AR109207A1 - Control de plagas de coleópteros utilizando moléculas de arn - Google Patents

Control de plagas de coleópteros utilizando moléculas de arn

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Abstract

Reivindicación 1: Una molécula de ácido ribonucleico interferente (ARN) donde el ARN comprende al menos un ARNbc, donde el ARNbc es una región de ARN bicatenario que comprende hebras complementarias hibridadas, donde una de las hebras comprende una secuencia de al menos 19 nucleótidos contiguos que es al menos parcialmente complementaria a una secuencia de nucleótidos diana dentro de un gen diana de Diabrotica spp, y (i) es idéntica en al menos un 85% a un fragmento de al menos 19 nucleótidos contiguos de las SEQ ID Nº 130, 134, 140, 160, 164, 170, 190, 194 ó 200, SEQ ID Nº 274 - 276, SEQ ID Nº 280 - 282, SEQ ID Nº 304 - 324, o sus complementarias; o (ii) comprende al menos un fragmento de 19 nucleótidos contiguos de las SEQ ID Nº 130, 134, 140, 160, 164, 170, 190, 194 ó 200, SEQ ID Nº 274 - 276, SEQ ID Nº 280 - 282, SEQ ID Nº 304 - 324, o sus complementarias; (iii) comprende al menos un fragmento de 19 nucleótidos contiguos de una secuencia de nucleótidos que codifica una secuencia de aminoácidos codificada por las SEQ ID Nº 130, 134, 140, 160, 164, 170, 190, 194 ó 200, SEQ ID Nº 274 - 276, SEQ ID Nº 280 - 282, SEQ ID Nº 304 - 324, o sus complementarias; o (iv) se puede hibridar en condiciones rigurosas con un polinucleótido seleccionado a partir del grupo constituido por las SEQ ID Nº 130, 134, 140, 160, 164, 170, 190, 194 ó 200, SEQ ID Nº 274 - 276, SEQ ID Nº 280 - 282, SEQ ID Nº 304 - 324, y sus complementarias, donde la molécula de ARN interferente tiene actividad insecticida sobre una plaga de coleópteros que atacan plantas. Reivindicación 20: Una composición insecticida de la reivindicación 19, que comprende al menos un segundo agente insecticida para controlar un insecto de Diabrotica. Reivindicación 26: Una planta transgénica, o parte de esta, de la reivindicación 25, donde la planta transgénica comprende al menos un segundo agente insecticida para controlar insectos de Diabrotica. Reivindicación 32: La semilla transgénica de una planta transgénica de cualquiera de las reivindicaciones 25 a 31. Reivindicación 43: Un método para controlar un insecto de Diabrotica que comprende poner en contacto el insecto de Diabrotica con una molécula de ácido nucleico que es una molécula de ARN interferente de las reivindicaciones 1 - 8, o que es capaz de producirla, para inhibir la expresión de un gen diana en el insecto de Diabrotica y poner en contacto el insecto de Diabrotica con al menos un segundo agente insecticida para controlar el insecto de Diabrotica. Reivindicación 62: Un método para producir una planta transgénica con una mayor tolerancia al daño debido a la alimentación de insectos de Diabrotica que comprende introducir en una planta la molécula de ARN interferente, la molécula de ácido nucleico o el constructo de ácido nucleico de cualquiera de las respectivas reivindicaciones anteriores, con el fin de producir de este modo una planta transgénica con una mayor tolerancia al daño debido a la alimentación de insectos de Diabrotica en comparación con una planta de control. Reivindicación 70: Un método para identificar un gen diana ortólogo para utilizarlo como una estrategia de iARN con el fin de controlar una plaga de plantas, comprendiendo dicho método las etapas de: a) producir un par de cebadores que permitirán amplificar una diana seleccionada a partir del grupo que comprende o está constituido por las SEQ ID Nº 49, 50, 57, 58, 69, 70, o una de sus complementarias, b) amplificar un gen diana ortólogo a partir de una muestra de ácido nucleico de la plaga de plantas, c) identificar una secuencia de un gen diana ortólogo, d) producir una molécula de ARN interferente, donde el ARN comprende al menos un ARNbc, donde el ARNbc es una región de ARN bicatenario que comprende hebras complementarias hibridadas, donde una de las hebras comprende una secuencia de al menos 19 nucleótidos contiguos que es al menos parcialmente complementaria a la secuencia de nucleótidos diana ortóloga dentro del gen diana, y e) determinar si la molécula de ARN interferente de la etapa (d) tiene actividad insecticida sobre la plaga de plantas; donde si el ARN interferente tiene actividad insecticida respecto al gen diana de la plaga de plantas, se ha identificado un gen diana ortólogo que se puede utilizar para el control de una plaga de plantas.
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