WO2025183178A1 - 植物由来の抽出組成物 - Google Patents

植物由来の抽出組成物

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WO2025183178A1
WO2025183178A1 PCT/JP2025/007201 JP2025007201W WO2025183178A1 WO 2025183178 A1 WO2025183178 A1 WO 2025183178A1 JP 2025007201 W JP2025007201 W JP 2025007201W WO 2025183178 A1 WO2025183178 A1 WO 2025183178A1
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plant
acid
rosmarinic acid
less
extraction
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茅窪大輔
我部有
土居陽彦
稲葉さやか
山口さゆり
市川琴子
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Kao Corp
Original Assignee
Kao Corp
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    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations

Definitions

  • This disclosure relates to plant-derived extract compositions.
  • stratum corneum's moisture content and flexibility is important for the health of this barrier function. Aging, dryness, ultraviolet rays, and other factors can disrupt cell turnover, leading to abnormalities in the formation of stratum corneum cells and the structure of intercellular lipids. This is known to lead to a variety of skin disorders and skin problems, including rough skin.
  • turnover refers to the constant repetition of keratinocyte (epidermal keratinocyte) proliferation in the basal layer, the cornification process, and peeling of the stratum corneum.
  • keratinocytes cornify outward in succession, forming each layer: basement membrane cells, spinous cells, granular cells, and corneocytes.
  • Proteins that make up the cornified envelope (CE) are synthesized from the upper spinous layer to the granular layer.
  • matrix proteins such as involucrin (IVL), loricrin (LOR), and cystatin bind to the keratinocyte cell membrane by transglutaminase (TGM), forming insolubilized CE.
  • TGM transglutaminase
  • ceramides and other proteins covalently bind to the insolubilized CE, forming the basis for the stratum corneum's barrier function.
  • Patent Document 2 proposes a filaggrin production promoter containing rosmarinic acid and/or eriodictyol 7-O-rutinoside as active ingredients, as an agent for promoting mRNA expression of profilaggrin, a precursor of filaggrin involved in improving the skin's moisturizing function.
  • Patent Document 3 proposes an involucrin expression promoter and a stratum corneum formation promoter as agents capable of maintaining healthy skin barrier function, which contain one or more plants or extracts thereof selected from Japanese pepper, peppermint, eucalyptus, saxifrage, rosemary, asparagus, comfrey, shiitake mushroom, calamus, thyme, burnet, gambir, ginkgo, kudzu, Chinese quince, gardenia, loquat, cinchona, hawthorn, clove, mugwort, and Phellodendron amurense.
  • the present disclosure relates to a plant-derived extract composition containing rosmarinic acid, in which the mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid (betulinic acid/rosmarinic acid) is 0.25 or less.
  • the present disclosure relates to a composition containing a plant extract component, which contains rosmarinic acid and has a mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid (betulinic acid/rosmarinic acid) of 0.25 or less.
  • the present disclosure relates to a method for producing a plant-derived extract composition, which includes an extraction step in which extraction is performed so that the mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid (betulinic acid/rosmarinic acid) is 0.25 or less.
  • the present disclosure relates to a cosmetic product containing the plant-derived extract composition of the present disclosure.
  • transglutaminase is known to catalyze the cross-linking reaction of basic proteins such as involucrin (IVL) and loricrin (LOR), thereby constructing the cornified envelope (CE).
  • IDL involucrin
  • LOR loricrin
  • CE cornified envelope
  • the present disclosure therefore provides a plant-derived extract composition that can increase the expression levels of transglutaminase 1 (TGM-1) and loricrin (LOR), which are representative transglutaminases (TGMs).
  • TGM-1 transglutaminase 1
  • LOR loricrin
  • the present disclosure provides a plant-derived extract composition that can increase the expression levels of transglutaminase (TGM-1) and loricrin (LOR).
  • TGM-1 transglutaminase
  • LOR loricrin
  • Rosmarinic acid has attracted attention as a component for improving (promoting) keratinization.
  • Rosmarinic acid is a type of polyphenol found in large amounts in Lamiaceae plants such as rosemary.
  • a known example of an extract (plant-derived composition) containing rosmarinic acid is rosemary extract extracted from rosemary (Japanese name: Mannenrou).
  • Rosemary extract contains rosmarinic acid as the main component and usually also contains other components such as betulinic acid.
  • the present inventors have found that the coexistence of rosmarinic acid and betulinic acid in a plant-derived extract composition such as rosemary extract inhibits the effect of rosmarinic acid in promoting the expression of transglutaminase (TGM-1) and loricrin (LOR). Furthermore, the present inventors have found that by extracting so that the mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid is reduced to a predetermined value or less, the inhibitory effect of betulinic acid on the expression of transglutaminase (TGM-1) and loricrin (LOR) can be reduced and the amount of expression promoted by the extract can be increased.
  • the present disclosure relates to a plant-derived extract composition (hereinafter also referred to as the "extract composition of the present disclosure") that contains rosmarinic acid and has a mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid (betulinic acid/rosmarinic acid) of 0.25 or less.
  • extract composition of the present disclosure contains rosmarinic acid and has a mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid (betulinic acid/rosmarinic acid) of 0.25 or less.
  • Betulinic acid which is contained in plant-derived extract compositions such as rosemary extract, is thought to inhibit rosmarinic acid.
  • the inhibitory effect of betulinic acid on the action of rosmarinic acid can be drastically reduced, which is thought to have led to an increase in the expression levels of transglutaminase (TGM-1) and loricrin (LOR).
  • TGM-1 transglutaminase
  • LOR loricrin
  • the plant of the present disclosure may be a plant containing rosmarinic acid.
  • the plant containing rosmarinic acid is not particularly limited as long as it contains rosmarinic acid, and examples thereof include Lamiaceae plants.
  • Lamiaceae plants include herb plants of the Lamiaceae family, such as rosemary (Rosmarinus officinalis), perilla, lemon balm, and common sage.
  • the plant part used for extraction may be the whole or a part of the plant, and can be appropriately selected depending on the purpose. Suitable plant parts for extraction include leaves, stems, flowers, fruits, pericarp, pits, above-ground parts, and mixtures thereof. Among these, leaves are preferred from the viewpoint of efficient extraction of rosmarinic acid.
  • the extraction composition of the present disclosure contains rosmarinic acid.
  • the concentration of rosmarinic acid in the extraction composition of the present disclosure can be appropriately set.
  • the concentration (content, ppm) of rosmarinic acid in the extract composition of the present disclosure is preferably 0.5 ppm or more, more preferably 0.7 ppm or more, even more preferably 0.9 ppm or more, and even more preferably 1 ppm or more, from the viewpoint of improving the expression levels of TGM-1 and LOR.
  • ppm is based on mass. Note that 1 ppm is 0.0001 mass% (the same applies hereinafter).
  • the extraction composition of the present disclosure may include betulinic acid, and in one or more other embodiments, may be betulinic acid-free.
  • the concentration (content, ppm) of betulinic acid in the extract composition of the present disclosure preferably satisfies the following mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid (betulinic acid/rosmarinic acid), and in one or more embodiments, is more preferably 0.25 ppm or less, even more preferably 0.20 ppm or less, even more preferably 0.10 ppm or less, even more preferably 0.09 ppm or less, and even more preferably 0.005 ppm or less.
  • the mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid (betulinic acid/rosmarinic acid) in the extract composition of the present disclosure is 0.25 or less, preferably 0.20 or less, more preferably 0.15 or less, even more preferably 0.10 or less, even more preferably 0.09 or less, and even more preferably 0.005 or less, from the viewpoint of improving the expression levels of TGM-1 and LOR.
  • the concentrations of rosmarinic acid and betulinic acid can be measured using high performance liquid chromatography (HPLC), for example, by the method described in the Examples.
  • the extract composition of the present disclosure can be obtained by extraction from a plant.
  • the present disclosure relates to a method for producing an extract composition (hereinafter also referred to as a "method for producing the extract composition of the present disclosure"), which includes a step of obtaining the extract composition from a plant (an extraction step).
  • the method for producing an extract composition of the present disclosure is a method for producing a plant-derived extract composition, comprising an extraction step of extracting betulinic acid to rosmarinic acid so that the mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid (betulinic acid/rosmarinic acid) is 0.25 or less.
  • the mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid can be controlled within a predetermined range by utilizing this difference.
  • the content of rosmarinic acid in the extract composition extracted in the extraction step is preferably 0.5 ppm or more.
  • the preferred values of the content of rosmarinic acid, the content of betulinic acid (ppm), and the mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid in the extract composition extracted in the extraction step are the same as those of the extract composition of the present disclosure described above. Examples of plants used for extraction include those mentioned above, with rosemary being preferred. Examples of plant parts used for extraction include those mentioned above, with leaves being preferred.
  • Examples of extraction methods used in the extraction step include soaking, decoction, percolation, reflux extraction, supercritical fluid extraction, ultrasonic extraction, and microwave extraction, among which a method of soaking a plant in an extraction solvent is preferred.
  • a method of extracting rosmarinic acid includes placing a certain amount of rosemary in a kettle, adding a soaking solvent (e.g., water), and then soaking and extracting at 25°C for 24 hours. Stirring may or may not be performed during soaking. Therefore, in one or more embodiments, the extraction step is a step of soaking a plant in an extraction solvent to obtain an extract composition.
  • the extraction solvent used in the extraction step may be either a polar solvent or a non-polar solvent.
  • the extraction solvent include water, monohydric alcohols such as methanol, ethanol, propanol, and butanol, polyhydric alcohols such as 1,3-propanediol, dipropylene glycol, pentanediol, hexanediol, propylene glycol, butylene glycol, and glycerin, and mixtures thereof.
  • at least one selected from water, ethanol, glycerin, 1,3-propanediol, butylene glycol, and mixtures thereof is preferred from the viewpoint of efficiently extracting rosmarinic acid.
  • the extraction solvent is preferably water from the viewpoint of efficiently extracting rosmarinic acid.
  • the concentration thereof is preferably more than 0% by mass and not more than 20% by mass, from the viewpoint of efficiently extracting rosmarinic acid and extracting it so that the mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid (betulinic acid/rosmarinic acid) is 0.25 or less.
  • the extraction solvent used in the extraction step may further contain other components as needed.
  • other components include preservatives to prevent decay and spreading agents to promote penetration into plant bodies.
  • the amount of extraction solvent used in the extraction step is preferably at least 3 times the weight or dry weight of the plant, more preferably at least 5 times, and even more preferably at least 10 times. From the same viewpoint, it is preferably no more than 100 times, more preferably no more than 75 times, and even more preferably no more than 50 times. From the same viewpoint, the amount of extraction solvent used in the extraction step is preferably at least 3 times but no more than 100 times, more preferably at least 5 times but no more than 75 times, and even more preferably at least 10 times but no more than 50 times.
  • the temperature of the extraction solvent used for extraction (extraction temperature) or the temperature at which the plant is immersed in the extraction solvent (immersion temperature) is preferably 5° C. or higher, more preferably 15° C. or higher, and even more preferably 20° C. or higher, from the viewpoint of efficient extraction of rosmarinic acid. From the same viewpoint, the extraction temperature or the immersion temperature is preferably 5° C. or higher and 35° C. or lower, more preferably 15° C. or higher and 30° C. or lower, and even more preferably 20° C. or higher and 30° C. or lower ...
  • the extraction time or the time for soaking the plant in the extraction solvent is preferably 5 hours or more, more preferably 12 hours or more, and even more preferably 24 hours or more, from the viewpoint of efficiently extracting rosmarinic acid, and from the same viewpoint, it is preferably 120 hours or less, more preferably 72 hours or less, and even more preferably 36 hours or less. From the same viewpoint, the extraction time or the soaking time is preferably 5 hours or more and 120 hours or less, more preferably 12 hours or more and 72 hours or less, and even more preferably 24 hours or more and 36 hours or less.
  • the extract composition of the present disclosure can be obtained by filtering using a filter. Therefore, in one or more embodiments, the extraction step is a step of soaking a plant in an extraction solvent and then filtering using a filter to obtain an extract composition. Examples of filters used for filtration include filter paper, membrane filters, cartridge filters, and disposable filters.
  • the plant before extraction or the plant before soaking in the extraction solvent may be blanched.
  • the extraction step may include a step of blanching rosemary before extraction.
  • a common method can be used for the blanching treatment.
  • a plant such as rosemary can be steamed, boiled, or microwaved.
  • the steam blanching temperature can be, for example, 100 to 150°C, and the blanching time can be, for example, 5 to 60 minutes.
  • the plant before extraction or the plant before soaking in the extraction solvent may be dried after pre-extraction treatment. Therefore, in one or more embodiments, the extraction step may include a step of blanching hydroponically grown rosemary and then drying it before extraction.
  • the drying method a common method can be used. For example, natural drying, hot air drying, freeze drying, reduced pressure drying, and spray drying can be used.
  • the hot air drying temperature can be, for example, 30°C to 100°C, and the drying time can be, for example, 1 to 24 hours.
  • the extraction composition of the present disclosure may be further purified to produce a purified product. Therefore, in one or more embodiments, the method for producing the extraction composition of the present disclosure may further include a step of purifying the extract composition.
  • the extraction composition of the present disclosure may be used as is, or may be diluted, concentrated, or dried before use. That is, the extract composition of the present disclosure includes the extract obtained in the extraction step, as well as a diluted product thereof, a concentrated product thereof, a dried product thereof, or a purified product thereof.
  • the extract composition of the present disclosure include an extract obtained by soaking a plant in water and then adjusting the extract using only an extracting solvent other than water so that the rosmarinic acid concentration and solvent concentration in the extract reach predetermined concentrations, or an extracting composition prepared using an extracting solvent other than water and water.
  • the extract composition of the present disclosure can be used to promote transglutaminase expression in human epidermal keratinocytes, promote loricrin expression in human epidermal keratinocytes, promote stratum corneum formation, or promote epidermal turnover.
  • the present disclosure relates to a method for promoting transglutaminase expression in human epidermal keratinocytes using the extract composition of the present disclosure.
  • the present disclosure relates to a method for promoting loricrin expression in human epidermal keratinocytes using the extract composition of the present disclosure.
  • the present disclosure relates to a method for promoting stratum corneum formation using the extract composition of the present disclosure. In another aspect, the present disclosure relates to a method for promoting epidermal turnover using the extract composition of the present disclosure. In one or more embodiments, the extract composition of the present disclosure can be used to improve uneven redness of the skin. Thus, in another aspect, the present disclosure relates to a method for improving uneven redness of the skin using the extract composition of the present disclosure.
  • epidermis and skin include the epidermis and skin of a human or non-human mammal.
  • the extract composition of the present disclosure can be used as an active ingredient of a composition for promoting the expression of transglutaminase in human epidermal keratinocytes, promoting the expression of loricrin in human epidermal keratinocytes, promoting stratum corneum formation, or promoting epidermal turnover, or can be used to produce such a composition.
  • the extract composition of the present disclosure can be used as an active ingredient in a composition for improving uneven redness of the skin, or can be used to produce such a composition.
  • the present disclosure relates to a composition containing a plant extract, the composition containing rosmarinic acid, and the mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid (betulinic acid/rosmarinic acid) being 0.25 or less.
  • the content of rosmarinic acid in the composition of this aspect is preferably 0.5 ppm or more.
  • Preferred values for the content of rosmarinic acid, the content of betulinic acid, and the mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid in the composition of this aspect are the same as those for the extract composition of the present disclosure described above.
  • the composition of this aspect is a composition for promoting transglutaminase expression in human epidermal keratinocytes, promoting loricrin expression in human epidermal keratinocytes, promoting stratum corneum formation, or promoting epidermal turnover.
  • the composition of this aspect is a composition for improving uneven redness of the skin.
  • the composition of this aspect is a cosmetic, pharmaceutical, or quasi-drug for improving uneven redness of the skin.
  • the present disclosure relates to a cosmetic, pharmaceutical, or quasi-drug for improving uneven redness of the skin, comprising the composition of the present disclosure.
  • the composition of this aspect can be suitably used as an external product or food.
  • examples of external products include cosmetics, pharmaceuticals, quasi-drugs, bath additives, and perfumed products such as toothpaste.
  • the present disclosure relates to an external product or food containing the composition of the present disclosure.
  • the extract composition of the present disclosure can be suitably used in cosmetics. That is, in one aspect, the present disclosure relates to a cosmetic containing the extract composition of the present disclosure.
  • the cosmetic include hair cosmetics and skin cosmetics.
  • product forms of hair cosmetics include hair shampoo, hair conditioner, and hair treatment.
  • Examples of product forms of skin cosmetics include facial cleanser, moisturizer, emulsion, and serum.
  • the present disclosure relates to a cosmetic containing the extract composition of the present disclosure.
  • a cosmetic containing the extract composition of the present disclosure.
  • effects such as improving the skin's moisture retention ability, preventing and improving rough skin, reducing the formation of wrinkles and texture patterns, improving firmness, and improving uneven redness of the skin can be expected.
  • topical products include creams, liquid lotions, milky lotions, sprays, moisturizers, moisturizing liquids, and skin lotions.
  • the content of the extract composition of the present disclosure or the composition of this aspect in an external product or food is preferably 0.0001% or more, more preferably 0.01% or more, even more preferably 1% or more, and preferably 10% or less, more preferably 5% or less. In one or more embodiments, the content of the extract composition of the present disclosure or the composition of this aspect in an external product or food is preferably 0.0001% or more and 10% or less, more preferably 0.01% or more and 5% or less, and even more preferably 1% or more and 5% or less.
  • the present disclosure further relates to one or more of the following embodiments.
  • a plant-derived extract composition containing rosmarinic acid wherein the mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid (betulinic acid/rosmarinic acid) is 0.25 or less, 0.20 or less, 0.15 or less, 0.10 or less, 0.09 or less, or 0.005 or less.
  • ⁇ 3> The extraction composition according to ⁇ 1> or ⁇ 2>, containing betulinic acid.
  • ⁇ 4> The extraction composition according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 3>, wherein the concentration (content, ppm) of betulinic acid is 0.25 ppm or less, 0.20 ppm or less, 0.10 ppm or less, 0.09 ppm or less, or 0.005 ppm or less.
  • concentration (content, ppm) of betulinic acid is 0.25 ppm or less, 0.20 ppm or less, 0.10 ppm or less, 0.09 ppm or less, or 0.005 ppm or less.
  • ⁇ 5> The extraction composition according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 4>, which does not contain betulinic acid.
  • ⁇ 6> The extract composition according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 5>, wherein the plant is a plant containing rosmarinic acid.
  • ⁇ 7> The extract composition according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 6>, wherein the plant is a Lamiaceae plant.
  • ⁇ 8> The extract composition according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 7>, wherein the plant is at least one selected from rosemary, perilla, lemon balm, and common sage.
  • ⁇ 10> The composition according to ⁇ 9>, wherein the content of the rosmarinic acid is 0.5 ppm or more, 0.7 ppm or more, 0.9 ppm or more, or 1 ppm or more.
  • ⁇ 11> The composition according to ⁇ 9> or ⁇ 10>, containing betulinic acid.
  • ⁇ 13> The composition according to ⁇ 9> or ⁇ 10>, which does not contain betulinic acid.
  • composition according to any one of ⁇ 9> to ⁇ 13> for promoting loricrin expression in human epidermal keratinocytes, promoting stratum corneum formation, or promoting epidermal turnover.
  • composition according to any one of ⁇ 9> to ⁇ 13> for promoting the expression of transglutaminase in human epidermal keratinocytes.
  • ⁇ 16> The composition according to any one of ⁇ 9> to ⁇ 13> for improving uneven redness of the skin.
  • ⁇ 17> The composition according to any one of ⁇ 9> to ⁇ 16>, wherein the plant is a plant containing rosmarinic acid.
  • the plant is at least one selected from rosemary, perilla, lemon balm, and common sage.
  • a method for producing a plant-derived extract composition comprising an extraction step of extracting so that the mass ratio of betulinic acid to rosmarinic acid (betulinic acid/rosmarinic acid) is 0.25 or less, 0.20 or less, 0.15 or less, 0.10 or less, 0.09 or less, or 0.005 or less.
  • ⁇ 21> The method for producing a plant-derived extract composition according to ⁇ 20>, wherein the extraction step is a step of immersing a plant in an extraction solvent to obtain an extract composition.
  • the extraction solvent used in the extraction step is at least one selected from polar solvents and non-polar solvents.
  • ⁇ 23> The method for producing a plant-derived extract composition according to any one of ⁇ 20> to ⁇ 22>, wherein the extraction solvent is at least one selected from water, a monohydric alcohol, a polyhydric alcohol, and a mixture thereof, or at least one selected from water, methanol, ethanol, propanol, butanol, 1,3-propanediol, dipropylene glycol, pentanediol, hexanediol, propylene glycol, butylene glycol, glycerin, and a mixture thereof, or at least one selected from water, ethanol, glycerin, 1,3-propanediol, butylene glycol, and a mixture thereof.
  • the extraction solvent is at least one selected from water, a monohydric alcohol, a polyhydric alcohol, and a mixture thereof, or at least one selected from water, methanol, ethanol, propanol, butanol, 1,3-propaned
  • ⁇ 24> The method for producing a plant-derived extract composition according to any one of ⁇ 20> to ⁇ 23>, wherein the extraction solvent is water.
  • ⁇ 25> The method for producing a plant-derived extract composition according to any one of ⁇ 20> to ⁇ 24>, wherein when an aqueous solution of an alcohol (monohydric alcohol and/or polyhydric alcohol) is used as the extraction solvent, the concentration of the aqueous solution is more than 0% by mass and 20% by mass or less.
  • an alcohol monohydric alcohol and/or polyhydric alcohol
  • ⁇ 26> The method for producing a plant-derived extract composition according to any one of ⁇ 20> to ⁇ 25>, wherein the amount of the extraction solvent used in the extraction step is 3 times or more, 5 times or more, or 10 times or more, and 100 times or less, 75 times or less, or 50 times or less, based on the weight or dry weight of the plant.
  • the amount of extraction solvent used in the extraction step is 3 to 100 times, 5 to 75 times, or 10 to 50 times the amount of the plant extract.
  • ⁇ 28> The method for producing a plant-derived extract composition according to any one of ⁇ 20> to ⁇ 27>, wherein the extraction temperature or the soaking temperature in the extraction step is 5°C or higher, 15°C or higher, or 20°C or higher, and 35°C or lower, or 30°C or lower.
  • ⁇ 29> The method for producing a plant-derived extract composition according to any one of ⁇ 20> to ⁇ 28>, wherein the extraction temperature or the soaking temperature in the extraction step is 5°C or higher and 35°C or lower, 15°C or higher and 30°C or lower, or 20°C or higher and 30°C or lower.
  • ⁇ 30> The method for producing a plant-derived extract composition according to any one of ⁇ 20> to ⁇ 29>, wherein the extraction time or soaking time in the extraction step is 5 hours or more, 12 hours or more, or 24 hours or more, and 120 hours or less, 72 hours or less, or 36 hours or less.
  • the extraction time or the soaking time in the extraction step is 5 hours or more and 120 hours or less, 12 hours or more and 72 hours or less, or 24 hours or more and 36 hours or less.
  • ⁇ 32> The method for producing a plant-derived extract composition according to any one of ⁇ 20> to ⁇ 31>, wherein the extraction step includes a step of blanching rosemary before extraction.
  • the blanching treatment is one or more of steam treatment, boiling treatment, and microwave treatment.
  • the extraction step includes a step of blanching hydroponically grown rosemary and then drying it before extraction.
  • the plant is a plant containing rosmarinic acid.
  • ⁇ 36> The method for producing an extract composition derived from a plant according to any one of ⁇ 20> to ⁇ 34>, wherein the plant is a Lamiaceae plant.
  • ⁇ 37> The method for producing a plant-derived extract composition according to any one of ⁇ 20> to ⁇ 34>, wherein the plant is at least one selected from rosemary, perilla, lemon balm, and common sage.
  • ⁇ 38> A cosmetic preparation containing the plant-derived extract composition according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 8>.
  • ⁇ 39> A method for promoting expression of transglutaminase in human epidermal keratinocytes, using the extract composition derived from a plant according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 8>.
  • ⁇ 40> A method for promoting loricrin expression in human epidermal keratinocytes, using the plant extract composition according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 8>.
  • ⁇ 41> A method for promoting stratum corneum formation, using the plant extract composition according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 8>.
  • ⁇ 42> A method for promoting epidermal turnover, using the plant extract composition according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 8>.
  • ⁇ 43> A method for improving uneven redness of the skin, using the plant extract composition according to any one of ⁇ 1> to ⁇ 8>.
  • a cosmetic, pharmaceutical, or quasi-drug for improving uneven redness of the skin comprising the composition according to any one of ⁇ 9> to ⁇ 19>.
  • Rosemary Extract 1 was produced as follows. [Pre-extraction treatment] Fresh rosemary leaves were blanched (steamed) to obtain dried plants. ⁇ Blanching process> Equipment: Steam convection oven (CSVH-E10-T, Comet Kato) Blanching temperature: 110°C Blanching time: 15 minutes [drying process] After pre-extraction treatment, the rosemary leaves were dried. Equipment: Constant temperature dryer (DRR420DA, ADVANTEC) Drying temperature: 60°C Drying time: 18 hours [extraction process] The dried plant was immersed in water and extracted for 24 hours at 25° C. to obtain an extract. The amount of extraction solvent used was 25 times the dry weight of the rosemary.
  • the extract was adjusted with butylene glycol and water so that the rosmarinic acid concentration was 300 ppm and the solvent concentration was 50% (v/v) butylene glycol aqueous solution, and this was designated as rosemary extract 1.
  • the rosemary extract 1 thus obtained contained 300 ppm of rosmarinic acid and 1 ppm of betulinic acid.
  • Rosemary extract 2 Rosemary Extract 2 was prepared by immersing the plant in a 50% (v/v) ethanol solution after the same pre-extraction and drying procedures as those for Rosemary Extract 1, and extracting at 25°C for 24 hours. The amount of extraction solvent used was 25 times the dry weight of the rosemary.
  • Rosemary Extract 2 thus obtained contained 312 ppm of rosmarinic acid and 94 ppm of betulinic acid.
  • Rosemary Extract 3 was prepared by diluting Rosemary Extract 2 with 50% (v/v) ethanol to a betulinic acid concentration of 27 ppm, and then adding reagent rosmarinic acid (Fujifilm Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) to the diluted solution to a rosmarinic acid concentration of 300 ppm. Rosemary Extract 3 thus obtained contained 300 ppm of rosmarinic acid and 27 ppm of betulinic acid.
  • Rosemary Extract 4 was prepared by diluting Rosemary Extract 2 with 50% (v/v) ethanol to a betulinic acid concentration of 54 ppm, and adding reagent rosmarinic acid (Fujifilm Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) to the diluted solution to a rosmarinic acid concentration of 300 ppm.
  • Rosemary Extract 4 thus obtained contained 300 ppm rosmarinic acid and 54 ppm betulinic acid.
  • the concentrations of rosmarinic acid and betulinic acid were measured as follows.
  • TGM-1 Transglutaminase 1
  • LOR loricrin
  • Normal human epidermal keratinocytes were seeded onto a 6-well plate (collagen-coated; Corning) at a density of 1.5 x 10 5 cells/well and cultured in growth medium for 1 day, then replaced with material-supplemented medium and cultured for another day. The next day, the additives shown in Table 1 were added and the mixture was cultured for 48 hours. Thereafter, the cells were washed once with PBS, lysed in RIPA buffer (SIGMA) supplemented with 100-fold diluted Protease/Phosphatase Inhibitor Cocktail (Cell Signaling), and the cells (cell suspension) were collected.
  • SIGMA RIPA buffer
  • the cell suspension was homogenized (sonicated) and centrifuged (15,000 ⁇ g, 10 min), and the supernatant was collected. Protein was then quantified using the Pierce® BCA Protein Assay Kit (Thermo Fisher). Detection required 8-10 ⁇ g of protein. Samples were separated by electrophoresis using NuPAGE® 4-12% SDS (sodium dodecyl sulfate)-polyacrylamide gels (Thermo Fisher). After transfer to a PVDF membrane, the gels were blocked for 1 hour with 5% (w/v) skim milk in TBS-T (Tween 20 0.1% (w/v)).
  • the membranes were then incubated overnight at 4°C with primary antibodies (anti-transglutaminase 1 antibody; Novus; anti-loricrin antibody; Abcam) diluted 2000-fold in blocking solution. After three 15-minute washes with PBS-T, the membranes were incubated for 1 hour at room temperature with secondary antibodies (anti-rabbit IgG antibody (HRP-conjugated); Dako) diluted 4000-fold in blocking solution. After washing three times with PBS-T for 10 minutes, images were taken using the luminescence reagent SuperSignal® West Dura Extended Duration substrate (Thermo Fisher) and a detector (Amersham Imager 600). Band density was quantified using the Amersham Imager 600.
  • primary antibodies anti-transglutaminase 1 antibody; Novus; anti-loricrin antibody; Abcam
  • secondary antibodies anti-rabbit IgG antibody (HRP-conjugated); Dako
  • Measurement data (mean, SD) were evaluated relative to the control group value of 100 to determine the protein expression levels of transglutaminase 1 (TGM-1) and loricrin (LOR). The results are shown in Table 1. In addition, since the expression level of LOR was not evaluated for Example 3, it is shown as "-" in Table 1.
  • Example 1 when rosemary extracts 1, 3, and 4 with a mass ratio (betulinic acid/rosmarinic acid) of 0.25 or less were used (Examples 1-3), the expression level of transglutaminase (TGM-1) was increased compared to when rosemary extract 2 with a mass ratio (betulinic acid/rosmarinic acid) of 0.3 was used (Comparative Example 2).
  • the skin's moisture retention ability was confirmed by measuring changes in stratum corneum moisture content. Measurements of stratum corneum moisture content were performed using a Corneometer (Courage+Khazaka). Measurements were performed five times on each cheek, and the average of three measurements, excluding the lowest and highest values, was calculated. Measurements before and after four weeks of application were compared, and the greater the change, the greater the improvement. Visual improvement in skin condition was evaluated by one expert evaluator who is involved in the development of cosmetics and regularly conducts evaluations. Facial images were evaluated before and after four weeks of application, and the number of people who judged their skin condition to have improved is shown. Skin redness unevenness was confirmed by image analysis.
  • the present disclosure provides a plant-derived extract composition that can increase the expression levels of transglutaminase (TGM-1) and loricrin (LOR).
  • TGM-1 transglutaminase
  • LOR loricrin

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Abstract

一態様において、トランスグルタミナーゼ（ＴＧＭ－１）及びロリクリン（ＬＯＲ）の発現量を増大できる、植物由来の抽出組成物を提供する。　本開示は、一態様において、ロスマリン酸を含有し、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下である、植物由来の抽出組成物に関する。

Description

植物由来の抽出組成物
　本開示は、植物由来の抽出組成物に関する。
　皮膚の水分保持能改善、肌荒れの防止及び改善、並びにしわの形成やきめ模様の減少等の皮膚老化の予防改善には、皮膚の表皮細胞に作用し、表皮細胞の角化を促進し、健全な角層の形成を促して、外界からの刺激や生体を防御するための角層バリア機能を健全にすることがよいとされている。
　この角層バリア機能の健全には、角層の水分量を保持して角層の柔軟性を維持することが重要であるといわれている。角層バリア機能が低下する原因としては、加齢、乾燥、紫外線等の影響によりターンオーバーが乱れ角層細胞の形成や細胞間脂質の構造に異常が生じることが考えられる。そして、様々な皮膚疾患や肌荒れ等の皮膚トラブルを生じることが知られている。
　ここで、ターンオーバーとは、基底層におけるケラチノサイト（表皮角化細胞）の増殖と、角化の過程、角層の剥離の間断ない繰り返しのことをいう。このケラチノサイトは、基底膜細胞、有棘細胞、顆粒細胞、角層細胞と順次外部に向かって角化しながら、各層を形成している。そして、有棘層上層から顆粒層にかけてコーニファイドエンベロープ（ＣＥ）を構成するタンパク質が合成されている。さらに角層に至る過程でトランスグルタミナーゼ（ＴＧＭ）によってケラチノサイトの細胞膜にインボルクリン（ＩＶＬ）、ロリクリン（ＬＯＲ）、シスタチン等の基質タンパク質が結合し、不溶化したＣＥが形成される。さらに不溶化したＣＥにはセラミド等が共有結合し、角層バリア機能の基礎を形成することが知られている。
　従来、角層バリア機能の低下に起因する肌荒れ等の皮膚トラブルに対してセラミド等を含むクリーム等で角層バリア機能を補うことにより解決してきた。しかし、角層細胞のＣＥの改善は十分ではなく、健全なＣＥの形成を促進できる成分（剤、組成物など）が求められている。
　例えば、国際公開第２０２０／１５８９１２号（特許文献１）には、皮膚の粘弾性を改善するための組成物として、（Ａ）ロスマリン酸と（Ｂ）ルテオリングルクロニドとの含有比率が重量比にて（Ａ）：（Ｂ）＝１：０.２～１．５である細胞外ＡＴＰ濃度上昇抑制剤を含む組成物が提案されている。
　特開２０１０－９００３７号公報（特許文献２）には、皮膚の保湿機能向上に関与するフィラグリンの前駆体であるプロフィラグリンのｍＲＮＡ発現を促進する剤として、ロスマリン酸及び／又はエリオジクチオール　７－Ｏ－ルチノシドを有効成分として含有するフィラグリン産生促進剤が提案されている。
　特開２００７－２７７１４９号公報（特許文献３）には、皮膚バリア機能を健全にすることができる剤として、サンショウ、セイヨウハッカ、ユーカリ、ユキノシタ、ローズマリー、アスパラガス、ヒレハリソウ、シイタケ、ショウブ、イブキジャコウソウ、ワレモコウ、ガンビール、イチョウ、クズ、カリン、クチナシ、ビワ、アカキナノキ、サンザシ、チョウジノキ、ヨモギ及びキハダから選ばれる１種以上の植物又はその抽出物を含有するインボルクリン発現促進剤及び角層形成促進剤が提案されている。
　本開示は、一態様において、ロスマリン酸を含有し、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下である、植物由来の抽出組成物に関する。
　本開示は、一態様において、植物抽出成分を含有する組成物であって、ロスマリン酸を含有し、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下である、組成物に関する。
　本開示は、一態様において、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下となるように抽出する抽出工程を含む、植物由来の抽出組成物の製造方法に関する。
　本開示は、一態様において、本開示の植物由来の抽出組成物を含有する化粧料に関する。
　トランスグルタミナーゼ（ＴＧＭ）は、上述したとおり、イボルクリン（ＩＶＬ）、ロリクリン（ＬＯＲ）等の基礎タンパク質の架橋反応を触媒し、コーニファイドエンベロープ（ＣＥ）を構築することが知られている。
　従来の植物抽出組成物よりも、トランスグルタミナーゼ（ＴＧＭ）及びロリクリン（ＬＯＲ）の発現量を増大でき、健全なＣＥの形成を促進できる抽出組成物が求められている。
　そこで、本開示は、代表的なトランスグルタミナーゼ（ＴＧＭ）であるトランスグルタミナーゼ１（ＴＧＭ－１）及びロリクリン（ＬＯＲ）の発現量を増大できる、植物由来の抽出組成物を提供する。
　本開示によれば、一態様において、トランスグルタミナーゼ（ＴＧＭ－１）及びロリクリン（ＬＯＲ）の発現量を増大できる、植物由来の抽出組成物を提供できる。
　角化の改善（促進）するための成分としてロスマリン酸が着目されている。ロスマリン酸はローズマリー等のシソ科植物に多く含まれるポリフェノールの一種である。ロスマリン酸を含むエキス（植物由来の出組成物）としては、例えば、ローズマリー（和名：マンネンロウ）から抽出されたローズマリーエキスが知られている。ローズマリーエキスには、主成分としてロスマリン酸が含まれ、通常、さらにベツリン酸等の他の成分も含まれている。
　本発明者らが鋭意検討した結果、ローズマリーエキスのような植物由来の抽出組成物中に、ロスマリン酸とベツリン酸が共存するとロスマリン酸によるトランスグルタミナーゼ（ＴＧＭ－１）及びロリクリン（ＬＯＲ）の発現促進効果が阻害されることを見出した。さらに、本発明者らは、ロスマリン酸に対するベツリン酸の質量比を所定の値以下に低減するように抽出することで、トランスグルタミナーゼ（ＴＧＭ－１）及びロリクリン（ＬＯＲ）の発現に対するベツリン酸の阻害効果を低減し、抽出物によるこれらの発現促進量を増大できることを見出した。
　すなわち、本開示は、一態様において、ロスマリン酸を含有し、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下である、植物由来の抽出組成物（以下、「本開示の抽出組成物」ともいう）に関する。
　本開示の効果発現のメカニズムの詳細は明らかではないが、以下のように推察される。
　ローズマリーエキスのような植物由来の抽出組成物に含まれるベツリン酸は、ロスマリン酸を阻害すると考えられる。
　本開示では、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）を０．２５以下とすることで、ベツリン酸によるロスマリン酸の作用阻害の影響を極端に低減することができるため、トランスグルタミナーゼ（ＴＧＭ－１）およびロリクリン（ＬＯＲ）の発現量増加につながったと考えられる。
　但し、本開示はこれらのメカニズムに限定して解釈されなくてもよい。
　本開示における植物としては、一又は複数の実施形態において、ロスマリン酸を含有する植物が挙げられる。ロスマリン酸を含有する植物としては、ロスマリン酸を含有すれば植物の種類は特に限定されないが、例えば、シソ科植物が挙げられる。シソ科植物としては、例えば、ローズマリー（Rosmarinus officinalis）、シソ、レモンバーム、コモンセージ等のシソ科ハーブ類の植物が挙げられる。
　抽出に用いる植物の構成部位は、植物の全部でもよいし一部でもよく、目的に応じて、適宜選定することができる。抽出に用いる植物の構成部位としては、例えば、葉、茎、花、果実、果皮、果核、地上部又はこれらの混合物が好適に挙げられ、これらの中でも、ロスマリン酸を効率よく抽出する観点から、葉が好ましい。
［ロスマリン酸］
　本開示の抽出組成物は、一又は複数の実施形態において、ロスマリン酸を含む。本開示の抽出組成物中のロスマリン酸の濃度は、適宜設定することができる。
　本開示の抽出組成物中のロスマリン酸の濃度（含有量、ｐｐｍ）は、一又は複数の実施形態において、ＴＧＭ－１及びＬＯＲの発現量向上の観点から、０．５ｐｐｍ以上が好ましく、０．７ｐｐｍ以上がより好ましく、０．９ｐｐｍ以上が更に好ましく、１ｐｐｍ以上が更に好ましい。
　本開示において、「ｐｐｍ」は質量基準である。なお、１ｐｐｍは、０．０００１質量％である（以下、同じ）。
［ベツリン酸］
　本開示の抽出組成物は、一又は複数の実施形態において、ベツリン酸を含んでもよいし、その他の一又は複数の実施形態において、ベツリン酸を含まなくてもよい。
　本開示の抽出組成物中のベツリン酸の濃度（含有量、ｐｐｍ）は、ＴＧＭ－１及びＬＯＲの発現量向上の観点から、下記のベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）を満たすことが好ましく、一又は複数の実施形態において、０．２５ｐｐｍ以下がより好ましく、０．２０ｐｐｍ以下が更に好ましく、０．１０ｐｐｍ以下が更に好ましく、０．０９ｐｐｍ以下が更に好ましく、０．００５ｐｐｍ以下が更に好ましい。
［質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）］
　本開示の抽出組成物中のベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）は、ＴＧＭ－１及びＬＯＲの発現量向上の観点から、０．２５以下であって、０．２０以下が好ましく、０．１５以下がより好ましく、０．１０以下が更に好ましく、０．０９以下が更に好ましく、０．００５以下が更に好ましい。
　本開示において、ロスマリン酸及びベツリン酸の濃度は、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）を用いて測定でき、例えば、実施例に記載の方法により測定できる。
［抽出組成物の製造方法］
　本開示の抽出組成物は、一又は複数の実施形態において、植物から抽出することにより得ることができる。したがって、本開示は、一態様において、植物から抽出組成物を得る工程（抽出工程）を含む、抽出組成物の製造方法（以下、「本開示の抽出組成物の製造方法」ともいう）に関する。
　本開示の抽出組成物の製造方法は、一又は複数の実施形態において、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下となるように抽出する抽出工程を含む、植物由来の抽出組成物の製造方法である。ロスマリン酸とベツリン酸とは、相対的に前者が親水性成分、後者が疎水性成分と言えるため、その差を利用することでベツリン酸とロスマリン酸の質量比を所定の範囲とすることができる。
　前記抽出工程で抽出される抽出組成物中のロスマリン酸の含有量は、一又は複数の実施形態において、０．５ｐｐｍ以上であることが好ましい。前記抽出工程で抽出される抽出組成物中のロスマリン酸の含有量、ベツリン酸の含有量（ｐｐｍ）、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比の好ましい数値としては、上述した本開示の抽出組成物と同じ数値が挙げられる。
　抽出に用いる植物としては上述したものが挙げられ、ローズマリーが好ましく挙げられる。抽出に用いる植物の構成部位としては上述したものが挙げられ、葉が好ましく挙げられる。
　前記抽出工程における抽出方法としては、例えば、浸漬、煎出、浸出、還流抽出、超臨界抽出、超音波抽出及びマイクロ波抽出等が挙げられるが、植物を抽出溶剤に浸漬する方法が好ましく挙げられる。例えば、ロスマリン酸の抽出方法としては、ローズマリーを一定量釜に投入し、浸漬溶剤（例えば、水）を添加後、２５℃で２４時間浸漬抽出する方法が挙げられる。浸漬の際、攪拌してもよいし、しなくてもよい。
　したがって、前記抽出工程は、一又は複数の実施形態において、植物を抽出溶剤に浸漬して抽出組成物を得る工程である。
　＜抽出溶剤＞
　前記抽出工程で用いる抽出溶剤としては、極性溶剤、非極性溶剤のいずれも使用することができる。
　前記抽出溶剤としては、例えば、水；メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等の１価アルコール；１，３－プロパンジオール、ジプロピレングリコール、ペンタンジオール、ヘキサンジオール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、グリセリン等の多価アルコール及びこれらの混合物が挙げられる。これらの中でも、ロスマリン酸を効率よく抽出する観点から、水、エタノール、グリセリン、１，３－プロパンジオール、ブチレングリコール及びこれらの混合物から選ばれる少なくとも１種が好ましい。
　前記抽出溶剤としては、一又は複数の実施形態において、ロスマリン酸を効率よく抽出する観点から、水が好ましい。
　前記抽出溶剤としてアルコール（１価アルコール及び／又は多価アルコール）の水溶液を使用する場合、その濃度は、ロスマリン酸を効率よく抽出する観点、及び、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下となるように抽出する観点から、０質量％超２０質量％以下が好ましい。
　前記抽出工程で用いる抽出溶剤は、一又は複数の実施形態において、必要に応じてその他の成分をさらに含有していてもよい。その他の成分としては、例えば、腐敗を防ぐための防腐剤、植物体への浸透を促進する展着剤等が挙げられる。
　前記抽出工程で用いる抽出溶剤の使用量は、ロスマリン酸を効率よく抽出する観点から、植物の重量又は乾燥重量に対し３倍以上が好ましく、５倍以上がより好ましく、１０倍以上が更に好ましく、そして、同様の観点から、１００倍以下が好ましく、７５倍以下がより好ましく、５０倍以下が更に好ましい。同様の観点から、前記抽出工程で用いる抽出溶剤の使用量は、３倍以上１００倍以下が好ましく、５倍以上７５倍以下がより好ましく、１０倍以上５０倍以下が更に好ましい。
　＜抽出温度＞
　抽出に用いる抽出溶剤の温度（抽出温度）又は植物を抽出溶剤に浸漬させるときの温度（浸漬温度）は、ロスマリン酸を効率よく抽出する観点から、５℃以上が好ましく、１５℃以上がより好ましく、２０℃以上が更に好ましく、そして、同様の観点から、３５℃以下が好ましく、３０℃以下がより好ましい。同様の観点から、前記抽出温度又は前記浸漬温度は、５℃以上３５℃以下が好ましく、１５℃以上３０℃以下がより好ましく、２０℃以上３０℃以下が更に好ましい。
　＜抽出時間＞
　抽出時間又は抽出溶剤を植物に浸漬させる時間（浸漬時間）は、ロスマリン酸を効率よく抽出する観点から、５時間以上が好ましく、１２時間以上がより好ましく、２４時間以上が更に好ましく、そして、同様の観点から、１２０時間以下が好ましく、７２時間以下がより好ましく、３６時間以下が更に好ましい。同様の観点から、前記抽出時間又は前記浸漬時間は、５時間以上１２０時間以下が好ましく、１２時間以上７２時間以下がより好ましく、２４時間以上３６時間以下が更に好ましい。
　本開示の抽出組成物は、一又は複数の実施形態において、フィルタを用いてろ過することで得ることができる。したがって、前記抽出工程は、一又は複数の実施形態において、植物を抽出溶剤に浸漬した後、フィルタを用いてろ過し、抽出組成物を得る工程である。
　ろ過に用いるフィルタとしては、例えば、ろ紙、メンブレンフィルタ、カートリッジフィルタ、ディスポーザブルフィルタ等が挙げられる。
　＜抽出前処理＞
　抽出前の植物又は抽出溶剤に浸漬前の植物は、一又は複数の実施形態において、ブランチング処理したものであってもよい。したがって、前記抽出工程は、一又は複数の実施形態において、抽出前に、ローズマリーをブランチング処理する工程を含むものであってもよい。
　ブランチング処理方法としては、一般的な手法を用いることができる。例えば、ローズマリー等の植物をスチーム処理、ボイル処理、マイクロ波処理する方法が挙げられる。スチームブランチング処理温度としては、例えば、１００～１５０℃が挙げられ、ブランチング処理時間としては、例えば、５～６０分が挙げられる。
　＜乾燥処理＞
　抽出前の植物又は抽出溶剤に浸漬前の植物は、一又は複数の実施形態において抽出前処理後に乾燥したものであってもよい。したがって、前記抽出工程は、一又は複数の実施形態において、抽出前に、水耕栽培されたローズマリーをブランチング処理後に乾燥する工程を含むものであってもよい。
　乾燥処理方法としては、一般的な手法を用いることができる。例えば、自然乾燥処理、熱風乾燥処理、凍結乾燥処理、減圧乾燥処理、噴霧乾燥処理が挙げられる。熱風乾燥処理温度としては、例えば、３０℃～１００℃が挙げられ、乾燥処理時間としては、１～２４時間が挙げられる。
　本開示の抽出組成物は、一又は複数の実施形態において、さらに精製して精製物としてもよい。したがって、本開示の抽出組成物の製造方法は、一又は複数の実施形態において、抽出物組成物を精製する工程をさらに含むものであってもよい。
　本開示の抽出組成物は、一又は複数の実施形態において、そのまま使用してもよいし、希釈、濃縮又は乾燥して使用してもよい。
　すなわち、本開示の抽出組成物には、前記抽出工程で得られる抽出物、及び、その希釈物、その濃縮物、その乾燥物、又は、これらの精製物が含まれる。
　本開示の抽出組成物としては、例えば、植物を水に浸漬して抽出液を得た後、抽出液中のロスマリン酸濃度及び溶剤濃度が所定濃度になるよう水以外の抽出溶剤のみで調整したもの、あるいは、水以外の抽出溶剤及び水で調製したものが挙げられる。
［抽出組成物の用途］
　本開示の抽出組成物は、一又は複数の実施形態において、ヒト表皮角化細胞におけるトランスグルタミナーゼの発現促進、ヒト表皮角化細胞におけるロリクリンの発現促進、角層形成促進、又は表皮のターンオーバー促進のために使用できる。よって、本開示は、その他の態様において、本開示の抽出組成物を用いる、ヒト表皮角化細胞におけるトランスグルタミナーゼの発現を促進する方法に関する。本開示は、その他の態様において、本開示の抽出組成物を用いる、ヒト表皮角化細胞におけるロリクリンの発現を促進する方法に関する。本開示は、その他の態様において、本開示の抽出組成物を用いる、角層形成を促進する方法に関する。本開示は、その他の態様において、本開示の抽出組成物を用いる、表皮のターンオーバーを促進する方法に関する。
　本開示の抽出組成物は、一又は複数の実施形態において、皮膚の赤みムラ改善のために使用できる。よって、本開示は、その他の態様において、本開示の抽出組成物を用いる、皮膚の赤みムラを改善する方法に関する。
　本開示において、表皮及び皮膚としては、ヒト又は非ヒト哺乳類の表皮及び皮膚が挙げられる。
　本開示の抽出組成物は、一又は複数の実施形態において、ヒト表皮角化細胞におけるトランスグルタミナーゼの発現促進、ヒト表皮角化細胞におけるロリクリンの発現促進、角層形成促進、又は表皮のターンオーバー促進のための組成物の有効成分として使用でき、あるいは、当該組成物の製造に使用できる。
　本開示の抽出組成物は、一又は複数の実施形態において、皮膚の赤みムラ改善のための組成物の有効成分として使用でき、あるいは、当該組成物の製造に使用できる。
　したがって、本開示は、一態様において、植物抽出成分を含有する組成物であって、ロスマリン酸を含有し、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下である、組成物に関する。本態様の組成物中のロスマリン酸の含有量は、一又は複数の実施形態において、０．５ｐｐｍ以上であることが好ましい。本態様の組成物中のロスマリン酸の含有量、ベツリン酸の含有量、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比の好ましい数値としては、上述した本開示の抽出組成物と同じ数値が挙げられる。
　本態様の組成物は、一又は複数の実施形態において、ヒト表皮角化細胞におけるトランスグルタミナーゼの発現促進、ヒト表皮角化細胞におけるロリクリンの発現促進、角層形成促進、又は表皮のターンオーバー促進のための組成物である。
　本態様の組成物は、一又は複数の実施形態において、皮膚の赤みムラ改善のための組成物である。本態様の組成物は、一又は複数の実施形態において、皮膚の赤みムラ改善のための化粧料、医薬品、又は医薬部外品である。本開示は、その他の態様において、本開示の組成物を含有する、皮膚の赤みムラ改善のための化粧料、医薬品、又は医薬部外品に関する。
　本態様の組成物は、一又は複数の実施形態において、外用品又は食品として好適に用いることができる。本開示において、外用品としては、例えば、化粧料、医薬品、医薬部外品、入浴剤、歯磨き粉のような香料賦香品等が挙げられる。本開示は、その他の態様において、本開示の組成物を含有する、外用品又は食品に関する。
　本開示の抽出組成物は、一又は複数の実施形態において、化粧料に好適に用いることができる。すなわち、本開示は、一態様において、本開示の抽出組成物を含有する化粧料に関する。化粧料としては、毛髪化粧料、皮膚化粧料等が挙げられる。毛髪化粧料の製品形態としては、例えば、ヘアシャンプー、ヘアコンディショナー、ヘアトリートメント等が挙げられる。皮膚化粧料の製品形態としては、例えば、洗顔料、保湿液、乳液、美容液等が挙げられる。本開示は、その他の態様において、本開示の抽出組成物を含有する化粧料に関する。
　本開示の抽出組成物又は本態様の組成物を化粧料等の皮膚外用剤に配合した場合は、皮膚の水分保持能改善、肌荒れの防止及び改善、しわの形成やきめ模様の減少、ハリの改善、並びに、皮膚の赤みムラ改善といった効果が期待できる。
　外用品の形態としては、例えば、クリーム、液状ローション、乳液状ローション、スプレー、保湿剤、保湿液、化粧水等の形態が挙げられる。
　外用品中又は食品中の本開示の抽出組成物又は本態様の組成物の含有量は、一又は複数の実施形態において、好ましく０．０００１％以上、より好ましくは０．０１％以上、更に好ましくは１％以上であり、そして、好ましくは１０％以下、より好ましくは５％以下である。外用品中又は食品中の本開示の抽出組成物又は本態様の組成物の含有量は、一又は複数の実施形態において、０．０００１％以上１０％以下が好ましく、０．０１％以上５％以下がより好ましく、１％以上５％以下が更に好ましい。
　本開示はさらに以下の一又は複数の実施形態に関する。
＜１＞　ロスマリン酸を含有し、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下、０．２０以下、０．１５以下、０．１０以下、０．０９以下、又は０．００５以下である、植物由来の抽出組成物。
＜２＞　前記ロスマリン酸の含有量が０．５ｐｐｍ以上、０．７ｐｐｍ以上、０．９ｐｐｍ以上、又は１ｐｐｍ以上である、＜１＞に記載の抽出組成物。
＜３＞　ベツリン酸を含む、＜１＞又は＜２＞に記載の抽出組成物。
＜４＞　ベツリン酸の濃度（含有量、ｐｐｍ）は、０．２５ｐｐｍ以下、０．２０ｐｐｍ以下、０．１０ｐｐｍ以下、０．０９ｐｐｍ以下、又は０．００５ｐｐｍ以下である、＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の抽出組成物。
＜５＞　ベツリン酸を含まない、＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の抽出組成物。
＜６＞　前記植物は、ロスマリン酸を含有する植物である、＜１＞から＜５＞のいずれかに記載の抽出組成物。
＜７＞　前記植物は、シソ科植物である、＜１＞から＜６＞のいずれかに記載の抽出組成物。
＜８＞　前記植物は、ローズマリー、シソ、レモンバーム、及びコモンセージから選ばれる少なくとも１種である、＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の抽出組成物。
＜９＞　植物抽出成分を含有する組成物であって、ロスマリン酸を含有し、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下、０．２０以下、０．１５以下、０．１０以下、０．０９以下、又は０．００５以下である、組成物。
＜１０＞　前記ロスマリン酸の含有量が０．５ｐｐｍ以上、０．７ｐｐｍ以上、０．９ｐｐｍ以上、又は１ｐｐｍ以上である、＜９＞に記載の組成物。
＜１１＞　ベツリン酸を含む、＜９＞又は＜１０＞に記載の組成物。
＜１２＞　ベツリン酸の濃度（含有量、ｐｐｍ）は、０．２５ｐｐｍ以下、０．２０ｐｐｍ以下、０．１０ｐｐｍ以下、０．０９ｐｐｍ以下、又は０．００５ｐｐｍ以下である、＜９＞から＜１１＞のいずれかに記載の組成物。
＜１３＞　ベツリン酸を含まない、＜９＞又は＜１０＞に記載の組成物。
＜１４＞　ヒト表皮角化細胞におけるロリクリンの発現促進、角層形成促進、又は表皮のターンオーバー促進のための、＜９＞から＜１３＞のいずれかに記載の組成物。
＜１５＞　ヒト表皮角化細胞におけるトランスグルタミナーゼの発現促進のための、＜９＞から＜１３＞のいずれかに記載の組成物。
＜１６＞　皮膚の赤みムラ改善のための、＜９＞から＜１３＞のいずれかに記載の組成物。
＜１７＞　前記植物は、ロスマリン酸を含有する植物である、＜９＞から＜１６＞のいずれかに記載の組成物。
＜１８＞　前記植物は、シソ科植物である、＜９＞から＜１７＞のいずれかに記載の組成物。
＜１９＞　前記植物は、ローズマリー、シソ、レモンバーム、及びコモンセージから選ばれる少なくとも１種である、＜９＞から＜１８＞のいずれかに記載の組成物。
＜２０＞　ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下、０．２０以下、０．１５以下、０．１０以下、０．０９以下、又は０．００５以下となるように抽出する抽出工程を含む、植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜２１＞　前記抽出工程は、植物を抽出溶剤に浸漬して抽出組成物を得る工程である、＜２０＞に記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜２２＞　前記抽出工程で用いる抽出溶剤は、極性溶剤及び非極性溶剤から選ばれる少なくとも１種である、＜２０＞又は＜２１＞に記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜２３＞　前記抽出溶剤は、水、１価アルコール、多価アルコール及びこれらの混合物から選ばれる少なくとも１種である、又は、水、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、１，３－プロパンジオール、ジプロピレングリコール、ペンタンジオール、ヘキサンジオール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、グリセリン、及びこれらの混合物から選ばれる少なくとも１種である、又は、水、エタノール、グリセリン、１，３－プロパンジオール、ブチレングリコール及びこれらの混合物から選ばれる少なくとも１種である、＜２０＞から＜２２＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜２４＞　前記抽出溶剤は、水である、＜２０＞から＜２３＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜２５＞　前記抽出溶剤としてアルコール（１価アルコール及び／又は多価アルコール）の水溶液を使用する場合、その濃度は、０質量％超２０質量％以下である、＜２０＞から＜２４＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜２６＞　前記抽出工程で用いる抽出溶剤の使用量は、植物の重量又は乾燥重量に対し、３倍以上、５倍以上、又は１０倍以上であり、１００倍以下、７５倍以下、又は５０倍以下である、＜２０＞から＜２５＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜２７＞　前記抽出工程で用いる抽出溶剤の使用量は、３倍以上１００倍以下、５倍以上７５倍以下、又は、１０倍以上５０倍以下である、＜２０＞から＜２６＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜２８＞　前記抽出工程における抽出温度又は浸漬温度は、５℃以上、１５℃以上、又は２０℃以上であり、３５℃以下又は３０℃以下である、＜２０＞から＜２７＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜２９＞　前記抽出工程における抽出温度又は浸漬温度は、５℃以上３５℃以下、１５℃以上３０℃以下、又は２０℃以上３０℃以下である、＜２０＞から＜２８＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜３０＞　前記抽出工程における抽出時間又は浸漬時間は、５時間以上、１２時間以上、又は２４時間以上であり、１２０時間以下、７２時間以下、又は３６時間以下である、＜２０＞から＜２９＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜３１＞　前記抽出工程における抽出時間又は浸漬時間は、５時間以上１２０時間以下、１２時間以上７２時間以下、又は２４時間以上３６時間以下である、＜２０＞から＜３０＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜３２＞　前記抽出工程は、抽出前に、ローズマリーをブランチング処理する工程を含む、＜２０＞から＜３１＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜３３＞　ブランチング処理が、スチーム処理、ボイル処理、マイクロ波処理のいずれか１種以上である、＜３２＞に記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜３４＞　前記抽出工程は、抽出前に、水耕栽培されたローズマリーをブランチング処理後に乾燥する工程を含む、＜２０＞から＜３３＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜３５＞　前記植物は、ロスマリン酸を含有する植物である、＜２０＞から＜３４＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜３６＞　前記植物は、シソ科植物である、＜２０＞から＜３４＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜３７＞　前記植物は、ローズマリー、シソ、レモンバーム、及びコモンセージから選ばれる少なくとも１種である、＜２０＞から＜３４＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物の製造方法。
＜３８＞　＜１＞から＜８＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物を含有する化粧料。
＜３９＞　＜１＞から＜８＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物を用いる、ヒト表皮角化細胞におけるトランスグルタミナーゼの発現を促進する方法。
＜４０＞　＜１＞から＜８＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物を用いる、ヒト表皮角化細胞におけるロリクリンの発現を促進する方法。
＜４１＞　＜１＞から＜８＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物を用いる、角層形成を促進する方法。
＜４２＞　＜１＞から＜８＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物を用いる、表皮のターンオーバーを促進する方法。
＜４３＞　＜１＞から＜８＞のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物を用いる、皮膚の赤みムラを改善する方法。
＜４４＞　＜９＞から＜１９＞のいずれかに記載の組成物を含有する、皮膚の赤みムラ改善のための化粧料、医薬品、又は医薬部外品。
＜４５＞　＜９＞から＜１９＞のいずれかに記載の組成物を含有する、外用品又は食品。
　以下、実施例により本開示を更に詳細に説明するが、これらは例示的なものであって、本開示はこれら実施例に制限されるものではない。
（１）ローズマリーエキス１～４の製造
ローズマリーエキス１
　ローズマリーエキス１は以下のように製造した。
［抽出前処理］
　生のローズマリーの葉をブランチング処理（スチーム処理）し、乾燥した植物を得た。
　＜ブランチング処理＞
　装置：スチームコンベクションオーブン（CSVH-E10-T、コメットカトウ）
　ブランチング処理温度：１１０℃
　ブランチング処理時間：１５分
［乾燥処理］
抽出前処理後のローズマリー葉を乾燥処理した。
　装置：定温乾燥機（DRR420DA、ADVANTEC）
　乾燥温度：６０℃
　乾燥時間：１８時間
［抽出処理］
　前記乾燥処理後の植物を水に浸漬し、２５℃で２４時間抽出し、抽出液を得た。抽出溶剤の使用量は、ローズマリーの乾燥重量に対して２５倍であった。
　上記抽出液のロスマリン酸の濃度が３００ｐｐｍかつ、溶剤の濃度が５０％（ｖ／ｖ）ブチレングリコール水溶液になるように、ブチレングリコール及び水で調製したものをローズマリーエキス１とした。このようにして得られたローズマリーエキス１は、ロスマリン酸：３００ｐｐｍ、ベツリン酸を１ｐｐｍ含有していた。
ローズマリーエキス２
　ローズマリーエキス２は、ローズマリーエキス１と同じ抽出前処理及び乾燥処理を施した植物を５０％(v/v)エタノール水溶液に浸漬し、２５℃で２４時間抽出し、抽出液を得た。抽出溶剤の使用量は、ローズマリーの乾燥重量に対して２５培であった。このようにして得られたローズマリーエキス２は、ロスマリン酸を３１２ｐｐｍ、ベツリン酸を９４ｐｐｍ含有していた。
ローズマリーエキス３
　ローズマリーエキス３は、ローズマリーエキス２をベツリン酸濃度が２７ｐｐｍになるように５０％(v/v)エタノール水溶液で希釈し、希釈液のロスマリン酸量が３００ｐｐｍになるように試薬のロスマリン酸（富士フィルム和光純薬株式会社）を添加した。このようにして得られたローズマリーエキス３は、ロスマリン酸を３００ｐｐｍ、ベツリン酸を２７ｐｐｍ含有していた。
ローズマリーエキス４
　ローズマリーエキス４は、ローズマリーエキス２をベツリン酸濃度が５４ｐｐｍになるように５０％(v/v)エタノール水溶液で希釈し、希釈液のロスマリン酸量が３００ｐｐｍになるように試薬のロスマリン酸（富士フィルム和光純薬株式会社）を添加した。このようにして得られたローズマリーエキス４は、ロスマリン酸：３００ｐｐｍ、ベツリン酸：５４ｐｐｍ含有していた。
　なお、ロスマリン酸及びベツリン酸の濃度測定は下記のように行った。
[ロスマリン酸及びベツリン酸の濃度測定]
　ロスマリン酸及びベツリン酸の濃度は、下記測定条件により高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）を用いて測定した。
　＜測定条件＞
装置：Ｕｌｔｉｍａｔｅ３０００（ＨＰＬＣ）、Ｃｏｒｏｎａ　ｕｌｔｒａ（検出器）（ダイオネクス社製）
カラム：ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎ　ＯＤＳ－３　５ｕｍ　３．０ｘ１５０ｍｍ (ジーエルサイエンス社製)
溶離液：ギ酸０．１％（Ａ液）及びアセトニトリル（Ｂ液）
傾斜条件：Ａ液９５：Ｂ液５～Ａ液１０：Ｂ液９０まで傾斜
流速：０．５ｍＬ／分
カラム温度：４０℃
検出器：ＵＶ（ロスマリン酸の定量）、ＣＡＤ（ベツリン酸の定量）
（２）トランスグルタミナーゼ１（ＴＧＭ－１）、ロリクリン（ＬＯＲ）発現解析（実施例１～３、比較例１～２）
［添加剤の調製］
　ローズマリーエキス１～４、又は、エタノール水溶液（５０％ (v/v)）を用い、ロスマリン酸及びベツリン酸を下記の表１に示す濃度で含有する添加剤（実施例１～３、比較例１～２）を調整した。
［実験用細胞培養］
　細胞は、正常ヒト表皮角化細胞（新生児包皮由来；クラボウ）を用いた。細胞の増殖培養にはEpiLife Medium, with 60 μM calcium（Thermo Fisher）にHKGS（Thermo Fisher）を添加して使用した。また、素材の添加培養として、EpiLife Medium, with 60 μM calciumにHKGS Kit（BPE及びEGF 不含、Thermo Fisher）を添加して使用した。細胞培養は３７℃、５％ ＣＯ2の環境下で常法に従って行った。
［タンパク質の抽出とトランスグルタミナーゼ１（ＴＧＭ－１）、ロリクリン（ＬＯＲ）発現解析］
　正常ヒト表皮角化細胞を、６穴プレート（コラーゲンコート；Corning）に１．５×１０5 cells/wellの密度で播種し、増殖培地にて１日培養した後、素材添加培地に置き換えさらに１日培養した。
　翌日、表1に示す添加剤を添加し、４８時間培養した。
　その後、PBSで1回洗浄し、Protease/Phosphatase Inhibitor Cocktail（Cell Signaling）を１００倍希釈で添加したRIPA buffer （SIGMA）に溶解し、細胞（細胞懸濁液）を回収した。
　細胞懸濁液は、ホモジナイズ（超音波破砕）を行い、遠心分離（15,000×g, 10 min）処理後、上清を回収した。その後、Pierce（登録商標）BCA Protein Assay Kit（Thermo Fisher）を用いてタンパク質定量を行った。検出には８～１０μｇのタンパク質を要した。
　サンプルをNuPAGE（登録商標）４～１２％ SDS (sodium dodecyl sulfate)－polyacrylamide gel (Thermo Fisher) を用いた電気泳動により分離した。PVDF膜に転写後、５％ (w/v)スキムミルクを含む TBS-T (Tween20 0.1% (w/v))で1時間ブロッキングし、ブロッキング溶液で２０００倍希釈した一次抗体（Anti-Transglutaminase 1 antibody；Novus、Anti-Loricrin antibody；Abcam）を用いて４℃下で一晩インキュベートした。PBS-Tで１５分３回洗浄後、ブロッキング溶液で４０００倍希釈した二次抗体（抗ウサギIgG抗体（HRP標識）；Dako）を用いて室温下で１時間インキュベートした。PBS-T で１０分３回洗浄後、発光試薬 SuperSignal（登録商標）West Dura Extended Duration substrate (Thermo Fisher)を用いて、検出器 (Amersham Imager 600)にて撮影を行った。バンド濃度は、Amersham Imager 600を用いて定量した。測定データ（mean、SD）は、対照群の値を１００としてトランスグルタミナーゼ１（ＴＧＭ－１）、ロリクリン（ＬＯＲ）のタンパク質発現量を相対的に評価した。
　結果を表１に示す。
　なお、実施例３についてはＬＯＲの発現量の評価を行っていないため、表１において「－」と示す。
　表１に示すとおり、質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下であるローズマリーエキス１、３、４を用いた場合（実施例１～３）、質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．３であるローズマリーエキス２を用いた場合（比較例２）に比べて、トランスグルタミナーゼ（ＴＧＭ－１）の発現量が増加していた。また、表１に示すとおり、質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下であるローズマリーエキス１、３を用いた場合（実施例１、２）、質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．３であるローズマリーエキス２を用いた場合（比較例２）に比べて、ロリクリン（ＬＯＲ）の発現量が増加していた。
（３）角層機能の改善効果（実施例４、比較例３、参考例１～２）
　表２～３に示す組成及び配合量（有効分、質量％）の保湿液を製造し、その効果を評価した。
（製法）
　キサンタンガムと１，３－ブチレングリコール、精製水３０質量％を８０℃に加熱し、撹拌しながら均一に混合した後、２５℃まで冷却した。残りの成分（ローズマリーエキス、クエン酸、クエン酸ナトリウム、フェノキシエタノール）を加えて、２５℃で攪拌しながら均一に混合し、各保湿液（実施例４、比較例３、参考例１～２）を得た。
（評価方法）
　健常女性３２名を対象として、４週間連続塗布による角層機能の改善効果を評価した。
　被験者の顔にハーフフェイスで、片側に各ローズマリーエキス（実施例１、比較例２）を含む保湿液（実施例４、比較例３）、片側にローズマリーエキスを含まないプラセボ保湿液（参考例１、２）を１日２回、１回約０．２ｇずつ塗布した。塗布開始前と塗布４週間経過後に測定を行い、プラセボ保湿液の塗布側および各ローズマリーエキスを含む保湿液塗布側に対して、より改善した人数を比較した。評価は水分保持能及び目視による肌状態の改善について行った。
　肌の水分保持能は角層水分量の変化によって確認した。角層水分量の測定はコルネオメーター（Courage＋Khazaka社製）を用いて行った。測定は左右の頬部各５回行い、計測値は最低値と最高値を除く３回の平均値で求めた。塗布開始前と塗布４週間経過後の計測値を比較し、変化量の値が大きい方をより改善したと判断した。
　目視による肌状態の改善については、化粧料開発に従事し、定常的に評価をおこなっている専門評価者１名で評価した。塗布開始前と塗布４週間経過後の顔画像を評価し、肌状態がより改善したと判断した人数を示した。
　肌の赤みムラについては画像解析によって確認した。VISIA-CR（Canfield Scientific社製）を用いて表面光を除去した顔写真を塗布開始前と塗布4週間経過後に撮影し、取得した画像からヘモグロビンに由来する色素成分を、特許６９７７７４４記載の方法に従って分離し、ヘモグロビン抽出画像（ヘモグロビン成分量にヘモグロビンベクトルを乗じた後RGBに変換したカラー画像）を作成した。画像解析ソフト ウェア Image Jを使用し、頬部におけるRedの標準偏差（StdDev）値を算出し、塗布4週間経過後の値から塗布開始前の値を引いたものを赤みムラの変化量とした。赤みムラの変化量の数値が小さいほど、肌の赤みムラが改善したと判断できる。
　結果を表２～３に示す。
　表２の結果より、実施例１のローズマリーエキスを含む保湿液（実施例４）は、ローズマリーエキスを含まないプラセボ保湿液（参考例１）に対して角層機能の改善効果に優れていた。また、実施例４の保湿液は、プラセボ保湿液（参考例１）に対して、肌の赤みムラの改善効果があることがわかった。
　一方、表３の結果より、比較例２のローズマリーエキスを含む保湿液（比較例３）は、ローズマリーエキスを含まないプラセボ保湿液（参考例２）に対して角層機能の改善効果が認められなかった。また、比較例３の保湿液は、プラセボ保湿液（参考例２）に対して、肌の赤みムラの改善効果が認められなかった。
　本開示によれば、一態様において、トランスグルタミナーゼ（ＴＧＭ－１）及びロリクリン（ＬＯＲ）の発現量を増大できる植物由来の抽出組成物を提供できる。

Claims (11)

  1. 　ロスマリン酸を含有し、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下である、植物由来の抽出組成物。
  2. 　前記ロスマリン酸の含有量が０．５ｐｐｍ以上である、請求項１に記載の抽出組成物。
  3. 　前記植物がローズマリーである、請求項１又は２に記載の抽出組成物。
  4. 　植物抽出成分を含有する組成物であって、ロスマリン酸を含有し、ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下である、組成物。
  5. 　ヒト表皮角化細胞におけるロリクリンの発現促進、角層形成促進、又は表皮のターンオーバー促進のための、請求項４に記載の組成物。
  6. 　ヒト表皮角化細胞におけるトランスグルタミナーゼの発現促進のための、請求項４又は５に記載の組成物。
  7. 　皮膚の赤みムラ改善のための、請求項４から６のいずれかに記載の組成物。
  8. 　前記植物がローズマリーである、請求項４から７のいずれかに記載の組成物。
  9. 　ベツリン酸とロスマリン酸の質量比（ベツリン酸／ロスマリン酸）が０．２５以下となるように抽出する抽出工程を含む、植物由来の抽出組成物の製造方法。
  10. 　前記植物がローズマリーである、請求項９に記載の製造方法。
  11. 　請求項１から３のいずれかに記載の植物由来の抽出組成物を含有する化粧料。
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