WO2024019519A1 - iCP-NI를 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물 - Google Patents

iCP-NI를 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물 Download PDF

Info

Publication number
WO2024019519A1
WO2024019519A1 PCT/KR2023/010394 KR2023010394W WO2024019519A1 WO 2024019519 A1 WO2024019519 A1 WO 2024019519A1 KR 2023010394 W KR2023010394 W KR 2023010394W WO 2024019519 A1 WO2024019519 A1 WO 2024019519A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
icp
cytokine storm
disease
pharmaceutical composition
treatment
Prior art date
Application number
PCT/KR2023/010394
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
조대웅
Original Assignee
주식회사 셀리버리
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 셀리버리 filed Critical 주식회사 셀리버리
Publication of WO2024019519A1 publication Critical patent/WO2024019519A1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Definitions

  • the present invention relates to a pharmaceutical composition containing iCP-NI for the treatment or prevention of cytokine storm or inflammatory disease, and allows a wider variety of patients to use the previously developed injectable cytokine storm suppressing community infectious disease treatment iCP-NI on their own. To this end, it was developed as a patient-friendly inhalation formulation.
  • iCP-NI a treatment for community infectious diseases that suppresses cytokine storm
  • iCP-NI improved cell-permeable nuclear import inhibitor
  • NLS nuclear localization signal
  • CPP third-generation hydrophobic cell penetrating peptide
  • the NLS of iCP-NI increased stability by introducing cysteine at each end of 10 amino acids and connecting them with disulfide bonds to form a ring, and was ultimately composed of 24 amino acids.
  • the NLS of iCP-NI preempts the importin protein, which is essential for inflammation-associated transcription factors (IATFs) when they move into the nucleus, and prevents IATFs from entering the nucleus. This prevents a cytokine storm from occurring in advance. By blocking it, various infectious/inflammatory diseases, including COVID-19, can be treated.
  • IATFs inflammation-associated transcription factors
  • the purpose of the present invention is to develop iCP-NI, a therapeutic agent for suppressing cytokine storms developed as an injectable formulation, into an inhaled formulation so that a wider range of patients can easily access it.
  • an example of the present invention is a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of cytokine storm or inflammatory disease comprising an iCP-NI peptide containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 and a pharmaceutically acceptable salt thereof. provides.
  • Another example of the present invention is the step of administering to a subject a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of cytokine storm or inflammatory disease comprising an iCP-NI peptide containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 and a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of cytokine storm or inflammatory disease comprising an iCP-NI peptide containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 and a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • This iCP-NI has the effect of suppressing cytokine storm and treating inflammatory diseases.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be used as an inhalant, and has excellent effects in reducing the number of neutrophils and macrophages in the affected area, suppressing inflammatory cytokines/chemokines, recovering body weight, and suppressing inflammatory cells and collagen infiltration. represents.
  • Figure 1 is a graph showing the efficacy of iCP-NI inhalant in suppressing inflammatory cell infiltration in the Poly I:C-induced acute pneumonia model in terms of total cell count (a), neutrophil count (b), and macrophage count (c).
  • Figure 2 is a photograph verifying the inhibition of inflammatory cell recruitment into the lung by iCP-NI inhalant in the Poly I:C-induced acute pneumonia model using immunofluorescence.
  • FIG. 3 Pro-inflammatory cytokines/chemokines of iCP-NI inhalant in the Poly I:C acute pneumonia model: TNF- ⁇ (a), IL-6 (b), and MCP-1 (c) ) and a graph showing the effect of suppressing the expression of IFN- ⁇ (d).
  • Figure 4 A graph showing the verification of the weight recovery efficacy of iCP-NI inhalant in the Poly I:C induced acute pneumonia model.
  • Figure 5 Photo showing the long-term protection effect of iCP-NI inhalant in the Poly I:C-induced acute pneumonia model.
  • FIG. 7 Photograph of the tissue recovery efficacy of iCP-NI inhalant in SARS-CoV-2.
  • Figure 8 Graph showing the inhibitory efficacy of iCP-NI inhalant on the cytokines IL-17 (a), TNF- ⁇ (b), and IL-1 ⁇ (c) in SARS-CoV-2.
  • One example of the present invention provides a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of cytokine storm or inflammatory disease, comprising an iCP-NI peptide containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 and a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the pharmaceutical composition may include a peptide compound, a stereoisomer thereof, a solvate, or a pharmaceutically acceptable salt as an active ingredient.
  • the pharmaceutical composition may further include known active ingredients with anticancer activity.
  • the pharmaceutical composition may additionally include a pharmaceutically acceptable diluent or carrier.
  • the diluent may be lactose, corn starch, soybean oil, microcrystalline cellulose, or mannitol, and the lubricant may be magnesium stearate, talc, or a combination thereof.
  • the carrier may be an excipient, disintegrant, binder, lubricant, or a combination thereof.
  • the excipient may be microcrystalline cellulose, lactose, low-substituted hydroxycellulose, or a combination thereof.
  • the disintegrant may be calcium carboxymethylcellulose, sodium starch glycolate, calcium monohydrogen phosphate anhydride, or a combination thereof.
  • the binder may be polyvinylpyrrolidone, low-substituted hydroxypropylcellulose, hydroxypropylcellulose, or a combination thereof.
  • the lubricant may be magnesium stearate, silicon dioxide, talc, or a combination thereof.
  • the pharmaceutical composition may be formulated in the form of oral dosage forms such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, external preparations, suppositories, or sterile injection solutions according to conventional methods. When formulated, it can be prepared using diluents or excipients such as commonly used fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrants, and surfactants.
  • the solid preparation for oral administration may be a tablet, pill, powder, granule, or capsule.
  • the solid preparation may further include excipients. Excipients may be, for example, starch, calcium carbonate, sucrose, lactose, or gelatin. Additionally, the solid preparation may further include a lubricant such as magnesium stearate or talc.
  • the oral liquid preparation may be a suspension, oral solution, emulsion, or syrup.
  • the liquid formulation may contain water or liquid paraffin.
  • the liquid formulation may contain excipients such as wetting agents, sweeteners, flavoring agents, or preservatives.
  • preparations for parenteral administration may be sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried products, and suppositories.
  • Non-aqueous solvents or suspensions may contain vegetable oil or ester.
  • the vegetable oil may be, for example, propylene glycol, polyethylene glycol, or olive oil.
  • the ester may be, for example, ethyl oleate.
  • the base of the suppository may be witepsol, macrogol, tween 61, cacao, laurel, or glycerogelatin.
  • the preferred dosage of the pharmaceutical composition varies depending on the individual's condition and weight, degree of disease, drug form, administration route and period, but can be appropriately selected by a person skilled in the art.
  • the compound, its isomer, derivative, solvate, or pharmaceutically acceptable salt may be used in an amount of, for example, about 0.0001 mg/kg to about 100 mg/kg, or about 0.001 mg/kg to about 100 mg/kg.
  • the amount can be divided and administered 1 to 24 times per day, 1 to 7 times per 2 days to 1 week, or 1 to 24 times per month to 12 months.
  • the compound, its isomer, derivative, solvate, or pharmaceutically acceptable salt is present in an amount of about 0.0001% to about 10% by weight, or about 0.001% to about 1% by weight, based on the total weight of the composition. may be included.
  • administering As used herein, the terms “administering,” “introducing,” and “implanting” are used interchangeably and are used interchangeably to introduce a composition into an individual by a method or route that results in at least partial localization to the desired site according to one embodiment. It may refer to the arrangement of the composition according to one embodiment of.
  • Administration can be done by methods known in the art. Administration may be administered directly to the subject by any means, such as, for example, intravenous, intramuscular, oral, transdermal, mucosal, intranasal, intratracheal or subcutaneous administration. You can. The administration may be administered systemically or locally.
  • the subject may be a mammal, such as a human, cow, horse, pig, dog, sheep, goat, or cat.
  • the subject may be an individual in need of a cytokine storm or inflammatory disease inhibition and/or improvement effect.
  • the administration of the composition according to one embodiment is 0.1 mg to 1,000 mg, for example, 0.1 mg to 500 mg, 0.1 mg to 100 mg, 0.1 mg to 50 mg, 0.1 mg to 25 mg, 1 mg to 1 mg per day.
  • the dosage may be prescribed in various ways depending on factors such as formulation method, administration method, patient's age, weight, gender, pathological condition, food, administration time, administration route, excretion rate, and reaction sensitivity, and those skilled in the art will Taking these factors into consideration, the dosage can be adjusted appropriately.
  • the frequency of administration can be once a day or two or more times within the range of clinically acceptable side effects, and can be administered at one or two or more locations, daily or at intervals of 2 to 5 days.
  • the number of days of administration can be from 1 to 30 days per treatment. If necessary, the same treatment can be repeated after an appropriate period.
  • the dosage per kg is the same as for humans, or the above dosage is converted into, for example, the volume ratio (e.g., average value) of the organs (heart, etc.) between the target animal and human.
  • One dose can be administered.
  • the composition can be administered intravenous, parenteral, transdermal, subcutaneous, intramuscular, intracranial, intraorbital, intraocular, intraventricular. (intracerebroventricular), intracerebral injection, intracapsular, intrathecal, intracisternal, intraperitoneal, intranasal, intrarectal, intravaginal (by any one or more methods selected from the group consisting of intravaginal, spraying, oral administration, and dermal application, preferably by one or more methods selected from the group consisting of intravenous, subcutaneous, and dermal application. may be administered.
  • the composition can be administered intravenous, parenteral, transdermal, subcutaneous, intramuscular, intracranial, intraorbital, intraocular, intraventricular. (intracerebroventricular), intracerebral injection, intracapsular, intrathecal, intracisternal, intraperitoneal, intranasal, intrarectal, intravaginal ( By any one or more methods selected from the group consisting of intravaginal, oral administration, and skin application, preferably by any one or more methods selected from the group consisting of intranasal and oral administration. It may be administered.
  • composition may be administered by any one or more methods selected from the group consisting of dry powder inhaler (DPI), metered-dose inhaler, and nebulizer methods.
  • DPI dry powder inhaler
  • metered-dose inhaler metered-dose inhaler
  • nebulizer methods nebulizer methods
  • the cytokine storm or inflammatory diseases include dermatitis, conjunctivitis, periodontitis, rhinitis, otitis media, pharyngitis, tonsillitis, pneumonia, gastric ulcer, gastritis, Crohn's disease, colitis, hemorrhoids, gout, ankylosing spondylitis, rheumatic fever, fibromyalgia, psoriatic arthritis, Osteoarthritis, rheumatoid arthritis, periarthritis, tendinitis, tenosynovitis, peritendinitis, myositis, hepatitis, cystitis, nephritis, Sjogren's syndrome, multiple sclerosis, acute and chronic inflammatory diseases, Churg-Strauss syndrome, dermatomyositis, Paget's disease, It may be at least one selected from the group consisting of Alzheimer's disease, cancer or neoplastic disease, viral infectious disease
  • the viral infectious diseases include influenza; respiratory syncytial virus; HIV; hepatitis B virus; hepatitis C virus; Infection with the SARS-CoV2 virus (COVID-19) or herpes virus, or dengue fever; Or it may be septicemia.
  • An example of the present invention includes administering to a subject a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of cytokine storm or inflammatory disease, comprising an iCP-NI peptide containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 and a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of cytokine storm or inflammatory disease comprising an iCP-NI peptide containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 and a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • a method for preventing or treating a cytokine storm or inflammatory disease comprising the present invention.
  • Another example of the present invention provides the use of a composition containing an iCP-NI peptide containing the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 and a pharmaceutically acceptable salt thereof for the prevention or treatment of cytokine storm or inflammatory disease.
  • amino acid in its broadest sense includes naturally occurring L ⁇ -amino acids or residues thereof as well as D-amino acids and chemically modified amino acids.
  • amino acids may include mimetics and analogs of the amino acids described above.
  • mimetics and analogs may include functional equivalents.
  • the term “prophylaxis” refers to any action that inhibits or delays the development of a cytokine storm or inflammatory disease by administering a composition comprising iCP-NI according to the present invention
  • treatment refers to It refers to all actions in which symptoms of a cytokine storm or inflammatory disease are improved or advantageously modified by administering a composition containing iCP-NI according to the present invention.
  • administering means providing a predetermined pharmaceutical composition of the invention to a subject in any suitable manner.
  • the term “subject” refers to any animal, including humans, that has developed or is likely to develop a cytokine storm or inflammatory disease.
  • Animals may include, but are not limited to, humans as well as cattle, horses, sheep, pigs, goats, camels, antelopes, dogs, or cats that require treatment for similar symptoms.
  • the routes of administration of the composition according to the present invention include intravenous, parenteral, transdermal, subcutaneous, intramuscular, intracranial, and intraorbital. ), intraocular, intracerebroventricular, intracerebral injection, intracapsular, intrathecal, intracisternal, intraperitoneal, intranasal It can be administered to humans and animals by methods such as intrarectal, intravaginal, spraying, oral administration, and dermal application. Preferably, it can be administered by intravenous, subcutaneous, or dermal application.
  • composition of the present invention may further contain auxiliaries such as preservatives, wetting agents, emulsification accelerators, salts and/or buffers for osmotic pressure adjustment, and other therapeutically useful substances, and may be formulated according to conventional methods.
  • auxiliaries such as preservatives, wetting agents, emulsification accelerators, salts and/or buffers for osmotic pressure adjustment, and other therapeutically useful substances, and may be formulated according to conventional methods.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may contain a pharmaceutically acceptable carrier and/or additive.
  • a pharmaceutically acceptable carrier and/or additive for example, it contains sterile water, physiological saline, common buffers (phosphoric acid, citric acid, other organic acids, etc.), stabilizers, salts, antioxidants (ascorbic acid, etc.), surfactants, suspending agents, isotonic agents, or preservatives. can do.
  • the pharmaceutical composition according to one embodiment is prepared in a formulation suitable for injection, the recombinant protein may be dissolved in a pharmaceutically acceptable carrier or frozen in a dissolved solution state.
  • the iCP-NI peptide consisting of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 according to the present invention uses an advanced macromolecule transduction domain (aMTD) consisting of the amino acid of SEQ ID NO: 2 and the NF- ⁇ nuclear site sequence (NLS) consisting of the amino acid of SEQ ID NO: 3. It was prepared (Table 1).
  • aMTD advanced macromolecule transduction domain
  • NLS NF- ⁇ nuclear site sequence
  • Inhalation formulations include metered dose inhaler (MDI; Metered Dose Inhaler), which sprays a fixed amount using a propellant gas such as chlorofluorocarbon, dry powder inhaler (DPI; Dry Powder Inhaler), where the patient directly inhales only the active drug powder, and liquid.
  • MDI metered dose inhaler
  • DPI dry powder inhaler
  • nebulizers that spray and aerosolize drugs into fine particles and allow the patient to inhale them for a relatively long period of time.
  • the inhalation formulation of iCP-NI adopts the nebulizer method and ensures the stability of iCP-NI. Formulation development was completed to create a form suitable for administration.
  • Table 2 The list of excipients for iCP-NI inhalation formulation is shown in Table 2.
  • the previously developed injectable iCP-NI can be administered directly to various inflammatory diseases and applied to various infectious diseases and autoimmune diseases, but due to limitations in the administration method, it has the disadvantage of being difficult to administer to patients who have not visited the hospital.
  • a simple administration method using an inhaler was developed so that patients who do not visit the hospital can self-administer the drug, so it can be applied to many patients for whom the existing administration method is difficult.
  • iCP-NI which was developed as an inhalation formulation, has the advantage of being able to be self-administered not only to critically ill patients in the hospital but also to mildly ill patients receiving treatment at home.
  • Example 2 dsRNA-simulated Poly I:C-induced acute pneumonia model (Poly I:C-Induced Acute Pneumonitis Model)
  • an acute pneumonia model was constructed using Poly I:C, a compound that mimics viral dsRNA.
  • dsRNA-mimicking Poly I:C When injected into the lungs, dsRNA-mimicking Poly I:C activates TLR7/8 and causes inflammation. This not only induces cytokine activation but also lung inflammation, leading to overall tissue collapse. In this model, iCP-NI can be administered by inhalation to confirm the effective anti-inflammatory effect.
  • An acute pneumonits model was constructed by intratracheal instilation of Poly I:C, and iCP-NI was inhaled to suppress the infiltration of innate immune cells in bronchoalveolar lavage fluids (BALFs). .
  • SARS-CoV-2 infects and replicates itself through the ACE2 (angiotensin-converting enzyme 2) receptor on the host's lung and bronchial mucosal cells, which stimulates the entire innate immune system and activates inflammatory transcription factors.
  • ACE2 angiotensin-converting enzyme 2
  • the SARS-CoV-2 infection model is induced by injecting the virus into the nasal cavity of hamsters.
  • weight recovery can also be seen as one of the main indicators.
  • the inhibitory effect on lung tissue damage was confirmed in a SARS-CoV-2 infected hamster model by administration of iCP-NI.
  • Lung inflammation was histologically analyzed for each group at 5 and 7 dpi after SARS-CoV-2 infection. At both 5 and 7 dpi, inflammatory cell infiltration increased between each tissue and tissue structure collapsed in the diluted group compared to Mock. On the other hand, in the iCP-NI inhalation group, inflammatory cell infiltration between each tissue was suppressed and the tissue structure was maintained similar to Mock, confirming the tissue recovery effect (Figure 7).
  • iCP-NI showed an inhibitory effect on the expression of inflammatory cytokines in lung tissue in a SARS-CoV-2 infected hamster model.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

본 발명은 iCP-NI를 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물에 관한 것으로, 기 개발된 주사제형 싸이토카인 폭풍 억제 지역사회감염병 치료제 iCP-NI를 좀 더 다양한 환자가 스스로 사용할 수 있도록, 환자 친화적인 흡입제형으로 개발한 것이다.

Description

iCP-NI를 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2022년 7월 19일에 출원된 한국 가특허출원 일련번호 10-2022-0088646의 혜택과 우선권을 주장하며, 그 전체가 여기에 참조로 포함된다.
본 발명은 iCP-NI를 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물에 관한 것으로, 기 개발된 주사제형 싸이토카인 폭풍 억제 지역사회감염병 치료제 iCP-NI를 좀 더 다양한 환자가 스스로 사용할 수 있도록, 환자친화적인 흡입제형으로 개발한 것이다.
싸이토카인 폭풍 억제 지역사회감염병 치료제 iCP-NI
iCP-NI(improved cell-permeable nuclear import inhibitor)는 NF-κB에서 유래한 핵이동서열 (Nuclear Localization Signal; NLS)과 3세대 소수성 CPP(hydrophobic cell penetrating peptide)인 aMTD가 융합된 지역사회감염병 치료물질이다. iCP-NI의 NLS는 10개의 아미노산 양 말단에 시스테인을 하나씩 도입한 후 이들을 이황화결합으로 연결하여 고리형태로 만들어 안정성을 높였으며, 최종적으로 24개 아미노산으로 구성하였다. iCP-NI의 NLS는 염증관련전사인자 (inflammation-associated transcription factors; IATFs) 들이 핵 내부로 이동할 때 꼭 필요한 importin 단백질을 선점하여 IATFs가 핵속으로 들어가는 것을 막게 되는데, 이로써 싸이토카인 폭풍을 발생하지 않게 사전에 차단하여 코로나19를 포함한 다양한 감염/염증질환을 치료할 수 있다.
본 발명의 목적은 주사제형으로 개발된 싸이토카인 폭풍 억제용 치료제인 iCP-NI를 흡입제형으로 개발하여 좀더 다양한 환자가 손쉽게 접근할 수 있도록 하기 위한 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 예는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 iCP-NI 펩타이드 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 일 예는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 iCP-NI 펩타이드 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
본 iCP-NI를 이용하여 싸이토카인 폭풍을 억제하고 염증성 질환을 치료할 수 있는 효과가 있다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 흡입제로 사용할 수 있으며, 이를 사용하여 환부의 호중구 수 및 대식세포 수를 감소, 염증성 싸이토카인/키모카인의 억제, 체중 회복, 염증세포 및 콜라겐 침윤 억제에 있어 우수한 효과를 나타낸다.
도 1 Poly I:C 유도 급성 폐렴 모델에서 iCP-NI 흡입제의 염증세포 침윤 억제 효능을 총 세포 수(a), 중성구 수(b), 대식세포 수(c)로 나타낸 그래프이다.
도 2 Poly I:C 유도 급성 폐렴 모델에서 iCP-NI 흡입제에 의한 폐내로 염증세포 모집 억제를 면역 형광법으로 검증한 사진이다.
도 3. Poly I:C 급성 폐렴 모델에서 iCP-NI 흡입제의 전 염증성 싸이토카인/키모카인(Pro-inflammatory cytokines/chemokine)인 TNF-α(a), IL-6(b), MCP-1(c) 및 IFN-γ(d)의 발현 억제 효과를 나타낸 그래프이다.
도 4. Poly I:C 유도 급성 폐렴 모델에서 iCP-NI 흡입제의 몸무게 회복 효능 검증한 것을 나타낸 그래프이다.
도 5. Poly I:C 유도 급성 폐렴 모델에서 iCP-NI 흡입제의 장기보호 효과를 촬영한 사진이다.
도 6. SARS-CoV-2에서 iCP-NI 흡입제의 몸무게 회복 효능을 나타낸 그래프이다.
도 7. SARS-CoV-2에서 iCP-NI 흡입제의 조직 회복 효능을 촬영한 사진이다.
도 8. SARS-CoV-2에서 iCP-NI 흡입제의 싸이토카인인 IL-17(a), TNF-α(b) 및 IL-1β(c)의 억제 효능을 나타낸 그래프이다.
본 명세서에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어들은 달리 정의되지 않는 한, 본 발명이 속하는 기술분야의 전문가에 의해 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 본 명세서에서 언급된 모든 간행물, 특허 및 기타 다른 참고문헌은 전체가 참고로 포함된다.
본 명세서 전체에서 특별한 언급이 없는 한 "포함" 또는 "함유"라 함은 어떤 구성 요소(또는 구성 성분)를 별다른 제한 없이 포함함을 지칭하며, 다른 구성 요소(또는 구성 성분)의 부가를 제외하는 것으로 해석될 수 없다.
본 발명의 일 예는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 iCP-NI 펩타이드 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 약학적 조성물은 펩티드 화합물, 이의 입체이성질체, 용매화물, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 유효 성분으로 포함할 수 있다. 상기 약학적 조성물은 항암 활성을 갖는 공지의 유효 성분을 더 포함할 수 있다. 상기 약학적 조성물은 약제학적으로 허용가능한 희석제 또는 담체를 추가적으로 포함할 수 있다. 상기 희석제는 유당, 옥수수 전분, 대두유, 미정질 셀룰로오스, 또는 만니톨, 활택제로는 스테아린산 마그네슘, 탈크, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 담체는 부형제, 붕해제, 결합제, 활택제, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 부형제는 미결정 셀룰로오즈, 유당, 저치환도 히드록시셀룰로오즈, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 붕해제는 카르복시메틸셀룰로오스 칼슘, 전분글리콜산 나트륨, 무수인산일수소 칼슘, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 결합제는 폴리비닐피롤리돈, 저치환도 히드록시프로필셀룰로오즈, 히드록시프로필셀룰로오즈, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 활택제는 스테아린산 마그네슘, 이산화규소, 탈크, 또는 그 조합일 수 있다.
상기 약학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화될 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
상기 약학적 조성물에 있어서, 경구 투여를 위한 고형 제제는 정제, 환제, 산제, 과립제, 또는 캡슐제일 수 있다. 상기 고형 제제는 부형제를 더 포함할 수 있다. 부형제는 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose), 또는 젤라틴일 수 있다. 또한, 상기 고형 제제는 마그네슘 스테아레이트, 또는 탈크와 같은 윤활제를 더 포함할 수 있다. 상기 약학적 조성물에 있어서, 경구를 위한 액상제제는 현탁제, 내용액제, 유제, 또는 시럽제일 수 있다. 상기 액상 제제는 물, 또는 리퀴드 파라핀을 포함할 수 있다. 상기 액상 제제는 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 또는 보존제를 포함할 수 있다. 상기 약학적 조성물에 있어서, 비경구 투여를 위한 제제는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 또는 및 좌제일 수 있다. 비수성용제 또는 현탁제는 식물성 기름 또는 에스테르를 포함할 수 있다. 식물성 기름은 예를 들면, 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 또는 올리브 오일일 수 있다. 에스테르는 예를 들면 에틸올레이트일 수 있다. 좌제의 기제는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 또는 글리세로젤라틴일 수 있다. 상기 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 개체의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물 형태, 투여 경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 상기 화합물, 이의 이성질체, 유도체, 용매화물, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 예를 들면, 약 0.0001 ㎎/㎏ 내지 약 100 ㎎/㎏, 또는 약 0.001 ㎎/㎏ 내지 약 100 ㎎/㎏의 양을 일일 1회 내지 24회, 2일 내지 1주에 1 내지 7회, 또는 1개월 내지 12개월에 1 내지 24회로 나누어 투여할 수 있다. 상기 약학적 조성물에서 화합물, 이의 이성질체, 유도체, 용매화물, 또는 약학적으로 허용가능한 염은 전체 조성물 총 중량에 대하여 약 0.0001 중량% 내지 약 10 중량%, 또는 약 0.001 중량% 내지 약 1 중량%로 포함될 수 있다.
본 명세서에서 용어, "투여하는", "도입하는", 및 "이식하는"은 상호교환적으로 사용되고 일 구체예에 따른 조성물의 원하는 부위로의 적어도 부분적 국소화를 초래하는 방법 또는 경로에 의한 개체 내로의 일 구체예에 따른 조성물의 배치를 의미할 수 있다.
투여는 당업계에 알려진 방법에 의하여 투여될 수 있다. 투여는 예를 들면, 정맥내, 근육내, 경구, 경피(transdermal), 점막, 코안 (intranasal), 기관내 (intratracheal) 또는 피하 투여와 같은 경로로, 임의의 수단에 의하여 개체로 직접적으로 투여될 수 있다. 상기 투여는 전신적으로 또는 국부적으로 투여될 수 있다.
상기 개체는 포유동물, 예를 들면, 사람, 소, 말, 돼지, 개, 양, 염소, 또는 고양이일 수 있다. 상기 개체는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환 억제 및/또는 개선 효과를 필요로 하는 개체일 수 있다.
상기 투여는 일 구체예에 따른 조성물을 개체당 일당 0.1 ㎎ 내지 1,000 ㎎, 예를 들면, 0.1 ㎎ 내지 500 ㎎, 0.1 ㎎ 내지 100 ㎎, 0.1 ㎎ 내지 50 ㎎, 0.1 ㎎ 내지 25 ㎎, 1 ㎎ 내지 1,000 ㎎, 1 ㎎ 내지 500 ㎎, 1 ㎎ 내지 100 ㎎, 1 ㎎ 내지 50 ㎎, 1 ㎎ 내지 25 ㎎, 5 ㎎ 내지 1,000 ㎎, 5 ㎎ 내지 500 ㎎, 5 ㎎ 내지 100 ㎎, 5㎎ 내지 50 ㎎, 5 ㎎ 내지 25 ㎎, 10 ㎎ 내지 1,000 ㎎, 10 ㎎ 내지 500 ㎎, 10 ㎎ 내지 100 ㎎, 10 ㎎ 내지50 ㎎, 또는 10 ㎎ 내지 25 ㎎을 투여하는 것일 수 있다. 다만, 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성별, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있고, 당업자라면 이러한 요인들을 고려하여 투여량을 적절히 조절할 수 있다. 투여 횟수는 1일 1회 또는 임상적으로 용인가능한 부작용의 범위 내에서 2회 이상이 가능하고, 투여 부위에 대해서도 1개소 또는 2개소 이상에 투여할 수 있으며, 매일 또는 2 내지 5일 간격으로 총 투여 일수는 한번 치료 시 1일에서 30일까지 투여될 수 있다. 필요한 경우, 적정 시기 이후에 동일한 치료를 반복할 수 있다. 인간 이외의 동물에 대해서도, kg당 인간과 동일한 투여량으로 하거나, 또는 예를 들면 목적의 동물과 인간과의 기관(심장 등)의 용적비(예를 들면, 평균값) 등으로 상기의 투여량을 환산한 양을 투여할 수 있다.
상기 조성물은 정맥내(intravenous), 비경구(parenteral), 경피(transdermal), 피하(subcutaneous), 근육내(intramuscular), 두개내(intracranial), 안와내(intraorbital), 안내(intraocular), 뇌실내(intracerebroventricular), 뇌실질내 주사(intracerabral injection), 피막내(intracapsular), 척수강내(intrathecal), 수조내(intracisternal), 복강내(intraperitoneal), 비강내(intranasal), 직장내(intrarectal), 질내(intravaginal), 분무(spraying) 경구(oral) 투여 및 피부 도포(application)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 방법, 바람직하게는 정맥내, 피하 및 피부도포로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 방법으로 투여될 수 있다.
상기 조성물은 정맥내(intravenous), 비경구(parenteral), 경피(transdermal), 피하(subcutaneous), 근육내(intramuscular), 두개내(intracranial), 안와내(intraorbital), 안내(intraocular), 뇌실내(intracerebroventricular), 뇌실질내 주사(intracerabral injection), 피막내(intracapsular), 척수강내(intrathecal), 수조내(intracisternal), 복강내(intraperitoneal), 비강내(intranasal), 직장내(intrarectal), 질내(intravaginal), 경구(oral) 투여 및 피부 도포(application)로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 방법, 바람직하게는 비강내(intranasal) 및 경구(oral) 투여로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 방법으로 투여되는 것일 수 있다.
상기 조성물은 분말 흡입(DPI: dry powder inhaler), 정량 흡입(metered-dose inhaler) 및 분무(nebulizer) 방법으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 방법으로 투여되는 것일 수 있다.
상기 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환은 피부염, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 강직성 척추염, 류마티스 열, 섬유근통 (fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스 관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 건주위염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrome), 다발성 경화증, 급성 및 만성 염증 질환, 처그-스트라우스 증후군, 피부근염, 패젯병, 알츠하이머병, 암 또는 종양성 질환, 바이러스 감염 질환, 및 루푸스로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상, 바람직하게는 폐렴, 인후염, 편도염 및 바이러스 감염 질환으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다.
상기 바이러스 감염 질환은 인플루엔자; 호흡기 세포 융합 바이러스; HIV; B형 간염 바이러스; C형 간염 바이러스; SARS-CoV2 바이러스(COVID-19) 또는 헤르페스 바이러스의 감염 질환이거나, 뎅기열; 또는 패혈증(septicemia)인 것일 수 있다.
본 발명의 일 예는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 iCP-NI 펩타이드 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
본 발명의 다른 일 예는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 iCP-NI 펩타이드 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 조성물의 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 예방 또는 치료 용도를 제공한다.
이하 본 발명을 실험예 및 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실험예 및 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실험예 및 실시예에 한정되는 것은 아니다.
본 발명에 사용된 용어 "아미노산"은 가장 넓은 의미에서, 자연 발생한 L α-아미노산 또는 이의 잔기뿐만 아니라 D-아미노산 및 화학적으로 변형된 아미노산을 포함한다. 예를 들어, 아미노산은 전술한 아미노산의 모방체 및 유사체를 포함할 수 있다. 본 개시에서, 모방체 및 유사체는 기능적 등가물을 포함할 수 있다.
본 발명에 사용된 "예방"이라는 용어는 본 발명에 따른 iCP-NI를 포함하는 조성물을 투여함으로써 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 발생을 억제 또는 지연시키는 모든 작용을 의미하며, 그리고 "치료"라는 용어는 본 발명에 따른 iCP-NI를 포함하는 조성물을 투여함으로써 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 증상이 호전되거나 유리하게 변형되는 모든 작용을 의미한다.
본 발명에 사용된 "투여"는 임의의 적절한 방식으로 대상체에게 본 발명의 미리 결정된 약학적 조성물을 제공하는 것을 의미한다.
본 발명에 사용된 용어 "대상체"는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환이 발병했거나 발병할 가능성이 있는 인간을 포함하는 모든 동물을 의미한다. 동물은 인간뿐만 아니라 유사한 증상의 치료가 필요한 소, 말, 양, 돼지, 염소, 낙타, 영양, 개 또는 고양이를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명에 따른 조성물의 투여 경로로는 정맥내(intravenous), 비경구(parenteral), 경피(transdermal), 피하(subcutaneous), 근육내(intramuscular), 두개내(intracranial), 안와내(intraorbital), 안내(intraocular), 뇌실내(intracerebroventricular), 뇌실질내 주사(intracerabral injection), 피막내(intracapsular), 척수강내(intrathecal), 수조내(intracisternal), 복강내(intraperitoneal), 비강내(intranasal), 직장내(intrarectal), 질내(intravaginal), 분무(spraying) 경구(oral) 투여 및 피부 도포(application)등의 방법으로 사람과 동물에게 투여될 수 있다. 바람직하게는 정맥내, 피하, 피부 도포의 방법으로 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물은 방부제, 수화제, 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제와 같은 보조제와 기타 치료적으로 유용한 물질을 추가로 포함할 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 제제화될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체 및/또는 첨가물을 포함할 수 있다. 예를 들어, 멸균수, 생리식염수, 관용의 완충제(인산, 구연산, 그 밖의 유기산 등), 안정제, 염, 산화방지제(아스코르브산 등), 계면활성제, 현탁제, 등장화제, 또는 보존제 등을 포함할 수 있다. 일 구체예에 따른 약학적 조성물이 주사에 적당한 제형으로 조제되는 경우에는 재조합 단백질이 약학적으로 허용가능한 담체 중에 용해되어 있거나 또는 용해되어 있는 용액상태로 동결된 것일 수 있다.
<실시예>
실시예 1. 개선된 세포 투과성 핵 수송 억제제(iCP-NI)의 제조
본 발명에 따른 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 iCP-NI 펩티드는 서열번호 2의 아미노산으로 이루어진 aMTD(advanced macromolecule transduction domain) 및 서열번호 3의 아미노산으로 이루어진 NF-κ핵 위치 서열(NLS)을 이용하여 제조하였다(표 1).
명칭 서열 SEQ No.
iCP-NI IAAVLAAPALVPCVQRKRQKLMPC 서열번호 1
aMTD IAAVLAAPALVP 서열번호 2
NLS CVQRKRQKLMPC 서열번호 3
제조예. 흡입제형 iCP-NI의 개발
흡입제형에는 염화불화탄소와 같은 추진제 가스를 이용하여 정량을 분사하는 정량 분무식 흡입제 (MDI; Metered Dose Inhaler), 환자가 약물 활성분말만을 직접 흡입하는 건조분말 흡입제 (DPI; Dry Powder Inhaler), 액상 약물을 미세한 입자로 분무, 에어로졸 (aerosol)화 하여 비교적 오랜 시간 동안 환자에게 흡입시키는 네뷸라이저 (nebulizer) 등이 있는데, iCP-NI의 흡입제형은 네뷸라이저 방식을 채택하였으며, iCP-NI의 안정성을 높이고 투여하기에 적합한 형태로 만들어 주기 위해 제제개발을 완료하였다. iCP-NI 흡입제형의 첨가제 목록은 표 2와 같다.
첨가제 기능
iCP-NI API
NaCl 긴장제(Tonicifier)
Montanox 80 계면활성제(Surfactant)
EDTA 항산화제(Anti-oxidant)
Sodium acetate trihydrate 완충제(Buffer component)
아세트산(Acetic acid) 1mol/L 완충제(Buffer component)
정수(Purified water) type II 완충제(Buffer component)
흡입제형 iCP-NI 개발을 통한 투여가능 환자군 증대
기 개발된 주사제형 iCP-NI는 다양한 염증성 질환에 직접 투여하여 다양한 감염성 질환, 자가면역 질환 등에 적용될 수 있지만, 투여방법의 한계로 인하여 병원에 내원하지 않은 환자에게는 투여하기 힘들다는 단점이 있었다. 이를 개선하기 위하여 흡입기를 통한 간단한 투여방식을 개발하여 내원하지 않은 환자가 스스로 투여할 수도 있도록 하여, 기존의 투여방식이 어려운 수많은 환자들에게 적용할 수 있다.
대표적으로 2019년 이후 발생한 코로나19의 경우, 감염된 환자의 수가 폭발적으로 증가하여 모든 환자를 병원에 수용할 수 없었기 때문에 대부분의 환자는 자가격리를 통한 재택치료를 진행하였다. 주사제형은 이러한 재택치료중인 환자들에게 투여하기 어렵다. 반면 흡입제형으로 개발된 iCP-NI는 내원 중인 위중증 환자를 포함하여 재택치료중인 경증 환자들 까지도 스스로 투여할 수 있다는 장점이 있다.
실시예 2. dsRNA 모사한 Poly I:C 유도 급성 폐렴 모델 (Poly I:C-Induced Acute Pneumonitis Model)
iCP-NI에 의한 폐렴 치료제 가능성을 검증하기 위하여, 바이러스의 dsRNA를 모사한 화합물인 Poly I:C를 이용하여 급성 폐렴 모델을 구축하였다.
dsRNA 모사한 Poly I:C는 폐 내에 주입되었을 때 TLR7/8을 활성화시켜 염증을 발생시킨다. 이는 싸이토카인 활성뿐 아니라 폐 염증을 유도하여 전반적인 조직의 붕괴를 유도하게 되며, 이 모델에서 iCP-NI를 흡입 (inhalation) 투여하여 효과적인 항염증 효과를 확인할 수 있다.
실험예 1. iCP-NI 흡입을 통한 폐렴 모델의 치료 효과 확인
(1) iCP-NI 흡입 시 총 세포 수, 호중구 수 및 대식세포 수 감소 확인
Poly I:C를 기도 내 점적 (intratracheal instilation) 하여 폐렴 모델 (acute pneumonits model)을 구축하고, iCP-NI를 흡입하도록 하여 기관지폐포세척액 (bronchoalveolar lavage fluids; BALFs) 내의 내제면역 세포의 침윤을 억제하였다.
이후, Poly I:C 유도 급성 폐렴 모델의 1일차 BALF를 이용하여 총 세포 수 및 선천성 면역세포(innate immune cell)인 호중구(neutrophil)와 대식세포(macrophage)의 변화를 유세포 분석기(flow cytometry)로 수를 측정하였다. 희석군(Diluent)에서 총 세포 수(도 1a), 호중구 수(도 1b) 및 대식세포 수(도 1c)는 증가된 반면, iCP-NI 흡입군에서는 모두 감소되었다.
동일하게, Poly I:C 유도 급성 폐렴 모델의 day1 폐 조직을 이용하여 선천성 면역세포의 변화를 면역형광법(immunofluorescence)으로 확인하였다(도 2). 희석군에서는 호중구(Red) 및 대식세포(Green)가 폐 조직 사이사이에 증가된 반면, iCP-NI 흡입군에서는 폐 조직에서 감소하였다. (Red: Neutrophil marker (Ly6G), Green: Macrophage marker (F4/80), & Blue: Nucleus maker (DAPI))
(2) iCP-NI 흡입 시 염증성 싸이토카인/키모카인 억제 효과 확인
iCP-NI 흡입으로 Poly I:C 유도 급성 폐렴 모델에서 폐 세척액 내의 염증성 싸이토카인/키모카인(Cytokine/Chemokine) 발현 억제 효과를 확인하였다.
Poly I:C 유도된 급성 폐렴 모델의 1일차 BALF를 이용하여 CBA(cytometric bead array)를 분석하였다. 희석군과 비교한 결과 iCP-NI 흡입군에서 TNF-α는 -46.3%(도 3a), IL-6는 -32.1%(도 3b), MCP-1는 -26.9%(도 3c), IFN-γ는 -45.6%(도 3d) 감소하였다.
(3) iCP-NI 흡입 시 체중 회복 효과 확인
iCP-NI 흡입 시 Poly I:C 유도 급성 폐렴 마우스 모델에서 빠른 몸무게 회복 효과를 나타냈다(도 4).
Poly I:C로 급성 폐렴 모델을 유도하면 1일차에 몸무게가 -16% 감소되지만, 2일차부터는 몸무게가 회복되기 시작하였다. 희석군과 비교하였을 때 iCP-NI 흡입군은 3일차부터 몸무게 회복이 증가되고 5일차에서 가장 크게 몸무게 차이가 나타났다. 이를 통해 iCP-NI 흡입의 몸무게 회복 효능이 있음을 확인하였다.
(4) iCP-NI 흡입 시 염증세포 및 콜라겐 침윤 억제 효과 확인
iCP-NI 흡입에 따른 Poly I:C 유도 급성 폐렴 마우스 모델에서 폐 조직의 염증 및 콜라겐의 침윤 억제 효과를 확인하였다(도 5).
Poly I:C 유도 후 7일차 마우스 모델의 폐 염증을 조직학적으로 분석하였을 때, 희석군은 각 폐 조직 사이에 염증세포 침윤과 조직의 붕괴, 콜라겐의 침윤이 증가되었지만, iCP-NI 흡입군은 폐 조직 사이에 염증세포 침윤과 조직 붕괴, 콜라겐 침윤이 억제된 것이 나타났다.
실험예 2. iCP-NI 흡입을 통한 SARS-CoV2 감염 모델에서의 치료 효과 확인
SARS-CoV-2 기전을 보면 숙주의 폐, 기관지 점막세포의 ACE2(angiotensin-converting enzyme 2) 수용체를 통해 감염되어 자기 복제되고 이로 인해 전체 내재면역 체계를 자극함으로 염증 활성 전사인자들이 활성화된다.
SARS-CoV-2 감염 모델은 햄스터의 비강에 바이러스를 주입시켜 유도시킨다. 이 경우, 중증도가 높지 않기 때문에 몸무게 회복 여부도 주요한 지표 중 하나로 볼 수 있다.
(1) iCP-NI 흡입 시 체중 회복 효과 확인
SARS-CoV-2 감염 모델을 대상으로, iCP-NI 흡입제 투여에 의한 SARS-CoV-2 모델의 몸무게 회복 또는 증가효과를 확인하였다(도 6).
SARS-CoV-2 감염 후 dpi(days post infection) 14까지 몸무게 변화를 관찰한 결과, dpi 2부터 몸무게 감소가 시작되었고, 희석군과 비교하였을 때 iCP-NI 흡입군은 dpi 3, 4, 5, 6 모두 몸무게 감소가 억제된 것으로 나타났다. 이를 통해 iCP-NI 흡입시의 몸무게 회복 효과를 확인하였다.
(2) iCP-NI 흡입 시 폐 조직 손상 억제 효과 확인
iCP-NI의 투여에 의해 SARS-CoV-2 감염 햄스터 모델에서 폐 조직 손상 억제 효과를 확인하였다.
SARS-CoV-2 감염 후 5 dpi와 7 dpi의 각 군마다 폐 염증을 조직학적으로 분석하였다. 5 & 7 dpi 모두 Mock 대비 희석군에서 각 조직 사이로 염증 세포 침윤이 증가되고 조직 구조가 붕괴되었다. 반면에 iCP-NI 흡입군에서는 각 조직 사이 염증 세포 침윤이 억제되고 조직 구조도 Mock과 유사하게 유지되는 바, 조직 회복 효과를 확인하였다(도 7).
(3) iCP-NI 흡입 시 싸이토카인 감소 효과 확인
iCP-NI의 투여에 의해 SARS-CoV-2 감염 햄스터 모델에서 폐 조직 내의 염증성 싸이토카인 발현 억제 효과를 나타냈다.
구체적으로, SARS-CoV2 감염 후 5일째 폐에서 mRNA를 추출하여 유전자 발현량을 비교했을때, Mock으로 정규화 후 SARS-CoV-2 모델과 비교한 결과 IL-17는 -58%(도 8a), TNF-α는 -63%(도 8b), IL-1β는 -48%(도 8c)의 감소를 확인하였다.

Claims (6)

  1. 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 iCP-NI 펩타이드 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 비강내(intranasal) 및 경구(oral) 투여로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 방법으로 투여되는 것인 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 분말 흡입(DPI: dry powder inhaler), 정량 흡입(metered-dose inhaler) 및 분무(nebulizer) 방법으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 방법으로 투여되는 것인 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환은 피부염, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 강직성 척추염, 류마티스 열, 섬유근통 (fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스 관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 건주위염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrome), 다발성 경화증, 급성 및 만성 염증 질환, 처그-스트라우스 증후군, 피부근염, 패젯병, 알츠하이머병, 암 또는 종양성 질환, 바이러스 감염 질환, 및 루푸스로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것인 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 바이러스 감염 질환은 인플루엔자; 호흡기 세포 융합 바이러스; HIV; B형 간염 바이러스; C형 간염 바이러스; SARS-CoV2 바이러스(COVID-19) 또는 헤르페스 바이러스의 감염 질환이거나, 뎅기열; 또는 패혈증(septicemia)인 것인 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물.
  6. 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 iCP-NI 펩타이드 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 예방 또는 치료 방법.
PCT/KR2023/010394 2022-07-19 2023-07-19 iCP-NI를 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물 WO2024019519A1 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20220088646 2022-07-19
KR10-2022-0088646 2022-07-19

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2024019519A1 true WO2024019519A1 (ko) 2024-01-25

Family

ID=89618264

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2023/010394 WO2024019519A1 (ko) 2022-07-19 2023-07-19 iCP-NI를 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2024019519A1 (ko)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040235746A1 (en) * 1994-06-13 2004-11-25 Hawiger Jack J. Cell permeable peptides for inhibition of inflammatory reactions and methods of use
KR20190041551A (ko) * 2014-08-17 2019-04-22 (주)셀리버리 세포 투과성의 향상을 위한 개선된 거대분자 전달 도메인(aMTD) 서열, 이를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드, 이를 포함하는 aMTD의 독특한 특징을 확인하는 방법, 이를 포함하는 aMTD 서열을 개발하는 방법
WO2021167324A1 (en) * 2020-02-18 2021-08-26 Cellivery Therapeutics, Inc. Improved cell-permeable nuclear import inhibitor synthetic peptide for inhibition of cytokine storm or inflammatory disease and use thereof

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040235746A1 (en) * 1994-06-13 2004-11-25 Hawiger Jack J. Cell permeable peptides for inhibition of inflammatory reactions and methods of use
KR20190041551A (ko) * 2014-08-17 2019-04-22 (주)셀리버리 세포 투과성의 향상을 위한 개선된 거대분자 전달 도메인(aMTD) 서열, 이를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드, 이를 포함하는 aMTD의 독특한 특징을 확인하는 방법, 이를 포함하는 aMTD 서열을 개발하는 방법
WO2021167324A1 (en) * 2020-02-18 2021-08-26 Cellivery Therapeutics, Inc. Improved cell-permeable nuclear import inhibitor synthetic peptide for inhibition of cytokine storm or inflammatory disease and use thereof

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KIM DONGHO, GYUNAM KIM, DASOM SHIN, SANGHYEON YU, MISUK BAEK, JAEWOOK LEE, HYEMIN YU, JOOHYUN PI, MINGU KANG, JIEUN KIM, SUJEONG K: "Intracellularly Delivered Nuclear Localization Sequence Attenuates The Severity Of COVID-19 By Inhibits Interaction Of Inflammatory Transcription Factors And Importins ", THE JOURNAL OF IMMUNOLOGY, vol. 208, no. 1_suppl., 1 May 2022 (2022-05-01), XP093130396, DOI: 10.4049/jimmunol.208.Supp.111.28 *
LEE DANBI, SANGHYEON YU; MISUK BAEK; JIEUN KIM; MINGU KANG; HAKYOUNG PARK; JAEWOOK LEE; SEOKWON LEE; JUNGHUN KWAK; HYEMIN YU; SEUN: "Abstract PO-051: Intracellular delivery of nuclear localization signal suppresses COVID-19 mediated inflammation by regulating expression of cytokines/chemokines", CLINICAL CANCER RESEARCH, POSTER PRESENTATIONS, vol. 26, no. 18_suppl., 15 September 2020 (2020-09-15), XP093130398, DOI: 10.1158/1557-3265.COVID-19-PO-051 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107281210B (zh) 阿奇霉素在抗冠状病毒感染中的应用
ES2390226T3 (es) Tratamiento de enfermedades infecciosas
US20190309021A1 (en) Composition Comprising a Peptide and an Inhibitor of Viral Neuraminidase
US20170143674A1 (en) Use of Glutaryl Histamine for the Treatment of Respiratory Tract Diseases
WO2021040337A1 (ko) 니클로사마이드 지연방출 조성물 및 이의 항바이러스 용도
CN113244212B (zh) 黄芩素在制备预防和/或治疗新型冠状病毒感染疾病的药物中的应用
WO2022124525A1 (ko) 니클로사마이드를 포함하는 근육내 및/또는 피하 투여용 약학적 조성물
CN112386595A (zh) 一种治疗呼吸系统病毒性感染的药物组合物
WO2024019519A1 (ko) iCP-NI를 포함하는 싸이토카인 폭풍 또는 염증성 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물
WO2021194290A1 (ko) 유행성 rna 바이러스 감염질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물
US20070087974A1 (en) Treatment or prevention of respiratory viral infections with immunomodulator compounds
CN114786659A (zh) 用于治疗汉坦病毒感染的mek抑制剂
CN112546046A (zh) 盐酸阿比朵尔在制备治疗肺纤维化疾病药物中的应用
WO2018012901A1 (ko) 사이클로 히스티딘-프롤린을 유효성분으로 포함하는 세포 보호용 조성물
CN105616921A (zh) 一种治疗上呼吸道感染的中药组合物及其制备方法
WO2024019496A1 (ko) Icp-ni를 포함하는 covid-19 치료 또는 예방용 약학적 조성물
EP3928785B1 (en) Medicament and food for use in preventing or treating novel coronavirus pneumonia covid-19
WO2021162525A1 (ko) 히드록시유레아를 포함하는 염증 반응 억제용 약학 조성물
CN111568900A (zh) 吲哚美辛在抗冠状病毒感染中的应用
WO2023219360A1 (ko) B형 간염 예방 또는 치료용 약학 조성물
WO2015030504A1 (ko) 비소세포폐암 치료제를 유효성분으로 포함하는 톡소포자충감염증의 예방 또는 치료용 약학 조성물
KR20110071586A (ko) 메트포르민을 유효성분으로 함유하는 염증성 또는 폐쇄성 기도 질환의 치료 및 예방용 약학조성물
WO2022177054A1 (ko) 제2형 중증급성호흡기증후군 코로나바이러스 감염증 예방 또는 치료용 약학 조성물
WO2023128427A1 (ko) 폴리감마글루탐산을 유효성분으로 포함하는 코로나바이러스(sars-cov-2) 감염질환의 예방, 경감 또는 치료용 약학적 조성물
KR880003973A (ko) 약리적 활성 화합물 및 용도

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 23843365

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1