opcionalmente substituído.
[00510] Em algumas representações R3K é alcóxi Ci^ opcionalmente substituído.
[00511] Em algumas representações R3k é fenil opcionalmente substituído.
[00512] Em algumas representações R3k é CO2R8.
[00513] Em algumas representações R31 é hidrogênio.
[00514] Em algumas representações R31 é alquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00515] Em algumas representações R31 é alquil ramificado Ci_6 opcionalmente substituído.
[00516] Em algumas representações R31 é haloalquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00517] Em algumas representações R31 é alcóxi C1-6 opcionalmente substituído.
[00518] Em algumas representações R31 é fenil opcionalmente substituído.
[00519] Em algumas representações R31 é CO2R8
[00520] Em algumas representações R43 é hidrogênio.
[00521] Em algumas representações R43 é alquil Ci-e opcionalmente substituído.
[00522] Em algumas representações R43 é alquil ramificado C1-6 opcionalmente substituído.
[00523] Em algumas representações R43 é cicloalquil Ci^ opcionalmente substituído.
[00524] Em algumas representações R43 é haloalquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00525] Em algumas representações R43 é alcóxi C1-6 opcionalmente substituído.
[00526] Em algumas representações R43 é CO2R5
[00527] Em algumas representações R43 é CONR62
[00528] Em algumas representações R43 é NR'2.
[00529] Em algumas representações R43 é sulfato.
[00530] Em algumas representações R43 é sulfonato.
[00531] Em algumas representações R43 é aril opcionalmente substituído
[00532] Em algumas representações R43 é arilóxi opcionalmente substituído.
[00533] Em algumas representações R43 é heteroaril opcionalmente substituído
[00534] Em algumas representações R43 é heterociclo opcionalmente substituído.
[00535] Em algumas representações R4b é hidrogênio.
[00536] Em algumas representações R4*3 é alquil C4-6 opcionalmente substituído.
[00537] Em algumas representações R4b é alquil ramificado Ci-6 opcionalmente substituído.
[00538] Em algumas representações R4b é cicloalquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00539] Em algumas representações R4b é haloalquil Ci^ opcionalmente substituído.
[00540] Em algumas representações R4D é alcóxi Ci.6 opcionalmente substituído.
[00541] Em algumas representações R4b é CO2R5.
[00542] Em algumas representações R40 é CONR62
[00543] Em algumas representações R4b é NR72
[00544] Em algumas representações R4b é sulfato.
[00545] Em algumas representações R4b é sulfonato.
[00546] Em algumas representações R4b é aril opcionalmente
[00547] Em algumas representações R4b é arilóxi opcionalmente substituído.
[00548] Em algumas representações R4b é heteroaril opcionalmente substituído.
[00549] Em algumas representações R4b é heterociclo opcionalmente substituído.
[00550] Em algumas representações R40 é hidrogênio.
[00551] Em algumas representações R442 é alquil Ci-e opcionalmente substituído.
[00552] Em algumas representações R40 é alquil ramificado Ci-e opcionalmente substituído.
[00553] Em algumas representações R443 é cicloalquil C1-6 opcionalmente substituído.
[00554] Em algumas representações R40 é haloalquil Ci-6 opcionalmente substituído.
[00555] Em algumas representações R40 é alcóxi Ci-6 opcionalmente substituído.
[00556] Em algumas representações R40 é CO2R5
[00557] Em algumas representações R40 é CONR62
[00558] Em algumas representações R40 é NR72.
[00559] Em algumas representações R442 é sulfato.
[00560] Em algumas representações R442 é sulfonato.
[00561] Em algumas representações R442 é aril opcionalmente substituído.
[00562] Em algumas representações R442 é arilóxi opcionalmente substituído.
[00563] Em algumas representações R442 é heteroaril opcionalmente substituído.
[00564] Em algumas representações R442 é heterociclo opcionalmente substituído.
[00565] Em algumas representações R43 e R4b são tomados juntos com o átomo ao qual eles são ligados para formar um anel opcionalmente substituído tendo a partir de 6 átomos de anel contendo 2 átomos de oxigênio.
[00566] Em algumas representações R5 é hidrogênio.
[00567] Em algumas representações R5 é alquil opcionalmente substituído.
[00568] Em algumas representações R6 é hidrogênio.
[00569] Em algumas representações R6 é alquil opcionalmente substituído.
[00570] Em algumas representações R7 é hidrogênio.
[00571] Em algumas representações R7 é alquil opcionalmente substituído.
[00572] Em algumas representações R8 é hidrogênio.
[00573] Em algumas representações R8 é alquil opcionalmente substituído.
[00574] Em alguma representação t é um inteiro.
[00575] Em algumas representações t é 1.
[00576] Em algumas representações t é 2.
[00577] Em algumas representações t é 3.
[00578] Em algumas representações t é 4.
[00579] Em algumas representações t é 5.
[00580] Em algumas representações t é 6.
[00581] Em algumas representações A2 é
Figure img0122
[00582] Em algumas representações A2 é
Figure img0123
[00583] Em algumas representações A2 é
Figure img0124
[00584] Em algumas representações A2 é
Figure img0125
[00585] Em algumas representações A2 é
Figure img0126
[00586] Em algumas representações A2 é
Figure img0127
[00587] Em algumas representações A2 é
Figure img0128
[00588] Em algumas representações A2 é
Figure img0129
[00589] Em algumas representações A2 é
Figure img0130
[00590] Em algumas representações A2 é
Figure img0131
[00591] Em algumas representações A3 é
Figure img0132
[00592] Em algumas representações A3 é
Figure img0133
[00593] Em algumas representações A3 é
Figure img0134
[00594] Em algumas representações A3 é
Figure img0135
[00595] Em algumas representações A3 é
Figure img0136
[00596] Representações exemplares incluem compostos tendo a fórmula (VIII) ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos:
Figure img0137
onde exemplos não limitadores de M, z, y, X, n, e R' são definidos aqui abaixo na Tabela 1. Tabela 1:
Figure img0138
Figure img0139
Figure img0140
Figure img0141
Figure img0142
Figure img0143
Figure img0144
[00597] Representações exemplares incluem compostos tendo a fórmula (IX) ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos:
Figure img0145
onde exemplos não limitadores de M, Lig, y, z, X, e n são definidos aqui abaixo na Tabela 2. Tabela 2:
Figure img0146
Figure img0147
Figure img0148
Figure img0149
Figure img0150
Figure img0151
Figure img0152
Figure img0153
Figure img0154
Figure img0155
Figure img0156
Figure img0157
[00598] Representações exemplares incluem compostos tendo a fórmula (X) ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos:
Figure img0158
onde exemplos não limitadores de M, t, X, e q são definidos aqui abaixo na Tabela 4. Tabela 4:
Figure img0159
Figure img0160
[00599] Representações exemplares incluem compostos tendo a fórmula (XI) ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos:
Figure img0161
onde exemplos não limitadores de M, Lig, t, X, e q são definidos aqui abaixo na Tabela 5. Tabela 5:
Figure img0162
Figure img0163
[00600] Representações exemplares incluem compostos tendo a fórmula (XII) ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos:
Figure img0164
onde exemplos não limitadores de M, Lig, t, X, e q são definidos aqui abaixo na Tabela 6.
[00601] Tabela 6:
Figure img0165
Figure img0166
[00602] Representações exemplares incluem compostos tendo a fórmula (XIII) ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos:
Figure img0167
onde exemplos não limitadores de M1, M2, X, e n são definidos aqui abaixo na Tabela 7.
[00603] Tabela 7:
Figure img0168
[00604] Representações exemplares incluem compostos tendo a fórmula (XIV) ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos:
Figure img0169
onde exemplos não limitadores de M1, M2 Lig1, Lig2, X, e n são definidos aqui abaixo na Tabela 8.
[00605] Tabela 8:
Figure img0170
[00606] Representações exemplares incluem compostos tendo a fórmula (XV) ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos:
Figure img0171
onde exemplos não limitadores de M1, M2, Lig1, Lig2, X, e n são definidos aqui abaixo na Tabela 9. Tabela 9:
Figure img0172
[00607] Representações exemplares incluem compostos tendo a fórmula (XVI) ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos:
Figure img0173
[00608] onde exemplos não limitadores de M1, M2, Lig1, Lig2, X, e n são definidos aqui abaixo na Tabela 10.
Figure img0174
[00609] Representações exemplares incluem compostos tendo a fórmula (XVII) ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos:
Figure img0175
[00610] onde exemplos não limitadores de M1, M2, Lig1, Lig2, X, e n são definidos aqui abaixo na Tabela 11.
Figure img0176
[00611] Para os efeitos da presente invenção, um composto descrito pela fórmula racêmica significará igualmente qualquer um dos dois enantiômeros ou misturas dos mesmos, ou no caso em que um segundo centro quiral estiver presente, todos os diastereômeros.
[00612] Em todas as representações aqui fornecidas, os exemplos de substituintes opcionais adequados não pretendem limitar o escopo da invenção reivindicada. Os compostos da invenção podem conter qualquer um dos substituintes, ou combinações de substituintes, aqui fornecidos.
[00613] Propriedades dos compostos da invenção:
[00614] Com a feliz descoberta da cisdiamminodicloroplatinum(ll), i.e., cisplatina, e seu sucesso sem precedentes como um quimioterápico anticâncer, metalofarmacêuticos como agentes anticâncer tem atraído considerável atenção embora poucos tenham sido aprovados para uso clínico. Complexos derivados de ouro, ferro, e rutênio tem sido relatados como possuindo atividade anticâncer, e dois complexos organometálicos de rutênio (Imidazolium [trans- tetracloro(1H-imidazole)(S-dimetilsulfóxido)rutenato(lll)], NAMI-A e indazolium [frans-tetraclorobis(1/-/-indazole)rutenato(lll)], KP1019) estão atualmente em testes clínicos (Alessio, E.; Mestroni, G.; Bergamo, A.; Sava, G. Current Topics in Medicinal Chemistry 2004, 4, 1525-1535. Hartinger, C. G.; Zorbas-Seifried, S.; Jakupec, M. A.; Kynast, B.; Zorbas, H.; Keppler, B. K. Journal of Inorganic Biochemistry 2006, 100, 891-904.). Em contraste, metalofarmacêuticos derivados do ósmio metal de transição de terceira coluna permanecem em grande parte inexplorados ((a) Ni, W.-X.; Man, W.-L.; Cheung, M. T.-W.; Sun, R W.-Y.; Shu, Y.-L.; Lam, Y.-W.; Che, C.-M.; Lau, T.-C. Chemical Communications 2011, 47, 2140-2142.(b) Kostrhunova, H.; Florian, J.; Novakova, O.; Peacock, A. F. A.; Sadler, P. J.; Brabec, V. Journal of Medicinal Chemistry 2008, 51, 3635-3643 ), muito provavelmente devido a uma percebida reputação por ser altamente tóxico (ex., OSO4) e substitucionalmente inerte (Os2+, Os3+). Recentemente complexos organometálicos baseados em um motivo areno Os(ll) apresentaram potentes propriedades citotóxicas e anti- metastáticas in vitro, mas essa atividade não se traduziu para atividade anti- câncer in vivo (Bergamo, A.; Masi, A.; Peacock, A.; Habtemariam, A.; Sadler, P.; Sava, G. Journal of Inorganic Biochemistry 2010, 104, 7θ-86). Até agora, somente bases Schiff de nitridoósmio(VI) alto-valente apresentaram promessa in vivo. Juntos esses estudos preliminares referentes a complexos Os- baseados destacam vários pontos salientes: (i) a potente citotoxicidade in vitro não leva a priori a uma atividade anti-câncer in vivo, (ii) existem alguns complexos Os-baseados alto-valentes que apresentam potente citotoxicidade in vitro que se traduz para tumor-supressão in vivo, e (iii) mais importantemente, nem todos os compostos Os-baseados mostram toxicidade hospedeira de limitação de dose. Até agora, não existem exemplos de compostos fotodinâmicos baseados em complexo de coordenação à base de metal (PDCs) que tenham demonstrado com sucesso efeitos PDT in vitro ou efeitos PDT in vivo PDT. (Ni, W.-X.; Man, W.-L; Cheung, M. T.-W.; Sun, R. W - Y; Shu, Y.-L.; Lam, Y.-W.; Che, C.-M.; Lau, T.-C. Chemical Communications 2011, 47, 2140-2142. Kostrhunova, H ; Florian, J.; Novakova, O.; Peacock, A. F. A.; Sadler, P. J.; Brabec, V Journal of Medicinal Chemistry 2008, 51, 36353643. Bergamo, A.; Masi, A.; Peacock, A.; Habtemariam, A.; Sadler, P.; Sava, G. Journal of Inorganic Biochemistry 2010, 104, 79-86.).
[00615] Os compostos da divulgação aqui descritos são os primeiros exemplos do uso de compostos asfotodinâmicos complexos de coordenação á base de metal simples (PDCs) úteis para o tratamento e diagnóstico de estados de doença, particularmente para a destruição de organismos infecciosos, células hiperproliferativas, e células tumorais. Os compostos da divulgação (i) são complexos de coordenação à base de metal, (ii) absorvem luz ultravioleta (UV), visível, e infravermelho (IR) (particuiarmente próximo ao infravermelho (NIR)) e são ativados por comprimentos de ondas de UV a IR, particularmente >800 nm, (iii) matam células cancerígenas humanas em cultura e em animais, e (iv) destroem bactérias e bactérias resistentes a antibióticos.
[00616] Compostos usando os construtos orgânicos descritos aqui e empregando os metais ósmio, manganês, molibdênio, rênio, rutênio, ferro, cobalto, ródio, irídio, níquel, platina, paládio, vanádio, cromo, tungsténio, tecnécio e cobre também são capazes de atuar como agentes de PDT, são uteis para o tratamento e diagnóstico de estados de doença, particularmente para a destruição de organismos infecciosos, células hiperproliferativas, e células tumorais, e são incluídos nos compostos da divulgação.
[00617] Compostos da divulgação são agentes PDT solúveis em água, solúveis em solução salina e insolúveis em água. A solubilidade em água, solubilidade em solução salina e lipofilicidade dos ditos compostos podem ser sintonizadas alterando-se os substituintes. Complexos com estruturas (b) e (c) na Figura 1 tem falta de significativa hidrofobicidade e, consequentemente, são solúveis em água enquanto as estruturas (a), (d), e (e) são insolúveis em água Compostos solúveis em água podem ser tornados mais lipofílicos e compostos lipofílicos podem ser tornados hidrofílicos através de modificações estruturais, escolha judiciosa de solventes, diluições, excipientes, e outros.
[00618] Compostos da divulgação são úteis como agentes PDT tumor- direcionados. A hidrofobicidade, hidrofilicidade, lipofilicidade e retenção de tumor de compostos da divulgação podem ser controladas alterando-se os substituintes. A inclusão de pelo menos um ligante imidazo[4,5- f][1,10]fenantrolina tiofeno-anexado (estrutura (a) na Figura 1) leva a uma retenção de tumor em um modelo subcutâneo murino de câncer de cólon de pelo menos 4 horas. O número de unidades de tiofeno no ligante imidazo[4,5- f][1,10]fenantrolina pode ser manipulado para controlar a solubilidade em água versus retenção de tumor (estruturas (a), (e), e (f) na Figura 1).
[00619] Compostos da divulgação absorvem luz de UV através da luz IR, particularmente a luz próxima a IR (figura 2) e são úteis como agentes de terapia fotodinâmica. O ligante 2,2,-biquinolina diimina (“biq”) proporciona capacidade de NIR-absorção aos compostos da divulgação, enquanto a identidade dos ligantes remanescentes pode ser alterada para controlar as propriedades tanto físicas quanto farmacocinéticas do complexo bem como o seu mecanismo de ação para agentes PDT da divulgação.
[00620] Compostos da divulgação são não-tóxicos para células, mesmo em concentrações superiores a 100 uM. Além disso, compostos da divulgação apresentam um forte efeito PDT com dose crescente de luz (Figura 3), mesmo em concentrações de baixa efetividade de 0,8 uM. Em relação ao agente clínico ALA, esses compostos são muito mais estáveis (Figuras 4, 5) e apresentam maior absorção de fóton. Os compostos apresentam a capacidade de agir como agentes PDT Tipo 1 ou Tipo 2 dependendo da combinação de ligantes escolhida, onde a fotoquímica Tipo 1 envolve a geração de radicais tais como o radical hidroxila altamente tóxico e a fotoquímica Tipo 2 envolve sensibilização de oxigênio singlete pelo agente PDT. Esses mecanismos contrastantes de ação podem ser investigados incluindo-se removedores das respectivas espécies de oxigênio reativas no experimento PDT e notando se o efeito PDT é diminuído ou eliminado; por exemplo, eliminação de PDT na presença de um removedor para sinais de radical hidroxila de que o radical hidroxila está envolvido no mecanismo de ação. Compostos dessa classe descrita na presente invenção apresentam um espectro de atividades que vão do Tipo 1 puro ao Tipo 2 puro e também com elementos de ambos.
[00621] Os ligantes dos compostos da divulgação podem ser variados (i) para obter formulações tanto solúveis em água quanto insolúveis em água que rapidamente penetram nas membranas celulares e (ii) para trocar de atividade entre normóxia e hipóxia (Figura 6). Os compostos da divulgação, atuando como fotosensibilizadores, ligam DNA diretamente, induzindo altos níveis de condensação de DNA e subsequente apoptose, e são capazes de produzir uma quantidade terapêutica suficiente de oxigênio singlete e radicais hidroxila (espécies de oxigênio reativo, ROS, Figura 7), matando assim células microbianas e cancerígenas mesmo em ambientes hipóxicos.
[00622] Os compostos da divulgação são não-tóxicos para células mas apresentam potente fotocitotoxicidade em relação a células cancerígenas e micro-organismos e podem ser usados para gerar o efeito PDT (Figuras 8, 9) útil para o tratamento de doença associada à hiperproliferação celular, como o câncer, incluindo mas não limitado a câncer do seio, câncer do cólon, câncer do cérebro, melanoma, leucemia, e câncer da bexiga, e a destruição de microorganismos, bactérias, vírus, protozoários e fungos.
[00623] Agentes clínicos estabelecidos para PDT possuem produções de quantidade de oxigênio singlete respeitáveis, indicando uma alta probabilidade de que PDT in vivo depende, pelo menos em parte, da produção de oxigênio singlete. Os compostos da divulgação, surpreendentemente, apresentam produções de quantidade de oxigênio singlete muito baixas em todas as excitações de comprimento de onda (Tabela 1). Ao mesmo tempo em que não surpreende que a sensibilização de oxigênio singlete pela absorção de um- fóton falhe na janela fototerapêutica (780-950 nm), devido à energia de baixo- fóton (Starkey, J. R.; Rebane, A. K.; Drobizhev, M. A.; Meng, F.; Gong, A.; Elliott, A.; Mclnnerney, K.; Spangler, C. W. Clinical Cancer Research 2008, 14, 6564-6573), os baixos rendimentos quânticos de oxigênio singlete em comprimentos de ondas mais curtos é inesperada dado a potente PDT observada in vitro e in vivo com compostos da divulgação. Consequentemente, superóxido, peróxido de hidrogênio e radicais hidroxila podem ser responsáveis pela irrupção oxidativa aguda de ROS, mas espécies reativas de nitrogênio secundárias (RNS) podem também desempenhar um papel importante (Coleman, J.; Scherz, A., European Urological Review, 2012;7(2): 106-8). Efeitos fototermais não foram excluídos. Tabela 1: Rendimentos quânticos de oxigênio singlete de compostos exemplares da divulgação.
Figure img0177
Figure img0178
[00624] Representações da divulgação produzem emissão em comprimentos de onda >800 nm, e os rendimentos quânticos para emissão aumentam em menos de um fator ou dois em solução degaseificada ou purgada em argônio. A mínima dependência de oxigênio e saída de longo comprimento de onda podem ser úteis para efeitos de diagnóstico, especificamente em aplicações médicas ((a)Starkey, J. R.; Rebane, A. K.; Drobizhev, M. A.; Meng, F.; Gong, A.; Elliott, A.; Mclnnerney, K.; Spangler, C. W. Clinical Cancer Research 2008, 14, 6564-6573. (b) Cullander, C. The Journal of Investigative Dermatology. Symposium Proceedings / the Society for Investigative Dermatology, Inc. [e] European Society for Dermatological Research 1998, 3, 166-171). Adicionalmente, os compostos profundamente pigmentados podem ser usados como indicadores colorimétricos para células cancerosas e tecido (Figura 10) conforme indicado pela alta retenção de compostos da divulgação pelas células cancerosas.
[00625] Compostos da divulgação tem a capacidade de colher fótons com baixa energia, expandindo a resposta espectral bem na região do espectro eletromagnético não disponível para fotosensibilizadores anteriormente descritos, tornando-os úteis em células solares sensibilizadas por corante (DSSCs). Representações da divulgação apresentam tanto absorção pancromática quanto alta densidade ótica (Figuras 1 e 11, TLDOsH2B Ch). O ligante 2,2’-biquinoline dos compostos da divulgação servem como ligantes aromáticos n-deslocalizados que aumentam a força oscilatória de transições NIR de centrifugação proibida emprestando intensidade de transições singlete- singlete significativamente de centrifugação permitida desviadas para o vermelho (Kinoshita, T.; Fujisawa, J.-i.; Nakazaki, J.; Uchida, S.; Kubo, T.; Segawa, H. J. Phys. Chem. Lett. 2012, 3, 394-398). Ligantes adicionais são incorporados sem alterar significativamente a assinatura de absorção NIR do composto modelo TLDOsH2B Cl2. A Figura 11 demonstra que 1,10-fenantrolina pode ser substituída por imidazo[4,5-f][1,10]fenantrolina (TLDOsH2IP Cl2) ou 2- (2”-tienil)-imidazo[4,5-f][1,10]fenantrolina (TLDOslH Cl2), um composto fotobiologicamente ativo útil como um agente PDT que pode ser ativado com fontes de luz NIR.
[00626] Compostos da divulgação também são capazes de destruir micro-organismos, tais como Staphylococcus aureus (SA) e S. aureus (MRSA) resistente a meticilina, com ativação por luz UV a IR, particularmente luz vermelha e NIR Como um exemplo, a ativação de TLDOsH2IP CI2 (tão baixa quanto 25 μM) com luz vermelha produziu substancial inativação fotodinâmica de MRSA medida como redução logio em unidades formadoras de colônia (cfu) per mL de solução bacteriana. Em picos de concentração, reduções logio de 5.2 e 4.6 foram alcançadas com TLDOsH2IP CI2 e TLD0sH2B Cfe, respectivamente (Figura 15). Assim, a inativação fotodinâmica (PDI) mediada por essa nova classe de fotosensibilizadores foi demonstrada para um patógeno particularmente oportunista, e esse efeito fotodinâmico pode ser aplicado tanto a bactérias gram-positivas quanto gram-negativas (resistentes e não resistentes) em vários graus de tensão de oxigénio por escolha judiciosa do fotosensibilizador e seu comprimento de onda de ativação.
[00627] Compostos da divulgação também são capazes de aumentar o tempo de sobrevivência em camundongos com tumores de cólon adenocarcinoma com ativação por irradiação no comprimento de onda apropriado. Resultados exemplares com compostos da divulgação são mostrados na Figura 16. PDT TLDOsH2IP Ch-mediado com luz vermelha (635 nm) a 190 ou 266 J/cm2 foi realizado em camundongos (tipo imunogênico CT26CL25) com tumores de cólon subcutâneo adenocarcinoma. A Figura 16 contem curvas de sobrevivência Kaplan Meier demonstrando que luz ou fotosensibilizador sozinhos não levam á sobrevivência animal prolongada. Entretanto, camundongos tratados com luz mais fotosensibilizador experimentam sobrevivência prolongada, e essa sobrevivência aumenta com o aumento da dose de luz. Quando TLDOsH2IP CI2 é ativado por 266 J/cm2 de luz vermelha, a sobrevivência a longo prazo dos animais é evidente em mais de 80% da população. Consequentemente, a classe de compostos descrita nesta invenção traz uma promessa como ferramentas terapêuticas para o tratamento do câncer (e destruição de células indesejadas em geral, tais como micro-organismos e vírus).
[00628] Compostos da divulgação também tem função imuno- moduladora, pela qual o tratamento PDT in vivo foi utilizado para mediar a rejeição de tumores secundários. Camundongos PDT-tratados foram re- desafiados com células CT26. CL25 (antigênicas) que expressam um tumor antígeno e não resultou nenhum tumor. Em camundongos controle que não receberam tratamento prévio PDT, foi relatado um novo crescimento do tumor em até 4 dias em todos os camundongos. Dessa forma, PDT com compostos desta invenção podem modificar a resposta imune celular que leva à imunidade sistêmica, antígeno-específica e anti-tumor.
PROCESSO
[00629] A presente invenção também se refere a um processo para preparar os compostos da presente invenção.
[00630] Compostos dos seguintes ensinamentos podem ser preparados de acordo com os procedimentos aqui delineados, a partir de matérias primas comercialmente disponíveis, compostos conhecidos na literatura, ou intermediários facilmente preparados, empregando métodos e procedimentos sintéticos padrão conhecidos dos especialistas. Métodos e procedimentos sintéticos padrão para a preparação de moléculas orgânicas e complexos de coordenação e transformações e manipulações de grupo funcional podem ser facilmente obtidos na literatura científica relevante ou em manuais padrão no campo. Deve ser observado que onde condições de processo típicas ou preferidas (i.e., temperaturas de reação, tempos, razão molar de reagentes, solventes, pressões, etc.) são dadas, outras condições de processo também podem ser usadas salvo afirmação em contrário. Condições de reação ideais podem variar com os reagentes ou solventes em particular usados, mas essas condições podem ser determinadas por qualquer especialista na área através de procedimentos de otimização rotineiros. Os especialistas em síntese orgânica e inorgânica reconhecerão que a natureza e a ordem das etapas sintéticas apresentadas podem ser variadas com o propósito de otimizar a formação dos compostos aqui descritos.
[00631] Os processos aqui descritos podem ser monitorados de acordo com qualquer método apropriado conhecido. Por exemplo, a formação do produto pode ser monitorada por meio de espectroscopia, como a espectroscopia por ressonância magnética nuclear (ex., 1H ou 13C), espectroscopia por infravermelho, espectrofotometria (ex., UV-visível) espectrometria de massa, ou por cromatografia como a cromatografia líquida de alta pressão (HPLC), cromatografia por gás (GC), cromatografia por gel- permeação (GPC), ou cromatografia por camada fina (TLC).
[00632] A preparação dos compostos pode envolver a proteção e desproteção de vários grupos químicos. A necessidade de proteção e desproteção e a seleção dos grupos de proteção apropriados pode ser facilmente determinada por um especialista na área. A química dos grupos de proteção pode ser encontrada, por exemplo, em Greene et. al., Protective Groups in Organic Synthesis, 2d. Ed.(Wiley & Sons), cuja divulgação completa está aqui incorporada como referência para todos os efeitos.
[00633] As reações dos processos aqui descritos podem ser realizadas em solventes apropriados que podem ser facilmente selecionados por qualquer especialista da área de síntese orgânica e inorgânica. Solventes apropriados são tipicamente substancialmente não reativos com os reagentes, intermediários, e/ou produtos em temperaturas nas quais as reações são realizadas, i.e., temperaturas que podem ir desde a temperatura de congelamento do solvente até a temperatura de ebulição do solvente. Uma determinada reação pode ser realizada em um solvente ou uma mistura de mais de um solvente. Dependendo da etapa de reação em particular, solventes adequados para uma etapa de reação em particular podem ser selecionados.
[00634] Os compostos desses ensinamentos podem ser preparados através de métodos conhecidos na técnica de química orgânica e inorgânica. Os reagentes usados na preparação dos compostos desses ensinamentos podem ser ou obtidos comercialmente ou preparados através de procedimentos padrão descritos na literatura. Por exemplo, compostos da presente invenção podem ser preparados de acordo com o método ilustrado nos Esquemas Sintéticos Gerais.
ESQUEMAS SINTÉTICOS GERAIS PARA A PREPARAÇÃO DE COMPOSTOS
[00635] Os reagentes usados na preparação dos compostos desta invenção podem ser ou obtidos comercialmente ou preparados através de procedimentos padrão descritos na literatura. De acordo com esta invenção, compostos no gênero podem ser produzidos através de um dos esquemas de reação seguintes.
[00636] Compostos de fórmula (5) podem ser preparados de acordo com o processo delineado nos seguintes esquemas:
Figure img0179
[00637] Desta maneira, um composto adequadamente substituído da fórmula (1), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, é reagido com um composto adequadamente substituído da fórmula (2) na presença de um sal de amónio como o acetato de amónio, formato de amónio, cloreto de amónio, brometo de amónio, sulfato de amónio e outros em um solvente como o acido acético, acido fórmico, acido propiônico e outros, opcionalmente na presença de metanol, etanol, N, N-dimetilformamida e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (3). Um composto da fórmula (3) foi então reagido com um composto da fórmula (4) em um solvente como o metanol, etanol, isopropanol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (5). Compostos da fórmula (5) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos dos especialistas na área.
Figure img0180
[00638] Alternativamente, um composto adequadamente substituído da fórmula (1), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, é reagido com um composto adequadamente substituído da fórmula (2a) na presença de um sal de amónio como o acetato de amónio, formato de amónio, cloreto de amónio, brometo de amónio, sulfato de amónio e outros em um solvente como o acido polifosfórico, acido acético, acido fórmico, acido propiónico e outros, opcionalmente na presença de metanol, etanol, N, N- dimetilformamida e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (3). Um composto da fórmula (3) foi então reagido com um composto da fórmula (4) em um solvente como o metanol, etanol, isopropanol, etileno glicol, 1,2- dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (5). Compostos da fórmula (5) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos dos especialistas na área
[00639] Compostos de fórmula (7) podem ser preparados de acordo com o processo delineado no Esquema 2.
Figure img0181
[00640] Desta maneira, um composto adequadamente substituído da fórmula (3) é reagido com um composto da fórmula (6) em um solvente como o metanol, etanol, isopropanol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (7). Compostos da fórmula (7) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos dos especialistas na área.
[00641] Compostos de fórmula (8) podem ser preparados de acordo com o processo delineado no Esquema 3.
Figure img0182
[00642] Desta maneira, um composto adequadamente substituído da fórmula (9), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, é reagido com um composto adequadamente substituído da fórmula (10) na presença de um sal de amónio como o acetato de amónio, formato de amónio, cloreto de amónio, brometo de amónio, sulfato de amónio e outros em um solvente como o acido acético, acido fórmico, acido propiónico e outros, opcionalmente na presença de metanol, etanol, N, N-dimetilformamida e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (11). Um composto da fórmula (11) foi então reagido com um composto da fórmula (12) em um solvente como o metanol, etanol, isopropanol, etileno glicol, 1,2-dimetoxyetano, glicerol, água, 1,4-dioxano, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (8). Compostos da fórmula (8) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos dos especialistas na área.
Figure img0183
[00643] Alternativamente, um composto adequadamente substituído da fórmula (9), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, é reagido com um composto adequadamente substituído da fórmula (10a) na presença de um sal de amónio como o acetato de amónio, formato de amónio, cloreto de amónio, brometo de amónio, sulfato de amónio e outros em um solvente como o acido polifosfórico, acido acético, acido fórmico, acido propiônico e outros, opcionalmente na presença de metanol, etanol, N, N- dimetilformamida e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (11). Um composto da fórmula (11) foi então reagido com um composto da fórmula (12) em um solvente como o metanol, etanol, isopropanol, etileno glicol, 1,2- dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (8). Compostos da fórmula (8) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos dos especialistas na área.
[00644] Compostos da fórmula (8a) podem ser preparados de acordo com o processo delineado no seguinte Esquema 3b.
Figure img0184
[00645] Um composto da formula (11) foi então reagido com um composto da fórmula (12) em um solvente como o metanol, etanol, isopropanol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por microondas, para fornecer um composto da fórmula (8a). Um composto da fórmula (8a) foi então reagido com um composto da fórmula (12a) em um solvente como o metanol, etanol, isopropanol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (8b). Compostos da fórmula (8b) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos dos especialistas na área.
[00646] Compostos de fórmula (8d) podem ser preparados de acordo com o processo delineado no seguinte Esquema 3c.
Figure img0185
[00647] Um composto da formula (11) foi então reagido com um composto da fórmula (12b) em um solvente como o metanol, etanol, isopropanol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (8c). Um composto da fórmula (8c) foi então reagido com um composto da fórmula (12a) em um solvente como o metanol, etanol, isopropanol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (8d). Compostos da fórmula (8d) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos dos especialistas na área.
[00648] Compostos de fórmula (8f) podem ser preparados de acordo com o processo delineado no seguinte Esquema 3d.
Figure img0186
[00649] Um composto da formula (11) foi então reagido com um composto da fórmula (12c) em um solvente como o metanol, etanol, isopropanol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (8e). Um composto da fórmula (8e) foi então reagido com um composto da fórmula (12d em um solvente como o metanol, etanol, isopropanol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (8f). Compostos da fórmula (8f) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos dosespecialistas na área.
[00650] Compostos de fórmula (13) podem ser preparados de acordo com o processo delineado no seguinte Esquema 4.
Figure img0187
[00651] Desta maneira, um composto adequadamente substituído da fórmula (14), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, foi então reagido com um composto da fórmula (15), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, em um solvente como o metanol, etanol, isopropanolol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (13). Compostos da fórmula (13) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos pelos especialistas na área.
[00652] Compostos de fórmula (16) podem ser preparados de acordo com o processo delineado no Esquema 5.
Figure img0188
[00653] Desta maneira, um composto adequadamente substituído da fórmula (17) é reagido com um composto da fórmula (18) em um solvente como o metanol, etanol, isopropanolol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (16). Compostos da fórmula (16) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos pelos especialistas na área.
[00654] Compostos de fórmula (19) podem ser preparados de acordo com o processo delineado no Esquema 6.
Figure img0189
[00655] Desta maneira, um composto adequadamente substituído da fórmula (20), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, foi então reagido com um composto da fórmula (21), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, em um solvente como o metanol, etanol, isopropanolol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (19). Compostos da fórmula (19) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos pelos especialistas na área.
[00656] Compostos de fórmula (22) podem ser preparados de acordo com o processo delineado no Esquema 7.
Figure img0190
[00657] Desta maneira, um composto adequadamente substituído da fórmula (23), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, é reagido com um composto da fórmula (24), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, em um solvente como o metanol, etanol, isopropanolol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (22). Compostos da fórmula (22) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos pelos especialistas na área.
[00658] Compostos de fórmula (25) podem ser preparados de acordo com o processo delineado no Esquema 8.
Figure img0191
[00659] Desta maneira, um composto adequadamente substituído da fórmula (26), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, e um composto adequadamente substituído da fórmula (27), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, são reagidos com um composto da fórmula (24) em um solvente como o metanol, etanol, isopropanolol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (25). Compostos da fórmula (25) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos pelos especialistas na área.
Figure img0192
[00660] Alternativamente, um composto adequadamente substituído da fórmula (26), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, é reagido com um composto da fórmula (30), em um solvente como o metanol, etanol, isopropanolol, etileno glicol, 1,2- dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (26a). Um composto da fórmula (26a) é então reagido com um composto da fórmula (27), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, em um solvente como o metanol, etanol, isopropanolol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4- dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (27a). Um composto da fórmula (27a) é então reagido com um composto da fórmula (29), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, em um solvente como o metanol, etanol, isopropanolol, etileno glicol, 1,2- dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (25).
[00661] Compostos de fórmula (28) podem ser preparados de acordo com o processo delineado no Esquema 10.
Figure img0193
[00662] Desta maneira, um composto adequadamente substituído da fórmula (29), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, é reagido com um composto da fórmula (30), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, opcionalmente na presença de cloreto de lítio, em um solvente como o metanol, etanol, isopropanolol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (28). Compostos da fórmula (28) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos pelos especialistas na área.
[00663] Compostos de fórmula (31) podem ser preparados de acordo com o processo delineado no Esquema 11.
Figure img0194
[00664] Um composto da fórmula (27a) é reagido com um composto da fórmula (29a), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, em um solvente como o metanol, etanol, isopropanolol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4-dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (25a). Um composto da fórmula (25a) é então reagido com um composto da fórmula (27a), um composto conhecido ou um composto preparado através de métodos conhecidos, em um solvente como o metanol, etanol, isopropanolol, etileno glicol, 1,2-dimetoxietano, glicerol, água, 1,4- dioxano, dimetil formamida, misturas dos solventes acima mencionados, e outros, opcionalmente aquecido, opcionalmente aquecido com irradiação por micro-ondas, para fornecer um composto da fórmula (31). Compostos da fórmula (31) podem ser convertidos em formas de sal alternativas através de métodos convencionais conhecidos pelos especialistas na área.
[00665] A invenção será ilustrada mais detalhadamente com referência aos exemplos seguintes, mas deve ser entendido que a presente invenção não deve estar limitada aos mesmos.
[00666] Os Exemplos abaixo fornecem métodos representativos para preparar compostos exemplares da presente invenção. O profissional especializado saberá como substituir os reagentes apropriados, matérias primas e métodos de purificação conhecidos, de modo a preparar os compostos da presente invenção.
[00667] Os espectros 1H-NMR foram obtidos em um Bruker Avance 300-MHz NMR. Dados de massa espectral de baixa e alta resolução foram determinados com um instrumento Bruker Daltonics micrOTOF. EXEMPLOS
Figure img0195
[00668] Preparação de 2-(2,,2”:5”,2”’-tertiofeno)-imidazo[4,5-f][1,10] fenantrolina (IP-TT): 10-Fenantrolina-5,6-dione (166.6 mg, 0.800 mmol), acetato de amónio (616 mg, 8.00 mmol), e 5-formil-2,2’:5’,2”-tertiofeno (221.12, 0.800 mmol) foram combinados com ácido acético glacial (4.0 mL) em uma câmara de reação de micro-ondas e reagido com 300 W a 180 °C por 10 minutos. A solução mudou de uma cor amarelo clara para uma cor vermelho escura e foi deixada esfriar em temperatura ambiente. A solução foi neutralizada pela adição gota-a-gota de NH4OH (6 mL) aquosa até que o produto precipitou como um sólido amarelo/marrom. O sólido foi coletado usando um filtro poroso de vidro sinterizado fino e lavado com H2O (15 mL). O produto foi secado a vácuo para dar um pó castanho amarelado. (256 mg, 69%). Rf = (2% H2O, 43% CHCh, 25% Acetona, 30% MeOH + 1% NH4OH). 1H NMR (DMSO-C/6) 7.14 (dd; 1H; J = 4.37 Hz), 7.33-7.43 (m; 4H), 7.55 (m; 1H), 7.75-7.79 (m; 3H), 8.82 (d; 2H; J = 8.01 Hz), 8.97 (d; 2H; J = 3.00 Hz).
Figure img0196
[00669] Preparação de 16x: 2,2’-5,2”-Tertiofeno-5-ácido borônico pinicol éster (236.1 mg, 0.780 mmol), 5-bromo-2-tiofeno carboxaldido (57.4 uL, 0.59 mmol), e Pd(PPh3)4 (55 mg) foram combinados em um tubo de micro-ondas purgado com argònio. O tubo de micro-ondas foi novamente purgado com argônio e 1,2-dimetoxietano (5.66 mL) e 2M Na2CO3 solução aquosa (0.4 mL) foram então adicionados separadamente por seringa. A solução foi reagida a 200 W e 175 °C por 1 hora. A solução verde escura foi filtrada em um poroso fino para remover o catalizador e lavado com pequenas quantidades de acetato de etilo. O filtrado foi diluído com adicional EtOAc, transferido para um separador de 125-mL, e lavado com solução aquosa saturada NaCI (3x50 mL). A camada orgânica foi concentrada sob pressão reduzida, e secada sob vácuo para dar o produto cru (130.9 mg, 62%). A purificação foi feita em uma coluna de sílica, eluindo com 1:1 diclorometano:hexanos. Um ponto de movimento lento que foi marcado positivo como tendo aldeído por Dinitrophenylhydrazine foi coletado, concentrado sob pressão reduzida, e secado sob vácuo para dar o produto puro (14.1 mg, 6.7%). Rf = 0.20 (1:1 diclorometano:hexanos). 1H NMR (CDCI3) 9 86 (s; 1H), 7.67 (d; 1H; J = 3.96 Hz), 7.21-7.29 (m; 3H), 7.20 (d; 1H; J = 3.54 Hz), 7.11-7.14 (m; 3H), 7.04 (t; 1H; J = 4.89 Hz).
Figure img0197
[00670] Preparação of 16L: 1,10-Fenantrolina-5,6-dione (41.6 mg, 0.200 mmol), acetato de amónio (154 mg, 2.00 mmol), e 16x (71.7 mg, 0.200 mmol) foram combinados com ácido acético glacial (1.0 mL) em uma câmara de reação por micro-ondas e reagidos a 300 W a 180 °C por 10 minutos. A solução foi deixada para esfriar até a temperatura ambiente seguido pela neutralização através de adição gota-a-gota de solução aquosa NH4OH (2-4 mL) até que o produto precipitou como um sólido marrom. O sólido foi coletado usando-se um filtro poroso de vidro sinterizado fino e lavado com H2O (15 mL). O produto foi secado sob vácuo para dar o produto cru como um pó marrom (105.9 mg, 96%). A purificação foi feita por recristalização a partir de MeOH quente para dar o produto puro (31.1 mg, 28%). 1H NMR (DMSO-Ó6) 9.04 (br; 2H), 8.84 (d; 2H; J = 7.35 Hz), 7.86 (br; 2H), 7.33-7.57 (m; 8H); 7.11 (br; 1H). MS (ESI+) m/z: 549.0 [M+1 H]+. HRMS (ESI+) m/z for C29H17N4S4; calcd 549.0331; encontrado 549.0307.
[00671] Preparação de 2L: 1,10-Fenantrolina-5,6-dione (234.1 mg, 1,11 mmol), acetato de amónio (1.77 g, 23.0 mmol), e 2,5-tiofeno dicarboxaldeído (77.9 mg, 0.556 mmol) foram combinados em ácido acético glacial (20 mL) e refluxados em ar a 135°C por 6 horas. A solução mudou de uma cor amarelo claro para uma cor vermelho escuro e o produto precipitou como um precipitado fibroso laranja claro. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente. O precipitado laranja foi coletado usando um filtro poroso de vidro sinterizado médio e lavado com H2O (10 mL). O produto foi secado sob vácuo para dar o produto final puro como um pó laranja claro, Não houve necessidade de purificação. (90.7 mg, 31.3%). Rf = faixa para 0.60 (2% H2O, 43% CHCI3, 25% Acetona, 30% MeOH + 1% NH40H). 1H NMR (300 MHz) [(CD3)2SO]: 9.07 (d; 4H; J = 3.03 Hz), 8.90 (d; 4H; J = 8.22 Hz), 8.04 (s; 2H), 7.86-7.90 (br; 4H). MS (ESI+) m/z: 521.1 [M+H]+. HRMS (ESI+) m/z for C3oH17N8S; calcd 521 1291; encontrado 521.1265.
Figure img0198
[00672] Preparação de 3L:1,10-Fenantrolina-5,6-dione (18.9 mg, 0.0900 mmol), acetato de amónio (138.7 mg, 1.80 mmol), e 2,2'-bitiofeno-5,5’- dicarbaldeído (10 mg, 0.0450 mmol) foram combinados em ácido acético glacial (5 ml_) e refluxados em ar a 135°C por 6 horas. A solução mudou de uma cor amarelo claro para uma cor vermelho escuro e o produto precipitou como um pó precipitado laranja claro. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente. A solução foi neutralizada pela adição gota-a-gota de solução aquosa NH4OH (5 ml_) até que mais produto desejado terminou por precipitar como um sólido laranja. O precipitado laranja foi coletado usando um filtro poroso de vidro sinterizado fino e lavado com H2O (10 ml_). O produto foi secado sob vácuo para dar um pó laranja que mostrou o produto e contaminante por NMR (12.6 mg, 47%). Uma síntese alternativa por micro- ondas também foi realizada envolvendo 1,10-Fenantrolina-5,6-dione (18.9 mg, 0.0900 mmol), acetato de amónio (138.7 mg, 1.80 mmol), e 2,2'-bitiofeno-5,5’- dicarbaldeído (10 mg, 0.0450 mmol) sendo combinado em ácido acético glacial (1.0 mL) em uma câmara de reação por micro-ondas e reagido com 300 W a 180°C por 10 minutos. A solução mudou de uma cor amarelo claro para uma cor vermelho escuro e foi deixada esfriar até a temperatura ambiente. Um precipitado laranja do produto foi visto. A solução foi neutralizada pela adição gota-a-gota de solução aquosa NH4OH (1 mL) até que mais produto desejado terminasse por precipitar como um sólido laranja O sólido foi coletado usando um filtro poroso de vidro sinterizado fino e lavado com H2O (10 mL). O produto foi secado sob vácuo para dar um pó laranja que mostrou o produto e contaminante por NMR. (25.3 mg, 93%) Rf= faixa para 0.68 (2% H2O, 43% CHCI3, 25% Acetona, 30% MeOH + 1% NH4OH). 1H NMR (300 MHz) [(CD3)2SO]: 9.02 (br), 8 85 (br; 4H), 7.84 (m; 2H), 7.70 (br).
Figure img0199
[00673] Preparação de imidazo[4,5-f][1,10]fenatrolina (IP): [1,10]fenantrolina[5,6]dione (525 mg, 2.5 mmol) foi combinado com formaldeído (0.243 mL of a 37% w/v solução, 3 mmol) e NH4OAc (3.85g, 50 mmol)) em glacial HOAc (8 mL). A reação foi aquecida em refluxo até que todo o reagente limitador fosse consumido e resfriado até a temperatura ambiente. A diluição com água seguida da neutralização com NH4OH deu um precipitado que foi filtrado e lavado com água e então éter etílico para produzir um sólido marrom claro (504 mg, 91%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6), δ (ppm): 13.75 (s, 1H), 9.03 (dd, 2H, J, =4.3 Hz, J2 =1.5 Hz), 8.83 (dd, 2H, J1 =8 Hz, J2 =1.5 Hz), 8.47 (d, 1H), 7.83 (dd, 2H, J, =8Hz, J2 =4.3Hz).
Figure img0200
[00674] Preparação de 2-(Tienil)imidazo[4,5-f][1,10]fenantrolina (IP-T). 1,10-Fenantrolina-5,6-dione (42 mg, 0.62 mmol), acetato de amónio (154 mg, 2.0 mmol), e 2-tiofenecarboxaldeído (18.3 mL, 0.20 mmol) foram combinados com ácido acético glacial (1 mL) em uma câmara de reação por micro-ondas e regido (300 W, 180 °C) por 10 minutos. A solução vermelho escuro foi resfriada até a temperatura ambiente e neutralizada pela adição gota-a-gota de solução aquosa NH4OH até que o produto precipitou como um sólido marrom amarelado. O sólido foi coletado usando um filtro poroso de vidro sinterizado fino e lavado com H2O. O produto foi secado sob vácuo para dar um pó amarelo (36.2 mg, 60%). = Estriado para 0.77 (2% H2O, 43% CHCI3, 25% acetona, 30% MeOH + 1% NH4OH). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 9.01 (d; 2H; J = 1.89 Hz ), 8.83 (d; 2H; J - 7.89 Hz), 7.89 (s; 1H), 7.81 (br; 2H), 7.73 (s; 1H), 7.27 (s; 1H). MS (ESI+) m/z: 303.1 [M+H]+. HRMS (ESI+) m/z for C17H11N4S; calcd 303.0699; encontrado 303.0706.
Figure img0201
[00675] Preparação de 2-(2’,2”-Bitiofeno)imidazo[4,5-f][1,10]fenantrolina (IP-BT). 1,10-Fenantrolina-5,6-dione (100 mg, 0.48 mmol), acetato de amónio (740 mg, 9.6 mmol), e 5-formil-2,2’-bitiofeno (112, 0.58 mmol) foram combinados com ácido acético glacial (10 mL) em uma câmara de reação por micro-ondas e reagido (300 W, 180 °C) por 10 minutos. A solução vermelho escuro foi resfriada até a temperatura ambiente e neutralizada por adição gota- a-gota de solução aquosa NH40H até que o produto precipitou como um sólido amarelo/marrom. O sólido foi coletado usando um filtro poroso de vidro sinterizado fino e lavado com H2O. O produto foi secado sob vácuo para dar um sólido laranja-marrom (125 mg, 68%). Rf = 0.33 (2% H2O/43% CHCh/25% acetona/30% CH3OH + 1% NH4OH). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 7.17 (m, 1H), 7.47(m, 2H), 7.60 (m, 1H), 7.83 (m, 3H), 8.84 (d, 2H), 9.03 (m, 2H). MS (ESI+) m/z: 385.0 [M+1]+. HRMS (ESI+) m/z for C21H13N4S2; calcd 385.0582; encontrado 385.0576.
[00676] Preparação de 2-(2’,2”-Bitiofeno)imidazo[4,5-f][1,10]fenantrolina (IP-BT). 1,10-Fenantrolina-5,6-dione (100 mg, 0.48 mmol), acetato de amónio (740 mg, 9.6 mmol), e 5-formil-2,2’-bitiofeno (112, 0.58 mmol) foram combinados com ácido acético glacial (10 mL) em uma câmara de reação por micro-ondas e reagido (300 W, 180 °C) por 10 minutos. A solução vermelho escuro foi resfriada até a temperatura ambiente e neutralizada pela adição gota-a-gota de solução aquosa NH40H até que o produto precipitou como um sólido amarelo/marrom. O sólido foi coletado usando um filtro poroso de vidro sinterizado fino e lavado com H2O. O produto foi secado sob vácuo para dar um sólido laranja-marrom (125 mg, 68%). Rf= 0.33 (2% H2O/43% CHCl3/25% acetona/30% CH3OH + 1% NH4OH). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 7.17 (m, 1H), 7.47(m, 2H), 7.60 (m, 1H), 7.83 (m, 3H), 8.84 (d, 2H), 9.03 (m, 2H). MS (ESI-*-) m/z: 385.0 [M+1f. HRMS (ESI+) m/z for C2iH13N4S2; calcd 385.0582; encontrado 385.0576.
[00677] Preparação de TLDOsH2B Cl2 e TLDOsH2B 2PF6. Os(biq)2CI2 (162 mg, 0.2 mmol) e [1,10]fenantrolina monoidrato (48 mg, 0.24 mmol) foram combinados em um etileno glicol purgado em argônio (2.5 mL) e irradiados em um reator de micro-ondas de vaso único (180 °C, 300 W) por 10 minutos. A mistura da reação foi deixada esfriar e dividida entre água e CH2CI2. A fase aquosa foi lavada com CH2CI2 para remover o ligante não reagido, e então uma solução aquosa de NH4PF6 foi adicionada gota-a-gota até que mais nenhum precipitado se formou. O produto foi extraído em CH2CI2 e concentrado sob pressão reduzida para produzir um sólido roxo escuro (247 mg). A purificação de TLDOsH2B 2PF6 foi feita em sílica, eluindo com uma solução 7.5-10% H2O:MeCN contendo 0.5% KNO3. As frações contendo o produto desejado foram combinadas, evaporadas sob pressão reduzida, e ainda secadas sob vácuo para dar o complexo NO3 correspondente e excesso KNO3. Para remover o sal indesejado, o produto foi dissolvido em água com sonicação. Uma solução aquosa saturada de KPF6 foi adicionada até que nenhum outro produto precipitou. O complexo PF6‘ desejado foi extraído usando CH2CI2- A camada orgânica foi separada, concentrada sob pressão reduzida, e secada sob vácuo para dar o produto final puro como um sólido roxo escuro (105 mg, 45%) que foi sujeitado a metátese de ânion para formar o complexo de cloreto correspondente (87.7 mg, 97% de eficiência de conversão) em Amberlite IRA- 410.1H NMR (300 MHz, CD3CN) δ (ppm): 9.10 - 8.95 (m, 2H), 8.90 - 8.75 (m, 4H), 8.27 - 8.15 (m, 4H), 8.12 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.98 (s, 2H), 7.86 - 7.74 (m, 2H), 7.68 (dq, J = 7.8, 4.4, 3.3 Hz, 4H), 7.48 (d, J = 4.3 Hz, 2H), 7.26 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 7.01 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 6.90 (dd, J = 14.7, 6.4 Hz, 4H), 6.79 (d, J = 6.6 Hz, 2H). MS (ESI+) m/z: 442.1 [M-2PF6]2+, 1027.2 [M-PF6], HRMS (ESI+) m/z for C48H32N6OS; ca led 442.1146; encontrado 442.1132.
Figure img0202
[00678] Preparação de TLDOsH2IP Cl2e TLDOsH2IP 2PF6: Os(biq)2GI2 (81 mg, 0.1 mmol) e lmidazo[4,5-f][1,10]fenatrolina (22 mg, 0.1 mmol) foram combinados com etileno glicol purgado em argônio (2.5 mL) e irradiados em um reator de micro-ondas de vaso único (180 °C, 300 W) por 10 minutos. A mistura da reação foi deixada esfriar e dividida entre água e CH2CI2. A fase aquosa foi lavada com CH2CI2 para remover o ligante não reagido, e então uma solução aquosa de NH4PF6 saturada foi adicionada gota-a-gota até que mais nenhum precipitado se formasse. O sólido foi extraído em CH2CI2 e concentrado sob pressão reduzida para produzir o TLDOsH2IP 2PF6s como um sólido roxo escuro (120 mg, 99%) em rendimento quantitativo. O material foi usado sem mais nenhuma purificação. 100 mg do produto foi sujeitado à metátese de ânion para formar o complexo de cloreto correspondente (61.4 mg, 76% de eficiência de conversão) em Amberlite IRA-410. 1H NMR (300 MHz, CD3CN) δ (ppm) 9.02 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 8.83 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 8.80 (d, J = 3.5 Hz, 2H), 8.22 - 8.13 (m, 3H), 8.10 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.88 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 7.84 - 7.75 (m, 2H), 7.63 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.47 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.22 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.05 - 6.95 (m, 2H), 6.91 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 6.80 -6.71 (m, 2H). MS (ESI+) m/z: 462.1 [M-2PF6]2+, 1069.2 [M-PF6], HRMS (ESI+) m/z for C49H32N8OS; calcd 462.1177; encontrado 462.1174.
Figure img0203
[00679] Preparação de TLDOslH Cl2e TLDOslH 2PF6. Os(biq)2CI2 (81 mg, 0.1 mmol) e 2-(Tienil)imidazo[4,5-f][1,10]fenantrolina (30 mg, 0.1 mmol) foram combinados em etileno glicol purgado em argônio (2.5 mL) e irradiados em um reator de micro-ondas de vaso único (180 °C, 300 W) por 10 minutos. A mistura da reação foi deixada esfriar e dividida entre água e CH2CI2. A fase aquosa foi lavada com CH2CI2 para remover o ligante não reagido, e então uma solução aquosa saturada de NH4PF6 foi adicionada gota-a-gota até que mais nenhum precipitado se formasse. O produto foi extraído em CH2CI2 e concentrado sob pressão reduzida para produzir um sólido roxo escuro (96 mg, 74%). TLDOslH 2PF6 não precisou de mais nenhuma purificação. O produto puro (65 mg) foi sujeitado a metátese de ânion para formar o complexo de cloreto correspondente (47.9 mg, 91% de eficiência de conversão) em Amberlite IRA-410. 1H NMR (300 MHz, CD3CN) δ (ppm): 9.01 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 8.82 (d, J - 9.1 Hz, 4H), 8.51 (s, 2H), 8.18 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 8.10 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.88 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 7.85 - 7.73 (m, 4H), 7.64 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.57 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.53 - 7.44 (m, 2H), 7.29 - 7.19 (m, 2H), 7.19 - 7.12 (m, 1H), 7.06 - 6.96 (m, 3H), 6.91 (d, J = 9.2 Hz, 4H), 6.78 (d, J = 6.7 Hz, 2H). MS (ESI+) m/z: 503.1 [M-2PF6]2+, 1005.2 [M-PF6], HRMS (ESI+) m/z for C53H34N8OSS; calcd 503.1115; encontrado 503.1105.
Figure img0204
[00680] Preparação de TLDOsWH Cl2 e TLDOslOH 2PF6. Os(biq)2CI2 (81 mg, 0.1 mmol) e 2-(2',2”-Bitiofeno)imidazo[4,5-f][1,10]fenantrolina (38.4 mg, 0.1 mmol) foram combinados em etileno glicol purgado em argônio (2.5 mL) e irradiados em um reator de micro-ondas de único vaso (180 °C, 300 W) por 10 minutos. A mistura da reação foi deixada esfriar e dividida entre água e CH2CI2. A fase aquosa foi lavada com CH2CI2 para remover o ligante não reagido, e então uma solução saturada aquosa de NH4PF6 foi adicionada gota-a-gota até que mais nenhum precipitado se formasse. O produto foi extraído em CH2CI2 e concentrado sob pressão reduzida para produzir um sólido roxo escuro (135 mg, 98%). TLDOslOH 2PF6 não precisou de mais purificação. O produto puro (70 mg) foi sujeitado a metátese de ânion para formar o complexo de cloreto correspondente (55.3 mg, 97% de eficiência de conversão) em Amberlite IRA- 410. 1H NMR (300 MHz, CD3CN) δ (ppm): 9.01 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 8.82 (d, J = 9.1 Hz, 4H), 8.51 (s, 2H), 8.18 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 8.10 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7 88 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 7.85 - 7.73 (m, 4H), 7.64 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.57 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.53 - 7.44 (m, 2H), 7.29 - 7.19 (m, 2H), 7.19 - 7.12 (m, 1H), 7.06 - 6.96 (m, 3H), 6.91 (d, J = 9.2 Hz, 4H), 6.78 (d, J = 6.7 Hz, 2H). MS (ESI+) m/z: 544.1 [M-2PF6]2+. HRMS (ESI+) m/z for C57H36N8OSS2; calcd 544.1054; encontrado 544.1046.
Figure img0205
[00681] Preparação de TLDOs14H Cl2 e TLDOs14H 2PF6. Os(biq)2CI2 (162 mg, 0.2 mmol) e 2-(2’,2”:5”,2”’-tertiofeno)-imidazo[4,5-f][1,10] fenantrolina (112 mg, 0.24 mmol) foram combinados em etileno glicol purgado em argônio (2.5 mL) e irradiados em um reator de micro-ondas de vaso único (180 °C, 300 W) por 10 minutos. A mistura da reação foi deixada esfriar e dividida entre água e CH2CI2. A fase aquosa foi lavada com CH2CI2 para remover o ligante não reagido, e então uma solução aquosa de NH4PFe foi adicionada gota-a-gota até que mais nenhum precipitado se formasse. O produto foi extraído em CH2CI2 e concentrado sob pressão reduzida para produzir um sólido roxo escuro (456 mg). A purificação de TLDOs14H PF6 foi feita em sílica, eluindo com uma solução 0-10% H2O:MeCN contendo 0.5-2.5% KNO3. As frações contendo o produto desejado foram combinadas, evaporadas sob pressão reduzida, e ainda secadas sob vácuo para dar o complexo NOs' correspondente e excesso KNO3. Para remover o sal indesejado, o produto foi dissolvido em água com sonicação. Uma solução aquosa saturada de KPF6 foi adicionada até que mais nenhum produto precipitou. O complexo PFe' desejado foi extraído usando CH2CI2. A camada orgânica foi separada, concentrada sob pressão reduzida, e secada sob vácuo para dar o produto puro final como um sólido preto amarronzado muito escuro (84 mg, 29%) que foi sujeitado a metátese de ânion para formar 0 complexo de cloreto correspondente (68 mg, 99% de eficiência de conversão) em Amberlite IRA-410. 1H NMR (300 MHz, CD3CN-d3) δ 9.01 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 8.82 (dd, J = 8.7, 2.4 Hz, 4H), 8.46 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 8.19 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 8.11 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.88 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 7.85 - 7.76 (m, 2H), 7.68 - 7.60 (m, 3H), 7.48 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.36 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.31 - 7.17 (m, 5H), 7.10 - 7.02 (m, 1H), 7.00 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 6.93 (d, J = 8.5 Hz, 4H), 6.78 (t, J = 7.9 Hz, 2H). MS (ESI+) m/z: 585.1 [M-2PF6]2+. HRMS (ESI+) m/z for C6iH38N80sS3; calcd 585.0993; encontrado 585.1012.
FORMULAÇÕES
[00682] A presente invenção também se refere a composições ou formulações que compreendem os compostos de acordo com a presente invenção. De modo geral, as composições da presente invenção compreendem uma quantidade efetiva de um ou mais compostos e sais dos mesmos de acordo com a presente invenção que são eficazes para fornecer terapia fotodinâmica; e um ou mais excipientes.
[00683] Para os efeitos da presente invenção os termos “excipiente” e “veículo” são usados de maneira intercambiável através do relatório da presente invenção e os ditos termos são definidos aqui como, “ingredientes que são usados na prática de formular uma composição farmacêutica segura e efetiva.”
[00684] O formulador entenderá que excipientes são usados primariamente para servir na administração de um medicamento seguro, estável e funcional, servindo não apenas como parte do veículo em geral para a administração, mas também como um meio para alcançar a efetiva absorção pelo recipiente do ingrediente ativo. Um excipiente pode desempenhar um papel tão simples e direto como o de ser um material de enchimento inerte, ou um excipiente conforme é usado aqui pode ser parte de um sistema estabilizador de pH ou revestimento para assegurar a administração dos ingredientes com segurança ao estômago. O formulador também pode tirar vantagem do fato dos compostos da presente invenção terem maior potência celular, propriedades farmacocinéticas, bem como maior biodisponibilidade oral.
[00685] Os presentes ensinamentos também fornecem composições farmacêuticas que incluem pelo menos um composto descrito aqui e um ou mais veículos, excipientes ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis. Exemplos desses veículos são bastante conhecidos dos especialistas e podem ser preparados de acordo com procedimentos farmacêuticos aceitáveis, como, por exemplo, aqueles descritos em Remington’s Pharmaceutical Sciences, 17a edição, ed. Alfonoso R. Gennaro, Mack Publishing Company, Easton, PA (1985), cuja divulgação completa está aqui incorporada a título de referência para todos os efeitos. Conforme é usado aqui, “farmaceuticamente aceitável” se refere a uma substância que é aceitável para uso em aplicações farmacêuticas a partir de uma perspectiva toxicológica e não interage adversamente com o ingrediente ativo. Consequentemente, veículos farmaceuticamente aceitáveis são aqueles que são compatíveis com os outros ingredientes da formulação e são biologicamente aceitáveis. Ingredientes ativos suplementares também podem ser incorporados às composições farmacêuticas.
[00686] Compostos dos presentes ensinamentos podem ser administrados oralmente ou parenteralmente, puros ou em combinação com veículos farmacêuticos convencionais. Veículos sólidos aplicáveis podem incluir uma ou mais substâncias que também podem atuar como agentes aromatizantes, lubrificantes, solubilizantes, agentes de suspensão, materiais de enchimento, glidantes, auxiliares de compressão, aglutinantes ou agentes de desintegração de tabletes, ou materiais encapsulates. Os compostos podem ser formulados de modo convencional, por exemplo, de maneira similar àquela usada para compostos fotodinâmicos conhecidos. Formulações orais contendo um composto divulgado aqui podem compreender qualquer forma oral convencionalmente usada, incluindo tabletes, cápsulas, formas bucais, trociscos, pastilhas e líquidos orais, suspensões ou soluções. Em pós, o veículo pode ser um sólido finamente dividido, que é uma mistura com um composto finamente dividido. Em tabletes, um composto divulgado aqui pode ser misturado com um veículo tendo as propriedades de compressão necessárias em proporções adequadas e compactado no formato e tamanho desejado. Os pós e tabletes podem conter até 99 % do composto.
[00687] Cápsulas podem conter misturas de um ou mais compostos divulgados aqui com materiais de enchimento inertes e/ou diluente(s) como amidos farmaceuticamente aceitáveis (ex., milho, batata ou amido de tapioca), açúcares, agentes adoçantes artificiais, celuloses pulverizadas (ex., celuloses cristalinas e microcristalinas), farinhas, gelatinas, gomas, e semelhantes.
[00688] Formulações em tablete úteis podem ser feitas por compressão convencional, métodos de granulação úmida ou granulação seca e utilizar diluentes farmaceuticamente aceitáveis, agentes aglutinantes, lubrificantes, desintegrantes, agentes modificadores de superfície (incluindo surfactantes), agentes de suspensão ou estabilizantes, incluindo, mas não limitado a, estearato de magnésio, ácido esteárico, laurel sulfato de sódio, talco, açúcares, lactose, dextrina, amido, gelatina, celulose, metil celulose, celulose microcristalina, celulose carboximetilo de sódio, cálcio carboximetilcelulose, polivinilpirrolidina, ácido algínico, goma acácia, goma xantina, citrato de sódio, silicates complexos, carbonato de cálcio, glicina, sacarose, sorbitol, fosfato dicálcio, sulfato de cálcio, lactose, caolina, manitol, cloreto de sódio, ceras de baixa fusão, e resinas de troca de íon. Agentes modificadores de superfície incluem agentes modificadores de superfície noniônicos a aniònicos. Exemplos representativos de agentes modificadores de superfície incluem, mas não estão limitados a, poloxâmero 188, cloreto de benzalcônio, estearato de cálcio, álcool cetostearl, cera emulsificante cetomacrogol, ésteres de sorbitano, silicone coloidal dióxido, fosfatos, dodecilsulfato de sódio, silicato de alumínio de magnésio, e trietanolamina. As formulações orais aqui podem utilizar formulações de retardo padrão ou tempo de liberação para alterar a absorção do(s) composto(s). A formulação oral também pode consistir de administrar um composto divulgado aqui em água ou suco de fruta, contendo solubilizantes apropriados ou emulsificantes se necessário.
[00689] Veículos líquidos podem ser usados na preparação de soluções, suspensões, emulsões, xaropes, elixires, e para administração por inalação. Um composto dos presentes ensinamentos pode ser dissolvido ou suspendido em um veículo líquido farmaceuticamente aceitável como água, um solvente orgânico, ou uma mistura de ambos, ou óleos ou gorduras farmaceuticamente aceitáveis. O veículo líquido pode conter outros aditivos farmaceuticamente apropriados tais como solubilizantes, emulsificantes, agentes tampão, preservativos, adoçantes, agentes aromatizantes, agentes de suspensão, agentes de espessamento, cores, reguladores de viscosidade, estabilizantes, e osmo-reguladores. Exemplos de veículos líquidos para administração oral e parenteral incluem, mas não estão limitados a, água (particularmente contendo aditivos conforme descrito aqui, ex., derivados de celulose como uma solução de celulose carboximetil de sódio), álcoois (incluindo álcoois monohídricos e álcoois polihídricos, ex., glicóis) e seus derivados, e óleos (ex., óleo de coco fracionado e óleo de arachis). Para administração parenteral, o veículo pode ser um éster oleoso como o oleato etílico e o miristato de isopropilo. Veículos líquidos estéreis são usados em composições na forma líquida estéril para administração parenteral. O veículo líquido para composições pressurizadas pode ser hidrocarboneto halogenado ou outros propelentes farmaceuticamente aceitáveis.
[00690] Composições farmacêuticas líquidas, que são soluções estéreis ou suspensões, podem ser utilizadas através de, por exemplo, injeção intramuscular, intraperitoneal ou subcutânea. Soluções estéreis também podem ser administradas intravenosamente. Composições para administração oral podem ser na forma líquida ou na forma sólida.
[00691] Preferivelmente a composição farmacêutica é na forma de dosagem unitária, por exemplo, como tabletes, cápsulas, pós, soluções, suspensões, emulsões, grânulos, ou supositórios. Nessa forma, a composição farmacêutica pode ser subdividida em dose(s) unitária(s) contendo quantidades apropriadas do composto. As formas de dosagem unitária podem ser composições embaladas, por exemplo, pós embalados, frascos, ampolas, seringas pré-enchidas ou sachês contendo líquidos. Alternativamente, a forma de dosagem unitária pode ser uma própria cápsula ou tablete, ou pode ser o número apropriado de qualquer uma dessas composições na forma embalada. Essa forma de dosagem unitária pode conter de aproximadamente 1 mg/kg de composto a aproximadamente 500 mg/kg de composto, e pode ser dada em uma única dose ou em duas ou mais doses. Essas doses podem ser administradas de qualquer maneira útil para direcionar o(s) composto(s) para a corrente sanguínea do recipiente, incluindo oralmente, via implantes, de forma parenteral (incluindo injeções intravenosas, intraperitoneais e subcutâneas), de forma retal, vaginal, e transdérmica.
[00692] Quando administrada para o tratamento ou inibição de um determinado estado de doença ou transtorno, deve ser entendido que uma dosagem efetiva pode variar dependendo do composto em particular utilizado, do modo de administração, e severidade da condição sendo tratada, bem como dos vários fatores físicos relacionados ao indivíduo sendo tratado. Em aplicações terapêuticas, um composto dos presentes ensinamentos pode ser fornecido a um paciente já sofrendo de uma doença em uma quantidade suficiente para curar ou pelo menos melhorar parcialmente os sintomas da doença e suas complicações. A dosagem a ser usada no tratamento de um indivíduo específico tipicamente deve ser subjetivamente determinada pelo médico que o atende. As variáveis envolvidas incluem a condição específica e seu estado bem como o tamanho, idade e padrão de resposta do paciente.
[00693] Em alguns casos pode ser desejável administrar um composto diretamente nas vias aéreas do paciente, usando dispositivos tais como, mas não limitados a, inaladores de dose fixa, inaladores por respiração, inaladores de pó seco multidose, bombas, dispensadores em spray nebulizador acionados por aperto, dispensadores em aerossol, e nebulizadores em aerossol. Para inalação intranasal ou intrabrônquica, os compostos dos presentes ensinamentos podem ser formulados em uma composição líquida, uma composição sólida, ou uma composição em aerossol. A composição líquida pode incluir, a título de ilustração, um ou mais compostos dos presentes ensinamentos dissolvidos, parcialmente dissolvidos, ou suspendidos em um ou mais solventes farmaceuticamente aceitáveis e podem ser administrados através de, por exemplo, uma bomba ou um dispensador em spray nebulizador acionados por aperto. Os solventes podem ser, por exemplo, solução salina isotónica ou água bacteriostática. A composição sólida pode ser, a título de ilustração, uma preparação em pó incluindo um ou mais compostos dos presentes ensinamentos intermixados com lactose ou outros pós inertes que seja aceitáveis para uso intrabrônquico, e pode ser administrada através de, por exemplo, um dispensador em aerossol ou um dispositivo que quebre ou perfure uma cápsula envolvendo a composição sólida e distribua a composição sólida para inalação. A composição em aerossol pode incluir, a título de ilustração, um ou mais compostos dos presentes ensinamentos, propelentes, surfactantes, e co-solventes, e pode ser administrada através de, por exemplo, um dispositivo dosimetrado. Os propelentes podem ser um clorofluorocarboneto (CFC), a hidrofluoroalcano (HFA), ou outros propelentes que sejam fisiologicamente e ambientalmente aceitáveis.
[00694] Os compostos descritos aqui podem ser administrados de modo parenteral ou intraperitoneal. Soluções ou suspensões desses compostos ou sais farmaceuticamente aceitáveis, hidratos, ou ésteres dos mesmos podem ser preparados em água adequadamente misturada com um surfactante como hidroxil-propilcelulose. Dispersões também podem ser preparadas em glicerol, polietileno glicóis líquidos, e misturas dos mesmos em óleos. Sob condições normais de armazenamento e uso, essas preparações tipicamente contem um preservativo para inibir o crescimento de micro-organismos.
[00695] As formas farmacêuticas apropriadas para injeção podem incluir soluções aquosas estéreis ou dispersões e pós estéreis para a preparação extemporânea de soluções injetáveis estéreis ou dispersões. Em algumas representações, a forma pode ser estéril e a sua viscosidade permite que ela flua através de uma seringa. A forma preferivelmente é estável sob as condições de fabricação e armazenamento e pode ser preservada contra a ação contaminante de micro-organismos como bactérias, fungos e protozoários. O veículo pode ser um solvente ou meio de dispersão contendo, por exemplo, água, etanol, poliol (ex., glicerol, propileno glicol e polietileno glicol líquido), misturas apropriadas dos mesmos, e óleos vegetais.
[00696] Os compostos descritos aqui podem ser administrados transdermicamente, i.e., administrados através da superfície do corpo θ dos revestimentos internos de passagens corporais incluindo tecidos epiteliais e da mucosa. Essa administração pode ser realizada usando os compostos dos presentes ensinamentos incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis, hidratos, ou ésteres dos mesmos, em loções, cremes, espumas, adesivos, suspensões, soluções, e supositórios (retal e vaginal).
[00697] A administração transdérmica pode ser realizada através do uso de um adesivo transdérmico contendo um composto, como um composto divulgado aqui, e um veículo que pode ser inerte ao composto, pode ser não tóxico para a pele, e pode permitir a liberação do composto para absorção sistêmica na corrente sanguínea através da pele. O veículo pode ter qualquer quantidade de formas tais como cremes ou pomadas, pastas, géis, e dispositivos oclusivos. Os cremes e pomadas podem ser líquido viscoso ou emulsões semi-sólidas do tipo óleo-em-água ou do tipo água-em-óleo. Pastas compreendendo pós de absorção dispersados em petróleo ou petróleo hidrofílico contendo o composto também podem ser apropriadas. Uma variedade de dispositivos oclusivos pode ser usada para liberar o composto na corrente sanguínea, como uma membrana semi-permeável cobrindo um reservatório contendo o composto com ou sem um veículo, ou uma matriz contendo o composto. Outros dispositivos oclusivos são conhecidos na literatura.
[00698] Os compostos aqui descritos podem ser administrados de modo retal ou vaginal na forma de um supositório convencional. Formulações de supositórios podem ser feitas de materiais tradicionais, incluindo manteiga de cacau, com ou sem a adição de ceras para alterar o ponto de fusão do supositório, e glicerina. Bases de supositórios solúveis em água, como polietileno glicóis de vários pesos moleculares, também podem ser usadas.
[00699] Formulações lipídicas ou nano-cápsulas podem ser usadas para introduzir compostos dos presentes ensinamentos em células hospedeiras seja in vitro ou in vivo. Formulações lipídicas e nano-cápsulas podem ser preparadas através de métodos conhecidos.
[00700] Para aumentar a eficácia dos compostos dos presentes ensinamentos, pode ser desejável combinar um composto com outros agentes eficazes no tratamento da doença alvo. Por exemplo, outros compostos ativos (i.e., outros ingredientes ou agentes ativos) eficazes em tratar a doença alvo podem ser administrados com compostos dos presentes ensinamentos. Os outros agentes podem ser administrados ao mesmo tempo ou em tempos diferentes dos compostos aqui divulgados.
[00701] Compostos dos presentes ensinamentos podem ser úteis para o tratamento ou inibição de uma condição patológica ou transtorno em um mamífero, por exemplo, um paciente humano. Os presentes ensinamentos consequentemente fornecem métodos para tratar ou inibir uma condição patológica ou transtorno fornecendo a um mamífero um composto dos presentes ensinamentos (incluindo seu sal farmaceuticamente aceitável) ou uma composição farmacêutica que inclui um ou mais compostos dos presentes ensinamentos em combinação ou associação com veículos farmaceuticamente aceitáveis. Compostos dos presentes ensinamentos podem ser administrados sozinhos ou em combinação com outros compostos terapeuticamente eficazes ou terapias para o tratamento ou inibição da condição patológica ou transtorno.
[00702] Exemplos não limitadores de composições de acordo com a presente invenção incluem de aproximadamente 0.001 mg a aproximadamente 1000 mg de um ou mais compostos de acordo com a presente invenção e um ou mais excipientes; de aproximadamente 0.01 mg a aproximadamente 100 mg de um ou mais compostos de acordo com a presente invenção e um ou mais excipientes; e de aproximadamente 0.1 mg a aproximadamente 10 mg de um ou mais compostos de acordo com a presente invenção; e um ou mais excipientes.
PROCEDIMENTOS
[00703] Os seguintes procedimentos podem ser utilizados para avaliar e selecionar compostos como compostos fotodinâmicos.
[00704] Método para determinar o efeito da fluência da luz no efeito PDT de compostos da divulgação:
[00705] A linhagem celular foi adquirida de ATCC (Mannassas, VA): U87MG (U87, #HTB-14). Os perfis de repetições curtas seguidas (STR) para todas as linhagens celulares foram verificados. As células foram cultivadas em meio DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino e 1% de penicilina (5,000 unidades ml'1) e estreptomicina (5,000 plml'1) (todos de Gibco, Invitrogen, CA, USA) em frascos de 75 cm2 (Falcon, Invitrogen, CA, USA) e mantidas a 37 °C in 5% CO2. As células foram passadas a 80% de confluência, e a troca completa de meio foi realizada a cada 2-3 dias. As células foram usadas entre 6 e 27 passagens.
[00706] 24 horas antes dos experimentos 15,000 células por poço foram colocadas em placas de 96-poços em duplicata (Falcon, Invitrogen, CA, USA) usando 200 μL de suspensão celular por poço No dia seguinte, o meio foi substituído por meio plus TLDOs14H CI2 em variadas concentrações. Após 4-6 horas de carregamento PS, o PS não ligado foi removido por uma completa troca de meio por meio livre de piruvato de sódio fresco, seguido por irradiação de luz PDT.
[00707] A irradiação de toda a placa de 96-poços foi conduzida usando uma fonte de laser (B & W Tek Inc., Newark, DE, US) emitindo a 808 +/-25 nm. Uma exposição radiante de 90-600 Jcm'2 foi liberada a uma irradiação de 0.120-0.190 mWcm’2. Não foi necessário refrigeração.
[00708] A viabilidade celular foi medida nos 96-poços em duplicata, 24 horas pós-irradiação usando o teste de Viabilidade Celular Presto Blue (Invitrogen, CA, USA), de acordo com o protocolo do fabricante, com a leitura fornecida por um SpectroMax M5 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, US). Resultados exemplares são mostrados na Figura 3 que demonstra, usando TLDOS14HCI2 como um caso representativo, que o efeito fotodinámico pode ser aumentado aumentando-se a dose de luz.
[00709] Método para determinar a foto-estabilidade de compostos da divulgação.
[00710] Para medir a foto-estabilidade, um composto da divulgação foi dissolvido em H2O destilada e deionizada (usando cepa concentrada preparada em DMSO). O PS foi irradiado a 78 mWcm'2 por um total de 60 minutos usando uma fonte de luz LED verde (525 nm, 78 mW cm’2). O OD de 670 nm ou 808 nm foi medido a cada 5 minutos e traçado em função dos fótons absorvidos. Resultados exemplares para TLDOs14H Cl2 são mostrados na Figura 4 e demonstram alta foto-estabilidade dos compostos da divulgação.
[00711] Método para determinar a estabilidade dos compostos da divulgação sob condições de foto-branqueamento:
[00712] A linhagem celular foi adquirida de ATCC (Mannassas, VA): U87MG (U87, #HTB-14). Os perfis de repetições curtas seguidas (STR) para todas as linhagens celulares foram verificados. Células foram cultivadas em meio DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino e 1% de penicilina (5,000 unidades ml'1) e estreptomicina (5,000 μl ml’1) (todos de Gibco, Invitrogen, CA, USA) em frascos de 75 cm2 (Falcon, Invitrogen, CA, USA) e mantidos a 37 °C em 5% CO2. As células foram passadas a 80% de confluência, e foi realizada a troca completa de meio a cada 2-3 dias. As células foram usadas entre 6 e 27 passagens.
[00713] 24 horas antes dos experimentos 15,000 células por poço foram colocadas em placas de 96-poços em duplicata (Falcon, Invitrogen, CA, USA) usando 200 μL de suspensão celular por poço. No dia seguinte, o meio foi substituído por meio mais compostos da divulgação em várias concentrações. Após 4-6 horas de carregamento PS, o PS não ligado foi removido por uma troca completa de meio com meio livre de piruvato de sódio fresco, seguido de irradiação de luz PDT.
[00714] A irradiação de toda a placa de 96-poços foi conduzida usando uma fonte de laser (B & W Tek Inc., Newark, DE, US) emitindo a 808 +/- 25 nm. Uma exposição radiante de 400-600 Jcm’2 foi liberada a uma irradiação de 0.120-0.190 mWcm’2. Não foi necessário refrigeração.
[00715] A viabilidade celular foi medida nos 96-poços em duplicata, 24 horas pós-irradiação usando o teste de Viabilidade Celular Presto Blue (Invitrogen, CA, USA), de acordo com o protocolo do fabricante, com a leitura fornecida por um SpectroMax M5 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, US). Resultados exemplares para TLDOs14H Ch são mostrados na Figura 5 e demonstram que compostos da divulgação são estáveis a condições de foto- branqueamento.
[00716] Método para determinar o efeito in vitro de compostos da divulgação sob condições normóxicas e hipóxicas.
[00717] A linhagem celular foi adquirida de ATCC (Mannassas, VA): U87MG (U87, #HTB-14). Os perfis de repetições curtas seguidas (STR) para todas as linhagens celulares foram verificados. As células foram cultivadas em meio DMEM suplementado com 10% soro fetal bovino e 1% de penicilina (5,000 unidades ml'1) e estreptomicina (5,000 μl ml1) (todos de Gibco, Invitrogen, CA, USA) em frascos de 75 cm2 (Falcon, Invitrogen, CA, USA) e mantidas a 37 °C in 5% CO2. As células foram passadas em 80% de confluência, e foi realizada a troca completa de meio a cada 2-3 dias. As células foram usadas entre 6 e 27 passagens.
[00718] 24 horas antes dos experimentos 15,000 células por poço foram colocadas em placas de 96-poços em duplicata (Falcon, Invitrogen, CA, USA) usando 200 μL de suspensão celular por poço. No dia seguinte, o meio foi substituído por meio mais compostos da divulgação em várias concentrações. Após 4-6 horas de carregamento PS, o PS não ligado foi removido por uma completa troca de meio com meio livre de piruvato de sódio fresco, seguido por irradiação de luz PDT.
[00719] A irradiação de toda a placa de 96-poços foi conduzida usando uma fonte de luz de sistema de LED vermelho emitindo a 635 +/- 25 nm fornecido por Theralase Inc. (Toronto, ON, Canada). Uma exposição radiante de 90 Jem'2 foi liberada a uma irradiação de 125 mW cm'2 A irradiação foi homogênea para dentro de 12% através de todos os poços. A refrigeração de ar ativa manteve a subida de temperatura do meio de cultura do tecido abaixo de 3°C da temperatura ambiente.
[00720] Para experimentos hipóxicos, todas as soluções usadas foram mantidas sob condições hipóxicas por pelo menos 24 horas antes do experimento. Para facilitar a conexão, as placas de 96 poços contendo células foram transferidas para uma câmara hipóxica (lnvivO2 400 Ruskinn Technology Ltd., UK) 4 horas pós semeadura normóxica. As placas permaneceram em condições hipóxicas por 24 horas antes da irradiação com luz PDT. A câmara hipóxica tinha uma atmosfera de 0.5% O2, 5% CO2, equilíbrio com N2, a 37°C e 95% de umidade. Como sob condições normóxicas, o meio com PS foi adicionado e então substituído por meio fresco após as 4-6 horas de carregamento de foto-sensibilizador. As células foram mantidas por 2 horas a 0.1% O2 para ainda reduzir o oxigênio disponível no poço experimental. O tempo de difusão do oxigênio através da coluna líquida de -3 mm é mais curto do que o tempo de exposição de ~7 min e consequentemente a re-oxigenação do ambiente externo precisou ser limitada sem comprometer a sobrevivência da célula PDT independente. Após a irradiação, as células foram mantidas a 0.5% O2 por 24 horas até que as medições de viabilidade celular fossem realizadas. Para todos os procedimentos conduzidos sob condições ambientes normais (irradiação de luz, medições de morte celular), as placas contendo células hipóxicas foram vedadas hermeticamente com um filme adesivo oxigénio-impermeável (Evergreen Scientific, USA). Quando as placas retornaram às condições hipóxicas, a vedação foi removida e as coberturas das placas foram substituídas. Isso não alterou o pO2 nos poços experimentais, conforme testado com um ensaio colorimétrico (Suflita, J. and Concannon, F.,1995).
[00721] A viabilidade celular foi medida nos 96-poços em duplicata, 24 horas pós-irradiação usando o teste de Viabilidade Celular Presto Blue (Invitrogen, CA, USA), de acordo com o protocolo do fabricante, com a leitura fornecida por um SpectroMax M5 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, US). Resultados exemplares são mostrados na Figura 6 que demonstram que esses compostos são capazes de matar células com ativação de luz em concentrações onde a toxicidade escura é insignificante. Também demonstra que alguns desses compostos apresentam um efeito fotodinâmico mesmo em hipoxia, com sinais Tipo 1 de foto-atividade em alguns exemplos representativos.
[00722] Método para a produção de espécies de oxigênio reativo por compostos da divulgação:
[00723] A linhagem celular foi adquirida de ATCC (Mannassas, VA): U87MG (U87, #HTB-14). Os perfis de repetições curtas seguidas (STR) para todas as linhagens celulares foram verificados. As células foram cultivadas em meio DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino e 1% de penicilina (5,000 unidades ml'1) e estreptomicina (5,000 plml'1) (todos de Gibco, Invitrogen, CA, USA) em frascos de 75 cm2 (Falcon, Invitrogen, CA, USA) e mantidas a 37 °C em 5% CO2. As células foram passadas em 80% de confluência, e foi realizada a completa troca de meio a cada 2-3 dias. As células foram usadas entre 6 e 27 passagens.
[00724] 24 horas antes dos experimentos 15,000 células por poço foram colocadas em placas de 96-poços em duplicata (Falcon, Invitrogen, CA, USA) usando 200 μL de suspensão celular por poço. No dia seguinte, o meio foi substituído por meio mais TLDOs14H Cl2 em várias concentrações. Após 4-6 horas de carregamento PS, o PS não ligado foi removido por uma completa troca de meio com meio livre de piruvato de sódio fresco, seguido de irradiação com luz PDT.
[00725] A irradiação de toda a placa de 96-poços foi conduzida usando uma fonte de luz de Sistema de LED vermelho emitindo a 635 +/- 25 nm fornecido por Theralase Inc. (Toronto, ON, Canada). Uma exposição radiante de 90 Jcm'2 foi liberada a uma irradiação de 125 mWcm'2 A irradiação foi homogênea para dentro de 12% através de todos os poços. A refrigeração de ar ativa manteve a subida de temperatura do meio de cultura do tecido para abaixo de 3°C da temperatura ambiente.
[00726] Para revelar a contribuição do radical de hidroxila e do oxigênio singlete para o efeito PDT, as células foram carregadas com PS na presença de ou N,N’-dimetilthiourea (DMTU) (40 mM), um removedor de radicais de hidroxila ou azida de sódio (2 mM), um removedor de oxigênio singlete. Antes de PDT, após a remoção de PS, soluções recém preparadas dos removedores foram adicionadas às células; elas foram removidas e substituídas por meio fresco após o PDT.
[00727] A viabilidade celular foi medida nos 96-poços em duplicata, 24 horas pós irradiação usando o teste de Viabilidade Celular Presto Blue (Invitrogen, CA, USA), de acordo com o protocolo do fabricante, com a leitura fornecida por um SpectroMax M5 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, US). Resultados exemplares são mostrados nas Figuras 7 e 12 que demonstram que TLDOsh2IP Cl2 e TLDOsh2B Cl2 produzem espécies de oxigênio reativo.
[00728] Quando o PDT TLDOsH2B-mediado é realizado na presença de removedores de radicais de hidroxila, o efeito PDT é quase eliminado, sugerindo que esse composto demonstra a foto-atividade Tipo I nessas células cancerígenas. Essa atribuição é ainda corroborada pela observação de que um removedor de oxigênio singlete (um Tipo 2 intermediário) não diminui o efeito PDT até nenhum ponto significativo. Consequentemente, radicais de hidroxila poderiam desempenhar um papel chave em um número de fenômenos biológicos atribuídos a essa classe de agentes, incluindo: foto-ligação com DNA e outras biomoléculas, atividade de nuclease, foto-clivagem de DNA, e vias foto-redox citotóxicas.
[00729] Quantificação de PDT in vitro em células cancerígenas humanas por compostos desta invenção.
[00730] As células de leucemia promielocíticas humanas HL-60 (ATCC CCL-240) crescendo em fase log foram transferidas em alíquotas de 50 μL (aproximadamente 40,000 células) para duas microplacas de cultura de tecido de 96-poços (Corning Costar, Acton, MA) contendo 25 μL de meio de cultura aquecido (RPM1-1640 meio suplementado com 20% FBS), e colocadas em uma incubadora de jaqueta de água de 5% CO2 a 37°C, (Thermo Electron Corp., Forma Series II, Modelo 3110, HEPA Classe 100) por uma hora para equilibrar. Alíquotas de 25 μL aquecidas de compostos serialmente diluídos da divulgação, recém feitos em PBS (2.68 mM cloreto de potássio, 1.47 mM monobásico de fosfato de potássio, 0.137 M cloreto de sódio, e 8.10 mM dibásico de fosfato de sódio, pH 7.4), foram adicionados às células e incubados a 37°C sob 5% CO2 por 15-19 hr. Uma das microplacas foi irradiada com luz visível (400 - 700 nm) usando um projetor de 190 W (BenQ MS510) por 1 hr (0.0278 mW cm'2 s’', a dose total de luz foi de 100 Jcm2), enquanto que a outra microplaca foi mantida no escuro. Ambas as microplacas foram então incubadas (37°C sob 5% CO2) por aproximadamente 48 hr. A proliferação e viabilidade celular foi determinada usando o indicador redox de reagente alamar blue que é baseado na capacidade de células metabolicamente ativas converterem o reagente em um indicador fluorescente. Em resumo, alíquotas de 10 μL aquecidas de reagente alamar blue aquecido (Life Technologies DAL 1025) foram adicionadas a todos os poços de amostras e as microplacas foram incubadas por 15-16 hr a 37°C sob 5% CO2. As microplacas foram então colocadas em um leitor de fluorescência de microplaca Cytofluor 4000 com o filtro de excitação estabelecido em 530 ± 25 nm e o filtro de emissão estabelecido em 620 ± 40 nm. Os dados foram subsequentemente importados para uma planilha Microsoft (Microsoft Office 2010) e usados para análise de dados. Resultados exemplares são mostrados na Figura 14 que demonstra que a luz branca de amplo espectro, em adição a uma luz de estreito alcance de onda, pode ser usada para destruir as células de câncer mamário através do efeito fotodinâmico, e a sua atividade se traduz para a eliminação de células microbianas como bactérias, fungos, protozoários, e vírus.
[00731] A inativação fotodinâmica (PDI) de S. aureus resistente à meticilina (MRSA) mediada por foto-sensibilizadores TLDOsH2IP Cl2 e TLDOsH2B Cl2
[00732] Culturas foram cultivadas durante a noite em caldo Columbia. Alíquotas de referência bacteriana foram preparadas pela diluição da cultura de durante a noite com meio fresco para um ODA=6oonm de 0.3, que é equivalente a 108 cfu mL'1 Soluções estoque PS de 2 mM foram preparadas em água de alta pureza (MilliQ, 18.5mQ), e diluições seriais foram preparadas em condições de luz baixa para alcançar concentrações finais de 409.6 a 0.4 μM. Alíquotas bacterianas foram adicionadas a uma placa de 96 poços (60 pL por poço) seguido pela adição de meio de 60 pL contendo a diluição PS apropriada, incluindo controles para cada cepa SA sem PS. Placas foram preparadas em duplicata, pelo que uma placa serviu como um controle escuro e foi incubada por 30 minutos com o PS no escuro a 37°C. A outra placa idêntica foi exposta a luz vermelha (72 J cm'2 total radiância) por 10 minutos. A quantificação bacteriana foi realizada por contagem manual; 30 pL alíquotas diluídas em PBS foram colocadas em placas Columbia agar, e colônias foram contadas após 24-horas de incubação a 37°C. Resultados exemplares são mostrados na Figura 15 que demonstra que compostos desta divulgação são capazes de destruir agentes infecciosos, particularmente bactérias e bactérias resistentes a antibióticos.
[00733] Inativação fotodinâmica da pneumonia Klebsiella (Kp) por compostos da divulgação:
[00734] Culturas foram cultivadas durante a noite em caldo Columbia. Alíquotas de referência bacteriana foram preparadas por uma diluição da cultura de durante a noite em meio fresco com um ODÀ=600nm de 0.3, que é equivalente a 108 cfu mL'1 Soluções estoque PS de 2 mM foram preparadas em água purificada (MilliQ, 18.5mO), e diluições seriais foram preparadas em condições de luz baixa para alcançar concentrações finais de 500 a 6.4 μM. Alíquotas bacterianas foram adicionadas a uma placa de 96 poços (40 μl por poço) seguido de 40 μl de meio com a diluição PS apropriada, incluindo controles. Placas foram preparadas em duplicata, pelo que uma placa serviu como um controle escuro e foi incubada por 30 minutos com o PS no escuro a 37°C. A outra placa com bactérias idênticas e concentrações PS foi exposta á luz por 10 minutos usando uma fonte de luz (66Jcm'2 total radiância) verde (530nm). A quantificação bacteriana foi realizada usando contagem manual, 10 μL alíquotas diluídas em PBS foram colocadas em placas Columbia agar, e colônias foram contadas após 24-horas de incubação a 37’C. Resultados exemplares são mostrados na Figura 17 que demonstram que compostos da divulgação são capazes de eliminar a pneumonia Klebsiella.
[00735] Modelos de camundongos in vivo:
[00736] Todos os experimentos animais foram realizados de acordo com protocolos aprovados pelo Animal Care Committee na University Health Network, ON, Canada (IACUC data de aprovação 08/03/2012 número de segurança A5408-01). Todos os animais foram abrigados no viveiro com água e comida fornecidos ad libitum em um ciclo dia/noite de 12 horas. A linhagem celular foi adquirida de ATCC (Mannassas, VA); CT26 tipo selvagem (CT26.WT, #CRL-2638). Os perfis de repetições curtas seguidas (STR) para todas as linhagens celulares foram verificados. Células foram cultivadas em meio RPMI 1640 suplementado com 10% de soro fetal bovino e 1% de penicilina (5,000 unidades ml'1) e estreptomicina (5,000 μlml'1) (todos de Gibco, Invitrogen, CA, USA) em frascos de 75 cm2 (Falcon, Invitrogen, CA, USA) e mantidos a 37 °C em 5% CO2. Células foram passadas em 80% de confluência, e foi realizada a completa troca de meio a cada 2-3 dias. Células foram usadas entre 6 e 27 passagens. Para injeções de célula de carcinoma de cólon murino CT26.WT, camundongos BALB/c de 8-10 semanas foram anestesiados com isofluorano (5% indução, 1.5% manutenção) e uma perna posterior foi raspada. Os camundongos foram subcutaneamente injetados com 3 a 3.5 x106 células por camundongo em 100 μl PBS na área dorsal da perna por 30 segundos. O tamanho do tumor foi medido em duas dimensões com um calibrador manual Vernier a cada 2-3 dias. Quando o tamanho do tumor atingiu 5-6 mm, 3 mg/kg de compostos da divulgação foram injetados de forma intratumoral (IT) por uma estimativa de 100 μL em um peso corporal de 20 g. Camundongos controle foram injetados IT com solução salina estéril. Após 4 horas os tumores foram irradiados enquanto os camundongos estavam sob anestesia com isofluorano. Resultados exemplares são mostrados nas Figuras 8, 9 e 10 que demonstram que compostos desta invenção são capazes de erradicar tumores em camundongos quando ativados por luz UV-IR
[00737] Compostos desta divulgação são capazes de prolongar a sobrevivência de camundongos com câncer tratados com PDT.
[00738] Todos os experimentos com animais foram realizados de acordo com protocolos aprovados pelo Animal Care Committee na University Health Network, ON, Canadá (IACUC data de aprovação 08/03/2012 número de segurança A5408-01). Todos os animais foram abrigados no viveiro com água e comida fornecidas ad libitum em um ciclo noite/dia de 12 horas. Para injeções de célula de carcinoma de cólon murino do tipo imunogênico CT26.CL25, camundongos BALB/c de 8-10 semanas foram anestesiados com isofluorano (5% indução, 1.5% manutenção) e uma perna posterior foi raspada. Os camundongos foram injetados de modo subcutâneo com 2.5 x106 células por camundongo em 100 μl PBS na área dorsal da perna durante 30 segundos. O tamanho do tumor foi medido em duas dimensões com um calibrador manual Vernier a cada 2-3 dias. Quando o tamanho do tumor alcançou 5-6 mm Os2IP foi injetado de modo intratumoral (IT) por uma estimativa de 100 μL em um peso corporal de 20 g. Camundongos controle foram injetados IT com solução salina estéril. Depois de 4 horas os tumores foram irradiados enquanto os camundongos estavam sob anestesia com isofluorano, administrado em solução salina estéril. Depois de 4 horas os tumores foram irradiados com luz vermelha (635 nm) enquanto os camundongos estavam sob anestesia com isofluorano. Resultados exemplares para compostos da divulgação são mostrados na Figura 16 que demonstra maior tempo de sobrevivência sob as condições do experimento.
[00739] Tratamento com PDT em camundongos evita o recrudescimento do tumor com células (antigênicas) CT26.CL25.
[00740] No dia 0, camundongos com tumor subcutâneo de 6-mm tratados com PDT com TLDOsH2IP CI2; no dia 1, nenhum tumor foi relatado na avaliação clínica e medição por calibragem. No dia 20, o mesmo animal livre de tumor é redesafiado com células (antigênicas) CT26.CL25 que expressam um antígeno de tumor. No dia 21 e daí por diante (>4 dias), a observação revela que os camundongos tratados com PDT estão curados e resistentes ao redesafio. Os efeitos anti-tumor do PDT são completamente anulados nos animais não tratados, e o crescimento do tumor é relatado no dia 4 em todos os camundongos.
[00741] Extração de topoisomerase II de células HL60.
[00742] Extratos nucleares foram precipitados por afinidade conforme descrito em ‘Small Scale Preparation of Topo I and II Extracts from Tissue Culture Cells (Optimizado para HeLa Cells)’ no website TopoGEN (http:www.topogen.com/html/extracts.html). Todas as etapas foram conduzidas em gelo ou a 4°C. Em resumo, 10 mL de células HL-60 crescendo exponencialmente (1 x 106 células/mL) foram transferidas para um tubo de centrífuga cônico de 15 mL estéril (Fisher Scientific, Canadá) e peletizados em uma centrífuga eppendorf 5804R (16.1 cm de raio) a 2100 rpm por 3 min a 4°C. As células foram lavadas duas vezes com 3 mL de solução salina tamponada de fosfato gelada (PBS) contendo 2.68 mM de cloreto de potássio, 1.47 mM de monobásico de fosfato de potássio, 0.137 M de cloreto de sódio, e 8.10 mM de dibásico de fosfato de sódio, pH 7.4, da seguinte forma: o grânulo da célula foi resuspendido com tampão PBS (misturado por pipetagem para cima e para baixo), centrifugado a 2100 rpm (3 min, 4°C), e o sobrenadante gentilmente derramado. Após a segunda lavagem, as células foram resuspendidas em 3 mL de tampão hipotônico frio (10 mM Tris-HCI, pH 7.5, 1 mM EDTA, 4 mM MgCI2, 0.5 mM de fluoreto de fenilmetilsulfonil (PMSF)), e os torrões foram dispersados por pipetagem para cima e para baixo. As células foram peletizadas novamente (2100 rpm, 3 min, 4°C), resuspendidas e dispersadas em 3 mL do mesmo tampão hipotônico frio, e deixadas em gelo por 10 min para inchar. As membranas celulares foram rompidas com um homogeneizador frio Dounce (Pyrex, 15 mL), usando 6-8 golpes. O lisado foi transferido para um tubo de microcentrífuga de 1.5 mL estéril limpo (Fisher Scientific, Canadá) e centrifugado (2900 rpm, 10 min, 4°C). O grânulo, contendo núcleos, foi lavado duas vezes com o mesmo tampão hipotônico frio, da seguinte forma: o tampão frio foi adicionado ao grânulo e os núcleos foram resuspendidos por pipetagem para cima e para baixo, e então peletizados (2900 rpm, 10 min, 4°C), o sobrenadante gentilmente removido e descartado. Após a segunda lavagem, os núcleos foram resuspendidos em 4 volumes de grânulos (aproximadamente 500 pL) de tampão hipotônico frio sem MgCh. Um igual volume de 1 M NaCl frio foi adicionado ao grânulo resuspendido e deixado em gelo por 45 min, seguido por peletização em uma microcentrífuga (14,000 rpm, 15 min, 4°C). 0 sobrenadante (extrato nuclear), suspendido em 5 mM Tris-HCI (pH 7.5), 0.5 mM EDTA, 0.25 mM PMSF, e 0.5 M NaCl, foi usado para ensaios de relaxamento de DNA.
[00743] A concentração total de proteína (BSA equivalente) do extrato foi determinada usando um kit de proteína total Micro Lowry (Total Protein Kit, Micro Lowry, modificação de Peterson), seguindo as instruções do fabricante para ‘Protein Determination without Protein Precipitation.’ Em resumo, cinco proteínas padrão BSA foram preparadas a partir de uma solução estoque de 400 pg/mL em água pura para um volume de 200 pL em tubos de microcentrífuga estéreis de 1.5 mL (concentrações finais de BSA foram 10, 20, 40, 60, 80 pg). Um sexto tubo contendo água pura foi usado apenas como um vazio. Um sétimo tubo, contendo 50 pL de extrato nuclear e 150 pL (diluição escolhida aleatoriamente) foi preparado de modo a medir o seu conteúdo de proteína em relação aos padrões BSA. Todos os tubos foram bem misturados com vórtice, e então 200 pL de solução reagente Lowry foi adicionada a todos os tubos seguido de vórtice para misturar. As soluções ficaram em temperatura ambiente por 20 min, e então 100 pL de reagente fenol Folin Ciocalteu (6X diluição de 2 N solução estoque) foi adicionado a cada tubo, seguido de vórtice para misturar. A cor foi deixada para desenvolver por 30 min. As soluções foram transferidas uma de cada vez para uma cuvete de quartz, com uma extensão de 1 cm, e a absorção dos tubos padrão e de ensaio versus o vazio foram medidos em uma extensão de onda de 750 nm. Foi construído um traçado (Excel, 2007) de valores de absorção dos padrões versus as suas concentrações de proteína correspondentes e regressão linear foi usada para calcular a concentração de proteína na amostra de extrato nuclear, levando em conta a diluição de 10x. 0 resultado foi uma concentração de proteína de 559 μg/mL ou 279 μg (BSA equivalentes) do extrato nuclear.
[00744] Atividade do extrato de topoisomerase em ensaios de relaxamento de DNA:
[00745] A atividade de relaxamento do extrato nuclear, contendo topo I e II, foi determinada por detecção da conversão de DNA de plasmídeo enovelado para a sua forma relaxada na presença de ATP. Tubos de reação (20 μL volumes) foram reunidos em gelo pela adição ordenada de: (i) água pura (variável, feita até um volume de 20 μL); (ii) 4 μL de tampão de relaxamento (250 mM Tris-HCI, pH 8, 0.75 M NaCI, 50 mM MgCh, 2.5 mM ditiotreitol, 150 μg BSA/mL, e 10 mM ATP); (iii) pUC19 DNA de plasmídeo enovelado (250 ng, ou 38.6 μM bases); e (iv) extrato de topo (1, 2, 3, or 4 μL). A reação foi iniciada pelo aquecimento dos tubos em uma incubadora a 37°C por 30 min. A reação foi paralisada pela adição de 2 μL de 10% SDS (em água estéril), e a proteína DNA-ligada foi então digerida pela adição de 2 μL de proteinase K (0.50 mg/mL estoque em 10 mM Tris-HCI, 1 mM EDTA, pH 7.5) e incubando a 37°C por 15 min. Então, 2 μl_ de corante de carregamento com ficoll (0.25% bromofenol azul, 15% ficoll, em tampão 1X TBE) foi adicionado e amostras de DNA foram então analisadas por 1.5% de eletroforese de gel de agarose usando tampão 1X TBE (50 V, 180 min). Os géis foram manchados com brometo de etídio (1 μg/mL) por 30 min com o subsequente des-manchamento em água por 30 min, e visualisado com UV-transiluminação (UVP transiluminador) usando o sistema Gel-Doc-lt Imaging (UVP). Uma unidade de atividade de DNA topoisomerase II foi definida como a quantidade de enzima capaz de relaxar 250 ng de DNA enovelado em 30 minutos a 37°C (nesse caso, uma unidade = 2 μL extrato). A presença de topo I foi avaliada testando-se o relaxamento de plasmídeo pUC19 (250 ng) na ausência de ATP por 30 min a 37°C. Sob essas condições, o relaxamento do plasmídeo pUC19 não foi detectado (indicando pouco ou nenhum topo I).
[00746] Ensaios de Topoisomerase II:
[00747] Inibição da atividade de topoisomerase II por compostos da divulgação foi medida por um ensaio de relaxamento de DNA enovelado usando um kit de rastreio de droga topoisomerase II (TopoGEN). Em resumo, 0.23 μg de DNA de plasmídeo pUC19 enovelado (3.5 μL of 64.5 ng/μL solução estoque em 10 mM Tris-CI, pH 8.5) foi suspendida em tampão de reação pH 8.0 (250 mM Tris-HCI, 0.75 M NaCI, 50 mM MgCI2, 2.5 mM ditiotreitol, 150 μg BSA/mL, e 10 mM ATP). Água pura foi adicionada (variável, feita até o volume de 20 μL), então 2 μL alíquotas de compostos de rutênio (1, 10, 50, 100, 500, 1000 μM diluições seriais) foram adicionadas, fazendo concentrações finais de amostras de 0.1, 1, 5, 10, 50, e 100 μM. Amostras controle foram preparadas da seguinte forma: (i) apenas plasmídeo (sem extrato nuclear); (ii) plasmídeo com extrato nuclear; (iii) plasmídeo com a mais alta concentração de rutênio (sem extrato nuclear); e (iv) plasmídeo com extrato nuclear (sem ATP no tampão). Os tubos foram então bem misturados (gentilmente agitados e girados para baixo) antes de iniciar a reação pela adição de 2 μL (uma unidade) de extrato nuclear. Após 30 min de incubação a 37°C, a reação foi paralisada pela adição de 2 μL de 10% SDS (em água estéril). A proteína DNA- ligada foi digerida pela adição de 2 μl_ de proteinase K (0.50 mg/mL estoque em 10 mM Tris-HCI, 1 mM EDTA, pH 7.5) a 37°C por 15 min, sem a extração opcional de álcool clorofórmio: isoamil (extrações anteriores não apresentaram melhora cosmética dos resultados). Finalmente, 2 μL ficoll corante de carregamento (0.25% bromofenol azul, 15% ficoll, em tampão 1X TBE) foi adicionado e amostras de DNA foram analisadas por 1.5% de eletroforese de gel de agarose usando tampão 1X TBE (50 V, 180 min) 0 gel foi manchado com brometo de etídio (1 μg/mL) por 30 min com subsequente des- manchamento por 30 min em água pura, e visualizado com UV-transiluminação (UVP transiluminador) usando o sistema Gel-Doc-lt Imaging (UVP).
[00748] Ligação de DNA por UV-vis:
[00749] Titulações óticas foram realizadas em soluções de 0.5-2 mL dos PDCs com crescentes quantidades de DNA de timo de vitela ou esperma de arenque para dar [DNA bases]/[PDC] entre 0.1 e 10. O DNA foi adicionado em 1-5 μL de incrementos para soluções de composto (10 μM) em 10 mM MOPS, 10 mM MOPS com 50 mM NaCI, 5 mM Tris-HCI, ou 5 mM Tris-HCI with 50 mM NaCI em pH 7.5. A diluição de compostos da divulgação ao final de cada titulação, embora insignificante, foi levada em conta na análise da constante de ligação. A constante de ligação de DNA (Kb) foi obtida a partir de ajustes dos dados de titulação para eq. 1 (Figura 13), onde b = 1 + KbCt + Kb[DNA]t/2s, Ct e [DNA]t representam as concentrações totais de PDC DNA, respectivamente, s é o tamanho do local de ligação, e εa, εf, e εb representam os coeficientes de extinção molar dos PDCs aparentes, livres e ligados, respectivamente, εf foi calculado em 414 nm para 7 e 412 nm para 8 antes da adição de DNA, e εa foi determinado nesses comprimentos de onda após cada adição de DNA. O valor de εb foi determinado a partir do platò da titulação do DNA, onde a adição de DNA não resultou em nenhuma outra diminuição no sinal de absorção. Ajustes detalhados dos dados da titulação foram obtidos usando tanto Kaleidagraph quanto Gnuplot.
[00750] Curvas de fusão de DNA foram construídas medindo-se a absorbância (A26o) de uma solução de 2 mL, 25 μM DNA (40 mM MOPS, pH 7.5) como uma função de temperatura (20-100 °C) na ausência e presença de um composto da divulgação (5 μM). Soluções de DNA e um composto da divulgação para experimentos de fusão foram deixados para equilibrar por 30 min a 25 °C antes da medição. O controlador de temperatura ETC-505T foi resfriado com água gelada (4 °C) usando uma bomba de aquário de peixes, e foi fornecida uma corrente de argônio através da válvula de entrada de gás para o compartimento de amostra para evitar a condensação nas janelas da cuvete durante experimentos de temperatura variável.
[00751] Titulações de Foto-clivagem:
[00752] Experimentos de foto-clivagem de DNA foram realizados de acordo com um ensaio geral de plasmídeo de DNA com volumes totais de amostra de 20 μL em 0.5 ou tubos de microcentrífuga de 1.5 mL contendo plasmídeo pUC19 transformado (200 ng, >95% Form I) em tampão 10 mM MOPS e 100 mM NaCl, pH 7.4. DNA (1-5 μL) foi distribuído aos tubos de ensaio como uma solução em 10 mM Tris-CI (pH 8.5) e diluído com MOPS (pH 7.5, concentração final 10 mM) e NaCl (concentração final 100 mM). Soluções dos compostos da divulgação foram adicionadas para dar de 0 a 500 μM, e as misturas da reação foram diluídas para um volume final de 20 μL, quando necessário, com H2O destilada e deionizada. Complexos foram dissolvidos inicialmente em acetonitrilo (2 μM soluções estoque), e todas as diluições subsequentes foram feitas com H2O destilada e deionizada onde tubos de ensaio finais continham <1% de acetonitrilo. Para ensaios baseados em concentração, amostras (sem período de pré-incubação) foram irradiadas em ar por 30 min com 420 nm de luz no interior de um foto-reator (Luzchem LZC- 4X). Onde a irradiação de amostras deionizadas foi necessária, o argônio foi borbulhado através das soluções por 15 min antes da irradiação sob uma pressão positiva de argônio. Todas as amostras foram temperadas pela adição de tampão de carregamento de gel (4 μl_), carregadas em 1% de géis de -1 agarose contendo brometo de etídio (0.75 μg mL ), e sujeitadas a eletroforese -1 por 30 min a 8-12 V cm em 1X TAE (40 mM Trisacetato, 1 mM EDTA, pH 8.2). As faixas foram visualisadas com UV-transiluminação (UVP transiluminador) e quantificadas usando o sistema Gel Doc-lt Imaging (UVP) ou o programa de manipulação de imagem GNU Image Manipulation Program (GIMP).
[00753] Cultura de Célula HL-60:
[00754] Células HL-60 humanas de leucemia promielocitica (ATCC CCL- 240) foram cultivadas a 37°C sob 5% CO2 em Hyclone's IMDM, suplementado com 20% FBS e foram passados 3-4 vezes por semana de acordo com procedimentos assépticos padrão. As culturas foram iniciadas em 200,000 células mL"1 em frascos de cultura de tecido de 25 cm2 e foram subcultivados antes que o crescimento alcançasse 750,000 células mL‘ 1 para evitar o envelhecimento associado à alta densidade celular prolongada. Meio completo foi preparado em porções de 200 mL se necessário combinando IMDM (160 mL), FBS (40 mL, pré-alíquota e inativado por calor), e sulfato de gentamicina (100 μL de 50 mg mL'1 solução estoque) em um stericup a vácuo de 250 mL Millipore (0.22 μm) e filtragem.
[00755] Ensaios de Citotoxicidade e Fotocitotoxicidade
[00756] Células HL-60 crescendo em fase log (aproximadamente 8x105) foram transferidas em alíquotas de 50 μL para duas microplacas de cultura de tecido de 96-poços (Corning Costar, Acton, MA) contendo 100 μL de meio de cultura aquecido e colocadas em uma incubadora de jaqueta de água de 5% CO2 a 37°C (Thermo Electron Corp., Forma Series II, Model 3110, HEPA Class 100) por uma hora para equilibrar. Todos os poços vazios da microplaca continham 200 μL de solução salina tamponada com fosfato (PBS) contendo 2.68 mM de cloreto de potássio, 1.47 mM de monobásico de fosfato de potássio, 0.137 M de cloreto de sódio, e 8.10 mM de dibásico de fosfato de sódio, pH 7.4, para ajudar a minimizar a perda de evaporação. 50 μL de alíquotas aquecidas de solução de compostos da divulgação (4, 20, 40, 200 μM), recém feitas em PBS, foram adicionadas às células e incubadas a 37°C sob 5% CO2 por 4 hr (concentrações finais foram 1, 5, 10, 50 μM). Uma das microplacas foi irradiada com luz visível (400 - 700 nm) em um foto-reator Luzchem (tubos fluorescentes brancos frios, 21 W/ m2) por 15 min; a outra microplaca foi incubada sob condições idênticas no escuro. Ambas as microplacas foram então incubadas (37°C sob 5% CO2) por 40 hr. Um Cellometer Auto T4 (ESBE Scientific) foi usado para determinar 0 número de células, a viabilidade, diâmetro, e % de viabilidade celular. Suspensões celulares (20 pL) foram diluídas a 1:1 com 0.2% de corante trypan azul (Sigma Aldrich, Canadá), carregadas em uma câmara deslizante de contagem celular, e inseridas no contador celular automático baseado em imagem. A concentração celular e a viabilidade celular foram automaticamente determinadas (Cellometer Auto Counter Software) com base no total da contagem celular, no fator de diluição, e na exclusão do corante trypan azul. Os parâmetros ideais de tipo celular foram estabelecidos importando-se as configurações para células HL-60, e os dados foram subsequentemente importados para uma planilha Microsoft excel (Microsoft Office 2010) para análise de dados.
[00757] Ensaios de Citotoxicidade e Fotocitotoxicidade:
[00758] Células HL-60 crescendo em fase log foram transferidas (tipicamente alíquotas de 25 pL) para placas de cultura de tecido de 96-poços (Corning Costar, Acton, MA) contendo meio de cultura com ou sem concentrações variadas dos compostos da divulgação para dar os volumes finais nos poços de cultura de 100 pL e 10,000-20,000 células. Soluções de compostos da divulgação em meio completo foram preparadas em porções de 1 mL, onde o acetonitrilo dos compostos iniciais da solução estoque da divulgação foi <0.5% v/v, e estéril-filtrado em seringas de 3 mL equipadas com 0.22 pm filtros Nalgene. Placas foram incubadas a 37 °C sob 5% CO2 por 30 min antes da exposição a 420 nm de luz em um foto-reator Luzchem por 30 min; controles escuros foram incubados sob condições idênticas no escuro. Controles escuros, ou ensaios de citotoxicidade (CT), se referem a ensaios que incluem compostos da divulgação mas que não foram expostos á luz, e controles luz se referem a ensaios expostos á luz que não continham compostos da divulgação. Ensaios de fotocitotoxidade (PCT) continham PDC e foram expostos à luz. Contagens celulares e coloração de viabilidade foram realizadas imediatamente e a -24 h após a exposição à luz. Contagens manuais foram realizadas em misturas de 25 pL 1:1 de cultura de ensaio e solução de trypan azul em um hemocitômetro Neubauer visto sob um microscópio de luz invertida em modo de fase-contraste (4X objetiva, 60X ampliação total). Sob essas condições, células viáveis apareceram em branco brilhante, e células não-viáveis eram azuis. Todos os experimentos foram realizados em triplicata, e os dados representados graficamente são a média dos três testes.
[00759] Coloração de Viabilidade:
[00760] A viabilidade foi estabelecida de acordo com um protocolo publicado pelo qual uma solução estoque de 100X de brometo de etídio/laranja acridina (EB/AO) foi preparada dissolvendo-se brometo de etídio (50 mg) e laranja acridina (15 mg) em 95% de etanol (1 mL) e diluindo 1/50 com H2O destilada e deionizada. A solução de 100X foi dividida em alíquotas de 1 mL e armazenada a -20 °C. Uma solução de trabalho de 1X foi feita pelo descongelamento de uma alíquota de 1 mL da solução estoque de 100X e diluindo a 1/100 com solução salina tamponada com fosfato. A solução de trabalho foi armazenada em uma garrafa de âmbar a 4 °C por até um mês. Para coloração de viabilidade celular, uma alíquota de suspensão celular foi ajustada para 1-5 x106 células mL’1 em tamponado de fosfato IMDM. Uma alíquota de 25 pL dessa suspensão celular foi misturada com 1X EB/AO de solução de coloração (25 pL) em um tubo de microcentrífuga; uma alíquota de 25 pL dessa mistura célula-coloração foi transferida para um hemocitômetro e vista sob um microscópio de luz invertida Nikon Eclipse TE2000-U operando em modo de epi-fluorescência (10X ou 40X objetiva, 150X ou 600X de ampliação total). Sob essas condições, células viáveis tomaram AO e excluíram EB, resultando em apenas fluorescência verde com UV-excitação. Células não-viáveis (apoptóticas or necróticas) assimilaram EB e vermelho fluorescido com excitação verde, sobrepujando qualquer fluorescência verde de AO. Células apoptóticas foram discernidas da formação de corpos menores, apoptóticos que fluoresceram em vermelho.
[00761] Coloração nuclear para microscopia confocal de escaneamento a laser (LSCM)
[00762] Células humanas HL-60 de leucemia promielocítica (ATCC CCL- 240) crescendo em fase log foram transferidas em alíquotas de 100 μL (aproximadamente 50,000 células) para uma microplaca de cultura de tecido de 96-poços (Corning Costar, Acton, MA) contendo 150 pL de meio de cultura aquecido (Hyclone’s IMDM suplementado com 20% FBS), e colocadas em uma incubadora de jaqueta de água a 37°C, 5% CO2 (Thermo Electron Corp., Forma Series II, Model 3110, HEPA Class 100) por uma hora para equilibrar. Então, 50 pL de uma solução de 600 pM de um composto da divulgação (aquecida a 37°C), feita em solução salina tamponada de fosfato (PBS) contendo 2.68 mM de cloreto de potássio, 1.47 mM de monobásico de fosfato de potássio, 0.137 M de cloreto de sódio, e 8.10 mM de dibásico de fosfato de sódio, pH 7.4, foi adicionada. A microplaca foi devolvida à incubadora por 15 min. A amostra de 300 pL foi então transferida para um prato de cultura de tecido com fundo de vidro revestido de colágeno (FluoroDish FD35COL, World Precision Instruments Inc.) e devolvida à incubadora por 10-15 min para permitir às células aderirem ao prato revestido. O volume do prato de cultura de tecido foi subsequentemente completado até 2 mL com PBS aquecida para LSCM.
[00763] Ao mesmo tempo em que a invenção foi descrita em detalhes e com referência a exemplos específicos da mesma, ficará claro para qualquer especialista na área que várias mudanças e modificações podem ser feitas sem se afastar do seu espírito e escopo.

Claims (4)

1. Composto caracterizado por possuir a fórmula (V):
Figure img0206
incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, onde: M é selecionado do grupo consistindo de ósmio, manganês, molibdenio, rênio, rutenio, ferro, cobalto, ródio, iridio, níquel, e platina; X é selecionado do grupo consistindo de Cl-, PF6-, Br-, BF4-, ClO4-, CF3SO3-, e SO4-2; n = 0, 1, 2, 3, 4, ou 5; Lig3 é um ligante bidentado que em cada ocorrencia é independentemente selecionado do grupo consistindo de:
Figure img0207
R3a, R3b, R3c, R3d, R3e, R3f, R3g, R3h R3i, R3j, R3k, e R3I em cada ocorrencia são independentemente selecionados do grupo consistindo de hidrogênio, alquil C16 opcionalmente substituído, alquil ramificado C1-6 opcionalmente substituído, haloalquil C1-6 opcionalmente substituído, alcoxi C1-6 opcionalmente substituído, fenil opcionalmente substituído, e CO2R8; R8 em cada ocorrencia é independentemente selecionado do grupo consistindo de hidrogênio e alquil C1-6 opcionalmente substituído; onde: (a) o composto não é Os(biq)3(ClO4^H2O, onde biq é 2,2'-biquinolina, (b) quando M é rutênio (i) não mais do que dois substituintes em M são idênticos, e (ii) não mais do que um substituinte em M é 2,2'-biquinolina, e (c) todos os substituintes dos grupos R opcionalmente substituídos são selecionados independentemente do grupo que consiste em halogênio, -CN, -NO2, oxo (=O), -OR9, -SR9, -N(R9)2, -NR9C(O)R9, -SO2R9, -SO2OR9, -SO2N(R9)2, -C(O)R9, -C(O)OR9, -C(O)N(R9)2, C1-6 alquil, C1-6 haloalquil, C1-6 alcóxi, C2-8 alquenil, C2-8 alquinil, C3-14 cicloalquil, aril, heterociclico, ou heteroaril, onde R9 é C1-6 alquil.
2. Composto caracterizado por possuir a fórmula [Os(biq)2(Lig)]Xn, onde: X é selecionado do grupo consistindo de Cl-, PF6-, Br-, BF4-, ClO4-, CF3SO3-, e SO4-2; n = 0, 1, 2, 3, 4 ou 5; Lig é um ligante bidentado outro que não biq não-substituído selecionado do grupo consistindo de:
Figure img0208
Figure img0209
Figure img0210
R1 é selecionado do grupo consistindo de hidrogenio, fenil opcionalmente substituído, aril opcionalmente substituído, heteroaril opcionalmente substituído, 4-piridil, 3-piridil, 2-tiazol, 2-pirolil, 2-furanil,
Figure img0211
Figure img0212
u é um número inteiro; R2a, R2b, R2c, R2d, R2e, R2f, R2g, R2h, R2i, R2j, R2k, e R2l em cada ocorrencia são independentemente selecionados do grupo consistindo de hidrogenio, alquil C1-6 opcionalmente substituído, alquil ramificado C1-6 opcionalmente substituído, cicloalquil C3-7 opcionalmente substituído, haloalquil C1-6 opcionalmente substituído, alcoxi C1-6 opcionalmente substituído, CO2R5, CONR62, NR72, SO3H, sulfato, sulfonato, aril opcionalmente substituído, ariloxi opcionalmente substituído, heteroalquil opcionalmente substituído, e heterocíclico opcionalmente substituído; R3a, R3b, R3c, R3d, R3e, R3f, R3g, R3h R3i, R3j, R3k, e R3l em cada ocorrencia são independentemente selecionados do grupo consistindo de hidrogenio, alquil C1-6 opcionalmente substituído, alquil ramificado C1-6 opcionalmente substituído, haloalquil C1-6 opcionalmente substituído, alcoxi C1-6 opcionalmente substituído, fenil opcionalmente substituído, e CO2R8; R4a, R4b, e R4c em cada ocorrencia são independentemente selecionados do grupo consistindo de hidrogenio, alquil C1-6 opcionalmente substituído, alquil ramificado C1-6 opcionalmente substituído, cicloalquil C1-6 opcionalmente substituido, haloalquil C1-6 opcionalmente substituido, alcoxi C1-6 opcionalmente substituído, CO2R5, CONR62, NR72, sulfato, sulfonato, aril opcionalmente substituído, ariloxi opcionalmente substituído, heteroaril opcionalmente substituído, e heterocíclico opcionalmente substituído; R4a e R4b em cada ocorrencia em um anel de tiofeno são tomados juntos com o átomo ao qual eles são ligados para formar um anel opcionalmente substituído possuindo de 6 átomos contendo 2 átomos de oxigênio; R5 em cada ocorrencia é independentemente selecionado do grupo consistindo de hidrogenio e alquil C1-6 opcionalmente substituído; R6 em cada ocorrencia é independentemente selecionado do grupo consistindo de hidrogenio e alquil C1-6 opcionalmente substituído; R7 em cada ocorrencia é independentemente selecionado do grupo consistindo de hidrogenio e alquil C1-6 opcionalmente substituído; R8 em cada ocorrencia é independentemente selecionado do grupo consistindo de hidrogênio, alquil C1-6 opcionalmente substituído, e, biq é 2,2’-biquinolina, onde todos os substituintes dos grupos R opcionalmente substituídos são independentemente selecionados do grupo consistindo de halogênio, -CN, - NO2, oxo (=O), -OR9, -SR9, -N(R9)2, -NR9C(O)R9, -SO2R9, -SO2OR9, - SO2N(R9)2, -C(O)R9, -C(O)OR9, -C(O)N(R9)2, C1-6 alquil, C1-6 haloalquil, C1-6 alcóxi, C2-8 alquenil, C2-8 alquinil, C3-14 cicloalquil, aril, heterociclo, ou heteroaril, onde R9 é C1-6 alquil.
3. Composto de acordo com a reivindicação 2 caracterizado por Lig ser 1,10-fenatrolina, imidazo[4,5-f][1,10]fenatrolina ou benzo[i]dipirido[3,2-α:2’,3’- c]fenazina.
4. Composto de acordo com a reivindicação 3 caracterizado por X ser Cl- e n ser 2.
BR112015023568A 2013-03-15 2014-03-17 Composto à base de metal como composto fotodinâmico BR112015023568B8 (pt)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361801674P 2013-03-15 2013-03-15
US61/801,674 2013-03-15
PCT/US2014/030194 WO2014145428A2 (en) 2013-03-15 2014-03-17 Metal-based coordination complexes as photodynamic compounds and their use

Publications (3)

Publication Number Publication Date
BR112015023568A2 BR112015023568A2 (pt) 2017-07-18
BR112015023568B1 true BR112015023568B1 (pt) 2023-04-11
BR112015023568B8 BR112015023568B8 (pt) 2024-01-02

Family

ID=50687659

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112015023568A BR112015023568B8 (pt) 2013-03-15 2014-03-17 Composto à base de metal como composto fotodinâmico

Country Status (7)

Country Link
US (1) US10766915B2 (pt)
EP (1) EP2976347B1 (pt)
CN (1) CN105377862B (pt)
BR (1) BR112015023568B8 (pt)
CA (1) CA2907356C (pt)
RU (1) RU2682674C2 (pt)
WO (1) WO2014145428A2 (pt)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2974329C (en) * 2015-01-19 2018-10-02 Theralase Technologies, Inc. Metal-glycoprotein complexes and their use as chemotherapeutic compounds
US10111936B2 (en) 2015-01-19 2018-10-30 Theralase Technologies, Inc. Metal-glycoprotein complexes and photodynamic therapy of immune privileged sites with same
WO2017019836A1 (en) 2015-07-28 2017-02-02 Photonmd, Llc Systems and methods for phototherapeutic modulation of nitric oxide
US12109429B2 (en) 2015-07-28 2024-10-08 Know Bio, Llc Phototherapeutic light for treatment of pathogens
US10335608B2 (en) 2016-04-20 2019-07-02 Theralase Technologies, Inc. Photodynamic compounds and methods for activating them using ionizing radiation and/or other electromagnetic radiation for therapy and/or diagnostics
CN117462558A (zh) 2017-05-05 2024-01-30 博德疗法公司 反式-[四氯双(1h-吲唑)钌(iii)]及其组合物的制备
WO2018209203A1 (en) * 2017-05-11 2018-11-15 Theralase Biotech, Inc. Vaccine containing cancer cells inactivated by photodynamic treatment with metal-based coordination complexes, and immunotherapy method using same
US11793818B2 (en) 2018-03-26 2023-10-24 Theralase Technologies, Inc. Method for treating conditions associated with hyperproliferating cells comprising combined administration of a cannabinoid receptor agonist and radiation therapy
US12011611B2 (en) 2020-03-19 2024-06-18 Know Bio, Llc Illumination devices for inducing biological effects
US11147984B2 (en) 2020-03-19 2021-10-19 Know Bio, Llc Illumination devices for inducing biological effects
US11986666B2 (en) 2020-03-19 2024-05-21 Know Bio, Llc Illumination devices for inducing biological effects
CN111939124B (zh) * 2020-07-13 2022-06-28 东南大学 一种金属聚合物、金属聚合物纳米胶束及其制备方法和应用
US11813330B2 (en) * 2021-03-04 2023-11-14 Theralase Technologies, Inc. Sonodynamic therapy using sonodynamically activated coordination complexes of transition metals as sensitizing agents
US12115384B2 (en) 2021-03-15 2024-10-15 Know Bio, Llc Devices and methods for illuminating tissue to induce biological effects
US11654294B2 (en) 2021-03-15 2023-05-23 Know Bio, Llc Intranasal illumination devices

Family Cites Families (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6239682A (ja) * 1985-08-13 1987-02-20 Fuji Photo Film Co Ltd 赤外線吸収性組成物
CA2005039A1 (en) 1989-12-08 1991-06-08 Randell L. Mills Pharmaceuticals and apparatus providing diagnosis and selective tissue necrosis
WO1991016719A2 (en) * 1990-04-17 1991-10-31 Michael Graetzel Photovoltaic cells
US6362175B1 (en) 1991-09-20 2002-03-26 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Porphyrin compounds for imaging tissue oxygen
GB9123814D0 (en) 1991-11-08 1992-01-02 Johnson Matthey Plc Photosensitizers
TW235298B (pt) 1992-02-27 1994-12-01 Ciba Geigy
CA2133284A1 (en) 1994-09-29 1996-03-30 Svetlana Kudrevich Octacarboxy substituted tetra(2,3-pyrazino)porphyrazines and their derivatives
US5648485A (en) 1994-10-26 1997-07-15 University Of British Columbia β, β-dihydroxy meso-substituted chlorins, isobacteriochlorins, and bacteriochlorins
RU2089555C1 (ru) 1995-05-04 1997-09-10 Новосибирский институт биоорганической химии СО РАН Бисимидазол-(1,10)-фенантролинплатина (iii) дихлорид, проявляющий цитостатическую противоопухолевую активность
WO1996039144A1 (en) * 1995-06-06 1996-12-12 Procyte Corporation Stable copper(i) complexes as active therapeutic substances
CA2225214A1 (en) 1995-06-20 1997-01-09 Miravant Pharmaceuticals, Inc. Efficient functionalization of porphyrin derivatives
CA2237056C (en) 1995-11-24 2006-10-10 Avigdor Scherz Synthetic metal-substituted bacteriochlorophyll derivatives and use thereof
CA2221912A1 (en) 1997-11-21 1999-05-21 David Dolphin Photosensitizers with improved biodistribution and light-absorbing properties
US6248733B1 (en) 1998-01-09 2001-06-19 3M Innovative Properties Company Method for limiting the growth of microorganisms using metal-containing compounds
AU748625B2 (en) 1998-07-10 2002-06-06 Meiji Seika Kaisha Ltd. Novel X-ray intercepting metal complexes of chlorin derivatives
EP1137411B1 (en) 1998-12-09 2006-12-06 YEDA RESEARCH AND DEVELOPMENT Co. LTD. Palladium-substituted bacteriochlorophyll derivatives and use thereof
AU2002310314B2 (en) 2001-06-06 2006-07-27 Brookhaven Science Associates Novel metalloporphyrins and their uses as radiosensitizers for radiation therapy
GB0120618D0 (en) 2001-08-24 2001-10-17 Univerity Court Of The Univers Photoreactive compounds and compositions
US7087214B2 (en) 2002-02-01 2006-08-08 Zentaris Gmbh Water-soluble porphyrin platinum compounds with high tumor selectivity and their use for the treatment of benign and malignant tumor diseases
CA2498231A1 (en) 2002-08-01 2004-02-12 Purdue Research Foundation Photoactivated anti-viral and anti-cancer agent
IL152900A0 (en) 2002-11-17 2003-06-24 Yeda Res & Dev Water-soluble bacteriochlorophyll derivatives and their pharmaceutical uses
AU2004264421B2 (en) 2003-08-13 2011-02-24 University Of South Florida Platinum complexes for the treatment of tumors
PL197232B1 (pl) 2004-06-03 2008-03-31 Univ Wroclawski Nowe kompleksy kationowe żelaza(II) i kobaltu(II) z 2,2'-bipirydyną, z 2,2'-bichinoliną i 1,10-fenantroliną oraz ich pochodnymi, sposób wytwarzania tych kompleksów i zastosowanie
GB0418643D0 (en) 2004-08-20 2004-09-22 Univ Edinburgh Ruthenium (II) compounds
US7825250B2 (en) 2004-10-01 2010-11-02 Ube Industries, Ltd. Binuclear metal complex, metal complex dye, photoelectric conversion element, and photochemical battery
GB0610062D0 (en) 2006-05-19 2006-06-28 Univ Edinburgh Ruthenium (ll) compounds
CN101778857A (zh) 2007-06-18 2010-07-14 普拉托技术（私有）公司 铂(iv)络合物
GB201006762D0 (en) 2010-04-22 2010-06-09 Univ Warwick Osmium (II) arene AZO anti-cancer complexes
GB201008584D0 (en) 2010-05-22 2010-07-07 Univ Warwick Novel iridium anti-cancer compounds
BR112014025702B1 (pt) 2012-04-15 2022-10-11 Sherri Ann Mcfarland Compostos de tiofeno fotodinâmicos a base de metal e seus usos
PT108082B (pt) 2014-12-06 2020-12-15 Faculdade De Ciências Da Universidade De Lisboa Complexos macromoleculares de metais de transição para o tratamento do cancro e seu processo de preparação
EP3355901A4 (en) 2015-10-01 2019-08-07 Photodynamic Inc. NOVEL EXTRACTS OF POLYGONUM CUSPIDATUM AND THEIR USE AS PHOTODYNAMIC INACTIVATION AGENTS

Also Published As

Publication number Publication date
CA2907356A1 (en) 2014-09-18
RU2015144121A (ru) 2017-04-21
US10766915B2 (en) 2020-09-08
RU2682674C2 (ru) 2019-03-20
EP2976347B1 (en) 2022-01-19
EP2976347A2 (en) 2016-01-27
CA2907356C (en) 2022-07-12
WO2014145428A2 (en) 2014-09-18
BR112015023568A2 (pt) 2017-07-18
CN105377862A (zh) 2016-03-02
US20160039854A1 (en) 2016-02-11
CN105377862B (zh) 2019-09-13
WO2014145428A3 (en) 2015-01-15
BR112015023568B8 (pt) 2024-01-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BR112015023568B1 (pt) Composto à base de metal como composto fotodinâmico antecedentes da invenção
BR112014025702B1 (pt) Compostos de tiofeno fotodinâmicos a base de metal e seus usos
Sun et al. Cascade reactions by nitric oxide and hydrogen radical for anti-hypoxia photodynamic therapy using an activatable photosensitizer
Yang et al. Thienopyrrole-expanded BODIPY as a potential NIR photosensitizer for photodynamic therapy
Huang et al. Diketopyrrolopyrrole-Au (I) as singlet oxygen generator for enhanced tumor photodynamic and photothermal therapy
Wu et al. A new near-infrared phosphorescent iridium (III) complex conjugated to a xanthene dye for mitochondria-targeted photodynamic therapy
Song et al. Rational design of BODIPY organic nanoparticles for enhanced photodynamic/photothermal therapy
Tang et al. Heavy atom enhanced generation of singlet oxygen in novel indenofluorene-based two-photon absorbing chromophores for photodynamic therapy
Song et al. BODIPY derivatives as light-induced free radical generators for hypoxic cancer treatment
Ma et al. Enhanced singlet oxygen generation of a soft salt through efficient energy transfer between two ionic metal complexes
Perumal et al. Biotin-decorated NIR-absorbing nanosheets for targeted photodynamic cancer therapy
JP2021512849A (ja) ヒポクレリンのペリ位及び２−位の両方がアミノ置換された誘導体、その調製方法及び使用
Tian et al. A feasible molecular engineering for bright π-conjugation free radical photosensitizers with aggregation-induced emission
Bian et al. A proton-activatable aminated-chrysophanol sensitizer for photodynamic therapy
Zhang et al. Non-aryl substituted aza-BODIPYs at 1, 7-or 3, 5-sites: synthesis, structures, optical properties, and applications
Da et al. A targeted and efficient CDT system with photocatalytic supplement of H 2 O 2 and hydroxyl radical production at a neutral pH
Gao et al. Highly efficient singlet oxygen generation of AIE luminogens enable mitochondria-targeted photodynamic therapy
WO2008119950A1 (en) Porphyrin compounds
Eçik et al. Design of novel photosensitizers and controlled singlet oxygen generation for photodynamic therapy
CN113454067A (zh) 用于单线态氧生成与癌症消融的荧光探针
WO2014044757A1 (en) Cationic triphenylamine derivatives activable by visible and infra red light for inducing and imaging apoptosis in cancer cells
US20220409727A1 (en) Metal Complexes Bearing Bisstyryl-Bipyridine Ligand and Their Use as Photosensitizer Agent in One and Two-Photon Photodynamic Therapy
He et al. Synergistic phototherapy of NIR wavelength xanthene-quinoline salt-based heavy-atom-free photosensitizers for tumor therapy
KR102720878B1 (ko) 광역학 암치료를 위한 신규한 화합물, 이를 포함하는 조성물 및 광역학 암치료 방법
US20230015033A1 (en) New compound for photodynamic therapy of cancer, composition including same, and method for photodynamic therapy of cancer

Legal Events

Date Code Title Description
B07D Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette]
B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B07E Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette]
B06U Preliminary requirement: requests with searches performed by other patent offices: procedure suspended [chapter 6.21 patent gazette]
B25G Requested change of headquarter approved

Owner name: SHERRI ANN MCFARLAND (US)

B06A Patent application procedure suspended [chapter 6.1 patent gazette]
B09A Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette]
B16A Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 17/03/2014, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS

B16C Correction of notification of the grant [chapter 16.3 patent gazette]

Free format text: REFERENTE A RPI 2727 DE 11/04/2023, QUANTO AO ITEM (54) TITULO.