WO2022146070A1 - B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 약학적 조성물 - Google Patents

B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 약학적 조성물 Download PDF

Info

Publication number
WO2022146070A1
WO2022146070A1 PCT/KR2021/020259 KR2021020259W WO2022146070A1 WO 2022146070 A1 WO2022146070 A1 WO 2022146070A1 KR 2021020259 W KR2021020259 W KR 2021020259W WO 2022146070 A1 WO2022146070 A1 WO 2022146070A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
pharmaceutical composition
coronavirus
polypeptide
cov
poly6
Prior art date
Application number
PCT/KR2021/020259
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
김범준
최유민
Original Assignee
서울대학교산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 서울대학교산학협력단 filed Critical 서울대학교산학협력단
Publication of WO2022146070A1 publication Critical patent/WO2022146070A1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/195—Proteins from microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/324—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the immune system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Definitions

  • composition for anti-coronavirus comprising a hepatitis B virus-derived polypeptide.
  • SARS-CoV-2 shows 79% homology to SARS-CoV with the genome sequence and structural genes envelope (E), membrane (M), and nucleocapsid (N), and the Spike (S) gene has over 90% homology.
  • E envelope
  • M membrane
  • N nucleocapsid
  • S Spike
  • cytokines and chemokines such as IL6 and CXCL and CCL are secreted to cause a cytokine storm, and several inhibitors that can prevent this are being used with antiviral drugs.
  • Co-administration is being considered. Even now, administration strategies for antiviral agents and various inhibitors for SARS-CoV-2 are being developed, and several candidates for viable therapeutic agents are needed.
  • One aspect is to provide a pharmaceutical composition for anti-coronavirus comprising a polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • Another aspect is to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating coronavirus infection comprising a polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • Another aspect is to provide a health functional food for anti-coronavirus comprising a polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • Another aspect is to provide a method for preventing or treating a coronavirus infection comprising administering a polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • Another aspect is to provide the use of a polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 for use in the preparation of a composition for anti-coronavirus.
  • compositions for anti-coronavirus comprising a polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • polypeptide refers to a polymer consisting of two or more amino acids linked by an amide bond (or peptide bond).
  • the polypeptide may be a polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, about 70% or more, about 75% or more, about 80% or more, about 85% or more, about 90% or more, about 92% or more, about 95% or more, about 97% or more, about 98% or more, respectively, or polypeptides having at least about 99% sequence homology.
  • N- or N- or A protecting group may be bound to the C-terminus.
  • the protecting group may be an acetyl group, a fluorenyl methoxycarbonyl group, a formyl group, a palmitoyl group, a myristyl group, a stearyl group, or polyethylene glycol (PEG). If so, it can be included without limitation.
  • stability may refer to storage stability (eg, room temperature storage stability) as well as in vivo stability to protect the polypeptide of the present invention from attack by proteolytic enzymes in vivo.
  • polypeptide may additionally contain a specific purpose amino acid sequence for a targeting sequence, a tag, and a labeled residue.
  • homology is intended to indicate a degree of similarity to a wild-type amino acid sequence, and the comparison of such homology can be performed using a comparison program well known in the art, and the homology between two or more sequences can be calculated as a percentage (%).
  • the polypeptide may be derived from nature or may be obtained by various methods for synthesizing a polypeptide well known in the art. As an example, it may be prepared using polynucleotide recombination and a protein expression system, or synthesized in vitro through chemical synthesis such as peptide synthesis, and cell-free protein synthesis.
  • the polypeptide may be a peptide, an extract of a plant-derived tissue or cell, or a product obtained by culturing a microorganism (eg, bacteria or fungi, and particularly yeast), specifically, hepatitis B virus (Hepatitis B). virus, HBV) polymerase, and more specifically, it may be derived from the preS1 region of HBV polymerase.
  • a microorganism eg, bacteria or fungi, and particularly yeast
  • Hepatitis B hepatitis B virus
  • the polypeptide may have anti-coronavirus activity.
  • the coronavirus may be SARS-CoV-2 (Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2).
  • the polypeptide may have anti-coronavirus activity by inhibiting the proliferation of coronavirus, and the polypeptide is at least selected from the group consisting of a nucleocapsid protein and a spike protein. It may be to exhibit anti-coronavirus activity by inhibiting the expression of one protein.
  • the polypeptide may increase the expression of type 1 interferon, and the type 1 interferon is composed of IFN- ⁇ , IFN- ⁇ , IFN- ⁇ and IFN- ⁇ . It may be at least one interferon selected from the group, and specifically may be IFN- ⁇ .
  • the pharmaceutical composition may further include a therapeutic agent for coronavirus.
  • the corona virus therapeutic agent may be a known coronavirus therapeutic agent, or may be a newly developed coronavirus therapeutic agent.
  • the coronavirus treatment agent is lopinavir-ritonavir, favipiravir, sofosbuvir, ribavirin, chloroquine, hydroxychloroquine ), dexamethasone, infliximab, ivermectin, tocilizumab, nafamostat, pyronaridine-artesunate, ranitidine bismuth
  • the corona virus therapeutic agent may be remdesivir (Remdesivir).
  • the ratio in the composition of the polypeptide and the remdesivir is 1:1 to 10:1, 2:1 to 10:1, 3:1 to 10:1, 1:1 to 8: 1, 2:1 to 8:1, 3:1 to 8:1, 1:1 to 6:1, 2:1 to 6:1 or 3:1 to 6:1.
  • the anti-coronavirus effect can be significantly increased to exhibit a synergistic effect
  • the ratio of the polypeptide and the remdesivir in the composition is If it is less than 1:1 or more than 10:1, the synergistic effect may be reduced.
  • the polypeptide may inhibit the expression of at least one protein selected from the group consisting of IL-1 ⁇ and IL-6.
  • the polypeptide increases the expression of type 1 interferon, increases the expression of IL-10, and suppresses the expression of at least one protein selected from the group consisting of IL-1 ⁇ and IL-6, thereby further enhancing the anti-inflammatory effect.
  • prevention may refer to any action of suppressing or delaying the onset of a disease caused by a virus in an individual by administration of the pharmaceutical composition according to an aspect.
  • treatment may refer to any action in which symptoms of a disease caused by a virus in an individual are improved or changed to a beneficial effect by administration of the pharmaceutical composition according to an aspect.
  • the pharmaceutical composition may include an active ingredient alone or may be provided as a pharmaceutical composition including one or more pharmaceutically acceptable carriers, excipients or diluents.
  • the carrier may be, for example, a colloidal suspension, powder, saline, lipid, liposome, microspheres or nanospherical particles. They may form complexes with or be associated with a vehicle and are known in the art such as lipids, liposomes, microparticles, gold, nanoparticles, polymers, condensation reagents, polysaccharides, polyamino acids, dendrimers, saponins, adsorption enhancing substances or fatty acids. It can be delivered in vivo using known delivery systems.
  • lubricants such as sodium stearate and talc may also be used.
  • Liquid formulations for oral use include suspensions, solutions, emulsions, syrups, etc., and various excipients such as wetting agents, sweetening agents, fragrances, preservatives, etc. in addition to water and liquid paraffin, which are commonly used simple diluents, may be included.
  • Formulations for parenteral administration may include sterile aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, and suppositories.
  • Non-aqueous solvents and suspending agents include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, and injectable esters such as ethyl oleate.
  • witepsol macrogol, tween 61, cacao butter, laurin, glycero geratin, etc.
  • a known diluent or excipient may be used when preparing in the form of eye drops. have.
  • pharmaceutically acceptable means exhibiting properties that are not toxic to cells or humans exposed to the composition.
  • the term "individual” refers to a subject in need of treatment for a disease caused by a virus, and more specifically refers to mammals such as human or non-human primates, mice, dogs, cats, horses and cattle. can
  • the pharmaceutical composition may be administered orally or parenterally (eg, intramuscularly, intravenously, intraperitoneally, subcutaneously, intradermally, or topically) according to a desired method.
  • parenterally eg, intramuscularly, intravenously, intraperitoneally, subcutaneously, intradermally, or topically
  • administration means introducing a given substance into a subject by an appropriate method.
  • the pharmaceutical composition is administered in a pharmaceutically effective amount.
  • pharmaceutically effective amount means an amount sufficient to treat a disease with a reasonable benefit/risk ratio applicable to medical treatment, and the effective dose level depends on the type, severity, activity of the drug, and the drug. It can be determined according to factors including sensitivity to, administration time, administration route and excretion rate, duration of treatment, concurrent drugs, and other factors well known in the medical field.
  • the pharmaceutical composition may be administered at 0.01 to 1000 mg/kg/day, more specifically, at 0.1 to 500 mg/kg/day. The administration may be administered once a day, or may be administered in several divided doses.
  • the pharmaceutical composition according to one aspect may be administered individually or in combination with other anti-coronavirus therapeutic agents, and may be administered simultaneously, separately, or sequentially with known anti-coronavirus therapeutic agents, and may be administered single or multiple. have. Taking all of the above factors into consideration, it is important to administer an amount capable of obtaining the maximum effect with a minimum amount without side effects, which can be easily determined by those skilled in the art.
  • the effective amount of the pharmaceutical composition may vary depending on the patient's age, sex, condition, body weight, absorption of the active ingredient into the body, inactivation rate, excretion rate, disease type, combined drug, administration route, obesity It can be increased or decreased according to the severity of the disease, sex, weight, age, etc.
  • Another aspect provides a pharmaceutical composition for preventing or treating coronavirus infection comprising a polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 may be within the above-described range.
  • the coronavirus infection is asymptomatic, fever, malaise, cough, dyspnea, pneumonia, renal failure, renal dysfunction, septic shock, sputum, sore throat, headache, hemoptysis, nausea and diarrhea selected from the group consisting of at least one symptom.
  • the polypeptide may further exhibit an anti-inflammatory effect.
  • the polypeptide increases the expression of type 1 interferon, increases the expression of IL-10, and suppresses the expression of at least one protein selected from the group consisting of IL-1 ⁇ and IL-6, thereby further enhancing the anti-inflammatory effect.
  • Another aspect provides a health functional food for anti-coronavirus comprising a polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • the polypeptide may prevent or ameliorate coronavirus infection.
  • polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 may be within the above-described range.
  • the term “improvement” may refer to any action that at least reduces a parameter related to the condition being treated, for example, the severity of a symptom.
  • the health functional food may be used before or after the onset of the disease for the prevention or improvement of corona virus infection, simultaneously or separately with the drug for treatment.
  • the active ingredient may be added to food as it is or used together with other food or food ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method.
  • the mixing amount of the active ingredient may be appropriately determined depending on the purpose of its use (for prevention or improvement).
  • the health functional food may be added in an amount of specifically about 15% by weight or less, more specifically about 10% by weight or less, based on the raw material.
  • the amount may be less than or equal to the above range.
  • the health functional food further includes at least one of a carrier, a filler, an extender, a binder, a wetting agent, a disintegrant, a diluent such as a surfactant, an excipient, or an additive, such as tablets, pills, powders, granules, powders, capsules, and liquid formulations It may be formulated with one selected from the group consisting of.
  • the foods that can be added include various foods, powders, granules, tablets, capsules, syrups, beverages, gums, tea, vitamin complexes, health functional foods, and the like.
  • carrier examples include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, erythritol, starch, gum acacia, calcium phosphate, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, microcrystalline cellulose , polyvinylpyrrolidone, cellulose, polyvinylpyrrolidone, methylcellulose, water, sugar syrup, methylcellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. It may be at least one selected from.
  • the health functional food may contain other ingredients as essential ingredients without any particular limitation in addition to containing the active ingredient.
  • various flavoring agents or natural carbohydrates may be contained as additional ingredients.
  • natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; disaccharides such as maltose, sucrose and the like; and polysaccharides, for example, conventional sugars such as dextrin, cyclodextrin, and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol.
  • natural flavoring agents such as taumatine, stevia extract (eg, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.)
  • synthetic flavoring agents sacharin, aspartame, etc.
  • the ratio of the natural carbohydrate may be appropriately determined by the selection of those skilled in the art.
  • the health functional food includes various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavoring agents such as synthetic and natural flavoring agents, coloring agents and thickening agents (cheese, chocolate, etc.), pectic acid and salts thereof , alginic acid and its salts, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents used in carbonated beverages, and the like. These components may be used independently or in combination, and the proportion of these additives may also be appropriately selected by those skilled in the art.
  • Another aspect provides a method for preventing or treating a coronavirus infection comprising administering a polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 "administration”, “coronavirus infection”, “prevention”, “treatment”, etc. may be within the above-described range.
  • the polypeptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 has no cytotoxicity, has an anti-coronavirus effect, can also exhibit an anti-inflammatory effect, and has a synergistic effect with existing coronavirus therapeutic agents, thereby contributing to global public health.
  • FIG. 1 is a diagram showing the selection process of HBV-derived polypeptides having anti-coronavirus activity.
  • FIG. 2 is a diagram showing the measurement of cytotoxicity (MTS assay) according to Poly6 treatment in Calu-3 cells and Vero-E6 cells.
  • FIG. 3 is a diagram showing the proliferation inhibitory ability for SARS-CoV-2 after pre (A), pre/post (B), and post (C) treatment of Poly6 in Calu-3 cells.
  • FIG. 4 is a diagram confirming the antiviral activity of Poly6, RDV, and HCQ against SARS-CoV-2 Nucleocapid primarily through immunofluorescence.
  • 5 is a diagram confirming the antiviral activity of Poly6 against SARS-CoV-2 Nucleocapid through secondary immunofluorescence.
  • FIG. 6 is a diagram confirming the antiviral activity of HCQ against SARS-CoV-2 Nucleocapid through secondary immunofluorescence.
  • FIG. 7 is a diagram confirming the antiviral activity of RDV against SARS-CoV-2 Nucleocapid through secondary immunofluorescence.
  • WB Western blot
  • FIG. 9 is a diagram illustrating a decrease in SARS-CoV-2 NP measured by flow cytometry.
  • 10 is a diagram measuring the antiviral activity of Poly6 in monkey kidney cells VERO-E6.
  • FIG. 11 is a diagram confirming that IFNb gene expression and secretion increased by Poly6 treatment during SARS-CoV-2 infection.
  • type 1 interferon signaling mechanism protein is increased according to Poly6 treatment during SARS-CoV-2 infection.
  • 13 is a diagram confirming the type 1 interferon-dependent antiviral activity of Poly6 after neutralization assay and IFN-related inhibitor treatment.
  • 14 is a diagram showing the synergistic antiviral effects of Poly6 and RDV.
  • 15 is a diagram showing the cytokine and chemokine inhibitory effects according to the treatment of SARS-CoV-2, Poly6 during infection.
  • 16 is a diagram illustrating the measurement of IL6 secretion by ELISA according to Poly6 and RDV treatment after SARS-CoV-2 infection.
  • 17 is a diagram showing the dependence of the anti-inflammatory effect of Poly6 treatment on type 1 interferon.
  • Poly6 shows anti-HIV-1 effect and has antiviral activity on its own was observed, and the anti-HBV effect was also observed in the HBV-carrier mouse model (hydrodynamic injection).
  • the calculated CC50 (cytotoxic concentration 50) according to the measured values was 5.54 mM (A) in Calu-3 cells and 10.94 mM (B) in Vero-E6 cells, confirming that the cells were very stable even at high concentrations (Fig. 2).
  • a probe labeled with FAM fluorescence was added to the PCR reaction solution.
  • the PCR reaction was carried out at 95° C. (5 minutes), followed by (95° C. (10 seconds) - 60° C. (50 seconds)) ⁇ 40 cycles.
  • the IC50 was calculated by deriving the inhibition rate by converting the RT-qPCR analysis value into 100%.
  • the poly6 pre-treatment IC50 value was 2.594 ⁇ M (A)
  • the pre/post treatment IC50 value was 2.232 ⁇ M (B)
  • the post-treatment IC50 value was calculated as 2.617 ⁇ M (C) (FIG. 3).
  • Poly6 was treated at a concentration of 1-100 ⁇ M, and remdesivir, a control drug, was treated at a concentration of 1-10 ⁇ M.
  • Cells were obtained 24 hours (hpi) after infection, treated with RIPA, lysis and protein quantification, and then protein expression was measured after treatment with primary and secondary antibodies.
  • Antiviral activity against SARS-CoV-2 of Poly6 and RDV identified above was analyzed by flow cytometry. After Calu-3 cells were infected with SARS-CoV-2 MOI of 1, 24 hours after each drug treatment, cells were obtained using EDTA. After washing, the samples were stained with SARS-CoV-2 NP antibody for 1 hour and Alexa Flour 488-conjugated goat anti-rabbit IgG (1:200) for 1 hour, and then measured by flow cytometry.
  • the virus only group infected with 1 MOI showed an infection rate of about 90%, and the group treated with RDV and Poly6 showed a reduction rate of about 20% (FIG. 9).
  • the amount of IFN secretion was measured using hMH55-293-IFNb-ISRE-luci cells, which measure the expression level of luciferase according to the amount of IFN.
  • hMH55-293-IFNb-ISRE-luci cells which measure the expression level of luciferase according to the amount of IFN.
  • the inhibitory effect was significantly increased when the two drugs were used in combination compared to when administered alone, which was observed in both the hree-dimensional synergy map and the dose-response matrix, and the Zero Interaction Potency (ZIP) synergy score was measured to be 25.52 (> 10 synergistic effect, 0 ⁇ x ⁇ 10 additive; Fig. 14).
  • ZIP Zero Interaction Potency
  • Type I Interferons as anti-inflammatory mediator.
  • IRF3 activated IRF3 induces IFNb and activates STAT1 and STAT2 and its complex to show an anti-inflammatory effect by increasing IL-10, a powerful anti-inflammatory cytokine.
  • IRF3, IFRL9, STA1, JAK, etc. were significantly increased to increase the transcription level of IL-10, and it was confirmed that IL-1 ⁇ and IL6 were decreased compared to the virus group.
  • the mRNA levels of the cytokine IL6 and the chemokine IL-1 ⁇ were confirmed by measuring the mRNA of the IFNAR neutralized group and the control group. As shown in FIG. 17, the mRNA levels of both cytokines and chemokines that were inhibited in the control group were offset or recovered in the group neutralized with IFNAR. Accordingly, it could be confirmed that the anti-inflammatory effect of Poly6 is also due to the type 1 interferon signaling mechanism.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 약학적 조성물에 관한 것이다. 구체적으로 상기 폴리펩티드는 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드로서, 세포 독성 없이, 항 코로나 바이러스 효과를 가지며, 항염증 효과도 나타낼 수 있으며, 기존의 코로나 바이러스 치료제와 시너지 효과를 나타내는 바, 세계 공중보건에 이바지할 수 있다.

Description

B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 약학적 조성물
B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 약학적 조성물에 관한 것이다.
신종 코로나 바이러스 SARS-CoV-2는 2019년 12월 중국 우한에서 처음 발병한 이후 현재까지 약 220여개국에 질병이 퍼져 있으며 약 6천만명의 감염 확진자 및 140만명이 넘는 사망자를 낳고 있다. 따라서 이를 타개하기 위한 백신 개발이 활발하게 이루어져 오고 있으나 그 효용성 및 안정성이 아직 검증되지 못하였고 이미 감염된 환자들에 대한 치료가 시급할 뿐만 아니라 많은 인구가 COVID19에 면역이 되기 전까지는 아직도 잠재적 사망률에 대한 위험성이 끊임없이 커지고 있다. 따라서 SARS-CoV-2의 증식을 저해할 수 있는 보다 효과적이고 안정적인 약물이 계속해서 시급하게 필요로 되고 있는 실정이다.
SARS-CoV-2는 SARS-CoV와 79%의 genome sequence 및 구조적 유전자들 envelope (E), membrane (M), nucleocapsid (N)의 상동성을 보이며 Spike (S) 유전자는 90%가 넘는 상동성을 보인다(Characteristics of SARS-CoV-2 and COVID-19; Nat Rev Microbiol; 2020 Oct 6; 1-14). 최근 이 두 바이러스를 구분할 수 있는 주요한 특징이 제 1형 인터페론이라는 연구들이 계속해서 보고되고 있다. 즉 SARS-CoV-2의 여러 산물은 제 1형 인터페론의 유도를 억제하며 감염된 환자들에게서는 손상되거나 적은 1형 인터페론 분비가 이루어지며 따라서 SARS-CoV-2는 제 1형 인터페론의 처리에 매우 민감하게 반응한다고 보고되고 있다(Imbalanced host response to SARS-CoV-2 drives development of COVID-19; Cell; 2020 May 28; 181(5); 1036-1045; e9). 이에 따라 IFN의 SARS-CoV-2에 대한 투여가 시도되고 있으나 그 투여 시기에 따라 다른 임상적 결과를 낳는다는 점에 대하여 논쟁이 이루어 지고 있다.
한편 중증 COVID-19 환자들에게서 매우 높은 IL6 및 CXCL, CCL 등과 같은 사이토카인 및 케모카인이 분비되어 사이토카인 폭풍 (cytokine storm)이 일어나는 문제가 크게 대두되고 있으며, 이를 막을 수 있는 여러 저해제를 항바이러스제제와 함께 투여하는 방법이 고려되고 있다. 현재까지도 SARS-CoV-2에 대한 항바이러스제 및 여러 저해제 등에 대한 투여 전략이 개발되고 있으며 실행가능한 치료제의 여러 후보들이 필요한 상황이다.
글로벌 팬데믹 사태를 야기하고 있는 SARS-COV-2에 대한 항바이러스제를 개발하고 이의 세부적 기능을 규명하여 전세계에 만연한 COVID19 감염자의 치료에 여러 가지로 활용할 수 있는 물질을 개발하여 세계 보건에 이바지하고자 한다.
일 양상은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
다른 양상은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 포함하는 코로나 바이러스 감염증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
또 다른 양상은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 건강기능식품을 제공하는 것이다.
또 다른 양상은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 투여하는 단계를 포함하는 코로나 바이러스 감염증의 예방 또는 치료 방법을 제공하는 것이다.
또 다른 양상은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 항 코로나 바이러스용 조성물의 제조에 사용하기 위한 용도를 제공하는 것이다.
일 양상은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 용어 "폴리펩티드(Polypeptide)”는 아마이드 결합 (또는 펩티드 결합)으로 연결된 2개 이상의 아미노산으로 이루어진 폴리머를 의미한다. 상기 폴리펩티드는 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드일 수 있고, 상기 서열번호 1의 아미노산 서열과 각각 약 70% 이상, 약 75% 이상, 약 80% 이상, 약 85%이상, 약 90% 이상, 약 92% 이상, 약 95% 이상, 약 97% 이상, 약 98% 이상, 또는 약 99% 이상의 서열 상동성을 갖는 폴리펩티드를 포함할 수 있다.
또한, 보다 나은 화학적 안정성, 강화된 약리 특성(반감기, 흡수성, 역가, 효능 등), 변경된 특이성(예를 들어, 광범위한 생물학적 활성 스펙트럼), 감소된 항원성을 획득하기 위하여, 상기 폴리펩티드의 N- 또는 C-말단에 보호기가 결합되어 있을 수 있다. 상기 보호기는 아세틸기, 플루오레닐 메톡시 카르보닐기, 포르밀기, 팔미토일기, 미리스틸기, 스테아릴기 또는 폴리에틸렌글리콜(PEG)일 수 있으나, 폴리펩티드의 개질, 특히 폴리펩티드의 안정성 증진시킬 수 있는 성분이라면, 제한없이 포함할 수 있다.
상기 용어 "안정성"은 생체 내 단백질 절단효소의 공격으로부터 본 발명의 폴리펩티드를 보호하는 인 비보(in vivo) 안정성뿐만 아니라, 저장 안정성(예컨대, 상온 저장 안정성)도 의미하는 것일 수 있다.
아울러, 상기 폴리펩티드는 표적화 서열, 태그 (tag), 표지된 잔기를 위한 특정 목적으로 제조된 아미노산 서열도 추가적으로 포함할 수 있다.
상기 용어 "상동성(Homology)"은 야생형 아미노산 서열과의 유사한 정도를 나타내기 위한 것으로서, 이러한 상동성의 비교는 당업계에서 널리 알려진 비교 프로그램을 이용하여 수행할 수 있으며, 2개 이상의 서열간 상동성을 백분율(%)로 계산할 수 있다.
상기 폴리펩티드는 천연으로부터 유래될 수도 있고, 당해 분야에서 널리 공지된 다양한 폴리펩티드 합성 방법으로 획득할 수 있다. 일례로서, 폴리뉴클레오티드 재조합과 단백질 발현 시스템을 이용하여 제조하거나 펩티드 합성과 같은 화학적 합성을 통하여 시험관 내에서 합성하는 방법 및 무세포 단백질 합성법 등으로 제조될 수 있다. 또한, 일례로서, 상기 폴리펩티드는 펩티드, 식물 유래 조직이나 세포의 추출물, 미생물(예를 들어 세균류 또는 진균류, 그리고 특히 효모)의 배양으로 얻어진 생산물일 수 있고, 구체적으로는 B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus, HBV) 중합효소로부터 유래되는 것일 수 있고, 보다 구체적으로 HBV 중합효소의 preS1 영역에서 유래되는 것일 수 있다.
상기 폴리펩티드는 항 코로나 바이러스 활성을 가질 수 있다. 구체적으로 상기 코로나 바이러스는 SARS-CoV-2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2)일 수 있다.
일 양상에 있어서, 상기 폴리펩티드는 코로나 바이러스의 증식을 억제함으로써 항 코로나 바이러스 활성을 가지는 것일 수 있고, 상기 폴리펩티드는 뉴클레오캡시드 단백질(Nucleocapsid protein) 및 스파이크 단백질(Spike protein)으로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 단백질의 발현을 억제하여 항 코로나 바이러스 활성을 나타내는 것일 수 있다.
또한, 일 양상에 있어서, 상기 폴리펩티드는 제1 형 인터페론의 발현을 증가시키는 것일 수 있고, 상기 제1 형 인터페론은 IFN-α, IFN-β, IFN-ε, IFN-κ 및 IFN-ω로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 인터페론일 수 있고, 구체적으로 IFN-β일 수 있다.
또한, 일 양상에 있어서, 상기 약학적 조성물은 코로나 바이러스 치료제를 더 포함할 수 있다.
상기 코로나 바이러스 치료제는 공지의 코로나 바이러스 치료제일 수 있고, 새로이 개발될 코로나 바이러스 치료제일 수도 있다.
구체적으로, 상기 코로나 바이러스 치료제는 로피나비르-리토나비르(Lopinavir-Ritonavir), 파비피라비르(Favipiravir), 소포스부비르(Sofosbuvir), 리바비린(Ribavirin), 클로로퀸(Chloroquine), 하이드록시클로로퀸(Hydroxychloroquine), 덱사메타손(Dexamethasone), 인플릭시맙(Infliximab), 이버멕틴(Ivermectin), 토실리주맙(Tocilizumab), 나파모스타트(Nafamostat), 피로나리딘-알테수네이트(pyronaridine-artesunate), 라니티딘 비스무스 구연산염(Ranitidine bismuth citrate), 렘데시비르(Remdesivir), 카시리비맙-임데비맙(Casirivimab-imdevimab), 레그단비맙(Regdanvimab) 및 보셉프레비르(Boceprevir)로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 치료제일 수 있고, 보다 구체적으로, 상기 코로나 바이러스 치료제는 렘데시비르(Remdesivir)일 수 있다.
일 양상에 있어서, 상기 폴리펩티드와 상기 렘데시비르(Remdesivir)의 조성물 내 비율은 1:1 내지 10:1, 2:1 내지 10:1, 3:1 내지 10:1, 1:1 내지 8:1, 2:1 내지 8:1, 3:1 내지 8:1, 1:1 내지 6:1, 2:1 내지 6:1 또는 3:1 내지 6:1일 수 있다.
상기 폴리펩티드와 상기 렘데시비르의 조성물 내 비율이 1:1 내지 10:1인 경우, 항 코로나 바이러스 효과가 현저하게 증가하여 시너지 효과를 나타낼 수 있고, 상기 폴리펩티드와 상기 렘데시비르의 조성물 내 비율이 1:1 미만이거나, 10:1 초과인 경우에는 상기 시너지 효과가 적어질 수 있다.
일 양상에 있어서, 상기 폴리펩티드는 IL-1β, IL-6로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 단백질의 발현을 억제하는 것일 수 있다.
상기 폴리펩티드는 제1 형 인터페론의 발현을 증가시키고, IL-10의 발현은 증가시키며, IL-1β 및 IL-6로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 단백질의 발현은 억제시킴으로써, 항염증 효과를 더 나타낼 수 있다.
상기 용어 "예방"은 일 양상에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 개체의 바이러스로 인한 질병을 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미할 수 있다.
상기 용어 "치료"는 일 양상에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 개체의 바이러스로 인한 질병에 대한 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미할 수 있다.
상기 약학적 조성물은 유효성분을 단독으로 포함하거나, 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 포함하여 약학적 조성물로 제공될 수 있다.
구체적으로, 상기 담체는 예를 들어, 콜로이드 현탁액, 분말, 식염수, 지질, 리포좀, 미소구체(microspheres) 또는 나노 구형입자일 수 있다. 이들은 운반 수단과 복합체를 형성하거나 관련될 수 있고, 지질, 리포좀, 미세입자, 금, 나노입자, 폴리머, 축합 반응제, 다당류, 폴리아미노산, 덴드리머, 사포닌, 흡착 증진 물질 또는 지방산과 같은 당업계에 공지된 운반 시스템을 사용하여 생체 내 운반될 수 있다.
또한, 상기 약학적 조성물이 제제화될 경우에는 통상적으로 사용하는 윤활제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제, 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함될 수 있고, 이러한 고형제제는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calciumcarbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 있으며, 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propyleneglycol), 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로 제라틴 등이 사용될 수 있고, 점안제 형태로 제조 시 공지의 희석제 또는 부형제 등이 사용될 수 있다.
상기 용어 "약학적으로 허용되는"이란 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다.
상기 용어 "개체"는 바이러스로 인한 질병의 치료를 필요로 하는 대상을 의미하며, 보다 구체적으로 인간 또는 비-인간인 영장류, 생쥐 (mouse), 개, 고양이, 말 및 소 등의 포유류를 의미할 수 있다.
상기 약학적 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구투여(예를 들어, 근육 내, 정맥 내, 복강 내, 피하, 피내, 또는 국소에 적용)할 수 있다.
상기 용어 "투여"란 적절한 방법으로 개체에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미한다.
또한, 상기 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 상기 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 구체적으로, 상기 약학적 조성물은 0.01 내지 1000 mg/kg/day로, 보다 구체적으로 0.1 내지 500 ㎎/kg/day로 투여될 수 있다. 상기 투여는 하루에 한 번 투여되는 것일 수도 있고, 수 회 나누어 투여되는 것일 수도 있다.
일 양상에 따른 약학적 조성물은 개별적으로 투여되거나 다른 항 코로나 바이러스 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 공지의 항 코로나 바이러스 치료제와는 동시에, 별도로, 또는 순차적으로 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
구체적으로, 상기 약학적 조성물의 유효량은 환자의 연령, 성별, 상태, 체중, 체내에 활성 성분의 흡수도, 불활성율, 배설 속도, 질병 종류, 병용되는 약물에 따라 달라질 수 있으며, 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라 증감될 수 있다.
다른 양상은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 포함하는 코로나 바이러스 감염증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 "서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드", "코로나 바이러스", "예방", "치료", "약학적 조성물" 등은 전술한 범위 내일 수 있다.
일 양상에 있어서, 상기 코로나 바이러스 감염증은 무증상, 발열, 권태감, 기침, 호흡곤란, 폐렴, 신부전, 신장 기능 장애, 패혈성 쇼크, 가래, 인후통, 두통, 객혈, 오심 및 설사로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 증상일 수 있다.
또한, 일 양상에 있어서, 상기 폴리펩티드는 항염증 효과를 더 나타내는 것일 수 있다.
상기 폴리펩티드는 제1 형 인터페론의 발현을 증가시키고, IL-10의 발현은 증가시키며, IL-1β 및 IL-6로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 단백질의 발현은 억제시킴으로써, 항염증 효과를 더 나타낼 수 있다.
또 다른 양상은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 건강기능식품을 제공한다.
상기 폴리펩티드는 코로나 바이러스 감염증을 예방 또는 개선시킬 수 있다.
상기 "서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드", "코로나 바이러스", "예방", "코로나 바이러스 감염증" 등은 전술한 범위 내일 수 있다.
상기 용어 "개선"이란 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예를 들어, 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미할 수 있다. 이때, 상기 건강기능식품은 코로나 바이러스 감염증의 예방 또는 개선을 위하여 해당 질환의 발병 단계 이전 또는 발병 후, 치료를 위한 약제와 동시에 또는 별개로서 사용될 수 있다.
상기 건강기능식품에서, 유효성분은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 상기 건강기능식품은 원료에 대하여 구체적으로 약 15 중량% 이하, 보다 구체적으로 약 10 중량% 이하의 양으로 첨가될 수 있다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있다.
상기 건강기능식품은 담체, 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제, 부형제 또는 첨가제 중 하나 이상을 더 포함하여 정제, 환제, 산제, 과립제, 분말제, 캡슐제 및 액제 제형으로 이루어진 군에서 선택된 하나로 제형될 수 있다. 상기 첨가될 수 있는 식품으로는, 각종 식품류, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽제, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성 식품류 등이 있다.
상기 담체, 부형제, 희석제 및 첨가제의 구체적인 예로는 락토즈, 덱스트로즈, 슈크로즈, 솔비톨, 만니톨, 에리스리톨, 전분, 아카시아 고무, 인산칼슘, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 미세결정성 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 메틸셀룰로즈, 물, 설탕시럽, 메틸셀룰로즈, 메틸 하이드록시 벤조에이트, 프로필하이드록시 벤조에이트, 활석, 스테아트산 마그네슘 및 미네랄 오일로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있다.
상기 건강기능식품은 상기 유효성분을 함유하는 것 외에 특별한 제한없이 다른 성분들을 필수 성분으로서 함유할 수 있다. 예를 들어, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당 알코올일 수 있다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제 (타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어, 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 당업자의 선택에 의해 적절하게 결정될 수 있다.
상기 외에도, 일 양상에 따른 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있으며, 이러한 첨가제의 비율 또한 당업자에 의해 적절히 선택될 수 있다.
또 다른 양상은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 투여하는 단계를 포함하는 코로나 바이러스 감염증의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
상기 "서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드", "투여", "코로나 바이러스 감염증", "예방", "치료" 등은 전술한 범위 내일 수 있다.
서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드는 세포 독성 없이, 항 코로나 바이러스 효과를 가지며, 항염증 효과도 나타낼 수 있으며, 기존의 코로나 바이러스 치료제와 시너지 효과를 나타내는 바, 세계 공중보건에 이바지할 수 있다.
도 1은 항코로나 바이러스능을 가진 HBV 유래 폴리펩티드의 선별 과정을 나타낸 도이다.
도 2는 Calu-3세포 및 Vero-E6 세포에서 Poly6처리에 따른 세포독성 측정(MTS assay)을 나타낸 도이다.
도 3은 Calu-3 세포에서 Poly6의 pre(A), pre/post(B), post(C) 처리 후 SARS-CoV-2에 대한 증식 저해 능력을 나타낸 도이다.
도 4는 1차적으로 면역형광검사법 (Immunofluorescence)을 통한 SARS-CoV-2 Nucleocapid 에 대한 Poly6, RDV, HCQ의 항바이러스 능을 확인한 도이다.
도 5는 2차적으로 면역형광검사법 (Immunofluorescence)을 통한 SARS-CoV-2 Nucleocapid 에 대한 Poly6의 항바이러스 능을 확인한 도이다.
도 6은 2차적으로 면역형광검사법 (Immunofluorescence)을 통한 SARS-CoV-2 Nucleocapid 에 대한 HCQ의 항바이러스 능을 확인한 도이다.
도 7은 2차적으로 면역형광검사법 (Immunofluorescence)을 통한 SARS-CoV-2 Nucleocapid 에 대한 RDV의 항바이러스 능을 확인한 도이다.
도 8은 SARS-CoV-2 Nucleocapsid protein (NP) 및 Spike (S) 항원에 대한 웨스턴블롯 (WB) 결과를 나타낸 도이다.
도 9는 유세포분석측정법(Flow cytometry)으로 SARS-CoV-2 NP 감소치를 측정한 도이다.
도 10은 원숭이 신장 세포 VERO-E6에서 Poly6의 항바이러스능을 측정한 도이다.
도 11은 SARS-CoV-2 감염시 Poly6처리에 의한 IFNb 유전자 발현 및 분비가 증가된 것을 확인한 도이다.
도 12는 SARS-CoV-2 감염 시 Poly6 처리에 따른 제 1형 인터페론신호기전 단백 발현이 증가됨을 확인한 도이다.
도 13은 Neutralization assay 및 IFN-related inhibitor 처리 후 Poly6의 제 1형 인터페론 의존적 항바이러스능을 확인한 도이다.
도 14는 Poly6 와 RDV 의 synergistic antiviral effects를 나타낸 도이다.
도 15는 SARS-CoV-2, 감염 시 Poly6의 처리에 따른 사이토카인 및 케모카인 저해 효과를 나타낸 도이다.
도 16은 SARS-CoV-2 감염 후 Poly6 및 RDV 처리에 따른 IL6 분비량을 ELISA로 측정한 도이다.
도 17은 Poly6 처리에 의한 항염 효과의 제 1형 인터페론 의존성을 나타낸 도이다.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예
1. 항 코로나 바이러스용 B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드의 개발
HBV 유전자 C형의 간 질환 발전에 연관이 있는 변이주들을 스크리닝하고, 유전자 C2형 B형 만성 간염 바이러스 환자들에게서 HBV preS1 시작 부위의 15, 18, 21개의 뉴클레오타이드 결함을 발견하여 이것이 환자 체내에서 HBV 증식 및 간 질환 발전에 주요한 연관성이 있는 것을 발견하였다.
스크리닝 된 펩타이드들 중, 폴리머레이즈 부위와 중첩되는 preS1 결손 부위(5-7개의 아미노산)가 HBV 증식 및 항바이러스 반응과 큰 관련이 있다는 가설을 세우고 이 폴리펩타이드 후보군(poly5, poly6 및 poly 7)을 개발하였다(도 1).
폴리펩타이드 후보군인 Poly5 (GRLVF, 서열번호 2), Poly6 (GRLVFQ, 서열번호 1) 및 Poly7 (GRLVFQT, 서열번호 3) 중 Poly6(또는 Pol6)는 항 HIV-1 효과를 보이며 자체적으로 항바이러스능이 있음이 관찰되었고 또한 HBV-carrier mouse model에서 (hydrodynamic injection) 항 HBV 효과 역시 관찰되었다.
나아가, 상기 Poly6 (GRLVFQ, 서열번호 1)가 항 코로나 바이러스(Anti-SARS-CoV-2) 효과가 있는지 확인하고자 하였다.
2. 인간 폐 상피세포(Calu-3) 및 원숭이 신장세포(Vero-E6)에서 Poly6의 세포독성 확인
SARS-CoV-2에 대한 Poly6의 항바이러스능을 측정하기 전 COVID-19 연구에 많이 쓰이는 두 세포주인 인간 폐 상피 세포 Calu-3 및 원숭이 신장세포 VERO-E6에서 Poly6의 세포 독성을 MTS 어세이를 통해 측정하였다. 두 세포주를 96웰 플레이트에 seeding 후 Poly6의 여러 농도 (10, 5, 2.5, 1.25, 0.625, 0.32, 0.16, 0.08, 0.04, 0.02, 0.01 및 0.005 mM)로 24시간동안 37도에서 처리 후 세포 생존 능력 (viability)를 측정해보았다.
그 결과, 측정 값에 따라 산출된 CC50 (cytotoxic concentration 50)은 Calu-3 세포에서는 5.54 mM(A), Vero-E6 세포에서는 10.94 mM(B)로서 고 농도에서도 세포가 매우 안정적임을 확인하였다(도 2).
3. Calu-3 세포에서 SARS-CoV-2 에 대한 Poly6의 증식 저해 능력의 확인
SARS-CoV-2에 대한 Poly6의 직접적인 항바이러스능을 측정하기 위하여 인간 폐 상피세포 Calu-3를 Seeding한 후 BSL3 실험실에서 SARS-CoV-2를 0.1 MOI로 감염시켰다. 이 때, Poly6는 pre, post, 또는 pre/post로 농도 별로 처리하였다(감염 기준). 48시간 뒤 상층액을 걷어 Trizol-LS 처리 후 eptube에 수득 한후 total-RNA를 추출한 뒤 nano-drop으로 농도를 재고 cDNA를 합성하였다. RT-qPCR을 진행하기 위해 viral RNA를 합성하는 RNA-dependent RNA polymerase(RdRp) 유전자 부분에 해당하는 primer를 반응시켰다(표 1). RdRp의 증폭의 경우 FAM 형광 표식의 probe를 PCR 반응액에 첨가하였다. PCR 반응은 95℃(5분) 후 (95℃(10초) - 60℃(50초)) × 40 사이클의 과정을 진행하였다. RT-qPCR 분석 값을 100%로 환산하여 inhibition rate를 도출하여 IC50을 구하였다.
그 결과, Poly6 pre처리시 IC50값은 2.594 μM(A), pre/post 처리시 IC50값은 2.232 μM(B), 그리고 post 처리시 IC50값은 2.617 μM(C)로 산출되었다(도 3).
프라이머 종류 프라이머 서열 서열번호
RdRp-F 5'-GTGARATGGTCATGTGTGGCGG-3' 4
RdRp-R 5'-CARATGTTAAASACACTATTAGCATA-3' 5
RdRp-probe 5'-FAM-CCAGGTGGWACRTCATCMGGTGATGC-BHQ-3' 6
4. 면역형광검사법 (Immunofluorescence)을 통한 SARS-CoV-2 Nucleocapid 에 대한 항바이러스능의 확인
SARS-CoV-2에 대한 Poly6의 항바이러스능을 면역 항체 어세이로 검증해보고자 독립적인 실험을 1, 2차로 진행하였다. 이 때, 대조비교군은 렘데시비르 및 클로로퀸으로 설정하였다.
1차 실험 결과 SARS-CoV-2 Nucleocapsid (NP) 항원에 대해 Virus only로 약물을 처리하지 않은 그룹에서는 극명한 NP의 발현을 Alexa488로 확인할 수 있었으나, Poly6 또는 대조약물 Remdesivir(RDV) 를 처리한 Calu-3 세포에서는 그 감소효과를 유의하게 확인할 수 있었다(도 4). 한편, Vero E6에서는 SARS-CoV-2에 항바이러스능이 있지만 Calu-3 세포에서는 그 효과가 미미하다고 알려져 있는 또 다른 대조 약물인 Hydroxychloroquine sulfate (HCQ)은 위 Immunofluorescence 결과에서 보이는 것과 같이 HCQ를 100 μM 처리시 독성이 보여지나 그럼에도 불구하고 NP의 감소효과는 확인되지 않았다.
2차 실험에서는 그 범위를 세분화 하여 Poly6 및 렘데시비르의 경우 0.1 ~ 50 μM의 농도에서, HCQ의 경우 0.49 ~ 250 μM의 농도를 처리 후 SARS-CoV-2의 NP 발현량을 관찰하였다. 이를 분석하여 Immunofluorescence and Dose-response curve (DRC)를 도출하였다.
그 결과, Poly6의 경우 EC50(1.555 μM; 도 5), 렘데시비르의 경우 EC50(0.77 μM; 도 7)로 산출되었다. 반면, 클로로퀸은 매우 높은 EC50(101.2 μM; 도 6)을 나타내었다.
5. 웨스턴 블롯(Western Blot assay)을 통한 Nucloecapsid protein (NP) 및 Spike protein (S) 감소의 확인
SARS-CoV-2에 대한 Poly6의 항바이러스 효과를 단백 레벨에서 검증 해보기 위해 웨스턴 블롯을 수행하였다.
Poly6는 1-100 μM의 농도로 처리하였고, 컨트롤 약물인 렘데시비르는 1-10 μM의 농도로 처리하였다. 세포는 감염 후 24시간(hpi)에 수득하여 RIPA로 처리하여 lysis 및 단백 정량 후 1차 항체 및 2차 항체 처리 후 단백 발현을 측정하였다.
그 결과, Spike (S) 항원에 대한 항바이러스 효과는 Poly6의 10 μM 처리시부터 유의하게 나타났으며 Nucleocapsid protein (NP)항원에 대한 항바이러스 효과는 Poly6 1 μM 처리 시부터 유의한 감소 효과를 보였다. 이를 GAPDH로 보정하여 intensity를 도표화하여 나타낸 그래프는 도 8의 우측과 같이 도출되었다. 이를 통해 Poly6의 Calu-3 세포에서 SARS-CoV-2에 대한 항바이러스능이 RNA 레벨뿐 아니라 단백 레벨에서도 확인됨을 검증할 수 있었다(도 8).
6. 유세포측정분석법(Flow cytometric analysis)을 통한 Nucleocapsid protien 감소의 확인
상기 확인한 Poly6 및 RDV의 SARS-CoV-2에 대한 항바이러스 능을 유세포측정 분석법을 통해 분석하였다. Calu-3 세포를 SARS-CoV-2 1 MOI로 감염시킨 뒤 각 약물을 처리 후 24시간 뒤 세포를 EDTA를 사용하여 수득하였다. Washing 후 SARS-CoV-2 NP 항체로 1시간, Alexa Flour 488-conjugated goat anti-rabbit IgG (1:200)로 1시간 염색 후 flow cytometry로 측정하였다.
그 결과, 1 MOI로 감염한 Virus only 군에서는 약 90%의 감염률을 보였고, RDV와 Poly6를 처리한 군에서는 약 20%의 감소율이 확인되었다(도 9).
7. Poly6의 SARS-CoV-2에 대한 항바이러스 효과의 제 1형 인터페론 의존성 규명
상기 기술된 SARS-CoV-2에 대한 Poly6의 항바이러스능의 기전에 대하여 규명하고자 여러 어세이를 진행하였다. 먼저 인간 폐 상피세포인 Calu-3에서 Poly6가 보이던 SARS-CoV-2에 대한 증식 저해 효과가 원숭이 신장세포 VERO-E6에서는 확인되지 않음을 RT-qPCR 및 플라크 어세이를 통해 관찰하였다(도 10). VERO-E6는 제 1형 인터페론을 encoding하는 유전자가 저해되어 있음이 알려져 있어, Poly6의 SARS-CoV-2에 대한 증식 저해 효과가 제 1형 인터페론 신호기전을 통한 것이라는 가설을 세우고 여러 어세이들을 진행하였다.
8. Poly6의 처리로 인한 IFNb 유전자 up-regulation 및 세포 외 분비 증가
SARS-CoV-2 감염 시 Poly6의 처리로 인한 제 1형 인터페론 증가 양상을 먼저 확인하기 위해 세포 내 mRNA레벨을 측정하였다. 세포 내에서 total RNA 추출 후 cDNA를 합성한 후 IFNb를 18s 유전자로 보정하여 증가량을 분석하였다.
그 결과, Virus only 그룹 및 렘데시비르, 클로로퀸 처리 군에서는 차이가 확인되지 않았으나 Poly6를 처리한 군에서 유의하게 IFNb의 mRNA가 증가함을 확인하였다(도 11(A)).
유전자 레벨뿐만 아니라 세포 외 IFNb의 분비량이 달라지는 지 추가적으로 확인하기 위해 IFN 양에 따라 luciferase 발현량을 측정하는 hMH55-293-IFNb-ISRE-luci 세포를 사용하여 IFN 분비량을 측정하였다. SARS-CoV-2가 감염된 Calu-3세포에 Poly6를 처리 후 24시간 뒤 배양액을 수득하고 이를 hMH55-293-IFNb-ISRE-luci 세포에 4시간동안 배양한 뒤 세포를 lysis후 luciferase 값을 측정하였다.
그 결과, SARS-CoV-2의 감염으로 세포 단일군에 비해 slightly 감소하였던 IFNb 분비량이 Poly6처리 후 약 30%가 증가하는 경향을 확인하였다. 이에 따라 Poly6가 SARS-CoV-2 감염 시 처리로 IFNb를 유전자 레벨 및 분비 레벨에서 증가시킴을 확인하였다(도 11(B)).
9. SARS-CoV-2 감염 후 Poly6 처리에 따른 제 1형 인터페론신호기전 단백 발현의 증가
SARS-CoV-2 감염 시 Poly6의 처리가 제 1형 인터페론의 신호기전을 유도 및 증가시키는지 단백 레벨에서 확인해보기 위해 웨스턴 블롯을 진행하여 제 1형 인터페론 신호 인자들로 잘 알려진 IRF3, phosphor-IRF3, STAT1, phosphor-STAT1을 발현 시켜 측정해보았다.
그 결과, IRF3 및 STAT1의 phosphorylation이 증가되는 것이 단백 레벨에서 유의하게 확인되었다. 따라서 Poly6가 IRF3-type IIFN axis를 따라 제 1형 인터페론을 유도시킴을 확인하였다(도 12).
10. SARS-CoV-2 감염 후 Poly6의 처리에 따른 유전자 전사 (transcriptional) 레벨의 확인 - 제 1형 인터페론 관련 mRNA인자 측정
SARS-CoV-2 감염 전후 GV1001의 처리시 유전자 전사(transcriptional) 레벨을 여러가지 type I IFN에 관련된 mRNA들을 측정해보고 이를 통해 Heatmap을 도출해보았다. 구체적으로, 분석은 qPCR-array를 통해 Bioneer에서 array분석 서비스를 제공받았으며, 측정한 mRNA 인자들은 SARS-CoV-2 감염 시 Uiversal IFNβ을 처리하였을 때 상향조절(up-regulation)되었다고 알려진 유전인자들인 IFI6, IFI30, IFIH1, IFNA2, ISG15, CD86, MYD88, IFNB1, TYK2, JAK1, IRF9, DDX58, IFITM1, IFNA1, GBP1, IFITM2, PSME2, IFIT2, IFNA4, ISG20, STAT1, IFNAR2, IRF3, IFI16, TLR9, IFI27, NOS2, TICAM1, IRF2, CAV1, OAS2 및 TLR7을 확인한 결과, 제 1형 인터페론 관련 유전인자들이 유의하게 증가하는 것을 확인하였다.
11. Poly6의 제1형 인터페론 의존적 항바이러스 효능의 확인 - IFNAR neutralization 및 신호기전 저해제
상기 기술된 Poly6의 제1형 인터페론 유도능이 SARS-CoV-2의 증식을 저해하는 주요 신호기전이라는 것을 규명하기 위해 IFNAR를 neutralization 시키거나 인터페론 신호 기전에 관련된 신호 저해제를 사용하여 항바이러스 능을 측정해 보았다.
그 결과, Isotype IgG를 처리한 컨트롤 그룹에서는 Poly6가 RDV와 유의한 SARS-CoV-2 저해효과를 보였으나 IFNAR로 type IIFN 수용체를 neutralization 시킨 그룹에서는 Poly6의 항바이러스능이 모두 상쇄되었음을 알 수 있었다(도 13(A)).
또한, IFN 신호기전의 여러 저해제 Ruxolinitib, AZD1480 등을 처리한 어세이에서 또한 RDV에서는 저해제들의 처리와는 상관없이 SARS-CoV-2에 대한 저해 능력을 보였으나 Poly6는 저해제 특히 JAK 신호 저해제의 처리와 함께 SARS-CoV-2의 증식이 많이 회복되는 것을 확인할 수 있었다(도 13(B)). 이에 따라 Poly6의 SARS-CoV-2에 대한 항바이러스 효과가 제 1형 인터페론 신호기전에 의존적임을 다시 확인하였다.
12. Poly6 및 렘데시비르의 병용 효과의 synergistic effects(상승적 병용효과)
한편 현재 상용되고 있는 치료제인 렘데시비르와 Poly6의 병용 투여 시 SARS-CoV-2에 대한 synergistic antiviral effect가 관찰되는지를 병용 처리 및 RT-qPCR 어세이를 통해 측정해보았다. SARS-CoV-2의 감염 후 Poly6 (5-10 μM) 와 RDV (1-2.5 μM)를 단독 처리 및 병용 처리하여 48시간동안 배양한 후 상층액을 수득하고 이를 위에 기술한 방법으로 cDNA를 합성 후 RT-qPCR로 RdRp 양을 측정해 보았다. 결과 분석은 SynergyFinder 프로그램을 통해 저해 효과를 확인하였다(Dose-response-matrix에서 저해률을 100%로 보정한 것으로 0은 바이러스 단독, 100은 바이러스 없음을 뜻함).
그 결과, 단독 투여 시에 비해 두 약물의 병용시 저해 효과가 유의하게 증가하였고 이는 hree-dimensional synergy map 및 dose-response matrix에서 모두 관찰되었으며 Zero Interaction Potency (ZIP) synergy score는 25.52로 측정되었다(>10 synergistic effect, 0<x<10 additive; 도 14).
13. SARS-CoV-2 감염시 Poly6의 처리에 따른 항염 효과의 확인(사이토카인 및 케모카인 저해)
SARS-CoV-2 감염 시 크게 증가되는 것으로 알려진 IL-6 및 CXCL과 같은 사이토카인 및 케모카인이 Poly6의 처리시 크게 완화되는 것을 확인하였다. Calu-3에서 SARS-CoV-2 감염시 IL6, VEGFA 등이 유의하게 증가하였고 이러한 염증 반응이 Poly6처리 군에서는 유의하게 감소되는 것이 유전자레벨에서 확인되었다(도 15). 이러한 항염 효과는 유전자 레벨뿐만 아니라 세포 외 사이토카인 분비레벨에서도 확인이 되었는데, 감염 후 약물 처리된 상층액을 수득하여 human IL-6 ELISA로 분비 레벨을 측정하였을 때에 RDV에서는 차이 없음을, Poly6처리 군에서는 IL6량이 감소함을 확인하였다(도 16).
이러한 항염 효과 역시 Poly6의 제 1형 인터페론 유도능에 의한 것임을 확인할 수 있었는데, type I IFN은 anti-viral 효능 및 anti-inflammatory 효과가 있음이 여러 연구들을 통해 밝혀진바 있다(Type I Interferons as anti-inflammatory mediator, Anti-inflammatory properties of Type I interferons). 활성화된 IRF3가 IFNb를 유도하고 STAT1 및 STAT2 그리고 그 complex를 활성화시켜 강력한 항염 사이토카인인 IL-10을 증가시킴으로써 항염 효과를 보임을 보고하고 있으며, 본 실험에서도 이와 마찬가지로 도 15에서 보는 바와 같이 Poly6의 처리시 IRF3, IFRL9, STA1, JAK등이 유의하게 증가하여 IL-10의 transcription level을 증가시키고 이를 통해 virus 군에 비하여 IL-1β 및 IL6가 감소함을 확인하였다.
14. SARS-CoV-2 감염시 Poly6 처리로 인한 항염효과의 제1 형 인터페론 의존성
이러한 Poly6의 항염 효능이 제 1형 인터페론 의존성을 보인다는 것을 재확인하기 위하여 IFNAR를 neutralization 시킨 그룹과 대조군의 mRNA를 측정하여 사이토카인 IL6 및 케모카인 IL-1β 의 transcription level을 확인하였다. 도 17과 같이 컨트롤 그룹에서 저해되었던 두 사이토카인 및 케모카인의 mRNA 레벨은 IFNAR로 neutralization 시킨 그룹에서 상쇄되거나 회복되는 경향을 확인할 수 있었다. 이에 따라 Poly6가 보이는 항염 효과 역시 제 1형 인터페론 신호 기전으로 인한 작용임을 규명할 수 있었다.

Claims (17)

  1. 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 약학적 조성물.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 폴리펩티드는 B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드인, 약학적 조성물.
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 코로나 바이러스는 SARS-CoV-2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2)인, 약학적 조성물.
  4. 청구항 1에 있어서, 상기 폴리펩티드는 코로나 바이러스의 증식을 억제하는 것인, 약학적 조성물.
  5. 청구항 1에 있어서, 상기 폴리펩티드는 뉴클레오캡시드 단백질(Nucleocapsid protein) 및 스파이크 단백질(Spike protein)으로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 단백질의 발현을 억제하는 것인, 약학적 조성물.
  6. 청구항 1에 있어서, 상기 폴리펩티드는 제1 형 인터페론의 발현을 증가시키는 것인, 약학적 조성물.
  7. 청구항 6에 있어서, 상기 제1 형 인터페론은 IFN-β인, 약학적 조성물.
  8. 청구항 1에 있어서, 상기 약학적 조성물은 코로나 바이러스 치료제를 더 포함하는 것인, 약학적 조성물.
  9. 청구항 8에 있어서, 상기 코로나 바이러스 치료제는 렘데시비르(Remdesivir)인, 약학적 조성물.
  10. 청구항 9에 있어서, 상기 폴리펩티드와 상기 렘데시비르(Remdesivir)의 조성물 내 비율은 1:1 내지 10:1인, 약학적 조성물.
  11. 청구항 1에 있어서, 상기 폴리펩티드는 IL-1β 및 IL-6로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 단백질의 발현을 억제하는 것인, 약학적 조성물.
  12. 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 포함하는 코로나 바이러스 감염증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  13. 청구항 12에 있어서, 상기 코로나 바이러스 감염증은 무증상, 발열, 권태감, 기침, 호흡곤란, 폐렴, 신부전, 신장 기능 장애, 패혈성 쇼크, 가래, 인후통, 두통, 객혈, 오심 및 설사로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 증상인, 약학적 조성물.
  14. 청구항 12에 있어서, 상기 폴리펩티드는 항염증 효과를 더 나타내는 것인, 약학적 조성물.
  15. 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 건강기능식품.
  16. 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 투여하는 단계를 포함하는 코로나 바이러스 감염증의 예방 또는 치료 방법.
  17. 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩티드를 항 코로나 바이러스용 조성물의 제조에 사용하기 위한 용도.
PCT/KR2021/020259 2020-12-30 2021-12-30 B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 약학적 조성물 WO2022146070A1 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200188375A KR102625620B1 (ko) 2020-12-30 2020-12-30 B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 약학적 조성물
KR10-2020-0188375 2020-12-30

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2022146070A1 true WO2022146070A1 (ko) 2022-07-07

Family

ID=82259512

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2021/020259 WO2022146070A1 (ko) 2020-12-30 2021-12-30 B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 약학적 조성물

Country Status (2)

Country Link
KR (1) KR102625620B1 (ko)
WO (1) WO2022146070A1 (ko)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20190128999A (ko) * 2018-05-09 2019-11-19 서울대학교산학협력단 B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드 및 이의 항바이러스 용도
KR20200107958A (ko) * 2018-01-08 2020-09-16 엔지메티카 에이비 코로나바이러스 감염의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 프로테아제 활성을 갖는 펩타이드

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20200107958A (ko) * 2018-01-08 2020-09-16 엔지메티카 에이비 코로나바이러스 감염의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 프로테아제 활성을 갖는 펩타이드
KR20190128999A (ko) * 2018-05-09 2019-11-19 서울대학교산학협력단 B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드 및 이의 항바이러스 용도

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHOI YU-MIN, JEONG HYEIN, PARK UNI, CHO NAM-HYUK, KIM BUM-JOON: "A Hepatitis B Virus-Derived Peptide Can Inhibit Infection of Human Lung Cells with SARS-CoV-2 in a Type-1 Interferon-Dependent Manner", VIRUSES, vol. 13, no. 7, 1 January 2021 (2021-01-01), pages 1 - 13, XP055948425, DOI: 10.3390/v13071227 *
ERWAN SALLARD; FRANÇOIS-XAVIER LESCURE; YAZDAN YAZDANPANAH; FRANCE MENTRE; NATHAN PEIFFER-SMADJA: "Type 1 interferons as a potential treatment against COVID-19", ANTIVIRAL RESEARCH, vol. 178, 1 June 2020 (2020-06-01), NL , pages 1 - 5, XP055768812, ISSN: 0166-3542, DOI: 10.1016/j.antiviral.2020.104791 *
TAI WANBO; ZHANG XIUJUAN; HE YUXIAN; JIANG SHIBO; DU LANYING: "Identification of SARS-CoV RBD-targeting monoclonal antibodies with cross-reactive or neutralizing activity against SARS-CoV-2", ANTIVIRAL RESEARCH, vol. 179, 13 May 2020 (2020-05-13), NL , pages 1 - 6, XP086177877, ISSN: 0166-3542, DOI: 10.1016/j.antiviral.2020.104820 *

Also Published As

Publication number Publication date
KR20220096166A (ko) 2022-07-07
KR102625620B1 (ko) 2024-01-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2019216603A1 (ko) B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드 및 이의 항바이러스 용도
AU2009293493B2 (en) Combination of HCV NS3 protease inhibitor with interferon and ribavirin
WO2021206309A1 (en) Pharmaceutical composition for prevention or treatment of diseases caused by sars-cov-2
WO2022103138A1 (ko) 비피도박테리움 롱검 rapo (kctc13773bp)를 포함하는 암 예방 또는 치료용 조성물
KR20120106942A (ko) Ｂｉ２０１３３５, 인터페론 알파 및 리바비린을 포함하는 ｈｃｖ 병용 치료요법을 위한 투여 용법
WO2022146070A1 (ko) B형 간염 바이러스 유래 폴리펩티드를 포함하는 항 코로나 바이러스용 약학적 조성물
WO2016159582A2 (ko) 형개 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 조성물
WO2021194290A1 (ko) 유행성 rna 바이러스 감염질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물
CN113398219A (zh) 橘红痰咳浸膏在制备抑制人冠状病毒感染的药物中的用途
WO2022173165A1 (ko) 흑삼을 유효성분으로 포함하는 코로나 바이러스 감염의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
WO2016159584A2 (ko) 상지 또는 상백피 추출물을 유효성분으로 함유하는 선천면역 증진 및 항바이러스용 조성물
WO2021215616A1 (ko) 폴리포스페이트를 포함하는 코로나바이러스 감염 또는 감염 질환의 치료용 조성물
Derymedvid et al. Side effects of antiviral drugs used in respiratory infections: a review
WO2022085806A1 (ko) 코로나바이러스 감염 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
CN114903897B (zh) 千金藤素在制备抗蜱传脑炎病毒药物中的应用
WO2023149593A1 (ko) 플로로푸코퓨로엑콜 a를 유효성분으로 포함하는 바이러스 감염 질환 개선, 예방 또는 치료용 조성물
WO2022220339A1 (ko) 오배자 추출물을 유효성분으로 포함하는 코로나 바이러스(sars-cov-2) 감염의 예방 또는 치료용 조성물
WO2022215827A1 (ko) Sars-cov-2 3cl 프로테아제와 rdrp활성을 억제하는 지유 추출 조성물
WO2023200064A1 (ko) 인플루엔자 바이러스 억제용 조성물
WO2019022357A1 (ko) 중동호흡기 증후군의 예방 또는 치료용 약학조성물
WO2022107999A1 (ko) 레인(rhein), 메클로페남산(meclofenamic acid), 또는 이들의 조합을 포함하는 SARS-CoV-2 및 HCoV-OC43에 대한 항바이러스용 조성물
KR102240693B1 (ko) 육산화사비소를 포함하는 코로나바이러스 감염증의 예방 또는 치료용 약학조성물
WO2022065971A2 (ko) 지구자 추출물을 포함하는 코로나바이러스 감염 예방 또는 치료용 조성물
WO2022098133A1 (ko) 항바이러스 효능을 가지는 스트렙토마이세스 속 균주 및 이를 포함하는 항바이러스용 조성물
WO2004083186A1 (ja) ウイルス性肝炎治療剤及び制癌剤

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 21915867

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 21915867

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1