본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
[실시예]
하기 제조예는 본 발명에 따른 실시예 화합물의 합성에 필요한 중간체 제조를 보다 구체적으로 설명한다. 하기 제조예 및 실시예에 사용된 약어는 다음과 같다.
Ac: 아세틸
ACN: 아세토나이트릴
BOC: t-부톡시카보닐
Bn: 벤질
Bu: 부틸
DBU: 1,8-다이아자바이사이클로(5,4,0)운데크-7-엔
DCM: 다이클로로메탄
DIBAL-H: 다이아이소부틸알루미늄 하이드라이드
DIPEA: 다이아이소프로필에틸아민
DMAP: 4-다이메틸아미노피리딘
DMF: N,N-다이메틸포름아마이드
DMSO: 다이메틸술폭사이드
EA: 에틸 아세테이트
EtOH: 에틸 알코올
Et: 에틸
HATU: (1-[비스(다이메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트라이아졸로[4,5-b]피리디늄
3-옥사이드 헥사플루오로포스페이트
Hex: 헥산
EDC: 1-에틸-3-(3-다이메틸아미노프로필)카보다이이미드
Me: 메틸
NMM: N-메틸모폴린
NBS: N-브로모석신이미드
NIS: N-아이오도석신이미드
PE: 페트롤륨 에테르
Pd(dppf)Cl2: [1,1′비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라디움(II)
Ph: 페닐
TBAF: 테트라부틸암모늄 플루오라이드
TEA: 트라이에틸아민
TFA: 트라이플루오로아세틱산
THF: 테트라하이드로푸란
TMS: 트라이메틸실릴
본 발명의 실시예 화합물은 하기 반응식 1 또는 2에 따라 제조될 수 있다. 반응식 1은 R2가 수소 외의 치환기인 경우를 나타낸 것이고, 반응식 2는 R3가 수소 외의 치환기인 경우를 나타낸 것이다.
[반응식 1]
상기 반응식1에서 화합물 1과 2는 한국 등록 특허 10-1511771에서 기술한 방법을 따라 합성을 하였다.
PBr3를 사용하여 얻은 중간체 3과 알콕시알킬 알코올(HO-CH2(CH2)o-O-R7)과 염기를 사용하여 화합물 4를 합성할 수 있다. 염기는 Et3N, DIPEA, DBU, NMP, K2CO3등을 사용할 수 있다.
화합물 4는 금속과 산 촉매를 사용하거나 수소가스 존재 하에서 금속 촉매를 사용하여 환원 반응을 진행하여 화합물 5를 얻을 수 있다. 금속으로는 Fe, Zn, Li, Na 등을 사용할 수 있으며 산 촉매로는 염산, 황산, 질산 같은 무기산이나 AcOH, TFA 같은 유기산 혹은 NH4Cl 등을 사용할 수 있다. 수소 가스 존재 하에 금속 촉매로 Pd, Ni, Pt, Rt, Rh 등을 사용하여 환원반응을 할 수 있다.
화합물 5와 케톤 화합물이나 알데히드 화합물인 화합물 6을 NaBH(OAc)3 또는 NaBH3CN 등을 사용하여 환원성 아민화 반응(Reductive amination)에 NaBH(OAc)3으로 화합물 7을 얻을 수 있다.
[반응식 2]
상기 반응식 2에서 화합물 8은 상업적으로 구입가능하며 CN110818609에 따라 얻을 수도 있다. 화합물 8과 통상적인 방법으로 환원(reduction) 과 브롬화(bromination)을 진행하여 얻어진 화합물 10 중간체를 반응식 1과 같은 방법으로 2-알콕시에틸 알코올(HO-CH2CH2-O-R7)과 염기를 사용하여 화합물 11를 얻을 수 있다. NBS를 사용하여 인돌 링의 3번 위치에 브로민을 도입하고 스즈키(Suzuki) 반응으로 R3으로 치환된 화합물 13을 얻고 반응식 1의 화합물 4에서 화합물 5와 7을 얻는 방법과 같은 방법으로 진행하여 화합물 14와 15를 얻을 수 있다.
하기 제조예 1 내지 42는 본 발명의 실시예 화합물을 제조하기 위한 중간체 화합물 및 이의 합성방법을 나타낸 것이다.
제조예 1: (7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)메탄올{(7-nitro-2-phenyl-1H-indol-5-yl)methanol}
7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-카복실 산 (1.0 g, 3.45 mmol)을 THF (10 mL)에 투입하고 0oC로 냉각하였다. 2M BH3·SMe2/THF (5.3 mL, 10.6 mmol)을 천천히 적가한 후 같은 온도에서 30분 교반 후 실온으로 승온하여 5 시간 동안 교반하였다. 반응액을 0oC로 냉각하고 1N NaOH 수용액 (10 mL)을 30 분에 걸쳐 천천히 적가하였다. 1 시간 동안 추가로 교반하고 EA를 가하여 2 회 추출 후 유기층을 모아 brine으로 씻어 주었다. 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 농축 잔사에 EtOH를 가하여 결정화 하고 여과한 후 진공 건조하여 표제 화합물 (770 mg, 71%)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.08 (br, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.76 (d, 2H), 7.51 (t, 2H), 7.49 (t, 1H), 6.94 (s, 1H), 4.87 (s, 2H), 1.81 (t, 1H).
제조예 2: 5-(브로모메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌{5-(bromomethyl)-7-nitro-2-phenyl-1H-indole}
제조예 1에서 수득한 (7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)메탄올 (7.6 g, 28.33 mmol)을 THF (76 mL)에 투입하고 0oC로 냉각하였다. PBr3 (1.6 mL, 17.0 mmol)을 천천히 적가하고 실온으로 승온하여 2 시간 동안 교반하였다. 반응액을 얼음물에 부어 반응을 종결하고 EA를 가하여 추출하였다. 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하였다. 농축잔사에 다이에틸 에테르를 가하여 결정화하고 여과한 후 진공 건조하여 표제 화합물 (7.5 g, 80%)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.04 (br, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.50 (t, 2H), 7.42 (t, 1H), 6.90 (s, 1H), 4.84 (s, 2H).
제조예 3: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌{5-(2-methoxyethoxymethyl)-7-nitro-2-phenyl-1H-indole}
아르곤 대기하에서 2-메톡시에탄올 (156 mL, 과량)에 K2CO3 (6.5 g, 47.11 mmol)을 넣고 실온에서 20분 교반하였다. 상온에서 제조예 2에서 수득한 5-(브로모메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 (7.8 g, 23.55 mmol)을 5회에 걸쳐 투입하였다. 상온에서 2 시간 교반하고 TLC로 반응종결 확인 후 물과 EA를 넣고 work-up을 한 후 유기층을 MgSO4 로 건조, 여과 농축하였다. 농축잔사를 실리카 젤 컬럼크로마토그래피(Hex: EA = 3:1~ 2:1)로 정제하여 표제 화합물 (3.3 g, 43%)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.06 (br, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.49 (t, 2H), 7.47 (t, 1H), 4.70 (s, 2H), 3.68 (m, 2H), 3.60 (m, 2H), 3.40 (s, 3H).
제조예 4: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 3에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 (1.91 g, 5.85 mmol)을 MeOH (20 mL) / THF (6 mL) / H2O (4 mL) 혼합용액에 녹인 후 Fe 파우더 (3.92 g, 70.23 mmol, 12 eq)와 NH4Cl (6.26 g, 117 mmol, 20 eq)를 가하고 80oC로 승온하여 18 시간 교반하였다. 반응 완결을 HPLC로 확인한 후 반응혼합물은 상온으로 냉각한 후 셀라이트 패드를 사용하여 여과하였다. 여액에 H2O (20 mL)을 가하고 EtOAc (50 mL x 2) 로 추출하였다. 유기층은 다시 H2O (30 mL) 과 brine (20 mL) 로 씻고 MgSO4 로 건조, 여과 농축하여 표제화합물 (1.43 g, 75%)를 갈색 고체로 얻었으며, 추가정제 없이 다음반응에 사용하였다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 10.91 (br, 1H), 7.81 (d, 2H), 7.46 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.34 (s, 1H), 5.18 (br, 2H), 4.40 (s, 2H), 3.51-3.46 (m, 4H), 3.25 (s, 3H).
Mass [M + H] = 297.4 (M +1)
실시예 1: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-N-테트라하이드로피란-4-일-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-N-tetrahydropyran-4-yl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민 (500 mg, 1.69 mmol)에 DCM (50 mL)과 테트라하이드로-4H-피란-4-온 (187 μL, 2.02 mmol)을 투입하였다. 실온에서 1 시간 동안 교반하고 NaBH(OAc)3 (1.43 g, 6.75 mmol)을 투입하였다. 실온에서 15 시간 동안 교반한 후 반응 종결을 확인하고 1N NaOH 수용액 (50 mL)을 투입한 후 1 시간 동안 교반하였다. 층분리하고 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 농축 잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제 (Hex/EA, 1/1 + DCM 2%)하여 표제 화합물 (307 mg, 48%)을 연한 갈색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 10.94 (s, 1H), 7.81 (d, 2H), 7.47 (t, 2H), 7.33 (t, 1H), 6.77 (two s, 2H), 6.30 (s, 1H), 5.37 (d, 1H, NH), 4.44 (s, 2H), 3.94 (m, 2H), 3.65 (m, 1H), 3.55-3.45 (m, 6H), 3.25 (s, 3H), 2.06 (m, 2H), 1.48 (m, 2H).
Mass [M + H] = 381.3 (M +1)
실시예 2: N-사이클로펜틸-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-cyclopentyl-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로펜탄온 (1 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.35 (br s, 1H), 7.68 (d, 2H), 7.40 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.94 (m, 1H), 3.62-3.55 (m, 4H), 3.37 (s, 3H), 2.08 (m, 2H), 1.76 (m, 2H), 1.61 (m, 4H).
Mass [M + H] = 365.5 (M +1)
실시예 3: N,N-다이사이클로펜틸-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N,N-dicyclopentyl-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로펜탄온 (10 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.73 (br s, 1H), 7.67 (d, 2H), 7.42 (t, 2H), 7.40 (s, 1H), 7.27 (t, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.63 (s, 2H), 3.69 (m, 2H), 3.55 (br s, 4H), 3.37 (s, 3H), 1.80 (m, 4H), 1.32 (m, 8H), 1.32 (m, 4H).
Mass [M + H] = 433.1 (M +1)
실시예 4: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-N-(테트라하이드로피란-4-일메틸)-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-N-(tetrahydropyran-4-ylmethyl)-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로-2H-피란-4-카바알데히드를 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.41 (br s, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.41 (t, 2H), 7.28 (t, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.46 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.01 (m, 2H), 3.60 (m, 4H), 3.40 (t, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.07 (d, 2H), 2.00 (m, 1H), 1.74 (m, 2H), 1.41 (m, 2H).
Mass [M + H] = 395.2 (M +1)
실시예 5: 4-[5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일]몰포린{4-[5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-yl]morpholine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민 (50 mg, 0.153 mmol)을 DMF (200 μL)에 용해하고 K2CO3 (23 mg, 0.168 mmol)와 1-브로모-2-(2-브로모에톡시)에탄 (21 μL, 0.168 mmol)을 투입하였다. 80oC로 승온한 후 22 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 확인 후 실온으로 냉각하였다. EA와 포화 NH4Cl 수용액을 가하고 유기층을 분리하였다. 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 2/1)하여 표제 화합물 (15 mg, 27%)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.37 (br, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.47 (t, 2H), 7.32 (t, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 3.66-3.60 (m, 4H), 3.42 (s, 3H), 3.13 (br, 4H), 1.85 (br, 4H), 1.66 (m, 2H).
Mass [M + H] = 365.2 (M +1)
실시예 6: 실시예 4: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-N-테트라하이드로푸란-3-일-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-N-tetrahydrofuran-3-yl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로푸란-3-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.92 (br, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.46 (t, 2H), 7.32 (t, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.25 (br, 1H), 4.10-3.90 (m, 4H), 3.64 (m, 4H), 3.41 (s, 3H), 2.31 (m, 2H), 2.13 (m, 2H).
Mass [M + H] = 367.1 (M +1)
실시예 7: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-N-(옥세탄-3-일)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-N-(oxetan-3-yl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 옥세탄-3-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.57 (br, 1H), 7.68 (d, 2H), 7.42 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 5.04 (m, 2H), 4.55 (m, 5H), 3.59 (m, 4H), 3.38 (s, 3H).
Mass [M + H] = 353.2 (M +1)
실시예 8: N-사이클로부틸-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-cyclobutyl-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로부탄온 (1 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.55 (br s, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.40 (t, 2H), 7.27 (t, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.37 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 3.97 (m, 1H), 3.63-3.57 (m, 4H), 3.36 (s, 3H), 2.47 (m, 2H), 1.83 (m, 4H).
Mass [M + H] = 351.3 (M +1)
실시예 9: N,N-다이사이클로부틸-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N,N-di(cyclobutyl)-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로부탄온 (5 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.55 (br, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.42 (t, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.27 (t, 1H), 6.83 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 4.62 (s, 2H), 3.77 (m, 2H), 3.54 (m, 4H), 3.37 (s, 3H), 1.97 (br, 4H), 1.77 (m, 4H), 1.51 (m, 4H).
Mass [M + H] = 405.4 (M +1)
제조예 5: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-1-메틸-7-나이트로-2-페닐-인돌{5-(2-methoxyethoxymethyl)-1-methyl-7-nitro-2-phenyl-indole}
제조예 3에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 (200 mg, 0.612 mmol)을 THF에 가하고 0oC로 냉각하였다. NaH (60% in mineral oil dispersion, 28 mg, 1.735 mmol)을 소분하여 투입하고 동 온도에서 30 분 교반하였다. CH3I (130 mg, 0.918 mmol)을 적가하고 실온으로 승온하여 15 시간 교반하였다. H2O를 가하여 반응을 종결하고 EA로 2회 추출하였다. 유기층을 모아 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 4/1)하여 표제 화합물 (88 mg, 42%)을 노란색 고체로 얻었다.
Mass [M + H] = 341.3 (M +1)
제조예 6: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-1-메틸-2-페닐-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-1-methyl-2-phenyl-indol-7-amine}
제조예 5에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-1-메틸-7-나이트로-2-페닐-인돌 (88 mg, 0.258 mmol)을 THF/MeOH/H2O (1.76 mL/1.76 mL/1.76 mL)에 가하고 Fe 파우더 (144 mg, 2.585 mmol)과 NH4Cl (69 mg, 1.29 mmol)을 투입하였다. 60oC로 승온하여 2 시간 동안 교반하고 반응 종결을 확인하였다. 실온으로 냉각하고 셀라이트 패드를 통과하여 여과하고 EA로 씻어 주었다. 여액을 감압농축한 후 EA와 포화 NH4Cl 수용액으로 추출하고 수층을 EA로 재추출하였다. EA층을 모아 MgSO4 로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 1/1)하여 표제 화합물 (32 mg, 40%)을 갈색 고체로 얻었다.
Mass [M + H] = 311.5 (M +1)
실시예 10: N-사이클로부틸-5-(2-메톡시에톡시메틸)-1-메틸-2-페닐-인돌-7-아민{N-cyclobutyl-5-(2-methoxyethoxymethyl)-1-methyl-2-phenyl-indol-7-amine}
제조예 6에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-1-메틸-2-페닐-인돌-7-아민 (32 mg, 0.103 mmol)을 DCM (1.6 mL)에 녹이고 사이클로부탄온 (7 μL, 0.093 mmol)을 가하였다. NaBH(OAc)3 (65 mg, 0.309 mmol)을 투입하고 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 1N NaOH 수용액을 투입하고 30 분 동안 교반하였다. 층분리하고 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 2/1)하여 표제 화합물 (27 mg, 70%)을 연한 갈색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 7.47-7.30 (m, 5H), 7.00 (s, 1H), 6.44 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 4.01 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.55 (m, 4H), 3.38 (s, 3H), 2.62 (m, 2H), 1.85 (m, 4H).
Mass [M + H] = 365.2 (M +1)
실시예 11: N-(2,2-다이메틸프로필)-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-(2,2-dimethylpropyl)-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 피발알데히드를 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.17 (br, 1H), 7.67 (d, 2H), 7.42 (t, 2H), 7.28 (t, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 3.60-3.53 (m, 4H), 3.38 (s, 3H), 3.03 (s, 2H), 1.07 (s, 9H).
Mass [M + H] = 367.3 (M +1)
실시예 12: N-(사이클로펜틸메틸)-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-(cyclopentylmethyl)-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로펜탄카바알데히드를 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.41 (br, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.46 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 7.10 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.63 (m, 4H), 3.42 (s, 3H), 3.20 (d, 2H), 2.29 (m, 1H), 1.90 (m, 2H), 1.67 (m, 4H), 1.37 (m, 2H).
Mass [M + H] = 379.2 (M +1)
실시예 13: N-사이클로헥실-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-cyclohexyl-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로헥산온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); 8.46 (br, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.39 (t, 2H), 7.27 (t, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.50 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 3.60 (m, 4H), 3.36 (s, 3H), 3.34 (m, 1H), 2.13 (m, 2H), 1.76 (br m, 2H), 1.65 (m, 1H), 1.36 (m, 2H), 1.21 (m, 3H).
Mass [M + H] = 379.2 (M +1)
실시예 14: N-(4,4-다이플루오로사이클로헥실)-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-(4,4-difluorocyclohexyl)-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 4,4-다이플루오로사이클로헥산-1-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.36 (br, 1H), 7.67 (d, 2H), 7.41 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 3.57 (m, 5H), 3.37 (s, 3H), 2.16 (m, 4H), 1.90-1.55 (m, 4H).
Mass [M + H] = 415.2 (M +1)
실시예 15: N-아이소부틸-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-isobutyl-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 아이소부틸알데히드를 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.34 (br, 1H), 7.67 (d, 2H), 7.41 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 3.57 (m, 4H), 3.37 (s, 3H), 3.06 (d, 2H), 1.97 (m, 1H), 1.04 (d, 6H).
Mass [M + H] = 353.2 (M +1)
실시예 16: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-N-프로필-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-N-propyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 프로필알데히드를 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.30 (br, 1H), 7.63 (d, 2H), 7.39 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.58 (m, 4H), 3.37 (s, 3H), 3.20 (t, 2H), 1.73 (m, 2H), 1.04 (t, 6H).
Mass [M + H] = 339.2 (M +1)
실시예 17: N-부틸-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-butyl-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 n-부탄알을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.20 (br, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.41 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.58 (m, 4H), 3.37 (s, 3H), 3.24 (t, 2H), 1.73 (m, 2H), 1.50 (m, 2H), 1.04 (t, 6H).
Mass [M + H] = 353.2 (M +1)
실시예 18: N-(2-에틸부틸)-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-(2-ethylbutyl)-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 2-에틸부탄알을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.29 (br, 1H), 7.67 (d, 2H), 7.41 (t, 2H), 7.28 (t, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 3.60 (m, 4H), 3.37 (s, 3H), 3.10 (m, 2H), 1.59 (m, 1H), 1.47 (m, 4H), 0.93 (m, 6H).
Mass [M + H] = 381.2 (M +1)
실시예 19: N-아이소펜틸-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-isopentyl-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 3-메틸부탄알을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.29 (br, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.45 (t, 2H), 7.31 (t, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.65 (s, 2H), 3.60 (m, 4H), 3.42 (s, 3H), 3.27 (t, 2H), 1.82 (m, 1H), 1.65 (q, 2H), 1.02 (d, 6H).
Mass [M + H] = 367.2 (M +1)
실시예 20: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-N-sec-부틸-1H-인돌-7-아민 1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-N-sec-butyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 부탄-2-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.20 (br, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.41 (t, 2H), 7.26 (t, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.60-3.55 (m, 5H), 3.37 (s, 3H), 1.70 (m, 1H), 1.54 (m, 1H), 1.25 (d, 3H), 1.02 (t, 3H).
Mass [M + H] = 353.2 (M +1)
실시예 21: N-(사이클로프로필메틸)-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-(cyclopropylmethyl)-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로프로판카바알데히드를 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.36 (br, 1H), 7.67 (d, 2H), 7.41 (t, 2H), 7.26 (t, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.48 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 3.60-3.55 (m, 4H), 3.37 (s, 3H), 3.07 (d, 2H), 1.20 (m, 1H), 0.59 (m, 2H), 0.29 (m, 2H).
Mass [M + H] = 351.2 (M +1)
실시예 22: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-N-(1-메틸부틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-N-(1-methylbutyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 펜탄-2-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.32 (br, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.45 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.65 (s, 2H), 3.67-3.58 (m, 5H), 3.41 (s, 3H), 1.68 (m, 1H), 1.51 (m, 3H), 1.28 (d, 3H), 0.98 (t, 3H).
Mass [M + H] = 367.2 (M +1)
실시예 23: N-(1-에틸프로필)-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-(1-ethylpropyl)-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 펜탄-3-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.21 (br, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.45 (t, 2H), 7.35 (t, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.65 (s, 2H), 3.65-3.55 (m, 5H), 3.45 (m, 1H), 3.41 (s, 3H), 1.67 (m, 4H), 1.02 (t, 6H).
Mass [M + H] = 367.3 (M +1)
실시예 24: (E, Z)-1,1,1-트리플루오로-N-[5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일]프로판-2-이민{(E, Z)-1,1,1-trifluoro-N-[5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-yl]propan-2-imine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 (50 mg, 0.169 mmol)을 DCM (2.5 mL)에 용해하고, 1,1,1-트리플루오로프로판-2-온 (14 μl, 0.152 mmol)을 투입하였다. NaBH(OAc)3 (107 mg, 0.507 mmol)을 가하고 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 1N NaOH 수용액을 가하고 30 분 동안 교반하였다. 층분리하고 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제 (Hex/EA, 2/1)하여 표제 화합물 (39 mg, 60%)을 연한 갈색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.52 (br, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.47 (t, 2H), 7.47 (s, 1H), 7.38 (t, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.68 (s, 1H), 4.69 (s, 2H), 3.65-3.60 (m, 5H), 3.41 (s, 3H), 2.28 (s, 3H).
Mass [M] = 391.2 (M +1)
실시예 25: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-N-(2,2,2-트리플루오로-1-메틸-에틸)-1H-인돌-7-아민 1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-N-(2,2,2-trifluoro-1-methyl-ethyl)-1H-indol-7-amine}
실시예 24에서 수득한 (E, Z)-1,1,1-트리플루오로-N-[5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일]프로판-2-이민 (39 mg, 0.100 mmol)을 EtOH (2.5 mL)에 용해하고 NaBH4 (11 mg, 0.300 mmol)을 가하고 실온에서 15시간 동안 교반하였다. H2O를 천천히 적가하여 반응을 종결하였다. EA를 가하여 2회 추출하고 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제 (Hex/EA, 2/1)하여 표제 화합물 (30 mg, 77%)을 연한 갈색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.36 (br, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.47 (t, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.20 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.14 (m, 1H), 3.66-3.59 (m, 4H), 3.42 (s, 3H), 1.50 (d, 3H).
Mass [M] = 392.9 (M +1)
실시예 26: N-(1,2-다이메틸프로필)-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-(1,2-dimethylpropyl)-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 3-메틸부탄-2-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.20 (br, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.46 (t, 2H), 7.31 (t, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.65-3.55 (m, 5H), 3.41 (s, 3H), 2.01 (m, 1H), 1.22 (d, 3H), 1.09 (d, 3H), 1.02 (d, 3H).
Mass [M + H] = 367.2 (M +1)
실시예 27: N-아이소프로필-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-isopropyl-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 아세톤을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.27 (br, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.40 (t, 2H), 7.28 (t, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.76 (m, 1H), 3.60-3.57 (m, 4H), 3.37 (s, 3H), 2.96 (br, 1H), 1.27 (d, 6H).
Mass [M + H] = 339 (M +1)
실시예 28: N-벤질-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-benzyl-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 벤즈알데히드을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.47 (br s, 1H), 7.63 (d, 2H), 7.43 (t, 2H), 7.36 (m, 4H), 7.28 (m, 2H), 7.04 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.54 (s, 2H), 4.30 (s, 2H), 3.57-3.46 (m, 4H), 3.31 (s, 3H).
Mass [M + H] = 387.3 (M +1)
실시예 29: tert-부틸-4-[[5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일]아미노]피페리딘-1-카복실레이트{tert-butyl 4-[[5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-yl]amino]piperidine-1-carboxylate}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민 (100 mg, 0.337 mmol)을 DCM (5 mL)에 용해하고 1-tert-부톡시카보닐-피페리딘-4-온 (81 mg, 0.405 mmol)을 가하였다. 30 분 동안 교반하고 NaBH(OAc)3 (286 mg, 1.35 mmol)을 가하였다. 실온에서 15 시간 동안 교반하고 1N NaOH 수용액을 가하고 1 시간 동안 교반하였다. 층분리하고 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 4/1)하여 표제 화합물 (20 mg, 12%)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 9.36 (br s, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.42 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.18 (m, 2H), 3.65-3.57 (m, 5H), 3.39 (s, 3H), 2.97 (m, 2H), 2.16 (m, 2H), 1.48 (s, 9H), 1.40 (m, 2H).
Mass [M + H] = 480.3 (M +1)
실시예 30: 1-[4-[[5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일]아미노]피페리딜]-1-에탄온{1-[4-[[5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-yl]amino]-1-piperidyl]ethanone}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 1-아세틸피페리딘-4-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.70 (br s, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.38 (t, 2H), 7.26 (t, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.49 (s, 1H), 4.81 (m, 1H), 4.61 (ABq, 2H), 3.89 (m, 1H), 3.75 (m, 1H), 3.58-3.53 (m, 4H), 3.37 (s, 3H), 3.30 (m, 1H), 2.83 (m, 1H), 2.45 (m, 1H), 2.14 (s, 3H), 2.13 (m, 1H), 1.42 (m, 2H), 1.24 (m, 1H).
Mass [M + H] = 422.3 (M +1)
실시예 31: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-N-(1-메틸술포닐-4-피페리딜)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-N-(1-methylsulfonyl-4-piperidyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 1-(메틸술포닐)피페리딘-4-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.73 (br s, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.45 (t, 2H), 7.32 (t, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.88 (m, 2H), 3.64-3.57 (m, 5H), 3.39 (s, 3H), 2.89 (m, 2H), 2.86 (s, 3H), 2.30 (m, 2H), 1.70 (m, 2H).
Mass [M + H] = 458.2 (M +1)
실시예 32: N-(1,1-다이옥소티안-4-일)-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-(1,1-dioxothian-4-yl)-5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로-4H-티오피란-4-온 1,1-다이옥사이드를 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 9.07 (br s, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.41 (t, 2H), 7.29 (t, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.22 (s, 1H), 4.54 (s, 2H), 3.67-3.61 (m, 4H), 3.37 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 3.14 (m, 2H), 2.92 (m, 3H), 2.28 (m, 2H), 2.10 (m, 2H).
Mass [M + H] = 429.2 (M +1)
실시예 33: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-N-(1-옥소티안-4-일)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-N-(1-oxothian-4-yl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로-4H-티오피란-4-온 1-옥사이드를 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.68 (br s, 1H), 7.82 (d, 2H), 7.46 (t, 2H), 7.31 (t, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.69 (m, 1H), 3.62-3.56 (m, 4H), 3.38 (s, 3H). 3.28 (m, 2H), 2.74 (m, 2H), 2.47 (m, 2H), 2.31 (m, 2H).
Mass [M + H] = 413.2 (M +1)
실시예 34: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-N-(1-메틸-4-피페리딜)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-N-(1-methyl-4-piperidyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 1-메틸피페리딘-4-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.81 (br s, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.37 (t, 2H), 7.26 (t, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.46 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 3.59-3.53 (m, 4H), 3.37 (m, 1H), 3.34 (s, 3H), 2.86 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.13 (m, 4H), 1.60 (m, 2H).
Mass [M + H] = 394.3 (M +1)
제조예 7: 5-(2-에톡시에톡시메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-(2-ethoxyethoxymethyl)-7-nitro-2-phenyl-1H-indole}
제조예 2에서 수득한 5-(브로모메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 (1.0 g, 3.019 mmol)을 2-에톡시에탄올 (20 mL)에 투입하였다. K2CO3 (625 mg, 4.528 mmol)을 가한 후 3 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 EA와 H2O를 가하여 추출하였다. 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제 (Hex/EA, 4/1)하여 표제 화합물 (646 mg, 58%)을 노란색 고체로 얻었다.
Mass [M + H] = 341.4 (M +1)
제조예 8: 5-(2-에톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-(2-ethoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 7에서 수득한 5-(2-에톡시에톡시메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-7-아민 (481 mg, 1.413 mmol)을 THF/MeOH/H2O (10 mL/10 mL/10 mL)에 가하고 Fe 파우더 (789 mg, 14.131 mmol)과 NH4Cl (377 mg, 7.065 mmol)을 투입하였다. 60oC로 승온하여 2 시간 동안 교반하고 반응 종결을 확인하였다. 실온으로 냉각하고 셀라이트 패드를 통과하여 여과하고 EA로 씻어 주었다. 여액을 감압농축한 후 EA와 포화 NH4Cl 수용액으로 추출하고 수층을 EA로 재추출하였다. EA층을 모아 MgSO4 로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 2/1)하여 표제 화합물 (220 mg, 50%)을 갈색 고체로 얻었다.
Mass [M + H] = 311.4 (M +1)
실시예 35: 5-(2-에톡시에톡시메틸)-2-페닐-N-테트라하이드로피란-4-일-1H-인돌-7-아민{5-(2-ethoxyethoxymethyl)-2-phenyl-N-tetrahydropyran-4-yl-1H-indol-7-amine}
제조예 8에서 수득한 5-(2-에톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로-4H-피란-4-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.83 (br s, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.44 (t, 2H), 7.34 (t, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.03 (m, 2H), 3.68 (s, 4H), 3.57-3.48 (m, 5H), 2.08 (m, 2H), 1.53 (m, 2H), 1.19 (t, 3H).
Mass [M + H] = 395.3 (M +1)
실시예 36: N-사이클로펜틸-5-(2-에톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-cyclopentyl-5-(2-ethoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 8에서 수득한 5-(2-에톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로펜탄온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.41 (br s, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.44 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.92 (m, 1H), 3.68 (s, 4H), 3.57 (qt, 2H), 2.10 (m, 2H), 1.79-1.55 (m, 6H), 1.23 (t, 3H).
Mass [M + H] = 379.3 (M +1)
제조예 9: 5-(2-아이소프로폭시에톡시메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌{5-(2-isopropoxyethoxymethyl)-7-nitro-2-phenyl-1H-indole}
제조예 2에서 수득한 5-(브로모메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 (1.0 g, 3.019 mmol)을 2-아이소프로폭시에탄올 (20 mL)에 투입하였다. K2CO3 (834 mg, 6.039 mmol)을 가한 후 2 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 EA와 H2O를 가하여 추출하였다. 유기층을 brine으로 씻어주고 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 4/1)하여 표제 화합물 (630 mg, 63%)을 노란색 고체로 얻었다.
Mass [M + H] = 355.4 (M +1)
제조예 10: 5-(2-아이소프로폭시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-(2-isopropoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 9에서 수득한 5-(2-아이소프로폭시에톡시메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 (630 mg, 1.777 mmol)을 THF/MeOH/H2O (12 mL/12 mL/12 mL)에 가하고 Fe 파우더 (992 mg, 17.776 mmol)과 NH4Cl (475 mg, 8.885 mmol)을 투입하였다. 60oC로 승온하여 2 시간 동안 교반하고 반응 종결을 확인하였다. 실온으로 냉각하고 셀라이트 패드를 통과하여 여과하고 EA로 씻어 주었다. 여액을 감압농축한 후 EA와 포화 NH4Cl 수용액으로 추출하고 수층을 EA로 재추출하였다. EA층을 모아 MgSO4 로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 1/1)하여 표제 화합물 (310 mg, 53%)을 갈색 고체로 얻었다.
Mass [M + H] = 325.4 (M +1)
실시예 37: N-사이클로펜틸-5-(2-아이소프로폭시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-cyclopentyl-5-(2-isopropoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 10에서 수득한 5-(2-아이소프로폭시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로펜탄온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.63 (br s, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.43 (t, 2H), 7.31 (t, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.62 (s, 2H), 3.85 (m, 1H), 3.68 (m, 4H), 3.60 (s, 4H), 3.66 (m, 1H), 1.80 (m, 2H), 1.76 (m, 2H), 1.66 (m, 4H).
Mass [M + H] = 393.3 (M +1)
실시예 38: 5-(2-아이소프로폭시에톡시메틸)-2-페닐-N-테트라하이드로피란-4-일-1H-인돌-7-아민{5-(2-isopropoxyethoxymethyl)-2-phenyl-N-tetrahydropyran-4-yl-1H-indol-7-amine}
제조예 10에서 수득한 5-(2-아이소프로폭시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로-4H-피란-4-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.95 (br s, 1H), 7.75 (d, 2H), 7.43 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.35 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 4.02 (m, 2H), 3.70 (m, 4H), 3.60 (m, 1H), 3.50 (m, 3H), 2.07 (m, 2H), 1.51 (m, 2H), 1.14 (d, 6H).
Mass [M + H] = 409.3 (M +1)
제조예 11: 5-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시메틸]-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌{5-[2-(2-methoxyethoxy)ethoxymethyl]-7-nitro-2-phenyl-1H-indole}
제조예 2에서 수득한 5-(브로모메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 (1.0 g, 3.019 mmol)을 다이에틸렌 글라이콜 모노메틸 에테르 (20 mL)에 투입하였다. K2CO3 (834 mg, 6.039 mmol)을 가한 후 2 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 EA와 H2O를 가하여 추출하였다. 유기층을 brine으로 씻어주고 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제 (Hex/EA, 2/1)하여 표제 화합물 (646 mg, 58%)을 노란색 고체로 얻었다.
Mass [M + H] = 371.4 (M +1)
제조예 12: 5-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시메틸]-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-[2-(2-methoxyethoxy)ethoxymethyl]-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 11에서 수득한 5-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시메틸]-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 (646 mg, 1.742 mmol)을 THF/MeOH/H2O (6.5 mL/6.5 mL/6.5 mL)에 가하고 Fe 파우더 (973 mg, 17.426 mmol)과 NH4Cl (465 mg, 8.71 mmol)을 투입하였다. 60oC로 승온하여 2 시간 동안 교반하고 반응 종결을 확인하였다. 실온으로 냉각하고 셀라이트 패드를 통과하여 여과하고 EA로 씻어 주었다. 여액을 감압농축한 후 EA와 포화 NH4Cl 수용액으로 추출하고 수층을 EA로 재추출하였다. EA층을 모아 MgSO4 로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 1/4) 하여 표제 화합물 (140 mg, 24%)을 갈색 액체로 얻었다.
Mass [M + H] = 341.4 (M +1)
실시예 39: N-사이클로펜틸-5-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시메틸]-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-cyclopentyl-5-[2-(2-methoxyethoxy)ethoxymethyl]-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 12에서 수득한 5-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시메틸]-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로펜탄온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.68 (br s, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.43 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 3.85 (m, 1H), 3.69 (m, 6H), 3.57 (m, 2H), 3.47 (m, 1H), 3.34 (s, 3H), 2.07 (m, 2H), 1.75 (m, 2H), 1.70-1.54 (m, 4H).
Mass [M + H] = 408.8 (M +1)
실시예 40: 5-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시메틸]-2-페닐-N-테트라하이드로피란-4-일-1H-인돌-7-아민{5-[2-(2-methoxyethoxy)ethoxymethyl]-2-phenyl-N-tetrahydropyran-4-yl-1H-indol-7-amine}
제조예 12에서 수득한 5-[2-(2-메톡시에톡시)에톡시메틸]-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로-4H-피란-4-온을 실시예 37과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.47 (br s, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.46 (t, 2H), 7.31 (t, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.54 (s, 1H), 4.61 (s, 2H), 4.05 (m, 2H), 3.69 (m, 6H), 3.60-3.52 (m, 5H), 3.37 (s, 3H), 2.11 (m, 2H), 1.60 (m, 2H).
Mass [M + H] = 424.8 (M +1)
제조예 13: N-(3,5-비스(트리플루오로메틸)페닐)-4-옥소피페리딘-1-카복사미드{N-(3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl)-4-oxopiperidine-1-carboxamide}
피페리딘-4-온·HCl 일수화물(200 mg, 1.3 mmol)를 DCM에 가하고 1-아이소시아네이토-3,5-비스(트라이플루오로메틸)벤젠 (270 μL, 1.56 mmol)을 가하였다. K2CO3 (539 mg, 3.9 mmol)을 투입하고 15 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 반응액을 여과하였다. 여액을 2 N HCl 수용액으로 씻어주고 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 DCM/n-Hexane으로 결정화하였다. 고체를 여과하고 건조하여 표제 화합물 (70 mg, 15%)를 하얀색 고체로 얻었으며 다음 반응에 그대로 사용하였다.
실시예 41: N-[3,5-비스(트리플루오로메틸)페닐]-4-[[5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일]아미노]피페리딘-1-카복사미드{N-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]-4-[[5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-yl]amino]piperidine-1-carboxamide}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 (40mg, 0.135 mmol)을 DCM에 가하고 제조예 13에서 얻은 N-(3,5-비스(트리플루오로메틸)페닐)-4-옥소피페리딘-1-카복사미드 (57 mg, 0.162 mmol)을 가하였다. NaBH(OAc)3 (114 mg, 0.54 mmol)을 투입하고 15 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 1N NaOH 수용액을 가하고 1 시간 동안 교반하였다. 층분리하고 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 1/1)하여 표제 화합물 (13 mg, 15%)를 하얀색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 9.21 (br s, 1H), 7.86 (s, 2H), 7.62 (d, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.36 (t, 2H), 7.27 (t, 1H), 7.01 (m, 2H), 6.70 (s, 1H), 6.44 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.95 (m, 2H), 3.74 (m, 3H), 3.63 (m, 2H), 3.45 (m, 1H), 3.32 (s, 3H), 2.94 (m, 2H), 2.04 (m, 2H), 1.33 (m, 2H).
Mass [M + H] = 635.3 (M +1)
제조예 14: N-(3,5-다이클로로페닐)-4-옥소피페리딘-1-카복사미드{N-(3,5-dichlorophenyl)-4-oxopiperidine-1-carboxamide}
피페리딘-4-온·HCl 일수화물 (500 mg, 3.255 mmol)을 DCM에 가하고 1,3-다이클로로-5-아이소시아네이토벤젠 (795 mg, 4.232 mmol)을 가하였다. K2CO3 (1.35 g, 9.77 mmol)을 투입하고 15 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 반응액을 여과하였다. 여액을 2N HCl 수용액으로 씻어주고 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 DCM/n-Hexane으로 결정화하였다. 고체를 여과하고 건조하여 표제 화합물 (217 mg, 23%)를 하얀색 고체로 얻었으며 다음 반응에 그대로 사용하였다.
실시예 42: N-(3,5-다이클로로페닐)-4-[[5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일]아미노]피페리딘-1-카복사미드{N-(3,5-dichlorophenyl)-4-[[5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-yl]amino]piperidine-1-carboxamide}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민 (47 mg, 0.157 mmol)에 DCM을 가하고 제조예 14에서 얻은 N-(3,5-다이클로로페닐)-4-옥소피페리딘-1-카복사미드 (55 mg, 0.190 mmol)을 가하였다. NaBH(OAc)3 (134 mg, 0.634 mmol)을 투입하고 15 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 1N NaOH 수용액을 가하고 1 시간 동안 교반하였다. 층분리하고 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 1/1)하여 원하는 표제화합물 (20 mg, 22%)를 하얀색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 9.46 (br s, 1H), 7.56 (d, 2H), 7.31 (t, 2H), 7.24 (m, 3H), 6.96 (s, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.64 (br, 1H), 6.43 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 3.95 (m, 2H), 3.63-3.56 (m, 4H), 3.52 (m, 1H), 3.31 (s, 3H). 2.95 (m, 2H), 2.06 (m, 2H), 1.35 (m, 2H).
Mass [M] = 566.2 (M)
실시예 43: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-N-(2-티에닐메틸)-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-N-(2-thienylmethyl)-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 티오펜-2-카바알데히드를 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.45 (br s, 1H), 7.67 (d, 2H), 7.44 (t, 2H), 7.31 (m, 2H), 7.13 (m, 2H), 7.03 (m, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.57 (s, 2H), 3.66-3.55 (m, 4H), 3.40 (s, 3H).
Mass [M + H] = 393.2 (M +1)
실시예 44: 에틸 4-[[5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일]아미노]피페리딘-1-카복실레이트{ethyl 4-[[5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-yl]amino]piperidine-1-carboxylate}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 에틸 4-옥소피페리딘-1-카복실레이트를 실시예 1와 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.09 (br s, 1H), 7.76 (d, 2H), 7.43 (t, 2H), 7.28 (t, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.39-4.10 (br m, 2H), 4.17 (qt, 2H), 3.79 (m, 1H), 3.65-3.57 (m, 4H), 3.66-3.55 (m, 4H), 3.41 (s, 3H), 3.03 (m, 2H), 2.42-2.10 (br m, 2H), 1.45 (br, 2H), 1.21 (t, 3H).
Mass [M + H] = 452.3 (M +1)
실시예 45: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-N-(4-피리딜메틸)-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-N-(4-pyridylmethyl)-1H-indol-7-amine}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 아이소-니코티닉 알데히드를 실시예 1와 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 11.05 (br s, 1H), 8.52 (d, 2H), 7.81 (d, 2H), 7.47 (t, 2H), 7.44 (d, 2H), 7.32 (t, 1H), 6.81 (m, 2H), 6.13 (s, 2H), 4.53 (d, 2H), 4.36 (s, 2H), 3.45-3.35 (m, 4H), 3.20 (s, 3H).
Mass [M + H] = 388.2 (M +1)
제조예 15: 2-메톡시-N-[5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일]아세트아미드{2-methoxy-N-[5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-yl]acetamide}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민 (100 mg, 0.337 mmol)을 Acetonitrile (1.5 mL)에 투입하고 DIPEA (176 μL, 1.011 mmol)을 가하였다. 반응액에 HATU (192 mg, 0.506 mmol)와 2-methoxyacetic acid (28 μL, 0.371 mmol)을 가하고 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 반응액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제 (Hex/EA, 1/2)하여 표제 화합물 (130 mg, quantitative yield)을 옅은 갈색 고체로 얻었다.
Mass [M] = 369.2 (M+1)
실시예 46: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-N-(2-메톡시에틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-N-(2-methoxyethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 15에서 얻은 2-메톡시-N-[5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일]아세트아미드 (124 mg, 0.337 mmol)을 THF (1.2 mL)에 용해하였다. 0oC로 냉각하고 BH3·SMe2 2M in THF (0.5 mL, 1.011 mmol)을 적가하였다. 실온으로 승온하여 17 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 0oC로 냉각하고 1N NaOH 수용액을 천천히 적가하였다. 실온으로 승온하여 30분 동안 교반하고 EA를 가하여 추출하였다. 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 1/1)하여 표제 화합물 (96 mg, 80%)을 연한 갈색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 9.29 (br s, 1H), 7.68 (d, 2H), 7.43 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.76 (m, 2H), 3.65-3.55 (m, 4H), 3.52 (m, 2H), 3.50 (s, 3H). 3.41 (s, 3H).
Mass [M + H] = 355.2 (M +1)
제조예 16: 3-메톡시-N-[5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일]프로판아미드{3-methoxy-N-[5-(2-methoxyethoxymethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-yl]propanamide}
제조예 4에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민 (100 mg, 0.337 mmol)을 Acetonitrile (1.5 mL)에 투입하고 DIPEA (176 μL, 1.011 mmol)을 가하였다. 반응액에 HATU (192 mg, 0.506 mmol)와 3-메톡시프로파노익 산 (35 μL, 0.371 mmol)가하고 실온에서 15 시간 동안 교반하였다. 반응액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 1/2)하여 표제 화합물 (135 mg, 정량적 수율)을 옅은 갈색 고체로 얻었다.
Mass [M] = 383.2 (M+1)
실시예 47: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-N-(3-메톡시프로필)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-N-(3-methoxypropyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 16에서 수득한 3-메톡시-N-[5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일]프로판아미드 (128 mg, 0.337 mmol)을 THF (1.2 mL)에 용해하였다. 0oC로 냉각하고 BH3·SMe2 2M in THF (0.5 mL, 1.011 mmol)을 적가하였다. 실온으로 승온하여 17 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 0oC로 냉각하고 1N NaOH 수용액을 천천히 적가하였다. 실온으로 승온하여 30 분 동안 교반하고 EA를 가하여 추출하였다. 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(Hex/EA, 1/1)하여 표제 화합물 (55 mg, 44%)을 연한 갈색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.91 (br s, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.45 (t, 2H), 7.35 (t, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.69 (t, 2H), 3.63-3.58 (m, 4H), 3.41 (s, 6H). 3.39 (m, 2H), 1.99 (m, 2H).
Mass [M + H] = 369.2 (M +1)
제조예 17: 메틸 2-(3-플루오로페닐)-7-나이트로-1H-인돌-5-카복실레이트{methyl 2-(3-fluorophenyl)-7-nitro-1H-indole-5-carboxylate}
메틸 4-아미노-3-아이오도-5-나이트로벤젠 (1.03 g, 3.105 mmol)을 다이옥산 (100 mL)에 용해하고 TEA (1.3 mL, 9.315 mmol)과 3-플루오로페닐아세틸렌 (0.4 mL, 3.726 mmol), CuI (6 mg, 0.031 mmol), PdCl2(PPh3)2 (22 mg, 0.031 mmol)을 순서대로 투입하였다. 60oC로 승온하여 3 시간 동안 교반하였다. TLC로 중간체의 생성을 확인하고 DBU (2.6 mL, 18.63 mmol)을 적가하고 110oC로 승온하여 15 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 확인후 실온으로 냉각하였다. DCM과 H2O로 추출하고 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제화합물 (653 mg, 58%)을 노란색 고체로 얻었다.
Mass [M + H] = 315.3 (M +1)
제조예 18: 2-(3-플루오로페닐)-7-나이트로-1H-인돌-5-카복실산{2-(3-fluorophenyl)-7-nitro-1H-indole-5-carboxylic acid}
제조예 17에서 수득한 메틸 2-(3-플루오로페닐)-7-나이트로-1H-인돌-5-카복실레이트 (570 mg, 1.813 mmol)을 THF/MeOH/H2O (11 mL/5.7 mL/5.7 mL)에 투입하고 0oC로 냉각하였다. LiOH·H2O (152 mg, 3.627 mmol)을 투입하고 실온으로 승온하여 15 시간 동안 교반하였다. 0oC로 냉각하고 2N HCl 수용액으로 중화하고 1 시간 동안 추가로 교반하였다. 생성된 고체를 여과하고 물로 씻어 주었다. 여과된 고체를 진공 건조하여 표제화합물 (440 mg, 80%)을 노란색 고체로 얻었다.
Mass [M + H] = 301.3 (M +1)
제조예 19: (2-(3-플루오로페닐)-7-나이트로-1H-인돌-5-일)메탄올{(2-(3-fluorophenyl)-7-nitro-1H-indol-5-yl)methanol}
제조예 18에서 수득한 2-(3-플루오로페닐)-7-나이트로-1H-인돌-5-카복실 산 (440 mg, 1.465 mmol)을 THF (4.4 mL)에 용해하였다. 0oC로 냉각하고 BH3·SMe2 2M in THF (2.2 mL, 4.396 mmol)을 적가하였다. 동 온도에서 30 분 동안 교반하고 실온으로 승온하여 15 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 0oC로 냉각하였다. 1N NaOH 수용액을 천천히 적가하고 실온으로 승온하여 1 시간 동안 교반하였다. EA를 가하여 추출하고 유기층을 brine으로 씻어 주었다. 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제화합물 (285 mg, 68%)을 노란색 고체로 얻었다.
Mass [M + H] = 287.2 (M +1)
제조예 20: 5-(브로모메틸)-2-(3-플루오로페닐)-7-나이트로-1H-인돌{5-(bromomethyl)-2-(3-fluorophenyl)-7-nitro-1H-indole}
제조예 19에서 수득한 (2-(3-플루오로페닐)-7-나이트로-1H-인돌-5-일)메탄올 (285 mg, 0.995 mmol)을 THF (3 mL)에 용해하였다. 0oC로 냉각하고 PBr3 (0.06 mL, 0.597 mmol)을 천천히 적가하였다. 실온으로 승온하고 2 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 확인 후 얼음에 반응액을 부은 후 EA로 2 회 추출하였다. 유기층을 모아 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 농축잔사에 diethyl ether를 가하여 결정화 하고 여과하여 표제화합물 (287 mg, 83%)을 노란색 고체로 얻었다.
Mass [M + H] = 350.2 (M +1)
제조예 21: 2-(3-플루오로페닐)-5-(2-메톡시에톡시메틸)-7-나이트로-1H-인돌{2-(3-fluorophenyl)-5-(2-methoxyethoxymethyl)-7-nitro-1H-indole}
제조예 20에서 수득한 5-(브로모메틸)-2-(3-플루오로페닐)-7-나이트로-1H-인돌 (287 mg, 0.822 mmol)을 2-메톡시에탄올 (6 mL)에 용해하였다. K2CO3 (163 mg, 1.178 mmol)을 투입하고 실온에서 1 시간 30 분 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 EA와 H2O를 가하여 추출하였다. 유기층을 brine으로 씻어주고 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물 (47 mg, 16%)을 노란색 고체로 얻었다.
Mass [M + H] = 345.3 (M +1)
제조예 22: 2-(3-플루오로페닐)-5-(2-메톡시에톡시메틸)-1H-인돌-7-아민{2-(3-fluorophenyl)-5-(2-methoxyethoxymethyl)-1H-indol-7-amine}
제조예 21에서 수득한 2-(3-플루오로페닐)-5-(2-메톡시에톡시메틸)-7-나이트로-1H-인돌 (43 mg, 0.125 mmol)을 THF/MeOH/H2O (0.86 mL/0.86 mL/0.86 mL)에 투입하였다. Fe 파우더 (69 mg, 1.249 mmol)과 NH4Cl (33 mg, 0.625 mmol)을 투입하고 60oC로 승온하여 2 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 확인하고 실온으로 냉각하였다. 셀라이트 패드를 통과하여 여과하고 여액을 농축하였다. 농축 잔사를 EA와 H2O로 추출하고 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물 (39 mg, 90%)을 갈색 액체로 얻었다.
Mass [M + H] = 315.3 (M +1)
실시예 48: 2-(3-플루오로페닐)-5-(2-메톡시에톡시메틸)-N-테트라하이드로피란-4-일-1H-인돌-7-아민{2-(3-fluorophenyl)-5-(2-methoxyethoxymethyl)-N-tetrahydropyran-4-yl-1H-indol-7-amine}
제조예 22에서 수득한 2-(3-플루오로페닐)-5-(2-메톡시에톡시메틸)-1H-인돌-7-아민 (39 mg, 0.124 mmol)을 DCM (2 mL)에 투입하고 테트라하이드로-4H-피란-4-온 (11 μL, 0.372 mmol)과 NaBH(OAc)3 (79 mg, 0.372 mmol)을 투입하였다. 실온에서 15 시간 동안 교반하고 반응 종결을 확인하였다. 1N NaOH 수용액을 가하고 30 분 동안 교반하였다. 층분리하고 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물 (45 mg, 91%)을 연한 갈색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.53 (br s, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.37 (m, 2H), 7.35 (t, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.97 (t, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.01 (m, 2H), 3.60-3.50 (m, 7H), 3.37 (s, 3H). 2.10 (m, 2H), 1.56 (m, 2H).
Mass [M + H] = 399.2 (M +1)
제조예 23: 메틸 4-아미노-3-나이트로-5-(2-트리메틸실릴에티닐)벤조에이트{methyl 4-amino-3-nitro-5-(2-trimethylsilylethynyl)benzoate}
메틸 4-아미노-3-아이오도-5-나이트로-벤조에이트 (6.56 g, 20.37 mmol, 1 eq.)를 MeCN (70 mL)에 녹인 후 에티닐(트리메틸)실레인 (2.40 g, 24.44 mmol, 1.2 eq.) 와 TEA (6.18 g, 61.11 mmol, 3 eq.)를 가하였다. 25°C, 질소 하에서 30 분간 교반한 후 Pd(dppf)Cl2 (149.04 mg, 203.69 μmol, 0.01 eq.) 와 CuI (38.79 mg, 203.69 μmol, 0.01 eq.)를 가한 후, 60°C 로 승온하여 3 시간 교반하여 갈색 혼탁액을 얻었다. LCMS 로 반응완결을 확인 후 반응물을 얼음물 (100 mL)에 가하고 여과하였다. 여과액에 EtOAc (200 mL)를 가하여 추출하였다. 유기층을 물 (150 mL)과 brine (150 mL)으로 씻어주고 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제(EtOAc in PE = 0-10%) 하여 원하는 표제화합물(4.46 g, 74.67%)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.81 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 0.30 (s, 9H).
제조예 24: 메틸 7-나이트로-1H-인돌-5-카복실레이트{methyl 7-nitro-1H-indole-5-carboxylate}
제조예 23에서 수득한 메틸 4-아미노-3-나이트로-5-(2-트리메틸실릴에티닐)벤조에이트 (4.46 g, 15.26 mmol, 1 eq.)을 THF (45 mL)에 녹인 후 0°C에서 TBAF (1 M, 30.51 mL, 2 eq.)를 가하고 65°C에서 30 분간 가온하여 갈색 용액을 얻었다. TLC (PE/EtOAc = 9/1) 로 반응완결을 확인 후 감압 하에서 농축하였다. 농축잔사를 H2O (500 mL) 과 EtOAc (500 mL x 2)로 처리하여 유기층을 다시 H2O (800 mL), brine (500 mL)로 씻고 Na2SO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제화합물 (3.46 g, crude)을 갈색 고체로 얻었다. 추가정제 없이 다음 반응에 사용하였다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 12.27 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 7.65 (t, 1H), 6.92 (t, 1H), 3.92 (s, 3H).
제조예 25: (7-나이트로-1H-인돌-5-일)메탄올{(7-nitro-1H-indol-5-yl)methanol}
제조예 24에서 수득한 메틸 7-나이트로-1H-인돌-5-카복실레이트 (3.16 g, 14.35 mmol, 1 eq.)를 THF (30 mL)에 녹인 후 0°C에서 1 M DIBAL-H in toluene (43.06 mL, 3 eq.)를 가하였다. 같은 온도에서 30 분간 교반한 후 TLC (PE/EtOAc = 2/1)로 반응 완결을 확인하였다. H2O (100 mL)을 가하여 반응을 종료하고 여과하였다. 여과액은 EtOAc (150 mL x 2)로 추출하고 유기층은 H2O (200 mL)과 brine (150 mL)으로 씻고 Na2SO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피 PE/EtOAc = 0-25%)로 정제하여 표제화합물(1.79 g, 64.90% yield)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 11.82 (br s, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.51 (t, 1H), 6.70 (t, 1H), 5.37 (t, 1H), 4.65 (d, 2H).
제조예 26: 5-(브로모메틸)-7-나이트로-1H-인돌{5-(bromomethyl)-7-nitro-1H-indole}
제조예 25에서 수득한 (7-나이트로-1H-인돌-5-일)메탄올 (1.98 g, 10.30 mmol, 1 eq.)을 DCM (20 mL)에 녹인 후 0°C에서 PBr3 (5.58 g, 20.61 mmol, 2 eq.)를 가하였다. 반응 혼합물은 15°C에서 3 시간 교반하여 갈색 혼탁액을 얻었다. TLC (PE/EtOAc = 2/1) 로 반응 완결을 확인 후 H2O (5 mL)로 반응을 종결하였다. DCM (25 mL)으로 추출하고 유기층을 H2O (20 mL)과 brine (15 mL)으로 씻고 Na2SO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 플래시 컬럼 크로마토그래피 PE/EtOAc = 0-15%)로 정제하여 원하는 표제화합물(1.56 g, 59.36% yield)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 11.98 (br s, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 4.96 (s, 2H).
제조예 27: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-7-나이트로-1H-인돌{5-(2-methoxyethoxymethyl)-7-nitro-1H-indole}
2-메톡시에탄올 (46.54 g, 611.20 mmol 100 eq)에 K2CO3 (5.58 g, 20.61 mmol, 2 eq.)를 15°C에서 가한 후 제조예 26에서 수득한 5-(브로모메틸)-7-나이트로-1H-인돌 (1.56 g, 6.12 mmol, 1 eq.)의 THF (5 mL) 용액을 같은 온도에서 가하였다. 반응 혼합물은 15°C에서 3 시간 교반하여 갈색 혼탁액을 얻었다. TLC (PE/EtOAc = 10/1) 로 반응 완결을 확인 후 H2O (10 mL)과 EtOAc (30 mL)를 가하여 work-up을 진행하였다. 추출 유기층을 H2O (25 mL)과 brine (25 mL)으로 씻고 Na2SO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 플래시 컬럼 크로마토그래피 PE/EtOAc = 0-25%)로 정제하여 표제화합물 (610.6 mg, 39.9% yield)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 11.88 (br s, 1H), 8.07 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.53 (m, 1H), 6.72 (m, 1H), 4.64 (s, 2H), 3.61-3.49 (m, 4H), 3.32 (s, 3H).
제조예 28: 3-브로모-5-(2-메톡시에톡시메틸)-7-나이트로-1H-인돌 {3-bromo-5-(2-methoxyethoxymethyl)-7-nitro-1H-indole}
제조예 27에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-7-나이트로-1H-인돌 (610 mg, 2.44 mmol, 1 eq.)을 DMF (12 mL)에 녹인 후 0°C에서 NBS (433.85 mg, 2.44 mmol, 2 eq.)를 가하였다. 반응 혼합물은 15°C에서 1 시간 교반하여 노란색 용액을 얻었다. TLC (PE/EtOAc = 2/1) 로 반응 완결을 확인 후 H2O (30 mL)를 가하고 여과하였다. 얻어진 필터 케이크에 THF (20 mL)를 가하고 유기층을 Na2SO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 표제화합물 (798.2 mg, 94.02% yield)을 노란색 고체로 얻어 추가 정제없이 다음 반응에 바로 사용하였다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 12.20 (br s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.73 (d, 1H), 4.69 (s, 2H), 3.63-3.51 (m, 4H), 3.27 (s, 3H).
제조예 29: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-3-메틸-7-나이트로-1H-인돌{5-(2-methoxyethoxymethyl)-3-methyl-7-nitro-1H-indole}
마이크로웨이브 튜브에 2,4,6-트라이메틸-1,3,5,2,4,6-트라이옥사트라이보리네인 (3.43 g, 13.67 mmol, 50% purity, 15 eq.), 제조예 28에서 수득한 3-브로모-5-(2-메톡시에톡시메틸)-7-나이트로-1H-인돌 (300 mg, 911.45 μmol, 1 eq.), K2CO3 (377.90 mg, 2.73 mmol, 3 eq.) and Pd(PPh3)4 (105.32 mg, 91.14 μmol, 0.1 eq.)를 넣고 THF (3 mL)를 가하였다. 밀봉된 튜브는 microwave 반응기 (2 bar)에 80°C, 6h 동안 반응을 시켜 검은색 현탁액을 얻었다. TLC (PE/EtOAc = 2/1) 로 반응종결을 확인하였다. 현탁액은 EtOAc (5 mL)를 가하고 여과하였다. 여과액은 EtOAc (5 mL) 과 H2O (3 mL)를 가하고 유기층은 H2O (10 mL)과 brine (5 mL)으로 씻고 Na2SO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 플래시 컬럼 크로마토그래피 (PE/EtOAc = 0-15%)로 정제하여 표제화합물 (94.3 mg, 39.15% yield)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 11.59 (br s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 3.60-3.49 (m, 4H), 3.26 (s, 3H), 2.31 (s, 3H).
제조예 30: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-3-메틸-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-3-methyl-1H-indol-7-amine}
제조예 29에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-3-메틸-7-나이트로-1H-인돌 (154 mg, 582.72 μmol, 1 eq.)에 THF (1.2 mL), H2O (1 mL)와 EtOH (4 mL)를 넣고 15°C에서 Fe 파우더 (390.51 mg, 6.99 mmol, 12 eq.) 과 NH4Cl (623.41 mg, 11.65 mmol, 20 eq.)를 가하고 80°C로 승온하여 3 시간 교반하였다. LCMS 로 반응종결을 확인한 후 셀라이트를 사용하여 여과하였다. 여액에 EtOAc (10 mL) 과 H2O (20 mL)를 가하여 추출하였다. 유기층을 H2O (20 mL)과 brine (10 mL)으로 씻고 Na2SO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 플래시 컬럼 크로마토그래피 PE/EtOAc = 0-60%)로 정제하여 표제화합물 (100 mg)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 10.24 (br s, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 6.30 (s, 1H), 4.40 (s, 2H), 3.49-3.45 (m, 4H), 3.24 (s, 3H), 2.18 (s, 3H).
실시예 49: N-사이클로펜틸-5-(2-메톡시에톡시메틸)-3-메틸-1H-인돌-7-아민{N-cyclopentyl-5-(2-methoxyethoxymethyl)-3-methyl-1H-indol-7-amine}
제조예 30에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-3-메틸-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로펜탄온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 10.33 (br s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.20 (s, 1H), 5.15 (d, 1H), 4.44 (s, 2H), 3.85 (m, 1H), 3.49-3.43 (m, 4H), 3.24 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 1.97 (m, 2H), 1.71 (m, 2H), 1.61-1.50 (m, 4H).
Mass [M + H] = 303.2 (M +1)
실시예 50: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-3-메틸-N-테트라하이드로피란-4일-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-3-methyl-N-tetrahydropyran-4-yl-1H-indol-7-amine}
제조예 30에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-3-메틸-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로-4H-피란-4-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 10.35 (br s, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 5.08 (d, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.89 (m, 2H), 3.65 (m, 1H), 3.49-3.45 (m, 6H), 3.24 (s, 3H), 2. 18 (s, 3H), 1.99 (m, 2H), 1.43 (m, 2H).
Mass [M + H] = 319.2 (M +1)
제조예 31: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-7-나이트로-3-페닐-1H-인돌{5-(2-methoxyethoxymethyl)-7-nitro-3-phenyl-1H-indole}
제조예 28에서 수득한 3-브로모-5-(2-메톡시에톡시메틸)-7-나이트로-1H-인돌 (300 mg, 911.45 μmol, 1 eq.)를 다이옥산 (3 mL)/H2O (0.6 mL)에 녹이고 K2CO3 (377.90 mg, 2.73 mmol, 3 eq.), PhB(OH)2 (222.26 mg, 1.82 mmol, 2 eq.), Pd(dppf)Cl2 (6.67 mg, 9.11 μmol, 0.01 eq.)를 가한 후 100°C에서 2 시간 교반하고 LCMS로 반응 완결을 확인하였다. 반응 혼합물에 H2O (15 mL)과 EtOAc (20 mL)를 가하여 추출하였다. 얻어진 유기층을 H2O (20 mL) 과 brine (15 mL)으로 씻은 후 Na2SO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 플래시 컬럼 크로마토그래피 (PE/EtOAc = 0-20%)로 정제하여 원하는 표제화합물(286.7 mg, 96.39% yield)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 12.10 (br s, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.69 (d, 2H), 7.48 (t, 2H), 7.33 (t, 1H), 4.70 (s, 2H), 3.62-3.49 (m, 4H), 3.25 (s, 3H).
제조예 32: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-3-페닐-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-3-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 31에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-7-나이트로-3-페닐-1H-인돌 (286.7 mg, 878.52 μmol, 1 eq.)에 THF (1.5 mL), H2O (1 mL) 과 EtOH (5 mL)를 넣고 Fe 파우더 (588.73 mg, 10.54 mmol, 12 eq.) 과 NH4Cl (939.86 mg, 17.57 mmol, 20 eq.)를 가한 후 80°C로 승온하여 3 시간 교반하였다. LCMS 로 반응종결을 확인한 후 셀라이트를 사용하여 여과하였다. 여액에 EtOAc (10 mL) 과 H2O (20 mL)를 가하여 추출하였다. 유기층을 H2O (20 mL)과 brine (10 mL)으로 닦고 Na2SO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카 젤 플래시 컬럼 크로마토그래피 PE/EtOAc = 0-60%)로 정제하여 원하는 표제화합물 (216.2 mg, 97.2%)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 10.90 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.59 (s, 1H), 7.41 (t, 2H), 7.20 (t, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 5.14 (br s, 2H), 4.44 (s, 2H), 3.52-3.45 (m, 4H), 3.24 (s, 3H).
실시예 51: N-사이클로펜틸-5-(2-메톡시에톡시메틸)-3-페닐-1H-인돌-7-아민{N-cyclopentyl-5-(2-methoxyethoxymethyl)-3-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 32에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-3-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로펜탄온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 11.37 (br s, 1H), 7.68 (br, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.45 (t, 2 H), 7.30 (s, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.04 (s, 1H), 4.54 (s, 2H), 3.98 (m, 1H), 3.54-3.48 (m, 4H), 3.25 (s, 3H), 1.97 (m, 2H), 1.77 (m, 2H), 1.67-1.59 (m, 4H).
Mass [M + H] = 365.4 (M +1)
실시예 52: 5-(2-메톡시에톡시메틸)-3-페닐-N-테트라하이드로피란-4-일-1H-인돌-7-아민{5-(2-methoxyethoxymethyl)-3-phenyl-N-tetrahydropyran-4-yl-1H-indol-7-amine}
제조예 32에서 수득한 5-(2-메톡시에톡시메틸)-3-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로-4H-피란-4-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 11.49 (br s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.51 (s, 1 H), 7.43 (t, 2H), 7.25 (t, 1H), 6.88 (s, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.93 (m, 2H), 3.77 (m, 1H), 3.61-3.48 (m, 4H), 3.41 (m, 2H), 3.27 (s, 3H), 1.97 (m, 2H), 1.77 (m, 2H).
Mass [M + H] = 381.3 (M +1)
실시예 53: 5-((2-메톡시에톡시)메틸)-1-메틸-2-페닐-N-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-인돌-7-아민{5-((2-methoxyethoxy)methyl)-1-methyl-2-phenyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-indol-7-amine}
제조예 6에서 수득한 5-((2-메톡시에톡시)메틸)-1-메틸-2-페닐-인돌-7-아민과 상업적으로 구입 가능한 테트라하이드로-4H-피란-4-온을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 원하는 표제화합물을 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 7.51-7.46 (m, 4H), 7.41 (m, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.59 (s, 1 H), 6.48 (s, 1H), 4.61 (s, 2H), 4.01 (m, 2H), 3.96 (s, 3H) 3.61-3.54 (m, 7H), 3.39 (s, 3H), 2.14-2.11 (m, 2H), 1.59 (m, 2H).
ESI-MS (m/z): 394.5 [M+H]+
제조예 33: 2-(4-브로모페닐)-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-7-나이트로-1H-인돌{2-(4-bromophenyl)-5-((2-methoxyethoxy)methyl)-7-nitro-1H-indole}
4-브로모페닐아세틸렌을 사용하여 국제특허공개공보WO2009-025478의 알려진 방법으로 수득한 2-(4-브로모페닐)-7-나이트로-1H-인돌-5-카르복실 산으로부터 제조예1, 2와 3와 같은 방법을 사용하여 원하는 표제화합물을 얻었다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 11.72 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.98 (d, 2H), 7.68 (d, 2H), 7.20 (s, 1 H), 4.66 (s, 2H), 3.61 (m, 2H), 3.51 (m, 2H), 3.27 (s, 3H).
제조예 34: 2-(4-브로모페닐)-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-1H-인돌-7-아민{2-(4-bromophenyl)-5-((2-methoxyethoxy)methyl)-1H-indol-7-amine}
제조예 33에서 수득한 화합물을 제조예 4와 같은 방법을 사용하여 추가 정제없이 바로 다음 반응에 사용하였다.
실시예 54: 2-(4-
브로모페닐
)-N-사이클로펜틸-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-
1H-인돌-7-아민
{2-(4-bromophenyl)-N-cyclopentyl-5-((2-methoxyethoxy)methyl)-1H-indol-7-amine}
제조예 34에서 수득한 2-(4-브로모페닐)-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로펜탄온 (1 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6); δ10.94 (s, 1 H), 7.75 (d, J = 8.8 Hz, 2 H), 7.66 (d, J = 8.4 Hz, 2 H), 6.81 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 6.75 (s, 1 H), 6.24 (s, 1 H), 5.39 (d, J = 6.0 Hz, 1 H), 4.44 (s, 2 H), 3.93 - 3.83 (m, 1 H), 3.53 - 3.43 (m, 4 H), 3.25 (s, 3 H), 2.10 - 1.98 (m, 2 H), 1.81 - 1.71 (m, 2 H), 1.66 - 1.51 (m, 4 H).
LCMS: 96.60%, MS (ESI): m/z 445.1 [M+H]+
실시예 55:
2-(4-브로모페닐)-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-N-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-인돌-7-아민{2-(4-bromophenyl)-5-((2-methoxyethoxy)methyl)-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-indol-7-amine}
제조예 34에서 수득한 5-((2-메톡시에톡시)메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로-4H-피란-4-온을 (1 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6); δ11.02 (s, 1 H), 7.83 - 7.77 (m, 2 H), 7.74 - 7.67 (m, 2 H), 6.87 (d, J = 2 Hz, 1 H), 6.82 (s, 1 H), 6.36 (s, 1 H), 5.38 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 4.48 (s, 2 H), 4.03 - 3.94 (m, 2 H), 3.72 - 3.64 (m, 1 H), 3.58 - 3.53 (m, 4 H), 3.51 (m, 2 H), 3.29 (s, 3 H), 2.15 - 2.06 (m, 2 H), 1.57 - 1.45 (m, 2 H).
LCMS: 93.05%, MS (ESI): m/z 461.1 [M+H]+
제조예 35: (4-(5-((2-메톡시에톡시)메틸))-7-나이트로-1H-인돌-2-일)페닐) 다이메틸포스핀 옥사이드 {(4-(5-((2-methoxyethoxy)methyl)-7-nitro-1H-indol-2-yl)phenyl)dimethylphosphine oxide}
메틸포스포닐메탄 (138.67 mg, 1.78 mmol, 1.2 eq.)을 DMF (10 mL)에 녹인 후 질소하에서 제조예 33 화합물 (600 mg, 1.48 mmol, 1 eq.), Pd(OAc)2 (26.59 mg, 118.45 μmol, 0.08 eq.), K3PO4 (345.71 mg, 1.63 mmol, 1.1 eq.) 과 잔포스(Xantphos) (85.67 mg, 148.06 μmol, 0.1 eq.)를 차례대로 가하였다. 반응 혼합물은 마이크로웨이브 반응기에서 질소조건하, 150°C (1기압)에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS 로 반응진행을 확인 후 반응혼합물을 농축하고 플래시 컬럼 크로마토그래피((SiO2, MeOH /DCM = 0-10%)로 원하는 표제 화합물(550 mg, 92.32%)을 갈색 오일로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6); δ11.77 (s, 1 H), 8.15 (m, 2 H), 8.09 (s, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 7.87 (m, 2H), 7.30 (s, 1 H), 4.67 (s, 2 H), 3.62 - 3.52 (m, 4 H), 3.27 (s, 3 H), 1.71 (s, 3 H), 1.68 (s, 3 H).
제조예 36: (4-(7-아미노-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-1H-인돌-2-일)페닐)다이메틸포스핀 옥사이드 {(4-(7-amino-5-((2-methoxyethoxy)methyl)-1H-indol-2-yl)phenyl)dimethylphosphine oxide}
제조예 35에서 수득한 (4-(5-((2-메톡시에톡시)메틸))-7-나이트로-1H-인돌-2-일)페닐) 다이메틸포스핀 옥사이드를 THF (10 mL)에 녹인 후 Pd/C (120 mg, 10% purity)을 가하고 상온에서 수소 (15 psi)에서 2시간 교반하였다. 반응물은 셀라이트를 사용하여 여과, 농축하여 원하는 표제 화합물(290 mg)을 얻었다. 더 이상의 정제는 하지 않고 다음 반응에 사용하였다.
실시예 56: (4-(7-(사이클로펜틸아미노)-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-1H-인돌-2-일)페닐)다이메틸포스핀 옥사이드{(4-(7-(cyclopentylamino)-5-((2-methoxyethoxy)methyl)-1H-indol-2-yl)phenyl)dimethylphosphine oxide}
제조예 36에서 수득한 (4-(7-아미노-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-1H-인돌-2-일)페닐)다이메틸포스핀 옥사이드와 상업적으로 구입가능한 사이클로펜탄온 (1 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ11.07 (s, 1 H), 7.97 - 7.90 (m, 2 H), 7.88 - 7.80 (m, 2 H), 6.94 (d, J = 1.6 Hz, 1 H), 6.84 (s, 1 H), 6.33 (s, 1 H), 4.46 (s, 2 H), 3.97 - 3.89 (m, 1 H), 3.53 - 3.51 (m, 4 H), 3.25 (s, 3 H), 2.10 - 1.99 (m, 2 H), 1.81 - 1.73 (m, 2 H), 1.70 (s, 3 H), 1.66 (s, 3 H), 1.65 (m, 4 H)
LCMS: 94.69%, MS (ESI): m/z 441.3 [M+H]+
실시예 57: (4-(5-((2-메톡시에톡시)메틸)-7-((
테트라하이드로-2H-피란-4-일)아미노-1H-인돌
-2-일)페닐)다이메틸포스핀 옥사이드{(4-(5-((2-methoxyethoxy)methyl)-7-((tetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino)-1H-indol-2-yl)phenyl)dimethylphosphine oxide}
제조예 36에서 수득한 (4-(7-아미노-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-1H-인돌-2-일)페닐)다이메틸포스핀 옥사이드와 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로-4H-피란-4-온을 (1 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6); δ11.07 (s, 1 H), 7.97 - 7.91 (m, 2 H), 7.89 - 7.80 (m, 2 H), 6.93 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 6.81 (s, 1 H), 6.35 (s, 1 H), 4.45 (s, 2 H), 4.00 - 3.90 (m, 2 H), 3.70 - 3.61 (m, 1 H), 3.53 - 3.48 (m, 4 H), 3.48 - 3.45 (m, 3 H), 3.25 (s, 3 H), 2.10 - 2.00 (m, 2 H), 1.68 (d, J = 13.6 Hz, 6 H), 1.55 - 1.41 (m, 2 H)
LCMS: 97.30%, MS (ESI): m/z 457.3 [M+H]+
실시예 58: 4-(4-(7-(사이클로펜틸아미노)-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-1H-인돌-2-일)페닐)-2-메틸붙-3-인-2-올{4-(4-(7-(cyclopentylamino)-5-((2-methoxyethoxy)methyl)-1H-indol-2-yl)phenyl)-2-methylbut-3-yn-2-ol}
실시예 54에서 수득한 2-(4-브로모페닐)-N-사이클로펜틸-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-1H-인돌-7-아민을 DMF (3 mL) 에 녹이고 CuI (3.87 mg, 20.30 μmol, 0.1 eq.), 2-메틸부트-3-인-2-올 (51.22 mg, 608.96 μmol, 59.49 μL, 3 eq.), K2CO3 (84.16 mg, 608.96 μmol, 3 eq.), 다이클로로팔라듐;트리사이클로헥실포스판 (14.98 mg, 20.30 μmol, 0.1 eq.)을 가하였다. 이 반응혼합물을 120°C로 마이크로웨이브 반응기에서 2시간 교반하였다. LCMS 로 반응을 확인하고 물을 넣어 반응을 종결하였다. EA를 가하여 유기층을 H2O (20 mL)과 소금물 (10 mL)로 닦고 Na2SO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 프렙 TLC PE/EtOAc = 1/1)와 트리트레이션 [MTBE/PE=20/1(2 mL)] 로 정제, 원하는 표제 화합물 (14.9 mg, 7.82%)을 회색 고체로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6); δ10.95 (d, J = 1.6 Hz, 1 H), 7.83 - 7.74 (m, 2 H), 7.52 - 7.43 (m, 2 H), 6.82 (d, J = 2 Hz, 1 H), 6.75 (s, 1 H), 6.23 (s, 1 H), 5.49 (s, 1 H), 5.42 (d, J = 6.4 Hz, 1 H), 4.44 (s, 2 H), 3.93 - 3.83 (m, 1 H), 3.54 - 3.42 (m, 4 H), 3.25 (s, 3 H), 2.10 - 1.99 (m, 2 H), 1.81 - 1.71 (m, 2 H), 1.67 - 1.53 (m, 4 H), 1.48 (s, 6 H)
LCMS: 93.75%, MS (ESI): m/z 447.2 [M+H]+
실시예 59: 4-(4-(5-((2-메톡시에톡시)메틸)-7-((
테트라하이드로-2H-피란-4-일)
아미노)-1H-인돌-2-일)페닐)-2-메틸부트3-인-2-올 {4-(4-(5-((2-methoxyethoxy)methyl)-7-((tetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino)-1H-indol-2-yl)phenyl)-2-methylbut-3-yn-2-ol}
실시예 55에서 수득한 2-(4-브로모페닐)-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-N-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-인돌-7-아민 (100 mg, 217.69 μmol, 1 eq.)을 실시예 58과 같은 방법을 사용하여 원하는 표제 화합물 (31.6 mg, 14.89%)을 녹색 고체로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6); δ10.98 (s, 1 H), 7.86 - 7.73 (m, 2 H), 7.54 - 7.43 (m, 2 H), 6.84 (d, J = 2 Hz, 1 H), 6.77 (s, 1 H), 6.31 (s, 1 H), 5.49 (s, 1 H), 5.37 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 4.44 (s, 2 H), 3.98 - 3.90 (m, 2 H), 3.69 - 3.59 (m, 1 H), 3.54 - 3.44 (m, 6 H), 3.25 (s, 3 H), 2.11 - 2.00 (m, 2 H), 1.49 (s, 6 H), 1.46 - 1.43 (m, 1 H), 1.33 - 1.30 (m, 1 H).
LCMS: 95.04%, MS (ESI): m/z 463.3 [M+H]+
실시예 60: 5-((2-메톡시에톡시)메틸)-N-(
테트라하이드로-2H-피란-4-일
)-2-(p-톨릴)-1H-인돌-7-아민{5-((2-methoxyethoxy)methyl)-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-2-(p-tolyl)-1H-indol-7-amine}
실시예 55에서 수득한 2-(4-브로모페닐)-5-((2-메톡시에톡시)메틸)-N-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-인돌-7-아민(70 mg, 152.38 μmol, 1 eq.)을 다이옥산 (4 mL) 과H2O (1 mL)에 녹인 후 메틸보로닉 애시드 (10.95 mg, 182.86 μmol, 1.2 eq.), Pd(dppf)Cl2 (11.15 mg, 15.24 μmol, 0.1 eq.) 와 K2CO3 (63.18 mg, 457.14 μmol, 3 eq.)를 가하고 100°C 질소하에서 12시간 교반하였다. LCMS로 반응완결을 확인, EA를 가하고 셀라이트로 필터 후 여액을 농축하였다. 농축잔사를 Prep-TLC (PE/EA = 1/2) 와 Prep-HPLC (column: Welch Xtimate C18 150*30 mm*5 um; mobile phase: [water (NH4HCO3)-ACN]; B%: 27%-73%, 12min)를 사용하여 원하는 표제 화합물(12.4 mg, 19.80% yield, 96% purity)을 파란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6); δ10.87 (s, 1 H), 7.69 (d, J = 8.0 Hz, 2 H), 7.28 (d, J = 7.6 Hz, 2 H), 6.77 - 6.68 (m, 2 H), 6.28 (s, 1 H), 5.34 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 4.43 (s, 2 H), 3.97 - 3.89 (m, 2 H), 3.69 - 3.56 (m, 1 H), 3.51 (m, 6 H), 3.24 (s, 3 H), 2.36 - 2.32 (m, 3 H), 2.09 - 2.01 (m, 2 H), 1.52 - 1.40 (m, 2 H).
LCMS: 96.29%, MS (ESI): m/z 395.1 [M+H]+
제조예 37: 5-((3-메톡시프로필)메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 {5-((3-methoxypropoxy)methyl)-7-nitro-2-phenyl-1H-indole}
제조예 2에서 수득한 5-(브로모메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌과 상업적으로 구입가능한 3-메톡시프로판-1-올을 제조예 2와 같은 방법으로 반응시켜 원하는 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.94 (br, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.76 (d, 2H), 7.53 (t, 2H), 7.45 (t, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.67 (s, 2H), 3.65 (t, 2H), 3.53 (t, 2H), 3.37 (s, 3H), 1.95 (m, 2H).
제조예 38: 5-((3-메톡시프로필)메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-((3-methoxypropoxy)methyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 37에서 수득한 5-((3-메톡시프로필)메틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌을 제조예 4와 같은 방법으로 원하는 표제화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.25 (br, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.46 (t, 2H), 7.36 (t, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.80, (s, 1H), 6.64 (s, 1H), 4.55 (s, 2H), 3.60 (t, 2H), 3.52 (t, 2H), 3.36, (s, 3H), 1.92 (m, 2H).
실시예 61: N-사이클로펜틸-5-((3-메톡시프로폭시)메틸)-2-페닐-
1H-인돌-7-아민
{N-cyclopentyl-5-((3-methoxypropoxy)methyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 38에서 수득한 5-((3-메톡시프로필)메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로펜탄온 (1 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.27 (s, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.45 (t, 2H), 7.34 (t, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.59 (s, 2H), 3.39 (m, 1H), 3.59 (t, 2H), 3.53 (t, 2H), 3.36 (s, 3H), 2.14 (m, 2H), 1.92 (m, 2H), 1.81 (m, 2H), 1.75 -1.60 (m, 4H).
ESI-MS (m/z): 379.3 [M+H]+
실시예 62: 5-((3-메톡시프로폭시)메틸)-N-(옥세탄-3-일)-2-페닐-
1H-인돌-7-아민
{5-((3-methoxypropoxy)methyl)-N-(oxetan-3-yl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 38에서 수득한 5-((3-메톡시프로필)메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 옥세탄-3-온 (1 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.64 (br, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.48 (t, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 3.17 (s, 1H), 5.13 (m, 2H), 4.66 (m, 1H), 4.64 (m, 2H), 4.55 (s, 2H), 4.30 (br, 1H), 3.59 (t, 2H), 3.53 (t, 2H), 3.36 (s, 3H), 1.92 (m, 2H).
ESI-MS (m/z): 366.2 [M+H]+
실시예 63: 5-((3-메톡시프로폭시)메틸)-2-phenyl-N-(
테트라하이드로-2H-피란-4-일
)-
1H-인돌-7-아민
(221){5-((3-methoxypropoxy)methyl)-2-phenyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-indol-7-amine}
제조예 38에서 수득한 5-((3-메톡시프로필)메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로-4H-피란-4-온 (1 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3); δ8.69 (br, 1 H), 7.73 (d, 2 H), 7.46 (t, 2 H), 7.35 (t, 1 H), 7.15 (s, 1 H), 6.80 (s, 1 H), 6.64 (s, 1 H), 4.56 (s, 2 H), 4.05 (d, 2 H), 3.69 (m, 1 H), 3.59-3.49 (m, 6 H), 3.35 (s, 3 H), 2.13 (d, 2 H), 1.91 (m, 2 H), 1.68 (m, 2 H).
MS (ESI): m/z 395.3 [M+H]+
실시예 64: 5-((2-메톡시에톡시)메틸)-2-페닐-N-(피페리딘-4-일)-1H-인돌-7-아민{5-((2-methoxyethoxy)methyl)-2-phenyl-N-(piperidin-4-yl)-1H-indol-7-amine}
실시예 29에서 수득한 tert-부틸-4-[[5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일]아미노]피페리딘-1-카복실레이트에 2M 염화수소/다이옥산을 사용하여 탈 보호화하여 원하는 표제화합물을 얻었다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 11.71 (br, 1H), 8.85 (br, 1H), 8.77 (br, 1H), 7.94 (d, 2H), 7.47 (t, 2H), 7.32 (t, 1H), 7.02 (br, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.55 (br, 1H), 4.49 (s, 2H), 3.81 (m, 1H), 3.55-3.43 (m, 6H), 3.26 (s, 3H), 3.05 (m, 2H), 2.19 (m, 2H), 1.89 (m, 2H).
ESI-MS (m/z): 380.3 [M+H]+
제조예 39: tert-부틸 5-(3-하이드록시프로필)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-1-카복실레이트{tert-butyl 5-(3-hydroxypropyl)-7-nitro-2-phenyl-1H-indole-1-carboxylate}
단계 1: 7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-카발데하이드 {7-nitro-2-phenyl-1H-indole-5-carbaldehyde}
제조예 1에서 수득한 (7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)메탄올 (5 g, 18.6 mmol)을 DCM (300 mL), 아세톤 (100 mL)에 용해시키고, 피리디늄 클로로크로메이트 (5.63 g, 26.12 mmol)을 투입하였다. 밤새 가열환류 하였다. TLC로 반응 완결을 확인하고 실리카 젤 여과 후 농축하여 7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-카발데하이드 (5 g, 수율100%)를 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.34 (br, 1H), 10.15 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.79 (d, 2H), 7.57 (t, 2H), 7.49 (t, 1H), 7.12 (s, 1H).
Mass [M + H]- = 267.07 (M +1)
단계 2: tert-부틸 5-포밀-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-1-카복실레이트 {tert-butyl 5-formyl-7-nitro-2-phenyl-1H-indole-1-carboxylate}
단계 1에서 수득한 7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-카발데하이드 5 g (18.7 mmol)을 DCM (250 mL)에 용해시키고, TEA (6.54 mL, 46.95 mmol), (Boc)2O (8.19 g, 37.56 mmol)와 DMAP (0.229 g, 1.878 mmol)을 투입하였다. 실온에서 이틀 간 교반하였다. TLC로 반응 완결을 확인하고 농축 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 분리(Hex/EA, 10/1)하여 tert-부틸 5-포밀-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-1-카복실레이트 (5.2 g, 수율 75%)을 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.12 (s, 1H), 8.38 (d, 2H), 7.49 (m, 5H), 6.77 (s, 1H), 1.31 (s, 9H).
Mass [M + H] = 367.12 (M +1)
단계 3: 3-(1-(tert-부톡시카보닐)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)프로피오닉 애시드 {3-(1-(tert-butoxycarbonyl)-7-nitro-2-phenyl-1H-indol-5-yl)propanoic acid}
디메틸포름아마이드 (20 mL)에 10℃에서 포름산 (1.63 mL, 42.57 mmol), TEA (2.57 mL, 18.45 mmol), 2,2-디메틸-1,3-디옥산-4,6-디온 (2.045 g, 14.19 mmol)을 투입하였다. 단계 2에서 얻은 tert-부틸 5-포밀-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-1-카복실레이트 (5.2 g, 14.19 mmol)을 추가한 뒤 80℃에서 밤새 교반하였다. TLC로 반응 완결을 확인하고10℃에서 포화 NH4Cl수용액을 반응 용액에 넣고 30분 간 교반한다. 포화 NH4Cl수용액으로 유기층을 세 번 세척한 뒤 다시 물로 세척하고 포화 NaCl용액으로 세척하였다. MgSO4로 건조한 다음 여과한 여액을 농축하였다. 3-(1-(tert-부톡시카보닐)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)프로피오닉 애시드 (6 g, 수율 104%)을 오렌지 오일로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 7.85 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.46 (m, 2H), 6.61 (s, 1H), 3.84 (s, 2H), 1.30 (s, 9H).
Mass [M + H] = 410.15 (M +1)
단계 4: tert-부틸 5-(3-하이드록시프로필)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-1-카복실레이트 {tert-butyl 5-(3-hydroxypropyl)-7-nitro-2-phenyl-1H-indole-1-carboxylate}
단계 3에서 수득한 3-(1-(tert-부톡시카보닐)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)프로피오닉 애시드 (6 g, 14.76 mmol)을 THF (120 mL)에 용해하고 0oC로 냉각하였다. BH3·SMe2 2M in THF (22.05 mL, 44.28 mmol)을 가하고 실온으로 승온하여 5 시간 교반하였다. TLC로 반응 완결을 확인하고 0oC로 냉각하였다. 1 N NaOH 수용액을 천천히 적가하고 1 시간 교반하였다. EA로 2회 추출하고 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하고 감압농축하였다. 농축 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피로 정제 (Hex/EA, 2/1)하여 tert-부틸 5-(3-하이드록시프로필)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-1-카복실레이트 (3.2 g, 수율 55 %)을 노란색 오일로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 7.76 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.54 (m, 2H), 7.44 (m, 3H), 6.58 (s, 1H), 3.75 (t, 2H), 2.91 (t, 2H), 1.99 (m, 2H), 1.30 (s, 9H).
Mass [M + H] = 397.17 (M +1)
제조예 40: 5-(3-(2-메톡시에톡시)프로필)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{5-(3-(2-methoxyethoxy)propyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
단계 1: tert-부틸 5-(3-((메틸설포닐)옥시)프로필)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-1-카복실레이트 {tert-butyl 5-(3-((methylsulfonyl)oxy)propyl)-7-nitro-2-phenyl-1H-indole-1-carboxylate}
제조예 39에서 얻은 tert-부틸 5-(3-하이드록시프로필)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-1-카복실레이트 (300 mg, 0.756 mmol)를 DCM (6 mL)에 녹이고 TEA (0.255 mL, 1.82 mmol)을 적가한 뒤 0oC로 냉각하였다. 메탄설포닐 클로라이드 (0.07 mL, 0.908 mmol)을 적가하고 상온에서 2시간 교반한다. TLC로 반응 완결을 확인한 후 EA로 2회 추출하여 포화 NaHCO3 용액으로 세척하였다. 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하고 감압농축하였다. 농축 잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피로 정제 (Hex/EA, 1/1)하여 tert-부틸 5-(3-((메틸설포닐)옥시)프로필)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-1-카복실레이트 노란색 오일 (342 mg, 수율 95%)을 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 7.74 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.54 (m, 2H), 7.46 (m, 3H), 6.59 (s, 1H), 4.29 (t, 2H), 3.06 (s, 3H), 2.96 (t, 2H), 2.20 (m, 2H), 1.30 (s, 9H).
단계 2: 5-(3-(2-메톡시에톡시)프로필)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 {5-(3-(2-methoxyethoxy)propyl)-7-nitro-2-phenyl-1H-indole}
단계 1에서 수득한 tert-부틸 5-(3-((메틸설포닐)옥시)프로필)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-1-카복실레이트 (342 mg, 0.72 mmol)을 2-메톡시에탄-1-올 (6 mL)에 녹이고 포타슘 아이오다이드 (12 mg, 0.075 mmol)을 추가한 뒤 밤새 가열환류 하였다. TLC로 반응 완결을 확인하고 상온으로 식힌다. EA로 2회 추출하여 포화 NaHCO3 용액으로 세척한 뒤 포화 NaCl수용액으로 세척하였다. 유기층을 MgSO4로 건조, 여과하고 감압농축하였다. 농축 잔사를 실리카젤 컬럼 크로마토그래피로 정제 (Hex/EA, 5/1)하여 5-(3-(2-메톡시에톡시)프로필)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 노란색 고체 (261 mg, 수율 96%)을 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.00 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.74 (d, 2H), 7.50 (t, 2H), 7.41 (t, 1H), 6.88 (s, 1H), 3.59 (m, 4H), 3.51 (t, 2H), 3.42 (s, 3H), 2.88 (t, 2H), 2.00 (m, 2H).
단계 3: 5-(3-(2-메톡시에톡시)프로필)-2-페닐-1H-인돌-7-아민 {5-(3-(2-methoxyethoxy)propyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
단계 2에서 수득한 5-(3-(2-메톡시에톡시)프로필)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 (100 mg, 0.283 mmol)을 THF (2 mL), EA (2 mL)에 용해하고 팔라듐 카본 50%/water (30 mg, 30 wt%)를 투입하였다. 수소 풍선을 꽂고 2 시간 40분 교반하였다. 반응 용액을 셀라이트 여과 후 감압 농축하고 실리카 젤 여과 후 감압 농축하여 표제화합물 5-(3-(2-메톡시에톡시)프로필)-2-페닐-1H-인돌-7-아민 (89 mg, 수율 96%)을 옅은 갈색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.30 (br, 1H), 7.67 (d, 2H), 7.42 (t, 2H), 7.30 (t, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.44 (s, 1H), 3.58 (m, 4H), 3.49 (t, 2H), 3.40 (s, 3H), 2.70 (t, 2H), 1.95 (t, 2H).
실시예 65: 5-(3-(2-메톡시에톡시)프로필)-2-페닐-N-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-인돌-7-아민{5-(3-(2-methoxyethoxy)propyl)-2-phenyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-indol-7-amine}
제조예 40에서 수득한 5-(3-(2-메톡시에톡시)프로필)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로-4H-피란-4-온 (1 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.47 (br, 1H), 7.72 (d, 2H), 7.46 (t, 2H), 7.32 (t, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 4.06 (m, 2H), 3.61 (m, 9H), 3.43 (s, 3H), 2.76 (t, 2H), 2.13 (s, 2H), 1.99 (m, 2H), 1.69 (m, 2H).
Mass [M + H] = 409.42 (M +1)
제조예 41: 에틸 2-(7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)아세테이트 {ethyl 2-(7-nitro-2-phenyl-1H-indol-5-yl)acetate}
단계 1: 에틸 2-(4-아미노페닐)아세테이트 {ethyl 2-(4-aminophenyl)acetate}
상업적으로 구입 가능한 에틸 2-(4-나이트로페닐)아세테이트 (20 g, 95.6 mmol)을 테트라하이드로퓨란, 메탄올, 물 1:1:1 혼합 용액 300 mL에 녹였다. 철가루 (26.7 g, 478 mmol)와 NH4Cl (25.6 g, 478 mmol)를 가하고, 60℃에서 2시간 교반하였다. TLC로 반응 완결을 확인하고 상온에서 셀라이트 여과 후 감압 농축하였다. EA에 묽혀 유기층을 포화 NH4Cl용액으로 세척하고 EA로 추출한 뒤 MgSO4로 건조한 다음 여과한 여액을 감압 농축하였다. 에틸 2-(4-아미노페닐)아세테이트 (17 g, 수율 99%)를 얻었다.
Mass [M + H] = 180.09 (M +1)
단계 2: 에틸 2-(4-아세트아미도페닐)아세테이트 {ethyl 2-(4-acetamidophenyl) acetate}
단계 1에서 얻은 에틸 2-(4-아미노페닐)아세테이트 (17 g, 94.87 mmol)를 DCM (170 mL)에 용해하고 TEA (19.8 mL, 142.3 mmol)을 투입한 뒤 0℃에서 무수 아세트산(11.6 g, 113.84 mmol) 천천히 적가하였다. 상온에서 상온에서 1시간 교반하였다. TLC로 반응 완결을 확인하고 반응 혼합물을 DCM로 희석하고 포화 K2CO3 용액, 포화 NaCl 용액 순으로 세척하였다. 유기층을 MgSO4로 건조한 다음 여과한 여액을 감압 농축하였다. 농축 잔사를 헥산에서 재결정한 뒤 여과하였다. 에틸 2-(4-아세트아미도페닐)아세테이트 (20.6 g, 수율 98%) 분홍빛 고체를 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 7.48 (d, 2H), 7.32 (br, 1H), 7.26 (d, 2H), 4.17 (q, 2H), 3.59 (s, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.27 (t, 3H).
Mass [M + H] = 222.11 (M +1)
단계 3: 에틸 2-(4-아세트아미도-3-나이트로페닐)아세테이트 {ethyl 2-(4-acetamido-3-nitrophenyl)acetate}
단계 2에서 얻은 에틸 2-(4-아세트아미도페닐)아세테이트 (20.6 g, 93.1 mmol)을 무수 아세트산 (309 mL)에 용해하고 0℃에서 적연질산을 천천히 적가하였다. 상온으로 승온하여 4 시간 동안 교반하였다. TLC로 반응 완결을 확인하고 물을 추가해 생성된 고체를 여과하여 건조하였다. 에틸 2-(4-아세트아미도-3-나이트로페닐)아세테이트 (24 g, 92%)를 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.31 (br, 1H), 8.76 (d, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.60 (d, 1H), 4.20 (q, 2H), 3.67 (s, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.29 (t, 3H).
Mass [M + H] = 267.09 (M +1)
단계 4: 에틸 2-(4-아미노-3-나이트로페닐)아세테이트 {ethyl 2-(4-amino-3-nitrophenyl)acetate}
단계 3에서 얻은 에틸 2-(4-아세트아미도-3-나이트로페닐)아세테이트 (24 g, 86 mmol)을 에탄올 (300 mL)에 용해하고 1N HCl (160 mL)를 적가하였다. 상온에서 밤새 교반한 뒤, 추가로 밤새 가열환류 하였다. TLC로 반응 완결을 확인하고 반응 용액을 농축한 뒤 포화 NaHCO3로 유기층을 세척한 뒤 MgSO4로 건조한 다음 여과한 여액을 농축하였다. 에틸 2-(4-아미노-3-나이트로페닐)아세테이트 (16 g, 82%)을 주황색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.05 (s, 1H), 7.35 (d, 1H), 6.82 (d, 1H), 6.06 (br, 1H), 4.19 (q, 2H), 3.56 (s, 2H), 1.29 (t, 3H).
Mass [M + H] = 225.08 (M +1)
단계 5: 에틸 2-(4-아미노-3-아이오도-5-나이트로페닐)아세테이트 {ethyl 2-(4-amino-3-iodo-5-nitrophenyl)acetate}
단계 4에서 얻은 에틸 2-(4-아미노-3-나이트로페닐)아세테이트 (16 g, 71.27 mmol)를 에탄올 (480 mL)에 용해하고 질산은 (14.5 g, 85.52 mmol), 아이오딘 (21.7 g, 85.52 mmol)을 투입하여 상온에서 밤새 교반하였다. TLC로 반응 완결을 확인하고 반응 용액을 농축한 뒤 EA에 묽혔다. 유기층을 포화 소듐 사이오설페이트로 세 번 씻어주고, MgSO4로 건조한 다음 여과한 여액을 농축하였다. 농축 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 분리(Hex/EA, 5/1)하여 에틸 2-(4-아미노-3-아이오도-5-나이트로페닐)아세테이트 (17 g, 수율 68%)를 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.11 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 6.65 (br, 1H), 4.20 (q, 2H), 3.53 (s, 2H), 1.30 (t, 3H).
Mass [M + H] = 350.98 (M +1)
단계 6: 에틸2-(7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)아세테이트 {ethyl 2-(7-nitro-2-phenyl-1H-indol-5-yl)acetate}
단계 5에서 수득한 에틸2-(4-아미노-3-아이오도-5-나이트로페닐)아세테이트 (5.67 g, 16.2 mmol)을 무수 다이옥산 (100 mL)에 용해시키고 TEA (6.77 mL, 48.6 mmol)과 페닐아세틸렌 (2.14 mL, 19.44 mmol), 비스트리페닐 포스핀 팔라디움 다이 클로라이드 (114 mg, 0.162 mmol), 요오드화구리 (30.85 mg, 0.162 mmol)을 순서대로 투입하였다. 60oC에서 18시간 반응하고, 반응액에 1,8-디아자바이사이클로[5,4,0]언덱-7-엔 (18.3 mL, 129.6 mmol)을 가하고 110oC에서 48 시간 반응하였다. 실온에서 셀라이트를 통하여 여과하고 여과액을 감압증류하였다. 농축잔사에 EA를 가하고 물로 세척하였다. 물층을 EA로 재추출하고, 유기층을 모아 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 농축잔사를 실리카컬럼 크로마토그래피로 분리하여 에틸2-(7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)아세테이트 (3.3 g, 수율 63%)을 주황색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.08 (br, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.77 (d, 2H), 7.52 (t, 2H), 7.42 (t, 1H), 6.93 (s, 1H), 4.22 (q, 2H), 3.80 (2, 1H), 1.30 (t, 3H).
제조예 42: 5-(2-(2-메톡시에톡시)에틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민 {5-(2-(2-methoxyethoxy)ethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
단계 1: 2-(7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)에탄-1-올 {2-(7-nitro-2-phenyl-1H-indol-5-yl)ethan-1-ol}
제조예 41의 단계6에서 수득한 에틸-2-(7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)아세테이트 (420 mg, 1.295 mmol)를 THF (20 mL)에 용해시키고 5oC로 냉각하였다. 2M LiAlH4/THF (1.3 mL, 2.59 mmol)을 적가하고 동 온도에서 1 시간 동안 반응하였다. 동 온도에서 타르타르산 나트륨 칼륨 수용액 (5 mL)을 적가하여 반응을 종결하고 실온으로 승온하였다. 물과 에틸아세테트를 가하고 층분리하고 물층을 EA로 재추출하였다. 유기층을 모아 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 건조하여 2-(7-나이트로-2-페틸-1H-인돌-5-일)에탄-1-올 (255 mg, 수율 70%)을 주황색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.05 (br, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.77 (d, 2H), 7.53 (t, 2H), 7.45 (t, 1H), 6.92 (s, 1H), 4.00 (t, 2H), 3.07 (s, 3H), 1.13 (t, 1H).
단계 2: 2-(7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)에틸 메탄설포네이트 {2-(7-nitro-2-phenyl-1H-indol-5-yl)ethyl methanesulfonate}
단계 1에서 수득한 2-(7-나이트로-2-페틸-1H-인돌-5-일)에탄-1-올 (366 mg, 1.295 mmol)를 DCM에 용해시키고 TEA (546 μL, 3.89 mmol)을 적가한 후 5oC로 냉각하였다. 메탄설포닐 클로라이드 (150 μL, 1.94 mmol)을 투입하고 실온에서 30분 동안 반응하였다. 반응액을 감압농축하고 실리카컬럼 크로마토그래피로 분리하여 2-(7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)에틸 메탄설포네이트 (291 mg, 수율 89%)를 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.06 (br, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.75 (d, 2H), 7.52 (t, 2H), 7.45 (t, 1H), 6.91 (s, 1H), 4.50 (t, 2H), 3.25 (t, 2H), 2.95 (s, 3H).
단계 3: 5-(2-(2-메톡시에톡시)에틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 {5-(2-(2-methoxyethoxy)ethyl)-7-nitro-2-phenyl-1H-indole}
단계 2에서 수득한 2-(7-나이트로-2-페닐-1H-인돌-5-일)에틸 메탄설포네이트 (290 mg, 0.805 mmol)을 에탈렌글라이콜 (20 mL)에 투입하고 포타슘 아이오다이드 19 mg (0.1165 mmol)을 가하였다. 40 시간동안 가열환류하여 반응한 후 실온으로 냉각하고 EA와 물을 가하였다. 층분리하고 물층을 EA로 재추출하였다. 유기층을 모아 MgSO4로 건조, 여과하였다. 여액을 감압농축하고 실리카컬럼 크로마토그래피로 분리하여 5-(2-(2-메톡시에톡시)에틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 (120 mg, 수율 44%)을 주황색 고체로 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 10.04 (br, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.77 (d, 2H), 7.53 (t, 2H), 7.45 (t, 1H), 6.91 (s, 1H), 3.81 (t, 2H), 3.65 (t, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.42 (s, 3H), 3.10 (t, 2H).
단계 4: 5-(2-(2-메톡시에톡시)에틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민 {5-(2-(2-methoxyethoxy)ethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
단계 3에서 수득한 5-(2-(2-메톡시에톡시)에틸)-7-나이트로-2-페닐-1H-인돌 (120 mg, 0.352 mmol)을 EA와 메탄올 (1:1)용액으로 용해하고 팔라디움 카본 (10%)/물50% (50 mg)을 가하였다. 수소풍선하에서 4시간 동안 반응하고 셀라이트를 통과하여 여과하고 EA로 세척하였다. 여액을 감압농축, 건조하여 5-(2-(2-메톡시에톡시)에틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민 (108 mg, 수율 99%)을 갈색 고체로 얻었다.
Mass [M + H] = 311.1 (M +1)
실시예 66: N-사이클로펜틸-5-(2-(2-메톡시에톡시)에틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민{N-cyclopentyl-5-(2-(2-methoxyethoxy)ethyl)-2-phenyl-1H-indol-7-amine}
제조예 42에서 수득한 5-(2-(2-메톡시에톡시)에틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 사이클로펜탄온 (1 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.27 (br, 1H), 7.69 (d, 2H), 7.42 (t, 2H), 7.31 (t, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.45 (s, 1H), 3.98 (m, 1H), 3.72 (t, 2H), 3.63 (t, 2H), 3.58 (t, 2H), 3.40 (s, 3H), 2.98 (t, 2H), 2.11 (m, 2H), 1.78 (m, 2H), 1.66 (m, 4H).
Mass [M + H] = 379.2 (M +1)
실시예 67: 5-(2-(2-메톡시에톡시)에틸)-2-페닐-N-(테트라하이드로
-2H-피란-4-일)-1H-인돌-7-아민{5-(2-(2-methoxyethoxy)ethyl)-2-phenyl-N-(tetrahydro-2H-pyran-4-yl)-1H-indol-7-amine}
제조예 42에서 수득한 5-(2-(2-메톡시에톡시)에틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 상업적으로 구입가능한 테트라하이드로-4H-피란-4-온 (1 당량)을 실시예 1과 같은 방법으로 반응시켜 표제 화합물을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.62 (br, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.43 (t, 2H), 7.33 (t, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 4.04 (m, 2H), 3.71 (t, 2H), 3.63 (t, 2H), 3.57 (t, 2H), 3.46 (m, 1H), 3.40 (s, 3H), 2.96 (t, 2H), 2.13 (m, 2H), 1.67 (m, 2H).
Mass [M + H] = 395.2 (M +1)
실시예 68: 5-((2-메톡시에톡시)메틸)-2-페닐-7-(피페리딘-1-일)-1H-인돌{5-((2-methoxyethoxy)methyl)-2-phenyl-7-(piperidin-1-yl)-1H-indole}
제조예 4에서 수득한 5-((2-메톡시에톡시)메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민 (50 mg, 0.1687 mmol)을 DMF에 용해하고 K2CO3 (28 mg, 0.202 mmol)을 투입하였다. 1,5-디브로모펜탄 (27.6 μl, 0.202 mmol)을 가하고 80oC에서 18 시간 반응하였다. 실온으로 냉각하고 EA와 물을 가하고 층분리하였다. 유기층을 MgSO4 로 건조, 여과하였다. 여액을 감압 농축하고 실리카컬럼 크로마토그래피로 분리하여 5-((2-메톡시에톡시)메틸)-2-페닐-7-(피페리딘-1-일)-1H-인돌 (30 mg, 수율 49 %)를 얻었다.
1H NMR (400MHz, CDCl3); d 8.37 (br, 1H), 7.70 (d, 2H), 7.48 (t, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 3.66 - 3.60 (m, 4H), 3.42 (s, 3H), 3.13 (br s, 4H), 1.85 (br s, 4H), 1.66 (br s, 2H).
ESI-MS (m/z): 365.2 [M+H]+
실시예 69-1과 69-2: 4-((5-((2-메톡시에톡시)메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일)아미노)사이클로헥산-1-올{4-((5-((2-methoxyethoxy)methyl)-2-phenyl-1H-indol-7-yl)amino)cyclohexan-1-ol}
제조예4에서 수득한 5-((2-메톡시에톡시)메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 4-하이드록시사이클로헥산-1-온을 사용하여 실시예 2와 같은 방법으로 표제화합물을 두 아이소머로 각각 실리카컬럼 크로마토그래피로 분리하였다.
이성질체 1: 실시예69-1
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 10.99 (br, 1H), 7.81 (d, 2H), 7.48 (t, 2H), 7.31 (t, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.24 (s, 1H), 5.31 (d, 1H), 4.47 (d, 1H), 4.44 (s, 2H), 3.78 (m, 1H), 3.51 (m, 2H), 3.48 (m, 2H), 3.26 (s, 3H), 1.76 (m, 6H), 1.63 (m, 2H).
이성질체 2: 실시예 69-2
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 10.91 (br, 1H), 7.80 (d, 2H), 7.47 (t, 2H), 7.31 (t, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.24 (s, 1H), 5.26 (d, 1H), 4.60 (d, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.51 (m, 2H), 3.48 (m, 2H), 3.37 (m, 1H), 3.27 (s, 3H), 2.14 (m, 2H), 1.93 (m, 2H), 1.34 (m, 4H).
실시예 70-1과 70-2: 4-((5-((2-메톡시에톡시)메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-일)아미노)-1-메틸사이클로헥산-1-올 {4-((5-((2-methoxyethoxy)methyl)-2-phenyl-1H-indol-7-yl)amino)-1-methylcyclohexan-1-ol}
제조예4에서 수득한 5-((2-메톡시에톡시)메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민과 4-하이드록시-4-메틸사이클로헥산-1-온을 사용하여 실시예 2와 같은 방법으로 표제화합물을 두 아이소머로 각각 실리카컬럼 크로마토그래피로 분리하였다.
이성질체 1: 실시예 70-1
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 10.93 (br, 1H), 7.81 (d, 2H), 7.47 (t, 2H), 7.31 (t, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.24 (s, 1H), 5.31 (d, 1H), 4.43 (s, 2H), 4.12 (s, 1H), 3.51 (m, 2H), 3.48 (m, 2H), 3.33 (m, 1H), 3.26 (s, 3H), 1.85 (m, 2H), 1.65 (m, 4H), 1.49 (m, 2H), 1.16 (s, 3H).
이성질체 2: 실시예 70-2
1H NMR (400MHz, DMSO-d6); d 10.94 (br, 1H), 7.81 (d, 2H), 7.48 (t, 2H), 7.31 (t, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.24 (s, 1H), 5.27 (d, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.30 (s, 1H), 3.52 - 3.42 (m, 5H), 3.26 (s, 3H), 2.03 (m, 2H), 1.65 (m, 2H), 1.52 - 1.42 (m, 4H), 1.20 (s, 3H).
실험예 1:
심장 세포(H9C2, 흰쥐 심근 세포)에 대한 보호 효과
측정
심장 세포에 대한 보호 효과를 확인하기 위하여 H9C2 세포를 1.5 X 104 개씩 96웰 플레이트에 분주하여 24 시간 배양하였다. 실시예 화합물의 최종 농도가 30, 10, 3, 1, 0.3, 0.1, 0.03, 0.01 μM이 되도록 3 배씩 연속 희석하여 각 웰에 처리하였고 15-20 분 동안 배양하였다. t-BHP를 최종농도가 400 μM이 되게 처리하였으며 2 시간 배양하였다. 각 화합물의 보호 효과를 확인하기 위하여 Cytotoxicity LDH assay kit [Dojindo; CK12]를이용하여 LDH 세포 외 분비 정도를 측정하였다. 간략히 설명하면, 세포에 t-BHP 2 시간 처리가 끝난 시점에서 세포가 담겨있던 상등액을 100 μl씩 취하여 새로운 96웰 플레이트에 옮긴다. Kit에 포함된 assay buffer를 100 μl/well (샘플과 동량) 넣어준 후, 호일로 감싸고 상온에서 30분간 반응시킨다. 변화된 샘플의 색깔을 관찰하며, Stop solution 50 μl/well 넣은 후 iD3 분광 광도계를 이용하여 490 nm의 흡광도 값을 측정하여 EC50 값을 계산하였다. 실시예 화합물의 바람직한 EC50는 1.0 μM 이하이며, 더욱 바람직하게는 0.3 μM 이하이다.
표 1에 세포사멸 유발물질인 t-BHP에 대한 실시예 화합물의 보호효과를 나타내었다.
표 1: 심장세포(H9C2)에서의 t-BHP 유도에 따른 세포사멸 보호효과
실시예 |
EC50 (μM) |
실시예 |
EC50 (μM) |
실시예 |
EC50 (μM) |
1 |
A |
25 |
A |
49 |
B |
2 |
A |
26 |
A |
50 |
C |
3 |
A |
27 |
A |
51 |
A |
4 |
A |
28 |
A |
52 |
A |
5 |
C |
29 |
A |
53 |
B |
6 |
A |
30 |
A |
54 |
A |
7 |
A |
31 |
A |
55 |
A |
8 |
A |
32 |
A |
56 |
A |
9 |
A |
33 |
A |
57 |
C |
10 |
B |
34 |
A |
58 |
B |
11 |
A |
35 |
A |
59 |
B |
12 |
A |
36 |
A |
60 |
A |
13 |
A |
37 |
A |
61 |
A |
14 |
A |
38 |
A |
62 |
A |
15 |
A |
39 |
A |
63 |
B |
16 |
A |
40 |
B |
64 |
A |
17 |
A |
41 |
C |
65 |
A |
18 |
A |
42 |
B |
66 |
A |
19 |
A |
43 |
B |
67 |
A |
20 |
A |
44 |
A |
68 |
C |
21 |
A |
45 |
A |
69-1 |
A |
22 |
A |
46 |
A |
69-2 |
A |
23 |
A |
47 |
A |
70-1 |
A |
24 |
A |
48 |
A |
70-2 |
A |
A indicates EC50 ≤ 0.3 μM, B indicates 0.3 μM < EC50 ≤ 1uM, C indicates EC50 >1.0 μM |
실험예 2
: 심장 세포 (H9C2, 흰쥐 심근 세포)에 t-BHP를 처리한 경우 세포내 칼슘 농도 유지 효과
심장 세포에서 칼슘 농도 유지 효과를 확인하고자 H9C2 세포를 96웰 플레이트에 1.5 X 104 cells/well로 분주하여 24 시간 배양하였다. 세포 내 칼슘 농도 측정은 FLIPR Calcium 6 assay kit (Molecular devices; #R8190)을 이용하였다. 제조사 실험방법에 따라 세포에 probenecid와 칼슘 특이적 염색제를 처리하고, 1.75 시간 경과 후 실시예 2 화합물의 최종 농도가 0.02 또는 0.01 μM이 되도록 세포에 0.25 시간동안 처리하였다. t-BHP를 최종 농도가 150 μM이 되도록 세포에 처리 후 실시간으로 30 초마다 세포 내 칼슘 농도를 측정하였다.
도 1은 t-BHP 처리 조건에서의 실시예 2 화합물의 칼슘 농도 조절 효과를 보여준다. 세로 축의 ΔF/F(Max-Min) 값은 t-BHP 처리 후 발생한 칼슘 특이적 염색제의 형광 값의 최대치에서 최소치를 뺀 값으로, 세포 내 칼슘 농도가 많이 증가할수록 큰 값을 가진다. 가로 축은 실시예 2 화합물의 농도를 나타내고, V.C은 운반체만 처리한 대조군으로 t-BHP 처리 시 세포 내 칼슘 농도가 가장 많이 증가한다. 실시예 2 화합물이 0.01 μM 처리된 경우 t-BHP 처리에 의한 비정상적으로 증가된 세포 내 칼슘 농도가 감소되었고, 0.02 μM 처리 조건에서는 정상 수준의 세포 내 칼슘 농도를 나타내었다. 따라서, t-BHP 처리에 의한 비정상적 세포 내 칼슘 농도의 증가가 실시예 2 화합물 처리시 효과적으로 감소함을 확인하였다.
실험예 3: 섬유아세포(NIH/3T3, 생쥐 배아 섬유아세포)에 대한 세포 사멸 보호 효과
섬유아세포에 대한 보호 효과를 확인하기 위하여 NIH/3T3 세포를 8 X 103 개씩 96웰 플레이트에 분주하여 18-24 시간 배양하였다. 실시예 화합물의 최종 농도가 0.1, 1 μM이 되도록 희석하여 각 웰에 처리하였고 15-20 분 배양하였다. 에라스틴, 글루타메이트, RSL3를 각각 최종농도가 각각 3 μM, 30 mM, 3 μM이 되게 처리하였으며 24시간 배양하였다. 각 화합물의 보호 효과를 확인하기 위하여 Cytotoxicity LDH assay kit [Dojindo; CK12]을 이용하여 LDH의 세포 외 분비 정도를 측정하였다. 간략하게 설명하면, 세포에 에라스틴, 글루타메이트, RSL3를 24시간 처리가 끝난 시점에서 세포가 담겨있던 상등액을 70 μl씩 취하여 새로운 96웰 플레이트에 옮긴다. Kit에 포함된 assay buffer를 70 μl/well (샘플과 동량) 넣어준 후, 포일로 감싸고 상온에서 15 분간 반응시킨다. 변화된 샘플의 색을 관찰하여, Stop solution 35 μl/well 넣은 후, iD3 분광 광도계를 이용하여 490 nm 파장의 흡광도 값을 측정하여 % inhibition 값을 계산하였다. 표 2는 페롭토시스 유발 물질인 에라스틴, 글루타메이트, RSL3에 대한 실시예 화합물의 각 농도에 따른 세포사멸 감소율을 나타내었다.
표 2: 에라스틴, 글루타메이트 및 RSL3에 대한 섬유아세포(NIH/3T3)에서의 세포사멸 보호효과
|
에라스틴, 3 μM |
글루타메이트, 30 mM |
RSL3, 3 μM |
실시예 |
0.1 μM |
1.0 μM |
0.1 μM |
1.0 μM |
0.1 μM |
1.0 μM |
inhibition (%) |
Ferrostatin-1 |
17 |
99 |
97 |
97 |
100 |
100 |
1 |
99 |
100 |
100 |
100 |
100 |
100 |
4 |
99 |
99 |
100 |
100 |
100 |
100 |
30 |
6 |
100 |
100 |
100 |
100 |
100 |
36 |
99 |
100 |
100 |
100 |
100 |
100 |
39 |
99 |
100 |
99 |
100 |
100 |
100 |
45 |
100 |
100 |
0 |
97 |
0 |
100 |
50 |
0 |
8 |
99 |
100 |
100 |
100 |
64 |
99 |
100 |
99 |
100 |
100 |
100 |
실험예 4:
부신세포(PC-12, 흰쥐 부신세포)에 대한 세포 사멸 보호 효과
부신세포에 대한 보호 효과를 확인하기 위하여 PC-12 세포를 1 X 104 개씩 96웰 플레이트에 분주하여 18-24 시간 배양하였다. 실시예 화합물의 최종 농도가 에라스틴에서 0.1과 1.0 μM, 글루타메이트에서 0.01과 0.1 μM, RLS3에서 0.3 μM과 3.0 μM이 되도록 희석하여 각 웰에 처리하였고 20 분 배양하였다. 에라스틴, 글루타메이트, RSL3를 각각 최종농도가 각각 1 μM, 10 mM, 0.3 μM이 되게 처리하였으며 24시간 배양하였다. 각 화합물의 보호 효과를 확인하기 위하여 Cytotoxicity LDH assay kit [Dojindo; CK12]을 이용하여 LDH의 세포 외 분비 정도를 측정하였다. 간략하게 설명하면, 세포에 에라스틴, 글루타메이트, RSL3를 24시간 처리가 끝난 시점에서 세포가 담겨있던 상등액을 70 μl씩 취하여 새로운 96웰 플레이트에 옮긴다. Kit에 포함된 assay buffer를 70 μl/well (샘플과 동량) 넣어준 후, 포일로 감싸고 상온에서 15분간 반응시킨다. 변화된 샘플의 색을 관찰하여, Stop solution 35 μl/well 넣은 후, iD3 분광 광도계를 이용하여 490 nm 파장의 흡광도 값을 측정하여 % inhibition 값을 계산하였다. 표 3은 페롭토시스 유발 물질인 에라스틴, 글루타메이트 및 RSL3에 대한 실시예 화합물의 각 농도에 따른 세포사멸 감소율을 나타내었다.
표 3: 에라스틴, 글루타메이트, RSL3에 대한 부신세포(PC-12)에서의 세포사멸 보호효과
|
에라스틴, 1 μM |
글루타메이트, 10 mM |
RSL3, 0.3 μM |
실시예 |
0.1 μM |
1.0 μM |
0.01 μM |
0.1 μM |
0.3 μM |
3.0 μM |
inhibition (%) |
Ferrostatin-1 |
100 |
100 |
35 |
98 |
100 |
100 |
1 |
100 |
100 |
53 |
98 |
100 |
100 |
4 |
100 |
100 |
53 |
96 |
100 |
100 |
30 |
86 |
100 |
33 |
95 |
100 |
100 |
36 |
100 |
100 |
61 |
95 |
100 |
100 |
39 |
100 |
100 |
52 |
97 |
100 |
100 |
45 |
100 |
100 |
57 |
100 |
100 |
100 |
50 |
41 |
68 |
16 |
25 |
0 |
100 |
64 |
100 |
100 |
39 |
97 |
78 |
100 |
실험예 5:
심장세포(H9C2, 흰쥐 심근세포)에 대한 세포 사멸 보호 효과
심장세포에 대한 보호 효과를 확인하기 위하여 H9C2 세포를 1 X 104 개씩 96웰 플레이트에 분주하여 18-24 시간 배양하였다. 실시예 화합물의 최종 농도가 0.1, 1 μM이 되도록 희석하여 각 웰에 처리하였고 15-20 분 배양하였다. 에라스틴, 글루타메이트, RSL3를 각각 최종농도가 각각 1 μM, 25 mM, 0.5 μM이 되게 처리하였으며 24시간 배양하였다. 각 화합물의 보호 효과를 확인하기 위하여 Cytotoxicity LDH assay kit [Dojindo; CK12]을 이용하여 LDH의 세포 외 분비 정도를 측정하였다. 간략하게 설명하면, 세포에 에라스틴, 글루타메이트, RSL3를 24시간 처리가 끝난 시점에서 세포가 담겨있던 상등액을 70 μl씩 취하여 새로운 96웰 플레이트에 옮긴다. Kit에 포함된 assay buffer를 70 μl/well (샘플과 동량) 넣어준 후, 포일로 감싸고 상온에서 15분간 반응시킨다. 변화된 샘플의 색을 관찰하여, Stop solution 35 μl/well 넣은 후, iD3 분광 광도계를 이용하여 490 nm 파장의 흡광도 값을 측정하여 % inhibition 값을 계산하였다. 표 4는 페롭토시스 유발 물질인 에라스틴, 글루타메이트, RSL3에 대한 실시예 화합물의 각 농도에 따른 세포사멸 감소율을 나타내었다.
표 4: 에라스틴, 글루타메이트 및 RSL3에 대한 심근세포(H9C2)에서의 세포사멸 보호효과
|
에라스틴, 1 μM |
글루타메이트, 25 mM |
RSL3, 0.5 μM |
실시예 |
0.1 μM |
1.0 μM |
0.1 μM |
1.0 μM |
0.1 μM |
1.0 μM |
inhibition (%) |
Ferrostatin-1 |
100 |
100 |
98 |
97 |
96 |
96 |
1 |
100 |
100 |
96 |
97 |
100 |
98 |
4 |
100 |
100 |
97 |
96 |
97 |
96 |
30 |
0 |
100 |
90 |
98 |
0 |
96 |
36 |
100 |
100 |
99 |
97 |
98 |
99 |
39 |
100 |
100 |
96 |
96 |
96 |
96 |
45 |
100 |
100 |
98 |
96 |
99 |
97 |
50 |
16 |
18 |
0 |
49 |
7 |
4 |
64 |
100 |
100 |
97 |
97 |
90 |
95 |
실험예 6:
신장 섬유아세포(NRK-49F, 흰쥐 신장 섬유아세포)에 대한 세포 사멸 보호 효과
신장 섬유아세포에 대한 보호 효과를 확인하기 위하여 NRK-49F 세포를 1 X 104 개씩 96웰 플레이트에 분주하여 18-24 시간 배양하였다. 실시예 화합물의 최종 농도가 0.1, 1 μM이 되도록 희석하여 각 웰에 처리하였고 15-20 분 배양하였다. 에라스틴, 글루타메이트, RSL3를 각각 최종농도가 각각 3 μM, 75 mM, 3 μM이 되게 처리하였으며 24시간 배양하였다. 각 화합물의 보호 효과를 확인하기 위하여 Cytotoxicity LDH assay kit [Dojindo; CK12]을 이용하여 LDH의 세포 외 분비 정도를 측정하였다. 간략하게 설명하면, 세포에 에라스틴, 글루타메이트, RSL3를 24시간 처리가 끝난 시점에서 세포가 담겨있던 상등액을 70 μl씩 취하여 새로운 96웰 플레이트에 옮긴다. Kit에 포함된 assay buffer를 70 μl/well (샘플과 동량) 넣어준 후, 포일로 감싸고 상온에서 15분간 반응시킨다. 변화된 샘플의 색을 관찰하여, Stop solution 35 μl/well 넣은 후, iD3 분광 광도계를 이용하여 490 nm 파장의 흡광도 값을 측정하여 % inhibition 값을 계산하였다. 표 5는 페롭토시스 유발 물질인 에라스틴, 글루타메이트, RSL3에 대한 실시예 화합물의 각 농도에 따른 세포사멸 감소율을 나타내었다.
표 5: 에라스틴, 글루타메이트 및 RSL3에 대한 신장 섬유아세포(NRK-49F)에서의 세포사멸 보호효과
|
에라스틴, 3 μM |
글루타메이트, 75 mM |
RSL3, 3 μM |
실시예 |
0.1 μM |
1.0 μM |
0.1 μM |
1.0 μM |
0.1 μM |
1.0 μM |
inhibition (%) |
Ferrostatin-1 |
99 |
98 |
95 |
100 |
94 |
99 |
1 |
99 |
99 |
100 |
100 |
99 |
99 |
4 |
99 |
99 |
99 |
100 |
98 |
99 |
30 |
98 |
98 |
97 |
100 |
52 |
98 |
36 |
99 |
99 |
100 |
100 |
98 |
99 |
39 |
99 |
98 |
100 |
100 |
98 |
99 |
45 |
99 |
98 |
100 |
98 |
99 |
98 |
50 |
3 |
99 |
4 |
73 |
16 |
18 |
64 |
100 |
100 |
7 |
99 |
70 |
100 |
실험예 7:
망막상피세포(ARPE-19, 인간 망막상피세포)에 대한 세포 사멸 보호 효과
망막상피세포에 대한 보호 효과를 확인하기 위하여 ARPE-19 세포를 1 X 104 개씩 96웰 플레이트에 분주하여 18-24 시간 배양하였다. 실시예 화합물의 최종 농도가 0.03, 0.3 μM이 되도록 희석하여 각 웰에 처리하였고 20 분 배양하였다. 에라스틴, RSL3를 각각 최종농도가 각각 10 μM, 0.3 μM이 되게 처리하였으며 24시간 배양하였다. 각 화합물의 보호 효과를 확인하여 위하여 Cytotoxicity LDH assay kit [Dojindo; CK12]을 이용하여 LDH의 세포 외 분비 정도를 측정하였다. 간략하게 설명하면, 세포에 에라스틴, RSL3를 24시간 처리가 끝난 시점에서 세포가 담겨있던 상등액을 70 μl씩 취하여 새로운 96웰 플레이트에 옮긴다. Kit에 포함된 assay buffer를 70 μl/well (샘플과 동량) 넣어준 후, 포일로 감싸고 상온에서 15분간 반응시킨다. 변화된 샘플의 색을 관찰하여, Stop solution 35 μl/well 넣은 후, iD3 분광 광도계를 이용하여 490 nm 파장의 흡광도 값을 측정하여 % inhibition 값을 계산하였다. 표 6에는 페롭토시스 유발 물질인 에라스틴과 RSL3에 대한 실시예 화합물의 각 농도에 따른 세포사멸 감소율을 나타내었다.
표 6: 에라스틴과 RSL3에 대한 망막상피세포(ARPE-19)에서의 세포사멸 보호효과
|
에라스틴, 10 μM |
RSL3, 0.3 μM |
실시예 |
0.03 μM |
0.3 μM |
0.03 μM |
0.3 μM |
inhibition (%) |
Ferrostatin-1 |
86 |
100 |
61 |
100 |
1 |
100 |
100 |
95 |
100 |
4 |
100 |
100 |
100 |
100 |
30 |
80 |
100 |
60 |
100 |
36 |
98 |
100 |
100 |
100 |
39 |
100 |
100 |
100 |
100 |
45 |
100 |
100 |
100 |
100 |
50 |
19 |
86 |
4 |
45 |
64 |
100 |
100 |
67 |
100 |
실험예 8:
폐상피세포(MLE-12, 쥐 폐상피세포)에 대한 세포 사멸 보호 효과
폐상피세포에 대한 보호 효과를 확인하기 위하여 MLE-12 세포를 5 X 103 개씩 96웰 플레이트에 분주하여 18-24 시간 배양하였다. 실시예 화합물의 최종 농도가 0.1, 1.0 μM이 되도록 희석하여 각 웰에 처리하였고 20 분 배양하였다. RSL3를 각각 최종농도가 각각 1.0 μM 이 되게 처리하였으며 24시간 배양하였다. 각 화합물의 보호 효과를 확인하여 위하여 Cytotoxicity LDH assay kit [Dojindo; CK12]을 이용하여 LDH의 세포 외 분비 정도를 측정하였다. 간략하게 설명하면, 세포에 RSL3를 24시간 처리가 끝난 시점에서 세포가 담겨있던 상등액을 70 μl씩 취하여 새로운 96웰 플레이트에 옮긴다. Kit에 포함된 assay buffer를 70 μl/well (샘플과 동량) 넣어준 후, 호일로 감싸고 상온에서 15분간 반응시킨다. 변화된 샘플의 색을 관찰하여, Stop solution 35 μl/well 넣은 후, iD3 분광 광도계를 이용하여 490 nm 파장의 흡광도 값을 측정하여 % inhibition 값을 계산하였다. 표 7에는 페롭토시스 유발 물질인 RSL3에 대한 실시예 화합물의 각 농도에 따른 세포사멸 감소율을 나타내었다.
표 7: RSL3에 대한 폐상피세포(MLE-12)에서의 세포사멸 보호효과
|
RSL3, 1.0 μM |
실시예 |
0.1 μM |
1.0 μM |
inhibition (%) |
Ferrostatin-1 |
100 |
100 |
1 |
100 |
100 |
4 |
90 |
91 |
30 |
84 |
95 |
36 |
89 |
94 |
39 |
89 |
89 |
45 |
98 |
100 |
50 |
0 |
56 |
64 |
100 |
98 |
실험예 9: 실시예 화합물과 비교예 화합물의 약동학 비교
실시예 2 화합물인 (N-사이클로펜틸-5-(2-메톡시에톡시메틸)-2-페닐-1H-인돌-7-아민)의 약동학 측정
약동학 파라미터는 최고 혈장 농도 (Cmax), 최고 혈장농도까지 걸리는 시간 (Tmax), 혈장농도-시간 곡선 하 면적 (AUClast 및 AUCinf), 반감기 (t1/2) 등으로 나타낼 수 있다.
ICR 마우스에 실시예 2 화합물을 10 mg/kg의 용량으로 경구 투여 후, 0.5/1/2/4/8/24 시간 경과된 시점에서 마우스의 혈장 내 약물 농도를 HPLC-MS/MS 분광법에 의해 측정하고, 2 또는 24 시간 경과된 시점에서 마우스의 뇌를 적출 후 뇌 내 약물 농도를 HPLC-MS/MS 분광법에 의해 측정하였다. 혈장 농도 대 시간하 곡선 면적 (AUCinf)은 5420 ng/mL로 측정되었고, 투여 2시간 경과 시점에서 혈장 내 약물농도가 398 ng/mL 그리고 뇌 내 약물 농도가 683 ng/mL로 측정되어 뇌-혈장 약물농도 비율이 1.71로 나타나 매우 높은 수준의 뇌 내 노출도를 보였다. 또한 투여 24시간 경과 시점에서는 실시예 2의 경우 혈장내 약물농도가 5.6 ng/mL 그리고 뇌 내 약물 농도가 11.4 ng/mL로 측정되어 뇌-혈장 약물농도 비율이 2.04로 여전히 뇌 내 약물 노출도가 높았다.
비교예 화합물인 [7-(사이클로펜틸아미노)-2-페닐-1H-인돌-5-일]메탄올{[7-(cyclopentylamino)-2-phenyl-1H-indol-5-yl]methanol}의 약동학 측정
비교예 화합물 [[7-(사이클로펜틸아미노)-2-페닐-1H-인돌-5-일]메탄올은 등록특허 KR 10-1511771에 따라 합성하여 사용하였다.
ICR 마우스에 비교예 화합물을 10 mg/kg의 용량으로 경구 투여 후, 0.5/1/2/4/8/24 시간 경과된 시점에서 마우스의 혈장 내 약물 농도를 HPLC-MS/MS 분광법에 의해 측정하고, 2 또는 24시간 경과된 시점에서 마우스의 뇌를 적출 후 뇌 내 약물 농도를 HPLC-MS/MS 분광법에 의해 측정하였다.
비교예 화합물의 경우 혈장 농도 대 시간하 곡선 면적 (AUCinf)은 5458ng/mL로 측정되며 투여 2시간 경과 시점에서 혈장 내 약물농도가 1122 ng/mL 그리고 뇌 내 약물 농도가 95 ng/mL로 측정되어 뇌-혈장 약물농도 비율이 0.08로 나타났고, 또한 투여 24시간 경과 시점에서는 혈장 및 뇌 내의 약물 농도가 측정되지 않았다.
실시예 2 화합물과 비교예 화합물의 경구 투여시 시간 대 평균 혈장과 뇌 내 농도의 값과 이의 비율을 하기 표 8에 나타내었고, 이의 그래프를 각각 도 2 및 도 3에 나타내었다.
표 8: 실시예 2와 비교예 화합물의 뇌/혈장 농도 비율 [Brain/Plasma (B/P) ratio]
Test article
|
실시예 2
|
비교예
|
Dose(mg/kg)
|
10 |
10 |
Time (hr) |
Plasma |
Brain |
B/P ratio |
Plasma |
Brain |
B/P ratio |
0.5 |
333.7 |
NT |
- |
1642.4 |
NT |
- |
1 |
336.7 |
NT |
- |
2113.5 |
NT |
- |
2 |
398.2 |
682.8 |
1.71 |
1122.4 |
95.1 |
0.08 |
4 |
671.5 |
NT |
- |
389.2 |
NT |
- |
8 |
232.0 |
NT |
- |
50.8 |
NT |
- |
24 |
5.6 |
11.4 |
2.04 |
0.0 |
0.0 |
NA |
AUClast (ng·hr/mL or ng·hr/g) |
5396.0 |
8319.0 |
1.74 |
5359.1 |
NA |
NA |
NT: not tested, NA: not available
실시예 2 화합물과 비교예 화합물의 약동학 결과 분석
상기 표 8에서 확인할 수 있는 바와 같이, 혈장 농도 대 시간 곡선 면적 (AUClast) 기준으로 실시예2와 비교예 화합물은 5396 ng/mL대비 5359 ng/mL로 측정되어 비슷한 수준의 혈장 내 노출도를 보였다.
하지만, 비교예의 경우 투여 2시간 경과 시점에서 혈장 내 약물농도가 1122 ng/mL 그리고 뇌 내 약물 농도가 95 ng/mL로 측정되어 뇌-혈장 약물농도 비율이 0.08로 나타났고, 실시예 2 화합물의 경우 투여 2시간 경과 시점에서 혈장 내 약물농도가 398 ng/mL 그리고 뇌 내 약물 농도가 683 ng/mL로 측정되어 뇌-혈장 약물농도 비율이 1.71로 나타나 비교예 대비 매우 높은 수준의 뇌 내 노출도를 보였다. 또한 투여 24 시간 경과 시점에서는 비교예의 경우 혈장 및 뇌 내의 약물 농도가 측정되지 않은 것에 비하여, 실시예2의 경우 혈장 내 약물농도가 5.6 ng/mL 그리고 뇌 내 약물 농도가 11.4 ng/mL로 측정되어 뇌-혈장 약물농도 비율이 2.04로 여전히 비교 화합물 대비 뇌 내 약물 노출도가 높았다.
따라서 본 발명은 준수한 수준의 혈장 노출량을 유지하면서 뇌 내 노출이 잘 되는 화합물의 특성을 갖고 있음을 알 수 있다.