WO2021039854A1 - 皮膚常在微生物採取用粘着テープ、被験者の身体状態を評価する方法、被験者に情報を提示する方法及び身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法、並びに、皮膚代謝物採取用粘着テープ - Google Patents

皮膚常在微生物採取用粘着テープ、被験者の身体状態を評価する方法、被験者に情報を提示する方法及び身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法、並びに、皮膚代謝物採取用粘着テープ Download PDF

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玄志 井上
広太 立花
尚史 須谷
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TAK-Circulator株式会社
国立大学法人東京大学
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    • G01N2500/00Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/10Screening for compounds of potential therapeutic value involving cells

Definitions

  • the present invention relates to an adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms, a method for evaluating the physical condition of a subject, a method for presenting information to a subject, a method for screening a substance for improving or preventing the physical condition, and an adhesive for collecting skin biotransformers.
  • tape for collecting skin-resident microorganisms
  • a method for evaluating the physical condition of a subject a method for presenting information to a subject
  • a method for screening a substance for improving or preventing the physical condition a method for screening a substance for improving or preventing the physical condition
  • an adhesive for collecting skin biotransformers Regarding tape.
  • human skin condition is evaluated by indexes such as firmness, texture, age spots, wrinkles, water content, oil content, and water evaporation amount (barrier function).
  • indexes such as firmness, texture, age spots, wrinkles, water content, oil content, and water evaporation amount (barrier function).
  • questionnaire survey image analysis of the skin surface disclosed in Patent Document 1 and the like (tension, texture, stain, wrinkle, etc.), and measurement by equipment (water content, oil content, water evaporation amount, etc.) are used. Has been done.
  • the factors that affect the skin condition are not necessarily limited to the above-mentioned indexes, and there are skin conditions that are difficult to evaluate by the conventional technology that depends on the above-mentioned indexes. There is an increasing need for technology that can evaluate such skin conditions. This need is not limited to the skin condition, but the same applies to the general physical condition.
  • the applicants have described the method of evaluating the physical condition of a subject as a technique for evaluating a skin condition that can be objectively evaluated and is not easily affected by changes in skin quality due to face washing or the like.
  • the value of the skin microflora collected from the skin surface of the subject is determined, and the correlation is described. It has a process to be compared with the sex standard, and the physical condition is skin age, greasy skin, skin stain, dullness, sagging, wrinkle, swelling condition, skin condition which is at least one of pore condition, or hair.
  • Teeth, urine, bones, internal organs, blood, urine, or a method related to nerves see Patent Document 2.
  • Non-Patent Document 1 if skin metabolites can be collected from the skin surface, there is a possibility that the physical condition can be evaluated from the collected skin metabolites (see Non-Patent Document 1). Therefore, it is also desired to collect skin metabolites on the skin surface well.
  • the present invention has been made in view of the above-mentioned conventional circumstances, and an adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms and an adhesive tape for collecting skin metabolites, which can improve the amount of skin-resident microorganisms collected on the skin surface, and these. It is an object of the present invention to provide a method for evaluating the physical condition of a subject used, a method for presenting information to the subject, and a method for screening a substance for improving or preventing the physical condition.
  • the amount of skin-resident microorganisms collected on the skin surface can be improved by using an adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms that has an adhesive layer containing a rubber-based adhesive and has specific adhesive strength and peeling power.
  • the present invention has been completed. It was also found that the skin metabolites on the skin surface can be satisfactorily collected by using an adhesive tape for collecting skin metabolites having a pressure-sensitive adhesive layer containing a rubber-based pressure-sensitive adhesive and having a specific adhesive force and peeling power.
  • An adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms used for collecting skin-resident microorganisms on the skin surface. It has a base material and an adhesive layer provided on at least a part of the surface of the base material.
  • the pressure-sensitive adhesive layer contains a pressure-sensitive adhesive, and the pressure-sensitive adhesive contains a rubber-based pressure-sensitive adhesive.
  • JIS Z 0237: 2009 the adhesive strength when measured at a test piece width of 12 mm, an adherend bakelite plate, a crimping method of 2 kg roller 1 reciprocation, a tensile speed of 300 mm / min, and a tensile angle of 90 ° is 10.0 N or more.
  • the peeling force when measured at a tensile speed of 300 mm / min and a tensile angle of 180 ° using a test piece 12 mm wide, silicone-treated woodfree paper as a release paper is 0.25 N or more.
  • Adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms is 0.25 N or more.
  • a method for evaluating the physical condition of a subject For the abundance ratio of skin-resident microorganisms on the skin surface or parameters based on the abundance ratio for which the correlation standard with the physical condition has been prepared, the value of the skin flora collected from the skin surface of the subject is determined, and the above-mentioned It has a process to compare with the correlation standard, The skin flora collected from the skin surface of the subject was collected by using the skin resident microorganisms on the skin surface using the adhesive tape for collecting skin resident microorganisms according to any one of (1) to (3) above. The way it is.
  • a method of presenting information to the subject The step of evaluating the physical condition of the subject by the method described in (4) or (5) above, and When it is evaluated that the physical condition is not in the target state, the abundance ratio or the abundance ratio or the numerical range indicated by the abundance ratio or the parameter is obtained based on the correlation criterion when the physical condition is in the target state.
  • a method of screening for substances that improve or prevent physical condition A step of selecting the candidate substance based on the change of the candidate substance with respect to the abundance ratio of the skin-resident microorganisms on the skin surface or the value of the parameter based on the abundance ratio for which the correlation standard with the physical condition has been prepared.
  • Have, The skin flora collected from the skin surface is collected from the skin-resident microorganisms on the skin surface of the subject using the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms according to any one of (1) to (3). The way it is.
  • An adhesive tape for collecting skin metabolites used for collecting skin metabolites on the surface of the skin It has a base material and an adhesive layer provided on at least a part of the surface of the base material.
  • the pressure-sensitive adhesive layer contains a pressure-sensitive adhesive
  • the pressure-sensitive adhesive contains a rubber-based pressure-sensitive adhesive.
  • JIS Z 0237: 2009 the adhesive strength when measured at a test piece width of 12 mm, an adherend bakelite plate, a crimping method of 2 kg roller 1 reciprocation, a tensile speed of 300 mm / min, and a tensile angle of 90 ° is 10.0 N or more.
  • the peeling force when measured at a tensile speed of 300 mm / min and a tensile angle of 180 ° using a test piece 12 mm wide, silicone-treated woodfree paper as a release paper is 0.25 N or more.
  • Adhesive tape for collecting skin metabolites is 0.25 N or more.
  • a method for evaluating the physical condition of a subject For the abundance ratio of skin metabolites on the skin surface or parameters based on the abundance ratio for which the correlation standard with the physical condition has been prepared, the value of the skin metamorphic substances collected from the skin surface of the subject is determined, and the correlation is determined. It has a process to compare with the sex standard, The skin biotransforms collected from the skin surface of the subject are collected by using the skin metametase collecting adhesive tape according to any one of claims (9) to (12). The way it is.
  • a method of presenting information to a subject The step of evaluating the physical condition of the subject by the method according to (13) or (14), and When it is evaluated that the physical condition is not in the target state, the abundance ratio or the abundance ratio or the numerical range indicated by the abundance ratio or the parameter is obtained based on the correlation criterion when the physical condition is in the target state.
  • a method of screening for substances that improve or prevent physical condition A step of selecting the candidate substance based on the change due to the candidate substance with respect to the abundance ratio of skin biotransforms on the skin surface or the value of the parameter based on the abundance ratio for which the correlation standard with the physical condition has been prepared.
  • Have and The skin metabolite collected from the skin surface is obtained by collecting the skin metabolite on the skin surface of the subject using the adhesive tape for collecting skin metabolite according to any one of (9) to (12). There is a way.
  • an adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms that can improve the amount of skin-resident microorganisms collected on the skin surface. Further, it is possible to provide an adhesive tape for collecting skin metabolites, which can satisfactorily collect skin metabolites on the skin surface.
  • this adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms and the adhesive tape for collecting skin metabolites a highly accurate method for evaluating the physical condition of the subject, a method for presenting information to the subject, and improving the physical condition can be achieved. A method of screening for substances to be prevented can be provided.
  • the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms of the present invention is an adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms used for collecting skin-resident microorganisms on the skin surface, and is a base material and at least a part of the surface of the base material. It has an adhesive layer provided in.
  • the pressure-sensitive adhesive layer contains a pressure-sensitive adhesive, and the pressure-sensitive adhesive contains a rubber-based pressure-sensitive adhesive.
  • the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms was measured by JIS Z 0237: 2009 with a test piece width of 12 mm, an adherend bakelite plate, a crimping method of 2 kg roller 1 reciprocation, a tensile speed of 300 mm / min, and a tensile angle of 90 °.
  • the adhesive strength is 10.0 N or more
  • JIS Z 0237: 2009 a test piece 12 mm wide, silicone-treated high-quality paper is used as a release paper, and the tensile speed is 300 mm / min and the tensile angle is 180 °.
  • the peeling force at the time of measurement is 0.25 N or more.
  • FIG. 1 is a perspective view showing an example of an adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms of the present invention.
  • the adhesive tape 1 for collecting skin-resident microorganisms of the present invention has a base material 2 and an adhesive layer 3 provided on the surface of the base material 2.
  • the adhesive layer 3 is provided on the entire surface of one surface of the base material 2, but the pressure-sensitive adhesive layer 3 may be provided on at least a part of the surface of the base material 2, for example, a base.
  • the adhesive layer 3 may not be provided on a part of the surface of the material 2, and the base material 2 may be exposed.
  • the pressure-sensitive adhesive layer 3 contains a pressure-sensitive adhesive, and the pressure-sensitive adhesive contains a rubber-based pressure-sensitive adhesive.
  • the rubber-based pressure-sensitive adhesive contained in the pressure-sensitive adhesive layer 3 may be one or more selected from natural rubber and synthetic rubber, but preferably contains natural rubber.
  • the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms of the present invention has a test piece width of 12 mm, an adherend bakelite plate, a crimping method of 2 kg, one reciprocation of a roller, a tensile speed of 300 mm / min, and a tensile angle of 90 according to JIS Z 0237: 2009.
  • the adhesive strength when measured at ° (hereinafter, also simply referred to as “adhesive strength”) is 10.0 N or more, preferably 11.0 N or more, more preferably 12.0 N or more, still more preferably 13.0 N or more. ..
  • the upper limit of the adhesive strength is not particularly limited, but is, for example, 20.0 N or less, preferably 19.0 N or less, more preferably 18.0 N or less, still more preferably 17.0 N or less.
  • the adhesive tape for collecting microorganisms resident on the skin of the present invention uses JIS Z 0237: 2009 with a test piece width of 12 mm, a high-quality silicone-treated paper as a release paper, a tensile speed of 300 mm / min, and a tensile angle of 180.
  • the peeling force (hereinafter, also simply referred to as “peeling force”) when measured at ° is 0.25 N or more, preferably 0.26 N or more, more preferably 0.27 N or more, still more preferably 0.28 N or more. ..
  • the upper limit of the peeling force is not particularly limited, but is, for example, 0.50 N or less, preferably 0.45 N or less, more preferably 0.40 N or less, still more preferably 0.35 N or less.
  • the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms having the adhesive layer 3 containing the rubber-based adhesive and having an adhesive strength of 10.0 N or more and a peeling power of 0.25 N or more is used, which will be described later.
  • the amount of skin-resident microorganisms collected on the skin surface can be improved as compared with the conventional tape. Therefore, using an adhesive tape for collecting indigenous skin microorganisms having an adhesive layer containing such a rubber-based adhesive and having an adhesive force of 10.0 N or more and a peeling force of 0.25 N or more, the skin surface is normal.
  • the indigenous microorganisms When the indigenous microorganisms are collected, they are comparable to the case where the skin indigenous microorganisms on the skin surface are wet-collected using, for example, a swab (cotton stick) capable of satisfactorily collecting the skin indigenous microorganisms on the skin surface.
  • a swab cotton stick
  • the tape since the tape is used for collection, the collection procedure is easy.
  • the thickness of the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms of the present invention is not particularly limited, but may be, for example, 0.01 mm or more, 0.10 mm or more, or 0.20 mm or more. Further, the upper limit of the thickness is not particularly limited, but may be, for example, 0.50 mm or less, 0.40 mm or less, or 0.30 mm or less.
  • the place where the skin flora is collected by the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms of the present invention is not particularly limited, and examples thereof include the face, scalp, armpits, and navel, and the face, especially the forehead is particularly preferable.
  • the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms of the present invention is preferably used for collecting skin-resident microorganisms on the skin surface having a sebum amount of 75 or more.
  • the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms of the present invention can extremely improve the amount of skin-resident microorganisms collected on the skin surface having a sebum amount of 75 or more.
  • the skin-resident microorganisms on the skin surface having a sebum amount of less than 75 may be used for collecting skin-resident microorganisms on the skin surface having a sebum amount of less than 75. Since the amount of sebum on the skin surface of a subject changes depending on the environment, physical condition, etc., for example, even when collecting skin-resident microorganisms on the skin surface having a sebum amount of 75 or more, it should be collected from a wide range of subjects. Can be done.
  • the skin-resident microorganisms collected by the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms of the present invention are not particularly limited and may be bacteria or fungi, and bacteria are particularly preferable.
  • Specific examples of skin-resident microorganisms include bacteria belonging to the phylum Proteobacteria, bacteria belonging to the phylum Proteobacteria, and bacteria belonging to the phylum Firmicutes, and bacteria belonging to Proteobacteria acnes (also referred to as Cutibacterium acnes in recent years).
  • the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms is stored after collecting the skin-resident microorganisms on the skin surface with the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms of the present invention (for example, the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms).
  • the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms After collecting the skin-resident microorganisms on the skin surface, after a while, when analyzing the collected skin microorganism flora), store the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms in the state where the skin-resident microorganisms have been collected.
  • the temperature is not particularly limited, and it may be stored at room temperature, or it may be stored refrigerated or frozen.
  • the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms of the present invention can be used as a method for evaluating the physical condition of a subject.
  • the method for evaluating the physical condition of the subject is that the skin collected from the skin surface of the subject with respect to the abundance ratio or the parameter based on the abundance ratio of the skin indigenous microorganisms on the skin surface for which the correlation standard with the physical condition has been prepared.
  • the skin flora collected from the skin surface of the subject has a step of determining the value of the microbial flora and comparing it with the correlation criterion, and the skin resident microorganism on the skin surface is used for collecting the skin resident microorganism of the present invention. It is collected using an adhesive tape.
  • the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms of the present invention can be used as a method for presenting information to a subject.
  • the method of presenting information to the subject is a step of evaluating the physical condition of the subject by the method of evaluating the physical condition of the subject, and when it is evaluated that the physical condition is not in the target state, the physical condition becomes the target state.
  • a method having a step of presenting information registered in a database as a component capable of deriving the value of the abundance ratio or the parameter toward the numerical range indicated by the abundance ratio or the parameter based on a correlation criterion at a certain time. is there. This makes it possible to personalize and present information on the improvement of the physical condition to the subject.
  • the information referred to here refers to the name of the ingredient or the ingredient-containing preparation, the usage / dose of the ingredient / preparation, the expected improvement method and degree of the physical condition, side effects, and the like.
  • the information is provided based on the step of re-evaluating the physical condition of the subject after ingesting the component by the method of evaluating the physical condition of the subject and the degree of improvement of the re-evaluated physical condition. It is preferable to further have a step of updating. As a result, it is expected that the information in the database will be improved and the accuracy of improvement of the physical condition will be further improved.
  • the timing of the evaluation again is not particularly limited, and may be, for example, when the time expected to improve the physical condition (which can be included in the information in the database) has passed after the use of the ingredient.
  • the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms of the present invention can be used as a method for screening a substance that improves or prevents a physical condition.
  • the method of screening for a substance that improves or prevents the physical condition is a candidate substance regarding the abundance ratio of skin-resident microorganisms on the skin surface or the value of a parameter based on the abundance ratio, for which a correlation standard with the physical condition has been prepared.
  • the skin flora collected from the skin surface has a step of selecting candidate substances based on the change due to the above, and the skin resident microorganisms on the skin surface of the subject are collected using the above-mentioned adhesive tape for collecting skin resident microorganisms. It is a thing. As a result, it is expected that substances that improve or prevent physical condition will be screened with high probability.
  • the existence probability of a substance that improves or prevents a physical condition is higher in the candidate substance group after screening than in the candidate substance group before screening, and the candidate substance after screening is It is not always necessary to be able to improve or prevent physical condition. Therefore, it is preferable to further perform a step of confirming that the screened candidate substance has an effect of improving or preventing the physical condition.
  • the skin-resident microorganism may be a bacterium or a fungus, and the bacterium is particularly preferable. Its abundance may be for any of the phylum, class, order, family, genus and species. For example, it may be the abundance ratio of at least one bacterium selected from the group consisting of bacteria belonging to the phylum Proteobacteria, bacteria belonging to the phylum Proteobacteria, and bacteria belonging to the phylum Firmicutes. The abundance ratio of acnes bacteria can be mentioned.
  • the parameters are not particularly limited as long as they are based on the abundance ratio of skin-resident microorganisms, and may be the difference, sum, product, ratio, exponent, logarithm or a combination thereof among the abundance ratios of a plurality of skin-resident microorganisms. It may be a ratio, a difference or a combination thereof. For example, there is a difference in the relative amount of the bacterial species belonging to the phylum Proteobacteria and the bacterial species belonging to the phylum Firmicutes. Alternatively, the parameter may be a skin-resident microbial diversity index. Such parameters may correlate with the coordinate axes when each sample data of the population is plotted in the coordinate space using a dimension reduction method (for example, principal component analysis, principal component analysis).
  • a dimension reduction method for example, principal component analysis, principal component analysis
  • the physical condition is not particularly limited as long as it has a correlation with the abundance ratio of skin-resident microorganisms on the skin surface or parameters based on the abundance ratio, and the skin, hair, teeth, urine, bones, internal organs, blood, and nerves. It can be a state related to any part such as.
  • Skin conditions include skin age, greasy skin, acne skin, freckles on the skin, texture, yellowing, dryness, shine, age spots, dullness, sagging, wrinkles, swelling, pores, and yellowing of the skin.
  • Examples of the condition of the hair include thinning hair and hair loss.
  • Examples of the tooth condition include periodontal disease and alveolar pyorrhea.
  • Examples of bone, internal organs, blood, urine, and nerve conditions include liver function, hyperuric acid, knee pain, osteoporosis, autonomic imbalance, and diabetes.
  • female hormones and menopause, which can affect cosmetology are also included in the physical condition.
  • the correlation standard is a standard that can qualitatively or quantitatively identify the goodness or severity of the physical condition to be evaluated based on the above-mentioned abundance ratio or parameter value obtained from the skin flora.
  • Examining the abundance ratio of bacteria to bacteria belonging to the Firmicutes phylum it is possible to examine various facial skin conditions such as acne and widened pores, and various physical symptoms not limited to the face such as periodontal disease and thinning hair / hair loss of the head. The likelihood of occurrence can be evaluated.
  • the relative amount of a particular bacterial species correlates with the likelihood of causing other physical symptoms. For example, high uric acid level (genus Rothia, genus Brevibacterium, genus Erythrobacteraceae, etc.), osteoporosis (genus Pseudomonas, genus Methirobacterium), decreased liver function (genus Campylobacter, genus Russia, etc.), yellowing of the skin ), Diabetes (bacteria belonging to the order Actinomycetales), etc. show a correlation with the relative amount of the bacterial species in parentheses, respectively.
  • the aging skin index calculated from the presence or absence of sagging, wrinkles, and firmness of the skin of the face is a group of bacteria that can be called "aging skin bacteria” consisting of bacterial species belonging to the Gammaproteobacteria class and Propionibacteria granulosum bacteria. Shows correlation with abundance.
  • the correlation criteria may be created for a quasi-population classified by at least one species selected from the group consisting of age, gender, place of residence, nationality and race of the population. This makes it possible to accurately evaluate the physical condition of the subject, taking into consideration the age, gender, area of residence, nationality, race, and the like.
  • the method of presenting information to the subject it is possible to present more appropriate information in consideration of the subject's age, gender, area of residence, nationality and race. Therefore, in addition to the above abundance ratio or parameters, at least one input selected from the group consisting of age, gender, place of residence, nationality and race regarding the subject is preferable.
  • the screening method for substances that improve or prevent physical condition it becomes easy to obtain substances that can improve or prevent physical condition suitable for the age, gender, residential area, nationality and race of the user.
  • the place where the skin flora is collected is not particularly limited, and may be the face, scalp, armpits, navel, etc., particularly the face, especially the forehead.
  • the place where the skin flora is collected is preferably the surface of the skin having a sebum amount of 75 or more. This is because the adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms can extremely improve the amount of skin-resident microorganisms collected on the skin surface having a sebum amount of 75 or more. Of course, the amount of sebum may be less than 75 at the place where the skin flora is collected.
  • the amount of sebum on the skin surface of the subject changes depending on the environment, physical condition, etc., a wide range of subjects can be applied even when the skin flora is collected on the skin surface having a sebum amount of 75 or more. can do. It is preferable that the collection location of the population sample for which the correlation standard is created coincides with the collection location of the subject sample.
  • the value of the skin flora collected from the skin surface of the subject is determined by analyzing the skin flora collected from the skin surface of the subject using the above-mentioned adhesive tape for collecting skin-resident microorganisms of the present invention. ..
  • the analysis of the bacterial flora on the skin surface is preferably performed by analyzing the DNA existing on the skin surface.
  • the method of examining the bacterial flora by DNA can examine the bacterial flora more accurately than the method of estimating the bacterial flora by culturing the bacteria collected from the skin surface on an agar medium. This is because the proportion of microorganisms that can be cultivated on agar is said to be about 1%, and most microbial species are difficult to cultivate.
  • the method of analyzing DNA the bacterial flora collected from the skin surface can be analyzed accurately as it is.
  • a peeling step of peeling the adhesive tape 1 for collecting skin-resident microorganisms in which the pressure-sensitive adhesive layer 3 is brought into contact with the skin surface from the skin surface and adhering bacteria existing on the skin surface to the pressure-sensitive adhesive layer.
  • An extraction step in which the pressure-sensitive adhesive layer 3 to which the bacterium is attached is brought into contact with a liquid to extract DNA contained in the bacterium. It is preferable to carry out by a method including a genome analysis step of performing genome analysis of the extracted DNA.
  • the adhesive tape 1 for collecting indigenous skin microorganisms in which the adhesive layer 3 is in contact with the skin surface is peeled off from the skin surface, and the bacteria existing on the skin surface remain attached to the adhesive layer 3. Collect (peeling step).
  • peeling step the bacteria existing on the skin surface, the bacteria on the skin surface in contact with the adhesive layer 3 adhere to the adhesive layer 3 side of the adhesive tape 1 for collecting indigenous microorganisms on the skin in the same distribution and are collected. Therefore, unlike the method of scraping the skin surface with a cotton swab, there is no possibility that the data of the bacterial flora will vary depending on the scraping force and the scraping range.
  • the bacterial flora on the surface of the skin can be faithfully copied.
  • the pressure-sensitive adhesive layer 3 to which the bacteria are attached is brought into contact with the liquid to extract the DNA contained in the bacteria (extraction step). Therefore, compared to the method in which substances adhering to the surface of the pressure-sensitive adhesive layer are separated using a magnifying glass or the like and used as a sample, a state of a DNA solution capable of measuring a bacterial flora extremely quickly from a pressure-sensitive adhesive member to which bacteria have adhered. Can be. Therefore, it is possible to minimize changes in the bacterial flora during the elapsed time for sampling. Then, if the extracted DNA is analyzed by a next-generation sequencer (NGS) or the like, the bacterial flora existing on the skin surface can be easily and uniformly measured.
  • NGS next-generation sequencer
  • the adhesive tape for collecting skin biotransforms of the present invention is an adhesive tape for collecting skin biotransforms used for collecting skin biotransforms on the skin surface, and is provided on a base material and at least a part of the surface of the base material. It has an adhesive layer.
  • the pressure-sensitive adhesive layer contains a pressure-sensitive adhesive, and the pressure-sensitive adhesive contains a rubber-based pressure-sensitive adhesive.
  • the adhesive tape for collecting skin metabolites was measured by JIS Z 0237: 2009 with a test piece width of 12 mm, an adherend bakelite plate, a crimping method of 2 kg, one reciprocation of a roller, a tensile speed of 300 mm / min, and a tensile angle of 90 °.
  • JIS Z 0237: 2009 measures with a test piece width of 12 mm, silicone-treated high-quality paper as a release paper, a tensile speed of 300 mm / min, and a tensile angle of 180 °.
  • the peeling force is 0.25 N or more.
  • Such an adhesive tape for collecting skin biotransformers of the present invention has the same configuration as the adhesive tape 1 for collecting indigenous skin microorganisms.
  • the adhesive tape for collecting skin metabolites of the present invention has a base material and an adhesive layer provided on the surface of the base material.
  • the pressure-sensitive adhesive layer may be provided on at least a part of the surface of the base material.
  • the pressure-sensitive adhesive layer may be provided on the entire surface of one surface of the base material, or one of the surfaces of the base material.
  • the base material may be exposed without the pressure-sensitive adhesive layer provided on the portion.
  • the pressure-sensitive adhesive layer contains a pressure-sensitive adhesive, and the pressure-sensitive adhesive contains a rubber-based pressure-sensitive adhesive.
  • the rubber-based pressure-sensitive adhesive contained in the pressure-sensitive adhesive layer may be one or more selected from natural rubber and synthetic rubber, but preferably contains natural rubber.
  • the adhesive tape for collecting skin biotransforms of the present invention has a test piece width of 12 mm, an adherend bakelite plate, a crimping method of 2 kg, one reciprocation of a roller, a tensile speed of 300 mm / min, and a tensile angle of 90 ° according to JIS Z 0237: 2009.
  • the adhesive strength (hereinafter, also simply referred to as “adhesive strength”) as measured in 1 above is 10.0 N or more, preferably 11.0 N or more, more preferably 12.0 N or more, still more preferably 13.0 N or more.
  • the upper limit of the adhesive strength is not particularly limited, but is, for example, 20.0 N or less, preferably 19.0 N or less, more preferably 18.0 N or less, still more preferably 17.0 N or less.
  • the adhesive tape for collecting skin metabolites of the present invention uses JIS Z 0237: 2009 with a test piece width of 12 mm, a high-quality silicone-treated paper as a release paper, a tensile speed of 300 mm / min, and a tensile angle of 180 °.
  • the peeling force (hereinafter, also simply referred to as “peeling force”) measured in 1) is 0.25N or more, preferably 0.26N or more, more preferably 0.27N or more, still more preferably 0.28N or more.
  • the upper limit of the peeling force is not particularly limited, but is, for example, 0.50 N or less, preferably 0.45 N or less, more preferably 0.40 N or less, still more preferably 0.35 N or less.
  • an adhesive tape for collecting skin metabolites having an adhesive layer containing a rubber-based adhesive and having an adhesive force of 10.0 N or more and a peeling force of 0.25 N or more
  • the skin surface concretely
  • metabolites on the skin and on the surface of the skin can be collected well.
  • the adhesive tape for collecting skin metabolites is used, the amount of metabolites collected on the skin surface is extremely large as compared with the case where the conventional tape is used. Therefore, a skin metabolite on the skin surface is used with an adhesive tape for collecting skin metabolites having an adhesive layer containing such a rubber-based adhesive and having an adhesive strength of 10.0 N or more and a peeling power of 0.25 N or more.
  • the collection procedure is easy because the collection is performed with tape.
  • the thickness of the adhesive tape for collecting skin metabolites of the present invention is not particularly limited, but may be, for example, 0.01 mm or more, 0.10 mm or more, or 0.20 mm or more. Further, the upper limit of the thickness is not particularly limited, but may be, for example, 0.50 mm or less, 0.40 mm or less, or 0.30 mm or less.
  • the place where the skin biotransformer is collected by the adhesive tape for collecting the skin biotransformer of the present invention is not particularly limited, and examples thereof include the face, scalp, armpits, and navel, and the face, particularly the forehead is preferable.
  • the adhesive tape for collecting skin metabolites of the present invention is preferably used for collecting skin metabolites on the skin surface having a sebum amount of 75 or more.
  • the adhesive tape for collecting skin biotransformers of the present invention can extremely improve the amount of skin metabolites collected on the skin surface having a sebum amount of 75 or more. Of course, it may be used for collecting skin metabolites on the skin surface having a sebum amount of less than 75.
  • the amount of sebum on the skin surface of a subject changes depending on the environment, physical condition, etc., for example, even when collecting skin metabolites on the skin surface having a sebum amount of 75 or more, it is possible to collect from a wide range of subjects. it can.
  • Skin biotransformers of the present invention are not particularly limited, but are, for example, soluble proteins.
  • the total amount of soluble protein can be measured, for example, by biochemical quantitative analysis (BCA method or the like).
  • identification and quantification of individual soluble proteins can be performed by, for example, a biochemical method using an antibody (Western blotting method, ELISA method, etc.) or a mass spectrometer.
  • the adhesive tape for collecting skin metabolites is stored after collecting the skin metabolites on the skin surface with the adhesive tape for collecting skin metabolites of the present invention (for example, the skin on the skin surface is stored with the adhesive tape for collecting skin metabolites).
  • the temperature at which the adhesive tape for collecting skin metabolites in the collected skin metabolites is stored is not particularly limited. It may be stored at room temperature, or it may be stored refrigerated or frozen.
  • the adhesive tape for collecting skin metabolites of the present invention can be used as a method for evaluating the physical condition of a subject.
  • the method for evaluating the physical condition of the subject is that the skin metabolism collected from the skin surface of the subject with respect to the abundance ratio or the parameter based on the abundance ratio of the skin metatransformers on the skin surface for which the correlation standard with the physical condition has been prepared.
  • the skin metabolites collected from the skin surface of the subject which has a step of determining the value of the substance and comparing with the correlation standard, are the skin metabolites on the skin surface, and the adhesive tape for collecting the skin metabolites of the present invention. It is collected by using.
  • the adhesive tape for collecting skin metabolites of the present invention can be used as a method for presenting information to a subject.
  • the method of presenting information to the subject is a step of evaluating the physical condition of the subject by the method of evaluating the physical condition of the subject, and when it is evaluated that the physical condition is not in the target state, the physical condition becomes the target state.
  • a method having a step of presenting information registered in a database as a component capable of deriving the value of the abundance ratio or the parameter toward the numerical range indicated by the abundance ratio or the parameter based on a correlation criterion at a certain time. is there. This makes it possible to personalize and present information on the improvement of the physical condition to the subject.
  • the information referred to here refers to the name of the ingredient or the ingredient-containing preparation, the usage / dose of the ingredient / preparation, the expected improvement method and degree of the physical condition, side effects, and the like.
  • the information is provided based on the step of re-evaluating the physical condition of the subject after ingesting the component by the method of evaluating the physical condition of the subject and the degree of improvement of the re-evaluated physical condition. It is preferable to further have a step of updating. As a result, it is expected that the information in the database will be improved and the accuracy of improvement of the physical condition will be further improved.
  • the timing of the evaluation again is not particularly limited, and may be, for example, when the time expected to improve the physical condition (which can be included in the information in the database) has passed after the use of the ingredient.
  • the adhesive tape for collecting skin biotransforms of the present invention can be used as a method for screening a substance that improves or prevents a physical condition.
  • the method of screening for a substance that improves or prevents the physical condition depends on the candidate substance regarding the abundance ratio of skin biotransforms on the skin surface or the value of a parameter based on the abundance ratio, for which a correlation standard with the physical condition has been prepared. It has a step of selecting candidate substances based on the change, and the skin biotransforms collected from the skin surface are those obtained by collecting the skin biotransforms on the skin surface of the subject using the above-mentioned adhesive tape for collecting skin metatransforms. is there. As a result, it is expected that substances that improve or prevent physical condition will be screened with high probability.
  • the existence probability of a substance that improves or prevents a physical condition is higher in the candidate substance group after screening than in the candidate substance group before screening, and the candidate substance after screening is It is not always necessary to be able to improve or prevent physical condition. Therefore, it is preferable to further perform a step of confirming that the screened candidate substance has an effect of improving or preventing the physical condition.
  • the parameters are not particularly limited as long as they are based on the abundance ratio of skin biotransformers, and may be the difference, sum, product, ratio, exponent, logarithm or a combination thereof, among others, the ratio. It may be a difference or a combination thereof.
  • the parameter may be a skin metabolite diversity index.
  • Such parameters may correlate with the coordinate axes when each sample data of the population is plotted in the coordinate space using a dimension reduction method (for example, principal component analysis, principal component analysis).
  • the physical condition is not particularly limited as long as it has a correlation with the abundance ratio of skin metabolites on the skin surface or parameters based on the abundance ratio, and the skin, hair, teeth, urine, bones, internal organs, blood, nerves, etc. It can be a condition for any part of. Skin conditions include skin age, greasy skin, acne skin, freckles on the skin, texture, yellowing, dryness, shine, age spots, dullness, sagging, wrinkles, swelling, pores, and yellowing of the skin. Can be mentioned. Examples of the condition of the hair include thinning hair and hair loss. Examples of the tooth condition include periodontal disease and alveolar pyorrhea.
  • Examples of bone, internal organs, blood, urine, and nerve conditions include liver function, hyperuric acid, knee pain, osteoporosis, autonomic imbalance, and diabetes.
  • female hormones and menopause, which can affect cosmetology are also included in the physical condition.
  • the correlation standard is a standard that can qualitatively or quantitatively identify the goodness or severity of the physical condition to be evaluated based on the above-mentioned abundance ratio or parameter value obtained from the skin biotransformer.
  • the correlation criterion is preferably after exclusion of the effects of at least one of the events known to correlate with the physical condition. This makes it possible to suppress the influence on the presence or absence and degree of the above-mentioned other events related to the subject, and to evaluate the physical condition more accurately based on the abundance ratio of skin metabolites or the value of the parameter.
  • the method of presenting information to the subject it is possible to present more appropriate information in consideration of the presence or absence and degree of the above-mentioned other events related to the subject.
  • the correlation criteria may be created for a quasi-population classified by at least one species selected from the group consisting of age, gender, place of residence, nationality and race of the population. This makes it possible to accurately evaluate the physical condition of the subject, taking into consideration the age, gender, area of residence, nationality, race, and the like.
  • the method of presenting information to the subject it is possible to present more appropriate information in consideration of the subject's age, gender, area of residence, nationality and race. Therefore, in addition to the above abundance ratio or parameters, at least one input selected from the group consisting of age, gender, place of residence, nationality and race regarding the subject is preferable.
  • the screening method for substances that improve or prevent physical condition it becomes easy to obtain substances that can improve or prevent physical condition suitable for the age, gender, residential area, nationality and race of the user.
  • the place where the skin metabolites are collected is not particularly limited, and may be the face, scalp, armpits, navel, etc., particularly the face, especially the forehead.
  • the place where the skin metabolites are collected is preferably the surface of the skin having a sebum amount of 75 or more. This is because the adhesive tape for collecting skin metabolites can extremely improve the amount of skin metabolites collected on the skin surface having a sebum amount of 75 or more. Of course, the amount of sebum may be less than 75 at the place where the skin metabolites are collected.
  • the amount of sebum on the skin surface of the subject changes depending on the environment, physical condition, etc., a wide range of subjects can be applied even when the skin metabolite is collected on the skin surface having a sebum amount of 75 or more. can do. It is preferable that the collection location of the population sample for which the correlation standard is created coincides with the collection location of the subject sample.
  • the value of the skin biotransforms collected from the skin surface of the subject is determined by the bacteria simultaneously collected from the amount of the skin metatransforms collected from the skin surface of the subject using the above-mentioned adhesive tape for collecting skin metatransforms of the present invention. It is preferable to calculate as a value excluding the amount of skin biotransforms derived from. Since the amount of skin biotransformers derived from the collected bacteria is extremely small compared to the amount of skin metabolites collected, the value of the collected skin biotransformers is used as it is for the evaluation of the physical condition. May be good. In detail, most of the soluble proteins collected by the adhesive tape for collecting skin metabolites are considered to be proteins derived from human skin cells.
  • the amount of total protein derived from bacteria is 0 per adhesive tape for collecting skin metabolites. This is because it is estimated to be 1 ⁇ g or less. For this calculation, a known value was used, in which the number of 16S rRNA genes contained in one bacterium was about 4, and the total amount of protein was about 0.1 pg.
  • the adhesive tape for collecting skin metabolites in which the adhesive layer is brought into contact with the skin surface is peeled off from the skin surface, and the skin metabolites existing on the skin surface are collected while being attached to the adhesive layer ( Peeling process).
  • Peeling process As a result, among the skin metabolites existing on the skin surface, the skin metamorphosis on the skin surface in contact with the adhesive layer adheres to the adhesive layer side of the adhesive tape for collecting skin metabolites in the same distribution and is collected. Therefore, unlike the method of scraping the skin surface with a cotton swab, there is no possibility that the data of skin metabolites will vary depending on the scraping force and the scraping range. In addition, skin metabolites on the skin surface can be faithfully copied.
  • the pressure-sensitive adhesive layer to which the skin metatransformers are attached is brought into contact with a liquid (for example, PBS: phosphate buffer), and if necessary, ultrasonic treatment or the like is performed to extract the skin metabolites (extraction step). ..
  • a solution capable of measuring skin biotransforms extremely quickly from an adhesive member to which skin metatransforms are attached as compared with a method in which substances adhering to the surface of the adhesive layer are separated using a magnifying glass or the like and used as a sample. Can be in the state of. Therefore, changes in skin metabolites during the elapsed time for sampling can be minimized.
  • the extracted skin metabolite is analyzed with a commercially available soluble protein measuring kit or the like, the amount of the soluble protein or the like present on the skin surface can be easily and uniformly measured.
  • the means for extracting and analyzing skin metabolites are not particularly limited.
  • Adhesive tape for collecting microorganisms resident on the skin >> ⁇ Example 1> (Collection of bacterial flora and measurement of total DNA amount) Bacterial flora was collected from each of the subjects A to E. Bacterial flora was collected and the total amount of DNA was measured according to the flowchart shown in FIG. -Contact step S1 and peeling step S2 The adhesive tape 1 for collecting microorganisms resident on the skin shown in FIG. 1 is prepared.
  • the adhesive tape 1 for collecting microorganisms resident on the skin has a structure in which an adhesive layer 3 made of an adhesive is provided on a flaky tape base material 2 as a base. Therefore, the contact step S1 can be easily performed by attaching it to human skin in the same manner as an ordinary adhesive plaster or dressing tape.
  • the adhesive tape 1 for collecting microorganisms resident on the skin was attached to a release paper (not shown), and was sent to the subject together with latex gloves in an aluminum bag containing a sealable desiccant.
  • the subject wore latex gloves immediately after waking up and before washing his face, opened the aluminum bag, took out the release paper to which the adhesive tape 1 for collecting skin-resident microorganisms was attached, and peeled off the adhesive tape 1 for collecting skin-resident microorganisms. Paste it on the subject's forehead. Then, after maintaining the adhered state for 5 minutes, the adhesive tape 1 for collecting microorganisms resident on the skin was peeled off, put back on the release paper, and put in an aluminum bag together with a desiccant and sealed. Then, it was stored frozen until the DNA analysis test was performed. Table 1 shows the types of the base material and the adhesive of the adhesive tape 1 for collecting microorganisms resident on the skin.
  • DNA was extracted directly from the adhesive tape 1 for collecting indigenous microorganisms on the skin according to the method of Morita et al. (Microbes Environ. Vol22, No. 3, 214-222, 2007) to prepare a DNA solution. Then, the total amount of DNA was measured from the DNA solution. Specifically, 1/20 of the DNA solution is used as a sample sample, and a real-time PCR reagent containing KAPA SYBR (registered trademark) DNA polymerase enzyme (manufactured by KAPA Biosystems, product name: KAPA SYBR (registered trademark) FAST qPCR).
  • KAPA SYBR registered trademark
  • FAST qPCR real-time PCR reagent containing KAPA SYBR (registered trademark) DNA polymerase enzyme
  • a copy number analysis was performed on the 16S rRNA gene with a real-time PCR device (manufactured by Applied Biosystem, product name: StepOnePlusTM).
  • a calibration curve was prepared using a DNA fragment having the same amplification efficiency as the target molecule as an internal standard.
  • the measurement was avoided.
  • the amount of sebum is classified according to the skin type, and the amount of sebum on the cheeks is "dry / less sebum” when it is 70 or less, “normal” when it is 70-180, and “greasy” when it is 180 or more.
  • the amount of sebum was 146.3 for subject A, 137.0 for subject B, 104.7 for subject C, 82.7 for subject D, and 76.3 for subject E.
  • a test piece 10 having a width of 12 mm was prepared from the adhesive tape 1 for collecting microorganisms resident on the skin.
  • the adhesive strength was measured according to JIS Z 0237: 2009. Specifically, a test piece 10 prepared from an adhesive tape 1 for collecting skin-resident microorganisms composed of a base material 1 and an adhesive layer 3 is placed on a bakelite plate as an adherend 11, and the adhesive layer 3 is adhered to the bakelite plate. The 2 kg roller was reciprocated once so as to be on the 11 side for lamination. Then, as shown in FIG. 3, the adhesive strength was measured at a tensile speed of 300 mm / min and a tensile angle of 90 ° using a tensile tester according to JIS B7721: 2009.
  • test piece 20 having a width of 12 mm was prepared from the adhesive tape 1 for collecting microorganisms resident on the skin.
  • the peeling force was measured using this test piece 20 in accordance with JIS Z 0237: 2009.
  • the test piece 20 prepared from the adhesive tape 1 for collecting skin-resident microorganisms composed of the base material 1 and the adhesive layer 3 is put on a high-quality paper subjected to silicone treatment as a release paper 21, and the adhesive layer 3 is applied.
  • the release paper 21 was on the surface side of the release paper 21 subjected to the silicone treatment. Then, as shown in FIG.
  • Table 1 shows the measurement results of the adhesive force and the peeling force of the adhesive tape 1 for collecting skin-resident microorganisms, and the thickness of the adhesive tape 1 for collecting skin-resident microorganisms.
  • the measurement result of subject A is shown in FIG. 5
  • the measurement result of subject B is shown in FIG. 6
  • the measurement result of subject C is shown in FIG. 7
  • the measurement result of subject D is shown in FIG. The measurement results are shown in FIG.
  • Adhesive tape for collecting skin metabolites >> (Collection of soluble protein and measurement of the amount of soluble protein) For each of the subjects A and C to E, soluble protein was collected in the following steps S1 and S2, and the soluble protein was extracted in the following steps S3, and the amount of the soluble protein was measured.
  • -Contact step S1 and peeling step S2 The adhesive tape 1 for collecting skin-resident microorganisms used in Example 1 is used as an adhesive tape for collecting skin metabolites.
  • the adhesive tape for collecting skin metabolites (adhesive tape for collecting indigenous microorganisms on the skin 1) has a structure in which an adhesive layer made of an adhesive is provided on a flaky tape base material as a base. There is.
  • the contact step S1 can be easily performed by attaching it to human skin in the same manner as an ordinary adhesive plaster or dressing tape.
  • the adhesive tape for collecting skin biotransforms was attached to a release paper and sent to the subject together with latex gloves in an aluminum bag containing a sealable desiccant.
  • the subject wore latex gloves immediately after waking up and before washing his face, opened the aluminum bag, took out the release paper with the adhesive tape for collecting skin biotransforms, and peeled off the adhesive tape for collecting skin biotransforms on the subject's forehead. paste.
  • the adhesive tape for collecting skin biotransformers was peeled off, put back on the release paper, and put in an aluminum bag together with a desiccant and sealed. Then, it was stored frozen until the amount of soluble protein was measured.
  • -Extraction step S3 Use PBS (manufactured by Fuji Film Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) for the adhesive tape for collecting skin biotransforms obtained in the contact step S1 and the peeling step S2 and the adhesive tape for collecting skin biotransforms to which no skin metatransforms are attached as a control. It was placed in a container to which 2 mL was added, and the container was subjected to ultrasonic crushing treatment for 15 minutes. The ultrasonic crushing treatment was carried out for 30 cycles of 15 seconds on and 15 seconds off using an ultrasonic crusher (Bioruptor (registered trademark) Pico, manufactured by diagene).
  • an ultrasonic crusher Bioruptor (registered trademark) Pico, manufactured by diagene
  • the amount of soluble protein derived from human skin cells Ultrasonic crushing solution obtained in extraction step S3, measuring kit: Micro BCA Protein Assay Kit (manufactured by Thermo Fisher Scientific) and measuring device: Nanodrop ND-1000 (manufactured by Thermo Fisher Scientific).
  • the total amount of soluble protein was measured under the condition of 562 nm spectrophotometer using Thermo Fisher Scientific).
  • the amount of soluble protein derived from bacteria, which is simultaneously collected by the adhesive tape for collecting skin metabolites is the number of 16S rRNA gene copies ⁇ the number of 16S rRNA retained per unit bacterium (3.5) ⁇ the amount of protein retained per unit bacterium. It was calculated at (0.1 pg).
  • the amount of soluble protein derived from bacteria per tape was as small as 0.04 ⁇ g or less. From the total amount of soluble proteins extracted from the adhesive tape for collecting skin metabolites obtained in the contact step S1 and the peeling step S2, the protein extracted from the adhesive tape for collecting skin metabolites to which no skin metabolites are attached The value excluding the amount and the amount of soluble protein estimated to be derived from bacteria was taken as the amount of soluble protein derived from human skin cells.
  • the measurement was avoided.
  • the amount of sebum is classified according to the skin type, and the amount of sebum on the cheeks is "dry / less sebum” when it is 70 or less, “normal” when it is 70-180, and “greasy” when it is 180 or more.
  • the amount of sebum was 146.3 for subject A, 104.7 for subject C, 61.3 for subject D, and 74.0 for subject E.
  • results of subject A are shown in Table 2
  • results of subject C are shown in Table 3
  • results of subject D are shown in Table 4.
  • results of subject E are shown in Table 5.
  • Example 1 skin-resident microorganisms in which the adhesive layer contains a rubber-based adhesive, the adhesive strength is 10 N / 12 mm or more, and the peeling power is 0.25 N / mm or more.
  • Example 1 using the adhesive tape for collection the total amount of DNA was extremely high as compared with Comparative Examples 1 to 6.
  • Tables 2 to 5 an adhesive tape for collecting skin metabolites, in which the adhesive layer contains a rubber-based adhesive, the adhesive strength is 10 N / 12 mm or more, and the peeling power is 0.25 N / mm or more.
  • Example 1 used the amount of soluble protein was extremely high as compared with Comparative Examples 1, 2 and 6.
  • Adhesive tape for collecting indigenous microorganisms on the skin 2 Base material 3 Adhesive layer

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Abstract

皮膚表面の皮膚常在微生物の採取量を向上できる皮膚常在微生物採取用粘着テープを提供すること。 皮膚表面の皮膚常在微生物の採取に用いられる皮膚常在微生物採取用粘着テープであって、基材と、該基材の表面の少なくとも一部に設けられた粘着剤層とを有し、前記粘着剤層は粘着剤を含み、前記粘着剤はゴム系粘着剤を含み、JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、被着体ベークライト板、圧着方法2kgローラー1往復、引張速度300mm/分、引張角度90°で測定したときの粘着力が10.0N以上であり、JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、シリコーン処理を施した上質紙を剥離紙として用い、引張速度300mm/分、引張角度180°で測定したときの剥離力が0.25N以上である。

Description

皮膚常在微生物採取用粘着テープ、被験者の身体状態を評価する方法、被験者に情報を提示する方法及び身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法、並びに、皮膚代謝物採取用粘着テープ
 本発明は、皮膚常在微生物採取用粘着テープ、被験者の身体状態を評価する方法、被験者に情報を提示する方法及び身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法、並びに皮膚代謝物採取用粘着テープに関する。
 従来、ヒトの肌状態はハリ、キメ、シミ、しわ、水分量、油分量、水分蒸散量(バリア機能)等の指標で評価されている。評価法としては、アンケート調査や、特許文献1等に開示される皮膚表面の画像解析(ハリ、キメ、シミ、しわ等)、機器による計測(水分量、油分量、水分蒸散量等)が用いられている。
 しかし、アンケート調査では、被験者の主観に大きく影響されるため、客観的な評価が得られ難いという問題がある。これに対して、画像解析では、客観的な指標を得ることができるが、洗顔の有無、ファンデーションやスキンクリームの塗布等によって肌質が変化するため、的確な肌状態の評価を行うことが困難であるという問題があった。
 また、肌状態に影響する要因は、必ずしも上記した指標だけに限られないことが分かってきており、上記した指標に依存する従来技術では評価困難な肌状態が存在する。そのような肌状態を評価可能な技術へのニーズが高まっている。このニーズは、肌状態に限られず、身体状態一般について同様である。
 そこで、本出願人らは、客観的な評価が可能であって、洗顔等による肌質の変動に左右され難い肌状態を評価する技術として、被験者の身体状態を評価する方法であって、前記身体状態との相関性基準が作成済みである、皮膚表面の皮膚常在微生物の存在割合又は前記存在割合に基づくパラメータについて、被験者の皮膚表面から採取した皮膚微生物叢の値を決定し、前記相関性基準と対比する工程を有し、前記身体状態は、肌年齢、脂性肌、肌のしみ、くすみ、たるみ、しわ、はりの状態、毛穴の状態の少なくとも1種である肌の状態、又は毛髪、歯、尿、骨、内臓、血液、尿、もしくは神経に関する状態である方法等を開発した(特許文献2参照)。
特開2013-188326号公報 特許第6046849号
Zouboulis, C.C., Stratakis, C.A., Chrousos, G.P. et al. Metabolism and skin diseases. Rev Endocr Metab Disord 17, 241-246 (2016).
 ここで、特許文献2の技術においては、被験者の皮膚表面から皮膚常在微生物を採取する必要がある。
 被験者の皮膚表面から皮膚常在微生物を採取する方法として、スワブ(綿棒)を用いて湿式に採取する方法がある。この方法では、皮膚表面の皮膚常在微生物を良好に採取することができるが、採取手技が不安定であり、また、採取物の良好な保存には冷蔵又は冷凍状態での保管が必須であるという問題がある。
 そこで、テープを用いて乾式に皮膚表面から皮膚常在微生物を採取する方法が考えられるが、この方法では、皮膚表面の皮膚常在微生物を良好に採取し難い。皮膚表面の皮膚常在微生物は微量なため、高精度で評価等するためには、皮膚表面の皮膚常在微生物を良好に採取することが望まれる。
 また、皮膚表面から皮膚代謝物を採取することができれば、採取された皮膚代謝物から身体状態を評価できる可能性がある(非特許文献1参照)。このため、皮膚表面の皮膚代謝物を良好に採取することも望まれる。
 本発明は、上記従来の実情に鑑みてなされたものであり、皮膚表面の皮膚常在微生物の採取量を向上できる皮膚常在微生物採取用粘着テープ及び皮膚代謝物採取用粘着テープ、並びにこれらを用いた被験者の身体状態を評価する方法、被験者に情報を提示する方法、及び身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法を提供することを課題とする。
 ゴム系粘着剤を含む粘着剤層を有し特定の粘着力及び剥離力を有する皮膚常在微生物採取用粘着テープとすることで、皮膚表面の皮膚常在微生物の採取量が向上することを見出し、本発明を完成するに至った。
 また、ゴム系粘着剤を含む粘着剤層を有し特定の粘着力及び剥離力を有する皮膚代謝物採取用粘着テープとすることで皮膚表面の皮膚代謝物を良好に採取できることを見出した。
 (1) 皮膚表面の皮膚常在微生物の採取に用いられる皮膚常在微生物採取用粘着テープであって、
 基材と、該基材の表面の少なくとも一部に設けられた粘着剤層とを有し、
 前記粘着剤層は粘着剤を含み、前記粘着剤はゴム系粘着剤を含み、
 JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、被着体ベークライト板、圧着方法2kgローラー1往復、引張速度300mm/分、引張角度90°で測定したときの粘着力が10.0N以上であり、
 JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、シリコーン処理を施した上質紙を剥離紙として用い、引張速度300mm/分、引張角度180°で測定したときの剥離力が0.25N以上である、皮膚常在微生物採取用粘着テープ。
 (2) 前記ゴム系粘着剤は天然ゴムを含む、上記(1)に記載の皮膚常在微生物採取用粘着テープ。
 (3) 皮脂量が75以上である前記皮膚表面の皮膚常在微生物の採取に用いられる、上記(1)又は(2)に記載の皮膚常在微生物採取用粘着テープ。
 (4) 被験者の身体状態を評価する方法であって、
 前記身体状態との相関性基準が作成済みである、皮膚表面の皮膚常在微生物の存在割合又は前記存在割合に基づくパラメータについて、被験者の皮膚表面から採取した皮膚微生物叢の値を決定し、前記相関性基準と対比する工程を有し、
 前記被験者の皮膚表面から採取した皮膚微生物叢は、皮膚表面の皮膚常在微生物を上記(1)~(3)のいずれか1つに記載の皮膚常在微生物採取用粘着テープを用いて採取されるものである、方法。
 (5) 前記皮膚微生物叢を採取する前記皮膚表面の皮脂量が75以上である、上記(4)に記載の方法。
 (6) 被験者に情報を提示する方法であって、
 上記(4)又は(5)に記載の方法により、被験者の身体状態を評価する工程と、
 前記身体状態が目標状態にないと評価された場合、前記身体状態が目標状態にあるときに前記相関性基準に基づいて前記存在割合又は前記パラメータが示す数値範囲の方に、前記存在割合又は前記パラメータの値を誘導可能な成分としてデータベースに登録されている情報を提示する工程と、を有する方法。
 (7) 前記成分を摂取した後の被験者の身体状態を上記(4)又は(5)に記載の方法により再度評価する工程と、
 前記再度評価した身体状態の改善の程度に基づき、前記情報をアップデートする工程と、をさらに有する上記(6)に記載の方法。
 (8) 身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法であって、
 前記身体状態との相関性基準が作成済みである、皮膚表面の皮膚常在微生物の存在割合又は前記存在割合に基づくパラメータの値に関する、候補物質による変化に基づいて、前記候補物質を選抜する工程を有し、
 前記皮膚表面から採取した皮膚微生物叢は、被験者の皮膚表面の皮膚常在微生物を(1)~(3)のいずれか1つに記載の皮膚常在微生物採取用粘着テープを用いて採取されるものである、方法。
 (9) 皮膚表面の皮膚代謝物の採取に用いられる皮膚代謝物採取用粘着テープであって、
 基材と、該基材の表面の少なくとも一部に設けられた粘着剤層とを有し、
 前記粘着剤層は粘着剤を含み、前記粘着剤はゴム系粘着剤を含み、
 JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、被着体ベークライト板、圧着方法2kgローラー1往復、引張速度300mm/分、引張角度90°で測定したときの粘着力が10.0N以上であり、
 JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、シリコーン処理を施した上質紙を剥離紙として用い、引張速度300mm/分、引張角度180°で測定したときの剥離力が0.25N以上である、皮膚代謝物採取用粘着テープ。
 (10) 前記ゴム系粘着剤は天然ゴムを含む、(9)に記載の皮膚代謝物採取用粘着テープ。
 (11) 皮脂量が75以上である前記皮膚表面の皮膚代謝物の採取に用いられる、(9)又は(10)に記載の皮膚代謝物採取用粘着テープ。
 (12) 前記皮膚代謝物が、可溶性タンパク質である、(9)~(11)のいずれか1つに記載の皮膚代謝物採取用粘着テープ。
 (13) 被験者の身体状態を評価する方法であって、
 前記身体状態との相関性基準が作成済みである、皮膚表面の皮膚代謝物の存在割合又は前記存在割合に基づくパラメータについて、被験者の皮膚表面から採取した皮膚代謝物の値を決定し、前記相関性基準と対比する工程を有し、
 前記被験者の皮膚表面から採取した皮膚代謝物は、皮膚表面の皮膚代謝物を請求項(9)~(12)のいずれか1つに記載の皮膚代謝物採取用粘着テープを用いて採取されるものである、方法。
 (14) 前記皮膚代謝物を採取する前記皮膚表面の皮脂量が75以上である、(13)に記載の方法。
 (15) 被験者に情報を提示する方法であって、
 (13)又は(14)に記載の方法により、被験者の身体状態を評価する工程と、
 前記身体状態が目標状態にないと評価された場合、前記身体状態が目標状態にあるときに前記相関性基準に基づいて前記存在割合又は前記パラメータが示す数値範囲の方に、前記存在割合又は前記パラメータの値を誘導可能な成分としてデータベースに登録されている情報を提示する工程と、を有する方法。
 (16) 前記成分を摂取した後の被験者の身体状態を(13)又は(14)に記載の方法により再度評価する工程と、
 前記再度評価した身体状態の改善の程度に基づき、前記情報をアップデートする工程と、をさらに有する(15)に記載の方法。
 (17) 身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法であって、
 前記身体状態との相関性基準が作成済みである、皮膚表面の皮膚代謝物の存在割合又は前記存在割合に基づくパラメータの値に関する、候補物質による変化に基づいて、前記候補物質を選抜する工程を有し、
 前記皮膚表面から採取した皮膚代謝物は、被験者の皮膚表面の皮膚代謝物を(9)~(12)のいずれか1つに記載の皮膚代謝物採取用粘着テープを用いて採取されるものである、方法。
 本発明によれば、皮膚表面の皮膚常在微生物の採取量を向上できる皮膚常在微生物採取用粘着テープを提供することができる。また、皮膚表面の皮膚代謝物を良好に採取できる皮膚代謝物採取用粘着テープを提供することができる。また、この皮膚常在微生物採取用粘着テープや皮膚代謝物採取用粘着テープを用いることにより、高精度な、被験者の身体状態を評価する方法、被験者に情報を提示する方法及び身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法を提供することができる。
本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープの一例を示す斜視図である。 本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープを用いた細菌叢測定方法の一例を示す工程図である。 粘着力の測定方法を示す模式図である。 剥離力の測定方法を示す模式図である。 被験者Aの全DNA量の測定結果を示す図である。 被験者Bの全DNA量の測定結果を示す図である。 被験者Cの全DNA量の測定結果を示す図である。 被験者Dの全DNA量の測定結果を示す図である。 被験者Eの全DNA量の測定結果を示す図である。
 本発明について、以下に具体的に説明する。なお、本発明は、以下に限定されるものではなく、本発明の要旨を変更しない範囲で種々の変更が可能である。
<皮膚常在微生物採取用粘着テープ>
 本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープは、皮膚表面の皮膚常在微生物の採取に用いられる皮膚常在微生物採取用粘着テープであって、基材と、該基材の表面の少なくとも一部に設けられた粘着剤層とを有する。そして、粘着剤層は粘着剤を含み、該粘着剤はゴム系粘着剤を含む。また、皮膚常在微生物採取用粘着テープを、JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、被着体ベークライト板、圧着方法2kgローラー1往復、引張速度300mm/分、引張角度90°で測定したときの粘着力が10.0N以上であり、JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、シリコーン処理を施した上質紙を剥離紙として用い、引張速度300mm/分、引張角度180°で測定したときの剥離力が0.25N以上である。
 このような本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープについて、図1を用いて詳細に説明する。図1は本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープの一例を示す斜視図である。
 本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープ1は、図1に示すように、基材2と、基材2の表面に設けられた粘着剤層3とを有する。図1において、基材2の一方の表面の全部に粘着剤層3を有するものを示したが、粘着剤層3は基材2の表面の少なくとも一部に設けられていればよく、例えば基材2の表面の一部に粘着剤層3が設けられておらず基材2が露出していてもよい。
 粘着剤層3は、粘着剤を含み、該粘着剤はゴム系粘着剤を含む。
 粘着剤層3に含まれるゴム系粘着剤は、天然ゴム及び合成ゴムから選択される1種又は2種以上でよいが、天然ゴムを含むことが好ましい。
 そして、本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープは、JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、被着体ベークライト板、圧着方法2kgローラー1往復、引張速度300mm/分、引張角度90°で測定したときの粘着力(以下、単に「粘着力」とも記載する)が10.0N以上であり、11.0N以上が好ましく、12.0N以上がより好ましく、13.0N以上がさらに好ましい。粘着力の上限は特に限定されないが、例えば、20.0N以下であり、19.0N以下が好ましく、18.0N以下がより好ましく、17.0N以下がさらに好ましい。
 また、本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープは、JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、シリコーン処理を施した上質紙を剥離紙として用い、引張速度300mm/分、引張角度180°で測定したときの剥離力(以下、単に「剥離力」とも記載する)が0.25N以上であり、0.26N以上が好ましく、0.27N以上がより好ましく、0.28N以上がさらに好ましい。剥離力の上限は特に限定されないが、例えば、0.50N以下であり、0.45N以下が好ましく、0.40N以下がより好ましく、0.35N以下がさらに好ましい。
 このように、ゴム系粘着剤を含む粘着剤層3を有し、粘着力が10.0N以上且つ剥離力が0.25N以上である皮膚常在微生物採取用粘着テープとすることにより、後述する実施例及び比較例に示すように、従来のテープと比べて皮膚表面の皮膚常在微生物の採取量を向上することができる。したがって、このようなゴム系粘着剤を含む粘着剤層を有し粘着力が10.0N以上且つ剥離力が0.25N以上である皮膚常在微生物採取用粘着テープを用いて皮膚表面の皮膚常在微生物を採取すると、例えば皮膚表面の皮膚常在微生物を良好に採取できるスワブ(綿棒)を用いて皮膚表面の皮膚常在微生物を湿式に採取した場合と比べて遜色がない。また、テープによる採取のため、採取手技が容易である。
 本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープの厚みは特に限定されないが、例えば、0.01mm以上であり、0.10mm以上や0.20mm以上であってもよい。また、厚みの上限も特に限定されないが、例えば、0.50mm以下であり、0.40mm以下や0.30mm以下であってもよい。
 本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープで皮膚微生物叢を採取する箇所は、特に限定されず、例えば、顔面、頭皮、脇、臍が挙げられ、中でも顔面、特に額が好ましい。
 また、本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープは、皮脂量が75以上である皮膚表面の皮膚常在微生物の採取に用いられることが好ましい。本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープは、皮脂量が75以上である皮膚表面の皮膚常在微生物の採取量を極めて向上することができる。勿論、皮脂量が75未満である皮膚表面の皮膚常在微生物の採取に用いてもよい。なお、被験者の皮膚表面の皮脂量は環境や体調等で変化するため、例えば、皮脂量が75以上である皮膚表面の皮膚常在微生物を採取する場合であっても、幅広い被験者から採取することができる。
 本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープで採取される皮膚常在微生物は、特に限定されず、細菌又は真菌であってよく、中でも細菌が好ましい。皮膚常在微生物の具体例として、例えば、Actinobacteria門に属する細菌、Proteobacteria門に属する細菌及びFirmicutes門に属する細菌、Propionibacterium acnes(P.acnes)(近年は Cutibacterium acnes ともいう)菌が挙げられる。
 なお、本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープで皮膚表面の皮膚常在微生物を採取した後、皮膚常在微生物採取用粘着テープを保管する場合(例えば、皮膚常在微生物採取用粘着テープで皮膚表面の皮膚常在微生物を採取した後、しばらくしてから、採取された皮膚微生物叢を解析する場合)、皮膚常在微生物が採取された状態の皮膚常在微生物採取用粘着テープを保管する温度は特に限定されず、常温で保存してもよく、冷蔵又は冷凍して保存してもよい。
<皮膚常在微生物採取用粘着テープの用途>
 本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープは、被験者の身体状態を評価する方法に用いることができる。該被験者の身体状態を評価する方法は、身体状態との相関性基準が作成済みである、皮膚表面の皮膚常在微生物の存在割合又は存在割合に基づくパラメータについて、被験者の皮膚表面から採取した皮膚微生物叢の値を決定し、相関性基準と対比する工程を有し、被験者の皮膚表面から採取した皮膚微生物叢は、皮膚表面の皮膚常在微生物を、上記本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープを用いて採取されるものである。
 これにより、種々の身体状態を的確に評価することができる。また、従来、一括りにされていた、ある身体状態を、皮膚常在微生物の存在割合又はパラメータの値によって細分化でき、これにより、被験者の身体状態の改善をより高確度に行うことが期待される。そして、上記皮膚常在微生物採取用粘着テープを用いることにより、皮膚表面の皮膚常在微生物の採取量が向上するため、身体状態を高精度で評価することができる。
 また、本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープは、被験者に情報を提示する方法に用いることができる。該被験者に情報を提示する方法は、上記被験者の身体状態を評価する方法により、被験者の身体状態を評価する工程と、身体状態が目標状態にないと評価された場合、身体状態が目標状態にあるときに相関性基準に基づいて存在割合又はパラメータが示す数値範囲の方に、存在割合又はパラメータの値を誘導可能な成分としてデータベースに登録されている情報を提示する工程と、を有する方法である。
 これにより、身体状態の改善等に関する情報を、被験者にパーソナライズして提示することができる。なお、ここでいう情報は、成分又は成分含有製剤の名前、成分・製剤の用法・用量、身体状態の期待される改善の仕方や程度、副作用等を指す。
 被験者に情報を提示する方法では、成分を摂取した後の被験者の身体状態を上記被験者の身体状態を評価する方法により再度評価する工程と、再度評価した身体状態の改善の程度に基づき、情報をアップデートする工程と、をさらに有することが好ましい。
 これにより、データベース内の情報が改良され、身体状態の改善の確度等をより高めることが期待される。
 再度評価のタイミングは、特に限定されず、例えば、成分使用後に身体状態の改善が期待される(データベース内の情報に含まれ得る)時間が経過した時であってよい。
 また、本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープは、身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法に用いることができる。該身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法は、身体状態との相関性基準が作成済みである、皮膚表面の皮膚常在微生物の存在割合又は存在割合に基づくパラメータの値に関する、候補物質による変化に基づいて、候補物質を選抜する工程を有し、皮膚表面から採取した皮膚微生物叢は、被験者の皮膚表面の皮膚常在微生物を上記皮膚常在微生物採取用粘着テープを用いて採取されるものである。
 これにより、身体状態を改善又は予防する物質を高確率でスクリーニングすることが期待される。
 なお、本発明におけるスクリーニングとは、身体状態を改善又は予防する物質の存在確率が、スクリーニング後の候補物質群においてスクリーニング前の候補物質群に比べて高まっていれば足り、スクリーニング後の候補物質が必ず身体状態を改善又は予防できることを要しない。したがって、スクリーニングされた候補物質が、身体状態を改善又は予防する効果を有することを確認する工程をさらに行うことが好ましい。
 上記各方法について、さらに具体的に説明する。
 皮膚常在微生物は、細菌又は真菌であってよく、中でも細菌が好ましい。その存在割合は、門、綱、目、科、属及び種のいずれに関してもよい。例えば、Actinobacteria門に属する細菌、Proteobacteria門に属する細菌及びFirmicutes門に属する細菌からなる群より選ばれる少なくとも1種の細菌の存在割合であってよく、中でもP. acnes 菌の存在割合が挙げられる。
 パラメータは、皮膚常在微生物の存在割合に基づく限りにおいて特に限定されず、複数の皮膚常在微生物の存在割合の差、和、積、比、指数、対数又はそれらの組合せであってよく、中でも比、差又はその組み合わせであってよい。例えば、Proteobacteria門に属する細菌種とFirmicutes門に属する細菌種の相対量の差が挙げられる。あるいは、パラメータは、皮膚常在微生物の多様性指数であってもよい。このようなパラメータは、母集団の各検体データを次元削減の手法(例えば、主座標解析、主成分解析)を用いて座標空間にプロットしたときの座標軸と相関するものであってよい。
 身体状態は、皮膚表面の皮膚常在微生物の存在割合又は存在割合に基づくパラメータとの相関性を有するものであれば特に限定されず、肌、毛髪、歯、尿、骨、内臓、血液、神経等のあらゆる箇所に関する状態であり得る。肌の状態としては、肌年齢、脂性肌、ニキビ肌、肌のそばかす、きめ、黄ばみ、かさつき、てかり、しみ、くすみ、たるみ、しわ、はりの状態、毛穴の状態、肌の黄ばみ等が挙げられる。毛髪の状態としては、薄毛、脱毛等が挙げられる。歯の状態としては、歯周病及び歯槽膿漏等が挙げられる。骨、内臓、血液、尿、神経の状態としては、肝機能、高尿酸、膝の痛み、骨粗鬆症、自律神経失調症、糖尿病等が挙げられる。その他、女性ホルモン、美容性に影響を与え得る閉経も身体状態に包含される。
 相関性基準は、皮膚微生物叢から求めた上記存在割合又はパラメータの値に基づいて、評価すべき身体状態の良好度又は重篤度を定性的又は定量的に特定可能な基準である。
 本発明者らの細菌叢の分析結果によれば、特許文献2に示されるように、顔面皮膚表面に存在する特定の常在菌として、Actinobacteria門に属する細菌の相対量、またProteobacteria門に属する細菌とFirmicutes門に属する細菌の存在量比を調べれば、ニキビや広がった毛穴等の様々な顔面皮膚状態や、歯周病や頭部の薄毛・脱毛等の顔に限局されない様々な身体症状の生じやすさを評価することができる。
 また、特定の細菌種の相対量がその他の身体症状の惹起されやすさと相関する。例えば、高尿酸値(Rothia属、Brevibacterium属、Erythrobacteraceae科、等)、骨粗鬆症(Pseudomonas 属、Methylobacterium 属)、肝機能の低下(Campylobacter属、等)、肌の黄ばみ(Bacillus属、Rothia dentocariosa 菌、等)、糖尿病(Actinomycetales目に属する細菌)等の発生が、それぞれ括弧内の細菌種の相対量と相関を示す。
 また、顔の皮膚のたるみやしわ、ハリのなさ等の有無から算出される老化肌指数は、Gammaproteobacteria 綱に属する細菌種やPropionibacterium granulosum菌等からなる「老化肌細菌」と呼びうる一群の細菌の存在量と相関を示す。
 身体状態の多くは、皮膚微生物叢だけでなく、他の事象(例えば実年齢)との相関性も有する。このため、相関性基準は、身体状態と相関することが既知の事象の少なくとも1つによる影響の排除後におけるものであることが好ましい。これにより、被験者に関する上記他の事象の有無や程度に影響を抑え、皮膚微生物叢の存在割合又はパラメータの値に基づき、より正確な身体状態の評価が可能である。
 また、被験者に情報を提示する方法においては、被験者に関する上記他の事象の有無や程度も考慮して、より適切な情報を提示することが可能である。このため、上記存在割合又はパラメータに加え、被験者に関する上記他の事象の有無や程度のインプットが好ましいことになる。
 また、身体状態を改善又は予防する物質のスクリーニング方法においては、使用者の上記他の事象にかかわらず身体状態を改善又は予防可能な物質を取得しやすくなる。
 また、相関性基準は、母集団の年齢、性別、居住地域、国籍及び人種からなる群より選ばれる少なくとも1種で分類した準母集団に関して作成されたものであってよい。これにより、被験者の年齢、性別、居住地域、国籍及び人種等までも考慮した、身体状態の正確な評価が可能である。
 また、被験者に情報を提示する方法においては、被験者の年齢、性別、居住地域、国籍及び人種も考慮して、より適切な情報を提示することが可能である。このため、上記存在割合又はパラメータに加え、被験者に関する年齢、性別、居住地域、国籍及び人種からなる群より選ばれる少なくとも1種のインプットが好ましいことになる。
 また、身体状態を改善又は予防する物質のスクリーニング方法においては、使用者の年齢、性別、居住地域、国籍及び人種に適した、身体状態を改善又は予防可能な物質を取得しやすくなる。
 皮膚微生物叢を採取する箇所は、特に限定されず、顔面、頭皮、脇、臍等であってよく、中でも顔面、特に額が挙げられる。
 皮膚微生物叢を採取する箇所は、皮脂量が75以上である皮膚表面であることが好ましい。上記皮膚常在微生物採取用粘着テープは、皮脂量が75以上である皮膚表面の皮膚常在微生物の採取量を極めて向上することができるためである。勿論、皮膚微生物叢を採取する箇所は、皮脂量が75未満であってもよい。なお、被験者の皮膚表面の皮脂量は環境や体調等で変化するため、例えば、皮膚微生物叢を採取する箇所を皮脂量が75以上である皮膚表面とする場合であっても、幅広い被験者を適用することができる。
 なお、相関性基準が作成された母集団サンプルの採取箇所と、被験者サンプルの採取箇所とは一致することが好ましい。
 被験者の皮膚表面から採取した皮膚微生物叢の値の決定は、被験者の皮膚表面から上記本発明の皮膚常在微生物採取用粘着テープを用いて採取される皮膚微生物叢を解析することにより、行われる。
 皮膚表面の細菌叢の解析は、皮膚表面に存在するDNAを解析することにより行うことが好ましい。DNAによって細菌叢を調べる方法は、皮膚表面から採取した細菌を寒天培地で培養して細菌叢を推定する方法と比べて、細菌叢をより正確に調べることができる。なぜならば、寒天で培養可能な微生物の割合は1%程度と言われており、ほとんどの微生物種は培養困難だからである。これに対して、DNAを解析する方法では、皮膚表面から採取した細菌叢をありのまま正確に分析することができる。
 このような細菌叢の解析は、
 皮膚表面に粘着剤層3を接触させた皮膚常在微生物採取用粘着テープ1を該皮膚表面から剥がして該皮膚表面に存在する細菌を該粘着剤層に付着させる剥離工程と、
 該細菌が付着した該粘着剤層3を液体と接触させて該細菌に含まれるDNAを抽出する抽出工程と、
 抽出された該DNAをゲノム解析するゲノム解析工程と、を備える方法により行うことが好ましい。
 この細菌叢の解析方法では、皮膚表面に粘着剤層3を接触させた皮膚常在微生物採取用粘着テープ1を皮膚表面から剥がして皮膚表面に存在する細菌を粘着剤層3に付着させたまま回収する(剥離工程)。これにより皮膚表面に存在する細菌のうち、粘着剤層3に接触した皮膚表面の細菌がそのままの分布で皮膚常在微生物採取用粘着テープ1の粘着剤層3側に付着し採取される。このため、綿棒で皮膚表面を掻きとったりする方法のように、掻きとられる力や掻きとられる範囲の違いによって、細菌叢のデータにバラツキが生じるというおそれがない。また、皮膚表面の細菌叢を忠実に写し取ることができる。そして、さらに細菌が付着した粘着剤層3を液体と接触させて細菌に含まれるDNAが抽出される(抽出工程)。このため、粘着剤層の表面に付着した物質を拡大鏡等を用いて分別して試料に供する方法と比較して、細菌が付着した粘着部材から極めて迅速に細菌叢を測定可能なDNA溶液の状態にすることができる。このため、試料採取のための経過時間中に細菌叢が変化するのを最小限とすることができる。そして、抽出されたDNAを次世代シーケンサー(NGS)等により解析すれば、皮膚表面に存在する細菌叢を簡便、均一に測定することができる。
 なお、DNAの抽出手段及び解析手段は特に限定されない。
<皮膚代謝物採取用粘着テープ>
 本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープは、皮膚表面の皮膚代謝物の採取に用いられる皮膚代謝物採取用粘着テープであって、基材と、該基材の表面の少なくとも一部に設けられた粘着剤層とを有する。そして、粘着剤層は粘着剤を含み、該粘着剤はゴム系粘着剤を含む。また、皮膚代謝物採取用粘着テープを、JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、被着体ベークライト板、圧着方法2kgローラー1往復、引張速度300mm/分、引張角度90°で測定したときの粘着力が10.0N以上であり、JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、シリコーン処理を施した上質紙を剥離紙として用い、引張速度300mm/分、引張角度180°で測定したときの剥離力が0.25N以上である。
 このような本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープは、上記皮膚常在微生物採取用粘着テープ1と同様の構成である。
 本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープは、基材と、基材の表面に設けられた粘着剤層とを有する。粘着剤層は基材の表面の少なくとも一部に設けられていればよく、例えば、基材の一方の表面の全部に粘着剤層を有していてもよく、また、基材の表面の一部に粘着剤層が設けられておらず基材が露出していてもよい。
 粘着剤層は、粘着剤を含み、該粘着剤はゴム系粘着剤を含む。
 粘着剤層に含まれるゴム系粘着剤は、天然ゴム及び合成ゴムから選択される1種又は2種以上でよいが、天然ゴムを含むことが好ましい。
 そして、本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープは、JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、被着体ベークライト板、圧着方法2kgローラー1往復、引張速度300mm/分、引張角度90°で測定したときの粘着力(以下、単に「粘着力」とも記載する)が10.0N以上であり、11.0N以上が好ましく、12.0N以上がより好ましく、13.0N以上がさらに好ましい。粘着力の上限は特に限定されないが、例えば、20.0N以下であり、19.0N以下が好ましく、18.0N以下がより好ましく、17.0N以下がさらに好ましい。
 また、本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープは、JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、シリコーン処理を施した上質紙を剥離紙として用い、引張速度300mm/分、引張角度180°で測定したときの剥離力(以下、単に「剥離力」とも記載する)が0.25N以上であり、0.26N以上が好ましく、0.27N以上がより好ましく、0.28N以上がさらに好ましい。剥離力の上限は特に限定されないが、例えば、0.50N以下であり、0.45N以下が好ましく、0.40N以下がより好ましく、0.35N以下がさらに好ましい。
 このように、ゴム系粘着剤を含む粘着剤層を有し、粘着力が10.0N以上且つ剥離力が0.25N以上である皮膚代謝物採取用粘着テープとすることにより、皮膚表面、具体的には皮膚上や皮膚表面の皮膚内の代謝物を良好に採取できる。そして、当該皮膚代謝物採取用粘着テープを用いると、従来のテープを用いた場合と比べて皮膚表面の代謝物の採取量が極めて多い。したがって、このようなゴム系粘着剤を含む粘着剤層を有し粘着力が10.0N以上且つ剥離力が0.25N以上である皮膚代謝物採取用粘着テープを用いて皮膚表面の皮膚代謝物を採取すると、例えば皮膚表面の皮膚代謝物を良好に採取できるスワブ(綿棒)を用いて皮膚表面の皮膚代謝物を湿式に採取した場合と比べて遜色がない。また、テープによる採取のため、採取手技が容易である。
 本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープの厚みは特に限定されないが、例えば、0.01mm以上であり、0.10mm以上や0.20mm以上であってもよい。また、厚みの上限も特に限定されないが、例えば、0.50mm以下であり、0.40mm以下や0.30mm以下であってもよい。
 本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープで皮膚代謝物を採取する箇所は、特に限定されず、例えば、顔面、頭皮、脇、臍が挙げられ、中でも顔面、特に額が好ましい。
 また、本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープは、皮脂量が75以上である皮膚表面の皮膚代謝物の採取に用いられることが好ましい。本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープは、皮脂量が75以上である皮膚表面の皮膚代謝物の採取量を極めて向上することができる。勿論、皮脂量が75未満である皮膚表面の皮膚代謝物の採取に用いてもよい。なお、被験者の皮膚表面の皮脂量は環境や体調等で変化するため、例えば、皮脂量が75以上である皮膚表面の皮膚代謝物を採取する場合であっても、幅広い被験者から採取することができる。
 本発明の皮膚代謝物皮膚常在微生物採取用粘着テープで採取される皮膚代謝物は、特に限定されないが、例えば、可溶性タンパク質である。
 本発明の実施形態において、可溶性タンパク質の総量は、例えば生化学的定量分析(BCA法等)によって計測することができる。また、個々の可溶性タンパク質の同定や定量は、例えば抗体を用いた生化学的手法(ウェスタンブロッティング法やELISA法等)や質量分析器によって行うことができる。
 なお、本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープで皮膚表面の皮膚代謝物を採取した後、皮膚代謝物採取用粘着テープを保管する場合(例えば、皮膚代謝物採取用粘着テープで皮膚表面の皮膚代謝物を採取した後、しばらくしてから、採取された皮膚代謝物を解析する場合)、皮膚代謝物が採取された状態の皮膚代謝物採取用粘着テープを保管する温度は特に限定されず、常温で保存してもよく、冷蔵又は冷凍して保存してもよい。
<皮膚代謝物採取用粘着テープの用途>
 本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープは、被験者の身体状態を評価する方法に用いることができる。該被験者の身体状態を評価する方法は、身体状態との相関性基準が作成済みである、皮膚表面の皮膚代謝物の存在割合又は存在割合に基づくパラメータについて、被験者の皮膚表面から採取した皮膚代謝物の値を決定し、相関性基準と対比する工程を有し、被験者の皮膚表面から採取した皮膚代謝物は、皮膚表面の皮膚代謝物を、上記本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープを用いて採取されるものである。
 これにより、種々の身体状態を的確に評価することができる。また、従来、一括りにされていた、ある身体状態を、皮膚代謝物の存在割合又はパラメータの値によって細分化でき、これにより、被験者の身体状態の改善をより高確度に行うことが期待される。そして、上記皮膚代謝物採取用粘着テープを用いることにより、皮膚表面の皮膚代謝物の採取量が良好であるため、身体状態を高精度で評価することができる。
 また、本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープは、被験者に情報を提示する方法に用いることができる。該被験者に情報を提示する方法は、上記被験者の身体状態を評価する方法により、被験者の身体状態を評価する工程と、身体状態が目標状態にないと評価された場合、身体状態が目標状態にあるときに相関性基準に基づいて存在割合又はパラメータが示す数値範囲の方に、存在割合又はパラメータの値を誘導可能な成分としてデータベースに登録されている情報を提示する工程と、を有する方法である。
 これにより、身体状態の改善等に関する情報を、被験者にパーソナライズして提示することができる。なお、ここでいう情報は、成分又は成分含有製剤の名前、成分・製剤の用法・用量、身体状態の期待される改善の仕方や程度、副作用等を指す。
 被験者に情報を提示する方法では、成分を摂取した後の被験者の身体状態を上記被験者の身体状態を評価する方法により再度評価する工程と、再度評価した身体状態の改善の程度に基づき、情報をアップデートする工程と、をさらに有することが好ましい。
 これにより、データベース内の情報が改良され、身体状態の改善の確度等をより高めることが期待される。
 再度評価のタイミングは、特に限定されず、例えば、成分使用後に身体状態の改善が期待される(データベース内の情報に含まれ得る)時間が経過した時であってよい。
 また、本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープは、身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法に用いることができる。該身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法は、身体状態との相関性基準が作成済みである、皮膚表面の皮膚代謝物の存在割合又は存在割合に基づくパラメータの値に関する、候補物質による変化に基づいて、候補物質を選抜する工程を有し、皮膚表面から採取した皮膚代謝物は、被験者の皮膚表面の皮膚代謝物を上記皮膚代謝物採取用粘着テープを用いて採取されるものである。
 これにより、身体状態を改善又は予防する物質を高確率でスクリーニングすることが期待される。
 なお、本発明におけるスクリーニングとは、身体状態を改善又は予防する物質の存在確率が、スクリーニング後の候補物質群においてスクリーニング前の候補物質群に比べて高まっていれば足り、スクリーニング後の候補物質が必ず身体状態を改善又は予防できることを要しない。したがって、スクリーニングされた候補物質が、身体状態を改善又は予防する効果を有することを確認する工程をさらに行うことが好ましい。
 上記各方法について、さらに具体的に説明する。
 パラメータは、皮膚代謝物の存在割合に基づく限りにおいて特に限定されず、複数の皮膚代謝物の存在割合の差、和、積、比、指数、対数又はそれらの組合せであってよく、中でも比、差又はその組み合わせであってよい。あるいは、パラメータは、皮膚代謝物の多様性指数であってもよい。このようなパラメータは、母集団の各検体データを次元削減の手法(例えば、主座標解析、主成分解析)を用いて座標空間にプロットしたときの座標軸と相関するものであってよい。
 身体状態は、皮膚表面の皮膚代謝物の存在割合又は存在割合に基づくパラメータとの相関性を有するものであれば特に限定されず、肌、毛髪、歯、尿、骨、内臓、血液、神経等のあらゆる箇所に関する状態であり得る。肌の状態としては、肌年齢、脂性肌、ニキビ肌、肌のそばかす、きめ、黄ばみ、かさつき、てかり、しみ、くすみ、たるみ、しわ、はりの状態、毛穴の状態、肌の黄ばみ等が挙げられる。毛髪の状態としては、薄毛、脱毛等が挙げられる。歯の状態としては、歯周病及び歯槽膿漏等が挙げられる。骨、内臓、血液、尿、神経の状態としては、肝機能、高尿酸、膝の痛み、骨粗鬆症、自律神経失調症、糖尿病等が挙げられる。その他、女性ホルモン、美容性に影響を与え得る閉経も身体状態に包含される。
 相関性基準は、皮膚代謝物から求めた上記存在割合又はパラメータの値に基づいて、評価すべき身体状態の良好度又は重篤度を定性的又は定量的に特定可能な基準である。
 身体状態の多くは、皮膚代謝物だけでなく、他の事象(例えば実年齢)との相関性も有する。このため、相関性基準は、身体状態と相関することが既知の事象の少なくとも1つによる影響の排除後におけるものであることが好ましい。これにより、被験者に関する上記他の事象の有無や程度に影響を抑え、皮膚代謝物の存在割合又はパラメータの値に基づき、より正確な身体状態の評価が可能である。
 また、被験者に情報を提示する方法においては、被験者に関する上記他の事象の有無や程度も考慮して、より適切な情報を提示することが可能である。このため、上記存在割合又はパラメータに加え、被験者に関する上記他の事象の有無や程度のインプットが好ましいことになる。
 また、身体状態を改善又は予防する物質のスクリーニング方法においては、使用者の上記他の事象にかかわらず身体状態を改善又は予防可能な物質を取得しやすくなる。
 また、相関性基準は、母集団の年齢、性別、居住地域、国籍及び人種からなる群より選ばれる少なくとも1種で分類した準母集団に関して作成されたものであってよい。これにより、被験者の年齢、性別、居住地域、国籍及び人種等までも考慮した、身体状態の正確な評価が可能である。
 また、被験者に情報を提示する方法においては、被験者の年齢、性別、居住地域、国籍及び人種も考慮して、より適切な情報を提示することが可能である。このため、上記存在割合又はパラメータに加え、被験者に関する年齢、性別、居住地域、国籍及び人種からなる群より選ばれる少なくとも1種のインプットが好ましいことになる。
 また、身体状態を改善又は予防する物質のスクリーニング方法においては、使用者の年齢、性別、居住地域、国籍及び人種に適した、身体状態を改善又は予防可能な物質を取得しやすくなる。
 皮膚代謝物を採取する箇所は、特に限定されず、顔面、頭皮、脇、臍等であってよく、中でも顔面、特に額が挙げられる。
 皮膚代謝物を採取する箇所は、皮脂量が75以上である皮膚表面であることが好ましい。上記皮膚代謝物採取用粘着テープは、皮脂量が75以上である皮膚表面の皮膚代謝物の採取量を極めて向上することができるためである。勿論、皮膚代謝物を採取する箇所は、皮脂量が75未満であってもよい。なお、被験者の皮膚表面の皮脂量は環境や体調等で変化するため、例えば、皮膚代謝物を採取する箇所を皮脂量が75以上である皮膚表面とする場合であっても、幅広い被験者を適用することができる。
 なお、相関性基準が作成された母集団サンプルの採取箇所と、被験者サンプルの採取箇所とは一致することが好ましい。
 被験者の皮膚表面から採取した皮膚代謝物の値の決定は、被験者の皮膚表面から上記本発明の皮膚代謝物採取用粘着テープを用いて採取される皮膚代謝物の量から、同時に採取される細菌に由来する皮膚代謝物の量を除いた値として算出することが好ましい。なお、採取される細菌に由来する皮膚代謝物の量は、採取される皮膚代謝物の量と比べて、極少量であるため、採取した皮膚代謝物の値をそのまま身体状態の評価に用いてもよい。詳述すると、皮膚代謝物採取用粘着テープで採取された可溶性タンパク質は、そのほとんどがヒト皮膚細胞に由来するタンパク質であると考えられる。なぜならば、皮膚代謝物採取用粘着テープに付着した細菌の量(16S rRNAのqPCR計測で求められる。)から、細菌に由来する総タンパク質の量は、皮膚代謝物採取用粘着テープ1枚当たり0.1μg以下と概算されるからである。なお、この計算には、1細菌に含まれる16S rRNA遺伝子の数はおおよそ4、タンパク質の総量はおおよそ0.1pgという公知の値を使用した。
 具体的には、まず、皮膚表面に粘着剤層を接触させた皮膚代謝物採取用粘着テープを皮膚表面から剥がして皮膚表面に存在する皮膚代謝物を粘着剤層に付着させたまま回収する(剥離工程)。これにより皮膚表面に存在する皮膚代謝物のうち、粘着剤層に接触した皮膚表面の皮膚代謝物がそのままの分布で皮膚代謝物採取用粘着テープの粘着剤層側に付着し採取される。このため、綿棒で皮膚表面を掻きとったりする方法のように、掻きとられる力や掻きとられる範囲の違いによって、皮膚代謝物のデータにバラツキが生じるというおそれがない。また、皮膚表面の皮膚代謝物を忠実に写し取ることができる。
 そして、さらに皮膚代謝物が付着した粘着剤層を液体(例えば、PBS:リン酸緩衝液)と接触させて、必要に応じて超音波処理等して、皮膚代謝物を抽出する(抽出工程)。このため、粘着剤層の表面に付着した物質を拡大鏡等を用いて分別して試料に供する方法と比較して、皮膚代謝物が付着した粘着部材から極めて迅速に皮膚代謝物を測定可能な溶液の状態にすることができる。このため、試料採取のための経過時間中に皮膚代謝物が変化するのを最小限とすることができる。そして、抽出された皮膚代謝物を、市販の可溶性タンパク質測定キット等により解析すれば、皮膚表面に存在する可溶性タンパク質等の量を簡便、均一に測定することができる。
 なお、皮膚代謝物の抽出手段及び解析手段は特に限定されない。
 以下、本発明を実施例に基づきさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
<<皮膚常在微生物採取用粘着テープ>>
 <実施例1>
 (細菌叢の採取及び全DNA量の測定)
 被験者A~Eそれぞれについて、細菌叢の採取を行った。
 細菌叢の採取及び全DNA量の測定は図2に示すフローチャートに従って行った。
・接触工程S1及び剥離工程S2
 図1に示す皮膚常在微生物採取用粘着テープ1を用意する。この皮膚常在微生物採取用粘着テープ1は、ベースとなる薄片状のテープ基材2に粘着剤からなる粘着剤層3が設けられた構造とされている。このため、通常の絆創膏やドレッシングテープと同様にして、ヒトの皮膚に貼付けることによって、簡単に接触工程S1を行うことができる。皮膚常在微生物採取用粘着テープ1は図示しない剥離紙に貼り付けられており、密封可能な乾燥剤入りのアルミ袋に封入された状態でラテックス手袋と共に被験者に送付された。被験者は、起床直後洗顔前にラテックス手袋を装着し、アルミ袋を開封して皮膚常在微生物採取用粘着テープ1が貼られた剥離紙を取り出し、皮膚常在微生物採取用粘着テープ1を剥がして被験者の額に貼り付ける。そして、5分間接着させた状態を保ったのち、皮膚常在微生物採取用粘着テープ1を剥がし、剥離紙の上に張り戻し、これを乾燥剤と共にアルミ袋に入れて密封した。その後、DNA解析試験を行うまでの間冷凍保存した。なお、皮膚常在微生物採取用粘着テープ1の基材及び粘着剤の種類を、表1に示す。
 ・抽出工程S3
 DNAの抽出は、森田らの方法(MicrobesEnviron. Vol22,No.3,214-222, 2007)に従って皮膚常在微生物採取用粘着テープ1から直接行い、DNA溶液を調製した。そしてDNA溶液から、全DNA量を測定した。具体的には、DNA溶液の1/20量を検体サンプルとし、KAPA SYBR(登録商標) DNAポリメラーゼ酵素が含まれたリアルタムPCR試薬(KAPA Biosystems社製、製品名:KAPA SYBR(登録商標) FAST qPCR Kit)を用い、リアルタイムPCR装置(Applied Biosystem社製、製品名:StepOnePlusTM)にて16S rRNA遺伝子を対象としたコピー数解析を実施した。また、内部標準として標的分子と同様の増幅効率を有するDNA断片を用いて、検量線を作成した。
 (皮脂量の測定)
 被験者A~Eそれぞれについて、細菌叢の採取を行った日の洗顔前に、おでこの皮脂量を測定した。まず、室温25℃±1℃にて20分間馴化した。馴化後に皮膚表面に分泌された皮脂量をセブメーター(Courage+Khazaka社製、製品名:Sebmeter SM815)にて測定した。具体的には、右頬骨頭頂部に30秒間セブメーターを押し当て、隣接箇所の皮脂量を3回測定し、3回の測定値の平均を皮脂量とした。また、測定箇所に黒子や炎症がある場合は避けて測定した。なお、皮脂量は、肌質における分類がなされており、頬における皮脂量は、70以下は「乾燥・皮脂少ない」、70-180は「正常」、180以上は「脂性」を示す。
 この結果、皮脂量は、被験者Aが146.3、被験者Bが137.0、被験者Cが104.7、被験者Dが82.7、被験者Eが76.3であった。
 (皮膚常在微生物採取用粘着テープ1の粘着力の測定)
 皮膚常在微生物採取用粘着テープ1から幅12mmの試験片10を作成した。この試験片10を用い、JIS Z 0237:2009に準拠して、粘着力を測定した。具体的には、基材1及び粘着剤層3からなる皮膚常在微生物採取用粘着テープ1から作成した試験片10を、被着体11としてのベークライト板に、粘着剤層3が被着体11側になるようにして、2kgローラーを1往復させてラミネートした。そして、図3に示すように、JIS B7721:2009に準じた引張試験機を用いて、引張速度300mm/分、引張角度90°で、粘着力を測定した。
 (皮膚常在微生物採取用粘着テープ1の剥離力の測定)
 皮膚常在微生物採取用粘着テープ1から幅12mmの試験片20を作成した。この試験片20を用い、JIS Z 0237:2009に準拠して、剥離力を測定した。具体的には、基材1及び粘着剤層3からなる皮膚常在微生物採取用粘着テープ1から作成した試験片20を、剥離紙21としてのシリコーン処理を施した上質紙に、粘着剤層3が剥離紙21のシリコーン処理を施した表面側になるようにして、張り付けた。そして、図4に示すように、補助板22上に載置して、JIS B7721:2009に準じた引張試験機を用いて、引張速度300mm/分、引張角度180°で、剥離力を測定した。
 <比較例1~6>
 皮膚常在微生物採取用粘着テープ1を、表1に記載のものに変更したこと以外は、実施例1と同様の操作を行った。なお、比較例5は、実施例1の皮膚常在微生物採取用粘着テープの両面に比較例4の皮膚常在微生物採取用粘着テープを貼付したものである。
 皮膚常在微生物採取用粘着テープ1の粘着力及び剥離力の測定結果、皮膚常在微生物採取用粘着テープ1の厚みを表1に示す。
 また、全DNA量について、被験者Aの測定結果を図5に、被験者Bの測定結果を図6に、被験者Cの測定結果を図7に、被験者Dの測定結果を図8に、被験者Eの測定結果を図9に示す。
 この結果、表1及び図5~9に示すように、粘着剤層がゴム系粘着剤を含み、粘着力が10N/12mm以上で、剥離力が0.25N/mm以上である皮膚常在微生物採取用粘着テープを用いた実施例1は、比較例1~6と比べて、全DNA量が極めて高かった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
<<皮膚代謝物採取用粘着テープ>>
 (可溶性タンパク質の採取及び可溶性タンパク質の量の測定)
 被験者A、C~Eそれぞれについて、以下の工程S1及びS2により、可溶性タンパク質の採取を行い、以下の工程S3により可溶性タンパク質を抽出して、可溶性タンパク質の量を測定した。
・接触工程S1及び剥離工程S2
 上記実施例1で用いた皮膚常在微生物採取用粘着テープ1を、皮膚代謝物採取用粘着テープとする。この皮膚代謝物採取用粘着テープ(皮膚常在微生物採取用粘着テープ1)は、上記のとおり、ベースとなる薄片状のテープ基材に粘着剤からなる粘着剤層が設けられた構造とされている。このため、通常の絆創膏やドレッシングテープと同様にして、ヒトの皮膚に貼付けることによって、簡単に接触工程S1を行うことができる。皮膚代謝物採取用粘着テープは剥離紙に貼り付けられており、密封可能な乾燥剤入りのアルミ袋に封入された状態でラテックス手袋と共に被験者に送付された。被験者は、起床直後洗顔前にラテックス手袋を装着し、アルミ袋を開封して皮膚代謝物採取用粘着テープが貼られた剥離紙を取り出し、皮膚代謝物採取用粘着テープを剥がして被験者の額に貼り付ける。そして、5分間接着させた状態を保ったのち、皮膚代謝物採取用粘着テープを剥がし、剥離紙の上に張り戻し、これを乾燥剤と共にアルミ袋に入れて密封した。その後、可溶性タンパク質量の測定を行うまでの間冷凍保存した。
 ・抽出工程S3
 上記接触工程S1及び剥離工程S2で得られた皮膚代謝物採取用粘着テープ及びコントロールとして皮膚代謝物の付着していない皮膚代謝物採取用粘着テープを、PBS(富士フィルム和光純薬社製)を2mL添加した容器に入れ、容器を15分間超音波破砕処理した。超音波破砕処理は、超音波破砕機(Bioruptor(登録商標)Pico、diagenode社製)を用い、15秒オンおよび15秒間オフを30サイクル行った。
 ・ヒト皮膚細胞に由来する可溶性タンパク質の量の算出
 抽出工程S3で得られた超音波破砕処理液、測定キット:Micro BCA Protein Assay Kit(Thermo Fisher Scientific社製)及び測定機器:Nanodrop ND-1000(Thermo Fisher Scientific社製)を用いて、562nm spectrophotometerの条件で、可溶性タンパク質の総量を測定した。
 また、皮膚代謝物採取用粘着テープにより同時に採取される、細菌に由来する可溶性タンパク質の量を、16S rRNA遺伝子コピー数÷単位細菌あたり16S rRNA保有数(3.5)×単位細菌あたりタンパク質保有量(0.1pg)で算出した。この結果、実施例及び比較例とも、テープ1枚当たりの細菌に由来する可溶性タンパク質の量は、0.04μg以下と僅少量であった。
 上記接触工程S1及び剥離工程S2で得られた皮膚代謝物採取用粘着テープから抽出された可溶性タンパク質の総量から、皮膚代謝物の付着していない皮膚代謝物採取用粘着テープより抽出されたタンパク質の量及び細菌に由来すると推計される可溶性タンパク質の量を除いた値を、ヒト皮膚細胞に由来する可溶性タンパク質の量とした。
 (皮脂量の測定)
 被験者A、C~Eそれぞれについて、皮膚代謝物の採取を行った日の洗顔前に、おでこの皮脂量を測定した。まず、室温25℃±1℃にて20分間馴化した。馴化後に皮膚表面に分泌された皮脂量をセブメーター(Courage+Khazaka社製、製品名:Sebmeter SM815)にて測定した。具体的には、右頬骨頭頂部に30秒間セブメーターを押し当て、隣接箇所の皮脂量を3回測定し、3回の測定値の平均を皮脂量とした。また、測定箇所に黒子や炎症がある場合は避けて測定した。なお、皮脂量は、肌質における分類がなされており、頬における皮脂量は、70以下は「乾燥・皮脂少ない」、70-180は「正常」、180以上は「脂性」を示す。
 この結果、皮脂量は、被験者Aが146.3、被験者Cが104.7、被験者Dが61.3、被験者Eが74.0であった。
 また、皮膚代謝物採取用粘着テープを、実施例1で用いた皮膚常在微生物採取用粘着テープの代わりに、表1に記載の比較例1、2及び6ものに変更したこと以外は、上記と同様の操作を行った。
 抽出された可溶性タンパク質の総量、及びヒト皮膚細胞に由来すると考えられる可溶性タンパク質の量について、被験者Aの結果を表2に、被験者Cの結果を表3に、被験者Dの結果を表4に、被験者Eの結果を表5に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
 この結果、表1及び図5~9に示すように、粘着剤層がゴム系粘着剤を含み、粘着力が10N/12mm以上で、剥離力が0.25N/mm以上である皮膚常在微生物採取用粘着テープを用いた実施例1は、比較例1~6と比べて、全DNA量が極めて高かった。
 また、表2~5に示すように、粘着剤層がゴム系粘着剤を含み、粘着力が10N/12mm以上で、剥離力が0.25N/mm以上である皮膚代謝物採取用粘着テープを用いた実施例1は、比較例1、2及び6と比べて、可溶性タンパク質の量が極めて高かった。
 1 皮膚常在微生物採取用粘着テープ
 2 基材
 3 粘着剤層

Claims (17)

  1.  皮膚表面の皮膚常在微生物の採取に用いられる皮膚常在微生物採取用粘着テープであって、
     基材と、該基材の表面の少なくとも一部に設けられた粘着剤層とを有し、
     前記粘着剤層は粘着剤を含み、前記粘着剤はゴム系粘着剤を含み、
     JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、被着体ベークライト板、圧着方法2kgローラー1往復、引張速度300mm/分、引張角度90°で測定したときの粘着力が10.0N以上であり、
     JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、シリコーン処理を施した上質紙を剥離紙として用い、引張速度300mm/分、引張角度180°で測定したときの剥離力が0.25N以上である、皮膚常在微生物採取用粘着テープ。
  2.  前記ゴム系粘着剤は天然ゴムを含む、請求項1に記載の皮膚常在微生物採取用粘着テープ。
  3.  皮脂量が75以上である前記皮膚表面の皮膚常在微生物の採取に用いられる、請求項1又は2に記載の皮膚常在微生物採取用粘着テープ。
  4.  被験者の身体状態を評価する方法であって、
     前記身体状態との相関性基準が作成済みである、皮膚表面の皮膚常在微生物の存在割合又は前記存在割合に基づくパラメータについて、被験者の皮膚表面から採取した皮膚微生物叢の値を決定し、前記相関性基準と対比する工程を有し、
     前記被験者の皮膚表面から採取した皮膚微生物叢は、皮膚表面の皮膚常在微生物を請求項1~3のいずれか1項に記載の皮膚常在微生物採取用粘着テープを用いて採取されるものである、方法。
  5.  前記皮膚微生物叢を採取する前記皮膚表面の皮脂量が75以上である、請求項4に記載の方法。
  6.  被験者に情報を提示する方法であって、
     請求項4又は5に記載の方法により、被験者の身体状態を評価する工程と、
     前記身体状態が目標状態にないと評価された場合、前記身体状態が目標状態にあるときに前記相関性基準に基づいて前記存在割合又は前記パラメータが示す数値範囲の方に、前記存在割合又は前記パラメータの値を誘導可能な成分としてデータベースに登録されている情報を提示する工程と、を有する方法。
  7.  前記成分を摂取した後の被験者の身体状態を請求項4又は5に記載の方法により再度評価する工程と、
     前記再度評価した身体状態の改善の程度に基づき、前記情報をアップデートする工程と、をさらに有する請求項6に記載の方法。
  8.  身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法であって、
     前記身体状態との相関性基準が作成済みである、皮膚表面の皮膚常在微生物の存在割合又は前記存在割合に基づくパラメータの値に関する、候補物質による変化に基づいて、前記候補物質を選抜する工程を有し、
     前記皮膚表面から採取した皮膚微生物叢は、被験者の皮膚表面の皮膚常在微生物を請求項1~3のいずれか1項に記載の皮膚常在微生物採取用粘着テープを用いて採取されるものである、方法。
  9.  皮膚表面の皮膚代謝物の採取に用いられる皮膚代謝物採取用粘着テープであって、
     基材と、該基材の表面の少なくとも一部に設けられた粘着剤層とを有し、
     前記粘着剤層は粘着剤を含み、前記粘着剤はゴム系粘着剤を含み、
     JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、被着体ベークライト板、圧着方法2kgローラー1往復、引張速度300mm/分、引張角度90°で測定したときの粘着力が10.0N以上であり、
     JIS Z 0237:2009にて、試験片12mm幅、シリコーン処理を施した上質紙を剥離紙として用い、引張速度300mm/分、引張角度180°で測定したときの剥離力が0.25N以上である、皮膚代謝物採取用粘着テープ。
  10.  前記ゴム系粘着剤は天然ゴムを含む、請求項9に記載の皮膚代謝物採取用粘着テープ。
  11.  皮脂量が75以上である前記皮膚表面の皮膚代謝物の採取に用いられる、請求項9又は10に記載の皮膚代謝物採取用粘着テープ。
  12.  前記皮膚代謝物が、可溶性タンパク質である、請求項9~11のいずれか1項に記載の皮膚代謝物採取用粘着テープ。
  13.  被験者の身体状態を評価する方法であって、
     前記身体状態との相関性基準が作成済みである、皮膚表面の皮膚代謝物の存在割合又は前記存在割合に基づくパラメータについて、被験者の皮膚表面から採取した皮膚代謝物の値を決定し、前記相関性基準と対比する工程を有し、
     前記被験者の皮膚表面から採取した皮膚代謝物は、皮膚表面の皮膚代謝物を請求項9~12のいずれか1項に記載の皮膚代謝物採取用粘着テープを用いて採取されるものである、方法。
  14.  前記皮膚代謝物を採取する前記皮膚表面の皮脂量が75以上である、請求項13に記載の方法。
  15.  被験者に情報を提示する方法であって、
     請求項13又は14に記載の方法により、被験者の身体状態を評価する工程と、
     前記身体状態が目標状態にないと評価された場合、前記身体状態が目標状態にあるときに前記相関性基準に基づいて前記存在割合又は前記パラメータが示す数値範囲の方に、前記存在割合又は前記パラメータの値を誘導可能な成分としてデータベースに登録されている情報を提示する工程と、を有する方法。
  16.  前記成分を摂取した後の被験者の身体状態を請求項13又は14に記載の方法により再度評価する工程と、
     前記再度評価した身体状態の改善の程度に基づき、前記情報をアップデートする工程と、をさらに有する請求項15に記載の方法。
  17.  身体状態を改善又は予防する物質をスクリーニングする方法であって、
     前記身体状態との相関性基準が作成済みである、皮膚表面の皮膚代謝物の存在割合又は前記存在割合に基づくパラメータの値に関する、候補物質による変化に基づいて、前記候補物質を選抜する工程を有し、
     前記皮膚表面から採取した皮膚代謝物は、被験者の皮膚表面の皮膚代謝物を請求項9~12のいずれか1項に記載の皮膚代謝物採取用粘着テープを用いて採取されるものである、方法。
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