BE877378A

BE877378A - Derives de la substance sf-1739, leur preparation et les compositions antibacteriennes et antitumorales les contenant

Info

Publication number: BE877378A
Application number: BE0/196053A
Authority: BE
Original assignee: Meiji Seika Kaisha
Priority date: 1978-08-16
Filing date: 1979-06-29
Publication date: 1979-10-15
Also published as: JPS5527132A; JPS619837B2

Description


  "Dérivés de la substance SF-1739, leur préparation et les compositions antibactériennes et antitumorales les contenant"

  
La présente invention est relative à un nouveau groupe 

  
de dérivés de la substance SF-1739, à des procédés pour la préparation de ces dérivés ainsi qu'à des compositions antibactériennes

  
et antitumorales contenant comme ingrédient actif au moins l'un de

  
ces dérivés.

  
La présente invention est plus particulièrement relati-

  
ve à de nouveaux dérivés de la substance SF-1739, à savoir la  <EMI ID=1.1> 

  
substance SF-1739 HP, la substance SF-1739 HP-C, la substance

  
 <EMI ID=2.1> 

  
HP-5, à des procédés pour la préparation de ces dérivés SF-1739, ainsi qu'à des compositions antimicrobiennes et antitumorales contenant comme ingrédient actif au moins l'un de ces dérivés de la substance SF-1739 .

  
En ce qui concerne la technique antérieure , on a décrit dans la demande de brevet Japonais publiée , non encore examinée , n[deg.] 125798/1976 (déposée par Meiji Seika Kaisha Ltd, Japon, le 24 avril 1975 sous le numéro n[deg.]49131/1975 ) qu'une substance antibiotique SF-1739 peut être produite en cultivant une souche de Streptomyces griseoplanus SF-1739.En outre., suivant le

  
 <EMI ID=3.1> 

  
la substance SF-1739 est une base diacide jaune d'une structure chimique non identifiée , les propriétés physico-chimiques et biologiques de cette substance étant par ailleurs discutées en détail dans ce rapport. De plus, on sait que la substance SF-1739 est extrêmement instable sous des conditions alcalines et même sa base libre se décompose en différentes fractions ne présentant aucune activité antibactérienne après un repos à l'état sec pendant plusieurs jours, tandis qu'elle est très stable sous des conditions acides .

  
On a réalisé des études plus poussées au sujet de la stabilité de la substance SF-1739 sous des conditions acides et,

  
à la suite de cela, on a constaté qu'on peut obtenir une nouvelle substance SF-1739 HP en traitant la substance SF-1739 avec un acide fort,'et que cette nouvelle substance peut présenter des activités antibactériennes et antitumorales intéressantes.

  
De plus, en raison du fait que la nouvelle substance SF-1739 HP montre une toxicité nettement supérieure , on a effectué d'autres études sur des dérivés de la substance SF-1739 HP afin de réduire sa toxicité , et on a également constaté eu'un nouveau groupe des dérivés de la substance SF-1739 HP, à savoir la substance SF-1729 HP-C et la substance SF-1739 HP-F, peuvent être obtenus en faisant réagir la substance SF-1739 HP avec un cyanure ou du formaldéhyde , ces nouvelles substances remplissant parfaitement le bur ?oursuivi.

  
D'un autre coté , on a étudié d'autres métabolites.qui

  
 <EMI ID=4.1> 

  
tinomycètes tels que la souche de Streptomyces grisèoplanus SF-1739 (demande de brevet Japonais publiée non encore examinée

  
 <EMI ID=5.1> 

  
nait dans un bouillon de culture des métabolites jaunes qui s'avèraient nettement différents de la substance SF-1739 , bien qu'ils aient également des valeurs de Rf, et qu'on pouvait obtenir ce nou-

  
 <EMI ID=6.1> 

  
HP-3 et la substance SF-1739 HP-5 à partir des métabolites jaunes par traitement avec un acide fort.

  
Par conséquent, un but de la présente invention est de prévoir un nouveau groupe de cinq substances antibiotiques, à savoir la substance SF-1739 HP, la substance SF-1739 HP-C,la substan-

  
 <EMI ID=7.1> 

  
HP-5.

  
 <EMI ID=8.1> 

  
procédé pour la préparation de ces substances antibiotiques.

  
Encore un autre but de la présente invention est ce prévoir une composition antibactérienne ou antitumorale contenant

  
 <EMI ID=9.1> 

  
ce SF-1739.

  
 <EMI ID=10.1> 

  
vention , on prévoit , ainsi qu'on l'a mentionné ci-desus , cinq dérivés différents de la substance SF-1739. Chacun de ces dérivés  <EMI ID=11.1>  après, 

  
I. Substance SF-1739 HP

  
(1) Propriétés physico-chimiques :

  
Cette substance ne présente pas de point de fusion défini et fond en noircissant sur une large gamme commençant aux en-

  
 <EMI ID=12.1> 

  
te un spectre d'absorption ultraviolet dans le méthanol [illustré par une ligne entrait plein ( à la figure 1] avec trois

  
 <EMI ID=13.1> 

  
 <EMI ID=14.1> 

  
 <EMI ID=15.1> 

  
 <EMI ID=16.1> 

  
et un spectre d'absorption ultraviolet dans NaOH 0,05 N-méthanol 

  
 <EMI ID=17.1> 

  
 <EMI ID=18.1> 

  
(124), 345 nm (épaulement ) et 540 nm (24) .Ainsi qu'on peut le voir à la figure 2, cette substance montre un spectre d'absorption .infrarouge (dans le Nujol) avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3.350, 1655, 1600, 1540, 1355, 1265, 1235, 1180, 1120, <EMI ID=19.1> 

  
et un spectre de résonance magnétique nucléaire (dans le D20)  tel que celui représenté à la figure 3. Son spectre de masse montre des pics à m/e 412 et 430, de sorte que l'on estime que son poids moléculaire est approximativement celui de la substance SF-1739 . Cette substance présente la composition analytique suivante: C: 62,19 %, H: 6,95 %; N: 8,50%: 0; 22,36 % (par différence) Elle montre également une courbe de dispersion rotatoire optique telle que celle représentée à la figure 4, courbe à partir de laquelle on peut calculer sa rotation spécifique qui est de

  
 <EMI ID=20.1> 

  
couleur pourpre noirâtre qui est aisément soluble dans l'eau et le  <EMI ID=21.1> 

  
 <EMI ID=22.1> 

  
 <EMI ID=23.1> 

  
E.Merck, République Fédérale d'Allemange ) sont de 0,45 lorsqu'elle est développée avec un mélange de chloroforme et de méthanol (9/1) et de 0,23 lorsqu'elle est développée avec un mélange de h-butanol,

  
 <EMI ID=24.1> 

  
pondantes de la substance SF-1739 sont respectivement de 0, 76 et de 0,39. La stabilité de la substance SF-1739 HP est fortement améliorée comparativement à celle de la substance SF-1739 de départ et cette substance est stable aussi bien sous des conditions acides que sous des conditions alcalines. Par exemple, même si on la lais-

  
 <EMI ID=25.1> 

  
est totalement stable, tandis que la substance SF-1739 de départ se convertit pratiquement à la substance SF-1739 HP. De même, même si

  
 <EMI ID=26.1> 

  
pérature ambiante pendant la nuit , on ne constate aucune diminution sensible de son activité bactérienne, tandis que la substance SF-1739 de départ est pratiquement inactivée .

  
(2) Préparation:

  
On peut préparer cette substance à partir de la substance SF-1739 par un traitement avec un -acide . Comme acide que l'on peut utiliser pour ce traitement , on peut mentionner les acides minéraux tels que l'acide chlorhydrique , l'acide bromhydrique , l'acide sulfurique , etc, et les acides organiques tels que l'acide trifluoroacétique , l'acide méthanesulfonique , l'acide trifluorométhanesulfonique , etc. Les paramètres de la réaction peuvent varier suivant le type et la concentration de l'acide à utiliser et  du solvant à utiliser . Dans le cas d'un acide minéral, le traitement est effectué d'une façon désirable sous refroidissement eu à la température ambiante pendant une période d' un jour à une semaine lors- <EMI ID=27.1> 

  
 <EMI ID=28.1> 

  
 <EMI ID=29.1> 

  
centration inférieure de pas plus de 5N. A une température élevée au-dessus des 80[deg.]C, la production de sous-produits à plutôt tendance quelquefois à s'accroître. Le traitement peut se développer d'une manière plutôt rapide dans une solution aqueuse,tandia qu'il est plus lent dans du méthanol aqueux. La conversion de la substance SF-1739 en la substance SF-1738 HP peut se faire à un pH en dessous de 3.

  
Une fois que le traitement est réalisé , la substance SF-1739 HP peut aisément être récupérée à partir du mélange de réac-

  
 <EMI ID=30.1> 

  
physico-chimiques mentionnées ci-dessus de la substance SF-1739 HP. Par exemple , on peut neutraliser le mélange de réaction avec une base , par - exemple du bicarbonate de 'sodium, du . carbonate

  
 <EMI ID=31.1> 

  
du méthanol et on purifie ensuite l'extrait directement par une chromatographie sur couche mince préparatoire avec gel de silice. Ou bien, comme ... moins de sous-produits sont obtenus dans ce traitement , on peut concentrer le mélange de réaction , on dissout le résidu dans du méthanol , on neutralise la solution résultante, et on la fait ensuite passer dans une colonne de Séphadex LH-20
(délivrée par Pharmacia, Suède),qui peut ensuite être développée avec du méthanol ou un solvant mixte formé d'acétate d'éthyle et de méthanol pour purifier le produit désiré.

  
II. Substance SF-1739 HP-C et Substance SF-1739 HP-F
(II-a) Substance SF-1739 HP-C

  
(1) Propriétés physico-chimiques:

  
Cette substanco ne présente pas de point de fusion défini et fond en noircissant sur une large gamme commençant aux  <EMI ID=32.1> 

  
 <EMI ID=33.1> 

  
 <EMI ID=34.1> 

  
 <EMI ID=35.1> 

  
 <EMI ID=36.1> 

  
 <EMI ID=37.1> 

  
410 nm (22) , et un spectre d'absorption ultraviolet dans un mélan-

  
 <EMI ID=38.1> 

  
chaîne à la figure 5 ] avec des maxima d'absorption à 222 nm

  
 <EMI ID=39.1> 

  
d'absorption infrarouge (dans le Nujol) tel qu'indiqué à la figure

  
1

  
 <EMI ID=40.1> 

  
i
1355. 1265, 1235, 1200, 1175, 1140, 1120, 1080, 1060, 1000. 940, 

  
 <EMI ID=41.1> 

  
que telle qu'indiquée à la figure 7, et un spectre de résonance

  
 <EMI ID=42.1> 

  
 <EMI ID=43.1> 

  
N: 12,63%: 0: 21,65% (par différence ). C'est une substance de couleur pourpre noirâtre qui est aisément soluble dans l'eau et le mé-

  
 <EMI ID=44.1> 

  
soluble dans l'hexane . Ses valeurs de Rf sur une plaque de gel de

  
 <EMI ID=45.1> 

  
d'Allemagne ) sont de 0,40 lorsqu'elle est développée dans un mélan- 

  
 <EMI ID=46.1> 

  
développée avec un mélange d'acétate d'éthyle et de méthanol (3/2),  tandis que les valeurs correspondantes de la substance SF-1739 HP  sont respectivement de 0,26 et de 0,31. Elle est stable à l'état  sec et en solution méthanolique neutre, acide et alcaline . 

  
(II-b) Substance SF-1739 HP-F 

  
 <EMI ID=47.1>  

  
Cette substance ne présente pas de point de fusion défini et fond en noircissant sur une large gamme commençant aux alentours de 110[deg.] - 140[deg.]C. Ainsi qu'on peut le voir à la figure 9, elle présente un spectre d'absorption ultraviolet dans le méthanol [illustré par une ligne en trait plein à la figure 9] avec trois

  
 <EMI ID=48.1> 

  
(24) , un spectre d'absorption ultraviolet dans un mélange de HC1

  
 <EMI ID=49.1>  <EMI ID=50.1> 

  
= 133) et 405 nm (19), et un spectre d'absorption ultraviolet

  
 <EMI ID=51.1> 

  
 <EMI ID=52.1> 

  
et 540 nm (29). Ainsi qu'on peut le voir à la figure 10, elle montre un spectre d'absorption infrarouge (dans le Nujol) avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3300, 1660, 1530, 1350,
1310, 1265, 1235,1205, 1175, 1125, 1085, 1025, 1000, 940, 920, 830

  
 <EMI ID=53.1> 

  
 <EMI ID=54.1> 

  
une substance de couleur pourpre noirâtre qui est aisément soluble dans 1'eau et le méthanol, soluble dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et faiblement.soluble dans l'hexane . Ses valeurs de Rf sur une plaque de gel de silice en couche mince (délivré par E.Merck, République Fédérale d'Allemagne) sont de 0,28 lorsqu'elle est développée avec un mélange de chloroforme et de méthanol (9/1) et

  
de 0,53 lorsqu'elle est développée avec un mélange d'acétate d'é-

  
 <EMI ID=55.1> 

  
de la substance SF-1739 HP sont respectivement de 0,26 et de 0,31. Elle est stable à l'état sec et en solution méthanolique neutre et alcaline , mais elle est moins stable dans du méthanol acide.

  
 <EMI ID=56.1> 

  
La substance SF-1739 HP-C peut être préparée à partir de la substance SF-1739 HP, qui est obtenue comme dans le para- <EMI ID=57.1> 

  
Comme cyanure que l'on peut utiliser , on peut mention-

  
 <EMI ID=58.1> 

  
lino-terreux , métalliques ou d'amines organiques (y compris l'ammoniac ) d'acide cyanhydrique , tels que du cyanure de sodium, de potassium , de lithium , de magnésium ou d'ammonium, etc , ainsi

  
 <EMI ID=59.1> 

  
dairement , tels que le bromure de cyanogène, etc.

  
D'un autre c8té , on peut préparer la substance SF-1739

  
 <EMI ID=60.1> 

  
mamide.

  
Dans les deux cas, la réaction peut se dérouler rapide-

  
 <EMI ID=61.1> 

  
tiquement achevée dans une période d'environ 5 à 30 minutes.A une

  
 <EMI ID=62.1> 

  
dans chaque cas , on peut mentionner , par exemple , l'eau,l'alcool , le diméthylformamide , les solvants mixtes formés d'un solvant organique miscible dans l'eau et d'eau , etc. Par ailleurs,

  
on peut utiliser du formamide en une quantité excédentaire de manière à ce qu'il puisse agir à la fois comme réactif et comme solvant pour la préparation de la substance SF-1739 HP-F.

  
Une fois la réaction terminée , le produit désiré peut être aisément récupéré et purifié par des méthodes traditionnelles, en utilisant les propriétés physico-chimiques mentionnées ci-dessus de chaque substance. Par exemple , on peut concentrer le mélange de réaction à sec , on extrait le résidu avec du méthanol, et ensuite on purifie directement l'extrait au moyen d'une chromatographie sur couche mince préparatoire avec gel de silice .

  
Ou bien, comme moins de sous-produits sont obtenus dans chaque réaction, on peut concentrer le mélange de réaction, on dissout le résidu dans du méthanol et on fait ensuite passer la  <EMI ID=63.1> 

  
vrée par Pharmacia, Suède ), qui peut ensuite être développée avec  du méthanol ou un solvant mixte formé d'acétate d'éthyle et de mé-  thanol pour purifier le produit désiré. 

  
III Substance SF-1738 HP-5 et Substance SF-1739-HP-3 

  
 <EMI ID=64.1> 

  
 <EMI ID=65.1> 

  
Cette substance est une substance poudreuse de couleur pourpre noirâtre qui n'a pas de point de fusion défini et qui fond en noircissant sur une gamme étendue commençant aux alentours de

  
 <EMI ID=66.1> 

  
un spectre d'absorption ultraviolet dans le méthanol [illustré par une ligne en trait plein à la figure Il] avec trois maxima d'absorp-

  
 <EMI ID=67.1> 

  
cm  tre d'absorption ultraviolet dans,un mélange de HC1 0,05 N et de 

  
 <EMI ID=68.1> 

  
 <EMI ID=69.1> 

  
cm

  
(22) , et un spectre d'absorption ultraviolet dans un mélange de  NaOH 0,05N et de méthanol à 95% [ illustré par une ligne en chaîne

  
 <EMI ID=70.1> 

  
1 cm

  
et 550 nm (34). Elle montre un spectre d'absorption infrarouge
(dans le Nujol) tel que celui représenté à la figure 12, avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3300, 1655, 1600, 1540, 1350,

  
 <EMI ID=71.1> 

  
et également un spectre de résonance magnétique nucléaire ( dans 

  
 <EMI ID=72.1> 

  
spectre de résonance magnétique nucléaire (C-13) révèle qu'au moins
19 atomes de carbone sont présents dans la molécule de la substance SP-1739 HP-5. On estime que son poids moléculaire est de l'ordre de
550 par un procédé de tension de vapeur. Elle présente la composition analytique suivante: C: 60,93%; H: 7,058%; N: 8,41%; 0:23,61%  <EMI ID=73.1> 

  
lubie dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et faiblement soluble dans l'hexane. Ses valeurs de Rf sur une plaque de gel de silice

  
 <EMI ID=74.1> 

  
 <EMI ID=75.1> 

  
chloroforme et de méthanol (9/1) et de 0,12 lorsqu'elle est développée avec un mélange d'acétate d'éthyle et de méthanol (3/2),  tandis que les valeurs correspondantes de la substance SF-1739 HP sont respectivement de 0,26 et de 0,31. Elle est stable à l'état

  
 <EMI ID=76.1> 

  
nol acide et moins stable dans du méthanol alcalin.

  
 <EMI ID=77.1> 

  
 <EMI ID=78.1> 

  
Cette substance est une substance poudreuse de couleur

  
 <EMI ID=79.1> 

  
en noircissant sur une gamme étendue commençant aux alentours de,

  
 <EMI ID=80.1> 

  
un spectre d'absorption ultraviolet dans l'éthanol 6 illustré par une ligne en trait'plein à la figure l4] avec quatre maxima

  
 <EMI ID=81.1> 

  
(314), 330 nm (épaulement) et 543 nm (54) , un spectre d'absorp-..  tion ultraviolet dans un mélange de HC1 0,05 N et de méthanol à

  
 <EMI ID=82.1> 

  
 <EMI ID=83.1> 

  
(40) , et un spectre d'absorption ultraviolet dans un mélange de 

  
 <EMI ID=84.1> 

  
 <EMI ID=85.1> 

  
 <EMI ID=86.1> 

  
sorption infrarouge (dans le Nujol) tel que celui représenté à  <EMI ID=87.1> 

  
 <EMI ID=88.1> 

  
 <EMI ID=89.1> 

  
 <EMI ID=90.1>   <EMI ID=91.1> 

  
soluble dans l'hexane. Ses valeurs de Rf sur une plaque de gel de silice en couche mince (délivré par E.Merck , République Fédérale d'Allemagne) sont de 0,22 lorsqu' elle' est développée avec un mélange de chloroforme et de méthanol (9/1) et de 0,39 lorsqu'elle est développée avec un mélange d'acétate d'éthyle et de méthanol (3/2),

  
 <EMI ID=92.1> 

  
sont respectivement de 0,26 et 0,31. Elle est stable dans du méthanol neutre. ou acide , mais moins stable dans du méthanol alcalin.

  
 <EMI ID=93.1> 

  
Ces substances peuvent être préparées à partir de métabolites jaunes naturels par traitement avec un acide, ces métabolites étant produits dans un bouillon cultivé par culture d'actinomy-

  
 <EMI ID=94.1> 

  
crite dans la demande de:brevet Japonais publiée , non encore examinée .mentionnée ci-dessus.

  
Comme acide que l'on peut utiliser pour ce traitement , on peut mentionner les acides minéraux tels que l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique l'acide sulfurique , etc, et les acides

  
 <EMI ID=95.1> 

  
de la réaction peuvent varier suivant le type et la concentration d'acide et du solvant utilisés .Dans le cas d'un acide minéral, le traitement est effectué d'une façon désirable sous refroidissement ou à la température ambiante pendant une période de un jour à une semaine lorsque l'on utilise une concentration très élevée de

  
 <EMI ID=96.1> 

  
périeure pendant une période de un à plusieurs jours lorsque l'on 

  
 <EMI ID=97.1> 

  
 <EMI ID=98.1> 

  
duits a parfois plutôt tendance à augmenter. Le traitement peut être réalisé plutôt rapidement en solution aqueuse, tandis qu'il est plus lent dans du méthanol aqueux. La conversion des métabolites jaunes en les substances SF-1739 HP-3 et SF-1739 HP-5 peut se faire à un pH en dessous de 3.

  
Une fois que le traitement a été réalisé , on peut aisément récupérer les substances SF-1739 -HP-3 et SF-1739 HP-5 à partir du mélange de réaction par des méthodes ordinaires , en uti-

  
 <EMI ID=99.1> 

  
stances SF-1739 HP-3 et SF-1739 HP-5. Par exemple , on peut neutra-

  
 <EMI ID=100.1> 

  
bicarbonate de sodium , du carbonate de sodium , etc, on concentre à sec et on extrait le résidu avec du méthanol , et ensuite on parifie directement-l'extrait au moyen d'une chromatographie sur

  
 <EMI ID=101.1> 

  
tient moins de sous-produits dans ce traitement , on peut concentrer le mélange de réaction , on dissout le résidu dans du méthanol , on neutralise la solution résultante , et on la.fait ensuite passer dans une colonne de Séphadex LH-20 (délivré par

  
 <EMI ID=102.1> 

  
ou un solvant mixte formé d'acétate d'éthyle et de méthanol pour purifier les produits désirés . 

  
 <EMI ID=103.1> 

  
peut produire les métabolites jaunes de départ pour cette préparation et la production du métabolite jaune sera définie plus

  
en détail ci-après.

  
La Bouche SE-1739 de gtreptomyces griseoplanus a été déposée sous le numéro d'accès 3002 auprès du Technical Research

  
 <EMI ID=104.1>   <EMI ID=105.1> 

  
Collection (ATCC) , Etats-Unis d'Amérique . Les caractéristiques morphologiques de cette souche.numéro 3002 sont les suivantes.

  
(I) Morphologie :

  
 <EMI ID=106.1> 

  
formés de farine d'avoine et d'agar, de levure , de malt et d'agar, etc, avec une riche sporulation . De simples ramifications sont observées , mais des ramifications en forme de touffes n'ont pas été remarquées. Une spirale ouverte lâche se forme au sommet du mycélium aérien. Une configuration spécifique telle qu'une sclérotie n'est,pas observée . Lorsqu'on l'observe au microscope , la surfa-

  
 <EMI ID=107.1> 

  
Les spores ont des formes qui vont de la forme elliptique à la

  
 <EMI ID=108.1> 

  
Les chaînes de spore ont d'une manière générale 10 ou plus de 10 spores par chaîne. 

  
 <EMI ID=109.1> 

  

 <EMI ID=110.1> 


  
(III) Propriétés physiologiques

  
Gamme de températures pour la 20-40[deg.]C sur un milieu de levurecroissance: malt-agar 

  
Liquéfaction de la gélatine: lente sur une culture à 20[deg.]C au 

  
cours d'une période ne dépassant pas 21 jours 

  
Hydrolyse de l'amidon positive (forte à 28[deg.]C)

  
 <EMI ID=111.1> 

  
Peptonisation du lait écrémé: positive (à 28[deg.]C et 37[deg.]C) Formation de mélanine négative

  
(IV) Schéma d'utilisation des sources de carbone (sur un milieu

  
d'aoar de Pridham-Gottlièb à 28[deg.]C) 
 <EMI ID=112.1> 
 En résumant les propriétés mentionnées ci-dessus , la souche SF-1739 appartient au genre Streptomyces , est en spirale au sommet de mycélium aérien et présente une surface de spores couverte d'aspérités. La croissance sur divers milieux va d'une couleur grise à une couleur brun-jaune grisâtre et le mycélium aérien est de couleur grise , Il n'y a pas de formation de mélanine et on ne voit pas de pigments solubles.

  
Les propriétés de la souche SF-1739 sont très similaires à celles du Streptomyces griseoplanus parmi les espèces du genre Streptcmyces . D'une manière plus spécifique , ils correspondent tous les deux parfaitement en ce qui concerne la formation en spi-

  
 <EMI ID=113.1> 

  
gris et l'absence de mélanine . Une comparaison de la souche

  
 <EMI ID=114.1> 

  
(International Streptomyces Project ) [cf. International Journal

  
 <EMI ID=115.1> 

  
souche donnée dans ISP est différente de la souche SF-1739 par le fait quelle présente une faible croissance sur un milieu d'amidon et d'agar , qu'elle utilise le raffinose et qu'elle n'utilise pas

  
 <EMI ID=116.1> 

  
étant par contre très similaires en ce qui concerne la surface des spores., cette surface étant couverte d'aspérités et plus ou moins épinifêre.

  
 <EMI ID=117.1> 

  
souche SF-1739 appartient à l'espèce Streptomyces griseoplanus . puisque les propriétés morphologiques correspondent parfaitement et que d'autres propriétés principales sont également communes. Mais la souche SF-1739 est différente de la souche donnée dans ISP pour ce qui est du schéma d'utilisation des sources de carbone et pour d'autres propriétés . Par conséquent, la souche SF-1739 a été nommée souche SF-1739 de Streptomyces griseoplanus . 

  
 <EMI ID=118.1> 

  
diverses propriétés de tous les micro-organismes appartenant au  genre Streptomyces ne sont pas définies , et que les micro-organismes du genre Streptomyces peuvent se transformer aisément naturellement et artificiellement. Par conséquent , on notera que toutes les souches qui sont capables de produire les métabolites jaunes antibiotiques de départ et qui appartiennent au genre Streptomyces. y compris les variantes et les mutants, entrent dans le cadre de la présente invention.

  
La culture peut être réalisée d'une manière satisfaisanté en suivant le même processus que celui que l'on utilise ordinairement pour cultiver n'importe quelle souche du genre Streptomyces. On peut utiliser comme composants du milieu , l'une quel-

  
 <EMI ID=119.1> 

  
Streptomyces. On peut utiliser , par exemple , comme source de carbone , du glucose , du sucrose, de l'amidon , du glycérol , du sirop de mais , de la mélasse , de l'huile de soja, etc. On peut ajouter au milieu , si cela s'avère nécessaire , des sels . minéraux tels que du carbonate de calcium , du chlorure de sodium, du chlorure de potassium, des phosphates , etc. De même , on peut ajouter une petite quantité d'une substance quelconque qui peut favoriser la croissance de la souche et accélérer la production des métabolites jaunes antibiotiques.

  
La culture peut être effectuée suivant une technique de culture liquide, telle, qu'on l'applique ordinairement dans la production des substances antibiotiques connues , et de préférence 

  
 <EMI ID=120.1> 

  
de l'ordre de 25[deg.] à 35[deg.]C, et d'une manière plus préférée aux alentours de 28[deg.]C. La production maximum peut être ordinairement atteir. te après une période de 2 à 6 jours. 

  
 <EMI ID=121.1> 

  
Les métabolites jaunes ainsi accumulés dans un bouillon cultivé sont des substances à moitié solubles dans l'eau, basiques,qui sont extrêmement instables et qui n'ont pas encore été isolées et identifiées d'une manière satisfaisante .

  
En ce qui concerne l'utilisation des métabolites susmentionnés en vue du traitement avec un acide afin d'obtenir les  substances SF-1739 HP-3 et SF-1739 HP-5, on peut traiter le bouil- ! 

  
 <EMI ID=122.1> 

  
Ou bien , et d'une manière plus appropriée , on peut concentrer  les métabolites et les soumettre ensuite au traitement à l'acide.

  
Pour ce qui est de la concentration des métabolites , on peut utiliser l'une quelconque des techniques bien connues que l'on utilise ordinairement pour la récupération d'un produit naturel à moitié soluble dans l'eau , basique . Par exemple , le bouillon cultivé peut être filtré , le filtrat peut être rendu basique , saturé avec du chlorure de sodium , du sulfate d'ammonium, etc , et ensuite extrait avec un solvant organique non miscible dans l'eau, par exemple du n-butanol, de l'acétate d'éthyle , de l'acétate de butyle , de l'éther , etc. De même , le filtrat peut être adsorbé sur une résine échangeuse de cations , telle qu'une résine Amberlite IRC-50 , CG-50, IR-120 ou Dowex 50W, et l'on peut ensuite réaliser l'élution avec un acide tel que de l'acide chlorhydrique ou de l'acide sulfurique , pour obtenir les métabolites à l'état concentré.

  
Afin d'obtenir les métabolites désirés dans un état plus pur , on peut utiliser une combinaison quelconque des techniques d'extraction susmentionnées , ou bien on peut effectuer une adsorption avec une résine , par exemple une résine XAD-2, une désorption, une purification au moyen d'une chromatographie sir colonne avec du Séphadex G - 10 , la carboxyméthylcellulose ,etc,

  
et/ou un grattage avec une plaque de gel de silice en couche min- 

  
! ce, etc. 

  
Finalement , les métabolites ainsi concentrés et fractionnés peuvent être utilisés en vue du traitement à l'acide pour

  
 <EMI ID=123.1> 

  
Les activités biologiques des dérivés de la substance SF-1739 de la présente invention sont indiquées ci-après.

  
I. Activité antimicrobienne

  
Le Tableau 1 montre la concentration inhibitrice minimale des cinq dérivés de la substance SF-1739 de la présente inven-

  
tion. Tableau 1

  
Activité antimicrobienne des dérivés de la substance SF-1739

  

 <EMI ID=124.1> 


  
II. Activité antitumorale

  
 <EMI ID=125.1> 

  
minimale des cinq dérivés de la substance SF-1739 de la présente invention. 

  
 <EMI ID=126.1> 

  

 <EMI ID=127.1> 


  
 <EMI ID=128.1> 

  
B: Effet carcinostatique in vivo chez la souris

  
r

  
 <EMI ID=129.1> 

  
5 semaines , pesant 19 1 g, chaque groupe étant constitué de

  
3 à 5 animaux) sont inoculées par la voie intrapéritonéale avec

  
 <EMI ID=130.1> 

  
souris. On dissout chaque substance d'essai dans de l'eau à la dose indiquée et on l'administre par la voie intrapéritonéale à raison de 2 à 0,2 ml/jour/souris, pendant 3 jours successifs 24 heures après l'inoculation. Ensuite, on calcule l'augmentation de la durée d'existence . Les résultats sont résumés au Tableau 3. 

  
 <EMI ID=131.1> 

  

 <EMI ID=132.1> 


  
III. Toxicité aiguë

  
 <EMI ID=133.1> 

  
dérivés de la substance SF-1739 de la présente invention lorsqu' ils sont administrés par la voie intraveineuse à des souris. 

  
 <EMI ID=134.1> 

  
Tableau 4 

  

 <EMI ID=135.1> 


  
En ce qui concerne l'application des dérivés de la substance SF-1739 de la présente invention au traitement de divers types de tumeurs , ils peuvent être administrés par la voie orale ou parentérale sous la forme d'une préparation ordinairement mélangée avec un support ou excipient acceptable du point de vue pharmaceutique liquide ou solide ordinaire . La préparation solide pour administration orale peut être constituée par une capsule , un comprimé, ces granulés . des pastilles , etc, et la préparation applicable par la voie tiopique peut être constituée par &#65533;n suppositoire , une pommade, etc. La préparation liquide peut être une solution , une suspension, un sirop, etc, et être appliquée par la voie orale , topique ou par injection.

   Ces préparations peuvent être aisément obtenues avec des matières ordinaires par des techniques appropriées quelconques bien connues des spécialistes de la technique. La quantité de l'ingrédient actif dans la préparation ou la composition ainsi que le choix de la forme de préparation à adopter peuvent ordinairement dépendre du type et de la gravité de la maladie; à traiter, de la voie d'administration , du poids corporel et de l'age du patient , ainsi que de l'ac-

  
 <EMI ID=136.1> 

  
Dans le cas d'une préparation injectable, il est sou-   <EMI ID=137.1> 

  
intramusculaire ou , de préférence , par la voie intraveineuse ou

  
 <EMI ID=138.1> 

  
 <EMI ID=139.1> 

  
ou tous les trois jours. Il peut parfois 5'avérer efficace suivant  le type de la tumeur d'injecter directement la préparation à la tu-  meur elle-même. 

  
 <EMI ID=140.1> 

  
il est souhaitable pour les adultes d'administrer la préparation

  
sous la forme d'une seule dose journalière de 1 à 500 mg tous les jours ou tous les deux jours.

  
Dans le cas d'une application par la voie topique ,  l'ingrédient actif peut être appliqué directement à la partie atta-  quée ou malade sous la forme d'un mélange avec une base appropriée de manière à ce qu'il contienne de 1 à 20 % de l'ingrédient actif.

  
Il peut également s'avérer intéressant d'utiliser un

  
ou plusieurs des dérivés actifs de la présente invention soit seuls ou en combinaison avec d'autres agents antitumoraux et/ou un immunoaccélérateurs connus .

  
Dans le cas où le dérivé de la substance SF-1739 est  à utiliser comme agent antimicrobien , en particulier comme agent  antibactérien , il peut être également administré par la voie orale ou parentérale sous la forme d'une préparation solide ou liquide ordinairement utilisée dans la technique pour d'autres agents antibactériensou antibiotiques connus . On peut par exemple utiliser comme  préparation pour l'administration par la voie orale, une capsule ,

  
un comprimé , une poudre ,des granulés, une solution, une suspension ou un sirop . Pour une application topique , on peut mentionner , 

  
par exemple , un suppositoire , une pommade , etc. On peut utiliser comme préparation pour une administration par la voie parentérale ,  une solution en suspension injectable et la préparation peut être  administrée par la voie sous-cutanée , intramusculaire ou intravei- <EMI ID=141.1> 

  
le type et la gravité de la maladie , le poids corporel et l'age du patient , l'activité et la toxicité des dérivés de la substance SF-1739 et d'après d'autres facteurs , mais le dérivé actif peut 

  
 <EMI ID=142.1> 

  
pour l'administration par la voie orale en une seule dose ou sous forme de doses divisées , ou bien en une seule dose de 1 à 100 mg pour la voie parentérale , par exemple une administration intramusculaire ou intraveineuse. Des doses supérieures ou inférieures peuvent être choisies et utilisées par le médecin tout en faisant

  
 <EMI ID=143.1> 

  
physique du patient et à tout autre effet défavorable.

  
Les dérivés de la substance SF-1739 de la présente invention peuvent être administrés soit seuls soit sous la forme d'un mélange , ou bien en combinaison avec n'importe quel autre agent antimicrobien connu, comme par exemple n'importe quel antibiotique , etc.

  
Les Exemples suivants sont donnés dans le but d'illustrer plus en détail la présente invention.

Exemple 1 !

  
Préparation de la substance SF-1739 HP

  
On laisse une solution de 6 mg de chlorhydrate de SF-
1739 dans 3 ml d'acide chlorhydrique 5 N à la température ambiante pendant une semaine. On neutralise ensuite la solution avec du bicarbonate de sodium solide et on concentre la solution neutralisée à sec sous pression réduite. On dissout le résidu dans une petite quantité de méthanol , on sépare par filtration les: produits insolubles et on concentre le filtrat. On place la résidu sur une plaque de chromatographie sur couche mince préparatoire avec gel de silice (2 x 100 x 100 mm, délivrée par E.Merck , République Fédérale d'Allemagne ) , que l'on développe ensuite avec un solvant mix-

  
 <EMI ID=144.1>  pourpre avec un Rf de 0,45 est découpée à partir de la plaque et extraite avec du méthanol . On concentre à sec l'extrait. On redissout le résidu dans un solvant mixte formé de méthanol et d'acétone (2/1) et on sépare par filtration les produits insolubles . On concentre le filtrat à sec et l'on obtient 3,3 mg de la substance SF-1739 HP.

Exemple 2

  
Préparation de la substance SF-1739 HP-C

  
On ajoute 144 mg de cyanure de sodium à une solution

  
 <EMI ID=145.1> 

  
laisse le mélange résultant à la température ambiante pendant 30 minutes . Ensuite, on la concentre à sec sous pression réduite à une température inférieure à 35[deg.]C avec addition de n-butanol. On dissout le résidu dans une petite quantité de méthanol , on sépare par filtration les matières insolubles et on concentre le filtrat. On place le résidu sur une plaque de chromatographie sur couche mince préparatoire avec gel de silice (2 x 100 x 100 mm , délivré par E.Merck, République Fédérale d'Allemagne ), et on développe ensuite avec un solvant mixte formé d'acétate d'éthyle et de méthanol (3/2) . 

  
 <EMI ID=146.1> 

  
tage et extraite avec du méthanol. On concentre l'extrait à sec et  on redissout le résidu dans un solvant mixte formé de méthanol et d'acétone (2/1) , on sépare par filtration les produits insolubles, on concentre ensuite le filtrat à sec et on obtient 35 mg de la

  
 <EMI ID=147.1> 

Exemple 3

  
Préparation de la substance SF-1739 HP-F

  
On laisse à la température ambiante pendant 5 minutes une solution formée de 35 mg de la substance SF-1730 HP dans 1,5 ml de formamide. On concentre ensuite à sec le mélange de réaction sous pression réduite à une température inférieure à 50[deg.]C. On dissout le résidu dans une petite quantité de méthanol et on place la solution  <EMI ID=148.1> 

  
 <EMI ID=149.1> 

  
 <EMI ID=150.1> 

  
République Fédérale d'Allemagne ), que l'on développe ensuite avec  un solvant mixte formé d'acétate d'éthyle et de méthanol (3/2). On  sépare par grattage une bande de couleur pourpre avec un Rf de  0,53 et on l'extrait avec du méthanol. On concentre l'extrait à sec, on redissout le résidu dans un solvant mixte formé de méthanol et d'acétone (2/1) , on sépare par filtration les matières insolubles  on concentre ensuite le filtrat à sec et l'on obtient 25 mg de la substance SF-1739 HP-F.

Exemple 4

  
Préparation de la substance SF-1739 HP-C

  
On ajoute 72 mg de cyanure de potassium à une solution de 73 g de la substance SF-1739 HP dans 2 ml de méthanol et on agite le mélange résultant à la température ambiante pendant 5 minutes .On  place le mélange de réaction sur une plaque de chromatographie sur  couche préparatoire- avec gel de silice (2 x 100 x 100 mm, délivré 

  
par E.Merck , République Fédérale d'Allemagne ), que l'on développe  ensuite avec un solvant mixte formé d'acétate d'éthyle et de métha-  nol (3/2). Une bande de couleur pourpre avec un Rf de 0,70 est sépa-  rée par grattage et extraite avec du méthanol. On concentre l'extrait à sec , on redissout le résidu dans un solvant mixte formé de métha-  nol et d'acétone (2/1) , on sépare par filtration les matières insolubles , ensuite on concentre à sec le filtrat et l'on obtient 50 mg de la substance SF-1739 HP-C . 

Exemple 5 

  
Préparation des substances SF-1739 HP-3, SF-1739 HP-5 et SF-1739 HP 

  
Des spores de la souche SF-1739 de Streptomyces griseoplanus (numéro d'accès 3002.déposée auprès du Technical Research  Institute of Microbial Industry) sont inoculées sur 1,6 litres d'un  milieu liquide contenant 1,0% d'amidon et 3,0% de farine de soja 

  
(pH de 7,0 ) , l'agitation de la culture étant effectuée à une température de 28[deg.]C pendant 30 heures en utilisant 16 flacons de Sakaguchi -de manière à obtenir une culture d.'ensemencement 

  
La culture d'ensemencement ainsi obtenue est inoculée

  
 <EMI ID=151.1> 

  
 <EMI ID=152.1> 

  
et 0,3% d&#65533;hlorure de sodium (pH de 6,6) , l'agitation de la culture étant effectuée avec aération à une température de 28[deg.]C pendant 90

  
 <EMI ID=153.1> 

  
teurs ayant un volume de 50 litres.

  
 <EMI ID=154.1> 

  
l'acide chlorhydrique 6 N et est filtré avec un acide de filtration, du Hyflo Super Cel . Le filtrat (environ 47 litres) est ajusté à

  
un pH de 6 avec de l'hydroxyde de sodium 3 N et est amené dans une colonne d'environ 4 litres d'une résine échangeuse d'ions , à savoir

  
 <EMI ID=155.1> 

  
antibiotiques . La colonne est lavée à fond avec de l'eau et est éluée avec de l'acide chlorhydrique aqueux 0,2 N. Une fraction active d'environ 4,5 litres est saturée avec du chlorure de sodium, ajustée au pH 8,0 avec de l'hydroxyde de sodium et est ensuite extraite deux fois avec chaque fois une portion d'un litre d'acétate d'éthyle tout en refroidissant . L'extrait à l'acétate d'éthyle est réextrait avec 200 ml d'acide chlorhydrique aqueux 0,05 N . La solution aqueuse résultante (pH de 2,0) est concentrée à sec sous pression réduite et l'on obtient 1,68 g de métabolites antibiotiques sous la forme d'une poudre brute. On dissout la poudre brute dans 20 ml d'acide chlorhydrique 5 N , on la laisse à la température ambiante pendant une semaine et on la concentre ensuite à nouveau à sec sous pression réduite.

   On dissout le résidu dans 20 ml de méthanol et on neutralise la solution rouge jaunâtre résultante avec du. bicarbonate de sodium jusqu'a ce qu'elle devienne pourpre. On sépa-

  
 <EMI ID=156.1> 

  
et on place ensuite le résidu sur des plaques de chromatographie en couche mince préparatoire avec gel de silice (2 x 100 x 100 mm,  <EMI ID=157.1> 

  
développe avec un solvant mixte formé d'acétate d'éthyle et de méthanol (3/2). Une bande de couleur pourpre avec un Rf de 0,12 est séparée par grattage de chaque plaque et est extraite avec du méthanol. On concentre l'extrait combiné à sec et l'on obtient la substance SF-1739 HP-5 sous la forme d'une poudre grossière. On dissout la poudre grossière dans une petite quantité de méthanol et on la place sur trois plaques de chromatographie en couche mince préparatoire avec gel de silice , que l'on développe ensuite avec un solvant mixte formé de chloroforme et de méthanol (9/1). Les bandes de couleur  pourpre avec un Rf de 0,12 sont séparées par grattage, extraites avec du méthanol et l'extrait est concentré à sec .

   On dissout le résidu dans un solvant mixte formé de méthanol et d'acétone (3/1) , on sépare par filtration les matières insolubles , on concentre le filtrat à sec et l'on obtient 153 mg de la substance SF-1739 HP-5. On sépare par grattage les bandes pourpres avec un Rf de 0,39 des premières plaques de chromatographie en couche mince avec gel de silice et on les extrait avec du méthanol. On concentre l'extrait

  
à sec, on dissout le résidu dans une petite quantité de méthanol et on le place sur une plaque de chromatographie en couche mince préparatoire avec gel de silice (2 x 100 x 100 mm, délivré par E.Merek, République Fédérale d'Allemagne ), que l'on développe ensuite avec un solvant mixte formé de chloroforme et de méthanol (9/1). On sépare une bande de couleur pourpre avec un Rf de 0,22 par grattage

  
et on l'extrait avec du méthanol. On concentre l'extrait à sec, on dissout le résidu dans un solvant mixte formé de méthanol et d'acétone (2/1) , on sépare par filtration les matières insolubles , on concentre ensuite le filtrat à sec et on obtient 27 mg de la substance SF-1739 HP-3.

  
On sépare par grattage les bandes pourpres présentant un Rf de 0,31 des premières plaques de chromatographie en couche mince avec gel de silice et on les extrait avec du méthanol. On con-

Claims

centre l'extrait à sec, on dissout le résidu dans une petite quantité de méthanol et on le place sur deux plaques de chromatographie

en couche mince préparatoire: avec gel de silice (2 x 100 x 100 mm, délivrées par E.Merck , République Fédérale d'Allemagne ) , que l'on développe ensuite dans un solvant mixte formé de chloroforme et

de méthanol (9/1) . Les bandes de couleur pourpre avec un Rf de

0,26 sont séparées par grattage et extraites avec du méthanol. On

concentre l'extrait à sec , on dissout le résidu dans un solvant

mixte formé de méthanol et d'acétone (2/1) , on sépare les matières insolubles par filtration , on concentre ensuite le filtrat à sec

et on obtient 99 'mg de la substance SF-1739 HP.

REVENDICATIONS

l.La substance SH-1739 HP présentant les propriétés physico-chimiques suivantes:

(1) Une couleur pourpre noirâtre.

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que représenté par la figure 1.

(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que représenté à la figure 2, avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3350, 1655, 1600, 1540, 1355,

1265, 1235, 1180 , 1120, 1080, 1020, 1000, 965, <EMI ID=158.1>

(4) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel

que représenté à la figure 3 .

(5) Une courbe de dispersion rotatoire optique telle

que représentée à la figure 4

(6) Analyse élémentaire:

Trouvé: C: 62,19 % : H: 6,95 %;

N: 8,50 % , 0:22,36 %

(par différence)

(7) Solubilité:

aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétate d'éthyle et faiblement soluble dans l'hexane.

(8) Chromatographie :

Au moyen d'une chromatographie en couche mince sur gel de silice , on obtient des valeurs de Rf de 0,45 (chloroforme/méthanol = 9/1 ) ou de 0,23 ! (N-butanol/mêthanol/acide chlorhydrique 0,1 N = 4/2/1) .

2, La substance SF-1739 HP-C présentant les propriétés physico-chimiques suivantes:

(1) Une couleur pourpre noirâtre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que re-

<EMI ID=159.1>

(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que représenté à la figure 6, avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3350, 1660, 1600,1535,1355, 1265, 1235, 1200, 1175, 1140, 1120, 1080, 1060,

<EMI ID=160.1>

(4) Une courbe de dispersion rotatoire optique telle

que représentée à la figure 7.

(5) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel

que représenté à la figure 8,

(6) Analyse élémentaire :

<EMI ID=161.1>

N: 12,63 % ; 0; 21,65 %

<EMI ID=162.1>

(7) Solubilité:

Aisément: soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et faiblement soluble dans l'hexane.

(8) Chromatographie:

Au moyen d'une chromatographie en couche mince sur gel de silice , on trouve des valeurs de Rf

de 0,40 (chloroforme/méthanol = 9/1) et de 0,70 <EMI ID=163.1>

tés physico-chimiques suivantes:

(1) Une couleur pourpre noiratre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que représenté à la figure 9.

(3) Un spectre d'absorption irfrarouge tel que représenté à la figure 10, avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3300, 1660, 1530,1350. 1310, 1265, 1235, 1205, 1175, 1125, 1085, 1025, 1000,

<EMI ID=164.1>

(4) Analyse élémentaire :

Trouvé : C: 57,26% ; H: 6,33 %,

N: 12,14% 0:24,27 %

(par différence)

(5) Solubilité:

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et fai-

<EMI ID=165.1>

(6) Chromatographie:

Au moyen d'une chromatographie en- couche mince, sur gel de silice , on trouve des valeurs de Rf de 0,28 (chloroforme/méthanol = 9/1) et de 0,53 (acétate d'éthyle/méthanol = 3/2) .

.4. La substance SF-1739 HP-5 représentant les propriétés physico-chimiques suivantes :

(1) Une couleur pourpre noirâtre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que repré-

<EMI ID=166.1>

<EMI ID=167.1>

senté à la figure 12, avec des bandes d'absorp- tion caractéristiques à 3300, 1655, 1600, 1540, <EMI ID=168.1>

<EMI ID=169.1>

(4) Spectre de résonance magnétique nucléaire tel que représenté à la figure 13.

(5) Analyse élémentaire:

Trouvé : C: 60,93 %: H: 7,05 %:

N: 8,41 %; 0: 23,61'%

(par différence)

(6) Solubilité :

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétate d'éthyle et l'acétone et faiblement soluble dans l'hexane.

<EMI ID=170.1>

Au moyen d'une chromatographie en couche mince sur gel de silice , on trouve des valeurs de Rf de 0,12 (chloroforme/méthanol = 9/1) et de 0,12 (acétate d'éthyle/méthanol = 3/2).

5.. La substance SF-1739 HP-3 présentant les propriétés physico-chimiques suivantes:

(1) Une couleur pourpre noirâtre .

(2) Un spectre d'qbsorption ultraviolet tel que représenté

à la figure 14.

(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que représenté

à la figure 15, avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3355, 1680, 1655, 1600, 1545, 1350, 1310, 1265, 1180, 1155, 1085, 1070, 1055, 1020, 950, 955,

<EMI ID=171.1>

(4) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel que

représenté à la figure 16.

(5) Analyse élémentaire:

Trouvé : C: 64,13 % : H: 5,01 %;

N: 9,25 %. : 0: 21,61 %

(par différence) <EMI ID=172.1>

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol , soluble dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et faiblement so- luble dans l'hexane.

(7) Chromatographie :

Au moyen d'une chromatographie en. couche mince sur gel de silice , on trouve des valeurs de Rf de 0,22 (chloroforme/méthanol = 9/1 ) et de 0,39 (acétate d'éthyle/ méthanol = 3/2) .

6. Procédé de préparation de la substance SF-1739 HP pré-

<EMI ID=173.1>

(1) Une couleur pourpre noirâtre.

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que représenté à la figure 1.

(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que représenté

à la figure 2, avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3350, 1655, 1600, 1540, 1355, 1265, 1235,1180, 1120, 1080, 1020, 1000, 965, 945, 920, 910, 865, 830,

<EMI ID=174.1>

(4) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel que

représenté à la figure 3.

(5) Une courbe de dispersion rotatoire optique tel que représentée à la figure 4.

<EMI ID=175.1>

Trouvé : C: 62,19 % ; H: 6,95 %;

N: 8, 50 % ; 0: 22,36 %

(par différence)

(7) Solubilité :

Aisément- soluble dans l'eau et le méthanol , soluble dans l'acétate d'éthyle et faiblement soluble dans l'hexane. <EMI ID=176.1>

Au moyen d'une.chromatographie en. couche mince sur

<EMI ID=177.1>

<EMI ID=178.1>

thariol/acide chlorhydrique 0,1 N = 4/2/1),

ce procédé étant caractérisé en ce qu'il consiste à sou- mettre la substance SF-1739 à un traitement avec un aci- de.

7. Procédé de préparation de la substance SF-1739 HP-C présentant les propriétés physico-chimiques suivantes:

(1) Couleur pourpre noirâtre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que représenté

à la figure 5.

(3).Un spectre d'absorption infrarouge tel que représenté

à la figure 6, avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3350, 1660, 1600, 1535, 1335, 1265, 1235,1200, 1175, 1140, 1120, 1080, 1060, 1000, 940, 910, 880, 835

<EMI ID=179.1>

(4) Une courbe de dispersion rotatoire optique telle que

représentée à la figure 7.

(5) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel que

représenté à la figure 8.

(6) Analyse élémentaire :

<EMI ID=180.1>

N: 12,63 %; 0: 21,65 %

(par différence)

(7) Solubilité:

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et faiblement soluble dans l'hexane.

(8) Chromatographie :

Au moyen d'une chromatographie en couche mince sur.;. <EMI ID=181.1>

(chloroforme/méthanol - 9/1) et de 0,70 (acétate d'éthyle/méthanol = 3/2) ,

ce procédé étant caractérisé en qu'il consiste à sou- mettre la substance SF-1739 à un traitement avec un acide de ma- nière à obtenir la substance SF-1739 HP , et à faire réagir cette dernière avec un cyanure.

<EMI ID=182.1>

sentant les propriétés physico-chimiques suivantes :

(1) Une couleur pourpre noiretre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que représen-

té à la figure 9.

(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que représen-

<EMI ID=183.1>

ractéristiques à 3300, 1660, 1530, 1350, 1310, 1265,

<EMI ID=184.1>

<EMI ID=185.1>

(4) Analyse élémentaire:

Trouvé : C: 57,26%; H; 6,33 %;

N: 12,14%; 0: 24,27 %

(par différence)

(5) Solubilité:

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et faiblement soluble dans l'hexane.

(6) Chromatographie:

Au moyen d'une chromatographie sur couche mince et

<EMI ID=186.1>

de 0,28 (chloroforme/méthanol = 9/1 ) et de 0,53 (acétate d'éthyle/méthanol; 3/2) , ce procédé étant caractérisé en ce qu'il consiste à soumettre la substance SF-1739 à un traitement avec un acide de manière à ob-r avec

<EMI ID=187.1>

9. Procédé de préparation de la substance SF-1739 HP-5 présentant les propriétés physico-chimiques suivantes:

(1) Une couleur pourpre noirâtre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que repré-

<EMI ID=188.1>

<EMI ID=189.1>

senté à la figure 12, avec des bandes d'absorption

catactéristiques à 3300, 1635, 1600, 1540, 1350, 1260, 1235, 1175, 1085, 1025, 1000, 905, 865, 835, <EMI ID=190.1>

(4) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel

que représenté à la figure 13 .

(5) Analyse élémentaire :

<EMI ID=191.1>

N: -8,41 %; 0: 23,61 %

(par différence)

(6) Solubilité:

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétate d'éthyle et l'acétone et faiblement soluble dans l'hexane.

(7) Chromatographie:

Au moyen d'une chromatographie en couche mince sur. gel de silice , on obtient des valeurs de Rf de 0,12 (chloroforme/méthanol = 9/1 ) et de 0,12 (acétate d'éthyle/méthanol = 3/2) ,

ce procédé étant caractérisé en ce qu'il consiste à soumettre un métabolite antibiotique à un traitement avec un acide, le métabolite étant obtenu en cultivant une souche SF-1739 de Streptomyces griseoplanus et en fractionnant ensuite le touiller; cultivé. <EMI ID=192.1>

présentant les propriétés physico-chimiques suivantes:

<EMI ID=193.1>

(2).Un spectre d'absorption ultraviolet tel que représenté à la figure 14.

(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que représenté à la figure 15, avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3355, 1680, 1655, 1600, 1545, 1350, 1310, 1265, 1180, 1155, 1085, 1070, 1055, 1020

<EMI ID=194.1>

(4) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel

que représenté à la figure 16.

(5) Analyse élémentaire :

Trouvé : C : 64,13 % ; H: 5,01 % ;

N: 9,25 % : 0: 21,61 %

(par différence)

(6) Solubilité :

<EMI ID=195.1>

ble dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et faiblement soluble dans l'hexane.

(7) Chromatographie:

Au moyen d'une chromatographie en couche mince sur gel de silice , on obtient des valeurs de Rf de 0,22 (chloroforme/méthanol = 9/1) et de 0,39 (acétate d'éthyle/méthanol = 3/2 ) , .

ce procédé étant caractérisé en ce qu'il consiste à soumettre un

..métabolite antibiotique à un traitement avec un acide, le métabolite étant obtenu en cultivant une souche SF-1739 de Streptomyces griseoplanus et en fractionnant ensuite le bouillon cultivé 11. Composition antibactérienne , caractérisée en ce qu'elle comprend comme ingrédient actif une ou plusieurs des substances antibiotiques choisies dans le groupe formé par la substance SF-

<EMI ID=196.1> <EMI ID=197.1>

qu'un support acceptable du point de vue pharmaceutique ,

la substance SF-1739 HP présentant les propriétés physico-chimiques suivantes:

(1) Une couleur pourpre noirâtre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que représenté à la figure 1.

(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que représen-

<EMI ID=198.1>

téristiques à 3350, 1655, 1600, 1540, 1355, 1265,

1235, 1180, 1120, 1080, 1020, 1000, 965, 945,920,

<EMI ID=199.1>

(4) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel

que représenté à la figure 3 .

(5) Une courbe de dispersion rotatoire optique telle

que représentée à la figure 4.

(6) Analyse élémentaire:

Trouvé : C: 62,19 %; H: 6,95 %;

N: 8,50 %: 0: 22,36 %

(par différence)

(7) Solubilité:

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétate d'éthyle et faiblement soluble dans l'hexane.

(8) Chromatographie :

Au moyen d'une chromatographie en. couche mince sur gel de silice , on obtient des valeurs de Rf de 0,45 (chloroforme/méthanol = 9/1 ) et de 0,23

<EMI ID=200.1>

<EMI ID=201.1>

la substance SF-1739 HP-C présentant les propriétés physico-chimiques suivantes: <EMI ID=202.1>

senté à la figure 5.

(3) Un spectre, d'absorption infrarouge tel que représenté à la figure 6, avec des bandes d'absorption catactéristiques à 3350, 1660, 1600, 1535,, 1355, 1265, 1235, 1200, 1175, 1140, 1120, 1080, 1060,

<EMI ID=203.1>

(4) Une courbe de dispersion rotatoire optique telle

que représentée à la figure 7.

(5) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel-

que représenté à la figure 8.

(6) Analyse élémentaire :

Trouvé: C: 59,58 %: H: 6,14 %:

i N: 12,63 %: 0: 21,65 %

(par différence)

(7) Solubilité:

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et fai- blement soluble dans l'hexane.

(8) Chromatographie :

Au moyen d'une chromatographie on couche mince sur . gel de silice , on obtient des valeurs de Rf de 0,40 (chloroforme/méthanol = 9/1) et de

<EMI ID=204.1>

la substance BF-1739 HP-F présentant les propriétés physico-chi- miques suivantes:

(1) Une couleur pourpre noirâtre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que représenté à la figure 9.

.(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que repré- senté à la figure 10, avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3300, 1660, 1530, 1350, 1310, 1265. 1235, 1205. 1175, 1125, 1085, 1025, 1000, 940,

<EMI ID=205.1>

(4) Analyse élémentaire:

Trouvé : C: 57,26 %; H: 6,33 %

N: 12,14 %,- 0: 24,27 %

(par différence)

(5) Solubilité:

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et faiblement soluble dans l'hexane.

(6) Chromatographie :

Au moyen d'une chromatographie en couche mince sur gel de silice , on obtient des valeurs de Rf de 0,28 (chloroforme/méthanol =9/1 ) et de 0,53 (acétate d'éthyle/méthanol = 3/2 ) ;

la substance SF-1739 HP-5 .présentant les propriétés physicochimiques suivantes :

(1) Une couleur pourpre noirâtre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que représenté à la figure 11.

(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que représenté

à la figure 12 , avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3300, 1655, 1600, 1540, 1350, 1260, 1235,

<EMI ID=206.1>

(4) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel que

représenté à la figure 13.

(5) Analyse élémentaire :

Trouvé: C: 60, S3 %; H: 7,05 %;

N: 8,41 %; 0: 23,61 %

(par différence)

(6) Solubilité:

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble <EMI ID=207.1>

ble dans l'hexane .

(7) Chromatographie:

Au moyen d'une chromatographie en couche mince sur gel de silice , on obtient des valeurs de Rf de 0,12 (chloro-

<EMI ID=208.1>

nol = 3/2 ) ; et

la substance SF-1739 HP-3 présentant les propriétés physico-chimiques suivantes :

(1) Une couleur pourpre noirâtre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que représenté à la

figure 14 .

(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que représenté à la

figure 15 , avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3355, 1680, 1655, 1600, 1545, 1350, 1310, 1265, 1180. 1155,

<EMI ID=209.1>

(4) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel que représenté à la figure 16.

(5) Analyse élémentaire :

Trouvé : C: 64,13 %; H: 5,01 %

N: 9,25 %; 0: 21,61 %

(par différence)

(6) Solubilité:

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et faiblement soluble dans l'hexane .

(7) Chromatographie:

Au moyen d'une chromatographie en couche mince sur gel

de silice , on obtient des valeurs de Rf de 0,22 (chloroforme/méthanol = 9/1 ) et de 0,39 (acétate d'éthyle/méthanol = 3/2) . .12. Composition antitumorale, , caractérisée en ce qu'elle comprend comme ingrédient actif une ou plusieurs des substances choisies dans le groupe formé par la substance SF-1739 HP, la substance SF-1739 HP-C, la substance SF-1739 HP-F, la substance SF-1739 HP-5 et la substance SF-1739 HP-3 , ainsi qu'un support acceptable du point de vue pharmaceutique , la substance SF-1739 HP présentant les propriétés physico-chimiques suivantes:

(1) Une couleur pourpre noirâtre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que représenté à la figure 1.

(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que représenté à la figure 2, avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3350, 1655, 1600, 1540, 1355, 1265, 1235, 1180, 1120, 1080, 1020, 1000, 965, 945,

<EMI ID=210.1>

(4) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel

que représenté à la figure 3.

(5) Une courbe de dispersion rotatoire optique telle que

représentée à la figure 4.

(6) Analyse élémentaire :

<EMI ID=211.1>

N: 8,50 % ; 0: 22,36 %

(par différence)

(7) Solubilité :

Elément soluble dans l'eau et le méthanol , soluble dans l'acétate d'éthyle et faiblement soluble dans l'hexane.

(8) Chromatographie:

Au moyen d'une chromatographie en couche mince sur gel de silice , on trouve des valeurs de Rf de 0,45 (chloroforme/méthanol = 9/1 ) et de 0,23 (nbutanol/méthanol/acide chlorhydrique 0,1 N = 4/2/1) <EMI ID=212.1>

ques suivantes:

<EMI ID=213.1>

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que repré-

té à la figure 5 .

(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que représenté à la figure 6, avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3350, 1660, 1600, 1535, 1355 ,

<EMI ID=214.1>

<EMI ID=215.1>

(4) Une courbe de dispersion rotatoire optique telle

que représentée à la figure 7.

(5) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel

que représenté à la figure 8. ' .

(6) Analyse élémentaire :

Trouvé : C: 59,58 % ; H: 6,14 %;

N: 12,63 % 0: 21,65 %

(par différence)

(7) Solubilité:

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et fai- blement soluble dans l'hexane.

(8) Chromatographie:

Au moyen d'une chromatographie en. couche mince sur . gel de silice , on obtient des valeurs de Rf de 0,40 (chloroforme/méthanol = 9/1) et de 0,70 (acétate d'éthyle/méthanol = 3/2) :

la substance SF-1739 BP-F présentant les propriétés physico-chi- miques suivantes:

(1) Une couleur pourpre noirâtre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que re- <EMI ID=216.1>

ristiques à 3300, 1660, 1530, 1350, 1310, 1265, 1235,

<EMI ID=217.1>

<EMI ID=218.1>

(4) Analyse élémentaire :

Trouvé : C: 57,26% ; H: 6,33 %;

N: 12,14%: 0: 24,27 %

(par différence)

(5) Solubilité :

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et faiblement soluble dans l'hexane .

<EMI ID=219.1>

Au moyen d'une chromatographie en couche mince sur

<EMI ID=220.1>

(chloroforme/méthanol = 9/1 ) et de 0,53 (acétate d'éthyle/méthanol = 3/2) ;

la substance SF-1739 HP-5 présentant les propriétés physico-chimiques suivantes :

(1) Une couleur pourpre noirâtre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que représenté à la figure 11.

(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que représenté

à la figure 12, avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3300, 1655, 1600, 1540, 135'0, 1260, 1235.

<EMI ID=221.1>

(4) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel que

représenté à la figure 13.

(5) Analyse élémentaire ;

Trouvé : C: 60,93 %; H: 7.05 %:

N: 8,41 %; 0: 23.61 %

(par différence). <EMI ID=222.1>

<EMI ID=223.1>

ble dans l'acétate d'éthyle et l'acétone et faiblement soluble dans l'hexane.

(7) Chromatographie :

Au moyen d'une chromatographie en couche mince sur gel de silice , on obtient des valeurs de Rf de 0,12 chloroforme/méthanol = 9/1) et de 0,12 (acétate d'éthyle/méthanol =3/2) ;

et la substance SF-1739 HP-3 présentant les propriétés physicochimiques suivantes :

(1) Une couleur pourpre noirâtre .

(2) Un spectre d'absorption ultraviolet tel que représenté à la figure- 14.

(3) Un spectre d'absorption infrarouge tel que représenté à la figure 15, avec des bandes d'absorption caractéristiques à 3355, 1680, 1655, 1600, 1545, 1350, 1310,1265, 1180, 1155, 1085, 1070, 1055, 1020.

<EMI ID=224.1>

(4) Un spectre de résonance magnétique nucléaire tel

que représenté à la figure 16.

(5) Analyse élémentaire:

<EMI ID=225.1>

<EMI ID=226.1>

(par différence)

(6) Solubilité :

Aisément soluble dans l'eau et le méthanol, soluble dans l'acétone et l'acétate d'éthyle et faiblement soluble dans l'hexane .

(7) Chromatographie :

Au moyen d'une chromatographie en couche mince sur gel de silice , on obtient des valeurs de <EMI ID=227.1>

(acétate d'éthyle/méthanol = 3/2) ,

l'ingrédient actif étant contenu en une quantité suffisante pour réduire ou annhiJ.er les symptômes ou les signes d'un patient souffrant d'un cancer.

13. Les dérivés de la substance SF-1739 , leur procédé de

I

préparation et les compositions antibactériennes et antitumorales contenant ces dérivés , tels que décrits ci-dessus, notamment dans les Exemples donnés.