WO2019244929A1 - サバディラ種子を含む飼料添加組成物 - Google Patents

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    • Y02P60/87—Re-use of by-products of food processing for fodder production

Definitions

  • the present invention relates to an additive for poultry feed, and more particularly to an additive for controlling poultry coccidiosis by adding to feed. More specifically, the present invention relates to a feed additive composition for controlling poultry coccidiosis, comprising a Sabadilla seed, a defatted Sabadilla extract, and / or an extract residue of a Sabadilla seed, a feed containing the feed additive composition, and a Sabadilla seed, Sabadilla, The present invention relates to a method for controlling poultry coccidiosis using a defatted extract and / or an extraction residue of Sabadilla seeds.
  • Coccidiosis is one of the most important diseases in poultry, as it is endemic to all continents and causes significant economic losses to the poultry industry.
  • Coccidiosis causes severe conditions in the intestine and cecum of poultry. Coccidiosis mainly affects the upper, middle and lower parts of the small intestine, rectum, colon and cecum. Coccidiosis is caused by infection by a protozoan of the genus Eimeria (hereinafter sometimes referred to as "coccidiosis").
  • Eimeria acervulina E. acervulina
  • Eimeria brunette E. brunett
  • Eimeria maxima Eimeria maxima
  • Eimeria miberti E. mivati E. ⁇ ⁇ necatrix, E. tenella, E.
  • ⁇ ⁇ adenoeides for turkeys E. dispersa, E. ⁇ dispersa, E. . Gallopavonis), E. meleagridis and, for ducks, E. aythyae and E. ⁇ ⁇ burcephalae.
  • the site of coccidium infestation in poultry depends on the species of coccidium and the species of poultry. Coccidium can infest the upper, middle and lower parts of the small intestine, rectum, colon, kidney, and cecum.
  • Coccidium multiplies in the mucous membrane in the digestive tract and excretes the stool with an infectious body covered in a hard shell called oocysts.
  • the excreted oocysts are transmitted to other individuals by oral infection.
  • coccidiosis ⁇ Symptoms of coccidiosis vary depending on the species of infected coccidiosis, but hemorrhagic lesions are formed in the cecum, small intestine and the like, and they exhibit symptoms such as diarrhea and bloody stool. Severe symptoms can lead to death, and even without death, growth is severely inhibited, adversely affecting subsequent productivity. Thus, coccidiosis is an economically important disease, and extensive research has been undertaken to find new and improved ways to control and treat coccidial infections in poultry.
  • chemotherapeutic agents and vaccines which are composed of antibiotics (polyether antibiotics such as salinomycin, etc.) and synthetic antibacterial agents (sulfa drugs, etc.), have been mainly used.
  • antibiotics and chemotherapeutic agents have problems such as the occurrence of side effects and a decrease in the effect due to the acquisition of resistance to the drugs.
  • vaccines they are only for prevention and cannot be used for treatment.
  • humans consume the meat or milk of animals to which these drugs are administered there is a problem of transfer of the drugs remaining in the animals to the human body, and strict restrictions are imposed on the amount used and the administration period. Was needed.
  • a series of coccidiosis-mitigating agents comprising cashew nut shell oil and / or anacardic acids as a main component thereof has been proposed as an agent for preventing or reducing coccidiosis (Patent Documents 1 to 5).
  • Patent Document 6 extracts of Sanguinaria canadensis (Papaveraceae) and alkaloids (Patent Document 6), gluconic acids (Patent Document 7), trypsin inhibitor (Patent Document 8), Microorganism (Patent Document 9), Simulba Amara dried bark or its extract and / or Momordica carantia fruit extract (Patent Document 10), fermented wheat germ extract (Patent Document 11), protease and quaternary amine carboxylic acid Salts (Patent Literature 12), carbanilide compounds (Patent Literature 13), fermented products of lactic acid bacteria and propionic acid (Patent Literature 14), and those using a deoxynarassin antibiotic complex (Patent Literature 15) are known. .
  • the plant of the genus Schoenocaulon is generally called Sabadira, and many Sabadira tissues provide effective and naturally occurring insecticides.
  • the longest-running species is Schoenocaulon officinale.
  • Alkaloids contained in Sabadilla seeds are known to be effective as insecticides (Patent Documents 16 to 20, Non-Patent Document 1) and are commercially available as VeratranD TM .
  • Non-Patent Document 2 discloses that in order to reduce the frequency of occurrence of coccidial oocysts in the intestinal tract, three different additives, namely, homeopathic preparations (including Sabadilla in some of the raw materials), probiotics, and prebiotics were used.
  • homeopathic preparations including Sabadilla in some of the raw materials
  • probiotics including Sabadilla in some of the raw materials
  • prebiotics prebiotics
  • JP 2003-238400 A JP 2001-151675 A JP-A-8-231410 Re-table 2009-139468 JP-A-2010-143627 DE4303099 JP 2008-28393 A JP-A-08-040935 JP-T-2015-530876 Japanese Patent Publication No. 2007-520515 JP 2005-535325 A JP-T-2003-516133 Japanese Patent Publication No. 09-510457 JP-A-2010-024413 U.S. Pat. No. 4,174,404 WO2017070437 WO2017070440 WO2017070444 WO2017070447 WO2017070451
  • the present inventor has found that Sabadilla seed, Sabadilla defatted extract and / or Sabadilla seed extraction residue act as a coccidiostat and can be effectively used for controlling coccidiosis in poultry.
  • the present invention provides a feed additive composition for controlling poultry coccidiosis, comprising a Sabadilla seed, a defatted Sabadilla extract and / or an extract residue of a Sabadilla seed, a feed containing the feed additive composition, and a Sabadilla seed and / or a Sabadilla seed
  • the present invention provides a method for controlling poultry coccidiosis using an extraction residue of spores.
  • the present invention includes the following.
  • a feed additive composition for controlling poultry coccidiosis comprising a Sabadilla seed, a defatted Sabadilla extract and / or an extract residue of a Sabadilla seed.
  • the feed additive composition according to [1] further comprising herbs.
  • a feed comprising the feed additive composition according to [1] or [2].
  • Sabadilla seed, Sabadilla defatted extract and / or extraction residue of Sabadilla seed are present in the feed at a concentration of 0.125% or less, 0.045% or less, or 1.25% or less, respectively, by weight ratio in the feed.
  • [5] The feed according to [3] or [4], wherein the herbs are present in the feed at a concentration of 0.05% by weight to 5% by weight. [6] further comprising at least one selected from the group consisting of corn, mylo, bran, rice bran, soybean meal, corn flour, rice flour, and soy flour, [3], [4] or The feed according to [5]. [7] Poultry ingestion of the feed additive composition for controlling poultry coccidiosis according to [1] or [2] or the feed according to any of [3], [4], [5] and [6].
  • a method for controlling poultry coccidiosis comprising: [8] A method of breeding poultry, comprising the step of ingesting poultry with the feed according to any one of [3], [4], [5] and [6]. [9] Use of sabadilla seed, sabadilla defatted extract and / or extract residue of sabadilla seed for controlling poultry coccidiosis.
  • the present invention has made it possible to control coccidiosis in poultry safely, effectively and easily by using sabadilla seeds, defatted sabadilla extracts and / or extract residues of sabadilla seeds.
  • coccidiosis can be controlled by mixing Sabadilla seed, Sabadilla defatted extract and / or Sabadilla seed extract residue with poultry feed.
  • Sabadilla seed, Sabadilla defatted extract and / or extraction residue of Sabadilla seed can be obtained from any species belonging to Schoenocaulon.
  • the genus Shoenokauron includes the following species: Schoenocaulon calcicola, Schoenocaulon caricifolium, Schoenocaulon ocaatum, Schoenocaulon comatum, Schoenocaulon cocho ⁇ onchozonchoonchoonchoonchoonchoonchoonchoonchoonchoonchoonchoonchoonchoonchoonchoonchoonchoonchoonchooncho.
  • the defatted extract of Sabadilla can be extracted from the seeds of Sabadilla by the extraction method described in WO2017 / 070437. That is, in the present invention, after crushing Sabadilla seed, a seed / plant partial solvent is added, an oil solution and a residue are obtained, and an extraction solvent is added to crude oil obtained by distilling methanol from the oil solution, and the obtained crude solution is obtained. Is decanted, and the remaining extract is a Sabadilla defatted extract. After extraction of crude oil from Sabadilla seeds, residues of Sabadilla seeds remain. This residue is referred to as an extraction residue of Sabadilla seed.
  • Sabadilla defatted extract can be obtained from any part of Schoenocaulon officinale, but is preferably obtained from seed.
  • extraction solvent refers to a C5-C14 alkane, chlorinated methane, chlorinated ethane, benzene, and / or a benzene derivative.
  • benzene derivative refers to a compound derived from benzene, in which one or more hydrogen atoms have been replaced with another functional group. Examples of benzene derivatives include phenol, toluene and aniline.
  • the extraction solvent is hexane.
  • seed / plant partial solvent refers to methanol, ethanol, glycol ether, ethyl lactate, propanol, butyl lactate, gamma-butyrolactone and / or 1-butanol.
  • the “seed / plant partial solvent” is selected from the group consisting of methanol, ethanol, glycol ether, ethyl lactate and propanol.
  • the “seed / plant part solvent” is methanol.
  • Methanol can be used at a temperature of 0-60 ° C. Lower temperatures of methanol require additional extraction time, and temperatures of about 55 to about 60 ° C. result in loss of methanol and boiling.
  • the optimal temperature for methanol extraction is from about 50 to about 55 ° C.
  • the term “sabadilla oil solution” refers to at least one “seed / plant part” selected from the group consisting of methanol, ethanol, glycol ether, ethyl lactate, propanol, butyl lactate, gamma-butyrolactone and 1-butanol.
  • Solvents "and parts of the seed dissolved in the seed / plant part solvent, such as resins, alkaloids and oils. This solvent extraction separates resins, alkaloids and oils from seed cellulose, hemicellulose, lignin and pectin.
  • crude oil from Sabadilla refers to at least one selected from the group consisting of methanol, ethanol, glycol ether, ethyl lactate, propanol, butyl lactate, gamma-butyrolactone and 1-butanol (seed / Plant partial solvent) and the residue remaining after removing the seed / plant partial solvent from the oil solution.
  • the lipid composition of sabadilla oil is generally about half triglycerides, followed by diglycerides, vegetable waxes and monoglycerides. Free fatty acids and sterols are also present to a lesser extent.
  • the composition of fatty acids usually includes C-12 to C-24 fatty acids, but the majority are C-18 fatty acids, of which oleic acid, which is a monounsaturated fatty acid, accounts for the majority.
  • crude Sabadilla refers to at least one extraction solvent selected from the group consisting of C5-C14 alkanes, chlorinated methane, chlorinated ethane, benzene and benzene derivatives, and Sabadilla dissolved in the extraction solvent. Refers to a solution containing seed-derived oil. This extraction of the solvent separates the Sabadilla oil from the rest of the defatted extract or seed part.
  • poultry is used for any variety of domesticated birds, regardless of age, including chickens, quails, ducks, geese, pigeons, turkeys and ostriches. “Poultry” is preferably used for chickens, ducks, geese and turkeys, most preferably for chickens. Chicken includes broilers and laying hens (layers).
  • the feed additive composition for controlling poultry coccidiosis of the present invention may use a sabadilla seed, a defatted extract of sabadilla and / or an extract residue of the sabadilla seed as it is.
  • Sabadilla seeds, Sabadilla defatted extract further added excipients such as solid carriers, liquid carriers, etc. to tablets, powders, granules, capsules, aqueous solvents, liquids, wettable powders, suspensions, etc. It may be formulated and used.
  • Excipients that are solid carriers include, for example, lactose, sucrose, glucose, corn starch, gelatin, casein, starch, gum arabic, cellulose derivatives, alginic acid, and the like.
  • examples of the excipient that is a liquid carrier include water, glycerin, vegetable oils, fatty acids, fatty acid esters, and sorbitol.
  • the feed additive composition for controlling poultry coccidiosis of the present invention includes proteins and vitamins (vitamin A, vitamin B1, vitamin B2, vitamin B6, vitamin B12, vitamin D, vitamin E, calcium pantothenate, nicotinamide) , Folic acid, etc.) and trace inorganic salts (magnesium sulfate, iron sulfate, copper sulfate, zinc sulfate, potassium iodide, cobalt sulfate, etc.) and the like. Further, additives such as an antioxidant, a flavor, and a pigment may be mixed.
  • the feed additive composition for controlling poultry coccidiosis of the present invention is used as it is or added to poultry feed. Further, additives such as an antioxidant, a flavor, and a dye may be mixed or used in combination.
  • the administration of the feed additive composition for controlling poultry coccidiosis of the present invention to poultry is not particularly limited, but it is convenient and convenient to administer to poultry by mixing it with poultry feed.
  • the dose is an amount effective for controlling the coccidiosis of poultry, that is, when the other conditions are equal, the dose of the feed additive composition for controlling poultry coccidiosis of the present invention is lower than the dose when the composition is not administered. It is an amount that enhances the coccidiosis control effect of poultry. More specifically, the weight of Sabadilla seed in the feed is 0.005% to 0.125%, preferably 0.01% to 0.1%, more preferably 0.03% to 0.07%.
  • the concentration of the Sabadilla defatted extract is 0.0018% to 0.045%, preferably 0.0036% to 0.036%, more preferably 0.0011% to 0.0252%. It is mixed so as to be present at a concentration of 0.05% to 1.25%, preferably 0.1% to 1.0%, more preferably 0.3% to 0.7%. It is preferable that the Sabadilla seed, the Sabadilla defatted extract and / or the extraction residue of the Sabadilla seed are mixed so as to be present at a weight ratio of 0.125% or less, 0.045% or less, or 1.25% or less, respectively. .
  • the poultry feed used by mixing with the poultry coccidiosis-controlling feed additive composition of the present invention may be any generally used one, and is not particularly limited. Specifically, the concentration of the composition in the feed is preferably 0.005% to 1.0%, more preferably 0.05% to 0.5%, further preferably 0.1% by weight. % To 0.3%.
  • Examples of these include corn, rice, wheat, milo, soybean meal, rapeseed meal, bran, defatted rice bran, fish meal, skim milk powder, dried whey, alfalfa meal, northern sea meal, soybean oil, powdered refined tallow, flour, rapeseed oil, Meat and bone meal (feather meal), animal fats and oils, calcium phosphate, corn gluten meal, corn distiller's grain soluble, molasses, calcium carbonate, tricalcium phosphate, sodium chloride, choline chloride, vitamins (vitamin A, vitamin B1, vitamins) B2, vitamin B6, vitamin B12, vitamin D, vitamin E, calcium pantothenate, nicotinamide, folic acid, etc., amino acids (lysine, methionine, threonine, etc.), and trace inorganic salts (magnesium sulfate, iron sulfate, copper sulfate, Zinc sulfate, potassium iodide,
  • Examples of the herbs include Shobu (Acorus calamus), Garlic (Allium sativum), Inondo (Anethum graveolens), Artemisia absinthium, Caraway (Carum carvi), Nikkei (Cinnamomum), Coriander (Coriandrum sativum), Cumin (Cuminum cyminum), turmeric (Curcuma longa), lemongrass (Cymbopogon citratus), artichoke (Cynara scolymus), genus Echinacea, cardamom (Elettaria cardamomum), fennel (Foeniculum vulgare), biloba (Ginkgo) Glycyrrhiza glabra, Hypericum perforatum (Hypericum perforatum), Bay laurel (Laurus nobilis), Lavage (Levisticum officinale), Tea tree (Melaleuca alternifolia), Lemon balm (Melissa officinalis), Spe
  • shobu Acorus calamus
  • garlic Allium sativum
  • Artemisia absinthium Nikkei (Cinnamomum)
  • genus Echinacea oregano (Origanum vulgare)
  • clove Syzygium aromaticum
  • Thyme Thymus
  • These herbs may be used alone or in combination of two or more.
  • Garlic is particularly preferred.
  • the herbs can be used in the form of an essential oil or the like by extracting it in addition to powder.
  • the herb content in the feed of the present invention is not particularly limited, but is generally 0.05% to 5% by weight, preferably 0.1% to 3% by weight, and more preferably 0% to 3% by weight. In the range of .25% to 1% by weight.
  • the ratio of the weight of herbs to the weight of Sabadilla seeds is usually 10 or more and 50 or less, preferably 20 or more and 40 or less, and more preferably 25 or more and 35 or less.
  • the ratio of the weight of the herbs to the weight of the Sabadilla defatted extract is usually 28 or more and 139 or less, preferably 56 or more and 111 or less, and 69 or more and 97 or less. Is more preferred.
  • the ratio of the weight of herbs to the extract residue of Sabadilla seed is usually 1 or more and 5 or less, preferably 2 or more and 4 or less, and more preferably 2.5 or more and 3 or more. More preferably, it is 5 or less.
  • the feed additive composition for controlling poultry coccidiosis of the present invention or the feed containing the same may be administered during the entire breeding season, but is preferably in the chick development phase (0 to 5 weeks after hatching). . More preferably, it is administered continuously for 0 to 21 days after hatching of the poultry.
  • the present invention will be described specifically with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples.
  • Sabadilla seeds were flake milled according to the manufacturer's instructions. 200 g of the crushed seeds were put into a 3 liter flask together with methanol at 40 to 45 ° C., and stirred with a three-blade stirrer controlled by an overhead motor. The stirring speed was maintained so that the seed fragments did not settle in the flask. The system was sealed to limit evaporation.
  • the Sabadilla oil solution was decanted off and methanol was added to the flask. This step was repeated three more times. After decanting off the Sabadilla oil solution, the washed crushed seeds (residues of Sabadilla seed extraction) remained at the bottom of the flask.
  • the decanted Sabadilla oil solution was placed in another flask. Then, distillation was performed to remove methanol from the Sabadilla oil solution.
  • a standard IKA rotary evaporator was used for distillation.
  • the flask containing the Sabadilla oil solution was placed in an evaporator and placed in a heated water bath. The flask was heated to 50-55 ° C. to maximize the efficient removal of methanol without boiling and spilling over the condenser.
  • the evaporated methanol was concentrated sufficiently in an adjacent flask to obtain a crude oil of Sabadilla. Thus, a high-purity crude oil of Sabadilla was prepared.
  • the Sabadilla solution was decanted off and hexane was added to the flask. This step was repeated three more times to remove all the solution from the crushed seeds. A total of 2 liters of hexane was used. After decanting off the Sabadilla solution, a precipitate (Sabadilla defatted extract) remained in the flask.
  • Test for evaluation of anticoccidial activity of sabadilla The feed containing sabadilla seed and the extract residue of sabadilla seed obtained in Example 1 as feed materials was fed to broiler chicks from 8 days of age, and chicken coccidium (E. tenella) was fed at 10 days of age. ) was subjected to a single forced gavage of the fresh spore-forming oocysts to confirm the anticoccidial effect of the raw material from the fecal properties up to 18 days of age, OPG (oocysts per gram of feces: oocysts per gram of feces), and intestinal lesions.
  • OPG oocysts per gram of feces: oocysts per gram of feces
  • Test animals and test samples Test animals: 50 male ROSS-type broilers, which were introduced at the age of 0 days and had no abnormalities during the 8-day acclimation period, were used for the test. They were assigned to each group at the age of 8 days (5 birds / test group, total of 10 test groups).
  • Test sample Seed of Schoenocaulon officinale and its extraction residue
  • Test period Conditioning period 0-7 days old Feeding period of test material: 8-18 days
  • each rearing room was controlled by an air conditioner.
  • the breeding room temperature was measured and recorded by a thermo-hygrometer installed near the center of the breeding room.
  • the basal feed was a compound feed for the first stage of SD broiler fattening manufactured by Feed One Co., Ltd. Feed was restricted.
  • the basic feed components were as follows.
  • the feed additives contained in the basal feed were as follows: corn, dextrin, soybean oil cake, white fish meal, animal fat, alfalfa meal, calcium phosphate, calcium carbonate, salt, lactose, vitamin A, Vitamin D3, vitamin E, vitamin K3, vitamin B1, vitamin B2, vitamin B6, pantothenic acid, biotin, nicotinic acid, vitamin B12, folic acid, choline, methionine, iron sulfate, copper sulfate, cobalt sulfate, zinc carbonate, manganese sulfate, Calcium iodate, sodium caseinate, emulsifier.
  • a basal feed was fed, and for 8 days to 18 days old, a feed to which each test material was added at a prescribed concentration was fed.
  • Drinking water was freely available through a waterer with a picker.
  • Fecal properties The properties after mixing (normal, loose stool, water-soluble stool, bloody stool) every day from the day before the oocyst gavage (9 days old) to the end of the test (18 days old). Observed and recorded.
  • Oocyst excretion Measured daily (12 to 18 days of age) from the second day after gavage administration of oocysts. All feces of each test group were mixed, 2 g was separated, diluted 20-fold with 0.5% Tween20 solution, and stirred with a stirrer for about 30 minutes.
  • the lesion may reach as far as 1 / 3-1 / 4 of the rectum, but if the lesion does not reach the rectum, it is set to 4 if atrophy is significant. Others are the same as 3.
  • test group 2 The mean value and standard deviation (SD) of each test plot were calculated for the intestinal lesion score. Statistical analysis was performed for each additive substance, using the uninfected group (test group 2) as a common control group. For intestinal lesion score, Kruskal-Wallis test was performed, and as a result, when P ⁇ 0.05, the significant difference between test sections was examined using Steel's multiple comparison test.
  • the intestinal lesion score and OPG on the test termination day are shown in Tables 3 and 4, respectively.
  • fecal properties were normal throughout the test period, and no oocyst excretion was observed.
  • the cecum was normal (lesion score: 0) in all animals at the autopsy at the time of termination.
  • oocysts infection
  • normal stool normal stool
  • Oocyst excretion was noted on days 7 and 8 post-infection, with OPG of 163 and 164 ⁇ 10 4 / g, respectively.
  • the cecal lesion score was 4 in all animals.
  • Anticoccidial activity evaluation test using a mixture of sabadilla and herbs A diet supplemented with sabadilla seeds and garlic powder was fed to broiler chicks from the age of 0 days, and a fresh spore-forming oocyst of chicken coccidium (E. tenella) was given at 21 days of age.
  • OPG oocysts per gram: the number of oocysts per gram of cecal contents
  • Test animals and test samples Test animals: 126 male ROSS-type broilers, which were introduced at the age of 0 days and did not show any abnormality during the 21-day acclimation period, were used for the test. At the age of 0 days, the animals were allocated to each group (14 birds / repeat, 3 repeats / test group, a total of 3 test groups).
  • Test sample Schoenocaulon officinale seeds and garlic (Allium sativum) powder
  • Test period Habituation period 0 to 21 days old
  • Feeding period of test material 0 to 28 days old
  • the OPG of the results 28 days are shown in Table 6.
  • the OPG in the cecal contents of the control group to which no infection was added was 6.84 ⁇ 10 4 / g.
  • the OPG in the group where 0.0167% of infected Sabadilla seeds were added was 6.71 ⁇ 10 4 / g
  • the OPG in the group where 0.0167% of Sabadilla seeds and 0.5% garlic powder were mixed was 5.89 ⁇ 10 4 / g. .
  • the feed additive composition for controlling poultry coccidiosis comprising the Sabadilla seed, the Sabadilla defatted extract and / or the extraction residue of the Sabadilla seed, according to the present invention can be effectively used for controlling coccidiosis in poultry.

Abstract

家禽におけるコクシジウム症の予防又は軽減のために、改善された、より安全な生成物、特に、耐性の発達を誘発しない組成物を提供する。サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣を含む家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物、該飼料添加組成物を含む飼料、及びサバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣を用いた家禽コクシジウム症の防除方法。

Description

サバディラ種子を含む飼料添加組成物
　本発明は、家禽飼料用添加剤に関し、より詳しくは、飼料への添加により、家禽コクシジウム症を防除する添加剤に関する。より詳しくは、本発明は、サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物、及び／又はサバディラ種子の抽出残渣を含む家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物、該飼料添加組成物を含む飼料、及びサバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣を用いた家禽コクシジウム症の防除方法に関する。
　コクシジウム症は、全ての大陸に蔓延しており、家禽産業に対して重大な経済的損失を引き起こすため、家禽における最も重要な疾患のうちの一つである。
　コクシジウム症は、家禽の腸及び盲腸における重度の病態を引き起こす。コクシジウム症は、主として、小腸の上部、中央部及び下部、直腸、結腸、並びに盲腸に影響を与える。コクシジウム症は、エイメリア（Eimeria）属の原生動物（以下、「コクシジウム」と称することがある）による感染により引き起こされる。家禽（ニワトリ、シチメンチョウ等）において問題を引き起こす一般的な種は、ニワトリではエイメリア・アセルブリナ（E. acervulina）、エイメリア・ブルネット（E. brunett）、エイメリア・マキシマ（E. maxima）、エイメリア・ミバティ（E. mivati）、エイメリア・ネカトリックス（E. necatrix）、エイメリア・テネラ（E. tenella）、シチメンチョウではエイメリア・アデノエイデス（E. adenoeides）、エイメリア・ジスペルサ（E. dispersa）、エイメリア・ガロパボニス（E. gallopavonis）、エイメリア・メレアグリディス（E. meleagridis）、アヒルではエイメリア・エイシアエ（E. aythyae）及びエイメリア・ブルセファラエ（E. burcephalae）である。家禽におけるコクシジウムの寄生部位は、コクシジウムの種及び家禽の種に依る。コクシジウムは、小腸の上部、中央部及び下部、直腸、結腸、腎臓、並びに盲腸に寄生し得る。
　コクシジウムは消化管内粘膜で増殖し、糞便中にオーシストと呼ばれる固い殻に覆われた感染体を排出する。この排出されたオーシストが経口感染することにより、他の個体に伝播する。
　コクシジウム症の症状は、感染したコクシジウムの種によって異なるが、盲腸や小腸等に出血性病変が形成され、下痢や血便等の症状を呈する。症状が重い場合は死に至ることもあり、死に至らなくても発育が大きく阻害され、その後の生産性に悪影響を及ぼす。従って、コクシジウム症は、経済的に極めて重要な疾患であり、家禽におけるコクシジウム感染の抑制及び処置のための新たな、改善された方法を見出すため、広範な研究が行われてきた。
　コクシジウム症の予防や治療に際しては、これまで抗生物質（サリノマイシン等のポリエーテル系抗生物質等）、合成抗菌剤（サルファ剤等）からなる化学療法剤及びワクチン等の生物学的製剤が主に使用されてきた。しかし、抗生物質や化学療法剤では副作用の発現、薬剤への耐性獲得による効果の減退等の問題があり、ワクチンの場合は予防のみであり治療には使用できなかった。しかも、それらの薬剤を投与した動物の肉や乳等をヒトが食用とする場合には、動物体内に残留した薬剤の人体への移行の問題があり、その使用量や投与期間に厳しい制限が必要であった。
　さらに、抗生物質の乱用及び交差耐性のおそれのため、上記コクシジウム抑制剤のうちの幾つかについては、健康及び安全性に関する懸念が存在する。従って、それらの全てが、今後、世界中で入手可能になるとは限らない。現在、既に、アンプロリウム及びメチクロルピンドール（meticlorpindol）を含むいくつかのコクシジウム抑制剤が、欧州連合において禁止されている。
　化学物質に対する耐性の発達は、単細胞真核生物における重大な問題である。その主な理由は、そのような生物は、極めて急速に複製し、迅速に環境変化に代謝を適応させることができるためである。これは、化学物質が一年中予防的に投与されており、病原体が永続的に化学物質に直面している家禽において、コクシジウム症を引き起こす原生動物に特に当てはまる。そのような環境においては、極めて急速に耐性が発達し得る。
　このため、改善された、より安全でありかつ耐性の発達を誘発しない、天然由来のコクシジウム症防除剤の提供が強く求められている。
　コクシジウム症の予防又は軽減剤として、カシューナッツ殻油及び／又はその主成分であるアナカルド酸類を有効成分とした一連のコクシジウム症軽減剤が提案されている（特許文献１～５）。
　コクシジウム症の予防又は軽減のための飼料添加剤としては、サンギナリア・カナデンシス（ケシ科植物）の抽出物並びにアルカロイド（特許文献６）、グルコン酸類（特許文献７）、トリプシンインヒビター（特許文献８）、微生物（特許文献９）、シマルバアマラ乾燥樹皮又はその抽出物及び／又はモモルディカカランティア果実抽出物（特許文献１０）、発酵小麦胚芽抽出物（特許文献１１）、プロテアーゼ及び第４級アミンカルボン酸内部塩（特許文献１２）、カルバニリド化合物（特許文献１３）、乳酸菌発酵物及びプロピオン酸発酵物（特許文献１４）、デオキシナラシン抗生物質複合体（特許文献１５）を用いたものが知られている。
　Schoenocaulon属の植物は一般にサバディラと呼ばれており、多くのサバディラの組織からは天然由来の有効な殺虫剤が得られている。その中で最も長い歴史の種は、ショエノカウロン・オフィツィナレ（Schoenocaulon officinale）である。
　サバディラの種子に含まれるアルカロイドは、殺虫剤としての効能が知られており（特許文献１６～２０、非特許文献１）、VeratranDTMとして市販されている。
　非特許文献２には、腸管内でのコクシジウムオーシストの発生頻度を低くするため、３つの異なる添加剤、すなわち、ホメオパシー製剤（原料の一部にサバディラを含む）、プロバイオティックス及びプレバイオティックスを4週間の飲水に20ml混合し、経口投与した結果、ホメオパシー製剤は対照と比較して有意に腸管内でのコクシジウムオーシストの発生頻度を低くしたこと、また、健康状態の促進や病原菌の発生の低減がもたらされたことが記載されている。
特開２００３－２３８４００号公報 特開２００１－１５１６７５号公報 特開平８－２３１４１０号公報 再表２００９－１３９４６８号公報 再表２０１０－１４３６２７号公報 ＤＥ４３０３０９９号公報 特開２００８－２８３８９３号公報 特開平０８－０４０９３５号公報 特表２０１５－５３０８７６号公報 特表２００７－５２０５１５号公報 特表２００５－５３５３２５号公報 特表２００３－５１６１３３号公報 特表平０９－５１０４５７号公報 再表２０１０－０２４４１３号公報 米国特許第４，１７４，４０４号 ＷＯ２０１７０７０４３７ ＷＯ２０１７０７０４４０ ＷＯ２０１７０７０４４４ ＷＯ２０１７０７０４４７ ＷＯ２０１７０７０４５１
Journal of Economic Entomology, Vol.90, no.2, p.326-332 Acta fytotechn zootechn, 19, 2016(2): 51-53
　上記のように、家禽におけるコクシジウム症の予防又は軽減のために、改善された、より安全な生成物、特に、耐性の発達を誘発しない生成物が必要とされている。
　驚くべきことに、本発明者は、サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣が、コクシジウム抑制剤として作用し、家禽におけるコクシジウム症の防除に有効に使用できることを見出した。
　すなわち、本発明は、サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣を含む家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物、該飼料添加組成物を含む飼料、及びサバディラ種子及び／又はサバディラ種子の抽出残渣を用いた家禽コクシジウム症の防除方法を提供する。
　したがって、本発明は以下を含む。
［１］サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣を含有することを特徴とする、家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物。
［２］さらにハーブ類を含有することを特徴とする、［１］に記載の飼料添加組成物。
［３］［１］または［２］に記載の飼料添加組成物を含有することを特徴とする、飼料。
［４］サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣が、それぞれ飼料中に重量比で０．１２５％以下、０．０４５％以下又は１.２５％以下の濃度で存在する、［３］に記載の飼料。
［５］ハーブ類が飼料中に０．０５重量％～５重量％の濃度で存在する、［３］または［４］に記載の飼料。
［６］さらに、トウモロコシ、マイロ、ふすま、米ぬか、大豆粕、トウモロコシ粉、米粉、及び大豆粉よりなる群から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とする、［３］、［４］又は［５］に記載の飼料。
［７］［１］または［２］に記載の家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物又は［３］、［４］、［５］ないし［６］のいずれかに記載の飼料を家禽に摂取させることを特徴とする、家禽コクシジウム症の防除方法。
［８］［３］、［４］、［５］ないし［６］のいずれかに記載の飼料を家禽に摂取させる工程を含むことを特徴とする、家禽の飼育方法。
［９］家禽コクシジウム症の防除のためのサバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣の使用。
　本発明は、サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣を使用することにより、家禽におけるコクシジウム症を安全、有効かつ簡便に防除することを可能とした。
（発明の詳細な説明）
　本発明者は、予期しないことに、サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣を家禽の飼料に混合することによりコクシジウム症を防除できることを見出した。
　サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣は、ショエノカウロン（Schoenocaulon）に属するあらゆる種から得ることができる。ショエノカウロン属は以下の種を含む：ショエノカウロン・カルチコラ（Schoenocaulon calcicola）、ショエノカウロン・カリチフォリイウム（Schoenocaulon caricifolium）、ショエノカウロン・コマツム（Schoenocaulon comatum）、ショエノカウロン・コンザッティイ（Schoenocaulon conzattii）、ショエノカウロン・ドゥビウム（Schoenocaulon dubium）(別称：ショエノカウロン・グラチレ（Schoenocaulon gracile)）、ショエノカウロン・フラメイ（Schoenocaulon framei）、ショエノカウロン・ギエスブレギッティ（Schoenocaulon ghiesbreghtii）(別称：ショエノカウロン・ドゥルモンディイ（Schoenocaulon drummondii）、ショエノカウロン・ユカタネンセ（Schoenocaulon yucatanense)）、ショエノカウロン・イグニゲヌム（Schoenocaulon ignigenum）、ショエノカウロン・インテルメディウム（Schoenocaulon intermedium）、ショエノカウロン・ジャリシェンセ（Schoenocaulon jaliscense）、ショエノカウロン・マクロカルプム（Schoenocaulon macrocarpum）(別称：ショエノカウロン・ラウリコラ（Schoenocaulon lauricola)）、ショエノカウロン・メディドルム（Schoenocaulon madidorum）、ショエノカウロン・メガッリズム（Schoenocaulon megarrhizum）、ショエノカウロン・モルトニイ（Schoenocaulon mortonii）、ショエノカウロン・オアキサツェンセ（Schoenocaulon oaxacense）、ショエノカウロン・オブトゥスム（Schoenocaulon obtusum）、ショエノカウロン・オフィツィナレ（Schoenocaulon officinale）、ショエノカウロン・ペッルツィドゥム（Schoenocaulon pellucidum）、ショエノカウロン・プルモスム（Schoenocaulon plumosum）、ショエノカウロン・プリングレイ（Schoenocaulon pringlei）、ショエノカウロン・ルチェドウスキイ（Schoenocaulon rzedowskii）、ショエノカウロン・テノリオイ（Schoenocaulon tenorioi）、ショエノカウロン・テヌエ（Schoenocaulon tenue）、ショエノカウロン・テヌイフォリウム（Schoenocaulon tenuifolium）、ショエノカウロン・テキサヌム（Schoenocaulon texanum）及びショエノカウロン・チグレンセ（Schoenocaulon tigrense）。
　サバディラ脱脂抽出物は、WO2017/070437に記載の抽出方法によりサバディラ種子から抽出することができる。すなわち、本発明において、サバディラ種子を粉砕後、種子/植物部分溶媒を加え、油溶液と残渣を得て、更に油溶液からメタノールを蒸留させた粗油に抽出溶媒を加え、得られた粗溶液をデカントし、残った抽出物がサバディラ脱脂抽出物である。サバディラ種子からサバディラ粗油を抽出した後にはサバディラ種子の残渣が残る。この残渣をサバディラ種子の抽出残渣と称する。
　前記WO2017/070437に記載の他の抽出方法は、サバディラ種子又は他の植物部分を粉砕し、粉砕したサバディラ種子又は他の植物部分を、メタノール、エタノール、グリコールエーテル、乳酸エチル、プロパノール、乳酸ブチル、ガンマ－ブチロラクトン及び1-ブタノールよりなる群から選ばれた少なくとも一つの種子／植物部分溶媒で洗浄してサバディラ油溶液を得、洗浄した粉砕化種子からサバディラ油溶液および残渣に分離し、該油溶液から該種子／植物部分溶媒を除去してサバディラ粗油を得、該粗油をC5～C14アルカン、塩素化メタン、塩素化エタン、ベンゼン及びベンゼン誘導体よりなる群から選ばれた少なくとも一つの抽出溶媒で攪拌下に洗浄してサバディラ粗溶液を得、該粗溶液から該サバディラ溶液およびサバディラ脱脂抽出物に分離し、該溶液から抽出溶媒を除去することによってサバディラ油を得ることを含む。
　サバディラ脱脂抽出物は、ショエノカウロン・オフィツィナレ（Schoenocaulon officinale）のいかなる部分からも得ることができるが、種子から得るのが好ましい。
　本明細書において、「抽出溶媒」とは、C5～C14アルカン、塩素化メタン、塩素化エタン、ベンゼン及び／又はベンゼン誘導体をいう。本明細書において、「ベンゼン誘導体」とは、ベンゼンに由来する化合物であって、１又はそれ以上の水素原子が他の官能基で置換されたものをいう。ベンゼン誘導体の例としては、フェノール、トルエン及びアニリンが挙げられる。好ましい態様において、抽出溶媒はヘキサンである。
　本明細書において、「種子／植物部分溶媒」とは、メタノール、エタノール、グリコールエーテル、乳酸エチル、プロパノール、乳酸ブチル、ガンマ－ブチロラクトン及び／又は1-ブタノールをいう。好ましい態様において、「種子／植物部分溶媒」は、メタノール、エタノール、グリコールエーテル、乳酸エチル及びプロパノールよりなる群から選ばれる。さらに好ましい態様において、「種子／植物部分溶媒」はメタノールである。
　メタノールは、0～60℃の温度で用いることができる。低い温度のメタノールではさらなる抽出時間が必要となり、約55～約60℃の温度ではメタノールの喪失及び沸騰という結果になる。メタノール抽出の最適温度は約50～約55℃である。
　本明細書において、「サバディラ油溶液」とは、メタノール、エタノール、グリコールエーテル、乳酸エチル、プロパノール、乳酸ブチル、ガンマ－ブチロラクトン及び1-ブタノールよりなる群から選ばれた少なくとも一つの「種子／植物部分溶媒」、並びに樹脂、アルカロイド及び油などの、種子／植物部分溶媒に溶解した種子の部分をいう。この溶媒の抽出は、種子のセルロース、ヘミセルロース、リグニン及びペクチンから樹脂、アルカロイド及び油を分離する。
　本明細書において、「サバディラ粗油」とは、種子を、メタノール、エタノール、グリコールエーテル、乳酸エチル、プロパノール、乳酸ブチル、ガンマ－ブチロラクトン及び1-ブタノールよりなる群から選ばれた少なくとも一つ（種子／植物部分溶媒）で洗浄し、種子／植物部分溶媒を油溶液から除去した後に残るものをいう。サバディラ油の脂質組成は、一般に、約半分がトリグリセリドで、ついでジグリセリド、植物ワックス及びモノグリセリドである。遊離の脂肪酸及びステロールも少しだが存在する。脂肪酸の組成は、通常、C-12からC-24の脂肪酸を含むが、C-18の脂肪酸が大半であり、そのうち１価不飽和脂肪酸であるオレイン酸が大部分を占める。
　本明細書において、「サバディラ粗溶液」とは、C5～C14アルカン、塩素化メタン、塩素化エタン、ベンゼン及びベンゼン誘導体よりなる群から選ばれた少なくとも一つの抽出溶媒、及び抽出溶媒に溶解したサバディラ種子由来の油を含む溶液をいう。この溶媒の抽出は、脱脂抽出物又は種子の部分の残りからサバディラ油を分離する。
　本明細書において「家禽」とは、齢と無関係に、ニワトリ、ウズラ、アヒル、ガチョウ、ハト、シチメンチョウ及びダチョウを含む、家畜化された鳥類のあらゆる品種について使用される。「家禽」は、好ましくは、ニワトリ、アヒル、ガチョウ及びシチメンチョウについて使用され、最も好ましくは、ニワトリについて使用される。ニワトリには、ブロイラーおよび採卵鶏（レイヤー）が含まれる。
　本発明の家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物は、サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣をそのまま用いてもよい。また、サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物にさらに固形担体、液状担体等の賦形剤を加えて錠剤、粉末剤、顆粒剤、カプセル剤、水溶剤、液剤、水和剤、又は懸濁剤等に製剤化して用いてもよい。固体坦体である賦形剤としては例えば、乳糖、ショ糖、ブドウ糖、コーンスターチ、ゼラチン、カゼイン、澱粉、アラビアガム、セルロース誘導体、アルギン酸等が挙げられる。また液体担体である賦形剤としては例えば、水、グリセリン、植物油、脂肪酸、脂肪酸エステル、ソルビトール等が挙げられる。
　なお、本発明の家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物には、タンパク質、ビタミン類（ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＤ、ビタミンＥ、パントテン酸カルシウム、ニコチン酸アミド、葉酸等）及び微量無機塩類（硫酸マグネシウム、硫酸鉄、硫酸銅、硫酸亜鉛、ヨウ化カリウム、硫酸コバルト等）等をさらに含有させてもよい。また、抗酸化剤、着香料、色素のような添加物を混合してもよい。
　本発明の家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物は、そのままで、又は家禽飼料に添加して使用される。また、抗酸化剤、着香料、色素のような添加物等を混用又は併用して用いてもよい。
　本発明の家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物の家禽への投与については特に制限はないが、家禽飼料に混合することにより家禽へ投与するのが簡便で好ましい。投与量は、家禽のコクシジウム症防除効果に有効な量、即ち、他の条件を等しくした場合において、本発明の家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物を投与したときの方が投与しないときに較べて家禽のコクシジウム症防除効果が増進される量である。具体的には、それぞれ飼料中に重量比でサバディラ種子は０．００５％～０．１２５％、好ましくは０．０１％～０．１％、さらに好ましくは０．０３％～０．０７％の濃度、サバディラ脱脂抽出物は０．００１８％～０．０４５％、好ましくは０．００３６％～０．０３６％、さらに好ましくは０．００１１％～０．０２５２％の濃度、サバディラ種子の抽出残渣は０．０５％～１．２５％、好ましくは０．１％～１．０％、さらに好ましくは０．３％～０．７％の濃度で存在するように混合する。サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣は、それぞれ重量比で０．１２５％以下、０．０４５％以下又は１.２５％以下の濃度で存在するように混合するのが好ましい。
　本発明の家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物と混合して用いられる家禽飼料は、一般に使用されているものであればよく、特に制限されない。具体的には、その組成物の飼料中の濃度としては、重量比で好ましくは０．００５％～１．０％、より好ましくは０．０５％～０．５％、さらに好ましくは０．１％～０．３％である。これらの一例としては、トウモロコシ、米、麦、マイロ、大豆粕、なたね粕、ふすま、脱脂米ぬか、魚粉、脱脂粉乳、乾燥ホエー、アルファルファミール、北洋ミール、大豆油、粉末精製牛脂、小麦粉、なたね油、肉骨粉（フェザーミール）、動物性油脂、リン酸カルシウム、コーングルテンミール、コーンジスチラーズグレインソリュブル、糖蜜、炭酸カルシウム、リン酸三カルシウム、塩化ナトリウム、塩化コリン、ビタミン類（ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＤ、ビタミンＥ、パントテン酸カルシウム、ニコチン酸アミド、葉酸等）、アミノ酸類（リジン、メチオニン、スレオニン等）、微量無機塩類（硫酸マグネシウム、硫酸鉄、硫酸銅、硫酸亜鉛、ヨウ化カリウム、硫酸コバルト等）、有機酸類(ギ酸、プロピオン酸等)、酵素類(フィターゼ等)、生菌剤等を適宜混合して調製した飼料等が挙げられる。本発明の飼料添加組成物および本発明の飼料は、ハーブ類及び／又はトウモロコシ、マイロ、ふすま、米ぬか、大豆粕、トウモロコシ粉、米粉、及び大豆粉よりなる群から選ばれる少なくとも１種を含有するのが好ましい。
　前記ハーブ類としては、ショウブ（Acorus calamus）、ニンニク（Allium sativum）、イノンド（Anethum graveolens）、ニガヨモギ（Artemisia absinthium）、キャラウェイ（Carum carvi）、ニッケイ属（Cinnamomum）、コリアンダー（Coriandrum sativum）、クミン（Cuminum cyminum）、ターメリック（Curcuma longa）、レモングラス（Cymbopogon citratus）、アーティチョーク（Cynara scolymus）、ムラサキバレンギク属（Echinacea）、カルダモン（Elettaria cardamomum）、フェンネル（Foeniculum vulgare）、イチョウ（Ginkgo biloba）、リコリス（Glycyrrhiza glabra）、セイヨウオトギリ（Hypericum perforatum）、ゲッケイジュ（Laurus nobilis）、ラベージ（Levisticum officinale）、ティーツリー（Melaleuca alternifolia）、レモンバーム（Melissa officinalis）、スペアミント（Mentha spicata）、ペパーミント（Mentha x piperita）、ナツメグ（Myristica fragrans）、バジル（Ocimum basilicum）、マジョラム（Origanum majorana）、オレガノ（Origanum vulgare）、オタネニンジン（Panax ginseng）、パセリ（Petroselinum sativum）、オールスパイス（Pimenta dioica）、アニス（Pimpinella anisum）、コショウ（Piper nigrum）、パチョリ（Pogostemon cablin）、ローズマリー（Rosmarinus officinalis）、セージ（Salvia officinalis）、ステビア（Stevia rebaudiana）、クローブ（Syzygium aromaticum）、タンジー（Tanacetum vulgare）、セイヨウタンポポ（Taraxacum officinale）、タイム（Thymus）、アジョワン（Trachyspermum ammi）、ショウガ（Zingiber officinale）等のハーブ類を、単独又は複数混用又は併用して用いてもよい。好ましくは前記ハーブ類のうち、ショウブ（Acorus calamus）、ニンニク（Allium sativum）、ニガヨモギ（Artemisia absinthium）、ニッケイ属（Cinnamomum）、ムラサキバレンギク属（Echinacea）、オレガノ（Origanum vulgare）、クローブ（Syzygium aromaticum）及びタイム（Thymus）が挙げられる。これらハーブ類を、単独または複数混用又は併用して用いてもよい。特にニンニクが好ましい。
　前記ハーブ類は粉末の他、抽出して精油（エッセンシャルオイル）等の形態にして用いることもできる。
　本発明の飼料におけるハーブの含有量は特には限定されないが、一般的には０．０５重量％～５重量％であり、好ましくは０．１重量％～３重量％であり、より好ましくは０．２５重量％～１重量％の範囲である。
　サバディラ種子とハーブ類を飼料が含む場合、サバディラ種子重量に対するハーブ類重量の比は通常１０以上５０以下であり、２０以上４０以下であることが好ましく、２５以上３５以下であることがより好ましい。
　サバディラ脱脂抽出物とハーブ類を飼料が含む場合、サバディラ脱脂抽出物重量に対するハーブ類重量の比は通常２８以上１３９以下であり、５６以上１１１以下であることが好ましく、６９以上９７以下であることがより好ましい。
　サバディラの抽出残渣とハーブ類を飼料が含む場合、サバディラ種子の抽出残渣重量に対するハーブ類重量の比は通常１以上５以下であり、２以上４以下であることが好ましく、２．５以上３．５以下であることがより好ましい。
　本発明の家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物又はこれを含有する飼料の投与の時期は、全飼育期で投与して良いが、好ましくは、育雛期（孵化後０～５週齢）である。より好ましくは、家禽の孵化後０～２１日間継続して投与する。
　以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例によって何ら限定されるものではない。
　サバディラ種子を製造業者の指示に従って破砕した（flake milled）。破砕した種子200gを3リットル容フラスコに40～45℃にてメタノールとともに入れ、オーバーヘッドモーターで制御された三枚羽スターラーで攪拌した。攪拌速度をフラスコに種子断片が沈渣しないように維持した。蒸発減を制限するためにシステムを密封した。
　サバディラ油溶液をデカントして除き、フラスコにメタノールを追加した。この工程をさらに３回繰り返した。サバディラ油溶液をデカントして除いた後に、フラスコの底に洗浄された破砕種子(サバディラ種子の抽出残渣)が残った。
　デカントしたサバディラ油溶液を別のフラスコに入れた。ついで、サバディラ油溶液からメタノールを除去すべく蒸留を行った。蒸留には標準IKAロータリーエバポレーターを用いた。サバディラ油溶液を入れたフラスコをエバポレーターにいれ、加熱水浴に入れた。沸騰してコンデンサーに吹きこぼれることなくメタノールの効率的な除去を最大限にするため、フラスコを50～55℃に加熱した。蒸発したメタノールを隣接するフラスコ中に充分に濃縮してサバディラ粗油を得た。このようにして、高純度のサバディラ粗油を調製した。
　このようにして、破砕種子から除去した種子成分（セルロースなど）を含むサバディラ粗油を調製した。このサバディラ粗油を3リットル容フラスコに40～45℃にてヘキサンとともに入れ、オーバーヘッドモーターで制御された三枚羽スターラーで攪拌した。攪拌速度をフラスコに沈殿が沈渣しないように維持した。蒸発減を制限するためにシステムを密封した。
　サバディラ溶液をデカントして除き、フラスコにヘキサンを追加した。この工程をさらに３回繰り返して、破砕した種子から溶液をすべて除去した。合計2リットルのヘキサンを用いた。サバディラ溶液をデカントして除いた後に、フラスコに沈殿(サバディラ脱脂抽出物)が残った。
サバディラの抗コクシジウム活性評価試験
　飼料原料としてサバディラ種子及び実施例１で得られたサバディラ種子の抽出残渣を添加した飼料を8日齢からブロイラー雛に給与し、10日齢時に鶏コクシジウム（E. tenella）の新鮮胞子形成オーシストを単回強制投与して18日齢までの糞便性状、OPG（oocysts per gram of feces：糞便1g当たりのオーシスト数）、腸病変から当該原料の抗コクシジウム効果を確認した。
材料及び方法
1）供試動物および被験サンプル
　供試動物: 0日齢で導入し8日間の馴化期間中に異常の認められなかったROSS種ブロイラー雄50羽を試験に用いた。8日齢時に各群に割り付けた（5羽/試験区、計10試験区）。
　被験サンプル: ショエノカウロン・オフィツィナレ（Schoenocaulon officinale）の種子及びその抽出残渣
2）試験期間
　馴化期間：0～7日齢
　被験原料給与期間：8～18日齢
3）試験区
　以下の10試験区を設けた。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
4）飼育管理
　各飼育室は、エアコンにて温度管理した。飼育室温度は、飼育室内中央部付近に設置した温湿度計で計測し、記録した。基礎飼料はフィード・ワン株式会社製のSDブロイラー肥育前期用配合飼料であった。飼料を制限給与した。基礎飼料成分は以下のとおりであった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
　また、基礎飼料に含まれる飼料添加物は以下のとおりであった：とうもろこし、デキストリン、大豆油かす、ホワイトフィッシュミール、動物性油脂、アルファルファミール、りん酸カルシウム、炭酸カルシウム、食塩、乳糖、ビタミンA、ビタミンD3、ビタミンE、ビタミンK3、ビタミンB1、ビタミンB2、ビタミンB6、パントテン酸、ビオチン、ニコチン酸、ビタミンB12、葉酸、コリン、メチオニン、硫酸鉄、硫酸銅、硫酸コバルト、炭酸亜鉛、硫酸マンガン、ヨウ素酸カルシウム、カゼインナトリウム、乳化剤。
　予備飼育期間（0～7日齢）は、基礎飼料を給与し、8～18日齢の11日間は、各被験原料を規定の濃度で添加した飼料を給与した。飲料水はピッカー付き給水器による自由摂取とした。
5）観察及び測定項目
　(i)糞便性状：オーシスト強制経口投与前日（9日齢）から試験終了時（18日齢）まで毎日、混合後の性状（正常、軟便、水溶状便、血便）を観察・記録した。
　(ii)オーシスト排出量：オーシスト強制経口投与後2日目から毎日（12～18日齢）測定した。各試験区の全糞便を混合して、2gを取り分け、0.5%Tween20液にて20倍に希釈し、スターラーにて約30分間攪拌した。攪拌した直後の糞液をプランクトン計算盤に取りオーシストを計数した。また、オーシスト数が多く計数が困難な場合は、更に糞液を10倍希釈してオーシストを計数した。計数したオーシスト数を基に糞便1gあたりのオーシストの数を算出した。オーシスト数は各試験区3回測定した。
　(iii)腸病変スコア：試験終了時に全動物を解剖して盲腸を観察した。以下のスコア基準に従って腸病変をスコア化し、記録した。
0：盲腸は全く正常
1：盲腸の形は正常。内容物はやや流動性を帯び色も黄色がかる。盲腸膜は部分的に軽度の腫脹があり白っぽくなる。
2：盲腸の形はほぼ正常。粘膜の腫脹は全面に見られる。内容に出血はなく、粘液は黄色みをおび退色している。粘膜内には少数の白色点状壊死巣や出血斑が見られる。
3：盲腸の萎縮・変形は明瞭である。正常な内容物は全くなく、凝血又は灰白色チーズ状の変性物が充満していることが多い。盲腸壁の肥厚は顕著でもろくなり、点状出血斑がまだ残っていることもある。病変は盲腸基部にまで達するが直腸にまでは達しない。
4：盲腸の萎縮、変形は顕著。一般にソーセージ状を呈し、その長さは直腸よりやや長いか、又は同じか短くなっている。病変は直腸の1/3-1/4位の所にまで達することもあるが、病変が直腸に達さない場合も、萎縮が顕著であれば4とする。その他は3と同様である。
統計学的解析
　腸病変スコアについて、各試験区の平均値及び標準偏差（SD）を算出した。統計解析は感染無添加区（試験区2）を共用の対照群として添加物質毎に実施した。腸病変スコアについては、クラスカル・ウォリス検定を行い、その結果、P<0.05の場合にはSteelの多重比較検定を用いて試験区間の有意差を検討した。
結果
　試験終了日の腸病変スコア及びOPGをそれぞれ表３及び表４に示す。非感染無添加対照区では、試験期間を通して糞便性状は正常で、オーシスト排出は認められなかった。また、終了時の剖検でも盲腸は全動物で正常（病変スコア：0）であった。感染無添加対照区では、オーシスト強制経口投与（感染）後3日目にごく少量の粘血が正常便の中に確認され（粘血正常）、4日目には正常便であったが、5日目から7日目まで血便がみられ、8日目には軟便の中にごく少量の血便がみられた。オーシスト排出は感染後7日目と8日目に認められ、OPGはそれぞれ163及び164×104/gであった。また、終了時の剖検でも盲腸の病変スコアは全動物で4であった。
1）サバディラ種子添加
　感染無添加対照区とサバディラ種子添加4試験区の腸病変スコア及びOPGを次表にまとめた（平均値±SD）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
　感染後2日目から一部の濃度区でごく少量の粘血が正常便の中に確認され、5日目から7日目までほぼ全ての濃度区で血便がみられたが、8日目には軟便の中にごく少量の血便がみられるのみとなった。
2）サバディラ種子の抽出残渣添加
　感染無添加対照区とサバディラ種子の抽出残渣添加4試験区の腸病変スコア及びOPGを次表にまとめた（平均値±SD）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
　感染後3日目からほとんどの濃度区でごく少量の粘血が正常便の中に確認され、5日目から7日目までほぼ全ての濃度区で血便がみられたが、8日目にはほぼ血便はみられなくなった。
　以上のように、飼料原料としてサバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及びサバディラ種子の抽出残渣を添加した飼料を与えたブロイラー雛では、コクシジウム感染による腸病変の軽減及びOPG減少が認められ、抗コクシジウム効果が確認された。
サバディラとハーブの混用による抗コクシジウム活性評価試験
　サバディラ種子及びニンニク粉末を添加した飼料を0日齢からブロイラー雛に給与し、21日齢時に鶏コクシジウム（E. tenella）の新鮮胞子形成オーシストを単回強制投与して28日齢に盲腸内容物中のOPG（oocysts per gram：盲腸内容物1g当たりのオーシスト数）を測定し、サバディラ種子とハーブとの混用による抗コクシジウム効果を確認した。
材料及び方法
1）供試動物および被験サンプル
　供試動物: 0日齢で導入し21日間の馴化期間中に異常の認められなかったROSS種ブロイラー雄126羽を試験に用いた。0日齢時に各群に割り付けた（14羽/反復、3反復/試験区、計3試験区）。
　被験サンプル: ショエノカウロン・オフィツィナレ（Schoenocaulon officinale）の種子およびニンニク（Allium sativum）の粉末
2）試験期間
　馴化期間：0～21日齢
　被験原料給与期間：0～28日齢
3）試験区
　以下の3試験区を設けた。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
4）飼育管理
　各飼育室は、ガスブルーダーおよび保温灯にて温度管理した。飼育室温度は、温湿度計で計測し、記録した。基礎飼料には、実施例２で用いた基礎飼料と同じフィード・ワン株式会社製のSDブロイラー肥育前期用配合飼料を用いた。飼料を自由摂取とした。
5）測定法
　盲腸内容物中のOPG：オーシスト強制経口投与後28日目に各試験区の各反復から2羽(計6羽)を剖検し、各羽の盲腸内容物2gを採取し、0.5%Tween20液にて20倍に希釈し、スターラーにて約30分間攪拌した。攪拌した直後の盲腸内容物溶液をMcMaster計算盤に取りオーシストを計数し、計数したオーシスト数を基に盲腸内容物1gあたりのオーシストの数を算出した。
結果
　28日のOPGを表６に示す。感染無添加対照区の盲腸内容物中のOPGは6.84×104/gであった。対して感染サバディラ種子０．０１６７％添加区のOPGは6.71×104/g、サバディラ種子０．０１６７％とニンニク粉末０．５％の混用添加区のOPGは5.89×104/gであった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
　以上のように、サバディラ種子とニンニク粉末を混用添加した飼料を与えたブロイラー雛では、コクシジウム感染による盲腸内容物中のOPG減少が認められ、抗コクシジウム効果が確認された。
　本発明によるサバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣を含む家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物は、家禽におけるコクシジウム症の防除に有効に使用できる。

Claims (9)

  1. 　サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣を含有することを特徴とする、家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物。
  2. 　さらにハーブ類を含有することを特徴とする、請求項１に記載の飼料添加組成物。
  3. 　請求項１または２に記載の飼料添加組成物を含有することを特徴とする、飼料。
  4. 　サバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣が、それぞれ飼料中に０．１２５％以下、０．０４５％以下又は１.２５％以下の濃度で存在する、請求項３に記載の飼料。
  5. 　ハーブ類が飼料中に０．０５重量％～５重量％の濃度で存在する、請求項３または４に記載の飼料。
  6. 　さらに、トウモロコシ、マイロ、ふすま、米ぬか、大豆粕、トウモロコシ粉、米粉、及び大豆粉よりなる群から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とする、請求項３、４又は５に記載の飼料。
  7. 　請求項１または２に記載の家禽コクシジウム症防除用飼料添加組成物又は請求項３、４、５ないし６のいずれか一項に記載の飼料を家禽に摂取させることを特徴とする、家禽コクシジウム症の防除方法。
  8. 　請求項３、４、５ないし６のいずれか一項に記載の飼料を家禽に摂取させる工程を含むことを特徴とする、家禽の飼育方法。
  9. 　家禽コクシジウム症の防除のためのサバディラ種子、サバディラ脱脂抽出物及び／又はサバディラ種子の抽出残渣の使用。
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