WO2023282296A1 - ｐＨ応答性脂質誘導体 - Google Patents

Abstract

本発明は、下記式（ｉ）で表される構造：（上記式中、各記号は明細書に記載のとおりである。） で表されるｐＨ応答性脂質誘導体、および腫瘍組織への低分子薬剤等の送達等を、安全かつ効率よく行うための輸送担体として有用なｐＨ応答性輸送担体を提供する。

Description

ｐＨ応答性脂質誘導体

　本発明は、ｐＨ応答性ポリマーと脂質からなる脂質誘導体に関する。また、腫瘍組織周辺の微細なｐＨ変化をとらえて物性変化することで、高い腫瘍組織集積性を有するドラッグデリバリー用輸送担体に関する。

　核酸医薬品は、従来の低分子や抗体医薬品では標的とすることのできなかった疾患の原因を高い特異性をもって標的とすることが可能であり、多くの疾患領域での創薬が期待されている。核酸医薬品をより効率的に標的細胞へ送達することを目的として、薬物送達システム（Ｄｒｕｇ　Ｄｅｌｉｖｅｒｙ　Ｓｙｓｔｅｍ：ＤＤＳ）の検討がなされている。また、従来の低分子薬剤においても、標的細胞のみへより効率的に薬剤を送達し、副作用などの低減を図る検討がされている。

　これら輸送担体には、一般的にリン脂質あるいはその誘導体、またはステロールやリン脂質以外の脂質、ＰＥＧ脂質などを基本構成成分とした脂質ナノ粒子（Ｌｉｐｉｄ　Ｎａｎｏ　Ｐａｒｔｉｃｌｅ：ＬＮＰ）が用いられる。特にＰＥＧ脂質は担体同士の凝集抑制、体内における血中滞留性の向上の面で重要な役割を果たしている。

　このＰＥＧ脂質による血中滞留性の向上は、ＰＥＧによる水和層が担体表面を覆うことにより、血清タンパク吸着などのオプソニン化が抑制され、その結果、マクロファージによる貪食と細網内皮系組織による取り込みを回避できることに基づいている（以下、ステルス性と記載する）。これにより正常組織及び血液成分との無作為な相互作用を抑制するステルス性を発揮する一方で、血液成分や正常組織との相互作用だけでなく、腫瘍組織との相互作用も抑制し、腫瘍組織への集積性や細胞内への取り込み効率が低下する場合がある。

　一般的に腫瘍組織への集積性や細胞内への取り込み効率向上を目的として、抗体や抗体フラグメントを付与した輸送担体の開発が報告されている（例えば、特許文献１）。これらは抗体等により標的指向性が付与され特定の細胞腫等へ輸送可能であるが、適した抗体等を選定する必要があるため標的細胞種の汎用性に乏しく、また抗体等は生産コストが高いため、それに応じて該輸送担体のコストもまた高くなる。

　また特許文献２では、温度応答性ポリマーを用いた細胞内核酸送達用リポソームの利用が開示されている。該リポソームは温度変化により、親水性から疎水性へと変化することで、細胞膜との親和性が上がり、集積性や取り込み効率が向上することが報告されている。しかし、温度変化が必要であることから付帯設備等が必要となる場合があり、また温度応答性ポリマーがビニル系ポリマーであることから、生体内での分解が期待できず、医薬品としての安全性の面でも懸念が残る。さらに該開示技術では担体はリポソームのみに限定され、かつ薬物も核酸医薬品に限定される。

　非特許文献１ではＰＥＧ残基とリン脂質の残基との間に酸性条件下で分解するコハク酸骨格を配置したリン脂質誘導体を含むリポソームが開示されている。該リポソームはｐＨ５～６の酸性条件で、親水性から疎水性へと変化することで、細胞膜との親和性が上がり、集積性や取り込み効率が向上することが報告されている。しかし、腫瘍組織周辺のｐＨは弱酸性（ｐＨ６．５程度）であることが知られており、腫瘍組織周辺で所望の効果が得られない恐れがある。さらにｐＨに応答するリポソームの場合、薬剤調製時の分解や保管時の分解といった保存安定性の面で問題があることがある。

　以上の通り、腫瘍組織へのドラッグデリバリー用輸送担体においては、腫瘍組織周辺の微細なｐＨ変化をとらえて物性が変化し、低分子薬剤・核酸医薬品を内包可能で、かつ生体内で分解可能な技術が望まれていた。

ＷＯ２０１０／０９０２２２ ＷＯ２０１６／１９９８９５

Ｌａｎｇｍｕｉｒ、２０１１年、２７、ｐ．１０５５６－１０５６１

　本発明では腫瘍組織への低分子薬剤等の送達や核酸医薬品等の腫瘍細胞へのトランスフェクションを、安全かつ効率よく行うことができる導入システムを達成できる輸送担体として有効なｐＨ応答性輸送担体、さらにはそのような輸送担体を形成するために有用なｐＨ応答性脂質誘導体を提供することを目的とする。

　本発明者らは、上記課題の解決に向けて鋭意検討を行った結果、本発明を完成した。具体的には、本発明は、以下の通りである。
１．ｐＨ応答性脂質誘導体
［１］下記式（ｉ）で表される構造：

ここで：
Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４のアシル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇ、ｎはそれぞれ独立して１または２であり、
ｍは５から３００であり、
Ｒ^ａはＨ、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である、
で表されるｐＨ応答性脂質誘導体（ｐＨ応答性脂質誘導体（ｉ）とも表記する）。
［２］下記式（１）で表される構造：

ここで：
Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４のアシル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇ、ｎはそれぞれ独立して１または２であり、
ｍは５から３００である、
で表される、上記［１］に記載のｐＨ応答性脂質誘導体（ｐＨ応答性脂質誘導体（１）とも表記する）。
［３］下記式（１－１）で表される構造：

ここで：
Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４のアシル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇ、ｎはそれぞれ独立して１または２であり、
ｍは５から３００であり、
Ｒ^ｂは－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である、
で表される、上記［１］に記載のｐＨ応答性脂質誘導体（ｐＨ応答性脂質誘導体（１－１）とも表記する）。
［４］前記式（ｉ）、前記式（１）または前記式（１－１）中、
Ｘが下記式（２）で表される連結基である、
上記［１］～［３］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。

（式（２）中、Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、ｐ１、ｐ２、ｐ３はそれぞれ独立して０または１であり、ｑ１、ｑ２はそれぞれ独立して、０から５０である。）
［５］前記式（ｉ）、前記式（１）または前記式（１－１）中、
ｍが５から１５０である、
上記［１］～［４］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［６］前記式（ｉ）、前記式（１）または前記式（１－１）中、
ｇ、ｈがそれぞれ２であり、Ａがカルボキシ基である、
上記［１］～［５］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［７］前記式（ｉ）、前記式（１）または前記式（１－１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基であり、
ｂ、ｎがそれぞれ１であり、
ｄが０である、
上記［１］～［６］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［８］前記式（ｉ）、前記式（１）または前記式（１－１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基であり、
Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ａがカルボキシ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｎがそれぞれ１であり、
ｃ、ｄ、ｅ、ｆがそれぞれ０であり、
ｇ、ｈがそれぞれ２である、
上記［１］～［３］、［５］～［７］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［９］前記式（ｉ）、前記式（１）または前記式（１－１）中、
Ｒ^１がステロール残基であり、ａ１、ｂ、ｃ、ｄがそれぞれ０である、
上記［１］～［８］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［１０］前記式（ｉ）、前記式（１）または前記式（１－１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアシル基であり、
Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂが水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
ｆが２から５の整数であり、かつ、
Ｘが前記式（２）中、
Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１である、
上記［１］～［７］、［９］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［１１］前記式（ｉ）、前記式（１）または前記式（１－１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアシル基であり、
Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂが水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
ｆが２から５の整数であり、かつ、
Ｘが前記式（２）中、
Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚが環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１であり、
ｑ２が０から５である、
上記［１］～［７］、［９］～［１０］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［１２］前記式（ｉ）、前記式（１）または前記式（１－１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアシル基であり、
Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
ｆが２から５の整数であり、かつ、
Ｘが前記式（２）中、
Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚが環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１であり、
ｑ１が０から５である、
上記［１］～［７］、［９］～［１１］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［１３］前記式（ｉ）、前記式（１）または前記式（１－１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアシル基であり、
Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂが水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ａがカルボキシ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
ｆが２から５の整数であり、
ｇ、ｈがそれぞれ２であり、かつ、
Ｘが前記式（２）中、
Ｘ^１、Ｘ^２は炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚは環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１であり、
ｑ１、ｑ２がそれぞれ独立して、０から５である、
上記［１］～［７］、［９］～［１２］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［１４］前記式（ｉ）、前記式（１）または前記式（１－１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基または炭素数８から２４のアシル基であり、
ｂ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
ｄが０であり、
ｆが２から５の整数であり、かつ、
Ｘが前記式（２）中、
Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１である、
上記［１］～［７］、［９］～［１３］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［１５］前記式（ｉ）、前記式（１）または前記式（１－１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基または炭素数８から２４のアシル基であり、
Ａがカルボキシ基であり、
ｂ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
ｄが０であり、
ｆが２から５の整数であり、
ｇ、ｈがそれぞれ２であり、かつ、
Ｘが前記式（２）中、
Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚが環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１であり、
ｑ１、ｑ２がそれぞれ独立して、０から５である、
上記［１］～［７］、［９］～［１４］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。

２．ｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法
[１６]下記式（４７－ｉ）中Ｒ^ａがＨの場合は、下記工程（Ａ）、工程（Ｂ）及び工程（Ｃ）をその順で実施することを特徴とし、（４７－ｉ）中Ｒ^ａが－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）の場合は、下記工程（Ａ１）、工程（Ｂ）及び工程（Ｃ）をその順で実施することを特徴とする（４７－ｉ）で表される構造：

ここで：
Ｒ^１ａ、Ｒ^２ａはそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇ、ｎはそれぞれ独立して１または２であり、
ｍは５から３００であり、
Ｒ^ａはＨ、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である、
で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法。
［工程（Ａ）］
　下記式（３）で表される重合開始剤と下記式（４）で表されるα－アミノ酸－Ｎ－カルボン酸無水物とを用いて開環重合することにより下記式（５）で表されるポリマーを得る工程。

（式（３）中、各記号は前記のとおりである。）

（式（４）中、Ｐ^１はカルボキシ基の保護基を表し、ｇは１または２である。）

（式（５）中、各記号は前記のとおりである。）
［工程（Ａ１）］
　下記式（３）で表される重合開始剤と下記式（４）で表されるα－アミノ酸－Ｎ－カルボン酸無水物とを用いて開環重合することにより下記式（５）で表されるポリマーを得て、
さらに得られたポリマーの末端アミノ基に－ＣＯＣＨ_３または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）を導入して、下記式（５－１）で表されるポリマーを得る工程。

（式（３）中、各記号は前記のとおりである。）

（式（４）中、Ｐ^１はカルボキシ基の保護基を表し、ｇは１または２である。）

（式（５）中、各記号は前記のとおりである。）

（式（５－１）中、Ｒ^ｂは－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）であり、その他記号は前記のとおりである。）
［工程（Ｂ）］
　前記工程（Ａ）もしくは前記工程（Ａ１）で得られた下記式（５－ｉ）で表されるポリマー（前記式（５）で表されるポリマーと前記式（５－１）で表されるポリマーを包括して表記する）と、下記式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体とを反応させることで下記式（７－ｉ）で表されるポリマーを得る工程。

（式（５－ｉ）中、各記号は前記のとおりである。）

（式（６）中、Ｐ^２は保護されたカルボキシ基または保護されたスルホ基を表し、ｈは前記のとおりである。）

（式（７－ｉ）中、各記号は前記のとおりである。）
［工程（Ｃ）］
　前記工程（Ｂ）で得られた前記式（７－ｉ）で表されるポリマーを脱保護させることで前記式（４７－ｉ）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程。
[１７]下記工程（Ｄ）を実施することを特徴とする、下記式（３６－ｉ）で表される構造：

ここで：
Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４のアシル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇは１または２であり、
ｍは５から３００であり、
Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２はそれぞれ独立して０または１であり、
ｑ１、ｑ２はそれぞれ独立して、０から５０であり、
Ｒ^ａはＨ、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である、
で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法。
［工程（Ｄ）］
　下記式（８）で表される官能基含有脂質と下記式（９－ｉ）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーとを反応させることにより前記式（３６－ｉ）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程。

（式（８）中、Ｙ^１は下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）

（式（９－ｉ）中、Ｙ^２は前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）
[１８]下記工程（Ｅ）、工程（Ｆ）及び工程（Ｇ）をその順で実施することを特徴とする、下記式（４６－ｉ）で表される構造：

ここで：
Ｒ^１ａ、Ｒ^２ａはそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または分岐していてもよい炭素数３から７の炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇは１または２であり、
ｍは５から３００であり、
Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２はそれぞれ独立して０または１であり、
ｑ１、ｑ２はそれぞれ独立して、０から５０であり、
Ｒ^ａはＨ、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である、
で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法。
［工程（Ｅ）］
　下記式（１０）で表される官能基含有脂質と下記式（１１－ｉ）で表されるポリマーとを反応させることにより下記式（１２－ｉ）で表されるポリマーを得る工程。

（式（１０）中、Ｙ^１は下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）

（式（１１－ｉ）中、Ｐ^１はカルボキシ基の保護基を表し、Ｙ^２は前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）

（式（１２－ｉ）中、各記号は前記のとおりである。）
［工程（Ｆ）］
　前記工程（Ｅ）で得られた前記式（１２－ｉ）で表されるポリマーと、前記式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体とを反応させることで下記式（１３－ｉ）で表されるポリマーを得る工程。

（式（１３－ｉ）中、Ｐ^２は保護されたカルボキシ基または保護されたスルホ基を表し、その他記号は前記のとおりである。）
［工程（Ｇ）］
　前記工程（Ｆ）で得られた前記式（１３－ｉ）で表されるポリマーを脱保護させることで前記式（４６－ｉ）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程。

［１９］下記工程（Ａ２）、工程（Ｂ１）及び工程（Ｃ１）をその順で実施することを特徴とする、下記式（４７）で表される構造：

ここで：
Ｒ^１ａ、Ｒ^２ａはそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇ、ｎはそれぞれ独立して１または２であり、
ｍは５から３００である、
で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法。
［工程（Ａ２）］
　下記式（３）で表される重合開始剤と下記式（４）で表されるα－アミノ酸－Ｎ－カルボン酸無水物とを用いて開環重合することにより下記式（５）で表されるポリマーを得る工程。

（式（３）中、各記号は前記のとおりである。）

（式（４）中、Ｐ^１はカルボキシ基の保護基を表し、ｇは１または２である。）

（式（５）中、各記号は前記のとおりである。）
［工程（Ｂ１）］
　前記工程（Ａ２）で得られた前記式（５）で表されるポリマーと、下記式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体とを反応させることで下記式（７）で表されるポリマーを得る工程。

（式（６）中、Ｐ^２は保護されたカルボキシ基または保護されたスルホ基を表し、ｈは前記のとおりである。）

（式（７）中、各記号は前記のとおりである。）
［工程（Ｃ１）］
　前記工程（Ｂ１）で得られた前記式（７）で表されるポリマーを脱保護させることで前記式（４７）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程。
［２０］下記工程（Ｄ１）を実施することを特徴とする、下記式（３６）で表される構造：

ここで：
Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４のアシル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇは１または２であり、
ｍは５から３００であり、
Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２はそれぞれ独立して０または１であり、
ｑ１、ｑ２はそれぞれ独立して、０から５０である、
で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法。
［工程（Ｄ１）］
　下記式（８）で表される官能基含有脂質と下記式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーとを反応させることにより前記式（３６）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程。

（式（８）中、Ｙ^１は下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）

（式（９）中、Ｙ^２は前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）
［２１］下記工程（Ｅ１）、工程（Ｆ１）及び工程（Ｇ１）をその順で実施することを特徴とする、下記式（４６）で表される構造：

ここで：
Ｒ^１ａ、Ｒ^２ａはそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または分岐していてもよい炭素数３から７の炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇは１または２であり、
ｍは５から３００であり、
Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２はそれぞれ独立して０または１であり、
ｑ１、ｑ２はそれぞれ独立して、０から５０である、
で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法。
［工程（Ｅ１）］
　下記式（１０）で表される官能基含有脂質と下記式（１１）で表されるポリマーとを反応させることにより下記式（１２）で表されるポリマーを得る工程。

（式（１０）中、Ｙ^１は下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）

（式（１１）中、Ｐ^１はカルボキシ基の保護基を表し、Ｙ^２は前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）

（式（１２）中、各記号は前記のとおりである。）
［工程（Ｆ１）］
　前記工程（Ｅ１）で得られた前記式（１２）で表されるポリマーと、前記式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体とを反応させることで下記式（１３）で表されるポリマーを得る工程。

（式（１３）中、Ｐ^２は保護されたカルボキシ基または保護されたスルホ基を表し、その他記号は前記のとおりである。）
［工程（Ｇ１）］
　前記工程（Ｆ１）で得られた前記式（１３）で表されるポリマーを脱保護させることで前記式（４６）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程。

［２２］下記工程（Ａ３）、工程（Ｂ２）及び工程（Ｃ２）をその順で実施することを特徴とする、下記式（４７－１）で表される構造：

ここで：
Ｒ^１ａ、Ｒ^２ａはそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇ、ｎはそれぞれ独立して１または２であり、
ｍは５から３００であり、
Ｒ^ｂは－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である、
で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法。
［工程（Ａ３）］
　下記式（３）で表される重合開始剤と下記式（４）で表されるα－アミノ酸－Ｎ－カルボン酸無水物とを用いて開環重合することにより下記式（５）で表されるポリマーを得て、
さらに得られたポリマーの末端アミノ基に－ＣＯＣＨ_３または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）を導入して、下記式（５－１）で表されるポリマーを得る工程。

（式（３）中、各記号は前記のとおりである。）

（式（４）中、Ｐ^１はカルボキシ基の保護基を表し、ｇは１または２である。）

（式（５）中、各記号は前記のとおりである。）

（式（５－１）中、Ｒ^ｂは－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）であり、その他記号は前記のとおりである。）
［工程（Ｂ２）］
　前記工程（Ａ３）で得られた前記式（５－１）で表されるポリマーと、下記式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体とを反応させることにより下記式（７－１）で表されるポリマーを得る工程。

（式（６）中、Ｐ^２は保護されたカルボキシ基または保護されたスルホ基を表し、ｈは前記のとおりである。）

（式（７－１）中、各記号は前記のとおりである。）
［工程（Ｃ２）］
　前記工程（Ｂ２）で得られた前記式（７－１）で表されるポリマーを脱保護させることで前記式（４７－１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程。
［２３］下記工程（Ｄ２）を実施することを特徴とする、下記式（３６－１）で表される構造：

ここで：
Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４のアシル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇは１または２であり、
ｍは５から３００であり、
Ｒ^ｂはＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）であり、
Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２はそれぞれ独立して０または１であり、
ｑ１、ｑ２はそれぞれ独立して、０から５０である、
で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法。
［工程（Ｄ２）］
　下記式（８）で表される官能基含有脂質と下記式（９－１）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーとを反応させることにより前記式（３６－１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程。

（式（８）中、Ｙ^１は下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）

（式（９－１）中、Ｙ^２は前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）
［２４］下記工程（Ｅ２）、工程（Ｆ２）及び工程（Ｇ２）をその順で実施することを特徴とする、下記式（４６－１）で表される構造：

ここで：
Ｒ^１ａ、Ｒ^２ａはそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または分岐していてもよい炭素数３から７の炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇは１または２であり、
ｍは５から３００であり、
Ｒ^ｂは－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）であり、
Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２はそれぞれ独立して０または１であり、
ｑ１、ｑ２はそれぞれ独立して、０から５０である、
で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法。
［工程（Ｅ２）］
　下記式（１０）で表される官能基含有脂質と下記式（１１－１）で表されるポリマーとを反応させることにより下記式（１２－１）で表されるポリマーを得る工程。

（式（１０）中、Ｙ^１は下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）

（式（１１－１）中、Ｐ^１はカルボキシ基の保護基を表し、Ｙ^２は前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）

（式（１２－１）中、各記号は前記のとおりである。）
［工程（Ｆ２）］
　前記工程（Ｅ２）で得られた前記式（１２－１）で表されるポリマーと、前記式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体とを反応させることで下記式（１３－１）で表されるポリマーを得る工程。

（式（１３－１）中、Ｐ^２は保護されたカルボキシ基または保護されたスルホ基を表し、その他記号は前記のとおりである。）
［工程（Ｇ２）］
　前記工程（Ｆ２）で得られた前記式（１３－１）で表されるポリマーを脱保護させることで前記式（４６－１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程。

３．ｐＨ応答性脂質誘導体（ｉ）を含むドラッグデリバリー用輸送担体
［２５］上記［１］～［１５］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体を、０．１から３０ｍｏｌ％含むドラッグデリバリー用輸送担体。
［２６］固体脂質ナノ粒子である、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
［２７］下記式（Ｆ１）で表されるゼータ電位の差（Ｑ）が２．５ｍＶ以上であることを特徴とする、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
　式（Ｆ１）：Ｑ＝（ｐＨ６．５におけるゼータ電位）―（ｐＨ７．４におけるゼータ電位）
［２８］前記式（Ｆ１）で表されるゼータ電位の差（Ｑ）が２．５ｍＶ以上かつ、ｐＨ６．５におけるゼータ電位が０より大きいことを特徴とする、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
［２９］粒子径が１０から２００ｎｍである、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
［３０］前記ドラッグデリバリー用輸送担体が、リン脂質をさらに含む、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
［３１］前記ドラッグデリバリー用輸送担体が、カチオン性脂質をさらに含む、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
［３２］前記カチオン性脂質が、ＤＯＴＡＰ（１，２－ジオレオイルオキシ－３－トリメチルアンモニウムプロパン）またはＤＯＤＡＰ（ジオレオイル－３－ジメチルアンモニウムプロパン）である、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
［３３］前記ドラッグデリバリー用輸送担体が、ステロールをさらに含む、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
［３４］上記［１］～［１５］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体を、０．１から３０ｍｏｌ％、リン脂質を０から６０ｍｏｌ％、カチオン性脂質を１から６０ｍｏｌ％、ステロールを０から４０ｍｏｌ％含む、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
［３５］輸送薬剤が核酸誘導体である、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
［３６］輸送薬剤がペプチドである、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
［３７］輸送薬剤が低分子薬剤または抗がん剤である、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
［３８］ｐＨ応答性脂質誘導体が、上記［２］に記載のｐＨ応答性脂質誘導体である、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
［３９］ｐＨ応答性脂質誘導体が、上記［３］に記載のｐＨ応答性脂質誘導体である、上記［２５］に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。

　本発明のｐＨ応答性脂質誘導体の別の好ましい態様として、例えば、以下のものを挙げることができる。
［１Ａ］下記式（１）で表される構造： 

ここで：
Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４のアシル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇ、ｎはそれぞれ独立して１または２であり、
ｍは５から３００である、
で表されるｐＨ応答性脂質誘導体。
［２Ａ］前記式（１）中、Ｘが下記式（２）で表される連結基である、
上記［１Ａ］に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。

（式（２）中、Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、ｐ１、ｐ２、ｐ３はそれぞれ独立して０または１であり、ｑ１、ｑ２はそれぞれ独立して、０から５０である。）
［３Ａ］前記式（１）中、ｍが５から１５０である、
上記［１Ａ］または［２Ａ］に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［４Ａ］前記式（１）中、ｇ、ｈがそれぞれ２であり、Ａがカルボキシ基である、
上記［１Ａ］～［３Ａ］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［５Ａ］前記式（１）中、Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基であり、
ｂ、ｎがそれぞれ１であり、
ｄが０である、
上記［１Ａ］～［４Ａ］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［６Ａ］前記式（１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基であり、
Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ａがカルボキシ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｎがそれぞれ１であり、
ｃ、ｄ、ｅ、ｆがそれぞれ０であり、
ｇ、ｈがそれぞれ２である、
上記［１Ａ］～［５Ａ］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［７Ａ］前記式（１）中、Ｒ^１がステロール残基であり、ａ１、ｂ、ｃ、ｄがそれぞれ０である、
上記［１Ａ］～［４Ａ］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［８Ａ］前記式（１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアシル基であり、
Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂが水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
ｆが２から５の整数であり、かつ、
Ｘが前記式（２）中、
Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１である、
上記［１Ａ］～［４Ａ］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［９Ａ］前記式（１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアシル基であり、
Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂが水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
ｆが２から５の整数であり、かつ、
Ｘが前記式（２）中、
Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚが環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１であり、
ｑ２が０から５である、
上記［１Ａ］～［４Ａ］または［８Ａ］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［１０Ａ］前記式（１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアシル基であり、
Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
ｆが２から５の整数であり、かつ、
Ｘが前記式（２）中、
Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚが環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１であり、
ｑ１が０から５である、
上記［１Ａ］～［４Ａ］、［８Ａ］または［９Ａ］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［１１Ａ］前記式（１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアシル基であり、
Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂが水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ａがカルボキシ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
ｆが２から５の整数であり、
ｇ、ｈがそれぞれ２であり、かつ、
Ｘが前記式（２）中、
Ｘ^１、Ｘ^２は炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚは環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１であり、
ｑ１、ｑ２がそれぞれ独立して、０から５である、
上記［１Ａ］～［４Ａ］または［８Ａ］～［１０Ａ］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［１２Ａ］前記式（１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基または炭素数８から２４のアシル基であり、
ｂ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
ｄが０であり、
ｆが２から５の整数であり、かつ、
Ｘが前記式（２）中、
Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１である、
上記［１Ａ］～［４Ａ］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
［１３Ａ］前記式（１）中、
Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基または炭素数８から２４のアシル基であり、
Ａがカルボキシ基であり、
ｂ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
ｄが０であり、
ｆが２から５の整数であり、
ｇ、ｈがそれぞれ２であり、かつ、
Ｘが前記式（２）中、
Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
Ｚが環化付加反応により形成される基であり、
ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１であり、
ｑ１、ｑ２がそれぞれ独立して、０から５である、
上記［１Ａ］～［４Ａ］または［１２Ａ］のいずれかに記載のｐＨ応答性脂質誘導体。

　本発明のｐＨ応答性脂質誘導体は、中性条件下（ｐＨ７．４）では電気的に中性となり、腫瘍組織周辺の弱酸性条件下（ｐＨ６．５）ではカチオン性へと変化する特性を有している。本発明のｐＨ応答性脂質誘導体を含む球状ミセルやリポソームに代表されるドラッグデリバリー用輸送担体は、生体内で中性環境下である血液成分や正常組織にはステルス性を示し、腫瘍組織周辺では微細なｐＨ変化に応答してカチオン性が増大することで腫瘍組織への集積効率及び取り込み効率が向上する。その結果、輸送担体中に内包された低分子薬剤や核酸医薬品を腫瘍組織周辺部で放出することや腫瘍細胞内に効率的に導入することができる。

　さらに本発明のｐＨ応答性脂質誘導体は生体内に含まれるアミノ酸の重合体により構成されている。従って、低分子薬剤や核酸医薬品の送達後は生体内で分解され、生体内で蓄積されない。

　本発明によれば、低分子薬剤や核酸医薬品等の腫瘍組織周辺への送達及び腫瘍細胞へのトランスフェクションを、安全かつ効率よく行うことができる導入システムを達成できる輸送担体として有効なｐＨ応答性輸送担体、さらにはそのような輸送担体を形成するために有用なｐＨ応答性脂質誘導体を提供することが可能となる。

図１は、後記の実験例１における、試験に供されたポリマーのヘパリン共存下のｐＨ応答性の評価結果を示す。 図２は、後記の実験例３における、試験に供された粒子からのｓｉＲＮＡの細胞への取り込みの程度を示す。 図３は、後記の実験例４における、試験に供された粒子からのｓｉＲＮＡの腫瘍集積性の評価結果を示す。 図４は、後記の実験例５における、試験に供された粒子を用いたｓｉＰＬＫ１の抗腫瘍性効果の評価結果を示す。

　以下、本発明の好適な実施形態について詳細に説明する。
＜ｐＨ応答性脂質誘導体＞
　本発明のｐＨ応答性脂質誘導体（ｉ）は、以下の構造により表される。

ここで：
Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４
のアシル基、またはステロール残基であり、
Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基であり、
Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅはそれぞれ独立して、０または１であり、
ｆは０から５の整数であり、
ｈは１から３の整数であり、
ｇ、ｎはそれぞれ独立して１または２であり、
ｍは５から３００であり、
Ｒ^ａはＨ、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である、
で表されるｐＨ応答性脂質誘導体。

　ｐＨ応答性脂質誘導体（ｉ）には、２つの好ましい実施態様である（Ａ）ｐＨ応答性脂質誘導体（１）および（Ｂ）ｐＨ応答性脂質誘導体（１―１）が包含される。これら３つの誘導体は構造的にはＲ^ａにおいてのみ異なっている。即ち、（Ａ）ｐＨ応答性脂質誘導体（１）では、好ましい実施態様の一つとして、Ｒ^ａがＨであり、（Ｂ）ｐＨ応答性脂質誘導体（１－１）では、好ましい他の実施態様として、Ｒ^ａが－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）であり、ｐＨ応答性脂質誘導体（ｉ）では、両者を包括するものとして、Ｒ^ａがＨ、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）であって、その他の構造的特徴（Ｒ^１、Ｒ^２、Ｍ、Ｂ、Ｘ、Ａ、ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｈ、ｇ、ｎおよびｍ）は、３つの誘導体において共通している。
　従って、以下では、本発明のｐＨ応答性脂質誘導体（ｉ）を、それを代表するものとして（Ａ）ｐＨ応答性脂質誘導体（１）を具体例にとって説明することとする。当業者であれば、当該説明に基づいて、ｐＨ応答性脂質誘導体（ｉ）およびｐＨ応答性脂質誘導体（１－１）についても同様に理解することができる。

（Ａ）ｐＨ応答性脂質誘導体（１）
　本発明のｐＨ応答性脂質誘導体は下記式（１）で表される。

　式（１）中、Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４のアシル基、またはステロール残基である。
　式（１）中、Ｒ^１、Ｒ^２で示される炭素数８から２４のアルキル基は、直鎖型であっても分岐型であっても良く、不飽和結合を含んでいても良い。具体的にはオクチル基、ノニル基、デシル基、ウンデシル基、ドデシル基、トリデシル基、テトラデシル基、ペンタデシル基、ヘキサデシル基、ヘプタデシル基、オクタデシル基、ノナデシル基、イコシル基、ヘンイコシル基、ドコシル基、オクテニル基、ノネニル基、デセニル基、ウンデセニル基、ドデセニル基、トリデセニル基、テトラデセニル基、ペンタデセニル基、ヘキサデセニル基、ヘプタデセニル基、オクタデセニル基、ノナデセニル基、イコセニル基、ヘンイコセニル基、ドコセニル基、オクタジエニル基、ノナジエニル基、デカジエニル基、ウンデカジエニル基、ドデカジエニル基、トリデカジエニル基、テトラデカジエニル基、ペンタデカジエニル基、ヘキサデカジエニル基、ヘプタデカジエニル基、オクタデカジエニル基、ノナデカジエニル基、イコサジエニル基、ヘンイコサジエニル基、ドコサジエニル基、オクタデカトリエニル基、イコサトリエニル基、イコサテトラエニル基、イコサペンタエニル基、ドコサヘキサエニル基、イソステアリル基、テトラメチルヘキサデセニル基（フィチル基）等が挙げられ、好ましくはデシル基、ドデシル基、テトラデシル基、ヘキサデシル基、オクタデシル基、イコシル基、デセニル基、ドデセニル基、テトラデセニル基、ヘキサデセニル基、オクタデセニル基、イコセニル基、デカジエニル基、ドデカジエニル基、テトラデカジエニル基、ヘキサデカジエニル基、オクタデカジエニル基、イコサジエニル基等の炭素数１０～２０の脂肪族炭化水素基であり、より好ましくはテトラデシル基、ヘキサデシル基、オクタデシル基、イコシル基等の炭素数１４～２０の脂肪族炭化水素基である。

　式（１）中、Ｒ^１、Ｒ^２で示される炭素数８から２４のアシル基は、直鎖型であっても分岐型であってもよく、不飽和結合を含んでいてもよい。具体的にはオクタノイル基、ノナノイル基、デカノイル基、ウンデカノイル基、ドデカノイル基、トリデカノイル基、テトラデカノイル基、ペンタデカノイル基、ヘキサデカノイル基、ヘプタデカノイル基、オクタデカノイル基、ノナデカノイル基、イコサノイル基、ヘンイコサノイル基、ドコサノイル基、オクタエノイル基、ノナエノイル基、デカエノイル基、ウンデカエノイル基、ドデカエノイル基、トリデカエノイル基、テトラデカエノイル基、ペンタデカエノイル基、ヘキサデカエノイル基、ヘプタデカエノイル基、オクタデカエノイル基、ノナデカエノイル基、イコサエノイル基、ヘンイコサエノイル基、ドコサエノイル基、オクタジエノイル基、ノナジエノイル基、デカジエノイル基、ウンデカジエノイル基、ドデカジエノイル基、トリデカジエノイル基、テトラデカジエノイル基、ペンタデカジエノイル基、ヘキサデカジエノイル基、ヘプタデカジエノイル基、オクタデカジエノイル基、ノナデカジエノイル基、イコサジエノイル基、ヘンイコサジエノイル基、ドコサジエノイル基、オクタデカトリエノイル基、イコサトリエノイル基、イコサテトラエノイル基、イコサペンタエノイル基、ドコサヘキサエノイル基、イソステアロイル基、テトラメチルヘキサデカノイル基（フィタノイル基）、レチノイル基等が挙げられ、好ましくはデカノイル基、ドデカノイル基、テトラデカノイル基、ヘキサデカノイル基、オクタデカノイル基、イコサノイル基、デカエノイル基、ドデカエノイル基、テトラデカエノイル基、ヘキサデカエノイル基、オクタデカエノイル基、イコサエノイル基、デカジエノイル基、ドデカジエノイル基、テトラデカジエノイル基、ヘキサデカジエノイル基、オクタデカジエノイル基、イコサジエノイル基等の炭素数１０～２０のアシル基であり、より好ましくはテトラデカノイル基、ヘキサデカノイル基、オクタデカノイル基、イコサノイル基等の炭素数１４～２０のアシル基である。
　式（１）中、Ｒ^１、Ｒ^２で示されるステロール残基としては、例えば、コレステリル基（コレステロール残基）、コレスタリル基（コレスタノール残基）、スチグマステリル基（スチグマステロール残基）、β－シトステリル基（β－シトステロール残基）、ラノステリル基（ラノステロール残基）、及びエルゴステリル基（エルゴステロール残基）等が挙げられる。ステロール残基は、好ましくはコレステリル基またはコレスタリル基である。

　式（１）中、ａ１、ａ２はそれぞれ独立して０または１である。

　式（１）中、ｂは０または１である。ｂ＝０の場合、得られる脂質誘導体は一本鎖脂質誘導体を、ｂ＝１の場合、分岐部位としてＭを有する二本鎖脂質誘導体を表す。

　Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基（炭素数３から７の直鎖状または分岐状の炭化水素から誘導される３価基）を表し、３価であれば特に限定されないが、例えば、下記式（１４）～（１６）で表される基が挙げられる。なお、下記式では基Ｍと他の基との結合関係を明確化するため、他の基も含めて表記している。

（上記式中、ｒ１は１から５の整数を表し、
ｒ２は０から４の整数を表し、
Ｒ^１およびＲ^２は、それぞれ前記のとおりであり
ａ１およびａ２は、それぞれ前記のとおりであり、
ｃは、後記のとおりであり、および

は、３価基Ｍの他の３つの基への結合位置を表す。）

　式（１）中、ｃは０または１である。

　式（１）中、ｄは０または１である。ｄ＝１の場合、式（１）はリン脂質を表す。式（１）中、Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基である。アルカリ金属としては、リチウム、ナトリウム、カリウム等が挙げられる。

　式（１）中、ｅは０または１である。

　式（１）中、ｎは１または２である。ｎ＝１の場合、得られる脂質誘導体はｐＨ応答性ポリマーを一本有する誘導体を、ｎ＝２の場合はｐＨ応答性ポリマーを二本有する誘導体を表す。

　式（１）中、Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基である。

（ｅ＝１かつｎ＝１の場合）
　ｅ＝１かつｎ＝１の場合、Ｘは２価の有機基であれば特に限定されないが、好ましくは下記式（２）で表される連結基が挙げられる。

　式（２）中、ｐ１、ｐ２はそれぞれ独立して０または１である。
　式（２）中、Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、求核置換反応により形成される結合とスペーサーから構成される。

　求核置換反応により形成される結合としては、エステル結合、ウレタン結合、アミド結合、エーテル結合、カーボネート結合、２級アミノ基を含んだ二価の炭化水素基、単結合、二価の炭化水素基が挙げられる。またスペーサーとしては、共有結合によって構成される部位であれば特に制限はないが、例えば、式（１７）または式（１８）に示す構造が挙げられる。

－（ＣＨ_２）_ｓ１－・・・（１７）
（式（１７）中、ｓ１は１から４の整数を表す。）
－（ＣＨ_２）_ｓ２－Ｏ－（ＣＨ_２）_ｓ３－・・・（１８）
（式（１８）中、ｓ２は１から３の整数を、ｓ３は４－ｓ２の式を満たす整数を表す。）

　式（２）中、ｑ１、ｑ２はエチレングリコール構造の重合度を表し、それぞれ独立して０から５０である。ｑ１またはｑ２が大きければｐＨ応答性脂質誘導体の親水性部分の割合が大きくなる。要求される性能等に応じて、任意に設定が可能である。

　式（２）中、ｐ３は０または１である。ｐ３が０の場合、後述する重合開始剤を出発物質として製造することが可能である。また、ｐ３が１の場合、後述する官能基含有脂質と官能基含有ｐＨ応答性ポリマーとを反応させることで製造することが可能である。

　式（２）中、Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、例えば、下記式（１９）～（２７）が挙げられる。なお、下記式ではＺと他の基との結合関係を明確化するため、他の基も含めて表記している。

（上記式中、Ｅは水素原子またはメチル基を表し、
Ｘ^２およびｐ２は、それぞれ前記のとおりであり、および

は、基Ｚの他の２つの基への結合位置を表す。）

（ｅ＝１かつｎ＝２の場合）
　ｅ＝１かつｎ＝２の場合、Ｘは３価の有機基であり、３価であれば特に限定されないが、例えば、下記式（２８）～式（３０）で表される基が挙げられる。

（上記式中、ｆは０から５の整数であり、

は、Ｘの他の３つの基への結合位置を表す。）

　式（１）中、ｇは１または２である。ｇ＝１の場合は、該ｐＨ応答性脂質誘導体は生体内で分解されることで、アスパラギン酸やその誘導体、また、ｇ＝２の場合はグルタミン酸やその誘導体まで分解される。従って、生体内で蓄積されずに体外へ排出される。

　式（１）中、ｈ＝１から３である。ｈ＝４以上となると、ｐＨ７．４という中性条件下であっても、カチオン性を帯びる。従って、生体内で中性環境下である血液成分や正常組織に対してステルス性を示すことが困難となる。

　式（１）中、Ａはカルボキシ基、またはスルホ基である。

　式（１）中のＡ及びｈを含む下記式（３１）で表される官能基は、ｐＨ７．２から７．６で中性を示し、ｐＨ６．０から６．６でカチオン性に変化する特性を有する。すなわち、該ｐＨ応答性官能基を繰り返し単位として含むポリマーもまた、同様のｐＨ応答性を有する。また、該ｐＨ応答性ポリマーを有する式（１）で表される脂質誘導体もまた、同様のｐＨ応答性を有する。

　式（１）中、ｍは５から３００であり、ｍの範囲は結合する脂質にもよるが、好ましくは、５から２００であり、最も好ましくは５から１５０である。さらに、特に好ましくは５から１１０である。

　ｍが５より小さい場合、ｐＨ応答性脂質誘導体中のｐＨ応答性官能基の含有量が少なくなり、ｐＨ応答性の脂質ナノ粒子を形成するのが困難となる可能性がある。ｍが３００より大きい場合、ｐＨ応答性脂質誘導体中の親水性部分の割合が大きくなり、製造した脂質ナノ粒子から該ｐＨ応答性脂質誘導体が脱離し易くなる。

　本実施形態に係るｐＨ応答性脂質誘導体の重合度、すなわちｍは、要求される性能等に応じて、例えば、中間重合体の重合条件により調整可能である。

　尚、式（１）中のペプチド構造のＮ末端を水素原子と記載しているが、ペプチド骨格の合成法やｐＨ応答性ポリマーの製造方法、または保存条件等によって、末端アミノ基の代わりに、例えば、ｐＨ変化によりオニウム塩構造、または分子内求核置換反応によりγ―ラクタム環を与える可能性がある。
　また、後述の通り、後続の反応において副反応の恐れがある場合等においては、Ｎ末端のアミノ基の保護や変換によりアセチル基やカルボン酸などの官能基に変更して、下記式で表される（Ｂ）ｐＨ応答性ポリマー（１－１）へと導いても良い。

（上記式中、Ｒ^ｂは、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）であり、
他の各記号は、ｐＨ応答性ポリマー（１）について詳述したところを参照することができる）

　式（１）で表される構造は、好ましくは、下記式（３２）から（３４）で表される構造である。

（Ｒ^３は炭素数１４から２０のアルキル基であり、Ａはカルボキシ基またはスルホ基であり、ｍは５から１５０である。）

（Ｒ^４は炭素数１４から２０のアルキル基または炭素数１４から２０のアシル基であり、Ａはカルボキシ基またはスルホ基であり、ｍは５から１５０である。）

（Ｒ^４は炭素数１４から２０のアルキル基または炭素数１４から２０のアシル基であり、Ａはカルボキシ基またはスルホ基であり、ｍは５から１５０である。）

　＜ｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法＞
　本発明のｐＨ応答性脂質誘導体（ｉ）は、前記の通り
前記式（４７－ｉ）中、Ｒ^ａがＨの場合は工程（Ａ）、工程（Ｂ）及び工程（Ｃ）をその順で実施するか、または前記式（４７－ｉ）中、Ｒ^ａが－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）の場合は、工程（Ａ１）、工程（Ｂ）及び工程（Ｃ）をその順で実施することで、前記式（４７－ｉ）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得るか、
工程（Ｄ）を実施することで、前記式（３６－ｉ）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得るか、または
工程（Ｅ）、工程（Ｆ）及び工程（Ｇ）をその順で実施することで、前記式（４６－ｉ）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得ることにより、製造することができる。
　より具体的には、本発明のｐＨ応答性脂質誘導体（ｉ）は、その好ましい実施態様である（Ａ）ｐＨ応答性脂質誘導体（１）および（Ｂ）ｐＨ応答性脂質誘導体（１－１）を得ることにより製造することができる。従って、以下では、（Ａ）ｐＨ応答性脂質誘導体（１）および（Ｂ）ｐＨ応答性脂質誘導体（１－１）の製造方法を説明する。

［（Ａ）ｐＨ応答性脂質誘導体（１）の製造方法］
　本発明に係る前記式（１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体は、例えば、重合法、カップリング法（１）、カップリング法（２）により製造することができる。以下、重合法について説明する。
　なお、以下は代表的な前記式（１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法であり、当業者であれば、当該製造方法を適宜変更して用いて、あるいは、当技術分野で公知の他の製造方法やそれらを適宜変更して用いて、前記式（１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を製造することも可能である。
　詳細は後述するが、さらに当業者であれば、当該製造方法や原料を適宜変更して、本発明に係る前記式（１－１）で表される末端アミノ基の保護や変換を行ったｐＨ応答性脂質誘導体を製造することも可能である。

　＜ｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法～重合法～＞

　下記式（４７）の構造で表されるｐＨ応答性脂質誘導体は、下記の工程（Ａ２）、工程（Ｂ１）、及び工程（Ｃ１）をこの順で行う製造方法により製造することができる。

　ここで、式（１）中、Ｒ^１ａ、Ｒ^２ａはそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、またはステロール残基であり、Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基であり、Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅはそれぞれ独立して、０または１であり、ｆは０から５の整数であり、ｈは１から３の整数であり、ｇ、ｎはそれぞれ独立して、１または２であり、ｍは５から３００である。

［工程（Ａ２）］
　工程（Ａ２）は、下記式（３）で表される重合開始剤と下記式（４）で表されるα―アミノ酸－Ｎ－カルボン酸無水物とを用いて開環重合することにより下記式（５）で表されるポリマーを得る工程である。

　式（３）中、Ｒ^１ａ、Ｒ^２ａはそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、またはステロール残基であり、アルキル基は直鎖型であっても分岐型であっても良く、不飽和結合を含んでいても良い。その他記号は前記のとおりである。

　式（３）中、Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基である。
（ｅ＝１かつｎ＝１の場合）
　ｅ＝１かつｎ＝１の場合、Ｘは２価の有機基であれば特に限定されないが、好ましくは下記式（３５）で表される連結基が挙げられる。

　式（３５）中、ｐ１、ｐ２はそれぞれ独立して０または１である。

　式（３５）中、Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、求核置換反応により形成される結合とスペーサーから構成される。

　求核置換反応により形成される結合としては、ウレタン結合、アミド結合、エーテル結合、２級アミノ基を含んだ二価の炭化水素基、単結合、二価の炭化水素基が挙げられる。またスペーサーとしては、共有結合によって構成される部位であれば特に制限はないが、例えば、前記式（１７）または前記式（１８）に示す構造が挙げられる。

　式（３５）中、ｑ１、ｑ２はエチレングリコール構造の重合度を表し、それぞれ独立して０から５０である。

（ｅ＝１かつｎ＝２の場合）
　ｅ＝１かつｎ＝２の場合、Ｘは３価の有機基であり、３価であれば特に限定されないが、例えば、前記式（２８）～前記式（３０）で表される基が挙げられる。

　式（４）中、ｇ＝１または２である。好ましくは、医薬用途へ使用する観点から、天然に存在するＬ－アミノ酸から誘導された酸無水物であることが好ましい。

　式（４）中、Ｐ^１はカルボキシ基の保護基を表し、好ましくは炭素数１から８のカルボキシ基の保護基である。カルボキシ基の一般的な保護基であれば特に制限されないが具体的にはメチル基、エチル基、ｔ－ブチル基、アリル基、ベンジル基などが挙げられる。好ましくは、入手のし易さ及び続く工程（Ｂ）での反応のし易さの観点からベンジル基が好ましい。

　開環重合の方法としては、公知の方法が利用可能である。
　このような方法は、例えば、Ｐｅｐｔｉｄｅ－Ｂａｓｅｄｅ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，２０１１，１－２６，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．，２０１８，５１５１－５１５５，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｕｎｉｔｅｄ　Ｓｔａｔｅｓ　ｏｆ　Ａｍｅｒｉｃａ，２０１９，１０６５８－１０６６３に開示されている。

　開環重合反応に用いられる溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、Ｎ－メチル－２－ピロリドン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド，ジクロロメタン、クロロホルム等の各種有機溶媒及びそれらの混合物が挙げられる。好ましくは、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、クロロホルムが挙げられる。

　開環重合反応に用いられる溶媒の総量は、式（４）で表されるα―アミノ酸－Ｎ－カルボン酸無水物に対して容量比で３～１００倍量、好ましくは５～５０倍量、最も好ましくは７～２５倍量である。混合溶媒を用いる場合の比率は特に制限されないが、式（３）および式（４）で表される各種化合物がそれぞれ溶解すればよい。

　開環重合反応の際の反応温度は通常２０～６０℃であり、好ましくは２５～４０℃の範囲である。この時の反応時間は、反応温度等の条件により異なるが、通常３時間～２４時間であることが好ましい。

　以上により、式（５）で表されるポリマーが得られる。

（式（５）中、各記号は前記のとおりである。）

　式（５）中、ｍは前記式（１）中のｍと同様に定義され得る。すなわち、式（５）中、ｍは５から３００であり、ｍの範囲は、好ましくは、５から２００であり、最も好ましくは５から１５０である。さらに、特に好ましくは５から１１０である。

　得られたポリマーは、そのまま未精製で用いられても、再沈殿やゲルろ過クロマトグラフィー、膜精製等の処理により単離・精製が行われてもよい。また、後述の通り、さらに、末端アミノ基の保護や変換を行うことで末端アミノ基を保護もしくは変換したｐＨ応答性脂質誘導体を得ることができる。

［工程（Ｂ１）］
　工程（Ｂ１）は、前記工程（Ａ２）で得られた前記式（５）で表されるポリマーに、下記式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体を付加反応させることで下記式（７）で表されるポリマーを得る工程である。

　式（６）中、ｈは１から３の整数である。合成の観点から、ｈ＝２または３が好ましい。

　式（６）中、Ｐ^２は保護されたカルボキシ基、もしくは保護されたスルホ基を表す。

　保護されたカルボキシ基としては、一般的に使用される誘導体であれば特に制限されないが具体的にはカルボン酸メチルエステル基、カルボン酸エチルエステル基、カルボン酸ｔ－ブチルエステル基、カルボン酸アリルエステル基、カルボン酸ベンジルエステル基などが挙げられる。好ましくは、脱保護のし易さの観点からカルボン酸ｔ－ブチルエステル基である。

　保護されたスルホ基としては、一般的に使用される誘導体であれば特に制限されないが具体的にはスルホン酸メチルエステル基、スルホン酸エチルエステル基、スルホン酸２，２，２－トリフルオロメチルエステル基などが挙げられる。好ましくは、脱保護のし易さの観点からスルホン酸２，２，２－トリフルオロメチルエステル基である。

　式（５）で表されるポリマーと、式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体の１級アミノ基とを付加反応させることで、アミド結合が形成されて、式（７）で表されるポリマーが得られる。

　式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体の量は、式（５）で表されるポリマーのｍに対して、モル比で、通常、２～１０倍量、好ましくは３～８倍量、最も好ましくは４～６倍量である。

　２倍量より少ない場合は、ジエチレントリアミン誘導体によりポリマー間が架橋された構造体が生成する恐れやジエチレントリアミン誘導体のポリマーへの付加率が低下する恐れがあり、１０倍量より多い場合は、反応に使われなかったジエチレントリアミン誘導体が無駄になる。

　また本反応には触媒を用いることが可能であり、例えば２－ヒドロキシピリジン、ピリジン、トリエチルアミン等の触媒を使用することができる。

　付加反応は、各種溶媒中で行う事ができる。溶媒としては、式（５）で表されるポリマーと式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体に対して反応性を持たない溶媒であれば特に限定されず、例えば、テトラヒドロフラン、トルエン、アセトニトリル、クロロホルム、Ｎ－メチル－２－ピロリドン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド等の各種有機溶媒、及びそれらの混合物が挙げられる。ポリマーの溶解性の観点から、Ｎ－メチル－２－ピロリドンまたはテトラヒドロフランが好ましい。

　付加反応に用いられる溶媒の総量は、式（５）で表されるポリマーに対して容量比で１．５～７０倍量、好ましくは１．８～５０倍量、最も好ましくは２～３０倍量である。

　付加反応の際の反応温度は使用する溶媒により異なるが、通常０～１００℃である。この時の反応時間は、反応温度等の条件により異なるが、通常３時間～７２時間であることが好ましい。

　以上により、式（７）で表されるポリマーが得られる。

（式（７）中、各記号は前記のとおりである。）

　得られたポリマーは、そのまま未精製で用いられても、再沈殿やゲルろ過クロマトグラフィー、膜精製等の処理により単離・精製が行われても良い。

［工程（Ｃ１）］
　工程（Ｃ１）は、前記工程（Ｂ１）で得られた前記式（７）で表されるポリマーを脱保護させることで前記式（４７）で表されるｐＨ応答性ポリマーを得る工程である。

　脱保護方法としては工程（Ｂ１）で導入したジエチレントリアミン誘導体のＰ^２に応じて既知の方法を用いることができる。例えば、Ｐ^２がカルボン酸ｔ－ブチルエステル基であれば酸性条件下の加水分解により脱保護され、カルボキシ基となる。また、Ｐ^２がスルホン酸２，２，２－トリフルオロメチルエステル基であれば塩基性条件下の加水分解によりスルホ基となる。

　以下、具体的な製造方法を示すが、これらに限定されるものではない。

（具体例１）
　式（７）中のＰ^２がカルボン酸ｔ－ブチルエステル基である場合について説明する。この場合、酸性条件下で酸加水分解反応が進行し、カルボキシ基となる。

　酸加水分解反応に用いられる酸としては、酸であれば特に限定されないが、無機酸が好ましく、更に好ましくは塩酸水溶液、硝酸水溶液、またはリン酸水溶液であり、最も好ましくは塩酸水溶液である。

　酸の濃度としては、酸の種類によって異なるが、例えば塩酸水溶液であれば、通常１～１１．２Ｎ、好ましくは１．５～１１．２Ｎ、最も好ましくは２～１１．２Ｎである。

　１Ｎより薄い場合は酸加水分解反応完結までの時間が長くなる。

　酸加水分解反応は各種溶媒中で行う事ができるが、水と混和可能な溶媒が好ましい。酸加水分解反応に用いられる混合溶媒としては、例えば、水－ＴＨＦ、水－１，４－ジオキサンが挙げられる。

　酸加水分解反応に用いられる溶媒の総量は、式（７）で表されるポリマーに対して容量比で３～１００倍量、好ましくは４～７５倍量、最も好ましくは５～５０倍量である。混合溶媒を用いる場合の比率は特に制限されないが、式（７）で表される各種化合物が使用する有機溶媒量に溶解することが好ましい。

　酸加水分解反応の際の反応温度は通常２０～８０℃であり、好ましくは２５～６０℃の範囲である。この時の反応時間は、反応温度等の条件により異なるが、通常３時間～４８時間であることが好ましい。

　得られたｐＨ応答性脂質誘導体の精製方法としては、例えば、再沈殿やゲルろ過クロマトグラフィー、膜精製等の処理により単離・精製が可能である。

　＜ｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法～カップリング法（１）～＞
　前記式（１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体は脂質誘導体とｐＨ応答性ポリマーを共有結合させることにより合成することも可能である。

　前記式（１）で表される本発明のｐＨ応答性ポリマーは、前記の通りであるが、ここでは具体例として、脂質誘導体とｐＨ応答性ポリマーを１：１のモル比で共有結合させた下記式（３６）について説明する。

　下記式（３６）の構造で表されるｐＨ応答性脂質誘導体は、工程（Ｄ１
）に示す製造方法を経由することで製造することができる。

　ここで、式（３６）中、Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４のアシル基、またはステロール残基であり、Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄはそれぞれ独立して、０または１であり、ｆは０から５の整数であり、ｈは１から３の整数であり、ｇは１または２であり、ｍは５から３００であり、かつ、Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、ｐ１、ｐ２はそれぞれ独立して０または１であり、ｑ１、ｑ２はそれぞれ独立して、０から５０である。

［工程（Ｄ１）］
　工程（Ｄ１）は、下記式（８）で表される官能基含有脂質と下記式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーとを反応させることにより前記式（３６）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程である。

　式（８）中、ｐ１、ｐ２はそれぞれ独立して０または１である。
　式（８）中、Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、求核置換反応により形成される結合とスペーサーから構成される。

　求核置換反応により形成される結合としては、エステル結合、ウレタン結合、アミド結合、エーテル結合、カーボネート結合、２級アミノ基を含んだ二価の炭化水素基、単結合、二価の炭化水素基が挙げられる。またスペーサーとしては、共有結合によって構成される部位であれば特に制限はないが、例えば、前記式（１７）または前記式（１８）に示す構造が挙げられる。

　式（８）中、Ｙ^１は下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団を示す。

　前記原子団Ｙ^１は、前記式（８）で表される脂質に含まれる原子団であって、下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成して得る官能基（Ｙ^１’）を含む。Ｙ^１は、前記官能基（Ｙ^１’）のみであっても、前記官能基（Ｙ^１’）と前記脂質との結合部位（Ｗ）からなるものであってもよく、次式：
Ｙ^１－＝Ｙ^１’－Ｗ－
で表される。前記式中、Ｙ^１’は下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を示し、Ｗは脂質への結合部位または単結合を示す。

　結合部位Ｗとしては、脂質との結合を担うリンカーであり、共有結合によって構成される部位であれば特に制限はない。

　結合部位Ｗとしては、好ましくはエステル結合、ウレタン結合、アミド結合、エーテル結合、カーボネート結合、２級アミノ基を含んだ二価の炭化水素基、単結合、二価の炭化水素基、及び、二価のオキシアルキレン基及びこれの繰り返し構造が挙げられる。前記炭化水素基としては、炭素数が１２以下であることが好ましく、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、テトラメチレン基、ブチレン基、イソブチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチレン基等が挙げられる。前記オキシアルキレン基としては、オキシエチレン基もしくはオキシプロピレン基が挙げられる。前記オキシレンアルキレン骨格の繰り返し単位が１２以下であることが好ましい。

　式（８）中、その他記号は前記の通りである。

　前記式（９）中、Ｙ^２は前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団を示し、前記式（８）中の原子団Ｙ^１に含まれる官能基と原子団Ｙ^２に含まれる官能基とは互いに異なる。

　前記原子団Ｙ^２は、前記式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーに含まれる原子団であって、前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基（Ｙ^２’）を含む。Ｙ^２は、前記官能基（Ｙ^２’）のみであっても、前記官能基（Ｙ^２’）とｐＨ応答性ポリマーとの結合部位（Ｗ’）からなるものであってもよく、次式：
Ｙ^２－＝Ｙ^２’－Ｗ’－
で表される。前記式中、Ｙ^２’は前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を示し、Ｗ’はｐＨ応答性ポリマーとの結合部位または単結合を示す。

　式（９）中の結合部位Ｗ’としては、ｐＨ応答性ポリマーとの結合を担うリンカーであり、共有結合によって構成される部位であれば特に制限はない。

　結合部位Ｗ’としては、好ましくは、ウレタン結合、アミド結合、エーテル結合、２級アミノ基を含んだ二価の炭化水素基、単結合、二価の炭化水素基、及び、二価のオキシアルキレン基及びこれの繰り返し構造が挙げられる。前記炭化水素基としては、炭素数が１２以下であることが好ましく、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、テトラメチレン基、ブチレン基、イソブチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチレン基等が挙げられる。前記オキシアルキレン基としては、オキシエチレン基もしくはオキシプロピレン基が挙げられる。前記オキシレンアルキレン骨格の繰り返し単位が１２以下であることが好ましい。

　前記式（８）中の官能基Ｙ^１’及び前記式（９）中のＹ^２’は、互いに異なる官能基であり、互いに反応して共有結合を形成し得る官能基であれば特に制限されない。官能基Ｙ^１’と官能基Ｙ^２’とが反応することで前記式（３６）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体が得られる。

　官能基Ｙ^１’として適切な官能基はとして、好ましくは、下記式（３７）～下記式（４５）が挙げられる。

（上記式（４４）中、Ｅは水素原子またはメチル基を表す。）

　前記式（３７）から式（４５）で表される官能基Ｙ^１’を含む原子団Ｙ^１を有する前記式（８）で表される官能基含有脂質としては、市販品を用いても良いし、また別途合成して用いても良い。

　前記式（９）中の官能基Ｙ^２’を含む原子団Ｙ^２を有する前記式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーとしては、既報に基づき合成して用いることができる。このような方法は、例えば、ＷＯ２０１８／１１０３６６に開示されている。

　官能基Ｙ^１’と官能基Ｙ^２’とを共有結合させる反応条件としては、既知の方法が利用可能であり、共有結合させることでＺを形成し、前記式（３６）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体が得られる。
　ここで官能基Ｙ^２’の好適な例としては、官能基Ｙ^１’について例示された官能基の内、式（３７）～（４１）および（４３）～（４５）が挙げられる。

　一例として官能基Ｙ^１’が前記式（３７）に代表される内部アルキン化合物である場合、官能基Ｙ^２’としては前記式（４３）と反応し、前記式（１９）で表されるＺを形成する。

　他の例として官能基Ｙ^１’が前記式（３８）に代表される内部アルキン化合物である場合、官能基Ｙ^２’としては前記式（４３）と反応し、前記式（２０）で表されるＺを形成する。

　他の例として官能基Ｙ^１’が前記式（３９）に代表されるアルキン化合物である場合、官能基Ｙ^２’としては前記式（４３）と反応し、前記式（２１）で表されるＺを形成する。

　他の例として官能基Ｙ^１’が前記式（４０）に代表されるトランスシクロオクチン化合物である場合、官能基Ｙ^２’としてはテトラジン基等と反応し、前記式（２２）で表されるＺを形成する。

　他の例として官能基Ｙ^１’が前記式（４１）に代表されるアルケン化合物である場合、官能基Ｙ^２’としては前記式（４５）と反応し、前記式（２３）で表されるＺを形成する。

　他の例として官能基Ｙ^１’が前記式（４２）に代表されるマレイミド化合物である場合、官能基Ｙ^２’としては前記式（４５）と反応し、前記式（２４）で表されるＺを形成する。

　他の例として官能基Ｙ^１’が前記式（４３）である場合、官能基Ｙ^２’としては前記式（３９）と反応し、前記式（２５）で表されるＺを形成する。

　他の例として官能基Ｙ^１’が前記式（４４）に代表されるテトラジン化合物である場合、官能基Ｙ^２’としては前記式（３９）と反応し、前記式（２６）で表されるＺを形成する。

　他の例として官能基Ｙ^１’が前記式（４５）である場合、官能基Ｙ^２’としては前記式（４１）と反応し、前記式（２７）で表されるＺを形成する。

　得られたｐＨ応答性脂質誘導体の精製方法としては、例えば、再沈殿やゲルろ過クロマトグラフィー、膜精製等の処理により単離・精製が可能である。

　式（９）中、その他記号は前記の通りである。

　以下、具体的な製造方法を示すが、これらに限定されるものではない。

（具体例２）
　まず、前記式（８）中のＹ^１’が前記式（３７）で表される官能基で、前記式（９）中のＹ^２’が前記式（４３）で表される官能基である場合について説明する。

　この場合、式（３７）で表される官能基と、式（４３）で表される官能基とが環化付加反応によって反応する。これにより、前記式（３６）中のＺが前記式（１９）であるｐＨ応答性脂質誘導体が得られる。

　環化付加反応に用いられる式（８）で表される官能基含有脂質の量は、式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーに対して、モル比で、通常、０．８～３．０倍量、好ましくは１．０～２．５倍量、最も好ましくは１．２～２．０倍量である。

　０．８倍量より少ない場合は生成物中のｐＨ応答性ポリマーが占める割合が多くなり、精製が困難となる。３．０倍量より多い場合は生成物中の官能基含有脂質が占める割合が多くなり、精製が困難となり、また、反応に使われなかった官能基含有脂質は無駄になる。

　環化付加反応は、各種溶媒中で行う事ができる。環化付加反応に用いられる溶媒は式（８）で表される官能基含有脂質と式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーを溶解可能であればよい。

　溶媒は式（８）で表される官能基含有脂質及び式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーを溶解可能であっても良いし、それぞれを溶解可能な溶媒を２種以上混合して用いても良い。

　環化付加反応に用いられる溶媒としては、例えば、水、緩衝液、メタノール、トルエン、ＴＨＦ、ジクロロメタン、クロロホルム等の各種有機溶媒及びそれらの混合物が挙げられる。

　環化付加反応に用いられる混合溶媒としては、例えば、水－トルエン、水－ＴＨＦ、水－ジクロロメタン、水－クロロホルム等の組合せが挙げられる。環化付加反応は均一溶媒系であっても、２層分離溶媒系であっても良い。一般的に式（８）で表される官能基含有脂質が有機溶媒に溶解しやすいこと及び式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーが水に溶解しやすい観点から、水－ジクロロメタンの混合溶媒が好ましい。

　環化付加反応に用いられる溶媒の総量は、式（８）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーに対して容量比で５０～１５０倍量、好ましくは６５～１３５倍量、最も好ましくは８０～１２０倍量である。混合溶媒を用いる場合の比率は特に制限されないが、式（８）および式（９）で表される各種化合物がそれぞれ溶解すればよい。

　環化付加反応の際の反応温度は通常２０～６０℃であり、好ましくは２５～４５℃の範囲である。この時の反応時間は、反応温度等の条件により異なるが、通常３時間～７２時間であることが好ましい。

　以上により、Ｚが式（１９）であるｐＨ応答性脂質誘導体が得られる。得られたｐＨ応答性脂質誘導体の精製方法としては、例えば、再沈殿やゲルろ過クロマトグラフィー、膜精製等の処理により単離・精製が可能である。

（具体例３）
　続いて、前記式（８）中のＹ^１’が前記式（４１）で表される官能基で、前記式（９）中のＹ^２’が前記式（４５）で表される官能基である場合について説明する。

　この場合、式（４１）で表される官能基と、式（４５）で表される官能基とがチオール－エン反応によって反応する。これにより、前記式（３６）中のＺが前記式（２３）であるｐＨ応答性脂質誘導体が得られる。

　チオール－エン反応に用いられる式（８）で表される官能基含有脂質の量は、式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーに対して、モル比で、通常、０．８～３．０倍量、好ましくは１．０～２．５倍量、最も好ましくは１．２～２．０倍量である。

　０．８倍量より少ない場合は生成物中のｐＨ応答性ポリマーが占める割合が多くなり、精製が困難となる。３．０倍量より多い場合は生成物中の官能基含有脂質が占める割合が多くなり、精製が困難となり、また、反応に使われなかった官能基含有脂質は無駄になる。

　チオール－エン反応は、各種溶媒中で行う事ができる。チオール－エン反応に用いられる溶媒は式（８）で表される官能基含有脂質と式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーを溶解可能であればよい。

　溶媒は式（８）で表される官能基含有脂質及び式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーを溶解可能であっても良いし、それぞれを溶解可能な溶媒を２種以上混合して用いても良い。

　チオール－エン反応に用いられる溶媒としては、例えば、水、緩衝液、メタノール、トルエン、ＴＨＦ、ジクロロメタン、クロロホルム等の各種有機溶媒及びそれらの混合物が挙げられる。

　チオール－エン反応に用いられる混合溶媒としては、例えば、水－トルエン、水－ＴＨＦ、水－ジクロロメタン、水－クロロホルム等の組合せが挙げられる。環化付加反応は均一溶媒系であっても、２層分離溶媒系であっても良い。一般的に式（８）で表される官能基含有脂質が有機溶媒に溶解しやすいこと及び式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーが水に溶解しやすい観点から、水－ジクロロメタンの混合溶媒が好ましい。

　チオール－エン反応に用いられる溶媒の総量は、式（９）で表されるｐＨ応答性ポリマーに対して容量比で５０～１５０倍量、好ましくは６５～１３５倍量、最も好ましくは８０～１２０倍量である。混合溶媒を用いる場合の比率は特に制限されないが、式（８）および式（９）で表される各種化合物がそれぞれ溶解すればよい。

　式（８）で表される官能基含有脂質と式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーとのチオール－エン反応の際に、熱ラジカル発生剤または光ラジカル発生剤が用いられる。熱ラジカル発生剤としては、過酸化物またはアゾ化合物が好ましい。

　過酸化物としては、例えば、ｔｅｒｔ－ブチルヒドロペルオキシド、過酸化ジベンゾイル、過硫酸アンモニウム、過酸化水素、ｔｅｒｔ－ブチル－２－エチルヘキノアート、ジラウロイルペルオキシドが挙げられ、好ましくは、ｔｅｒｔ－ブチルヒドロペルオキシド、過硫酸アンモニウム、過酸化水素が挙げられる。

　アゾ化合物としては、例えば、アゾビス（イソ－ブチロニトリル）、２，２’－アゾビス（２－メチルブタンニトリル）、２，２’－アゾビス（２－アミジノプロパン）塩酸塩、４’４－アゾビス（４－シアノペンタン酸）、２’２－アゾビス［２－メチル－Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）プロピオンアミド］、２’２－アゾビス［Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）－２－メチルプロピオンアミジン］４水和物、２’２－アゾビス（２－メチルプロピオンアミジン）２塩酸塩、２’２－アゾビス［２－（２－イミダゾリン－２－イル）プロパン］、２’２－アゾビス［２－（２－イミダゾリン－２－イル）プロパン］２塩酸塩が挙げられる。

　光ラジカル発生剤としては、例えば、リチウムフェニル（２，４，６－トリメチルベンゾイル）ホスフィネート、ジフェニル（２，４，６－トリメチルベンゾイル）ホスフィンオキシド、２－ヒドロキシ－４’－（２－ヒドロキシエトキシ）－２－メチルプロピオフェノン、ＦＯＭ－０３０１１（富士フイルム和光純薬株式会社製）、サイラキュアＵＶＩ－６９７０、同ＵＶＩ－６９７４、同ＵＶ－６９９０（いずれも米国ユニオンカーバイド社製）、イルガキュア２６４（ＢＡＳＦ社製）、ＣＩＴ－１６８２（日本曹達株式会社製）が挙げられる。

　チオール－エン反応に用いられる熱ラジカル発生剤または光ラジカル発生剤の量は式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーに対して、モル比で、通常０．０５～１０倍量、好ましくは０．１０～８倍量、最も好ましくは０．１５～５倍量である。

　式（８）で表される官能基含有脂質と式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーとのチオール－エン反応の際の反応温度は、熱ラジカル発生剤を使用する場合、使用する熱ラジカル発生剤の１０時間半減期温度±２０℃であることが好ましい。この時の反応時間は、反応温度などの条件により異なるが、通常３～７２時間であることが好ましい。

　式（８）で表される官能基含有脂質と式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーとのチオール－エン反応の際の反応温度は、光ラジカル発生剤を使用する場合、通常０～６０℃であり、使用する光ラジカル発生剤の吸収波長に応じて、別途高圧水銀灯やＬＥＤレーザー等紫外線を発光する装置を用いてラジカルを発生させる。紫外線照射時間は、光ラジカル発生剤の種類や紫外線を発光する装置などの条件により異なるが、３時間以下であることが好ましい。

　以上により、Ｚが式（２３）であるｐＨ応答性脂質誘導体が得られる。得られたｐＨ応答性脂質誘導体の精製方法としては、例えば、再沈殿やゲルろ過クロマトグラフィー、膜精製等の処理により単離・精製が可能である。

　尚、原子団Ｙ^１を２つ有する脂質と原子団Ｙ^２を１つ有するｐＨ応答性ポリマーを反応させることでｐＨ応答性ポリマーを二本有するｐＨ応答性脂質誘導体を得ることができる。

　また、後述の通り、末端アミノ基を有する前記式（９）の代わりに、末端アミノ基を保護もしくは変換したｐＨ応答性ポリマーを反応させることで、末端基を保護もしくは変換したｐＨ応答性脂質誘導体を得ることができる。

　＜ｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法～カップリング法（２）～＞
　前記式（１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体は脂質誘導体とｐＨ応答性ポリマー前駆体とを共有結合させることでｐＨ応答性脂質誘導体前駆体を合成し、その後ｐＨ応答性脂質誘導体へと誘導することも可能である。

　前記式（１）で表される本発明のｐＨ応答性脂質誘導体は、前記の通りであるが、ここでは具体例として、脂質誘導体とｐＨ応答性ポリマー前駆体を１：１のモル比で共有結合させた下記式（４６）について説明する。

　下記式（４６）の構造で表されるｐＨ応答性脂質誘導体は、下記の工程（Ｅ１）、工程（Ｆ１）、及び工程（Ｇ１）をこの順で行う製造方法により製造することができる。

　ここで、式（４６）中、Ｒ^１ａ、Ｒ^２ａはそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、またはステロール残基であり、Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または分岐していてもよい炭素数３から７の炭化水素３価基であり、Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄはそれぞれ独立して、０または１であり、ｆは０から５の整数であり、ｈは１から３の整数であり、ｇは１または２であり、ｍは５から３００であり、かつ、Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、ｐ１、ｐ２はそれぞれ独立して０または１であり、ｑ１、ｑ２はそれぞれ独立して、０か
ら５０である。

　同様に、後述の通り、上記式（４６）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体において末端アミノ基が保護もしくは変換された誘導体は、末端アミノ基を有するｐＨ応答性ポリマー前駆体の代わりに、末端アミノ基を保護もしくは変換したｐＨ応答性ポリマー前駆体を用い、下記の工程（Ｅ１）、工程（Ｆ１）、及び工程（Ｇ１）をこの順で行う製造方法により製造することができる。

［工程（Ｅ１）］
　工程（Ｅ１）は、下記式（１０）で表される官能基含有脂質と下記式（１１）で表されるポリマーとを反応させることにより下記式（１２）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体前駆体を得る工程である。

　式（１０）中、Ｒ^１ａ、Ｒ^２ａはそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、またはステロール残基であり、アルキル基は直鎖型であっても分岐型であっても良く、不飽和結合を含んでいても良い。その他各記号は前記のとおりである。

　Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、求核置換反応により形成される結合とスペーサーから構成される。

　求核置換反応により形成される結合としては、ウレタン結合、アミド結合、エーテル結合、２級アミノ基を含んだ二価の炭化水素基、単結合、二価の炭化水素基が挙げられる。またスペーサーとしては、共有結合によって構成される部位であれば特に制限はないが、例えば、前記式（１７）または前記式（１８）に示す構造が挙げられる。

　式（１０）中、Ｙ^１は下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団を示す。

　前記原子団Ｙ^１は、前記式（１０）で表される脂質に含まれる原子団であって、下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成して得る官能基（Ｙ^１’）を含む。Ｙ^１は、前記官能基（Ｙ^１’）のみであっても、前記官能基（Ｙ^１’）と前記脂質との結合部位（Ｗ）からなるものであってもよく、次式：
Ｙ^１－＝Ｙ^１’－Ｗ－
で表される。前記式中、Ｙ^１’は下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を示し、Ｗは脂質への結合部位または単結合を示す。

　結合部位Ｗとしては、脂質との結合を担うリンカーであり、共有結合によって構成される部位であれば特に制限はない。

　結合部位Ｗとしては、好ましくはウレタン結合、アミド結合、エーテル結合、２級アミノ基を含んだ二価の炭化水素基、単結合、二価の炭化水素基、及び、二価のオキシアルキレン基及びこれの繰り返し構造が挙げられる。前記炭化水素基としては、炭素数が１２以下であることが好ましく、メチレン基、エチレン基、トリメチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、テトラメチレン基、ブチレン基、イソブチレン基、ペンタメチレン基、ヘキサメチレン基等が挙げられる。前記オキシアルキレン基としては、オキシエチレン基もしくはオキシプロピレン基が挙げられる。前記オキシレンアルキレン骨格の繰り返し単位が１２以下であることが好ましい。

　官能基Ｙ^１’として適切な官能基として、好ましくは、前記式（３７）～前記式（４５）が挙げられる。

　その他各記号については、前記のとおりである。

　式（１１）中、Ｐ^１は炭素数１から８のカルボキシ基の保護基である。カルボキシ基の一般的な保護基であれば特に制限されないが具体的にはメチル基、エチル基、ｔ－ブチル基、アリル基、ベンジル基などが挙げられる。好ましくは、入手のし易さ及び続く工程（Ｆ）での反応のし易さの観点からベンジル基が好ましい。

　前記式（１１）中、Ｙ^２は前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団を示し、前記式（１０）中の原子団Ｙ^１に含まれる官能基と原子団Ｙ^２に含まれる官能基とは互いに異なる。

　前記原子団Ｙ^２は、前記式（１１）で表されるポリマーに含まれる原子団であって、前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基（Ｙ^２’）を含む。Ｙ^２は、前記官能基（Ｙ^２’）のみであっても、前記官能基（Ｙ^２’）とｐＨ応答性ポリマーとの結合部位（Ｗ’）からなるものであってもよく、次式：
Ｙ^２－＝Ｙ^２’－Ｗ’－
で表される。前記式中、Ｙ^２’は前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を示し、Ｗ’はｐＨ応答性ポリマー前駆体との結合部位または単結合を示す。

　式（１１）中の結合部位Ｗ’としては、ｐＨ応答性ポリマー前駆体との結合を担うリンカーであり、共有結合によって構成される部位であれば特に制限はないが、好ましくは前記式（９）中のＹ^２に含まれる結合部位と同様である。

　その他各記号については、前記式（４６）と同様である。

　前記式（１０）中の官能基Ｙ^１’及び前記式（１１）中のＹ^２’は、互いに異なる官能基であり、互いに反応して共有結合を形成し得る官能基であれば特に制限されない。官能基Ｙ^１’と官能基Ｙ^２’とを共有結合させる反応条件としては、既知の方法が利用可能であり、共有結合させることでＺを形成し、下記式（１２）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体前駆体が得られる。

（式（１２）中、各記号は前記のとおりである。）

　得られたｐＨ応答性脂質誘導体前駆体は、そのまま未精製で用いられても、再沈殿やゲルろ過クロマトグラフィー、膜精製等の処理により単離・精製が行われても良い。

　以下、具体的な製造方法を示すが、これらに限定されるものではない。

（具体例４）
　前記式（１０）中のＹ^１’が前記式（３７）で表される官能基で、前記式（１１）中のＹ^２’が前記式（４３）で表される官能基である場合について説明する。

　この場合、式（３７）で表される官能基と、式（４３）で表される官能基とが環化付加反応によって反応する。これにより、前記式（１２）中のＺが前記式（１９）であるポリマーが得られる。

　環化付加反応に用いられる官能基含有脂質の量、溶媒量、反応温度については前記（具体例２）と同様の条件が利用可能である。

　環化付加反応は、各種溶媒中で行う事ができる。環化付加反応に用いられる溶媒は式（１０）で表される官能基含有脂質と式（１１）で表されるポリマーを溶解可能であればよい。

　溶媒は式（１０）で表される官能基含有脂質及び式（１１）で表されるポリマーを溶解可能であっても良いし、それぞれを溶解可能な溶媒を２種以上混合して用いても良い。

　環化付加反応に用いられる溶媒としては、例えば、ＴＨＦ、トルエン、Ｎ－メチル－２－ピロリドン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、クロロホルム等の各種有機溶媒及びそれらの混合物が挙げられる。

　以上により、Ｚが式（１９）であるｐＨ応答性脂質誘導体前駆体が得られる。得られたｐＨ応答性脂質誘導体前駆体は、そのまま未精製で用いられても、再沈殿やゲルろ過クロマトグラフィー、膜精製等の処理により単離・精製が行われても良い。

［工程（Ｆ１）］
　工程（Ｆ１）は、前記工程（Ｅ）で得られた前記式（１２）で表されるポリマーに、前記式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体を付加反応させることで下記式（１３）で表されるポリマーを得る工程である。

　前記式（１２）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体前駆体と、前記式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体の１級アミノ基とを付加反応させることで、アミド結合が形成されて、下記式（１３）で表されるポリマーが得られる。

　式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体の量は、前記式（１２）で表されるポリマーのｍに対して、モル比で、通常、２～１０倍量、好ましくは３～８倍量、最も好ましくは４～６倍量である。

　２倍量より少ない場合は、ジエチレントリアミン誘導体によりポリマー間が架橋された構造体が生成する恐れやジエチレントリアミン誘導体のポリマーへの付加率が低下する恐れがあり、１０倍量より多い場合は、反応に使われなかったジエチレントリアミン誘導体が無駄になる。

　また本反応には触媒を用いることが可能であり、例えば２－ヒドロキシピリジン、ピリジン、トリエチルアミン等の触媒を使用することができる。

　付加反応は、各種溶媒中で行う事ができる。溶媒としては、前記式（１２）で表されるポリマーと式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体に対して反応性を持たない溶媒であれば特に限定されず、例えば、テトラヒドロフラン、トルエン、アセトニトリル、クロロホルム、Ｎ－メチル－２－ピロリドン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド等の各種有機溶媒、及びそれらの混合物が挙げられる。ポリマーの溶解性の観点から、Ｎ－メチル－２－ピロリドンまたはテトラヒドロフランが好ましい。

　付加反応に用いられる溶媒の総量は、前記式（１２）で表されるポリマーに対して容量比で１．５～７０倍量、好ましくは１．８～５０倍量、最も好ましくは２～３０倍量である。

　付加反応の際の反応温度は使用する溶媒により異なるが、通常０～１００℃である。この時の反応時間は、反応温度等の条件により異なるが、通常３時間～７２時間であることが好ましい。

　以上により、式（１３）で表されるポリマーが得られる。

（式（１３）中、各記号は前記のとおりである。）

　得られたポリマーは、そのまま未精製で用いられても、再沈殿やゲルろ過クロマトグラフィー、膜精製等の処理により単離・精製が行われても良い。

［工程（Ｇ１）］
　工程（Ｇ１）は、前記工程（Ｆ１）で得られた前記式（１３）で表されるポリマーを脱保護させることで前記式（４６）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程である。

　脱保護方法としては工程（Ｆ１）で導入したジエチレントリアミン誘導体のＰ^２に応じて既知の方法を用いることができる。例えば、式（１３）中のＰ^２がカルボン酸ｔ－ブチルエステル基である場合、前記式（７）で表されるポリマーの代わりに式（１３）を用いる以外は前記工程（Ｃ１）と同様の方法で脱保護することができる。

　尚、原子団Ｙ^１を２つ有する脂質と原子団Ｙ^２を１つ有するｐＨ応答性ポリマー前駆体とを反応させ、前記工程（Ｅ１）から（Ｇ１）を経ることでｐＨ応答性ポリマーを二本有するｐＨ応答性脂質誘導体を得ることができる。

［（Ｂ）ｐＨ応答性脂質誘導体（１－１）の製造方法］
　本発明に係る前記式（１-１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体は、例えば、重合法、カップリング法（１）、カップリング法（２）により製造することができる。
　なお、以下は代表的な前記式（１-１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法であり、当業者であれば、当該製造方法を適宜変更して用いて、あるいは、当技術分野で公知の他の製造方法やそれらを適宜変更して用いて、前記式（１-１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を製造することも可能である。

　＜ｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法～重合法～＞
　下記式（４７-１）の構造で表されるｐＨ応答性脂質誘導体は、下記工程（Ａ３）、工程（Ｂ２）及び工程（Ｃ２）をその順で実施することにより製造することができる。

　ここで、式（４７－１）中、Ｒ^ｂは－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）であり、その他各記号については、前記式（４７）と同様である。
［工程（Ａ３）］
　工程（Ａ３）は、
（ｉ）前記式（３）で表される重合開始剤と前記式（４）で表されるα―アミノ酸－Ｎ－カルボン酸無水物とを用いて開環重合することにより前記式（５）で表されるポリマーを得て（工程（ｉ））、
（ｉｉ）さらに得られたポリマーの末端アミノ基にＣＯＣＨ_３またはＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）を導入して、前記式（５－１）で表されるポリマーを得る（工程（ｉｉ））、
工程である。
工程（ｉ）
　当業者であれば、ｐＨ応答性脂質誘導体（１）の製造について先に詳述された工程（Ａ２）の説明を参照して、反応条件等を適宜決定して、工程（ｉ）を実施することができる。
工程（ｉｉ）
　当業者であれば、後述の実施例での具体的な記載や、当技術分野で公知のポリマーや方法、並びに技術常識を参照して、反応条件等を適宜決定して、工程（ｉｉ）を実施することができる。
　具体的には、ポリマー（５－１）は、前記式（５）で表されるポリマー（ポリマー（５）とも表記する）の末端アミノ基の保護や変換により合成することができる。末端アミノ基の保護や変換は既知の反応を用いることが可能である。
　例えば、求電子剤として無水酢酸とポリマー（５）の末端アミノ基とを反応させることによりＲ^ｂが－ＣＯ－ＣＨ_３であるポリマー（５－１）を得ることができる。
　また、例えば、求電子剤として無水コハク酸とポリマー（５）末端アミノ基とを反応させることにより、Ｒ^ｂが－ＣＯ－（ＣＨ_２）_２－ＣＯＯＨであるポリマー（５－１）を得ることができる。
　求電子剤の使用量は、ポリマー（５）の末端アミノ基に対して、モル比で、通常、２～１０倍量、好ましくは３～８倍量、最も好ましくは４～６倍量である。
　また、本反応には触媒を用いることが可能であり、例えばＤＭＡＰ等の触媒を使用することができる。
　当該反応は、各種溶媒中で行うことができる。溶媒としては、ポリマー（５）を溶解可能で、かつ求電子剤と反応性を持たない溶媒であれば特に制限はされず、例えば、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、トルエン、アセトニトリル、ジクロロメタン、クロロホルム、Ｎ－メチル－２－ピロリドン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド等の各種有機溶媒、及びそれらの混合物を用いることができる。
　当該反応に用いられる溶媒の総量は、ポリマー（５）に対して容量比で１．５～７０倍量、好ましくは１．８～５０倍量、最も好ましくは２～３０倍量である。
　当該反応の際の反応温度は使用する溶媒により異なるが、通常０～１００℃である。この時の反応時間は、反応温度等の条件により異なるが、通常３時間～７２時間であることが好ましい。

［工程（Ｂ２）］
　工程（Ｂ２）は、
前記工程（Ａ３）で得られた前記式（５－１）で表されるポリマーと、前記式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体とを反応させることにより前記式（７－１）で表されるポリマーを得る工程である。

　当業者であれば、ｐＨ応答性脂質誘導体（１）の製造について先に詳述された工程（Ｂ１）の説明を参照して、反応条件等を適宜決定して、工程（Ｂ２）を実施することができる。
［工程（Ｃ２）］
　工程（Ｃ２）は、前記工程（Ｂ２）で得られた前記式（７－１）で表されるポリマーを脱保護させることで、前記式（４７－１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程である。
　当業者であれば、ｐＨ応答性脂質誘導体（１）の製造について先に詳述された工程（Ｃ１）の説明を参照して、反応条件等を適宜決定して、工程（Ｃ２）を実施することができる。

　＜ｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法～カップリング法（１）～＞
　ｐＨ応答性脂質誘導体（１－１）中、前記式（３６）で表される誘導体における末端アミノ基の水素原子が、Ｒ^ｂ（ここでＲ^ｂは、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である）で置換された誘導体（３６－１）は、ｐＨ応答性脂質誘導体（１）の製造方法において前記した工程（Ｄ１）において、末端アミノ基を有する式（９）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーに代えて、当該末端アミノ基の水素原子がＲ^ｂで置換された官能基含有ｐＨ応答性ポリマー（９－１）を式（８）で表される官能基含有脂質と反応させることにより得ることができる。当該反応は、ｐＨ応答性脂質誘導体（１）の製造について先に詳述された工程（Ｄ１）の説明を参照して、適宜決定して、実施することができる。
　当業者であれば官能基含有ｐＨ応答性ポリマー（９－１）は、当技術分野で公知のポリマーや方法、並びに技術常識および工程（Ａ３）中工程（ｉｉ）を参照して適宜合成して、工程（Ｄ２）の実施に用いることができる。

　＜ｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法～カップリング法（２）～＞
　前記式（１-１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体は脂質誘導体とｐＨ応答性ポリマー前駆体とを共有結合させることでｐＨ応答性脂質誘導体前駆体を合成し、その後ｐＨ応答性脂質誘導体へと誘導することも可能である。
　より具体的には、ｐＨ応答性脂質誘導体（１－１）中、下記の式（４６－１）の構造で表されるｐＨ応答性脂質誘導体は、末端アミノ基を有するｐＨ応答性ポリマー前駆体の代わりに、末端アミノ基の水素原子が、Ｒ^ｂ（ここでＲ^ｂは、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である）で置換されたｐＨ応答性ポリマー前駆体を用いて、ｐＨ応答性脂質誘導体（１）の製造について先に詳述された下記の工程（Ｅ１）、工程（Ｆ１）、及び工程（Ｇ１）に準じて、対応する工程（Ｅ２）、工程（Ｆ２）、及び工程（Ｇ２）をこの順で行うことにより製造することができる。
　当業者であれば末端アミノ基の水素原子が、Ｒ^ｂ（ここでＲ^ｂは、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である）で置換されたｐＨ応答性ポリマー前駆体は当技術分野で公知のポリマーや方法、並びに技術常識および工程（Ａ３）中工程（ｉｉ）を参照して適宜合成することができる。

　以上、本発明のｐＨ応答性脂質誘導体（１）および（１－１）の製造方法を詳述したが、ｐＨ応答性脂質誘導体（ｉ）は、当該説明に基づいて、工程（Ａ）、工程（Ａ１）、工程（Ｂ）、工程（Ｃ）、工程（Ｄ）、工程（Ｅ）、工程（Ｆ）、および工程（Ｇ）を適宜実施することにより製造することができる。

　以上、本発明のｐＨ応答性脂質誘導体について詳述したが、式（ｉ）で表される構造で表されるｐＨ応答性脂質誘導体、式（１）で表される構造で表されるｐＨ応答性脂質誘導体、式（１-１）で表される構造で表されるｐＨ応答性脂質誘導体、式（４７）で表される構造で表されるｐＨ応答性脂質誘導体、式（３６）で表される構造で表されるｐＨ応答性脂質誘導体、および式（４６）で表される構造で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の各構造をさらに明瞭に示すため、以下に式（ｉ）、式（１）、式（１－１）、式（４７）、式（３６）、および式（４６）で表される各構造を拡大してその順に記載する。

　＜ｐＨ応答性脂質誘導体のドラッグデリバリー用輸送担体としての利用＞
　次に本発明のｐＨ応答性脂質誘導体（具体的には、ｐＨ応答性脂質誘導体（ｉ）、ｐＨ応答性脂質誘導体（１）、およびｐＨ応答性脂質誘導体（１-１））をドラッグデリバリー用輸送担体として利用する場合について説明する。以下では、本発明のｐＨ応答性脂質誘導体（ｉ）を代表するものとして（Ａ）ｐＨ応答性脂質誘導体（１）を具体例にとって説明することとする。当業者であれば、当該説明に基づいて、ｐＨ応答性脂質誘導体（ｉ）およびｐＨ応答性脂質誘導体（１－１）についても、同様にドラッグデリバリー用輸送担体として利用することができる。

　本発明のドラッグデリバリー用輸送担体は、前記式（１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を含有するものであり、リン脂質あるいはその誘導体、またはステロールやリン脂質以外の脂質等を基本構成成分とした脂質ナノ粒子が例として挙げられる。

　本発明に係る脂質ナノ粒子の形態は特に限定されないが、例えば、水系溶媒に分散した形態として一枚膜リポソーム、多重層リポソーム、Ｏ／Ｗ型エマルション、Ｗ／Ｏ／Ｗ型エマルション、球状ミセル、固体脂質ナノ粒子、または不定型の層状構造物等が挙げられる。本発明に係る脂質ナノ粒子としては、球状ミセル、固体脂質ナノ粒子、及びリポソームであることが好ましい。

　本発明に係る脂質ナノ粒子は、ｐＨ応答性脂質誘導体の親水性部分が界面の水相側に向かって配列した構造を有する粒子である。ｐＨ応答性脂質誘導体中、脂質部分が疎水性を、ｐＨ応答性官能基を含むポリマー部分が親水性を示すため、脂質ナノ粒子の表面にｐＨ応答性部分が露出する。従って、本発明に係る脂質ナノ粒子はｐＨ応答性脂質誘導体と同様、ｐＨ応答性を有する。すなわち、中性環境下（ｐＨ７．４）では電気的に中性となり、腫瘍組織周辺の弱酸性条件下（ｐＨ６．５）ではカチオン性が増大する特性を有している。

　本発明に係る脂質ナノ粒子の構成脂質の内、本発明のｐＨ応答性脂質誘導体以外の脂質としては、一般的な脂質ナノ粒子を形成する際に使用される脂質を用いることができる。このような脂質としては、例えば、リン脂質、中性脂質、カチオン性脂質、ステロール、または飽和もしくは不飽和の脂肪酸等が挙げられる。これらは１種または２種以上を組み合わせて用いることができる。

　リン脂質としては、ホスファチジルコリン、グリセロリン脂質、スフィンゴリン脂質、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジン酸等が挙げられ、具体的にはジオレイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、ジオレイルホスファチジン酸（ＤＯＰＡ）等を挙げることができる。ステロールとしては、例えば、コレステロール、コレステロールコハク酸、ラノステロール、ジヒドロステロール、デスモステロール、ジヒドロコレステロール等の動物由来のステロール；スチグマステロール、シトステロール、カンペステロール、ブラシカステロール等の植物由来のステロール（フィトステロール）；チモステロール、エルゴステロール等の微生物由来のステロール等が挙げられる。好ましいリン脂質としては、ＤＯＰＥ、好ましいステロールとしてはコレステロールが挙げられる。

　中性脂質としては、グリセロ脂質またはスフィンゴ脂質が挙げられる。これらのグリセロ脂質またはスフィンゴ脂質における脂肪酸残基は特に限定されないが、例えば、炭素数１２から２４の飽和または不飽和の脂肪酸残基を挙げることができる。具体的には、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノレン酸、アラキジン酸、アラキドン酸、ベヘン酸、リグノセリン酸等の脂肪酸由来のアシル基を挙げることができる。　

　カチオン性脂質としては、例えば、ＤＯＤＡＣ（ジオクタデシルジメチルアンモニウムクロリド　ｄｉｏｃｔａｄｅｃｙｌｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ　ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ＤＯＴＭＡ（Ｎ－［２，３－ビス（オレオイルオキシ）プロピル］－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド　Ｎ－［２，３－ｂｉｓ（ｏｌｅｏｙｌｏｘｙ）ｐｒｏｐｙｌ］－Ｎ，Ｎ，Ｎ－ｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ　ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ＤＤＡＢ（ジドデシルジメチルアンモニウムブロミド　ｄｉｄｏｄｅｃｙｌｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ　ｂｒｏｍｉｄｅ）、ＤＯＴＡＰ（１，２－ジオレイルオキシ－３－トリメチルアンモニウムプロパン、１，２－ｄｉｏｌｅｏｙｌｏｘｙ－３－ｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ　ｐｒｏｐａｎｅ）、ＤＣ－Ｃｈｏｌ（３β－［Ｎ－（Ｎ’，Ｎ’－ジメチルアミノエタン）カルバモイル］コレステロール　３β－Ｎ－（Ｎ’，Ｎ’，－ｄｉｍｅｔｈｙｌ－ａｍｉｎｏｅｔｈａｎｅ）－ｃａｒｂａｍｏｙｌ　ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）、ＤＭＲＩＥ（１，２－ジミリストイルオキシプロピル－３－ジメチルヒドロキシエチルアンモニウムブロミド　１，２－ｄｉｍｙｒｉｓｔｏｙｌｏｘｙｐｒｏｐｙｌ－３－ｄｉｍｅｔｈｙｌｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ　ａｍｍｏｎｉｕｍ　ｂｒｏｍｉｄｅ）、ＤＯＳＰＡ（２，３－ジオレイルオキシ－Ｎ－［２－（スペルミンカルボキサミド）エチル］－Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－プロパンアミニウム　トリフルオロアセタート　２，３－ｄｉｏｌｅｙｌｏｘｙ－Ｎ－［２－（ｓｐｅｒｍｉｎｅｃａｒｂｏｘａｍｉｄｏ）ｅｔｈｙｌ］－Ｎ，Ｎ－ｄｉｍｅｔｈｙｌ－１－ｐｒｏｐａｎａｍｉｎｕｍ　ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔａｔｅ）、ＤＳＴＡＰ（１，２－ジステアロイル－３－トリメチルアンモニウムプロパン　１，２－ｄｉｓｔｅａｒｏｙｌ－３－ｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ　ｐｒｏｐａｎｅ）、ＤＯＤＡＰ（ジオレオイル－３－ジメチルアンモニウムプロパン　ｄｉｏｌｅｏｙｌ－３－ｄｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ－ｐｒｏｐａｎｅ）等が挙げられる。好ましいカチオン性脂質としてはＤＯＴＡＰ、ＤＯＤＡＰが挙げられる。　

　脂肪酸等としてはカプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、アラキン酸、ベヘン酸、エルカ酸、リグノセリン酸、またはこれら誘導体等が挙げられる。

　本発明に係る脂質ナノ粒子の構成脂質の内、本発明のｐＨ応答性脂質誘導体以外の脂質の配合比としては、一般的な脂質ナノ粒子を形成する際に使用される配合比を用いることができる。

　本発明の脂質ナノ粒子においては、前記式（１）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体が、脂質ナノ粒子製造時の脂質全体の０．１から３０ｍｏｌ％配合されていることが好ましく、０．５から２０ｍｏｌ％配合されていることが好ましい。０．１ｍｏｌ％より少ない場合、脂質ナノ粒子表面のｐＨ応答性部分の割合が小さくなり、弱酸性条件下で腫瘍組織への集積や取り込みに十分なカチオン性を帯びることができない恐れがある。３０ｍｏｌ％より多い場合、安定な脂質ナノ粒子の製造が困難となる可能性がある。

　本発明に係る脂質ナノ粒子の大きさは、平均粒子径が５００ｎｍ以下であることが好ましく、平均粒子径が４００ｎｍ以下であることがより好ましく、平均粒子径が２００ｎｍ以下であることが更に好ましい。また粒子径分布は、０．５以下であることが好ましく、０．４５以下であることがより好ましく、０．４以下であることが最も好ましい。尚、脂質ナノ粒子の平均粒子径とは、動的光散乱法（Ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ：ＤＬＳ）により測定された個数平均粒子径を意味する。動的光散乱法による測定は、市販のＤＬＳ装置等を用いて行う事ができる。

　本発明の脂質ナノ粒子は、ｐＨ７．２から７．６で中性を示し、ｐＨ６．０から６．６でカチオン性に変化するｐＨ応答性脂質誘導体を構成成分に含むことから、脂質ナノ粒子の表面電荷（ゼータ電位）もまた、ｐＨ変化に応答し変化する。各ｐＨでの脂質ナノ粒子の表面電荷の測定は市販のゼータ電位測定装置を用いて行う事ができる。

　本発明の脂質ナノ粒子のｐＨ７．４でのゼータ電位は、構成成分や内包させる薬剤、及びその含有量等に応じて変化するが、電気的に中性であることが好ましい。例えば核酸を内包した脂質ナノ粒子であれば、－１０ｍＶから＋１０ｍＶの範囲の脂質ナノ粒子が主に利用される。

　本発明の脂質ナノ粒子のｐＨ応答性は、ｐＨ６．５におけるゼータ電位の値とｐＨ７．４におけるゼータ電位の値との差から算出可能である。本発明に係る脂質ナノ粒子のゼータ電位の差（Ｑ）は下記式（Ｆ１）：
　式（Ｆ１）：Ｑ＝（ｐＨ６．５におけるゼータ電位）－（ｐＨ７．４におけるゼータ電位）
から算出可能であり、Ｑは２．５ｍＶ以上であることが好ましく、５ｍＶ以上がさらに好ましい。

　本発明の脂質ナノ粒子はｐＨ７．４の中性環境下では電気的に中性を示すため、血液成分や正常組織にはステルス性を示し、腫瘍組織周辺では微細なｐＨ変化（ｐＨ６．５）に応答してカチオン性が増大する。
　細胞表面は負電荷を有していることから、カチオン性の増大に伴い、腫瘍組織への集積効率及び取り込み効率の向上が期待できる。その結果、輸送担体中に内包された低分子薬剤や核酸医薬品を腫瘍組織周辺部で放出することや腫瘍細胞内に効率的に導入することができる。

　脂質ナノ粒子のゼータ電位の差（Ｑ）が２．５ｍＶより小さい場合、ｐＨの変化に伴うゼータ電位の変位量が小さいため、腫瘍組織への集積性や細胞内への取り込み効率の向上が見込めない恐れがある。

　また本発明の脂質ナノ粒子のｐＨ６．５でのゼータ電位は正の値を示すことがより好ましい。細胞表面が負電荷を有していることから、正の値を示すことで静電的相互作用を促進し、細胞への取り込みがさらに促進される。

　本発明に係る脂質ナノ粒子の製造方法は特に限定されず、当業者に利用可能な任意の方法を採用することができる。一例を挙げれば、すべての脂質成分をクロロホルムなどの有機溶媒に溶解し、エバポレーターによる減圧乾固や噴霧乾燥機による噴霧乾燥を行う事によって脂質膜を形成した後、水系溶媒を乾燥した上記混合物に添加し、さらにホモジナイザー等の乳化機、超音波乳化機、または高圧噴射乳化機等により乳化することで製造することができる。また、リポソームを製造する方法としてよく知られている方法、例えば、逆相常圧法などによっても製造することができる。脂質ナノ粒子の大きさを制御したい場合には、孔径の揃ったメンブランフィルター等を用いて、高圧下でイクストルージョン（押し出し濾過）を行えばよい。

　水系溶媒（分散媒）の種類は特に限定されず、例えば、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝化生理食塩液等の緩衝液、生理食塩水、細胞培養用培地等を使用することができる。これら水系溶媒（分散媒）は脂質ナノ粒子を安定に分散させることができるが、水の他にグルコース、乳糖、ショ糖等の糖水溶液、グリセリン、プロピレングリコール等の多価アルコール等を加えても良い。水系溶媒に分散した脂質膜構造体を安定に長期間保存するには、凝集等の物理的安定性の面から、水系溶媒中の電解質を極力低減することが望ましく、また窒素バブリングにより溶存酸素を除去することが望ましい。さらに、凍結乾燥保存や噴霧乾燥保存をする場合には、例えば、水系溶媒に分散した脂質膜構造体を凍結保存するに際し糖水溶液や多価アルコール水溶液を用いると長期保存が可能になる。水系溶媒の濃度は特に限定されるものではないが、例えば、糖水溶液において、２から２０％（Ｗ／Ｖ）が好ましく、５から１０％（Ｗ／Ｖ）が更に好ましい。また、多価アルコール水溶液においては、１から５％（Ｗ／Ｖ）が好ましく、２から２．５％（Ｗ／Ｖ）が更に好ましい。緩衝液においては、緩衝剤の濃度が５から５０ｍＭが好ましく、１０から２０ｍＭが更に好ましい。水系溶媒中の脂質膜構造体の濃度は特に限定されないが、水系溶媒中の脂質の合計濃度は０．１から５００ｍＭが好ましく、１から１００ｍＭが更に好ましい。

　水系溶媒に分散した脂質ナノ粒子を更に乾燥させる方法としては、通常の凍結乾燥や噴霧乾燥を挙げることができる。この場合、水系溶媒として、先述したように糖水溶液、好ましくはショ糖水溶液、乳糖水溶液を用いることができる。水系溶媒に分散した脂質ナノ粒子を製造した後に更に乾燥すると、脂質ナノ粒子の長期保存が可能となる。また、この乾燥した脂質ナノ粒子に医薬水溶液を添加すると、効率よく脂質混合物が水和され、医薬を効率よく脂質ナノ粒子に保持させることができる。

　本発明に係る脂質ナノ粒子は、腫瘍組織へ薬効成分を送達するキャリアとして特に有用である。本発明に係る脂質ナノ粒子が粒子内部に内包する成分としては、内包可能な大きさであれば特に限定されるものではなく、例えば、低分子薬剤、核酸、糖類、ペプチド類、金属化合物等任意の物質を封入することができる。本発明に係る脂質ナノ粒子に内包させる成分としては、低分子薬剤、核酸、ペプチド類からなる群より選択される１種以上であることが好ましい。核酸としては、例えば、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍＲＮＡ、核酸アプタマー、デコイ核酸、リボザイム、ＣｐＧオリゴ核酸等が挙げられる。

　低分子薬剤としては、分子量が概ね１０００以下である医薬が挙げられる。低分子薬剤は、例えば、抗がん剤、造影剤であっても良い。抗がん剤としては、例えば、パクリタキセル、ドキソルビシン、シスプラチン、ゲムシタビン等が挙げられる。

　ペプチド類としては、ハーセプチン、アバスチン、サイラムザ等の抗体医薬等が挙げられる。

　次に実施例並びに実験例を示して本発明を更に詳細に説明するが、本発明は以下の実施例並びに実験例に限定されるものではない。

［ゲルろ過クロマトグラフィー（ＧＰＣ）分析による分子量の測定］
　島津製作所製の商品名「Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ」もしくはアジレント・テクノロジー株式会社（以下、アジレント社）製の商品名「ＩｎｆｉｎｉｔｙＬａｂ　２Ｄ－ＬＣ」を用いた。
　ポリ（β－ベンジル　Ｌ－グルタミン酸）（以下、ｐＢＬＧと略す）の測定は、カラム：アジレント社製のＰＬゲル（商品名「ＭＩＸＥＤ－Ｄ」）（二本を結合）、カラム温度：４０℃、サンプル濃度：０．２重量％、注入量：１００μＬ、溶離液：１０ｍＭ　ＬｉＢｒを添加したＮ－メチル－２－ピロリドン、流速：０．６ｍｌ／分、検出器；示差屈折率計（ＲＩ）、スタンダード：ポリメチルメタクリレートの条件で測定を行った。
　ポリ（グルタミン酸ジエチレントリアミンカルボン酸）（以下、ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃａｒ）と略す）およびポリ（グルタミン酸ジエチレントリアミンスルホン酸）（以下、ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｓｕｌ）と略す）の測定は、カラム：東ソー株式会社製のＴＳＫゲル二種（商品名「ＴＳＫｇｅｌ　Ｇ３０００ＰＷ_ＸＬ」および商品名「ＴＳＫｇｅｌ　Ｇ５０００ＰＷ_ＸＬ」）を結合、カラム温度：４０℃、サンプル濃度：０．２重量％、注入量：１００μＬ、溶離液：５００ｍＭとなるようにＮａＣｌを添加した１０ｍＭ　ＨＥＰＥＳバッファー（ｐＨ７．４）、流速：０．４ｍｌ／分、検出器：示差屈折率計（ＲＩ）、スタンダード：ポリエチレングリコールの条件で測定を行った。

［製造例１］Ｎ－（２－（２－アミノエチルアミノ）エチル）－３－アミノプロピオン酸
　ｔ-ブチルエステル（ＤＥＴ－Ｃａｒ　ｔＢｕ、化合物３）の合成）

　ジエチレントリアミン（以下、ＤＥＴと略す、４７４．９ｇ，４．６ｍｏｌ、化合物１）を氷冷下で５００ｍＬのメタノールを用いて溶解させ、また別途、アクリル酸ｔ－ブチルエステル（５．９ｇ，４６ｍｏｌ、化合物２）を２７０ｍＬのメタノールを用いて溶解させることで各種溶液を調製した。ＤＥＴ溶液を撹拌させながら、アクリル酸ｔ－ブチルエステル溶液を３時間かけて１５－２５℃を維持しながら滴下した。
　滴下終了後、１５－２５℃で１時間撹拌した後に、減圧留去を行うことで、黄色透明オイルを１０９．７ｇ得た。
　得られたオイルをシリカゲルカラムを用いたカラム精製を行うことで無色透明オイルのＤＥＴ－Ｃａｒ　ｔＢｕ（化合物３）を６６．０ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（ＭｅＯＤ　４００ＭＨｚ）：δ　２．６０－２．８５（ｍ，１０Ｈ），２．４２（ｔ，２Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ）．
ＥＳＩ－ＭＳ：ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ_１１Ｈ_２６Ｎ_３Ｏ_２ ^＋［Ｍ＋Ｈ^＋］：２３２．２０２０；ｆｏｕｎｄ　２３２．１９９５．

［製造例２］ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０（化合物７、ｍ＝２２）の合成
（ＡＺ－ｐＢＬＧ２０（化合物６）の合成）

　ＢＬＧ－Ｎ－カルボキシアンヒドリド（以下、ＢＬＧ－ＮＣＡと略す、８．２ｇ，３１ｍｍｏｌ、化合物５）を窒素雰囲気下で４５ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（以下、ＤＭＦと略す、ＢＬＧ－ＮＣＡの重量に対して５．５倍容量）及び４５ｍＬのジクロロメタン（以下、ＤＣＭと略す、ＢＬＧ－ＮＣＡの重量に対して５．５倍容量）を用いて溶解させた。得られた溶液に、９００ｍｇの１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン（０．９ｇ，４．１ｍｍｏｌ、化合物４）を加え、窒素雰囲気下にて３０分、３０℃にて撹拌した。反応の完了は重ＤＭＳＯ溶媒中、２５℃における^１Ｈ－ＮＭＲ測定で、化合物５のアミドα位に由来するピーク（－ＮＨ－ＣＨ（ＣＯ－）－ＣＨ_２－），δ＝４．３５－４．６０ｐｐｍ）の消失により確認した。
　反応終了後、ＤＣＭの減圧留去を行い、得られた溶液を撹拌しながら５７ｍＬのメタノール（ＢＬＧ－ＮＣＡの重量に対して７．０倍容量）および１１４ｍＬのイオン交換水（ＢＬＧ－ＮＣＡの重量に対して１４．０倍容量）を加えることで白色固体を析出させた。得られた固体を濾別し、２３ｍＬのテトラヒドロフラン（以下、ＴＨＦと略す）を加えて溶解させた後に、２０８ｍＬのエタノール（ＥｔＯＨ）を加えることで白色固体を析出させた。得られた固体を濾別し、減圧乾燥を行うことで白色粉体のＡＺ－ｐＢＬＧ２０（化合物６）を５．６ｇ得た。

　目的物１０ｍｇに対しトリメチルシラン（ＴＭＳ）を添加した重ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）溶媒を１．０ｍＬ添加し、溶解させたサンプルを用いて^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＡＺ－ｐＢＬＧ２０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重ＤＭＳＯ　４００ＭＨｚ）：δ７．００－７．６０（ｍ，重合度×５Ｈ），４．８０－５．３０（ｍ，重合度×２Ｈ），３．７５－４．４０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．００－３．６５（ｍ，１６Ｈ），１．５５－２．７０（ｍ，重合度×４Ｈ）．

　また、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）解析により分子量を算出し、Ｍｎ＝３，６００、Ｍｗ＝５，２００、ＰＤＩ＝１．４４であることを確認した。

（ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０（化合物７、ｍ＝２２の場合）の合成）

　ＡＺ－ｐＢＬＧ２０（３．０ｇ，ポリマー中のベンジル基のモル数１３．６ｍｍｏｌ、化合物６）及び２－ヒドロキシピリジン（３．９ｇ，４１ｍｍｏｌ、ポリマー中のベンジル基のモル数に対して３倍量）を製造例１で合成した化合物３（１５．７ｇ，６８ｍｍｏｌ、ポリマー中のベンジル基のモル数に対して５倍量）及び１５ｍＬのＴＨＦを用いて均一溶解させ、５０℃で２１時間反応させた。反応の完了は重ＤＭＳＯ溶媒中、２５℃における^１Ｈ－ＮＭＲ測定で、ｐＢＬＧ側鎖中のベンジル位のピーク（ＣＨ_２－Ｃ_６Ｈ_５，δ＝５．０２ｐｐｍ）の消失により確認した。
　反応終了後、減圧留去を行い、黄色オイル状溶液とした。得られた溶液に４６．５ｇの６Ｎ塩酸溶液（化合物６の重量に対して１５．５倍量）を滴下し、３０℃で１７時間反応させた。反応の完了は重塩酸水溶媒中、２５℃における^１Ｈ－ＮＭＲ測定で、側鎖中のｔＢｕ基のピーク（Ｃ－（ＣＨ_３）３，δ＝１．４５ｐｐｍ）の消失により確認した。
　反応終了後、５Ｎ水酸化ナトリウム溶液を２４．９ｇ添加することで、ｐＨを３－４に調整し、透析精製および凍結乾燥を行うことで、白黄色粉体のＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０（化合物７）を１．９ｇ得た。

　０．６５％重塩酸重水溶液にトリメチルシリルプロピオン酸（ＴＭＳＰ）を添加した。目的物１０ｍｇに対し上記重溶媒を１．０ｍＬ添加し、溶解させたサンプルを用いて^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重塩酸＋重水　４００ＭＨｚ）：δ　４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．６５－３．８０（ｍ，１４Ｈ），３．２０－３．６５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋２Ｈ），２．８５－３．００（ｔ，重合度×２Ｈ），２．３５－２．５５（ｍ，重合度×２Ｈ），１．９０－２．２５（ｍ、ｄ，重合度×２Ｈ）．

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、ｐＨ７．４におけるＭｎ＝６，３００，Ｍｗ＝７，８００，ＰＤＩ＝１．２４であることを確認した。

　以下、ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃａｒ）２０における具体的な算出方法を一例としてあげる。

（ｍの算出）
　開始剤に由来するピーク（３．６５－３．８０ｐｐｍ）を基準値（１４Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は２２相当であることを確認した。

　以後、各製造例または実施例の最終目的物のポリマーを製造例〇のポリマーまたは実施例〇のポリマーと呼称する場合がある。例として、ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０は、製造例２のポリマーである。

［製造例３］ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物７、ｍ＝３２の場合）の合成
（ＡＺ－ｐＢＬＧ３０（化合物６）の合成）
　化合物５を１０．０ｇ、化合物４を２５６ｍｇとした以外は製造例２と同様の操作を行う事で白色粉体のＡＺ－ｐＢＬＧ３０（化合物６）を７．９ｇ得た。

　製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＡＺ－ｐＢＬＧ３０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重ＤＭＳＯ　４００ＭＨｚ）：δ　７．００－７．６０（ｍ，重合度×５Ｈ），４．８０－５．３０（ｍ，重合度×２Ｈ），３．７５－４．４０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．００－３．６５（ｍ，１６Ｈ），１．５５－２．７０（ｍ，重合度×４Ｈ）．

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、Ｍｎ＝７，２００、Ｍｗ＝９，９００、ＰＤＩ＝１．３８であることを確認した。

　続いて、化合物６を３．５ｇとした以外は製造例２と同様の操作を行う事で、白黄色粉体のＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物７）を３．８ｇ得た。

　製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重塩酸＋重水　４００ＭＨｚ）：δ　４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．６５－３．８０（ｍ，１４Ｈ），３．２０－３．６５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋２Ｈ），２．８５－３．００（ｔ，重合度×２Ｈ），２．３５－２．５５（ｍ，重合度×２Ｈ），１．９０－２．２５（ｍ、ｄ，重合度×２Ｈ）．

　開始剤に由来するピーク（３．６５－３．８０ｐｐｍ）を基準値（１４Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は３２相当であることを確認した。

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、ｐＨ７．４におけるＭｎ＝９，１００、Ｍｗ＝１１，４００、ＰＤＩ＝１．２５であることを確認した。

［製造例４］ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）１００（化合物７、ｍ＝９８の場合）の合成
（ＡＺ－ｐＢＬＧ１００（化合物６）の合成）
　化合物５を３９．８ｇ、化合物４を３０８ｍｇとした以外は製造例２と同様の操作を行う事で白色粉体のＡＺ－ｐＢＬＧ１００（化合物６）を３１．４ｇ得た。

　製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＡＺ－ｐＢＬＧ１００であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重ＤＭＳＯ　４００ＭＨｚ）：δ　７．００－７．６０（ｍ，重合度×５Ｈ），４．８０－５．３０（ｍ，重合度×２Ｈ），３．７５－４．４０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．００－３．６５（ｍ，１６Ｈ），１．５５－２．７０（ｍ，重合度×４Ｈ）．

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、Ｍｎ＝１９，０００、Ｍｗ＝２２，１００、ＰＤＩ＝１．１６であることを確認した。

（ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）１００（化合物７、ｍ＝９８の場合）の合成）
　続いて、化合物６を３０．８ｇとした以外は製造例２と同様の操作を行う事で、白黄色粉体のＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）１００（化合物７）を３０．３ｇ得た。

　製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）１００（ｍ＝９８）であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重塩酸＋重水　４００ＭＨｚ）：δ　４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．６５－３．８０（ｍ，１４Ｈ），３．２０－３．６５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋２Ｈ），２．８５－３．００（ｔ，重合度×２Ｈ），２．３５－２．５５（ｍ，重合度×２Ｈ），１．９０－２．２５（ｍ、ｄ，重合度×２Ｈ）．

　開始剤に由来するピーク（３．６５－３．８０ｐｐｍ）を基準値（１４Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は９８相当であることを確認した。

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、ｐＨ７．４におけるＭｎ＝１７，５００、Ｍｗ＝１９，３００、ＰＤＩ＝１．１０であることを確認した。

［製造例５］ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ３－Ｃａｒ）１００（化合物１１、ｍ＝９８の場合）の合成
（Ｎ－（２－（２－アミノエチルアミノ）エチル）－４－アミノブチル酸　ｔ－ブチルエステル（ＤＥＴ－Ｃ３－Ｃａｒ　ｔＢｕ、化合物１０）の合成）

　３０ｇの硫酸マグネシウムと２ｍＬの硫酸を２００ｍＬのＤＣＭに混合し、１０分撹拌した。次いで、４－ブロモ酪酸（１０．０ｇ，５９．９ｍｍｏｌ、化合物８）及びｔ－ブタノール（２２．２ｇ，１３２．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応溶液をアルゴン雰囲気下、２５℃で７２時間撹拌させた後、飽和重曹水に滴下してクエンチした。
　反応終了後、有機層を飽和重曹水及び飽和食塩水を用いて分液洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。濾過後、濾液を減圧留去することで、無色透明オイルの４－ブロモブチル酸　ｔ-ブチルエステル（化合物９）を１１．１ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３　４００ＭＨｚ）δ　３．４５（ｔ，２Ｈ），２．４０（ｔ，２Ｈ），２．１３（ｑ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．
^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３　１００ＭＨｚ）δ　２７．９，２８．０，３２．８，３３．７，８０．５，１７１．７

　ＤＥＴ（３６．９ｇ，３５７．７ｍｍｏｌ、化合物１）を１００ｍＬのＤＣＭを用いて溶解させた。得られたＤＥＴ溶液に化合物９（１０．０ｇ，４０．８ｍｍｏｌ）を滴下し、室温下２４時間反応させた。
　反応終了後、有機層を５００ｍＭ　ＮａＣｌ溶液を用いて二回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過及び減圧留去後、得られたクルード品をメタノールで希釈し、５Ｍ　ＨＣｌを加えて酸性とした。この溶液にジエチルエーテルを滴下することで、白色固体を析出させた。得られた固体を濾別し、減圧乾燥することで、白色固体のＤＥＴ－Ｃ３－Ｃａｒ　ｔＢｕ（化合物１０）を３．８ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，４００ＭＨｚ）δ　３．４２－３．６４（ｍ，８Ｈ），３．０７（ｔ，２Ｈ），２．４３（ｔ，２Ｈ），１．９５４（ｑ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．

ＥＳＩ－ＭＳ：ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ_１２Ｈ_２８Ｎ_３Ｏ_２ ^＋［Ｍ＋Ｈ^＋］：２４６．２１７６；ｆｏｕｎｄ：２４６．２１４７．

　製造例４で合成したＡＺ－ｐＢＬＧ１００（５０ｍｇ、ポリマー中のベンジル基のモル数０．２３ｍｍｏｌ、化合物６）及び２－ヒドロキシピリジン（１０７ｍｇ，１．１ｍｍｏｌ、ポリマー中のベンジル基のモル数に対して５倍量）をＤＥＴ－Ｃ３－Ｃａｒ　ｔＢｕ（８５２ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ、ポリマー中のベンジル基のモル数に対して１５倍量、化合物１０）及び５ｍＬのＴＨＦを用いて均一溶解させ、５０℃で２１時間反応させた。反応の完了は重ＤＭＳＯ溶媒中、２５℃における^１Ｈ－ＮＭＲ測定で、ｐＢＬＧ側鎖中のベンジル位のピーク（ＣＨ_２－Ｃ_６Ｈ_５，δ＝５．０２ｐｐｍ）の消失により確認した。
　反応終了後、減圧留去を行い、黄色オイル状溶液とした。得られた溶液に４０ｍＬの１Ｎ塩酸溶液（化合物６の重量に対して１５．５倍量）を滴下し、４０℃で２日間反応させた。反応の完了は重塩酸水溶媒中、２５℃における^１Ｈ－ＮＭＲ測定で、側鎖中のｔＢｕ基のピーク（Ｃ－（ＣＨ_３）_３，δ＝１．４５ｐｐｍ）の消失により確認した。
　反応終了後、透析精製および凍結乾燥を行うことで、白黄色粉体のＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ３－Ｃａｒ）１００を５２．７ｍｇ得た。

　目的物１０ｍｇに対しトリメチルシリルプロピオン酸（ＴＭＳＰ）を添加した重水を０．６ｍＬ添加し溶解させたサンプルを用いて、^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ３－Ｃａｒ）１００であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重水　４００ＭＨｚ）δ　４．３０－４．５０（ｂ，重合度×１Ｈ），３．６５－３．８０（ｍ，１４Ｈ），３．００－３．６５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋２Ｈ），２．３０－２．５５（ｂ，重合度×４Ｈ），１．９０－２．２５（ｂ、ｄ，重合度×２Ｈ），１．８２（ｂ，重合度×２Ｈ）．

　開始剤に由来するピーク（３．６５－３．８０ｐｐｍ）を基準値（１４Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は９８相当であることを確認した。

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、ｐＨ７．４におけるＭｎ＝１７，７００、Ｍｗ＝２０，４００、ＰＤＩ＝１．１５であることを確認した。　

［製造例６］ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｓｕｌ）１００（化合物１５、ｍ＝９８の場合）の合成
（Ｎ－（２－（２－アミノエチルアミノ）エチル）－２－アミノエタンスルホン酸　２，２，２－トリフルオロエチルエステル（化合物１４）の合成）

　２，２，２－トリフルオロエタノール（以下、ＴＦＥと略す、１８．４ｇ，１８３．９ｍｍｏｌ）、及びトリエチルアミン（２７．９ｇ，２７５．７ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのＤＣＭを用いて溶解させた後に氷冷した。次いで、混合溶液に２－クロロエタンスルホン酸クロライド（１５．０ｇ，９２ｍｍｏｌ、化合物１２）を滴下し、２０－３０℃で２時間撹拌した。
　反応終了後、濾過を行い、得られた濾液を１Ｍ　ＨＣｌ及びイオン交換水で洗浄し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させた。濾過後、濾液を減圧留去することで、無色透明オイルのビニルスルホン酸　２，２，２－トリフルオロエチルエステル（化合物１３）を１４．５ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）δ　６．６０（ｍ，１Ｈ），６．５１（ｄ，１Ｈ），６．２３（ｄ，１Ｈ），４．４２（ｑ，２Ｈ）．
^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，１００ＭＨｚ）δ　６４．８０，１２０．５５，１２３．０９，１３１．８７．
^１９Ｆ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３７６ＭＨｚ，δ）－７４．０．

　ＤＥＴ（６０．７ｇ，５８８ｍｍｏｌ、化合物１）を１００ｍＬのＤＣＭを用いて溶解させ、氷冷した。ここに化合物１３（１２．０ｇ，６３．１ｍｍｏｌ）を滴下し、室温下２４時間反応させた。
　反応終了後、有機層を５００ｍＭ　ＮａＣｌ溶液を用いて二回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過及び減圧留去後、得られたクルード品をメタノールで希釈し、５Ｍ　ＨＣｌを加えて酸性とした。この溶液にジエチルエーテルを滴下することで、白色固体を析出させた。得られた固体を濾別し、減圧乾燥することで、白色固体のＤＥＴ－Ｃ２－Ｓｕｌ　ＴＦＥ（化合物１４）を９．５ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，４００ＭＨｚ）δ　４．９２（ｑ，２Ｈ），４．０２（ｔ，２Ｈ），３．７４（ｔ，２Ｈ），３．４５－３．６１（ｍ，８Ｈ）．

ＥＳＩ－ＭＳ：ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ_８Ｈ_２０Ｎ_３Ｏ_３Ｓ^＋［Ｍ＋Ｈ^＋］：２９４．１０９４；ｆｏｕｎｄ：２９４．１１０１．　

（ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｓｕｌ）１００（化合物１５）の合成）

　製造例４で合成したＡＺ－ｐＢＬＧ１００（５０ｍｇ，ポリマー中のベンジル基のモル数０．２３ｍｍｏｌ、化合物６）及び２－ヒドロキシピリジン（１０７ｍｇ，１．１ｍｍｏｌ、ポリマー中のベンジル基のモル数に対して５倍量）を化合物１４（１．０２ｇ、３．５ｍｍｏｌ、ポリマー中のベンジル基のモル数に対して１５倍量）及び５ｍＬのＴＨＦを用いて均一溶解させ、５０℃で２１時間反応させた。反応の完了は重ＤＭＳＯ溶媒中、２５℃における^１Ｈ－ＮＭＲ測定で、ｐＢＬＧ側鎖中のベンジル位のピーク（ＣＨ_２－Ｃ_６Ｈ_５，δ＝５．０２ｐｐｍ）の消失により確認した。
　次いで、反応溶液に４０ｍＬの０．３Ｍ　ＮａＯＨ　ＮＭＰ／ＭｅＯＨ溶液を添加し、２４時間室温で撹拌した。
　反応終了後、０．０１Ｍ　ＨＣｌ水溶液及びイオン交換水を用いて透析精製を行い、凍結乾燥を行う事で５Ｎ水酸化ナトリウム溶液を２４．９ｇ添加することで、ｐＨを３－４に調整し、透析精製および凍結乾燥を行うことで、白黄色粉体のＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｓｕｌ）１００を４９．１ｍｇ得た。

　製造例４と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｓｕｌ）１００であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重水　４００ＭＨｚ）：δ　４．３０－４．５０（ｂ，重合度×１Ｈ），３．９０（ｔ，重合度×２Ｈ），３．６５－３．８０（ｍ，１４Ｈ），３．００－３．６５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋２Ｈ），２．４０（ｂ，重合度×２Ｈ），１．９０－２．２５（ｂ、ｄ，重合度×２Ｈ）．

　開始剤に由来するピーク（３．６５－３．８０ｐｐｍ）を基準値（１４Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は９８相当であることを確認した。

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、ｐＨ７．４におけるＭｎ＝１９，３００、Ｍｗ＝２１，６００、ＰＤＩ＝１．１２であることを確認した。

［製造例７］ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ―Ｃ３―Ｓｕｌ）１００（化合物２０、ｍ＝９８の場合）の合成
（Ｎ－（２－（２－アミノエチルアミノ）エチル）－３－アミノプロパンスルホン酸　２，２，２－トリフルオロエチルエステル（ＤＥＴ－Ｃ３－Ｓｕｌ）　ＴＦＥ（化合物１９）の合成）

　ＴＦＥ（１６．９ｇ，１６８．９ｍｍｏｌ）、及びトリエチルアミン（１７．１ｇ，１６９．０ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのＤＣＭを用いて溶解させた後に氷冷した。次いで、混合溶液に３－クロロプロパンスルホン酸クロライド（１５．０ｇ，８４．７ｍｍｏｌ、化合物１６）を滴下し、２０－３０℃で２時間撹拌した。
　反応終了後、濾過を行い、得られた濾液を１Ｍ　ＨＣｌ及びイオン交換水で洗浄し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させた。濾過後、濾液を減圧留去することで、３－クロロプロパンスルホン酸　２，２，２－トリフルオロエチルエステル（化合物１７）を１６．９ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ　（ＣＤＣｌ_３，５００ＭＨｚ）δ　４．５２（ｑ，２Ｈ），３．６８（ｔ，２Ｈ），３．４３（ｔ，２Ｈ），２．３７（ｍ，３Ｈ）．
^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，１００ＭＨｚ）δ　１２１．８，６３．８，４８．７，４２．２，２８．３．
^１９Ｆ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，３７６ＭＨｚ）δ　－７３．９

　１８．７ｇのヨウ化ナトリウム（１８．７ｇ，１２４．８ｍｍｏｌ）を４０ｍＬのアセトンを用いて懸濁溶液として調製し、化合物１７（１５．０ｇ，６２．３ｍｍｏｌ）を加え、５６℃で三日間撹拌した。
　反応終了後、濾過及び濾液の減圧留去を行った。ジクロロメタンで希釈後、イオン交換水で分液洗浄し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させた。濾過及び濾液の減圧留去を行うことで、３－ヨードプロパンスルホン酸　２，２，２，－トリフルオロエチルエステル（化合物１８）を１６．８ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ　（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）δ　４．５２（ｑ，２Ｈ），３．３６（ｔ，２Ｈ），３．３１（ｔ，２Ｈ），２．３９（ｍ，３Ｈ）．
^１３Ｃ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，１００ＭＨｚ）δ　１２１．９，６３．８，５１．９，２７．０，１．８．
^１９Ｆ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３７６ＭＨｚ）δ　－７３．９

　ＤＥＴ（３９．８ｇ，３８５．８ｍｍｏｌ、化合物１）を１００ｍＬのＤＣＭを用いて溶解させ、氷冷した。ここに化合物１８（１６．０ｇ，４８．２ｍｍｏｌ）を滴下し、室温下２４時間反応させた。
　反応終了後、有機層を５００ｍＭ　ＮａＣｌ溶液を用いて二回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過及び減圧留去後、得られたクルード品をメタノールで希釈し、５Ｍ　ＨＣｌを加えて酸性とした。この溶液にジエチルエーテルを滴下することで、白色固体を析出させた。得られた固体を濾別し、減圧乾燥することで、白色固体のＤＥＴ－Ｃ３－Ｓｕｌ　ＴＦＥ（化合物１９）を７．０ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，４００ＭＨｚ）δ　４．９２（ｑ，２Ｈ），４．０２（ｔ，２Ｈ），３．７４（ｔ，２Ｈ），３．４５－３．６１（ｍ，８Ｈ）．

ＥＳＩ－ＭＳ：ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ_８Ｈ_２０Ｎ_３Ｏ_３Ｓ^＋　［Ｍ＋Ｈ^＋］：３０８．１２５０；ｆｏｕｎｄ：３０８．１２７２．

（ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ３－Ｓｕｌ）１００（化合物２０、ｍ＝９８の場合）の合成）

　ＤＥＴ－Ｃ２－Ｓｕｌ　ＴＦＥ（化合物１４）の代わりにＤＥＴ－Ｃ３－Ｓｕｌ　ＴＦＥ（１．０６ｇ、３．４ｍｍｏｌ、化合物１９）を用いた以外は製造例６と同様の操作を行う事で白黄色粉体のＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ３－Ｓｕｌ）１００（化合物２０）を５３．１ｍｇ得た。

　製造例４と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ３－Ｓｕｌ）１００であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重水　４００ＭＨｚ）δ　４．３０－４．５０（ｂ，重合度×１Ｈ），３．６５－３．８０（ｍ，１４Ｈ），３．２０－３．５０（ｍ，重合度×１０Ｈ＋２Ｈ），３．０５（ｂ，重合度×２Ｈ），２．４５（ｂ，重合度×２Ｈ），１．８０－２．３５（ｂ、ｍ，重合度×４Ｈ）．

　開始剤に由来するピーク（３．６５－３．８０ｐｐｍ）を基準値（１４Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は９８相当であることを確認した。

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、ｐＨ７．４におけるＭｎ＝２０，８００、Ｍｗ＝２３，１００、ＰＤＩ＝１．１１であることを確認した。

［製造例８］ＳＨ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ―Ｃ２―Ｃａｒ）３０（化合物２３、ｍ＝３３の場合）の合成
（ＳＨ－ｐＢＬＧ３０（化合物２２）の合成）

　化合物４の代わりにアミノエタンチオール（９０ｍｇ、化合物２１）とした以外は製造例２と同様の操作を行う事で白色粉体のＳＨ－ｐＢＬＧ３０（化合物２２）を７．８ｇ得た。

　製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＳＨ－ｐＢＬＧ３０であることを確認した。
^１Ｈ　ＮＭＲ（重ＤＭＳＯ　４００ＭＨｚ）δ　７．００－７．６０（ｍ，重合度×５Ｈ），４．８０－５．３０（ｍ，重合度×２Ｈ＋１Ｈ），３．７５－４．４０（ｍ，重合度×１Ｈ），２．６５－３．２０（ｍ，４Ｈ），１．５５－２．６５（ｍ，重合度×４Ｈ）．

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、Ｍｎ＝７，６００、Ｍｗ＝１０，６００、ＰＤＩ＝１．３９であることを確認した。

（（ＳＨ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物２３）、ｍ＝３３の場合）の合成）

　続いて、化合物６の代わりにＳＨ－ｐＢＬＧ３０（３．５ｇ、化合物２２）とした以外は製造例２と同様の操作を行う事で、白黄色粉体のＳＨ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物２３）を３．８ｇ得た。

　製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＳＨ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重塩酸＋重水　４００ＭＨｚ）δ　４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．２０－３．８５（ｍ，重合度×１０Ｈ），３．１０－３．２０（ｍ，２Ｈ），２．６５－３．００（ｔ＋ｍ，重合度×２Ｈ＋２Ｈ），２．３５－２．５５（ｍ，重合度×２Ｈ），１．９０－２．２５（ｍ、ｄ，重合度×２Ｈ）．

　開始剤に由来するピーク（３．１０－３．２０ｐｐｍ）を基準値（２Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は３３相当であることを確認した。

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、ｐＨ７．４におけるＭｎ＝９，５００、Ｍｗ＝１１，８００、ＰＤＩ＝１．２４であることを確認した。

［製造例９］ＡＺ－Ｐｈ－（ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０）２（化合物３１、ｍ＝２９、ｎ＝２の場合）の合成

（３，５－ビス[（３－Ｂｏｃ－アミノ）プロピルオキシ]安息香酸メチル（化合物２６）の合成）
　３，５－ジヒドロキシ安息香酸メチル（３．０ｇ，１７．８ｍｍｏｌ、化合物２４）、３－Ｂｏｃ－アミノプロピルメシラート（１０．２ｇ，４０．２ｍｍｏｌ、化合物２５）を３０ｍＬのＤＭＦを用いて完全に溶解させた。次いで、炭酸カリウム（９．５ｇ，６８．７ｍｍｏｌ）を添加し、４０℃で４８時間撹拌させた。
　反応終了後、反応溶媒の減圧留去を行い、酢酸エチルを用いて再溶解させた。クエン酸水溶液を用いて分液洗浄を行い、硫酸マグネシウムで乾燥させた。
　濾過後、濾液を減圧留去することで、褐色固体を得、これを再結晶することで白色固体の３，５－ビス[（３－Ｂｏｃ－アミノ）プロピルオキシ]安息香酸メチル（化合物２６）を５．０ｇ得た。

（３，５－ビス[（３－Ｂｏｃ－アミノ）プロピルオキシ]安息香酸（化合物２７）の合成）
　化合物２６（３．０ｇ，６．２ｍｍｏｌ）を４２ｍＬのＴＨＦ及び１５ｍＬのＭｅＯＨを用いて完全に溶解させた。次いで、６ｍＬの４Ｎ　ＮａＯＨを添加し、３０℃で５時間撹拌させた。
　反応終了後、反応溶媒の減圧留去を行い、クエン酸水溶液を用いて再溶解させた。ジクロロメタン抽出、及び飽和食塩水を用いて分液洗浄を行い、硫酸マグネシウムで乾燥させた。
　濾過後、濾液を減圧留去することで、白色固体の３，５－ビス[(３－Ｂｏｃ－アミノ）プロピルオキシ）安息香酸（化合物２７）を２．８ｇ得た。

（ＡＺ－ＥＧ_３－Ｐｈ－ＤｉＢｏｃＰｒ、化合物２８の合成）
　化合物２７（１．１ｇ，２．３ｍｍｏｌ）、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（０．４ｇ，３．４ｍｍｏｌ）を８ｍＬのＴＨＦ及び１５ｍＬのジクロロメタンを用いて完全に溶解させた。次いで１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（０．７ｇ，３．４ｍｍｏｌ）を添加し、３０℃で４８時間撹拌させた。
　続いて、１１－アジド－３，６，９－トリオキサウンデカン－１－アミン（０．６ｇ，２．５ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（４８０μＬ，３．４ｍｍｏｌ）を添加し、さらに２４時間撹拌させた。
　反応終了後、減圧留去を行う事で褐色粘性体を得、これをカラム精製することで無色透明粘性オイルのＡＺ－ＥＧ_３－Ｐｈ－ＤｉＢｏｃＰｒ（化合物２８）を１．１ｇ得た。

（ＡＺ－ＥＧ_３－Ｐｈ－ＤｉＰＡ、化合物２９の合成）
　化合物２８（１．１ｇ，１．６ｍｍｏｌ）を６ｍＬの酢酸エチル及び６ｍＬのＥｔＯＨを用いて完全に溶解させた。次いで、１２ｍＬの４Ｎ　ＨＣｌ酢酸エチル溶液を添加し、室温で４時間撹拌させた。
　反応終了後、減圧留去を行う事で白色固体のＡＺ－ＥＧ_３－Ｐｈ－ＤｉＰＡ・ＨＣｌを０．８ｇ得た。
　得られた塩酸塩をメタノールを用いて溶解させ、陰イオン交換樹脂による脱塩後、減圧留去を行うことで白色固体のＡＺ－ＥＧ_３－Ｐｈ－ＤｉＰＡ（化合物２９）を０．５ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重クロロホルム＋重ジメチルスルホキシド　４００ＭＨｚ）δ　７．２０－７．３０（ｍ，１Ｈ），６．８５－７．００（ｓ，２Ｈ），６．５０－６．６０（ｓ，１Ｈ），４．１０－４．２５（ｔ，４Ｈ），３．５０－３．７５（ｍ，１４Ｈ），３．１０－３．２０（ｔ，２Ｈ），２．８０－３．００（ｔ，４Ｈ），１．８０－２．０５（ｍ，４Ｈ）．

（ＡＺ－Ｐｈ－（ｐＢＬＧ３０）２（化合物３０）の合成）
　化合物５を６．０ｇ、化合物２９を１７８ｍｇとした以外は製造例２と同様の操作を行う事で白色粉体のＡＺ－Ｐｈ－（ｐＢＬＧ３０）２（化合物３０）を４．５ｇ得た。

　製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＡＺ－Ｐｈ－（ｐＢＬＧ３０）２であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重ＤＭＳＯ　４００ＭＨｚ）δ　６．８０－７．６０（ｍ，重合度×５Ｈ＋３Ｈ），６．５０－６．６（ｓ，１Ｈ），４．８０－５．３０（ｍ，重合度×２Ｈ），３．７５－４．４０（ｍ，重合度×１Ｈ＋４Ｈ），３．５０－３．７５（ｍ，１４Ｈ），３．００－３．５０（ｍ，６Ｈ），１．５５－２．７０（ｍ，重合度×４Ｈ＋４Ｈ）．

　また、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）解析により分子量を算出し、Ｍｎ＝１１，５００、Ｍｗ＝１６，６００、ＰＤＩ＝１．４４であることを確認した。

　（ＡＺ－Ｐｈ－（ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０）２（化合物３１）の合成）
　化合物６の代わりにＡＺ－Ｐｈ－（ｐＢＬＧ３０）２（５００ｍｇ、化合物３０）を用いた以外は製造例２と同様の操作を行う事で、白色粉体のＡＺ－Ｐｈ－（ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０）２（化合物３１）を２２０ｍｇ得た。

　製造例２と同様の手法で、^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、そのシフト値からＡＺ－Ｐｈ－（ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０）２であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重塩酸＋重水　４００ＭＨｚ）δ　６．８０－７．１０（ｍ，２Ｈ），６．５－６．６５（ｍ，１Ｈ），４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），４．１０－４．３０（ｍ，４Ｈ），３．６５－３．８０（ｍ，１４Ｈ），３．２０－３．６５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋８Ｈ），２．８５－３．００（ｔ，重合度×２Ｈ），２．３５－２．５５（ｍ，重合度×２Ｈ），１．９０－２．２５（ｍ、ｄ，重合度×２Ｈ＋４Ｈ）．

　開始剤に由来するピーク（３．６５－３．８０ｐｐｍ）を基準値（１４Ｈ）とし、ポリペプチドのアミノ基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は２９相当であることを確認した。

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、ｐＨ７．４におけるＭｎ＝１３，６０００，Ｍｗ＝１７，０００，ＰＤＩ＝１．２４であることを確認した。

［製造例１０］末端アセチル化ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物５６、ｍ＝３２の場合）の合成

（末端アセチル化ＡＺ－ｐＢＬＧ３０（化合物５５）の合成）

　製造例３で合成したＡＺ－ｐＢＬＧ３０（５０ｍｇ、６．９１μｍｏｌ、化合物６）及び無水酢酸（３．５ ｍｇ、 ０．０３５ｍｍｏｌ、 ポリマーのモル数に対して５倍量）、ジメチルアミノピリジン（０．０４ ｍｇ、 ０．３５μｍｏｌ、ポリマーのモル数に対して０．０５倍量）を０．５ｍＬのジクロロメタンを用いて均一溶解させ、室温で１６時間反応させた。反応の完了はＴＬＣスポットにて原料由来のニンヒドリン呈色の消失により確認した。
　反応終了後、ＴＨＦとエタノールを用いた再沈殿精製を行い、乾燥を行うことで末端アセチル化ＡＺ－ｐＢＬＧ３０の白色粉体を３７ｍｇ得た。

（末端アセチル化ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物５６）の合成）

　ＡＺ－ｐＢＬＧ２０（化合物６）の代わりに末端アセチル化ＡＺ－ｐＢＬＧ３０（３０ｍｇ，ポリマー中のベンジル基のモル数０．１４ｍｍｏｌ、化合物５５）を用いた以外は製造例２と同様の操作を行うことで、白黄色粉体の末端アセチル化ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物５６）を３２ｍｇ得た。

　製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、末端アセチル化ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重塩酸＋重水　４００ＭＨｚ）：δ　４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．６５－３．８０（ｍ，１４Ｈ），３．２０－３．６５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋２Ｈ），２．８５－３．００（ｔ，重合度×２Ｈ），２．３５－２．５５（ｍ，重合度×２Ｈ），１．９０－２．２５（ｍ、ｄ，重合度×２Ｈ＋３Ｈ）．

　開始剤に由来するピーク（３．６５－３．８０ｐｐｍ）を基準値（１４Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は３２相当であることを確認した。

［比較例１－１］ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ４－Ｃａｒ）１００（化合物３５、ｍ＝９８の場合）の合成
（Ｎ－（２－（２－アミノエチルアミノ）エチル）－５－アミノペンタン酸　ｔ－ブチルエステル（ＤＥＴ－Ｃ４－Ｃａｒ）　ｔＢｕ（化合物３４）の合成）

　化合物８の代わりに５－ブロモペンタン酸（１０．０ｇ，５５．２ｍｍｏｌ、化合物３２）を用いた以外は製造例５と同様の操作を行うことで、無色透明オイルの５－ブロモペンタン酸　ｔ－ブチルエステル（化合物３３）を１１．８ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）δ　３．４２（ｔ，２Ｈ），２．２６（ｔ，２Ｈ），１．８９（ｍ，２Ｈ），１．７４（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．

　化合物９の代わりに５－ブロモペンタン酸　ｔ－ブチルエステル（１０．０ｇ，４２．１ｍｍｏｌ、化合物３３）を用いた以外は製造例５と同様の操作を行うことで、白色固体のＤＥＴ－Ｃ４－Ｃａｒ　ｔＢｕ（化合物３４）を３．８ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，４００ＭＨｚ）δ　３．４１－３．５９（ｍ，８Ｈ），３．１６（ｔ，２Ｈ），２．４５（ｔ，２Ｈ），１．６５－１．８１（ｍ，４Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．

ＥＳＩ－ＭＳ：ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ_１３Ｈ_３０Ｎ_３Ｏ_２ ^＋［Ｍ＋Ｈ^＋］：２６０．２３３２；ｆｏｕｎｄ：２６０．２２９７

（ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ４－Ｃａｒ）１００（化合物３５、ｍ＝９８の場合）の合成）

　ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ　ｔＢｕ（化合物３）の代わりにＤＥＴ－Ｃ４－Ｃａｒ　ｔＢｕ（９０１ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ、化合物３４）を用いた以外は製造例２と同様の操作を行う事で白黄色粉体のＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ４－Ｃａｒ）１００を５３．６ｍｇ得た。

　製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ４－Ｃａｒ）１００であることを確認した。
^１Ｈ　ＮＭＲ（重水４００ＭＨｚ）δ　４．３０－４．５０（ｂ，重合度×１Ｈ），３．６５－３．８０（ｍ，１４Ｈ），３．２０－３．６５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋２Ｈ），２．４２（ｂ，重合度×２Ｈ），２．３１（ｔ，重合度×２Ｈ），１．９０－２．２０（ｂ、ｄ，重合度×２Ｈ），１．６５（ｑ，重合度×２Ｈ），１．５５（ｑ，重合度×２Ｈ）．

　開始剤に由来するピーク（３．６５－３．８０ｐｐｍ）を基準値（１４Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は９８相当であることを確認した。

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、ｐＨ７．４におけるＭｎ＝１８，５００、Ｍｗ＝２０，６００、ＰＤＩ＝１．１１であることを確認した。

［比較例１－２］ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ４－Ｓｕｌ）１００（化合物４１、ｍ＝９８の場合）の合成
（Ｎ－（２－（２－アミノエチルアミノ）エチル）－４－アミノブタンスルホン酸　２，２，２－トリフルオロエチルエステル（ＤＥＴ－Ｃ４－Ｓｕｌ）　ＴＦＥ（化合物４０）の合成）

　１１．３ｍＬのチオニルクロライド（１１．３ｍＬ，１５５．８ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＤＭＦを用いて溶解させた。次いで、得られた混合溶液に１，４－ブタンスルトン（１５．０ｇ，１１０．２ｍｍｏｌ、化合物３６）を滴下し、アルゴン雰囲気下、７０℃で３日間撹拌した。チオニルクロライド（３ｍＬ，４１．４ｍｍｏｌ）を再度反応液に添加し、７０℃でさらに３日撹拌した。
　反応終了後、トルエンを添加して、減圧留去した。この工程を二回繰り返し、得られた残渣の真空乾燥を行うことで、４－クロロブタンスルホン酸クロライド（化合物３７）を１７．９ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）δ　３．７５（ｔ，２Ｈ），３．６１（ｔ，２Ｈ），２．１９－２．２９（ｍ，２Ｈ），１．９６－２．０５（ｍ，２Ｈ）．

　化合物１６の代わりに４－クロロブタンスルホン酸クロライド（１５．０ｇ，７８．５ｍｍｏｌ、化合物３７）を用いた以外は製造例７と同様の操作を行う事で、４－クロロブタンスルホン酸　２，２，２－トリフルオロエチルエステル（化合物３８）を１６．３ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）δ　４．５３（ｑ，２Ｈ），３．５８（ｔ，２Ｈ），３．２６（ｔ，２Ｈ），２．０９（ｑ，２Ｈ），１．９６（ｑ，２Ｈ）．

　化合物１７の代わりに４－クロロブタンスルホン酸　２，２，２－トリフルオロエチルエステル（１５．０ｇ，５８．９ｍｍｏｌ、化合物３８）を用いた以外は製造例７と同様の操作を行う事で、４－ヨードブタンスルホン酸　２，２，２－トリフルオロエチルエステル（化合物３９）を１７．３ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，４００ＭＨｚ）δ　４．５３（ｑ，２Ｈ），３．２６（ｔ，２Ｈ），３．１９（ｔ，２Ｈ），１．９２－２．０９（ｍ，２Ｈ）．

　化合物１８の代わりに、４－ヨードブタンスルホン酸　２，２，２－トリフルオロエチルエステル（１６．０ｇ，４６．２ｍｍｏｌ、化合物３９）を用いた以外は製造例７と同様の操作を行う事で、白色固体のＤＥＴ－Ｃ４－Ｓｕｌ　ＴＦＥ（化合物４０）を７．０ｇ得た。

^１Ｈ　ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，４００ＭＨｚ）δ　４．８１（ｑ，２Ｈ），３．５６（ｔ，２Ｈ），３．１２－３．３１（ｍ，１０Ｈ），１．８４－２．０２（ｍ，４Ｈ）．

ＥＳＩ－ＭＳ：ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ_８Ｈ_２０Ｎ_３Ｏ_３Ｓ^＋［Ｍ＋Ｈ^＋］：３２２．１４９７；ｆｏｕｎｄ：３２２．１４６３．

（ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ４－Ｓｕｌ）１００（化合物４１、ｍ＝９８の場合）の合成）

　ＤＥＴ－Ｃ２－Ｓｕｌ　ＴＦＥ（化合物１４）の代わりにＤＥＴ－Ｃ４－Ｓｕｌ　ＴＦＥ（１．１２ｇ、３．５ｍｍｏｌ、化合物４０）を用いた以外は製造例６と同様の操作を行う事で、白黄色粉体のＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ４－Ｓｕｌ）１００（化合物４１）を５１．３ｍｇ得た。

　製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ４－Ｓｕｌ）１００であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（重水　４００ＭＨｚ）δ　４．３０－４．５０（ｂ，重合度×１Ｈ），３．６５－３．８０（ｍ，１４Ｈ），３．２０－３．６５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋２Ｈ），２．９２（ｔ，重合度×２Ｈ），２．４２（ｂ，重合度×２Ｈ），１．７０－２．３０（（ｂ、ｍ）＋ｑ，重合度×４Ｈ），１．６０－１．７０（ｑ，重合度×２Ｈ）．

　開始剤に由来するピーク（３．６５－３．８０ｐｐｍ）を基準値（１４Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は９８相当であることを確認した。

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、ｐＨ７．４におけるＭｎ＝２１，７００、Ｍｗ＝２３，９００、ＰＤＩ＝１．１０であることを確認した。

［実施例１－１］ＤＳＧＥ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物４４、ｍ＝３１の場合）の合成

（ＤＳＧＥ－ｐＢＬＧ３０　（化合物４３）の合成）
　化合物５を１．４３ｇ、化合物４の代わりにＤＳＧＥ－ａｍｉｎｅ（１００ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ、化合物４２）とした以外は製造例２と同様の操作を行う事で白色粉体のＤＳＧＥ－ｐＢＬＧ３０（化合物４３）を０．９ｇ得た。

　測定溶媒を重クロロホルムとした以外は製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＤＳＧＥ－ｐＢＬＧ３０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ　（重クロロホルム　４００　ＭＨｚ）δ　７．１０－７．５０（ｍ，重合度×５Ｈ），４．８０－５．３０（ｍ，重合度×２Ｈ），３．８０－４．３０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．２０－３．８０（ｍ，９Ｈ），１．９０－２．９０（ｍ，重合度×４Ｈ），１．２５（ｂ，６４Ｈ），０．８８（ｔ，６Ｈ）．

　脂質末端のメチル基由来のピーク（０．８８ｐｐｍ）を基準値（６Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（３．８０－４．３０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は３１相当であることを確認した。

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、Ｍｎ＝９，８００，　Ｍｗ＝１２，９００，
　ＰＤＩ＝１．３２であることを確認した。

（ＤＳＧＥ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物４４、ｍ＝３１の場合）の合成）

　続いて、化合物６の代わりにＤＳＧＥ－ｐＢＬＧ３０（０．９ｇ、化合物４３）を、６Ｎ塩酸溶液を用いた脱保護反応を５０℃で実施した以外は製造例２と同様の操作を行う事で、白黄色粉体のＤＳＧＥ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物４４）を０．８ｇ得た。

　製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＤＳＧＥ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ　（重塩酸水　４００ＭＨｚ）δ　４．３０－４．５０（ｂ，重合度×１Ｈ），３．２０－３．９０（ｍ，重合度×１０Ｈ＋９Ｈ），２．９０（ｂ，重合度×２Ｈ），２．４５（ｂ，重合度×２Ｈ），１．８０－２．２５（ｍ，重合度×２Ｈ），１．２０－１．４０（ｂ，６４Ｈ），０．８０－０．９５（ｂ，６Ｈ）．

　脂質末端のメチル基由来のピーク（０．８０－０．９５ｐｐｍ）を基準値（６Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は３１相当であることを確認した。

［実施例１－２］ＤＳＧＥ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）１００（化合物４４、ｍ＝９８の場合）の合成

（ＤＳＧＥ－ｐＢＬＧ１００（化合物４３）の合成）

　化合物５を２．８６ｇ、化合物４の代わりにＤＳＧＥ－ａｍｉｎｅ（６０ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ、化合物４２）を、６Ｎ塩酸溶液を用いた脱保護反応を５０℃で実施した以外は製造例２と同様の操作を行う事で白色粉体のＤＳＧＥ－ｐＢＬＧ１００（化合物４３）を２．１ｇ得た。

　実施例１－１と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＤＳＧＥ－ｐＢＬＧ１００であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ　（重クロロホルム　４００ＭＨｚ）δ　７．１０－７．５０（ｍ，重合度×５Ｈ），４．８０－５．３０（ｍ，重合度×２Ｈ），３．８０－４．３０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．２０－３．８０（ｍ，９Ｈ），１．９０－２．９０（ｍ，重合度×４Ｈ），１．２５（ｂ，６４Ｈ），０．８８（ｔ，６Ｈ）．

　脂質末端のメチル基由来のピーク（０．８８ｐｐｍ）を基準値（６Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（３．８０－４．３０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は９８相当であることを確認した。

　また、ＳＥＣ解析により分子量を算出し、Ｍｎ＝１５，２００，　Ｍｗ＝１８，６００，　ＰＤＩ＝１．２２であることを確認した。

　（ＤＳＧＥ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）１００（化合物４４、ｍ＝９８の場合）の合成）

　続いて、ＤＳＧＥ－ｐＢＬＧ３０の代わりにＤＳＧＥ－ｐＢＬＧ１００（１．０ｇ、化合物４３）とした以外は実施例１－１と同様の操作を行う事で、白黄色粉体のＤＳＧＥ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）１００（化合物４４）を１．３０ｇ得た。

　製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＤＳＧＥ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）１００であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ　（重塩酸水　４００　ＭＨｚ）δ　４．３０－４．５０（ｂ，重合度×１Ｈ），３．２０－３．９０（ｍ，重合度×１０Ｈ＋９Ｈ），２．９０（ｂ，重合度×２Ｈ），２．４５（ｂ，　重合度×２Ｈ），１．８０－２．２５（ｍ，重合度×２Ｈ），１．２０－１．４０（ｂ，６４Ｈ），０．８０－０．９５（ｂ，６Ｈ）．

　脂質末端のメチル基由来のピーク（０．８０－０．９５ｐｐｍ）を基準値（６Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は９８相当であることを確認した。

［実施例１－３］ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０（化合物４６、ｍ＝２２の場合）の合成　

　製造例２で合成したＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０（３９６ｍｇ，６３μｍｏｌ，化合物７、ｍ＝２２）を１９．８ｍＬのイオン交換水（ポリマーの重量に対して５０倍容量）に均一溶解させた。別途、ＤＳＰＥ－ＥＧ_４－ＤＢＣＯ（２４１ｍｇ，１８８μｍｏｌ、ポリマーのモル数に対して３倍量、化合物４５）を１９．８ｍＬのジクロロメタン（ポリマーの重量に対して５０倍容量）に均一溶解させ、水溶液に添加した。この二層反応溶液を遮光下、室温で二日撹拌した。
　反応終了後、得られた反応溶液を８００ｍＬのアセトニトリルに滴下して白色沈殿を析出させた。上澄みを廃棄し、アセトニトリルで二回洗浄後、室温で真空乾燥を行う事で、白黄色粉体のＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０（化合物４６）を６２６ｍｇ得た。

　トリメチルシリルプロピオン酸（ＴＭＳＰ）を添加し、重水０．６ｍＬあたり２０％重塩酸２０ｍｇおよびＴＨＦ０．４ｍＬを添加した重溶媒を調製した。目的物５ｍｇに対し上記重溶媒を０．６ｍＬ添加し、溶解させたサンプルを用いて^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、そのシフト値からＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４０％重ＴＨＦ重塩酸水　４００ＭＨｚ）δ　７．２０－７．８０（ｍ，８Ｈ），５．２０（ｄ，１Ｈ），４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．３０－４．２５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋５４Ｈ），２．９０（ｂ，重合度×２Ｈ），２．００－２．６０（ｍ，重合度×４Ｈ），１．２８（ｂ，６０Ｈ）,０．８５（ｔ，６Ｈ）．

［実施例１－４］ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物４６、ｍ＝３２の場合）の合成　
　ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０の代わりに製造例３で合成したＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（７００ｍｇ，７６μｍｏｌ，化合物７、ｍ＝３２）を、ＤＳＰＥ－ＥＧ_４－ＤＢＣＯ（１４２ｍｇ，１１４μｍｏｌ、ポリマーのモル数に対して１．５倍量、化合物４５）を用いた以外は実施例１－３と同様の操作を行う事で白黄色粉体のＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物４６）を７８１ｍｇ得た。

　実施例１－３と同様の手法で、^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、そのシフト値からＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４０％重ＴＨＦ重塩酸水　４００ＭＨｚ）δ　７．２０－７．８０（ｍ，８Ｈ），５．２０（ｄ，１Ｈ），４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．３０－４．２５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋５４Ｈ），２．９０（ｂ，重合度×２Ｈ），２．００－２．６０（ｍ，重合度×４Ｈ），１．２８（ｂ，６０Ｈ），０．８５（ｔ，６Ｈ）．

［実施例１－５］ＤＳＰＥ－ａｌｋｅｎｙｌ－ＨＳ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物４８、式（１）中　ｍ＝３３の場合）の合成

　製造例８で合成した７００ｍｇのＳＨ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（７００ｍｇ，７４μｍｏｌ、化合物２３、ｍ＝３３）を３５．０ｍＬの水に均一溶解させた。別途、ＤＳＰＥ－ａｌｋｅｎｙｌ（１０１ｍｇ，１２２μｍｏｌ、ポリマーのモル数に対して１．６倍量、化合物４７）を３５．０ｍＬのジクロロメタンに均一溶解させ、水溶液に添加し窒素下で撹拌した。この二層溶液に１０．３ｍｇの過硫酸アンモニウムを添加し、窒素下、室温で二日撹拌した。
　反応終了後、反応溶液を１４００ｍＬのアセトニトリルに滴下して白色沈殿を析出させた。上澄みを廃棄し、水とアセトニトリルによる再沈殿精製を２回繰り返して、室温で真空乾燥を行うことで、白黄色粉体のＤＳＰＥ－ａｌｋｅｎｙｌ－ＨＳ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物４８）を６３２ｍｇ得た。

　実施例１－３と同様の手法で、^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、そのシフト値からＤＳＰＥ－ａｌｋｅｎｙｌ－ＨＳ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４０％重ＴＨＦ重塩酸水　４００ＭＨｚ）δ　４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．３０－４．２５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋１７Ｈ），２．６５－３．１０（ｍ，重合度×２Ｈ＋４Ｈ），２．００－２．６０（ｍ，重合度×４Ｈ），１．５５－１．８５（ｑ＋ｑ，４Ｈ），１．２８（ｂ，６０Ｈ），０．８５（ｔ，６Ｈ）．

［実施例１－６］ＤＰＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０（化合物５０、ｍ＝２２の場合）の合成　

　ＤＳＰＥ－ＥＧ_４－ＤＢＣＯの代わりにＤＰＰＥ－ＤＢＣＯ（１８４ｍｇ，１８８μｍｏｌ、化合物４９）を用いた以外は実施例１－３と同様の操作を行う事で白黄色粉体のＤＰＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０（化合物５０）を５１９ｍｇ得た。

　実施例１－３と同様の手法で、^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、そのシフト値からＤＰＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４０％重ＴＨＦ重塩酸水　４００ＭＨｚ）δ　７．２０－７．８０（ｍ，８Ｈ），５．２０（ｄ，１Ｈ），４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．３０－４．２５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋３４Ｈ），２．９０（ｂ，重合度×２Ｈ），２．００－２．６０（ｍ，重合度×４Ｈ），１．２８（ｂ，５２Ｈ），０．８５（ｔ，６Ｈ）．

［実施例１－７］ＤＰＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物５０、ｍ＝３２の場合）の合成
　ＤＳＰＥ－ＥＧ_４－ＤＢＣＯの代わりにＤＰＰＥ－ＤＢＣＯ（１１１ｍｇ，１１３μｍｏｌ、化合物４９）を用いた以外は実施例１－４と同様の操作を行う事で白黄色粉体のＤＰＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物５０）を６９９ｍｇ得た。

　実施例１－３と同様の手法で、^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、そのシフト値からＤＰＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４０％重ＴＨＦ重塩酸水　４００ＭＨｚ）δ　７．２０－７．８０（ｍ，８Ｈ），５．２０（ｄ，１Ｈ），４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．３０－４．２５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋３４Ｈ），２．９０（ｂ，重合度×２Ｈ），２．００－２．６０（ｍ，重合度×４Ｈ），１．２８（ｂ，５２Ｈ），０．８５（ｔ，６Ｈ）．

［実施例１－８］ＤＳＧＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物５２、ｍ＝３２の場合）の合成　

　ＤＳＰＥ－ＥＧ_４－ＤＢＣＯの代わりにＤＳＧＥ－ＤＢＣＯ（１１１ｍｇ，１２６μｍｏｌ、化合物５１）を用いた以外は実施例１－４と同様の操作を行う事で白黄色粉体のＤＳＧＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物５２）を６６６ｍｇ得た。

　実施例１－３と同様の手法で、^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、そのシフト値からＤＳＧＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４０％重ＴＨＦ重塩酸水　４００ＭＨｚ）δ　７．２０－７．８０（ｍ，８Ｈ），５．２０（ｄ，１Ｈ），４．３０－４．５０（ｂ，重合度×１Ｈ），３．１０－４．００（ｍ，重合度×１０Ｈ＋３０Ｈ），２．９０（ｂ，重合度×２Ｈ），２．４５（ｂ，重合度×２Ｈ），１．８０－２．３０（ｍ，重合度×２Ｈ），１．２５－１．６０（ｂ，６４Ｈ），０．８５（ｔ，６Ｈ）．

［実施例１－９］ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０（化合物４６、ｍ＝２２の場合）の合成　

　製造例２で合成したＡＺ－ｐＢＬＧ２０（３０５ｍｇ，６３μｍｏｌ，化合物６、ｍ＝２２）、ＤＳＰＥ－ＥＧ_４－ＤＢＣＯ（２４１ｍｇ，１８８μｍｏｌ、ポリマーのモル数に対して３倍量、化合物４５）を３０．５ｍＬのＤＣＭ（ポリマーの重量に対して１００倍容量）を用いて溶解させ、室温で二日撹拌した。
　反応終了後、ＤＣＭの減圧留去を行い、２．１ｍＬのＤＭＦ（ポリマーの重量に対して７．０倍容量）を用いて溶解後、２．１ｍＬのメタノール（ポリマーの重量に対して７．０倍容量）および４．２ｍＬのイオン交換水（ポリマーの重量に対して１４．０倍容量）を加えることで白色固体を析出させた。得られた固体を濾別し、ＥｔＯＨ洗浄及び減圧乾燥を行うことで白黄色粉体のＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＢＬＧ２０（化合物５３）を３６２ｍｇ得た。
　続いて、製造例２と同様の操作を行う事で、白黄色粉体のＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０（化合物４６）を４２０ｍｇ得た。

　実施例１－３と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４０％重ＴＨＦ重塩酸水　４００ＭＨｚ）δ　７．２０－７．８０（ｍ，８Ｈ），５．２０（ｄ，１Ｈ），４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．３０－４．２５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋５４Ｈ），２．９０（ｂ，重合度×２Ｈ），２．００－２．６０（ｍ，重合度×４Ｈ），１．２８（ｂ，６０Ｈ）,０．８５（ｔ，６Ｈ）．

［実施例１－１０］ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－Ｐｈ－（ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０）２（化合物５４、ｍ＝２９、ｎ＝２の場合）の合成

　製造例９で合成したＡＺ－Ｐｈ－（ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０）２（１．０ｇ，６３μｍｏｌ，化合物３１、ｍ＝２９）を用いた以外は実施例１－３と同様の操作を行うことで白黄色粉体のＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－Ｐｈ－（ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０）２（化合物５４）を０．９９ｇ得た。

　実施例１－３と同様の手法で、^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、そのシフト値からＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－Ｐｈ－（ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０）２であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４０％重ＴＨＦ重塩酸水　４００ＭＨｚ）δ　７．２０－７．８０（ｍ，１１Ｈ），５．２０（ｄ，１Ｈ），４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．３０－４．２５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋５８Ｈ），２．９０（ｂ，重合度×２Ｈ＋４Ｈ），２．００－２．６０（ｍ，重合度×４Ｈ＋４Ｈ），１．２８（ｂ，６０Ｈ）,０．８５（ｔ，６Ｈ）．

［実施例１－１１］末端アセチル化ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物５７、ｍ＝３２の場合）の合成

　ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０の代わりに製造例１０で合成した末端アセチル化ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（３０ｍｇ，２．８μｍｏｌ，化合物５６、ｍ＝３２）を用いた以外は実施例１－３と同様の操作を行うことで白黄色粉体の末端アセチル化ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物５７）を２７ｍｇ得た。

　実施例１－３と同様の手法で、^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、そのシフト値から末端アセチル化ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ（４０％重ＴＨＦ重塩酸水　４００ＭＨｚ）δ　７．２０－７．８０（ｍ，８Ｈ），５．２０（ｄ，１Ｈ），４．３０－４．５０（ｍ，重合度×１Ｈ），３．３０－４．２５（ｍ，重合度×１０Ｈ＋５４Ｈ），２．９０（ｂ，重合度×２Ｈ），２．００－２．６０（ｍ，重合度×４Ｈ＋３Ｈ），１．２８（ｂ，６０Ｈ），０．８５（ｔ，６Ｈ）．

［実施例１－１２］末端アセチル化ＤＳＧＥ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物５９、ｍ＝３１の場合）の合成

（末端アセチル化ＤＳＧＥ－ｐＢＬＧ３０（化合物５８、ｍ＝３１の場合）の合成）

　ＡＺ－ｐＢＬＧ３０（化合物６）の代わりに実施例１－１で得られたＤＳＧＥ－ｐＢＬＧ３０（０．３ｇ，３９μｍｏｌ，化合物４３、ｍ＝３１）を用いた以外は製造例１０と同様の操作を行う事で、０．２４ｇの白色粉体の末端アセチル化ＤＳＧＥ－ｐＢＬＧ３０（化合物５８）を得た。

続いて、化合物６の代わりに末端アセチル化ＤＳＧＥ－ｐＢＬＧ３０（０．２１ｇ、２７μｍｏｌ、化合物５８）を、６Ｎ塩酸溶液を用いた脱保護反応を５０℃で実施した以外は製造例２と同様の操作を行う事で、白黄色粉体の末端アセチル化ＤＳＧＥ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０（化合物５９）を０．２５ｇ得た。

　製造例２と同様の手法で^１Ｈ－ＮＭＲ解析により構造を確認し、末端アセチル化ＤＳＧＥ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０であることを確認した。

^１Ｈ　ＮＭＲ　（重塩酸水　４００ＭＨｚ）δ　４．３０－４．５０（ｂ，重合度×１Ｈ），３．２０－３．９０（ｍ，重合度×１０Ｈ＋９Ｈ），２．９０（ｂ，重合度×２Ｈ），２．４５（ｂ，重合度×２Ｈ），１．８０－２．２５（ｍ，重合度×２Ｈ＋３Ｈ），１．２０－１．４０（ｂ，６４Ｈ），０．８０－０．９５（ｂ，６Ｈ）．

　脂質末端のメチル基由来のピーク（０．８０－０．９５ｐｐｍ）を基準値（６Ｈ）とし、ポリペプチドのアミド基α位由来のピーク（４．３０－４．５０ｐｐｍ）の積分値から重合度を算出したところ、重合度は３１相当であることを確認した。

［実施例２－１］ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０を用いた固体脂質ナノ粒子の調製
　まず、９０％　ｔ－ＢｕＯＨ水溶液を用いて、５ｍＭ　コレステロール溶液、５ｍＭ　ＤＯＴＡＰ溶液、５ｍＭ　ＤＯＰＥ溶液をそれぞれ調製した。
　次いで、１．５ｍＬチューブに上記コレステロール溶液（４５μＬ）、ＤＯＴＡＰ溶液（５２．５μＬ）、ＤＯＰＥ溶液（５２．５μＬ）及び９０％ｔ－ＢｕＯＨ水溶液（５０μＬ）を加えた。さらに、別途調製した１ｍｇ／ｍｌ　ｓｉＲＮＡ（ｓｉＧＬ３，　ｓｅｎｓｅ：５’－ＣＵＵＡＣＧＣＵＧＡＧＵＡＣＵＵＣＧＡｄＴｄＴ－３’（配列番号：１） ，ａｎｔｉｓｅｎｓｅ：５’－ＵＣＧＡＡＧＵＡＣＵＣＡＧＣＧＵＡＡＧｄＴｄＴ－３’（配列番号：２）、北海道システム・サイエンス社製）水溶液（２０μＬ）、１．２ｍＭ　実施例１－３のポリマー水溶液（２０μＬ）、及び純水（１０μＬ）を混合した。
　それぞれ調製した混合溶液を撹拌混合し、得られた溶液を２０ｍＭ　ＨＥＰＥＳバッファー（ｐＨ７．４、２ｍＬ）に撹拌しながら滴下することで固体脂質ナノ粒子を形成した。
　得られた固体脂質ナノ粒子をＰＢＳバッファーを用いた限外濾過（メルク株式会社製Ａｍｉｃｏｎ　Ｕｌｔｒａ－１５（ＭＷＣＯ　５０ｋＤａ））にて精製した。

［実施例２－２］ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）２０を用いた固体脂質ナノ粒子の調製
　２．０ｍＭ　実施例１－３のポリマー水溶液（２０μＬ）に変更した以外は、実施例２－１と同様の方法で固体脂質ナノ粒子を調製した。

［実施例２－３］ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０を用いた固体脂質ナノ粒子の調製
　１．０ｍＭ　実施例１－３のポリマー水溶液の代わりに、１．０ｍＭ　実施例１－４のポリマー水溶液（２０μＬ）に変更した以外は、実施例２－１と同様の方法で固体脂質ナノ粒子を調製した。

［実施例２－４］ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０を用いた固体脂質ナノ粒子の調製
　２．０ｍＭ　実施例１－４のポリマー水溶液（２０μＬ）に変更した以外は、実施例２－３と同様の方法で固体脂質ナノ粒子を調製した。

［実施例２－５］ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０を用いた固体脂質ナノ粒子の調製
　３．０ｍＭ　実施例１－４のポリマー水溶液（２０μＬ）に変更した以外は、実施例２－３と同様の方法で固体脂質ナノ粒子を調製した。

［実施例２－６］ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０を用いた固体脂質ナノ粒子の調製
　４．０ｍＭ　実施例１－４のポリマー水溶液（２０μＬ）に変更した以外は、実施例２－３と同様の方法で固体脂質ナノ粒子を調製した。

［実施例２－７］ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０を用いた固体脂質ナノ粒子の調製
　使用するｓｉＲＮＡをＡｌｅｘａ６４７－ｌａｂｅｌｅｄ　ｓｉＲＮＡ（Ａｌｅｘａ６４７－ｓｉＧＬ３，　ｓｅｎｓｅ：５’－ＣＵＵＡＣＧＣＵＧＡＧＵＡＣＵＵＣＧＡｄＴｄＴ－３’（配列番号：３），ａｎｔｉｓｅｎｓｅ：５’－Ａｌｅｘａ６４７－ＵＣＧＡＡＧＵＡＣＵＣＡＧＣＧＵＡＡＧｄＴｄＴ－３’（配列番号：４）、株式会社ジーンデザイン社製）に変更した以外は、実施例２－３と同様の方法で固体脂質ナノ粒子を調製した。

［実施例２－８］ＤＳＰＥ－ＤＢＣＯ－ＡＺ－ｐＧｌｕ（ＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ）３０を用いた固体脂質ナノ粒子の調製
　使用するｓｉＲＮＡをｓｉＰＬＫ１（ｓｅｎｓｅ：５’－ＡＧＡｕＣＡＣＣＣｕＣＣＵｕＡＡＡｕＡＵＵ－３’（配列番号：５），ａｎｔｉｓｅｎｓｅ：５’－ＵＡＵＵＵＡＡｇＧＡＧＧＧＵＧＡｕＣＵＵＵ－３’（配列番号：６）、株式会社ジーンデザイン社製）に変更した以外は、実施例２－３と同様の方法で固体脂質ナノ粒子を調製した。
　上記のｓｉＰＬＫ１配列において、小文字で表記されたものは、塩基部分は同一であるが、糖部分において２’－Ｏ－メチル化修飾がなされていることを示す。

［比較例２－１］ＤＳＰＥ－ＰＥＧ５ｋ（ＳＵＮＢＲＩＧＨＴ　ＤＳＰＥ－０５０ＣＮ、日油株式会社製）を用いた固体脂質ナノ粒子の調製
　実施例１－３のポリマー水溶液（２０μＬ）の代わりに２．０ｍＭ　ＤＳＰＥ－ＰＥＧ５ｋ水溶液（２０μＬ）に変更した以外は、実施例２－１と同様の方法で固体脂質ナノ粒子を調製した。

［比較例２－２］ＤＳＰＥ－ＰＥＧ５ｋを用いた固体脂質ナノ粒子調製
　実施例１－３のポリマー水溶液（２０μＬ）の代わりに３．０ｍＭ　ＤＳＰＥ－ＰＥＧ５ｋ水溶液（２０μＬ）に変更した以外は、実施例２－１と同様の方法で固体脂質ナノ粒子を調製した。

［比較例２－３］ＤＳＰＥ－ＰＥＧ５ｋを用いた固体脂質ナノ粒子調製
　実施例１－３のポリマー水溶液（２０μＬ）の代わりに４．０ｍＭ　ＤＳＰＥ－ＰＥＧ５ｋ水溶液（２０μＬ）に変更した以外は、実施例２－１と同様の方法で固体脂質ナノ粒子を調製した。

［比較例２－４］ＤＳＰＥ－ＰＥＧ５ｋを用いた固体脂質ナノ粒子調製
　実施例１－３のポリマー水溶液（２０μＬ）の代わりに１．０ｍＭ　ＤＳＰＥ－ＰＥＧ５ｋ水溶液（２０μＬ）を、使用するｓｉＲＮＡをＡｌｅｘａ６４７－ｌａｂｅｌｅｄ　ｓｉＲＮＡ（Ａｌｅｘａ６４７－ｓｉＧＬ３，　ｓｅｎｓｅ：５’－ＣＵＵＡＣＧＣＵＧＡＧＵＡＣＵＵＣＧＡｄＴｄＴ－３’（配列番号：３），ａｎｔｉｓｅｎｓｅ：５’－Ａｌｅｘａ６４７－ＵＣＧＡＡＧＵＡＣＵＣＡＧＣＧＵＡＡＧｄＴｄＴ－３’（配列番号：４）、株式会社ジーンデザイン社製）に変更した以外は、実施例２－１と同様の方法で固体脂質ナノ粒子を調製した。

［比較例２－５］ＤＳＰＥ－ＰＥＧ５ｋを用いた固体脂質ナノ粒子調製
　実施例１－３のポリマー水溶液（２０μＬ）の代わりに１．０ｍＭ　ＤＳＰＥ－ＰＥＧ５ｋ水溶液（２０μＬ）を、使用するｓｉＲＮＡをｓｉＰＬＫ１（ｓｅｎｓｅ：５’－ＡＧＡｕＣＡＣＣＣｕＣＣＵｕＡＡＡｕＡＵＵ－３’（配列番号：５），ａｎｔｉｓｅｎｓｅ：５’－ＵＡＵＵＵＡＡｇＧＡＧＧＧＵＧＡｕＣＵＵＵ－３’（配列番号：６）、株式会社ジーンデザイン社製）に変更した以外は、実施例２－１と同様の方法で固体脂質ナノ粒子を調製した。

［実験例１］ヘパリン共存下のｐＨ応答性試験
　製造例４～７のポリマー及び比較例１－１、１－２のポリマーを用いてヘパリン存在下での蛍光相関分光法（ＦＣＳ）測定を行った。
　各種ポリマーをクリックケミストリーにてＣｙ３標識を行い、最終濃度２００ｎＭの水溶液をｐＨ６－８で調製した（１０ｍＭ　ＨＥＰＥＳまたはＭＥＳ、１５０ｍＭ　ＮａＣｌ）。そこにヘパリンが２００μｇ／ｍＬとなるように添加し、ヘパリンの有無によるポリマーサイズへの影響を確認した。
　結果を図１に示す。図１の横軸はｐＨを、図１の縦軸は相対拡散係数を表す。尚、相対拡散係数は（ヘパリン存在下のポリマーの拡散係数）÷（ヘパリン非存在下のポリマーの拡散係数）から算出される値である。
　すなわち、相対拡散係数が１未満の場合は、アニオン性のヘパリンとポリマーとが相互作用していることを示し、ポリマーがカチオン性であることを示唆する。ここでは、便宜的に相対拡散係数０．９５未満をカチオン性とする。
　すべてのポリマーがｐＨ６．０～ｐＨ６．５で相対拡散係数０．９５未満となりカチオン性を示した。さらに製造例４～７のポリマーはｐＨ７．４において相対拡散係数０．９５以上を示し、カチオン性がほぼ消失することを確認した。この結果はポリマーが微細なｐＨ変化に応答していることを示している。
　一方、比較例１－１、１－２のポリマーはｐＨ７．４においても相対拡散係数０．９５未満となり、カチオン性を維持することが明らかとなった。

　以上の結果から、本発明の製造例４、５、６、７のポリマー側鎖構造であるＤＥＴ－Ｃ２－Ｃａｒ、ＤＥＴ－Ｃ３－Ｃａｒ、ＤＥＴ－Ｃ２－Ｓｕｌ、ＤＥＴ－Ｃ３－Ｓｕｌの各構造が微細なｐＨ領域でｐＨ応答性を示すことが明らかとなった。

［参考実験例１］粒子径の測定
　実施例２－１～２－７及び比較例２－１～２－４にて調製した各粒子をＺｅｔａｓｉｚｅｒ　Ｎａｎｏ　ＺＳ（Ｍａｌｖｅｒｎ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製）にて解析した。測定結果を表１に示す。

［実験例２］粒子のゼータ電位の測定
　実施例２－２、２－７および比較例２－２、２－４で得られた粒子を１０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）あるいは１０ｍＭ　ＭＥＳ（ｐＨ６．５）にてゼータ電位測定を行った結果を表２に示す。

　実施例２－２および２－７の粒子は、ｐＨ７．４ではそれぞれ９．０ｍＶ、４．９ｍＶだったのに対し、ｐＨ６．５ではそれぞれ１４．８ｍＶ、１９．２ｍＶであった。この結果から、本発明のｐＨ応答性脂質誘導体から得られた粒子が微細なｐＨ変化に応答してカチオン性を帯びることが分かった。
　一方、比較例２－２および２－４の粒子は、ｐＨ７．４ではそれぞれ０．２ｍＶ、４．２ｍＶだったのに対し、ｐＨ６．５では－２．９ｍＶ、２．３ｍＶであった。この結果から、本発明のｐＨ応答性脂質誘導体を含まない従来のＰＥＧ脂質から得られた粒子はｐＨによらず中性を維持することが分かった。

［参考実験例２］ｓｉＲＮＡの封入効率
　実施例２－２、２－７、比較例２－２および２－４の粒子へのｓｉＲＮＡの封入効率を、ＲｉｂｏＧｒｅｅｎ試薬を用いた蛍光定量法にて評価した。
　実施例２－２、２－７、比較例２－２および２－４で調製した粒子溶液におけるＲｉｂｏＧｒｅｅｎ試薬由来の蛍光強度と、Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ処理にて各粒子を崩壊した系でのＲｉｂｏＧｒｅｅｎ試薬由来の蛍光強度とを比較することでｓｉＲＮＡ封入量を算出した。
　ｓｉＲＮＡ封入効率を表３に示す。

　実施例２－２のｓｉＲＮＡ封入効率は９３．０％、実施例２－７では９５．０％、比較例２－２では９８．４％、比較例２－４では９０．０％であった。この結果から、本発明のｐＨ応答性脂質誘導体から得られた粒子および従来のＰＥＧ脂質から得られた粒子のいずれもが、ほぼ同等のｓｉＲＮＡ封入効率を有することが分かった。

［実験例３］ｓｉＲＮＡの細胞取り込み試験
　実施例２－２及び比較例２－２の粒子を用いたｓｉＲＮＡの細胞への取り込み効率を評価した。各粒子は各実施例に記載の方法に従い、Ｃｙ５標識したｓｉＲＮＡを用いて別途粒子を調製した。
　Ａ５４９細胞を５万ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌ（２４ウェルプレート）にてまき、一晩培養した。そこにＣｙ５標識したｓｉＲＮＡを内包する各粒子をアプライし（最終ｓｉＲＮＡ濃度：１００ｎＭ）、ｐＨ７．４あるいはｐＨ６．５の血清培地にて４時間インキュベートし、フローサイトメーターにてｓｉＲＮＡ取り込み量を評価した。結果を図２に示す。

　実施例２－２の粒子をアプライした細胞において、ｐＨ７．４の場合に比較してｐＨ６．５の方がＣｙ５由来の蛍光量が多くみられた。さらに、実施例２－２の粒子は比較例２－２の粒子と比較して、ｐＨ７．４におけるｓｉＲＮＡ取り込み量が同等である一方、ｐＨ６．５におけるｓｉＲＮＡ取り込み量は４０％程度増加する結果を与えた。

　以上の結果から、本発明のｐＨ応答性脂質誘導体を含む粒子が、従来のＰＥＧ脂質を用いた粒子と比較して、微細なｐＨ変化に応答してカチオン性を帯び、その結果、細胞への取り込み量が向上することが示された。

［実験例４］ｓｉＲＮＡの体内動態試験
　実施例２－７及び比較例２－４の粒子を用いたｓｉＲＮＡの腫瘍集積性を評価した。マウス大腸がん細胞株ＣＴ２６をＢＡＬＢ／ｃマウスへ皮下移植することで担がんモデルマウスを作成した（５×１０^５ｃｅｌｌ／マウス）。腫瘍のサイズが２００ｍｍ^３程度に大きくなった後、各粒子を尾静脈注射を行った（投与量：０．５ｍｇ／ｋｇ　ｓｉＲＮＡ換算）。
　投与から１、６、２４時間経過後に腫瘍を摘出した。腫瘍をＬｙｓｉｓ　ｂｕｆｆｅｒを用いてホモジナイズし、遠心分離機で処理した。次に上澄み液を取り出し、ラウリル硫酸ナトリウムが３％、ｔ－ＢｕＯＨが６０％の濃度になるように調整した。得られた溶液をマイクロプレートリーダー（ＳＰＡＲＫ　ＴＫＳ０１，ＴＥＣＡＮ社製）にてｓｉＲＮＡの濃度を求めた（励起波長：６３０ｎｍ、蛍光波長：６９０ｎｍ）。結果を図３に示す。尚、統計学有意差に関しては、２－ｗａｙ　ＡＮＯＶＡ　ｗｉｔｈ　Ｔｕｋｅｙ’ｓ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ法を用いて確認し、^＊Ｐ＜０．０５、^＊＊Ｐ＜０．０１、^＊＊＊Ｐ＜０．００１を有意と判定した。

　実施例２－７の粒子は投与から１、６、２４時間経過後すべての時間においてｓｉＲＮＡが検出された一方、比較例２－４の粒子は投与から６時間経過後以降はｓｉＲＮＡが検出されなかった。

　以上の結果から、本発明のｐＨ応答性脂質誘導体を含む粒子が、従来のＰＥＧ脂質を用いた粒子と比較して、腫瘍組織に到達した時に微細なｐＨ変化に応答してカチオン性を帯び、その結果、腫瘍組織周辺に留まる、すなわち腫瘍組織への集積性を有することが示された。また、６、２４時間後でも腫瘍組織からｓｉＲＮＡが検出されることから、血中滞留性を有することが示された。

［実験例５］ｓｉＰＬＫ１を用いた抗腫瘍性効果
　実施例２－８及び比較例２－５の粒子を用いてｓｉＰＬＫ１の抗腫瘍性効果を評価した。ヒト卵巣がん細胞株ＳＫＯＶ３－ｌｕｃ　ｃｅｌｌｓをＢａｌｂ／ｃ　ｎｕｄｅマウスへ皮下移植することで担がんモデルマウスを作成した（５×１０^６ｃｅｌｌ／マウス）。腫瘍のサイズが２５ｍｍ^３程度に大きくなった時にランダマイズし、実施例２－８の粒子投与群、比較例２－５の粒子投与群、およびコントロール群の３群に分け、尾静脈注射を行った。一回の投与量はｓｉＰＬＫ１換算で２．５ｍｇ／ｋｇとし、２日に１回（計９回）投与した。腫瘍体積の確認は投与直後を含む、０、２、６、１２、１４、１９日目に実施した。
　結果を図４に示す。尚、統計学有意差に関しては、２－ｗａｙ　ＡＮＯＶＡ　ｗｉｔｈ　Ｔｕｋｅｙ’ｓ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ法を用いて確認し、^＊Ｐ＜０．０５、^＊＊Ｐ＜０．０１、^＊＊＊Ｐ＜０．００１を有意と判定した。

　コントロール群および比較例２－５の粒子を投与した群においては、腫瘍のサイズが経時的に大きくなることが分かった。一方、実施例２－８の粒子を投与した群においては、腫瘍細胞の増殖が抑制され腫瘍サイズの増加量は緩やかとなった。

　以上の結果から、本発明のｐＨ応答性脂質誘導体を含む粒子が、従来のＰＥＧ脂質を用いた粒子と比較して、有意に抗腫瘍効果を示すことが確認された。

　以上説明したように、本発明によれば、低分子薬剤や核酸医薬品等の腫瘍組織周辺への送達及び腫瘍細胞へのトランスフェクションを、安全かつ効率よく行うことができる導入システムを達成できる輸送担体として有効なｐＨ応答性輸送担体、さらにはそのような輸送担体を形成するために有用なｐＨ応答性脂質誘導体を提供することが可能となる。

　本発明のｐＨ応答性輸送担体は、中性環境下（ｐＨ７．４）では電気的に中性となり、腫瘍組織周辺の弱酸性条件下（ｐＨ６．５）ではカチオン性へと変化する特性を有していることから、生体内で中性環境下である血液成分や正常組織にはステルス性を示し、腫瘍組織周辺では微細なｐＨ変化に応答して腫瘍組織への集積効率及び取り込み効率が向上する。その結果、輸送担体中に内包された低分子薬剤や核酸医薬品を腫瘍組織周辺部で放出することや腫瘍組織細胞内に効率的に導入することができる。

　さらに本発明のｐＨ応答性脂質誘導体は生体内に含まれるアミノ酸の重合体により構成されている。従って、低分子薬剤や核酸医薬品の送達後は生体内で分解され、生体内で蓄積されない。
　本出願は、日本で出願された特願２０２１－１１３１８９（出願日：２０２１年７月７日）を基礎としており、その内容は本明細書にすべて包含されるものである。

Claims (33)

1. 　下記式（ｉ）で表される構造：
   

   

   ここで：
   Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４のアシル基、またはステロール残基であり、
   Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
   Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
   Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基であり、
   Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
   ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅはそれぞれ独立して、０または１であり、
   ｆは０から５の整数であり、
   ｈは１から３の整数であり、
   ｇ、ｎはそれぞれ独立して１または２であり、
   ｍは５から３００であり、
   Ｒ^ａはＨ、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である、
   で表されるｐＨ応答性脂質誘導体。
2. 　下記式（１）で表される構造：
   

   

   ここで：
   Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４のアシル基、またはステロール残基であり、
   Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
   Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
   Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基であり、
   Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
   ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅはそれぞれ独立して、０または１であり、
   ｆは０から５の整数であり、
   ｈは１から３の整数であり、
   ｇ、ｎはそれぞれ独立して１または２であり、
   ｍは５から３００である、
   で表される、請求項１に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
3. 　下記式（１－１）で表される構造：
   

   

   ここで：
   Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４のアシル基、またはステロール残基であり、
   Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
   Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
   Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基であり、
   Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
   ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅはそれぞれ独立して、０または１であり、
   ｆは０から５の整数であり、
   ｈは１から３の整数であり、
   ｇ、ｎはそれぞれ独立して１または２であり、
   ｍは５から３００であり、
   Ｒ^ｂは－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である、
   で表される、請求項１に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
4. 　前記式（ｉ）中、Ｘが下記式（２）で表される連結基である、請求項１に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
   

   

   （式（２）中、Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、ｐ１、ｐ２、ｐ３はそれぞれ独立して０または１であり、ｑ１、ｑ２はそれぞれ独立して、０から５０である。）
5. 　前記式（ｉ）中、ｍが５から１５０である、請求項１または４に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
6. 　前記式（ｉ）中、ｇ、ｈがそれぞれ２であり、Ａがカルボキシ基である、請求項１または４に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
7. 　前記式（ｉ）中、Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基であり、
   ｂ、ｎがそれぞれ１であり、
   ｄが０である、
   請求項１または４に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
8. 　前記式（ｉ）中、
   Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基であり、
   Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
   Ａがカルボキシ基であり、
   ａ１、ａ２、ｂ、ｎがそれぞれ１であり、
   ｃ、ｄ、ｅ、ｆがそれぞれ０であり、
   ｇ、ｈがそれぞれ２である、
   請求項１に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
9. 　前記式（ｉ）中、Ｒ^１がステロール残基であり、ａ１、ｂ、ｃ、ｄがそれぞれ０である、
   請求項１または４に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
10. 　前記式（ｉ）中、
    Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアシル基であり、
    Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
    Ｂが水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
    ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
    ｆが２から５の整数であり、かつ、
    Ｘが前記式（２）中、
    Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１である、
    請求項１または４に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
11. 　前記式（ｉ）中、
    Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアシル基であり、
    Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
    Ｂが水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
    ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
    ｆが２から５の整数であり、かつ、
    Ｘが前記式（２）中、
    Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
    Ｚが環化付加反応により形成される基であり、
    ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１であり、
    ｑ２が０から５である、
    請求項１または４に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
12. 　前記式（ｉ）中、
    Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアシル基であり、
    Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
    Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
    ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
    ｆが２から５の整数であり、かつ、
    Ｘが前記式（２）中、
    Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
    Ｚが環化付加反応により形成される基であり、
    ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１であり、
    ｑ１が０から５である、
    請求項１または４に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
13. 　前記式（ｉ）中、
    Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアシル基であり、
    Ｍが炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
    Ｂが水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
    Ａがカルボキシ基であり、
    ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
    ｆが２から５の整数であり、
    ｇ、ｈがそれぞれ２であり、かつ、
    Ｘが前記式（２）中、
    Ｘ^１、Ｘ^２は炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
    Ｚは環化付加反応により形成される基であり、
    ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１であり、
    ｑ１、ｑ２がそれぞれ独立して、０から５である、
    請求項１または４に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
14. 　前記式（ｉ）中、
    Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基または炭素数８から２４のアシル基であり、
    ｂ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
    ｄが０であり、
    ｆが２から５の整数であり、かつ、
    Ｘが前記式（２）中、
    Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
    ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１である、
    請求項１または４に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
15. 　前記式（ｉ）中、
    Ｒ^１、Ｒ^２がそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基または炭素数８から２４のアシル基であり、
    Ａがカルボキシ基であり、
    ｂ、ｅ、ｎがそれぞれ１であり、
    ｄが０であり、
    ｆが２から５の整数であり、
    ｇ、ｈがそれぞれ２であり、かつ、
    Ｘが前記式（２）中、
    Ｘ^１、Ｘ^２が炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
    Ｚが環化付加反応により形成される基であり、
    ｐ１、ｐ２、ｐ３がそれぞれ１であり、
    ｑ１、ｑ２がそれぞれ独立して、０から５である、
    請求項１または４に記載のｐＨ応答性脂質誘導体。
16. 　下記式（４７－ｉ）中Ｒ^ａがＨの場合は、下記工程（Ａ）、工程（Ｂ）及び工程（Ｃ）をその順で実施することを特徴とし、（４７－ｉ）中Ｒ^ａが－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）の場合は、下記工程（Ａ１）、工程（Ｂ）及び工程（Ｃ）をその順で実施することを特徴とする（４７－ｉ）で表される構造：
    

    

    ここで：
    Ｒ^１ａ、Ｒ^２ａはそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、またはステロール残基であり、
    Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
    Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
    Ｘは求核置換反応、またはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される結合基を含む連結基であり、
    Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
    ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄ、ｅはそれぞれ独立して、０または１であり、
    ｆは０から５の整数であり、
    ｈは１から３の整数であり、
    ｇ、ｎはそれぞれ独立して１または２であり、
    ｍは５から３００であり、
    Ｒ^ａはＨ、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である、
    で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法。
    ［工程（Ａ）］
    　下記式（３）で表される重合開始剤と下記式（４）で表されるα－アミノ酸－Ｎ－カルボン酸無水物とを用いて開環重合することにより下記式（５）で表されるポリマーを得る工程。
    

    

    （式（３）中、各記号は前記のとおりである。）
    

    

    （式（４）中、Ｐ^１はカルボキシ基の保護基を表し、ｇは１または２である。）
    

    

    （式（５）中、各記号は前記のとおりである。）
    ［工程（Ａ１）］
    　下記式（３）で表される重合開始剤と下記式（４）で表されるα－アミノ酸－Ｎ－カルボン酸無水物とを用いて開環重合することにより下記式（５）で表されるポリマーを得て、
    さらに得られたポリマーの末端アミノ基に－ＣＯＣＨ_３または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）を導入して、下記式（５－１）で表されるポリマーを得る工程。
    

    

    （式（３）中、各記号は前記のとおりである。）
    

    

    （式（４）中、Ｐ^１はカルボキシ基の保護基を表し、ｇは１または２である。）
    

    

    （式（５）中、各記号は前記のとおりである。）
    

    

    （式（５－１）中、Ｒ^ｂは－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）であり、その他記号は前記のとおりである。）
    ［工程（Ｂ）］
    　前記工程（Ａ）もしくは前記工程（Ａ１）で得られた下記式（５－ｉ）で表されるポリマー（前記式（５）で表されるポリマーと前記式（５－１）で表されるポリマーを包括して表記する）と、下記式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体とを反応させることで下記式（７－ｉ）で表されるポリマーを得る工程。
    

    

    （式（５－ｉ）中、各記号は前記のとおりである。）
    

    

    （式（６）中、Ｐ^２は保護されたカルボキシ基または保護されたスルホ基を表し、ｈは前記のとおりである。）
    

    

    （式（７－ｉ）中、各記号は前記のとおりである。）
    ［工程（Ｃ）］
    　前記工程（Ｂ）で得られた前記式（７－ｉ）で表されるポリマーを脱保護させることで前記式（４７－ｉ）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程。
17. 　下記工程（Ｄ）を実施することを特徴とする、下記式（３６－ｉ）で表される構造：
    

    

    ここで：
    Ｒ^１、Ｒ^２はそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、または炭素数８から２４のアシル基、またはステロール残基であり、
    Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または炭素数３から７の分岐していてもよい炭化水素３価基であり、
    Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
    Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
    ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄはそれぞれ独立して、０または１であり、
    ｆは０から５の整数であり、
    ｈは１から３の整数であり、
    ｇは１または２であり、
    ｍは５から３００であり、
    Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
    Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、
    ｐ１、ｐ２はそれぞれ独立して０または１であり、
    ｑ１、ｑ２はそれぞれ独立して、０から５０であり、
    Ｒ^ａはＨ、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である、
    で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法。
    ［工程（Ｄ）］
    　下記式（８）で表される官能基含有脂質と下記式（９－ｉ）で表される官能基含有ｐＨ応答性ポリマーとを反応させることにより前記式（３６－ｉ）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程。
    

    

    （式（８）中、Ｙ^１は下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）
    

    

    （式（９－ｉ）中、Ｙ^２は前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）
18. 　下記工程（Ｅ）、工程（Ｆ）及び工程（Ｇ）をその順で実施することを特徴とする、下記式（４６－ｉ）で表される構造：
    

    

    ここで：
    Ｒ^１ａ、Ｒ^２ａはそれぞれ独立して炭素数８から２４のアルキル基、またはステロール残基であり、
    Ｍは＞Ｎ－ＣＨ_２－ＣＨ_２－で示される３価基または分岐していてもよい炭素数３から７の炭化水素３価基であり、
    Ｂは水素原子、アルカリ金属、またはアンモニウム基であり、
    Ａはカルボキシ基、またはスルホ基であり、
    ａ１、ａ２、ｂ、ｃ、ｄはそれぞれ独立して、０または１であり、
    ｆは０から５の整数であり、
    ｈは１から３の整数であり、
    ｇは１または２であり、
    ｍは５から３００であり、
    Ｘ^１、Ｘ^２はそれぞれ独立して炭素数１から５の求核置換反応による結合基を含む基であり、
    Ｚはマイケル付加反応、またはチオール－エン反応、または環化付加反応により形成される基であり、
    ｐ１、ｐ２はそれぞれ独立して０または１であり、
    ｑ１、ｑ２はそれぞれ独立して、０から５０であり、
    Ｒ^ａはＨ、－ＣＯＣＨ_３、または－ＣＯ－（ＣＨ_２）_ｂ１－ＣＯＯＨ（ここで、ｂ１は、２もしくは３である）である、
    で表されるｐＨ応答性脂質誘導体の製造方法。
    ［工程（Ｅ）］
    　下記式（１０）で表される官能基含有脂質と下記式（１１－ｉ）で表されるポリマーとを反応させることにより下記式（１２－ｉ）で表されるポリマーを得る工程。
    

    

    （式（１０）中、Ｙ^１は下記Ｙ^２に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）
    

    

    （式（１１－ｉ）中、Ｐ^１はカルボキシ基の保護基を表し、Ｙ^２は前記Ｙ^１に含まれる官能基と共有結合を形成し得る官能基を含む原子団であり、その他記号は前記のとおりである。）
    

    

    （式（１２－ｉ）中、各記号は前記のとおりである。）
    ［工程（Ｆ）］
    　前記工程（Ｅ）で得られた前記式（１２－ｉ）で表されるポリマーと、前記式（６）で表されるジエチレントリアミン誘導体とを反応させることで下記式（１３－ｉ）で表されるポリマーを得る工程。
    

    

    （式（１３－ｉ）中、Ｐ^２は保護されたカルボキシ基または保護されたスルホ基を表し、その他記号は前記のとおりである。）
    ［工程（Ｇ）］
    　前記工程（Ｆ）で得られた前記式（１３－ｉ）で表されるポリマーを脱保護させることで前記式（４６－ｉ）で表されるｐＨ応答性脂質誘導体を得る工程。
19. 　請求項１に記載のｐＨ応答性脂質誘導体を、０．１から３０ｍｏｌ％含むドラッグデリバリー用輸送担体。
20. 　固体脂質ナノ粒子である、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
21. 　下記式（Ｆ１）で表されるゼータ電位の差（Ｑ）が２．５ｍＶ以上であることを特徴とする、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
    　式（Ｆ１）：Ｑ＝（ｐＨ６．５におけるゼータ電位）―（ｐＨ７．４におけるゼータ電位）
22. 　前記式（Ｆ１）で表されるゼータ電位の差（Ｑ）が２．５ｍＶ以上かつ、ｐＨ６．５におけるゼータ電位が０より大きいことを特徴とする、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
23. 　粒子径が１０から２００ｎｍである、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
24. 　前記ドラッグデリバリー用輸送担体が、リン脂質をさらに含む、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
25. 　前記ドラッグデリバリー用輸送担体が、カチオン性脂質をさらに含む、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
26. 　前記カチオン性脂質が、ＤＯＴＡＰ（１，２－ジオレオイルオキシ－３－トリメチルアンモニウムプロパン）またはＤＯＤＡＰ（ジオレオイル－３－ジメチルアンモニウムプロパン）である、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
27. 　前記ドラッグデリバリー用輸送担体が、ステロールをさらに含む、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
28. 　請求項１に記載のｐＨ応答性脂質誘導体を、０．１から３０ｍｏｌ％、リン脂質を０から６０ｍｏｌ％、カチオン性脂質を１から６０ｍｏｌ％、ステロールを０から４０ｍｏｌ％含む、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
29. 　輸送薬剤が核酸誘導体である、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
30. 　輸送薬剤がペプチドである、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
31. 　輸送薬剤が低分子薬剤または抗がん剤である、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
32. 　ｐＨ応答性脂質誘導体が、請求項２に記載のｐＨ応答性脂質誘導体である、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。
33. 　ｐＨ応答性脂質誘導体が、請求項３に記載のｐＨ応答性脂質誘導体である、請求項１９に記載のドラッグデリバリー用輸送担体。

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