AT355843B - Verfahren zur bestimmung von 3-keto-delta 5 - steroiden - Google Patents

Description

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 EMI1.1 
 lI4-lI5 -Isomerase (EC 5. 3. 3. 1).3,20-dion. Gegenstand der Erfindung ist demgegenüber eine Steroid-A-Isomerase, bei welcher es sich sowohl um eine   C'9 - und C2, -als   auch um eine   C 27-Isomerase   handelt. 
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PH0, 6 M und eine Aktivierbarkeit durch oberflächenaktive Stoffe bzw. Phosphatpuffer. Die neue Isomerase ist in der DE-OS 2418978 beschrieben. 



   Dieses neue Enzym katalysiert ganz allgemein die Umwandlung von   3-Keto-A'-Steroiden   in   3-Keto-lI 4-Steroide   und umgekehrt. 



   Das Enzym kann daher, und dies ist Gegenstand der Erfindung, technisch zur Bestimmung von 3-Keto-A5 -Steroiden eingesetzt werden. Diese Substrate werden sehr rasch in die entsprechenden   A''-Steroide   umgesetzt, welche sich durch eine ausgeprägte UV-Absorption auszeichnen und daher leicht bei 240 nm quantitativ bestimmt werden können. Diese Umlagerung erfolgt in Gegenwart des Enzyms in etwa 1 bis 2 min, während in Abwesenheit des Enzyms die Umlagerung Stunden erfordert. 



   Das folgende Beispiel erläutert die Erfindung. 



   Bestimmung von   As-Cholesten-3-on   
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 240 nm in einem geeigneten Spektralphotometer abgelesen und die Reaktion mit 0, 02 ml (=   1,   0 U) Steroid-A-Isomerase gestartet. Nach 2 min wird erneut die Extinktion   (E2)   abgelesen. Die Konzentration des gebildeten   II 4-Cholesten-3-ons   und damit des   lI5 -Cholesten-3-ons   ergibt sich aus der Differenz zwischen der ersten und der zweiten Ablesung unter Berücksichtigung des molaren Extinktionskoeffizienten für   II 4 -Cholesten-3-on   bei 240 nm. (A = 15,5  Mol/cm2). 

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Claims (1)

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