WO2022124525A1 - 니클로사마이드를 포함하는 근육내 및/또는 피하 투여용 약학적 조성물 - Google Patents

니클로사마이드를 포함하는 근육내 및/또는 피하 투여용 약학적 조성물 Download PDF

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김유경
박민영
이아름
한주미
박현진
박상한
강복기
김동환
이민석
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주식회사 대웅제약
주식회사 대웅
주식회사 대웅테라퓨틱스
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    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
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    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Definitions

  • the present invention relates to a pharmaceutical composition for intramuscular and/or subcutaneous administration comprising niclosamide or a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or a solvate thereof, a use thereof, and a method for administering the same.
  • nanocrystals with a size of about 235 nm could be prepared by wet milling niclosamide with an appropriate surfactant. This was a formulation capable of intravenous administration of niclosamide, but the obtained half-life when administered intravenously to rats was only 1.36 hours.
  • the particle size can be prepared at a level of about 200 nm, and the dissolution rate of the drug is increased. It was confirmed that exposure to the body was increased, but a significant increase in half-life was not observed.
  • niclosamide when niclosamide is formulated in various ways and administered orally or intravenously, a commercially effective drug exposure profile has not been achieved.
  • niclosamide exhibits very rapid elimination when administered intravenously, and also shows rapid elimination when administered orally. activity could not be achieved. Therefore, the authors of this document tried to overcome this by synthesizing a number of analogs with some changes in the structure of niclosamide.
  • analog when developing a substance using this structural analog (analog), it is considered a new drug substance completely different from niclosamide, so the same toxicity test and clinical test as the new drug are required, so the development period of at least 10 years This is necessary, and there is a possibility that the toxicity will increase compared to niclosamide, which has been safe for decades.
  • Ashlee D. Brunaugh et al. recently reported the development of inhalable particles by encapsulating niclosamide in human lysozyme.
  • the present invention solves the problems of oral and intravenous administration of niclosamide, and simplifies the administration method by administering niclosamide a single time intramuscularly and/or subcutaneously, and is a pharmaceutical that can maintain effective blood concentration in the body It aims to provide a composition.
  • the present invention relates to a muscle of niclosamide comprising niclosamide or a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or a solvate thereof, and administering 24 mg to 1500 mg of niclosamide in a single total dose.
  • a pharmaceutical composition for intra- and/or subcutaneous administration is provided.
  • the present invention also provides the use of the pharmaceutical composition for intramuscular and/or subcutaneous administration of niclosamide and a method for intramuscular and/or subcutaneous administration of the pharmaceutical composition to a subject in need thereof. .
  • niclosamide when administered intramuscularly and/or subcutaneously, superior bioavailability can be achieved compared to oral administration, and the blood concentration of niclosamide can be maintained at a drug concentration higher than the virus inhibitory concentration for a long time.
  • the present invention it is possible to apply the wide range of antiviral activity of niclosamide in literature to the human body, and it is possible to secure an antiviral drug that can be used preferentially during an epidemic as well as industrial development and profit.
  • Example 1 shows a PK graph of IV administration and IM administration according to Example 2.
  • Example 2 is a graph showing the PK values of IM administration according to Example 2 and IC50 concentrations of 55.6 ng/mL and 91.6 ng/mL.
  • Figure 3 shows a PK graph of IM administration and SC administration by GMP according to Example 3.
  • Figure 4 shows the PK graph of the phase 1 clinical trial in India according to Example 4.
  • Example 5 shows a simulated PK graph for each dose of IM administration according to Example 5.
  • FIG. 6 shows a PK graph simulating administration of 960 mg IM according to Example 5.
  • Example 7 shows a PK graph simulated by multiple administration of niclosamide according to Example 6 (a total of 840 mg for 2 days with 1.0 cc (240 mg) of the arm + 2.5 cc (600 mg) of the hip).
  • FIG. 8 shows a PK graph simulated by multiple administration of niclosamide according to Example 6 (total of 960 mg for 2 days with 1.0 cc (240 mg) of the arm + 3.0 cc (720 mg) of the hip).
  • the present invention relates to a muscle of niclosamide comprising niclosamide or a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or a solvate thereof, and administering 24 mg to 1500 mg of niclosamide in a single total dose.
  • a pharmaceutical composition for intra- and/or subcutaneous administration is provided.
  • the pharmaceutical composition comprising niclosamide may be administered in a single dose or in multiple doses.
  • Single or multiple administration does not mean the number of injections, but means whether the administration cycle of the pharmaceutical composition containing niclosamide is single or multiple.
  • the administration cycle of the pharmaceutical composition containing niclosamide is single or multiple.
  • it may be desirable to administer a single total dose in divided doses for the pharmaceutical composition containing niclosamide, but such divided administration is not considered to be one time in the administration cycle. Even if a single total dose is divided into several parts of the body, if it is included within the same administration cycle, it is considered to be a single dose.
  • the single total dose refers to the sum of the divided doses when a single dose is divided into a single dose of the pharmaceutical composition according to the present invention.
  • the single total dose may be administered intramuscularly and/or subcutaneously at one site, or dividedly administered at multiple sites intramuscularly and/or subcutaneously.
  • the single total dose may be 96 mg to 1500 mg, or 96 to 1200 mg. More specifically, it may be 96 mg or more, 100 mg or more, 120 mg or more, 144 mg or more, 150 mg or more, and 1500 mg or less, 1400 mg or less, 1300 mg or less, 1200 mg or less.
  • the single total dose may be 300 to 1200 mg, or 800 to 1200 mg.
  • the dosage may be increased from 1/2 to 1/10, specifically 1/2, 1/3, 1/4, 1/5, or 10 It can be administered by adjusting the dosage by one minute. For example, if the dosage is 960 mg, one-half of 480 mg may be administered, one-third 320 mg, one quarter 240 mg, one fifth 192 mg, and one tenth 96 mg can be administered.
  • the concentration of niclosamide in the pharmaceutical composition may be 200 to 300 mg/ml. More preferably, it may be 200 to 280 mg/ml, 200 to 270 mg/ml, 210 to 270 mg/ml, or 220 to 260 mg/ml, and more specifically 240 mg/ml.
  • the body part of the intramuscular and/or subcutaneous administration may be an arm, hip, thigh and/or abdomen, and more specifically, both arms, both hips, both thighs, and/or abdomen.
  • the present invention is not limited thereto.
  • it may be administered more than once to the same or different parts of the body. Specifically, it may be administered 1 to 6 times in the same or different parts of the body.
  • the single administration of niclosamide is once per arm; 1 in the butt; 1 time on the thigh; 1 in the abdomen;
  • the dosage of the pharmaceutical composition for each administration site may be 0.1ml to 5ml. Specifically, it may be 0.2ml to 4.5ml, 0.3ml to 4.3ml, or 0.5ml to 4ml.
  • the dosage of the pharmaceutical composition may be 2ml or less, 1.5ml or less, 1.2ml or less, 1ml or less, 0.1ml or more, 0.3ml or more, 0.5ml or more, specifically , may be 0.1ml to 2ml, 0.3ml to 1.5ml, 0.5ml to 1.5ml, 0.5ml to 1.2ml, or 0.6ml to 1.1ml, preferably 0.8ml.
  • the dosage of the pharmaceutical composition may be 5ml or less, 4.5ml or less, 4ml or less, 0.5ml or more, 1ml or more, specifically, 0.5ml to 5ml, It may be 0.5ml to 4.5ml, 1ml to 4ml, 1ml to 3ml, 1ml to 2ml, or 1ml to 1.5ml, preferably 1.2ml.
  • the correlation between the dose (ml) of the pharmaceutical composition, the concentration of niclosamide (mg/ml), and the dose (mg) of niclosamide is ‘dose of the pharmaceutical composition (ml) X concentration of niclosamide (mg).
  • (mg/ml) administration dose of niclosamide (mg)' can be confirmed by the formula, and each numerical value can be appropriately adjusted with the formula.
  • the concentration of niclosamide is 240 mg/ml
  • the dosage of the pharmaceutical composition is 0.1 ml to 5 ml for each administration site
  • the dosage of niclosamide for each administration site is 24 mg to 1200 mg.
  • the pH of the pharmaceutical composition may be 4 to 7, specifically, may be pH 6.
  • the present formulation can be properly maintained at a pH of 4 to 7 without using a separate pH adjusting agent.
  • the pharmaceutical composition may include niclosamide or a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or a solvate thereof as an active ingredient, and a stabilizer, an isotonic agent and a buffer as an excipient.
  • the pharmaceutical composition may be a liquid formulation or a freeze-dried formulation.
  • the liquid agent may be a suspension.
  • the freeze-dried formulation can be used by rehydrating it with water for injection before administration to make a suspension.
  • the stabilizer may include an anionic polysaccharide cellulose derivative or a salt thereof. More specifically, the anionic polysaccharide may be a carboxy polysaccharide, and the anionic polysaccharide cellulose derivative may be carboxymethyl cellulose, carboxyethyl cellulose, carboxymethyl chitosan or carboxymethyl dextran, but is not limited thereto. More specifically, the anionic polysaccharide cellulose derivative or a salt thereof may be carboxymethyl cellulose or a salt thereof, but as an anionic polysaccharide cellulose derivative, it is applied as an excipient of a pharmaceutical preparation to exhibit the effect of the present invention. .
  • Buffers may further include phosphate and sodium salts.
  • the phosphate and sodium salt may be derived from sodium phosphate monobasic monohydrate, but is not limited thereto.
  • the tonicity agent may additionally include mannitol, but is not limited thereto, and as long as it is an excipient that can be applied to the injection formulation as a sugar alcohol, it can be changed and applied as needed.
  • the pharmaceutical composition may be used to prevent or treat various virus-related diseases.
  • niclosamide The potent activity of niclosamide against SARS-CoV was first reported in the literature reported by Chang-Jer Wu et al. in Antimicrobial Agents and Chemotherapy. The IC50 inhibitory concentration was reported to be at the level of 1.56 uM. Since then, various antiviral tests using niclosamide have been reported in vitro.
  • niclosamide increased viral autophagy in host cells through SKP2 inhibition, and it was reported that it exhibited potent activity against MERS-CoV. In addition, in 2020, it has been reported from multiple research groups that niclosamide exhibits strong activity against SARS-CoV-2.
  • niclosamide has been reported to have strong activity against beta-coronaviruses such as SARS-CoV, SARS-CoV-2, and MERS-CoV.
  • the antiviral activity of niclosamide has also been reported against Flavivirus to which Zika virus, dengue virus, West Nile virus, yellow fever virus and Japanese encephalitis virus belong.
  • Fang et. Al is PLoS ONE.
  • the activity of niclosamide against Japanese encephalitis virus was also reported in the literature reported in 2013, 8, e78425.
  • niclosamide exhibits potent antiviral activity at a level of 0.16 uM against human hepatitis C virus (HCV) (J. Med. Chem. 2011, 54, 8670-8680).
  • niclosamide The antiviral activity of niclosamide and its mechanism have also been reported on the antiviral activity of niclosamide against the rhinovirus, which causes various types of cold in humans and shows a fatality rate when infected with asthma or chronic obstructive pulmonary disease.
  • Jurgeit et al. PLoS Pathog According to the literature reported in 2012, 8, e1002976., it was reported that niclosamide exhibited an IC50 value of less than 1 uM for rhinovirus, and that niclosamide interfered with the formation of an acidic environment necessary for viral infection/replication. In addition, this literature reported that niclosamide exhibited an IC50 value of 0.83 uM for influenza.
  • Epstein-Barr Virus (EBV)
  • EBV Epstein-Barr Virus
  • Huang et al. Antiviral Res. According to the literature reported in 2017, 138, 68-78., niclosamide inhibited EBV replication in lymphocytes and epithelial cells, and the inhibitory mechanism was a disruption of the mammalian target of rapamycin (mTOR) signaling pathway, which is important in EBV replication in vivo. .
  • mTOR mammalian target of rapamycin
  • niclosamide is known to exhibit various antiviral activities regardless of the type of virus, but a method for maintaining long-term antiviral activity concentration by effectively systemic exposure to niclosamide for several decades has not been reported.
  • the pharmaceutical composition is influenza virus (Influenza virus), flavivirus (Flavivirus), adenovirus (Human adenovirus, HAdV), coronavirus severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV or SARS-CoV-1), type 2 severe acute respiratory syndrome coronavirus (SARS-CoV-2), MERS-CoV, coronavirus disease 2019 (COVID) -19)), Herpes virus, Zica virus, Japanese encephalitis virus (JEV), Epstein-Barr virus (EBV), Ebola virus (EBOV) ), rhinovirus, Chikungunya virus (CHIKV), hepatitis C virus (HCV), hepatitis B virus (HBV), hepatitis A virus , HAV), rotavirus, Astrovirus, Hantavirus, Dengue virus, SFTS virus (severe fever with thrombocytopenia syndrome virus), HIV virus, West Nile Virus (WNV)
  • the pharmaceutical composition may be for preventing or treating coronavirus disease 2019 (COVID-19).
  • composition of the present invention may be administered not only to a patient exhibiting infection symptoms or signs of infection, but also to a patient likely to become infected.
  • the blood concentration in the body for 3 to 14 days after administration of the pharmaceutical composition may exceed the IC 50 value for coronavirus infection-19 (Covid-19) of niclosamide.
  • the IC 50 of niclosamide for coronavirus infection-19 may be 45 to 100 ng/ml, 47 to 97 ng/ml, 50 to 95 ng/ml, or 53 to 93 ng/ml. have.
  • a pharmaceutical composition comprising niclosamide or a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate thereof or a solvate thereof is additionally administered at a dose of 24 mg to 1500 mg 1 to 4 times more. can be administered.
  • the administration site of the initial administration of niclosamide and the additional administration may be the same or different.
  • the additional administration of niclosamide may be further administered 1 to 4 times for one month, 3 weeks, or 2 weeks after the initial administration.
  • the additional administration of niclosamide is once every 2 days, once every 3 days, once every 4 days, once every 5 days, once every 6 days, during the treatment period after the initial administration.
  • once every 7 days, once every 8 days, or once every 9 days can be administered 1 to 3 more times in total.
  • the dosage regimen can be designed so that the blood concentration of niclosamide can be maintained, for example, for 7 to 14 days, above the IC50 concentration of niclosamide for the target virus.
  • the dosage regimen may be varied by administering at least 436 mg or more once in 2 days, administering at least 600 mg or more once in 3 days, for a total of 3 times, and at least 960 mg or more once in 4 days for a total of 3 administrations, etc. can be set.
  • Additional administration of niclosamide may be administered by the same administration method as the administration method of single administration of niclosamide described above.
  • the present invention also includes niclosamide or a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or solvate thereof for intramuscular and/or subcutaneous administration of niclosamide, and a single total dose of 24 mg to 1500 mg.
  • niclosamide or a pharmaceutically acceptable salt thereof, a hydrate or solvate thereof for intramuscular and/or subcutaneous administration of niclosamide, and a single total dose of 24 mg to 1500 mg.
  • Use of a pharmaceutical composition characterized in that niclosamide is administered may be provided.
  • the present invention may also provide a method for intramuscularly and/or subcutaneously administering the pharmaceutical composition to a subject in need thereof.
  • DWRX2003 used in the following examples and drawings means niclosamide.
  • Example 1 Confirmation of SARS-CoV-2 virus treatment effect in hamsters following administration of niclosamide
  • the species and strains of the hamsters were Syrian hamster, RjHan:AURA, and 27 males were classified into the following G1 (untreated control group), G2 (infected group), and G3 (test group) 9 each.
  • SARS-CoV-2 was subcultured to prepare a virus of 10 4 TCID 50/ml in a PBS solution, and 200ul of this solution was administered to the left nasal cavity of the hamster.
  • niclosamide was administered once, and the total dose was divided into two and administered to the left and right thighs of the hamster.
  • DPI is the number of days after virus infection, the number in parentheses is the number of surviving individuals, and ** indicates a significant difference in p ⁇ 0.01 compared to the G1 group.
  • RNA gene expression levels of RNA isolated from lung tissue autopsied on the 3rd, 5th and 7th days after virus inoculation were confirmed.
  • the E gene means the envelope in the structure of the virus, and plays a role in protecting the genetic material when moving between host cells.
  • the N gene refers to the nucleocapsid in the structure of the virus and plays an important role in RNA replication and new virus assembly.
  • RdRP gene refers to viral RNA-dependent RNA polymerase.
  • the G2 group had the lowest cq value, which is the viral replication cycle value, in all items (FAM, RED, and Cy5) during the entire test period. This means that there are the most viral genes in the infected lung tissue, and the relative expression value of the G3 group was calculated based on this. On the 3rd, 5th, and 7th days after virus inoculation, the relative expression level of the G3 group was significantly lower than that of the G2 group in all items (FAM, RED and Cy5).
  • FAM (E gene), unit: cq DPI G1 G2 G3 3 - 22.43 ⁇ 0.69 24.48 ⁇ 0.24 5 - 18.52 ⁇ 4.59 26.84 ⁇ 1.63 7 - 21.61 ⁇ 5.00 30.79 ⁇ 0.48 N 9 9 9
  • RED (RdRP gene), unit: cq DPI G1 G2 G3 3 - 18.64 ⁇ 2.81 19.64 ⁇ 0.80 5 - 21.79 ⁇ 2.86 26.61 ⁇ 2.00 7 - 20.35 ⁇ 3.40 29.59 ⁇ 0.87 N 9 9 9
  • Cy5 (N gene) , unit: cq DPI G1 G2 G3 3 - 22.43 ⁇ 0.69 24.48 ⁇ 0.24 5 - 18.52 ⁇ 4.59 26.84 ⁇ 1.63 7 - 21.61 ⁇ 5.00 30.79 ⁇ 0.48 N 9 9 9
  • niclosamide when administered intramuscularly during viral infection, it was possible to confirm weight recovery, suppression of viral gene expression level, and alleviation of tissue damage.
  • niclosamide When niclosamide is administered intravenously, it is rapidly eliminated from the body and it can be seen that most of the niclosamide in the body is decomposed in less than 24 hours. However, when administered intramuscularly, it was confirmed that the concentration in the body can be maintained at a high level even after 300 hours after administration.
  • niclosamide prepared by the GMP process was intramuscularly administered to three rats, and niclosamide prepared by the GMP process was intramuscularly administered to the other three rats. Thereafter, pharmacokinetic evaluation was performed for each rat group, and the results are shown in Tables 14, 15 and 3 below.
  • Table 14 is niclosamide IM administration prepared by GMP process
  • Table 15 is GMP It shows administration of niclosamide SC prepared by the process.
  • a phase 1 clinical trial was conducted in healthy adults to evaluate the safety, tolerability, pharmacokinetics, and pharmacodynamics of niclosamide by dose in India.
  • Eight patients per dose group (6 patients in the niclosamide group, 2 patients in placebo) were assigned, and after the safety and tolerability of the previous dose group were confirmed, a step-by-step escalation test proceeded to the next dose group.
  • each dose group was injected intramuscularly once into a total of 4 regions of the arm and hip muscles.
  • blood samples were collected from the subjects and the concentration of niclosamide in plasma of the drug was measured by HPLC-MS/MS.
  • the blood concentration curve according to time after intramuscular injection of DWRX2003 144mg, 432mg, 960mg, and 1200mg is shown in FIG.
  • the expected effective plasma concentration of niclosamide calculated as IC50 from the reported results for SARS-CoV-2 inhibitory efficacy, is 55.6 to 91.56 ng/mL (Jeon et al., 2020 in vitro inhibition of SARS-CoV- 2 (S type) virus infection using Vero cells; Gassen et al., 2020 in vitro inhibition of SARS-CoV-2 (G type) virus infection using Vero cells; Ko et al., 2020 In vitro inhibition of SARS- CoV-2 (S type) virus infection using Calu-3 cells)
  • the effective dose capable of representing the effective blood concentration was predicted based on the body concentration of niclosamide according to time in humans at the administration doses of 144 mg, 432 mg, 960 mg, and 1200 mg.
  • the results are shown in FIG. 5 .
  • the time in which the blood concentration is maintained at the IC50 in vitro is predicted to be at least 3 days to a maximum of 14 days depending on the dose.
  • the administration dose in humans showing similar exposure to 240 mg/kg administration which is the administration dose in the hamster model according to Example 1, was predicted to be 960 mg, which is summarized in Table 17, and a simulation graph is shown in FIG. 6 .
  • a phase 2 clinical trial was designed with a dose of 960 mg of niclosamide. Specifically, a single intramuscular administration is performed by dividing into a test group and a control group as shown in Table 18 below to a mild or severe patient confirmed with COVID-19 or a person who has developed one or more symptoms within 7 days, and, accordingly, a patient negative to the virus Check whether it shows the effect of treatment for COVID-19, such as the rate and the proportion of those who recover from symptoms.
  • niclosamide In addition to single administration of niclosamide, it is possible to maintain the in-vitro IC50 concentration (55.6 to 91.56 ng/mL) or higher for about 14 days by administering multiple doses (eg, administration over several days). As the repeat dosing interval increases, the required dose may also increase proportionally.
  • niclosamide was administered repeatedly for 2 days to 1.0 cc (240 mg) of the arm + 2.5 cc (600 mg) of the hip, and the results are shown in FIG. 7 .
  • a total of 960 mg was repeatedly administered for 2 days to 1.0 cc (240 mg) of the arm + 3.0 cc (720 mg) of the hip, and the results are shown in FIG. 8 .
  • niclosamide was administered to each side of the arm or hip for 2 days at 2.0cc (480mg), and the results are shown in FIG. 9 .
  • the effective blood concentration in the body can be maintained high even when niclosamide is administered multiple times by dispersing it twice or more at a total dosage similar to single administration of niclosamide.

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Abstract

본 발명은, 니클로사마이드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 포함하는 니클로사마이드의 근육내 및/또는 피하 투여용 약학적 조성물에 관한 것으로, 높은 혈중 농도를 장시간 유지할 수 있는 효과를 나타낼 수 있으며, 바이러스 관련 질환의 예방 또는 치료에 효과적으로 사용될 수 있다.

Description

니클로사마이드를 포함하는 근육내 및/또는 피하 투여용 약학적 조성물
본 발명은, 니클로사마이드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 포함하는 근육내 및/또는 피하 투여용 약학적 조성물, 이의 용도, 및 이의 투여 방법에 관한 것이다.
니클로사마이드의 전신 노출을 통해 다양한 약리작용을 활용하고자 수많은 연구 및 기술이 보고되었다.
첫 번째로, 니클로사마이드를 가용화 하거나 다양한 제형화 방법을 적용하여 경구 및 정맥으로 투여 및 개선된 체내 약물 노출이 보고되었다.
Anurag Lodagekar 등이 Carbohydrate Polymers에 보고한 문헌에 따르면, 니클로사마이드를 시클로덱스트린과 포접하여 in vitro에서의 항암활성 및 마우스에서의 생체이용율이 증가된다고 보고하였다. 그러나 이 경우에도 문헌에서 제시하고 있는 니클로사마이드/시클로덱스트린 포접 화합물의 체내 반감기가 4.6시간에 불과하였다.
Xingwang Zhang 등이 Journal of Microencapsulation에 보고한 문헌에 따르면, 니클로사마이드를 submicron 단위의 지질 에멀전에 탑재하여 제조 시 in vitro에서 니클로사마이드 대비 뛰어난 방출율을 나타낼 수 있고 장시간 에멀전의 안정성을 유지할 수 있었다. 그러나 이를 랫드에 경구투여하는 경우 관찰된 반감기는 2.6~3.2시간에 불과하였다.
Yanghuan Ye 등이 Drug Development and Industrial Pharmacy에 보고한 문헌에 따르면, 니클로사마이드를 적절한 계면활성제와 함께 습식밀링하는 경우 약 235nm 크기의 나노크리스탈을 제조할 수 있었다. 이는 니클로사마이드의 정맥투여가 가능한 제형이었으나, 랫드에 정맥투여 시 확보 된 반감기는 1.36시간에 불과하였다.
Maqsood Ur Rehman 등이 2018년 보고한 문헌에 따르면, 니클로사마이드를 지질과 함께 Solid lipid nanoparticle로 제조하는 경우 입자 크기를 약 200nm 수준으로 제조할 수 있고, 약물의 용출율이 증대되며 이를 동물에 투여 시 체내노출이 증가됨을 확인하였으나, 현저한 반감기 증가 등은 관찰되지 않았다.
이와 같이 니클로사마이드를 다양한 방법으로 제형화 하여 경구 및 정맥투여하는 경우 상업적으로 효과적으로 이용이 가능한 약물 노출 프로파일은 달성되지 않았다.
두 번째로, 니클로사마이드에 다양한 제형을 적용하여도 현저한 개선이 어려우므로 니클로사마이드의 구조를 일부 변경하여 구조유사체를 합성하는 방법이 보고되었다.
2006년 Journal of food and drug analysis에 Yi-Wei Chang 등이 보고한 문헌에 따르면, 니클로사마이드는 정맥투여시 매우 빠른 체내소실을 나타내며, 경구 투여시에도 마찬가지로 빠른 체내 소실을 나타내어 의도하고자 하는 항바이러스 활성을 달성할 수 없었다. 따라서 본 문헌의 저자들은 니클로사마이드의 구조를 일부 변경한 유사체를 다수 합성하여 이를 극복하고자 하였다. 그러나 당업계에 알려진 바와 같이, 이러한 구조 유사체 (Analog)를 활용한 물질 개발 시, 니클로사마이드와는 전혀 다른 신약물질로 간주되므로 신약과 동일한 독성시험 및 임상시험이 필요하여 최소 10년 이상의 개발 기간이 필요하고, 수십년간 안전성이 확보되어 있는 니클로사마이드에 비해 독성이 증가될 가능성이 존재한다.
유사하게 Haijun Chen 등이 ACS Medicinal Chemistry Letters에 보고한 문헌에서도 니클로사마이드의 부적절한 체내동태 양상을 개선하기 위하여 O-Alkylamino-tethered 유사체들을 디자인 및 합성하여 항암으로의 활용 가능성을 개시하고 있다. 위의 문헌과 동일하게 이는 니클로사마이드 자체를 이용한 개선의 어려움과 이에 따른 구조유사체 합성을 통한 신약물질의 개발 필요성을 암시하고 있다.
세 번째로, 니클로사마이드를 폐질환 또는 폐감염증 치료제로 개발하는 경우 작용부위인 폐로 니클로사마이드 약물 입자를 직접 전달하는 연구가 보고되었다.
Ashlee D. Brunaugh 등은 최근 니클로사마이드를 인간 리소자임에 봉입하여 흡입 가능한 입자 형태로의 개발을 보고하였다.
종래기술에서 살펴본 바와 같이, 니클로사마이드의 화학적 구조를 변화시키지 않으면서 근육 및/또는 피하 내로 약물을 투여하는 기술은 없었으며, 또한 본 발명에서 게시하는 조성물과 같이 우수한 혈중 반감기 프로파일을 나타내는 기술 또한 보고되지 않았다.
한편, 니클로사마이드의 강력한 항바이러스 활성 및 보고되는 다양한 in vitro 상에서의 활성 (항염증, 항암 등)을 상업적으로 활용하기 위해서는, 체내에서의 약물 농도를 유지해야한다. 이에 전세계적으로 매우 다양한 시도가 이루어졌다.
또한, 니클로사마이드는 경구투여 시, 장내에서 대량의 미생물환원 및 글루쿠론산 포접 반응이 나타나는 것으로 알려져있다. 또한 경구 투여 시 다양한 위장관계 부작용의 발생이 보고되어 있으며 이는 경구 투여 후 위장관에 대량으로 분포하는 약물의 특성에 기인한다.
본 발명은, 상기 니클로사마이드의 경구 투여와 정맥 투여의 문제점을 해결하면서, 니클로사마이드를 단회 근육내 및/또는 피하 투여하여 투여 방법을 단순화시키고, 유효한 체내 혈중 농도를 지속할 수 있는 약학적 조성물을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.
본 발명은, 니클로사마이드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 포함하고, 단회 총 투여용량으로 24mg 내지 1500mg의 니클로사마이드를 투여하는 것을 특징으로 하는 니클로사마이드의 근육내 및/또는 피하 투여용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은, 니클로사마이드의 근육내 및/또는 피하 투여를 위한 상기 약학적 조성물의 용도 및 상기 약학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상에게 근육내 및/또는 피하로 투여하는 방법을 제공한다.
본 발명을 통해 니클로사마이드를 근육 및/또는 피하로 투여하는 경우 경구 투여 대비 우수한 생체이용율을 달성하고 니클로사마이드의 혈중농도를 바이러스 저해 농도 이상의 약물 농도로 장시간 유지할 수 있다.
정맥투여를 위한 입원시설 등이 필요하지 않아 감염병 유행 시 중요한 의료인력 및 시설 절약에 큰 도움을 줄 수 있으며, 경구투여시 발생 가능한 다양한 위장관계 부작용이 나타나지 않는 장점을 가진다.
본 발명을 통해 문헌상으로 존재하던 니클로사마이드의 광범위한 항바이러스 활성을 인체에 적용할 수 있게 되었으며, 산업적인 개발 및 이익 뿐 아니라 감염병 유행시 최우선적으로 활용할 수 있는 항바이러스 약물을 확보할 수 있다.
도 1은 실시예 2에 따른 IV 투여 및 IM 투여의 PK 그래프를 나타낸 것이다.
도 2는 실시예 2에 따른 IM 투여의 PK 값과 55.6ng/mL와 91.6ng/mL의 IC50 농도를 표시한 그래프이다.
도 3은 실시예 3에 따른 GMP 에 의한 IM 투여 및 SC 투여의 PK 그래프를 나타낸 것이다.
도 4는 실시예 4에 따른 인도 1상 임상 실험의 PK 그래프를 나타낸 것이다.
도 5는 실시예 5에 따른 IM 투여의 투여용량별 시뮬레이션한 PK 그래프를 나타낸 것이다.
도 6은 실시예 5에 따른 960mg IM 투여를 시뮬레이션한 PK 그래프를 나타낸 것이다.
도 7은 실시예 6에 따른 니클로사마이드 다회 투여(팔 1.0 cc (240 mg) + 엉덩이 2.5 cc (600 mg)로 총 840mg 2일) 시뮬레이션한 PK 그래프를 나타낸 것이다.
도 8은 실시예 6에 따른 니클로사마이드 다회 투여(팔 1.0 cc (240 mg) + 엉덩이 3.0 cc (720 mg)로 총 960 mg 2일) 시뮬레이션한 PK 그래프를 나타낸 것이다.
도 9는 실시예 6에 따른 니클로사마이드 다회 투여(팔 또는 엉덩이 양측에 2.0cc(480mg)씩 2일) 시뮬레이션한 PK 그래프를 나타낸 것이다.
본 발명은 다양한 변경을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에 구체적으로 설명하고자 한다.
그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
본 발명은, 니클로사마이드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 포함하고, 단회 총 투여용량으로 24mg 내지 1500mg의 니클로사마이드를 투여하는 것을 특징으로 하는 니클로사마이드의 근육내 및/또는 피하 투여용 약학적 조성물을 제공한다.
니클로사마이드를 포함하는 약학적 조성물은 단회 투여되거나 다회 투여될 수 있다. 단회 또는 다회는 투여, 예를 들어, 주사의 횟수를 의미하는 것이 아닌 니클로사마이드를 포함하는 약학적 조성물의 투여주기가 단수인지 혹은 복수인지를 의미한다. 예를 들어, 약학적 조성물의 분할투여가 여러 번이여 걸쳐 수행되더라도 그 투여주기가 1회에 해당한다면 "단회"를 의미한다. 본 발명의 실시예에서 확인되는 바와 같이, 니클로사마이드를 포함하는 약학적 조성물은 단회 총 투여용량을 분할투여하는 것이 바람직할 수 있는데, 이러한 분할투여는 투여주기상의 1회로 간주되지 않는다. 단회 총 투여용량을 신체 부위 여러 곳에 분할투여하더라도 동일 투여주기 내에 포함되는 경우 단회투여에 속하는 것으로 본다.
단회 총 투여용량이라 함은 본 발명에 따른 약학적 조성물을 단회 투여함에 있어서 단회 투여용량을 분할투여하게 되는 경우, 그 분할투여되는 투여용량의 총합을 의미한다.
상기 단회 총 투여용량은 한 부위의 근육 및/또는 피하에 투여되거나 또는 다부위의 근육 및/또는 피하에 분할투여될 수 있다.
상기 단회 총 투여용량은 96mg 내지 1500mg일 수 있고, 96 내지 1200mg일 수 있다. 보다 구체적으로는 96mg 이상, 100mg 이상, 120mg 이상, 144mg 이상, 150mg 이상일 수 있고, 1500mg 이하, 1400mg 이하, 1300mg 이하, 1200mg 이하일 수 있다. 상기 단회 총 투여용량은 300 내지 1200mg일 수 있고, 또는 800 내지 1200mg일 수 있다.
환자의 연령, 컨디션, 또는 증상 정도에 따라 상기 투여용량을 2분의 1 내지 10분의 1, 구체적으로는 2분의 1, 3분의 1, 4분의 1, 5분의 1, 또는 10분의 1로 투여용량을 조절하여 투여할 수 있다. 예를 들어, 투여용량이 960mg의 경우, 이의 2분의 1인 480mg 을 투여할 수 있으며, 3분의 1인 320mg, 4분의 1인 240mg, 5분의 1인 192mg, 10분의 1인 96mg 을 투여할 수 있다.
상기 약학적 조성물 중 니클로사마이드의 농도는 200 내지 300mg/ml일 수 있다. 보다 바람직하게는 200 내지 280mg/ml, 200 내지 270mg/ml, 210 내지 270mg/ml, 또는 220 내지 260mg/ml일 수 있고, 보다 구체적으로는 240mg/ml 일 수 있다.
본 발명의 일 양태에서, 상기 근육내 및/또는 피하 투여의 신체 부위가 팔, 엉덩이, 허벅지 및/또는 복부일 수 있고, 보다 구체적으로는 양쪽 팔, 양쪽 엉덩이, 양쪽 허벅지, 및/또는 복부일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 양태에서, 상기 신체 부위의 동일 또는 상이한 부위에 1번 이상 투여할 수 있다. 구체적으로는 상기 신체 부위의 동일 또는 상이한 부위에 1번 내지 6번 투여할 수 있다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 니클로사마이드의 단회 투여는 팔에 1번; 엉덩이에 1번; 허벅지에 1번; 복부에 1번;
양쪽 팔에 각 1번씩 총 2번; 양쪽 엉덩이에 각 1번씩 총 2번; 양쪽 허벅지에 각 1번씩 총 2번; 팔에 1번, 엉덩이에 1번 총 2번; 팔에 1번, 허벅지에 1번 총 2번; 팔에 1번, 복부에 1번 총 2번; 엉덩이에 1번, 허벅지에 1번 총 2번; 엉덩이에 1번, 복부에 1번 총 2번; 허벅지에 1번, 복부에 1번 총 2번;
양쪽 팔에 각 1번씩, 엉덩이에 1번 총 3번; 양쪽 팔에 각 1번씩, 허벅지에 1번 총 3번; 양쪽 팔에 각 1번씩, 복부에 1번 총 3번; 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 팔에 1번 총 3번; 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 허벅지에 1번 총 3번; 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 복부에 1번 총 3번; 양쪽 허벅지에 각 1번씩, 팔에 1번 총 3번; 양쪽 허벅지에 각 1번씩, 엉덩이에 1번 총 3번; 양쪽 허벅지에 각 1번씩, 복부에 1번 총 3번; 팔에 1번, 엉덩이에 1번, 허벅지에 1번 총 3번; 팔에 1번, 허벅지에 1번, 복부에 1번 총 3번; 팔에 1번, 엉덩이에 1번, 복부에 1번 총 3번; 엉덩이에 1번, 허벅지에 1번, 복부에 1번 총 3번;
양쪽 팔에 각 1번씩, 양쪽 엉덩이에 각 1번씩 총 4번; 양쪽 팔에 각 1번씩, 양쪽 허벅지에 각 1번씩 총 4번; 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 양쪽 허벅지에 각 1번씩 총 4번; 양쪽 팔에 각 1번씩, 엉덩이에 1번, 허벅지에 1번 총 4번; 양쪽 팔에 각 1번씩, 엉덩이에 1번, 복부에 1번 총 4번; 양쪽 팔에 각 1번씩, 허벅지에 1번, 복부에 1번 총 4번; 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 팔에 1번, 허벅지에 1번 총 4번; 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 팔에 1번, 복부에 1번 총 4번; 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 허벅지에 1번, 복부에 1번 총 4번; 양쪽 허벅지에 각 1번씩, 팔에 1번, 엉덩이에 1번 총 4번; 양쪽 허벅지에 각 1번씩, 팔에 1번, 복부에 1번 총 4번; 양쪽 허벅지에 각 1번씩, 엉덩이에 1번, 복부에 1번 총 4번; 팔에 1번, 엉덩이에 1번, 허벅지에 1번, 복부에 1번 총 4번;
양쪽 팔에 각 1번씩, 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 허벅지에 1번 총 5번; 양쪽 팔에 각 1번씩, 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 복부에 1번 총 5번; 양쪽 팔에 각 1번씩, 양쪽 허벅지에 각 1번씩, 엉덩이에 1번 총 5번; 양쪽 팔에 각 1번씩, 양쪽 허벅지에 각 1번씩, 복부에 1번 총 5번; 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 양쪽 허벅지에 각 1번씩, 팔에 1번 총 5번; 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 양쪽 허벅지에 각 1번씩, 복부에 1번 총 5번; 양쪽 팔에 각 1번씩, 엉덩이에 1번, 허벅지에 1번, 복부에 1번 총 5번; 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 팔에 1번, 허벅지에 1번, 복부에 1번 총 5번; 양쪽 허벅지에 각 1번씩, 팔에 1번, 엉덩이에 1번, 복부에 1번 총 5번;
양쪽 팔에 각 1번씩, 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 양쪽 허벅지에 각 1번씩 총 6번; 양쪽 팔에 각 1번씩, 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 허벅지 1번, 복부 1번 총 6번; 양쪽 팔에 각 1번씩, 양쪽 허벅지에 각 1번씩, 엉덩이 1번, 복부 1번 총 6번; 또는 양쪽 엉덩이에 각 1번씩, 양쪽 허벅지에 각 1번씩, 팔에 1번, 복부 1번 총 6번; 투여할 수 있다.
각 투여 부위당 상기 약학적 조성물의 투여량은 0.1ml 내지 5ml일 수 있다. 구체적으로는 0.2ml 내지 4.5ml, 0.3ml 내지 4.3ml, 또는 0.5ml 내지 4ml일 수 있다.
하나의 예시에서, 투여 부위가 팔인 경우, 상기 약학적 조성물의 투여량은 2ml 이하, 1.5ml 이하, 1.2ml 이하, 1ml 이하, 0.1ml 이상, 0.3ml 이상, 0.5ml 이상일 수 있고, 구체적으로는, 0.1ml 내지 2ml, 0.3ml 내지 1.5ml, 0.5ml 내지 1.5ml, 0.5ml 내지 1.2ml, 또는 0.6ml 내지 1.1ml 일 수 있고, 바람직하게는 0.8ml 일 수 있다.
또 다른 하나의 예시에서, 투여 부위가 엉덩이인 경우, 상기 약학적 조성물의 투여량은 5ml 이하, 4.5ml 이하, 4ml 이하, 0.5ml 이상, 1ml 이상일 수 있고, 구체적으로는, 0.5ml 내지 5ml, 0.5ml 내지 4.5ml, 1ml 내지 4ml, 1ml 내지 3ml, 1ml 내지 2ml, 또는 1ml 내지 1.5ml일 수 있고, 바람직하게는 1.2ml 일 수 있다.
약학적 조성물의 투여량(ml), 니클로사마이드의 농도(mg/ml) 및 니클로사마이드의 투여용량(mg)의 상관 관계는 '약학적 조성물의 투여량(ml) X 니클로사마이드의 농도(mg/ml) = 니클로사마이드의 투여용량(mg)'의 수학식으로 확인할 수 있으며, 상기 수학식으로 각 수치들을 적절하게 조절할 수 있다. 하나의 예시에서, 니클로사마이드의 농도가 240mg/ml인 경우를 예로 들면, 각 투여 부위당 상기 약학적 조성물의 투여량은 0.1ml 내지 5ml 이라면, 각 투여 부위당 니클로사마이드의 투여용량은 24mg 내지 1200mg 일 수 있다.
상기 약학적 조성물의 pH 는 4 내지 7일 수 있으며, 구체적으로는 pH 6 일 수 있다. pH가 높아질수록 용해도가 높아져 니클로사마이드의 제형 안정성이 떨어질 수 있다. 본 제형은 별도의 pH 조절제를 사용하지 않고도 pH 가 4 내지 7로 적절하게 유지될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 유효성분으로서 니클로사마이드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물, 및 부형제로 안정화제, 등장화제 및 완충제를 포함할 수 있다.
여기서, 상기 약학적 조성물은 액제 또는 동결건조 제형일 수 있다. 여기서, 상기 액제는 현탁액일 수 있다. 또한, 상기 동결건조 제형은 투여 전 주사용수로 재수화하여 현탁액으로 만들어 사용될 수 있다.
안정화제로는 음이온계 다당류 셀룰로오스 유도체 또는 이의 염을 포함할 수 있다. 더욱 구체적으로, 상기 음이온계 다당류는 카복시 다당류인 것일 수 있으며, 상기 음이온계 다당류 셀룰로오스 유도체는 카복시메틸 셀룰로오스, 카복시에틸 셀룰로스, 카복시메틸 키토산 또는 카복시메틸 덱스트란일 수 있으나, 상기에 제한되는 것은 아니다. 더욱 구체적으로 상기 음이온계 다당류 셀룰로오스 유도체 또는 이의 염은 카복시메틸 셀룰로오스 또는 이의 염일 수 있으나, 음이온계 다당류 셀룰로오스 유도체로서 약학 제제의 부형제로 적용되어 본 발명의 효과를 나타낼 수 있는 고분자면 제한없이 적용될 수 있다.
완충제로는 인산염 및 나트륨염을 추가로 포함할 수 있다. 상기 인산염 및 나트륨염은 인산 나트륨 일염기 일수화물로부터 유래된 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
등장화제로는 만니톨을 추가로 포함할 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니며, 당알코올로서 주사 제형에 적용될 수 있는 부형제이면 필요에 따라 변경하여 적용할 수 있다.
상기 약학적 조성물은 다양한 바이러스 관련 질환을 예방 또는 치료하는데 사용될 수 있다.
[다양한 항바이러스 활성]
Chang-Jer Wu 등이 Antimicrobial Agents and Chemotherapy에 보고한 문헌에서 SARS-CoV에 대한 니클로사마이드의 강력한 활성이 최초로 보고되었다. IC50 저해 농도는 1.56uM 수준으로 보고되었다. 그 이후 니클로사마이드를 이용한 다양한 항바이러스 시험이 in vitro상에서 보고되었다.
Gassen et al.에 의해서 니클로사마이드가 SKP2 저해를 통해 숙주세포에서의 바이러스 자가탐식을 증가시킨 다는 것이 밝혀졌고 MERS-CoV에 대해서 강력한 활성을 나타냄이 보고되었다. 또한 2020년에 들어서는 니클로사마이드가 SARS-CoV-2에 대해서도 강력한 활성을 나타냄이 복수의 연구그룹으로부터 보고되었다.
위와 같이 니클로사마이드는 SARS-CoV, SARS-CoV-2, MERS-CoV와 같은 베타코로나 바이러스에 대핸 강력한 활성이 보고되었다.
지카바이러스, 뎅기바이러스, 웨스트나일바이러스, 황열바이러스 및 일본뇌염바이러스가 속하는 Flavivirus에 대해서도 니클로사마이드의 항바이러스 활성이 보고되었다.
Xu et al.이 Nat. Med. 2016, 22, 1101-1107에 보고한 문헌에 의하면, 니클로사마이드가 지카바이러스에 대해 0.37 Um 수준의 IC50값을 나타내어 강력한 항바이러스 효능이 있음이 밝혀졌다.
Li et al.이 Cell Res. 2017, 27, 1046-1064에 보고한 문헌에 의하면 니클로사마이드는 Flavivirus의 바이러스 복제 과정 중 NS2B-NS3의 상호작용을 방해하여 직접적으로 Flavivirus의 복제를 저해하는 것으로 알려졌다. 따라서 본 연구에서는 니클로사마이드가 뎅기, 웨스트나일, 황열, 일본뇌염 바이러스에 대해서도 효과가 있을 것임을 제시하였다.
그 외에도 Fang et. Al이 PLoS ONE. 2013, 8, e78425에 보고한 문헌에서도 일본뇌염 바이러스에 대한 니클로사마이드의 활성이 보고되었다.
Stachulski et al.에 의해 니클로사마이드는 인간C형 간염 바이러스 (HCV)에 대해서 0.16 uM수준의 강력한 항바이러스 활성을 나타내는 것으로 보고되었다.(J. Med. Chem. 2011, 54, 8670-8680).
감염 시 매우 높은 치사율을 보이며, 아프리카지역에서 심각한 수준의 감염을 일으키고 있는 에볼라 (Ebola) 바이러스에 대한 활성 또한 보고되어 있다. Madrid et al.이 ACS Infect. Dis. 2015, 1, 317-326.에 보고한 문헌에 의하면 니클로사마이드는 에볼라 바이러스에 대해 1.5 uM 수준의 EC50값을 가지며, 아직 동물모델에서의 효력은 입증되지 않았다.
인간에서 다양한 형태의 감기를 일으키고, 천식이나 만성폐쇄성호흡기질환 환자에 감염될 경우 치명률을 나타내는 리노바이러스 (Rhinovirus)에 대해서도 니클로사마이드의 항바이러스 활성과 그 기전에 보고되어 있다. Jurgeit et al.이 PLoS Pathog. 2012, 8, e1002976.에 보고한 문헌에 의하면 니클로사마이드는 리노바이러스에 대해 1uM이하의 IC50값을 나타내며, 니클로사마이드가 바이러스 감염/복제 과정에 필요한 산성환경 형성을 방해하는 것으로 보고하였다. 또한 이 문헌에서는 니클로사마이드가 인플루엔자에 대해서 0.83 uM 수준의 IC50값을 나타냄을 보고하였다.
감염 시 열과 관절통이 특징적으로 나타나며 암컷 모기에 의해 활발히 전염되는 것으로 알려진 치쿤군야 (Chikungunya) 바이러스에 대해서는 Wang et al.이 Antiviral Res. 2016, 135, 81-90에 니클로사마이드에 의한 항바이러스 활성 및 기전을 보고하였다. 니클로사마이드의 치쿤군야 바이러스에 대한 EC50값은 0.95 uM 수준이었으며, 니클로사마이드는 치쿤군야바이러스의 세포침투 뿐만 아니라 세포-세포간 바이러스 전염 또한 방지함을 보고하였다.
현재 개발된 항바이러스제가 존재하지 않는 아데노바이러스 (Humand Adenovirus)에 대해서는 Marrugal-Lorenzo et al.이 Antiviral Res. 2016, 135, 81-90.에 니클로사마이드의 항바이러스 활성을 보고하였다. 구체적으로는 니클로사마이드가 0.6 uM수준의 EC50값을 나타냈으며 니클로사마이드는 인간 아데노바이러스 입자의 세포 내 이동을 억제하는 것으로 보고되었다.
세계 인구 대부분이 감염되어 있는 것으로 알려진 인간 헤르페스 바이러스 중, Epstein-Barr Virus (EBV)에 대한 활성 또한 보고되었다. Huang et al.이 Antiviral Res. 2017, 138, 68-78.에 보고한 문헌에 따르면 니클로사마이드는 EBV의 림프구 및 표피세포에서의 복제를 저해하며 저해기전은 EBV 체내 복제 시 중요한 mTOR (mammalian target of rapamycin) 신호경로의 방해였다.
Niyomdecha et al.이 Heliyon 6 (2020) e04050에 보고한 문헌에 의하면 니클로사마이드는 mTORC1 신호경로 저해를 통해 HIV1 (Human inmmunodeficiency virus type 1)의 복제를 저해함이 보고되었다.
위와 같이 니클로사마이드는 바이러스의 종류에 관계없이 다양한 항바이러스 활성을 나타내는 것으로 알려져 있으나, 수십년간 니클로사마이드를 효과적으로 전신노출시켜 장기간 항바이러스 활성 농도를 유지하는 방법은 보고되지 않았다.
본 발명을 통해 니클로사마이드를 이용한 다양한 항바이러스 치료제 개발이 가능하며, 위의 보고된 항바이러스 활성 외에, 거의 대부분의 바이러스 질환에 적용이 가능하며 새롭게 발생될 수 있는 바이러스 및 바이러스 변이체에 대한 대응 또한 가능하다.
본 발명의 일 구체 양태에서, 상기 약학적 조성물은, 상기 약학적 조성물은 인플루엔자 바이러스(Influenza virus), 플라비 바이러스(Flavivirus), 아데노 바이러스(Human adenovirus, HAdV), 코로나 바이러스 중증급성호흡기증후군 코로나바이러스(SARS-CoV 또는 SARS-CoV-1), 제2형 중증급성호흡기증후군 코로나바이러스(SARS-CoV-2),메르스 코로나 바이러스(MERS-CoV), 코로나바이러스 감염증-19(Coronavirus disease 2019 (COVID-19)), 헤르페스 바이러스(Herpes virus), 지카 바이러스(Zica virus), 일본 뇌염 바이러스(Japanese encephalitis virus, JEV), 엡스타인-바 바이러스(Epstein-Barr virus, EBV), 에볼라 바이러스(Ebola virus, EBOV), 리노 바이러스(rhinovirus), 치쿤군야 바이러스(Chikungunya virus, CHIKV), C형 간염 바이러스(Hepatitis C virus, HCV), B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus, HBV), A형 간염 바이러스(Hepatitis A virus, HAV), 로타바이러스, 아스트로 바이러스(Astrovirus), 한타바이러스(Hantavirus), 뎅기 바이러스(Dengue virus), SFTS 바이러스(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus), HIV 바이러스, 웨스트나일바이러스(West Nile Virus, WNV), 및 황열바이러스(Yellow fever virus)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 바이러스 감염증의 예방 또는 치료를 위한 것일 수 있다.
본 발명의 일 구체 양태에서, 상기 약학적 조성물은 코로나바이러스감염증-19(coronavirus disease 2019, COVID-19)의 예방 또는 치료를 위한 것일 수 있다.
또한, 감염 증상 또는 감염 징후를 나타내는 환자 뿐만 아니라 감염될 가능성이 있는 환자에게도 본 발명의 약학적 조성물을 투여할 수 있다.
상기 약학적 조성물을 투여 후 3 내지 14일동안 체내 혈중 농도가 니클로사마이드의 코로나바이러스 감염증-19(Covid-19)에 대한 IC50 값을 초과하는 것일 수 있다.
여기서, 니클로사마이드의 코로나바이러스 감염증-19(Covid-19)에 대한 IC50가 45 내지 100ng/ml일 수 있고, 47 내지 97ng/ml, 50 내지 95ng/ml, 또는 53 내지 93ng/ml일 수 있다.
한편, 상기 약학적 조성물의 최초 투여 후 추가로, 니클로사마이드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 포함하는 약학적 조성물을 24mg 내지 1500mg의 용량으로 1회 내지 4회 더 투여할 수 있다.
여기서, 니클로사마이드의 최초 투여와 추가 투여의 투여 부위는 동일 또는 상이할 수 있다.
본 발명의 일 양태에서, 니클로사마이드의 추가 투여는 최초 투여 후 한달간, 3주간, 또는 2주간 1회 내지 4회 더 투여할 수 있다.
본 발명의 일 추가 양태에서, 니클로사마이드의 추가 투여는 최초 투여 후 치료 기간동안 2일에 1회씩, 3일에 1회씩, 4일에 1회씩, 5일에 1회씩, 6일에 1회씩, 7일에 1회씩, 8일에 1회씩, 또는 9일에 1회씩 총 1회 내지 3회 더 투여할 수 있다. 타겟 바이러스에 대한 니클로사마이드의 IC50 농도 이상으로 니클로사마이드의 혈중 농도를 예를 들어, 7일 내지 14일간 유지할 수 있도록 용량 용법을 설계할 수 있다. 예를 들어, 2일에 1회 최소 436mg 이상 총 4회 투여, 3일에 1회 최소 600mg 이상 총 3회 투여, 4일에 1회 최소 960 mg 이상 총 3회 투여 등으로 용량용법을 다양하게 설정할 수 있다.
니클로사마이드의 추가 투여는 상기에 기재한 니클로사마이드의 단회 투여의 투여 방법과 동일한 투여 방법으로 투여할 수 있다.
본 발명은, 또한, 니클로사마이드의 근육내 및/또는 피하 투여를 위한 니클로사마이드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 포함하고, 단회 총 투여용량으로 24mg 내지 1500mg의 니클로사마이드가 투여되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물의 용도를 제공할 수 있다.
본 발명은, 또한, 상기 약학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상에게 근육내 및/또는 피하로 투여하는 방법을 제공할 수 있다.
<실시예>
하기 본 실시예 및 도면에서 사용된 "DWRX2003"는 니클로사마이드를 의미하는 것이다.
실시예 1: 니클로사마이드 투여에 따른 햄스터의 SARS-CoV-2 바이러스 치료 효과 확인
(1) 햄스터 준비 및 시험군 구성
햄스터의 종 및 계통은 Syrian hamster, RjHan:AURA이었고, 수컷 27마리를 하기 G1(미처리대조군), G2(감염군), G3(시험군) 로 각 9마리씩 분류하였다.
성별 동물수(마리) 감염유무 시험물질 투여경로 투여량(mg/kg) 투여액량(mL/kg)
G1 M 9 - - - - -
G2 M 9 + - - - 1
G3 M 9 + 니클로사마이드 근육투여 240 1
(2) 바이러스 준비 및 감염
SARS-CoV-2를 계대 배양하여 104 TCID 50/ml 의 바이러스를 PBS 용액에 준비하였으며, 이러한 용액 200ul을 햄스터의 좌측 비강으로 투여하였다.
(3) 투여
바이러스 감염 직전에 니클로사마이드를 단회 투여하였으며, 총 투여량을 2등분하여 햄스터의 좌/우측 대퇴부에 투여하였다.
(4) 실험 결과
바이러스 접종 및 니클로사마이드 투여 직후부터 7일 동안 매일 생존율과 체중 변화를 관찰하였으며, 바이러스 접종 및 니클로사마이드 투여 개시후 3, 5 및 7일째에 각 시험군 당 3마리씩 부검하였다. 부검시 채취한 폐 조직에서 보이는 병변 부위 일부를 RNA 추출하여 Seegene Allplex 2019-nCoV assay kit (Cat no. RP10243X)를 통해 RT-PCR를 통한 바이러스 유전자 증폭 검사를 실시하였고 바이러스 잔존량을 평가하였다.
1) 사망 여부 및 체중 측정
전 실험기간 중 사망동물은 관찰되지 않았으며, 니클로사마이드 투여에 의한 다른 특이 증상은 관찰되지 않았다. 체중 측정 결과, 바이러스 접종 후 2일째부터 7일째까지 G3 군(시험물질 투여군)의 체중 수준은 G2 군(감염군)에 비해 유의하게 높았다.
체중(g)
DPI G1 G2 G3
0 111.09 ± 16.70 137.92 ± 24.41** 130.17 ± 10.13
1 113.60 ± 15.99 130.41 ± 21.52 122.93 ± 10.06
2 116.52 ± 15.98 126.06 ± 21.22 120.93 ± 11.10
3 118.80 ± 16.05 120.75 ± 19.60 118.87 ± 11.77
4 118.16 ± 17.21 (6) 117.85 ± 12.35 (6) 117.51 ± 5.46 (6)
5 119.28 ± 16.76 116.16 ± 11.19 120.07 ± 6.71
6 123.02 ± 24.65 (3) 117.42 ± 13.42 (3) 121.42 ± 6.49 (3)
7 123.61 ± 25.07 117.53 ± 14.06 122.56 ± 5.66
N 9 9 9
DPI는 바이러스 감염 후 일 수이고, 괄호 안의 숫자는 생존한 개체 수이며, ** 는 G1군과 비교하였을 때 p<0.01 에서 유의한 차이가 있는 것이다.
2) RT-PCR를 통한 바이러스 유전자 증폭 검사
바이러스 접종 후 3일, 5일 및 7일째에 부검한 폐 조직에서 분리한 RNA 의 바이러스 유전자 발현량을 확인하였다. E gene은 바이러스 구조 중 Envelope를 의미하고, 숙주세포 사이 이동 시 유전물질 보호 역할을 한다. N gene은 바이러스 구조 중 Nucleocapsid 를 의미하고, RNA 복제와 새로운 바이러스 조립에 중요 역할을 한다. RdRP gene 은 바이러스의 RNA-의존적 RNA 폴리머라제를 의미한다.
그 결과, 바이러스가 복제되는 cycle value 인 cq값에서 전 시험기간 동안 모든 항목 (FAM, RED 및 Cy5)에서 G2군이 제일 낮았다. 이것은 감염된 폐조직내 바이러스 유전자가 가장 많은 것을 의미하며 이것을 기준으로 G3군의 relative expression 값을 산출하였다. 바이러스 접종 후 3 일째, 5 일째 및 7 일째 모두에서 G3군의 relative expression 수준은 모든 항목 (FAM, RED 및 Cy5)에서 G2군 대비 유의하게 낮았다.
FAM (E gene), 단위:cq
DPI G1 G2 G3
3 - 22.43 ± 0.69 24.48 ± 0.24
5 - 18.52 ± 4.59 26.84 ± 1.63
7 - 21.61 ± 5.00 30.79 ± 0.48
N 9 9 9
RED (RdRP gene), 단위:cq
DPI G1 G2 G3
3 - 18.64 ± 2.81 19.64 ± 0.80
5 - 21.79 ± 2.86 26.61 ± 2.00
7 - 20.35 ± 3.40 29.59 ± 0.87
N 9 9 9
Cy5 (N gene) , 단위:cq
DPI G1 G2 G3
3 - 22.43 ± 0.69 24.48 ± 0.24
5 - 18.52 ± 4.59 26.84 ± 1.63
7 - 21.61 ± 5.00 30.79 ± 0.48
N 9 9 9
3) 육안 소견 검사
바이러스 접종 후 3 일째, 5 일째 및 7 일째에서 부검한 폐 조직의 육안 소견을 평가하였다. G1군은 전체 부검 기간 동안 육안 소견에서 이상병변이 관찰되지 않았다. G2군의 육안 소견의 경우 바이러스 접종 3 일째, 5 일째 및 7 일째 모두 점상 출혈 소견이 보이나 G3군은 G2군 대비 완화된 결과가 확인되었다. G3군의 경우 바이러스 접종 3 일째 점상 출혈 소견 및 폐 조직 손상이 G2군 대비 지연되어 진행되는 것으로 보이며, 바이러스 접종 5 일째 7 일째 역시 육안상 손상이 적게 관찰되었다.
4) 조직병리 검사
바이러스 접종 후 3 일째, 5 일째 및 7 일째에서 부검한 폐조직을 고정액 고정 후 H&E 염색을 하여 평가하였다. 각각의 촬영한 사진을 하기 표 6의 평가 기준에 따라 스코어링하여 평가하였으며, 그 결과를 하기 표 7 내지 11에 나타내었다.
Figure PCTKR2021011292-appb-img-000001
G1군은 전체 부검 기간 동안 조직병리 결과에서 이상병변이 관찰되지 않았다. G3의 경우 바이러스 접종 3 일째 조직병리 결과 미약한 간질 염증세포 침윤이 나타나고 있었으나, 바이러스 접종 5 일째에서 G2군 대비 완화된 것이 확인되었다. 바이러스 접종 7 일째 G3군에서 미약한 간질 염증세포 침윤이 관찰되었다. 이는 감염된 바이러스가 유발한 폐 조직 손상이 감염 초기에 큰 영향을 주었으나 니클로사마이드가 초기에 바이러스 증식을 억제시킴으로써 폐조직 손상 완화 또는 지연시킨 것으로 보인다. 또한, 조직 병리 검사 점수화 (Scoring)의 통계학적 분석 결과, 바이러스 접종 후 3 일째, 5 일째, 7 일째 모두 G3군에서 G2군 대비 그 수치가 낮은 것을 확인할 수 있다.
INFLAMMATORY CELL INFILTRATION, ALVEOLAR SPACE
DPI G1 G2 G3
3 0.0 ± 0.0 1.0 ± 0.0 1.0 ± 0.0
5 0.0 ± 0.0 2.3 ± 0.6 0.7 ± 0.6
7 0.0 ± 0.0 0.7 ± 0.6 0.3 ± 0.6
N 9 9 9
INFLAMMATORY CELL INFILTRATION, INTERSTITIAL
DPI G1 G2 G3
3 0.0 ± 0.0 2.0 ± 0.0 1.7 ± 0.6
5 0.0 ± 0.0 2.0 ± 1.7 1.3 ± 0.6
7 0.0 ± 0.0 1.3 ± 1.2 0.7 ± 0.6
N 9 9 9
INFLAMMATORY CELL INFILTRATION, PERVASCULAR
DPI G1 G2 G3
3 0.0 ± 0.0 2.3 ± 0.6 1.3 ± 0.6
5 0.0 ± 0.0 2.3 ± 0.6 1.3 ± 0.6
7 0.0 ± 0.0 2.0 ± 1.3 0.7 ± 0.6
N 9 9 9
HISTOPATHOLOGICAL EXAMINATION
DPI G1 G2 G3
3 0.0 ± 0.0 1.0 ± 0.0 1.0 ± 0.0
5 0.0 ± 0.0 0.7 ± 0.6 1.0 ± 0.0
7 0.0 ± 0.0 0.7 ± 0.6 1.0 ± 0.0
N 9 9 9
HEMORRHAGE
DPI G1 G2 G3
3 0.0 ± 0.0 0.7 ± 1.2 1.0 ± 0.0
5 0.0 ± 0.0 1.0 ± 1.0 1.0 ± 0.0
7 0.0 ± 0.0 1.3 ± 0.7 1.0 ± 0.0
N 9 9 9
따라서, 바이러스 감염시 니클로사마이드를 근육 투여할 경우, 체중 회복, 바이러스 유전자 발현량 억제, 조직 손상 완화 등을 확인할 수 있었다.
실시예 2. 햄스터에 대한 니클로사마이드의 정맥내 및 근육내 투여 PK(약동학적 데이터) 결과 확인
햄스터 5마리씩 2개의 집단을 준비하였으며, 한 집단은 정맥내 투여(IV), 한 집단은 근육내 투여(IM)으로 니클로사마이드를 투여하였다. 그 후, 각 햄스터에 대하여 약동학적 평가를 실시하였는 바, 그 결과를 하기 표 12, 13 및 도 1, 2 에 나타내었다.
니클로사마이드를 정맥내 투여할 경우 빠른 속도로 체내소실이 일어나 24시간도 안되서 체내 니클로사마이드가 거의 대부분 분해된 것을 확인할 수 있다. 하지만, 근육내 투여할 경우, 투여 후 300시간이 지나도 체내 농도를 높은 수준으로 유지할 수 있음을 확인하였다.
Figure PCTKR2021011292-appb-img-000002
Figure PCTKR2021011292-appb-img-000003
실시예 3. SD 래트에 니클로사마이드의 근육 및 피하내 투여 후 PK(약동학적 데이터) 결과 확인
동일한 조성물을 래트의 근육 및 피하에 투여하여 약물동태학적 변화를 관찰하였다. 먼저, 3마리의 래트에는 GMP 공정으로 제조한 니클로사마이드를 근육내 투여하였고, 다른 3마리의 래트에는 GMP 공정으로 제조한 니클로사마이드를 피하내 투여하였다. 그 후, 각 래트 집단에 대하여 약동학적 평가를 실시하였는 바, 그 결과를 하기 표 14, 15 및 도 3 에 나타내었다.(표 14는 GMP 공정으로 제조된 니클로사마이드 IM 투여, 표 15는 GMP 공정으로 제조된 니클로사마이드 SC 투여를 나타낸 것이다.) 그 결과, IM 투여와 마찬가지로, SC 투여도 모두 반감기가 매우 길게 나타나며, 약물이 서서히 방출되는 양상을 띄고 체내 노출이 증가하였음을 확인할 수 있다.
Figure PCTKR2021011292-appb-img-000004
Figure PCTKR2021011292-appb-img-000005
실시예 4. 인간에서 니클로사마이드의 근육내 투여에 따른 PK(약동학적 데이터) 결과 확인
인도에서 니클로사마이드의 투여 용량 별 안전성 및 내약성, 약동학, 약력학적 평가를 위한 건강한 성인 대상 1상 임상시험을 수행하였다. 용량군당 8명 (니클로사마이드 투여군 6명, 위약(Placebo) 2명)을 배정하여 진행하며, 이전 용량군에서의 안전성 및 내약성 확인된 후 다음 용량군을 진행하는 단계적 증량시험으로 진행하였다.
각 용량군은 하기 표 16과 같이 팔과 엉덩이 근육 총 4 부위에 단회 근육 주사 하였으며, 투여 후 대상자로부터 혈액 샘플을 수집하고 약물의 혈장 내 니클로사마이드 농도를 HPLC-MS/MS로 측정하였다. DWRX2003 144mg, 432mg, 960mg, 1200mg 근육 주사 후 시간에 따른 혈중농도 곡선은 도 4에 나타내었으며, 이로부터, 인간도 니클로사마이드를 근육 투여시 시간이 지나도 충분한 혈중 농도를 나타내는 것을 확인할 수 있다.
용량군 팔(양쪽) 엉덩이(양쪽)
코호트 1 - 144　mg 0.1 mL/site*2 sites 0.2 mL/site*2 sites
코호트 2 - 432　mg 0.3 mL/site *2 sites 0.6 mL/site*2 sites
코호트 3 - 960　mg 0.8 mL/site*2 sites 1.2 mL/site*2 sites
코호트 4 - 1200　mg 1.0 mL/site *2 sites 1.5 mL/site*2 sites
실시예 5. 인간에서 니클로사마이드의 투여용량 설정
SARS-CoV-2 억제 효능에 대해 보고된 결과로부터 IC50으로 계산한 니클로사마이드의 예상 유효혈중농도는 55.6~91.56 ng/mL 이다.(Jeon et al., 2020의 In vitro inhibition of SARS-CoV-2 (S type) virus infection using Vero cells; Gassen et al., 2020의 In vitro inhibition of SARS-CoV-2 (G type) virus infection using Vero cells; Ko et al., 2020의 In vitro inhibition of SARS-CoV-2 (S type) virus infection using Calu-3 cells 참고)
또한, 실시예 1 내지 4의 결과를 바탕으로 투여용량 144mg, 432mg, 960mg, 1200mg 에서 인간에서의 시간에 따른 니클로사마이드의 체내 농도를 바탕으로 유효혈중농도를 나타낼 수 있는 유효용량을 예측하여 그 결과를 도 5 에 나타내었다. 도 5에서 확인할 수 있는 바와 같이, 인-비트로(In vitro)에서 IC50으로 혈중 농도가 유지되는 시간은 용량에 따라 최소 3일 ~ 최대 14일 수준으로 예측된다.
실시예 1에 따른 햄스터 모델에서의 투여 용량인 240mg/kg 투여와 유사한 노출을 보이는 인간에게서의 투여 용량은 960mg로 예측되었으며, 이를 표 17에 정리하였으며, 도 6에 시뮬레이션 그래프를 나타내었다.
용량군 인간 햄스터
Dose(mg) 960 31.2 (240 mg/kg)
Cmax(ng/mL) 695.6 420.9
AUC0-168h(ng·h/mL) 23,745 28,687
AUC0-336h(ng·h/mL) 31,453 36,553
니클로사마이드의 투여용량 960mg 을 가지고 임상 2상을 디자인하였다. 구체적으로, 코로나-19로 확진된 경증 또는 중증의 환자 또는 7일 이내 증상 한가지 이상이 발현된 사람에게 하기 표 18과 같이 시험군 및 대조군으로 나누어 단회 근육내 투여를 진행하며, 이에 따라 바이러스 음전 환자 비율, 증상 회복 대상자 비율 등과 같이 코로나-19 치료 효과를 나타내는 지 여부에 대해 확인한다.
Figure PCTKR2021011292-appb-img-000006
실시예 6. 니클로사마이드의 다회 투여 시뮬레이션
니클로사마이드의 단회 투여 외에도 다회(예를 들면, 여러날에 거쳐 투여) 투여하여 in-vitro IC50 농도(55.6~91.56 ng/mL) 이상을 약 14일동안 유지할 수 있다. 반복 투여 간격을 늘릴수록 요구되는 투여용량도 비례적으로 증가할 수 있다.
니클로사마이드의 다회 투여를 확인하기 위하여 세가지 시뮬레이션을 진행하였다. 첫번째 시뮬레이션은 니클로사마이드를 팔 1.0 cc (240 mg) + 엉덩이 2.5 cc (600 mg)로 총 840mg 2일간 반복 투여하였으며, 그 결과를 도 7에 나타내었다. 두번째 시뮬레이션은 팔 1.0 cc (240 mg) + 엉덩이 3.0 cc (720 mg)로 총 960 mg 2일간 반복투여하였으며, 그 결과를 도 8에 나타내었다. 또한, 세번째 시뮬레이션은 니클로사마이드를 팔 또는 엉덩이 양측에 2.0cc(480mg)씩 2일간 투여하였고, 그 결과를 도 9에 나타내었다.
니클로사마이드의 단회 투여와 유사한 총 투여용량으로 2회이상 분산하여 다회 투여하는 경우에도 체내 유효 혈중농도를 높게 유지할 수 있음을 확인할 수 있다.

Claims (21)

  1. 니클로사마이드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 포함하고, 단회 총 투여용량으로 24mg 내지 1500mg의 니클로사마이드를 투여하는 것을 특징으로 하는 니클로사마이드의 근육내 및/또는 피하 투여용 약학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 단회 총 투여용량은 한 부위의 근육 및/또는 피하에 투여되거나 또는 다부위의 근육 및/또는 피하에 분할투여되는 것인 약학적 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 단회 총 투여용량은 96 내지 1200mg인 약학적 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 단회 총 투여용량은 300 내지 1200mg인 약학적 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 단회 총 투여용량은 800 내지 1200mg인 약학적 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 약학적 조성물 중 니클로사마이드의 농도는 200 내지 300mg/ml인 약학적 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 근육내 및/또는 피하 투여의 신체 부위가 팔, 엉덩이, 허벅지 및/또는 복부인 약학적 조성물.
  8. 제7항에 있어서, 상기 근육내 및/또는 피하 투여는 상기 신체 부위의 동일 또는 상이한 부위에 1번 내지 6번의 분할투여;로 투여하는 것인 약학적 조성물.
  9. 제1항에 있어서, 각 투여 부위당 상기 약학적 조성물의 투여량은 0.1ml 내지 5ml인 약학적 조성물.
  10. 제1항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 유효성분으로서 니클로사마이드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물, 및 부형제로 안정화제, 등장화제 및 완충제를 포함하는 것인 약학적 조성물.
  11. 제10항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 액제 또는 동결건조 제형인 약학적 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 상기 액제는 현탁액인 약학적 조성물.
  13. 제10항에 있어서, 상기 안정화제는 카르복시메틸셀룰로오스 또는 이의 염인 약학적 조성물.
  14. 제1항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 인플루엔자 바이러스(Influenza virus), 플라비 바이러스(Flavivirus), 아데노 바이러스(Human adenovirus, HAdV), 코로나 바이러스 중증급성호흡기증후군 코로나바이러스(SARS-CoV 또는 SARS-CoV-1), 제2형 중증급성호흡기증후군 코로나바이러스(SARS-CoV-2),메르스 코로나 바이러스(MERS-CoV), 코로나바이러스 감염증-19(Coronavirus disease 2019 (COVID-19)), 헤르페스 바이러스(Herpes virus), 지카 바이러스(Zica virus), 일본 뇌염 바이러스(Japanese encephalitis virus, JEV), 엡스타인-바 바이러스(Epstein-Barr virus, EBV), 에볼라 바이러스(Ebola virus, EBOV), 리노 바이러스(rhinovirus), 치쿤군야 바이러스(Chikungunya virus, CHIKV), C형 간염 바이러스(Hepatitis C virus, HCV), B형 간염 바이러스(Hepatitis B virus, HBV), A형 간염 바이러스(Hepatitis A virus, HAV), 로타바이러스, 아스트로 바이러스(Astrovirus), 한타바이러스(Hantavirus), 뎅기 바이러스(Dengue virus), SFTS 바이러스(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus), HIV 바이러스, 웨스트나일바이러스(West Nile Virus, WNV), 및 황열바이러스(Yellow fever virus)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 바이러스 감염증의 예방 또는 치료를 위한 것인 약학적 조성물.
  15. 제14항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 코로나바이러스 감염증-19(Covid-19)의 예방 또는 치료를 위한 것인 약학적 조성물.
  16. 제15항에 있어서, 상기 약학적 조성물을 투여 후 3 내지 14일동안 체내 혈중 농도가 니클로사마이드의 코로나바이러스 감염증-19(Covid-19)에 대한 IC50 값을 초과하는 것인 약학적 조성물.
  17. 제16항에 있어서, 니클로사마이드의 코로나바이러스 감염증-19(Covid-19)에 대한 IC50가 45 내지 100ng/ml인 약학적 조성물.
  18. 제1항에 있어서, 상기 약학적 조성물의 최초 투여 후 추가로, 니클로사마이드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 포함하는 약학적 조성물을 24mg 내지 1500mg의 용량으로 1회 내지 4회 더 투여하는 것을 특징으로 하는 니클로사마이드의 근육내 및/또는 피하 투여용 약학적 조성물.
  19. 제18항에 있어서, 니클로사마이드의 최초 투여와 추가 투여의 투여 부위는 동일 또는 상이한 것인 약학적 조성물.
  20. 니클로사마이드의 근육내 및/또는 피하 투여를 위한 니클로사마이드 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 수화물 또는 이의 용매화물을 포함하고, 단회 총 투여용량으로 24mg 내지 1500mg의 니클로사마이드가 투여되는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물의 용도.
  21. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 따른 약학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상에게 근육내 및/또는 피하로 투여하는 방법.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117281800A (zh) * 2023-11-10 2023-12-26 重庆医科大学 氯硝柳胺在制备治疗乙型肝炎的药物中的用途

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102568877B1 (ko) * 2022-05-18 2023-08-18 재단법인 한국파스퇴르연구소 중증열성혈소판감소증후군 치료 또는 예방용 약학 조성물 및 이의 의약 용도
WO2024117476A1 (ko) * 2022-11-28 2024-06-06 주식회사 대웅제약 생체이용률이 개선된 니클로사마이드 함유 조성물

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7544712B1 (en) * 2003-05-28 2009-06-09 National Health Research Insitutes Treatment of coronavirus infection
JP2015528437A (ja) * 2012-08-06 2015-09-28 ライフ・アンド・ブレイン・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＬＩＦＥ ＡＮＤ ＢＲＡＩＮ ＧｍｂＨ 固形腫瘍の治療のためのニクロサミド
EP3168211A1 (en) * 2015-11-10 2017-05-17 Westfälische Wilhelms-Universität Münster Pharmaceutical co-crystals of niclosamide
US20200155484A1 (en) * 2011-04-18 2020-05-21 Max-Delbrück-Centrum Für Molekulare Medizin In Der Helmholtz-Gemeinschaft Niclosamide for the treatment of cancer metastasis

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7544712B1 (en) * 2003-05-28 2009-06-09 National Health Research Insitutes Treatment of coronavirus infection
US20200155484A1 (en) * 2011-04-18 2020-05-21 Max-Delbrück-Centrum Für Molekulare Medizin In Der Helmholtz-Gemeinschaft Niclosamide for the treatment of cancer metastasis
JP2015528437A (ja) * 2012-08-06 2015-09-28 ライフ・アンド・ブレイン・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＬＩＦＥ ＡＮＤ ＢＲＡＩＮ ＧｍｂＨ 固形腫瘍の治療のためのニクロサミド
EP3168211A1 (en) * 2015-11-10 2017-05-17 Westfälische Wilhelms-Universität Münster Pharmaceutical co-crystals of niclosamide

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HOBSON JAMES J., SAVAGE ALISON C., DWYER ANDREW B., UNSWORTH CATHERINE, MASSAM JONATHAN, ARSHAD USMAN, PERTINEZ HENRY, BOX HELEN, : "Scalable nanoprecipitation of niclosamide and in vivo demonstration of long-acting delivery after intramuscular injection", NANOSCALE, ROYAL SOCIETY OF CHEMISTRY, vol. 13, no. 13, 9 April 2021 (2021-04-09), United Kingdom , pages 6410 - 6416, XP055941290, ISSN: 2040-3364, DOI: 10.1039/D1NR00309G *
XU JIMIN, SHI PEI-YONG, LI HONGMIN, ZHOU JIA: "Broad Spectrum Antiviral Agent Niclosamide and Its Therapeutic Potential", ACS INFECTIOUS DISEASES, vol. 6, no. 5, 8 May 2020 (2020-05-08), US , pages 909 - 915, XP055877565, ISSN: 2373-8227, DOI: 10.1021/acsinfecdis.0c00052 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117281800A (zh) * 2023-11-10 2023-12-26 重庆医科大学 氯硝柳胺在制备治疗乙型肝炎的药物中的用途

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