WO2023229303A1 - Igsf1의 c-말단에 결합하는 항체 및 이의 용도 - Google Patents

Igsf1의 c-말단에 결합하는 항체 및 이의 용도 Download PDF

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WO2023229303A1
WO2023229303A1 PCT/KR2023/006852 KR2023006852W WO2023229303A1 WO 2023229303 A1 WO2023229303 A1 WO 2023229303A1 KR 2023006852 W KR2023006852 W KR 2023006852W WO 2023229303 A1 WO2023229303 A1 WO 2023229303A1
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seq
amino acid
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heavy chain
light chain
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PCT/KR2023/006852
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손혜진
이미소
김하나
이준형
신원화
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웰마커바이오 주식회사
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    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Definitions

  • the present invention relates to an antibody that specifically binds to the C-terminus of IGSF1 and a pharmaceutical composition for preventing or treating cancer containing the same as an active ingredient.
  • Cancer is a major disease that ranks first in mortality in modern society, and despite much research, there is no technological treatment to date. Worldwide, more than 100 million cancer patients occur every year, and the World Health Organization (WHO) considers cancer to be one of the main causes of death.
  • WHO World Health Organization
  • cancer cannot be easily treated with conventional cancer treatment regimens and recurrence and metastasis to other areas frequently occur, so a more fundamental treatment method is required. Accordingly, interest is increasing in developing substances to treat cancer by targeting biomarkers that characterize cancer malignancy, metastasis, and recurrence.
  • Republic of Korea Patent Publication No. 10-2016-0014564 discloses that the IGSF1 (immunoglobulin superfamily member 1) gene can be used as a biomarker for predicting susceptibility to MET (mesenchymal-epithelial transition factor) inhibitors.
  • IGSF1 immunoglobulin superfamily member 1
  • MET mesenchymal-epithelial transition factor
  • an anticancer drug with high therapeutic effect can be selected by determining the sensitivity of each patient using the biomarker before treating the cancer patient.
  • IGSF1-specific antibodies can be used as anticancer agents.
  • the present inventors produced an antibody that specifically binds to the C-terminus of IGSF1, and the antibody has cancer cell death, tumor growth inhibition effects, and The present invention was completed after confirming that the immune cell activation effect was excellent.
  • one aspect of the present invention provides an anti-IGSF1 antibody or fragment thereof that specifically binds to the C-terminus of IGSF1.
  • Another aspect of the present invention is a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7; and a light chain variable region comprising a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 15. Antibodies or fragments thereof are provided.
  • Another aspect of the present invention is a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 21, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 23, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 25; and a light chain variable region comprising light chain CDR1 of SEQ ID NO: 29, light chain CDR2 of SEQ ID NO: 31, and light chain CR3 of SEQ ID NO: 33.
  • Another aspect of the present invention is a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 39, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 41, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 43; and a light chain variable region comprising light chain CDR1 of SEQ ID NO: 47, light chain CDR2 of SEQ ID NO: 49, and light chain CR3 of SEQ ID NO: 51.
  • Another aspect of the present invention is a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 57, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 59, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 61; and a light chain variable region comprising light chain CDR1 of SEQ ID NO: 65, light chain CDR2 of SEQ ID NO: 67, and light chain CR3 of SEQ ID NO: 69.
  • Another aspect of the present invention is a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 75, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 77, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 79; and a light chain variable region comprising a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 83, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 85, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 87.
  • Antibodies or fragments thereof are provided.
  • Another aspect of the present invention is a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 93, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 95, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 97; and a light chain variable region comprising a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 101, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 103, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 105.
  • Antibodies or fragments thereof are provided.
  • Another aspect of the present invention is a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 111, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 113, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 115; and a light chain variable region comprising a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 119, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 121, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 123.
  • Antibodies or fragments thereof are provided.
  • Another aspect of the present invention is a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 129, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 131, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 133; and a light chain variable region comprising a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 137, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 139, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 141.
  • Antibodies or fragments thereof are provided.
  • Another aspect of the present invention is a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 147, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 149, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 151; and a light chain variable region comprising a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 155, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 157, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 159.
  • Antibodies or fragments thereof are provided.
  • Another aspect of the present invention is a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 165, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 167, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 169; and a light chain variable region comprising a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 173, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 175, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 177.
  • Antibodies or fragments thereof are provided.
  • Another aspect of the present invention is a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 183, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 185, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 187; and a light chain variable region comprising a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 191, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 193, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 195.
  • Antibodies or fragments thereof are provided.
  • Another aspect of the present invention is a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 219, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 221, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 223; and a light chain variable region comprising a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 227, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 229, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 231.
  • Antibodies or fragments thereof are provided.
  • Another aspect of the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating cancer comprising the antibody or fragment thereof.
  • the anti-IGSF1 antibody that specifically binds to the C-terminus of IGSF1 according to the present invention was confirmed to have high binding specificity and binding affinity for IGSF1.
  • the anti-IGSF1 antibody was confirmed to have the effect of promoting the death of cancer cells overexpressing IGSF1, activating immune cells, and effectively inhibiting the growth of tumor tissue. Therefore, the anti-IGSF1 antibody will be useful as a treatment for various cancers expressing IGSF1.
  • Figures 1A and 1B show anti-IGSF1 antibodies that bind to the C-terminus of IGSF1, WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105, WM Results of analyzing the binding affinity of -A1-3106, WM-A1-3128, WM-A1-3132, and WM-A1-3133 to human embryonic kidney cell lines HEK293 mock ( Figure 1a) and HEK293 IGSF1 ( Figure 1b). am.
  • Figures 1c and 1d show anti-IGSF1 antibodies WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105, and WM that bind to the C-terminus of IGSF1.
  • Figure 2A shows anti-IGSF1 antibodies WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105, WM-A1- that bind to the C-terminus of IGSF1.
  • the immuno-anticancer efficacy of 3106, WM-A1-3128, WM-A1-3132, and WM-A1-3133 was confirmed by the T cell proliferation rate in lung cancer cell and T cell co-culture.
  • Figure 2b shows the immuno-anticancer efficacy of WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, and WM-A1-3104, which are anti-IGSF1 antibodies that bind to the C-terminus of IGSF1, on lung cancer cells and T cells. This result was confirmed by the production rate of the cytokine IL-2 in culture.
  • Figure 2c shows the immuno-anticancer efficacy of WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, and WM-A1-3104, which are anti-IGSF1 antibodies that bind to the C-terminus of IGSF1, on lung cancer cells and T cells. This result was confirmed by the production rate of cytokine TNF- ⁇ in culture.
  • Figure 3a shows WM-A1-2608, WM-A1-3102, WM-A1-3104, and WM-A1-3105, which are anti-IGSF1 antibodies that bind to the C-terminus of IGSF1, respectively, administered to a syngeneic mouse model of colon cancer. This is the result of observing changes in tumor size.
  • Figure 3b shows the results of observing changes in tumor size after administering WM-A1-2613, an anti-IGSF1 antibody that binds to the C-terminus of IGSF1, to a humanized mouse model of lung cancer.
  • Anti-IGSF1 antibody that specifically binds to the C-terminus of IGSF1
  • One aspect of the present invention provides an anti-IGSF1 antibody that specifically binds to the C-terminus of IGSF1.
  • Immunoglobulin superfamily member 1 is a plasma membrane glycoprotein encoded by the IGSF1 gene found on the X chromosome of humans and other mammalian species. Although the function of IGSF1 in normal cells is not well known, IGSF1 mutations are known to cause diseases such as IGSF1 deficiency syndrome or central hypothyroidism.
  • the IGSF1 may be included without limitation as long as it is mammalian IGSF1, but preferably refers to human IGSF1. Additionally, in the present invention, the IGSF1 protein may include both native or mutant IGSF1 proteins, but is not limited thereto.
  • the native IGSF1 protein generally refers to a polypeptide containing the amino acid sequence of the native IGSF1 protein, and the amino acid sequence of the native IGSF1 protein generally refers to the amino acid sequence found in naturally occurring IGSF1.
  • Information about IGSF1 can be obtained from known databases such as GenBank of the National Institutes of Health, and may have, for example, the amino acid sequence of Genbank accession number NP_001164433.1 or the amino acid sequence of SEQ ID NO: 235, but is not limited thereto.
  • C-terminus (C-terminal end) of IGSF1 refers to the carboxyl terminus of the amino acid chain of IGSF1, and is also referred to as “C-terminal domain of IGSF1.”
  • the C-terminal domain of IGSF1 may include an extracellular domain consisting of seven Ig loops, a transmembrane domain, and a cytoplasmic tail domain.
  • anti-IGSF1 antibody refers to an antibody capable of binding to IGSF1, and may be used interchangeably with “IGSF1-specific antibody” herein.
  • anti-IGSF1 antibodies can specifically bind to the C-terminus of IGSF1.
  • the form of the antibody may include both whole antibodies and antibody fragments.
  • antibody refers to an immunoglobulin (Ig) molecule that reacts immunologically with a specific antigen, a protein molecule that acts as a receptor that specifically recognizes the antigen, and a whole antibody (whole antibody). It is a concept that encompasses both antibody and antibody fragment.
  • Ig immunoglobulin
  • the antibody or fragment thereof may be a monoclonal antibody, polyclonal antibody, single domain antibody, single chain antibody, multispecific antibody, human antibody, or humanized antibody.
  • (humanized) antibody, chimeric antibody, intrabody, Fv, scFv, Fv linked by disulfide bond (di-scFv), Fab fragment, F(ab') 2 fragment and any of the above epitopes (epitope) may include a binding fragment, but is not limited thereto.
  • the heavy and light chains of immunoglobulins may each include a constant region and a variable region.
  • heavy chain refers to a full-length heavy chain and fragments thereof comprising a variable region (VH) and three constant regions, CH1, CH2, and CH3, sufficient to confer specificity for an antigen. It is meant to include all.
  • VH variable region
  • light chain is meant to include both full-length light chains and fragments thereof comprising variable regions (VL) and constant regions (CL) sufficient to confer specificity for an antigen. .
  • CDR complementarity determining region
  • the light and heavy chain variable regions of the immunoglobulin include three hypervariable regions called complementarity determining regions (CDRs) and four framework regions (FRs).
  • CDRs complementarity determining regions
  • FRs framework regions
  • the CDR mainly functions to bind to the epitope of the antigen.
  • the CDRs of each chain are typically called CDR1, CDR2, and CDR3 sequentially starting from the N-terminus, and are identified by the chain on which the specific CDR is located.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention include a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 3, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 5, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7.
  • heavy chain variable region and a light chain variable region including a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 15.
  • the heavy chain variable region consists of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1;
  • the light chain variable region may consist of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9.
  • the antibody may be referred to as WM-A1-2608.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or Heavy chain CDR1 with about 99% identity or 100% identity, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 5 %, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% with the heavy chain CDR2 and the amino acid sequence of SEQ ID NO: 7 with about 98% or about 99% identity or 100% identity; A heavy chain CDR3 having about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 11. % or about 99% identity or 100% identity to the light chain CDR1, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 13, Light chain CDR2 having about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 15 %, about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or It may comprise or consist of an amino acid sequence having about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 9. % or about 99% identity or 100% identity.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention include a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 21, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 23, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 25.
  • the heavy chain variable region consists of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 19;
  • the light chain variable region may consist of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 27.
  • the antibody may be referred to as WM-A1-2613.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or Heavy chain CDR1 with about 99% identity or 100% identity, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97% with amino acid sequence of SEQ ID NO:23 %, about 98% or about 99% identity or about 100% identity to the heavy chain CDR2 and the amino acid sequence of SEQ ID NO: 25, and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, A heavy chain CDR3 having about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 29. % or about 99% identity or 100% identity to the light chain CDR1, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 31, Light chain CDR2 having about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% to the amino acid sequence of SEQ ID NO:33 %, about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or It may comprise or consist of an amino acid sequence having about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 27. % or about 99% identity or 100% identity.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention include a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 39, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 41, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 43. heavy chain variable region; and a light chain variable region comprising light chain CDR1 of SEQ ID NO: 47, light chain CDR2 of SEQ ID NO: 49, and light chain CDR3 of SEQ ID NO: 51.
  • the heavy chain variable region consists of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 37;
  • the light chain variable region may consist of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 45.
  • the antibody may be referred to as WM-A1-3102.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or Heavy chain CDR1 with about 99% identity or 100% identity, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 41 %, about 98% or about 99% identity or about 100% identity with the heavy chain CDR2 and the amino acid sequence of SEQ ID NO: 43 and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, A heavy chain CDR3 having about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 47. % or about 99% identity or 100% identity to the light chain CDR1, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 49, Light chain CDR2 having about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% to the amino acid sequence of SEQ ID NO:51 %, about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or It may comprise or consist of an amino acid sequence having about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 45. % or about 99% identity or 100% identity.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention include a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 57, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 59, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 61.
  • heavy chain variable region and a light chain variable region comprising light chain CDR1 of SEQ ID NO: 65, light chain CDR2 of SEQ ID NO: 67, and light chain CDR3 of SEQ ID NO: 69.
  • the heavy chain variable region consists of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 55;
  • the light chain variable region may consist of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 63.
  • the antibody may be referred to as WM-A1-3104.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or Heavy chain CDR1 with about 99% identity or 100% identity, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97% with the amino acid sequence of SEQ ID NO:59 %, about 98%, or about 99% identity, or about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% with the heavy chain CDR2 and the amino acid sequence of SEQ ID NO: 61, A heavy chain CDR3 having about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 65. % or about 99% identity or 100% identity, light chain CDR1, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 67, Light chain CDR2 having about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% to the amino acid sequence of SEQ ID NO:69 %, about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or It may comprise or consist of an amino acid sequence having about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 63. % or about 99% identity or 100% identity.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention include a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 75, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 77, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 79. heavy chain variable region; and a light chain variable region including a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 83, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 85, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 87.
  • the heavy chain variable region consists of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 73;
  • the light chain variable region may consist of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 81.
  • the antibody may be referred to as WM-A1-3105.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or Heavy chain CDR1 with about 99% identity or 100% identity, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97 with the amino acid sequence of SEQ ID NO:77 %, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% with the heavy chain CDR2 and the amino acid sequence of SEQ ID NO: 79 with about 98% or about 99% identity or 100% identity; A heavy chain CDR3 having about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 83. % or about 99% identity or 100% identity, light chain CDR1, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 85, Light chain CDR2 having about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% with the amino acid sequence of SEQ ID NO:87 %, about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or It may comprise or consist of an amino acid sequence having about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 81. % or about 99% identity or 100% identity.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention include a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 93, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 95, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 97. heavy chain variable region; and a light chain variable region including a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 101, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 103, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 105.
  • the heavy chain variable region consists of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 91;
  • the light chain variable region may consist of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 99.
  • the antibody may be referred to as WM-A1-3106.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or Heavy chain CDR1 with about 99% identity or 100% identity, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 95 %, about 98% or about 99% identity or about 100% identity with the heavy chain CDR2 and the amino acid sequence of SEQ ID NO: 97 and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, A heavy chain CDR3 having about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 101. % or about 99% identity or 100% identity, light chain CDR1, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 103, Light chain CDR2 having about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 105 %, about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or It may comprise or consist of an amino acid sequence having about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 99. % or about 99% identity or 100% identity.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention include a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 111, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 113, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 115. heavy chain variable region; and a light chain variable region including a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 119, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 121, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 123.
  • the heavy chain variable region consists of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 109;
  • the light chain variable region may consist of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 117.
  • the antibody may be referred to as WM-A1-3114.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or Heavy chain CDR1 with about 99% identity or 100% identity, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 113 %, about 98% or about 99% identity or about 100% identity to the heavy chain CDR2 and the amino acid sequence of SEQ ID NO: 115, and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, A heavy chain CDR3 having about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 119. % or about 99% identity or 100% identity, light chain CDR1, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 121, Light chain CDR2 having about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 123 %, about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or It may comprise or consist of an amino acid sequence having about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 117. % or about 99% identity or 100% identity.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention include a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 129, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 131, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 133. heavy chain variable region; and a light chain variable region including a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 137, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 139, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 141.
  • the heavy chain variable region consists of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 127;
  • the light chain variable region may consist of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 135.
  • the antibody may be referred to as WM-A1-3128.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or Heavy chain CDR1 with about 99% identity or 100% identity, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 131 %, about 98% or about 99% identity or about 100% identity to the heavy chain CDR2 and the amino acid sequence of SEQ ID NO: 133 and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, A heavy chain CDR3 having about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 137. % or about 99% identity or 100% identity, light chain CDR1, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 139, Light chain CDR2 having about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 141 %, about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or It may comprise or consist of an amino acid sequence having about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 135. % or about 99% identity or 100% identity.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention include a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 147, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 149, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 151. heavy chain variable region; and a light chain variable region including a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 155, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 157, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 159.
  • the heavy chain variable region consists of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 145;
  • the light chain variable region may consist of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 153.
  • the antibody may be referred to as WM-A1-3132.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or Heavy chain CDR1 with about 99% identity or 100% identity, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 149 %, about 98% or about 99% identity or about 100% identity to the heavy chain CDR2 and the amino acid sequence of SEQ ID NO: 151 and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, A heavy chain CDR3 having about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 155. % or about 99% identity or 100% identity, light chain CDR1, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 157, Light chain CDR2 having about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 159 %, about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or It may comprise or consist of an amino acid sequence having about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 153. % or about 99% identity or 100% identity.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention include a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 165, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 167, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 169. heavy chain variable region; and a light chain variable region including a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 173, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 175, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 177.
  • the heavy chain variable region consists of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 163;
  • the light chain variable region may consist of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 171.
  • the antibody may be referred to as WM-A1-3133.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or Heavy chain CDR1 with about 99% identity or 100% identity, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 167 %, about 98% or about 99% identity or about 100% identity to the heavy chain CDR2 and the amino acid sequence of SEQ ID NO: 169 and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, A heavy chain CDR3 having about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 173. % or about 99% identity or 100% identity, light chain CDR1, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 175, Light chain CDR2 having about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 177 %, about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or It may comprise or consist of an amino acid sequence having about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 171. % or about 99% identity or 100% identity.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention include a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 183, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 185, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 187.
  • heavy chain variable region and a light chain variable region including a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 191, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 193, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 195.
  • the heavy chain variable region consists of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 181;
  • the light chain variable region may consist of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 189.
  • the antibody may be referred to as WM-A1-3140.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or Heavy chain CDR1 with about 99% identity or 100% identity, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 185 %, about 98% or about 99% identity or about 100% identity to the heavy chain CDR2 and the amino acid sequence of SEQ ID NO: 187 and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, A heavy chain CDR3 having about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 191. % or about 99% identity or 100% identity, light chain CDR1, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 193, Light chain CDR2 having about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 195 %, about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or It may comprise or consist of an amino acid sequence having about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 189. % or about 99% identity or 100% identity.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention include a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 201, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 203, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 205.
  • heavy chain variable region and a light chain variable region including a light chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 209, a light chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 211, and a light chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 213.
  • the heavy chain variable region consists of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 199;
  • the light chain variable region may consist of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 207.
  • the antibody may be referred to as WM-A1-3389.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or Heavy chain CDR1 with about 99% identity or 100% identity, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 203 %, about 98% or about 99% identity or about 100% identity to the heavy chain CDR2 and the amino acid sequence of SEQ ID NO: 205 and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, A heavy chain CDR3 having about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 209. % or about 99% identity or 100% identity, light chain CDR1, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 211, Light chain CDR2 having about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% to the amino acid sequence of SEQ ID NO: 213 %, about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or It may comprise or consist of an amino acid sequence having about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 207. % or about 99% identity or 100% identity.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention include a heavy chain CDR1 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 219, a heavy chain CDR2 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 221, and a heavy chain CDR3 represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 223.
  • the heavy chain variable region consists of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 217;
  • the light chain variable region may consist of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 225.
  • the antibody may be referred to as WM-A1-3399.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or Heavy chain CDR1 with about 99% identity or 100% identity, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 221 %, about 98% or about 99% identity or about 100% identity to the heavy chain CDR2 and the amino acid sequence of SEQ ID NO: 223 and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, A heavy chain CDR3 having about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 227. % or about 99% identity or 100% identity, light chain CDR1, about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96% with the amino acid sequence of SEQ ID NO: 229, Light chain CDR2 having about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity and about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95% to the amino acid sequence of SEQ ID NO:231 %, about 96%, about 97%, about 98% or about 99% identity or 100% identity.
  • the heavy chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% or It may comprise or consist of an amino acid sequence having about 99% identity or 100% identity.
  • the light chain variable region of the antibody is about 90%, about 91%, about 92%, about 93%, about 94%, about 95%, about 96%, about 97%, about 98% of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 225. % or about 99% identity or 100% identity.
  • Immunoglobulin heavy chain constant regions exhibit different amino acid compositions and sequences and therefore possess different types of antigenicity. Therefore, immunoglobulins can be divided into five categories and referred to as immunoglobulin isotypes, namely IgM, IgD, IgG, IgA and IgE.
  • the corresponding heavy chains are ⁇ chain, ⁇ chain, ⁇ chain, ⁇ chain and ⁇ chain, respectively.
  • the same type of Ig can be classified into different subtypes. For example, IgG can be classified as IgG1, IgG2, IgG3, and IgG4.
  • Light chains can be classified as ⁇ or ⁇ chains depending on their different constant regions. Each of the five types of IgG can have either a ⁇ or ⁇ chain.
  • the IGSF1-specific antibody of the present invention may include a constant region derived from IgG, IgA, IgD, IgE, IgM, or a partial hybrid thereof.
  • hybrid means that within a single chain immunoglobulin heavy chain constant region there are sequences corresponding to immunoglobulin heavy chain constant regions of two or more different origins. For example, a mixture of domains consisting of 1 to 4 domains selected from the group consisting of CH1, CH2, and CH3 of IgG, IgA, IgD, IgE, and IgM is possible.
  • the light chain constant region may be derived from a ⁇ or ⁇ light chain.
  • Another aspect of the present invention provides a polynucleotide encoding an antibody specific for IGSF1 or a fragment thereof.
  • the anti-IGSF1 antibody and fragments thereof are as described above.
  • one or more bases may be mutated by substitution, deletion, insertion, or a combination thereof.
  • synthesis methods well known in the art, for example, methods described in the literature (Engels and Uhlmann, Angew Chem IntEd Engl., 37:73-127, 1988), can be used. and triester, phosphite, phosphoramidite and H-phosphate methods, PCR and other autoprimer methods, and oligonucleotide synthesis methods on solid supports.
  • the polynucleotide is SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 71, SEQ ID NO: 72, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: No. 107, SEQ ID No. 108, Seq. No. 125, Seq. , may consist of the base sequence of SEQ ID NO: 216, SEQ ID NO: 233, or SEQ ID NO: 234.
  • the polynucleotide is SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 35, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 53, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 71, SEQ ID NO: 72, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO: 107, SEQ ID NO: 108, SEQ ID NO: 125, SEQ ID NO: 126, SEQ ID NO: 143, SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 179, SEQ ID NO: 180, SEQ ID NO: 197, SEQ ID NO: 198, SEQ ID NO: 215, SEQ ID NO: 216, Each base sequence of SEQ ID NO: 233 or SEQ ID NO: 234 and at least about 70%, at least about 75%, at least about 80%, at least about 85%, at least about 86%, at least about 87%, at least about 88%, at least about 89%,
  • the polynucleotide may additionally include a signal sequence or leader sequence.
  • the term “signal sequence” refers to a nucleic acid encoding a signal peptide that directs secretion of a target protein.
  • the signal peptide is cleaved after translation in the host cell.
  • the signal sequence of the present invention is a nucleotide encoding an amino acid sequence that initiates the movement of a protein across the ER (endoplasmic reticulum) membrane.
  • Signal sequences are well characterized in the art and typically contain 16 to 30 amino acid residues, but may contain more or fewer amino acid residues.
  • a typical signal peptide consists of three regions: a basic N-terminal region, a central hydrophobic region, and a more polar C-terminal region.
  • the central hydrophobic region contains 4 to 12 hydrophobic residues that anchor the signal sequence throughout the membrane lipid bilayer while the immature polypeptide moves.
  • the signal sequence is cleaved within the lumen of the ER by cellular enzymes commonly known as signal peptidases.
  • the signal sequence may be a tissue plasminogen activation (tPa), a signal sequence of herpes simplex virus glycoprotein D (HSV gDs), an IgG signal sequence, or a secretion signal sequence of growth hormone.
  • tPa tissue plasminogen activation
  • HSV gDs herpes simplex virus glycoprotein D
  • IgG signal sequence an IgG signal sequence
  • secretion signal sequence of growth hormone e.gG signal sequence
  • Signal sequences useful in the present invention include antibody light chain signal sequences, such as antibody 14.18 (Gillies et al., J. Immunol. Meth 1989. 125:191-202), and antibody heavy chain signal sequences, such as MOPC141 antibody heavy chain signal. sequence (Sakano et al., Nature, 1980. 286: 676-683) and other signal sequences known in the art (see, e.g., Watson et al., Nucleic Acid Research, 1984. 12:5145-5164). You can.
  • leader sequence refers to a region of messenger RNA (mRNA) that exists upstream from the start codon and is not translated into protein.
  • Another aspect of the present invention provides a vector containing a polynucleotide encoding the IGSF1-specific antibody or fragment thereof.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof are as described above.
  • the vector may be two vectors each containing polynucleotides encoding the heavy chain and the light chain, or a bicistronic expression vector containing both the polynucleotides.
  • the term “vector” can be introduced into a host cell and recombined and inserted into the host cell genome.
  • the vector is understood as a nucleic acid vehicle containing a nucleotide sequence capable of spontaneous replication as an episome.
  • the vectors include linear nucleic acids, plasmids, phagemids, cosmids, RNA vectors, viral vectors, mini chromosomes and analogs thereof.
  • viral vectors include, but are not limited to, retroviruses, adenoviruses, and adeno-related viruses.
  • the vector may be plasmid DNA, phage DNA, etc., commercially developed plasmids (pUC18, pBAD, pIDTSAMRT-AMP, etc.), E. coli-derived plasmids (pYG601BR322, pBR325, pUC118, pUC119, etc.), Bacillus subtilis.
  • plasmids pUB110, pTP5, etc.
  • yeast-derived plasmids yeast-derived plasmids
  • phage DNA Charon4A, Charon21A, EMBL3, EMBL4, ⁇ gt10, ⁇ gt11, ⁇ ZAP, etc.
  • animal virus vectors retroviruses
  • adenovirus vaccinia virus
  • insect virus vectors baculovirus, etc.
  • the plasmid may contain a selection marker, such as an antibiotic resistance gene, and host cells maintaining the plasmid may be cultured under selective conditions.
  • a selection marker such as an antibiotic resistance gene
  • the term “gene expression” or “expression” of a protein of interest is understood to mean transcription of a DNA sequence, translation of an mRNA transcript, and secretion of a fusion protein product or fragment thereof.
  • a useful expression vector may be RcCMV (Invitrogen, Carlsbad) or variants thereof.
  • the expression vector may include a human CMV (cytomegalovirus) promoter to promote continuous transcription of the target gene in mammalian cells and a bovine growth hormone polyadenylation signal sequence to increase the steady-state level of RNA after transcription. You can.
  • Another aspect of the present invention provides a transformed cell into which an expression vector containing a polynucleotide encoding the IGSF1-specific antibody or fragment thereof has been introduced.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof are as described above.
  • transformed cell refers to prokaryotic and eukaryotic cells into which a recombinant expression vector can be introduced.
  • the transformed cells can be produced by introducing a vector into a host cell and transforming it. Additionally, the polynucleotide contained in the vector can be expressed to produce an antibody or fragment thereof specific to IGSF1 of the present invention.
  • the transformation can be performed by various methods. There is no particular limitation thereto, as long as the antibody or fragment thereof specific to IGSF1 of the present invention can be produced.
  • the transformation method includes CaCl 2 precipitation and CaCl 2 precipitation using a reducing substance called DMSO (dimethyl sulfoxide).
  • DMSO dimethyl sulfoxide
  • Hanahan method electroporation, calcium phosphate precipitation method, protoplast fusion method, stirring method using silicon carbide fiber, agrobacteria-mediated transformation method, and transformation method using PEG, which have increased efficiency by using the Hanahan method.
  • dextran sulfate, lipofectamine, and drying/inhibition mediated transformation methods can be used.
  • the target can be delivered into cells using virus particles through infection. Additionally, vectors can be introduced into host cells by gene bombardment or the like.
  • the host cell used to produce the transformed cell is not particularly limited as long as it is capable of producing the fusion protein of the present invention.
  • the host cell may include, but is not limited to, cells of prokaryotic, eukaryotic, mammalian, plant, insect, fungal or cellular origin.
  • An example of the prokaryotic cell may be Escherichia coli.
  • yeast can be used as an example of a eukaryotic cell.
  • the mammalian cells include CHO cells, F2N cells, COS cells, BHK cells, Bowes melanoma cells, HeLa cells, 911 cells, AT1080 cells, A549 cells, SP2/0 cells, and human lymphoblastoids.
  • NSO cells HT-1080 cells, PERC.6 cells, HEK293 cells, or HEK293T cells can be used, but are not limited to these, and any cell that can be used as a mammalian host cell known to those skilled in the art can be used.
  • the glycosylation-related genes of the host cell are manipulated through methods known to those skilled in the art to produce an IGSF1-specific antibody and fragment thereof.
  • the sugar chain pattern e.g., sialic acid, fucosylation, glycosylation
  • the sugar chain pattern can be adjusted.
  • Another aspect of the present invention provides a method for producing the IGSF1-specific antibody or fragment thereof.
  • the IGSF1-specific antibody and fragment thereof are as described above.
  • the method for producing the IGSF1-specific antibody and fragment thereof includes the steps of i) culturing the transformed cell; and ii) obtaining an anti-IGSF1 antibody or fragment thereof from the cell culture.
  • the method of culturing the transformed cells can be performed using methods widely known in the art.
  • the culture is not particularly limited as long as it can be produced by expressing the IGSF1-specific antibody and fragment thereof of the present invention.
  • the culture may be continuously cultured in a batch process or fed batch or repeated fed batch process.
  • the step of obtaining the IGSF1-specific antibody and fragment thereof from the culture may be performed by methods known in the art.
  • the obtaining method is not particularly limited as long as the produced antibody specific to IGSF1 of the present invention and its fragment can be obtained.
  • the obtaining method includes centrifugation, filtration, extraction, spraying, drying, evaporation, precipitation, crystallization, electrophoresis, fractional dissolution (e.g. ammonium sulfate precipitation), chromatography (e.g. ion exchange, It may be a method such as affinity, hydrophobicity, and size exclusion).
  • Another aspect of the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating cancer comprising the IGSF1-specific antibody and fragment thereof as an active ingredient.
  • cancer refers to the aggressive nature of cells dividing and proliferating in defiance of normal growth limits, the invasive nature of infiltrating surrounding tissues, and the ability to spread to other parts of the body. It refers to a general term for diseases caused by cells with metastatic characteristics, and is used in the same sense as malignant tumor.
  • the cancer may be a cancer in which IGSF1 is overexpressed.
  • the above cancers include stomach cancer, liver cancer, lung cancer, non-small cell lung cancer, colon cancer, bladder cancer, bone cancer, blood cancer, breast cancer, melanoma, thyroid cancer, parathyroid cancer, bone marrow cancer, rectal cancer, throat cancer, larynx cancer, esophagus cancer, pancreas cancer, and tongue cancer.
  • it may be any one selected from the group consisting of skin cancer, sinus tumor, uterine cancer, head and neck cancer, gallbladder cancer, oral cancer, anal cancer, colon cancer, and central nervous system tumor.
  • treatment of cancer means inhibiting or preventing the growth of cancer cells or tissues, which reduces cancer growth and cancer metastasis compared to no treatment or treatment, and reduces resistance to anticancer drugs. This concept also includes making the treatment more effective.
  • the cancer metastasis refers to the process by which tumor (cancer) cells spread to distant parts of the body, and "resistance to anticancer drugs” or “anticancer drug resistance” refers to the initial stage of treatment when treating cancer patients using anticancer drugs. This means that there is no treatment effect or that the cancer treatment effect is initially effective but the cancer treatment effect is lost during the continuous treatment process.
  • prevention refers to all actions that inhibit the occurrence of cancer or delay its onset by administering the pharmaceutical composition.
  • the anti-IGSF1 antibody or fragment thereof may be included in any amount (effective amount) depending on the use, formulation, purpose of formulation, etc., as long as it can exhibit anti-cancer activity.
  • “effective amount” refers to the amount of an active ingredient that can induce an anticancer effect. Such effective amounts can be determined experimentally within the scope of the ordinary ability of those skilled in the art.
  • the pharmaceutical composition of the present invention contains the antibody or fragment thereof as an active ingredient in an amount of about 0.1% to about 90% by weight, specifically about 0.5% by weight to about 75% by weight, and more specifically about 1% by weight, based on the total weight of the composition. It may contain from % to about 50% by weight.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may contain a conventional, non-toxic pharmaceutically acceptable carrier that is formulated into a preparation according to a conventional method.
  • the pharmaceutically acceptable carrier may be any carrier that is a non-toxic material suitable for delivery to a patient. Distilled water, alcohol, fats, waxes and inert solids may be included as carriers. Pharmacologically acceptable adjuvants (buffers, dispersants) may also be included in the pharmacological composition.
  • the term “pharmaceutically acceptable carrier” refers to a carrier or diluent that does not irritate living organisms and does not inhibit the biological activity and properties of the administered compound.
  • Acceptable pharmaceutical carriers in compositions formulated as liquid solutions include those that are sterile and biocompatible, such as saline solution, sterile water, Ringer's solution, buffered saline solution, albumin injection solution, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol, ethanol, and One or more of these ingredients can be mixed and used, and other common additives such as sweeteners, solubilizers, wetting agents, emulsifiers, isotonic agents, absorbents, antioxidants, preservatives, lubricants, fillers, buffers, and bacteriostatic agents are added as needed. can do.
  • compositions of the present invention can be prepared in a variety of formulations for parenteral administration (e.g., intramuscular, intravenous, or subcutaneous injection).
  • parenteral administration e.g., intramuscular, intravenous, or subcutaneous injection.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be formulated in the form of injections, transdermal administration, nasal inhalation, and suppositories along with a suitable carrier according to methods known in the art.
  • injectable preparations include sterile aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, lyophilized preparations, and suppositories.
  • Non-aqueous solvents and suspensions may include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, and injectable ester such as ethyl oleate.
  • injectables may contain conventional additives such as solubilizers, isotonic agents, suspending agents, emulsifiers, stabilizers, preservatives, etc.
  • the antibody or composition of the present invention can be administered to a patient in a therapeutically effective amount or a pharmaceutically effective amount.
  • the term "administration” means introducing a predetermined substance into an individual by an appropriate method, and the composition may be administered through any general route as long as it can reach the target tissue. . It may be administered intraperitoneally, intravenously, intramuscularly, subcutaneously, intradermally, locally, intranasally, or rectally, but is not limited thereto.
  • therapeutically effective amount refers to the amount of the composition effective in preventing or treating the target disease, which is sufficient to treat the disease at a reasonable benefit/risk ratio applicable to medical treatment and has no side effects. It means an amount that does not cause any damage.
  • the level of the effective amount is determined by factors including the patient's health status, type and severity of the disease, activity of the drug, sensitivity to the drug, method of administration, time of administration, route of administration and excretion rate, treatment period, drugs combined or used simultaneously, and It may be determined based on other factors well known in the medical field.
  • the therapeutically effective amount refers to the amount of drug effective in treating cancer.
  • the effective amount of the antibody in the composition of the present invention may vary depending on the patient's age, gender, and weight, and is generally about 0.1 mg to about 1,000 mg, or about 5 mg to about 200 mg per kg of body weight daily. It can be administered every other day or divided into 1 to 3 doses per day. However, since it may increase or decrease depending on the route of administration, severity of disease, gender, weight, age, etc., the scope of the present invention is not limited thereto.
  • the antibody of the present invention or a pharmaceutical composition containing the same may be administered as an individual therapeutic agent or in combination with other therapeutic agents, may be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents, and may be administered singly or multiple times.
  • the other therapeutic agent may additionally include any compound or natural extract whose safety has already been verified and which is known to have anticancer activity in order to increase or reinforce anticancer activity. Taking all of the above factors into consideration, it is important to administer an amount that can achieve maximum effect with minimal or no side effects, and this can be easily determined by a person skilled in the art.
  • Another aspect of the present invention provides a method for preventing or treating cancer, comprising administering the pharmaceutical composition to a subject.
  • the pharmaceutical composition, administration, cancer, prevention and treatment are the same as described above.
  • the subject may be a mammal, such as a human, cow, horse, pig, dog, sheep, goat or cat.
  • the individual may be a patient suffering from the cancer, for example, liver cancer, stomach cancer, colon cancer, breast cancer, lung cancer, etc., or may be an individual with a high risk of suffering from cancer.
  • the pharmaceutical composition can be used alone or in combination with surgery, radiation therapy, hormone therapy, chemotherapy, and methods using biological response regulators. Additionally, the pharmaceutical composition may be administered in combination with other drugs or physiologically active substances known to have therapeutic effects on the disease to be treated, or may be formulated in the form of a combination preparation with other drugs.
  • IGSF1 expression may be suppressed in subjects administered the pharmaceutical composition according to the present invention.
  • Another aspect of the present invention provides a use of the IGSF1-specific antibody or fragment thereof for preventing or treating cancer.
  • IGSF1, IGSF1-specific antibodies, cancer, prevention and treatment are the same as described above.
  • the cancers include, but are not limited to, stomach cancer, liver cancer, lung cancer, colon cancer, breast cancer, prostate cancer, ovarian cancer, pancreas cancer, cervical cancer, thyroid cancer, laryngeal cancer, acute myeloid leukemia, brain tumor, neuroblastoma, retinoblastoma, head and neck cancer, It may be any one selected from the group consisting of salivary gland cancer and lymphoma.
  • Another aspect of the present invention provides the use of an antibody or fragment thereof specific for IGSF1 for the production of a drug for preventing or treating cancer.
  • IGSF1, IGSF1-specific antibodies, cancer, prevention and treatment are the same as described above.
  • Redundant content is omitted in consideration of the complexity of the present specification, and terms not otherwise defined in this specification have meanings commonly used in the technical field to which the present invention pertains.
  • Example 1.1 IGSF1 antigen protein preparation
  • IGSF1 extracellular domain contained in the carboxyterminal domain of IGSF1 was amplified using PCR.
  • An ISGF1 protein expression vector was constructed by fusing human Fc (fragment crystallizable region) and Hig-tag (His-Tag) to the carboxy-terminus of the IGSF1 extracellular domain using the N293F vector (Y Biologics Co., Ltd.).
  • the human embryonic kidney cell line HEK293F was transfected with the constructed IGSF1 expression vector, and then cultured for 6 days in medium supplemented with 1 nM valproate.
  • the IGSF1 extracellular domain was first purified using protein A agarose, and the IGSF1 extracellular domain was secondarily purified using Superdex 200 gel filtration chromatography. The purified IGSF1 extracellular domain was used as an antigen for antibody selection.
  • Example 1.2 Selection of human antibodies specific for IGSF1
  • biopanning was performed using the prepared human antibody phage library (Y Biologics Co., Ltd.) Note)) was carried out. Specifically, through biopanning, phages that specifically bound to the IGSF1 antigen were eluted and amplified. The second and third biopanning were performed using the phage amplified in the first biopanning. It was confirmed that anti-IGSF1 phage antibody was enriched in the phage pool obtained through third panning.
  • Polyphage ELISA was performed to confirm the specificity of the positive phage antibody pool obtained through the first to third biopanning with the IGSF1 antigen. Through this, it was confirmed that among the phage pools from the first to third panning, the phage pool obtained through the third biopanning had a high binding ability to IGSF1.
  • ELISA was performed to compare and analyze the specificity of the 99 positive phage clones with different base sequences identified in Example 1.2 for other antigens, including IGSF1.
  • antigens including IGSF1.
  • various types of unspecific antigens such as mFc, hRAGE-Fc, CD58-Fc, and ITGA6-Fc were used, and binding of phage clones to them was confirmed.
  • 95 types of phages that specifically bind to IGSF1 were selected.
  • the 95 selected phage clones were converted into full IgG form, and the sequences of the heavy and light chains of the converted 95 clones were confirmed to match the sequences of the phage clones.
  • 13 most optimized antibodies were selected, and the CDR sequence information of the selected antibodies is shown in Table 1 below.
  • H-CDR1 H-CDR2 H-CDR3 L-CDR1 L-CDR2 L-CDR3 WM-A1-2608 GFAFRRYE (SEQ ID NO: 3) INSGGSVK (SEQ ID NO: 5) ARAGNAFGTFDY (SEQ ID NO: 7) QDISRW (SEQ ID NO: 11) AAS (SEQ ID NO: 13) QQPISFPLT (SEQ ID NO: 15) WM-A1-2613 GDSVISTDW (SEQ ID NO: 21) IHHSGST (SEQ ID NO: 23) SRGSGGRDAFDV (SEQ ID NO: 25) MSNIGGNY (SEQ ID NO: 29) KTN (SEQ ID NO: 31) ASWDIGDGPTWV (SEQ ID NO: 33) WM-A1-3102 GGTFSSYA (SEQ ID NO: 39) IIPVLGAT (SEQ ID NO: 41) ARGRSWGFDY (SEQ ID NO: 43) QSLLHSDGNTY (SEQ ID
  • the human lung cancer cell line NCI-H292 or the human embryonic kidney cell line HEK293E were genetically engineered to overexpress IGSF1 (HEK293 IGSF1, NCI-H292 IGSF1).
  • a negative control an empty vector (pCMV6 entry, Origene PS100001) that does not contain the polynucleotide encoding IGSF1 was used (HEK293 mock, NCI-H292 mock).
  • an expression vector pCMV6 entry IGSF1, OriGene Technologies, Inc, Cat No RC209621
  • a polynucleotide encoding IGSF1 was transfected into NCI-H292 and HEK293F, respectively.
  • the transfected cells were selected while culturing in a medium containing G418 (neomycin).
  • G418 neomycin
  • the IGSF1 expression level of the selected cells was confirmed, and the cells showing the highest IGSF1 expression were selected and used in the experiment.
  • the medium of the HEK293 mock, HEK293 IGSF1, NCI-H292 mock, and NCI-H292 IGSF1 cells prepared in Experimental Example 1.1 was removed, washed once with PBS (phosphate-buffered saline), and then washed with 1 ml of 0.05% trypsin-EDTA.
  • the cells were separated by treatment.
  • the separated cells were diluted with 9 ml of PBS (hereinafter referred to as FACS buffer) containing 2% FBS and 0.05% NaN 3 and centrifuged at 800 rpm for 3 minutes to remove the supernatant.
  • the cells were resuspended by adding FACS buffer to a concentration of 5x10 5 cell/ml, then dispensed into 1 ml tubes and centrifuged at 4°C for 2 minutes to remove the supernatant.
  • a control human IgG1 (IgG isotype) (Bio -2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105, WM-A1-3106, WM-A1-3128, WM-A1-3132, WM-A1-3133) each in FACS buffer 100 0.5 ⁇ g per ⁇ l was added and reacted on ice for 30 minutes. After the reaction was completed, 1 ml of FACS buffer was added to each tube, and then centrifuged at 4°C and 1,200 rpm for 2 minutes to remove the supernatant.
  • IgG isotype Bio -2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105, WM-A1-3106, WM-A1-3128, WM-A1-3132, WM-A1-3133
  • WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105, WM which are anti-IGSF1 antibodies that bind to the C-terminus of IGSF1 prepared in Example 1
  • ELISA was performed. Specifically, starting from 100 nM, the concentration of human IGSF1 single antigen was diluted by 1/3 until it reached 0.046 nM and sequentially added to each well, followed by WM-A1-, an anti-IGSF1 antibody that binds to the C-terminus of IGSF1.
  • NCI-H292 MOCK cells and NCI-H292 IGSF1 cells prepared in Experimental Example 1.1 were treated with Jurkat cells (ATCC, Clone E6-1) labeled with CFSE (Invitrogen, C34554), 10% FBS, and 1% penicillin-streptomycin, respectively. Co-culture was performed in RPMI1640 medium supplemented with (penicillin-streptomycin).
  • human anti-CD3 antibody (BD, cat. # 555329) and human anti-CD28 (BD, cat. # 555725) were each added to PBS at a concentration of 1 ⁇ g/ml. After dilution, it was reacted with T cells for 2 hours.
  • lung cancer cells were distributed in a 24 -well plate (Eppendorf, cat. # 0030722116) at a 1:10 ratio of 5
  • control IgG Bio WM-A1-3104, WM-A1-3105, WM-A1-3106, WM-A1-3128, WM-A1-3132, WM-A1-3133
  • lung cancer was treated for 48 hours. Cells and T cells were co-cultured.
  • Anti-CD3 antibody (BD Pharmingen, 555329) was diluted in PBS to a concentration of 1 ⁇ g/ml, dispensed into a 6-well plate, and coated in a CO 2 incubator at 37°C for 2 hours.
  • Jurkat cells (ATCC, Clone E6-1) were centrifuged at 1,500 rpm for 10 minutes to remove the supernatant, and then resuspended by adding PBS.
  • CFSE carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester
  • 1 ⁇ l of 1 mM CFSE (Invitrogen, C34554) was added per 1x10 6 cells/ml of Jurkat cells, and then stained for 10 minutes in a CO 2 incubator at 37°C. After adding medium containing 5 times the amount of PBS (Fetal Bovine Serum) containing stained Jurkat cells, the mixture was incubated in a CO 2 incubator at 37°C for 5 minutes. The supernatant was removed by centrifugation at 1,500 rpm for 10 minutes, and medium was added to resuspend the stained Jurkat cells.
  • PBS Fetal Bovine Serum
  • 1 ⁇ g/ml of anti-CD28 antibody (BD Pharmingen, 555725), a control IgG (Bio A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104) were treated at 1 ⁇ g/ml each, and cultured in a CO 2 incubator at 37°C for 72 hours.
  • the supernatant of the cultured cells was placed in a 15 ml tube and stored on ice.
  • the cells were washed once with PBS and then treated with 500 ⁇ l of 0.25% trypsin-EDTA to separate the cells.
  • the isolated cells were diluted with 2 ml of PBS containing 2% FBS and centrifuged at 1,500 rpm for 3 minutes.
  • the resulting cell pellet was added to the supernatant stored in a 15 ml tube, resuspended, and then centrifuged at 1,500 rpm for 3 minutes. After removing the supernatant, 200 ⁇ l of Fixation/Permeabilization solution (BD Bioscience, 554722) was added and reacted at 4°C for 20 minutes.
  • Fixation/Permeabilization solution BD Bioscience, 554722
  • Perm/Wash buffer (BD Bioscience, 554723) diluted to 1x was added, and the supernatant was removed by centrifugation at 1,500 rpm for 3 minutes. After repeating this process once more, 200 ⁇ l of Perm/Wash buffer was added and resuspended, BV421-labeled anti-IL-2 antibody and APC-labeled anti-TNF- ⁇ antibody were added, and incubated at 4°C. It was reacted for 30 minutes. After completion of the reaction, 1 ml of FACS buffer was added, and the supernatant was removed by centrifugation at 1,500 rpm for 3 minutes.
  • Perm/Wash buffer BD Bioscience, 554723
  • BV421 (IL-2) and APC (TNF- ⁇ ) labeled on the cells were measured using the LSRFortessa equipment, and the measured values were analyzed using FlowJo software and the results are as follows. It is shown in Tables 4 and 5 and Figures 2b and 2c.
  • CT26 5 ⁇ 10 5 cells/mice
  • a mouse-derived colon cancer cell line was diluted in PBS and injected subcutaneously (100 ⁇ l) into the right abdominal side of the mouse.
  • a cancer syngeneic mouse model was prepared.
  • anti-IGSF1 antibody WM-A1-2608, WM-A1-3102, WM-A1-3104 binding to the C-terminus of IGSF1 prepared in Example 1 , WM-A1-3105
  • Administration was carried out for 2 weeks at intervals of once every 3 days, and tumor size was measured twice a week.
  • the change in tumor size according to the administered substance is shown in Figure 3a, and the tumor growth inhibition rate (TGI) is shown in Table 6 below.
  • WM-A1-2608 WM-A1-3102 WM-A1-3104 WM-A1-3105 Dose(mg/kg) 20 TGI(%) 36.2 ⁇ 10.6 23.6 ⁇ 4.0 47.5 ⁇ 5.4 48.1 ⁇ 4.2
  • mice 6-week-old female PBMC humanized mice (Gem biosciences) were purchased and acclimatized for a week, and then the IGSF1-overexpressing human lung cancer cells NCI-H292 IGSF1 (5x10 6 cells/mice) prepared in Experimental Example 1.1 were added to PBS and Matrigel. It was diluted and injected subcutaneously (200 ⁇ l) into the right ventral side of the mouse. When the size of the tumor reached about 100 mm 3 , a negative control, an anti-IGSF1 antibody (WM-A1-2613) binding to the C-terminus of IGSF1 prepared in Example 1, was intraperitoneally administered at a dose of 10 mg/kg. Administration was conducted at intervals of once every three days for three weeks, and tumor size was measured twice a week. Changes in tumor size following administration of WM-A1-2613 are shown in Figure 3b, and tumor growth inhibition (TGI) is shown in Table 7 below.
  • TGI tumor growth inhibition

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Abstract

본 발명은 IGSF1의 C-말단에 특이적으로 결합하는 항체 및 이를 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 IGSF1의 C-말단에 특이적으로 결합하는 항-IGSF1 항체는 IGSF1에 대하여 높은 결합 특이성과 결합 친화도를 가지는 것을 확인하였다. 또한, 상기 항-IGSF1 항체는 IGSF1이 과발현된 암 세포의 사멸을 촉진시키고, 주변 면역 세포를 활성시키는 효과가 있으며, 종양 조직의 성장을 효과적으로 억제하는 효과가 있는 것을 확인하였다. 따라서, 상기 항-IGSF1 항체는 IGSF1를 발현하는 암을 효과적으로 치료할 수 있으므로 다양한 암에 대한 항암제로서 활용될 가능성이 높다.

Description

IGSF1의 C-말단에 결합하는 항체 및 이의 용도
본 발명은 IGSF1의 C-말단에 특이적으로 결합하는 항체 및 이를 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
암은 현대 사회에서 사망률 1위를 차지하는 주요 질병으로서 현재까지 많은 연구에도 불구하고 획기적인 치료법이 없는 실정이다. 전세계적으로 매년 10,000만명이 넘는 암 환자가 발생하고 있으며, 세계보건기구(WHO)는 사망의 주요원인 중 하나로 암을 꼽고 있다.
암의 치료에 있어 항암제와 같은 화학적 치료 용법은 어느 정도 효과를 거두고 있으나, 암의 다양한 발병 기전과 항암제 내성으로 인하여 많은 연구가 요구되고 있다. 최근 수십년간 진단과 치료 기술의 발달로 암 치료율이 향상되었으나, 많은 진행성 암에 있어서 5년 생존율은 5 내지 50%에 머무르고 있다. 또한, 일부 암에 있어서는 다양한 연구와 치료에도 불구하고 지난 20년간의 생존율이 크게 변하지 못한 상태이다.
이와 같이, 암은 종래의 암 치료 요법에 의해 쉽게 치료되지 못하고 재발 및 다른 부위로의 전이가 빈번하게 발생하므로, 보다 본질적인 치료 방법이 요구되고 있는 실정이다. 이에, 암의 악성화, 전이 및 재발의 특징이 되는 바이오마커를 타겟으로 암을 치료하기 위한 물질 개발에 관심이 높아지고 있다.
한편, 대한민국 공개특허 제10-2016-0014564호에서는 IGSF1(immunoglobulin superfamily member 1) 유전자가 MET(mesenchymal-epithelial transition factor) 저해제에 대한 감수성 예측용 바이오마커로 사용할 수 있다는 점에 대해 개시하고 있다. 상기 문헌에서는, 암 환자를 치료하기 전에 상기 바이오마커를 이용하여 환자 개개인의 감수성을 판정함으로써 치료 효과가 높은 항암제를 선택할 수 있음을 개시하고 있다. 그러나, IGSF1에 특이적인 항체가 항암제로 활용될 수 있다는 점에 대하여는 개시된 바 없다.
본 발명자들은 IGSF1이 과발현된 암을 효과적으로 치료하기 위한 항암제를 개발하기 위해 연구한 결과, IGSF1의 C-말단에 특이적으로 결합하는 항체를 제조하였고, 상기 항체가 암 세포 사멸, 종양 성장 억제 효과 및 면역 세포 활성화 효과가 우수한 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명의 일 측면은, IGSF1의 C-말단에 특이적으로 결합하는 항-IGSF1 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 서열번호 3의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 7의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 11의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 13의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 15의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 서열번호 21의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 23의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 25의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 29의 경쇄 CDR1, 서열번호 31의 경쇄 CDR2, 및 서열번호 33의 경쇄 CR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 서열번호 39의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 41의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 43의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 47의 경쇄 CDR1, 서열번호 49의 경쇄 CDR2, 및 서열번호 51의 경쇄 CR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 서열번호 57의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 59의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 61의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 65의 경쇄 CDR1, 서열번호 67의 경쇄 CDR2, 및 서열번호 69의 경쇄 CR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 서열번호 75의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 77의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 79의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 83의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 85의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 87의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 서열번호 93의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 95의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 97의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 101의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 103의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 105의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 서열번호 111의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 113의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 115의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 119의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 121의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 123의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 서열번호 129의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 131의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 133의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 137의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 139의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 141의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 서열번호 147의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 149의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 151의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 155의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 157의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 159의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 서열번호 165의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 167의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 169의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 173의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 175의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 177의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 서열번호 183의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 185의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 187의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 191의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 193의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 195의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 서열번호 219의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 221의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 223의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 227의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 229의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 231의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 항체 또는 이의 단편을 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 IGSF1의 C-말단에 특이적으로 결합하는 항-IGSF1 항체는 IGSF1에 대하여 높은 결합 특이성과 결합 친화도를 가지는 것을 확인하였다. 또한, 상기 항-IGSF1 항체는 IGSF1이 과발현된 암 세포의 사멸을 촉진시키고, 면역 세포를 활성시키는 효과가 있으며, 종양 조직의 성장을 효과적으로 억제하는 효과가 있는 것을 확인하였다. 따라서, 상기 항-IGSF1 항체는 IGSF1를 발현하는 다양한 암 치료제로서 유용하게 활용될 것이다.
도 1a 및 도 1b는 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체인 WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105, WM-A1-3106, WM-A1-3128, WM-A1-3132, WM-A1-3133의 인간 배아 신장 세포주인 HEK293 mock(도 1a), HEK293 IGSF1(도 1b)에 대한 결합 친화도를 분석한 결과이다.
도 1c 및 도 1d는 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체인 WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105, WM-A1-3106, WM-A1-3128, WM-A1-3132, WM-A1-3133의 인간 폐암 세포주인 NCI-H292 mock(도 1c), NCI-H292 IGSF1(도 1d)에 대한 결합 친화도를 분석한 결과이다.
도 2a는 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체인 WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105, WM-A1-3106, WM-A1-3128, WM-A1-3132, WM-A1-3133의 면역 항암 효능을 폐암 세포와 T 세포 공동배양에서 T 세포 증식률로 확인한 결과이다.
도 2b는 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체인 WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104의 면역 항암 효능을 폐암 세포와 T 세포 공동배양에서 사이토카인 IL-2의 생성률로 확인한 결과이다.
도 2c는 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체인 WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104의 면역 항암 효능을 폐암 세포와 T 세포 공동배양에서 사이토카인 TNF-α의 생성률로 확인한 결과이다.
도 3a는 대장암 동계 마우스 모델에 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체인 WM-A1-2608, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105를 각각 투여한 후에 종양 크기의 변화를 관찰한 결과이다.
도 3b는 폐암 인간화 마우스 모델에 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체인 WM-A1-2613을 투여한 후에 종양 크기의 변화를 관찰한 결과이다.
IGSF1의 C-말단에 특이적으로 결합하는 항-IGSF1 항체
본 발명의 일 측면은, IGSF1의 C-말단에 특이적으로 결합하는 항-IGSF1 항체를 제공한다.
본 명세서에서 사용된 용어, "IGSF1(Immunoglobulin superfamily member 1)"은 인간 및 다른 포유동물 종의 X 염색체에서 발견되는 IGSF1 유전자에 의해 암호화된 혈장 막 당단백질이다. 정상 세포에서 IGSF1의 기능에 대해서는 잘 알려져 있지 않으나, IGSF1 돌연변이는 IGSF1 결핍 증후군(IGSF1 deficiency syndrome) 또는 중추성 갑상선 기능 저하증 등의 질병을 유발하는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서 상기 IGSF1은 포유류의 IGSF1이라면 제한없이 포함될 수 있으나, 바람직하게는 인간 IGSF1을 의미할 수 있다. 또한, 본 발명에서 상기 IGSF1 단백질은 천연형 또는 변이체 IGSF1 단백질을 모두 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 천연형 IGSF1 단백질이란 천연형 IGSF1 단백질의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩타이드를 일반적으로 지칭하며, 상기 천연형 IGSF1 단백질의 아미노산 서열이란 천연 발생 IGSF1에서 발견되는 아미노산 서열을 일반적으로 지칭한다. 상기 IGSF1에 대한 정보는 미국국립보건원의 GenBank 등 공지의 데이터베이스로부터 얻을 수 있으며, 예를 들어 Genbank accession number NP_001164433.1의 아미노산 서열 또는 서열번호 235의 아미노산 서열을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 명세서에서 사용된 용어, "IGSF1의 C-말단(C-terminus, C-terminal end)"은 IGSF1의 아미노산 사슬의 카르복실 말단을 의미하며, "IGSF1의 C-말단 도메인"이라고도 한다. 상기 IGSF1의 C-말단 도메인은 7개의 Ig 루프(loop)로 구성된 세포외 도메인(extracellular domain), 막횡단 도메인(transmembrane domain) 및 세포질 꼬리(cytoplasmic tail) 도메인을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어, "항-IGSF1 항체"는 IGSF1에 결합할 수 있는 항체를 의미하며, 본 명세서에서 "IGSF1에 특이적인 항체"와 혼용되어 사용될 수 있다. 특히, 항-IGSF1 항체는 IGSF1의 C-말단에 특이적으로 결합할 수 있다. 상기 항체의 형태는 전체(whole) 항체 및 항체 단편을 모두 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어, "항체(antibody)"는 특정 항원과 면역학적으로 반응하는 면역글로불린(Ig) 분자로, 항원을 특이적으로 인식하는 수용체 역할의 단백질 분자를 의미하고, 전체 항체(whole antibody) 및 항체 단편(antibody fragment) 모두 포괄하는 개념이다.
구체적으로, 상기 항체 또는 이의 단편은 단일클론(monoclonal) 항체, 다중클론(polyclonal) 항체, 단일 도메인(single domain) 항체, 단쇄(single chain) 항체, 다중 특이적(multispecific) 항체, 인간 항체, 인간화(humanized) 항체, 키메릭(chimeric) 항체, 인트라바디(intrabody), Fv, scFv, 이황화 결합으로 연결한 Fv(di-scFv), Fab 단편, F(ab')2 단편 및 상기 중 임의의 에피토프(epitope) 결합 단편을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
면역글로불린의 중쇄 및 경쇄는 각각 불변 영역(constant region) 및 가변 영역(variable region)을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어, "중쇄(heavy chain)"는 항원에 대한 특이성을 부여하기에 충분한 가변 영역(VH) 및 3개의 불변 영역인 CH1, CH2 및 CH3를 포함하는 전체 길이의 중쇄 및 이의 단편을 모두 포함하는 의미이다.
본 명세서에서 사용된 용어, "경쇄(light chain)"는 항원에 대한 특이성을 부여하기에 충분한 가변 영역(VL) 및 불변 영역(CL)를 포함하는 전체 길이 경쇄 및 이의 단편을 모두 포함하는 의미이다.
본 명세서에서 사용된 용어, "CDR(complementarity determining region)"은 항체의 중쇄 가변 영역(VH)과 경쇄 가변 영역(VL)의 일부인 상보성 결정 영역을 의미한다.
상기 면역글로불린의 경쇄 및 중쇄 가변 영역은, 상보성 결정 영역(complementarity determining region, CDR)이라 불리는 3개의 초가변 영역(hypervariable region) 및 4개의 구조 영역(framework region, FR)을 포함한다. 상기 CDR은 주로 항원의 에피토프에 결합하는 역할을 한다. 각각의 사슬의 CDR은 전형적으로 N-말단으로부터 시작하여 순차적으로 CDR1, CDR2, CDR3로 불리고, 특정 CDR이 위치하고 있는 사슬에 의해서 식별된다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 서열번호 3의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 7의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 11의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 13의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 15의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 이때, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 1의 아미노산 서열로 구성되고; 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 9의 아미노산 서열로 구성될 수 있다. 본 명세서에서 상기 항체는 WM-A1-2608로 지칭될 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 3의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR2 및 서열번호 7의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 11의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 13의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR2 및 서열번호 15의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 1의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 9의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 서열번호 21의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 23의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 25의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 29의 경쇄 CDR1, 서열번호 31의 경쇄 CDR2, 및 서열번호 33의 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 이때, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 19의 아미노산 서열로 구성되고; 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 27의 아미노산 서열로 구성될 수 있다. 본 명세서에서 상기 항체는 WM-A1-2613으로 지칭될 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 21의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 23의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR2 및 서열번호 25의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 29의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 31의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR2 및 서열번호 33의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 19의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 27의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 서열번호 39의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 41의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 43의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 47의 경쇄 CDR1, 서열번호 49의 경쇄 CDR2, 및 서열번호 51의 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 이때, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 37의 아미노산 서열로 구성되고; 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 45의 아미노산 서열로 구성될 수 있다. 본 명세서에서 상기 항체는 WM-A1-3102로 지칭될 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 39의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 41의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR2 및 서열번호 43의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 47의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 49의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR2 및 서열번호 51의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 37의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 45의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 서열번호 57의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 59의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 61의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 65의 경쇄 CDR1, 서열번호 67의 경쇄 CDR2, 및 서열번호 69의 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 이때, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 55의 아미노산 서열로 구성되고; 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 63의 아미노산 서열로 구성될 수 있다. 본 명세서에서 상기 항체는 WM-A1-3104로 지칭될 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 57의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 59의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR2 및 서열번호 61의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 65의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 67의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR2 및 서열번호 69의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 55의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 63의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 서열번호 75의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 77의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 79의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 83의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 85의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 87의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 이때, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 73의 아미노산 서열로 구성되고; 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 81의 아미노산 서열을 서열로 구성될 수 있다. 본 명세서에서 상기 항체는 WM-A1-3105로 지칭될 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 75의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 77의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR2 및 서열번호 79의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 83의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 85의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR2 및 서열번호 87의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 73의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 81의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 서열번호 93의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 95의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 97의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 101의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 103의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 105의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 이때, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 91의 아미노산 서열로 구성되고; 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 99의 아미노산 서열로 구성될 수 있다. 본 명세서에서 상기 항체는 WM-A1-3106으로 지칭될 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 93의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 95의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR2 및 서열번호 97의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 101의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 103의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR2 및 서열번호 105의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 91의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 99의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 서열번호 111의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 113의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 115의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 119의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 121의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 123의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 이때, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 109의 아미노산 서열로 구성되고; 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 117의 아미노산 서열로 구성될 수 있다. 본 명세서에서 상기 항체는 WM-A1-3114로 지칭될 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 111의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 113의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR2 및 서열번호 115의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 119의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 121의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR2 및 서열번호 123의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 109의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 117의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 서열번호 129의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 131의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 133의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 137의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 139의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 141의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 이때, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 127의 아미노산 서열로 구성되고; 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 135의 아미노산 서열로 구성될 수 있다. 본 명세서에서 상기 항체는 WM-A1-3128로 지칭될 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 129의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 131의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR2 및 서열번호 133의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 137의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 139의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR2 및 서열번호 141의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 127의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 135의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 서열번호 147의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 149의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 151의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 155의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 157의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 159의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 이때, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 145의 아미노산 서열로 구성되고; 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 153의 아미노산 서열로 구성될 수 있다. 본 명세서에서 상기 항체는 WM-A1-3132로 지칭될 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 147의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 149의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR2 및 서열번호 151의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 155의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 157의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR2 및 서열번호 159의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 145의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 153의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 서열번호 165의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 167의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 169의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 173의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 175의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 177의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 이때, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 163의 아미노산 서열로 구성되고; 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 171의 아미노산 서열로 구성될 수 있다. 본 명세서에서 상기 항체는 WM-A1-3133으로 지칭될 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 165의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 167의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR2 및 서열번호 169의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 173의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 175의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR2 및 서열번호 177의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 163의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 171의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 서열번호 183의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 185의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 187의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 191의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 193의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 195의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 이때, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 181의 아미노산 서열로 구성되고; 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 189의 아미노산 서열로 구성될 수 있다. 본 명세서에서 상기 항체는 WM-A1-3140으로 지칭될 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 183의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 185의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR2 및 서열번호 187의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 191의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 193의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR2 및 서열번호 195의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 181의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 189의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 서열번호 201의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 203의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 205의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 209의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 211의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 213의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 이때, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 199의 아미노산 서열로 구성되고; 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 207의 아미노산 서열로 구성될 수 있다. 본 명세서에서 상기 항체는 WM-A1-3389로 지칭될 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 201의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 203의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR2 및 서열번호 205의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 209의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 211의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR2 및 서열번호 213의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 199의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 207의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 서열번호 219의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 221의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 223의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및 서열번호 227의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 229의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 231의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함할 수 있다. 이때, 상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 217의 아미노산 서열로 구성되고; 상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 225의 아미노산 서열로 구성될 수 있다. 본 명세서에서 상기 항체는 WM-A1-3399로 지칭될 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 219의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 221의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR2 및 서열번호 223의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 중쇄 CDR3을 포함할 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 227의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 229의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR2 및 서열번호 231의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 경쇄 CDR3을 포함할 수 있다.
상기 항체의 중쇄 가변 영역은 서열번호 217의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다. 또한, 상기 항체의 경쇄 가변 영역은 서열번호 225의 아미노산 서열과 약 90%, 약 91%, 약 92%, 약 93%, 약 94%, 약 95%, 약 96%, 약 97%, 약 98% 또는 약 99% 동일성 또는 100% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
면역글로불린 중쇄 불변 영역(CH)은 상이한 아미노산 조성 및 순서를 나타내므로, 상이한 유형의 항원성을 보유한다. 따라서, 면역글로불린은 다섯 가지 카테고리로 분류될 수 있으며, 면역글로불린 이소형, 즉, IgM, IgD, IgG, IgA 및 IgE로 지칭될 수 있다. 이에 상응하는 중쇄는 각각 μ 사슬, δ 사슬, γ 사슬, α 사슬 및 ε 사슬이다. 또한, 힌지 영역(hinge region)의 아미노산 조성 및 중쇄 이황화 결합의 수와 위치에 따라, 동일한 유형의 Ig는 상이한 하위 유형으로 분류될 수 있다. 예를 들어, IgG는 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4로 분류될 수 있다. 경쇄는 상이한 불변영역에 따라 κ 또는 λ 사슬로 분류될 수 있다. 다섯 가지 유형의 IgG 각각은 κ 또는 λ 사슬을 가질 수 있다.
본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체가 불변 영역을 포함하는 경우, IgG, IgA, IgD, IgE, IgM 유래 또는 이들이 부분적으로 혼합(hybrid)된 불변 영역을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어, "혼합(hybrid)"은 단쇄 면역글로불린 중쇄 불변 영역 내에 2개 이상의 상이한 기원의 면역글로불린 중쇄 불변 영역에 해당하는 서열이 존재함을 의미한다. 예를 들어 IgG, IgA, IgD, IgE 및 IgM의 CH1, CH2 및 CH3으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 1개 내지 4개 도메인으로 이루어진 도메인의 혼합이 가능하다.
또한, 상기 IGSF1에 특이적인 항체가 경쇄 불변 영역(LC)을 포함하는 경우, 상기 경쇄 불변 영역은 κ 또는 λ 경쇄 유래일 수 있다.
항-IGSF1 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오티드
본 발명의 또 다른 측면은, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 제공한다. 상기 항-IGSF1 항체 및 이의 단편은 전술한 바와 같다.
상기 폴리뉴클레오티드는 동일한 폴리펩타이드를 암호화한다면, 하나 이상의 염기가 치환, 결실, 삽입 또는 이들의 조합에 의해 변이될 수 있다. 폴리뉴클레오티드 서열을 화학적으로 합성하여 제조하는 경우, 당업계에 널리 공지된 합성법, 예를 들어 문헌(Engels and Uhlmann, Angew Chem IntEd Engl., 37:73-127, 1988)에 기술된 방법을 이용할 수 있으며, 트리에스테르, 포스파이트, 포스포르아미다이트 및 H-포스페이트 방법, PCR 및 기타 오토프라이머 방법, 고체 지지체 상의 올리고뉴클레오티드 합성법 등을 들 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열번호 17, 서열번호 18, 서열번호 35, 서열번호 36, 서열번호 53, 서열번호 54, 서열번호 71, 서열번호 72, 서열번호 89, 서열번호 90, 서열번호 107, 서열번호 108, 서열번호 125, 서열번호 126, 서열번호 143, 서열번호 144, 서열번호 161, 서열번호 162, 서열번호 179, 서열번호 180, 서열번호 197, 서열번호 198, 서열번호 215, 서열번호 216, 서열번호 233 또는 서열번호 234의 염기서열로 구성될 수 있다. 상기 폴리뉴클레오티드는 서열번호 17, 서열번호 18, 서열번호 35, 서열번호 36, 서열번호 53, 서열번호 54, 서열번호 71, 서열번호 72, 서열번호 89, 서열번호 90, 서열번호 107, 서열번호 108, 서열번호 125, 서열번호 126, 서열번호 143, 서열번호 144, 서열번호 161, 서열번호 162, 서열번호 179, 서열번호 180, 서열번호 197, 서열번호 198, 서열번호 215, 서열번호 216, 서열번호 233 또는 서열번호 234인 각각의 염기서열과 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 86%, 적어도 약 87%, 적어도 약 88%, 적어도 약 89%, 적어도 약 90%, 적어도 약 91%, 적어도 약 92%, 적어도 약 93%, 적어도 약 94%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 적어도 약 99% 또는 적어도 약 100%의 동일성을 가지는 염기서열을 포함하거나 이들로 이루어질 수 있다.
상기 폴리뉴클레오티드는 신호 서열 또는 선도 서열을 추가적으로 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어, "신호 서열(signal sequence)"은 목적 단백질의 분비를 지시하는 신호 펩타이드를 암호화하는 핵산을 의미한다. 상기 신호 펩타이드는 숙주 세포에서 번역된 후에 절단된다. 구체적으로, 본 발명의 신호 서열은 ER(endoplasmic reticulum) 막을 관통하는 단백질의 이동을 개시하는 아미노산 서열을 암호화하는 뉴클레오티드이다.
신호 서열은 당업계에 그 특징이 잘 알려져 있으며, 통상 16 내지 30개의 아미노산 잔기를 포함하나, 그보다 더 많거나 적은 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 통상적인 신호 펩타이드는 기본 N 말단 영역, 중심의 소수성 영역 및 보다 극성인(polar) C 말단 영역의 세 영역으로 구성된다. 중심 소수성 영역은 미성숙 폴리펩타이드가 이동하는 동안 막지질 이중층을 통하여 신호 서열을 고정시키는 4 내지 12개의 소수성 잔기를 포함한다. 개시 이후에, 신호 서열은 흔히 신호 펩티다아제(signal peptidases)로 알려진 세포 효소에 의하여 ER의 루멘(lumen) 내에서 절단된다. 이때, 상기 신호 서열은 tPa(tissue plasminogen activation), HSV gDs(signal sequence of herpes simplex virus glycoprotein D), IgG 신호 서열 또는 성장 호르몬(growth hormone)의 분비 신호 서열일 수 있다. 바람직하게, 포유동물 등을 포함하는 고등 진핵 세포에서 사용되는 분비 신호 서열을 사용할 수 있다.
본 발명에서 유용한 신호 서열은 항체 경쇄 신호서열, 예를 들면 항체 14.18(Gillies et al., J. Immunol. Meth 1989. 125:191-202), 항체 중쇄 신호 서열, 예를 들면, MOPC141 항체 중쇄 신호서열(Sakano et al., Nature, 1980. 286: 676-683) 및 당업계에 알려진 다른 신호 서열(예, Watson et al., Nucleic Acid Research, 1984. 12:5145-5164를 참조)을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어, "선도 서열(leader sequence)"은 개시코돈으로부터 상류(upstream)에 존재하는 메신저 RNA(mRNA)의 영역으로, 단백질로 번역되지 않은 부분을 의미한다.
폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터를 제공한다. 상기 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 전술한 바와 같다.
상기 벡터는 상기 중쇄 및 경쇄를 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 각각 포함하는 2개의 벡터 또는 상기 폴리뉴클레오티드를 모두 포함하는 바이시스트로닉 발현 벡터(bicistronic expression vector)일 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어, "벡터"는 숙주 세포에 도입되어 숙주 세포 유전체 내로 재조합 및 삽입될 수 있다. 또는 상기 벡터는 에피좀으로서 자발적으로 복제될 수 있는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산 수단으로 이해된다. 상기 벡터는 선형 핵산, 플라스미드, 파지미드, 코스미드, RNA 벡터, 바이러스 벡터, 미니 염색체 및 이의 유사체들을 포함한다. 바이러스 벡터의 예로는 레트로바이러스, 아데노바이러스 및 아데노 관련 바이러스를 포함하나 이에 제한되지 않는다.
구체적으로, 상기 벡터는 플라스미드 DNA, 파아지 DNA 등이 될 수 있고, 상업적으로 개발된 플라스미드(pUC18, pBAD, pIDTSAMRT-AMP 등), 대장균 유래 플라스미드(pYG601BR322, pBR325, pUC118, pUC119 등), 바실러스 서브틸리스 유래 플라스미드(pUB110, pTP5 등), 효모-유래 플라스미드(YEp13, YEp24, YCp50 등), 파아지 DNA(Charon4A, Charon21A, EMBL3, EMBL4, λgt10, λgt11, λZAP 등), 동물 바이러스 벡터(레트로바이러스(retrovirus), 아데노바이러스(adenovirus), 백시니아 바이러스(vaccinia virus) 등), 곤충 바이러스 벡터(배큘로바이러스(baculovirus) 등) 등이 될 수 있다. 상기 벡터는 숙주 세포에 따라서 단백질의 발현량과 수식 등이 다르게 나타나므로, 목적에 가장 적합한 숙주세포를 선택하여 사용함이 바람직하다.
또한, 상기 플라스미드는 항생제 내성 유전자와 같은 선별 마커를 포함할 수 있고, 플라스미드를 유지하는 숙주 세포는 선택적인 조건하에서 배양될 수 있다.
본 명세서에서 사용하는 용어, 목적 단백질의 "유전자 발현" 또는 "발현"은 DNA 서열의 전사, mRNA 전사체의 번역 및 융합 단백질 생산물 또는 이의 단편의 분비를 의미하는 것으로 이해된다. 유용한 발현 벡터는 RcCMV(Invitrogen, Carlsbad) 또는 이의 변이체일 수 있다. 상기 발현 벡터는 포유류 세포에서 목적 유전자의 연속적인 전사를 촉진하기 위한 인간 CMV(cytomegalovirus) 프로모터 및 전사 후 RNA의 안정 상태 수준을 높이기 위한 우태 성장 인자(bovine growth hormone) 폴리아데닐레이션 신호서열을 포함할 수 있다.
항-IGSF1 항체를 발현하는 형질전환 세포
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 벡터가 도입된 형질전환 세포를 제공한다. 상기 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 전술한 바와 같다.
본 명세서에서 사용된 용어, "형질전환 세포"는 재조합 발현 벡터가 도입될 수 있는 원핵 세포 및 진핵 세포를 나타낸다. 상기 형질전환 세포는 벡터를 숙주 세포에 도입하여 형질전환시켜서 제작될 수 있다. 또한, 상기 벡터에 포함된 폴리뉴클레오티드를 발현시켜 본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 생산할 수 있다.
상기 형질전환은 다양한 방법에 의하여 수행될 수 있다. 본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 생산할 수 있는 한, 특별히 이에 제한되지 않는다, 구체적으로, 상기 형질전환 방법은 CaCl2 침전법, CaCl2 침전법에 DMSO(dimethyl sulfoxide)라는 환원 물질을 사용함으로써 효율을 높인 Hanahan 방법, 전기천공법(electroporation), 인산 칼슘(calcium phosphate) 침전법, 원형질 융합법, 실리콘 카바이드 섬유를 이용한 교반법, 아그로박테리아 매개된 형질전환법, PEG를 이용한 형질전환법, 덱스트란 설페이트, 리포펙타민 및 건조/억제 매개된 형질전환 방법 등이 사용될 수 있다. 또한, 감염(infection)을 수단으로 하여 바이러스 입자를 사용하여 목적물을 세포 내로 전달시킬 수 있다. 또한, 유전자 밤바드먼트(bombardment) 등에 의해 벡터를 숙주세포 내로 도입할 수 있다.
또한, 상기 형질전환 세포의 제작에 사용되는 숙주세포 역시 본 발명의 융합단백질을 생산할 수 있는 한, 특별히 이에 제한되지 않는다. 구체적으로 상기 숙주 세포는 원핵 세포, 진핵 세포, 포유동물, 식물, 곤충, 균류 또는 세포성 기원의 세포를 포함할 수 있지만 이에 한정되지 않는다. 상기 원핵 세포의 일 예로는 대장균을 사용할 수 있다. 또한, 진핵 세포의 일 예로는 효모를 사용할 수 있다. 또한, 상기 포유동물 세포로 CHO 세포, F2N 세포, COS 세포, BHK 세포, 바우스(Bowes) 흑색종 세포, HeLa 세포, 911 세포, AT1080 세포, A549 세포, SP2/0 세포, 인간 림프아구(human lymphoblastoid), NSO 세포, HT-1080 세포, PERC.6 세포, HEK293 세포 또는 HEK293T 세포 등을 사용할 수 있으나, 이에 한정되지 않으며, 당업자에게 알려진 포유동물 숙주 세포로 사용 가능한 세포는 모두 이용 가능하다.
상기 항-IGSF1 항체 및 이의 단편의 치료제로서의 특성을 최적화하거나 기타 다른 목적을 위하여, 숙주 세포가 갖고 있는 당화(glycosylation) 관련 유전자를 당업자에게 알려져 있는 방법을 통해 조작하여 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편의 당쇄 패턴(예를 들어, 시알산, 퓨코실화, 당화)을 조정할 수 있다.
항-IGSF1 항체의 제조방법
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 제조하는 방법을 제공한다. 상기 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편은 전술한 바와 같다.
상기 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편을 제조하는 방법은 i) 상기 형질전환 세포를 배양하는 단계; 및 ii) 상기 세포 배양물로부터 항-IGSF1 항체 또는 이의 단편을 수득하는 단계를 포함할 수 있다.
상기 형질전환 세포를 배양하는 방법은 당업계에 널리 알려져 있는 방법을 이용하여 수행할 수 있다. 구체적으로, 상기 배양은 본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편을 발현시켜서 생산할 수 있는 한 특별히 이에 제한되지 않는다. 구체적으로, 상기 배양은 배치 공정 또는 주입 배치 또는 반복 주입 배치 공정(fed batch or repeated fed batch process)에서 연속식으로 배양할 수 있다.
또한, 배양물로부터 상기 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편을 수득하는 단계는 당업계에 공지된 방법에 의해 수행될 수 있다. 구체적으로, 상기 수득 방법은 생산된 본 발명의 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편을 수득할 수 있는 한, 특별히 이에 제한되지 않는다. 바람직하게는, 상기 수득 방법은 원심분리, 여과, 추출, 분무, 건조, 증발, 침전, 결정화, 전기영동, 분별용해(예를 들면, 암모늄설페이트 침전), 크로마토그래피(예를 들어, 이온 교환, 친화성, 소수성 및 크기배제) 등의 방법일 수 있다.
항-IGSF1 항체의 용도
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 IGSF1에 특이적인 항체 및 이의 단편을 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 명세서에서 사용된 용어, "암(cancer)"은 세포가 정상적인 성장 한계를 무시하고 분열 및 증식하는 공격적인(aggressive) 특성, 주위 조직에 침투하는 침투적인(invasive) 특성 및 체내의 다른 부위로 퍼지는 전이적인(metastatic) 특성을 갖는 세포에 의한 질병을 총칭하는 의미하며, 악성 종양(tumor)과 동일한 의미로 사용된다.
상기 암은 IGSF1이 과발현되어 있는 암일 수 있다. 또한, 상기 암은 위암, 간암, 폐암, 비소세포 폐암, 대장암, 방관암, 골암, 혈액암, 유방암, 흑색종양, 갑상선암, 부갑성선암, 골수암, 직장암, 인후암, 후두암, 식도암, 췌장암, 설암, 피부암, 죄종양, 자궁암, 두경부암, 담낭암, 구강암, 항문 부근암, 결장암 및 중추신경계 종양으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것일 수 있다.
또한, "암의 치료"는 암 세포 또는 조직의 성장을 억제하거나 예방한다는 것을 의미하고, 이는 치료하거나 처리하지 않았을 때와 비교시에 암의 성장 및 암 전이를 감소시키고, 항암제에 대한 내성을 줄여 치료 효과가 더 발휘되도록 하는 것도 포함하는 개념이다. 상기 암 전이(metastasis)는 종양(암) 세포가 신체의 멀리 떨어진 부분으로 확산되는 과정을 의미하고, "항암제에 대한 내성" 또는 "항암제 내성"이란 항암제를 이용하여 암 환자를 치료할 때, 치료 초기부터 치료 효과가 없거나 초기에는 암 치료 효과가 있으나 계속적인 치료 과정에서 암 치료 효과가 상실되는 것을 의미한다. "예방"은 상기 약학 조성물의 투여에 의해 암의 발생을 억제하거나 그의 발병을 지연시키는 모든 행위를 말한다.
본 발명의 암 예방 또는 치료용 약학 조성물에서 상기 항-IGSF1 항체 또는 이의 단편이 항암 활성을 나타낼 수 있는 한, 용도, 제형, 배합 목적 등에 따라 임의의 양(유효량)으로 포함될 수 있다. 여기서, "유효량"이란 항암 효과를 유도할 수 있는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 유효성분으로서 상기 항체 또는 이의 단편을 조성물의 총 중량을 기준으로 약 0.1 중량% 내지 약 90 중량%, 구체적으로 약 0.5 중량% 내지 약 75 중량%, 보다 구체적으로 약 1 중량% 내지 약 50 중량%로 함유할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은, 통상적인 방법에 따라 제제로 배합되는 통상적이고 무독성인 약학적으로 허용가능한 담체를 포함할 수 있다.
상기 약학적으로 허용 가능한 담체는 환자에게 전달하기에 적절한 비-독성 물질이면 어떠한 담체라도 가능하다. 증류수, 알코올, 지방, 왁스 및 비활성 고체가 담체로 포함될 수 있다. 약물학적으로 허용되는 애쥬번트(완충제, 분산제) 또한 약물학적 조성물에 포함될 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어, "약학적으로 허용가능한 담체"란 생물체를 자극하지 않고 투여 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 담체 또는 희석제를 말한다. 액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용되는 약학적 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 한 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 감미제, 용해 보조제, 습윤제, 유화제, 등장화제, 흡수제, 항산화제, 보존제, 활택제, 충전제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다.
본 발명의 조성물은 비경구 투여(예컨대, 근육내, 정맥내 또는 피하 주사)를 위한 다양한 제형으로 제조될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물이 비경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 주사제, 경피 투여제, 비강 흡입제 및 좌제의 형태로 제제화될 수 있다. 주사용 제제에는 멸균된 수용액제, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. 한편, 주사제에는 용해제, 등장화제, 현탁화제, 유화제, 안정화제, 방부제 등과 같은 종래의 첨가제가 포함될 수 있다.
약제학적 조성물의 제제화와 관련하여서는 당업계에 공지되어 있으며, 구체적으로 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)] 등을 참조할 수 있다. 상기 문헌은 본 명세서의 일부로서 간주된다.
본 발명의 항체 또는 조성물은 치료학적으로 유효한 양 또는 약학적으로 유효한 양으로 환자에게 투여될 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어, "투여"란, 적절한 방법으로 개체에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미하며, 상기 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 국소 투여, 비내 투여, 직장내 투여될 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.
여기서 "치료학적으로 유효한 양" 또는 "약학적으로 유효한 양"이란 대상 질환을 예방 또는 치료하는데 유효한 조성물의 양으로서, 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미한다. 상기 유효량의 수준은 환자의 건강 상태, 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 구체적으로, 상기 치료학적으로 유효한 양은 암을 치료하는데 효과적인 약물의 양을 의미한다.
구체적으로, 본 발명의 조성물에서 항체의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 kg 당 약 0.1 mg 내지 약 1,000 mg, 또는 약 5 mg 내지 약 200 mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1일 1회 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로, 본 발명의 범위는 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 항체 또는 이를 포함하는 약학 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 이때, 상기 다른 치료제는 항암 활성의 상승, 보강을 위하여 이미 안전성이 검증되고 항암 활성을 갖는 것으로 공지된 임의의 화합물이나 천연 추출물을 추가로 포함할 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 최소한의 부작용으로 또는 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은, 상기 약학 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 암 예방 또는 치료 방법을 제공한다. 이때, 상기 약학 조성물, 투여, 암, 예방 및 치료는 상술한 바와 동일하다.
상기 개체는 포유동물, 예를 들어, 인간, 소, 말, 돼지, 개, 양, 염소 또는 고양이일 수 있다. 상기 개체는 상기 암, 예를 들어 간암, 위암, 결장암, 유방암, 폐암 등의 암을 앓는 환자이거나 암을 앓을 가능성이 큰 개체일 수 있다.
또한, 상기 약학 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다. 또한, 상기 약학 조성물은 치료하고자 하는 질환에 대하여 치료 효과가 공지된 다른 약물 또는 생리학적 활성물질과 병용하여 투여되거나, 다른 약물과의 조합 제제 형태로 제형화될 수 있다.
또한, 상기 본 발명에 따른 약학 조성물이 투여된 개체는 IGSF1 발현이 억제될 수 있다.
본 발명은 또 다른 측면은, 상기 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편의 암 예방 또는 치료를 위한 용도를 제공한다. 이때, 상기 IGSF1, IGSF1에 특이적인 항체, 암, 예방 및 치료는 상술한 바와 동일하다.
상기 암은 이에 제한되지는 않으나, 위암, 간암, 폐암, 대장암, 유방암, 전립선암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 갑상선암, 후두암, 급성 골수성 백혈병, 뇌종양, 신경모세포종, 망막 모세포종, 두경부암, 침샘암 및 림프종으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은, 암 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편의 용도를 제공한다. 때, 상기 IGSF1, IGSF1에 특이적인 항체, 암, 예방 및 치료는 상술한 바와 동일하다.
중복되는 내용은 본 명세서의 복잡성을 고려하여 생략하며, 본 명세서에서 달리 정의되지 않은 용어들은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상적으로 사용되는 의미를 갖는 것이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1. IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체 제조
실시예 1.1. IGSF1 항원 단백질 제조
Jurkat 세포 cDNA 라이브러리에서 PCR 방법을 통하여 IGSF1의 카복시 말단 도메인(carboxyterminal domain)에 포함되어 있는 세포외 도메인만을 증폭하였다. N293F 벡터(와이바이오로직스(주))를 사용하여 IGSF1 세포외 도메인의 카복시-말단에 인간 Fc(fragment crystallizable region) 및 Hig-태그(His-Tag)를 융합시킨 ISGF1 단백질 발현 벡터를 제작하였다. 인간 배아 신장 세포주인 HEK293F에 제작한 IGSF1 발현 벡터를 형질감염(transfection)시킨 후, 1 nM의 발프로산(valproate)을 첨가한 배지에서 6일 동안 배양하였다. 다음으로, protein A 아가로스(agarose)를 사용하여 IGSF1 세포외 도메인을 1차 정제하고, Superdex 200 겔 여과 크로마토그래피를 사용하여 IGSF1 세포외 도메인을 2차 정제하였다. 정제된 IGSF1 세포외 도메인을 항원으로서 항체 선별에 이용하였다.
실시예 1.2. IGSF1에 특이적인 인간 항체의 선별
실시예 1.1.에서 정제한 IGSF1 항원을 immunotube에 코팅하고 블로킹(blocking)한 후, 준비된 인간 항체 파아지(phage) 라이브러리 (와이바이오로직스(주))를 사용하여 바이오패닝(biopanning) (와이바이오로직스(주))을 수행하였다. 구체적으로, 바이오패닝을 통하여 IGSF1 항원에 특이적으로 결합한 파아지들한 용출(elution)하고 이를 증폭하였다. 1차 바이오패닝에서 증폭된 파아지를 사용하여 2차 및 3차 바이오패닝을 수행하였다. 3차 패닝을 통하여 수득한 파아지 풀(pool)에 항-IGSF1 파아지 항체가 인리치(enrich)된 것을 확인하였다.
1차 내지 3차 바이오패닝을 통하여 수득한 양성 파아지 항체 풀에 대한 IGSF1 항원과의 특이성을 확인하기 위하여 폴리 파아지 ELISA를 수행하였다. 이를 통하여, 1차 내지 3차 패닝의 파아지 풀 중에서 3차 바이오패닝을 통하여 수득한 파아지 풀이 IGSF1와 결합능이 큰 것을 확인하였다.
3차 패닝의 파아지 풀로부터 수백종의 모노클론(monoclone)들을 선별하고, 모노 파아지 ELISA를 수행하여 IGSF1에 특이적으로 결합하는지 여부를 확인하였다. IGSF1에 특이적으로 결합하는 다수의 예비 클론 항체를 선별하고, 선별된 예비 항체 클론들에 대해 DNA 염기서열 분석을 통하여 염기서열이 서로 다른 99종의 파아지를 확인하였다.
실시예 1.3. 선별된 예비 항체의 IGSF1 항원에 대한 특이성 확인
실시예 1.2.에서 확인된 염기서열이 서로 다른 99종의 양성 파아지 클론에 대하여 IGSF1을 포함한 다른 항원들에 대한 특이성을 비교 분석하기 위하여, ELISA를 수행하였다. 대조군 항원으로서 mFc, hRAGE-Fc, CD58-Fc, ITGA6-Fc 등 다양한 종류의 불특정 항원을 사용하였으며, 이에 대한 파아지 클론들의 결합 여부를 확인하였다. 이를 통하여, IGSF1에만 특이적으로 결합하는 95종의 파아지를 선별하였다. 선별된 95종의 파아지 클론을 전체 IgG 형태로 전환하고, 전환한 95개 클론의 중쇄와 경쇄의 서열이 파아지 클론의 서열과 일치하는 것을 확인하였다. 95종의 항체 중에서 가장 최적화된 항체 13종을 선별하였으며, 선별된 항체의 CDR 서열정보는 하기 표 1에 기재된 바와 같다.

 H-CDR1 H-CDR2 H-CDR3 L-CDR1 L-CDR2 L-CDR3
WM-A1-2608 GFAFRRYE
(서열번호 3)		 INSGGSVK
(서열번호 5)		 ARAGNAFGTFDY
(서열번호 7)		 QDISRW
(서열번호 11)		 AAS
(서열번호 13)		 QQPISFPLT
(서열번호 15)
WM-A1-2613 GDSVISTDW
(서열번호 21)		 IHHSGST
(서열번호 23)		 SRGSGGRDAFDV
(서열번호 25)		 MSNIGGNY
(서열번호 29)		 KTN
(서열번호 31)		 ASWDDIGDGPTWV
(서열번호 33)
WM-A1-3102 GGTFSSYA
(서열번호 39)		 IIPVLGAT
(서열번호 41)		 ARGRSWGFDY
(서열번호 43)		 QSLLHSDGNTY
(서열번호 47)		 TLS
(서열번호 49)		 MQRIEFPYT
(서열번호 51)
WM-A1-3104 GFTFSSYA
(서열번호 57)		 ISYDGSNK
(서열번호 59)		 ARGSGRHYQPLDH
(서열번호 61)		 QTIYRY
(서열번호 65)		 AAS
(서열번호 67)		 QQLKNYPLT
(서열번호 69)
WM-A1-3105 GRSTYNYA
(서열번호 75)		 IIPIFGAT
(서열번호 77)		 AKGSGNYYYGMDV
(서열번호 79)		 QSVGTW
(서열번호 83)		 AAS
(서열번호 85)		 QQADSFPYT
(서열번호 87)
WM-A1-3106 GFTFGDYA
(서열번호 93)		 ISGDGGTT
(서열번호 95)		 ARGGRVYGMDV
(서열번호 97)		 QGISVW
(서열번호 101)		 GSS
(서열번호 103)		 QQYKASPPT
(서열번호 105)
WM-A1-3114 GFSFDDYA
(서열번호 111)		 ISWNSRTM
(서열번호 113)		 ARTKGFPGHFHE
(서열번호 115)		 SGSFANNY
(서열번호 119)		 GDNQR
(서열번호 121)		 QSYDSRNRNYV
(서열번호 123)
WM-A1-3128 GFSLRTYG
(서열번호 129)		 IWHDGSHT
(서열번호 131)		 ARGGSYSRYSDAFDI
(서열번호 133)		 QSVSSSY
(서열번호 137)		 DAS
(서열번호 139)		 QQRSNWPLT
(서열번호 141)
WM-A1-3132 GYSLSELS
(서열번호 147)		 GYSLSELS
(서열번호 149)		 ARDLPELRGVLAD
(서열번호 151)		 SSDVGGYDY
(서열번호 155)		 DAS
(서열번호 157)		 SSYTRSSTLV
(서열번호 159)
WM-A1-3133 GFSFDDYG
(서열번호 165)		 ISGSGGST
(서열번호 167)		 ARGGRVYGMDV
(서열번호 169)		 HDIRRW
(서열번호 173)		 AAA
(서열번호 175)		 QKYDSVPFT
(서열번호 177)
WM-A1-3140 GFNFHNYA
(서열번호 183)		 ISWNSGSI
(서열번호 185)		 AGLKGMNWFDP
(서열번호 187)		 SGSFANNY
(서열번호 191)		 GDNQR
(서열번호 193)		 QSYDSNNHWV
(서열번호 195)
WM-A1-3389 GGTFSTYA
(서열번호 201)		 IIPFVGTV
(서열번호 203)		 VRDGGRSYFDS
(서열번호 205)		 TSNIGSNL
(서열번호 209)		 DNH
(서열번호 211)		 VAWDDSLNGYV
(서열번호 213)
WM-A1-3399 GFTFNKYG
(서열번호 219)		 ISPSGSLQ
(서열번호 221)		 AAGLIGGATAAFDN
(서열번호 223)		 SSDIGDYSF
(서열번호 227)		 DVY
(서열번호 229)		 SSYATDRTLV
(서열번호 231)
실험예 1. 항-IGSF1 항체의 결합 친화도 측정
실험예 1.1. IGSF1 과발현 인간 세포주의 제조
인간 폐암 세포주인 NCI-H292 또는 인간 배아 신장 세포주 HEK293E가 IGSF1을 과발현하도록 유전적으로 조작하였다(HEK293 IGSF1, NCI-H292 IGSF1). 음성 대조군으로 IGSF1을 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 포함되지 않은 공벡터(empty vector)(pCMV6 entry, Origene PS100001)를 사용하였다(HEK293 mock, NCI-H292 mock). 구체적으로, IGSF1를 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 포함된 발현 벡터(pCMV6 entry IGSF1, OriGene Technologies,Inc, Cat No RC209621)를 NCI-H292 및 HEK293F에 각각 형질감염(transfection)시켰다. 이어서, G418(neomycin)이 포함된 배지에서 배양하면서 형질감염된 세포를 선별하였다. 선별된 세포의 IGSF1 발현 수준을 확인하고, 가장 높은 IGSF1 발현을 보인 세포를 선택하여 실험에 사용하였다.
실험예 1.2. IGSF1 과발현 인간 세포주에 대한 결합 친화도 확인
실험예 1.1.에서 제조한 HEK293 mock, HEK293 IGSF1, NCI-H292 mock, NCI-H292 IGSF1 세포의 배지를 제거하고, PBS(phosphate-buffered saline)로 1회 세척한 후 1 ㎖의 0.05% trypsin-EDTA를 처리하여 세포를 분리하였다. 분리한 세포를 2% FBS와 0.05% NaN3를 첨가한 9 ㎖의 PBS(이하, FACS 버퍼)로 희석하고, 800 rpm으로 3분 동안 원심분리하여 상층액을 제거하였다. 5x105 cell/㎖ 농도가 되도록 FACS 버퍼를 첨가하여 세포를 재부유시킨 후 튜브에 1 ㎖씩 분주하고, 4℃에서 2분 동안 원심분리하여 상층액을 제거하였다.
각각의 세포에 대조군(control)인 인간 IgG1(IgG isotype)(Bio X cell, BE0297)와 실시예 1에서 제조한 IGSF1 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체(WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105, WM-A1-3106, WM-A1-3128, WM-A1-3132, WM-A1-3133)를 각각 FACS 버퍼 100 ㎕ 당 0.5 ㎍씩 첨가하고 얼음에서 30분 동안 반응시켰다. 반응이 끝나고 각 튜브에 FACS 버퍼를 1 ㎖씩 첨가한 후, 4℃, 1,200 rpm으로 2분 동안 원심분리하여 상층액을 제거하였다. 이러한 과정을 한 번 더 반복한 후, 상층액을 제거하고 FITC가 표지된 anti-human IgG(Invitrogen, 62-8411)를 FACS 버퍼 100 ㎕ 당 0.5 ㎍씩 첨가하고 얼음에서 30분 동안 반응시켰다.
반응이 끝나고 각 튜브에 FACS 버퍼를 1 ㎖씩 첨가한 후, 4℃, 1,200 rpm으로 2분 동안 원심분리하여 상층액을 제거했다. 이러한 과정을 한 번 더 반복한 후, 상층액을 제거하고 200 ㎕의 FACS 버퍼를 첨가하여 재부유시켰다. 유세포 분석기인 MACS Quant10 장비에서 세포에 표지된 FITC의 값을 측정하고, 측정된 값은 MACS Quant10 소프트웨어를 사용하여 분석하였다. 대조군을 기준으로 항-IGSF1 항체의 결합력을 측정하여, 그 결과를 도 1a 내지 도 1d에 나타냈다.
도 1a 및 도 1b에 나타난 바와 같이, HEK293 mock(도 1a)에서는 IGSF1 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체의 결합 친화도가 매우 낮으며, HEK293 IGSF1(도 1b)에서는 대부분의 항체가 세포에 결합한 것을 통하여, 결합 친화도가 매우 높은 것을 확인하였다.
또한, 도 1c 및 도 1d에 나타난 바와 같이, NCI-H292 mock(도 1c)에서는 IGSF1 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체의 결합 친화도가 매우 낮으며, NCI-H292 IGSF1(도 1d)에서는 대부분의 항체가 세포에 결합한 것을 통하여, 결합 친화도가 매우 높은 것을 확인하였다.
실험예 1.3. IGSF1 항원에 대한 결합 친화도 측정
실시예 1에서 제조한 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1　항체인 WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105, WM-A1-3106, WM-A1-3128, WM-A1-3132, WM-A1-3133의 IGSF1 항원에 대한 결합 친화도를 분석하기 위하여, ELISA를 수행하였다. 구체적으로, 인간 IGSF1 단일 항원의 농도를 100 nM에서 시작하여 0.046 nM가 될 때까지 1/3씩 희석하여 각 웰에 순차적으로 넣고 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체인 WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105, WM-A1-3106, WM-A1-3128, WM-A1-3132, WM-A1-3133 각각의 친화도를 측정하였다. 측정 결과는 GraphPad Prism 6 소프트웨어를 이용하여 분석하고, 그 결과를 표 2에 나타냈다.
WM-A1-2608 WM-A1-2613 WM-A1-3102 WM-A1-3104 WM-A1-3105 WM-A1-3106 WM-A1-3128 WM-A1-3132 WM-A1-3133
Kd 9.7×10-11 1.0×10-10 1.876×10-8 2.497×10-8 2.947×10-8 2.079×10-8 2.72×10-8 17.67×10-8 29.97×10-8
R2 0.9974 0.9788 0.9938 0.98 0.9834 0.9738 0.9787 0.9947 0.9551
표 2에 나타난 바와 같이, 실시예 1에서 제조한 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체 대부분이 IGSF1 항원에 대하여 높은 결합 친화도를 나타내는 것을 확인하였다.
실험예 2. 항-IGSF1 항체의 면역 항암 효능 분석
실험예 2.1. T 세포 활성화 효과 확인
실험예 1.1.에서 제조한 NCI-H292 MOCK 세포와 NCI-H292 IGSF1 세포를 각각 CFSE(Invitrogen, C34554)로 표지된 Jurkat 세포(ATCC, Clone E6-1)와 10% FBS 및 1% 페니실린-스트렙토마이신(penicillin-streptomycin)을 첨가한 RPMI1640 배지에서 공동 배양하였다.
구체적으로, 공동 배양 전에 T 세포를 자극하기 위하여, 인간 항-CD3 항체(BD, cat. # 555329)와 인간 항-CD28(BD, cat. # 555725)를 각각 1 ㎍/㎖의 농도가 되도록 PBS에 희석한 후, T 세포와 2시간 동안 반응시켰다. T 세포를 자극한 후, 24-웰 플레이트(Eppendorf, cat. # 0030722116)에 폐암 세포는 5X104 cells, T 세포는 5X105 cells의 1:10 비율로 분주하였다. 이어서, 대조군인 IgG(Bio X cell, BE0297)와 실시예 1에서 제조한 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1　항체(WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105, WM-A1-3106, WM-A1-3128, WM-A1-3132, WM-A1-3133)를 10 ㎍/㎖씩 각각 처리하고, 48시간 동안 폐암 세포와 T 세포를 공동 배양하였다.
배양이 완료된 후 Jurkat 세포를 확보하고, 1 ㎖의 Stain Buffer(BD, cat. # 554656)를 첨가하여 세척한 후, 1,200 rpm에서 3분 동안 원심분리하여 상층액을 제거하고 세포를 모았다. 이어서, 200 ㎕의 Stain Buffer를 첨가한 후, T 세포 증식률(T cell proliferation)을 BD LSRFortessaTM Flow Cytometer로 분석하고 그 결과를 하기 표 3 및 도 2a에 나타냈다.
T cell proliferation
IgG WM-A1-2608 WM-A1-2613 WM-A1-3102 WM-A1-3104 WM-A1-3105 WM-A1-3106 WM-A1-3128 WM-A1-3132 WM-A1-3133
NCI-H292 Mock Avg. 1.00 1.13 1.22 1.28 1.30 0.90 0.94 0.82 0.79 0.68
p-값 0.0079 0.2125 0.0682 0.0466 0.3310 0.5959 0.0101 0.0141 0.0000
NCI-H292 IGSF1 Avg. 1.00 1.02 1.27 1.40 1.39 0.98 0.93 0.88 0.76 0.79
p-값 0.8438 0.2385 0.0393 0.0429 0.7276 0.2515 0.1723 0.0384 0.0921
도 2a에 나타난 바와 같이, IGSF1 과발현 폐암 세포주에 실시예 1에서 제조한 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체를 처리한 경우에 대조군과 비교하여 T 세포 증식률이 증가하거나 유사한 수준인 것을 확인하였다.
실험예 2.2. 사이토카인 생성 효과 확인
항-CD3 항체(BD Pharmingen, 555329)를 1 ㎍/㎖의 농도가 되도록 PBS에 희석한 후 6-웰 플레이트에 분주하고, 37℃의 CO2 인큐베이터에서 2시간 동안 코팅하였다. Jurkat 세포(ATCC, Clone E6-1)를 1,500 rpm으로 10분 동안 원심분리하여 상층액을 제거하고, PBS를 첨가하여 재부유시켰다. CFSE(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester)를 5 mM의 농도가 되도록 18 ㎕의 DMSO(dimethyl sulfoxide)를 첨가한 후, 1 mM의 농도가 되도록 PBS를 첨가하여 희석하였다. Jurkat 세포 1x106 cells/㎖ 당 1 mM의 CFSE(Invitrogen, C34554)를 1 ㎕씩 첨가한 후 37℃의 CO2 인큐베이터에서 10분 동안 염색하였다. 염색한 Jurkat 세포가 포함된 PBS 양의 5배 양의 FBS(Fetal Bovine Serum)가 포함된 배지를 첨가한 후, 37℃의 CO2 인큐베이터에서 5분 동안 반응시켰다. 1,500 rpm으로 10분 동안 원심분리하여 상층액을 제거하고, 배지를 첨가하여 염색한 Jurkat 세포를 재부유시켰다.
CD3 항체가 코팅된 웰을 PBS로 1회 세척한 후, 실험예 1.1.에서 제조한 NCI-H292 Mock, NCI-H292 IGSF1 세포와 CFSE로 표지된 Jurkat 세포(ATCC, Clone E6-1)를 각각 1:5 비율로 분주하였다. 이어서, 1 ㎍/㎖의 항-CD28 항체(BD Pharmingen, 555725)와 대조군인 IgG(Bio X cell, BE0297), 실시예 1에서 제조한 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체(WM-A1-2608, WM-A1-2613, WM-A1-3102, WM-A1-3104)를 1 ㎍/㎖씩 각각 처리하고, 37℃의 CO2 인큐베이터에서 72시간 동안 배양하였다.
배양한 세포의 상층액을 15 ㎖의 튜브에 넣어 얼음에서 보관하고, 세포는 PBS로 1회 세척한 후 500 ㎕의 0.25% trypsin-EDTA를 처리하여 세포를 분리하였다. 분리된 세포는 2% FBS가 포함된 2 ㎖의 PBS로 희석하고, 1,500 rpm으로 3분 동안 원심분리하였다. 생성된 세포 펠렛(pellet)을 15 ㎖의 튜브에 보관 중인 상층액에 첨가하여 재부유시킨 후, 1,500 rpm으로 3분 동안 원심분리하였다. 상층액을 제거한 후, 200 ㎕의 Fixation/Permeabilization solution(BD Bioscience, 554722)를 첨가하고 4℃에서 20분 동안 반응시켰다. 이어서, 1x로 희석한 Perm/Wash buffer(BD Bioscience, 554723)를 1 ㎖씩 첨가하고, 1,500 rpm으로 3분 동안 원심분리하여 상층액을 제거하였다. 이러한 과정을 한 번 더 반복한 후, 200 ㎕의 Perm/Wash buffer를 첨가하여 재부유시킨 후, BV421 표지된 항-IL-2 항체와 APC 표지된 항-TNF-α 항체를 첨가하고 4℃에서 30분 동안 반응시켰다. 반응 완료 후에 1 ㎖의 FACS 버퍼를 첨가하고, 1,500 rpm으로 3분 동안 원심분리하여 상층액을 제거하였다. 이러한 과정을 한 번 더 반복한 후, LSRFortessa 장비를 사용하여 세포에 표지된 BV421(IL-2)와 APC(TNF-α)를 측정하고, 측정값을 FlowJo 소프트웨어를 사용하여 분석하여 그 결과를 하기 표 4 및 표 5와 도 2b 및 도 2c에 나타냈다.
IL-2 production
IgG WM-A1-2608 WM-A1-2613 WM-A1-3102 WM-A1-3104
NCI-H292 Mock 1.00 1.16 1.68 1.16 1.11
NCI-H292 IGSF1 O/E 1.00 3.25 7.58 5.58 6.08
TNF-α production
IgG WM-A1-2608 WM-A1-2613 WM-A1-3102 WM-A1-3104
NCI-H292 Mock 1.00 1.05 1.16 1.19 1.19
NCI-H292 IGSF1 O/E 1.00 1.68 1.88 1.32 1.41
도 2b에 나타난 바와 같이, IGSF1 과발현 폐암 세포주에 실시예 1에서 제조한 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체를 처리한 경우에 대조군과 비교하여 IL-2의 생성률이 증가하는 것을 확인하였다.
또한, 도 2c에 나타난 바와 같이, IGSF1 과발현 폐암 세포주에 실시예 1에서 제조한 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체를 처리한 경우에 대조군과 비교하여 TNF-α의 생성률이 증가하는 것을 확인하였다.
실험예 3. 암 동물 모델에서 항-IGSF1 항체의 항암 효능 분석
실험예 3.1. 대장암 모델의 종양 성장 억제 효과 확인
5주령 암컷 BALB/c 마우스를 구입하여 일주일 동안 순화시킨 후, 마우스 유래 대장암 세포주인 CT26(5Υ105 cells/mice)을 PBS에 희석하여 마우스의 오른쪽 배 측면에 피하(100 ㎕)로 주사하여 대장암 동계 마우스 모델(syngeneic mouse model)을 제조하였다. 종양의 크기가 약 100 mm3이 되었을 때 음성 대조군, 실시예 1에서 제조한 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체(WM-A1-2608, WM-A1-3102, WM-A1-3104, WM-A1-3105)를 각각 20 mg/kg 용량으로 복강 투여하였다. 3일에 한 번 간격으로 2주 동안 투여를 진행하였으며, 주 2회 종양 크기를 측정하였다. 투여 물질에 따른 종양 크기 변화를 도 3a에 나타냈으며, 종양 성장 억제율(Tumor Growth Inhibition, TGI)은 하기 표 6에 기재하였다.
WM-A1-2608 WM-A1-3102 WM-A1-3104 WM-A1-3105
Dose(mg/kg) 20
TGI(%) 36.2 ± 10.6 23.6 ± 4.0 47.5 ± 5.4 48.1 ± 4.2
도 3a에 나타난 바와 같이, 대장암 마우스 모델에 실시예 1에서 제조한 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체를 처리한 경우에 대조군과 비교하여 종양의 크기가 현저하게 감소하는 것을 확인하였다. 이를 통하여, 실시예 1에서 제조한 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체는 종양 성장 억제 효과가 우수한 것을 확인하였다.
실험예 3.2. 폐암 모델의 종양 성장 억제 효과 확인
6주령 암컷 PBMC 인간화 마우스(Gem biosciences)를 구입하여 일주일 동안 순화시킨 후, 실험예 1.1.에서 제조한 IGSF1 과발현 인간 폐암 세포 NCI-H292 IGSF1(5x106 cells/mice)를 PBS와 마트리겔(matrigel)에 희석하고 마우스의 오른쪽 배 측면에 피하(200 ㎕)로 주사하였다. 종양의 크기가 약 100 mm3이 되었을 때 음성 대조군, 실시예 1에서 제조한 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체(WM-A1-2613)을 10 mg/kg 용량으로 복강 투여하였다. 3일에 한 번 간격으로 3주 동안 투여를 진행하였으며, 주 2회 종양 크기를 측정하였다. WM-A1-2613 투여에 따른 종양 크기 변화를 도 3b에 나타냈으며, 종양 성장 억제율(Tumor Growth Inhibition, TGI)은 하기 표 7에 기재하였다.
WM-A1-2613
Dose(mg/kg) 10
TGI(%) 77.8 ± 4.5
도 3b에 나타난 바와 같이, 폐암 인간화 마우스 모델에 실시예 1에서 제조한 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체를 처리한 경우에 대조군과 비교하여 종양의 크기가 현저하게 감소하는 것을 확인하였다. 이를 통하여, 실시예 1에서 제조한 IGSF1의 C-말단에 결합하는 항-IGSF1 항체는 종양 성장 억제 효과가 우수한 것을 확인하였다.

Claims (33)

  1. 서열번호 3의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 7의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    서열번호 11의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 13의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 15의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  2. 제2항에 있어서,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 1의 아미노산 서열로 구성되고;
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 9의 아미노산 서열로 구성되는 것인, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  3. 서열번호 21의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 23의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 25의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    서열번호 29의 경쇄 CDR1, 서열번호 31의 경쇄 CDR2, 및 서열번호 33의 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  4. 제3항에 있어서,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 19의 아미노산 서열로 구성되고;
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 27의 아미노산 서열로 구성되는 것인, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  5. 서열번호 39의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 41의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 43의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    서열번호 47의 경쇄 CDR1, 서열번호 49의 경쇄 CDR2, 및 서열번호 51의 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 37의 아미노산 서열로 구성되고;
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 45의 아미노산 서열로 구성되는 것인, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  7. 서열번호 57의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 59의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 61의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    서열번호 65의 경쇄 CDR1, 서열번호 67의 경쇄 CDR2, 및 서열번호 69의 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 55의 아미노산 서열로 구성되고;
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 63의 아미노산 서열로 구성되는 것인, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  9. 서열번호 75의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 77의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 79의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    서열번호 83의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 85의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 87의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  10. 제9항에 있어서,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 73의 아미노산 서열로 구성되고;
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 81의 아미노산 서열을 서열로 구성되는 것인, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  11. 서열번호 93의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 95의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 97의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    서열번호 101의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 103의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 105의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  12. 제11항에 있어서,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 91의 아미노산 서열로 구성되고;
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 99의 아미노산 서열로 구성되는 것인, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  13. 서열번호 111의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 113의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 115의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    서열번호 119의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 121의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 123의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  14. 제13항에 있어서,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 109의 아미노산 서열로 구성되고;
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 117의 아미노산 서열로 구성되는 것인, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  15. 서열번호 129의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 131의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 133의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    서열번호 137의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 139의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 141의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  16. 제15항에 있어서,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 127의 아미노산 서열로 구성되고;
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 135의 아미노산 서열로 구성되는 것인, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  17. 서열번호 147의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 149의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 151의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    서열번호 155의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 157의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 159의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  18. 제17항에 있어서,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 145의 아미노산 서열로 구성되고;
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 153의 아미노산 서열로 구성되는 것인, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  19. 서열번호 165의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 167의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 169의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    서열번호 173의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 175의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 177의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  20. 제19항에 있어서,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 163의 아미노산 서열로 구성되고;
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 171의 아미노산 서열로 구성되는 것인, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  21. 서열번호 183의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 185의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 187의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    서열번호 191의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 193의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 195의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  22. 제21항에 있어서,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 181의 아미노산 서열로 구성되고;
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 189의 아미노산 서열로 구성되는 것인, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  23. 서열번호 219의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 221의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 223의 아미노산 서열로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
    서열번호 227의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 229의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 231의 아미노산 서열로 표시되는 경쇄 CDR3을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  24. 제23항에 있어서,
    상기 중쇄 가변 영역은 서열번호 217의 아미노산 서열로 구성되고;
    상기 경쇄 가변 영역은 서열번호 225의 아미노산 서열로 구성되는 것인, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  25. 제1항 내지 제24항에 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체는 IGSF1의 C-말단에 특이적으로 결합하는 것인, IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편.
  26. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 따른 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편을 유효성분으로 포함하는 암 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  27. 제26항에 있어서,
    상기 암은 IGSF1이 과발현된 것을 특징으로 하는, 암 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  28. 제26항에 있어서,
    상기 암은 위암, 간암, 폐암, 대장암, 유방암, 전립선암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 갑상선암, 후두암, 급성 골수성 백혈병, 뇌종양, 신경모세포종, 망막 모세포종, 두경부암, 침샘암 및 림프종으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나인, 암 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  29. 제26항 내지 제28항 중 어느 한 항에 따른 약학 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 암 예방 또는 치료 방법.
  30. 제29항에 있어서,
    상기 약학 조성물이 투여된 개체는 IGSF1 발현이 억제되는 것인, 암 예방 또는 치료 방법.
  31. 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 따른 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편의 암 예방 또는 치료를 위한 용도.
  32. 제31항에 있어서,
    상기 암은 위암, 간암, 폐암, 대장암, 유방암, 전립선암, 난소암, 췌장암, 자궁경부암, 갑상선암, 후두암, 급성 골수성 백혈병, 뇌종양, 신경모세포종, 망막 모세포종, 두경부암, 침샘암 및 림프종으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나인, 용도.
  33. 암 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한, 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 따른 IGSF1에 특이적인 항체 또는 이의 단편의 용도.
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