WO2021057308A1 - 粘质沙雷氏菌在制备白蚁拒食剂中的应用 - Google Patents

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Abstract

粘质沙雷氏菌在制备白蚁拒食剂中的应用。所述的粘质沙雷氏菌是以粘质沙雷氏菌菌株培养液的形式制备白蚁拒食剂。粘质沙雷氏菌培养简单，且生长周期短、生长速度快，易于扩大培养，不属于化学药剂，具有作为白蚁拒食剂施用的良好条件。

Description

粘质沙雷氏菌在制备白蚁拒食剂中的应用 技术领域
本发明涉及白蚁防治技术领域，具体涉及粘质沙雷氏菌在制备白蚁拒食剂中的应用。
背景技术
白蚁是一种世界性的重要害虫，在热带和亚热带，白蚁的危害尤为严重。我国已查知在23个省、市有分布，危害面积接近全国总面积的40％。它们扩散力强，破坏迅速，在短期内就能造成巨大损失。白蚁危害造成的经济损失每年约20～25亿元(李小鹰和王以燕，2003)。目前，防治的主要方法仍是化学防治，其危害大，对生态环境破环严重，尤其在城市防控与古木保护中，使用一般方法很难起到良好的效果，且可能对人体和古木造成一定程度的危害。
粘质沙雷氏菌Serratia marcescens属沙雷氏菌属，是自然界中广泛存在一类细菌，具有抗病毒，提高免疫力，抑制真茵、细菌、疟疾和霉菌，以及杀虫等功能。目前已发现粘质沙雷氏菌对许多昆虫具有致病力，可感染部分鱗翅目、鞘翅目及同翅目害虫。
发明内容
本发明的目的是提供一种粘质沙雷氏菌菌株的新用途，具体是提供粘质沙雷氏菌在制备白蚁拒食剂中的应用。所述的粘质沙雷氏菌的保藏编号为：GDMCC No：60999。
所述的粘质沙雷氏菌是以粘质沙雷氏菌菌株培养液的形式制备白蚁拒食剂。将粘质沙雷氏菌菌株培养液喷洒或浸润需要防护的材料，可作为白蚁拒食剂使用，对白蚁具有明显的拒食效果。
所述的粘质沙雷氏菌菌株培养液是将粘质沙雷氏菌接种于LB液体培养基中培养获得， 具体是将粘质沙雷氏菌接种于LB液体培养基中，于25±1℃环境，200r/min摇床摇菌培养48h后获得。
本发明的另一个目的在于，提供一种白蚁拒食剂，含有粘质沙雷氏菌作为活性成分，所述的粘质沙雷氏菌的保藏编号为：GDMCC No：60999。
本发明的另一个目的在于，提供一种白蚁拒食方法，将粘质沙雷氏菌菌株培养液喷洒或浸润需要防护的材料，所述的粘质沙雷氏菌的保藏编号为：GDMCC No：60999。
本发明的另一个目的在于，提供一种粘质沙雷氏菌，其保藏编号为：GDMCC No：60999。
本发明通过将粘质沙雷氏菌菌株培养液浸润白蚁取食的滤纸片，释放白蚁后，观察其对滤纸片的取食情况，验证了能够将粘质沙雷氏菌菌株培养液作为一种白蚁的拒食剂施用。之后，将滤纸片，通过极端处理(高温烘干)，测试其有效性，再次验证了能够将粘质沙雷氏菌菌株培养液作为一种白蚁的拒食剂施用。且因粘质沙雷氏菌培养简单，且生长周期短、生长速度快，易于扩大培养，不属于化学药剂，具有作为白蚁拒食剂施用的良好条件。
本发明的粘质沙雷氏菌菌株(Serratia marcescens)CfI2019于2020年4月17日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为：GDMCC No：60999。
附图说明
图1为实施例1中5d后白蚁的取食图。图中，上半部分10个培养皿为喷施粘质沙雷氏菌培养液处理，下半部分10个培养皿为喷施不含粘质沙雷氏菌的LB培养基对照。
图2为实施例1中5d后白蚁对滤纸片取食量。图中，*表示处理间存在显著差异，短棒表示滤纸片取食量的均值±标准误。
图3为实施例2中极端条件处理下，5d后白蚁的取食图。图中，上半部分10个滤纸片为喷施粘质沙雷氏菌培养液处理，下半部分10个滤纸片为喷施不含粘质沙雷氏菌的LB培养基对照。
图4为实施例2中极端条件处理下，5d后白蚁对滤纸片取食量。图中，*表示处理间存在显著差异，短棒表示滤纸片取食量的均值±标准误。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1
粘质沙雷氏菌，属于肠杆菌科沙雷氏属的一个种，为革兰氏阴性短杆菌，形态上一般比其他肠道菌小，无荚膜，偶尔呈长丝状。在生长过程中有一个突出的特点，会产生一种次生代谢产物-灵菌红素，且受温度的影响较大，在25℃左右时能够产生红色色素，而一旦温度升高，达到37℃时，红色色素即不再生成。本实验所用粘质沙雷氏菌由实验室死亡白蚁上分离，于2020年4月17日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为：GDMCC No：60999。
将粘质沙雷氏菌接种于LB液体培养基中，于25±1℃环境，200r/min摇床摇菌培养48h后，得到粘质沙雷氏菌培养液，待用。
剪取大小一致的圆形滤纸片，烘干后称取其重量，记为初始重量，将其放置于圆形培养皿中，使用上述的粘质沙雷氏菌培养液喷湿滤纸片，接入大小近似的白蚁群体(19头工蚁和1头兵蚁)。同时，设置喷施无粘质沙雷氏菌的LB培养基作为对照，同样接入同等规模的白蚁群体。每组设置10个重复，5d后将各自滤纸片取出，扫去白蚁粪便及其他取食 碎屑等，于80℃烘箱，烘干72h后，称量滤纸片重量，记为终重量。初始重量减去终重量，即为白蚁群体取食的滤纸片重量。
5d后取食情况见图1，我们可以看到喷施不含粘质沙雷氏菌的LB培养基对照中，滤纸片取食较多，而喷施粘质沙雷氏菌培养液的处理中，基本未见取食。
因本处理中，未见粘质沙雷氏菌培养液处理下，白蚁死亡数显著上升的情况，因此不考虑白蚁死亡导致取食量减少的因素。通过对数据进行统计分析，我们发现，喷施粘质沙雷氏菌培养液的处理，其对滤纸片的取食量显著低于喷施不含粘质沙雷氏菌的LB培养基对照。施用粘质沙雷氏菌培养液的处理确实对白蚁存在显著的拒食作用(如图2)，具体影响如下：
喷施粘质沙雷氏菌培养液的处理，其滤纸片平均取食量(平均初始重量-平均剩余重量＝平均取食量，0.0948g-0.0939g＝0.0009g)显著低于施用不含粘质沙雷氏菌的LB培养基(0.0932-0.0801＝0.0131g)(t＝-8.03,p<0.001)。
实施例2
将实施例1中实验后的滤纸片即高温极端条件处理后的滤纸片，重新放入培养皿中，两处理(原先分别喷施粘质沙雷氏菌培养液和不含粘质沙雷氏菌的LB培养基)均只喷施无菌水，并重新接入大小近似的白蚁群体(19头工蚁和1头兵蚁)。5d后将各自滤纸片取出，扫去白蚁粪便及其他取食碎屑等，于80℃烘箱，烘干72h后，称量滤纸片重量，记为终重量。实施例1中的终重量即为实施例2中的初始重量，通过其减去终重量，即为对粘湿沙雷氏菌极端条件处理后的白蚁群体取食量。
5d后取食情况见图3，我们可以看到经过极端条件处理后，喷施不含粘质沙雷氏菌的 LB培养基对照中，滤纸片取食较多，而喷施粘质沙雷氏菌培养液的处理中，取食情况依然较轻。
通过对数据进行统计分析，我们发现，经过极端条件处理后，喷施粘质沙雷氏菌培养液的处理，其对滤纸片的取食量虽然有所上升，但依然极低，且显著低于喷施不含粘质沙雷氏菌的LB培养基对照。施用粘质沙雷氏菌培养液的处理确实对白蚁存在显著的拒食作用(如图4)，具体影响如下：
经过极端条件处理后，喷施粘质沙雷氏菌培养液的处理，其滤纸片取食量(平均初始重量-平均剩余重量＝平均取食量，0.0939g-0.0904g＝0.0035g)显著低于施用不含粘质沙雷氏菌的LB培养基(0.0801-0.0684＝0.0117g)(t＝-7.91,p<0.001)。
实施例1和实施例2结果表明，喷施粘质沙雷氏菌培养液能极大的降低白蚁对滤纸的取食，即粘质沙雷氏菌对白蚁具有一定的拒食作用。且通过极端条件处理后(80℃高温处理3d)，喷施粘质沙雷氏菌培养液的滤纸片对白蚁依然具有较强的拒食效果。因此，能够将粘质沙雷氏菌培养液作为白蚁拒食剂，施用于所需要维护的木材建筑等环境中。
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

  1. 粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)CfI2019在制备白蚁拒食剂中的应用，所述的粘质沙雷氏菌的保藏编号为：GDMCC No：60999。
  2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，是以粘质沙雷氏菌菌株培养液的形式制备白蚁拒食剂。
  3. 根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，是将粘质沙雷氏菌菌株培养液喷洒或浸润需要防护的材料。
  4. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的粘质沙雷氏菌菌株培养液是将粘质沙雷氏菌接种于LB液体培养基中培养获得。
  5. 根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的粘质沙雷氏菌菌株培养液是将粘质沙雷氏菌接种于LB液体培养基中，于25±1℃环境，200r/min摇床摇菌培养48h后获得。
  6. 一种白蚁拒食剂，其特征在于，含有粘质沙雷氏菌作为活性成分，所述的粘质沙雷氏菌的保藏编号为：GDMCC No：60999。
  7. 一种白蚁拒食方法，其特征在于，是将粘质沙雷氏菌菌株培养液喷洒或浸润需要防护的材料，所述的粘质沙雷氏菌的保藏编号为：GDMCC No：60999。
  8. 一种粘质沙雷氏菌，其保藏编号为：GDMCC No：60999。
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