WO2025110565A1 - 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물 - Google Patents

피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물 Download PDF

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WO2025110565A1
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wrinkles
cyanocobalamin
skin
skin elasticity
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천혜연
이혜진
형경은
이선주
전승현
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LG Household and Health Care Ltd
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    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations

Definitions

  • the present disclosure relates to a composition for improving skin elasticity or skin wrinkles.
  • the skin is an organ that accounts for approximately 16% of the human body volume and exists on the outermost part of the body, protecting our body from the external environment and stimuli. Since the skin is always exposed to external stimuli compared to the internal organs of the body, it is easily attacked, and in particular, the skin of the face is directly exposed to ultraviolet rays and pollutants, making it an organ that is more prone to aging than the skin of the rest of the body.
  • Skin aging is divided into intrinsic aging that occurs naturally and extrinsic aging caused by external factors.
  • the main factor of intrinsic aging is genetic factors, which determine the structure and changes of skin cells and tissues.
  • the factors of extrinsic aging are external, and can be influenced by nutritional deficiencies, ultraviolet rays, and environmental pollution. Unlike genetic factors, these are factors that can be prevented and avoided.
  • MMP is a calcium-dependent zinc-containing metalloproteinase in the active center, and is secreted in the form of a latent zymogen in the body. In order to have enzymatic activity, MMP undergoes structural modification, and the amino-terminal region is cleaved and activated. The activity of activated MMP is regulated by inhibitors such as 2-macroglobulin or TIMP (tissue inhibitors of metalloproteinase), and many cells, including keratinocytes and fibroblasts of the skin, secrete MMP. These MMPs are divided into various subfamily groups according to their structure and functional characteristics.
  • TIMP tissue inhibitors of metalloproteinase
  • MMP1 is an interstitial collagenase and is an important protein for wound healing, tissue regeneration, and reorganization.
  • MMP3 (Stromelysin-1) is It is a protein enzyme that breaks down collagen, elastin, and fibronectin. When exposed to external or internal stimuli, these MMP1 or MMP3 are produced in the body in larger amounts than usual, bind to collagen, and then cut the collagen, causing skin wrinkles and loss of elasticity.
  • the problem that the present disclosure seeks to solve is to provide a composition that is remarkably excellent in the effect of improving skin elasticity or skin wrinkles.
  • the inventors of the present disclosure have conducted extensive research and have found that when adenosine triphosphate (ATP) and cyanocobalamin (vitamin B 12 ) are combined, the effect of improving skin elasticity or improving skin wrinkles is significantly increased.
  • the inventors of the present disclosure have surprisingly found that when adenosine triphosphate and cyanocobalamin are combined, the expression levels of collagen-decomposing enzymes MMP1 and MMP3 are synergistically decreased, thereby confirming that the effect of improving skin elasticity or improving skin wrinkles is significantly excellent, thereby completing the present invention.
  • the present disclosure provides a composition for improving skin elasticity or wrinkles, comprising adenosine triphosphate and cyanocobalamin.
  • the composition may comprise adenosine triphosphate and cyanocobalamin as active ingredients.
  • the adenosine triphosphate may be included in an amount of 0.0001 to 20 wt%, preferably 0.001 to 10 wt%, based on the total weight of the composition.
  • the adenosine triphosphate is less than 0.0001 wt% based on the total weight of the composition, the effect of improving skin elasticity or wrinkles may be insignificant, and when it exceeds 20 wt%, the stability of the formulation may be impaired.
  • the cyanocobalamin may be included in an amount of 0.00001 to 1 wt%, preferably 0.00005 to 0.01 wt%, based on the total weight of the composition. If the cyanocobalamin is less than 0.00001 wt% based on the total weight of the composition, the effect of improving skin elasticity or wrinkles may be insignificant, and if it exceeds 1 wt%, the stability of the formulation may be impaired.
  • the weight ratio of the adenosine triphosphate and cyanocobalamin may be 1: 0.001 to 10, preferably 1: 0.05 to 5, more preferably 1: 0.01 to 1, even more preferably 1: 0.02 to 0.5, and most preferably 1: 0.03 to 0.1 (adenosine triphosphate: cyanocobalamin).
  • the two components are included in the weight ratio range, the effect of improving skin elasticity or improving skin wrinkles can be significantly increased.
  • the skin elasticity enhancement may mean improving the elasticity of the skin by increasing the amount of collagen and elastin in the dermal tissue.
  • the collagen is a collagenous fibrous protein that accounts for 90% of the dermis, and can provide mechanical strength of the skin, resistance of the connective tissue, and binding strength of the tissue.
  • the elastin is a protein with very high elasticity, and can form a mesh structure with collagen to provide elasticity to the skin.
  • the improvement of skin wrinkles may mean preventing or improving wrinkles of the skin caused by aging or external factors by increasing the amount of collagen and elastin in the dermis.
  • the composition can exhibit an effect of improving skin elasticity or wrinkles by inhibiting the expression of MMP1 and MMP3 in the dermis. That is, the composition can increase the amount of collagen in the dermis by inhibiting MMPs that decompose collagen, thereby improving the cohesiveness and firmness of skin tissue, thereby improving skin elasticity and improving wrinkles.
  • the composition for improving skin elasticity or improving skin wrinkles may be a cosmetic composition.
  • the cosmetic composition may further include conventional excipients and carriers, such as conventionally used antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments, or fragrances.
  • the cosmetic composition may further include excipients, such as glycerin, butylene glycol, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, tocopheryl acetate, citric acid, panthenol, squalane, sodium citrate, or allantoin.
  • the cosmetic composition since the cosmetic composition is basically applied to the skin, it can be manufactured in any formulation that is commonly manufactured with reference to cosmetic compositions in the art.
  • it can be formulated as a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, or spray, but is not limited thereto.
  • it can be manufactured in the form of a flexible toner, a nourishing toner, a nourishing cream, a massage cream, an essence, an eye cream, a spray, or a powder.
  • the carrier component may include animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tragacanth, cellulose derivatives, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, or zinc oxide.
  • the carrier component when the cosmetic composition is in the form of a powder or spray, the carrier component may include lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, or polyamide powder, and particularly, in the case of a spray, the carrier component may additionally include a propellant such as chlorofluorohydrocarbon, propane/butane, or dimethyl ether.
  • a propellant such as chlorofluorohydrocarbon, propane/butane, or dimethyl ether.
  • the carrier component may include a solvent, a solubilizer, or an emulsifier, and specifically, water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1,3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol, or fatty acid ester of sorbitan.
  • the carrier component may include a liquid diluent such as water, ethanol, or propylene glycol; a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester, or polyoxyethylene sorbitan ester; microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar, or tragacanth.
  • a liquid diluent such as water, ethanol, or propylene glycol
  • a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester, or polyoxyethylene sorbitan ester
  • microcrystalline cellulose aluminum metahydroxide, bentonite, agar, or tragacanth.
  • the composition for improving skin elasticity or improving skin wrinkles may be a health functional food composition.
  • the health functional food may include a food additive acceptable from a food science perspective, and may further include an appropriate carrier, excipient, or diluent commonly used in the manufacture of health functional foods.
  • the health functional food composition can be used as a food additive, in which case the composition can be added as it is or used together with other foods or food ingredients according to a conventional method.
  • the amount of the active ingredient mixed can be appropriately determined depending on the purpose of use (prevention, health or therapeutic treatment).
  • Examples of the types of the health functional food include dairy products including ice cream, various soups, beverages, tea, drinks, alcoholic beverages, and vitamin complexes.
  • the health functional food composition can include various nutrients, vitamins, electrolytes, flavoring agents, coloring agents, pectic acid and its salts, alginic acid and its salts, organic acids, protective colloid thickeners, pH regulators, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohol, or carbonating agents used in carbonated beverages.
  • the present disclosure provides a method for improving skin elasticity or wrinkles, comprising a step of applying a composition for improving skin elasticity or wrinkles, comprising adenosine triphosphate and cyanocobalamin, to skin.
  • a composition for improving skin elasticity or wrinkles comprising adenosine triphosphate and cyanocobalamin.
  • the same technical features as those of the composition for improving skin elasticity or wrinkles, may be applied to the method.
  • All of the ingredients described in the present disclosure preferably do not exceed the maximum usage levels specified in relevant laws and regulations of Korea, China, the United States, Europe, Japan, etc. (e.g., Regulations on Cosmetic Safety Standards (Korea), Cosmetic Safety Technical Standards (China), Food Code (Korea), Food Additives Code (Korea), Health Functional Food Code (Korea)). That is, preferably, the cosmetic or health functional food composition according to the present disclosure contains the ingredients according to the present invention within the content limits permitted by relevant laws and regulations of each country.
  • composition for improving skin elasticity or wrinkles of the present disclosure exhibits a remarkable synergistic effect in improving skin elasticity or wrinkles through the combination of adenosine triphosphate and cyanocobalamin.
  • Figure 1 is a graph comparing the expression levels of MMP1 or MMP3 when adenosine triphosphate and cyanocobalamin were treated alone or in combination in Experimental Example 1.
  • Figure 2 is a graph comparing the rate of decrease in MMP1 or MMP3 expression when adenosine triphosphate and cyanocobalamin were treated alone or in combination in Experimental Example 1.
  • Figure 3 is a graph comparing the MMP1 expression reduction rate according to the weight ratio of adenosine triphosphate and cyanocobalamin (adenosine triphosphate: cyanocobalamin in that order) in Experimental Example 2.
  • Adenosine triphosphate (disodium adenosine triphosphate) used in the following experimental examples was purchased from the manufacturer Jiangsu Huayu chemical, China (Hanju CNC), and cyanocobalamin was purchased from the manufacturer DSM, China (Serochem).
  • MMP matrix metalloproteinase
  • Human foreskin-derived human fibroblasts (Hs68; human fibroblast, CRL-1635) were purchased from ATCC and used. The purchased cells were cultured in a medium made by adding 10% FBS (fetal bovine serum) and 1% Penicillin/Streptomycin to DMEM (Dulbecco Modified Eagle Medium-GIBCO) in a 5% CO2 incubator at 37°C.
  • FBS fetal bovine serum
  • Penicillin/Streptomycin to fetal bovine serum
  • DMEM Dulbecco Modified Eagle Medium-GIBCO
  • human fibroblasts were seeded at 2* 105 cells/well in a 6-well plate and cultured in a 37°C, 5% CO2 incubator for one day. After replacing the medium with PBS, UVA (365 nm) 10 J/ cm2 was irradiated using an RMX 3W (Vilber Lourmat) device. 10 ppm ATP and 1 ppm cyanocobalamin were added to the medium and cultured under the same conditions for one day.
  • the synergistic effect was determined by the Colby formula. If the effect measurement value (T) according to the combination was better than the Colby formula predicted value (E), it was judged that there was a synergistic effect.
  • the Colby formula is as follows.
  • T Efficacy compared to control when using cyanocobalamin and ATP combination
  • Human foreskin-derived human fibroblasts (Hs68; human fibroblast, CRL-1635) were purchased from ATCC and used. The purchased cells were cultured in a medium made by adding 10% FBS (fetal bovine serum) and 1% Penicillin/Streptomycin to DMEM (Dulbecco Modified Eagle Medium-GIBCO) in a 5% CO2 incubator at 37°C.
  • FBS fetal bovine serum
  • Penicillin/Streptomycin to fetal bovine serum
  • DMEM Dulbecco Modified Eagle Medium-GIBCO
  • human fibroblasts were seeded at 2* 105 cells/well in a 6-well plate and cultured in a 37°C, 5% CO2 incubator for one day. After replacing the medium with PBS, UVA (365 nm) 10 J/ cm2 was irradiated using an RMX 3W (Vilber Lourmat) device. ATP and cyanocobalamin were added to the medium at different weight ratios of 10 ppm: 10 ppm, 10 ppm: 1 ppm, 10 ppm: 0.3 ppm, or 10 ppm: 0.1 ppm (in the order of ATP: cyanocobalamin), and cultured under the same conditions for one day.

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Abstract

본 개시는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물에 관한 것이다. 본 개시의 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물은 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민의 조합을 통해 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선에 현저한 시너지 효과가 발생한다.

Description

피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물
본 출원은 2023년 11월 21일 출원된 대한민국출원 제10-2023-0162485호, 2023년 11월 21일 출원된 대한민국출원 제10-2023-0162486호, 및 2024년 9월 4일 출원된 대한민국출원 제10-2024-0120276호에 기초한 우선권을 주장하며, 해당 출원의 명세서 및 도면에 개시된 모든 내용은 본 출원에 원용된다.
본 개시는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물에 관한 것이다.
고령 인구 증가 및 기대 수명 상승에 따라 피부 탄력 증진 및 주름 개선을 중요시하는　피부　노화 방지에 대한 관심이 더욱 높아지고 있다.　피부는 인체 부피의 약 16%를 차지하는 기관으로, 신체의 가장 바깥에 존재하여 외부 환경 및 자극으로부터 우리 몸을 보호한다. 이러한 피부는 신체 내 기관들에 비해 외부 자극에 항상 노출되어 있기 때문에 쉽게 공격을 받을 수 있고, 특히 얼굴　피부의 경우에는 자외선 및 공해 물질에 직접적으로 노출되어 있으므로 다른 신체　피부에 비해 노화가 발생하기 쉬운 기관이다.
피부노화는 자연히 발생하는 내인성 노화와 외부 요인에 의해 일어나는 외인성 노화로 구분된다. 내인성 노화의 주된 요인으로 유전적인 요인이 언급되며, 이는　피부　세포 및 조직의 구조와 변화를 결정한다. 한편 외인성 노화의 요인은 외부에서 유래된 것으로, 영양 부족, 자외선, 환경오염에 의한 영향 등이 있을 수 있으며 이는 유전적인 요인과 달리 얼마든지 예방 가능하고 피할 수 있는 요인이다.
이러한 요인으로 인해 피부노화가 진행되어, 피부가 건조해지고 거칠어지며 주름 생성 및 탄력　저하 등의 증상이 일어나게 된다. 피부 주름 및　탄력　저하는 진피 내 주 단백질인 콜라겐 및 엘라스틴의 감소 및 변형이 직접적으로 관여하는 것으로 알려져 있다. 즉,　피부 주름의 시작은 진피의 노화에서부터 진행되는 것으로,　탄력　섬유인 엘라스틴의 구조가 변화되어　피부는 늘어지면서 주름이 생기게 된다. 또한, 진피의 콜라겐을 비롯한 결합조직 성분을 분해시키는 MMP(matrix metalloproteinase) 활성 증가로 인해 콜라겐 합성이 저해되어 주름이 증가한다는 연구가 많이 보고되어 있다.
MMP는 활성중심부에 칼슘 의존적인 아연을 함유 금속단백분해효소로서, 생체 내에서 잠재성 전효소(zymogen)형태로 분비된다. MMP는 효소활성을 가지기 위해서 구조적 변형이 일어나 아미노 말단 부위가 절단되어 활성화된다. 활성화된 MMP는 2-매크로글로불린이나 TIMP(tissue inhibitors of metalloproteinase)같은 저해제에 의해 활성이 조절되어, 피부의 각질세포 및 섬유아세포 등을 포함한 대다수의 많은 세포들이 MMP를 분비하게 된다. 이와 같은 MMP는 구조와 기능적 특성에 따라 다양한 하위 패밀리 그룹으로 나누어진다. 그 중 MMP1은 interstitial collagenase로 상처 치유, 조직 재생 및 재조직에 중요한 단백질이다. 또한, MMP3(Stromelysin-1)은 콜라겐, 엘라스틴, 및 피브로넥틴 등을 분해하는 단백질 효소이다. 이러한 MMP1 또는 MMP3은 외인적 또는 내인적 자극에 노출되었을 때, 체내에서 평소보다 많이 생성되어, 콜라겐과 결합 후 콜라겐을 절단하여　피부　주름 및　탄력　저하를 유발하게 된다.
상기와 같은 피부 탄력 저하 또는 피부 주름을 유발하는 요인을 억제함으로써, 피부 탄력 증진 및 주름 개선에 유용한 효과를 나타낼 수 있는 신규 효능 성분의 발굴이 필요한 실정이다.
따라서 본 개시가 해결하고자 하는 과제는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선 효과가 현저하게 우수한 조성물을 제공하는 것이다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 개시의 발명자들이 예의 연구한 결과, 아데노신 삼인산(ATP) 및 시아노코발라민(vitamin B12)의 조합시 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선 효과가 현저하게 상승하는 것을 발견하였다. 본 개시의 발명자들은 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민의 조합 처리시, 놀랍게도 콜라겐 분해효소인 MMP1 발현량 및 MMP3 발현량이 시너지적으로 감소하는 것을 발견하여, 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선 효과가 현저하게 우수함을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
본 개시는 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민을 포함하는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물을 제공한다. 상기 조성물은 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민을 유효성분으로 포함할 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 아데노신 삼인산은 조성물 총 중량 대비 0.0001 내지 20 중량%, 바람직하게 0.001 내지 10 중량%로 포함될 수 있다. 상기 아데노신 삼인산이 조성물 총 중량 대비 0.0001 미만일 경우에는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선 효과가 미약할 수 있으며, 20 중량% 초과일 경우에는 제형의 안정성이 저해될 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 시아노코발라민은 조성물 총 중량 대비 0.00001 내지 1 중량%, 바람직하게 0.00005 내지 0.01 중량%로 포함될 수 있다. 상기 시아노코발라민이 조성물 총 중량 대비 0.00001 미만일 경우에는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선 효과가 미약할 수 있으며, 1 중량% 초과일 경우에는 제형의 안정성이 저해될 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민의 중량비는 1: 0.001 ~ 10, 바람직하게 1: 0.05 ~ 5, 더욱 바람직하게 1:0.01 ~ 1, 더욱 더 바람직하게 1: 0.02 ~ 0.5, 가장 바람직하게 1: 0.03 ~ 0.1(아데노신 삼인산:시아노코발라민)일 수 있다. 상기 두 성분이 상기 중량비 범위로 포함될 때 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선 효과가 현저하게 상승될 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 피부 탄력 증진은 진피 조직의 콜라겐 및 엘라스틴의 양을 증가시켜 피부의 탄력성을 향상시키는 것을 의미할 수 있다. 상기 콜라겐은 진피의 90%를 차지하는 아교질 섬유성 단백질로서, 피부의 기계적 견고성, 결합 조직의 저항력, 및 조직의 결합력 등을 부여할 수 있다. 상기 엘라스틴은 탄력성이 매우 풍부한 단백질로서, 콜라겐과 함께 그물망 구조를 형성하여 피부에 탄력성을 부여할 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 피부 주름 개선은 진피 내 콜라겐 및 엘라스틴의 양을 증가시킴으로써, 노화 또는 외부 요인에 의해 발생한 피부의 주름을 예방 또는 개선하는 것을 의미할 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 조성물은 진피 내에서 MMP1 및 MMP3의 발현을 억제함으로써 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선 효과를 나타낼 수 있다. 즉, 상기 조성물은 콜라겐을 분해하는 MMP를 억제함으로써 진피에서 콜라겐의 양을 증가시킬 수 있고, 이를 통해 피부 조직의 결합력 및 견고성 등을 향상시켜 피부 탄력을 증진시키고 주름을 개선할 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민을 포함하는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물은 화장료 조성물일 수 있다. 상기 화장료 조성물은 통상적으로 사용되는 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 또는 향료 등과 같은 통상적인 보조제 및 담체가 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 상기 화장료 조성물은 글리세린, 부틸렌 글라이콜, 폴리옥시에칠렌 경화피마자유, 토코페릴 아세테이트, 시트릭산, 판테놀, 스쿠알란, 소듐 시트레이트, 또는 알란토인 등의 보조성분을 추가로 더 포함할 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 화장료 조성물은 기본적으로　피부에 도포되는 것이므로, 당업계의 화장료 조성물을 참조하여 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 일례로, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 또는 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 스프레이, 또는 파우더 등의 제형으로 제조될 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는, 담체 성분으로 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 또는 산화아연 등이 포함될 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트, 또는 폴리아미드 파우더 등이 포함될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄, 또는 디메틸 에테르 등의 추진체를 포함할 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로 용매, 용해화제, 또는 유탁화제 등이 포함될 수 있고, 구체적으로 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜, 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 포함될 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로 물, 에탄올, 프로필렌글리콜 등의 액상 희석제; 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르 등의 현탁제; 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가, 또는 트라칸트 등이 포함될 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민을 포함하는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물은 건강기능식품 조성물일 수 있다. 상기 건강기능식품은 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 건강기능식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제, 또는 희석제 등을 더 포함할 수 있다.
본 개시의 한 측면에서, 상기 건강기능식품 조성물은 식품 첨가물로 사용될 수 있고, 이 경우 통상적인 방법에 따라 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 상기 건강기능식품의 종류의 예로 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있다. 상기 건강기능식품 조성물은 상기 외에 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 또는 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있다.
또한, 본 개시는 상기 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민을 포함하는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선 방법을 제공한다. 상기 방법에는 상기 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물과 동일한 기술적 특징이 적용될 수 있다.
본 개시에 기재된 모든 성분은, 바람직하게는, 한국, 중국, 미국, 유럽, 일본 등의 관련 법규, 규범 (예를 들어, 화장품 안전 기준 등에 관한 규정(한국), 화장품 안전 기술 규범(중국), 식품공전(한국), 식품첨가물공전(한국), 건강기능식품공전(한국)) 등에서 규정한 최대사용치를 초과하지 않는다. 즉, 바람직하게, 본 개시에 따른 화장료 또는 건강기능식품 조성물은 각국의 관련 법규, 규범에서 허용되는 함량 한도로 본 발명에 따른 성분들을 포함한다.
본 개시의 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물은 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민의 조합을 통해 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선에 현저한 시너지 효과가 발생한다.
도 1은 실험예 1에서 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민을 각각 단독 또는 조합 처리시 MMP1 또는 MMP3 발현량을 비교하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 실험예 1에서 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민을 각각 단독 또는 조합 처리시 MMP1 또는 MMP3 발현 감소율을 비교하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 실험예 2에서 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민의 중량비(아데노신 삼인산: 시아노코발라민 순)에 따른 MMP1 발현 감소율을 비교하여 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 본 발명이 속한 분야에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
하기 실험예에서 사용된 아데노신 삼인산(disodium adenosine triphosphate)은 제조원 Jiangsu Huayu chemical, 중국 (한주씨앤씨)에서 구매하여 사용하였으며, 시아노코발라민은 제조원 DSM, 중국 (세로켐)에서 구매하여 사용하였다.
실험예 1: 아데노신 삼인산(ATP) 및 시아노코발라민 조합시 피부 탄력 증진 및 피부 주름 개선에 상승 효과 실험
피부 세포에 아데노신 삼인산(ATP) 및 시아노코발라민 병행 사용시, 피부 탄력 증진 및 주름 개선에 미치는 영향을 평가하였다. MMP (matrix metalloproteinase)는 피부 탄력 및 주름에 영향을 주는 인자이며, 본 실험예에서는 MMP1 및 MMP3 2종의 발현 조절에 대한 상승 효과를 평가하였다. MMP는 콜라겐을 분해하는 기질 단백질로 20여종 이상의 종류가 알려져 있고, 콜라겐을 분해하게 되면서 피부 내 탄력이 감소하여 주름을 생성하게 된다. 따라서 MMP 발현을 억제함으로써 피부 탄력을 증진시키고 피부 주름을 개선할 수 있다.
사람 foreskin 유래 인체섬유아세포(Hs68; human fibroblast, CRL-1635)는 ATCC로부터 구매하여 사용하였다. 구입한 세포는 DMEM (Dulbecco Modified Eagle Medium-GIBCO)에 10 % FBS (fetal bovine serum)와 1% Penicillin/Streptomycin을 넣어 만든 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 배양하였다.
MMP1과 MMP3 mRNA 발현 변화 효능을 분석하기 위해 인체섬유아세포를 6 well plate에 2*105 cells/well씩 분주한 후, 37℃, 5% CO2 인큐베이터에 하루 동안 배양하였다. 배지를 PBS로 교체한 후 RMX 3W (Vilber Lourmat) 기기를 사용하여 UVA (365 nm) 10 J/cm2을 조사하였다. ATP 10 ppm 및 시아노코발라민 1 ppm을 배지에 첨가한 후 동일 조건에서 하루 동안 배양하였다. 이 후 AccuPrep Universal RNA Extraction Kit (바이오니아, K-3140)을 이용하여 total RNA를 수득한 후, AccuPower® RocketScriptTM Cycle (바이오니아, K-2202)를 이용하여 cDNA를 합성하였다. 합성한 cDNA 및 taqman probe (assay ID: MMP1 (Hs00899658), MMP3 (Hs00968305))을 이용하여, ABI7500 Real Time PCR로 qPCR을 진행함으로써 MMP1 및 MMP3의 각 유전자의 발현량을 분석하였다.
상승 효과는 콜비(Colby)식에 의해 결정하였다. 조합에 따른 효과 측정치(T)가 콜비식 예측치(E)보다 더 우수할 경우 상승 효과가 있다고 판단하였다. 콜비식은 아래와 같다.
E = (X+Y)-(XХY/100)
X: 시아노코발라민 단독사용시 측정된 대조군 대비 효능
Y: ATP 단독사용시 측정된 대조군 대비 효능
E: 시아노코발라민과 ATP 조합 사용시 대조군 대비 예측 효능
T: 시아노코발라민과 ATP 조합 사용시 측정된 대조군 대비 효능
도 1 및 2에 나타난 실험 결과를 볼 때, UVA를 조사하면 콜라겐 분해 효소인 MMP1 및 MMP3가 증가하는데, 아데노신 삼인산(ATP) 또는 시아노코발라민을 단독 처리시 MMP1 및 MMP3가 다소 감소하는 것을 확인하였다. 특히, 아데노신 삼인산(ATP) 및 시아노코발라민을 조합하여 처리시 MMP1 발현 감소율 및 MMP3 발현 감소율이 각각의 단독 처리군에 비해 현저하게 향상되는 것을 볼 때, 두 성분의 조합에 의해 시너지 효과가 발생함을 알 수 있다.
실험예 2: 아데노신 삼인산(ATP) 및 시아노코발라민 조합의 중량비에 따른 피부 탄력 증진 및 피부 주름 개선에 상승 효과 실험
사람 foreskin 유래 인체섬유아세포(Hs68; human fibroblast, CRL-1635)는 ATCC로부터 구매하여 사용하였다. 구입한 세포는 DMEM (Dulbecco Modified Eagle Medium-GIBCO)에 10 % FBS (fetal bovine serum)와 1% Penicillin/Streptomycin을 넣어 만든 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 배양하였다.
MMP1 mRNA 발현 변화 효능을 분석하기 위해 인체섬유아세포를 6 well plate에 2*105 cells/well씩 분주한 후, 37℃, 5% CO2 인큐베이터에 하루 동안 배양하였다. 배지를 PBS로 교체한 후 RMX 3W (Vilber Lourmat) 기기를 사용하여 UVA (365 nm) 10 J/cm2을 조사하였다. ATP 및 시아노코발라민의 중량비를 각각 10 ppm: 10 ppm, 10 ppm: 1 ppm, 10 ppm: 0.3 ppm, 또는 10 ppm: 0.1 ppm(ATP: 시아노코발라민 순)로 달리하여 배지에 첨가한 후 동일 조건에서 하루 동안 배양하였다.
이 후 AccuPrep Universal RNA Extraction Kit (바이오니아, K-3140)을 이용하여 total RNA를 수득한 후, AccuPower® RocketScriptTM Cycle (바이오니아, K-2202)를 이용하여 cDNA를 합성하였다. 합성한 cDNA 및 taqman probe (assay ID: MMP1 (Hs00899658))을 이용하여, ABI7500 Real Time PCR로 qPCR을 진행함으로써 MMP1의 각 유전자의 발현량을 분석하였다.
도 3에 나타난 실험 결과를 볼 때, ATP 및 시아노코발라민의 중량비가 10 ppm:1 ppm, 10 ppm: 0.3 ppm일 때 콜비 예측값을 초과하여 시너지 효과가 발생함을 확인하였다. 상기 중량비가 10 ppm: 0.1 ppm일 때 콜비 예측값을 초과하지만, 시아노코발라민 0.1 ppm 단독 대비 복합 시 유의차는 없었다.

Claims (7)

  1. 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민을 포함하는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 아데노신 삼인산은 조성물 총 중량 대비 0.0001 내지 20 중량%로 포함되는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 시아노코발라민은 조성물 총 중량 대비 0.00001 내지 1 중량%로 포함되는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 아데노신 삼인산 및 시아노코발라민의 중량비는 1: 0.001 ~ 10 (아데노신 삼인산: 시아노코발라민)인 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 MMP1 및 MMP3의 발현을 억제하는 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 화장료 조성물인 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 건강기능식품 조성물인 피부 탄력 증진 또는 피부 주름 개선용 조성물.
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