AT403655B - Verwendung von aus gramnegativen bakterien gewonnenen glycoproteinen in einem verfahren zur herstellung von kosmetischen oder dermatologischen, den haarwuchs fördernden zusammensetzungen, sowie solche zusammensetzungen - Google Patents
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Description
AT 403 655 B
Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung von aus gramnegativen Bakterien gewonnenen Glycoproteinen in einem Verfahren zur Herstellung von kosmetischen oder dermatologischen Zusammensetzungen.
Aus der FR-PS 2 609 393 sind dermatologische und/oder kosmetische Zusammensetzungen auf Basis verschiedener stickstoffhaltiger Substanzen bekanntgeworden, wobei in einer Aufzählung einer großen Zahl von in Frage kommenden Substanzen auch Glycoproteine genannt sind. Die Herkunft dieser Glycoproteine ist allerdings nicht angeführt. Wenn aus gramnegativen Bakterien stammende Substanzen eingesetzt werden, dann wird ein Undefinierter Mikroorganismenextrakt verwendet.
In der FR-PS 2 043 475 und den Zusätzen 2 088 112 und 2 171 907 wurden Glycoproteine beschrieben, die aus mikrobiellen Zellorganellen lysierter gramnegativer Bakterien gewonnen werden, sowie der Herstellungsprozeß und die Anwendung dieser Glycoproteine als Arzneimittel.
Aus der GB-PS 2 157 566 sind Glycoprotein-Extrakte von lysierten Hafnia-Stämmen bekanntgeworden, welche für die Behandlung von Entzündungen, Rötungen oder Läsionen der Haut geeignet sind.
Die GB-PS 2 167 958 hat kosmetische Zusammensetzungen zum Gegenstand, welche eine Kombination von sauren Mucopolysacchariden, ein Bakterien-Zellproteolysat von Bacillaceae, niedermolekulare Peptide des Kalbserums und ebensolche Peptide von embryonaler Haut zusammen mit tierisehem Plazenta-Extrakt enthalten. Diese Mittel sollen zur Bekämpfung von Harrausfall dienen.
Im Laute von Forschungsarbeiten an Haarwuchsmitteln wurde vollkommen unerwartet entdeckt, daß Glycoproteine, die aus mikrobiellen Zellorganellen lysierter gramnegativer Bakterien gewonnen werden, beachtliche Eigenschaften hinsichtlich der Förderung des Haarwuchses besitzen.
Die Erfindung liegt daher in der Verwendung von aus gramnegativen Bakterien gewonnenen Glycoproteinen in einem Verfahren für die Herstellung von kosmetischen oder dermatologischen Produkten, die den Haarwuchs stimulieren.
Von den Glycoproteinen, die aus gramnegativen Bakterien gewonnen werden, sind vor allem jene Glycoproteine interessant, die aus gramnegativen Bakterien aus der Gruppe Klebsiella pneumoniae, Hafnia, Enterobacter cloacae, Escherichia coli, Klebsiella Ozoenae, Pseudomonas aeruginosa und Proteus stammen.
Die aus diesen gramnegativen Bakterien gewonnenen Glycoproteine besitzen bedeutende haarwuchsfördernde Eigenschaften.
Bei Einsatz von Klebsiella pneumoniae zur Gewinnung von Glycoproteinen setzt man vorzugsweise jenen Stamm ein, der im Institut Pasteur in Paris unter der Nr. 1-163 hinterlegt ist. Aufgrund Ihrer hervorragenden haarwuchsfördernden Eigenschaften, die später im experimentellen Teil veranschaulicht werden, können die aus dem genannten Bakterienstamm gewonnenen Glycoproteine bei allen Formen von Alopezie und allgemein bei allen Erscheinungsbildern eines temporären, mehr oder weniger lokalisierten Haarausfalls verwendet werden.
Die Erfindung bezieht sich weiters auf eine haarwuchsfördernde Zusammensetzung, welche als Wirkstoff aus gramnegativen Bakterien gewonnene Glycoproteine enthält, wobei erfindungsgemäß dafür die aus den Stamm Klebsiella pneumoniae gewonnene Glycoproteine eingesetzt werden, der im Institut Pasteur in Paris unter der Nummer 1-163 hinterlegt ist Diese Glycoproteine weisen eine sehr bedeutende und signifikante Aktivität bei der Keratinsynthese auf, was einen beschleunigten Haarwuchs ergibt.
In besonders ausgewogener Weise wird die Wirkung dann erzielt, wenn der Gewichtsanteil der Glycoproteine zwischen 0,01% und 0,5%, vorzugsweise zwischen 0,02% und 0,1%, liegt.
Die erfindungsgemäße haarwuchsfördernde Zusammensetzung kann in den in der Kosmetik üblichen Darreichungsformen, wie Cremen oder Gels in Tiegeln oder Tuben, Milch, Ölen oder Lotionen in Glas- oder Kunststoffflacons und eventuell in Dosierfläschen, oder auch Ampullen angeboten werden. Die Zusammensetzungen weisen dabei Excipienten auf, die für das Aufträgen auf die Kopfhaut geeignet sind. Es wird für jede Darreichungsform der geeignete Excipient ausgewählt, wobei diese Excipienten alle üblicherweise geforderten Eigenschaften aufweisen müssen. Sie müssen eine große Affinität zur Haut aufweisen, sehr gut verträglich und stabil sein, und eine entsprechende Konsistenz besitzen, die ein leichtes und angenehmes Aufträgen ermöglicht. Als Beispiel für Excipienten, die verwendet werden können, kann man für die Cremeform eine Mischung aus Isopropylmyristat, Glyzerinstearat, Süßmandelöl, Cetylalkohol, Polyol (jeweils 5g-15g-6g-l g-5gpro100g destilliertem Wasser) heranziehen. Für die Milchform verwendet man eine Mischung aus Sorbitmonostearat, Polyoxyethylcetylether, Vasilinöl, Isopropylpalmitat, Bienenwachs, Polyol (jeweils 1 g-3g-5g-5g-1g-5gpro100g destilliertem Wasser). Für die Gelform verwendet man beispielsweise ein Carboxyvinylpolymer in Verbindung mit Triethanolamin und einem Fettsäureester (jeweils 3 g - 3 g - 5 g pro 100 g destilliertem Wasser). Für die Ölform verwendet man Triglyzeride von Fettsäuren in Verbindung mit Perhydrosqualen (jeweils 30 g und 20 g pro 100 g pflanzliche Öle). 2
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Eventuell können die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen auch kleine Mengen Filter- und Schutzsubstanzen gegen die Sonnenstrahlung sowie Vitaminextrakte, Duftstoffe, Konservierungsmittel und Farbstoffe enthalten .
Die verschiedenen, obenerwähnten kosmetischen Darreichungsformen können nach den in dieser Branche üblichen Methoden hergestellt werden.
Die aus gramnegativen Bakterien gewonnen Glycoproteine können gemäß dem obengenannten französischen Patent Nr. 2 043 475 oder einem seiner Zusätze hergestellt werden.
In dem folgenden experimentellen Teil werden mit Produkt A jene Glycoproteine bezeichnet, die aus dem Stamm Klebsiella pneumoniae gewonnen werden, der beim Institut Pasteur in Paris unter der Nummer 1-163 hinterlegt ist. Diese Glycoproteine wurden gemäß den Angaben in Beispiel 1 des französischen Zusatz patentes FR 2 171 907 A1 hergestellt.
In der Folge werden nun Beispiele für die Anwendung der Erfindung, jedoch ohne einschränkenden Charakter, angeführt.
Beispiel 1: Creme
Die Creme wird nach der folgenden Formel hergestellt: - Aus Klebsiella pneumoniae gewonnene Glycoproteine (Produkt A) 0,05 g - Ölsäureazetat 2,0 g - Diethanolamin Alkylphosphat 2,0 g - Ethylhexylpalmitat 8,0 g - hydriertes Lanolin 5,0 g - Fettsäuretriglyzeride 4,0 g - Sorbitstearat 1,0 g - Carboxyvinylpolymer 0,4 g - Konservierungsmittel 0,4 g - Aromatische Verbindungen 0,4 g - gereinigtes Wasser auf 100 g Beispiel 2: Gel Das Gel wird gemäß folgender Formel hergestellt: - Aus Klebsiella pneumoniae gewonnene Glykoproteine (Produkt A) 0,05 g - Glykolextrakt Centelia Asiatica 5,0 g - Propylenglykol 5,0 g - Carboxyvinylpolymer 0,8 g - Konservierungsmittel 0,35 g - Aromatische Verbindungen 0,1 g - gereinigtes Wasser auf 100 g Studie zur Stimulierung der Keratinsynthese bei der Ratte
Tiere
Man verwendet männliche Wistar-Ratten, die bei Beginn des Experimentes 21 Tage alt sind.
Bei jedem Versuch stammen die Tiere, die eine Gruppe bilden, aus demselben Wurf. Jede Versuchs· gruppe besteht aus 6 Tieren. Während des Versuches werden die Tiere jeweils zu zweit in Makroionkäfigen gehalten. 3
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Behandlung
Die Tiere werden in zwei Sechsergruppen aufgeteilt. Jedes Tier wird während 31 Tagen täglich mit 0,5 ml einer Lösung behandelt, welche 500 ug/ml von Produkt A in destilliertem Wasser enthält, oder mit 0,5 ml destilliertem Wasser (Kontrollgruppe) behandelt.
Am 10. Behandlungstag erhält jedes Tier durch eine Speiseröhrensonde eine einmalige Dosis Cy-stein_35S in Form einer Lösung von 1 MBq/ml in einer 0,9%-igen Natriumchloridlösung.
Probenentnahmen und Messungen
Die Haarprobenentnahmen werden jeweils vor der täglichen Behandlung durchgeführt.
Die Fellhaare werden an den behandelten Stellen und an den Kontrollstellen mit einer gekrümmten Schere entnommen. Eine Probe von 50 £2 mg wird abgewogen und in 1 ml Toluol unter mehrstündigem Schütteln im Wasserbad bei 70 * C in verschlossenen Kolben aufgelöst.
Nach vollständiger Auflösung und Abkühlung gibt man 10 ml Szintillationsflüssigkeit Intagel dazu und beginnt, die Aktivität der radioaktiven Beta-Strahlung des 35S zu messen.
Jede Zählung dauert mindestens 10 Minuten, erforderlichenfalls auch länger, wenn man eine Zählung über 1000 Impulse erzielen will, wodurch eine statistische Präzision der Zählerrate besser als £3% gewährleistet wird.
Die erzielten Resultate sind aus der nachstehenden Tabelle zu entnehmen.
Aktivität JS$ in d.p.m. 50 mg Fellhaare bei den mit dem Produkt A behandelten Tieren
Behandeltes Tier TU Kontrol1 -ti er Behandeltes Kontroll-Tier tier T25 Behandeltes Tier T32 Kontrol1 -tier 153 107 9799 1830 4950 4352 109 88 9605 1790 5680 3212 142 74 5079 2028 4825 2100 92 214 8769 6743 4036 2620 150 105 12185 2953 4883 1925 127 124 7612 9797 3928 1937 X 128 118 8841 4190 4717 2691 Sx 9,9 20 972 1360 265 389 d 10 4651 2026 Sd 23 1672 265 t 0,44 2.78 4.3 a<0.05 aO.Ol X = Durchschnitt
Sx = Standardabweichung
d * Differenz zwischen jedem Wert von X
Sd = Abschätzung der angenommenen zwischen den 2 Serien von Werten gemeinsamen yeränderliehen t = gemäß Student-Test kalkulierte Werte α = Wahrscheinlichkeit gemäß Student-Test 4
Claims (5)
- AT 403 655 B Erzielte Resultate Bei T 25 ist ein klarer Einbau von Cystein-35S zu beobachten ( + 110%). Trotz einer bedeutenden Streuung der einzelnen Daten ist die Erhöhung signifikant. Bei T 32 ist die Erhöhung des Einbaus von Cystein-35Snoch signifikanter (alpha < 0,01). Die tägliche Beobachtung der Tiere läßt die Feststellung zu, daß bei der behandelten Versuchsgruppe das Fell nach den Probenentnahmen von T 11 und T 25 schneller nachwächst als bei den Tieren der Kontrollgruppe. Das Produkt A weist daher eine sehr bedeutende und signifikante Aktivität bei der Keratinsynthese auf, deren Begleiterscheinung der beschleunigte Fellhaarwuchs nach dem Schneiden ist. Patentansprüche 1. Verwendung von aus gramnegativen Bakterien gewonnenen G ly coproteinen in einem Verfahren zur Herstellung von kosmetischen oder dermatologischen, den Haarwuchs fördernden Zusammensetzungen.
- 2. Verwendung von Glycoproteinen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Glycoproteine aus gramnegativen Bakterien gewonnen wurden, die aus der Gruppe stammen, welchen von Klebsiella pneumoniae, Hafnia, Enterobacter cloacae, Escherichia coli, Klebsiella Ozoenae, Pseudomonas aeruginosa und Proteus gebildet wird.
- 3. Verwendung von Glycoproteinen nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Glycoproteine aus dem Stamm von Klebsiella pneumoniae gewonnen wurden, welcher im Institut Pasteur in Paris unter der Nummer 1-163 hinterlegt ist.
- 4. Haarwuchsfördernde Zusammensetzung, welche als Wirkstoff aus gramnegativen Bakterien gewonnene Glycoproteine enthalten, dadurch gekennzeichnet, daß aus dem Stamm Klebsiella pneumoniae gewonnene Glycoproteine eingesetzt werden, der im Institut Pasteur in Paris unter der Nummer 1-163 hinterlegt ist.
- 5. Zusammensetzungen nach Anspruch 4 dadurch gekennzeichnet, daß der Gewichtsanteil der Glycoproteine zwischen 0,01% und 0,5% , vorzugsweise zwischen 0,02% und 0,1%, beträgt. 5
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