JPH04501857A - 肝炎の治療方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 計重」鉦伍ｎ迭 光１と１■ 本発明はＢ型肝炎の治療方法に関する。

ｌ豆立１１ Ｂ型肝炎ウィルスによる慢性感染は、世界の人口のおよそ５％を冒している。Ｂ 型肝炎の慢性保菌者は、慢性肝臓疾病による罹患率および死亡率を増加する虞れ があり５そしてこれらの比率は、究極的には肝硬変および／または肝細胞癌を増 加するであろう。現在のところ、慢性Ｂ型肝炎のための証明された利益ある療法 は無い。

α−インターフェロンは末期を時間延長するために処置された亜群の患者におい て卓越した見込みを示すけれども、具合悪いことには、応答速度全体ががっかり するほどに低かった。

ヒトＢ型肝炎ウィルスは、ヘパドナウィルス（ｈｅｐａｄｎａｖｉｒｕｓｅｓ） として知られているウィルス科の一員である。この科の他のウィルスはマーモッ ト肝炎ウィルス、地上性リス肝炎ウィルスおよびアヒルＢ型肝炎ウィルスである 。これら動物ウィルスは、ヘパドナウィルスの特徴付けおよびその珍しい複製サ イクルの描写のために非常に貴重なモデルであった。これらウィルスは、逆転写 酵素活性を必要とするところのＲＮＡ鋳型を介して不斉的に複製する。Ｓｕｎ＋ ｍｅｒｓ　、　Ｃｅ１ｌ　２９：　４０３−４１５．１９８２　参照。

２°、３′−ジデオキシヌクレオシドは、最近、Ｍａｔｓｕｙａ等により　Ｐｒ ｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ　１９８６；　８３　：１ ９１１−１９１５において記載されるように、ヒト免疫不全ウィルス　ＨＴＶの 逆転写酵素活性に対して効能ある抗ウィルス活性を有することが示されたウィル スである。これらの類似物の中で最も大きい効能のあるものは、２’、　３’− ジデオキシシチジン、またはＤＤＣであり、これは細胞培養において１０　ｎＭ と同じ位低い濃度においてＨＩＶを阻害する。また、２°、３゛−ジデオキシア デノシン（ＤＤＡ）および２°、３°−ジデオキシグアノシン（ＤＤＧ）および ２゛、３°−ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）も、能力のあるＨＩＶの阻害因子で ある。

本発明の目的は、従来技術における欠点を克服することにある。

本発明のもう一つの目的は、Ｂ型肝炎を治療する方法を提供することにある。

本発明の別の目的は、Ｂ型肝炎を治療するための組成物を提供することにある。

本発明により、Ｂ型肝炎は、２゛、３°−ジデオキシイノシン（ＤＤＩ）、２° 、３°−ジデオキシグアノシン（ＤＤＧ）および２°、３°−ジデオキシアデノ シン（ＤＩ）Ａ）をＢ型肝炎に感染された患者に投与することにより、治療する ことができる。２゛、３°−ジデオキシイノシン、２°。

３“−ジデオキシグアノシンおよび２”、　３’−ジデオキシアデノシンは、ア ナポリックリン酸化に続いて、Ｂ型肝炎ウィルスの逆転写酵素を明害する。

本発明による組成物の抗ウィルス活性の正確な機構は知られていないが、ＤＤＡ 、ＤＤＧまたはＤＤＩの作用の機構はウィルス性ポリメラーゼ、特に逆転写酵素 の阻害であると思われる。ＤＤＡ、ＤＤＧおよびＤＤＩは、ヌクレオシド類似物 であり、そしてこれらは、ひとたび成長するＤＮＡ鎖の中に組み込まれると、正 常なホスホジエステル結合の形成を妨げるように思われる。この過程は、゛鎖終 結（ｃｈａｉｎ　ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｌ”に至る。ＤＤＩおよびＤＤＡは逆 ＤＤＧ転写酵素について高いアフィニティを有し、そして従って、ゲノムＲＮＡ 鋳型からの逆転写を妨げることにより、Ｂ型肝炎ウィルスの複製を阻害すること ができる。複製におけるこの干渉により、血清レベルのウィルスの減少と、肝臓 中のＢ型肝炎ウィルスＤＮＡの量の緩やかな降下となる。

ＤＤＧ、ＤＤＡおよびＤＤｉは、経口により吸収されかつ使用条件下で比較的に 最小の副作用を有するので、特に抗ウィルス剤として魅力あるものである。

日の言　な！日 ２′、３“−ジデオキシイノシン、２°、３゛−ジデオキシグアノシンまたは２ ゛、３“−ジデオキシアデノシンは、Ｂ型肝炎に感染された患者においてそれを 治療するために使用することができる。該ヌクレオシドは、経口によりよく吸収 され、そして一般に良好な耐容性がある。

インヒトＯ（ｉｎ　ｖｉｔｒｏ）　Ｄ　Ｄ　Ａ　トリホスフェート、ＤＤＧトリ ホスフェート、またはＤＤＩトリホスフェートは、アヒルＢ型肝炎ウィルスある いはヒトＢ型肝炎ウィルスのいずれのＤＮＡポリメラーゼ活性についてほとんど 効果が無い、以前の研究者たちは、Ｂ型肝炎における抗ウィルス活性を評価する ためにインビトロ分析を用いａｌ、、　Ａｎｔｉｍｉｃ、　組弘」Ｃｈｅａ＋ｏ 、　１９：　４４−５０．１９８１−ｉＪ照。

しかしながら、今、この評価は抗ウィルス剤をスクリーニングする手段として信 頼できないものであることが発見された。ヘパドナウィルスに感染されたヒトお よびアヒルよりの血清中で測定されたＤＮＡポリメラーゼ活性は、複製に必要な ウィルス酵素のうちの一つのみを表わし、そしてこの活性は、阻害に対して相対 的に耐性である。

血」して見りし折 血清ＤＮＡポリメラーゼ活性は、精製ディン（Ｄａｎｅ）粒子の中への１Ｈ−チ ミジンの混入をＫａｐｌａｎ　＋　ｅｔ　ａｌ。

Ｊ、　Ｖｉｒｏｌ、　１２：　９９５−１００５．１９７３の方法により測定す ることにより決定される。ＤＨＢＶおよびＨＢＶについてのヌクレオシド類似物 としてのＤＤｌ、ＤＤＡおよびＤＤＧのインビトロ効果は、ＤＮＡポリメラーゼ 反応を使用して評価した。ある濃度範囲のＤＤＩ、ＤＤＡまたはＤＤＧトリホス フェートを、精製ゲイン粒子とともに３７℃にて１時間の間定温に保ち、そして その後ＤＮＡポリメラーゼ反応を行った。

ＤＨＢＶ　ＤＮＡは、ｃＡＣＹＣｌ　８４中の３．Ｏｋｂ全長ＤＨＢＶ　ＤＮＡ クローンを使用して分子ハイブリッド形成により分析した。ＤＨＢＶ　ＤＮＡ挿 入物は、ＥｃｏＲｌによる消化とアガロースゲル電気泳動によりプラスミドＡ４ ９よりぜ離した。ＤＨＢＶ　ＤＮＡは、Ｆｅｉｎｂｅｒｇ　、　ｅｔ　ａｌ、　 、１ｂｉｄ、、の方法を使用してｌａｐの放射性同位体により標識して３ｘｌＯ ’ないし１ｘｌＯ＠ｃｐｓ／ｕｇの比活性とした。

ＤＨＢＶ　ＤＮＡは、血清および肝臓組織中においてスロットプロット分析（ｓ ｌｏｔ　ｂｌｏｔ　ａｎａｌｙｓｉｓ）により検出した。血清中のＤＨＢＶ　Ｄ ＮＡの分析については、ｆｏｕｌの血清を１ＬＬｌのＩＭ　ＮａＯＨで５分間変 性した。その後混合物を、９０ｕｌの１Ｍ酢酸アンモニウムを添加することによ り中和した。肝臓生検試料中のＤＨＢＶ　ＤＮＡの分析については、およそ　１ ００■ｇの細かく切り刻まれた肝臓を１ｍｌの水冷５０ｍｍ　Ｔｒｉｓ　、ｐＨ ８，５゜１０＋ｗＭ　Ｅ　Ｄ　Ｔ　Ａおよび１％ＳＤＳ中に均質化した。粗肝臓 均質物を、プロティナーゼＫ　（２００μｓ／ｍｌ）により５０℃にて２時間の 間消化した＊　Ｔｒｉｓ　ｐＨ７，５中のフェノールおよびクロロホルムの混合 物（１：　１）による二回の抽出物により全細胞ＤＮＡを調製した。ＤＮＡを無 水エタノールにより沈殿させ、そしてＴＥ緩衝液中のおよそ２躊ｇ／ｓｌのＤＮ Ａ濃度に希釈した。

血清または肝臓より調整された百マイクロリットルのＤＮＡ試料を、スロットプ ロット装置と真空マニホールドを使用して、１Ｍ酢酸アンモニウムで予め湿らせ たニトロセルロース濾紙の上に斑点を付けた。該膜を空気乾燥しそして真空オー ブン中で８０℃にて２時間の間焼成しそしてＤＨＢＶ　ＤＮＡプロウブ（ｐｒｏ ｂｅ）を用いて４０’Ｃにてハイブリッド形成した。ハイブリッド形成された膿 をｘｌＩｉｌフィルムに５．２４および７２時間の間暴露し、そして得られたオ ートラジオグラムをＺｅｎｉｔｈ走査型デンシトメータを使用して走査した。Ｄ ＨＢＶ　ＤＮＡの量は、各々の試料についてのオートラジオグラフィー信号を、 正常血清および正常アヒル肝臓ＤＮＡ中で希釈された同じフィルタ上に斑点を付 けた知られた量のクローン化ＤＮＡの該信号と比較することにより定量した。

また肝臓組織ＤＨＢＶ　ＤＮＡは、サインハイブリッド形成法（Ｓｏｕｔｈｅｒ ｎ　ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）により分析した。

サイン法Ｊ、　Ｍｏ１．　Ｂｉｏｌ、　９８：　５０３−５１７．１９７５＋ｃ ヨ’）、１１ａｈｌ　、　ｅｔ　ａｌ、　、Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ 、　Ｓｃｉ、　ＩＪｓＡ　７６　：３６８３−３６８７．１９７９により変形さ れたように、十マイクログラムの全細胞ＤＮＡを１％アガロース中で水平スラブ ゲル電気泳動にかけそしてニトロセルロース紙に移した。ハイブリッド形成およ びオートラジオグラフィーを、上記したように行った。

肢ヱロＬ近 学生の試験、正常分布についてのＳｈａｐｉｒｏ−ｍｉｌｋ試験およびＳｐｅａ ｒｍａｎの等級補正係数を用いて、データを比較した。血清ＤＮＡポリメ゛ラー ゼレベルの平均および標準偏差は、データの対数変換の後算出した。これらウィ ルス［１の血清および肝臓レベルにおける変化は、前処理レベルの百分率阻害と して表現した。

アヒルＬｉＪＬｊ　ウ　ルスに　・に　さ　アヒルについてＤＤＡのインビボ　 ｉｎ　ｖｉｖ。

インビボの経験とは反対に、ＤＤＡはアヒルＢ型肝炎ウィルスにより慢性的に感 染されたアヒルに、ヒト抗ウイルス試験（参照Ｙａｒｃｈｏａｎ　、ｅｔ　ａｌ ｌ、Ｌａｎｃｅｔ　１　ニア６−８１、１９８８）において使用されたのと同様 の投与量で７日間与えるとき、効能のある抗ウィルス活性を示した。ＤＮＡポリ メラーゼ活性とアヒルＢ型肝炎ウィルスの双方の阻害の程度は、同様であり（６ ７％および６９％それぞれ）そして慢性Ｂ型肝炎の治療に使用された他の抗ウイ ルス因子の研究において報告されたこれら標識の阻害の程度に匹敵し得るもので あった。しかしながら、抗ウイルス効果は一部のみのものであり、アヒルはアヒ ルＢ型肝炎ウィルスＤＮＡまたはＤＮＡポリメラーゼ活性に対して完全に陰性と ならず、かつ、これらウィルス標識のレベルはＤＤＡ療法を停止した後まもなく 上昇し始めた。これらの発見は、慢性Ｂ型肝炎に使用された他の抗ウィルス剤に ついて報告されたものと同様である。しかしながら、ＤＤＡ投与に続（有望な発 見は、ＤＮＡポリメラーゼ活性およびアヒルＢ型肝炎ウィルスＤＮＡの阻害のな かには、療法を停止した後１２日間の限りはなおも観察されたものがあることで ある。この観察は、アデニンアラビノシドおよびアシクロヴイア（ａｃｙｃｌｏ ｖｉｒｌを用いて、これら因子の禁断に続いて、アヒルＢ型肝炎ウィルスの血清 レベルがしばしば上記の前処理レベルに跳ね返るという発見（Ｈｉｒｏｔａ　、 　ｅｔ　ａｌ、　、Ｈｅ　ａｔｏｌｏ　７二２４−２８゜アヒルＢ１　ニラ　ル スによ　・に　されたアヒルについてＤＤＩおよびＤＤＧの　ンビボ２’、　３ ’−ジデオキシイノシンおよび２゛、３°−ジデオキシグアノシンの効果は、ア ヒルＢ型肝炎ウィルス（ＤＨＢ’Ｖ）により慢性的に感染された１８匹の北東タ ックにおいて評価した。６匹のアヒルはＤＤＩを、そして６匹のアヒルはＤＤＧ を、５日間の間６時間毎に丸薬により注射１回につき　０．８　ｍｇ／ｋｇの割 合で与えられた。抗ウイルス応答は、ＤＨ’ＢＶ　ＤＮＡポリメラーゼを含め、 ウィルス複製の血清標識をモニターすることにより評価した。ＤＤＩおよびＤＤ Ｇの血清レベルは、丸薬注射後２０分にて、それぞれ３８６　ｎｇ／ｍｌおよび ７７２　ｎｇ／ｍｌ　、そして１時間後にて、それぞれ１２０　ｎｇ／ｍｌおよ び５’Ｏｎｇ／ａ１１であった。

抗ウイルス療法は良好な耐性があり、そして全てのアヒルは、療法および肝臓生 検よりも長生きした。アヒルは薬剤毒性の明らかな証拠を示さなかった。

衣 ＤＨＢＶ　ＤＮＡポリメラーゼ（ｃｐｓ／（１，２ａ＋１）対照（６１５１０７ ±４００９　５１８２±４５０１　３５７１±３０７０Ｄ　Ｄ　Ｉ　２４１７± １６０９　１００１±８５０　６３０±５４８Ｄ　Ｄ　Ｇ　３５７１±３０７０ 　７００±２２９　１５７２±４３２表は、ＤＤＧおよびＤＤＩの双方が、対照 と比較して（ｐ＜０．０１）　、治療３日によりすべてのアヒルにおいて、ＤＮ Ａポリメラーゼ活性の大変意義ある阻害、それぞれ８３％と７９％をひき起こす ことを示す０両方の薬剤は同程度の阻害をひき起こした。しかしながら、４匹の ＤＤＧ治療のアヒルにおいては、治療を止めて５日目においてＤＮＡポリメラー ゼ活性の跳ね返りが観察された。

ＤＮＡポリメラーゼ活性の跳ね返りは、６匹のＤＤＩ治療アヒルのうちの１匹の みにおいて発生し、そして阻害は治療を停止した後１３日までの間続け、そして 対照群（ｐ＜０．０１）と比較して有意なものであった。

２匹のアヒルについてＡｒａ−ＡＭＰによる治療は、他の人（参照Ｈｉｒｏｔａ 　、ｅｔ　ａｌ、　、免り、　ｅｆｔ、　）により報告されたものと同様の結果 を得た。ＤＮＡポリメラーゼおよびＤＨＢＶ　ＤＮＡレベルは、療法の間に７１ ％および１００％だけ減少するが、これらウィルス標識のレベルは、筋肉内注射 を止めてから４日以内に急速に上昇して前処理の値よりもより大きくなる。

本発明において使用するためのヌクレオシドは、以下の式を肴する。

ジデオキシアデノシン　ジデオキシイノシンＤＤＧ、ＤＤＡまたはＤＤＩは、エ ステル基の非カルボニル部分が、直鎖または枝分れ鎖のアルキル基、アルコキシ アルキル基（例えば−メトキシメチル基）、アルアルキル基（例えばベンジル基 ）、アリールオキシアルキル基（例えばフェノキシメチル基）、アリール基（例 えば所望によりハロゲン原子、炭素原子数１ないし４のアルキル基または炭素原 子数１ないし４のアルコキシ基により置換されたフェニル基）より選択されたカ ルボン酸エステル；スルホン酸エステル例えばアルキル−またはアルアルキル− スルホニル基（例えばメタンスルホニル基）；およびモノ−、ジー、そしてトリ ーホスフェートエステルの形態であり得る。

また上記に記載した化合物には、薬学的に許容し得るその塩も含まれる。別個列 挙しない限り、存在する全てのアルキル部分は有利には１ないし１８個の炭素原 子、特に１ないし４個の炭素原子を含む。かかるエステルにおいて存在する全て のアリール部分は、好ましくは、置換フェニル基を含め、フェニル基よりなる。

本発明によりＢ型肝炎を治療するのに使用し得るところの化合物の薬学的に許容 し得る塩および薬学的に許容し得る誘導体の例には、塩基性塩、例えば塩基例え ばアルカリ金属（ナトリウム、リチウム、カリウム）塩、アルカリ土類金属（マ グネシウム〕塩、アンモニウムおよびＮＸ４　（Ｘは炭素原子数１ないし４のア ルキル基を表わす。）より誘導されたものが含まれる。水素原子またはいずれか のアミノ基を含む生理学的に許容し得る塩には、有機カルボン酸、例えば酢酸、 乳酸、酒石酸、マレイン酸、イソチオン酸、ラクトビオン酸および琥珀酸の塩； 有機スルホン酸、例えばメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホ ン酸、およびｐ−ｔ−ルエンスルホン酸の塩；無機酸、例えば塩酸、硫酸、燐酸 、およびスルファミン酸の塩が含まれる。ヒドロキシル基を含む化合物の生理学 的に許容し得る塩には、適当なカチオン、例えばＮ　ａ　”　、Ｎ　ＨＹ　４　 ”、およびＨＸ　４　”　（式中、Ｙは炭素原子数１ないし４のアルキル基をあ られしかっＸはハロゲン原子を表わす。）と組み合わせた前記化合物のアニオン が含まれる。

本発明に従い使用し得る化合物の薬学的に許容し得る誘導体の特別例には、モノ ナトリウム塩および次の５個のエステル：モノホスフェート、ジナトリウムモノ ホスフェート、ジホスフェート、トリホスフェート、アセテート、３−メチルブ チレート、オクタノエート、パルミテート、３−クロロベンゾエート、４−メチ ルベンゾエート、コハク酸水素エステル、ビバレート、およびメチレートが含ま れる。

また本発明の範囲内に含まれるものには、薬学的に許容し得る塩、エステル、該 エステルの塩、ニトリルオキシド、または、処方箋を受ける者への投与の際、上 記したようなヌクレオシド類似物または抗ウイルス活性代謝物もしくはその残留 物を、直接的あるいは間接的に、提供し得るすべての他の共有結合化合物または 非結合化合物がある。全てのこれら化合物は、ウィルス感染度および複製の効果 的な阻害のために十分な効能のある濃度にて活性でありかつ相対的に非毒性であ る。

本発明のヌクレオシドは溶液により単独で投与することができる。しかし、有効 成分は薬学的配合剤の中にて使用または投与し得る。これら配合剤は、一種また はそれ以上の薬学的に許容し得る担体および／または他の治療剤とともにヌクレ オシドまたはその誘導体よりなる。

本発明の範囲内に含まれるように、“許容し得る”は、配合剤中の他の有効成分 と両立し得るものでかつ患者または宿主細胞に有害で無いものと定義される。

Ｂ型肝炎を治療するためのＤＤＧ、ＤＤＡまたはＤＤＩの投与は、種々の投与手 段により行うことができる。

いかなる投与手段を選択しようとも、ヌクレオシドの循環レベルを約０．Ｏ１μ Ｍないし約２．０ｕＭの範囲内になるようにすべきである。４時間毎に投与して およそ０．０５ないし約０．５−ｇ／ｋｇの範囲は、ヒトにおいてウィルスタテ イック（ｖｉｒｕｓｔａｔｉｃ）範囲にあると考えられる。これに達するために は、経口投与のための予備投薬の範囲は、より広範に、例えば、４時間ごとに投 与して０．００１−０．５０−ｇ／ｋｇであっていい。投薬変形は、個々の患者 において毒性のある副効果を改善または抑制するために必要があると認められる 。

本発明による薬学的配合剤は、好都合には単位投薬の形態で投与することができ そして薬学技術において知られたいかなる方法によっても製造することができる 。該技術の熟練の範囲内にて、投薬内に含まれるべき有効量は決定される。

本発明による薬学的配合剤は、薬学的に使用し得る製剤へのり、ＤＡまたはＤＤ Ｉの加工を容易にす、るところの賦形剤および助剤よりなる適当な薬学的に許容 し得る担体を含むことができる。好ましくは製剤、特に経口投与できそして好ま しい種類の投与のために使用し得るところのもの、例えば錠剤、糖衣剤、カプセ ル□剤、およびまた直腸投与することができるもの、例えば坐剤、並びに注射ま たは経口による投与のために適する溶液は、賦形剤とともに、約０．１ないし９ ９重量％、そして好ましくは約２５−８５重量％のＤＤＣを含む。

本発明の薬学的製剤は、それ自体知られている方法により、例えば１通常の混合 、顆粒化、糖衣剤製造、溶解または凍結乾燥プロセスにより製造される。従って 、経口使用のための薬学的製剤は、活性化合物を固形賦形剤とともに組合せ、所 望により得られた混合物を粉砕し、そして、適当な助剤を加えた後、粒剤の混合 物を、望みあるいは必要ならば、加工して錠剤または糖衣剤コアとすることによ り得られる。

適する賦形剤は、特に、充填剤例えば糖質、例えばラクトースまたはスクロース 、マンニトールまたはソルビトール、セルロース製剤および／またはカルシウム ホスフェート、例えばリン酸カルシウムまたはリン酸水素カルシウム、並びに結 合剤例えば澱粉ペースト用剤、例えば、とうもろこし澱粉、小麦澱粉、米澱粉、 じゃがいも澱粉、および同様のもの；ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセル ロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセ ルロース、および／またはポリビニルピロリドンである。所望ならば、壊変剤・ 例えば上述の澱粉およびカルボキシメチル澱粉、架橋ポリビニルピロリドン、寒 天、アルギン酸またはその塩例えばアルギン酸ナトリウムを添加することができ る。助剤、例えば、流れ調整剤および潤滑剤、例えばシリカ、タルク、ステアリ ン酸またはその塩例えばステアリン酸マグネシウムもしくはカルシウム、および ／またはポリエチレングリコールである。糖衣剤コアは、望むならば、胃液に耐 え得るところの適当なコーティングを備λる。この目的のために、濃縮糖質溶液 を使用することができ、これは所望によりアラビアゴム、タルク、ポリビニルピ ロリドン、ポリエチレングリコール、二酸化チタン、ラッカー溶液、および適当 な有機溶剤または溶剤混合物を含むことができる。胃液に耐え得るコーティング を作るためには、適当なセルロース製剤例えばアセチルセルロースフタレートま たはヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートの溶液が使用される。染料 または顔料は、例えば、同定または活性化合物用量の異なる組合せを区別するた めに、錠剤または糖衣剤コーティングに加えられる。

経口使用することができる他の製剤には、ゼラチンで作られたブツシュ−フィツ ト（ｐｕｓｈ−ｆｉｔ）カプセル剤、並びにゼラチンで作られた軟質密封カプセ ル剤、および゛可塑剤例えばグリセロールまたはソルビトールが含まれる。ブツ シュ−フィツトカプセル剤は活性化合物を、充填剤例えばラクトース、結合剤例 えば澱粉、および／または潤滑剤例えばタルクまたはステアリン酸マグネシウム 、および所望により、安定剤と混合し得るところの顆粒の形態で含み得る。軟質 カプセル剤においては、活性化合物は好ましくは適当な液体例えば脂肪油、液状 パラフィン、または液状ポリエチレングリコールの中に溶解または懸濁される。

加えて、安定剤も添加し得る。

直腸使用することができる可能な薬学的製剤には、例えば、車側が含まれ、これ は有効成分と車側基剤の組合せよりなる。適する車側基剤には、天然または合成 トリグリセライド、パラフィン炭化水素、ポリエチレングリコールまたは高級ア ルカノールが含まれる。加えて、活性化合物と基剤の組合せよりなるゼラチン直 腸カプセル剤を使用することもまた可能である。可能な基剤には、例えば、液状 トリグリセライド、ポリエチレングリコール、およびパラフィン炭化水素が含ま れる。

非経口投与のために適する配合剤には、適当な油状注射懸濁液を投与し得るよう な活性化合物の水溶液が含まれる。適する脂質親和溶剤またはビヒクルには、脂 肪油、例えばごま油、合成脂肪酸エステル、例えばエチルオレエートまたはトリ グリセライドが含まれる。水性注射懸濁液は、懸濁液の粘度を増大するところの 物質例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトール、および／ま たはデキストランを含有することができる。所望により、懸濁液はまた安定剤を も含むことができる。

本発明においては、Ｂ型肝炎は、トリホスフェート誘導体を患者に直接受は渡す ことにより治療することができる。トリホスフェート化合物は細胞膜を浸透しな いので、“非シールド（ｕｎｓｈｉｅｌｄｌ”トリホスフェートは使用すること ができないことはよく知られている。従って、この発明のトリホスフェート誘導 体は、リポソーム、細胞内伝達系として吸収され得ない薬剤を細胞膜な通して正 常に受け渡し得るところの粒子（直径約２５μＭないし約１ｕＭ）を用いて受け 渡される。薬剤受渡のためのリポソームのかような使用は当該技術においてよく 知られており、そして水性環境において同時に二層を形成するリン脂質の能力に 基づくものである。

リポソームを形成するーの方法は、リン脂質を水性懸濁液中で高速で攪拌するこ とによる。これにより、リポソームに特有な閉じた小胞が形成される。ひとたび 細胞内に入ると、トリホスフェート誘導体はＢ型肝炎ウィルスの複製を排除する ように作用する。トリホスフェートは細胞の内側にて活性であり、そしてその中 では活性形態であると示されているので、リポソームは明らかにこれら薬剤の受 渡のための選択の一方法である。

膣投与のために適する配合剤は、有効成分に加えて、当該技術において適当であ ると知られているところの担体を含む、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル 、ベースト、フオーム、またはスプレー配合剤の形態であり得る。

本発明による配合剤は、単位服用量（ｕｎｉｔ−ｄｏｓｅｌまたは複数服用量（ ｍｕｌｔｉ−ｄｏｓｅ）の密封容器、例えばアンプルおよび水薬びんであってよ く、また使用直前に注射のための無菌液状担体の添加のみを必要とする親油化条 件において保存し得る。即席注射溶液および懸濁液は、以上記載した種類の滅菌 粉末、顆粒、および錠剤より製造することができる。

本発明によりＢ型肝炎を治療するために、薬剤は一般に１日に２ないし６回投与 される。経口薬の生物学的利用能を改良するために、しばしば、普通の緩衝液例 えば酢酸ナトリウムを、本発明によるヌクレオシドを含む溶液に添加するのがよ り好ましい。

特定の態様についての以上の記載は、他の人が、最近の知識を適用することによ り、包括的な概念から離れることなく、特定の態様のような様々な適用のために 容易に変形および／または適合し得る程に、本発明の一般的性質を十分に表わす であろう。そして従って、かような適合および変形は、開示された態様の意義と 均等物の範囲内に包含されることを意味する１本明細書では表現法および用語法 は記載の目的のためであって制限されるものではないと理解すべきである。

補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４の個平成３年１１月１４日

Claims (30)

【特許請求の範囲】
1. １．Ｂ型肝炎に感染された患者に、２′，３′−ジデオキシイノシンおよび２′ ，３′−ジテオキシアデノシンおよび２′，３′−ジデオキシグアノシンよりな る群から選択された有効量のヌクレオシドを投与することよりなる、Ｂ型肝炎の 治療方法。
2. ２．ヌクレオシドは、トリホスフェート塩の形態にあるところの請求項１記載の 方法。
3. ３．ヌクレオシドは、薬学的に許容し得る担体の中にあるところの請求項１記載 の方法。
4. ４．担体は、生理的食塩水であるところの請求項３記載の方法。
5. ５．担体は、リボソームであるところの請求項２記載の方法。
6. ６．ヌクレオシドを、毎日２ないし１２回投与して約０．０３ないし約０．５ｍ ｇ／ｋｇの範囲の服用量で投与するところの請求項１記載の方法。
7. ７．ヌクレオシドを、経口投与するところの請求項１記載の方法。
8. ８．ヌクレオシドを、静脈投与するところの請求項１記載の方法。
9. ９．ヌクレオシドを、筋肉内投与するところの請求項１記載の方法。
10. １０．ヌクレオシドを、直腸投与するところの請求項１記載の方法。
11. １１．ヌクレオシドは親油化粉末の形態にあり、そしてこれを鼻腔内投与すると ころの請求項１記載の方法。
12. １２．ヌクレオシドは、２′，３′−ジデオキシアデノシンであるところの請求 項１記載の方法。
13. １３．ヌクレオシドは、２′，３′−ジデオキシイノシンであるところの請求項 １記載の方法。
14. １４．ヌクレオシドは、２′，３′−ジデオキシクアノシンであるところの請求 項１記載の方法。
15. １５．薬学的に許容し得る担体中に、２′，３′−ジデオキシイノシン、２′， ３′−ジデオキシアデノシンおよび２′，３′−ジデオキシクアノシンよりなる 群から選択されたヌクレオシドよりなる組成物。
16. １６．ヌクレオシドは、トリホスフェート塩の形態にあるところの請求項１５記 載の組成物。
17. １７．Ｂ型肝炎の治療のために、２′，３′−ジデオキシイノシン、２′，３′ −ジデオキシアデノシンおよび２′，３′−ジデオキシグアノシンよりなる群か ら選択されたヌクレオシドを使用する方法。
18. １８．ヌクレオシドは、トリホスフェート塩の形態にあるところの請求項１７記 載の方法。
19. １９．ヌクレオシドは、薬学的に許容し得る担体の中にあるところの請求項１７ 記載の方法。
20. ２０．担体は、生理的食塩水であるところの請求項１９記載の方法。
21. ２１．担体は、リボソームであるところの請求項１９記載の方法。
22. ２２．ヌクレオシドを、毎日２ないし１２回投与して約０．０３ないし約０．５ ｍｇ／ｋｇの範囲の服用量で与えるところの請求項１７記載の方法。
23. ２３．ヌクレオシドを、経口投与するところの請求項１７記載の方法。
24. ２４．ヌクレオシドを、静脈投与するところの請求項１７記載の方法。
25. ２５．ヌクレオシドを、筋肉内投与するところの請求項１７記載の方法。
26. ２６．ヌクレオシドを、直腸投与するところの請求項１７記載の方法。
27. ２７．ヌクレオシドは親油化粉末の形態にあり、そしてこれを鼻腔内投与すると ころの請求項１７記載の方法。
28. ２８．ヌクレオシドは、２′，３′−ジデオキシアデノシンであるところの請求 項１７記載の方法。
29. ２９．ヌクレオシドは、２′，３′−ジデオキシイノシンであるところの請求項 １７記載の方法。
30. ３０．ヌクレオシドは、２′，３′−ジデオキシクアノシンであるところの請求 項１７記載の方法。