WO2021194228A1 - 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents
암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- WO2021194228A1 WO2021194228A1 PCT/KR2021/003590 KR2021003590W WO2021194228A1 WO 2021194228 A1 WO2021194228 A1 WO 2021194228A1 KR 2021003590 W KR2021003590 W KR 2021003590W WO 2021194228 A1 WO2021194228 A1 WO 2021194228A1
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- minutes
- cancer
- aqtgtgkt
- compound
- pharmaceutical composition
- Prior art date
Links
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 56
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 47
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 38
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 33
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims description 14
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 125
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 26
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 26
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 claims abstract description 17
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 35
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 26
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 26
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 26
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 claims description 16
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 15
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims description 15
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 claims description 15
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims description 15
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 14
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 14
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 13
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 13
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 11
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 11
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 claims description 11
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 11
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 11
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 11
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 11
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 11
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 10
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 claims description 9
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 claims description 8
- 208000003721 Triple Negative Breast Neoplasms Diseases 0.000 claims description 4
- 150000001294 alanine derivatives Chemical class 0.000 claims description 4
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 4
- 208000022679 triple-negative breast carcinoma Diseases 0.000 claims description 4
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 claims description 4
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 3
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 claims description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 61
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 44
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 22
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 abstract description 14
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 7
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 3
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 abstract 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 abstract 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 abstract 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 69
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 65
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 60
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 43
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N 0.000 description 35
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 30
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 26
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 23
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 21
- SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N (1s,2s,3s,5r)-1-(carboxymethyl)-3,5-bis[(4-phenoxyphenyl)methyl-propylcarbamoyl]cyclopentane-1,2-dicarboxylic acid Chemical compound O=C([C@@H]1[C@@H]([C@](CC(O)=O)([C@H](C(=O)N(CCC)CC=2C=CC(OC=3C=CC=CC=3)=CC=2)C1)C(O)=O)C(O)=O)N(CCC)CC(C=C1)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 SZUVGFMDDVSKSI-WIFOCOSTSA-N 0.000 description 19
- 229940126543 compound 14 Drugs 0.000 description 19
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 18
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 17
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 17
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 16
- OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 15
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 15
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 15
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 15
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 14
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium on carbon Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 11
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 11
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 11
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 10
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 10
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 8
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 8
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 8
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 8
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 8
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 8
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 0 CC([C@@](C(OCc1ccccc1)=O)NC([C@](CCCC*1C(C2)*2C1)N)=O)OCc1ccccc1 Chemical compound CC([C@@](C(OCc1ccccc1)=O)NC([C@](CCCC*1C(C2)*2C1)N)=O)OCc1ccccc1 0.000 description 6
- HHSJMSCOLJVTCX-ZDLURKLDSA-N L-Glutaminyl-L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O HHSJMSCOLJVTCX-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- 125000003412 L-alanyl group Chemical group [H]N([H])[C@@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 5
- RLMHWGDKMJIEHH-QRPNPIFTSA-N benzyl (2s)-2-aminopropanoate;hydrochloride Chemical compound Cl.C[C@H](N)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 RLMHWGDKMJIEHH-QRPNPIFTSA-N 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 4
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 4
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 4
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 4
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000001946 ultra-performance liquid chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N (2S,3R)-N-[(2S)-3-(cyclopenten-1-yl)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopropan-2-yl]-3-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide Chemical compound C1(=CCCC1)C[C@@H](C(=O)[C@@]1(OC1)C)NC([C@H]([C@@H](C1=CC=C(C=C1)OC)O)NC([C@H](C)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)=O GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N 0.000 description 3
- 125000000570 L-alpha-aspartyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[C@]([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 3
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 3
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 229940125773 compound 10 Drugs 0.000 description 3
- 229940125797 compound 12 Drugs 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 230000000431 effect on proliferation Effects 0.000 description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N jdtic Chemical compound C1([C@]2(C)CCN(C[C@@H]2C)C[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]2NCC3=CC(O)=CC=C3C2)=CC=CC(O)=C1 ZLVXBBHTMQJRSX-VMGNSXQWSA-N 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 3
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- STBLNCCBQMHSRC-BATDWUPUSA-N (2s)-n-[(3s,4s)-5-acetyl-7-cyano-4-methyl-1-[(2-methylnaphthalen-1-yl)methyl]-2-oxo-3,4-dihydro-1,5-benzodiazepin-3-yl]-2-(methylamino)propanamide Chemical compound O=C1[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC)[C@H](C)N(C(C)=O)C2=CC(C#N)=CC=C2N1CC1=C(C)C=CC2=CC=CC=C12 STBLNCCBQMHSRC-BATDWUPUSA-N 0.000 description 2
- QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N (3S)-3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-[1-bis(4-chlorophenoxy)phosphorylbutylamino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound CCCC(NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCC1SC[C@@H]2NC(=O)N[C@H]12)C(C)C)P(=O)(Oc1ccc(Cl)cc1)Oc1ccc(Cl)cc1 QFLWZFQWSBQYPS-AWRAUJHKSA-N 0.000 description 2
- IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N (3S,8S,10R,13S,14S,17S)-17-isoquinolin-7-yl-N,N,10,13-tetramethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-amine Chemical compound CN(C)[C@H]1CC[C@]2(C)C3CC[C@@]4(C)[C@@H](CC[C@@H]4c4ccc5ccncc5c4)[C@@H]3CC=C2C1 IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N 0.000 description 2
- UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 1-[6-[2-[3-[3-[3-[2-[2-[3-[[2-[2-[[(2r)-1-[[2-[[(2r)-1-[3-[2-[2-[3-[[2-(2-amino-2-oxoethoxy)acetyl]amino]propoxy]ethoxy]ethoxy]propylamino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-[(2r)-2,3-di(hexadecanoyloxy)propyl]sulfanyl-1-oxopropan-2-yl Chemical compound O=C1C(SCCC(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(=O)N[C@@H](CSC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCCCOCCOCCOCCCNC(=O)COCC(N)=O)CC(=O)N1CCNC(=O)CCCCCN\1C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2CC/1=C/C=C/C=C/C1=[N+](CC)C2=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C1 UNILWMWFPHPYOR-KXEYIPSPSA-M 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZEYHEAKUIGZSGI-UHFFFAOYSA-N 4-methoxybenzoic acid Chemical compound COC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 ZEYHEAKUIGZSGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000004694 Eucalyptus leucoxylon Nutrition 0.000 description 2
- 244000166102 Eucalyptus leucoxylon Species 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 125000003440 L-leucyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 125000002842 L-seryl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 2
- 229940125878 compound 36 Drugs 0.000 description 2
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001195 ultra high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- BDHUTRNYBGWPBL-HNNXBMFYSA-N (2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-6-(phenylmethoxycarbonylamino)hexanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCNC(=O)OCC1=CC=CC=C1 BDHUTRNYBGWPBL-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 1-[(1R)-1-(2,4-dichlorophenyl)ethyl]-6-[(4S,5R)-4-[(2S)-2-(hydroxymethyl)pyrrolidin-1-yl]-5-methylcyclohexen-1-yl]pyrazolo[3,4-b]pyrazine-3-carbonitrile Chemical compound ClC1=C(C=CC(=C1)Cl)[C@@H](C)N1N=C(C=2C1=NC(=CN=2)C1=CC[C@@H]([C@@H](C1)C)N1[C@@H](CCC1)CO)C#N KQZLRWGGWXJPOS-NLFPWZOASA-N 0.000 description 1
- UOBYKYZJUGYBDK-UHFFFAOYSA-N 2-naphthoic acid Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C(=O)O)=CC=C21 UOBYKYZJUGYBDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ILYSAKHOYBPSPC-UHFFFAOYSA-N 2-phenylbenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ILYSAKHOYBPSPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XNLWJFYYOIRPIO-UHFFFAOYSA-N 3-phenylbenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC(C=2C=CC=CC=2)=C1 XNLWJFYYOIRPIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N Cellulose, microcrystalline Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 125000001176 L-lysyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(N([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000769 L-threonyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])[C@](O[H])(C([H])([H])[H])[H] 0.000 description 1
- 125000003798 L-tyrosyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C(O[H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000003580 L-valyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])[H] 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- KTHDTJVBEPMMGL-VKHMYHEASA-N N-acetyl-L-alanine Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(C)=O KTHDTJVBEPMMGL-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- KTHDTJVBEPMMGL-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-L-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(C)=O KTHDTJVBEPMMGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940124650 anti-cancer therapies Drugs 0.000 description 1
- 238000011319 anticancer therapy Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010000 carbonizing Methods 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 229940125877 compound 31 Drugs 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 229940043231 innovative antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000036457 multidrug resistance Effects 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004019 papillary adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000012286 potassium permanganate Substances 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- CIJQGPVMMRXSQW-UHFFFAOYSA-M sodium;2-aminoacetic acid;hydroxide Chemical compound O.[Na+].NCC([O-])=O CIJQGPVMMRXSQW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
Abstract
본 발명은 신규한 올리고펩티드 AQTGTGKT 아날로그 화합물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 우수한 항암 효과를 나타내고, 인간의 혈액 내에서 안정적으로 존재하는 올리고펩티드 AQTGTGKT의 아날로그 화합물, 이를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물 및 이의 제조 방법을 제공한다. 본 발명에 따른 아날로그 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물은 올리고펩티드 제제가 가지고 있는 장점인 항체에 비해 분자량이 작아 면역반응의 우려가 적고, 조직 내에 침투가 용이하다는 점에 더하여 암 세포의 증식 억제 효과가 더욱 뛰어나고, 인간의 혈액 내에서 안정적으로 존재할 수 있는 효과를 나타내므로 암을 치료하는데 유용한 항암제로 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 신규한 올리고펩티드 AQTGTGKT의 아날로그 화합물, 이를 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
본 출원은 2020년 3월 23일에 출원된 대한민국 특허출원 제10-2020-0035188호 및 2021년 3월 23일에 출원된 대한민국 특허출원 제10-2021-0036982호에 기초한 우선권을 주장하며, 해당 출원의 명세서 및 도면에 개시된 모든 내용은 본 출원에 원용된다.
현재 암의 조기 진단법의 개발 및 새로운 항암 요법의 지속적인 개발로 인하여 암의 치료 효과가 향상되고 있음에도 불구하고, 암은 아직도 우리나라 사망 원인 중 제1, 2위를 다투는 중요한 질환이다. 현재 사용되고 있는 항암제의 대부분은 화학요법에 의한 것으로 암의 종류에 따라 약리작용이 다양하고, 독성에 의한 부작용이 다양하게 나타나기 때문에 암 치료의 문제점으로 지적되고 있다.
기존의 항암제는 암 세포뿐만 아니라, 정상 조직에도 침투하여 정상 세포의 기능 및 활성에 손상을 입히기 때문에, 골수 기능 저하, 위장장애, 탈모증 등의 부작용을 유발하기도 하고, 장기간 화학 요법에 따른 항암제에 대한 다약제 저항성을 보이는 등 암 치료의 커다란 문제점을 보인다. 따라서, 기존 항암제의 이러한 심각한 문제점을 해결할 수 있는 혁신적인 항암제의 개발에 관한 연구가 활발히 진행되고 있다.
한편, 종양 세포의 특이적 종양 항원을 표적으로 하는 항체의 개발이 이루어지고 있으나, 항체의 경우 면역반응의 우려 및 조직 내 침투의 낮은 효율성 등의 문제점이 있다. 반면, 펩티드(peptide)의 경우 분자량이 작아 항체와는 다르게 면역반응 우려가 적고, 조직 내 침투가 용이한 장점이 있으며, 종양 항원을 표적으로 하는 펩티드 기반 항암제는 종양에 선택적으로 작용할 수 있기 때문에 정상세포에 손상을 입히는 등의 부작용이 거의 없을 것으로 기대되고 있다. 그러나 이러한 장점에도 불구하고 매우 제한적인 암종에만 사용되고 있으며, 특히 인간에게 투여 직후 짧은 시간 내에 분해되어 효과를 발휘하기 어려운 문제점이 있었다.
상기 문제점을 해결하기 위한 방법으로 펩티드를 아미드화(amidation), 에스터화(esterification), 아실화(acylation), 아세틸화(acetylation), 페길화 (PEGylation), 고리화(cyclization) 또는 알킬화(alkylation) 등에 의해 변형시킴으로써 수율의 향상, 생체 내 활성의 증가, 수용체에 대한 펩티드의 친화성 증가, 단백질의 분해 지연 등을 꾀할 수 있으나, 상기 변형에 의하더라도 원하는 효과가 향상되는 것은 보장되지 않으며, 오히려 펩티드가 본래 가지고 있던 생체 내 활성을 잃어버리거나 예기치 못한 부작용이 발생할 수 있는 위험이 있다. 따라서 이러한 부정적 효과를 최소화함과 동시에 목적하는 효과를 극대화하기 위한 펩티드의 변형에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다.
본 발명은 상술한 바와 같은 종래 기술상의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로, 올리고펩티드 AQTGTGKT(alanine-glutamine-threonine-glycine-threonine-glycine-lysine-threonine)의 항암 효과 및 혈액 내에서의 반감기를 더욱 향상시키기 위해 예의 노력한 결과 본 발명을 완성하였다. 특히, AQTGTGKT 펩티드의 아미드화(amidation)된 아날로그 화합물은 우수한 항암 효과 및 증가된 반감기를 가지는 것을 확인하였다.
이에, 본 발명의 목적은 하기의 일반식으로 표시되는 화합물을 제공하는 것이다:
[일반식]
X-AQTGTGKT
상기 일반식에서, A는 알라닌(alanine)이고, Q는 글루타민(glutamine)이고, T는 트레오닌(threonine)이고, G는 글라이신(glycine)이고, K는 라이신(lysine)이고,
X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이다.
본 발명의 다른 목적은 상기의 일반식으로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는, 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은, 상기 일반식으로 표시되는 화합물의 제조방법을 제공하는 것이다.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위해서, 본 발명은 하기의 일반식으로 표시되는 화합물을 제공한다:
[일반식]
X-AQTGTGKT
상기 일반식에서, A는 알라닌(alanine)이고, Q는 글루타민(glutamine)이고, T는 트레오닌(threonine)이고, G는 글라이신(glycine)이고, K는 라이신(lysine)이고,
X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이다.
또한, 본 발명은 하기의 일반식으로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는, 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다:
[일반식]
X-AQTGTGKT
상기 일반식에서, A는 알라닌(alanine)이고, Q는 글루타민(glutamine)이고, T는 트레오닌(threonine)이고, G는 글라이신(glycine)이고, K는 라이신(lysine)이고,
X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이다.
또한, 본 발명은 상기 일반식으로 표시되는 화합물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 암의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
뿐만 아니라, 본 발명은 상기 일반식으로 표시되는 화합물의 암에 대한 예방, 개선 또는 치료 용도를 제공한다.
더욱이, 본 발명은 상기 일반식으로 표시되는 화합물의 암 치료용 약제를 생산하기 위한 용도를 제공한다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 암은 폐암, 유방암, 혈액암, 대장암, 췌장암 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 암일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 다른 구현예에 있어서, 상기 폐암은 비소세포성 폐암(non-small cell lung cancer)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 또 다른 구현예에 있어서, 상기 유방암은 삼중음성유방암(Triple negative breast cancer)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 또 다른 구현예에 있어서, 상기 혈액암은 백혈병, 림프종, 다발성 골수종 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이고, 상기 암은 폐암일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 다른 구현예에 있어서, 상기 X는
이고, 상기 암은 유방암일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 또 다른 구현예에 있어서, 상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이고, 상기 암은 혈액암일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 또 다른 구현예에 있어서, 상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이고, 상기 암은 췌장암일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 또 다른 구현예에 있어서, 상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이고, 상기 암은 대장암일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 구체예에 있어서, 상기 X가
인 경우, 인간 혈액 내에서의 반감기가 100분 내지 150분일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 다른 구체예에 있어서, 상기 X가
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 경우, 인간 혈액 내에서의 반감기가 45분 내지 70분일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 또 다른 구체예에 있어서, 상기 X가
인 경우, 인간 혈액 내에서의 반감기가 20분 내지 30분일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 하기의 단계를 포함하는 올리고펩티드 X-AQTGTGKT의 제조방법을 제공한다:
(상기 A는 알라닌(alanine)이고, Q는 글루타민(glutamine)이고, T는 트레오닌(threonine)이고, G는 글라이신(glycine)이고, K는 라이신(lysine)이고,
상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나임.)
(1) TG 및 KT를 각각 합성하는 단계;
(2) 상기 TG와 KT를 결합하여 TGKT를 합성하는 단계;
(3) 상기 TGKT의 N-말단에 TG를 결합하여 TGTGKT를 합성하는 단계;
(4) 상기 TGTGKT의 N-말단에 Q를 결합하여 QTGTGKT를 합성하는 단계; 및
(5) 상기 QTGTGKT의 N-말단에 알라닌 유도체(X-A)를 결합하여 X-AQTGTGKT를 합성하는 단계.
본 발명은 신규한 올리고펩티드 AQTGTGKT의 아날로그 화합물, 이를 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 상기 올리고펩티드 AQTGTGKT의 아날로그가 우수한 항암 효과를 나타내고, 인간의 혈액 내에서 안정적으로 존재함을 확인하였다. 따라서, 본 발명에 따른 약학적 조성물은 올리고펩티드가 가지고 있는 장점으로서 항체에 비해 분자량이 작아 면역반응의 우려가 적고, 조직 내에 침투가 용이하다는 점에 더하여 암 세포의 증식 억제 효과가 더욱 뛰어나고, 인간의 혈액 내에서 안정적으로 존재할 수 있는 효과를 나타내므로 암을 치료하는데 유용한 항암제로 사용할 수 있을 것으로 기대된다.
도 1 내지 도 7은 본 발명에 따른 화합물을 동정하고, 화합물의 구조 확인을 위한 UPLC-MS(상단) 및
1H NMR(하단) 결과를 나타낸 도로서, 도 1은 4-PhPh-AQTGTGKT, 도 2는 Ac-AQTGTGKT, 도 3은 3-PhPh-AQTGTGKT, 도 4는 4-MeOPh-AQTGTGKT, 도 5는 2-PhPh-AQTGTGKT, 도 6은 Ph-AQTGTGKT, 도 7은 Naphthyl-AQTGTGKT의 측정 결과를 나타낸 것이다.
도 8은 폐암 세포주 H1299에서 본 발명의 화합물 처리에 따른 세포 활성 억제 효과를 CTG assay에 의해 분석한 결과를 나타낸 도이다(
*p<0.05,
**p<0.01,
***p<0.001; 이하 도 9 내지 도 16에서 동일).
도 9는 폐암(유두상선암종) 세포주 H820에서 본 발명의 화합물 처리에 따른 세포 활성 억제 효과를 MTT assay에 의해 분석한 결과를 나타낸 도이다.
도 10은 폐암 세포주 H1975에서 본 발명의 화합물 처리에 따른 세포 활성 억제 효과를 MTT assay에 의해 분석한 결과를 나타낸 도이다.
도 11은 유방암 세포주 MDA-MB-231에서 본 발명의 화합물 처리에 따른 세포의 활성 억제 효과를 CTG assay에 의해 분석한 결과를 나타낸 도이다.
도 12는 혈액암 세포주 Daudi에서 본 발명의 화합물 처리에 따른 세포 활성 억제 효과를 MTT assay에 의해 분석한 결과를 나타낸 도이다.
도 13은 췌장암 세포주 BxPC3에서 본 발명의 화합물 처리에 따른 세포 활성 억제 효과를 MTT assay에 의해 분석한 결과를 나타낸 도이다.
도 14는 대장암 세포주 HT29에서 본 발명의 화합물 처리에 따른 세포 활성 억제 효과를 MTT assay에 의해 분석한 결과를 나타낸 도이다.
도 15는 H1975 폐암 세포주를 이식한 마우스에 본 발명의 화합물 또는 PBS를 처리한 후 시간에 따른 종양 부피를 측정하여, 본 발명의 화합물 처리에 따른 종양 성장 억제 효과를 확인한 도이다.
도 16은 H820 폐암 세포주를 이식한 마우스에 본 발명의 화합물 또는 PBS를 처리한 후 시간에 따른 종양 부피를 측정하여, 본 발명의 화합물 처리에 따른 종양 성장 억제 효과를 확인한 도이다.
도 17 내지 23은 인간 혈액 내에서 본 발명에 따른 각각의 화합물의 시간대별 잔류량을 측정한 결과를 나타낸 도이다.
본 발명자들은 올리고펩티드 AQTGTGKT의 아미드화 아날로그(amidation analog)를 새롭게 합성하고, 이들이 우수한 항암 효과(실시예 2 참조) 및 혈액 내에서의 뛰어난 안정성(실시예 3 참조)을 나타낸다는 사실을 확인하여 본 발명을 완성하였다. 이에 본 발명은 하기의 일반식으로 표시되는 화합물을 제공할 수 있다:
[일반식]
X-AQTGTGKT
상기 일반식에 있어서, A는 알라닌(alanine)이고, Q는 글루타민(glutamine)이고, T는 트레오닌(threonine)이고, G는 글라이신(glycine)이고, K는 라이신(lysine)이고,
X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이다.
본 발명의 다른 양태로서, 본 발명은 상기 일반식으로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는, 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명의 또 다른 양태로서, 본 발명은 상기 일반식으로 표시되는 화합물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 암의 예방 또는 치료 방법을 제공할 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어, “예방”이란 본 발명에 따른 조성물의 투여에 의해 암에 의한 증상을 차단하거나, 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 명세서에서 사용된 용어, “치료”란 본 발명에 따른 조성물의 투여에 의해 암에 의한 증세가 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 명세서에서 사용된 용어, “개체”란 질병의 예방 또는 치료를 필요로 하는 대상을 의미한다. 예를 들어, 상기 개체는 인간, 또는 비-인간인 영장류, 생쥐, 개, 고양이, 말, 양 및 소를 포함하는 포유류일 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어, “올리고펩티드”는 펩티드 결합에 의해 아미노산 잔기들이 서로 결합되어 형성된 선형(linear)의 분자를 의미한다. 본 발명의 올리고펩티드는 분자·생물학적인 방법과 함께 당업계에 공지된 화학적 합성 방법(예를 들어, 고상 합성 기술(solid-phase synthesis techniques))에 따라 제조될 수 있다(Merrifield, J. Amer. Chem. Soc. 85: 2149-54(1963); Stewart, et al., Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd. ed., Pierce Chem. Co.: Rockford, 111(1984)).
본 발명에 따른 화합물의 범위에는 이의 약학적으로 허용 가능한 염도 포함될 수 있다. 본 명세서에서 사용된 용어, “약학적으로 허용 가능한”이라는 용어는 과도한 독성, 자극, 알러지 반응 또는 기타 문제점이나 합병증 없이 이득/위험 비가 합리적이어서 대상체(예: 인간)의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합하며, 건전한 의학적 판단의 범주 이내인 화합물을 의미한다. 상기 약학적으로 허용 가능한 염은, 예를 들어 약학적으로 허용 가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염 및 약학적으로 허용 가능한 금속염을 포함한다.
또한, 본 발명에 따른 화합물의 범위에는 본 발명의 화합물과 균등한 생물학적 활성을 발휘하는 아미노산 서열의 변이를 갖는 생물학적 기능 균등물이 포함될 수 있다. 이러한 아미노산 서열의 변이는 아미노산 곁사슬 치환체의 상대적 유사성, 예컨대, 소수성, 친수성, 전하 및 크기 등에 기초하여 이루어질 수 있다. 아미노산 곁사슬 치환체의 크기, 모양 및 종류에 대한 분석에 의하여, 알라닌과 글라이신은 유사한 크기를 가지고; 라이신은 양전하를 띤 잔기이며; 글루타민과 트레오닌은 전하를 띠지 않는다는 것을 알 수 있다. 따라서, 이러한 고려 사항에 기초하여, 알라닌과 글라이신; 그리고 글루타민과 트레오닌은 생물학적으로 기능 균등물이라 할 수 있다.
변이를 도입하는 데 있어서, 아미노산의 소수성 인덱스(hydropathic index)가 고려될 수 있다. 각각의 아미노산은 소수성과 전하에 따라 다음과 같이 소수성 인덱스가 부여되어 있다: 아이소류신 (+4.5); 발린 (+4.2); 류신 (+3.8); 페닐알라닌(+2.8); 시스테인 (+2.5); 메싸이오닌 (+1.9); 알라닌 (+1.8); 글라이신 (-0.4); 트레오닌 (-0.7); 세린 (-0.8); 트립토판 (-0.9); 타이로신 (-1.3); 프롤린 (-1.6); 히스티딘 (-3.2); 글루탐산 (-3.5); 글루타민 (-3.5); 아스파트산 (-3.5); 아스파라진 (-3.5); 라이신 (-3.9); 및 아르기닌 (-4.5).
단백질의 상호적인 생물학적 기능(interactive biological function)을 부여하는 데 있어서 소수성 아미노산 인덱스는 매우 중요하다. 유사한 소수성 인덱스를 가지는 아미노산으로 치환하여야 유사한 생물학적 활성을 보유할 수 있다는 것은 공지된 사실이다. 소수성 인덱스를 참조하여 변이를 도입시키는 경우, 바람직하게는 ±2 이내, 보다 바람직하게는 ±1 이내, 보다 더 바람직하게는 ±0.5 이내의 소수성 인덱스 차이를 나타내는 아미노산 사이에 치환을 한다.
한편, 유사한 친수성 값(hydrophilicity value)을 가지는 아미노산 사이의 치환이 균등한 생물학적 활성을 갖는 단백질을 초래한다는 것도 잘 알려져 있다. 미국 특허 제4,554,101호에 개시된 바와 같이, 다음의 친수성 값이 각각의 아미노산 잔기에 부여되어 있다: 아르기닌 (+3.0); 라이신 (+3.0); 아스파트산(+3.0±1); 글루탐산 (+3.0±1); 세린 (+0.3); 아스파라진 (+0.2); 글루타민 (+0.2); 글라이신 (0); 트레오닌 (-0.4); 프롤린 (-0.5±1); 알라닌 (-0.5); 히스티딘 (-0.5); 시스테인 (-1.0); 메싸이오닌 (-1.3); 발린 (-1.5); 류신 (-1.8); 아이소류신 (-1.8); 타이로신 (-2.3); 페닐알라닌 (-2.5); 트립토판 (-3.4).
친수성 값을 참조하여 변이를 도입시키는 경우, 바람직하게는 ±2 이내, 보다 바람직하게는 ±1 이내, 보다 더 바람직하게는 ±0.5 이내의 친수성 값 차이를 나타내는 아미노산 사이에 치환을 한다.
분자의 활성을 전체적으로 변경시키지 않는 단백질에서의 아미노산 교환은 당해 분야에 공지되어 있다(H. Neurath, R.L.Hill, The Proteins, Academic Press, New York, 1979). 가장 통상적으로 일어나는 교환은 아미노산 잔기 Ala/Ser, Val/Ile, Asp/Glu, Thr/Ser, Ala/Gly, Ala/Thr, Ser/Asn, Ala/Val, Ser/Gly, Tyr/Phe, Ala/Pro, Lys/Arg, Asp/Asn, Leu/Ile, Leu/Val, Ala/Glu, Asp/Gly 간의 교환이다.
상술한 생물학적 균등 활성을 갖는 변이를 고려한다면, 본 발명의 상기 일반식으로 표시되는 화합물의 아미노산 서열(AQTGTGKT)의 단백질은 이와 실질적인 동일성(substantial identity)을 나타내는 서열도 포함하는 것으로 해석된다. 상기의 실질적인 동일성은, 상기한 본 발명의 서열과 임의의 다른 서열을 최대한 대응되도록 얼라인(align)하고, 당업계에서 통상적으로 이용되는 알고리즘을 이용하여 얼라인된 서열을 분석한 경우에, 최소 62.5%의 상동성, 보다 바람직하게는 75% 이상의 상동성, 가장 바람직하게는 87.5% 이상의 상동성을 나타내는 서열을 의미한다. 서열비교를 위한 얼라인먼트 방법은 당업계에 공지되어 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 암의 예방 또는 치료에 사용된다. 본 발명의 약학적 조성물이 사용 가능한 암은 폐암, 유방암, 혈액암, 대장암, 췌장암 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 암일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 있어서, 상기 폐암은 비소세포성 폐암(non-small cell lung cancer)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 유방암은 삼중음성유방암(Triple negative breast cancer)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 혈액암은 백혈병, 림프종, 다발성 골수종 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 혈액암 일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 실시예에서는 본 발명에 따른 약학적 조성물이 폐암, 유방암, 혈액암, 췌장암 및 대장암에 대하여 우수한 항암 활성을 나타내는 것을 확인하였다(실시예 2 참조).
본 발명에 있어서, 상기 약학적 조성물이 폐암의 예방 또는 치료에 사용되는 경우, 일반식 X-AQTGTGKT로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하고, 상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명에 있어서, 상기 약학적 조성물이 유방암의 예방 또는 치료에 사용되는 경우, 일반식 X-AQTGTGKT로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하고, 상기 X는
일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명에 있어서, 상기 약학적 조성물이 혈액암의 예방 또는 치료에 사용되는 경우, 일반식 X-AQTGTGKT로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하고, 상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명에 있어서, 상기 약학적 조성물이 췌장암의 예방 또는 치료에 사용되는 경우, 일반식 X-AQTGTGKT로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하고, 상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명에 있어서, 상기 약학적 조성물이 대장암의 예방 또는 치료에 사용되는 경우, 일반식 X-AQTGTGKT로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하고, 상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 다른 실시예에서는, 본 발명에 따른 상기 일반식으로 표시되는 화합물들이 인간의 혈액 내에서 안정적으로 존재할 수 있으며 AQTGTGKT와 비교하여 향상된 반감기를 갖는다는 사실을 확인하였다(실시예 3 참조). 따라서, 상기 실시예의 결과는 본 발명에 따른 화합물들이 향상된 항암 효과 및 안정성을 갖는다는 것을 보여주는 것이다.
본 발명의 일반식 X-AQTGTGKT으로 표시되는 화합물에서, 상기 X가
인 경우, 인간 혈액 내에서의 반감기는 20분 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 반감기는 예를 들어 20분 내지 30분, 21분 내지 30분, 22분 내지 30분, 23분 내지 30분, 24분 내지 30분, 25분 내지 30분, 26분 내지 30분, 27분 내지 30분, 28분 내지 30분, 29분 내지 30분, 20분 내지 29분, 21분 내지 29분, 21분 내지 28분, 21분 내지 27분, 21분 내지 26분, 21분 내지 25분, 21분 내지 24분, 21분 내지 23분, 21분 내지 22분, 22분 내지 30분, 22분 내지 28분, 22분 내지 26분, 22분 내지 24분, 23분 내지 30분, 23분 내지 28분, 23분 내지 26분, 23분 내지 24분, 24분 내지 30분, 24분 내지 27분, 25분 내지 30분, 25분 내지 27분, 26분 내지 30분, 26분 내지 28분, 27분 내지 30분, 27분 내지 29분, 28분 내지 30분, 28분 내지 29분 또는 29분 내지 30분 등일 수 있다. 또한, 상기 반감기는 AQTGTGKT의 반감기와 비교하여 1900% 내지 2900% 증가한 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 증가 비율은 예를 들어 1900% 내지 2700%, 2000% 내지 2700%, 2100% 내지 2700%, 2200% 내지 2700%, 2300% 내지 2700%, 2400% 내지 2700%, 2500% 내지 2700%, 2600% 내지 2700%, 1900% 내지 2600%, 2000% 내지 2600%, 2100% 내지 2600%, 2100% 내지 2500%, 2100% 내지 2400%, 2100% 내지 2300%, 2100% 내지 2200%, 2200% 내지 2700%, 2200% 내지 2600%, 2200% 내지 2500%, 2200% 내지 2400%, 2200% 내지 2300%, 2300% 내지 2700%, 2300% 내지 2500%, 2400% 내지 2700%, 2400% 내지 2600%, 또는 2500% 내지 2700% 등일 수 있다.
또한, 본 발명의 일반식 X-AQTGTGKT으로 표시되는 화합물에서, 상기 X가
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 경우, 인간 혈액 내에서의 반감기는 45분 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 반감기는 예를 들어 45분 내지 70분, 46분 내지 70분, 47분 내지 70분, 48분 내지 70분, 49분 내지 70분, 50분 내지 70분, 51분 내지 70분, 53분 내지 70분, 55분 내지 70분, 57분 내지 70분, 59분 내지 70분, 65분 내지 70분, 45분 내지 65분, 50분 내지 65분, 55분 내지 65분, 60분 내지 65분, 45분 내지 60분, 50분 내지 60분, 55분 내지 60분, 45분 내지 55분, 50분 내지 55분, 또는 60분 내지 70분 등일 수 있다. 또한, 상기 반감기는 AQTGTGKT의 반감기와 비교하여 4400% 내지 6900% 증가한 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 증가 비율은 예를 들어 4400% 내지 6900%, 4500% 내지 6900%, 4600% 내지 6900%, 4700% 내지 6900%, 4800% 내지 6900%, 4900% 내지 6900%, 5000% 내지 6900%, 5100% 내지 6900%, 5200% 내지 6900%, 5300% 내지 6900%, 5400% 내지 6900%, 5500% 내지 6900%, 5600% 내지 6900%, 5700% 내지 6900%, 5800% 내지 6900%, 5900% 내지 6900%, 6000% 내지 6900%, 6100% 내지 6900%, 6200% 내지 6900%, 6300% 내지 6900%, 6400% 내지 6900%, 6500% 내지 6900%, 6600% 내지 6900%, 6700% 내지 6900%, 6800% 내지 6900%, 4400% 내지 6500%, 4500% 내지 6500%, 4700% 내지 6500%, 5000% 내지 6500%, 5200% 내지 6500%, 5500% 내지 6500%, 5700% 내지 6500%, 6000% 내지 6500%, 6300% 내지 6500%, 4400% 내지 6000%, 4600% 내지 6000%, 4800% 내지 6000%, 5000% 내지 6000%, 5500% 내지 6000%, 4400% 내지 5500%, 4700% 내지 5500%, 5000% 내지 5500%, 5200% 내지 5500%, 4400% 내지 5000%, 4800% 내지 5000%, 4400% 내지 4700%, 또는 4500% 내지 4700% 등일 수 있다.
또한, 본 발명의 일반식 X-AQTGTGKT으로 표시되는 화합물에서, 상기 X가
인 경우, 인간 혈액 내에서의 반감기는 100분 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 반감기는 예를 들어 100분 내지 150분, 102분 내지 150분, 103분 내지 150분, 104분 내지 150분, 105분 내지 150분, 106분 내지 150분, 107분 내지 150분, 108분 내지 150분, 109분 내지 150분, 110분 내지 150분, 111분 내지 150분, 112분 내지 150분, 115분 내지 150분, 117분 내지 150분, 120분 내지 150분, 123분 내지 150분, 125분 내지 150분, 127분 내지 150분, 130분 내지 150분, 132분 내지 150분, 135분 내지 150분, 137분 내지 150분, 140분 내지 150분, 142분 내지 150분, 145분 내지 150분, 147분 내지 150분, 148분 내지 150분, 100분 내지 140분, 102분 내지 140분, 104분 내지 140분, 106분 내지 140분, 108분 내지 140분, 120분 내지 140분, 125분 내지 140분, 130분 내지 140분, 135분 내지 140분, 100분 내지 130분, 102분 내지 130분, 105 내지 130분, 110분 내지 130분, 115분 내지 130분, 120분 내지 130분, 125분 내지 130분, 100분 내지 120분, 105분 내지 120분, 110분 내지 120분, 115분 내지 120분, 100분 내지 110분, 105분 내지 110분, 또는 100분 내지 105분 등일 수 있다. 또한, 상기 반감기는 AQTGTGKT의 반감기와 비교하여 9900% 내지 14900% 증가한 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 증가 비율은 예를 들어 9900% 내지 14900%, 10000% 내지 14900%, 10100% 내지 14900%, 10200% 내지 14900%, 10300% 내지 14900%, 10400% 내지 14900%, 10500% 내지 14900%, 10700% 내지 14900%, 11000% 내지 14900%, 11500% 내지 14900%, 12000% 내지 14900%, 12500% 내지 14900%, 13000% 내지 14900%, 13500% 내지 14900%, 14000% 내지 14900%, 14500% 내지 14900%, 9900% 내지 12000%, 10000% 내지 12000%, 10200% 내지 12000%, 10500% 내지 12000%, 10700% 내지 12000%, 11000% 내지 12000%, 11500% 내지 12000%, 11700% 내지 12000%, 9900% 내지 11000%, 10000% 내지 11000%, 또는 9900% 내지 10000% 등일 수 있다.
한편, 본 발명에 따른 약학적 조성물은 유효성분 이외에 약학적 조성물로 제조하기 위하여 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및/또는 희석제를 더 포함할 수 있다. 또한, 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
상기 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시 벤조에이트, 프로필히드록시 벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 및 광물유 등이 있다. 상기 조성물을 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제할 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여된다. 본 발명에 있어서, “약학적으로 유효한 양”은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시에 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 바람직한 투여량은 개체의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물 형태, 투여경로 및 기간에 따라 선택될 수 있다. 구체적인 예로, 상기 약학적 조성물은 0.001 내지 1000 mg/kg, 0.01 내지 100 mg/kg, 0.01 내지 10 mg/kg, 0.1 내지 10 mg/kg 또는 0.1 내지 1 mg/kg의 양을 1일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다.
상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 결정될 수 있다. 구체적으로, 본 발명에 따른 약학적 조성물의 유효량은 환자의 연령, 성별, 상태, 체중, 체내에서 활성 성분의 흡수도, 불활성율 및 배설속도, 질병종류, 병용되는 약물에 따라 달라질 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 개체에게 다양한 경로로 투여될 수 있다. 예를 들면, 경구 투여, 비강 내 투여, 경기관지 투여, 동맥 주사, 정맥 주사, 피하 주사, 근육 주사 또는 복강 내 주사에 의해 투여될 수 있다. 일일 투여량은 하루 1회 내지 수회 나누어 투여할 수 있다.
본 발명의 다른 양태로서, 본 발명은 하기의 단계를 포함하는 올리고펩티드 X-AQTGTGKT의 제조방법을 제공할 수 있다:
(상기 A는 알라닌(alanine)이고, Q는 글루타민(glutamine)이고, T는 트레오닌(threonine)이고, G는 글라이신(glycine)이고, K는 라이신(lysine)이고,
상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나임.)
(1) TG 및 KT를 각각 합성하는 단계;
(2) 상기 TG와 KT를 결합하여 TGKT를 합성하는 단계;
(3) 상기 TGKT의 N-말단에 TG를 결합하여 TGTGKT를 합성하는 단계;
(4) 상기 TGTGKT의 N-말단에 Q를 결합하여 QTGTGKT를 합성하는 단계; 및
(5) 상기 QTGTGKT의 N-말단에 알라닌 유도체(X-A)를 결합하여 X-AQTGTGKT를 합성하는 단계.
본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
[실시예]
실험 방법
1. CTG(CellTiter-Glo Luminescent) 분석
본 발명에 따른 AQTGTGKT 아날로그 화합물을 암 세포주에 처리한 후 CTG 분석을 통해 세포의 증식 정도를 측정하였다. 구체적으로, 96-well 플레이트에 각 well 당 5 × 10
3/100 μl 세포를 시딩(seeding)하고, 24시간 동안 배양한 후 본 발명에 따른 AQTGTGKT 아날로그 7종을 각각 트랜스펙션(transfection) 하였다. 72시간 경과 후 CellTiter-Glo®(Promega Co., 미국) 시약을 세포 배양액과 동일한 양으로 섞고 2분간 회전 교반기(orbital shaker)에서 반응시켰다. 실온에서 10분간 반응시킨 후 루미노미터(luminometer; GloMax®, Promega)를 사용하여 발광 신호를 측정하였다.
2. MTT(tetrazolium) 분석
본 발명에 따른 AQTGTGKT 아날로그 화합물을 암 세포주에 처리한 후 MTT 분석을 통해 세포의 증식 정도를 측정하였다. 구체적으로, 96-well 플레이트에 각 well 당 5 × 10
3/100 μl 세포를 분주하고, 24시간 동안 배양한 후 본 발명에 따른 AQTGTGKT 아날로그 7종을 각각 도입하였다. 72시간 경과 후 CellTiter-96®(Promega Co., 미국) 시약을 각 well 당 10 μl씩 첨가하고 5% CO
2, 37℃에서 반응시켰다. 3시간 경과 후 분광광도계(spectrophotometer; SPECTROstar
Nano, BMG)를 사용하여 490nm에서 흡광도를 측정하였다.
3. 폐암 동물모델
H1975 세포를 4×10
6 cells /mouse의 농도로 150 ㎕씩 마우스의 옆구리에 피하주사로 1회 접종하였다. 접종 완료 후 형성된 tumor mass의 volume이 70 내지 130 ㎣에 도달한 것을 확인 한 후 무작위 군분리를 실시하였다. 시험물질은 3일 간격으로 5회, 2일 간격으로 5회 미정맥투여 하였다.
H820 세포를 5×10
6 cells /mouse의 농도로 matrigel 1:1로 200 ㎕씩 마우스의 옆구리에 피하주사로 1회 접종하였다. 접종 완료 후 형성된 tumor mass의 volume이 70 내지 130 ㎣에 도달한 것을 확인 한 후 무작위 군분리를 실시하였다. 시험물질은 매일 14회 미정맥투여 하였다.
실시예 1: AQTGTGKT 아날로그(analog)의 제조
1.1. 반응 일반
모든 반응은 달리 언급되지 않는 한 추가 반응 없이 상업적으로 판매되는 물질 및 시약을 사용하여 수행하였다. 반응들은 실리카겔 플레이트(Keiselgel 60 F254, Merck) 및/또는 초고성능 액체 크로마토그래피(UPLC) 상의 박막 크로마토그래피(TLC)에 의해 모니터링 하였다. TLC 플레이트 상의 반점의 가시화는 UV 광에 의해 그리고 과망간산 칼륨 및/또는 닌하이드린에서 TLC 플레이트를 염색하고 히트건(heat gun)으로 탄화시킴으로써 달성되었다. 모든 생성물은
1H NMR 및/또는 UPLC-MS를 사용하여 특정하였다.
1.2. Boc/OBn-TG의 합성
먼저 작용기가 벤질로 보호된 TG를 하기의 반응식 1에 따라 합성하였다. 이하 각 반응식에서 화합물 하기에 병기한 아라비아 숫자(n)에 따라 화합물 n으로 지칭하기로 한다.
[반응식 1]
구체적으로, BocThr(OBn)OH (화합물 1; 25.0 g, 80.8 mmol, 1.0 당량) 및 NOSu (9.77 g, 84.8 mmol, 1.05 당량)를 다이클로로메탄 (150 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 불활성 대기하에 두었다. 그 후, 상기 혼합물에 1-(3-다이메틸아미노프로필)-3-에틸카보다이이미드 하이드로클로라이드 (16.3 g, 84.8 mmol, 1.05 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고 20시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 NH
4Cl(포화 수성)로 세척하고 상을 분리하였다. 유기층을 MgSO
4상에서 건조시키고 감압하에 농축하여 생성물로서 담황색 오일 (35.7 g, >100% 수율, 정량 수율을 가정)의 화합물 2를 수득하였다.
상기 화합물 2 BocThr(OBn)OSu (32.8 g, 80.8 mmol, 1.0 당량)를 1,4-다이옥세인 (200 mL)에 용해시키고, 증류수 (100 mL) 중의 글라이신 나트륨 염 수화물 용액을 한번에 첨가하였다. 실온에서 6시간 동안 교반한 후, 혼합물을 에틸 아세테이트 및 시트르산(포화 수성)으로 분획하였다. 유기층을 MgSO
4 상에서 건조시키고, 여과한 후 감압하에서 농축하였다. 조 물질을 물 (0.1% 포름산) 용리액 중 30-70% 아세토 나이트릴 (0.1% 포름산)으로 C18 (400 g) 컬럼에서 정제하였다. 원하는 분획을 합하고, 에틸 아세테이트 및 NaHCO
3(포화 수성)으로 분획하였다. 유기층을 MgSO
4 상에서 건조시키고, 여과한 후 감압하에 생성물로서 담황색 검 (21.9 g, 74% 수율)의 화합물 3을 수득하였다.
1.3. CBz/OBn/CO
2
Bn-KT의 합성
OH 작용기가 벤질로 보호된 KT를 하기의 반응식 2에 따라 합성하였다.
[반응식 2]
구체적으로, BocLys(CBz)OH (화합물 4; 27.0 g, 70.9 mmol, 1.0 당량) 및 NOSu (9.80 g, 85.1 mmol, 1.2 당량)를 다이클로로메탄 (128 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 불활성 대기하에 두었다. 그 후, 상기 혼합물에 1-(3-다이메틸아미노프로필)-3-에틸 카보다이이미드 하이드로 클로라이드 (16.3 g, 85.1 mmol, 1.05 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고 20시간 동안 교반하였다. 이이서 혼합물을 NH
4Cl (포화 수성)로 세척하고 상을 분리하였다. 유기층을 MgSO
4 상에서 건조시키고 감압하에 농축하여 생성물로서 옅은 황색 오일 (36.7 g, >100% 수율, 정량 수율로 가정)의 화합물 5를 수득하였다.
이어서, 상기 화합물 5 (BocLys(Cbz)OSu; 36.7 g, 70.9 mmol, 1.0 당량) 및 Thr(OBn)OBn.HCl (25.0 g, 74.4 mmol, 1.05 당량)을 실온에서 1,4-다이옥세인 (477 mL)에 용해시켰다. 상기 용액에 증류수 (326 mL) 중 NaHCO3 (6.85 g, 81.5 mmol, 1.15 당량)의 용액을 첨가하였다. 이 후 생성된 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고 10% 시트르산 (수성) 및 염수로 세척하였다. 유기층을 Na
2SO
4 상에서 건조시키고, 여과한 후 감압하에서 농축하여 생성물로서 황색의 유성 고체 55.9 g (>100% 수율, 정량적 수율로 가정)의 화합물 6을 수득하였다.
마지막으로, 상기 화합물 6 (BocLys(Cbz)Thr(OBn)OBn; 55.9 g, 70.9 mmol, 1.00 당량)을 1,4-다이옥세인 (360 mL)에 용해시키고 1,4-다이옥세인 (177 mL) 중 4N HCl을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 그 후 NaHCO
3의 포화 수용액을 pH 값이 8이 될 때까지 첨가하였다. 상기 용액을 에틸 아세테이트로 추출하고, 생성된 유기 용액을 Na
2SO
4 상에서 건조시킨 후 여과한 다음 감압하에서 농축하여 생성물로서 황색 유성 고체(38.7 g, 97% 수율)의 화합물 7을 수득하였다.
1.4. CBz/OBn/OBn/CO
2
Bn-TGKT의 합성
상기 1.2. 및 1.3.에서 합성한 TG와 KT를 하기의 반응식 3에 따라 결합하여 TGKT를 합성하였다.
[반응식 3]
보다 구체적으로, 다이클로로메탄 (50 mL) 중 BocThr(OBn)GlyOH(화합물 3; 5.61 g, 15.3 mmol, 1.00 당량) 및 화합물 8(Lys(Cbz)Thr(OBn)OBn; 10.0 g, 15.3 mmol, 1.0 당량) 용액에, N,N-다이아이소프로필에틸아민 (5.90 mL, 33.7 mmol, 2.2 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 불활성 대기하에 교반하고 HATU (7.00 g, 18.4 mmol, 1.20 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음, NH
4Cl (포화 수성)으로 세척하고, 이어서 NaHCO
3 (포화 수성)로 세척하였다. 유기층을 Na
2SO
4 상에서 건조시키고, 여과한 후 감압하에 농축하여 생성물로서 옅은 주황색 오일성 고체 (25.0 g, >100% 수율, 정량 수율로 가정)의 화합물 9를 수득하였다.
상기 수득한 BocThr(OBn)GlyLys(Cbz)Thr(OBn)OBn (화합물 9; 이전 단계로부터 취한 13.9 g, 15.3 mmol, 1.0 당량)를 질소하에 실온에서 1,4-다이옥세인 (150 mL)에 용해시켰다. 이 용액에 1,4-다이옥세인 (20 mL) 중의 4N HCl을 첨가하였다. 상기 혼합물은 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압하에서 농축하고 물 (0.1% 포름산) 용리액 중 20% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산)을 사용하여 C18 (400 g) 컬럼에서 정제하였다. 원하는 분획을 합하고 동결 건조시켰다. 생성된 분말은 NaHCO
3 (포화 수성) 및 다이클로로메탄에 용해시키고 15분 동안 교반하였다. 층을 분리시키고 유기층을 Na
2SO
4 상에서 건조시킨 후 여과한 다음 감압하에 농축시켜 생성물로서 무색 검 (10.9 g, 88% 수율)의 화합물 10을 수득하였다.
1.5. CBz/OBn/OBn/OBn/CO
2
Bn-TGTGKT의 합성
상기 1.2. 및 1.4.에서 합성한 TG(화합물 3)와 TGKT(화합물 10)를 하기의 반응식 4에 따라 결합하여 벤질로 보호된 TGTGKT를 합성하였다.
[반응식 4]
보다 구체적으로, 다이클로로메탄 (100mL) 중의 BocThr(OBn)GlyOH (화합물 3; 5.10 g, 14.0 mmol, 1.05 당량) 및 BocThr(OBn)GlyLys(Cbz)Thr(OBn) OBn(화합물 10; 10.8 g, 13.3 mmol, 1.0 당량) 용액에
N,N-다이아이소프로필에틸 아민 (5.10 mL, 29.3 mmol, 2.2 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 불활성 대기하에 교반하고 HATU (5.60 g, 14.7 mmol, 1.1 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반하고, NH
4Cl(포화 수성) 및 NaHCO
3(포화 수성)로 세척하였다. 유기층을 감압하에서 농축하여 생성물로서 담황색 검 (21.4 g, >100% 수율, 정량 수율을 가정)의 화합물 11을 수득하였다.
이어서, 상기 수득한 화합물 11 (BocThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz)Thr (OBn)OBn; 이전 단계에서 취한 15.4g, 13.3mmol, 1.00 당량)을 질소하의 실온에서 1,4-다이옥세인 (150 mL)에 용해시켰다. 이 용액에 1,4-다이옥세인 (50 mL) 중 4N HCl을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압하에서 농축하고 물 (0.1% 포름산) 용리액 중 20% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산)을 사용하여 C18 (120 g) 컬럼에서 정제하였다. 원하는 분획을 합하고, 절반의 부피로 농축한 후 NaHCO
3 (포화 수성) 및 에틸 아세테이트로 분획하였다. 층을 분리하고 유기층을 Na
2SO
4 상에서 건조시킨 다음, 여과하고 감압하에 농축하여 생성물로서 회백색 고체 (14.6 g, >100% 수율, 정량 수율을 가정)의 화합물 12를 수득하였다.
1.6. CBz/OBn/OBn/OBn/CO
2
Bn-QTGTGKT의 합성
상기 1.5.에서 합성한 화합물 12(TGTGKT)에 하기 반응식 5에 따라 Q를 추가로 결합하여 화합물 14(QTGTGKT)를 합성하였다.
[반응식 5]
보다 구체적으로, 에틸 아세테이트 (150 mL) 및
N,N-다이메틸포름아마이드 (25 mL) 중 Thr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz)Thr(OBn)OBn (화합물 12; 12.7 g, 12.0 mmol, 1.0 당량) 및 BocGlnOH (3.25 g, 13.2 mmol, 1.1 당량)의 용액에 N,N-다이아이소 프로필에틸아민 (4.60 mL, 26.4 mmol, 2.2 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 불활성 대기하에 교반하고 HATU (5.47 g, 14.4 mmol, 1.20 당량)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반한 다음, NH
4Cl (포화 수성)로 세척하였다. 유기층을 다이클로로메탄으로 추가 추출하였다. 이어서 유기층을 합하고 감압하에 농축시켰다. 조 물질을 물 (0.1% 포름산) 중의 20-100% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산) 구배를 사용하여 400 g C18 컬럼으로 정제하였다. 원하는 분획을 합한 후, 에틸 아세테이트 및 NaHCO
3 (포화 수성) 용액으로 분획하였다. 유기층을 농축시키고, 동결 건조 공정에 의해 잔류수를 제거하였다. 합한 분획으로 총 12.9 g (89% 총 수율)의 화합물 13을 수득하였다.
상기 수득한 화합물 13 (BocGlnThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz)Thr(OBn) OBn; 7.00 g, 5.40 mmol, 1.00 당량)을 질소하에 실온에서 1,4-다이옥세인 (150 mL)에 용해시켰다. 이 용액에 1,4-다이옥세인 (43.5 mL) 중 4N HCl을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압하에서 농축하고 물/ 아세토나이트릴 (2/1) 용액을 사용하여 동결 건조시켰다. 최종적으로 담황색 분말 (6.36 g, 96% 수율)의 화합물 14를 분리하였다.
1.7. AQTGTGKT 아날로그의 합성
4-PhPh-AQTGTGKT를 제외한 나머지 6 종의 아날로그는 상기 반응식 5의 최종 생성물인 화합물 14 및 하기 반응식 6의 생성물인 화합물 17n을 하기 반응식 7에 따라 결합시켜 합성하였다.
[반응식 6]
[반응식 7]
상기 반응식 7에 따라 순도 90% 이상의 3-PhPh-AQTGTGKT 2.9 mg, 순도 89%의 4-MeOPh-AQTGTGKT 7.0 mg, 순도 95% 이상의 2-PhPh-AQTGTGKT 22.7 mg, 순도 90% 이상의 Ph-AQTGTGKT 23.2 mg, 및 순도 85%의 Naphthyl-AQTGTGKT 23.2 mg을 최종적으로 수득하였다.
이하, 각각의 아날로그 합성 과정에 대하여 구체적으로 설명한다.
1.7.1. 3-PhPh-AQTGTGKT의 합성
3-PhPh-AQTGTGKT(화합물 19-1)는 하기 반응식 8에 따라 수득한 화합물 17-1을 상기 화합물 14와 반응식 9에 따라 반응시켜 최종 목적 화합물인 3-PhPh-AQTGTGKT를 합성하였다.
[반응식 8]
보다 구체적으로, H-Ala-OBzl.HCl (388 mg, 1.80 mmol, 1.2 당량)을 에틸 아세테이트 (10 mL)에 현탁시키고 N,N-다이아이소프로필에틸아민 (653 μL, 3.75 mmol, 2.5 당량)을 첨가하였다. 실온에서 5분 동안 교반한 후, HATU (855 mg, 2.25 mmol, 1.5 당량) 및 [1,1'-바이페닐]-3-카복실산 (297 mg, 1.50 mmol, 1 당량)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석한 다음 NH
4Cl (포화 수성), NaHCO3 (포화 수성) 및 염수로 세척하였다. 수득한 유기물을 건조시키고 (Na
2SO
4), 여과한 후 감압하에 농축시켰다. 잔류물은 25 g 컬럼에서 헵테인 중의 2-40% 에틸 아세테이트 구배로 정제하여 무색 고체 (493 mg, 91% 수율)의 화합물 16-1 수득하였다.
이어서, 최소량의 물로 적신 10% Pd/C (49 mg)를 메탄올 (30 mL) 중의 화합물 16-1(3-PhPh-AlaOBn; 493 mg, 1.37 mmol) 용액에 첨가하였다. 상기 혼합물을 수소 대기(벌룬)하에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물은 셀라이트 패드를 통해 여과시키고, 메탄올 및 에틸 아세테이트로 세척하였다. 수득한 여과액은 감압하에 농축시켜 무색 거품 (337 mg, 91% 수율)의 화합물 17-1을 수득하고, 이를 하기 반응식 9에 따라 화합물 14와 반응시켰다.
[반응식 9]
보다 구체적으로,
N, N-다이아이소프로필에틸아민 (97.0 μL, 0.556 mmol, 2.2 당량) 및 다이클로로메테인 (20 mL) 중의 GlnThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz) Thr(OBn)OBn (화합물 14; 300 mg, 0.253 mmol, 1 당량) 및 3-PhPh-AlaOH (화합물 17-1; 68.0 mg, 0.253 mmol, 1 당량) 현탁액에 HATU (106 mg, 0.278 mmol, 1.1 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 반응 혼합물을 NaHCO
3 (포화 수성)로 세척하였다. 유기물을 감압하에서 농축하고 잔류물을 물 (0.1% 포름산) 중의 40-100% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산) 구배로 60g C18 컬럼으로 정제하여 동결 건조를 거친 후 무색 고체 (140 mg, 38% 수율)의 화합물 18-1을 수득하였다.
이어서, 10% Pd/C (85.0 mg)를 2M 염산(수성, 0.5 mL) 및 2-프로판올 (10 mL) 중의 3-PhPh-AlaGlnThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz)Thr(OBn)OBn (화합물 18-1; 85.0 mg, 59.1 μmol) 용액에 첨가하였다. 상기 혼합물을 수소 대기(벌룬)하에서 4.5시간 동안 교반한 후, 혼합물을 0.45 ㎛ 시린지 필터를 통해 여과하였다. 수득한 여과액을 감압하에 농축하고, 잔류물을 동결 건조하였다. 그 후 물 (0.1% 포름산) 중의 5-50% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산)을 사용하여 60 g C18 컬럼에서 물질을 정제하고, 동결 건조하여 무색 고체 (2.9 mg, 5% 수율)의 목적 화합물 19-1을 수득하였다.
화합물 19-1(3-PhPh-AQTGTGKT)의
1H NMR 데이터는 다음과 같이 측정되었다:
1H NMR (400 MHz; D2O): δ = 8.01-7.99 (m, 1H), 7.86-7.82 (m, 1H), 7.75-7.66 (m, 3H), 7.55 (t, J 7.7 Hz, 1H), 7.49 (t, J 7.5 Hz, 2H), 7.43-7.38 (m, 1H), 4.48-4.24 (m, 5H), 4.23-4.12 (m, 3H), 4.09 (d, J 3.8 Hz, 1H), 4.00- 3.96 (m, 2H), 3.88 (s, 2H), 2.90 (t, J 7.4Hz, 2H), 2.35 (t, J 7.5Hz, 2H), 2.15-2.06 (m, 1H), 2.03-1.91 (m , 1H), 1.84-1.72 (m, 1H), 1.70-1.52 (m, 3H), 1.45 (d, J 7.2Hz, 3H), 1.40-1.24 (m, 2H), 1.15-1.05 (m, 9H) , 16 exchangeable protons not visible.
1.7.2. 4-MeOPh-AQTGTGKT의 합성
4-MeOPh-AQTGTGKT(화합물 19-2)는 하기 반응식 10에 따라 수득한 화합물 17-2를 상기 화합물 14와 반응식 11에 따라 반응시켜 최종 목적 화합물인 4-MeOPh-AQTGTGKT를 합성하였다.
[반응식 10]
보다 구체적으로, H-Ala-OBzl.HCl (425 mg, 1.97 mmol, 1.2 당량)을 에틸 아세테이트 (10 mL)에 현탁시키고
N,N-다이아이소프로필에틸아민 (715 μL, 4.11 mmol, 2.5 당량)을 첨가하였다. 실온에서 5분 동안 교반한 후, HATU (937mg, 2.46mmol, 1.5 당량) 및 4-메톡시벤조산 (250mg, 1.64mmol, 1 당량)을 첨가하고 상기 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석한 다음 NH
4Cl (포화 수성), NaHCO
3 (포화 수성) 및 염수로 세척하였다. 유기물을 건조시키고 (Na
2SO
4), 여과한 후 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 헵테인 중의 15-50% 에틸 아세테이트 구배로 25 g 컬럼 상에서 정제하여 무색 고체 (360 mg, 70% 수율)의 화합물 16-2를 수득하였다.
이어서, 최소량의 물로 적신 10% Pd/C (18 mg)를 메탄올 (15 mL) 중의 4-OMePh-AlaOBn (화합물 16-2; 180 mg, 0.574 mmol) 용액에 첨가하였다. 혼합물을 수소 대기(벌룬)하에서 110시간 동안 교반하였다. 그 후 상기 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 수득한 여과액은 감압하에 농축시켜 무색 오일 (128 mg, 100% 수율)의 화합물 17-2를 수득하고, 이를 하기 반응식 11에 따라 화합물 14와 반응시켰다.
[반응식 11]
보다 구체적으로,
N, N-다이아이소프로필에틸아민 (63.0 μL, 0.360 mmol, 2.2 당량) 및 다이클로로메테인 (20 mL) 중의 GlnThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys (Cbz)Thr(OBn)OBn (화합물 14; 200 mg, 0.164 mmol, 1 당량) 및 4-OMePh-AlaOH (화합물 17-2; 36.6 mg, 0.164 mmol, 1 당량)의 현탁액에 HATU (74.5 mg, 0.196 mmol, 1.2 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 64시간 동안 교반하고, 상기 반응 혼합물을 메탄올로 희석한 다음 NH
4Cl (포화 수성), NaHCO
3 (포화 수성) 및 물로 세척하였다. 유기물을 감압하에서 농축하고 잔류물을 물 (0.1% 포름산) 중의 50-95% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산) 구배로 60g C18 컬럼에서 정제하여 동결 건조를 거친 후 무색 고체 (113 mg, 50% 수율)의 화합물 18-2를 수득하였다.
이어서, 10% Pd/C (100 mg)를 2M 염산(수성, 1.0 mL) 및 2-프로판올 (20 mL) 중의 4-OMePh-AlaGlnThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz)Thr(OBn)OBn (화합물 18-2; 108 mg, 77.6 μmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에서 18시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 0.45 ㎛ 시린지 필터를 통해 여과하였다. 수득한 여과액을 감압하에 농축시키고, 잔류물을 물에 용해시킨 다음 동결 건조시켰다. 상기 건조된 물질을 물 (0.1% 포름산) 중의 5-30% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산) 구배를 사용하여 30g C18 컬럼에서 정제하고, 동결 건조하여 무색 고체 (7.0 mg, 10% 수율)의 화합물 19-2를 수득하였다.
화합물 19-2(4-MeOPh-AQTGTGKT)의
1H NMR 데이터는 다음과 같이 측정되었다:
1H NMR (400 MHz; D2O): δ = 7.76-7.71 (m, 2H), 7.02-6.98 (m, 2H), 4.42-4.28 (m, 5H), 4.24-4.13 (m, 3H), 4.09 (d, J 3.9 Hz, 1H), 4.01-3.96 (m, 2H), 3.89 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.91 (t, J 7.4 Hz, 2H), 2.34 (t, J 7.6 Hz, 2H), 2.14-2.06 (m, 1H), 2.00-1.91 (m, 1H), 1.85-1.75 (m, 1H), 1.71-1.54 (m, 3H), 1.42 (d, J 7.2 Hz, 3H), 1.40-1.25 (m, 3H), 1.16-1.07 (m, 8H), 16 exchangeable protons not visible.
1.7.3. 2-PhPh-AQTGTGKT의 합성
2-PhPh-AQTGTGKT(화합물 19-3)는 하기 반응식 12에 따라 수득한 화합물 17-3을 상기 화합물 14와 반응식 13에 따라 반응시켜 최종 목적 화합물인 2-PhPh-AQTGTGKT를 합성하였다.
[반응식 12]
보다 구체적으로, H-Ala-OBzl.HCl (388 mg, 1.80 mmol, 1.2 당량)을 에틸 아세테이트 (10 mL)에 현탁시키고
N,N-다이아이소프로필에틸아민 (653 μL, 3.75 mmol, 2.5 당량)을 첨가하였다. 실온에서 5분 동안 교반한 후, HATU (855 mg, 2.25 mmol, 1.5 당량) 및 [1,1'-바이페닐]-2-카복실산 (297 mg, 1.50 mmol, 1 당량)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석한 다음 NH
4Cl (포화 수성), NaHCO
3 (포화 수성) 및 염수로 세척 하였다. 수득한 유기물을 건조시키고 (Na
2SO
4), 여과한 후 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 헵테인 중의 2-40% 에틸 아세테이트 구배로 25 g 컬럼에서 정제하여 무색 오일 (416 mg, 77% 수율)의 화합물 16-3을 수득하였다.
이어서, 최소량의 물로 적신 10% Pd/C (42 mg)를 메탄올 (20 mL) 중 2-PhPh-AlaOBn (화합물 16-3; 416 mg, 1.16 mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 수소 대기(벌룬)하에서 18시간 동안 교반하였다. 그 후 상기 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 수득한 여과액은 감압하에 농축시켜 무색 오일 (308 mg, 99% 수율)의 화합물 17-3을 수득하고, 이를 하기 반응식 13에 따라 화합물 14와 반응시켰다.
[반응식 13]
보다 구체적으로,
N,N-다이아이소프로필에틸아민 (63.0 μL, 0.360 mmol, 2.2 당량) 및 다이클로로메테인 (20 mL) 중의 GlnThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz) Thr(OBn)OBn (화합물 14; 200 mg, 0.164 mmol, 1 당량) 및 2-PhPh-AlaOH (화합물 17-3; 44.2 mg, 0.164 mmol, 1 당량)의 현탁액에 HATU (74.5 mg, 0.196 mmol, 1.2 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 64시간 동안 교반하고, 상기 반응 혼합물을 메탄올로 희석한 다음 NH
4Cl (포화 수성), NaHCO
3 (포화 수성) 및 물로 세척하였다. 유기층을 감압하에 농축하고 잔류물을 물 (0.1% 포름산) 중의 50-95% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산) 구배로 60 g C18 컬럼에서 정제하여 동결 건조를 거친 후 무색 고체 (115 mg, 49% 수율)의 화합물 18-3을 수득하였다.
이어서, 10% Pd/C (100 mg)를 2M 염산(수성, 1.0 mL) 및 2-프로판올 (20 mL) 중의 2-PhPh-AlaGlnThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz)Thr(OBn)OBn (화합물 18-3; 110 mg, 76.5 μmol) 용액에 첨가하였다. 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에서 18시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 0.45 ㎛ 시린지 필터를 통해 여과하였다. 수득한 여과액을 감압하에 농축시키고, 잔류물을 물에 용해시킨 다음 동결 건조하였다. 상기 건조된 물질을 물 (0.1% 포름산) 중의 5-50% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산) 구배로 30 g C18 컬럼에서 정제하고, 동결 건조하여 무색 고체 (22.7 mg, 31% 수율)의 화합물 19-3을 수득하였다.
화합물 19-3(2-PhPh-AQTGTGKT)의
1H NMR 데이터는 다음과 같이 측정되었다:
1H NMR (400 MHz; D2O): δ = 7.56-7.48 (m, 2H), 7.44-7.33 (m, 7H), 4.38-4.26 (m, 4H), 4.25-4.13 (m, 4H), 4.08 (d, J 3.9 Hz, 1H), 4.00-3.96 (m, 2H), 3.89 (s, 2H), 2.91 (t, J 7.5 Hz, 2H), 2.25 (t, J 7.5 Hz, 2H), 2.09-2.01 (m, 1H), 1.93-1.77 (m, 2H), 1.72-1.56 (m, 3H), 1.41-1.29 (m, 2H), 1.18 (d, J 7.2 Hz, 3H), 1.12 (d, J 5.6 Hz, 6H), 1.08 (d, J 6.4 Hz, 3H), 16 exchangeable protons not visible.
1.7.4. Ph-AQTGTGKT의 합성
Ph-AQTGTGKT(화합물 19-4)는 하기 반응식 14에 따라 수득한 화합물 17-4을 상기 화합물 14와 반응식 15에 따라 반응시켜 최종 목적 화합물인 Ph-AQTGTGKT를 합성하였다.
[반응식 14]
보다 구체적으로, H-Ala-OBzl.HCl (388 mg, 1.80 mmol, 1.2 당량)을 에틸 아세테이트 (10 mL)에 현탁시키고
N,N-다이아이소프로필에틸아민 (653 μL, 3.75 mmol, 2.5 당량)을 첨가하였다. 실온에서 5 분 동안 교반한 후, HATU (855 mg, 2.25 mmol, 1.5 당량) 및 벤조산 (183 mg, 1.50 mmol, 1 당량)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석한 다음 NH
4Cl (포화 수성), NaHCO
3 (포화 수성) 및 염수로 세척하였다. 수득한 유기물을 건조시키고 (Na
2SO
4), 여과한 후 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 헵테인 중의 2-50% 에틸 아세테이트 구배로 25 g 컬럼에서 정제하여 무색 오일 (375 mg, 88% 수율)의 화합물 16-4를 수득하였다.
이어서, 최소량의 물로 적신 10% Pd/C (38 mg)를 메탄올 (30 mL) 중 Ph-Ala-OBn (화합물 16-4; 375 mg, 1.32 mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 수소 대기(벌룬)하에서 4시간 동안 교반하였다. 그 후 상기 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 수득한 여과액은 감압하에 농축시켜 무색 유리 (glass; 254 mg, 99% 수율)의 화합물 17-4를 수득하고, 이를 하기 반응식 15에 따라 화합물 14와 반응시켰다.
[반응식 15]
보다 구체적으로,
N,N-다이아이소프로필에틸아민 (97.0 μL, 0.556 mmol, 2.2 당량) 및 다이클로로메탄 (20 mL) 중의 GlnThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz)Thr (OBn)OBn (화합물 14; 300 mg, 0.253 mmol, 1 당량) 및 Ph-Ala-OH (화합물 17-4; 49.0 mg, 0.253 mmol, 1)의 현탁액에 HATU (106 mg, 0.278 mmol, 1.1 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 상기 반응 혼합물을 NaHCO
3 (포화 수성)로 세척하였다. 유기물을 감압하에 농축하고 수득한 잔류물을 물 (0.1% 포름산) 중의 40-100% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산) 구배로 60 g C18 컬럼에서 정제하여 동결 건조를 거친 후 무색 고체 (200 mg, 58%)의 화합물 18-4를 수득하였다.
이어서, 10% Pd/C (110 mg)를 2M 염산(수성, 1.0 mL) 및 2-프로판올 (20 mL) 중의 Ph-AlaGlnThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz)Thr(OBn)OBn (화합물 18-4; 110 mg, 80.8 μmol) 용액에 첨가하였다. 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에서 18시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 0.45 ㎛ 시린지 필터를 통해 여과하였다. 수득한 여과액을 감압하에 농축시키고, 잔류물을 물에 용해시킨 다음 동결 건조시켰다. 상기 건조된 물질을 물 (0.1% 포름산) 중의 5-50% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산) 구배를 사용하여 60 g C18 컬럼에서 정제하고, 동결 건조하여 무색 고체 (23.2 mg, 33% 수율)의 화합물 19-4를 수득하였다.
화합물 19-4(Ph-AQTGTGKT)의
1H NMR 데이터는 다음과 같이 측정되었다:
1H NMR (400 MHz; D2O): δ = 7.74-7.70 (m, 2H), 7.58-7.53 (m, 1H), 7.48-7.43 (m, 2H), 4.45-4.34 (m, 3H), 4.32-4.27 (m, 2H), 4.25-4.14 (m, 3H), 4.11 (d, J 3.8 Hz, 1H), 4.00-3.96 (m, 2H), 3.89 (s, 2H), 2.91 (t, J 7.4 Hz, 2H), 2.34 (t, J 7.6 Hz, 2H), 2.14-2.06 (m, 1H), 2.01-1.91 (m, 1H), 1.85-1.76 (m, 1H), 1.71-1.56 (m, 3H), 1.43 (d, J 7.3 Hz, 3H), 1.40-1.30 (m, 2H), 1.16-1.07 (m, 9H), 16 exchangeable protons not visible.
1.7.5. Naphthyl-AQTGTGKT의 합성
Naphthyl-AQTGTGKT(화합물 19-5)는 하기 반응식 16에 따라 수득한 화합물 17-5를 상기 화합물 14와 반응식 17에 따라 반응시켜 최종 목적 화합물인 Naphthyl-AQTGTGKT를 합성하였다.
[반응식 16]
보다 구체적으로, H-Ala-OBzl.HCl (388 mg, 1.80 mmol, 1.2 당량)을 에틸 아세테이트 (10 mL)에 현탁시키고
N,N-다이아이소프로필에틸아민 (653 μL, 3.75 mmol, 2.5 당량)을 첨가하였다. 실온에서 5분 동안 교반한 후, HATU (855 mg, 2.25 mmol, 1.5 당량) 및 2- 나프토산 (258 mg, 1.50 mmol, 1 당량)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석한 다음 NH
4Cl (포화 수성), NaHCO
3 (포화 수성) 및 염수로 세척하였다. 수득한 유기물을 건조시키고 (Na
2SO
4), 여과한 후 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 헵테인 중의 2-40% 에틸 아세테이트 구배로 25 g 컬럼에서 정제하여 무색 고체 (385 mg, 77% 수율)의 화합물 16-5를 수득하였다.
이어서, 최소량의 물로 적신 10% Pd/C (39 mg)를 메탄올 (20 mL) 중 2-Naphthyl-AlaOBn (화합물 16-5; 385 mg, 1.15 mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에서 4시간 동안 교반하였다. 그 후 상기 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고 메탄올로 세척하였다. 수득한 여과액은 감압하에 농축시켜 무색 고체 (266 mg, 95% 수율)의 화합물 17-5를 수득하고, 이를 하기 반응식 17에 따라 화합물 14와 반응시켰다.
[반응식 17]
보다 구체적으로,
N,N-다이아이소프로필에틸아민 (97.0 μL, 0.556 mmol, 2.2 당량) 및 다이클로로메테인 (20 mL) 중의 GlnThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz) Thr(OBn)OBn (화합물 14; 300 mg, 0.253 mmol, 1 당량) 및 2-Naphthyl-Ala-OH (화합물 17-5; 61.0 mg, 0.253 mmol, 1 당량) 현탁액에 HATU (106 mg, 0.278 mmol, 1.1 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 (포화 수성) NaHCO
3로 세척하였다. 수득한 유기층을 감압하에 농축하고 잔류물을 물 (0.1% 포름산) 중의 40-100% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산) 구배로 60 g C18 컬럼에서 정제하여 동결 건조를 거친 후 무색 고체 (230 mg, 64% 수율)의 화합물 18-5를 수득하였다.
이어서, 10% Pd/C (101 mg)를 2M 염산(수성, 1.0 mL) 및 2-프로판올 (20 mL) 중의 2-Naphthyl-AlaGlnThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz)Thr(OBn)OBn (화합물 18-5; 101 mg, 71.5 μmol) 용액에 첨가하였다. 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에서 3시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 0.45 ㎛ 시린지 필터를 통해 여과하였다. 수득한 여과액을 감압하에 농축시키고, 잔류물을 물에 용해시킨 다음 동결 건조시켰다. 상기 건조된 물질을 물 (0.1% 포름산) 중의 5-40% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산) 구배로 30 g C18 컬럼상에서 정제하고, 동결 건조하여 무색 고체 (23.2 mg, 33% 수율)의 화합물 19-5를 수득하였다.
화합물 19-5(Naphthyl-AQTGTGKT)의
1H NMR 데이터는 다음과 같이 측정되었다:
1H NMR (400 MHz; D2O): δ = 8.32 (s, 1H), 8.01-7.90 (m, 3H), 7.79-7.73 (m, 1H), 7.64-7.55 (m, 2H), 4.51-3.70 (m, 13H), 2.96-2.81 (m, 2H), 2.39-2.30 (m, 2H), 2.18-2.04 (m, 1H), 2.03-1.93 (m, 1H), 1.85-1.72 (m, 1H), 1.71-1.53 (m, 3H), 1.50-1.43 (m, 3H), 1.39-1.24 (m, 2H), 1.19-1.04 (m, 9H), 16 exchangeable protons not visible.
1.8. Ac-AQTGTGKT의 합성
Ac-AQTGTGKT(화합물 19-6)는 하기 반응식 18에 따라 수행되어 최종 목적 화합물인 Ac-AQTGTGKT를 합성하였다.
[반응식 18]
보다 구체적으로,
N, N-다이아이소프로필에틸아민 (94.0 μL, 0.540 mmol, 2.2 당량) 및 다이클로로메테인 (30 mL) 중의 GlnThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz) Thr(OBn)OBn (화합물 14; 300 mg, 0.245 mmol, 1 당량) 및 Ac-Ala-OH (32.1 mg, 0.245 mmol, 1 당량)의 현탁액에 HATU (112 mg, 0.294 mmol, 1.2 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하고, 상기 반응 혼합물을 (포화 수성) NH
4Cl, NaHCO
3 및 물로 세척하였다. 유기층을 감압하에 농축하고, 잔류물을 물 (0.1% 포름산) 중의 50-95% 아세토나이트릴 (0.1% 포름산) 구배에서 60 g C18 컬럼으로 정제하였다. 원하는 분획을 합하고 동결 건조하여 무색 고체 (104 mg, 33% 수율)의 화합물 18-6을 수득하였다.
이어서, 10% Pd/C (10 mg)를 2M 염산(수성, 0.19 mL) 및 2-프로판올 (5 mL) 중의 Ac-AlaGlnThr(OBn)GlyThr(OBn)GlyLys(Cbz)Thr(OBn)OBn (화합물 18-6; 33 mg, 25 μmol) 용액에 첨가하였다. 혼합물을 수소 대기(벌룬) 하에서 14시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 0.45 ㎛ 시린지 필터를 통해 여과하였다. 수득한 여과액을 감압하에 농축시키고, 물에 용해시킨 다음 동결 건조하였다. 상기 건조된 물질을 메탄올 중 0.5M 암모니아로 용리시키면서 500 mg SCX-2 카트리지에서 정제하였다. 원하는 분획을 합하고 감압하에 농축한 다음 동결 건조하여 무색 고체 (7.6 mg, 37% 수율)의 화합물 19-6을 수득하였다.
화합물 19-6(Ac-AQTGTGKT)의
1H NMR 데이터는 다음과 같이 측정되었다:
1H NMR (400 MHz; D2O): δ = 4.40-4.33 (m, 2H), 4.32-4.27 (m, 2H), 4.24-4.12 (m, 4H), 4.08 (d, J 4.0 Hz, 1H), 4.03-3.88 (m, 4H), 2.92 (t, J 7.2 Hz, 2H), 2.32 (t, J 7.8 Hz, 2H), 2.15-2.02 (m, 1H), 1.99-1.88 (m, 4H), 1.86-1.76 (m, 1H), 1.74-1.55 (m, 3H), 1.45-1.31 (m, 2H), 1.29 (t, J 7.4 Hz, 2H), 1.20-1.06 (m, 10H), 16 exchangeable protons not visible.
1.9. 4-PhPh-AQTGTGKT의 합성
1.9.1. QTGTGKT 중간체의 합성
4-PhPh-AQTGTGKT 합성을 위한 중간체 QTGTGKT는 하기 반응식 19 내지 반응식 23에 따라 합성하였다:
[반응식 19]
[반응식 20]
[반응식 21]
[반응식 22]
[반응식 23]
상기 반응식 19 내지 반응식 23은 상기 반응식 1 내지 반응식 5와 벤질 보호기 유무 여부를 제외하고는 거의 유사한 과정으로서, 중복되는 설명은 생략하기로 한다.
1.9.2. 4-PhPh-AQTGTGKT의 합성
상기 반응식 23에서 수득한 화합물 31은 하기 반응식 24에서 합성된 알라닌 유도체와 반응식 25에 따라 결합되어 최종 생성물 4-PhPh-AQTGTGKT를 수득하였다.
[반응식 24]
[반응식 25]
상기 반응식 24 및 반응식 25 또한 전술한 반응식과 거의 유사한 과정에 의해 진행되었는바 중복되는 설명은 생략하기로 한다. 최종적으로 무색 고체 (583 mg, 68% 수율)의 화합물 36을 수득하였다.
화합물 36(4-PhPh-AQTGTGKT)의
1H NMR 데이터는 다음과 같이 측정되었다:
1H NMR (400 MHz; D2O): δ = 7.85 (d, J 8.8 Hz, 2H), 7.77 (d, J 8.8 Hz, 2H), 7.70 (d, J 7.2 Hz, 2H), 7.49 (t, J 7.2 Hz, 2H), 7.42 (t, J 7.1 Hz, 1H), 4.34-4.04 (m, 6H), 4.07 (d, J 3.6 Hz, 1H), 3.93 (d, J 2.0 Hz, 2H), 2.82 (t, J 7.0 Hz, 2H), 1.82-1.67 (m, 1H), 1.66-1.55 (m, 1H), 1.54-1.44 (m, 2H), 1.37-1.22 (m, 2H), 1.18 (d, J 6.4 Hz, 3H), 1.06 (t, J 6.5 Hz, 3H), 10 exchangeable protons not visible.
1.10. 화합물 확인
상기 제법에 의해 수득한 AQTGTGKT 아날로그 7종은
1H NMR 및 UPLC-MS(ultraperformance liquid chromatography-mass spectrometry) 기법으로 분석하여 화학 구조를 확인하였다. 분석 결과는 도 1 내지 도 7에 나타내었으며, 화합물은 표 1에 정리하였다.
| 이름 | 화학식 |
| AQTGTGKT |
 |
| 4-PhPh-AQTGTGKT |
 |
| Ac-AQTGTGKT |
 |
| 3-PhPh-AQTGTGKT |
 |
| 4-MeOPh-AQTGTGKT |
 |
| 2-PhPh-AQTGTGKT |
 |
| Ph-AQTGTGKT |
 |
| Naphthyl-AQTGTGKT |
 |
실시예 2: AQTGTGKT 아날로그의 항암 효과 확인
2.1. 폐암 세포 활성 억제 효과
상기 실험 방법에서 기술한 CTG 분석 방법에 따라 폐암 세포주 H1299에 7종의 아미드화(amidation) AQTGTGKT 아날로그를 500 μM 농도로 72시간 동안 처리하거나, 폐암 세포주 H820에 AQTGTGKT 아날로그를 각각 100 μM 농도로 72시간 동안 처리하거나, 또는 H1975에 AQTGTGKT 아날로그를 각각 10 μM 농도로 72시간 동안 처리한 후 아날로그의 세포 독성을 비교하였다.
그 결과 도 8에 나타난 바와 같이 4-PhPh-AQTGTGKT를 처리한 경우에는 대조군(control)과 비교하여 세포의 활성이 약 21% 감소하였으며, Ac-AQTGTGKT는 15%, 3-PhPh-AQTGTGKT는 25%, 4-MeOPh-AQTGTGKT는 23%, 2-PhPh-AQTGTGKT는 30%, Ph-AQTGTGKT는 28%, Naphthyl-AQTGTGKT는 24%의 세포활성 억제 효과를 보였다.
H820 세포주의 경우, 도 9에 나타난 바와 같이 4-PhPh-AQTGTGKT를 처리한 경우에는 대조군(control)과 비교하여 세포의 활성이 약 20% 감소하였으며, Ac-AQTGTGKT는 22%, 3-PhPh-AQTGTGKT는 34%, 4-MeOPh-AQTGTGKT는 32%, 2-PhPh-AQTGTGKT는 123%, Ph-AQTGTGKT는 20%, Naphthyl-AQTGTGKT는 24%의 세포활성 억제 효과를 보였다.
또한, H1975 세포주의 경우, 도 10에 나타난 바와 같이 4-PhPh-AQTGTGKT를 처리한 경우에는 대조군(control)과 비교하여 세포의 활성이 약 4% 감소하였으며, Ac-AQTGTGKT는 19%, 3-PhPh-AQTGTGKT는 36%, 4-MeOPh-AQTGTGKT는 8%, 2-PhPh-AQTGTGKT는 7%, Ph-AQTGTGKT는 4%, Naphthyl-AQTGTGKT는 4%의 세포활성 억제 효과를 보였다.
상기와 같은 결과는 상기 아미드화 아날로그가 폐암 세포의 분열을 매우 효과적으로 억제할 수 있음을 보여주는 것이다.
2.2. 유방암 세포의 활성 억제 효과
상기 실험 방법에서 기술한 CTG 분석 방법에 따라 유방암 세포주 MDA-MB-231에 AQTGTGKT 아날로그를 100 μM 농도로 48시간 동안 처리한 후 세포 내의 ATP 양을 측정함으로써 세포의 활성을 비교하였다.
그 결과 도 11에 나타난 바와 같이 4-PhPh-AQTGTGKT를 처리한 경우에는 대조군과 비교하여 세포의 활성이 약 36% 감소하였으며, Ac-AQTGTGKT를 처리한 경우 약 6%의 감소 효과를 보여 유방암 세포의 분열을 억제하는데 탁월한 효과가 있음을 입증하였다.
2.3. 혈액암 세포의 성장 및 증식능 억제 효과
상기 실험 방법에서 기술한 MTT 분석 방법에 따라 혈액암 세포주 Daudi에 AQTGTGKT 아날로그를 10 μM 농도로 72시간 동안 처리하여 세포 독성을 비교하였다.
그 결과 도 12에 나타난 바와 같이, 4-PhPh-AQTGTGKT를 처리한 경우에는 대조군(control)과 비교하여 세포의 활성이 약 17% 감소하였으며, 4-MeOPh-AQTGTGKT는 22%, 2-PhPh-AQTGTGKT는 22%, Ph-AQTGTGKT는 18%, Naphthyl-AQTGTGKT는 19%의 세포활성 억제 효과를 보였다. 상기와 같은 결과는 본 발명에 따른 7종의 AQTGTGKT 아날로그 모두 혈액암 세포에 대한 뛰어난 항암 효과가 있음을 보여주는 것이다.
2.4. 췌장암 세포의 성장 및 증식능 억제 효과
상기 실험 방법에서 기술한 MTT 분석 방법에 따라 췌장암 세포주 BxPC3에 AQTGTGKT 아날로그를 100 μM 농도로 72시간 동안 처리하여 세포 독성을 비교하였다.
그 결과 도 13에 나타난 바와 같이 4-PhPh-AQTGTGKT를 처리한 경우에는 대조군(control)과 비교하여 세포의 활성이 약 10% 감소하였으며, 3-PhPh-AQTGTGKT는 1%, 4-MeOPh-AQTGTGKT는 5%, 2-PhPh-AQTGTGKT 및 Ph-AQTGTGKT는 7%의 세포활성 억제 효과를 보였다. 상기와 같은 결과는 췌장암 세포에 대한 뛰어난 항암 효과가 있음을 보여주는 것이다.
2.5. 대장암 세포의 성장 및 증식능 억제 효과
상기 실험 방법에서 기술한 MTT 분석 방법에 따라 대장암 세포주 HT29에 AQTGTGKT 아날로그를 50 μM 농도로 72시간 동안 처리하여 세포 독성을 비교하였다.
그 결과 도 14에 나타난 바와 같이 4-PhPh-AQTGTGKT를 처리한 경우에는 대조군(control)과 비교하여 세포의 활성이 약 28% 감소하였으며, Ac-AQTGTGKT는 68%, 3-PhPh-AQTGTGKT는 69%, 4-MeOPh-AQTGTGKT는 60%, 2-PhPh-AQTGTGKT는 28%, Ph-AQTGTGKT는 54%, Naphthyl-AQTGTGKT는 68%의 세포활성 억제 효과를 보였다. 상기와 같은 결과는 본 발명에 따른 7종의 AQTGTGKT 아날로그 모두 대장암 세포에 대해 뛰어난 항암 효과가 있음을 보여주는 것이다.
2.6. 폐암 세포를 접종한 동물 모델에서의 종양성장 억제 효과
상기 실험 방법에서 기술한 동물실험 분석 방법에 따라 폐암세포주 H1975 폐암 세포가 이식된 누드마우스에 AQTGTGKT 아날로그를 10 mpk 용량으로 3일 간격으로 5회, 2일 간격으로 5회 총 10회 처리하여 종양의 성장을 비교하였다.
그 결과 도 15에 나타난 바와 같이, H1975 폐암세포주를 이식한 후 3-PhPh-AQTGTGKT를 처리한 경우에는 대조군(PBS)과 비교하여 약 49% 종양 성장의 억제 효과를 보였다.
또한, H820 폐암 세포를 이식한 누드마우스에 AQTGTGKT 아날로그를 10 mpk 용량으로 14일 동안 매일 처리하여 종양의 성장을 비교하였다.
그 결과 도 16에 나타난 바와 같이, 3-PhPh-AQTGTGKT를 처리한 경우에는 대조군(PBS)과 비교하여 종양의 성장이 약 52% 감소하였고, 2-PhPh-AQTGTGKT, Ph-AQTGTGKT, Naphthyl-AQTGTGKT를 처리한 경우에는 대조군(PBS)과 비교하여 종양의 성장이 약 56%, 마지막으로 4-PhPh-AQTGTGKT, Ac-AQTGTGKT, 4-MeOPh-AQTGTGKT를 처리한 경우에는 대조군(PBS)과 비교하여 종양의 성장이 약 39% 감소하여 종양성장의 억제효과를 보였다.
종합적으로, 상기와 같은 결과들은 폐암 세포를 이식한 동물 모델에서 본 발명의 화합물에 뛰어난 항암 효과가 있음을 보여주는 것이다.
실시예 3: AQTGTGKT 아날로그의 혈액 내 안정성 확인
본 발명에 따른 AQTGTGKT 아날로그가 혈액 내에서 몇 분 동안 안정적으로 존재하는지 확인하기 위해 100% 인간 혈액에 10 μM의 각 화합물을 넣어주고 0, 5, 10, 15, 30, 60 및 120분이 경과한 시점에서 혈액 내 잔류량을 측정하였다.
그 결과 도 17 내지 도 23에 나타난 바와 같이, AQTGTGKT의 경우에는 반감기가 1분도 채 되지 않았고, 20분 이내에 혈액 내에서 거의 분해되어 잔류 AQTGTGKT가 거의 검출되지 않는 것이 확인되었다. 이에 반해 본 발명에 따른 7종의 AQTGTGKT 아날로그는 모두 현저하게 향상된 안정성을 보였는데, 특히 4-PhPh-AQTGTGKT, 3-PhPh-AQTGTGKT, 4-MeOPh-AQTGTGKT, 2-PhPh-AQTGTGKT, Ph-AQTGTGKT 및 Naphthyl-AQTGTGKT의 경우에는 47분 내지 105분의 반감기를 나타내었으며, 120분이 경과된 후에도 20 내지 40%가 혈액 내 잔류하여 높은 안정성을 나타내었다. 이러한 결과는 아미드화 아날로그가 더 뛰어난 항암 효과를 나타낼 뿐만 아니라 더욱 향상된 혈액 내 안정성을 나타내어 표적에 도달하기까지 분해되지 않고 안정적으로 존재할 수 있음을 보여주는 결과이다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.
본 발명은 신규한 올리고펩티드 AQTGTGKT의 아날로그 화합물, 이를 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 상기 올리고펩티드 AQTGTGKT의 아날로그가 우수한 항암 효과를 나타내고, 인간의 혈액 내에서 안정적으로 존재함을 확인하였다. 따라서, 본 발명에 따른 약학적 조성물은 올리고펩티드가 가지고 있는 장점으로서 항체에 비해 분자량이 작아 면역반응의 우려가 적고, 조직 내에 침투가 용이하다는 점에 더하여 암 세포의 증식 억제 효과가 더욱 뛰어나고, 인간의 혈액 내에서 안정적으로 존재할 수 있는 효과를 나타내므로 암 치료 및 예방 분야에서 유용한 항암제로 사용할 수 있을 것으로 기대된다.
Claims (17)
- 하기 일반식으로 표시되는 화합물:[일반식]X-AQTGTGKT(상기 일반식에 있어서,A는 알라닌(alanine)이고, Q는 글루타민(glutamine)이고, T는 트레오닌(threonine)이고, G는 글라이신(glycine)이고, K는 라이신(lysine)이고,X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상임.) - 하기 일반식으로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는, 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물:[일반식]X-AQTGTGKT(상기 일반식에 있어서,A는 알라닌(alanine)이고, Q는 글루타민(glutamine)이고, T는 트레오닌(threonine)이고, G는 글라이신(glycine)이고, K는 라이신(lysine)이고,X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상임.) - 제2항에 있어서,상기 암은 폐암, 유방암, 혈액암, 대장암, 췌장암 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 암인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 제3항에 있어서,상기 폐암은 비소세포성 폐암(non-small cell lung cancer)인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 제3항에 있어서,상기 유방암은 삼중음성유방암(Triple negative breast cancer)인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 제3항에 있어서,상기 혈액암은 백혈병, 림프종, 다발성 골수종 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된 혈액암인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물.
- 제2항에 있어서,상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이고, 상기 암은 폐암인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물. - 제2항에 있어서,상기 X는
이고, 상기 암은 유방암인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물. - 제2항에 있어서,상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이고, 상기 암은 혈액암인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물. - 제2항에 있어서,상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이고, 상기 암은 췌장암인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물. - 제2항에 있어서,상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상이고, 상기 암은 대장암인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물. - 제2항에 있어서,상기 X가
인 경우, 인간 혈액 내에서의 반감기가 100분 내지 150분인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물. - 제2항에 있어서,상기 X가
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 경우, 인간 혈액 내에서의 반감기가 45분 내지 70분인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물. - 제2항에 있어서,상기 X가
인 경우, 인간 혈액 내에서의 반감기가 20분 내지 30분인 것을 특징으로 하는, 약학적 조성물. - 하기의 단계를 포함하는 올리고펩티드 X-AQTGTGKT의 제조방법:(상기 A는 알라닌(alanine)이고, Q는 글루타민(glutamine)이고, T는 트레오닌(threonine)이고, G는 글라이신(glycine)이고, K는 라이신(lysine)이고,상기 X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나임.)(1) TG 및 KT를 각각 합성하는 단계;(2) 상기 TG와 KT를 결합하여 TGKT를 합성하는 단계;(3) 상기 TGKT의 N-말단에 TG를 결합하여 TGTGKT를 합성하는 단계;(4) 상기 TGTGKT의 N-말단에 Q를 결합하여 QTGTGKT를 합성하는 단계; 및(5) 상기 QTGTGKT의 N-말단에 알라닌 유도체(X-A)를 결합하여 X-AQTGTGKT를 합성하는 단계. - 하기 일반식으로 표시되는 화합물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 암의 예방 또는 치료방법:[일반식]X-AQTGTGKT(상기 일반식에 있어서,A는 알라닌(alanine)이고, Q는 글루타민(glutamine)이고, T는 트레오닌(threonine)이고, G는 글라이신(glycine)이고, K는 라이신(lysine)이고,X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나임.) - 하기 일반식으로 표시되는 화합물의 암에 대한 예방, 개선, 또는 치료 용도:[일반식]X-AQTGTGKT(상기 일반식에 있어서,A는 알라닌(alanine)이고, Q는 글루타민(glutamine)이고, T는 트레오닌(threonine)이고, G는 글라이신(glycine)이고, K는 라이신(lysine)이고,X는
로 이루어진 군으로부터 선택된 하나임.)
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR10-2020-0035188 | 2020-03-23 | ||
| KR20200035188 | 2020-03-23 | ||
| KR1020210036982A KR102348728B1 (ko) | 2020-03-23 | 2021-03-23 | 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
| KR10-2021-0036982 | 2021-03-23 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| WO2021194228A1 true WO2021194228A1 (ko) | 2021-09-30 |
Family
ID=77892461
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PCT/KR2021/003590 WO2021194228A1 (ko) | 2020-03-23 | 2021-03-23 | 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| WO (1) | WO2021194228A1 (ko) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP4062974A3 (en) * | 2021-03-22 | 2022-10-19 | L-Base Co.,Ltd. | Pharmaceutical composition for preventing or treating cancer |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20120099440A (ko) * | 2009-10-22 | 2012-09-10 | 임페리얼 이노베이션스 리미티드 | Ｇａｄｄ45β를 표적으로 하는 물질 |
| WO2016099188A1 (ko) * | 2014-12-18 | 2016-06-23 | 주식회사 엘베이스 | Cage 유래 8개의 아미노산 서열을 갖으며 항암활성 및 항암제 내성 암세포의 항암제에 대한 감수성 증진 활성을 갖는 펩티드 |
| KR20160110723A (ko) * | 2015-03-11 | 2016-09-22 | 포항공과대학교 산학협력단 | 아스파탐을 이용하여 rgd 펩타이드를 제조하는 방법 |
| JP2020505326A (ja) * | 2017-01-18 | 2020-02-20 | フレッド ハッチンソン キャンサー リサーチ センター | Ｔｅａｄ相互作用を妨害するためのペプチド組成物およびその使用方法 |
-
2021
- 2021-03-23 WO PCT/KR2021/003590 patent/WO2021194228A1/ko active Application Filing
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20120099440A (ko) * | 2009-10-22 | 2012-09-10 | 임페리얼 이노베이션스 리미티드 | Ｇａｄｄ45β를 표적으로 하는 물질 |
| WO2016099188A1 (ko) * | 2014-12-18 | 2016-06-23 | 주식회사 엘베이스 | Cage 유래 8개의 아미노산 서열을 갖으며 항암활성 및 항암제 내성 암세포의 항암제에 대한 감수성 증진 활성을 갖는 펩티드 |
| KR20160110723A (ko) * | 2015-03-11 | 2016-09-22 | 포항공과대학교 산학협력단 | 아스파탐을 이용하여 rgd 펩타이드를 제조하는 방법 |
| JP2020505326A (ja) * | 2017-01-18 | 2020-02-20 | フレッド ハッチンソン キャンサー リサーチ センター | Ｔｅａｄ相互作用を妨害するためのペプチド組成物およびその使用方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| YOUNGMI KIM, HYUNA KIM, DEOKBUM PARK, HANSOO LEE, YUN SIL LEE, JONGSEON CHOE, YOUNG MYEONG KIM, DOYONG JEON, DOOIL JEOUNG: "The pentapeptide Gly-Thr-Gly-Lys-Thr confers sensitivity to anti-cancer drugs by inhibition of CAGE binding to GSK3β and decreasing the expression of cyclinD1", ONCOTARGET, vol. 8, no. 8, 21 February 2017 (2017-02-21), pages 13632 - 13651, XP055756625, DOI: 10.18632/oncotarget.14621 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP4062974A3 (en) * | 2021-03-22 | 2022-10-19 | L-Base Co.,Ltd. | Pharmaceutical composition for preventing or treating cancer |
| JP2023522311A (ja) * | 2021-03-22 | 2023-05-30 | エル－ベース カンパニー リミテッド | がんの予防または治療用薬学的組成物 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2018182341A1 (ko) | 피롤로벤조디아제핀 이량체 전구체 및 이의 리간드-링커 접합체 화합물 | |
| WO2011083999A2 (ko) | 바이구아나이드 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학 조성물 | |
| WO2013048164A1 (en) | NOVEL COMPOUNDS AS HIF-1αINHIBITORS AND MANUFACTURING PROCESS THEREOF | |
| WO2014046441A1 (ko) | 돌라스타틴 10 유도체, 그의 제조방법 및 그를 포함하는 항암제 조성물 | |
| WO2016032209A2 (ko) | 야누스인산화효소 억제제로서의 치환된 n-(피롤리딘-3-일)-7h-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 | |
| WO2018226053A1 (ko) | 시클로프로필아민 유도체 화합물 및 이의 용도 | |
| WO2021194228A1 (ko) | 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| AU2017256488B2 (en) | Quinazoline derivative or its salt and pharmaceutical composition comprising the same | |
| WO2017034245A1 (ko) | 야누스 키나제 1 선택적 억제제 및 그 의약 용도 | |
| WO2022197100A1 (ko) | 항암제의 항암 효과 증진용 약학적 조성물 | |
| WO2022203219A1 (ko) | 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| WO2020141923A9 (ko) | 안전성이 향상된 피롤로벤조디아제핀 이량체 화합물 및 이의 용도 | |
| WO2023043269A1 (ko) | 면역반응을 조절하기 위한 약학적 조성물 | |
| WO2023043261A1 (ko) | 항암제의 항암 효과 증진용 약학적 조성물 | |
| WO2021066573A1 (ko) | 신규 화합물 및 이의 자가면역질환 치료 용도 | |
| WO2023043271A1 (ko) | 암 치료용 cage 저해제에 대한 반응자 특성화 방법 | |
| WO2015115796A1 (ko) | 페길레이션된 7-디하이드로콜레스테롤 유도체 | |
| WO2020139044A1 (ko) | 신규한 화합물 및 이를 포함하는 항암 활성 증진용 약학 조성물 | |
| WO2020190073A1 (ko) | 신규한 아졸로피리미딘 헤테로고리 화합물을 유효 성분으로 함유하는 약제학적 조성물 | |
| WO2019035672A1 (ko) | 아실화 옥신토모듈린 펩타이드 유사체 | |
| WO2024039210A1 (ko) | Cdk2 및/또는 cdk9의 억제 또는 분해용 화합물 및 이들의 의약 용도 | |
| WO2014185561A1 (ko) | 신규한 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 이를 유효성분으로 함유하는 ｕｃｈ－ｌ１ 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| WO2024025396A1 (ko) | 신규 오리스타틴 전구약물 | |
| WO2023090935A1 (ko) | 뉴클레오린에 특이적으로 결합하는 agm 펩타이드를 제조하는 방법 | |
| WO2024096564A1 (ko) | 항-클라우딘18.2 항체를 포함하는 항체-약물 컨쥬게이트 및 이의 암에 대한 치료용도 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application |
Ref document number: 21776700 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |
|
| NENP | Non-entry into the national phase |
Ref country code: DE |
|
| 32PN | Ep: public notification in the ep bulletin as address of the adressee cannot be established |
Free format text: NOTING OF LOSS OF RIGHTS PURSUANT TO RULE 112(1) EPC (EPO FORM 1205A DATED 26.01.2023) |
|
| 122 | Ep: pct application non-entry in european phase |
Ref document number: 21776700 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |