WO2021221280A1 - 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법 - Google Patents

알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법 Download PDF

Info

Publication number
WO2021221280A1
WO2021221280A1 PCT/KR2021/002160 KR2021002160W WO2021221280A1 WO 2021221280 A1 WO2021221280 A1 WO 2021221280A1 KR 2021002160 W KR2021002160 W KR 2021002160W WO 2021221280 A1 WO2021221280 A1 WO 2021221280A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
weight
parts
solution
alcohol
edta
Prior art date
Application number
PCT/KR2021/002160
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
임욱빈
Original Assignee
(주)바이오다인
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by (주)바이오다인 filed Critical (주)바이오다인
Priority to AU2021264267A priority Critical patent/AU2021264267B2/en
Priority to EP21796069.9A priority patent/EP4079863A4/en
Priority to CA3163560A priority patent/CA3163560A1/en
Priority to CN202180009932.0A priority patent/CN114981447A/zh
Priority to US17/789,635 priority patent/US20230055122A1/en
Priority to JP2022540541A priority patent/JP7312509B2/ja
Publication of WO2021221280A1 publication Critical patent/WO2021221280A1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/24—Methods of sampling, or inoculating or spreading a sample; Methods of physically isolating an intact microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • A01N1/0231—Chemically defined matrices, e.g. alginate gels, for immobilising, holding or storing cells, tissue or organs for preservation purposes; Chemically altering or fixing cells, tissue or organs, e.g. by cross-linking, for preservation purposes
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/2813—Producing thin layers of samples on a substrate, e.g. smearing, spinning-on
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Processes Of Treating Macromolecular Substances (AREA)
  • Sampling And Sample Adjustment (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

본 발명은 검체(예: 인체의 탈락세포)를 바이알 내에 젤리화시켜 검진 센터로 안전하게 이동하고 검진 센터에서 원상태로 복구하여(예: 액상 변환) 검체를 검사할 수 있도록 하는 기술에 관한 것이다. 더욱 상세하게는, 본 발명은 바이알 내에 담겨지는 검체 보존용 액을 젤리 상태로 전환시켜 검체를 변형 없이 검진 센터까지 안전하게 이송하고 검진 센터에서 검체 보존용 액을 액상으로 재용해하여 검체의 검사를 수행하도록 하는 기술에 관한 것이다. 본 발명은 바이알의 내측에 채워지는 세포고정용액이 선택용액과 선택물질의 믹싱에 의해 젤리화가 이루어지기 때문에 그 세포고정용액의 젤리화가 간편하다는 장점을 나타낸다.

Description

알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법
본 발명은 검체(예: 인체의 탈락세포)를 바이알 내에 젤리화시켜 검진 센터로 안전하게 이동하고 검진 센터에서 원상태로 복구하여(예: 액상 변환) 검체를 검사할 수 있도록 하는 기술에 관한 것이다.
더욱 상세하게는, 본 발명은 바이알 내에 담겨지는 검체 보존용 액을 젤리 상태로 전환시켜 검체를 변형 없이 검진 센터까지 안전하게 이송하고 검진 센터에서 검체 보존용 액을 액상으로 재용해하여 검체의 검사를 수행하도록 하는 기술에 관한 것이다.
일반적으로 인체로부터 검체(탈락세포)를 획득한 후 그 탈락세포를 검진 센터에서 세포진 검사의 슬라이드에 도말한 후에 탈락세포의 상태를 관찰하고 진단할 수 있다.
여기서, 검진 센터 방문이 어려운 환자들의 경우에는 스스로 자신의 탈락셀포(검체)를 채취한 후 검진 센터까지 그 탈락세포가 손상되지 않는 상태로 이송시켜야 한다. 이를 위해, 밀폐 용기인 바이알 내에 검체 보호를 위한 세포고정용액을 검체와 함께 넣어 검진 센터로 이송시킬 수 있다.
검체 변형을 막기 위해 바이알 내에 채워지는 세포고정용액은 일반적으로 수용액으로 이루어진다. 바이알을 이송시키는 과정에서 바이알의 몸통과 뚜껑 사이의 틈으로 세포고정용액이 누수되는 경우가 빈번하고 그로 인해 검체가 변형되는 일이 발생할 수 있다.
이러한 종래기술의 문제점을 해결할 수 있는 기술 구현이 요구된다.
한편, 본 발명과 관련된 선행문헌은 다음과 같다.
(1) EP 0511430 A2 (1992. 11. 4.) "Cell preservative solution"
(2) US 2006/0088814 A1 (2006. 4. 27.) "Enhanced cell preservative solution and methods for using same"
(3) 대한민국 공개특허 제10-2005-0116689호(2005. 12. 13.) "겔상 보존제와 그 제조방법 및 그를 이용한 세포검사방법"
본 발명은 상기한 점을 감안하여 제안된 것으로, 본 발명의 목적은 검체(예: 인체의 탈락세포)를 안전하게 원거리 이송할 수 있도록 바이알 내에 담겨진 검체를 알코올계 용액 조성물로 젤리화하고 검진 센터에서 세포 검사를 할 때에 검체를 원래 상태로 간편하게 복구할 수 있도록 하는 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법을 제공함에 있다.
상기의 목적을 달성하기 위하여 본 발명의 제 1 실시예에 따른 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법은 (a) 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 구비하는 제 1 용액과, 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 구비하는 제 2 용액 중에서 선택된 어느 하나의 용액과 젤라틴과 광경화성 단백질 중 하나 이상의 물질 5 ~ 20 중량부, 셀룰로오스 천연 고분자 물질 1 ~ 100 중량부, 아크릴비드 합성 고분자 물질 1 ~ 100 중량부 중에서 선택된 어느 하나의 물질을 1℃ 내지 40℃의 온도에서 믹싱으로 젤리화한 알코올계 젤리화 물질을 생성하는 단계; (b) 알코올계 젤리화 물질이 담긴 밀폐 용기의 내측에 채취된 검체를 투입하는 단계; (d) 밀폐 용기 내의 젤리화된 알코올계 젤리화 물질을 재용해 용액에 투입하는 단계; (e) 재용해 용액을 1℃ 내지 40℃의 온도로 유지시켜 알코올계 젤리화 물질을 액상으로 재용해하는 단계; (f) 재용해를 거친 상태의 알코올계 젤리화 물질로부터 검체를 획득하여 검사하는 단계;를 포함하여 구성될 수 있다.
본 발명의 제 2 실시예에 따른 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법은 (a) 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 구비하는 제 1 용액과, 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 구비하는 제 2 용액 중에서 선택된 어느 하나의 용액(이하, '선택용액'이라 함)을 밀폐 용기에 투입하는 단계; (b) 선택용액이 채워진 상태의 밀폐 용기 내측에 검체를 투입하는 단계; (c) 1℃ 내지 40℃의 온도에서 젤라틴과 광경화성 단백질 중 하나 이상의 물질 5 ~ 20 중량부, 셀룰로오스 천연 고분자 물질 1 ~ 100 중량부, 아크릴비드 합성 고분자 물질 1 ~ 100 중량부 중에서 선택된 어느 하나의 물질을 선택용액과 검체가 투입된 상태의 밀폐 용기 내측에 투입하여 알코올계 젤리화 물질로 젤리화하는 단계; (d) 밀폐 용기 내의 젤리화된 알코올계 젤리화 물질을 재용해 용액에 투입하는 단계; (e) 재용해 용액을 1℃ 내지 40℃의 온도로 유지시켜 젤리화된 알코올계 젤리화 물질을 액상 물질로 재용해하는 단계; (f) 재용해를 거친 상태의 액상 물질로부터 검체를 획득하여 검사하는 단계;를 포함하여 구성될 수 있다.
이때, 단계 (d)는, 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 포함하여 구성되는 재용해 용액을 생성하는 단계;를 구비할 수 있다.
또한, 단계 (d)는, 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 포함하여 구성되는 재용해 용액을 생성하는 단계;를 구비할 수 있다.
본 발명은 바이알의 내측에 채워지는 세포고정용액이 선택용액과 선택물질의 믹싱에 의해 젤리화가 이루어지기 때문에 그 세포고정용액의 젤리화가 간편하다는 장점을 나타낸다.
또한, 본 발명은 세포고정용액의 젤리화를 통해 원거리 이송시에 바이알에서 세포고정용액의 누수를 방지할 수 있는 장점을 나타낸다.
또한, 본 발명은 젤리화 상태로부터 세포 검사를 위한 액상 변환이 간편하다는 장점도 나타낸다.
도 1은 검체를 담아 이송시키는 밀폐 용기인 바이알의 예시도.
도 2는 젤리화 교반기에 바이알이 탑재된 상태의 예시도.
도 3은 재용해 교반기에 바이알이 탑재된 상태의 예시도.
도 4는 본 발명의 제 1 실시예에 따른 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 과정을 나타낸 순서도.
도 5는 본 발명의 제 2 실시예에 따른 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 과정을 나타낸 순서도.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
도 1은 검체를 담아 이송시키는 밀폐 용기인 바이알의 예시도이다. 도 1을 참조하면, 바이알(10)은 일단부가 개구된 속이 빈 몸체(12)와 그 몸체(12)의 개구 부분을 개폐시키는 뚜껑(11)으로 구성될 수 있다.
이때, 바이알(10)에 세포고정용액을 담은 상태에서 빛이나 산소에 노출된다면 알코올 성분이 산화되는 현상이 발생할 수 있기 때문에 산화방지제가 들어간 레진으로 사출하여 바이알(10)을 제작할 수도 있다. 또한, 바이알(10)에 빛 차단 염료를 넣어 반투명하게 제작할 수도 있다.
한편, 세포고정용액을 담는 용기를 불투명한 파우치 형태의 포장재를 채용함으로써 산소나 빛의 노출을 차단할 수도 있다.
한편, 검체를 채취한 브러쉬 팁(미도시)을 바이알(10)의 내측에 담는 과정에서 세포고정용액에 잠기지 않은 검체 부분이 손상될 수 있다. 따라서, 바이알(10)은 브러쉬 팁을 완전히 담을 수 있는 정도의 사이즈로 제작됨이 바람직하다. 또한, 검체를 채취한 브러쉬 팁을 바이알(10)의 내측에 담은 상태에서 그 바이알(10)에 세포고정용액을 가득 채우는 것이 바람직하다.
종래에는 수용액 형태의 세포고정용액을 검체와 함께 바이알(10)에 채우는 경우 장거리 이송시 누수에 따른 검체 변형의 문제가 발생하였다. 본 발명은 이러한 문제점을 해결하기 위하여 그 세포고정용액을 젤리화할 수 있는 조성물을 제공한다. 즉, 세포고정용액이 젤리화되면 누수나 증발의 가능성이 낮기 때문에 검체 본래의 상태를 유지할 수 있다.
여기서, 바이알(10)에 담긴 세포고정용액을 젤리 상태에서 검진 센터로 이송하는데, 그 이송 과정에서 바이알(10)을 상온 이하의 저온 상태를 유지함으로써 그 젤리화 상태를 그대로 유지시킨다.
도 2는 젤리화 교반기(20)에 바이알(10)을 탑재한 상태의 예시도이다. 도 2를 참조하면, 본 발명에 따른 선택용액과 선택물질을 믹싱하여 알코올계 젤리화 물질을 생성하기 위한 수단으로 젤리화 교반기(20)를 구비할 수 있다.
먼저, 젤리화 교반기(20)의 테이블 부재(21)에 바이알(10)을 거치한다. 이 상태에서 젤리화 교반기(20)를 조작하여 테이블 부재(21)를 주입 부재(22)의 하부에 위치시키고 주입 부재(22)에서 하방향으로 젤리 조성물을 투하함에 따라 바이알(10) 내에 젤리 조성물이 채워진다.
또한, 젤리화 교반기(20)를 조작하여 테이블 부재(21)를 도 2의 화살표 방향으로 왕복 운동시킴으로써 바이알(10) 내의 젤리 조성물이 잘 섞이도록 할 수도 있다.
도 3은 재용해 교반기(30)에 바이알(10)을 탑재한 상태의 예시도이다. 본 발명에 따른 알코올계 젤리화 물질이 검체와 함께 바이알(10)에 담긴 상태로 검진 센터에 도착하면 그 바이알(10)로부터 검체를 꺼내기 전에 바이알(10) 내의 알코올계 젤리화 물질을 액상으로 재변환하여야 한다.
이를 위해, 재용해 교반기(30)의 테이블 부재(31)에 바이알(10)을 거치한다. 이 상태에서 재용해 교반기(30)를 조작하여 테이블 부재(31)를 주입 부재(32)의 하부에 위치시키고 주입 부재(32)에서 하방향으로 재용해 용액을 투하함에 따라 바이알(10) 내의 알코올계 젤리화 물질을 액상으로 재변환한다.
이때, 재용해 교반기(30)를 조작하여 테이블 부재(31)를 도 3의 화살표 방향으로 왕복 운동시킴으로써 바이알(10) 내의 재용해 용액이 젤리 조성물과 잘 섞이도록 할 수도 있다.
본 명세서에서 도 2의 젤리화 교반기(20)와 도 3의 재용해 교반기(30)는 설명의 편의상 구분하여 다른 명칭으로 기재하였지만 동일한 제품을 사용할 수 있다. 또한, 도 2의 젤리화 교반기(20)와 도 3의 재용해 교반기(30)는 비슷한 형태로 도시되었지만 상이한 형태로 구현될 수도 있다.
도 4는 본 발명의 제 1 실시예에 따른 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 과정을 나타낸 순서도이다.
단계 (S110) : 먼저, 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA(ethylenediaminetetraacetic acid) 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산(cholic acid) 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산(acetic acid) 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 구비하는 제 1 용액과, 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 구비하는 제 2 용액 중에서 어느 하나의 용액(이하, '선택용액'이라 함)을 선택한다.
그리고, 젤라틴과 광경화성 단백질(gelatin methacryloly; GelMA) 중 하나 이상의 물질 5 ~ 20 중량부, 셀룰로오스 천연 고분자 물질 1 ~ 100 중량부, 아크릴비드 합성 고분자 물질 1 ~ 100 중량부 중에서 어느 하나의 물질(이하, '선택물질'이라 함)을 선택한다.
이어서, 선택용액과 선택물질을 바이알(10)에 넣은 후 1℃ 내지 40℃의 온도에서 믹싱함에 따라 젤리화한 알코올계 젤리화 물질을 생성한다.
이때, 바이알(10) 주변의 온도가 1℃ 미만으로 너무 낮은 경우 젤라틴, 광경화성 단백질, 셀룰로오스 천연 고분자 물질, 아크릴비드 합성 고분자는 바이알(10) 내에서 용해되지 않아 겔화 또는 젤리화가 불량하게 된다.
또한, 바이알(10) 주변의 온도가 40℃를 초과하여 너무 높을 경우 비점이 낮은 알코올계 성분이 증발되기 때문에 전체 조성물의 물성 변화를 초래하여 세포고정수단의 검체 고정 능력이 너무 세지거나 약해진다.
단계 (S120) : 이어서, 알코올계 젤리화 물질이 담긴 바이알(10)의 내측에 검체를 투입한다. 이때, 검체를 채취한 브러쉬 팁(미도시)을 안전하게 담을 수 있도록 바이알(10)은 브러쉬 팁을 완전히 담을 수 있는 정도의 사이즈로 제작됨이 바람직하다.
이처럼, 검체가 투입된 상태의 바이알(10)을 검진 센터로 이송한다. 그 이송 과정에서 바이알(10)을 상온 이하의 저온 상태를 유지해야만 그 젤리화 상태가 액상으로 변환되는 현상을 방지할 수 있다.
검체가 투입된 상태의 바이알(10)이 이송되면 검진 센터에서는 그 바이알(10)로부터 검체를 꺼내어 세포 검사를 실시해야 한다. 이때, 바이알(10)로부터 검체를 변형 없이 안전하게 꺼내기 위해서는 바이알(10) 내의 세포고정수단을 액상으로 재변환하여야 한다.
단계 (S130, S140) : 바이알(10) 내의 젤리화된 알코올계 젤리화 물질을 재용해 용액에 투입한 후 그 재용해 용액을 1℃ 내지 40℃의 온도로 유지시켜 알코올계 젤리화 물질을 액상으로 재용해할 수 있다.
이때, 젤리화 물질과 검체를 담고 있는 바이알(10)을 도 3에서와 같이 재용해 교반기(30)의 기구물에 거치한 상태로 그 바이알(10)의 내부에 재용해 용액을 투하하는 실시예가 가능하다. 또한, 재용해 교반기(30)와 별개로 그 바이알(10)을 재용해 용액에 넣는 실시예도 가능하다.
한편, 본 발명의 제 1 실시예에서 재용해 용액은 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 포함하여 구성될 수 있다.
또한, 본 발명의 제 1 실시예에서 재용해 용액은 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 포함하여 구성될 수 있다.
단계 (S150) : 도 3에서와 같이 바이알(10) 내의 물질을 액상으로 재변환한 후에는 별도의 장비(미도시)를 통해 바이알(10) 내의 검체를 꺼내어 세포 검사를 수행할 수 있다.
본 발명의 제 1 실시예에서는 선택용액이 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 구비하는 제 1 용액과, 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 구비하는 제 2 용액 중에서 선택된다. 또한, 선택물질은 젤라틴과 광경화성 단백질 중 하나 이상의 물질 5 ~ 20 중량부, 셀룰로오스 천연 고분자 물질 1 ~ 100 중량부, 아크릴비드 합성 고분자 물질 1 ~ 100 중량부 중에서 선택된다.
이와 같은 본 발명의 제 1 실시예에 대해 각 구성비에 따른 물성을 실험하였는데, 개별 구성요소별로 그 혼합조성 비율을 달리하면서 해당 구성요소가 전체 조성물의 물성에 미치는 영향을 실험하였다.
표 1은 본 발명의 제 1 실시예에 대한 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 메탄올 수용액에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000001
표 2는 본 발명의 제 1 실시예에 대한 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 EDTA에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000002
표 3은 본 발명의 제 1 실시예에 대한 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 콜산에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000003
표 4는 본 발명의 제 1 실시예에 대한 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 1N(1노르말농도)의 아세트산 수용액에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000004
표 5는 본 발명의 제 1 실시예에 대한 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 젤라틴에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000005
표 1 내지 표 5에서 실시예(A1 내지 A5, B1 내지 B5, C1 내지 C5)에서는 젤리화된 세포고정수단의 고정 능력이 양호하였다. 반면, 비교예(a1 내지 a5, b1 내지 b5)에서는 바이알(10)의 내측에 검체를 고정하는 능력이 너무 세거나 약하였다. 그로 인해, 비교예에서는 바이알(10)에서 검체를 꺼내는 과정(예: 재용해)에서 문제(예: 검체 변형)가 발생하였다.
본 발명의 제 1 실시예와 관련하여 표 1 내지 표 5의 경우보다 더 많은 실험이 있었지만 설명의 편의를 위해 생략하였다.
한편, 본 발명의 제 1 실시예에 따른 알코올계 젤리화 물질에서, 젤라틴과 광경화성 단백질 중 어느 하나 이상의 5 ~ 20 중량부에 대해서는 셀룰로오스 천연 고분자(예: mecellose, hecellose) 1 ~ 100 중량부 또는 아크릴비드(acryl bead) 합성 고분자(예: methyl methacrylate-co-ethylene glycol dimethacrylate; MMA) 1 ~ 100 중량부로 대체할 수도 있다.
여기서, 셀룰로오스 천연 고분자에 대해서도 나머지 구성의 혼합비율을 고정한 상태에서 1 중량부의 미만 범위와 100 중량부의 초과 범위를 비교예로 하여 실험한 결과, 1 ~ 100 중량부를 벗어난 영역에서는 바이알(10)의 내측에서 검체를 고정시키는 능력이 양호하지 않았다.
그리고, 아크릴비드 합성 고분자에 대해서도 나머지 구성의 혼합비율을 고정한 상태에서 1 중량부의 미만 범위와 100 중량부의 초과 범위를 비교예로 하여 실험한 결과, 1 ~ 100 중량부를 벗어난 영역에서는 바이알(10)의 내측에서 검체를 고정시키는 능력이 양호하지 않았다.
한편, 본 발명의 제 1 실시예에서 단계 (S130)에서 사용되는 재용해 용액은 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 포함하여 구성될 수 있다.(이하, '제 1 재용해 용액'이라 함)
이러한 제 1 재용해 용액에 대해 본 발명의 제 1 실시예에서 각 구성비에 따른 물성을 실험하였으며, 개별 구성요소별로 그 혼합조성 비율을 달리하면서 해당 구성요소가 전체 조성물의 물성에 미치는 영향을 실험하였다.
표 6은 본 발명의 제 1 실시예에서 제 1 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 메탄올 수용액에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000006
표 7은 본 발명의 제 1 실시예에서 제 1 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 EDTA에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000007
표 8은 본 발명의 제 1 실시예에서 제 1 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 콜산에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000008
표 9는 본 발명의 제 1 실시예에서 제 1 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 1N의 아세트산 수용액에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000009
표 6 내지 표 9에서 실시예(A6 내지 A9, B6 내지 B9, C6 내지 C9)에서는 바이알(10)에서 검체를 꺼내는 과정(예: 재용해)에서 별다른 문제가 없었다. 반면, 비교예(a6 내지 a9, b6 내지 b9)에서는 바이알(10)에서 검체를 꺼내는 과정(예: 재용해)에서 문제(예: 검체 변형)가 발생하였다.
다른 한편, 본 발명의 제 1 실시예에서 재용해 용액은 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 포함하여 구성될 수 있다. (이하, '제 2 재용해 용액'이라 함)
이러한 제 2 재용해 용액에 대해 본 발명의 제 1 실시예에서 각 구성비에 따른 물성을 실험하였으며, 개별 구성요소별로 그 혼합조성 비율을 달리하면서 해당 구성요소가 전체 조성물의 물성에 미치는 영향을 실험하였다.
표 10은 본 발명의 제 1 실시예에서 제 2 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 에탄올 수용액에 대해서만 그 혼합비율을 달리하면서 전체 조성물의 물성을 알기 위한 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000010
표 11는 본 발명의 제 1 실시예에서 제 2 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 EDTA에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000011
표 12는 본 발명의 제 1 실시예에서 제 2 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 2가 알코올류 첨가제에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000012
표 10 내지 표 12에서 실시예(A10 내지 A12, B10 내지 B12, C10 내지 C12)에서는 바이알(10)에서 검체를 꺼내는 과정(예: 재용해)에서 별다른 문제가 없었다. 반면, 비교예(a10 내지 a12, b10 내지 b12)에서는 바이알(10)에서 검체를 꺼내는 과정(예: 재용해)에서 문제(예: 검체 변형)가 발생하였다.
도 5는 본 발명의 제 2 실시예에 따른 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 과정을 나타낸 순서도이다.
단계 (S210) : 먼저, 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 구비하는 제 1 용액과, 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 구비하는 제 2 용액 중에서 어느 하나의 용액(이하, '선택용액'이라 함)을 선택한 후 그 선택용액을 바이알(10)에 투입한다.
단계 (S220) : 이어서, 바이알(10) 내측으로 검체를 투입한다. 이때, 바이알(10)은 브러쉬 팁을 완전히 담을 수 있는 정도의 사이즈로 제작됨이 바람직하다.
단계 (S230) : 그리고, 젤라틴과 광경화성 단백질 중 하나 이상의 물질 5 ~ 20 중량부, 셀룰로오스 천연 고분자 물질 1 ~ 100 중량부, 아크릴비드 합성 고분자 물질 1 ~ 100 중량부 중에서 어느 하나의 물질(이하, '선택물질'이라 함)을 선택한다.
이어서, 바이알(10) 주변의 온도를 1℃ 내지 40℃의 온도로 유지하는 상태에서 선택물질을 검체가 투입된 상태의 바이알(10) 내측에 투입하여 알코올계 젤리화 물질로 젤리화한다.
이때, 바이알(10) 주변의 온도가 1℃ 미만으로 너무 낮은 경우 젤라틴, 광경화성 단백질, 셀룰로오스 천연 고분자 물질, 아크릴비드 합성 고분자는 바이알(10) 내에서 용해되지 않아 겔화 또는 젤리화가 불량하게 된다.
또한, 바이알(10) 주변의 온도가 40℃를 초과하여 너무 높을 경우 비점이 낮은 알코올계 성분이 증발되기 때문에 전체 조성물의 물성 변화를 초래하여 세포고정수단의 검체 고정 능력이 너무 세지거나 약해진다.
그리고 나서, 검체가 투입된 상태의 바이알(10)을 검진 센터로 이송한다. 그 이송 과정에서 바이알(10)을 상온 이하의 저온 상태를 유지해야만 그 젤리화 상태가 액상으로 변환되는 현상을 방지할 수 있다.
검체가 투입된 상태의 바이알(10)이 이송되면 검진 센터에서는 그 바이알(10)로부터 검체를 꺼내어 세포 검사를 실시해야 한다. 이때, 바이알(10)로부터 검체를 변형 없이 안전하게 꺼내기 위해서는 바이알(10) 내의 세포고정수단을 액상으로 재변환하여야 한다.
단계 (S240, S250) : 바이알(10) 내의 젤리화된 알코올계 젤리화 물질을 재용해 용액에 투입한 후 그 재용해 용액을 1℃ 내지 40℃의 온도로 유지시켜 알코올계 젤리화 물질을 액상으로 재용해할 수 있다.
이때, 젤리화 물질과 검체를 담고 있는 바이알(10)을 도 3에서와 같이 재용해 교반기(30)의 기구물에 거치한 상태로 그 바이알(10)의 내부에 재용해 용액을 투하하는 실시예가 가능하다. 또한, 재용해 교반기(30)와 별개로 그 바이알(10)을 재용해 용액에 넣는 실시예도 가능하다.
한편, 본 발명의 제 2 실시예에서 재용해 용액은 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 포함하여 구성될 수 있다.
또한, 본 발명의 제 2 실시예에서 재용해 용액은 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 포함하여 구성될 수 있다.
단계 (S260) : 도 3에서와 같이 바이알(10) 내의 물질을 액상으로 재변환한 후에는 별도의 장비(미도시)를 통해 바이알(10) 내의 검체를 꺼내어 세포 검사를 수행할 수 있다.
본 발명의 제 2 실시예에서는 선택용액이 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 구비하는 제 1 용액과, 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 구비하는 제 2 용액 중에서 선택된다. 또한, 선택물질은 젤라틴과 광경화성 단백질 중 하나 이상의 물질 5 ~ 20 중량부, 셀룰로오스 천연 고분자 물질 1 ~ 100 중량부, 아크릴비드 합성 고분자 물질 1 ~ 100 중량부 중에서 선택된다.
이와 같은 본 발명의 제 2 실시예에 대해 각 구성비에 따른 물성을 실험하였는데, 개별 구성요소별로 그 혼합조성 비율을 달리하면서 해당 구성요소가 전체 조성물의 물성에 미치는 영향을 실험하였다.
표 13은 본 발명의 제 2 실시예에 대한 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 에탄올 수용액에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000013
표 14는 본 발명의 제 2 실시예에 대한 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 EDTA에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000014
표 15는 본 발명의 제 2 실시예에 대한 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 2가 알코올류 첨가제에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000015
표 16은 본 발명의 제 2 실시예에 대한 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 젤라틴에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000016
표 13 내지 표 16에서 실시예(A13 내지 A16, B13 내지 B16, C13 내지 C16)에서는 젤리화된 세포고정수단의 고정 능력이 양호하였다. 반면, 비교예(a13 내지 a16, b13 내지 b16)에서는 바이알(10)의 내측에 검체를 고정하는 능력이 너무 세거나 약하였다. 그로 인해, 비교예에서는 바이알(10)에서 검체를 꺼내는 과정(예: 재용해)에서 문제(예: 검체 변형)가 발생하였다.
본 발명의 제 2 실시예와 관련하여 표 13 내지 표 16의 경우보다 더 많은 실험이 있었지만 설명의 편의를 위해 생략하였다.
한편, 본 발명의 제 2 실시예에서, 젤라틴과 광경화성 단백질 중 어느 하나 이상의 5 ~ 20 중량부에 대해서는 셀룰로오스 천연 고분자(예: mecellose, hecellose) 1 ~ 100 중량부 또는 아크릴비드 합성 고분자(예: methyl methacrylate-co-ethylene glycol dimethacrylate; MMA) 1 ~ 100 중량부로 대체할 수도 있다.
여기서, 셀룰로오스 천연 고분자에 대해서도 나머지 구성의 혼합비율을 고정한 상태에서 1 중량부의 미만 범위와 100 중량부의 초과 범위를 비교예로 하여 실험한 결과, 1 ~ 100 중량부를 벗어난 영역에서는 바이알(10)의 내측에서 검체를 고정시키는 능력이 양호하지 않았다.
그리고, 아크릴비드 합성 고분자에 대해서도 나머지 구성의 혼합비율을 고정한 상태에서 1 중량부의 미만 범위와 100 중량부의 초과 범위를 비교예로 하여 실험한 결과, 1 ~ 100 중량부를 벗어난 영역에서는 바이알(10)의 내측에서 검체를 고정시키는 능력이 양호하지 않았다.
한편, 본 발명의 제 2 실시예에서 단계 (S240)에서 사용되는 재용해 용액은 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 포함하여 구성될 수 있다.(이하, '제 3 재용해 용액'이라 함)
이러한 제 3 재용해 용액에 대해 본 발명의 제 2 실시예에서 각 구성비에 따른 물성을 실험하였으며, 개별 구성요소별로 그 혼합조성 비율을 달리하면서 해당 구성요소가 전체 조성물의 물성에 미치는 영향을 실험하였다.
표 17은 본 발명의 제 2 실시예에서 제 3 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 메탄올 수용액에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000017
표 18은 본 발명의 제 2 실시예에서 제 3 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 EDTA에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000018
표 19는 본 발명의 제 2 실시예에서 제 3 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 콜산에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000019
표 20은 '본 발명의 제 2 실시예에서 제 3 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 1N의 아세트산 수용액에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000020
이때, 표 17 내지 표 20에서 실시예(A17 내지 A20, B17 내지 B20, C17 내지 C20)에서는 바이알(10)에서 검체를 꺼내는 과정(예: 재용해)에서 별다른 문제가 없었다. 반면, 비교예(a17 내지 a20, b17 내지 b20)에서는 바이알(10)에서 검체를 꺼내는 과정(예: 재용해)에서 문제(예: 검체 변형)가 발생하였다.
다른 한편, 본 발명의 제 2 실시예에서 재용해 용액은 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 포함하여 구성될 수 있다. (이하, '제 4 재용해 용액'이라 함)
이러한 제 4 재용해 용액에 대해 본 발명의 제 2 실시예에서 각 구성비에 따른 물성을 실험하였으며, 개별 구성요소별로 그 혼합조성 비율을 달리하면서 해당 구성요소가 전체 조성물의 물성에 미치는 영향을 실험하였다.
표 21은 본 발명의 제 2 실시예에서 제 4 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 에탄올 수용액에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000021
표 22는 본 발명의 제 2 실시예에서 제 4 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 EDTA에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000022
표 23은 본 발명의 제 2 실시예에서 제 4 재용해 용액을 이용한 재용해 과정과 관련하여 각 구성의 혼합비율을 고정한 상태로 2가 알코올류 첨가제에 대해서만 그 혼합비율을 상이하게 설정한 실험조건을 나타낸 것이다.
Figure PCTKR2021002160-appb-T000023
표 21 내지 표 23에서 실시예(A21 내지 A23, B21 내지 B23, C21 내지 C23)에서는 바이알(10)에서 검체를 꺼내는 과정(예: 재용해)에서 별다른 문제가 없었다. 반면, 비교예(a21 내지 a23, b21 내지 b23)에서는 바이알(10)에서 검체를 꺼내는 과정(예: 재용해)에서 문제(예: 검체 변형)가 발생하였다.

Claims (4)

  1. (a) 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 구비하는 제 1 용액과, 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 구비하는 제 2 용액 중에서 선택된 어느 하나의 용액과 젤라틴과 광경화성 단백질 중 하나 이상의 물질 5 ~ 20 중량부, 셀룰로오스 천연 고분자 물질 1 ~ 100 중량부, 아크릴비드 합성 고분자 물질 1 ~ 100 중량부 중에서 선택된 어느 하나의 물질을 1℃ 내지 40℃의 온도에서 믹싱으로 젤리화한 알코올계 젤리화 물질을 생성하는 단계;
    (b) 상기 알코올계 젤리화 물질이 담긴 밀폐 용기의 내측에 채취된 검체를 투입하는 단계;
    (c) 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 구비하는 재용해 용액을 생성하는 단계;
    (d) 상기 밀폐 용기 내의 상기 젤리화된 알코올계 젤리화 물질을 상기 재용해 용액에 투입하는 단계;
    (e) 상기 재용해 용액을 1℃ 내지 40℃의 온도로 유지시켜 상기 알코올계 젤리화 물질을 액상으로 재용해하는 단계;
    (f) 상기 재용해를 거친 상태의 알코올계 젤리화 물질로부터 상기 검체를 획득하여 검사하는 단계;
    를 포함하여 구성되는 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법.
  2. (a) 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 구비하는 제 1 용액과, 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 구비하는 제 2 용액 중에서 선택된 어느 하나의 용액(이하, '선택용액'이라 함)을 밀폐 용기에 투입하는 단계;
    (b) 상기 선택용액이 채워진 상태의 상기 밀폐 용기 내측에 검체를 투입하는 단계;
    (c) 1℃ 내지 40℃의 온도에서 젤라틴과 광경화성 단백질 중 하나 이상의 물질 5 ~ 20 중량부, 셀룰로오스 천연 고분자 물질 1 ~ 100 중량부, 아크릴비드 합성 고분자 물질 1 ~ 100 중량부 중에서 선택된 어느 하나의 물질을 상기 선택용액과 검체가 투입된 상태의 상기 밀폐 용기 내측에 투입하여 알코올계 젤리화 물질로 젤리화하는 단계;
    (d) 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 구비하는 재용해 용액을 생성하는 단계;
    (e) 상기 밀폐 용기 내의 상기 젤리화된 알코올계 젤리화 물질을 상기 재용해 용액에 투입하는 단계;
    (f) 상기 재용해 용액을 1℃ 내지 40℃의 온도로 유지시켜 상기 젤리화된 알코올계 젤리화 물질을 액상 물질로 재용해하는 단계;
    (g) 상기 재용해를 거친 상태의 상기 액상 물질로부터 상기 검체를 획득하여 검사하는 단계;
    를 포함하여 구성되는 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법.
  3. (a) 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 구비하는 제 1 용액과, 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 구비하는 제 2 용액 중에서 선택된 어느 하나의 용액과 젤라틴과 광경화성 단백질 중 하나 이상의 물질 5 ~ 20 중량부, 셀룰로오스 천연 고분자 물질 1 ~ 100 중량부, 아크릴비드 합성 고분자 물질 1 ~ 100 중량부 중에서 선택된 어느 하나의 물질을 1℃ 내지 40℃의 온도에서 믹싱으로 젤리화한 알코올계 젤리화 물질을 생성하는 단계;
    (b) 상기 알코올계 젤리화 물질이 담긴 밀폐 용기의 내측에 채취된 검체를 투입하는 단계;
    (c) 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 구비하는 재용해 용액을 생성하는 단계;
    (d) 상기 밀폐 용기 내의 상기 젤리화된 알코올계 젤리화 물질을 상기 재용해 용액에 투입하는 단계;
    (e) 상기 재용해 용액을 1℃ 내지 40℃의 온도로 유지시켜 상기 알코올계 젤리화 물질을 액상으로 재용해하는 단계;
    (f) 상기 재용해를 거친 상태의 알코올계 젤리화 물질로부터 상기 검체를 획득하여 검사하는 단계;
    를 포함하여 구성되는 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법.
  4. (a) 메탄올 수용액 30 ~ 60 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 콜산 0.01 ~ 0.05 중량부, 1N의 아세트산 수용액 0.05 ~ 0.1 중량부를 구비하는 제 1 용액과, 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 구비하는 제 2 용액 중에서 선택된 어느 하나의 용액(이하, '선택용액'이라 함)을 밀폐 용기에 투입하는 단계;
    (b) 상기 선택용액이 채워진 상태의 상기 밀폐 용기 내측에 검체를 투입하는 단계;
    (c) 1℃ 내지 40℃의 온도에서 젤라틴과 광경화성 단백질 중 하나 이상의 물질 5 ~ 20 중량부, 셀룰로오스 천연 고분자 물질 1 ~ 100 중량부, 아크릴비드 합성 고분자 물질 1 ~ 100 중량부 중에서 선택된 어느 하나의 물질을 상기 선택용액과 검체가 투입된 상태의 상기 밀폐 용기 내측에 투입하여 알코올계 젤리화 물질로 젤리화하는 단계;
    (d) 에탄올 수용액 40 ~ 50 중량부, EDTA 0.1 ~ 0.2 중량부, 2가 알코올류 첨가제 0.2 ~ 1 중량부를 구비하는 재용해 용액을 생성하는 단계;
    (e) 상기 밀폐 용기 내의 상기 젤리화된 알코올계 젤리화 물질을 상기 재용해 용액에 투입하는 단계;
    (f) 상기 재용해 용액을 1℃ 내지 40℃의 온도로 유지시켜 상기 젤리화된 알코올계 젤리화 물질을 액상 물질로 재용해하는 단계;
    (g) 상기 재용해를 거친 상태의 상기 액상 물질로부터 상기 검체를 획득하여 검사하는 단계;
    를 포함하여 구성되는 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법.
PCT/KR2021/002160 2020-04-29 2021-02-20 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법 WO2021221280A1 (ko)

Priority Applications (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AU2021264267A AU2021264267B2 (en) 2020-04-29 2021-02-20 Cell examining method using jellification of alcohol-based solution composition
EP21796069.9A EP4079863A4 (en) 2020-04-29 2021-02-20 METHOD FOR CELL INSPECTION BY GELATION OF AN ALCOHOL-BASED SOLUTION COMPOSITION
CA3163560A CA3163560A1 (en) 2020-04-29 2021-02-20 Cell examining method using jellification of alcohol-based solution composition
CN202180009932.0A CN114981447A (zh) 2020-04-29 2021-02-20 使用醇类溶液组合物的凝胶化的细胞检查方法
US17/789,635 US20230055122A1 (en) 2020-04-29 2021-02-20 Cell examining method using jellification of alcohol-based solution composition
JP2022540541A JP7312509B2 (ja) 2020-04-29 2021-02-20 アルコール系溶液組成物のゼリー化を用いた細胞の検査方法

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200052928A KR102212669B1 (ko) 2020-04-29 2020-04-29 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법
KR10-2020-0052928 2020-04-29

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2021221280A1 true WO2021221280A1 (ko) 2021-11-04

Family

ID=74559007

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2021/002160 WO2021221280A1 (ko) 2020-04-29 2021-02-20 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법

Country Status (8)

Country Link
US (1) US20230055122A1 (ko)
EP (1) EP4079863A4 (ko)
JP (1) JP7312509B2 (ko)
KR (1) KR102212669B1 (ko)
CN (1) CN114981447A (ko)
AU (1) AU2021264267B2 (ko)
CA (1) CA3163560A1 (ko)
WO (1) WO2021221280A1 (ko)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102212669B1 (ko) * 2020-04-29 2021-02-05 (주)바이오다인 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0511430A2 (en) 1991-05-01 1992-11-04 Cytyc Corporation Cell preservative solution
US20030104347A1 (en) * 2000-03-21 2003-06-05 Yuichi Mori Coating material for living organism tissue, coated product from living organism tissue and method of coating living organism material
KR20050116689A (ko) 2004-06-08 2005-12-13 하숙태 겔상 보존제와 그 제조방법 및 그를 이용한 세포검사방법
US20060088814A1 (en) 2004-10-26 2006-04-27 Cytyc Corporation Enhanced cell preservative solution and methods for using same
KR100849035B1 (ko) * 2007-04-30 2008-07-29 변진성 세포 시료 운반용 용기의 제조방법
JP2017521642A (ja) * 2014-05-28 2017-08-03 キアゲン ゲーエムベーハー 細胞含有液体サンプルのための固定用組成物
KR102212669B1 (ko) * 2020-04-29 2021-02-05 (주)바이오다인 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2858087B2 (ja) * 1994-09-19 1999-02-17 グンゼ株式会社 組織培養用基材及び組織培養法
DE60300218T2 (de) * 2003-03-05 2005-12-29 Milestone S.R.L. Fixierungslösung
WO2011146909A1 (en) * 2010-05-20 2011-11-24 Azer Scientific, Inc. Tissue fixative having increased viscosity
US10365189B2 (en) * 2015-05-07 2019-07-30 Steven Wheeler Histological specimen treatment
EP3374751B1 (en) * 2015-11-13 2024-01-24 The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Fixatives and methods of use
EP3827241B1 (en) * 2018-07-24 2024-03-13 Andrew Simon Goldsborough Dissociation of biological samples

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0511430A2 (en) 1991-05-01 1992-11-04 Cytyc Corporation Cell preservative solution
EP0511430B1 (en) * 1991-05-01 1997-10-08 Cytyc Corporation Cell preservative solution
US20030104347A1 (en) * 2000-03-21 2003-06-05 Yuichi Mori Coating material for living organism tissue, coated product from living organism tissue and method of coating living organism material
KR20050116689A (ko) 2004-06-08 2005-12-13 하숙태 겔상 보존제와 그 제조방법 및 그를 이용한 세포검사방법
US20060088814A1 (en) 2004-10-26 2006-04-27 Cytyc Corporation Enhanced cell preservative solution and methods for using same
KR100849035B1 (ko) * 2007-04-30 2008-07-29 변진성 세포 시료 운반용 용기의 제조방법
JP2017521642A (ja) * 2014-05-28 2017-08-03 キアゲン ゲーエムベーハー 細胞含有液体サンプルのための固定用組成物
KR102212669B1 (ko) * 2020-04-29 2021-02-05 (주)바이오다인 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See also references of EP4079863A4

Also Published As

Publication number Publication date
JP7312509B2 (ja) 2023-07-21
AU2021264267B2 (en) 2024-05-02
EP4079863A1 (en) 2022-10-26
CA3163560A1 (en) 2021-11-04
EP4079863A4 (en) 2024-01-10
KR102212669B1 (ko) 2021-02-05
JP2023509927A (ja) 2023-03-10
AU2021264267A1 (en) 2022-07-21
US20230055122A1 (en) 2023-02-23
CN114981447A (zh) 2022-08-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2021221280A1 (ko) 알코올계 용액 조성물의 젤리화를 이용한 세포 검사 방법
WO2017114439A1 (zh) 基于图像处理的硅橡胶表面藻类生长程度测量方法及装置
Chan et al. Biopsy studies on the natural sex reversal in Monopterus albus (Pisces: Teleostei)
WO2021221279A1 (ko) 세포 고정용 알코올계 젤리 조성물
WO2012091419A2 (ko) 비접촉식 구획방식을 이용한 고체표면 미생물 검체 채취방법 및 그 고체표면 구획장치
WO2015115816A1 (ko) 방사성 의약품 분배장치
Fujita The microcomputer-based color image analyzer and its application to histochemistry
CN115612136B (zh) 一种多功能柔性薄膜封装材料的制备方法
WO2021261622A1 (ko) 표준형 오가노이드 제조방법
JPH05262878A (ja) 超高分子量ポリカルボランシロキサンの調製方法
WO2019078523A2 (en) COLLAGEN MEMBRANE WITH EXCELLENT PHYSICAL PROPERTIES AND METHOD OF MANUFACTURING THE SAME
WO2012053695A1 (ko) 고유좌표계를 가진 이종기기 사이의 공간좌표를 동기화시키는 좌표동기화 방법
JPS63282653A (ja) 細胞の活性度測定方法
WO2024071918A1 (ko) 고배율의 세포 확대 분석을 위한 세포 필름, 이의 제조용 조성물 및 제조 방법
CN204462029U (zh) 聚凝胺配血阅读仪
CN111220807B (zh) 一种基于水凝胶包裹技术的卵母细胞免疫荧光染色方法
WO2024101846A1 (ko) 산성도 감응성 하이드로겔 패치 및 이의 제조방법
WO2021132808A1 (ko) 하이드로겔 액적 디핑용 액체 배스 조성물
Ap Gwynn et al. Some aspects of cleavage in Pomatoceros triqueter eggs
Stadil The measurement of gastrin
RU2299437C1 (ru) Способ исследования состояния пародонта
Isaac A hematoxylin staining mountant for microorganisms
WO2020149436A1 (ko) 디스플레이를 통한 모니터링 기능을 갖는 카메라의 렌즈모듈 검사장비
Gupta Cytoplasmic inclusions of the male germ cells of ticks as studied under the phase-contrast and interference microscopes
Yamada et al. Reverse Hemolytic Plaque Assay: Electron Microscopic Observation of Plaque-Forming Single Adeno Cells in GH Producing Adenomas

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 21796069

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2022540541

Country of ref document: JP

Kind code of ref document: A

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 3163560

Country of ref document: CA

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2021264267

Country of ref document: AU

Date of ref document: 20210220

Kind code of ref document: A

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2021796069

Country of ref document: EP

Effective date: 20220718

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE